CN1441641A - 常温稳定饮料 - Google Patents

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Abstract

一种制备适于冷灌装的常温稳定饮料的方法。该方法包括向饮料中加入至少一种在0～40℃没有明显杀真菌活性而在加热到40～65℃时具有杀真菌活性的巴氏杀菌助剂，并升高饮料温度到40～65℃，以便活化巴氏杀菌助剂的杀真菌活性。

Description

常温稳定饮料
发明领域
本发明涉及一种制备常温稳定饮料特别是茶基饮料的方法，该方法包括向饮料中加入一种或多种巴氏杀菌助剂，该助剂在受热活化时成为杀真菌的。
背景和现有技术
近年来，消费者有一种日趋增加的选择，即希望用方便饮料来解渴。其中许多人现在正从众所周知的软饮料转向茶基饮料，它们是充了碳酸气的或不充气的，并且是能够提供的“天然”饮料。
茶含有酶、生物化学中间体以及通常与植物生长和光合作用有关的结构元素的复杂组合。还有许多天然物质，为茶赋予其独特的味道、涩味、香味和色泽。其中许多通过在红茶制造的所谓发酵步骤中发生的氧化反应而产生。长期以来茶的生产按照采用仅有的涉及化学的基础知识的传统加工方法来进行。因此，制造商发现，以与更传统的软饮料竞争所需要的量制造常温稳定的茶基饮料不仅仅是用茶为软饮料加味的事情。
茶基饮料的味道及其稳定性取决于饮料整体的稳定性。包括酵母和霉菌的真菌能够在茶基饮料和其它软饮料中滋生，可以通过加热处理杀死，或者至少使用防腐剂来控制。所以，一些茶基饮料经巴氏杀菌，然后灌装在玻璃或专门的热稳定PET容器中。这就是所谓的“热灌装”。遗憾的是，这可能是一种昂贵的操作，其产生大量的不利于环保的废物。所以，更吸引制造商的是，将其茶基产品灌装在标准PET容器中，包括单一功能的容器到多功能容器，并使用特制香料和防腐剂体系来保持产品的稳定性。这就是所谓的“冷灌装”。这也是有用的，因为人们能够方便地使用茶的浓缩物或茶的粉末。
遗憾的是，采用普通防腐剂会影响茶基饮料的味道。对于亚硫酸盐和山梨酸盐尤其存在这个问题。加入诸如柠檬等强食用香料能够抵消杀菌剂的味道。但是，消费者喜欢感受其它味道。另外，一些将茶基产品列为更利于健康并作为软饮料的天然替代品的消费者，往往将防腐剂视为应当力求避免使用的合成添加剂类。
许多国家已有禁止在食品和饮料中使用某些食品添加剂的法规，包括一些杀真菌剂和防腐剂。法规可能变化很大，但是有一个明显的趋势，食品中应该含有更少种类和更低含量的化学杀真菌剂和防腐剂，特别是合成的那些。
所以，需要一种制备含有低含量合成防腐剂的、具有合意味道的、常温稳定的饮料的方法。
为了响应这种需要，本发明人已经开发了茶基饮料用的杀真菌体系，其不含任何合成杀真菌剂或防腐剂。该杀真菌体系还可以用于稳定非茶基饮料，包括水果饮料和软饮料。
发明概述
广义讲，本发明可以说涉及一种制备适用于冷灌装的常温稳定饮料的方法，该方法包括的步骤有：向饮料中加入至少一种巴氏杀菌助剂，该助剂在0～40℃没有明显的杀真菌活性，但是加热到40～65℃时具有杀真菌活性；将饮料温度升高到40～65℃，以便使巴氏杀菌助剂的杀真菌活性得到活化。当饮料是茶基的时，优选含有0.01～3％茶固体，特别是约0.14％茶固体。
巴氏杀菌助剂优选是在0～40℃特别是在20～35℃，没有明显杀真菌活性、但是加热到40～65℃特别是45～55℃时具有杀真菌活性的物质。
特别优选的巴氏杀菌助剂包括乙酸癸酯、月桂酸、月桂醛、月桂醇、2-十二碳烯醛、2-癸烯酸乙酯、香叶基丙酮、乙酸香叶酯，优选以不大于1mM的浓度存在，再优选浓度不大于0.1mM。
与稳定饮料用的巴氏杀菌方法不同，本方法没有对时间或温度的依赖性。
用于本发明的“饮料”意指任何饮料，除水之外，包括软饮料、水果饮料、咖啡基饮料以及茶基饮料。
用于本发明的“茶”指的是自Camellid sinensis var.Sinensis或camellia sinensis var.Assamica的叶材料。茶还指包括掺合了这些茶中的任何两种或多种的产品。
为了避免疑问，“包含”这个词意指“包括…”，但不一定是“由……组成”。换句话说，所列步骤或选择方案不必是排它的。
除了操作实施例和比较实施例，或者明确说明的其它方面之外，在本说明书中表示材料量或浓度的所有数字均应理解为采用“大约”这个词修饰的。
附图简述
图1表示在方便茶(Ready to Drink tea)(0.14％茶)中使用0～200ppm巴氏杀菌助剂醋酸癸酯。
图2表示在方便茶(0.14％茶)中使用0～200ppm巴氏杀菌助剂月桂酸。
图3表示在方便茶(0.14％茶)中使用0～200ppm巴氏杀菌助剂月桂醇。
图4表示在方便茶(0.14％茶)中使用0～200ppm巴氏杀菌助剂月桂醛。
图5表示在方便茶(0.14％茶)中使用0～200ppm巴氏杀菌助剂乙酸香叶酯。
图6表示在方便茶(0.14％茶)中使用0～200ppm巴氏杀菌助剂香叶基丙酮。
图7表示在方便茶(0.14％茶)中使用0～200ppm巴氏杀菌助剂2-癸烯酸乙酯。
图8表示在方便茶(0.14％茶)中使用0～200ppm巴氏杀菌助剂醋酸癸酯与月桂酸之比为9∶1的混合物。
图9表示在合成软饮料(茶含量为零)中使用0～100ppm巴氏杀菌助剂的作用。
图10表示在方便茶(0.14％茶)或合成软饮料中使用0～100ppm巴氏杀菌助剂醋酸癸酯或月桂酸并经加热对细菌的影响。
图11是能够起巴氏杀菌助剂作用的化合物的分子量/分配系数的散点图。
图12至47表示在pH为3.4的YEPD肉汤中进行试验的、在表1中所列出的高效巴氏杀菌助剂。
图48～63表示在pH为3.4的YEPD肉汤中进行试验的、在表1中所列出的中效巴氏杀菌助剂。
图64～77表示在pH为3.4的YEPD肉汤中进行试验的、在表1中所列出的低效巴氏杀菌助剂。
图78～82表示在pH为3.4的YEPD肉汤中进行试验的、几乎没显示巴氏杀菌助剂效果的对比化合物。
发明详述
本发明涉及一种制备常温稳定饮料的方法。该方法包括：向饮料中加入至少一种巴氏杀菌助剂，该助剂在0～40℃下没有明显的杀真菌活性，但是在加热到40～65℃下时具有杀真菌活性；将饮料温度升高到40～65℃，以便使巴氏杀菌助剂的杀真菌活性得到活化。
巴氏杀菌作用是钝化酶和降低微生物总数的过程，该过程在将饮料加热至最低温度62.5～100℃一定的时间时发生。通过使用更高的温度和更长的处理时间可以获得更好的巴氏杀菌作用。与此相反，本发明出自以下发现，即，在室温或接近室温一般认为没有任何明显杀真菌活性的化学物质，在加热至约50℃时，事实上具有杀真菌活性。这意味着，含有这些化合物的饮料能够被加热到稍低于65℃的温度，而微生物的总数能够通过巴氏杀菌作用降低到人们所期待的水平。因此，这些化合物能够作为巴氏杀菌助剂。但是不同于稳定饮料所用的基于巴氏杀菌作用的方法，本方法的实施不是时间或温度依赖性的。
本发明人最初发现，诸如醋酸癸酯、月桂酸和癸烯酸甲酯在30℃没有杀真菌活性，而在加热到50℃时具有相当大的杀真菌活性。
这项发现促使他们试验在30℃没有杀真菌活性的其它化合物。结果发现在下文表1中所列的化合物在加热到50℃时的确具有显著的杀真菌活性。在表中给出了每种化合物的最低抑制浓度(MIC)，以及分子量(M.W.)、LogPoct和其重要性的评价。一种化合物如果仅需要低浓度即具有显著的杀真菌活性，那末就认为该化合物是高价值的。LogPoct是相关化合物在辛醇中的分配系数的对数，因此其是化合物的杀真菌活性的度量，LogPoct采用CHEMDRAWTM软件进行测定，该软件得自Cambridgesoft公司市售的CHEMOFFICE ULRA ENHANCED 2000TM软件电(5.5型)。
                    表1在50℃下具有杀真菌活性而在30℃下没有杀真菌活性的化合物 化合物             MIC50(mM)    M.W.  logPoct  价值环己烷丙酸烯丙酯     1            196       3.49    高己酸戊酯             2            186       3.88    高辛酸戊酯             60           214       4.79    中苯偶因               10           212       2.53    10苯甲酸苄酯           20           212       3.00    中水杨酸苄酯           50           228       2.61    低乙酸龙脑酯           2            196       2.66    低庚酸丁酯             5            186       3.88    高月桂酸丁酯           100          256       6.16    低10-十一碳烯酸丁酯    40           240       5.46    中丙酸蒈烷醇酯         5            208.3     2.81    中β-石竹烯            70           204       -       低乙酸癸酯             1            200       4.34    高丁酸癸酯             70           22.8      5.25    低丙酸癸酯             50           214.35    4.79    高2-十二碳烯醛         ＜0.05(9ppm) 182       4.44    高癸酸乙酯             40           200       4.34    高2-癸烯酸乙酯         1            198       4.16    高月桂酸乙酯           80           228       5.25    中壬酸乙酯             10           186       3.88    高十三烷酸乙酯         100          242       5.71    低十一烷酸乙酯         50            214    4.79     中10-十一碳烯酸乙酯    50            212    4.55     高乙酸香叶酯           1             196    -        高香叶基丙酮           0.5           194    -        高丁酸香叶酯           40            224    -        高丙酸香叶酯           12            210    -        高丁酸庚酯             2             186    3.88     高ω-6-十六烷酸内酯    50            252    -        低十六醇               100           242    6.48     低己酸己酯             30            201    4.34     高辛酸己酯             10            228    5.25     中己酸异戊酯           5             186    3.63     高月桂酸异戊酯         120           270    6.37     低水杨酸异戊酯         15            208    2.71     中月桂酸               0.1(20ppm)    200    4.49     高月桂醇               0.1(18.6ppm)  186    4.66     高月桂醛               0.2(36ppm)    184    4.61     高乙酸月桂酯           40            228    5.25     中乙酸里哪醇酯         10            196    2.78     中丙酸里哪醇酯         20            210    3.43     中癸酸甲酯             2             186    4.05     高月桂酸甲酯           40            214    4.96     高肉豆蔻酸甲酯         60            242    5.88     低壬酸甲酯             2             172    3.6      高十一烷酸甲酯         50            200    4.51     高9-十一碳烯酸甲酯     40            198    3.79     高肉豆蔻醛             40            212    5.53     中肉豆蔻酸             50            228    5.41     高橙花叔醇             1.5           222    4.08     高丁酸橙花酯           50            224    2.88     中异丁酸橙花醇酯       30            224    3.94     高乙酸壬酯             5             186    3.88     高丁酸辛酯             40            200    4.34     高ω-十五烷酸内酯      60            240    -        低十五烷酸             80            242    5.86     低十五醇               75            228    6.03     低己酸苯乙酯           10            220    3.99     高辛酸苯乙酯           40            248    4.90     中异丁酸2-苯氧乙酯     0.1           226    5.04     高十四醇        50               214    5.57    中十三醛        5                200    5.07    高十三烷酸      0.2              214    4.95    高十三醇        0.05             198    5.11    高2-十三烯醛    ＜0.05(9.8ppm)   196    4.90    高2-十一酮      1                170    3.68    高
许多所谓的巴氏杀菌助剂，在加热到50℃或低于65℃的某一其它温度时，会呈现有效的杀真菌活性。但是可以证明某些化合物比其它化合物在对茶基饮料味道的影响方面是更适合的。所以，本发明人验明如下化合物是用于本发明方法的优选的巴氏杀菌助剂：环己烷丙酸烯丙酯、己酸戊酯、庚酸丁酯、乙酸癸酯、丙酸癸酯、2-十二碳烯醛、癸酸乙酯、2-癸烯酸乙酯、壬酸乙酯、10-十一碳烯酸乙酯、乙酸香叶酯、香叶基丙酮、丁酸香叶酯、丙酸香叶酯、丁酸庚酯、己酸己酯、己酸异戊酯、月桂酸、月桂醇、月桂醛、癸酸甲酯、月桂酸甲酯、壬酸甲酯、十一烷酸甲酯、9-十一碳烯酸甲酯、肉豆蔻酸、橙花叔醇、异丁酸橙花酯、乙酸壬酯、丁酸辛酯、己酸苯乙酯、异丁酸2-苯氧乙酯、十三醛、十三烷酸、十三醇、2-十三烯醛以及2-十一酮。巴氏杀菌助剂优选以不大于1mM的浓度存在，尤其是不大于0.1mM。
自该表中特别优选的是乙酸癸酯、月桂酸、月桂醛、月桂醇、2-十二碳烯醛、2-癸烯酸乙酯、香叶基丙酮、乙酸香叶酯。
虽然不欲受理论约束，但是认为这些巴氏杀菌助剂至少在茶基饮料中的杀菌作用方式涉及微生物膜的破裂。认为，这些化合物在高温下能够进入膜，通过细胞溶解使微生物死亡。
本发明人认为，上述化合物不是在本方法中起巴氏杀菌助剂作用的仅有化合物。人们可以以巴氏杀菌助剂的定量结构活性关系(QSAR)参数为基础定义有效的巴氏杀菌助剂。该定义包括已知的和迄今未知的化合物。将以上试验的巴氏杀菌助剂的全部化合物关于其分子量和Log Poct值作图于图11中。从该图中，发明人预测优选的巴氏杀菌助剂可以定义为分子量为170～230道尔顿、Log Poct值为3.5～5.5的巴氏杀菌助剂。
水质可能严重损害饮料的稳定性。这在制造冷灌装茶基饮料时是特别重要的因素。为此，使在生产的所有步骤中使用的水的酵母含量最少通常是重要的。现有已知方法包括氯化/脱氯和UV辐射。
本发明的常温稳定饮料可以是不充气或充碳酸气的。充碳酸气本身似乎提供一种防腐作用，所以，充碳酸气的产品的配方不必与不充气的产品相同。
已知茶本身有一些杀菌和抗病毒性质。其浓度必须超过约3％，以保证茶开始抑制酵母和霉的生长。在低于此浓度时，这对茶基饮料是常见的，茶作为一种营养物质，增强了细菌腐败的可能性。
通常可以在茶基饮料中生长的大多数细菌在糖；氮、氧、锌、镁、磷酸盐和维生素的源上更容易生长。所以，把糖含量限制为8-10度白利糖度是有利的，但是，当产品是茶混合物时，人们可能使用最多60度的白利糖度。氧含量可以通过预先进行的巴氏灭菌或一些热处理或氮气鼓泡来减少。茶基饮料的矿物质含量可以使用EDTA、柠檬酸盐或水软化剂来减少。例如，如果镁离子浓度超过0.2ppm，微生物可能在茶中生长，并且它们仅需要痕量的锌。为此目的应用柠檬酸必须小心，因为其可能影响味道。
现以如下实施例参照附图说明本发明。
实施例1
方便茶实验
图1表示在方便茶(0.14％茶)中应用0～200ppm巴氏杀菌助剂乙酸癸酯。装有10ml pH为3.4的RTD茶的30ml试管排在水浴中于所要求的温度下平衡7min，然后用104细胞/毫升的酵母Saccharomycescerevisiae X2180-1B接种。将试管保温2min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着使试管在25℃下培育14天，使存活的酵母生长。在14天时，以稀释11倍的样品在600nm下以光密度测定滋生情况。巴氏杀菌助剂在低温下对酵母生长几乎没有影响，如同没有巴氏杀菌助剂而加热到60℃一样。而加热和巴氏杀菌助剂共同作用则显示显著的复合协同效应。
图2表示在方便茶(0.14％茶)中应用0～200ppm巴氏杀菌助剂月桂酸。装有10ml pH为3.4的RTD茶的30ml试管排在水浴中于所要求的温度下平衡7min，然后用104细胞/毫升的酵母Saccharomycescerevisiae X2180-1B接种。将试管保温2min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着使试管在25℃下培育14天，使存活的酵母生长。在14天时，以稀释11倍的样品在600nm下以光密度测定滋生情况。巴氏杀菌助剂在低温下对酵母生长几乎没有影响，如同没有巴氏杀菌助剂而加热到60℃一样。而加热和巴氏杀菌助剂共同作用则显示显著的复合协同效应。
图3表示在方便茶(0.14％茶)中应用0～200ppm巴氏杀菌助剂月桂醇。装有10ml pH为3.4的RTD茶的30ml试管排在水浴中于所要求的温度下平衡7min，然后用104细胞/毫升的酵母Saccharomycescerevisiae X2180-1B接种。将试管保温2min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着使试管在25℃下培育14天，使存活的酵母生长。在14天时，以稀释11倍的样品在600nm下以光密度测定滋生情况。巴氏杀菌助剂在低温下对酵母生长几乎没有影响，如同没有巴氏杀菌助剂而加热到60℃一样。而加热和巴氏杀菌助剂共同作用则显示显著的复合协同效应。
图4表示在方便茶(0.14％茶)中应用0～200ppm巴氏杀菌助剂月桂醛。装有10ml pH为3.4的RTD茶的30ml试管排在水浴中于所要求的温度下平衡7min，然后用104细胞/毫升的酵母Saccharomycescerevisiae X2180-1B接种。将试管保温2min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着使试管在25℃下培育14天，使存活的酵母生长。在14天时，以稀释11倍的样品在600nm下以光密度测定滋生情况。巴氏杀菌助剂在低温下对酵母生长几乎没有影响，如同没有巴氏杀菌助剂而加热到60℃一样。而加热和巴氏杀菌助剂共同作用则显示显著的复合协同效应。
图5表示在方便茶(0.14％茶)中应用0～200ppm巴氏杀菌助剂乙酸香叶酯。装有10ml pH为3.4的RTD茶的30ml试管排在水浴中于所要求的温度下平衡7min，然后用104细胞/毫升的酵母Saccharomycescerevisiae X2180-1B接种。将试管保温2min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着使试管在25℃下培育14天，使存活的酵母生长。在14天时，以稀释11倍的样品在600nm下以光密度测定滋生情况。巴氏杀菌助剂在低温下对酵母生长几乎没有影响，如同没有巴氏杀菌助剂而加热到60℃一样。而加热和巴氏杀菌助剂共同作用则显示显著的复合协同效应。
图6表示在方便茶(0.14％茶)中应用0～200ppm巴氏杀菌助剂香叶基丙酮。装有10ml pH为3.4的RTD茶的30ml试管排在水浴中于所要求的温度下平衡7min，然后用104细胞/毫升的酵母Saccharomycescerevisiae X2180-1B接种。将试管保温2min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着使试管在25℃下培育14天，使存活的酵母生长。在14天时，以稀释11倍的样品在600nm下以光密度测定滋生情况。巴氏杀菌助剂在低温下对酵母生长几乎没有影响，如同没有巴氏杀菌助剂而加热到60℃一样。而加热和巴氏杀菌助剂共同作用则显示显著的复合协同效应。
图7表示在方便茶(0.14％茶)中应用0～200ppm巴氏杀菌助剂2-癸烯酸乙酯。装有10ml pH为3.4的RTD茶的30ml试管排在水浴中于所要求的温度下平衡7min，然后用104细胞/毫升的酵母Saccharomyces cerevisiae X2180-1B接种。将试管保温2min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着使试管在25℃下培育14天，使存活的酵母生长。在14天时，以稀释11倍的样品在600nm下以光密度测定滋生情况。巴氏杀菌助剂在低温下对酵母生长几乎没有影响，如同没有巴氏杀菌助剂而加热到60℃一样。而加热和巴氏杀菌助剂共同作用则显示显著的复合协同效应。
图8表示在方便茶(0.14％茶)中应用0～200ppm巴氏杀菌助剂乙酸癸酯和月桂酸的9∶1混合物。装有10ml pH为3.4的RTD茶的30ml试管排在水浴中于所要求的温度下平衡7min，然后用104细胞/毫升的酵母Saccharomyces cerevisiae X2180-1B接种。将试管保温2min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着使试管在25℃下培育14天，使存活的酵母生长。在14天时，以稀释11倍的样品在600nm下以光密度测定滋生情况。巴氏杀菌助剂在低温下对酵母生长几乎没有影响，如同没有巴氏杀菌助剂而加热到60℃一样。而加热和巴氏杀菌助剂共同作用则显示显著的复合协同效应。
实施例2
合成软饮料实验
图9表示在合成软饮料中加入0～100ppm巴氏杀菌助剂的作用，其中茶含量为0。合成软饮料含有葡萄糖8％(W/V)、柠檬酸3g/l、正磷酸钾1g/l、氯化镁0.1g/l以及酵母提取物0.1g/l。装有10ml pH为3.4的合成软饮料的30ml试管排在水浴中于所要求的温度平衡7min，然后用104细胞/毫升的酵母Saccharomyces cerevisiae X2180-1B接种。将试管保温2min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着试管在25℃下培育14天，使存活的酵母繁殖。在14天时，以稀释11倍的样品在600nm下以光密度测定滋生情况。巴氏杀菌助剂在低温下对酵母繁殖几乎没有影响。而在50℃下加热和巴氏杀菌助剂共同作用下则显示显著的复合协同效应。
实施例3
细菌实验
图10表示在方便茶(0.14％茶)或软饮料中加入0～10ppm巴氏杀菌助剂乙酸癸酯或月桂酸并加热对细菌的影响。装有10ml pH为3.4的软饮料的30ml试管排在水浴中于所要求的温度平衡7min，然后采用104细胞/毫升的细菌Gluconobacter SP.222接种。将试管保温2min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着试管在25℃下培育14天，使存活的细菌繁殖。在14天时，肉眼测定滋生情况。巴氏杀菌助剂在低温下对酵母繁殖几乎没有影响，正如在没有巴氏杀菌助剂情况下加热到60℃时那样。加热和巴氏杀菌助剂共同作用显示于显著的复合协同效应。
实施例4
优选的巴氏杀菌助剂的鉴别
图11是能够起巴氏杀菌助剂作用的化合物的分子量/分配系数的散点图。化合物列在表1中，其中还列出LogPoct(分配系数)和分子量(M.W)。将化合物按巴氏杀菌助剂作用以高、中、低来评价。最优选的高效化合物在最低抑制浓度(MIC)方面在50℃下比30℃下一般至少减小4/5。
实施例5
关于高效巴氏杀菌助剂的实验
图12至47表示在pH为3.4的YEPD肉汤中进行试验的、表1中所列的高效巴氏杀菌助剂。YEPD含有葡萄糖20g/l、胨20g/l以及酵母提取物10g/l。装有10ml pH为3.4的YEPD的30ml试管排在水浴中于所要求的温度平衡7min，然后采用104细胞/毫升的酵母Saccharomyces cerevsiae X2180-1B进行接种。将试管保温10min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着试管在25℃下培育48小时，使存活的酵母繁殖，并形成不连续的菌落。巴氏杀菌助剂对酵母残余物在低温下几乎没有影响。在50℃下加热和巴氏杀菌助剂共同作用则显示显著的复合协同效应，起迅速杀灭酵母接种物的作用。
实施例6
关于中效巴氏杀菌助剂的实验
图48至63表示在pH为3.4的YEPD肉汤中进行试验的、表1中所列的中效巴氏杀菌助剂。YEPD含有葡萄糖20g/l、胨20g/l和酵母提取物log/l。装有10ml pH为3.4的YEPD的30ml试管排在水浴中于所要求的温度平衡7min，然后采用104细胞/毫升的酵母Saccharomyces cerevsiae X2180-1B进行接种。将试管保温10min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着试管在25℃下培育48小时，使存活的酵母繁殖，并形成不连续的菌落。巴氏杀菌助剂对酵母残余物在低温下几乎没有影响。在50℃下加热和巴氏杀菌助剂共同作用则显示显著的复合协同效应，起迅速杀灭酵母接种物的作用。
实施例7
关于低效巴氏杀菌助剂的实验
图64至77表示在pH为3.4的YEPD肉汤中进行试验的、在表1中所列的低效巴氏杀菌助剂。YEPD含有葡萄糖20g/l、胨20g/l和酵母提取物10g/l。装有10ml pH为3.4的YEPD的30ml试管排在水浴中于所要求的温度平衡7min，然后采用104细胞/毫升的酵母Saccharomyces cerevsiae X2180-1B进行接种。将试管保温10min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着试管在25℃下培育48hr，使存活的酵母繁殖，并形成不连续的菌落。巴氏杀菌助剂对酵母残余物在低温下几乎没有影响。在50℃下加热和巴氏杀菌助剂共同作用则显示显著的复合协同效应，起迅速杀灭酵母接种物的作用。
实施例8
对比实验
图78～82表示在pH为3.4的YEPD肉汤中进行试验的作为巴氏杀菌助剂几乎没有作用的对比化合物。YEPD含有葡萄糖20g/l、胨20g/l和酵母提取物10g/l。装有10ml pH为3.4的YEPD的30ml试管排在水浴中于所要求的温度平衡7min，然后采用104细胞/毫升的酵母Saccharomyces cerevsiae X2180-1B进行接种。将试管保温10min，然后迅速在冷水中冷却5min。接着试管在25℃下培育48小时，使存活的酵母繁殖，并形成不连续的菌落。对比化合物在低温下对酵母残余物具有正常的影响，而在50℃下仅对活性显示极小的改善。

Claims (13)

1.一种制备适用于冷灌装的常温稳定饮料的方法，该方法包括的步骤有：向饮料中加入至少一种巴氏杀菌助剂，该助剂在0～40℃下没有明显的杀真菌活性，但是加热到40～65℃下时具有杀真菌活性；
将饮料温度升高到40～65℃，以便使巴氏杀菌助剂的杀菌活性得到活化。
2.按照权利要求1的方法，其中巴氏杀菌助剂是一种在0～40℃没有明显杀真菌活性的物质。
3.按照权利要求2的方法，其中巴氏杀菌助剂在20-35℃没有明显杀真菌活性。
4.按照权利要求2的方法，其中巴氏杀菌助剂在加热到40～65℃时具有杀真菌活性。
5.按照权利要求4的方法，其中巴氏杀菌助剂在加热到45～55℃时具有杀真菌活性。
6.按照前述权利要求任一项的方法，其中巴氏杀菌助剂选自环己烷丙酸烯丙酯、己酸戊酯、辛酸戊酯、苯偶因、苯甲酸苄酯、水杨酸苄酯、乙酸龙脑酯、庚酸丁酯、月桂酸丁酯、10-十一碳烯酸丁酯、丙酸蒈烷醇酯、β-石竹烯、乙酸癸酯、丁酸癸酯、丙酸癸酯、2-十二碳烯醛、癸酸乙酯、2-癸烯酸乙酯、月桂酸乙酯、壬酸乙酯、十三烷酸乙酯、十一烷酸乙酯、10-十一碳烯酸乙酯、乙酸香叶酯、香叶基丙酮、丁酸香叶酯、丙酸香叶酯、丁酸庚酯、ω-6-十六烷酸内酯、十六醇、己酸己酯、辛酸己酯、己酸异戊酯、月桂酸异戊酯、水杨酸异戊酯、月桂酸、月桂醇、月桂醛、乙酸月桂酯、乙酸里哪醇酯、丙酸里哪醇酯、癸酸甲酯、月桂酸甲酯、肉豆蔻酸甲酯、壬酸甲酯、十一烷酸甲酯、9-十一碳烯酸甲酯、肉豆蔻醛、肉豆蔻酸、橙花叔醇、丁酸橙花酯、异丁酸橙花醇酯、乙酸壬酯、丁酸辛酯、ω-十五烷酸内酯、十五烷酸、十五醇、己酸苯乙酯、辛酸苯乙酯、异丁酸2-苯氧乙酯、十四醇、十三醛、十三烷酸、十三醇、2-十三烯醛和2-十一酮。
7.按照权利要求6的方法，其中巴氏杀菌助剂选自环己烷丙酸烯丙酯、己酸戊酯、庚酸戊酯、乙酸癸酯、丙酸癸酯、2-十二碳烯醛、癸酸乙酯、2-癸烯酸乙酯、壬酸乙酯、10-十一碳烯酸乙酯、乙酯香叶酯、香叶基丙酮、丁酸香叶酯、丙酸香叶酯、丁酸庚酯、己酸己酯、己酸异戊酯、月桂酸、月桂醇、月桂醛、癸酸甲酯、月桂酸甲酯、壬酸甲酯、十一烷酸甲酯、9-十一碳烯酸甲酯、肉豆蔻酸、橙花叔醇、异丁酸橙花酯、乙酸壬酯、丁酸辛酯、己酸苯乙酯、异丁酸2-苯氧乙酯、十三醛、十三烷酸、十三醇、2-十三烯醛以及2-十一酮。
8.按照权利要求7的方法，其中巴氏杀菌助剂选自乙酸癸酯、月桂酸、月桂醛、月桂醇、2-十二碳烯醛、2-癸烯酸乙酯、香叶基丙酮和乙酸香叶酯。
9.按照权利要求1～5中任何一项的方法，其中巴氏杀菌助剂是分子量为170～230道尔顿、log Poct值为3.5～5.5的化合物。
10.按照前述权利要求任一项的方法，其中巴氏杀菌助剂的浓度不大于1mM，优选不大于0.1mM。
11.按照前述权利要求任一项的方法，其中饮料是茶基的。
12.按照权利要求11的方法，其中饮料含有0.01～3％茶固体。
13.按照前述任何权利要求的方法，其中巴氏杀菌助剂在加热活化时也是抗菌的。
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