MXPA02011625A

MXPA02011625A - Antagonistas receptores de adenosina a2a.

Info

Publication number: MXPA02011625A
Application number: MXPA02011625A
Authority: MX
Inventors: Samuel Chackalamannil
Original assignee: Schering Corp
Priority date: 2000-05-26
Filing date: 2001-05-24
Publication date: 2003-03-27
Also published as: ECSP024364A; US6630475B2; EP1283839A1; DE60110219D1; IL220174A; BR0111015A; CN1800186A; US20050026932A1; NO325008B1; JP2006219497A; JP2007145875A; ES2237576T3; CN1451007A; WO2001092264A1; CN100384847C; RU2315053C2; MY132006A; USRE44205E1; CN1247588C; SK287748B6

Abstract

Compuestos que tienen la formula estructural I (Ver formula I) o una sal de los mismos farmaceuticamente aceptable en la cual Res fenilo opcionalmente substituido, cicloalquenilo, o heteroarilo; X es alquileno o - C(O)CH2-; Y es -N(R2)CH2CH2N(R3)-, -OCH2CH2N(R2) -O-, -S-, -CH2S-, -(CH2)2-NH, o (la) opcionalmente sustituido, (ver formula) m y n son 2-3, y Q es nitrogeno o carbon opcionalmente substituido, y Z es fenilo opcionalmente substituido, tenilo, fenilalquilo o heteroarilo, difenilmetilo, R6-C(O)-, R6-SO2-, R6-OC(O)-, R7-N(R8)-C(O)-, R7-N(R8)-C(S)-, fenilo- CH(OH)-, o fenilo-C(=NOR2)-; o cuando Q es CH, (Ib),(ver formula) fenilamino o piridilamino; o Z y Y conjuntamente son piperidinilo substituido o fenilo substituido; y R2, R3, R6, R7, y R8 son tal como se han definido en la memoria, y su uso para el tratamiento de enfermedad de Parkinson, solo o en combinacion con otros agentes para tratar la enfermedad de Parkinson, y las composiciones farmaceuticas que los comprenden; y se describe tambien un procedimiento para preparar intermediarios utiles para preparar los compuestos de la formula (I).

Description

. ANTAGONISTAS RECEPTORES DE ADENOSiNA A^ ANTECEDENTES La presente invención se refiere a antagonistas receptores de adenosina A^ de 5-amino-pirazolo-[4,3-e]-1 ,2,4-triazolo[1,5-c]pirimidina al uso de dichos compuestos en el tratamiento de enfermedades del sistema nervioso central, y en particular enfermedad de Parkinson, y a las composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos. La invención se refiere también a un procedimiento para preparar 5-amino-2-(sustituido)pirazolo[4,3-e]-1 ,2,4-triazolo-[1 ,5-c]pirimidinas, intermediarios útiles para preparar los compuestos reivindicados. Se sabe que la adenosina es un modulador endógeno de una variedad de funciones fisiológicas. Al nivel del sistema cardiovascular, la adenosina es un fuerte vasodilatador y un depresor cardíaco. Sobre el sistema nervioso central la adenosina induce efectos sedantes, ansiolíticos y antiepilépticos. Sobre el sistema respiratorio, la adenosina induce broncoconstricción. A nivel del riñon, ejerce una acción bifásica, que induce vasoconstricción a bajas concentraciones y vasodilatación a dosis elevadas. La actenosina actúa como inhibidor de lipólisis sobre células grasas y como antiagregante sobre las plaquetas. La acción de la adenosina es intermediada por la interacción con diferentes receptores específicos de membrana que pertenecen a ia familia de receptores acoplados con las proteínas G. Los estudios bioquímicos y farmacológicos conjuntamente con avances en la biología molecular, han permitido la identificación de por lo menos cuatro subtipos de receptores de adenosina: At, A2a, A2t>, y A3, Ai y A3 son de alta afinidad, inhiben la actividad de la enzima adenilalo ciclasa, y A2a y A2b son de baja afinidad, y estimulación la actividad de la misma enzima. También han sido identificados análogos de adenosina capaces de interactuar como antagonistas con los receptores A-i, A2a, A2b, y A3). Los antagonistas selectivos para el receptor A2a son de interés farmacológico debido a su reducido nivel de efectos secundarios. En el sistema nervioso central, los antagonistas A2a pueden tener propiedades antidepresivas y estimulan las funciones cognitivas. Además, los datos han demostrado que los receptores A2a están presentes en alta densidad en los ganglios básales, que se sabe que sor importantes en el control del movimiento. Por lo tanto, los antagonistas A2a pueden mejorar el deterioro motriz debido a enfermedades neurodegenerativas tales como enfermedad de Parkinson, demencia senil, tal como la enfermedad de Alzheimer, psicosis de origen orgánico. Algunos compuestos relacionados con xantina han demostrado se antagonistas selectivos del receptor Ai, y los compuestos de xantina y los que no sor de xantina han demostrado que tienen alta afinidad A2a con distintos grados de selectividad A2a versus Ai. Los antagonistas receptores A^ de adenosina de triazolo pirimidina con diferente sustitución en posición 7 han sido previamente descritos por ejemplo en WO 95/01356; US 5,565,460; WO 97/05138; y WO 98/52568.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a compuestos que tienen la fórmula estructural I o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, donde R es R1 -furanilo, R1 -tienilo, R1 -piridilo, N-óxido de R1 -piridilo, R1-oxazolilo, R10 fenilo, R1 -pirrolilo o cicloalquilo C4-C6; X es alquileno C -C6 o -C(0)CH2-, Yes -N(R2)CH2CH2N(R3)-. -OCH2CH2N(R2)-, -O-, -S-, -CH2S-, - y Z es R5-fenilo, R5-fenilalqu¡lo(CrC6), R5-heteroarilo, difenilmetilo, R6-C(0)-, R6-S02-, R6-OC(0)-, R7-N(R8)-C(0)-, R7-N(R8)-C(S)-, € HN_N— ¥ O f —O t fenilo-CH(OH)-, o fenilo-C(=NOR2)-, o cuando Q es H Z es también fenilamino o piridilamino; o Z y Y juntos son R es de 1 a 3 sustituyentes independientemente seleccionados de hidrógeno, alquilo C-i-Cß, -CF3, halógeno, -NO2, -NR12R13, alcoxi C-i-Cß, alquiltio C?-C6 alquilsulfinilo C?-C6, y alquilsulfonilo C-i-Cß; R2 y R3 están independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo C Cß; m y n son independientemente 2-3; Q es — N l — t — Cl — -Cl — -C' — 0 -C I — H ' CN ' OH COCH3 ; R4 es 1-2 sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C-pCß, o dos sustituyentes R4 en el mismo carbono pueden formar =0; R5 representa de 1 a 5 sustituyentes independientemente seleccionados de grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo C?-C6, hidroxí, alcoxi CrC6, -CN di-((C?-C6)aiquil)amino, -CF3, -OCF3, acetilo, -NO2, hidroxi(CrC6)alcox¡, (C Cß) alcoxi(C?-C6)alcoxi, di-((CrC6)-alcoxi)(C?-C6)alcoxi, (C?-C6)-alcoxi(C?-C6)alcox¡-(CrC6)-alcoxi, carboxi(CrC6)-alcoxi, (C C6>-alcoxicarbonil(CrC6)alcox¡, (CrC6)cicloalquil(CrC6)alcoxi, di-((d-CßJalquilaminoCC CeJalcoxi, morfolinilo, (CrC6)alquilo-S02-, (C?-C6)alquilo-SO-(C?-C5)alcoxi, tetrahidropiraniloxi, (CrC6)alquilcarbonil(C? -C6)-alcoxi, (d-C6)-alcoxicarbonilo, (Ci -C6)aiquilcarboniloxi(C?-C6)-alcoxi, -SO2NH2, fenoxi, o los sustituyentes R5 adyacentes conjuntamente con -O-CH2-O-, -O-CH2CH2-O-, -O-CF2-O- o -O-CF2CF2-0- y formar un anillo con los átomos de carbono a los cuales están unidos; R6 es (Ci -C6)alquilo, R5-fenilo, R5-fen¡lo(CrC6)alquilo, tienilo, piridilo, (C3-C6) cicloalquilo, (C C6)alquilo-OC(0)-NH-(C?-C6)alquilo-, di((C C6)alquil)aminometilo, o "" • N (C CeJalquilo-O^O R7 es (C?-C6)alquilo, R5-fenilo o R5-fenilo(CrC6)alquilo; R8 es hidrógeno o alquilo C Ce; o R7 y R8 conjuntamente son -(CH2p-A-(CH2)q, donde p y q son independientemente 2 ó 3 y A es un enlace, -CH2-, -S- o -O y forman un anillo con el nitrógeno al cual están unidos; R9 representa 1-2 grupos independientemente seleccionados de hidrógeno alquilo CrCß, hidroxi, alcoxi CrCß, halógeno, -CF3 y (Cr C6)alcoxi(CrCß)alcoxi; R10 es 1 a 5 sustltuyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo CrCß, hidroxi, alcoxi Cr C6, -CN, -NH2- aiquilamino CrC6, di-((CrC6)alqu¡l)amino, -CF3, -OCF3 y -S(0)o-2(CrC6)alquilo; R11 es H, alquilo CrCß, fenilo, bencilo, alquenHo C2-C6, alcoxi Cr Cß(CrCß)alquiio, di((C? -C6)alquil)amino(C? -Cß)alquilo, pirrolidinilo(Cr Cß)alquilo o piperidino(C-? -C6)alquilo; R12 es H o alquilo CrCß; y R 3 es (C C6)alquilo-C(0)- o (C C6)alquilo-S02-. Son compuestos preferidos de la fórmula I aquellos en los cuales R es R1- furanilo, R1-tienilo, R1-pirrolilo o R10-fenilo, más preferiblemente R1-furanilo. R1 es preferiblemente hidrógeno o halógeno. Otro grupo de compuestos preferidos es aquel en el cual X es alquileno, preferiblemente etileno. Y es preferiblemente siendo Q preferiblemente nitrógeno. Preferiblemente, m y n son cada uno dos, y R4 es H. Una definición preferida para Z es R5-fenilo, R5- heteroarilo, Rß-C(O)- o Re-SO2-. R5 es preferiblemente H, halógeno, alquilo, alcoxi, hidroxialcoxi o alcoxialcoxi. R6 es preferiblemente Rd-fenilo.

Otro aspecto de la invención es una composición farmacéutica que comprenede una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I en un portador farmacéuticamente aceptable. Otro aspecto de la invención es un método para tratar enfermedades del sistema nervioso central tales como depresión, enfermedades cognitivas y enfermedades neurodegenerativas tales como enfermedad de Parkinson, demencia senil o psicosis de origen orgánico, y apoplejía, que comprende administrar un compuesto de fórmula I a un mamífero que necesita dicho tratamiento. En particular la invención está dirigida al método para tratar la enfermedad de Parkinson que comprende administrar un compuesto de fórmula I a un mamífero que necesita dicho tratamiento. Otro aspecto de la invención es un procedimiento para preparar 5-amino-2-(R-sustituido)-pirazolo[4,3-e]-1 ,2,4-triazolo[1 ,5-c]-pirimidinas de fórmula II, que sor intermediarios útiles en la preparación de los compuestos de fórmula I. El procedimiento para preparar los compuestos de fórmula II ll en la cual R es tal como se ha definido anteriormente comprende (1) tratar 2-amino-4,6-dihidroxipirimidina con POCI3 en dimetilformamida (DMF) para obtener 2-amino-4,6-dicloropirimidina-5-carboxaldehido (2) tratar carboxaldehído Vil con una hidrazida que tiene la fórmula H2N-NH-C(O)-R, en la cual R es tal como se ha definido anteriormente, para obtener (3) tratar el intermediario de fórmula VIII con hidrato de hidrazina para formar un anillo pirazolo obteniendo de esta manera el intermediario de fórmula IX (4) formar el compuesto deseado de fórmula II mediante un reordenamiento deshidratante.

Un aspecto preferido del procedimiento es el reordenamiento deshidratante del intermediario de fórmula IX para obtener la 5-amino-2-(R-sustituido)-pirazolo[4,3-ej-1 ,2,4-triazolo[1 ,5-c]pirimidina de fórmula II. Las realizaciones preferidas del procedimiento usan hidrazida 2-furoica o 2-tienoilhidrazida en la etapa 2, y se preparan de este modo los compuestos de la fórmuia II en los cuales R es 2-furilo o 2-tienilo. Otro aspecto de la invención consiste en un procedimiento para preparar 7-bromoalquil-5-amino-2-(R-sust¡tu¡do)-pirazolo[4,3-e]-1 ,2,4-triazolo-[1 ,5-c]piridimidinas de fórmula Illa, que son intermediarios útiles en la preparación de los compuestos de fórmula I. El procedimiento para preparar los compuestos de la fórmula Illa en los cuales R es tal como se ha definido anteriormente, comprende (1) tratar un cloruro de fórmula VIII con una hidroxialquil hidrazina de fórmula HO-(CH2)-NHNH2> en la cual r es 2-6, par obtener (2) ciclar el intermediario de fórmula X por reordenamiento deshidratante para obtener el intermediario tricíclico de fórmula XI (3) convertir el compuesto hidroxi de fórmula XI al bromuro de fórmula Illa. Otro aspecto más de la invención consiste en un método para tratar la enfermedad de Parkinson con una combinación de un compuesto de fórmula I y un o más agentes que se sabe que son útiles en el tratamiento de la enfermedad di Parkinson, por ejemplo dopamina; y un agonista dopaminérgico; un inhibidor de monoamina oxidasa, tipo B (MAO-B); un inhibidor de DOPA descarboxilasa (DCI); un inhibidor de catecol-O-metiltransferasa (COMT). Asimismo se reivindica un composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula I y uno o más agentes que se sabe que son útiles en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson en un portador farmacéuticamente aceptable.

DESCRIPCIÓN DETALLADA Tal como se usa aquí, el término alquilo incluye cadenas rectas o ramificadas. Alquileno se refiere a un grupo alquilo divalente, similarmente se refiere a cadena rectas o ramificadas. Cicloalquileno se refiere a un grupo cicloalquilo divalente cicloalquenilo se refiere a un anillo cicloalquilo C -C6 que comprende un doble enlace. Heteroarilo se refiere a un grupo heteroaromático benzofusionado o bicíclico de anillo simple de 5 a 10 átomos que comprende 2 a 9 átomos de carbono y 1 a heteroátomos independientemente seleccionados del grupo que consiste N, O y con la condición de que los anillos no Incluyan átomos de oxígeno y/o azufre adyacentes. También se incluyen los N-óxidos de los nitrógenos del anillo. Ejemplo de grupos heteroarilo de anillo simple son piridilo; oxazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, furanilo, pirrolilo, tienilo, imidazolilo, pirazolilo, tetrazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, tiadiazolilo, pirazinilo, pirimidilo, piridazinilo y triazolilo. Ejemplos de grupo heteroarilo bicíclicos son naftiridilo (por ejemplo 1 , 5 ó 1 ,7) imidazopiridilo, pirido[2,3]imidazolilo, pindopinmidinilo y 7-azaindoiilo. Ejemplos de grupos heteroarilo benzofusionados son indoliio, quinolilo, isoquinolilo, flalazinilo, benzotienilo (es decir tionafteniio), bencimidazolilo, benzofuranilo, benzoxazolilo y benzofurazanilo. Todos los isómeros posicionales están contemplados, por ejemplo 2-piridilo, 3-piridilo y 4 piridilo. Heteroarilo R5- sustituido se refiere a aquellos grupos en los cuales los átomos de carbono sustituibles del anillo tienen un sustituyente tal como el definido anteriormente. Algunos compuestos de la invención pueden existir en diferentes formas estereoisoméricas (por ejemplo enantiómeros, diastereoisómeros y atropisómeros). La invención contempla todos dichos estereoisómeros tanto en forma pura como en mezcla incluyendo mezclas racémicas. Algunos compuestos serán de naturaleza acida, por ejemplo aquellos compuestos que poseen un grupo hidroxilo, carboxilo o fenólico. Estos compuestos pueden formar sales farmacéuticamente aceptables. Ejemplos de dichas sales pueden incluir sales de sodio, potasio, calcio, aluminio, oro y plata. Asimismo se contemplan sales formadas con aminas farmacéuticamente aceptables tales como amoníaco, alquilaminas, hidroxialquilaminas, N-metilglucamina y similares. Algunos compuestos básicos forman también sales farmacéuticamente aceptables, por ejemplo sales de adición de ácido. Por ejemplo, los átomos de pirido-nitrógeno pueden formar sales con ácidos fuertes mientras que los compuestos que tienen sustituyentes básicos tales como grupos amino forman también sales con ácidos más débiles. Ejemplos de ácidos apropiados para la formación de sales son ácido clorhídrico, sulfúrico, fosfórico, acético, cítrico, oxálico, malónico, salicílico, málico, fumárico, succínico, ascórbico, maleico, metansulfónico y otros ácidos minerales y carboxílicos que son bien conocidos por los expertos en la materia. Las sales se preparan por contacto de la forma de base libre con una cantidad suficiente del ácido deseado para producir una sal de la manera convencional. Las formas de base libre pueden regenerarse tratando la sal con una solución de base acuosa diluida apropiada tal como NaOH acuosa, carbonato de potasio, amoniaco y bicarbonato de sodio. Las formas de base libre difieren de sus respectivas formas salinas en cierto modo en cuanto a las propiedades físicas tales como la solubilidad en solventes polares, pero las sales acidas y básicas son por otra parte equivalentes a sus respectivas formas de base libre para los propósitos de la invención. Todas dichas sales acidas y básicas se consideran sales farmacéuticamente aceptables dentro del alcance de la invención y todas las sales acidas y básicas se consideran equivalentes a las formas libres de los correspondientes compuestos para los propósitos de la invención. Los compuestos de fórmula I pueden prepararse por métodos conocidos partir de materiales de partida que pueden ser conocidos en el arte o que pueden prepararse por métodos conocidos en el arte; ver, por ejemplo, WO 95101356 y J Med. Chem.. 39(1996)1164-1171. Preferiblemente, los compuestos de fórmula I se preparan por los método que se muestran en los siguientes esquemas de reacción. En el Esquema 1 , la alquilación de 5-amino-pirazolo[4,3-e]-[1 ,2,4]-triazoIo[1 ,5-cjpirimidina de fórmula II se usó para preparar los compuestos de fórmula I: ESQUEMA 1 Los materiales de partida de fórmula II pueden reaccionar con un dio ditosilato de alquilo y una base tal como NaH en un solvente inerte tal como dimetilformamida (DMF), o con un compuesto cloro-bromo- o dibromo-alquilo bajo condicione similares para obtener el intermediario alquilo-sustituido de fórmula lll. El compuesto de fórmula lll se hace reaccionar luego con una amina de fórmula Z-Y-H en un solvente inerte tal como DMF a una temperatura elevada para obtener un compuesto de fórmula la, es decir, un compuesto de fórmula I donde X es alquileno. Alternativamente, los materiales de partida de la fórmula II pueden reaccionar con un compuesto de fórmula Z-Y-X-CI y una base tal como NaH en un solvente inerte tal como DMF para obtener una mezcla de un compuesto 7-sustituido de fórmula I y el correspondiente compuesto 8-sustituido.

Para preparar los compuestos de la fórmula I en los cuales Y es piperazina y es R5-C(0)-, R6-S02-, R6-OC(0)-, R7-N(R8)-C(0)- o R7-N(R8)-C(S)-, se desprotege un compuesto de fórmula I donde Z-Y es 4-t-butoxicarbonil-1 -piperazinilo, por ejemplo por reacción con un ácido tal como HCl. El compuesto piperazinilo libre resultante IV se trata de acuerdo con procedimientos bien conocidos en el arte para obtener los compuestos deseados. El siguiente Esquema 2 resume dichos procedimientos: ESQUEMA 2 Otro método para preparar los compuestos de fórmula I se muestran en el Esquema 3: ESQUEMA 3 En este procedimiento, se hace reaccionar cloropirazolo-pirimidina V con un compuesto de fórmula Z-Y-X-CI de manera similar al procedimiento de alquilación de Esquema 1 , y el intermediario resultante se hace reaccionar con una hidrazida de fórmula H2N-NH-C(0)-R (o con hidrato de hidrazina, seguido con un compuesto de fórmula Cl-C(0)-R. La hidrazida resultante sufre un reordenamiento deshidratante por ejemplo por tratamiento con N,O-bis(trimetilsilil)acetamida (BSA) o un combinación de BSA y hexametildisilazano (HMDS) y a temperaturas elevadas. Los materiales de partida son conocidos o bien pueden prepararse PC procedimientos conocidos en el arte. Sin embargo, los compuestos de fórmula II se preparan preferiblemente mediante el nuevo procedimiento descrito precedentemente y descrito en forma más detallada aquí.

En la primera etapa del procedimiento, se convierte 2-amino-4,6-dihidroxipirimidina (VI) al correspondiente 4,6-dicloro-5-carboxaldehído PC tratamiento con POCI3 o SOCI2 en DMF de la manera descrita en Helv. Chim. Acta. 69. (1986), 1602-16-3. La reacción se lleva a cabo a una temperatura elevada preferiblemente de aproximadamente 100°C, durante 2 a 8 horas, preferiblemente aproximadamente 5 horas. En la segunda etapa, se trata el 2-amino-4,6-d¡cIoropirim¡dina-5-carboxaldehido (Vil) con una hidrazida de la fórmula H2N-NH-C(0)-R, donde R es como se ha definido anteriormente, para obtener el compuesto de la fórmula VIII; compuesto de fórmula VI y la hidrazida son utilizadas en una relación molar de aproximadamente 1. , prefiriéndose un leve exceso de la hidrazida. La reacción s lleva a cabo a temperatura ambiente o hasta aproximadamente 80°C en un solvente tal como CH3CN o DMF. El tiempo de reacción es de aproximadamente 16 horas (por ejemplo durante la noche). En la tercera etapa, se calienta el compuesto de fórmula VIII a 60-100°C con 1-5 equivalentes de hidrato de hidrazina en un solvente tal como CH3CN o DMF durante 1-24 horas para obtener el compuesto de fórmula IX. En la última etapa, el compuesto de fórmula IX es sometido a reordenamientc deshidratante mediante tratamiento con una mezcla de HMDS y BSA o con BSA solo. La reacción se lleva a cabo a temperatura elevada, preferiblemente aproximadamente 120°C durante aproximadamente 16 horas (por ejemplo durante la noche).

Después de cada etapa de procedimiento, el material crudo se purifica por métodos convencionales, por ejemplo, extracción y/o recristalización. Comparado con los métodos previamente publicados para preparar el intermediario de fórmula II, este método se lleva a cabo en menos etapas, bajo condiciones de reacción más suaves y con un rendimiento muy superior. Los compuestos de fórmula V y VII son conocidos (Helv. Chim. Acta 69 (1986), 1602-1613). Otro método para preparar los compuestos de fórmula I se ilustra en el siguiente Esquema 4.

ESQUEMA 4 El cloruro VIII se trata con una hidroxialquil-hidrazina en un solvente inerte tal como etanol, a temperaturas que van desde temperatura ambiente hasta 100°C, para proporcionar el derivado X. Este se somete a ciclación deshidratante de manera similar a IX, tal como con BSA, para proveer el tricíclico XI. El tricíclico XI se convierte luego a bromuro lila con PBr3 a temperatura elevada de desde 80°C 150°C durante 1 a 24 horas. El intermediario XI puede convertirse también a los análogos de tosilato a Illa mediante cloruro de toluensulfonilo y base. El bromuro lll, se convierte a los compuestos de fórmula I tal como se describió más arriba para lll. Otro método para preparar los compuestos de fórmula I se ilustran en el siguiente esquema 5: ESQUEMA 5 De manera análoga al Esquema 1 , se convierte el cloruro V en el compuesto alquilado XIV y este se hace reaccionar adicionalmente con carbazato XIV, donde R' es preferiblemente t-butilo o bencilo para obtener el derivado XIII. Puede emplearse un solvente tal como DMF a una temperatura de 60-120°C. Este se hace reacciona luego tal como en el Esquema 1 para proporcionar XV. A continuación se extrae el grupo R' tal como por remoción de un grupo t-butilo con OCI o TFA, obteniéndose la hidracina XVI. La acilación de XVI proporciona XVII el cual se somete a ciclación deshidratante tal como se describió más arriba para proporcionar el la deseado.

Alternativamente puede reaccionar XII con una hidracida XVII para obtener XIX, que puede convertirse a XVII de manera análoga a la preparación de XV. Usando los procedimientos anteriores se prepararon los siguientes compuestos.

PREPARACIÓN 1 Etapa 1 : Se agita POCI3 (84 mi, 0.9 moles) y se enfría a 5-10°C mientras se agrega DMF (17.8 mi, 0.23 moles) por goteo. Se deja calentar la mezcla a temperatura ambiente (RT, por sus siglas en inglés) y se ie agrega 2-amino-4,6-dihidroxipirimidina VI (14 g, 0.11 moles) en porciones. Se calienta a 100°C durante 5 horas. Se depura el exceso de POCI3 con vacío, se vierte el residuo en agua helada, y se agita durante la noche. Se recoge los sólidos por filtración y se recristaiiza el material seco a partir de una solución filtrada de acetato de etilo (EtOAc) para obtener el aldehido VII, p.f. 230°C (desc., Espectro de masa M+= 192 RMP (DMSO): d 8.6(8, 2H); 8 10,1(s, 1 H).

Etapa 2 Se agita una mezcla del producto de la etapa 1 (0.38 g, 2 mmoles) e hidrazida 2-furoica (0.31 g, 2.5 mmoles) en CH3CN (50 ml) que contenía N,N-diisopropiletilamina (0.44 ml, 2.5 mmoles) durante la noche a temperatura ambiente. Se depura de solvente la mezcla de reacción y se divide el residuo entre EtOAc y agua. Se seca la capa orgánica sobre MgS0 , se extrae el solvente y recristaliza el residuo a partir de CH3CN para dar el compuesto deseado VIII. Espectro de masa: MH+=282. Etapa 3 Se agrega hidrato de hidrazina (75 mg, 1.5 mmoles) a una soiución caliente de CH3CN del producto de la Etapa 2 (0.14 g, 0.5 mmoles). Se calienta a reflujo durante 1 hora. Se enfría a temperatura ambiente y se recoge el producto amarillo IX. Espectro de masa: MH+260. Etapa 4: Se calienta el producto de la Etapa 3 (5.4 g, 0.021 moles) en una mezcla de hexametildisilacina (100 ml) y N,0-bis(trimetilsílil) acetamida (35 ml) a 120°C durante la noche. Se extraen los volátiles al vacío y se suspende el residuo en agua caliente para proporcionar un precipitado sólido. Se recristaliza a partir de 80% de ácido acético acuoso para obtener el compuesto del titulo. P.F.>300°C. Espectro de masa MH+ =242.

PREPARACIÓN 2 Se combina el producto de la preparación 1 (6.0 g, 25 mmoles), de ditosilato de etilenglicol (11.1 g, 30 mmoles), y NaH (60% en aceite, 1.19 g, 30 mmoles) en DMF seco (30 ml). Se agita bajo N2 durante 24 horas y se filtra para obtener el compuesto de título en forma de una crema sólida (RMP en DMSO: d 4.47+4.51 tripletes, 8,03s). Se aisla el material adicional mediante cromatografía del filtrado.

PREPARACIÓN 3 De manera similar a la Preparación 1 , pero empleando hidrazida de 2-tienoilhidrazida se prepara el compuesto del título en forma de un sólido amarillo, espectro de masa MH+ 258.

PREPARACIÓN 4 De manera similar a ia Preparación 2, pero usando el producto de la Preparación 3, se prepara el compuesto del título en forma de un sólido amarillo RMP (DMSO) d 4.49+4.54 triplete, 8-05s.

PREPARACIÓN 5 Arilpiperacinas Se prepara 1 (2,4-difluorfenil)piperacina a partir de 2,4-difluorobromobenceno Al bromuro (8.0 g, 41.4 mmoles), piperacina (21.4 g, 249 mmoles), t-butoxido de sodio (5.6 g, 58 mmoles) y BINAP (1.55 g, 2.5 mmoles) en tolueno (20 ml), se le agrega Pd (dba)3 (0.477 g, 0.83 mmoles) Se callenta la mezcla a 110°C bajo N2 durante 20 horas Se deja enfriar y se extrae con HCl 1 N. Se basifica el extracto con NaOH a pH=10 se extrae con CH2CI2> se seca y se concentra para obtener el compuesto del título er forma de un aceite de color castaño. De manera similar se preparan las siguientes arilpiperacinas (Me es metilo): Se prepara 1 -(5-etil-2-pirimidinil)piperacina a partir de 2-cloro-5-etilpirimidina. Se calienta el cloruro (2.0 g, 14 mmoles) y piperacina (3.0 g, 35 mmoles) en EtOH (70 ml) a 90°C durante 2 horas en un recipiente sellado. Se concentra y divide entre CH2CI y NaOH 2N. Se seca el orgánico con MgS04 y se concentra. Se cromatografía el producto crudo sobre sílice (CH2CI2-CH3OH) para obtener la piperacina en forma de un color amarillo. De manera similar, se preparan las siguientes piperacinas a partir del cloruro apropiado: Se prepara 1-(4-ciano-2-fluorfenil)piperacina a partir de 3,4-difluorbenzonitrilo Se calienta el nitrilo (2.0 g, 14.4 mmoles), piperacina (6.2 g, 72 mmoles) y K2CO3 (2.4 g, 17 mmoles) en tolueno (10 ml) a reflujo durante 22 horas. Se deja enfriar, y se extrae con HCl 1 N. Se basifica con NaOH a pH=10. Se extrae con CH2CI2 y se lava con agua luego con salmuera. Se secan los orgánicos con MgS0 y se concentran para dar 1 piperacina en forma de un sólido blanco. De manera similar se preparan las siguientes piperacinas a partir del fluoruro apropiado (Et es etilo): Se prepara 1-(4-(2-metoxietoxi)fenil)piperacina a partir de 4-(4-hidroxi-fenil)-1 acetilpiperacina. A NaH (60% en aceite mineral, 0.79 g, 20 mmoles) en DMF (25 ml) se le agrega el fenol (3.0 g, 13.6 mmoles), seguido de éter 2-bromoetil metilico (2.27 g 16.3 mmoles). Se agita a temperatura ambiente durante 18 horas, se concentra y se divide entre EtOAc y ácido cítrico al 5%. Se lavan los orgánicos con NaOH 1 H, luego con salmuera. Se seca sobre MgS04 y se concentra para obtener el producto alquilado en forma de un sólido blanco. Se calienta este material (2.2 g, 7.9 mmoles) enr HCl 6N (30 ml) a reflujo durante 1 horas. Se deja enfriar y basificar a pH=10 col NaOH. Se extrae con CH2CI2 y se lava con agua y luego con salmuera. Se seca el orgánico con MgS04 y se concentra para dar la piperacina en forma de un aceite de color amarillo. De manera similar (excepto que se emplee hidrólisis básica para el éter ciclopropil-metílico) se preparan las siguientes piperacinas: Se prepara 4-(2-metil aminoetoxil)fluorbenceno a partir de 4-(2-bromo-etoxi)- fiuorbenceno. Se combina el bromuro (1.0 g, 4.6 mmoles) en CH3OH (5 ml) con CH3NH2 en CH3OH (2M, 46 ml, 92 mmoles) en un recipiente cerrado. Se calienta a 60°C durante 18 horas, se concentra, y se divide entre EtOAc y NaHC?3 saturado. Se lavan los orgánicos con salmuera, se secan con MgS04, y se concentran para obtener la amina en forma de un aceite de color amarillo. Se prepara N-metil-2-(4-(2-metoxietoxi)fenoxi)etilamina en dos etapas. Se combina 4-(2-metoxietoxi)fenol (1.68 g, 10.0 mmoles), 1,2-dibromoetano (16.9 g, 90 mmoles), y K2C03 (2.76 g, 20 mmoles) en CH3CN (20 ml) y DMF (10 ml). Se calienta a reflujo durante 22 horas, se deja enfriar, se filtra; y se divide entre éter (Et20) y NaOH 1 N. Se lava con salmuera, se seca sobre MgS0 , y se concentra para obtener el éter bromoetílico en forma de un sólido beige. Se combina esto (0.97 g, 3.5 mmoles con 2M CH3NH2/CH3OH (35 ml). Se calienta en un tubo sellado (65°C, 18 horas), se concentra, y se divide entre Et20 y NaHC03 1N. Se lava con salmuera, se seca cor MgS0 , y se concentra para obtener la amina en forma de un aceite de color naranja. Se prepara 1 -fenil-2-piperacinona a partir de 4-benciloxicarbonil-1 -fen 1-2 piperacinona. Se combina este material (1.61 g, 5.2 mmoies) con 1 0%Pd/C (0.4 g) en EtOH (50 ml) y HCl 1 N (6 mi). Se hidrogena a 3.1 kg/cm2 durante 2 horas y se filtra. Se concentra y cromatografía el residuo sobre sílice (eluyendo con CH2Cl2:CH3?H:NH OH) para obtener la piperacinona en forma de un sólido cremoso.

PREPARACIÓN 6 Prep. 6 Etapa 1 : Se disuelve el producto de la preparación 1 , Etapa 2 (0.56 g, 2.0 mmoles) en CH3CN caliente (200 ml). Se agrega 2-hidroxietilhidracina (0.51 g, 6.0 mmoles). Se calienta a reflujo durante 2 horas y se concentra. Se trata con 25 ml de agua y se agita para proporcionar un sólido. Se recoge y seca para obtener el alcohol, EM m/e= 304 (M+1). Etapa 2: Se calienta el producto de la Etapa 1 (0.10 g, 0.33 mmoles) en BSA (10 ml durante 4 horas a 115°C. Se concentra al vacío y se calienta con CH3OH acuoso. Se recoge y seca para dar el producto de ciclación, EM: m/e= 286 (M+1).

Etapa 3: Se combina el producto de la Etapa 2 (0.285 g, 1.0 mmoles) y PBr3 (2.0 ml, 2 mmoles). Se calienta a 145°C durante 2 horas, se enfría y se vierte sobre hielo. Se filtra y seca el sólido. Se recristaliza a partir de CH2OH para obtener el compuesto del título, EM:m/e=348+350 (M+1).

PREPARACIÓN 7 Se combina ácido 5-bromo-2-furoico (0.50 g, 2.6 mmoles) y aHC03 (0.44 g, 5.2 mmoles) en hexano (6 ml) y agua (5.2 ml). Se agrega Selectfluor® (0.98 g, 2.8 mmoles) y se agita durante 2 horas. Se separa la capa de hexano y se seca sobre MgS0 para proporcionar una solución de 2-bromo-5-fluorofurano. Se diluye con THF (6 ml) y se enfría a -78°C. Se agrega 2.5 M n-BuLi/hexano (4.2 ml, 11 mmoles). Se agita durante 10 minutos, se agrega el exceso de hielo seco, y se agita 1 hora adicional. Se trata con HCl 1N, se extrae con CH2CI2, y se seca sobre MgS0 . Se concentra y seca para obtener el compuesto del título en forma de un sólido blanco. RMP (CDC ) 86.70+7.28.

EJEMPLO 1 Se combina el tosilato de la Preparación 2 (0.55 g, 1.25 mmoles) y 1-(2,4-difluorfenil)piperacina (0.50 g, 2.5 mmoies) en DMF (7 ml) y se calienta a 80°C durante 20 horas. Se concentra y purifica por cromatografía en columna evaporativa (CH2CI2, CH3OH+NH3) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido crema, de un espectro de masa de m/e = (M+H). De manera similar, se preparan los siguientes compuestos: EJEMPQ 2 Etapa 1 : Se combina el producto de la Preparación 1 (0.60 g, 2.5 mmoles), 1.3-dibromopropano (0.60 g, 3.0 mmoles), y NaH (60% en aceite, 0.119 g, 3.0 mmoles) en DMF seco (9 ml). Se agita bajo N2 durante 2 horas, se concentra, y se cromatografía por cromatografía evaporativa para obtener el compuesto del título en forma de un sólido (PMN en CDCI3+CD3OD: 82.43 quint., 3.38+4.51 triplete, 8.09 s) como también el isómero 8-sustituido.

Etapa 2: Se combina el producto de la Etapa 1 (0.050 g, 0.14 mmoles) y 1-fenilpiperacina (0.045 g, 0.28 mmoles) en DMF (2 ml) y se caiienta a 80°C durante 4 horas. Se concentra y purifica por cromatografía en columna evaporativa (CH2CI2, CH3OH+NH3) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido crema, di un espectro de masa de m/e = 443 (M+H). De manera similar se preparan los siguientes compuestos: EJEMPLO 3 También se preparó el compuesto del Ejemplo 1-2 mediante el siguiente procedimiento: Se combina el producto de la preparación 1 (0.15 g, 0.62 mmoles), 1-fenil-4-(2 cloroetil)piperacina (0.17 g, 0.75 mmoles), y NaH (60% en aceite, 0.035 g, 0.87 mmoles) en DMF seco (7 ml). Se agita bajo N2 durante 48 horas, y se agrega cloruro adiciona (0.03 g) y NaH (0.005 g) y se agita durante 72 horas más. Se concentra y purifica por cromatografía en columna evaporativa (CH2CI2, CH3OH+NH3) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido crema de un espectro de masa de m/e=429 (M+H). El compuesto del Ejemplo 1 -3 se prepara de manera similar, así como también los siguientes compuestos: EJEMPLO 4 Etapa 1 : Se combina 1-(2,4-difluorfenil)piperac¡na (1.5 g, 7.6 mmoles), 2-bromopropionato de etilo (1.65 g, 9.1 mmoles) y DIPÉA (1.1 g, 8.3 mmoles) en DMF (8 ml). Se agita durante 4 horas, se concentra, y se divide entre Et20 y agua. Se lava con salmuera, se seca (MgS0 ), y se concentra para obtener el éster en forma de un aceite de color amarillo que coincide con la RMN (CDCI3).

Etapa 2: Al producto de la Etapa 1 (2.15 g, 7.2 mmoles) en THF (10 ml), se le agrega LiAIH (1.0 M en THF, 4.4 ml, 4.4 mmoles) por goteo. Se calienta a 60°C durante 1 hora, se le agrega agua (0.16 ml), 15% NaOH (0.16 ml), y luego agua (0.49 ml.). se filtra y concentra para obtener el alcohol en forma de un aceite de color amarillo, que coincide con RMN (CDCI3).

Etapa 3: Al producto de la Etapa 2 (0.90 g, 3.5 mmoles) en CH2CI2 (10 ml) a 50°C, se le agrega SOCI2 (0.38 ml, 5.3 mmoles). Se calienta y agita durante 16 horas. Se concentra y divide entre CH2CI2 y 1 N NaOH, se lava con agua, se seca (MgS04) y se concentra para obtener el producto crudo en forma de un aceite de color amarillo.

Etapa 4 Se combina el producto de la Preparación 1 (0.20 g, 0.83 mmoles), el producto de la Etapa 3 (0.34 g, 1.2 mmoles), y NaH (60% en aceite, 0.040 g, 1.0 mmoles) DMF seco (5 ml.). Se calienta a 60°C durante 24 horas, se agrega cloruro adicional (0.15 g) y NaH (0.02 g), y se calienta 4 horas más. Se concentra y purifica por cromatografía en columna evaporativa (CH2CI2, CH3OH+NH3) para obtener el compuesto del titulo en forma de un sólido de color amarillo, de un espectro de masa de m/e = 479 (M+H). De manera similar se prepara lo siguiente: Ej. 4-2: EM, m/e = 478,480 EJEMPLO 5 Usando el procedimiento del Ejemplo 1 , pero sustituyendo el tosilato de la Preparación 2 por el tosilato de la Preparación 4, se preparan los compuestos siguientes: EJEMPLO 6 Etapa 1 : A una solución del producto del Ejemplo 3-1 (4.17 g, 9.2 mmoles) en CH2CI2 (500 ml), se le agrega HCl anhidro (120 ml de una solución de dioxano 4.0 M) y se agita durante 2 horas. Se concentra hasta sequedad al vacío y se recoge el residuo en agua. Se hace alcalino con NaOH acuoso y se recoge el producto precipitado desprotegido. Espectro de masa: MH+ = 354.

Etapa 2: Se agita una mezcla del producto de la Etapa 1 (71 mg, 0.2 mmoíes), y cloruro de 4-metoxi-benzoilo (51 mg, 0.3 mmoles), en DMF seco (10 ml) que contiene N,N-diisopropil-etilamina (52 mg, 0.4 mmoles) durante 6 horas a temperatura ambiente. Se vierte la solución en agua y se recoge el compuesto del título precipitado. Espectro de masa MH+ = 488. De manera similar se prepara lo siguiente: EJEMPLO 7 A una solución del producto del Ejemplo 6, Etapa 1(53 mg, 0.15 mmoles) eN NMP (10 mL) se le agrega isocianato de 4-clorofenilo (25.3 mg, 0.165 mmoles) a temperatura ambiente. Se agita durante la noche, se le agregan 25.3 mg adicionales de ¡socianato, y se agita durante una hora para completar la conversión de todo el material de partida. Se vierte en agua y se recoge el compuesto del título precipitado. Espectro de masa: MH+ = 507.

De manera similar, se prepara lo siguiente a partir isocianato, isotiocianato cloruro de carbamoilo apropiado.

EJEMPLO 8 Se suspende el producto del Ejemplo 6, Etapa 1 (53 mg, 0.15 mmoles) er DMF seco (20 ml) que contiene trietilamina ( 77 mg, 0.76 mmoles); Se agrega cloruro de 2,4-difluorobencenosulfonilo (37 µl, 0.225 mmoles). Se agita a temperatura ambiente durante 2 días. Se vierte en agua y se recoge el compuesto del título precipitado. Espectro de masa: M+ = 529. De manera similar, se prepara lo siguiente: EJEMPLO 9 Se agrega cloroformiato de 4-metoxifenil (56 mg, 0.3 mmoles) a unA suspensión del producto del Ejemplo 6, Etapa 1 (71 mg, 0.2 mmoles) en DMF caliente (25 ml) que contiene trietilamina (101 mg, 1.,0 mmoles). Se agita la mezcla durante la noche a temperatura ambiente. Se concentra la solución hasta un tercio de su volumen y se vierte en agua. Se recoge el precipitado, se lava con agua y se seca al vacío. Se recristaliza a partir de CH3OH/CH2CI2 para dar el compuesto de título. Espectro de masa: MH+ = 504.

EJEMPLO 10 Etapa 1 : Se combinan 1-bromo-2,4-difluorbenceno (1.00 g, 5.18 mmoles), N.N'-dimetil-etilendiamina (2.74 g, 31.1 mmoles), NaO-t-Bu (0.70 g, 7.2 mmoles), Pd(dba)2 (0.060g, 0.10 moles) y (+)-BINAP (0.19 g, 0.31 mmoles) en tolueno (10 ml). Se caliente a 110°C durante 18 horas, se deja enfriar, y se extrae con HCl 1 N. Se basifica la solución acuosa con NaOH y se extrae con CH2CI2. Se seca, se concentra, y se purifica mediante PLC para obtener N-(2,4-difluorfeniI)-N,N'-dimetiletiIened¡amina.

Etapa 2: Se combinan el producto de la Preparación 2 (0.100 g, 0.23 mmoles) con el producto de la Etapa 1 (0.091 g, 0.46 mmoíes) en DMF (2 ml). Se calienta a 80°C durante 90 horas, y se deja enfriar, se concentra, y se purifica por cromatografía en columna para obtener el compuesto del título en forma de un aceite, espectro de masa m/e = 467.

EJEMPLO 11 También se preparó el compuesto del Ejemplo 1-2 mediante el siguiente procedimiento.

Etapa 1 : A una solución del producto de la Preparación 1 , Etapa 1 (768 mg, 4 mmoles) en DMF (20 ml) se agrega N,N-diisopropiletilamina (0.88 ml, 5 mmoles), seguido de hidrato de hidrazina (0.2 ml, 4.1 mmoles). La solución se caiienta y se forma un precipitado sólido el cual se disuelve gradualmente en el término de 1 hora. Después de agitar durante 3 horas, se concentra la soiución al vacío hasta aproximadamente 1/3 de su volumen, y se vierte en agua. Se recoge el precipitado y se recristaliza a" partir de CH2OH para proporcionar la cloropirazolpirimidina. Espectro de masa: MH+ =170.

Etapa 2: A una solución agitada de 1 -fenilpiperazina (6.5 g, 40 mmoles) y cloroacetaldehido acuoso al 50% (6.4 mi, 48 mmoles) en CH2CI2 (125 mi) a 5-10°C, se le agrega en porciones, Na(OAc)3BH (12.72 g. 60 mmoles). Cuando deja de formarse espuma, se deja calentar la mezcla a temperatura ambiente y se agita durante 3 horas. Se diluye con CH2CI2 (100 ml), y se agita con NaOH acuoso 1 N para llevar el pH por arriba de 8. Se lava la capa orgánica con agua y salmuera, se seca sobre MgS04, y se extrae el solvente. Se cromatografía sobre sílice y se eluye con CH3OH/CH2CI2 al 1% para obtener el compuesto del título. Espectro de masa: MH+ 225.

Etapa 3: A una solución de NaH al 60% (0.14 g, 3.5 mmoles) en DMF (30 ml) a una temperatura de baño de hielo se agrega, en porciones, el producto de la Etapa 1 (0.51 g, 3 mmoles). Cuando cesa el desprendimiento de gas, se agrega el producto de la Etapa 2. Se agita la mezcla resultante a temperatura ambiente durante ia noche Se filtra la materia insoluble de color rojo oscuro, y se concentra el filtrado hasta sequedad al vacío. Se tritura el residuo gomoso con CH3OH para dar el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo claro. Espectro de masa: MH+ = 358. Se trata el producto de la Etapa 3 tal como se describe en la Preparación 1, Etapas 2 y 4, para obtener el Ejemplo 1-2.

EJEMPLO 12 NH2 reordenamjepto . ( , — N N O deshidratante *- Ej. 12 Etapa 1 : Al NaH (60% en aceite, 142 mg, 3.5 mmoles) en DMF (15 ml) se le agrega el cloruro del Ejemplo 11 , Etapa 1 (500 mg, 2.9 mmoles). A esto se le agrega 1-(2-cloroetil)4-(2,4-difluorfenil)piperazina (846 mg, 3.5 mmoles). Se agita a temperatura ambiente durante 90 horas y se concentra. Se cromatografía para obtener el compuesto deseado en forma de un sólido blanco. RMP en DMSO: d 2.57 (4H, s), 2,76 (2H, t), 2.85 (4H, s), 4.30 (2H, t), 7.0 (2H, M), 7.15 (1H, dxt), 7.2 (2H, s), 7.97 (1H, s).

Etapa 2 Se trata el cloruro de la Etapa 1(37 mg, 0.095 mmoles) en DMF (95 ml) col hidrato de hidrazina (9.2 µl, 0,19 mmoles). Después de 4 horas se concentra cromatografía sobre PLC para obtener la hidrazida en forma de un aceite de color marrón. Espectro de masa: MH+ = 390.

. Etapa 3: Se trata la hidrazina de la Etapa 2 (18 mg, 0.047 mmoles) en DMF (2 ml con cloruro de tiofeno-2-carbonilo (5.2 µl, 0.047 mmoles) y DIPEA (12.2 µl, 0.07 mmoles). Después de 4 horas se concentra y cromatografía sobre PLC para obtiene la hidrazida en forma de un aceite de color amarillo.

Espectro de masa: MH+ = 500.

Etapa 4: Se calienta la hidrazina de la Etapa 3 (13 mg, 0.026 mmoles)en N,C bis(tremetiisi?il)acetamida (1 ml) durante 2 horas a 100°C. Se concentra cromatografía sobre PLC para obtener el compuesto del título en forma de un sólido blanco. Espectro de masa: MH+ = 482. La (1-2-cloroetil)-4-(2,4-difluorfenil)piperazina empleada en esta secuencia se prepara en dos etapas. Se agrega cloruro de cloroacetilo (1.76 ml, 22.1 mmoles), N-metilmorfolina (2.65 ml, 24.1 mmoles) a 1-(2,4-difluorfenil)piperazina (3.98 g, 20 mmoies)) en CH2CI2 (15 ml a 0°C). Se agita a temperatura ambiente durante 1 hora se concentra, se divide en EtOAc-agua, se seca, y se concentra para obtener amida en forma de un aceite de color marrón. A una solución a 0°C de esto (4.71 g, 17.1 mmoles) en THF (25 ml) se le agrega por goteo BH3.CH3S/THF (2M, 12.8 ml, 25 mmoles). Se agita a temperatura ambiente durante la noche, se apaga cor CH3OH, se concentra, y se divide con CH2Cl2-agua. Se seca y concentra la cape orgánica. Se trata el producto crudo por segunda vez con BH3.CH3S/THF y se elabora tal como anteriormente para obtener la cloroetilpiperazina en forma de un aceite de color castaño.

EJEMPLO 13 Etapa 1 A NaH (2.14 g, 60% en aceite, 53 mmoles) en DMF (20 ml), se le agrega el producto del Ejemplo 11 , Etapa 1 (7.55 g, 45 mmoles). Se agrega 1-bromo-2-cloroetano (14.8 ml, 178 mmoles). Se agita durante 1.5 horas y se concentra. Se cromatografía para obtener el dicloruro en forma de sólido blanco.

Etapa 2: Al producto de la Etapa 1 (3.7 g, 16 mmoles) en DMF (20 ml) se le agrega carbazato de t-butilo (2.53 g, 19 mmoles). Se calienta a 80°C durante 18 horas y se concentra. Se cromatografía para obtener el carbazato en forma de un sólido blanco.

Etapa 3: Al producto de la Etapa 2 (3.16 g, 9.6 mmoles) y Kl (1.6 g, 9.6 mmoles) en DMF (25 ml) se agrega 1-(2,4-difluorfenil)piperazina (3.82 g, 19 mmoles). Se calienta a 90°C durante 68 horas y se concentra. Se cromatografía para obtener la piperazina en forma de un sólido de color marrón.

Etapa 4: Se disuelve el producto de la Etapa 3 (3.38 g, 6.9 mmoles) en 1:1 CH3OH- CH2CI2 (50 mí). Se agrega HCl 4M en dioxano (20 ml). Se agita durante 16 horas y se le agrega NH3 acuoso a pH 11-12. Se concentra y cromatografía para obtener la hidrazida en forma de un sólido amarillo.

Etapa 5: Se combina el producto de la Etapa 4 (0.120 g, 0.31 mmoles) con ácido 5- bromo-2-furoico (0.71 g, 0.7 mmoles) y HOBt.H20 (0.050 g, 0.37 mmoles) en DMF (6 ml). Se agrega EDCI (0.071 g, 0.37 mmoles) y se agita durante 1 hora. Se concentra y cromatografía para obtener la hidrazida en forma de un sólido amarillo.

Etapa 6: Se disuelve el producto de la Etapa 5 (0.163 g, 0.28 mmoles) en N,0-bis(tr¡metils¡lil)acetamida (6 ml). Se calienta a 120°C durante 16 horas y se vierte en CH3OH. Se concentra y cromatografía para obtener el producto del título en forma de un sólido blancuzco. EM m/e 544+546 (M+1 ). De manera similar se preparan los compuestos de la siguiente estructura, donde R es tal como se ha definido en el cuadro: EJEMPLO 14 Se trata el producto del Ejemplo 13, Etapa 4 (0.080 g, 0.20 mmoles) coN clorhidrato de cloruro de nicotinoilo (0.044 g, 0.25 mmoles) y diisopropiletilamin (0.086 ml, 0.40 mmoles) en DMF (4 ml). Se agita durante 2 horas, se concentra y se cromatografía para obtener la hldrazida en forma de un sólido blanco. Se trata este material con BSA como en el Ejemplo 13, Etapa 6 para obtiene el compuesto del título en forma de un sólido blanco: EM m/e 477 (M+1). De manera similar se preparan los compuestos de la siguiente estructura, en la cual R es tal como se ha definido en el cuadro: EJEMPLO 15 Etapa 1 : Al producto del Ejemplo 13, Etapa 2 (3.54 g, 10.8 mmoles) y Kl (1.79 g, 10.8 mmoles) en DMF (35 ml) se agrega 1-(4-(2-metoxietoxi)fenil)piperazina (5.1 g, 22 mmoles). Se calienta a 90°C durante 90 horas y se concentra. Se cromatografía para obtener la piperazina en forma de un sólido de color marrón.

Etapa 2: Se trata el producto de la Etapa 1 con HCl como en el Ejemplo 13, Etapa 4 para obtener la hidrazina en forma de un sólido amarillo.

Etapa 3: Se trata el producto de la Etapa 2 con ácido 5-cioro-2-furoico tal como en el Ejemplo 13, Etapa 5, para obtener la hidrazida en forma de un sólido amarillo.

Etapa 4: Se trata el producto de la Etapa 3 con BSA tal como en el Ejemplo 13, Etapa 6. Se cromatografía para obtener el compuesto del título en forma de un sólido blanco. EM m/e 538+540 (M+1 ). De manera similar se preparan los compuestos de la siguiente estructura, en la cual R es tal como se ha definido en el cuadro.

EJEMPLO 16 Se combina el producto del Ejemplo 1-83 (0.080 g, 0.16 mmoles) con Ac2o (0.028 ml, 0.28 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (0.004 g, 0.03 mmoles) en DMF (5 ml). Se agita durante 4 horas, se concentra, se cromatografía para obtener el éste de acetato en forma de un sólido blanco, EM: m/e = 532 (M+1).

EJEMPLO 17 Se combina el producto del Ejemplo 1-21 (0.100 g, 0.21 mmoles) con H2NHOH.HCI (0.029 g, 0.42 mmoles) en 95% de EtOH (9 ml). Se agregan 10 gotas de HCl concentrado, se calienta a reflujo durante 5 horas, se agrega DMF (15 ml), se calienta durante 18 horas, se deja enfriar y se filtra para obtener la oxima en forma de un sólido blanco, EM: m/e=487 (M+1 ). Se cromatografía el licor madre para obtener un producto adicional. De manera similar se prepara la metoxima, un sólido blanco, EM: m/e=501 (M+1): Ej. 17-2 EJEMPLO 18 18 Etapa 1 : A una solución de alcohol 4-bromofenetílico (0.600 g, 2.98 mmoles) y ácido 3- piridinilborónico (0.734 g, 5.97 mmoles) en tolueno (35 ml) y EtOH (9 ml), se le agrega una solución de K2CO3 (0.8826 g, 5.97 mmoles) en H20 (16 ml) y tetraquis(trifenifosfina)paladio(0) (0.172 g, 0.149 mmoles). Se calienta en un tubo sellado durante 1 horas a 120°C y se enfría. Se extrae con EtOAc, se lava con salmuera, se seca (K2C0 ) y se concentra Se cromatografía sobre sílice (30-50% de EtOAc/hexano) para obtener el alcohol biarílico.

Etapa 2: Al producto de la Etapa 1 (0.540 g, 2.71 mmoles) en CH2CI2 (15 ml) a 0°C se le agrega cloruro de mesilo (0.35 ml, 3.52 mmoles) y Et3N (0.57 ml, 4.00 mmoles). Se agita durante 2.5 horas y se extrae con CH2Cl3. Se seca (Na2S0 ) y se concentra para obtener el mesilato.

Etapa 3: Se agrega el producto de la Preparación 4 (0.347 g, 1.44 mmoles) al mesilato de la Etapa 2 (0.480 g, 1.73 mmoles) en DMF (4.5 ml), seguido de NaH (60% en aceite 0.082 g, 4.04 mmoles). Se agita durante 18 horas y se extrae con EtOAc. Se lava con H20, se seca (H2COs) y se concentra. Se purifica por PTLC (5% CH3OH/CH2CI2), revelado dos veces) para obtener el compuesto del título como un sólido blanco, EM: 423 (M+1 ).

Mediante el método anterior, se prepara lo siguiente (Ejemplo eniletanol comercial): EJEMPLO 19 TBAF f Etapa 3 Ej. 19 Etapa 1 : Se combina alcohol de 4-bromofenetílico (3.00 g, 14.9 mmoles), trietilamina (2.68 ml, 19.2 mmoies), dimetiiaminopiridina (0.180 g, 1.47 mmoles) y cloruro de t-butildimetilsiiilo (2.45 g, 16.3 mmoles) en CH2CI3 (75 mi). Se agita durante 1 hora, se lava con H20, se seca (K2C03), y se concentra. Se cromografía sobre sílice (hexanos) para obtener el éter sililico.

Etapa 2: Al compuesto de la Etapa 1 (0.300 g, 0.95 mmoles) en tolueno seco (15 mi) se le agrega 2-(trl-butilestanilo)piridina (1.05 g, 2.86 mmoles) y tetraquis (trifenilfosfina) paladio (0.11 g, 0.095 mmoles). Se inunda con N2 y se callenta durante 16 horas 120°C. Se enfría, se filtra a través de Celite, y se lava con NH4CI, salmuera y luego con agua. Se seca (K2C03) y se concentra. Se cromatografía sobre sílice (3-5% EtOAc/hexanos) para obtener el biaríio, EM 314 (M+1).

Etapa 3: Se combina el biarilo de la Etapa 2 (0.180 g, 0.57 mmoles) y TBAF (1.0 M en THF, 1.7 ml) en THF (5.7 ml). se agita durante 2 horas, se lava con NH4CI saturado y se extrae con EtOAc. Se lava varias veces con H20, se seca (K2C03) y se concentra para obtener el alcohol.

Etapas 4 v 5: Se conduce tal como en el Ejemplo 18, Etapas 2 y 3, para obtener el compuesto del título en forma de un sólido blanco, MS: 423 (M+1). De manera similar se preparan los siguientes compuestos: EJ 19-3, EM"423 (M+1) EJEMPLO 20 AI producto del Ejemplo 18 (0.055 g, 0.13 mmoles) en CH2CI2 (1.5 ml) a -78°C se le agrega m-CPBA (0.050 g, 0.29 mmoles). Se deja calentar, se agita durante horas, y se lava sucesivamente con Na2S203 saturado, 5% de K2CO3, y H20. Se seca (Na2S04), y se concentra. Se purifica mediante PTLC (10% CH3OH/CH2CI2) para obtener el compuesto del título, EM: 439 (M+1). De manera similar, se oxida el producto del Ejemplo 18-2 a 0°C o temperatura ambiente para producir el sulfóxido, EM: 484 (M+1), o la sulfona, EM 500 (M+1).

Ej. 20-2 Ej. 20-3 EJEMPLO 21 Se combina el producto de la Preparación 6 (0.104 g, 0.30 mmoles), 4-metíl- bencenotiol (0.075 g, 0.60 mmoles), y K2C03 (0.091 g, 0.66 mmoles) en DMF (20 ml) Se calienta a 8000 durante 5 horas y se concentra.

Se divide entre EtOAc y agua, se lava con salmuera, se seca sobre MgS04 y se concentra. Se recristaliza a partir de CH3OH para obtener el compuesto del título, EM: m/e = (M+1). De manera similar se preparan los siguientes compuestos: EJEMPLO 22 Se combina el producto de la Preparación 6 (0.11 g, 0.25 mmoles), 3,4-dimetoxifenol (0.154 g, 1.0 mmoles), y K2CO3 (0.138 g, 1.0 mmoles) en DMF (5 mi). Se calienta a 90°C durante 48 horas y se concentra. Se divide entre EtOAc y agua, se lava con NaOH 1 N y luego con salmuera, se seca sobre MgS04, y se concentra. Se cromatografía sobre sílice (1.5% CH3OH/CH2CI2) para obtener el compuesto del título, EM: m/e = 422 (M+1 ). De manera similar se prepara el siguiente compuesto, EM: m/e = 454 (M+1).

Ej. 22-2 EJEMPLO 23 Etapa 1 : A NaH (60% en aceite, 1.32 g, 33 mmoles) en DMF (25 ml) a 5°C se le agrega por goteo, con agitación, 3,4-dimetoxifenol (4.77 g, 30 mmoles) Después de 0.5 horas, se agrega 1 ,5-dibromo-pentano (20.7 g, 90 mmoles) Se agita durante 2 horas y se concentra. Se cromatografía sobre sílice (CH2CI2) para obtener el monobromuro, EM: m/e 303 (M+1).

Etapa 2: A NaH (60% en aceite, 0.044 g, 1.1 mmoles) en DMF (25 ml) a 5°C se le agrega el producto de la Preparación 1 (0.241 g, 1.1 mmoles). Después de 0.5 horas, se agrega el compuesto de la Etapa 1. Se deja calentar, se agita durante 18 horas, y se concentra. Se divide entre EtOAc y agua, se Java con NaOH 1 N y Juego con salmuera, se seca sobre MgS04, y se concentra. Se cromatografía sobre sílice (2% CH3OH/CH2CÍ2) y se recristaliza la fracción apropiada a partir de CH3CN para obtener el compuesto del título; EM: m/e 464 (M+1).

EJEMPLO 24 Etapa 1 : Se combina 1 ,4-dioxa-8-azaspiro (4,5)decano (0.48 ml, 3.8 mmoles) con el producto de la Preparación 2 (0.66 g, 1.5 mmoles) en DMF (10 mi). Se calienta a 90°C durante 16 horas, y se deja enfriar, se filtra y se lava con CH2OH para proporcionar un sólido blancuzco, EM: m/e 411 (M+1).

Etapa 2: Se callenta el producto de la Etapa 1 (0.476 g, 1.16 mmoles) en acetona (10 ml) y 5% HCl (10 ml) a 100°C durante 16 horas. Se enfría, se neutraliza con NaHC03 saturado, y se extrae con 10% de CH3OH en CH2CI2. Se seca (MgS04), se concentra y cromatografía sobre sílice con CH3OH-CH2CI2 para obtener la cetona en forma de un polvo blanco, EM: m/e 367 (M+1).

Etapa 3: Se combina ei producto de la Etapa 2 (0.050 g, 0.13 mmoles) con clorhidrato de O-metilhidroxilamina (0.033 g, 0.39 mmoles) en piridina (3 mi). Se agita durante 16 horas y se concentra. Se divide entre NaHC03 (saturado) y 5% CH3OH en CH2CI2. Se seca (MgS0 ), se concentra y se cromatografía sobre sílice con 5% CH3OH CH2CI2 para obtener el compuesto del título en forma de un sólido blanco, EM: m/e 396 (M+1). De manera similar se preparan los siguientes compuestos: EJEMPLO 25 Etapa 1 : Se combina 4-oxo-1 -piperidinacarboxiiato de bencilo (1.0 g, 4.3 mmoles) con H2NOH HCl (0.89 g, 13 mmoles) en piridina (5 ml). Se agita durante 16 horas y se concentra. Se divide entre NaHC?3 (sat.) y EtOAc, se seca (MgS04) y se concentra para dar la oxima.

Etapa 2: Se combina el producto de la Etapa 1 (0.44 g, 1.8 mmoles) con éter 2- bromoetilmetílico (0-20 ml, 2.2 mmoles) y NaH (0.10 g, 2.7 mmoles) en DMF (8 ml). Se agita durante 16 horas y se concentra. Se divide entre NH4CI (sat.) y éter, se seca (MgS04), y se concentra. Se cromatografía el residuo sobre sílice con 20% de EtOAc-hexano para obtener la oxima alquilada.

Etapa 3: Se agita el producto de la Etapa 2 (0.45 g, 1.47 mmoles) sobre 5% de Pd/C (0.045 g) en EtOAc (25 ml) bajo H2 durante 6 horas. Se filtra y concentra para obtener la amina.

Etapa 4: Se trata la amina de la Etapa 3 con el producto de la Preparación 2 tal como en el Ejemplo 24, Etapa 1 , para obtener el compuesto del título en forma de un sólido blanco, EM: m/e 440 (M+1).

EJEMPLO 26 Se agrega triacetoxiborohidruro de sodio (0.083 g, 0.39 mmoies) a una mezcla del producto del Ejemplo 24, Etapa 2 (0.050 g, 0.13 mmoles), anilina (0.035 ml, 0.39 mmoles), y AcOH (0.045 ml, 0.78 mmoles) en dicloroetano (3 ml). Se agita durante 16 horas y se divide entre NaHC03 (sat.) y 5% CH3OH en CH2CI2. Se seca (MgS0 ) y se concentra. Se cromatografía (5% CH3OH-CH2CI2) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido blanco, EM: m/e 444 (M+1 ).

De manera similar, se prepara el siguiente compuesto, EM: m/e 445 (M+1).

EJEMPLO 27 Etapa 1 : Se combina 4-bromofeno! (3.46 g, 20.0 mmoles) con éter 2-bromoetilmetilico (2.82 ml, 30.0 mmoles) y K2C03 (8.30 g, 60.0 mmoles) en acetona (50 ml). Se calienta bajo reflujo durante 16 horas, se enfría, se filtra, y se concentra. Se cromatografía sobre sílice con 5% de EtOAc/hexano para proporcionar el éter en forma de un aceite claro. A este éter (2.73 g, 11.8 mmoles) en THF seco (50 ml) a -78°C se agrega n-BuLi (1.6 M en hexano, 7.4 ml, 11.8 mmoles). Se agita durante 10 minutos y se agrega a una solución 4-oxo-1 -piperidinacarboxilato de bencilo (2.5 g, 10.7 mmoles) en THF seco (5 ml). Se agita durante 2 horas y se deja calentar. Se divide entre NH4CI saturado y EtOAc, (MgS04 seco) y se concentra. Se cromatografía sobre sílice con EtOAc/hexano (20:80, luego 40:60) para obtener el alcohol.

Etapa 2: A una solución del producto de la Etapa 1 (0.386 g, 1.0 mmoles) y trietilsilano (0.80 ml, 5.0 mmoles) CH2CI2 seco (10 ml) a -78°C se le agrega ácido trifluoracético (0.38 ml, 5.0 mmoles). Se deja calentar durante 2 horas y se divide entre NaHCO3 saturado y CH2CI2. Se seca (MgS04) y se concentra. Se cromatografía sobre sílice.con 20% de EtOAc/hexano para obtener el producto de reducción, EM: m/e 370 (M+1).

Etapa 3: Se agita el producto de la Etapa 2 (0.300 g, 0.758 mmoles) sobre 5% Pd/C (0.030 g) en EtOAc (5 mi) y CH2OH (5 ml) bajo H2 durante 2 horas. Se filtra y concentra para obtener la amina.

Etapa 4: Se trata la amina de la Etapa 3 con el producto de la Preparación 2 tal como en el Ejemplo 24, Etapa 1 , para obtener el compuesto del título en forma de un sólido blanco. EM: m/e 503 (M+1).

EJEMPLO 28 Se trata el producto del Ejemplo 1-145 (0.020 g, 0.044 mmoles) en EtOH (0.5 ml) a 0°C con borohidruro de sodio (0.005 g, 0.13 mmoles) y con una cantidad igual nuevamente después de 075 horas. Después de otras 0.75 horas, se divide entre CH2CI2 y NH4CI saturado. Se seca (Na2S04) y se concentra. Se purifica por PTLC (10% CH3OH/CH2CI2) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido blanco, EM: 459 (M+1 ).

EJEMPLO 29 Se trata el producto del Ejemplo 1-145 (0.020 g, 0.044 mmoles) en piridina (0.5 ml) con clorhidrato de metoxiamina (0.011 g, 0.13 mmoles). Se agita durante 16 horas y se concentra. Se divide entre CH2CI2 y NaHC?3 saturado. Se seca (Na2S0 ) y se concentra. Se purifica mediante PTLC (5% CH3?H/CH2CI2) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido blanco, EM: 486 (M+1). De manera similar, se prepara la oxima 29-2 en forma de dos isómeros geométricos separados, cada uno un sólido blanco, EM: 472 (M+1).

Debido a su actividad antagonista de receptor A2a de adenosina, lo compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento de depresión enfermedades de la función cognitiva y enfermedades neurodegenerativas tales como la enfermedad de Parkinson, demencia senil, tal como la enfermedad de Alzheimer, y psicosis de origen orgánico. En particular, los compuestos de la presente invención pueden mejorar el deterioro motriz debido a enfermedades neurodegenerativas, tales como la enfermedad de Parkinson. Los otros agentes que se sabe que son útiles en el tratamiento de ia enfermedad de Parkinson que pueden administrarse en combinación con lo compuestos de la fórmula I incluyen: L-DOPA; agonistas dopaminérgicos tales como quinpirol, ropinirol, pramipexol, pergolida y bromocriptina; inhibidores de MAO-B tales como deprenil y selegilina; inhibidores de DOPA decarboxilasa tales como carbidopa y benserazida; e inhibidores de COMT tales como tolcapona y entacopona. Puede usarse de uno a tres de otros agentes en combinación con los compuestos de la fórmula I, preferiblemente un agente. La actividad farmacológica de los compuestos de la invención se determinan mediante los siguientes ensayos in vitro e in vivo para medir ia actividad del receptor A2a.

Protocolo de Ensayo de Adhesión de Competición de Adenosina Humana de Receptor A^ Fuentes de Membranas: A2a: Membranas de Receptor de Adenosina A2a Humana, Catálogo #RB-HA2ia, Receptor Biology, Inc., Beltsville, MD. Se diluye a 17 µg/100 µl en un solución reguladora de pH en dilución de membrana (ver a continuación). Soluciones reguladoras de pH de Ensayo: Solución reguladora de pH de dilución de membrana: Soiución salina regulada con fosfato de Dulbecco (Gibco/BRL) + 10 mM MgCI2. Solución reguladora de pH de Dilución del Compuesto: Solución salida regulada con fosfato Dulbecco (Gibco/BRL) + 10 mM MgCI2 suplementado con 1.6 mg/ml de metil celulosa y 16% de DMSO. Se prepara diariamente fresco. Ligandos: A2a: [3HJ-SCH 58261 , síntesis habitual, Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ. Se prepara materia prima en una solución reguladora de pH de dilución de membrana 1 nM. La concentración del ensayo final es de 0.5 nM. Ai: [3H]- DPCPX, AmershamPharmacia Biotech, Piscataway, NJ.

Stock se prepara a 2 nM en solución reguladora de pH de dilución de membrana. La concentración de ensayo final es de 1 nM.

Adhesión no específica: A2a: Para determinar la adhesión no específica, se agrega 100 nM CGS 15923 (RBI, Natick, MA). Se prepara una carga de trabajo a 400 nM en la solución reguladora de pH de dilución del compuesto. Ai: Para determinar la adhesión no específica, se agrega 100 µM ÑECA (RBI, Natick, MA). Se prepara una carga de trabajo a 400 µM en la solución reguladora de pH de dilución de compuesto.

Dilución del Compuesto: Se preparan soluciones de carga de 1 mM de los compuestos en 100% de DMSO. Se diluye en la solución reguladora de pH de dilución de compuesto. Se somete a ensayo a 10 concentraciones en un rango de 3 pM a 30 pM. Se preparan soluciones de trabajo hasta una concentración final 4X en la solución reguladora de pH de dilución del compuesto.

Procedimiento de Ensayo: Se llevan a cabo los ensayos en placas de 96 receptáculos con un hueco profundo. El volumen total del ensayo es de 200 µl. Se agregan 50 µl de la solución reguiadora de pH de dilución del compuesto (adhesión total de ligando) o 50 µl CGS 15923 de solución de trabajo (adhesión no específica A2a) o 50 µl de solución de trabajo ÑECA (Adhesión no específica A-i) o 50 µl de solución de trabajo del fármaco. Se agrega 50 µl de carga de ligando ([3Hj-SCH 58261 para A?a, [3H]- DPCPX para Ai). Se agregan 100 µl de membranas diluidas que contienen el receptor apropiado. Se mezcla. Se incuba a temperatura ambiente durante 90 minutos. Se cosecha usando una cosechadora de células Brande sobre placas de filtro Packard GF/B. Se agregan 45 µl de Microscint 20 (Packard), y se cuentan usando el Contador de Microcentelleo Packard TopCount. Se determinan los valores IC50 ajustando las curvas de desplazamiento usando un programa de ajuste de curvas iterativo (Excel). Se determina los valores Ki usando la ecuación de Cheng-Prusoff.

La catalepsia inducida por Haloperidol en rata Se usaron ratas macho Sprague-Dawley (Charles River, Calco Italia) que pesaban de 175-200 g Se indujo estado cataléptlco mediante administración subcutánea del haloperidol antagonista receptor de dopamina (1 mg/kg, sc), 90 minutos antes de someter los animales a prueba sobre el ensayo de rejilla vertical. Para este ensayo, se colocan las ratas en la cubierta de malla de alambre de una jaula de plexiglás de 25x43 colocada en un ángulo de aproximadamente 70 grados con la mesa de trabajo. La rata se coloca sobre la rejilla con las cuatro patas abducidas y extendidas ("postura de ranas"). El uso de dicha postura antinatural es esencial para la especificidad de este ensayo para catalepsia. El período de tiempo desde la colocación de las patas sobre la primera completa remoción de una pata (latencia decente) se mide como máximo durante 120 segundos. Los antagonistas de adenosina A2a selectivos bajo evaluación se administran oralmente en dosis que están comprendidas entre 0.03 y 3 mg/kg, 1 y 4 horas antes de evaluar los resultados en los animales. En experimentos separados, se determinaron los efectos anticatalépticos del compuesto de referencia LDQPA (25, 50 y 100 mg/kg, ip).

Lesión 6-ORDA del Haz de Nervios del Cerebro Anterior medio en Ratas En todos los experimentos se usaron ratas macho adultas Sprague-Dowley (Charles River, Calco, Como, Italia), de un peso de 275-300 g. Las ratas se alojaron en grupos de 4 por jaula, con acceso libre a alimentos y agua, bajo temperatura controlada y un ciclo de 12 horas de luz / oscuridad. El día antes de la cirugía las ratas se mantuvieron en ayunas durante la noche con agua ad libitum. Se practicó una lesión en el manojo de nervios el cerebro anterior medio unilateral de 6-hidroxidopamina (6-OHDA) de acuerdo con el método descrito por Ungerstedt et al. (Brain Research, 1971 , 6-OHDA y Cathecolamine Neurons, Holanda del Norte, Amsterdam, 101-127), con cambios menores Resumiendo, los animales fueron anestesiados con hidrato doral (400 mg/kg, ip) y se trataron con desipramina (10 mpk, ip) 30 minutos antes de la inyección de 6-OHDA para bloquear la absorción de la toxina en las terminales noradrenérgicas. Luego, se coloraron los animales en un marco estereotáxico. Se iluminó la piel sobre el cuero cabelludo y se tomaron las coordenadas estereotáxicas (-2.2 posterior del bregma (AP), +1.5 lateral desde el bregma (ML), 7.8 ventral desde dura (DV), de acuerdo con el atlas de Pellegrino et al (Peilegrino L.J. Pellegrino A.S. y Cushman A.J., A Stereotaxis Atlas of the Rat Brain, 1979, New York; Plenum Press). Luego se colocó un disco de orificio en el cuero cabelludo sobre el sitio de la lesión y se bajó una aguja unida a una jeringa Hamilton, en el MFB izquierdo. Luego se disolvieron 8 µg de 6-OHDA-HCI en 4 µl de salina con 0.05% de ácido ascórbico como antioxidante, y se infusionaron al régimen de flujo constante de 1 µl/1 minuto usando una bomba para infusión. La aguja se retiró después de 5 minutos adicionales y se cerró la herida quirúrgica y los animales se dejaron recuperar durante 2 semanas. Dos semanas después de la lesión se administró a las ratas L-DOPA (50 mg/kg, ip) además de benserazida (25 mg/kg, ip) y se seleccionaron en base a la cantidad de vueltas completas contralaterales cuantificadas en un período de ensayo de dos horas mediante rotámetros automáticos (ensayo de preparación). Cualquier rata que no mostrara por lo menos 200 vueltas completas/2 horas no fue incluida en el estudio. Las ratas seleccionadas recibieron el fármaco del ensayo 3 días después del ensayo de preparación (supersensibilidad máxima al receptor dopamina). Los nuevos antagonistas receptores A?A se administraron por vía oral a niveles de dosis comprendidos entre 0.1 y 3 mg/kg en diferentes puntos de tiempo (es decir, 1 , 6, 12 horas) antes de la inyección de una dosis de subumbral de L-DOPA (4 mpk, ip) además de benserazida (4 mpk, ip) y se evaluó el comportamiento de las vueltas. Usando los procedimientos de ensayo anteriores, se obtuvieron los siguientes resultados para los compuestos preferidos y/o representativos de la invención. Los resultados del ensayo de adhesión sobre los compuestos de la invención mostraron valores Ki de A?n de 0,3 a 57 nM, prefiriéndose ios compuestos que mostraban valores Ki comprendidos entre 0.3 y 5.0 nM. La selectividad se determinó dividiendo Ki por el receptor AI por Ki por el receptor A2a- Los compuestos preferidos de la invención tienen una selectividad comprendida entre aproximadamente 100 hasta aproximadamente 2000. Los compuestos preferidos mostraron una disminución de 50- 75% en la latencia de descenso cuando se ensayaron por vía oral a 1 mg/kg para la actividad anti-cataléptica en ratas.

En el ensayo de la lesión de 6-OHDA, las ratas fueron dosificadas oralmente con 1 mg/kg de los compuestos preferidos que se efectuaron en 170-440 vueltas en el período de ensayo de dos horas. En el ensayo de catalepsia inducido para haloperidol, una combinación de una cantidad de sub-umbral de un compuesto de fórmula I y una cantidad de subumbral de L-DOPA mostraron una significativa inhibición de la catalepsia, lo cual indica un efecto sinérgico. En el ensayo de la lesión de 6-OHDA, se administró a los animales de ensayo una combinación de un compuesto de fórmula I y una cantidad de subumbral de L-DOPA que demostró una vuelta contralateral significativamente superior. Para preparar las composiciones farmacéuticas a partir de los compuestos descritos en esta invención, los portadores inertes, farmacéuticamente aceptables pueden ser sólidos o líquidos. Las preparaciones en forma sólidas incluyen polvos, pastillas, granulos dispersables, cápsulas, sellos y supositorios. Los polvos y pastillas pueden estar constituidos por desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 70 por ciento del ingrediente activo. Los portadores sólidos apropiados son conocidos en el arte, por ejemplo carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, azúcar, lactosa. Las tabletas, polvos, sellos y cápsulas pueden usarse como formas de dosificación sólida apropiadas para administración oral. Para prepara los supositorios, se fundió primero una cera de bajo punto de fusión tal como una mezcla de glicéridos de ácidos grasos o manteca de cacao, y se dispersó el ingrediente activo homogéneamente mediante agitación. La mezcla homogénea fundida se vertió luego en moldes de un tamaño conveniente y se dejó enfriar y a continuación solidificar. Las preparaciones de formas líquidas incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones. Como ejemplo pueden mencionarse agua o soluciones de agua-propiienglicol para inyección parenteral. Las preparaciones de formas líquidas pueden incluir también soluciones para administración intranasal. Las preparaciones en aerosol apropiadas para inhalación pueden incluir soluciones y sólidos en forma pulverulenta, que pueden estar en combinación con un portador farmacéuticamente aceptable, tal como un gas comprimido inerte. Asimismo se incluyen las preparaciones en forma sólida destinadas convertirlas, poco tiempo antes del uso, a las preparaciones en forma líquida para administración oral o parenteral. Dichas formas líquidas incluyen soluciones suspensiones y emulsiones. Los compuestos de la invención pueden ser también administrados por vía transdérmica. Las composiciones transdérmicas pueden tener las formas de cremas, lociones, aerosoles y/o emulsiones y pueden estar incluidas en un parche transdérmico de matriz o de tipo reservorio tal como los que son convencionales en la técnica para este propósito. Preferiblemente, el compuesto se administra por vía oral.

Preferiblemente, la preparación farmacéutica está en una forma de dosificación unitaria. En dicha forma, la preparación se subdivide en dosis unitarias que contienen las cantidades apropiadas de componente activo, por ejemplo una cantidad eficaz para lograr el propósito deseado. La cantidad de compuesto activo de la fórmula I en una dosis unitaria de preparación puede variar o puede ajustarse a desde aproximadamente 0.1 mg a 1000 mg, más preferiblemente aproximadamente 1 mg a 300 mg, de acuerdo con la aplicación particular. La dosis real empleada puede variar dependiendo de los requisitos del paciente y de la gravedad de la condición que se esté tratando. La determinación de la dosis apropiada para una situación particular está dentro de la experiencia en la materia. En general, el tratamiento se inicia con dosis más pequeñas que son inferiores a las dosis óptima del compuesto. A continuación, la dosis se incrementa en pequeños incrementos hasta que se logra el efecto óptimo bajo las circunstancias. Por razones de conveniencia, la dosis diaria total puede dividirse y administrarse en porciones durante el día si se desea. La cantidad de frecuencias de administración de los compuestos de la invención y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos podrán regularse de acuerdo con la opinión del médico personal considerando factores tales como la edad, la condición y el peso del paciente, así como también la gravedad de los síntomas que se están tratando. Un régimen de dosis típico recomendado para los compuestos de la fórmula I es la administración oral de desde 10 mg a 2000 mg/día preferiblemente 10 a 1000 mg/día, en dos a cuatro dosis divididas para obtener alivio de las enfermedades del sistema nervioso central tal como la enfermedad de Parkinson. Los compuestos son no-tóxicos cuando se administran dentro del rango de dosificación. Las dosis y el régimen de dosificación de los otros agentes para tratar la Enfermedad de Parkinson serán determinados por el médico clínico, por ejemplo teniendo en cuenta las dosis aprobadas y el régimen de dosis en el inserto del paquete y teniendo en cuenta la edad, el sexo y el estado del paciente y ia gravedad de la enfermedad. Se espera que cuando se administra la combinación de un compuesto de fórmula I y otro agente, dosis menores de ios componentes serán eficaces en comparación con las dosis de los componentes administrados como monoterapia. Los siguientes son ejemplos de formas de dosificación farmacéutica que contienen un compuesto de la invención. Los expertos en la materia reconocerán que las formas de dosificación pueden modificarse de manera de contener un compuesto de fórmula I y otro agente. El alcance de la invención en su aspecto de composición farmacéutica no está limitado por los ejemplos provistos.

EJEMPLOS DE FORMA DE DOSIFICACIÓN FARMACÉUTICA EJEMPLO A Tabletas Método de manufactura Se mezclan los artículos Nos. 1 y 2 en una mezcladora apropiada durante 10-15 minutos. Se granula la mezcla con el articulo No. 3. Se trituran los granulos húmedos a través de un tamiz grueso (por ejemplo 0.63 cm) si es necesario. Se secan los granulos húmedos. Se tamizan los granulos secos si es necesario y se mezclan con los artículos No. 4 y se mezclan durante 10-15 minutos. Se agrega artículo No. 5 y se mezcla durante 1-3 minutos. Se comprime la mezcla hasta tamaño apropiado y se pesa en una máquina formadora de pastillas apropiada.

EJEMPLO B Cápsulas Método de Manufactura Se mezclan los artículos Nos. 1 , 2 y 3 en una mezcladora apropiada durante 10-15 minutos. Se agrega el artículo No. 4 y se mezcla durante 1-3 minutos. Se introduce la mezcla dentro de cápsulas de gelatina dura de dos piezas apropiadas en una máquina encapsuiadora adecuada. Aunque la presente invención ha sido descrita conjuntamente con las realizaciones específicas establecidas más arriba, puede llevarse a cabo muchas alternativas, modificaciones y variaciones las cuales resultarán aparentes para los expertos en la materia. Todas dichas alternativas, modificaciones y variaciones entran dentro del espíritu y alcance de la presente invención.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1. Compuestos que tienen la fórmula estructural o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, caracterizados porque R es R1 -furanilo, R1-tienilo, R1-piridilo, N-óxido de R1-piridilo, R1 -oxazolilo, R10-fenilo, R1 -pirrolilo o cicloalquiio C4-Cß; X es alquileno C2-C6 o -C(0)CH2-, Yes -N(R2)CH2CH2N(R3)-, -OCH2CH2N(R2)-, -O-, -S-, -CH2S-, -(CH2)2-NH- o y Z es R5-fenilo, R5-fenilalquilo(CrC6), R5-heteroarilo, difenilmetilo, R6-C(0)-, R°-S02-, R°-OC(0)-, R )7'-_MN(DR8B)-C(0)-, R 7'- MN/(DR8ß\)-C(S)-, í fenilo-CH(OH)-, o fenilo-C(=NOR2)-, o cuando Q es H z es también fenilamino o piridilamino; o Z y Y juntos son R1 es de 1 a 3 sustituyentes independientemente seleccionados de hidrógeno, alquilo C?-C6, -CF3, halógeno, -NO2, -NR12R13, alcoxi C?-C6, alquiltio C?-C6 alquilsulfinilo C?-C6, y alquilsulfonilo CrC6; R2 y R3 están independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo C-i-Cß; m y n son independientemente 2-3; Q es -N l — t -Ci — -Cl — -Ci — o -C I — H ' CN ' OH ¿OCH3 ; R4 es 1-2 sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C1-C6, o dos sustituyentes R4 en el mismo carbono pueden formar =0; Rd representa de 1 a 5 sustituyentes independientemente seleccionados de grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo C-i-Cß, hidroxi, alcoxi C-i-Cß, -CN di-((CrC6)alquil)amino, - CF3, -OCF3, acetilo, -NO2, hidroxi(C?-C6)alcoxi, (C Cß) alcoxi(C?-C6)alcoxi, di- ((C?-C6)-alcoxi)(C?-C6)alcoxi, (CrC6)-alcoxi(CrC6)alcoxi-(CrC6)-alcoxi, carboxi(CrC6)-aIcoxi, (C?-C6)-alcoxicarbon¡l(C?-C6)alcoxi, (C C6)cicloalquil(C?-C6)alcoxi, di-((CrC6)alquilamino(C?-C6)alcoxi, morfoiinilo, (d-C6)alquilo-S02-, (C?-C6)alquilo-SO-(CrC5)alcoxi, tetrahidropiraniloxi, (d-C6)alquilcarbonil(C?-Ce)-alcoxi, (C-i-CßJ-alcoxicarbonilo, (Cr C6)alquilcarboniloxi(C?-C6)-alcox¡, -SO2NH2, fenoxi, o los sustituyentes R adyacentes conjuntamente con -0-CH2-0-, -0-CH2CH2-0-, -0-CF2-0- o -0-CF2CF2-0- y formar un anillo con los átomos de carbono a los cuales están unidos; R6 es (C1 -C6)alquilo, R5-fenilo, R5-fenilo(CrC6)alquilo, tienilo, piridilo, (C3-C6) cicloalquilo, (CrC6)alquilo-OC(0)-NH-(C?-C6)alquilo-, di((C C6)alquil)aminometilo, o (d-C^alquüo-O"^ . R7 es (CrC6)alquilo, R5-fenilo o R5-fenilo(CrC6)alquilo; R8 es hidrógeno o alquilo CrC6; o R7 y R8 conjuntamente son -(CH2p-A-(CH2)q, donde p y q son independientemente 2 ó 3 y A es un enlace, -CH2-, -S- o -O y forman un anillo con el nitrógeno al cual están unidos; R9 representa 1-2 grupos independientemente seleccionados de hidrógeno alquilo Ci-Cß, hidroxi, alcoxi C?-C3, halógeno, -CF3 y (C?-C6)alcoxi(CrC6)alcoxi; R10 es 1 a 5 sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo Oi-Cß, hidroxi, alcoxi C Cß, -CN, -NH2- alquilamino C-i-Cß, dK(C?-C6)alquil)amino, -CF3, -OCF3 y -S(O)0-2(C?-C6)alquilo; R11 es H, alquilo C?-C6, fenilo, bencilo, alquenilo C2-C6, alcoxi C CßíCi-CßJalquilo, di((C? - C6)a[quil)amino(C| -C6)alquilo, pirrolidinilo(C?-C6)alquilo o piperidino(C? -C6)alquilo; R 2 es H o alquilo C Ce; y R13 es (C C6)alquilo-C(0)- o (C C6)alquiio-S02-.

2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R es R"1 -furanilo.

3. El compuesto de la reivindicación 1 , caracterizado además porque X es alquileno C2-Cd.

4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Y es \«-' >2 m l \ — Q^ \ N— (CH2)Í R4

5. El compuesto de la conformidad con la reivindicación 5, I I caracterizado además porque Q es — — o -CH— m y n son cada uno 2, y R4 es H.

6. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Z es R5-fenilo, R' heteroarilo, R6-C(0)- o R6-so2-.

7. El compuesto de la conformidad con la reivindicación 6, caracterizado además porque R5 es H, halógeno alquilo CrC6, alcoxi de Cr C6, hidroxi(CrC6)alcoxi o (CrC6)alcoxi, y R6 es R5-fenilo.

8. El compuesto de la conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque es seleccionado del grupo que consiste del compuesto de la fórmula 5 en la cual R y Z-Y son tal como se han definido en el cuadro siguiente:

9. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la reivindicación 1 en un portador farmacéuticamente aceptable.

10. El uso de un compuesto de la reivindicación 1, para la preparación de un medicamento para tratar la depresión, enfermedades cognitivas, enfermedades neurodegenerativas, o apoplejía.

11. Un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula II en donde R es R1 -furanilo, R1 -tienilo, R1 -piridilo, N-óxido de R1 -piridilo, R1-oxazolilo, R10-fenilo, R1-pirroliio o cicloalquenilo CrCe; y R1 representa de 1 a 3 substituyentes independientemente seleccionados de hidrógeno, alquilo Cr Ce, -CF3, halógeno, -N02, -NR12R13, alcoxi CrCe, alquiltio CrCe, alquilsulfinilo CrC6, y alquilsulfonilo CrC6; R1o representa de 1 a 5 sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógenol halógeno, alquilo CrCß, hldroxi, alcoxi CrCß, -CN, -NH2, alquilamino CrCß, d¡-(( CrCe)alquil)amino, -CF3-, -OCF3 y -S(O)0-2(CrC6)alquílo; R12 es H o alquilo CrC6; y R13 es (C?-C6)alquilo-C(0)- o (CrC6)alquilo-S02-; caracterizado porque comprende (1) tratar 2-amino-4,6- dihidroxipirimidina con POCI3 en dimetilformamida (DMF) para obtener 2-amino-4,6-dicloropirimidina-5-carboxaldehido (2) tratar carboxaldehído Vil con una hidrazida que tiene la fórmula H2N-NH-C(0)-R, en la cual R es tal como se ha definido anteriormente, para obtener C, VIH (3) tratar el intermediario de fórmula VIII con hidrato de hidrazina para formar un anillo pirazolo obteniendo de esta manera el intermediario de fórmula IX IX; (4) formar el compuesto deseado de fórmula II mediante un reordenamiento deshidratante.

12. Un procedimiento para preparar un compuesto de la fórmula en donde R es R1-furanilo, R1 -tienilo, R1-piridilo, N-óxido de R1 -piridilo, R1-oxazolilo, R10-feniio, R1-pirrolilo o cicloalquenilo CrCe; y R1 representa de 1 a 3 substituyentes independientemente seleccionados de hidrógeno, alquilo C ß, -CF3, halógeno, -N02, -NR12R13, alcoxi CrCß, alquiltio CrCe, alquilsulfinilo CrCß, y alquilsulfonilo CrCß; R1o representa de 1 a 5 sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógenol halógeno, alquilo Ci-Cß, hidroxi, alcoxi CrCß, -CN, -NH2, alquilamino CrCe, di-(( CrC6)alquil)amino, -CF3-, -OCF3 y -S(O)0-2(CrC6)alquílo; R12 es H o alquilo CrCe; y R13 es (CrC6)alquilo-C(O)- o (C?-Ce)alquilo-SO2-; caracterizado por convertir un compuesto de la fórmula IX en el compuesto deseado de la fórmula II por la reordenación deshidratante.

13. Un procedimiento para preparar un compuesto de la fórmula Illa caracterizado además porque R es R1-furanilo, R1 -tienilo, R1-piridilo, N-óxido de R1-piridilo, R1-oxazolilo, R 0-fenilo, R1 -pirrolilo o cicloalquenilo CrCß; y R1 representa de 1 a 3 substituyentes independientemente seleccionados de hidrógeno, alquiio CrCß, -CF3, halógeno, -N02, -NR12R13, alcoxi CrCß, alquiltio CrCß, alquilsulfinilo Oi-Cß, y alquilsulfonilo CrCß; R1o representa de 1 a 5 sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógenol halógeno, alquilo Oi-Cß, hidroxi, alcoxi CrC6, -CN, -NH2, alquilamino CrCß, di-(( CrC6)alquil)amino, -CF3-, -OCF3 y -S(0)o-2(Cr C6)alquílo; R12 es H o alquilo CrC6; y R13 es (C C6)alquilo-C(0)- o (C Ce)alquilo-S02-; caracterizado porque comprende (1 ) tratar un cloruro de la fórmula VIII con una hidroxialquil hidrazina de fórmula HO-(CH2)rNHNH2, en la cual r es 2-6, par obtener (2) ciclar el intermediario de fórmula X por reordenamiento deshidratante para obtener el intermediario tricíciico de fórmula XI (3) convertir el compuesto hidroxi de fórmuia XI al bromuro de fórmula Illa.

14. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la reivindicación 1 en combinación con 1 a 3 de otros agentes útiles en el tratamiento de enfermedad de Parkinson en un portador farmacéuticamente aceptable.

15. El uso de un compuesto de la reivindicación 1 en combinación con 1 a 3 de otros agentes útiles en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson para ia preparación de un medicamento para trata la enfermedad de Parkinson.