MXPA02011242A

MXPA02011242A - Bebida estable al ambiente.

Info

Publication number: MXPA02011242A
Application number: MXPA02011242A
Authority: MX
Inventors: Roy Michael Kirby
Original assignee: Unilever Nv
Priority date: 2000-05-15
Filing date: 2001-05-01
Publication date: 2003-03-10
Also published as: ZA200206146B; US6579556B2; BR0109568A; JP2003533200A; CN1287694C; CA2405130A1; CA2405130C; PL358642A1; DE60112277D1; AR028453A1; WO2001087094A1; HUP0302017A2; ATE300191T1; AU2001254823B2; EP1282368A1; GB0011677D0; CN1441641A; JP4327401B2; PL205069B1; EP1282368B1

Abstract

La presente invencion describe un metodo para preparar una bebida estable al ambiente que es adecuada para llenado en frio. El metodo involucra agregar a la bebida al menos un adyuvante de pasteurizacion que no tiene actividad fungicida apreciable a una temperatura entre 0 y 40°C pero que exhibe actividad fungicida cuando se calienta a una temperatura entre 40 y 65°C y se eleva la temperatura de la bebida a una temperatura entre 40 y 65°C a fin de activar la actividad fungicida del adyuvante de pasteurizacion.

Description

BEBIDA ESTABLE AL AMBIENTE Campo de la invención La presente invención se refiere a un método para preparar una bebida estable al ambiente, particularmente una bebida a base de té, que involucra adicionar a la misma uno o más adyuvantes de pasteurización que son fungicidas cuando se activan por calor.

Antecedentes de la Invención y Técnica Anterior En años recientes ha existido una elección incrementada por los consumidores quienes desean saciar su sed con bebidas recién elaboradas. La mayoría de ellos están cambiando de las ya bien conocidas bebidas refrescantes a bebidas a base de té, estando estas carbonatadas o no, y la frescura "natural" que pueden experimentar. El té contiene una combinación compleja de enzimas, intermediarios bioquímicos y elementos estructurales asociados normalmente con el crecimiento de las plantas y la fotosíntesis. También existen muchas sustancias naturales que dan al té su sabor único, astringencia, aroma y color. La mayoría de ellos son producidos por reacciones de oxidación que ocurren durante la llamada etapa de fermentación en la elaboración de té negro. REF. 141192 La producción del té ha sido manejada por mucho tiempo mediante los métodos de fabricación tradicionales de elaboración con solo un conocimiento fundamental de química que está involucrado. Como una consecuencia, los fabricantes han descubierto que el elaborar bebidas a base de té estables al medio ambiente a volúmenes requeridos para competir con la mayoría de las bebidas refrescantes, no es solo un asunto de aromatizar una bebida refrescante con té. El aroma de las bebidas a base de té y su estabilidad depende de la estabilidad de la bebida como un todo. El hongo incluye levaduras y mohos que crecen en las bebidas a base de té y otras bebidas refrescantes, los cuales pueden ser exterminados por tratamiento con calor o al menos controlados por el uso de conservadores . Algunas bebidas a base de té son por lo tanto pas eurizadas y después embotelladas en vidrio o en recipientes de PET estables al calor especiales. Esto es conocido como "llenado con calor". Desafortunadamente esto puede ser una operación costosa que crea un gran problema con el sabor "no-amigable" ambientalmente. Es por tanto más atractivo para los fabricantes empacar sus productos a base de té en recipientes de PET estándar los cuales pueden ir desde unidades para servir individuales hasta paquetes de servicio múltiple y mantener la estabilidad del producto usando sistemas de conservadores y aromas hechos a la medida. Lo anterior es conocido como "llenado en frío" . Esto también es útil para que no pueda usar un concentrado de té o polvo al instante . Desafortunadamente, el uso de conservadores comunes puede afectar a una bebida a base de té. Esto es particularmente cierto para el sulfito y el sorbato. Agregar un aroma más fuerte tal como el limón puede desplazar el sabor del conservador. Sin embargo, los consumidores están ansiosos de experimentar con otros sabores. Además, algunos de estos consumidores fueron atraídos a los productos a base de té como una alternativa más saludable y natural de las bebidas refrescantes algunas veces los conservadores son vistos como la especie de aditivos sintéticos que ocasionalmente se podrían evitar. Muchos países tienen reglamentos que prohiben el uso de ciertos aditivos de alimentos, incluyendo algunos fungicidas o conservadores, en alimentos y bebidas. Los reglamentos varían ampliamente pero hay una tendencia clara para alimentos que contienen niveles escasos o bajos de fungicidas y conservadores químicos, particularmente los sintéticos. Por lo tanto existe la necesidad de un método para elaborar bebidas estables al medio ambiente aromatizadas agradablemente que tengan niveles bajos de conservadores sintéticos . En respuesta a esta necesidad los presentes inventores han desarrollado un sistema fungicida para bebidas a base de té que no contienen ningún fungicida o conservador sintético. El sistema fungicida puede ser usado también para estabilizar bebidas que no son elaboradas a base de té incluyendo bebidas frutales y refrescantes.

Descripción de la Invención La invención puede referirse en términos generales a un método para preparar bebidas estables al medio ambiente útiles para llenado en frío que comprende las etapas de: adicionar a la bebida al menos un adyuvante de pasteurización que no tiene actividad fungicida apreciable a temperaturas entre 0 y 40 °C, pero que exhibe actividad fungicida cuando se calienta a una temperatura entre 40 y 65 °C a fin de activar la actividad fungicida del adyuvante de pasteurización. Cuando la bebida es a base de té contiene preferiblemente 0.01 a 3% de sólidos de té, especial y aproximadamente 0.14% de sólidos de té. El adyuvante de pasteurización es preferentemente una substancia que no tiene actividad fungicida apreciable a temperaturas entre 0 y 40 °C, especialmente entre 20 y 35°C, pero que exhibe actividad fungicida cuando se calienta a una temperatura entre 40 y 65°C, especialmente entre 45 y 55°C. Particularmente, los adyuvantes de pasteurización preferidos incluyen acetato de decilo, ácido láurico, aldehido láurico, alcohol láurico, 2-dodecenal, 2-decenoato de etilo, geranilo acetona, acetato de geranilo, el cuál está preferiblemente presente en una concentración no mayor de 1 mM, preferiblemente no mayor de 0.1 mM. Pero a diferencia de los métodos basados en pasteurización para estabilizar bebidas, el presente método no es dependiente del tiempo o temperatura. "Bebida" para propósitos de la presente invención significa cualquier bebida diferente al agua, que incluye bebidas refrescantes, bebidas frutales, bebidas a base de café y bebidas a base de té. "Té" para propósitos de la presente invención significa un material de hojas de Camellia sinensis var.

Sinensis or Camellia sinensis var. assamica . "Té" también pretende incluir el producto de la mezcla de dos o más de estos tés . Para evitar dudas la palabra "comprende" pretende significar incluir pero no necesariamente "consiste de" o "compuesto de" . En otras palabras las etapas listadas por separado o las opciones necesarias no pueden ser exhaustivas. Excepto en los ejemplos comparativos y operativos, o cualquier otra forma indicada explícitamente todos los números en esta descripción indican cantidades y concentraciones de material y deben ser entendidos como modificación de la palabra "aproximadamente" .

Breve descripción de las figuras La Figura 1 muestra un adyuvante de pasteurización, acetato de decilo, aplicado a 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. La Figura 2 muestra un adyuvante de pasteurización, ácido láurico, aplicado a 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. La Figura 3 muestra un adyuvante de pasteurización, alcohol láurico, aplicado 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. La figura 4 muestra un adyuvante de pasteurización, aldehido láurico, aplicado a 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. La figura 5 muestra un adyuvante de pasteurización, acetato de geranilo, aplicado a 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. La figura 6 muestra un adyuvante de pasteurización, geranilo acetona, aplicado a 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. La figura 7 muestra un adyuvante de pasteurización, 2-decenoato de etilo, aplicado a 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. La figura 8 muestra una mezcla de adyuvantes de pasteurización 9:1, acetato de decilo, ácido láurico, aplicado a 0-200 ppm en el té listo para tomar, 0.14% de té.

La figura 9 muestra el efecto de los adyuvantes de pasteurización aplicados a 0-100 ppm en una bebida refrescante sintética, con cero contenido de té. La figura 10 muestra el efecto de la bacteria del calor + adyuvantes de pasteurización, acetato de decilo o ácido láurico, aplicado a 0-100 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té o bebida refrescante sintética. La figura 11 es un diagrama de dispersión de peso molecular/coeficientes de partición de los compuestos capaces de funcionar como adyuvantes de pasteurización. Las figuras 12 a 47 muestran el efecto elevado de los adyuvantes de pasteurización listados en la tabla 1 probados en caldo YEPD pH 3.4. Las figuras 48 a 63 muestra el efecto moderado de los adyuvantes de pasteurización listados en la tabla 1 probados con caldo YEPD pH 3.4. Las figuras 64 a 77 muestra el efecto escaso de los adyuvantes de pasteurización listados en la tabla 1 probados con caldo YEPD pH 3.4. Las figuras 78 a 82 muestran los compuestos de control que exhiben poco efecto como adyuvantes de pasteurización probados con caldo YEPD pH 3.4.

Descripción detallada de la invención La presente invención se refiere a un método para preparar una bebida estable al medio ambiente. El método involucra agregar a una bebida al menos un adyuvante de pasteurización que no tiene actividad fungicida apreciable a temperaturas entre 0 y 40 °C pero que exhibe actividad fungicida cuando se calienta a una temperatura entre 40 y 65 °C y se eleva la temperatura de la bebida a una temperatura entre 40 y 65 °C a fin de activar la actividad fungicida del adyuvante de pasteurización. La pasteurización describe el proceso de inactivar los enzimas y reducir la población de microorganismos que se presentan cuando la bebida es calentada a una temperatura mínima entre 62.5 y 100 °C por un período especificado. Se obtiene una mejor pasteurización usando temperaturas elevadas y tiempos de tratamiento más largos. En contraste a esto la presente invención surge del descubrimiento de que ciertas substancias químicas que no se considera en general que tengan una actividad fungicida apreciable en o cerca de la temperatura ambiente en realidad; si exhiben una actividad fungicida cuando son calentadas a alrededor de 50 °C. Esto significa que las bebidas que contienen tales compuestos pueden ser calentadas a temperaturas como algo debajo de los 65 °C y todavía la población de microorganismos puede ser reducida a niveles que se espera conseguir por pasteurización. Por lo tanto, los compuestos químicos pueden describirse como adyuvantes de pasteurización. Pero a diferencia de los métodos basados en pasteurización para estabilizar bebidas, la realización del presente método no es dependiente del tiempo o la temperatura. Los presentes inventores encontraron inicialmente que los compuestos tales como el acetato de decilo, ácido láurico, y decenoato de metilo no tienen actividad fungicida a 30 °C y todavía exhiben actividad fungicida significativa cuando se calientan a 50 °C. Esto los llevo a probar otros compuestos que no exhiben actividad fungicida a 30 °C. Por lo que, ellos encontraron que los compuestos listados en la tabla 1 mostrados a continuación exhiben actividad fungicida significante cuando se calientan a 50 °C. En la tabla, la concentración inhibitoria mínima (CIM) es dada para cada compuesto así como el peso molecular (PM) , el logPoct y su orden de importancia. Un compuesto es aceptado como de gran importancia si una concentración baja es requerida para exhibir actividad fungicida substancial . El logPoct que es el logaritmo del coeficiente de partición de los compuestos relevantes en octanol y por tanto una medida de su actividad fungicida, fue determinada usando software CHEMDRA MR de CHEMOFFICE ULRA ENHANCED 2000^ (Ver 5.5) que esta disponible comercialmente de CambridgeSoft .

TABLA 1 Compuestos que exhiben actividad fungicida a 50 °C pero no a 30°C.

La mayoría de los llamados adyuvantes de pasteurización proporcionaran actividad fúngica efectiva cuando se calienta a 50 °C o a cualquier otra temperatura por debajo de los 65 °C. Sin embargo ciertos compuestos prueban ser más apropiados que otros en términos de su efecto en el sabor de las bebidas a base de té. Consecuentemente, los presentes inventores han identificado los siguientes compuestos como los adyuvantes de pasteurización más preferidos para uso en el método de la presente invención: Ciclohexanpropionato de alilo, Hexanoato de amilo, Heptanoato de butilo, Acetato de decilo, Propionato de decilo, 2-dodecenal, Decanoato de etilo, 2-decenoato de etilo, Nonanoato de etilo, 10-undecenoato de etilo, Acetato de geranilo, Geranilo acetona, Butirato de geranilo, Propionato de geranilo, Butirato de heptilo, Hexanoato de hexilo, Hexanoato de isoamilo, Ácido láurico, Alcohol láurico, Aldehido láurico, Decanoato de metilo, Laurato de metilo, Nonanoato de metilo, Undecanoato de metilo, 9-undecenoato de metilo, Ácido mistirico, Nerolidol, Isobutirato de nerilo, Acetato de nonilo, Butirato de octilo, Hexanoato de fenetilo, Isobutirato de 2-fenoxiletilo, Tridecanal, Ácido tridecanoico, Tridecanol, 2-tridecenal y 2 -undecanoato. Los adyuvantes de pasteurización están preferiblemente presentes en una concentración no mayor de 1 mM, y especialmente no mayor de 0.1 mM . De la lista anterior el Acetato de decilo, Ácido láurico, Aldehido láurico, Alcohol láurico, 2-dodecenal, 2-decenoato de etilo, Geranilo acetona, Acetato de geranilo son particularmente preferidos. Mientras no se quiera limitar por la teoría, el modo de la acción fungicida de estos adyuvantes de pasteurización en al menos las bebidas a base de té se cree que involucra la disolución de las membranas microbianas. Se piensa que a temperaturas elevadas estos compuestos son capaces de entrar dentro de las membranas y causar la muerte microbiana mediante lisis celular. Los inventores argumentaron que los compuestos mencionados anteriormente tal vez no sean los únicos compuestos que tienen función como adyuvantes de pasteurización es ese sentido. Uno podría definir adyuvantes de pasteurización efectivos sobre la base de sus parámetros de relación de actividad de la estructura cuantitativa (RAEC por sus siglas en español) . Esta definición podría incluir los compuestos químicos conocidos y los desconocidos hasta la fecha. La lista completa de los adyuvantes de pasteurización probados anteriormente fue graficada con respecto a su peso molecular y los valores logPoct en la Figura 11. De esta Figura los inventores pronosticaron que los adyuvantes de pasteurización preferidos pueden ser definidos como aquellos que tienen un peso molecular entre 170 y 230 daltons y valores logPoct entre 3.5 y 5.5. La calidad del agua puede arruinar seriamente la estabilidad de una bebida. Este es un factor importante cuando se elaboran bebidas, particularmente bebidas a base de té, para llenado en frío. Para este propósito será frecuentemente importante minimizar el contenido de levadura del agua usada en todas las etapas de producción. Los métodos conocidos en el arte previo incluyen cloración/decloración y radiación de rayos ultra violeta ( V) . Las bebidas estables al medio ambiente hechas por el método de la invención pueden ser destiladas o carbonatadas. La carbonación aparece para proporcionar un efecto conservador en la misma y por lo tanto la formulación de un producto carbonatado no necesariamente será la misma como la de un producto destilado. El té es conocido por tener ciertas propiedades antivirales y antibacterianas en sí mismo. Uno excede una concentración de alrededor del 3% para mostrar que el té empieza a suprimir el crecimiento de las levaduras y los mohos. A concentraciones inferiores a estas, las cuáles son típicas para las bebidas a base de té, el té actúa como un nutriente que mejora el potencial para la degradación microbiana. La mayoría de los microbios puede crecer típicamente en bebidas a base de té enriquecidas con azúcar, una fuente de nitrógeno, oxígeno, zinc, magnesio, potasio, fosfato y vitaminas. Es por lo tanto, ventajoso limitar el contenido de azúcar a 8 a 10 grados Brix, sin embargo uno puede usar arriba de 60 grados Brix cuando el producto es una mezcla de té. El contenido de oxígeno se puede minimizar por pre-pasteurización o algún tratamiento de calor o lavado de nitrógeno. El contenido mineral de las bebidas a base de té se puede minimizar usando EDTA, citrato, o un suavizador de agua. Por ejemplo, los microbios pueden crecer en té si la concentración de los iones de magnesio excede de 0.2 ppm, y si ellos solo necesitan pocos niveles de Zinc. Uno debe ser cuidadoso usando citrato para este propósito ya que este puede afectar el sabor. La invención ahora será descrita en los siguientes ejemplos con referencia a los dibujos anexos.

EJEMPLO 1 Experimentos de té listos para tomar. La Figura 1 muestra un adyuvante de pasteurización, Acetato de decilo, aplicado a 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. Filas de tubos de 30 ml TLPT ("té listo para tomar" por sus siglas en español), pH 3.4, fueron equilibrados a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos fueron mantenidos a temperatura por 2 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos . Los tubos fueron entonces incubados por 14 días a 25°C para permitir que la levadura sobreviviente creciera. A los 14 días el crecimiento fue medido por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas llx. El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a temperaturas bajas sobre el crecimiento de la levadura que cuando se calentó a 60°C, sin adyuvante de pasteurización. Calor + adyuvante de pasteurización mostraron un efecto sinérgico combinado remarcable. La Figura 2 muestra un adyuvante de pasteurización, Ácido láurico, aplicado a 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. Filas de tubos de 30 ml que contienen 10 ml de té TLPT, pH 3.4, fueron equilibrados a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño con agua, después de la inoculación con 104 celdas/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos fueron mantenidos a temperatura por 2 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos . Los tubos fueron incubados por 14 días a 25°C para permitir que la levadura sobreviviente creciera. A los 14 días se midió el crecimiento por densidad óptica a 600nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a baja temperatura sobre el crecimiento de la levadura como cuando se calentó a 60 °C, sin adyuvante de pasteurización. Calor + adyuvante de pasteurización mostraron un efecto sinérgico combinado remarcable . La Figura 3 muestra un adyuvante de pasteurización, Alcohol láurico, aplicado en 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. Filas de tubos de 30 ml conteniendo 10 ml de té TLPT, pH 3.4, fueron equilibradas a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos de mantuvieron a temperatura por 2 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos . Los tubos fueron después incubados por 14 días a 25°C para permitir a la levadura sobreviviente crecer. A los 14 días se midió el crecimiento por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a baja temperatura sobre el crecimiento de la levadura como cuando se calentó a 60°C, sin adyuvante de pasteurización. Calor + adyuvante de pasteurización mostraron un efecto sinergistico combinado remarcable . La Figura 4 muestra un adyuvante de pasteurización, Aldehido láurico, aplicado en 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. Filas de tubos de 30 ml conteniendo 10 ml de té TLPT, pH 3.4, fueron equilibradas a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos de mantuvieron a temperatura por 2 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos . Los tubos fueron después incubados por 14 días a 25 °C para permitir a la levadura sobreviviente crecer. A los 14 días se midió el crecimiento por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a baja temperatura sobre el crecimiento de la levadura como cuando se calentó a 60 °C, sin adyuvante de pasteurización. Calor + adyuvante de pasteurización mostraron un efecto sinérgico combinado remarcable . La Figura 5 muestra un adyuvante de pasteurización, Acetato de geranilo, aplicado en 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. Filas de tubos de 30 ml conteniendo 10 ml de té TLPT, pH 3.4, fueron equilibradas a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos de mantuvieron a temperatura por 2 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos . Los tubos fueron después incubados por 14 días a 25 °C para permitir a la levadura sobreviviente crecer. A los 14 días se midió el crecimiento por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a baja temperatura sobre el crecimiento de la levadura como cuando se calentó a 60°C, sin adyuvante de pasteurización. Calor + adyuvante de pasteurización mostraron un efecto sinérgico combinado remarcable . La Figura 6 muestra un adyuvante de pasteurización, Geranilo acetona, aplicado en 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. Filas de tubos de 30 ml conteniendo 10 ml de té TLPT, pH 3.4, fueron equilibradas a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos de mantuvieron a temperatura por 2 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos . Los tubos fueron después incubados por 14 días a 25 °C para permitir a la levadura sobreviviente crecer. A los 14 días se midió el crecimiento por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a baja temperatura sobre el crecimiento de la levadura como cuando se calentó a 60°C, sin adyuvante de pasteurización. Calor + adyuvante de pasteurización mostraron un efecto sinérgico combinado remarcable. La Figura 7 muestra un adyuvante de pasteurización, 2-decenoato de etilo, aplicado en 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. Filas de tubos de 30 ml conteniendo 10 ml de té TLPT, pH 3.4, fueron equilibradas a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos de mantuvieron a temperatura por 2 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos. Los tubos fueron después incubados por 14 días a 25°C para permitir a la levadura sobreviviente crecer. A los 14 días se midió el crecimiento por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a baja temperatura sobre el crecimiento de la levadura como cuando se calentó a 60 °C, sin adyuvante de pasteurización. Calor + adyuvante de pasteurización mostraron un efecto sinérgico combinado remarcable . La Figura 8 muestra una mezcla 9:1 de adyuvantes de pasteurización, Acetato de decilo :Ácido láurico, aplicada a 0-200 ppm en té listo para tomar, 0.14% de té. Filas de tubos de 30 ml conteniendo 10 ml de té TLPT, pH 3.4, fueron equilibradas a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos de mantuvieron a temperatura por 2 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos . Los tubos fueron después incubados por 14 días a 25°C para permitir a la levadura sobreviviente crecer. A los 14 días se midió el crecimiento por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a baja temperatura sobre el crecimiento de la levadura como cuando se calentó a 60°C, sin adyuvante de pasteurización. Calor + adyuvante de pasteurización mostraron un efecto sinérgico combinado remarcable.

EJEMPLO 2 Experimentos con bebidas refrescantes sintéticas La Figura 9 muestra el efecto de los adyuvantes de pasteurización aplicados a 0-100 ppm en bebidas refrescantes sintéticas, cero contenido de té. Las bebidas refrescantes sintéticas contenían glucosa, 8% p/v, 3 g/1 de Ácido cítrico, 1 g/1 de Ortofosfato de potasio, 0.1 g/1 de Cloruro de magnesio y 0.1 g/1 de extracto de levadura. Filas de tubos de 30 ml que contenían 10 ml de bebida refrescante sintética, pH 3.4 fueron equilibrados a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantuvieron a temperatura por 2 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos . Los tubos fueron después incubados por 14 días a 25 °C para permitir a la levadura sobreviviente crecer. A los 1< días se midió el crecimiento por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a baja temperatura sobre el crecimiento de la levadura. Temperatura a 50°C + adyuvantes de pasteurización mostraron un efecto sinérgico remarcable combinado.

EJEMPLO 3 Experimentos con bacterias La Figura 10 muestra el efecto sobre las bacterias de calor + adyuvantes de pasteurización, acetato de decilo o ácido láurico aplicados a 0-100 ppm en _ té listo para tomar, 0.14% de té o bebida refrescante sintética. Filas de tubos de 30 ml que contenían 10 ml de bebida refrescante sintética, pH 3.4 fueron equilibrados a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de la bacteria Gluconobacter sp. 222. Los tubos se mantuvieron a temperatura por 2 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos . Los tubos fueron después incubados por 14 días a 25°C para permitir a la levadura sobreviviente crecer. A los 14 días se midió el crecimiento por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a baja temperatura sobre el crecimiento de la levadura como cuando se calentó hasta 60 °C. Calor + adyuvantes de pasteurización mostraron un efecto sinérgico remarcable combinado.

EJEMPLO 4 Identificación de los adyuvantes de pasteurización preferidos La figura 11 muestra un diagrama de dispersión de peso molecular /coeficientes de partición de los compuestos capaces de funcionar como adyuvantes de pasteurización. Los compuestos fueron listados en la tabla 1, junto con el coeficiente de partición, logPoct y el peso molecular (PM) . Los compuestos fueron ' estimados como adyuvantes de pasteurización bajos, moderados o elevados. Los compuestos con mayor efecto, más preferidos, mostraron al menos un decremento de 5 enlaces en CIM, concentración inhibitoria mínima a 50°C comparada con 30°C.

EJEMPLO 5 Experimentos con adyuvantes de pasteurización de efecto elevado . Las Figuras 12 a 47 muestran el efecto elevado de los adyuvantes de pasteurización mencionados en la tabla 1 probados en caldo YEPD pH 3.4. El YEPD contenía 20 g/1 de glucosa, 20 g/1 de peptona y 10 g/1 de extracto de levadura. Filas de tubos de 30 ml conteniendo 10 ml de YEPD, pH 3.4 fueron equilibrados a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantuvieron a temperatura por 10 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos . Los tubos fueron después incubados por 48 horas a 25 °C para permitir a la levadura sobreviviente crecer y formar colonias discretas . El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a baja temperatura sobre la levadura sobreviviente. Temperatura a 50°C + adyuvantes de pasteurización mostraron un efecto sinérgico remarcable combinado, actuando rápidamente para matar el inoculo de la levadura.

EJEMPLO 6 Experimentos con adyuvantes de pasteurización de efecto moderado . Las Figuras 48 a 63 muestran el efecto moderado de los adyuvantes de pasteurización mencionados en la tabla 1 probados en caldo YEPD pH 3.4. YEPD contenía 20 g/1 de glucosa, 20 g/1 de peptona y 10 g/1 de extracto de levadura. Filas de tubos de 30 ml que contenían 10 ml de YEPD, pH 3.4 fueron equilibrados a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantuvieron a temperatura por 10 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos. Los tubos fueron después incubados por 48 horas a 25°C para permitir a la levadura sobreviviente crecer y formar colonias discretas.

El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a baja temperatura sobre la levadura sobreviviente. Temperatura a 50 C + adyuvantes de pasteurización mostraron un efecto sinérgico remarcable combinado, actuando rápidamente para matar al inoculo de la levadura.

EJEMPLO 7 Experimentos con adyuvantes de pasteurización de bajo efecto. Las Figuras 64 a 77 muestran el efecto moderado de los adyuvantes de pasteurización mencionados en la tabla 1 probados en caldo YEPD pH 3.4. YEPD contenía 20 g/1 de glucoea, 20 g/1 de peptona y 10 g/1 de extracto de levadura. Filas de tubos de 30 ml que contenían 10 ml de YEPD, pH 3.4 fueron equilibrados a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantuvieron a temperatura por 10 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos . Los tubos fueron después incubados por 48 horas a 25 °C para permitir a la levadura sobreviviente crecer y formar colonias discretas. El adyuvante de pasteurización tuvo poco efecto a baja temperatura sobre la levadura sobreviviente. Temperatura a 50 °C + adyuvantes de pasteurización mostraron un efecto sinérgico remarcable combinado, actuando rápidamente para matar el inoculo de la levadura.

EJEMPLO 8 Experimentos de control . Las Figuras 78 a 82 muestran los compuestos de control que tienen un efecto mínimo como adyuvantes de pasteurización probados en caldo YEPD pH 3.4. YEPD contenía 20 g/1 de glucosa, 20 g/1 de peptona y 10 g/1 de extracto de levadura. Filas de tubos de 30 ml que contenían 10 ml de YEPD, pH 3.4 fueron equilibrados a la temperatura requerida por 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104 celdas/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantuvieron a temperatura por 10 minutos antes de ser enfriados rápidamente en agua fría por 5 minutos. Los tubos fueron después incubados por 48 horas a 25°C para permitir a la levadura sobreviviente crecer y formar colonias discretas. Los compuestos de control tuvieron un efecto normal a bajas temperaturas sobre la levadura sobreviente y a la temperatura de 50°C mostraron sólo ligeros mejoramientos en actividad.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims

Reivindicaciones
Habiéndose descrito la invención como antecede se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones: 1. Método para preparar una bebida estable al ambiente adecuada para llenado en frío caracterizado porque comprende las etapas de : agregar a una bebida al menos un adyuvante de pasteurización que no tiene actividad fungicida apreciable a una temperatura entre 0 y 40 °C pero que exhibe actividad fungicida cuando se calienta a una temperatura entre 40 y 65°C. elevar la temperatura de la bebida a una temperatura entre 40 y 65 °C a fin de activar la actividad fungicida del adyuvante de pasteurización. 2. Método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el adyuvante de pasteurización es una substancia que no tiene actividad fungicida apreciable a una temperatura entre 0 y 40 °C.
3. Método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el adyuvante de pasteurización no tiene actividad fungicida apreciable a una temperatura entre 20 y 35°C.
4. Método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el adyuvante de pasteurización exhibe actividad fungicida cuando se calienta a una temperatura entre 40 y 65°C.
5. Método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el adyuvante de pasteurización exhibe actividad fungicida cuando se calienta a una temperatura entre 45 y 55°C.
6. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el adyuvante de pasteurización se selecciona del grupo que consiste en: Ciclohexanopropionato de alilo, Hexanoato de amilo, Octanoato de amilo, Benzoino, Benzoato de bencilo, Salicilato de bencilo, Acetato de bornilo, Heptanoato de butilo, Laurato de butilo, 10-undecenoato de butilo, Propionato de carvilo, ß-cariofileno, Acetato de decilo, Butirato de decilo, Propionato de decilo, 2-dodecenal, Decanoato de etilo, 2-decenoato de etilo, Laurato de etilo, Nonanoato de etilo, Tridecanoato de etilo, Undecanoato de etilo, 10-undecenoato de etilo, Acetato de geranilo, Geranil acetona, Butirato de geranilo, Propionato de geranilo, Butirato de heptilo, -6-hexadecalactona, Hexadecanol, Hexanoato de hexilo, Octanoato de hexilo, Hexanoato de isoamilo, Laurato de isoamilo, Salicilato de isoamilo, Ácido láurico, Alcohol láurico, Aldehido láurico, Acetato láurico, Acetato de linalilo, Propionato de linalilo, Decanoato de metilo, Laurato de metilo, Miristato de metilo, Nonanoato de metilo, Undecanoato de metilo, 9-undecenoato de metilo, Miristalaldehído, Ácido mistirico, Nerolidol, Butirato de nerilo, Isobutirato de nerilo, Acetato de nonilo, Butirato de octilo, -pentadecalactona, Ácido pentadecanoico, Pentadecanol, Hexanoato de fenetilo, Octanoato de fenetilo, Isobutirato de 2-fenoxietilo, Tetradecanol, Tridecanal, Ácido tridecanoico, Tridecanol, 2-tridecenal y 2-undecanona.
7. Método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el adyuvante de pasteurización se selecciona del grupo que consiste en: Ciclohexanopropionato de alilo, Hexanoato de amilo, Heptanoato de butilo, Acetato de decilo, Propionato de decilo, 2-dodecenal, Decanoato de etilo, 2-decenoato de etilo, Nonanoato de etilo, 10-undecenoato de etilo, Acetato de geranilo, Geranilo acetona, Butirato de geranilo, Propionato de geranilo, Butirato de heptilo, Hexanoato de hexilo, Hexanoato de isoamilo, Ácido láurico, Alcohol láurico, Aldehido láurico, Decanoato de metilo, Laurato de metilo, Nonanoato de metilo, Undecanoato de metilo, 9-undecenoato de metilo, Ácido mistirico, Nerolidol, Isobutirato de nerilo, Acetato de nonilo, Butirato de octilo, Hexanoato de fenetilo, Isobutirato de 2-fenoxiletilo, Tridecanal, Ácido tridecanoico, Tridecanol, 2-tridecenal, y 2-undecanona .
8. Método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el adyuvante de pasteurización se selecciona del grupo que consiste en Acetato de decilo, Ácido láurico, Aldehido láurico, Alcohol láurico, 2-dodecenal, 2-decenoato de etilo, Geranil acetona y Acetato de geranilo.
9. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque el adyuvante de pasteurización es un compuesto que tiene un peso molecular entre 170 y 230 daltons y un valor logPoct entre 3.5 y 5.5.
10. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque la concentración del adyuvante de pasteurización no es mayor que 1 mM, preferiblemente no mayor de 0.1 M.
11. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque la bebida es a base de té.
12. Método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque la bebida contiene 0.01 a 3 % de sólidos de té.
13. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes caracterizado porque el adyuvante de pasteurización también es antibacteriano cuando se activa por calor. /*• 32 Resumen de la Invención La presente invención describe un método para preparar una bebida estable al ambiente que es adecuada para llenado en frío. El método involucra agregar a la bebida al menos un adyuvante de pasteurización que no tiene actividad fungicida apreciable a una temperatura entre 0 y 40°C pero que exhibe actividad fungicida cuando se calienta a una temperatura entre 40 y 65°C y se eleva la temperatura de la bebida a una temperatura entre 40 y 65°C a fin de activar la actividad fungicida del adyuvante de pasteurización.