MXPA00001613A - Composiciones detergentes que comprenden una mananasa y un agente tensioactivo cation - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas que comprenden una mañanaza y un agente tensioactivo catiónico para un funcionamiento superior de suavizado y limpie

Description

COMPOSICIONES DETERGENTES QUE COMPRENDEN UNA MANANASA Y UN AGENTE TENSIOACTIVO CATIONICO CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas que comprenden una mananasa y un agente tensioactivo catiónico.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El desempeño de un producto detergente se juzga por numerosos factores, que incluyen la capacidad de remover suciedad y la capacidad de evitar la redeposición de la suciedad, o los productos de descomposición de la suciedad en los artículos en el lavado. Por lo tanto, las composiciones detergentes hoy en día incluyen una compleja combinación de ingredientes activos los cuales satisfacen ciertas necesidades específicas. En particular, las formulaciones detergentes actuales generalmente incluyen agentes tensioactivos y enzimas detergentes que proporcionan beneficios de limpieza y cuidado para las telas. Se conoce en la técnica que los agentes tensioactivos catiónicos proporcionan una mejor remoción de manchas grasosas tales como manchas cosméticas y de alimentos.

Las manchas/suciedad de alimentos y de cosméticos representan a la mayor parte de las manchas y suciedad relevante para el consumidor y con frecuencia comprenden aditivos alimenticios tales como agentes espesantes/estabilizantes. En realidad, comúnmente se utilizan como aditivos alimenticios gomas hidrocoloides, y emulsificantes. El término "goma" indica un grupo de polisacáridos industrialmente útiles (polímero de cadena larga) o sus derivados que se hidratan en agua caliente o fría para formar soluciones viscosas, dispersiones o geles. Las gomas se clasifican como naturales y modificadas. Las gomas naturales incluyen extracto de semillas marinas, extruidos de plantas, gomas de semillas o raíces y gomas que se obtienen por fermentación microbiana. Las gomas modificadas (semisintéticas) incluyen derivados de celulosa y almidón y ciertas gomas sintéticas tales como metoxilpectina baja, alginato de propilenglicol y carboximetil e hidropropil de goma guar (gomas en Encyclopedia Chemical Technology 4 Ed. Vol. 12, pp 842-862, J. Baird, Kelco división de Merck). Véase también Carbohydrate Chemistry for Food Scientists (Eagan Press - 1997) por R. L. Whistler y J. N. BeMiller, capítulo 4, pp 63-89 y Direct Food Additives in Fruit Processing por P. Laslo, Bioprinciples and Applications, Vol. 1 , capítulo II, pp 313-325 (1996) Technomie publishing. Algunas de estas gomas tal como la goma guar (E412), la goma de algarrobo (E410) se utilizan ampliamente solas o en combinaciones en muchas aplicaciones alimenticias (Gums in ECT4th Ed., Vol. 12 pp 842-862, J. Baird, Kelco división de Merck). La goma guar utilizada en estas manchas de alimentos y cosméticas se obtiene del endosperma de semillas de la planta leguminosa Cyamopsls tetragonoloba. La goma guar (también llamada guarano) extraída de la semilla de dicotiledóneas está compuesta de una estructura principal unitaria de 1-4, b-D-manopiranosilo y se utiliza como agente espesante en adheresos y productos congelados y cosméticos (H.-D. Berlitz, Food Chemistry pp 243, versión en inglés de la segunda edición, Springer-verlag, 1987, ISBN 0-387-15043-9 (US)) y (Carbohydrate Chemistry for Food Scientists, R.L. Wilstler eagan press, 1997, ISBN 0-913250-92-9) y (Industrial Gum, segundas ediciones, R.L. Whistler pp 308, Academic Press, 1973, ISBN, 0-12-74-6252-x). La goma de algarrobo (también denominada goma de carob bean o de semilla de St Jon's) también se utiliza en la industria alimenticia y se extrae de la semilla de una planta perene cultivada en el área mediterránea. La goma de algarrobo probablemente difiere de la estructura de la goma guar únicamente en el número más pequeño de cadenas laterales D-galactosilo y tiene la misma estructura principal de 1-4, b-D-manopiranosilo. En semillas leguminosas, el galactomanano soluble en agua es el carbohidrato de almacenamiento principal, constituyendo hasta 20% del peso seco total en algunos casos. El galactomanano tiene una a-galactosa unida a O-6 de residuos mañosa y también puede ser acetilada en grado variable sobre O-2 y O-3 de los residuos mañosa. Sin embargo, existe una necesidad continua por formular composiciones detergentes y/o para el cuidado de las telas, las cuales proporcionen un funcionamiento superior de suavizado y limpieza, especialmente respecto a manchas cosméticas y de alimentos. Este objetivo se satisface por la formulación de composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas que comprenden una mananasa y un agente tensioactivo catiónico. Se ha encontrado sorprendentemente que tales composiciones proporcionan un suavizado y limpieza superiores debido al efecto sinergístico del agente tensioactivo catiónico que remueve las manchas grasosas y a la mananasa que degrada las gomas hidrocoloides residuales. Este sistema mixto de tensioactivo-enzima suministra un efecto sorprendente de suavidad y limpieza, especialmente sobre estas manchas cosméticas y de alimentos. Se ha encontrado además que el funcionamiento de las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención se mejora por la adición de otros agentes tensioactivos, especialmente un agente tensioactivo aniónico, preferiblemente un sulfato de alquilo y/o sulfonato y/o un agente tensioactivo no iónico tal como un agente tensioactivo no iónico etoxilado de alquilo con una longitud de cadena de C8 a C20, preferiblemente de C12 a C16, y un grado de etoxilación de 2 a 9, preferiblemente de 3 a 7 y/o un agente tensioactivo de alquilmetilglucamida con una longitud de cadena alquilo de C8 a C20, preferiblemente de C12 a C18. Se han identificado mananasas en varios organismos del género Bacillus. Por ejemplo, Talbot et al., Appl. Environ. Microbiol., vol. 56, No. 11 , pp. 3505-3510 (1990) describe una ß-mananasa derivada de Bacillus stearothermophilus en forma dimérica que tiene un peso molecular de 162 kDa y un pH óptimo de 5.5-7.5. Mendoza et al., World J. Micobio. Boitech., vol. 10, no. 5, pp. 551-555 (1994) describe una ß-mananasa derivada de Bacillus subtilisis que tiene un peso molecular de 38 kDa, una actividad óptima a pH 5.0/55°C y un pl de 4.8. El documento J0304706 describe una ß-mananasa derivada de Bacillus sp. que tiene un peso molecular de 37 +/- 3 kDa medido por filtración en gel, un pH óptimo de 8-10 y un pl de 5.3-5.4. El documento J63056289 describe la producción de una ß-manasa termoestable alcalina la cual hidroliza los enlaces ß-1 ,4-D-manopiranósidos de, por ejemplo, mananos y produce mano:oligo:sacáridos. El documento J63036774 se relaciona con un microorganismo Bacillus FERM P-8856 el cual produce ß-mananasa y ß-manosidasa, a un pH alcalino. Una mananasa purificada de Bacillus amyloliquefaciens y su método de preparación útil en el blanqueado de pulpa y papel, se describe en el documento WO97/11164. El documento WO91/18974 describe una hemicelulasa tal como una glucanasa, xilanasa o mananasa, activa a pH y temperatura extremas, así como la producción de la misma. El documento WO94/25576 describe una enzima que muestra actividad de mananasa, derivada de Aspergillus aculeatus CBS 101.43, que puede ser utilizada para varios propósitos para los cuales se desea degradación o modificación del material de la pared celular de plantas o algas. El documento WO93/24622 describe una mananasa aislada de Tríchoderma reesie para blanqueo de pulpas lignocelulósicas. Sin embargo, nunca se ha reconocido previamente la combinación sinergística de una mananasa y un agente tensioactivo catiónico, para un funcionamiento superior de suavizado y limpieza en una composición detergente y/o para el cuidado de las telas.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas que comprende una mananasa y un agente tensioactivo catiónico para proporcionar un funcionamiento superior de suavizado y limpieza.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Se conocen agentes tensioactivos catiónicos en el campo de los detergentes los cuales proporcionan remoción de manchas grasosas, especialmente manchas tales como manchas de cosméticos y alimentos. Se sabe que las composiciones modernas de cosméticos y de alimentos contienen más y más aditivos, tales como gomas hidrocoloides utilizadas como espesantes. Los mananos, la goma guar y la goma de algarrobo se utilizan en varias composiciones cosméticas y de alimentos (véase Industrial Gum, segunda edición, R.L. Whistler pp 308, Academic Press, 1973, ISBN, 0-12-74-6252-x). Se ha encontrado que estas gomas hidrocoloides tienen una afinidad muy alta por materiales de celulosa. Además, se ha encontrado que las manchas que contienen gomas hidrocoloides son difíciles de remover, incluso con la ayuda de agentes fcjá- tensioactivos modernos tales como agentes tensioactivos catiónicos. Sin desear unirse a teoría alguna, se considera que la eficiencia de los agentes tensioactivos catiónicos para remover estas manchas cosméticas y de alimentos que contienen goma hidrocoloide se reduce debido a que las gomas hidrocoloides se adhieren a las manchas grasosas en las telas. Se ha encontrado sorprendentemente que el uso de una enzima mananasa en combinación con un agente tensioactivo catiónico, resulta en beneficios importantes en limpieza. En realidad, se ha encontrado que los agentes tensioactivos catiónicos remueven manchas grasosas y que la enzima mananasa degrada gomas hidrocoloides residuales. El uso de este sistema mixto de tensioactivo-enzima suministra un efecto limpiador sorprendente, especialmente en manchas de cosméticos y alimentos. Además, se ha encontrado que este sistema mixto de tensioactivo-enzima proporciona buenas propiedades de suavizado.

La enzima mananasa Un elemento esencial de una composición detergente y/o para el cuidado de telas de la presente invención es una enzima mananasa. Incluidas en la presente invención están las siguientes tres enzimas degradantes de mananos: EC 3.2.1.25 : ß-manosidasa, EC 3.2.1.78 : endo-1 ,4-ß-manosidasa, denominada en la presente en lo que sigue como "mananasa" y EC 3.2.1.100 : 1 ,4-ß-manobiosidasa (nomenclatura de clasificación de enzimas de la IUPAC, 1992 ISBN 0-12-227165-3 Academic Press). De manera más preferible, las composiciones para detergente de lavandería y/o para el cuidado de telas de la presente invención comprenden una ß-1 ,4-manosidasa (E.C. 3.2.1.78) denominada como mananasa. El término "mananasa" o "galactomananasa" indica una enzima mananasa definida de acuerdo con la técnica denominada oficialmente como mañano endo-1 ,4-ß-manosidasa y que tiene los nombres alternativos de ß-mananasa y endo-1 ,4-mananasa y que catalizan la reacción: hidrólisis aleatoria de enlaces 1 ,4-beta-D-manosídicos en mananos, galactomananos, glucomananos y galactoglucomananos. En particular, las mananasas (EC 3.2.1.78) constituyen un grupo de polisacarasas las cuales degradan mananos e indican enzimas las cuales son capaces de separar cadenas poliosa que contienen unidades de mañosa, es decir, que son capaces de separar enlaces glicosídicos en mananos, glucomananos, galactomananos y galactoglucomananos. Los mananos son polisacáridos que tienen una estructura principal constituida de mañosa unida ß-1 ,4-; los glucomananos son polisacáridos que tienen una estructura principal de más o menos alternante regularmente de mañosa unida ß-1 ,4 y glucosa; los galactomananos y los galactoglucomananos son mananos y glucomananos con cadenas laterales de galactosa unidos a-1 ,6. Estos compuestos pueden ser acetilados. La degradación de galactomananos y galactoglucomananos se facilita por la remoción total o parcial de las cadenas laterales de galactosa.

Además, la degradación de mananos acetilados, glucomananos, galactomananos y galactoglucomananos se facilita por la desacetilación total o parcial. Se pueden remover los grupos acetilo por material alcalino o por acetilesterasas de mañano. Los oligómeros los cuales se liberan de las mananasas o por una combinación de mananasas y a-galactosidasa y/o mañano acetil esterasas se pueden degradar adicionalmente para liberar la maltosa libre por ß-manosidasa y/o ß-glucosidasa. Las mananasas se han identificado en varios organismos del género Bacillus. Por ejemplo, Talbot et al., Appl. Environ. Microbiol., Vol. 56, No. 11 , pp. 3505-3510 (1990) describe una ß-mananasa derivada de Bacillus stearothermophilus en forma dimérica que tiene un peso molecular de 162 kDa y un pH óptimo de 5.5-7.5. Mendoza et al., World J. Microbiol. Biotech., Vol. 10, No. 5, pp. 551-555 (1994) describe una beta-mananasa derivada de Bacillus subtilis que tiene un peso molecular de 38 kDa, una actividad óptima a pH 5.0 y 55°C y un pl de 4.8. El documento JP-0304706 describe una beta-mananasa derivada de Bacillus sp., que tiene un peso molecular de 373 kDa medido por filtración en gel, un pH óptimo de 8-10 y un pl de 5.3-5.4. El documento JP-63056289 describe la producción de una beta-mananasa termoestable alcalina la cual hidroliza enlaces beta-1 ,4-D-manopiranósido de, por ejemplo mananos y produce manano-oligosacáridos. El documento JP-63036774 se relaciona con un microorganismo Bacillus FERM P-8856 el cual produce beta-mananasa y beta-manosidasa a un pH alcalino. El documento JP-08051975 describe beta-mananasas alcalinas de Bacillus sp alcalofílico AM-001. Una mananasa purificada de Bacillus amyloliquefaciens útil en el blanqueado de pulpa y papel, y un método de preparación de la misma se describen en el documento WO 97/11164. El documento WO 91/18974 describe una hemicelulasa tal como una glucanasa, xilanasa o mananasa activa a un pH y temperatura extremos. El documento WO 94/25576 describe una enzima a partir de Aspergillus aculeatus, CBS 101.43 que presenta actividad de mananasa la cual puede ser útil para la degradación o modificación de material de pared celular de plantas o algas. El documento WO 93/24622 describe una mananasa aislada de Trichoderma reseei útil para blanquear pulpas lignocelulósicas. Una hemicelulosa capaz de degradar hemicelulosa que contiene mañano se describe en el documento WO 91/18974 y una mananasa purificada de Bacillus amyloliquefaciens se describe en WO 97/11164. En particular, esta enzima mananasa será una mananasa alcalina como se define abajo, de manera más preferible, una mananasa que se origina de una fuente bacteriana. Especialmente, la composición detergente y/o para el cuidado de telas de la presente invención comprenderá una mananasa alcalina que se selecciona de una mananasa de la cepa de Bacillus agaradherens y/o Bacillus subtilisis cepa 168, gen yght. El término "enzima mananasa alcalina" se quiere significar que abarque enzimas que tienen una actividad enzimática de por lo menos 10%, preferiblemente por lo menos 25%, de manera más preferible por lo menos 40% de su actividad máxima a un pH dado que varía de 7 a 12, preferiblemente de 7.5 a 10.5.

De manera más preferible, la composición detergente y/o para el cuidado de telas de la presente invención comprenderá la mananasa alcalina de Bacillus agaradherens. Tal mananasa es: i) un polipéptido producido por Bacillus agaradherens, NCIMB 40482, o ii) un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos como se muestra en las posiciones 32-343 de la SEQ ID NO: 2 o iii) un análogo del polipéptido definido en los incisos i) o ii) el cual es por lo menos 70% homólogo con el polipéptido, o se deriva del polipéptido por sustitución, supresión o adición de uno o varios aminoácidos, o es inmunológicamente reactivo con un anticuerpo policlonal generado contra el polipéptido, en forma purificada. La presente invención, también abarca un polipéptido aislado que tiene actividad de mananasa, que se selecciona del grupo que consiste de: (a) moléculas polinucleotídicas que codifican para un polipéptido que tiene actividad de mananasa y que comprende una secuencia de nucleótidos como se muestra en la SEQ ID NO: 1 , desde el nucleótido 97 hasta el nucleótido 1029; (b) especies homologas del inciso (a); (c) moléculas polinucleotídicas que codifican para un polipéptido que tiene actividad de mananasa que es por lo menos 70% idéntico a la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 2, desde el residuo aminoácido 32 hasta el residuo aminoácido 343; A: (d) moléculas complementarias a los incisos (a), (b) o (c); y (e) secuencias nucleotídicas degeneradas de los incisos (a), (b), (c) o (d). El plásmido pSJ 1678 que comprende la molécula polinucleotídica (la secuencia de ADN) que codifica para una mananasa de la presente invención, se ha transformado en una cepa de Escherichia coli la cual se ha depositado por los inventores de acuerdo con el tratado de Budapest respecto al reconocimiento internacional del depósito de microorganismos para propósitos de procedimiento de Patentes en la Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Mascheroder Weg 1b, D-38124 Braunschweig, República Federal de Alemania el 18 de mayo de 1998, bajo el número de depósito DSM 12180. Una segunda enzima más preferida es la mananasa de Bacillus subtilisis cepa 168, mananasa la cual: i) es codificada por la parte codificante de la secuencia de ADN que se muestra en la SEQ ID NO: 5 o un análogo de tal secuencia, y/o ii) un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos, como se muestra en la SEQ ID NO: 6, o iii) un análogo del polipéptido definido en el inciso ii) el cual es por lo menos 70% homólogo con el polipéptido, o se deriva del polipéptido por sustitución, supresión o adición de uno o varios aminoácidos, o es inmunológicamente reactiva con un anticuerpo policlonal generado contra el polipéptido, en forma purificada.

La presente invención también abarca un polipéptido aislado que tiene actividad de mananasa que se selecciona del grupo que consiste de: a) moléculas polinucleotídicas que codifican para un polipéptido que tiene actividad de mananasa y que comprende una secuencia de nucleótidos como se muestra en la SEQ ID NO: 5 (b) especies homologas al inciso (a); (c) moléculas polinucleotídicas que codifican para un polipéptido que tienen actividad de mananasa que es por lo menos 70% idéntico a la secuencia de aminoácido de la SEQ ID NO: 6; (d) moléculas complementarias a los incisos (a), (b) o (c); y (e) secuencias nucleotídicas degeneradas de los incisos (a), (b), (c) o (d).

Definiciones Antes de discutir esta invención con mayor detalle, se definirán primero los siguientes términos. El término "ortólogo" o ("especies homologas") indica un polipéptido o una proteína obtenida de otra especie que tiene homología con un polipéptido o proteína análoga de una especie diferente. El término "paráloga" denota un polipéptido o proteína obtenida de una especie dada que tiene homología con un polipéptido o proteína distinto de la misma especie. El término "vector de expresión" indica una molécula de ADN, lineal o circular, que comprende un segmento que codifica para un polipéptido de interés unido operablemente a segmentos adicionales que se proporcionan para su transcripción. Tales segmentos adicionales pueden incluir secuencia promotora y terminadora, y opcionalmente pueden incluir uno o más orígenes de replicación, uno o más marcadores seleccionables, un alargador, una señal de poliadenilación y similares. Los vectores de expresión se derivan generalmente de ADN plasmídico o viral, o pueden contener elementos de ambos. El vector de expresión de la invención puede ser cualquier vector de expresión que este sometido convenientemente a procedimientos de ADN recombinantes, y la elección del vector con frecuencia dependerá de la célula huésped en la cual se va a introducir el vector. Por lo tanto, el vector puede ser un vector que se replique de manera autónoma, es decir, un vector el cual existe como una entidad extracromosómica, la replicación de la cual es independiente de la replicación cromosómica, por ejemplo un plásmido. Alternativamente, el vector puede ser uno el cual, cuando se introduce en una célula huésped, se integra en el genoma de la célula huésped y se replica junto con el o los cromosomas dentro de los cuales se ha integrado. El término "expresado recombinante" o "expresado recombinantemente" utilizado en la presente en relación con la expresión de un polipéptido o proteína, se define de acuerdo con la definición estándar en la técnica. La expresión recombinante de una proteína se realiza generalmente al utilizar un vector de expresión como se describe inmediatamente antes. El término "aislado", cuando se aplica a una molécula polinucleotídica, indica que el polinucleótido ha sido removido de su medio genético natural y por lo tanto está libre de otras secuencias codificantes extrañas o no deseadas, y está en una forma adecuada para uso con sistemas de producción de proteína sometidos a ingeniería genética. Tales moléculas aisladas son aquellas que se separan de su ambiente natural e incluyen ADNc y clonas genómicas. Las moléculas de ADN aisladas de la presente invención están libres de otros genes con los cuales habitualmente se asocian, pero pueden incluir regiones no traducidas 5' y 3' que se presentan de manera natural tales como promotores y terminadores. La identificación de las regiones asociadas será evidente para una persona habitualmente experta en la técnica (véase, por ejemplo, Dynan and Tijan, Nature 316:774-78, 1985). El término "un polinucleótido aislado" alternativamente se puede denominar "un polinucleótido clonado". Cuando se aplica a una proteína/polipéptido, el término "aislado" indica que la proteína se encuentra en una condición diferente a su ambiente nativo. En una forma preferida, la proteína aislada está sustancialmente libre de otras proteínas, particularmente otras proteínas homologas (es decir, "impurezas homologas" (véase abajo)). Se prefiere proporcionar la proteína en una forma pura mayor de 40%, más preferiblemente en una forma pura mayor de 60%. De manera incluso más preferible, se prefiere proporcionar la proteína en una forma altamente purificada, es decir, pura más de 80%, de manera más preferible pura más de 95% e incluso de manera más preferible pura más de 99%, determinado por SDS-PAGE.

El término "proteína/polipéptido aislado" alternativamente se puede determinar "proteína/polipéptido purificado" El término "impurezas homologas" significa una impureza (por ejemplo otro polipéptido al polipéptido de la invención) el cual se origina de la célula homologa de donde se ha obtenido originalmente el polipéptido de la invención. El término "obtenido de" como se utiliza en la presente en relación con una fuente microbiana específica, significa que el polinucleótido y/o el polipéptido producido por la fuente específica o por una célula en la cual se ha insertado un gen de la fuente. El término "unido operablemente", cuando se refiere a segmentos de ADN, indica que los segmentos están colocados de manera que funcionan de manera concertada para sus propósitos propuestos, por ejemplo la transcripción se inicia en el promotor y procede a través del segmento codificante hasta el terminador. El término "polinucleótido" indica un polímero de cadena sencilla o doble de desoxirribonucleótido o de bases de ribonucleótidos que se leen desde el extremo 5' hasta el 3', Los polinucleótidos incluyen ARN y ADN, y se pueden aislar de fuentes naturales, sintetizadas in vitro, o preparadas a partir de una combinación de moléculas naturales y sintéticas. El término "complementos de moléculas polinucleotídicas" indica moléculas polinucleotídicas que tienen una secuencia de bases complementaria y orientación inversa en comparación con la secuencia de . ? referencia. Por ejemplo, la secuencia 5'ATGCAÓGGG 3' es complementaria a 5' CCCGTGCAT 3'. El término "secuencia nucleotídica degenerada" indica una secuencia de nucleótidos que incluye uno o más codones degenerados (en comparación con una molécula polinucleotídica de referencia que codifica para un polipéptido). Los codones degenerados contienen tripletes diferentes de nucleótidos, pero codifican para el mismo residuo aminoácido (es decir, los tripletes GAU y GAC codifican, cada uno, para Asp). El término "promotor" indica una porción de un gen que contiene secuencias de ADN que proporcionan la unión de ARN polimerasa y el inicio de transcripción. Las secuencias promotoras comúnmente, pero no siempre se encuentran en las regiones 5" no codificantes de los genes. El término "secuencia de señal secretora" indica una secuencia de ADN que codifica para un polipéptido ("un péptido secretor") que, como un componente de un polipéptido más grande, dirige al polipéptido más grande a través de una vía secretora de una célula en la cual es sintetizado. El péptido más grande comúnmente se separa para remover al péptido secretor durante su tránsito a través de la vía secretora.

Cómo utilizar una secuencia de la invención para obtener otras secuencias relacionadas: La información de secuencia descrita en la presente en relación a una secuencia polinucleotídica que codifica para una mananasa de la invención ' *^s* . se puede utilizar como una herramienta para identificar otras mananasas homologas. Por ejemplo, se puede utilizar la reacción en cadena de polimerasa (PCR) para amplificar secuencias que codifican para otras mananasas homologas a partir de una variedad de fuentes microbianas, en particular de diferentes especies de Bacillus.

Ensayo para prueba de actividad Un polipéptido de la invención que tenga actividad de mananasa se puede probar para determinar su actividad de mananasa de acuerdo con procedimientos de prueba estándares conocidos en la técnica, tales como aplicar una solución que se va a probar a orificios de 4 mm de diámetro perforadas en placas de agar que contienen galactomanano AZCL 0.2% (algarrobo), es decir, sustrato para el ensayo de endo-1 ,4-beta-D-mananasa disponible como catálogo número 1- AZGMA de la compañía Megazyme por US $110.00 por 3 gramos (dirección de Megazyme en Internet: http://www.megazyme.com/Purchase/index.html).

Polinucleótidos: Un polinucleótido aislado de la invención hibridizará con regiones dimensionadas similares de la SEQ ID NO: 1 o una secuencia complementaria al mismo, bajo por lo menos condiciones de astringencia media. En particular, los polinucleótidos de la invención hibridizarán con una sonda de ADN de cadena doble desnaturalizada que comprende ya sea la secuencia completa que se muestra en las posiciones 97-1029 de la SEQ ID NO: 1 o cualquier sonda que comprenda una subsecuencia de la SEQ ID NO: 1 que tenga una longitud de por lo menos aproximadamente 100 pares de bases bajo condiciones de astringencia por lo menos media, pero preferiblemente bajo condiciones de astringencia elevada, como se describe con detalle abajo. Las condiciones experimentales adecuadas para determinar la hibridación en astringencia media o alta entre una sonda nucleotídica y una secuencia homologa de ADN o ARN involucra el prehumedecimiento del filtro que contiene los fragmentos de ADN o ARN para hibridizar en 5 x SSC (cloruro de sodio/citrato de sodio, Sambrook et al. 1989) durante 10 min, y prehibridación del filtro en una solución de 5 x SSC, 5 x solución de Denhardt's (Sambrook et al. 1989), SDS 0.5% y 100 µg/ml de ADN de esperma de salmón sonicado y desnaturalizado (Sambrook et al. 1989), seguido por hibridación en la misma solución que contiene una concentración de 10 ng/ml de una sonda, cebada aleatoriamente (Feinberg, A.P. y Vogelstein, B. (1983) Anal. Biochem. 132:6- 32 9 13), marcada con P-dCTP (actividad específica mayor de 1 x 10 cpm/µg) durante 12 horas a ca. 45°C. El filtro después se lava dos veces durante 30 minutos en 2 x SSC, SDS 0.5% por lo menos a 60°C (astringencia media), de manera aún más preferida a por lo menos 65°C (astringencia media/alta) de manera incluso más preferible a por lo menos 70°C (astringencia alta) e incluso de manera más preferible a por lo menos 75°C (astringencia muy alta). Las moléculas a las cuales se hibridiza la sonda oligonucleotídica bajo estas condiciones se detectan utilizando una película de rayos X. ía a-C &•£ * Como se ha indicado previamente, los polinucleótidos aislados de la presente invención incluyen ADN y ARN. Los métodos para aislar ADN y ARN son bien conocidos en la técnica. Los genes de interés que codifican para ADN y ARN se pueden clonar en Gene Banks o en bibliotecas de ADN por medio de métodos conocidos en la técnica. Los polinucleótidos que codifican para polipéptidos que tienen actividad de mananasa de la invención se identifican y aislan posteriormente mediante, por ejemplo, hibridación o PCR. La presente invención proporciona además polipéptidos contra partes y polinucleótidos de cepas bacterianas diferentes (ortólogos y parálogos). Son de particular interés polipéptidos de mananasa a partir de cepas alcalofílicas grampositivas que incluyen especies de Bacillus. Las especies homologas de un polipéptido con actividad de mananasa de la invención se pueden clonar utilizando información y composiciones que se proporcionen por la presente invención en combinación con técnicas de clonación convencionales. Por ejemplo, una secuencia de ADN de la presente invención se puede clonar utilizando ADN cromosómico que se obtiene de un tipo de célula que expresa la proteína. Las fuentes adecuadas de ADN se pueden identificar mediante pruebas de sondas Northern blots, con sondas diseñadas a partir de secuencias descritas en la presente. Después se prepara una biblioteca a partir de ADN cromosómico de una línea de células positivas. Una secuencia de ADN de la invención que codifica para un polipéptido que tiene actividad de mananasa se puede aislar, entonces, por . t^as* - diversos métodos, tales como sondeo con sondas diseñadas a partir de secuencias descritas en la presente especificación y en las reivindicaciones, o con uno o más conjuntos de sondas degeneradas basadas en las secuencias descritas. Una secuencia de ADN de la invención también se puede clonar utilizando reacción en cadena de polimerasa, o PCR (Mullís, Patente de los Estados Unidos número 4,683,202), utilizando iniciadores diseñados a partir de las secuencias descritas en la presente. Dentro de un método adicional, la biblioteca de ADN se puede utilizar para transformar o transfectar células huéspedes, y la expresión del ADN de interés se puede detectar con un anticuerpo (monoclonal o policlonal) generado contra la mananasa clonada a partir de B. agaradherens, NCIMB 40482, expresado y purificado como se describe en Materiales y Métodos y en el Ejemplo 1 , o por una prueba de actividad en relación a un polipéptido que tenga actividad de mananasa. La parte que codifica para mananasa de la secuencia de ADN clonada en el plásmido pSJ1678 presente en Escherichia coli DSM 12180 y/o una secuencia de ADN análoga de la invención, se puede clonar a partir de una cepa de las especies bacterianas Bacillus agaradherens, preferiblemente la cepa NCIMB 40482, lo que produce la enzima con actividad degradante de mañano u otro organismo relacionado, como se describe en la presente. Alternativamente, la secuencia análoga se puede construir en base en la secuencia de ADN obtenible del plásmido presente en Escherichia coli DSM 12180 (la cual se considera que es idéntica a la SEQ ID NO: 1 anexa), por ejemplo, que es una subsecuencia de la misma y/o por introducción de sustituciones de nucleótidos los cuales no generan otra secuencia de aminoácidos de la mananasa codificada por la secuencia de ADN, pero los cuales corresponden al uso de codones del organismo huésped que se utiliza para producción de la enzima o por introducción de sustituciones de nucleótidos los cuales den lugar a una secuencia diferente de aminoácidos (es decir, una variante de la enzima degradante de mañano de la invención).

Polipéptidos: La secuencia de aminoácidos números 32-343 de la SEQ ID NO: 2 es una secuencia de mananasa madura. La presente invención también proporciona polipéptidos de mananasa que son sustancialmente homólogos al polipéptido de la SEQ ID NO: 2 y especies homologas (parálogas y ortólogas) de la misma. El término "sustancialmente homólogo" se utiliza en la presente para denotar polipéptidos que tienen 70%, de manera preferible por lo menos 80%, y de manera más preferible por lo menos 85%, incluso de manera más preferible por lo menos 90% de identidad de secuencia con la secuencia mostrada en los aminoácidos números 32-343 de la SEQ ID NO: 2 o sus ortólogos o parálogos. Tales polipéptidos de manera más preferible serán por lo menos 95% idénticos, y de manera mucho más preferible 98% idénticos o una cantidad mayor, respecto a la secuencia mostrada en los aminoácidos números 32-343 de la SEQ ID NO: 2 o sus ortólogos o parálogos. El por ciento de identidad de la secuencia se determina por métodos convencionales, por medio de programas de computadora conocidos en la técnica tales como GAP, que se proporciona en el paquete de programa GCG (Program Manual for the Wisconsin Package, Versión 8, agosto de 1994, Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wisconsin, EUA 53711 ) como se describe por Needleman, S.B. y Wunsch, C.D., (1970), Journal of Molecular Biology, 48, 443-453, la cual se incorpora como referencia en su totalidad. Se utiliza GAP con los siguientes ajustes para comparación de secuencia de polipéptidos: Penalidad de creación de GAP de 3.0 y penalidad de extensión de GAP de 0.1. La identidad de secuencia de moléculas polinucleotídicas se determina por métodos similares utilizando GAP con los siguientes ajustes para comparación de secuencia de ADN: penalidad de creación de GAP de 5.0 y penalidad de extensión de GAP de 0.3. La preparación de enzima de la invención preferiblemente se deriva de un microorganismo, preferiblemente de una bacteria, una arqueobacteria o un hongo, especialmente de una bacteria tal como una bacteria que pertenece al género Bacillus, preferiblemente a una cepa de Bacillus alcalofílica la cual se puede seleccionar del grupo que consiste de las especies Bacillus agaradherens y las especies de Bacillus altamente relacionadas, en las cuales todas las especies preferiblemente son por lo menos 95%, incluso de manera más preferible por lo menos 98% homologas a Bacillus agaradherens basado en las secuencias de ADNr 16S alineadas. Las proteínas y polipéptidos sustancialmente homólogos están caracterizados porque tienen una o más sustituciones, supresiones o adiciones de aminoácidos. Estos cambios preferiblemente son de una naturaleza menor, esto es, las sustituciones conservadoras de aminoácidos (véase cuadro 1 ) y otras sustituciones que no afectan significativamente el plegado o la actividad de la proteína o polipéptido; las supresiones pequeñas, típicamente de una a 5 aproximadamente 30 aminoácidos; y extensiones pequeñas en la parte amino o carboxilo terminal, tales como un residuo metionina amino terminal, un péptido enlazador pequeño de hasta aproximadamente 20-25 residuos o una extensión pequeña que facilita la purificación (una etiqueta de afinidad), tal como el tracto de poli-histidina, proteína A (Nilsson et al., EMBO J. 4:1075; 1985; Nilsson et 10 al., Methods Enzvmol. 198:3, 1991. Véase, en general Ford et al., Protein Expression and Purification 2: 95-107, 1991 , la cual se incorpora en la presente como referencia. Las etiquetas de afinidad que codifican para ADN están disponibles de proveedores comerciales (por ejemplo Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ; New England Biolabs, Beverly, MA). 15 Sin embargo, aunque los cambios descritos antes preferiblemente son de naturaleza menor, tales cambios también pueden ser de una naturaleza más grande tales como polipéptidos de fusión o más grandes, de hasta 300 aminoácidos o mayores, como extensiones amino o carboxilo terminales a un polipéptido de mananasa de la invención ** ,#**. *- «,!,*,/-;, Jíaü CUADRO 1 Sustituciones conservadoras de aminoácidos Básicos: arginina, lisina, histidina Ácidos: ácido glutámico, ácido aspártico Polares: glutamina, asparagina Hidrofóbicos: leucina, isoleucina, valina Aromáticos: fenilalanina, tript?fano, tirosina Pequeños: glicina, alanina, serina, treonina, metionina Además de los 20 aminoácidos estándar, se pueden sustituir aminoácidos no estándares (tales como 4-hidroxiprolina, 6-?-metillisina, ácido 2-aminoisobutírico, isovalina y a-metilserina), por residuos aminoácidos de un polipéptido de acuerdo con la invención. Una cantidad limitada de aminoácidos no conservadores, aminoácidos que no son codificados por el código genético y aminoácidos no naturales se pueden sustituir por residuos aminoácidos. Los "aminoácidos no naturales" se han modificado después de la síntesis de proteína y/o tienen una estructura química en su cadena o cadenas laterales diferente a la de los aminoácidos estándar. Los aminoácidos no naturales se pueden sintetizar químicamente, o preferiblemente están disponibles comercialmente, e ¡ncluyen ácido pipecólico, ácido tiazolidincarboxílico, deshidroprolina, 3- y 4-metilprolina y 3,3-dimetilprolina. Los aminoácidos esenciales en los polipéptidos de mananasa de ab » la presente invención se pueden identificar de acuerdo con procedimientos conocidos en la técnica, tales como mutagénesis dirigida al sitio o mutagénesis de exploración de alanina (Cunningham and Wells, Science 244: 1081-1085, 1989). En esta última técnica, se introducen mutaciones de alanina sola en cada residuo en la molécula, y las moléculas mutantes resultantes se prueban para determinar su actividad biológica (es decir, actividad de mananasa) para identificar residuos aminoácidos que son críticos para la actividad de la molécula. Véase también, Hilton et al., J. Biol. Chem. 271:4699-4708, 1996. El sitio activo de la enzima u otra interacción biológica también se puede determinar por análisis físico de la estructura, determinado por técnicas tales como resonancia magnética nuclear, cristalografía, difracción electrónica o etiquetado de fotoafinidad, junto con mutación de los aminoácidos del sitio de contacto putativo. Véase, por ejemplo, de Vos et al., Science 255:306-312, 1992; Smith et al., J. Mol. Biol. 224:899-904, 1992; Wlodaver et al., FEBS Lett. 309:59-64, 1992. Las identidades de los aminoácidos esenciales también se pueden inferir a partir del análisis de homologías con polipéptidos los cuales están relacionados con un polipéptido de acuerdo con la invención. Las sustituciones múltiples de aminoácidos se pueden realizar y se pueden probar utilizando métodos conocidos de mutagénesis, recombinación y/o redistribución, seguido por el procedimiento de análisis relevante, tal como los descritos por Reidhaar-Olson y Sauer (Science 241 :53-57, 1988), Bowie y Sauer (Proc. Nati. Acad. Sci. EUA 86:2152-2156, 1989), WO95/17413 o WO 95/22625. Brevemente, estos autores describen métodos para aleatorizar simultáneamente dos o más posiciones en un polipéptido, o la recombinación/redistribución de mutaciones diferentes (WO95/17413, WO95/22625), seguido por selección por el polipéptido funcional, y después secuenciado de los polipéptidos mutagenizados para determinar el espectro de sustituciones permisibles en cada posición. Otros métodos que se pueden utilizar incluyen exhibición de fagos (por ejemplo Lowman et al., Biochem. 30:10832-10837, 1991 ; Ladner et al., Patente de los Estados Unidos número 5,223,409; Huse, Publicación WIPO WO 92/06204) y la mutagénesis dirigida a región (Derbyshire et al., Gene 46:145, 1986; Ner et al., DNA 7:127, 1988). Los métodos de mutagénesis/redistribución como se describen antes se pueden combinar con métodos de análisis automatizados de alto rendimiento para detectar actividad de los polipéptidos clonados y mutagenizados en células huéspedes. Las moléculas de ADN mutagenizadas que codifican para polipéptidos activos se pueden recuperar de las células huéspedes y se secuencian rápidamente utilizando equipo moderno. Estos métodos permiten la determinación rápida de la importancia de residuos aminoácidos individuales en un polipéptido de interés, y se pueden aplicar a polipéptidos de estructura desconocida. Utilizando los métodos discutidos antes, una persona habitualmente experta en la técnica puede identificar y/o preparar diversos polipéptidos que son sustancialmente homólogos a los residuos 32 a 343 de la SEQ ID NO: 2 y retener la actividad de mananasa de la proteína de tipo silvestre.

Producción de proteínas: Las proteínas y polipéptidos de la presente invención, que incluyen proteínas de longitud completa, fragmentos de las mismas y proteínas de fusión, se pueden elaborar en células huéspedes sometidas a ingeniería genética de acuerdo con técnicas convencionales. Las células huéspedes adecuadas son aquellos tipos de células que se pueden transformar o transfectar con ADN exógeno y que crecen en cultivo, e incluyen bacterias, células micóticas y células eucarióticas superiores cultivadas. Se prefieren las células bacterianas, particularmente células cultivadas de organismos grampositivos. Se prefieren especialmente células grampositivas de los géneros de Bacillus, tales como las que provienen de los grupos que consisten de Bacillus subtilis, Bacillus lentus, Bacillus brevis, Bacillus stearothermophilus, Bacillus alkalophilus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus coagulans, Bacillus circulans, Bacillus lautus, Bacillus thuringiensis, Bacillus licheniformis y Bacillus agaradherens, en particular Bacillus agaradherens. Las técnicas para manipular moléculas de ADN clonadas e introducir ADN exógeno en una variedad de células huéspedes se describen por Sambrook et al., Molecular Cloninq: A Laboratorv Manual, 2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989; Ausubel et al. (eds.), Current Protocols in Molecular Bioloqy, John Wiley and Sons, Inc., NY, 1987; y "Bacillus subtilis and Other Gram-Positive Bacteria", Sonensheim et al., 1993, American Society for Microbiology, Washington, D.C., las cuales se incorporan en la presente como referencia.

~ En general, una secuencia de ADN que codifica para una mananasa de la presente invención está unida operablemente a otros elementos genéticos necesarios para su expresión, que generalmente incluyen un promotor de transcripción y un terminador dentro de un vector de expresión. El vector también contendrá comúnmente uno o más marcadores seleccionables y uno o más orígenes de replicación, aunque aquellos expertos en la técnica reconocerán que dentro de ciertos sistemas se pueden proporcionar marcadores seleccionables sobre vectores separados y se puede proporcionar replicación del ADN exógeno por integración en el genoma de la célula huésped. La selección de los promotores, terminadores, marcadores seleccionables, vectores y otros elementos es una materia de diseño sistemático dentro del nivel de una persona habitualmente experta en la técnica. Muchos de tales elementos se describen en la literatura y están disponibles a través de proveedores comerciales. Para dirigir un polipéptido a la vía secretora de una célula huésped, se proporciona en el vector de expresión una secuencia de señal secretora (también conocida como una secuencia líder, secuencia prepro o secuencia pre). La secuencia de señal secretora puede ser la del polipéptido, o se puede derivar de otra proteína secretada o sintetizada de novo. Se conocen en la técnica numerosas secuencias de señal secretoras adecuadas y se hace referencia a "Bacillus subtilis and Other Gram-Positive Bacteria", Sonensheim et al., 1993, American Society for Microbiology, Washington, D.C., y Cutting, S. M. (eds). "Molecular Biological Methods for Bacillus", John Wiley and Sons, 1990, para descripción adicional de secuencias de señales secretoras adecuadas especialmente para secreción en una célula huésped de Bacillus. La secuencia de señal secretora se une a la secuencia de ADN en el marco de lectura correcto. Las secuencias de señal secretora se colocan comúnmente 5' respecto a la secuencia de ADN que codifica para el polipéptido de interés, aunque ciertas secuencias de señal pueden estar colocadas en otra parte en la secuencia de ADN de interés (véase, por ejemplo, Welch et al., Patente de los Estados Unidos número 5,037,743; Holland et al., Patente de los Estados Unidos número 5,143,830). Las células huéspedes transformadas o transfectadas se cultivan de acuerdo con procedimientos convencionales en un medio de cultivo que contiene los nutrientes y otros componentes necesarios para el crecimiento de las células huéspedes elegidas. Se conocen en la técnica diversos medios adecuados, que ¡ncluyen medios definidos y medios complejos, y que generalmente incluyen una fuente de carbono, una fuente de nitrógeno, aminoácidos esenciales, vitaminas y minerales. Los medios también pueden contener componentes tales como factores de crecimiento o suero, según se requiera. El medio de crecimiento generalmente se seleccionará para células que contienen ADN agregado exógenamente, mediante, por ejemplo, selección por medicamentos o deficiencia de un nutriente esencial el cual es complementado por el marcador seleccionable en el vector de expresión, o cotransfectado al interior de la célula huésped. ** -* f £ Aislamiento de proteínas: Cuando el polipéptido recombinante expresado es secretado, el polipéptido puede ser purificado del medio de crecimiento. Preferiblemente, las células huéspedes de expresión se remueven del medio antes de la purificación del polipéptido (por ejemplo por centrifugación). Cuando el polipéptido recombinante expresado no se secreta de la célula huésped, la célula huésped preferiblemente se rompe y el polipéptido es liberado al "extracto" acuoso el cual es la primera etapa de tales técnicas de purificación. Preferiblemente, las células huéspedes de expresión se recolectan del medio antes de la ruptura celular (por ejemplo por centrifugación). La ruptura celular se puede llevar a cabo por técnicas convencionales tales como digestión por lisozima o al obligar a las células a través de alta presión. Véase (Robert K. Scobes, Protein Purification, Segunda edición, Springer-Verlag) para descripción adicional de tales técnicas de ruptura de células. Ya sea que los polipéptidos recombinantes expresados (o polipéptidos quiméricos) se secreten o no, se pueden purificar utilizando métodos y medios de fraccionamiento y/o purificación convencionales. Se puede utilizar la precipitación con sulfato de amonio y la extracción de ácido o caotropo para fraccionamiento de muestras. Las etapas de purificación ejemplares pueden incluir hidroxiapatita, exclusión de tamaño, FPLC y cromatografía líquida de alta resolución de fase inversa. El medio de intercambio aniónico adecuado puede incluir dextranos derivatizados, agarosa, celulosa, poliacrilamida, sílices de especialidad y similares. Se prefieren los derivados PEÍ, DEAE, QAE y Q, prefiriéndose particularmente Sepharosa de flujo rápido DEAE (Pharmacia, Piscataway, NJ). Los medios cromatográficos ejemplares incluyen aquellos medios derivatizados con grupos fenilo, butilo u 5 octilo, tales como Phenyl-Sepharose FF (Pharmacia), Toyopearl butyl 650 (Toso Haas, Montgomeryville, PA), Octyl-Sepharose (Pharmacia) y similares, o resinas poliacrílicas tales como Amberchrom CG 71 (Toso Hass) y similares. Los soportes sólidos habituales incluyen esferas de vidrio, resinas basadas en sílice, resinas celulósicas, esferas de agarosa, esferas de agarosa reticuladas, 10 esferas de poliestireno, resina de poliacrilamida reticuladas y similares que son insolubles bajo condiciones a las cuales van a ser utilizadas. Estos soportes se pueden modificar con grupos reactivos que permiten la unión de las proteínas por grupos amino, grupos carboxilo, grupos sulfhidrilo, grupos hidroxilo y/o porciones de carbohidrato. Los ejemplos de química de acoplamiento incluyen 15 activación con bromuro de cianógeno, activación con N-hidroxisuccinimida, activación con epóxido, activación con sulfhidrilo, activación con hidrazida y derivados carboxilo y amino para química de acoplamiento con carbodiimida. Estos y otros medios sólidos son bien conocidos y utilizados ampliamente en la técnica, y están disponibles de proveedores comerciales. 20 La selección de un método particular es materia de diseño habitual y está determinada en partes por las propiedades del soporte que se elija. Véase, por ejemplo, Affinity Chromatography; Principies & Methods, Pharmacia LKB Biotechnology, Uppsala, Suecia, 1988.

Los polipéptidos de la invención o fragmentos de los mismos también se pueden preparar a través de síntesis química. Los polipéptidos de la invención pueden ser monómeros o multímeros; glicosilados o no glicosilados; pegilados o no pegilados; y pueden o no incluir un residuo aminoácido metionina inicial. En base en la información de secuencia descrita en la presente, una secuencia de ADN de longitud completa que codifica para una mananasa de la invención y que comprende la secuencia de ADN mostrada en la SEQ ID NO: 1 , por lo menos la secuencia de ADN desde la posición 97 a la posición 1029, se puede clonar. La clonación se realiza por procedimientos estándar conocidos en la técnica tales como por ejemplo, B preparar una biblioteca genómica a partir de una cepa de Bacillus, especialmente la cepa ß. agaradherens, NCIMB 40482; B sembrar en placa tal biblioteca en placas de sustrato adecuada; B identificar una clona que comprende una secuencia polinucleotídica de la invención por técnicas de hibridación estándar utilizando una sonda basada en la SEQ ID NO: 1 ; o mediante B identificación de una clona de la biblioteca genómica de Bacillus agaradherens NCIMB40482 mediante una estrategia de PCR inversa utilizando iniciadores basados en información de secuencia de la SEQ ID NO: 1. Se hace referencia a M.J. MCPherson et al., ("PCR A practical approach" Information Press Ltd, Oxford Inglaterra) para detalles adicionales respecto a PCR inversa.

Basado en la información de secuencia descrita en la presente (SEQ ID NO: 1 , SEQ ID NO: 2) es un trabajo de rutina para una persona experta en la técnica aislar secuencias polinucleotídicas homologas que codifiquen para mananasa homologa de la invención mediante una estrategia similar utilizando bibliotecas genómicas a partir de organismos microbianos relacionados, en particular de bibliotecas genónicas de otras cepas del género Bacillus tales como especies alcalofí cas de Bacillus. Alternativamente, el ADN que codifica para el mañano o la enzima que degrada galactomanano de la invención, de acuerdo con procedimientos bien conocidos, puede ser clonada convenientemente a partir de una fuente adecuada, tal como cualquiera de los organismos mencionados antes, mediante el uso de sondas oligonucleotídicas sintéticas preparadas en base en la secuencia de ADN que se puede obtener del plásmido presente en Escherichia coli DSM 12180. En consecuencia, la molécula polinucleotídica de la invención se puede aislar de Escherichia coli DSM 12180, en la cual se deposita el plásmido obtenido por clonación tal como el descrito antes. Además, la presente invención se relaciona con un cultivo biológico aislado y sustancialmente puro de la cepa Escherichia coli DSM 12180. En el presente contexto, se pretende que el término "preparación de enzima" signifique ya sea un producto de fermentación enzimático convencional, posiblemente aislado y purificado, a partir de una especie única de un microorganismo, tal preparación habitualmente comprende un número de actividades enzimáticas diferentes; o una mezcla de enzimas monocomponentes, preferiblemente enzimas derivadas de especies bacterianas o micóticas mediante el uso de técnicas recombinantes convencionales, enzimas las cuales se han fermentado y posiblemente aislado y purificado por separado y las cuales pueden originarse de especies diferentes, preferiblemente especies micóticas o bacterianas; o el producto de fermentación de un microorganismo el cual actúa como una célula huésped para la expresión de una mananasa recombinante, pero microorganismo el cual produce simultáneamente otras enzimas, por ejemplo enzimas que degradan pectina, proteasas o celulasas, que son productos de fermentación que se presentan naturalmente del microorganismo, es decir, el complejo de enzimas producido convencionalmente por el microorganismo correspondiente que se presenta de manera natural. En un método para producir la preparación de enzima de la invención, el método comprende cultivar un microorganismo, por ejemplo una cepa de tipo silvestre capaz de producir la mananasa bajo condiciones que permitan la producción de la enzima, y recuperar la enzima del cultivo. El cultivo se puede llevar a cabo utilizando técnicas de fermentación convencionales, por ejemplo el cultivo en matraces de agitación o fermentadores con agitación para asegurar aireación suficiente en un medio de crecimiento que induzca la producción de la enzima mananasa. El medio de crecimiento puede contener una fuente convencional de N tal como pectina, extracto de levadura o casaaminoácidos, una cantidad reducida de una fuente convencional de C como dextrosa o sacarosa y un inductor tal como goma guar o goma de algarrobo. La recuperación se puede llevar a cabo utilizando técnicas convencionales, por ejemplo separación de biomasa y sobrenadante por centrifugación o filtración, recuperación del sobrenadante o ruptura de células sin la enzima de interés es intracelular, tal vez seguido por purificación adicional como se describe en el documento EP 0 406 314 o por cristalización, como se describe en WO 97/15660.

Reactividad cruzada inmunológica Los anticuerpos policlonales para ser utilizados en la determinación de reactividad cruzada inmunológica se pueden preparar mediante el uso de una enzima mananasa purificada. Más específicamente, se puede generar antisuero contra la mananasa de la invención al inmunizar conejos (u otros roedores) de acuerdo con el procedimiento descrito por N. Axelsen et al. En: A Manual of Quantitative Immunoelectrophoresis, Blackwell Scientific Publications, 1973, capítulo 23 o bien A. Johnstone y R. Thorpe, Immunochemistry in Practice, Blackwell Scientific Publications, 1982 (más específicamente, páginas 27-31 ). Las inmunoglobulinas purificadas se pueden obtener de los antisueros, por ejemplo por precipitación salina ((NH )2SO4), seguido por diálisis y cromatografía de intercambio iónico, por ejemplo, en DEAE-Sephadex. La caracterización inmunoquímica de proteínas se puede realizar ya sea por análisis de difusión doble de Outcherlony (O. Ouchterlony en: Handook of Experimental Immunology (D.M. Weir, Ed.), Blackwell Scientific Publications, 1967, pp. 655-706), por inmunoelectroforesis cruzada (N. Axelsen et al., supra, capítulos 3 y 4) o por inminoelectroforesis instantánea (N. Axelsen et al., capítulo 2). Los ejemplos de bacterias útiles para producir la enzima o la preparación de enzima de la invención son bacterias grampositivas, preferiblemente de la subdivisión bacillus/Lactobacillus, preferiblemente una cepa del género Bacillus, de manera más preferible una cepa de Bacillus agaradherens, especialmente la cepa Bacillus agaradherens, NCIMB 40482. La presente invención incluye una mananasa aislada que tiene las propiedades descritas antes y la cual está libre de impurezas homologas, y se produce utilizando técnicas recombinantes convencionales.

Determinación de actividad catalítica (manu) de mananasa Ensayo calorimétrico: Sustrato: AZCL-galactomanano 0.2% (Megazyme, Australia) de algarrobo en amortiguador de glicina 0.1 M, pH 10.0.

El ensayo se lleva a cabo en un microtubo Eppendorf de 1.5 ml en un termomezclador con agitación y control de temperatura de 40°C. La incubación de 0.750 ml de sustrato con 0.5 ml de enzima durante 20 minutos, detención por centrifugación durante 4 minutos a 15,000 rpm. El color del sobrenadante se mide a 600 nm en una cubeta de 1 cm. Una ManU (unidades de mananasa) proporcionan 0.24 de abs en 1 cm.

Obtención de Bacillus agaradherens mananasa ncimb 40482 Cepa Bacillus agaradherens NCIMB 40482 comprende la secuencia de ADN que codifica para la enzima mananasa. Cepa de E. coli: Células de . coli SJ2 (Diderichsen, B., Wedsted, U., Hedegaard, L., Jensen, B. R. Sjoholm, C, (1990) que se clonan de aldB, el cual codifica para alfa-acetolactato descarboxilasa, una exoenzima de Bacillus brevis. J. Bacteriol., 172, 4315-4321 ), se prepara para, y se transforma por electroporación utilizando un electroporador Gene PulserMR de BIO-RAD, como se describe por el proveedor. B. subtilis PL2306. La cepa es B. subtilis DN1885 comn genes rotos apr y npr (Diderichsen, B., Wedsted, U., Hedegaard, L., Jensen, B. R., SjTholm, C. (1990). La clonación de aldB, la cual codifica para alfa-acetolactato descarboxilasa, una exoenzima de Bacillus brevis. J. Bacteriol., 172, 4315-4321 ) interrumpida en la unidad transcripcional del gen de célulasa de Bacillus subtilis conocido, lo que resulta en células negativas de celulasa. Esta ruptura se realiza esencialmente como se describe en (Eds., A.L. Sonenshein, J.A. Hoch y Richard Losick (1993) Bacillus subtilis and other Gram-Positive Bacteria, American Society for microbiology, p. 618. Las células competentes se preparan y transforman como se describe por Yasbin, R.E., Wilson, G.A. y Young, F.E. (1975) Transformation and transfection in lysogenic strains of Bacillus subtilis: evidence for selective induction of prophage in competent cells. J. Bacteriol, 121 :296-304.

Plásmidos pSJ1678 (como se describe con detalle en WO 94/19454, la cual se incorpora como referencia en su totalidad). pMOL944: Este plásmido es un derivado de pUB110 que contiene esencialmente elementos que hacen al plásmido propagable en Bacillus subtilis, gen de resistencia a kanamicina y que tiene un promotor fuerte y un péptido señal clonado a partir del gen amyL de B. licheniformis ATCC14580. El péptido señal contiene un sitio Sacll lo que lo vuelve conveniente para clonar el ADN que codifica para la parte madura de una proteína en fusión con el péptido señal. Esto resulta en la expresión de una pre-proteína la cual se dirige hacia el exterior de la célula. El plásmido se construye por medio de técnicas de ingeniería genética convencional las cuales se describen brevemente en lo siguiente.

Construcción de pMOL944: Se digiere el plásmido pUB110 (McKenzie, T. et al., 1986, Plasmid 15:93-103) con la enzima de restricción única Ncil. Un fragmento de PCR amplificado del promotor amyL codificado en el plásmido pDN1981 (P.L.

Jorgensen et al., 1990, Gene, 96, p 37-41 ) se digiere con Ncil y se inserta en Ncil digerido con pUB110 para proporcionar el plásmido pSJ2624. Los dos iniciadores de PCR utilizados tienen las siguientes secuencias: #LWN5494 5'- GTCGCCGGGGCGGCCGCTATCAATTGGTAACTGTATCTCAGC-3' #LWN5495 5'- GTCGCCCGGGAGCTCTGATCAGGTACCAAGCTTGTCGACCTGCAGAA TGAGGCAGCAAGAAGAT-3' El iniciador "LWN5494 inserta un sitio Notl en el plásmido. El plásmido pSJ2624 después se digiere con Sacl y Notl y se digiere un fragmento nuevo de PCR amplificado sobre el promotor amyL codificado en pDN1981 con Sacl y Notl y este fragmento de ADN se inserta en pSJ2624 digerido con Sacl-Notl para proporcionar el plásmido pSJ2670. Esta clonación sustituye al primer promotor amyL que se clona con el mismo promotor pero en la dirección opuesta. Los dos iniciadores utilizados para amplificación por PCR tienen las siguientes secuencias: #LWN5938 5'- GTCGGCGGCCGCTGATCACGTACCAAGCTTGTCGACCTGCAGAATG AGGCAGCAAGAAGAT-3' #LWN5939 5'-GTCGGAGCTCTATCAATTGGTAAGTGTATCTCAGC-3' El plásmido pSJ2670 se digiere con las enzimas de restricción Pstl y Bell y se digiere un fragmento de PCR amplificado a partir de la secuencia de ADN clonada que codifica para la amilasa alcalina SP722 (descrita en la solicitud para Patente Internacional publicada como WO95/26397 la cual se incorpora en la presente como referencia en su totalidad), con Pstl y Bell, y se inserta para proporcionar el plásmido pMOL944.

Los dos iniciadores utilizados para amplificación por PCR tienen la siguiente secuencia: #LWN7864 5'-AACAGCTGATCACGACTGATCTTTTAGCTTGGCAC-3' #LWN7901 5'-AACTGCAGCCGCGGCACATCATAATGGGACAAATGGG-3' El iniciador #LWN7901 inserta un sitio Sacll en el plásmido.

Clonación del gen de mananasa de Bacillus aqaradherens Preparación de ADN qenómico: La cepa de Bacillus agaradherens NCIMB 40482 se propaga en medio líquido como se describe en WO94/01532. Después de 16 horas de incubación a 30°C y 300 rpm, las células se cosechan y el ADN genómico aislado por el método descrito por Pitcher et al. (Pitcher, D. G., Saunders, N. A., Owen, R. J. (1989) Rapid extraction of bacterial genomic DNA with guanidium thiocyanate. Lett. Appl. Microbiol., 8, 151-156).

Construcción de una biblioteca qenómica: El ADN genómico se digiere parcialmente con enzima de restricción Sau3A, y se fracciona por tamaño mediante electroforesis en gel de agarosa 0.7%. Los fragmentos entre 2 y 7 kb de tamaño se aislan electroforesis en papel de DEAE-celulosa (Dretzen, G., Bellard, M., Sassone-Corsi, P., Chambón, P. (1981 ) A reliable method for the recovery of DNA fragments from agarose and acrylamide gels. Anal. Biochem., 112, 295-298). Los fragmentos de ADN aislados se ligan a ADN plasmídico pSJ1678 digerido con BamHl y la mezcla de ligación se utiliza para transformar E. coli sJ2.

Identificación de las clonas positivas: Una biblioteca de ADN en E. coli construida como se describe antes, se analiza en placas de agar LB que contiene AZCL-galactomanano 0.2% (Megazyme) y 9 µg/ml de cloramfenicol y se incuba durante la noche a 37°C. Las clonas que expresan actividad de mananasa aparecen con halos de difusión azules. Se aisla en ADN plasmídico de una de estas clonas por preparaciones giratorias de plásmido Qiagen sobre 1 ml de caldo de cultivo durante la noche (las células se incuban a 37°C en TY con 9 µg/ml de cloramfenicol y se agitan a 250 rpm). Esta clona (MB525) está caracterizada además por secuenciado de ADN del fragmento de ADN Sau3A clonado. El secuenciado de ADN se lleva a cabo mediante corrida de iniciador, utilizando el equipo de secuenciado de ciclo desoxi-terminal Taq (Perkin-Elmer, EUA), terminadores etiquetados fluorescentes y oligonucleótidos apropiados como iniciadores. El análisis de los datos de secuencia se realiza de acuerdo con Devereux et al. (1984) Nucleic Acids Res. 12, 387-395. La secuencia que codifica para mananasa se muestra en la SEQ ID NO: 1. La secuencia de proteínas derivada se muestra en la SEQ ID NO: 2.

Subclonación y expresión de mananasa en B. subtilis: La secuencia de ADN que codifica para mananasa de la invención se amplifica por PCR utilizando el conjunto de iniciadores de PCR que consisten de estos oligonucleótidos: Mananasa.superior.Sacll 5'-CAT TCT GCA GCC GCG GCA GCA AGT ACÁ GGC TTT TAT GTT GAT GG-3' Mananasa. inferior.Notl 5'-GAC GAC GTA CAÁ GCG GCC GCG CTA TTT CCC TAA CAT GAT GAT ATT TTC G-3' Los sitios de restricción Sacll y Notll están subrayados. El ADN cromosómico aislado de ß. agaradherens NCIMB 40482 como se describe antes se utiliza como plantilla en una reacción de PCR utilizando ADN polimerasa Amplitaq (Perkin Elmer) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. La reacción de PCR se establece en amortiguador PCR (Tris-HCl 10 mM, pH 8.3, KCl 50 mM, MgCI2 1.5 mM, 0.01% (p/v) de gelatina) que contiene 200 µM de cada uno de dNTP, 2.5 unidades de AmpliTaq polimerasa (Perkin-Elmer, Cetus, EUA) y 100 pmol de cada iniciador. La reacción de PCR se realiza utilizando un ciclador térmico de ADN (Langraf, Alemania). Una incubación a 94°C durante 1 minuto seguido por treinta ciclos de PCR realizados utilizando un perfil de ciclo de desnaturalización a 94°C durante 30 seg recocido a 60°C durante 1 min y extensión a 72°C durante 2 min. Se analizan por electroforesis alícuotas de 5 µl del producto de amplificación, en geles de agarosa 0.7% (NuSieve, FMC). La aparición de un fragmento de ADN con un tamaño de 1.4 kb indica la amplificación apropiada del segmento del gen.

Subclonación del fragmento de PCR. Se purifican alícuotas de 45 µl de los productos de PCR generados como se describe antes, utilizando el equipo de purificación para PCR QIAquick (Qiagen, EUA), de acuerdo con las instrucciones del fabricante. El ADN purificado se eluye en 50 µl de Tris-HCl 10 mM, pH 8.5. Se digieren 5 µg de pMOL944 y 25 µl del fragmento de PCR purificado con Sacll y Notl, se someten a electroforesis en 0.8% de geles de agarosa que gelifican a baja temperatura (SeaPlaque GTC, FMC), los fragmentos relevantes se cortan de los geles y se purifican utilizando el equipo de extracción de gel QIAquick (Qioagen, EUA) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. El fragmento de ADN aislado por PCR después se liga a pNOL944 digerido con Sacll-Notl y purificado. La ligación se realiza durante la noche a 16°C utilizando 0.5 µg de cada fragmento de ADN, 1 U de ADN ligasa T4 y amortiguador de ligasa T4 (Boehringer Mannheim, Alemania). La mezcla de ligación se utiliza para transformar ß. subtilis PL2306 competente. Las células transformadas se siembran en placa sobre placas de LBPG-10 µg/ml de kanamicina. Después de 18 horas de incubación a 37°C, las colonias se observan sobre las placas. Se analizan varias clonas por aislamiento de ADN plasmídico a partir de caldo de cultivo durante la noche.

Una de tales clonas positivas se vuelve a sembrar varias veces en placas de agar como se utiliza antes, esta clona se denomina MB594. La clona MB594 se hace crecer durante la noche en TY-10 µg/ml de kanamicina a 37°C y al siguiente día 1 ml de células se utilizan para ailsar el plásmido a partir de células que utilizan el equipo Qiaprep Spin Plasmid Miniprep #27106 de acuerdo con las recomendaciones del fabricante para preparaciones de plásmido de B. subtilis. Este ADN es sometido a secuenciado de ADN y muestra la secuencia de ADN que corresponde a la parte madura de la mananasa, es decir, las posiciones 94-1404 de la SEQ ID NO: 3 anexa. La proteína madura derivada se muestra en la SEQ ID NO: 4. Aparecerá que el extremo 3' de la mananasa codificada por la secuencia de la SEQ ID NO: 1 ha cambiado a una mostrada en la SEQ ID NO: 3 debido al diseño del iniciador inferior utilizado en la PCR. En la SEQ ID NO:4 se muestra la secuencia resultante de aminoácidos, y es evidente que la parte C terminal de la SEQ ID NO: 2 (SHHVREIGVQFSAADNSSGQTALYVDNVTLR) cambia a la parte C terminal de la SEQ ID NO: 4 (IIMLGK).

Medios: TY (como se describe en Ausubel, F. M. et al. (eds) "Current protocols in Molecular Biology". John Wiley and Sons, 1995). Agar LB (como se describe en Ausubel, F. M. et al. (eds.) "Current protocols in Molecular Biology". John Wiley and Sons, 1995). LBPG es agar LB (véase antes) suplementado con glucosa 0.5% y fosfato de potasio 0.05 M, pH 7.0. El medio BPX es como se describe en el documento EP 0 506 780 (WO 91/09129).

Expresión, purificación y caracterización de mananasa a partir de Bacillus aaaradherens La clona MB 594 obtenida como se describe antes bajo materiales y métodos se hace crecer en 25 x 200 ml de medio BPX con 10 µg/ml de kanamicina en dos matraces de agitación con deflectores de 500 ml, durante 5 días a 37°C, a 300 rpm. Se recolectan 6500 ml del fluido de cultivo del matraz de agitación de la clona MB 594 (lote #9813) y se ajusta el pH a 5.5. Se agregan 146 ml de agente catiónico (C521) y 292 ml de agente aniónico (A130) durante la agitación, para floculación. El material floculado se separa por centrifugación utilizando una centrífuga Sorval RC 3B a 9000 rpm durante 20 min a 6°C. El sobrenadante se aclara utilizando filtros de vidrio Whatman GF/D y C y finalmente se concentra en un filtro con un corte o umbral de 10 kDa. Una cantidad de 750 ml de este concentrado se ajustan a pH 7.5 utilizando hidróxido de sodio. La solución transparente se aplica a cromatografía de intercambio aniónico utilizando una columna de 900 ml de Q- Sepharose equilibrada con 50 mmoles de Tris, pH 7.5. La actividad de mananasa unida se eluye utilizando un gradiente de cloruro de sodio. A la enzima pura se le proporciona una banda única en SDS- PAGE con un peso molecular de 38 kDa. En la SEQ ID NO: 2 se muestra la secuencia de aminoácidos de la enzima mananasa, es decir, la secuencia de ADN traducida.

Determinación de las constantes cinéticas: Sustrato: Goma de algarrobo (carob) y análisis de azúcares reductores (PHBAH).

Goma de algarrobo de Siqma (G-0753). La determinación cinética utilizado concentraciones diferentes de goma de algarrobo e incubación durante 20 min a 40°C a pH 10, proporciona: Kcat: 467 por segundo Km: 0.08 gramos por I Peso molecular: 38 kDa pl (punto isoeléctrico): 4.2 Se encuentra que la temperatura óptima de la mananasa es de 60°C. El perfil de actividad de pH muestra su actividad máxima entre el pH 8 y 10. La calorimetría de exploración diferencial DSC proporciona 77°C como punto de pulsión a pH 7.5 en amortiguador Tris, lo que indica que esta enzima es muy termoestable. La compatibilidad detergente utilizando AZCL-galactomanano 0.2% a partir de algarrobo, sustrato e incubación como se describe antes a 40°C muestra excelente capacidad de compatibilidad con detergentes líquidos convencionales y buena compatibilidad con detergentes en polvo convencionales.

Obtención de mananasa 168 de bacillus subtilisis La ß-mananasa de Bacillus subtilis se caracteriza y purifica como sigue: Se analiza el genoma de Bacillus subtilis para determinar homología con una secuencia de gen de ß-mananasa de Bacillus sp conocida (Mendoza et al., Biochemica et Biophysica Acta 1243:552-554, 1995). La región codificante de ydhT, cuyo producto se desconoce, muestra 58% de similitud con la ß-mananasa de Bacillus conocida. Se diseñaron los siguientes oligonucleótidos para amplificar las secuencias que codifican para la porción madura de la ß-mananasa putativa: 5'-GCT CAÁ TTG GCG CAT ACT GTG TCG CCT GTG-3' y 5'-GAC GGA TCC CGG ATT CAC TCA ACG ATT GGC G- 3'. Se utiliza el ADN genómico total de Bacillus subtilis cepa 1A95 como una plantilla para amplificar la región madura de ydhT utilizando los iniciadores mencionados antes. Se realiza PCR utilizando el equipo para PCR GENE-AMP con ADN polimerasa AMPLITAQ (Perkin Elmer, Applied Biosystems, Foster City, CA). Un período de fusión inicial a 95°C durante 5 min es seguido por 25 ciclos del siguiente programa: fusión a 95°C durante 1 min, reasociación a 55°C durante 2 min, y extensión a 72°C durante 2 min. Después de este último ciclo, la reacción se mantiene a 72°C durante 10 min hasta completar la extensión. Los productos de PCR se purifican utilizando equipo de purificación de PCR QIAquick (Qiagen, Chatsworth, CA). La región madura amplificada de ydhT de Bacillus subtilis cepa 1A95 se inserta en el vector de expresión pPG1524 (descrito previamente) como sigue. Un fragmento amplificado de 1028 pb se difiere con Mfel y BamHl. El vector de expresión pPG1527 se dirige con EcoR I y BamH I. Los productos de restricción se purifican utilizando el equipo de purificación para PCR QIAqick (Qiagen, Chatsworth, CA). Los dos fragmentos de ligan utilizando ADN ligasa T4 (13 h, 16°C) y se utilizan para transformar E. coli cepa DH5-a competente. Se cultivan las colonias resistentes a ampicilina para preparaciones de ADN. El ADN se caracteriza posteriormente por análisis de restricción. El plásmido pPG3200 contiene la región madura del gen ydhT. El plásmido pPG3200 después se utiliza para transformar Bacillus subtilis cepa PG 632 competente (Saunders et al., 1992). Se toman siete clonas resistentes a kanamicina de Bacillus subtilis y una clona pG 632 control, y se hacen crecer en 20 ml de medio 20/20/5 (20 g/l de triptona, 20 g/l de extracto de levadura, 5 g/l de NaCI) suplementado con 1 ml de maltrin 25%, 120 µl de MnCI2 10 mM y 20 µl de 50 mg/ml de kanamicina. Las clonas se hacen crecer durante la noche en matraces de agitación con deflectores de 250 ml a 250 rpm a 37°C para expresión de la proteína. Las células se hacen girar a 14,000 rpm durante 15 minutos. Se diluye 1 µl de cada sobrenadante en 99 µl de acetato de sodio 50 mM (pH 6.0). Se realiza el ensayo de 1 µl de esta dilución utilizando las pastillas de endo-1 ,4-ß-mananasa Beta-Mannazyme (Megazyme, Irlanda) de acuerdo con las instrucciones de los fabricantes. La absorbancia se lee a 590 nm en un espectrofotómetro Beckman DU640. La clona 7 muestra la absorbancia más elevada de 1.67. El control PG632 no muestra absorbancia a 590 nm. El sobrenadante se analiza por SDS-PAGE en un gel de Tris-glicina 10-20% (Novex, San Diego, Ca) para confirmar el tamaño esperado de proteína de 38 kDa. Las muestras se preparan como sigue. Se precipita una muestra de 500 µl de ydhT clona 7 y sobrenadantes de PG 632 con 55.5 µl de ácido tricloroacético 100% (Sigma), se lava con 100 µl de tricloroacético 5%, se resuspende en 50 µl de amortiguador de muestras de Tris-glicina SDS (Novex) y se somete a ebullición durante 5 minutos. Se someten a electroforesis 1 µl de cada muestra en un gel a 30 mA durante 90 minutos. Se observa una banda grande de proteína que corre a 38 kDa para ydhT clona 7. Se realiza una fermentación de 10 I de Bacillus subtilis ydhT clona 7 en un fermentador B. Braun Biostat C. Las condiciones de fermentación son como sigue. Se hacen crecer células durante 18 h en un medio rico similar a 20/20/5 a 37°C. Al final de la corrida de fermentación, las células se remueven y el sobrenadante se concentra a 1 litro utilizando un sistema de filtración de flujo tangencial. El rendimiento final de ß-mananasa en el sobrenadanente concentrado se determina que es de 3 g/l. La purificación de la ß-mananasa a partir del sobrenadante de fermentación se realiza como sigue: se centrifugan 500 ml de sobrenadante a 10,000 rpm durante 10 min a 4°C. El sobrenadante centrifugado se dializa después durante la noche a 4°C en dos cambios de 4 I de fosfato de potasio 10 mM (pH 7.2) a través de un Spectrapor con una membrana de límite de 12,000-14,000 de peso molecular (Spectrum). El sobrenadante dializado se centrifuga a 10,000 rpm durante 10 min a 4°C. Una columna de intercambio aniónico de 200 ml de flujo rápido de Q-Sepharose (Pharmacia) se equilibra con 1 litro de fosfato de potasio 10 mM (pH 7.2) a 20°C y se cargan 300 ml de sobrenadante en la columna. Se recolectan dos fracciones de flujo pasante de 210 ml (muestra A) y 175 ml (muestra B). Las dos fracciones se ensayan como antes, excepto que las muestras se diluyen con 199 µl de acetato de sodio 50 mM (pH 6.0) y muestran absorbancia de 0.38 y 0.52, respectivamente. Se agregan 2 µl de cada muestra a 8 µl de amortiguador de muestra de SDS Tris-glicina (Novex, CA) y se somete a ebullición durante 5 min. Las muestras resultantes se someten a electroforesis en un gel de Tris-glicina 10-20% (NOvex, Ca) a 30 mA durante 90 minutos. Una banda principal que corresponde a 38 kDa está presente en cada muestra y comprende más de 95% de la proteína total. Se realiza un ensayo de proteína BCA (Pierce) en ambas muestras, de acuerdo con las instrucciones del fabricante, utilizando albúmina sérica bovina como estándar. Las muestras A y B contienen 1.3 mg/ml y 1.6 mg/ml de ß-mananasa, respectivamente. La identidad de la proteína se confirma por espectrometría de masas de aspersión de iones y análisis de secuencia de aminoácidos terminales. Se utilizan las muestras de ß-mananasa purificadas para caracterizar la actividad de las enzimas como sigue. Todos los ensayos utilizan tabletas de endo-1 ,4-ß-mananasa Beta-Mannazyme (Megazyme, Irlanda) como se describe anteriormente. La actividad a un intervalo de pH de 3.0-9.0 se realiza en amortiguador de citrato y fosfato 50 mM, para determinación de actividad a pH 9.5, se utiliza CAPSO 50 mM (Sigma) y para un intervalo de pH 10.0-11.0, se utiliza amortiguador CAPS 50 mM. Se encuentra que el pH óptimo para la ß-mananasa de Bacillus subtilis es de pH 6.0-6.5. Se realizan perfiles de actividad de temperatura en amortiguador de citrato fosfato 50 mM (pH 6.5). La enzima muestra actividad óptima a 40-45°C. La ß-mananasa de Bacillus subtilis retiene actividad significativa en menos de 15°C y más de 80°C. La actividad específica contra ß-1 ,4-ß-galactomanano se determina que es de 160,000 µmol/min.mg de ß-mananasa utilizando las tabletas endo-1 ,4-ß-mananasa de Beta-Mannazyme (Megazyme, Irlanda) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Las secuencias nucleotídica y de aminoácidos de ß-mananasa de Bacillus subtilisis se muestran en la SEQ ID NO: 5 y 6. La mananasa se incorpora en las composiciones de la invención preferiblemente a un nivel de 0.0001 % a 2%, de manera más preferible de 0.0005% a 0.1 %, y de manera mucho más preferible de 0.001% a 0.02% de enzima pura por peso de la composición. La enzima de la invención, además para el núcleo de enzima que comprende el dominio catalítico, también comprende un dominio de unión a celulosa (CBD), el dominio de unión a celulosa y el núcleo de enzima (el dominio catalíticamente activo) de la enzima están unidos operablemente. El dominio de unión a celulosa (CBD) puede existir como parte integral de la enzima codificada, o un CBD de otro origen se puede introducir en la enzima y crear de esta manera una enzima híbrida. En este contexto, se pretende que el término "dominio de unión a celulosa" signifique lo que ha sido definido por Peter Tomme et al. "Cellulose-Binding Domains: Classification and Properties" en "Enzymatic Degaration of Insoluble Carbohydrates", John N. Saddler and Michael H. Penner (Eds.), ACS Symposium Series, No. 618, 1996. Esta definición clasifica más de 120 dominios de unión a celulosa en 10 familias (l-X) y demuestra que los CBD se encuentran en diversas enzimas tales como celulasas, xilanasas, mananasas, arabinofuranosidasas, acetilesterasas y quitinasas. Los CBD también se han encontrado en algas, por ejemplo en algas rojas Porphyra purpurea como proteína que une polisacáridos no hidrolítica, véase Tomme et al., op.cit. Sin embargo, la mayor parte de los CBD son de celulasas y xilanasas, los CBD se encuentran en las partes N y C de proteínas o son internos. Se conocen híbrido de enzima en la técnica, véase, por ejemplo, WO 90/00609 y WO 95/16782, y se pueden preparar por transformación en una célula huésped una construcción de ADN que comprende por lo menos un fragmento de ADN que codifica para el dominio de unión a celulosa unido, con o sin un enlazador, a una secuencia de ADN que codifica para la enzima mananasa y hacer crecer la célula huésped para que exprese el gen fusionado. Las enzimas híbridas se pueden describir por la siguiente fórmula: CBD - MR - X en donde CBD es la región N terminal o C terminal de una secuencia de aminoácidos que corresponde a por lo menos el dominio de unión a celulosa; MR es la región media (el enlazador) y puede ser un enlace, o un grupo de enlace corto preferiblemente de aproximadamente 2 a aproximadamente 100 átomos de carbono, de manera más preferible de 2 a 40 átomos de carbono; o de manera mucho más preferible de aproximadamente 2 a aproximadamente 100 aminoácidos, de manera mucho más preferible de 2 a 40 aminoácidos; y X es una región N terminal o C terminal de la enzima de la invención. Las enzimas mencionadas antes pueden ser de cualquier origen adecuado, tales como de origen vegetal, animal, bacteriano, micótico y de levadura. El origen puede ser además mesofílico o extremofílico (psicrofílico, psicotrofíco, termofílico, barofílico, alcalofílico, acidofílico, halofílico, etc.). Se pueden utilizar formas purificadas o no purificadas de estas enzimas. Actualmente, es una práctica común modificar enzimas de tipo silvestre por medio de técnicas de ingeniería de proteínas/ingeniería genética con el fin de optimizar su eficiencia de funcionamiento en composiciones detergentes y/o para el cuidado de las telas de la invención. Por ejemplo, las variantes se pueden diseñar de manera que se incremente la compatibilidad de la enzima con los ingredientes encontrados comúnmente en tales composiciones. Alternativamente, se puede diseñar una variante de manera que el pH óptimo, el blanqueado, la estabilidad quelatador, la actividad catalítica y similar de la variante de enzima se adapte para adecuarse a una aplicación de limpieza particular. 5¡ En particular, la atención se debe enfocar en los aminoácidos sensibles a oxidación en el caso de estabilidad de blanqueo y sobre cargas de superficie para la compatibilidad de tensioactivo. El punto isoeléctrico de tales enzimas se puede modificar por la sustitución de algunos aminoácidos cargados, por ejemplo un incremento en el punto isoeléctrico puede ayudar a mejorar la compatibilidad con agentes tensioactivos aniónicos. La estabilidad de las enzimas se puede mejorar adicionalmente por la creación de, por ejemplo, puentes salinos adicionales y refuerzos de sitios de ¡ón metálico para incrementar la estabilidad quelatador.

Agentes tensioactivos catiónicos El segundo elemento esencial de la presente invención es un agente tensioactivo catiónico. Los agentes tensioactivos catiónicos preferidos son aquellos que tienen un grupo hidrocarbilo de cadena larga que incluye a los agentes tensioactivos de amonio y sus derivados etoxilados. Los ejemplos preferidos de tales agentes tensioactivos catiónicos incluyen los agentes tensioactivos de amonio tales como halogenuros de alquiltrimetilamonio y aquellos agentes tensioactivos que tienen la fórmula: [R2(OR3)y][R4(OR3)y]2R5N+X-en donde R es un grupo alquilo o alquilbencilo que tiene desde aproximadamente 8 hasta aproximadamente 18 átomos de carbono en la cadena alquilo, cada R3 se selecciona del grupo que consiste de -CH2-CH2-, - CH2CH(CH3)-, -CH2CH(CH2OH)-, -CH2CH2CH2-, y mezclas de los mismos; cada R se selecciona del grupo que consiste de alquilo de C?-C4, hidroxialquilo de C?-C , estructuras de anillo bencilo formadas por la unión de dos grupos R4, -CH2CHOH-CHOHCOR6CHOHCH2OH en donde R6 puede ser cualquier hexosa o polímero de hexosa que tenga un peso molecular menor de aproximadamente 1000, e hidrógeno cuando y no es 0; R5 es igual que R4 o es una cadena alquilo en donde el número total de átomos de carbono de R2 más R5 es no mayor de aproximadamente 18; cada y es de 0 a aproximadamente 10 y la suma de los valores de y es 0 a aproximadamente 15; y x es cualquier anión compatible. Los agentes tensioactivos de amonio cuaternarios adecuados para la presente invención tienen la fórmula (I): Fórmula I en donde R1 es un alquilo (C6-C10) de longitud de cadena corta o alquilamidoalquilo de la fórmula (II): Fórmula II y es 2-4, preferiblemente 3. en donde R2 es H o un alquilo de C1-C3, en donde x es 0-4, preferiblemente 0-2, de manera más preferible 0, en donde R3, R4 y R5 son iguales o diferentes y pueden ser cualquiera de un alquilo (C1-C3) de cadena corta o alquilo alcoxilado de la fórmula lll, en donde X" es un contraión, preferiblemente haluro, por ejemplo cloruro o metilsulfato.

Re H UU-o Fórmula lll R6 es C?-C y z es 1 ó 2. Los agentes tensioactivos de amonio cuaternario preferidos son aquellos como se definen en la fórmula I en donde R-i es Cs, Cío o mezclas de los mismos, x = o, R3, R4 = CH3 y R5 = CH2CH2OH Los agentes tensioactivos catiónicos altamente preferidos con compuestos de amonio cuaternarios solubles en agua útiles en la presente composición que tienen la fórmula: R?R2R3R4N+X" (i) en donde Ri es alquilo de Cß-Ciß, cada uno de R2, R3 y R es independientemente alquilo de C-?-C4, hidroxialquilo de C?-C , bencilo y -(C2H o)xH en donde x tiene un valor de 2 a 5 y X es un anión. Como máximo uno de R2, R3 o R4 puede ser bencilo. La longitud de cadena alquilo preferida para R-t es C12-C15, particularmente cuando el grupo alquilo es una mezcla de longitudes de cadena derivadas de grasa de semilla de coco o de palma o se deriva sintéticamente por acumulación de olefina o síntesis de alcoholes OXO. Los grupos preferidos para R2, R3 y R son grupos metilo e hidroxietilo y el anión X se puede seleccionar de iones haluro, metosulfato, acetato y fosfato. Los ejemplos de compuestos de amonio cuaternarios adecuados de fórmulas (i) para uso en la presente son: cloruro o bromuro de trimetilamonio de coco; cloruro o bromuro de metildihidroxietilamonio de coco; cloruro de decíltrietilamonio; cloruro o bromuro de decildimetilhidroxietilamonio; cloruro o bromuro de dimetil(C?2-i5)hidroxietilamonio; cloruro o bromuro de dimetilhidroxietilamonio de coco; metilsulfato de miristiltrimetilamonio; cloruro o bromuro de laurildimetilbencilamonio; cloruro o bromuro de laurildimetil(etenoxi)4 amonio; esteres de colina (compuestos de fórmula (i) donde Ri es C 12 - 14 CH2CH2-O-C-alquilc de y R2, R3 y R4 son metilo). dialqy imidazolinas [compuestos de fórmula (i)]. Otros agentes tensioactivos catiónicos útiles en la presente también se describen en la Patente de los Estados Unidos 4,228,044, Cambre, otorgada el 14 de octubre de 1980 y en la Solicitud para Patente Europea EP 000,224. Los componentes de agentes tensioactivos catiónicos/suavizante de telas típicos incluyen las sustancias activas suavizantes de telas de amonio cuaternario insolubles en agua o sus precursores de amina correspondientes, el más comúnmente utilizado ha sido cloruro o metilsulfato de di-alquilo de cadena larga amonio. Los suavizantes catiónicos monoalquilo preferidos entre estos ¡ncluyen a los siguientes: 1 ) cloruro de esterarilbencildimetilamonio; 2) cloruro de sebo trimetilamonio; 3) cloruro de sebo hidrogenado trimetilamonio; 4) cloruro de alquil de C12-14 hidroxietildimetil-amonio; 5) cloruro de alquilo de C12-18 dihidroxietilmetil-amonio. Los agentes tensioactivos catiónicos más preferidos para el propósito de la presente invención son cloruro de alquil de C12-14 y C8-11 hidroxietildimetilamonio. También son adecuados suavizantes catiónicos de dialquilo entre estos se incluyen a los siguientes: 1 ) cloruro de disebodimetilamonio (DTDMAC); 2) cloruro de sebo dihidrogenado dimetilamonio; 3) metilsulfato de sebo dihidrogenado dimetilamonio; 4) cloruro de diesterarildimetilamonio; 5) cloruro de dioleildimetilamonio; 6) cloruro de dipalmitilhidroxietilmetilamonio; 7) cloruro de diestearoiletiloxidimetilamonio (DSOEDMAC); 8) cloruro de di(sebo-oxi-etil)dimetilamon¡o; 9) metilsulfato de disebo imidazolinio; 10) metilsulfato de 1-(2-seboilamidoetil)-2-seboilimidazolinio. Cuando se incluyen en la presente, las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención típicamente comprenden de 0.2% a aproximadamente 25%, de manera preferible de aproximadamente 1% a aproximadamente 8% en peso de tales agentes tensioactivos catiónicos.

Componentes detergentes Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la invención deben contener por lo menos un componente detergente adicional.

La naturaleza precisa de este componente adicional y los niveles de incorporación del mismo dependerán de la forma física de la composición y la naturaleza de la operación de limpieza para la cual se van a usar. Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención preferiblemente comprenden además un ingrediente detergente que se selecciona de otros agentes tensioactivos especialmente un agente tensioactivo aniónico, preferiblemente un sulfato y/o sulfonato de alquilo y/o un agente tensioactivo no iónico tal como un agente tensioactivo no iónico etoxilado de alquilo con una longitud de cadena de C8 a C20, preferiblemente C12 a C16, y un grado de etoxilación de 2 a 9, preferiblemente de 3 a 7 y/o un agente tensioactivo de alquilmetilglucamida con una longitud de cadena alquilo de C8 a C20, preferiblemente de C12 a C18. Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de acuerdo con la invención pueden ser líquidos, pastas, geles, barras, tabletas, aspersiones, espumas, polvos o granulares. Las composiciones granulares también pueden estar en forma "compacta" y las composiciones líquidas también pueden estar en una forma "concentrada". En una modalidad preferida, la presente invención se relaciona con una composición detergente de lavandería que comprende una mananasa y un componente catiónico (Ejemplos 1-5). En una segunda modalidad, la presente invención se relaciona con composiciones detergente para lavado de trastes o detergentes caseros (Ejemplos 6-8). Las composiciones de la invención pueden formularse, por ejemplo, para composiciones de lavado de trastes a mano, composiciones detergentes para lavandería a mano o a máquina que incluyen composiciones aditivas de lavandería y composiciones adecuadas para uso en el enjuagado y/o pretratamiento de telas teñidas y composiciones para uso en operaciones de limpieza de superficies duras caseras en general. Cuando se formulan como composiciones para uso en métodos de lavado de trastes manual, las composiciones de la invención preferiblemente contendrán un agente tensioactivo y preferiblemente otros compuestos detergentes que se seleccionan de compuestos poliméricos orgánicos, agentes que mejoran el espumado, iones metálicos del grupo II, solventes, hidrotropos y enzimas adicionales. Cuando se formulan como composiciones adecuadas para uso en un método de lavado en una máquina de lavandería, las composiciones de la invención preferiblemente contiene tanto un agente tensioactivo como un compuesto aditivo y de manera adicional uno o más componentes detergentes que se seleccionan preferiblemente de compuestos poliméricos orgánicos, agentes blanqueadores, enzimas adicionales, supresores de espumado, dispersantes, dispersantes de cal-jabón, suspensiones para la suciedad y agentes que evitan la redeposición e inhibidores de la corrosión. Las composiciones de lavandería también pueden contener agentes suavizantes, como componentes detergentes adicionales. Tales composiciones contienen una mananasa y un agente tensioactivo catiónico y pueden proporcionar limpieza de telas, remoción de manchas, suavizado y mejoramiento de la apariencia de color cuando se formulan como composiciones detergentes para lavandería.

Las composiciones de la invención también se pueden utilizar como productos aditivos de detergentes en forma sólida o líquida. Tales productos aditivos se pretende que suplementen o que refuercen el funcionamiento de composiciones detergentes convencionales que se pueden agregar en cualquier etapa del proceso de limpiado. Si se necesita, la densidad de las composiciones detergentes de lavandería en la presente varía de 400 a 1200 g/litro, preferiblemente de 500 a 950 g/litro de composición medido a 20°C. La forma "compacta" de las composiciones en la presente se refleja mejor por densidad y, en términos de composición, por la cantidad de sal de relleno inorgánica; las sales de relleno inorgánicas son ingredientes convencionales de composiciones detergentes en forma de polvo; en composiciones detergentes convencionales, las sales de relleno representan cantidades sustanciales, típicamente 17-35% en peso de la composición total. En las composiciones compactas, la sal de relleno está presente en cantidades que no exceden 15% de la composición total, preferiblemente que no exceden 10%, y de manera más preferible que no exceden 5% en peso de la composición. Las sales de relleno inorgánicas tales como las que significan en las presentes composiciones se seleccionan de sales de metal alcalino y alcalinotérreo de sulfatos y cloruros. Una sal de relleno preferida es sulfato de sodio. Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de tela líquida de acuerdo con la presente invención también pueden estar en una "forma concentrada", en tal caso, las composiciones de detergente líquido de acuerdo con la presente invención contendrán una cantidad menor de agua, en comparación con los detergentes líquidos convencionales. Típicamente, el contenido de agua del detergente líquido concentrado preferiblemente es menor de 40%, de manera más preferible menor de 30% y de manera mucho más preferible menor de 20% en peso de la composición detergente. Los compuestos detergentes adecuados para uso en la presente se seleccionan del grupo que consiste de los siguientes compuestos descritos.

Sistema tensioactivo Además del agente tensioactivo catiónico, las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de acuerdo con la presente invención pueden comprender además otro sistema tensioactivo en donde el agente tensioactivo se puede seleccionar de otro tensioactivo catiónico, no iónico y/o aniónico y/o anfolítico y/o zwiteriónico y/o agentes tensioactivos semipolares. Preferiblemente, las composiciones detergentes y/o para cuidado de telas de la presente invención comprenderán además otros agentes tensioactivos, especialmente un agente tensioactivo aniónico, preferiblemente un sulfato y/o sulfonato de alquilo y/o un agente tensioactivo no iónico tal como un agente tensioactivo no iónico etoxilado de alquilo con una longitud de cadena de C8 a C20, preferiblemente C12 a C16, y un grado de etoxilación de 2 a 9, preferiblemente de 3 a 7 y/o un agente tensioactivo de alquilmetilglucamida con una longitud de cadena alquilo de C8 a C20, preferiblemente de C12 a C18. Se ha encontrado sorprendentemente que tales composiciones proporcionan mejor funcionamiento de limpieza. El otro tensioactivo típicamente está presente a un nivel de 0.1 % a 60% en peso. Los niveles de incorporación más preferidos son 1% a 35% en peso, de manera más preferible de 1% a 30% en peso de composiciones detergentes y/o para el cuidado de las telas de acuerdo con la invención. El agente tensioactivo preferiblemente se formula para ser compatible con componentes de enzima presentes en la composición. En las composiciones líquidas o en gel, el agente tensioactivo de manera más preferible se formula de manera que promueve, o al menos no degrada, la estabilidad de cualquier enzima en estas composiciones. Los condensados de polietileno, polipropileno y óxido de polibutileno de alquilfenoles son adecuados para uso como el agente tensioactivo no iónico de los sistemas agentes tensioactivos de la presente invención, prefiriéndose los condensados de óxido de polietileno. Estos compuestos ¡ncluyen los productos de condensación de alquilfenoles que tienen un grupo alquilo que contiene de aproximadamente 6 a aproximadamente 14 átomos de carbono, preferiblemente de aproximadamente 8 a aproximadamente 14 átomos de carbono, ya sea en una configuración de cadena lineal o de cadena ramificada con el óxido de alquileno. En una modalidad preferida, el óxido de etileno está presente en una cantidad igual de aproximadamente 2 a aproximadamente 25 moles, de manera más preferible de aproximadamente 3 a aproximadamente 15 moles de óxido de etileno por mol de alquilfenol. Los agentes tensioactivos no iónicos disponibles comercialmente de este tipo incluyen lgepalMR CO-630, vendido por GAF Corporation; y TritonMR X-45, X-114, X-100 y X-102, todos vendidos por Rohm & Haas Company. Estos agentes tensioactivos de denominan comúnmente como los alcoxilatos de alquilfenol (por ejemplo etoxilados de alquilfenol). Los productos de condensación de alcoholes alifáticos primarios y secundarios formarán aproximadamente 1 a aproximadamente 25 moles de óxido de etileno y son adecuados para uso como el agente tensioactivo no iónico de los sistemas agentes tensioactivos no iónicos de la presente invención. La cadena alquilo del alcohol alifático puede ser lineal o ramificada, primaria o secundaria y generalmente contiene desde aproximadamente 8 hasta aproximadamente 22 átomos de carbono. Se prefieren los productos de condensación de alcoholes que tienen un grupo alquilo que contiene de aproximadamente 8 a aproximadamente 20 átomos de carbono, de manera más preferible de aproximadamente 10 a aproximadamente 18 átomos de carbono, con de aproximadamente 2 a aproximadamente 10 moles de óxido de etileno por mol de alcohol. Aproximadamente 2 a aproximadamente 7 moles de óxido de etileno y de manera más preferible de 2 a 5 moles de óxido de etileno por mol de alcohol están presentes en tales productos de condensación. Los ejemplos de agentes tensioactivos no iónicos disponibles comercialmente de este tipo incluyen TergitolMR 15-S-9 (el producto de condensación de alcohol lineal de C11-C15 con 9 moles de óxido de etileno), Tergitol R 24-L-6 NMW (el producto de condensación de alcohol primario C12-C14 con 6 moles de óxido €7 j& * de etileno con una distribución de peso molecular estrecho) ambos vendidos por Union Carbide Corporation; NeodolMR 45-9 (el producto de condensación de alcohol lineal C14-C15 con 9 moles de óxido de etileno), Neodol R 23-3 (el producto de condensación de alcohol lineal de C12-C13 con 3.0 moles de óxido de etileno), NeodolMR 45-7 (el producto de condensación de alcohol lineal de d4-Ci5 con 7 moles de óxido de etileno), NeodolMR 45-5 (el producto de condensación de alcohol lineal de C14-C15 con 5 moles de óxido de etileno) vendidos por Shell Chemical Company, KyroMR EOB (el producto de condensación de C?3-C?s con 9 moles de óxido de etileno), vendido por The Procter & Gamble Company, y Genapol LA 030 o 050 (el producto de condensación de alcohol de C?2-Cu con 3 a 5 moles de óxido de etileno) vendido por Hoechst. El intervalo preferido de HLB en estos productos es de 8-11 y de manera más preferida de 8-10. También útil como un agente tensioactivo no iónico de los sistemas agentes tensioactivos de la presente invención son los alquilpolisacáridos descritos en la Patente de Estados Unidos 4,565,647, Llenado, otorgada el 21 de enero de 1986, que tienen un grupo hidrofóbico que contiene de aproximadamente 6 a aproximadamente 30 átomos de carbono, preferiblemente de aproximadamente 10 a aproximadamente 16 átomos de carbono y un polisacárido, por ejemplo, poliglicósido, un grupo hidrofílico que contiene de aproximadamente 1.3 a aproximadamente 10, de manera preferible de aproximadamente 1.3 a aproximadamente 3, de manera mucho más preferible de aproximadamente 1.3 a aproximadamente 2.7 unidades de sacáridos. Se puede utilizar cualquier sacárido reductor que contenga 5 ó 6 átomos de carbono, por ejemplo glucosa, galactosa y porciones galactosilo que puedan estar sustituidas por las porciones glucosilo (opcionalmente el grupo hidrofóbico se une en las posiciones 2-, 3-, 4-, etc., por lo que se proporciona una glucosa o galactosa en oposición a un glucósido o galactósido). Las uniones intersacáridos pueden ser, por ejemplo, entre una posición de las unidades de sacárido adicionales y las posiciones 2-, 3-, 4- y/o 6- de las unidades de sacárido precedentes. Los alquilpoliglicósidos preferidos tienen la fórmula R2O(CnH2nO)t(glicosil)? en donde R2 se selecciona del grupo que consiste de alquilo, alquilfenilo, hidroxialquilo, hidroxialquilfenilo y mezclas de los mismos, en el cual los grupos alquilo contienen de aproximadamente 10 a aproximadamente 18, de manera preferible de aproximadamente 12 a aproximadamente 14 átomos de carbono; n es 2 ó 3, preferiblemente 2, t es de 0 a aproximadamente 10, preferiblemente 0; y x es de aproximadamente 1.3 a aproximadamente 10, preferiblemente de aproximadamente 1.3 a aproximadamente 3, de manera más preferible de aproximadamente 1.3 a aproximadamente 2.7. El glicosilo preferiblemente se deriva de glucosa. Para preparar estos compuestos, el alcohol o alquilpolietoxialcohol se forma primero y después se hace reaccionar con glucosa, o una fuente de glucosa, para formar el glucósido (unión en la posición 1 ). Las unidades glicosilo adicionales se pueden unir después entre su posición 1 y las unidades glicosilo precedentes en la posición 2-, 3-, 4- y/o 6-, preferiblemente de manera predominante en la posición 2. Los productos de condensación de óxido de etileno con una base hidrofóbica formada por condensación de óxido de propileno con propilenglicol también son adecuadas para uso como los sistemas agentes tensioactivos no iónicos adicionales de la presente invención. La porción hidrofóbica de estos compuestos preferiblemente tendrá un peso molecular de aproximadamente 1500 a aproximadamente 1800 y mostrará insolubilidad en agua. La adición de porciones de polioxietileno a esta porción hidrofóbica tiende a incrementar la solubilidad en agua de la molécula en su totalidad y el carácter líquido del producto se retiene hasta el punto en el que el contenido de polioxietileno es de aproximadamente 50% del peso total del producto de condensación, el cual corresponde a la condensación con hasta aproximadamente 40 moles de óxido de etileno. Los ejemplos de compuestos de este tipo incluyen algunos de los agentes tensioactivos disponibles comercialmente Plurafac R LF404 y PluronicMR, vendidos por BASF. También son adecuados para uso como el agente tensioactivo no iónico del sistema tensioactivo no iónico de la presente invención los productos de condensación de óxido de etileno con el producto que resulta de la reacción de óxido de propileno y etilendiamina. La porción hidrofóbica de estos productos consiste del producto de reacción de etilendiamina y óxido de propileno en exceso, y generalmente tiene un peso molecular desde aproximadamente 2500 hasta aproximadamente 3000. Esta porción hidrofóbica se condensa con óxido de etileno hasta el grado en el que el producto de condensación contiene desde aproximadamente 40% hasta aproximadamente 80% en peso de polioxietileno y tiene un peso molecular desde aproximadamente 5,000 hasta aproximadamente 11 ,000. Los ejemplos de este tipo de tensioactivo no iónico incluyen algunos de los compuestos disponibles comercialmente TetronicMR, vendidos por BASF. Los preferidos para uso como el agente tensioactivo no iónico de los sistemas agentes tensioactivos de la presente invención son condensados de óxido de polietileno de alquilfenoles, productos de condensación de alcoholes alifáticos primarios y secundarios que incluyen de aproximadamente 1 a aproximadamente 25 moles de óxido de etileno, alquilpolisacáridos y mezclas de los mismos. Los más preferidos son alquilfenoles de Ce-Cu etoxilados que tienen de 3 a 15 grupos etoxi y alcohol de Cs-C-is etoxilados (preferiblemente con un promedio de Cío) que tienen 2 a 10 grupos etoxi, y mezclas de los mismos. Los agentes tensioactivos no iónicos altamente preferidos son agentes tensioactivos de amida de ácido polihidroxi graso de la fórmula.

N en donde R1 es H, o R1 es hidrocarbilo de CM, 2-hidroxietilo, 2-hidroxipropilo o una mezcla de los mismos, R2 es hidrocarbilo de C5-31 y Z es un polihidroxihidrocarbilo que tiene una cadena hidrocarbilo lineal con por lo menos 3 hidroxilos conectados directamente a la cadena, o un derivado alcoxilado del mismo. Preferiblemente, R1 es metilo, R2 es un alquilo de C1-15 recto o una cadena alquilo o alquenilo de C16-18 tal como alquil de coco o mezclas de los mismos, y Z se deriva de un azúcar reductor tal como glucosa, fructuosa, maltosa, lactosa, en una reacción de aminación reductiva. Los agentes tensioactivos no iónicos adecuados para ser utilizados son sulfonato de alquilbenceno lineal, agentes tensioactivos de sulfonato de alquiléster que ¡ncluyen esteres lineales de ácidos carboxílicos de C8-20 (es decir, ácidos grasos) los cuales son sulfonados con SO3 gaseoso de acuerdo con "The Journal of the American Oil Chemists Society", 52, (1975), pp. 323-329. Los materiales iniciales adecuados pueden incluir sustancias grasas naturales tales como las derivadas de sebo, aceite de palma, etc. El agente tensioactivo preferido de alquiléster sulfonato, especialmente para aplicaciones de lavandería, comprende agentes tensioactivos de alquiléster sulfonato de la fórmula estructural: o 3 || 4 R _CH _CM_OR S6 3M en donde R es un hidrocarbilo de Cs-C2o, preferiblemente un alquilo, o combinaciones de los mismos, R4 es un hidrocarbilo de Ci-Cß, preferiblemente un alquilo, o combinaciones de los mismos, y M es un catión el cual forma una sal soluble en agua con el alquiléster sulfonato. Los cationes formadores de sal adecuados incluyen metales tales como sodio, potasio y litio, y cationes de amonio sustituidos o no sustituidos tales como monoetanolamina, dietanolamina y trietanolamina. Preferiblemente, R3 es alquilo de C10-C16 y R4 es metilo, etilo o isopropilo. Se prefieren especialmente los metiléster sulfonatos en donde R3 es alquilo de do-Cíe. Otros agentes tensioactivos aniónicos adecuados incluyen agentes tensioactivos de alquil sulfato los cuales son sales o ácidos solubles en agua de la fórmula ROSO3M, en donde R preferiblemente es un hidrocarbilo de C?o-C2 , preferiblemente un alquilo o hidroxialquilo que tiene un componente alquilo de C?o-C2o, de manera más preferible un alquilo o hidroxialquilo de C?2-C18, y M es H o un catión, por ejemplo un catión de metal alcalino (por ejemplo sodio, potasio, litio) o amonio o amonio sustituido (por ejemplo cationes metil-, dimetil- y trimetilamonio y cationes de amonio cuaternarios tales como tetrametilamonio y cationes dimetilpiperidinio y cationes de amonio cuaternarios derivados de alquilaminas tales como etilamina, dietilamina, trietilamina y mezclas de los mismos, y similares). Típicamente se prefieren cadenas alquilo de C?2-Ci6 para temperaturas de lavado menores (por ejemplo de aproximadamente 50°C) y cadenas alquilo de C16-18 se prefieren para temperaturas de lavado superiores (por ejemplo superiores de aproximadamente 50°C). Otros agentes tensioactivos aniónicos útiles para propósitos detersivos también se pueden incluir en las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención. Estas pueden incluir sales (que incluyen, por ejemplo, sodio, potasio, amonio y sales de amonio sustituidas tales como sales de mono-, di- y trietanolamina) de jabón, alcanosulfonato primarios o secundarios de C8-C22, olefinsulfonatos de C8-C24, ácidos policarboxílicos sulfonados preparados por sulfonación del producto pirolisado de citratos de metal alcalinotérreo, por ejemplo, como se describe en la especificación de Patente Británica número 1 ,082,179, alquilpoliglicolétersulfatos de C8-C24 (que contienen hasta 10 moles de óxido de etileno); alquilglicerol sulfonatos, acilglicerol sulfonato grasos, oleilglicerol sulfatos grasos, alquilfenol óxido de etileno éter sulfatos, parafina sulfonatos, alquil fosfatos isetionatos tales como acil isetionatos, N-acil tauratos, alquil succinamatos y sulfosuccinatos, monoésteres de sulfosuccinatos (especialmente monoésteres saturados e insaturados de C12-C18) y diésteres de sulfosuccinatos (especialmente diésteres saturados e insaturados de C6-C12), acil sarcosinatos, sulfatos de alquilpolisacáridos tales como los sulfatos de alquilpoliglucósido (los compuestos no sulfatados no iónicos se describen posteriormente), alquil sulfatos primarios ramificados y alquil polimetoxi carboxilatos tales como los de la fórmula RO(CH2CH2O)k-CH2COO-M+ en donde R es un radical alquilo de C8-C22, k es un número entero de 1 a 10 y M es un catión formador de sal soluble. Los ácidos de resina y ácidos de resina hidrogenados también son adecuados tales como colofonia, colofonia hidrogenada y ácidos de resina y ácidos de resina hidrogenada presentes en o derivados de resina líquida. Los ejemplos adicionales se describen en "Surface Active Agnts and Detergents" (Vol. I y II por Schwartz, Perry y Berch). Diversos agentes tensioactivos también se describen generalmente en la Patente de los Estados Unidos 3,929,678, presentada el 30 de diciembre de 1975 a Laughiin et al., en la columna 23, línea 58 hasta la columna 29, línea 23 (incorporada en la presente como referencia). Cuando se incluyen en la presente, las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención típicamente comprenden de aproximadamente 1% a aproximadamente 40%, de manera preferible de aproximadamente 3% a aproximadamente 20% en peso de tales agentes tensioactivos aniónicos. Los agentes tensioactivos aniónicos altamente preferidos incluyen agentes tensioactivos de sulfato de alquilo alcoxilado de donde son sales solubles en agua o ácidos de la fórmula RO(A)mSO3M en donde R es un grupo alquilo no sustituido de C10-C24 o un grupo hidroxialquilo que tiene un componente alquilo de C?o-C2 , preferiblemente un alquilo o hidroxialquilo de C?2-C2o, de manera más preferible alquilo o hidroxialquilo de C12-C18, A es una unidad etoxi o propoxi, m es mayor de cero, típicamente entre aproximadamente 0.5 y aproximadamente 6, de manera más preferible entre aproximadamente 0.5 y aproximadamente 3, y M es H o un catión el cual puede ser, por ejemplo, un catión metálico (por ejemplo sodio, potasio, litio, calcio, magnesio, etc.), amonio o catión amonio sustituido. Los sulfatos de alquilo etoxilados asi como los sulfatos de alquilo propoxilados están contemplados en la presente. Los ejemplos específicos de cationes amonio sustituidos incluyen cationes metil-dimetil, trimetil-amonio y cationes de amonio cuaternarios tales como tetrametilamonio y cationes dimetilpiperidinio y aquellos derivados de alquilaminas tales como etilamina, dietilamina, trietilamina, mezclas de los mismos y similares. Los agentes tensioactivos ejemplares son alquil polietoxilato de C12-C18 (1.0) sulfato (C?2-C?sE(1.0)M), alquil polietoxilato de C12-Ciß (2.25) sulfato (C? -C?8E(2.25)M), alquil polietoxilato de C12-C18 (3.0) sulfato (Ci2-C?ßE(3.0)M), y alquil polietoxilato C12-C18 (4.0) sulfato (C?2-C?8E(4.0)M), en donde M se selecciona convenientemente de sodio y potasio. Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención también pueden contener otros agentes tensioactivos catiónicos, anfolíticos zwiteriónicos y semipolares así como los agentes tensioactivos no iónicos y/o aniónicos diferentes a los ya descritos aquí. Los compuestos de amonio cuaternarios biodegradables se han presentado como alternativa a los cloruros de dialquilamonio de cadena larga tradicionales y los sulfatos de metilo. Tales compuestos de amonio cuaternarios contienen grupos alq(en)ilo de cadena larga interrumpida por grupos funcionales tales como grupos carboxi. Tales materiales y composiciones suavizantes de telas, que los contienen se describen en numerosas publicaciones tales como EP-A-0,040,562 y EP-A-0,239,910. Los compuestos de amonio cuaternarios y precursores de amina en la presente tienen la fórmula (I) o (II), abajo: en donde Q se selecciona de -O-C(O)-, -C(O)-O-, -O-C(O)-O-, -NR4-C(O)-, - C(O)-NR4.; R1 es (CH2)n-Q-T2 o T3; R2 es (CH2)m-Q-T4 o T5 o R3; R3 es alquilo de C1-C4 o hidroxialquilo de C1-C4 o H; R4 es H o alquilo de C1-C4 o hidroxialquilo de C1-C4; T1 , T2, T3, T4 y T5 son independientemente alquilo o alquenilo de C11-C22; n y m son números enteros de 1 a 4; y X- es un anión compatible con suavizante. Los ejemplos no limitantes de aniones compatibles con suavizantes incluyen cloruro o metilsulfato. El alquilo o alquenilo, la cadena T1 , T2, T3, T4 y T5 deben contener por lo menos 11 átomos de carbono, preferiblemente por lo menos 16 átomos de carbono. La cadena puede ser recta o ramificada. El sebo es una fuente conveniente y barata de material alquilo y alquenilo de cadena larga. Se prefieren particularmente los compuestos en los que T1 , T2, T3, T4 y T5 representan la mezcla de materiales de cadena larga típicos para sebo. Los ejemplos específicos de compuestos de amonio cuaternarios adecuados para uso en las composiciones acuosas suavizantes de telas en la presente incluyen: 1 ) cloruro de N,N-di(seboil-oxi-etil)-N,N-dimetilamonio; 2) metilsulfato de N,N-di(seboil-oxi-etil)-N-metil, N-(2- hidroxietil)amonio; 3) cloruro de N,N-di(2-seboil-oxi-2-oxo-etil)-N,N-dimetilamonio; 4) cloruro de N,N-di(2-seboil-oxi-etilcarbonil-oxi-etil)-N,N- dimetilamonio; 5) cloruro de N-(2-seboil-oxi-2-etil)-N-(2-seboil-oxi-2-oxo-etil)-N,N- dimetilamonio; 6) cloruro de N,N,N-tri(seboil-oxi-etil)-N-metilamonio; 7) cloruro de N-(2-seboil-oxi-2-oxo-etil)-N-(seboil-N,N-dimetilamonio; 8) cloruro de 1 ,2-diseboil-oxi-3-trimetilamoniopropano; y mezclas de cualquiera de los materiales anteriores. Los agentes tensioactivos anfolíticos también son adecuados para uso en las composiciones detergentes y/o para cuidado de telas de la presente invención. Estos agentes tensioactivos pueden ser descritos ampliamente como derivados alifáticos de aminas secundarias o terciarias o derivados alifáticos de aminas heterocíclicas secundarias y terciarias en las cuales el radical alifático puede ser una cadena recta o ramificada. Uno de los sustituyentes alifáticos contiene por lo menos aproximadamente 8 átomos de carbono, típicamente de aproximadamente 8 a aproximadamente 18 átomos de carbono, y por lo menos una contiene un grupo aniónico solubilizante en agua, por ejemplo carboxi, sulfonato, sulfato. Véase la Patente de los Estados Unidos 3,929,678 para Laughiin et al., presentada el 30 de diciembre de 1975, en la columna 19, líneas 18-35, para ejemplos de agentes tensioactivos anfolíticos. Cuando se incluyen en la presente, las composiciones detergentes y/o para cuidado de telas de la presente invención típicamente comprenden de 0.2% a aproximadamente 15%, preferiblemente de aproximadamente 1% a aproximadamente 10% en peso de tales agentes tensioactivos anfolíticos. Los agentes tensioactivos zwiteriónicos también son adecuados para uso en composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas. Estos agentes tensioactivos pueden ser descritos ampliamente como derivados de aminas secundarias y terciarias, derivados de aminas secundarias y terciarias heterocíclicas o derivados de compuestos de amonio cuaternario, fosfonio cuaternario o sulfonio terciario. Véase la Patente de los Estados Unidos número 3,929,678 para Laughiin et al., presentada el 30 de diciembre de 1975, en la columna 19, línea 38 a la columna 22, línea 48, para ejemplos de agentes tensioactivos zwiteriónicos. Cuando se incluyen en la presente, las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención típicamente comprenden de 0.2% a aproximadamente 15%, preferiblemente de aproximadamente 1% a aproximadamente 10% en peso de tales agentes tensioactivos zwiteriónicos. Los agentes tensioactivos no iónicos semipolares son una categoría especial de agentes tensioactivos no iónicos los cuales ¡ncluyen óxidos de aminas solubles en agua que contienen una porción alquilo de aproximadamente 10 a aproximadamente 18 átomos de carbono y 2 porciones que se seleccionan del grupo que consiste de grupos alquilo y grupos hidroxialquilo que contienen de aproximadamente 1 a aproximadamente 3 átomos de carbono; óxidos de fosfina solubles en agua que contienen una porción alquilo de aproximadamente 10 a aproximadamente 18 átomos de carbono y 2 porciones que se seleccionan del grupo que consiste de grupos alquilo y grupos hidroxialquilo que contienen de aproximadamente 1 a aproximadamente 3 átomos de carbono; y sulfóxidos solubles en agua que contienen una porción alquilo de aproximadamente 10 a aproximadamente 18 átomos de carbono y una porción que se selecciona del grupo que consiste de porciones alquilo e hidroxialquilo de aproximadamente 1 a aproximadamente 3 átomos de carbono. Los agentes tensioactivos detergentes no iónicos semipolares incluyen los agentes tensioactivos de óxido de amina que tienen la fórmula O en donde R es un grupo alquilo, hidroxialquilo o alquilfenilo, o mezclas de los mismos que contiene de aproximadamente 8 a aproximadamente 22 átomos de carbono; R4 es un grupo alquileno o hidroxialquileno que contiene de aproximadamente 2 a aproximadamente 3 átomos de carbono o mezclas de los mismos; x es de 0 a aproximadamente 3; y cada R5 es un grupo alquilo o hidroxialquilo que contiene de aproximadamente 1 a aproximadamente 3 átomos de carbono o un grupo de óxido de polietileno que contiene de aproximadamente 1 a aproximadamente 3 grupos de óxido de etileno. Los grupos R5 se pueden unir entre si, por ejemplo, a través de un átomo de oxígeno o nitrógeno, para formar una estructura de anillo. Estos agentes tensioactivos de óxido de amina en particular ¡ncluyen óxidos de alquildimetilamina de C10-C18 y óxidos de alcoxietildihidroxietilamina de Cß-C?2. Cuando se ¡ncluyen en la presente, las composiciones limpiadoras de la presente invención típicamente comprenden de 0.2% a aproximadamente 15%, de manera preferible de aproximadamente 1 % a aproximadamente 10% en peso de tales agentes tensioactivos no iónicos semipolares. La composición detergente y/o para el cuidado de telas de la presente invención puede comprender adicionalmente un cotensioactivo que se selecciona del grupo de aminas primarias o terciarias. Las aminas primarias adecuadas para uso en la presente incluyen aminas de acuerdo con la fórmula R1NH2 en donde R1 es una cadena alquilo de C6-C12, preferiblemente de Ce-Cío o R4X(CH2)n, X es -O-, -C(O)NH- o -NH-, R4 es una cadena alquilo de C6-C? , n está entre 1 a 5, preferiblemente 3. Las cadenas alquilo de R1 pueden ser rectas o ramificadas y pueden estar interrumpidas con hasta 12, preferiblemente menos de 5 porciones de óxido de etileno. Las aminas preferidas de acuerdo con la fórmula en la presente anterior son n-alquilaminas. Las aminas adecuadas para uso en la presente se pueden seleccionar de 1-hexilamina, 1 -octilamina, 1-decilamina y laurilamina. Otras aminas primarias preferidas incluyen oxipropilamina de Ce-Cío, octiloxipropilamina, 2-etilhexiloxipropilamina, laurilamidopropilamina y aminopropilamina. Las aminas terciarias adecuadas para uso en la presente incluyen aminas terciarias que tienen la fórmula R1R2R3N en donde R1 y R2 son cadenas alquilo de Ci-Cß o Rs R3 es cualquiera de C6-C12, preferiblemente una cadena alquilo de Ce-Cío, o R3 es R4X(CH2)n, en donde X es -O-, -C(O)NH-, -NH-, R es C4-C12, n está entre 1 a 5, preferiblemente 2-3, R5 es H o alquilo de C?-C2 y x está entre 1 a 6. R3 y R4 pueden ser rectos o ramificados; las cadenas alquilo R3 pueden estar interrumpidas con hasta 12, preferiblemente menos de 5 porciones de óxido de etileno. Las aminas terciarias preferidas son R1R2R3N en donde R1 es una cadena alquilo de C6-C12, R2 y R3 son alquilo de C1-C3 o Rs en donde R5 es H o CH3 y x = 1-2. También se prefieren las amidoaminas de la fórmula: en donde Ri es alquilo de C6-C12; n es 2-4, preferiblemente n es 3; R2 y R3 es C1-C4. Las aminas más preferidas de la presente invención incluyen 1-octilamina, 1-hexilamina, 1-decilamina, 1-dodecilamina, C8-10 oxipropilamina, N coco 1-3-diaminopropano, cocoalquildimetilamina, laurildimetilamina, laurilbis(hidroxietil)amina, coco bis(hidroxietil)amina, laurilamina, 2 moles propoxilada, octilamina 2 moles propoxilada, laurilamidopropildimetilamina, amidopropildimetilamina C8-10 y amidopropildimetilamina C10. Las aminas más preferidas para uso en las composiciones en la presente son 1-hexilamina, 1 -octilamina, 1-decilamina, 1-dodecilamina. Son especialmente deseables n-dodecildimetilamina y bishidroxietilcocoalquilamina y oleilamina 7 veces etoxilada, laurilamidopropilamina y cocoamido propilamina.

Agente Blanqueador La composición detergente y/o para el cuidado de telas de la presente invención puede comprender además un agente blanqueador tal como peróxido de hidrógeno, PB1 , PB4 y percarbonato con un tamaño de partícula de 400-800 micrómetros. Estos componentes de agente blanqueador pueden incluir uno o más agentes blanqueadores de oxígeno y, en base en el agente blanqueador elegido, uno o más activadores de blanqueador. Cuando están presentes compuestos blanqueadores de oxígeno típicamente estarán presentes a niveles de aproximadamente 1 % a aproximadamente 25%. El componente de agente blanqueador para uso en la presente puede ser cualquiera de los agentes blanqueadores útiles para composiciones detergentes y/o para cuidado de telas que incluyen blanqueadores de oxígeno así como otros conocidos en la técnica. El agente blanqueador adecuado para la presente invención puede ser un agente blanqueador activado o no activado. Una categoría de agente blanqueador de oxígeno que puede ser utilizado abarca agentes blanqueadores de ácido percarboxílico y sales de los mismos. Los ejemplos adecuados de esta clase de agentes incluyen monoperoxiftalato de magnesio hexahidratado, la sal de magnesio de ácido meta-cloroperbenzoico, ácido 4-nonilamino-4-oxoperoxibutírico y ácido piperóxidodecanodioico. Tales agentes blanqueadores se describen en la Patente de los Estados Unidos 4,483,781 , solicitud de Patente de los Estados Unidos 740,446, Solicitud de Patente Europea 0,133,354 y Patente de los Estados Unidos 4,412,934. Los agentes blanqueadores altamente preferidos también incluyen ácido 6-nonilamino-6-oxoperoxicaproico como se describe en la Patente de los Estados Unidos 4,634,551. Otra categoría de agentes blanqueadores que pueden ser utilizados abarca agentes blanqueadores de halógeno. Los ejemplos de agentes blanqueadores de hipohalito, por ejemplo, incluyen ácido tricloroisocianúrico y los dicloroisocianuratos de sodio y de potasio y N-cloro y N-bromo alcano sulfonamidas. Tales materiales normalmente se agregan en 0.5-10% en peso del producto terminado, preferiblemente 1-5% en peso. Los agentes liberadores de peróxido de hidrógeno se pueden utilizar en combinación con activadores blanqueadores tales como tetraacetiletilendiamina (TAED), nonanoiloxibencensulfonato (NOBS, descrito en el documento US 4,412,934), 3,5-trimetilhexanoloxibencensulfonato (ISONOBS, descrito en el documento EP 120,591 ) o pentaacetilglucosa (PAG) o fenolsulfonato éster de ácido N-nonanoil-6-aminocaproico (NACA-OBS, descrito en WO94/28106), los cuales son perhidrolizados para formar un perácido como la especie blanqueadora activa, lo que lleva a un efecto blanqueador mejorado. Los activadores adecuados también son esteres de citrato acilados tales como los descritos en la solicitud para Patente Europea copendiente número 91870207.7 y el activador de blanqueador ¡mida acíclico asimétrico de la siguiente fórmula, como se describe en las solicitudes para Patentes copendientes de Procter & Gamble de Estados Unidos número de serie 60/022,786 (presentada el 30 de julio de 1996) y número 60/028,122 (presentada el 15 de octubre de 1996): en donde Ri es un grupo alquilo saturado o insaturado de cadena recta o ramificada de C7-C?3, R2 es un grupo alquilo saturado o insaturado de cadena recta o ramificada de Ci-Cs y R3 es un grupo alquilo saturado o insaturado de cadena recta o ramificada de C?-C4. Los agentes blanqueadores útiles incluyen peroxiácidos y sistemas blanqueadores que comprenden activadores de blanqueado y compuestos blanqueadores de peroxígeno para uso en composiciones detergentes de acuerdo con la invención y se describen en nuestras solicitudes copendientes USSN 08/136,626, PCT/US95/07823, WO95/27772, WO95/27773, WO95/27774 y WO95/27775. El peróxido de hidrógeno también puede estar presente al agregar un sistema enzimático (es decir, una enzima y un sustrato de lo anterior) el cual es capaz de generar peróxido de hidrógeno al principio o durante el proceso de lavado y/o enjuagado. Tales sistemas enzimáticos se describen en la solicitud para Patente EP 91202655.6 presentada el 9 de octubre de 1991. Los catalizadores que contienen metal para uso en composiciones blanqueadoras incluyen catalizadores que contienen cobalto tales como sales de pentaamina acetato de cobalto(lll) y catalizadores que contienen manganeso tales como los descritos en EPA 549 271 ; EPA 549 272; EPA 458 397; US 5,246,621 ; EPA 458 398; US 5,194,416 y US 5,114,611. La composición blanqueadora comprende un compuesto peroxi, un catalizador de blanqueado que contiene manganeso y un agente quelatador y se describe en la solicitud de Patente número 94870206.3. Los agentes blanqueadores diferentes a agentes blanqueadores de oxígeno también son conocidos en la técnica y se pueden utilizar en la presente. Un tipo de agente blanqueador diferente de oxígeno de interés particular incluye agentes blanqueadores fotoactivados tales como las ftalocianinas de zinc sulfonadas y/o de aluminio. Estos materiales se pueden depositar sobre el sustrato durante el proceso de lavado. Cuando se someten a irradiación con luz, en presencia de oxígeno, por ejemplo al colgar las prendas en el exterior para secarlas a la luz del día, la ftalocianina de zinc sulfonada es activada y en consecuencia el sustrato es blanqueado. El proceso preferido de blanqueado con ftalocianina de zinc y fotoactivación se describe en la Patente de los Estados Unidos número 4,033,718. Típicamente, las composiciones detergentes contendrán aproximadamente 0.025% a aproximadamente 1.25% 10 en peso de ftalocianina de zinc sulfonada.

Sistema aditivo Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención pueden comprender además un aditivo. Cualquier sistema 15 aditivo convencional es adecuado para uso en la presente se incluyen materiales de aluminosilicato, silicatos, policarboxilatos, ácido alquil- o alquenil- succínico y ácidos grasos, materiales tales como etilendiaminatetraacetato, dietiletriaminapentametilenacetato, secuestrantes de iones metálicos tales como aminopolifosfonatos, particularmente ácido etilendiamino 20 tetrametilenfosfónico y ácido dietilentriaminopentametilen-fosfónico. También se pueden utilizar en la presente aditivos de fosfato. Los aditivos adecuados pueden ser un material de intercambio iónico inorgánico, comúnmente un material de aluminosilicato hidratado ,.*. i&h inorgánico, de manera más particular una zeolita sintética hidratada tal como zeolita hidratada A, X, B, HS o MAP. Otro material aditivo inorgánico adecuado es un silicato estratificado, por ejemplo SKS-6 (Hoechst). SKS-6 es un silicato estratificado cristalino que consiste de silicato de sodio (Na2S¡2?5). Los policarboxilatos adecuados que contienen un grupo carboxi incluyen ácido láctico, ácido glicólico y derivados de éter de los mismos como se describe en las Patentes Belgas números 831 ,368, 821 ,369 y 821 ,370. Los policarboxilatos que contienen dos grupos carboxi incluyen las sales solubles en agua de ácido succínico, ácido malónico, ácido(etilendioxi) diacético, ácido maleico, ácido diglicólico, ácido tartárico, ácido tartrónico y ácido fumárico, así como los carboxilatos de éter descritos en la Offenlegenschrift Alemana 2,446,686 y 2,446,687, y en la Patente de los Estados Unidos 3,935,257 y los carboxilatos de sulfinilo se describen en la Patente Belga número 840,623. Los policarboxilatos que contienen tres grupos carboxi incluyen, en particular, citratos solubles en agua, aconitratos y citraconatos asi como derivados de succinato tales como los carboximetiloxisuccinatos descritos en la Patente Británica número 1 ,379,241 , lactoxisuccinatos descritos en la Solicitud de los Países Bajos 7205873, y los materiales de oxipolicarboxilato tales como 2-oxa-1 ,1 ,3-propanotricarboxilatos descritos en la Patente Británica número 1 ,387,447. Los policarboxilatos que contienen cuatro grupos carboxi incluyen oxidisuccinatos descritos en la Patente Británica número 1 ,261 ,829, 1 ,1 ,2,2- etanotetracarboxilatos, 1 ,1 ,3,3-propanotetracarboxilatos y 1 ,1 ,2,3-propanotetracarboxilatos. Los policarboxilatos que contienen sustituyentes sulfo incluyen los derivados de sulfosuccinato descritos en las Patentes Británicas números 1 ,398,421 y 1 ,398,422 y en la Patente de los Estados Unidos número 3,936,448, y los citratos pirolizados sulfonados descritos en la Patente Británica número 1 ,082,179, mientras que los policarboxilatos que contienen sustituyentes fosfona se describen en la Patente Británica número 1 ,439.000. Los policarboxilatos alicíclicos y heterocíclicos incluyen ciclopentano-cis,cis,cis-tetracarboxilatos, ciclopentadieno pentacarboxilatos, 2,3,4, 5-tetrahidrofuran-cis, cis, cis-tetracarboxilatos, 2,5-tetrahidrofuran-cis-dicarboxilatos, 2,2,5,5-tetrahidrofuranotetracarboxilatos, 1 ,2,3,4,5,6-hexanohexacarboxilatos y derivados de carboximetilo de alcoholes polihídricos tales como sorbitol, manitol y xilitol. Los policarboxilatos aromáticos incluyen ácido melítico, ácido piromelítico y los derivados de ácido ftálico descritos en la Patente Británica número 1 ,425,343. De los anteriores, los policarboxilatos preferidos son hidroxipolicarboxilatos que contienen hasta tres grupos carboxi por molécula, más particularmente citratos. Los sistemas aditivos preferidos para uso en las presentes composiciones incluyen una mezcla de aditivos de aluminosilicato insolubles en agua tales como zeolita A o de un silicato estratificado (SKS-6), y un agente quelatador de carboxilato soluble en agua tal como ácido cítrico. Otros sistemas aditivos preferidos incluyen una mezcla de un aditivo de aluminosilicato insoluble en agua tal como zeolita A, y un agente quelatador de carboxilato soluble en agua tal como ácido cítrico. Los sistemas aditivos preferidos para uso en composiciones de detergente líquido de la presente invención son jabones y policarboxilatos. Otros materiales aditivos que pueden formar parte del sistema aditivo para uso en composiciones glanulares ¡ncluyen materiales inorgánicos tales como carbonatos de metal alcalino, bicarbonatos, silicatos y materiales orgánicos tales como los fosfonatos orgánicos, aminopolialquilenfosfonatos y aminopolicarboxilatos. Otras sales orgánicas solubles en agua adecuadas son los ácidos homo- o co-poliméricos o sus sales, en los cuales el ácido policarboxílico comprende por lo menos dos radicales carboxilo separados entre si por no más de dos átomos de carbono. Los polímeros de este tipo se describen en el documento GB-A-1 ,596,756. Los ejemplos de tales sales son poliacrilatos de PM 2000-5000 y sus copolímeros con anhídrido maleico, tales copolímeros tienen un peso molecular de 20,000 a 70,000, especialmente de aproximadamente 40,000. Las sales aditivas de detergencia se incluyen normalmente en cantidades de 5% a 80% en peso de la composición, preferiblemente de 10% a 70%, y de manera más habitual de 30% a 60% en peso.

Enzimas detergentes convencionales Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas, además de la enzima mananasa, pueden comprender además una o más enzimas las cuales proporcionen funcionamiento limpiador, y beneficios para el cuidado de telas y/o sanitización. Tales enzimas incluyen enzimas que se seleccionan de celulasas, hemicelulasas, peroxidasas, proteasas, glucoamilasas, amilasas, xilanasas, lipasas, fosfolipasas, esterasas, cutinasas, pectinasas, queratanasas, reductasas, oxidasas, fenoloxidasas, lipoxigenasas, ligninasas, pululanasas, tanasas, pentosanasas, malanasas, ß-glucanasas, arabinosidasas, hialuronidasa, condroitinasa, lacasa o mezclas de las mismas. Una combinación preferida es una composición detergente y/o para el cuidado de telas que tiene una combinación de enzimas aplicables convencionales como proteasa, amilasa, lipasa, cutinasa y/o celulasa junto con uno o más enzimas degradadoras de papel celular vegetal. Las proteasas adecuadas son las subtilisinas las cuales se obtienen de cepas particulares de B. subtilis y B. licheniformis (subtilisina BPN y BPN'). Una proteasa adecuada se obtiene de una cepa de Bacillus que tiene una actividad máxima a través del intervalo de pH de 8-12, desarrollada y vendida como ESPERASEMR por Novo Industries A/S de Dinamarca, a continuación "Novo". La preparación de esta enzima y enzimas análogas se describe en GB 1 ,243,784 para Novo. Otras proteasas adecuadas incluyen ALCALASEMR, DURAZYMMR y SAVINASEMR de Novo y MAXATASEMR, 9Í MAXACAL R, PROPERASEMR y MAXAPEMMR (proteínas diseñadas por ingeniería por Maxacal) de Gist-Brocades. Las enzimas proteolíticas también abarcan serina proteasas bacterianas modificadas tales como las descritas en la Solicitud para Patente Europea número de serie 87 303761.8, presentada el 28 de abril de 1987 (particularmente las páginas 17, 24 y 98), y las cuales se denominan en la presente "proteasa B", y en la Solicitud de Patente Europea 199,404, Venegas, publicada el 29 de octubre de 1986, la cual se refiere a una enzima proteolítica serina bacteriana modificada la cual se denomina "proteasa A" en la presente. Es adecuada una proteasa denominada en la presente "proteasa C", la cual es una variante de una serina proteasa alcalina de Bacillus en la cual la lisina sustituye a arginina en la posición 27, la tirosina sustituye a valina en la posición 104, la serina sustituye a asparagina en la posición 123 y la alanina sustituye a treonina en la posición 274. La proteasa C se describe en el documento EP 90915958:4, que corresponde a WO91/06637, publicada el 16 de mayo de 1991. También se incluyen en la presente variantes modificadas genéticamente, particularmente de proteasa C. Una proteasa preferida a la que se hace referencia como "proteasa D" es una variante de carbonilhidrolasa que tiene una secuencia de aminoácidos que no se encuentra en la naturaleza, la cual se deriva de una carbonilhidrolasa precursora al sustituir un aminoácido diferente por una pluralidad de residuos aminoácidos en una posición en la carbonilhidrolasa equivalente a la posición +76, preferiblemente también en combinación con uno o más posiciones de residuos aminoácidos equivalentes a los seleccionados del grupo que consiste de +99, +101 , +103, +104, +107, +123, +27, +105, +109, +126, +128, +135, +156, +166, +195, +197, +204, +206, +210, +216, +217, +218, +222, +260, +265 y/o +274 de acuerdo con la numeración de subtilisina de Bacillus amyloliquefaciens, como se describe en WO95/10591 y en la solicitud de Patente de C. Ghosh, et al, "Bleaching Compositions Comprising Protease Enzymes", que tiene el documento número de serie 08/322,677, presentado el 13 de octubre de 1994. También es adecuada una vanante de carbonilhidrolasa de la proteasa descrita en WO95/10591 , que tiene la secuencia de aminoácidos derivada por sustitución de una pluralidad de residuos aminoácidos sustituidos en la enzima precursora que corresponden a la posición +210 en combinación con uno o más de los siguientes residuos: +33, +62, +67, +76, +100, +101 , +103, +104, +107, +128, +129, +130, +132, +135, +156, +158, +164, +166, +167, +170, +209, +215, +217, +218 y +222, en donde la posición numerada corresponde a la subtilisina que se presenta de manera natural de Bacillus amyloliquefaciens o a los residuos aminoácidos equivalentes en otras carbonilhidrolasas o subtilisinas, tales como la subtilisina de Bacillus lentus (solicitud de Patente copendiente de los Estados Unidos número de serie 60/048,550, presentada el 4 de junio de 1997. También son adecuadas para la presente invención las proteasas descritas en las solicitudes de Patente EP 251 446 y WO 91/06637, la proteasa BLAPMR descrita en WO91/02792 y sus variantes, descritas en WO95/23221. Véase también una proteasa de pH elevado de Bacillus sp, NCIMB 40338 descrita en WO 93/18140 A para Novo. Los detergentes enzimáticos que comprenden proteasa, una o más de otras enzimas, y un inhibidor de proteasa reversible se describen en WO 92/03529 A para Novo. Cuando se desee, esta disponible una proteasa que tiene adsorción disminuida e hidrólisis aumentada, como se describe en WO 95/07791 para Procter & Gamble. Una proteasa recombinante similar a tripsina para detergentes, adecuada en la presente, se describe en el documento WO 94/25583 para Novo. Otras proteasas adecuadas se describen en EP 516 200 por Unilever. Las enzimas proteolíticas se incorporan en las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención a un nivel de 0.0001% a 2%, preferiblemente de 0.001% a 02.%, y de manera más preferible de 0.005% a 0.1 % de enzima pura por peso de la composición. Las celulasas utilizables en la presente invención incluyen celulasas bacterianas o micóticas. Preferiblemente, tendrán un pH óptimo de entre 5 y 12 y una actividad específica superior a 50 CEVU/mg (unidad de viscosidad de celulosa). Las celulasas adecuadas se describen en la Patente de los Estados Unidos 4,435,307, Barbesgoard et al, J61078384 y WO96/02653 los cuales describen celulasa micótica producida respectivamente de Humicola insolens, Trichoderma, Thielavia y Sporotrichum. El documento EP 739 982 describe celulasas aisladas de especies novedosas de Bacillus. Se describen también celulasas adecuadas en GB-A-2.075,028; GB-A-2.095.275; DE-OS-2.247,832 y WO95/26398. Los ejemplos de tales celulasas son celulasas producidas por la cepa de Humicola insolens (Humicola grísea var. thermoidea), particularmente Humicola cepa DSM 1800. Otras celulasas adecuadas son celulasas originadas de Humicola insolens que tiene un peso molecular de aproximadamente 500 kDa, un punto isoeléctrico de 5.5 y que contiene 415 aminoácidos; y una endoglucanasa "43 kD derivada de Humicola insolens, DSM 1800, que muestra actividad de celulasa; un componente preferido de endoglucanasa tiene la secuencia de aminoácidos que se describe en la solicitud de Patente PCT WO91/17243. También son celulasas adecuadas las celulasas EGIII de Trichoderma longibrachiatum descrita en WO94/21801 , Genencor, publicada el 29 de septiembre de 1994. Las celulasas especialmente adecuadas son las celulasas que tienen beneficios para el cuidado de color. Los ejemplos de tales celulasas son celulasas como se describen en la solicitud para Patente Europea número 91202879.2, presentada el 6 de noviembre de 1991 (Novo). Son especialmente útiles Carezyme y Celluzyme (Novo Nordisk A/S). Véanse también los documentos WO91/17244 y WO91/21801. Otras celulasas adecuadas para propiedades para cuidado de tela y/o limpieza se describen en WO96/34092, WO96/17994 y WO95/24471. Tales celulasas se incorporan normalmente en la composición detergente y/o para el cuidado de telas a niveles de 0.0001 % a 2% de enzima pura en peso de composición detergente y/o para el cuidado de telas. Las enzimas peroxidasa se utilizan en combinación con fuentes de oxígeno, por ejemplo percarbonato, perborato, persulfato, peróxido de hidrógeno, etc., y con un sustrato fenólico como molécula mejoradora de á . blanqueado. Se utilizan para "blanqueado en solución" es decir, para evitar la transferencia de colorantes o pigmentos removidos de los sustratos durante las operaciones de lavado a otros sustratos en la solución de lavado. Las enzimas peroxidasas se conocen en la técnica e incluyen, por ejemplo, peroxidasa de rábano, ligninasa y haloperoxidasa tal como cloro- y bromo-peroxidasa. Las composiciones detergentes que contienen peroxidasa se describen, por ejemplo en la solicitud internacional PCT/WO 89/099813, WO 89/09813 y en la Solicitud para Patente Europea EP número 91202882.6, presentada el 6 de noviembre de 1991 y EP número 96870013.8, presentada el 20 de febrero de 1996. También es adecuada la enzima lacasa. Los mejoradores generalmente están comprendidos a un nivel de 0.1 % a 5% en peso de la composición total. Los mejoradores preferidos son fentiazina sustituida y ácido fenoxasina 10-fenotiazinapropiónico (PPT), ácido 10-etilfenotiazina-4-carboxílico (EPC), ácido 10-fenoxazinopropiónico (POP) y 10-metilfenoxiazina (descrito en WO 94/12621 ) y siringatos sustituidos (siringatos de alquilo sustituidos C3-C5) y fenoles. El percarbonato de sodio o perborato son fuentes preferidas de peróxido de hidrógeno. Tales peroxidasas se incorporan normalmente en la composición detergente y/o para el cuidado de telas a niveles desde 0.0001 % a 2% de enzima pura por peso de la composición detergente y/o para el cuidado de telas. Otras enzimas preferidas que se pueden incluir en las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención incluyen lipasas. Las enzimas lipasa adecuadas para uso detergente incluyen aquellas producidas por microorganismos del grupo Pseudomonas, tales como Pseudomonas stutzerí ATCC 19.154, como se describe en la Patente Británica 1 ,372,034. Las lipasas adecuadas incluyen aquellas las 5 cuales muestran una reacción cruzada inmunológica positiva con el anticuerpo de la lipasa, producido por el microorganismo Pseudomonas fluorescens IAM 1057. Esta lipasa está disponible de Amano Pharmaceuticals Co. Ltd., Nagoya, Japón, bajo el nombre comercial LipaseP "Amano" a continuación denominada como "Amano-P". Otras lipasas comerciales adecuadas ¡ncluyen Amano-CES, 10 lipasas de Chromobacter viscosum, por ejemplo Chromobacter viscosum var. lipolyticum NRRLB 3673 de Toyo Jozo Co., Tagata, Japón; lipasas de Chromobacter viscosum de U.S. Biochemical Corp., U.S.A. y Disoynth Co., Países Bajos, y lipasas de Peudomonas gladioli. Las lipasas especialmente adecuadas son lipasas tales como M1 LipasaR y LipomaxR (Gist-Brocades) y R R 15 Lipolasa y Lipolase Ultra (Novo) las cuales se ha encontrado que son muy efectivas cuando se utilizan en combinación con las composiciones de la presente invención. También son adecuadas las enzimas lipolíticas descritas en los documentos EP 258 068, WO 92/05249 y WO 95/22615 por Novo nordisk y en WO 94/03578, WO 95/35381 y WO 96/00292 por Unilever. 20 También son adecuadas las cutinasas [EC 3.1.1.50] las cuales se pueden considerar como una clase especial de lipasa, específicamente las lipasas las cuales no requieren activación interfacial. Además de las cutinasas para composiciones detergentes se han descrito en, por ejemplo, , r ' v 1$ WO-A-88/09367 (Genencor); WO 90/09446 (Plant Genetic System) y WO 94/14963 y WO 94/14964 (Unilever). Las lipasas y/o cutinasas normalmente se incorporan en la composición detergente y/o para el cuidado de telas a niveles de 0.0001 % a 2% de enzima pura en peso de la composición detergente y/o para el cuidado de telas. Se pueden incluir amilasas (a y/o ß) para remoción de manchas basadas en carbohidratos. El documento WO 94/02597, Novo Nordisk A/S publicado el 03 de febrero de 1994 describe composiciones detergentes las cuales incorporan amilasas mutantes. Véase también el documento WO95/10603, Novo Nordisk A/S publicado el 20 de abril de 1995. Otras amilasas conocidas para uso en composiciones detergentes incluyen ambas amilasas a y ß- Se conocen las a-amilasas en la técnica e incluyen aquellas descritas en la Patente de los Estados Unidos número 5,003,257; el documento EP 252,666; WO/91/00353; FR 2,676,456; EP 285,123, EP 525,610; EP 368,341 ; y la especificación de Patente Británica número 1 ,296,839 (Novo). Otras amilasas adecuadas son amilasas de estabilidad mejorada descritas en el documento WO94/18314, publicado el 18 de agosto de 1994 y WO96/05295, Genencor, publicado el 22 de febrero de 1996, y variantes de amilasa que tienen modificación adicional en la parental inmediata disponible de Novo Nordisk A/S descrita en WO 95/10603 publicada en 95 de abril. También son adecuadas amilasas descritas en EP 227 216, WO95/26397 y WO96/23873 (todas por Novo Nordisk).

Los ejemplos de productos comerciales de a-amilasas son Purafect Ox AmMR de Genencor y TermamylMR, Ban R, Fungamyl R y DuramylMR, todas disponibles de Novo Nordisk A/S Dinamarca. El documento WP95/26397 describe otras amilasas adecuadas: a-amilasas caracterizadas porque tienen una actividad específica por lo menos 25% mayor que la actividad específica de TermamylMR a un intervalo de temperatura de 25°C a 55°C y un valor de pH en el intervalo de 8 a 10, medido por el ensayo de actividad de a-amilasa Phadebas R. Son adecuadas variantes de las enzimas anteriores, descritas en el documento WO96/23873 (Novo Nordisk). Otras enzimas amilolíticas con propiedades mejoradas con respecto al nivel de actividad y la combinación de termoestabilidad y un nivel de actividad superior se describen en WO95/25382. Las enzimas amilolíticas se incorporan en las composiciones detergentes y/o para el cuidado de la presente invención a un nivel de 0.0001 % a 2%, preferiblemente de 0.00018% a 0.06%, de manera más preferible de 0.00024% a 0.048% de enzima pura en peso de la composición. Las enzimas mencionadas antes pueden ser de cualquier origen adecuado, tal como origen vegetal, animal, bacteriano, micótico y de levadura. El origen puede ser además mesofílico o extremofílico (psicrofílico, psicotrópico, termofílico, barofílico, alcalofílico, acidofílico, halofílico, etc.). Se pueden utilizar formas purificadas o no purificadas de estas enzimas. Actualmente, es una práctica común modificar enzimas de tipo silvestre por medio de técnicas de ingeniería de proteínas/ingeniería genética con el fin de optimizar su eficiencia de funcionamiento en las composiciones detergentes de la invención. Por ejemplo, se pueden diseñar variantes de manera que se incremente la compatibilidad de la enzima con los ingredientes encontrados habitualmente en tales composiciones. De manera alternativa, la variante puede ser diseñada de manera que el pH óptimo, la estabilidad del blanqueador o el quelatador, la actividad catalítica y similar de la variante de enzima se adapte para adecuarse a la aplicación de limpieza particular. En particular, la atención se debe enfocar en aminoácidos sensibles a la oxidación en el caso de estabilidad de blanqueadores y en cargas de superficie para la compatibilidad deí agente tensioactivo. Se puede modificar el punto isoeléctrico de tales enzimas por la sustitución de algunos aminoácidos cargados, por ejemplo, un incremento en el punto isoeléctrico puede ayudar a mejorar la compatibilidad con agentes tensioactivos aniónicos. La estabilidad de las enzimas se puede mejorar adicionalmente por la creación de puentes salinos adicionales por ejemplo, y al reforzar sitios de unión de calcio para incrementar su estabilidad quelatador. Se debe poner atención a celulasas pues la mayor parte de las celulasas tienen dominios de unión (CBD) separados. Las propiedades de tales enzimas se pueden alterar por modificaciones en estos dominios. Tales enzimas normalmente se incorporan en las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas a niveles de 0.0001% a 2% de enzima pura en peso de la composición detergente y/o para el cuidado de telas. Las enzimas se pueden agregar como ingredientes solos separados (grageas 106 granulados, líquidos estabilizados, etc., que contienen una enzima) o como mezclas de dos o más enzimas (por ejemplo cogranulados). Otros ingredientes detergentes adecuados que se pueden agregar son eliminadores de oxidación de enzimas los cuales se describen en la solicitud de Patente Europea copendiente 92870018.6 presentada el 31 de enero de 1992. Los ejemplos de tales eliminadores de oxidación de enzima son tetraetilenopoliaminas etoxiladas. Una gama de materiales enzimáticos y medios para su incorporación en composiciones detergentes sintéticas también se describen en WO 9307263 A y WO 9307260 A para Genencor International, WO 8908694 A para Novo y el documento U.S. 3,553,139, 5 de enero de 1971 para McCarty et al. Se describen adicionalmente enzimas en los documentos U.S. 4,101 ,457, Place et al., 18 de julio de 1978 y en U.S. 4,507,219, Hughes, 26 de marzo de 1985. Los materiales de enzimas útiles para formulaciones detergentes líquidas y su incorporación en tales formulaciones se describen en U.S. 4,261 ,869, Hora et al., 14 de abril de 1981. Las enzimas para uso en detergentes pueden ser estabilizadas por diversas técnicas. Las técnicas de estabilización de enzimas se describen y ejemplifican en U.S. 3,600,319, 17 de agosto de 1971 , Gedge et al., EP 199,404 y EP 200,586, 29 de octubre de 1986, Venegas. Los sistemas de estabilización de enzimas también se describen, por ejemplo, en el documento U.S. 3,519,570. Una cepa útil de Bacillus sp AC13 proporciona proteasas, xilanasas y celulasas, se describe en WO 9401532 A para Novo.

Beneficios de cuidado de color y cuidado de tela Las tecnologías las cuales proporcionan un tipo de beneficio de cuidado de color también se pueden incluir. Los ejemplos de estas tecnologías son catalizadores metalo para mantenimiento de color. Tales catalizadores metalo se describen en la solicitud para Patente Europea copendiente número 92870181.2. Los agentes fijadores de colorantes, dispersión de poliolefinas para evitar arrugas y una absorbencia mejorada de agua, perfume y polímero amino funcional (PCT/US97/16546) para el tratamiento de cuidado de color y sustantividad de perfume son ejemplos adicionales de tecnologías de cuidado de color/cuidado de telas y se describen en la solicitud para Patente copendiente número 96870140.9 presentada el 07 de noviembre de 1996. También se pueden incorporar agentes suavizantes de telas en las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de acuerdo con la presente invención. Estos agentes pueden ser de tipo inorgánico u orgánico. Los agentes suavizantes inorgánicos están ejemplificados por arcillas de smectita descritas en GB-A-1 400 898 y en USP 5,019,292. Los agentes suavizantes de telas orgánicos incluyen aminas terciarias solubles en agua como se describe en GB-A1 514 276 y EP-B0 011 340 y su combinación con sales de amonio monocuatemarias de C12-C14 que se describen en EP-B-0026 527 y EP-B-0 026 528 o diamidas de cadena larga, como se describe en EP-B-0 242 919. Otros ingredientes orgánicos útiles de sistemas suavizantes de telas incluyen materiales de óxido de polietileno de peso molecular elevado como se describe en EP-A-0 299 575 y 0 313 146.

Los niveles de arcilla smectita normalmente están en el intervalo de 2% a 20%, de manera más preferible de 5% a 15% en peso, con el material agregado como componente mixto seco al resto de la formulación. Otros agentes suavizantes de telas orgánicos tales como las aminas terciarias insolubles en agua o materiales de diamida de cadena larga se incorporan a niveles de 0.5% a 5% en peso, normalmente de 1 % a 3% en peso mientras que los materiales de óxido de polietileno de peso molecular elevado y los materiales catiónicos solubles en agua se agregan a niveles de 0.1% a 2%, normalmente de 0.15% a 1.5% en peso. Estos materiales normalmente se agregan a la porción secada por aspersión de la composición, aunque en algunos casos es más conveniente agregarlos como un particulado mixto seco, o rociarlos como un líquido fundido sobre otros componentes sólidos de la composición.

Agentes quelatadores Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas también pueden contener opcionalmente uno o más agentes quelatadors de hierro y/o manganeso. Tales agentes quelatadors se pueden seleccionar del grupo que consiste de aminocarboxilatos, aminofosfonatos, agentes quelatadors aromáticos sustituidos polifuncionalmente y mezclas de los mismos, todos como se definen en lo anterior. Sin intentar unirse a alguna teoría, se considera que el beneficio de estos materiales se debe en parte a su excepcional capacidad para remover iones hierro y manganeso de soluciones de lavado por formación de quelatos solubles. Los aminocarboxilatos útiles como agentes quelatadors opcionales incluyen etilendiaminotetraacetatos, N-hidroxietil-etilendiaminotriacetatos, nitrilotriacetatos, etilendiamino-tetrapropionatos, trietilentetraaminohexaacetatos, dietilentriaminopentaacetatos y etanoldiglicinas, sales de metales alcalinos, de amonio y de amonio sustituido en las mismas y mezclas de los mismos. Los aminofosfonatos también son adecuados para uso como agentes quelatadors en las composiciones de la invención cuando se permiten por lo menos niveles bajos de fósforo total en composiciones detergentes e incluyen etilendiaminotetrakis(metilenfosfonatos) como DEQUEST. Preferiblemente, estos aminofosfonatos no contienen grupos alquilo o alquenilo con más de aproximadamente 6 átomos de carbono. Los agentes quelatadors aromáticos sustituidos polifuncionalmente también son útiles en las composiciones en la presente. Véase la Patente de los Estados Unidos 3,812,044 presentada el 21 de mayo de 1974 para Connor et al. Los compuestos preferidos de este tipo en forma acida son los dihidroxidisulfobencenos tales como 1 ,2-dihidroxi-3,5-disulfobenceno. Un quelatador biodegradable preferido para uso en la presente es etilendiamina disuccinato ("EDDS"), especialmente el isómero [S,S] como se describe en la Patente de los Estados Unidos 4,704,233, 3 de noviembre de 1987 para Hartman y Perkins. Las composiciones en la presente también pueden contener sales de ácido metilglicina diacético solubles en agua (MGDA) (o forma acida) como un quelatador o coaditivo útil con, por ejemplo, aditivos insolubles tales como zeolitas, silicatos estratificados y similares. Si se utilizan, estos agentes quelatadors generalmente comprenden de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 15% en peso de 5 las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas en la presente. De manera más preferible, si se utilizan, estos agentes quelatadors comprenderán de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 3.0% en peso de tales composiciones. 10 Supresor de jabonaduras Otro ingrediente opcional es un supresor de jabonaduras, ejemplificado por siliconas y mezclas de sílice-silicina. Las siliconas pueden ser representadas generalmente por materiales de polisiloxano alquilado mientras que el sílice normalmente se utiliza en forma finamente dividida ejemplificado 15 por aerogeles y xerogeles de sílice y sílices hidrofóbicos de diversos tipos. Estos materiales de pueden incorporar como particulados en los cuales el supresor de jabonaduras es incorporado ventajosamente de manera liberable en un portador soluble en agua o dispersable en agua, sustancialmente un detergente no tensioactivo impermeable. Alternativamente, el supresor de 20 jabonaduras se puede disolver o dispersar en un portador líquido y se puede aplicar por aspersión sobre uno o más de otros componentes. Un agente para control de jabonaduras de silicona preferido se describe en Bartollota et al. Patente de los Estados Unidos 3 933 672. Otros supresores de jabonaduras particularmente útiles son los supresores de jabonaduras de silicona autoemulsificables descritos en la solicitud para Patente Alemana DTOS 2 646 126 publicada el 28 de abril de 1977. Un ejemplo de tal compuesto es DC-544, disponible comercialmente de Dow Corning, el cual es un copolímero de siloxano-glicol. El agente para control de jabonaduras especialmente preferido son los sistemas supresores de jabonaduras que comprenden una mezcla de aceite de silicona y 2-alquil-alcanoles. Los 2-alquilalcanoles adecuados son 2-butiloctanol el cual está disponible comercialmente bajo el nombre comercial Isofol 12 R. Tal sistema supresor de jabonaduras se describe en la solicitud para Patente Europea copendiente N 92870174.7 presentada el 10 de noviembre de 1992. Los agentes controladores de jabonaduras de silicona preferidos especialmente se describen en la solicitud de Patente Europea copendiente número 92201649.8. Tales composiciones pueden comprender una mezcla de silicona/sílice en combinación con sílice no poroso ahumado tales como Aerosil R. Los supresores de jabonaduras descritos antes normalmente se utilizan a niveles de 0.001% a 2% en peso de la composición, preferiblemente de 0.01 % a 1 % en peso.

Otros componentes Se pueden utilizar otros componentes utilizados en las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas, tales como agentes para suspensión de suciedad, agentes liberadores de suciedad, abrillantadores ópticos, abrasivos, bactericidas, inhibidores de deslustrado, agentes colorantes y/o perfumes encapsulados o no encapsulados. Los materiales encapsulantes especialmente adecuados son cápsulas solubles en agua las cuales consisten de una matriz de polisacárido y compuestos polihidroxi tales como se describe en GB 1 ,464,616. Otros materiales encapsulantes solubles en agua adecuados comprenden dextrinas derivadas de ácido de almidón no gelatinizado-ésteres de ácidos dicarboxílicos sustituidos tales como se describen en el documento US 3,455,838. Estas dextrinas de ácido-éster preferiblemente se preparan a partir de almidones tales como maíz ceroso, sorgo ceroso, sagú, tapioca y papa. Los ejemplos adecuados de tales materiales encapuslantes incluyen N-Lok, fabricado por National Starch. El material encapsulante N-Lok consiste de almidón de maíz modificado y glucosa. El almidón se modifica al agregar grupos sustituidos monofuncionales tales como anhídrido de ácido octenilsuccínico. Los agentes antirredeposición y para suspensión de suciedad adecuados en la presente incluyen derivados de celulosa tales como metilcelulosa, carboximetilcelulosa e hidroximetilcelulosa, y ácidos policarboxílicos homo- o co-poliméricos o sus sales. Los polímeros de este tipo ¡ncluyen los poliacrilatos y copolímeros de anhídrido maleico-ácido acrílico mencionados previamente como aditivos, así como copolímeros de anhídrido maleico con etileno, metilviniléter o ácido metacrílico, el anhídrido maleico constituye por lo menos 20 moles por ciento del copolímero. Estos materiales normalmente se utilizan a niveles de 0.5% a 10% en peso, de manera más preferible de 0.75% a 8%, y de manera mucho más preferible de 1% a 6% en peso de la composición. Los abrillantadores ópticos preferidos son de carácter aniónico, los ejemplos de los cuales son 4,4'-bis-(2-dietanolamino-4-anilino-s-triazin-6-ilamino)estilbeno.2:2'-disulfonato de disodio, 4,4'-bis(2-morfolino-4-an¡lino-s-triazin-6-ilamino-estilbeno-2:2'-disulfonato de disodio, 4,4'-bis-(2,4-dianilino-s-triazin-6-ilamino)estilbeno-2:2'-disulfonato de disodio, 4',4"-bis-(2,4-dianilino-s-triazin-6-ilamino)estilben-2-sulfonato de monosodio, 4,4'-bis-(2-anilino-4-(N-metil-N-2-hidroxietilamino)-s-triazin-6-ilamino)estilbeno-2,2'-disulfonato de disodio, 4,4'-bis-(4-fenil-2,1 ,3-triazol-2-il)-estilbeno-2,2'-disulfonato de disodio, 4,4'-bis(2-anilino-4-(1 -metil-2-h¡drox¡etilamino)-s-triazin-6-ilamino)estilben-2,2'-disulfonato de sodio, 2(estilbil-4"-(nafto-1',2':4,5)-1 ,2,3-triazol-2"-sulfonato de disodio y 4,4'-bis(2-sulfostiril)bifenilo de sodio. Los abrillantadores altamente preferidos son los abrillantadores específicos descritos en el documento EP 753 567. Otros materiales poliméricos útiles son los polietilenglicoles, particularmente aquellos de peso molecular 1000-10000, de manera más particular 2000 a 8000, y de manera más preferible de aproximadamente 4000. Estos se utilizan a niveles de 0.20% a 5%, de manera más preferible de 0.25% <éí*"**,*C a 2.5% en peso. Estos polímeros y las sales homo- o co-poliméricas de policarboxilato mencionadas previamente son útiles para mejorar el mantenimiento de blancura, la deposición de ceniza en la tela y el desempeño limpiador sobre arcilla, manchas proteináceas y oxidables en presencia de impurezas de metales de transición. Los agentes liberadores de suciedad útiles en composiciones de la presente invención convencionalmente copolímeros o terpolímeros de ácido tereftálico con etilenglicol y/o unidades de propilenglicol en diversas disposiciones. Los ejemplos de tales polímeros se describen en las Patentes de los Estados Unidos cedidas comúnmente números 4116885 y 4711730 y la Solicitud para Patente Europea publicada número 0 272 033. Un polímero particular preferido de acuerdo con EP-A-0 272 033 tiene la fórmula (CH3/(PEG)43)075(POH)o 25[T- O)2 s(T-PEG)o ]T(PO-H)025((PEG)43CH3)075 en donde PEG es -(OC2H4)O-, PO es (OC3H6O) y T es (pcOC6H4CO). Además son muy útiles los poliésteres modificados como copolímeros aleatorios de dimetiltereftalato, dimetilsulfoisoftalato, etilenglicol y 1-2-propanodiol, los grupos de extremo consisten principalmente de sulfobenzoato y en segundo lugar de monoésteres de etilenglicol y/o propanodiol. El objetivo es obtener un polímero rematado en ambos extremos por grupos sulfobenzoato, "principalmente" en el presente contexto significa la mayor parte de los copolímeros en la presente estarán rematados en el extremo por grupos sulfobenzoato. Sin embargo, algunos copolímeros estarán menos que rematados completamente, y por lo tanto sus grupos de extremo pueden consistir de monoéster de "etiléngíicol y/o propano 1 ,2-diol de los mismos que consisten "secundariamente" de tales especies. Los poliésteres seleccionados en la presente contienen aproximadamente 46% en peso de ácido dimetiltereftálico, aproximadamente 16% en peso de propano-1 ,2-diol, aproximadamente 10% en peso de etilenglicol, aproximadamente 13% en peso de ácido dimetilsulfobenzoico y aproximadamente 15% en peso de ácido sulfoisoftálico, y tienen un peso molecular de aproximadamente 3000. Los poliésteres y su método de preparación se describen con detalle en EPA 311 342. Es bien sabido en la técnica que el cloro libre en el agua corriente desactiva rápidamente las enzimas comprendidas en composiciones detergentes. Por lo tanto, se utiliza un eliminador de cloro tal como perborato, sulfato de amonio, sulfito de sodio o polietilenimina a un nivel superior a 0.1% en peso de la composición total, en las fórmulas, lo cual proporcionará una mejoría a través del lavado en la estabilidad de las enzimas detergentes. Las composiciones que comprenden eliminadores de cloro se describen en la solicitud de Patente Europea 92870018.6 presentada el 31 de enero de 1992. Los policarboxilatos alcoxílados tales como los preparados a partir de poliacrilatos son útiles en la presente para proporcionar un funcionamiento adicional de remoción de grasa. Tales materiales se describen en WO 91/08281 y PCT 90/01815 en p. 4 et seq., incorporada en la presente como referencia. Químicamente, estos materiales comprenden poliacrilatos que tienen una cadena lateral etoxi por cada 7-8 unidades acrilato. Las cadenas lía- laterales son de la fórmula -(CH2CH2?) (CH2)nCH3 en donde m es 2-3 y n es 6- 12. Las cadenas laterales están unidas a éster a la "estructura principal" de poliacrilato para proporcionar una estructura de tipo de polímero de "peine". El peso molecular puede variar, pero típicamente está en el intervalo de 5 aproximadamente 2000 a aproximadamente 50,000. Tales policarboxilatos alcoxilados pueden comprender de aproximadamente 0.05% a 10% en peso de las composiciones en la presente.

Dispersantes 10 La composición detergente y/o para el cuidado de telas de la presente invención también puede contener dispersantes: Las sales orgánicas solubles en agua adecuadas son los ácidos homo- o co-poliméricos o sus sales, en los cuales el ácido policarboxílico comprende por lo menos dos radicales carboxilos separados entre si por como máximo dos átomos de 15 carbono. Los polímeros de este tipo se describen en GB-A-1 ,596,756. Los ejemplos de tales sales son poliacrilatos de peso molecular 2000-5000 y sus copolímeros con anhídrido maleico, tales copolímeros tienen un peso molecular desde 1000 hasta 100,000. Especialmente, el copolímero de acrilato y metacrilato tal como 480N que tiene un peso molecular de 4000, a un nivel de 20 0.5-20% en peso de composición se puede agregar en las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención. Las composiciones de la invención pueden contener un compuesto peptizador de jabón de cal el cual preferiblemente tiene un poder dispersante de jabón de cal (LSDP), como se define en lo siguiente no mayor de 9, preferiblemente no mayor de 7, de manera más preferible no mayor de 6.

El compuesto peptizador de jabón de cal preferiblemente está presente a un nivel de 0% a 20% en peso. Una medida numérica de la efectividad de un peptizador de jabón de cal se proporciona por la potencia dispersante de jabón de cal (LSDP) la cual se determina utilizando la prueba de dispersante de jabón de cal como se describe en un artículo por H.C. Borghetty and C.A. Bergman, J. Am. Oil. Chem.

Soc, volumen 27, páginas 88-90 (1950). Este método de prueba de dispersión de jabón de cal se utiliza ampliamente por los practicantes en este campo de la técnica al que se hace referencia, por ejemplo, en los siguientes artículos de revisión; W.N. Linfield, Surfactant science Series, Volumen 7, página 3; W.N.

Linfield, Tenside surf. det., volumen 27, páginas 159-163, (1990); y M.K.

Nagarajan, W.F. Masler, Cosmetics and Toiletries, volumen 104, páginas 71-73, (1989). El LSDP es la proporción % en peso de agente dispersante respecto a oleato de sodio necesaria para dispersar los depósitos de jabón de cal formados por 0.025 g de oleato de sodio en 30 ml de agua de una dureza equivalente de 333 ppm de CaCO3 (Ca:Mg=3:2). Los agentes tensioactivos que tienen buena capacidad peptizadora de jabón de cal incluirán ciertos óxidos de amina, betaínas, sulfobetaínas, alquiletoxisulfatos y alcoholes etoxilados. Los agentes tensioactivos ejemplares que tienen LSDP no mayor de 8 para uso de acuerdo con la presente invención incluyen óxido de dimetilamina C16-C18, alquiletoxisulfatos C12-C18 con un grado promedio de etoxilación de 1-5, particularmente un agente tensioactivo de alquiletoxisulfato de C12-C15 con un grado de etoxilación de una cantidad de 3 (LSDP=4), y los alcoholes etoxilados C14-C15 con un grado promedio de etoxilación de ya sea 12 (LSDP=6) o 30, vendidos bajo los nombres comerciales Lutensol A012 y Lutensol A030, respectivamente, por BASF GmbH. Los peptizadores de jabón de cal poliméricos adecuados para uso en la presente se describen en el artículo por M.K. Nagarajan, W.F. Masler, que se encuentra en Cosmetics and Toiletries, volumen 104, páginas 71-73 (1989). Los blanqueadores hidrofóbicos tales como 4-[N-octanoil-6-aminohexanoiljbencensulfonato, 4-[N-nonaoil-6-aminohexanoiljbencenosulfonato, 4-[N-decanoil-6-aminohexanoiljbencenosulfonato y mezclas de los mismos; y nonanoiloxibencensulfonato junto con formulaciones blanqueadores hidrofílicas/hidrofóbicas también se pueden utilizar como compuestos peptizadores de jabón de cal.

Inhibición de transferencia de colorantes Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención también pueden incluir compuestos para inhibir la transferencia de colorantes de una tela a otra de colorantes solubilizados y suspendidos que se encuentren durante las operaciones de lavandería de telas que involucran telas de colores.

Agentes poliméricos inhibidores de transferencia de colorantes Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de acuerdo con la presente invención también comprenden de 0.001% a 10%, preferiblemente de 0.01% a 2%, de manera más preferible de 0.05% a 1% en peso de agentes poliméricos inhibidores de transferencia de colorantes. Tales agentes poliméricos inhibidores de transferencia de colorantes normalmente se incorporan en las composiciones detergentes con el fin de inhibir la transferencia de colorantes de telas coloreadas a telas lavadas con los mismos. Estos polímeros tienen la capacidad de formar complejos o absorber colorantes fugitivos que se separan por lavado de telas teñidas antes de que los colorantes tengan la oportunidad de unirse a otros artículos en el lavado. Los agentes poliméricos inhibidores de transferencia de colorantes adecuados especialmente son polímeros de poliamina N-óxido, copolímeros de N-vinilpirrolidona y polímeros de N-vinilimidazol, polivinilpirrolidona, poliviniloxazolidonas y polivinilimidazoles, o mezclas de los mismos. La adición de tales polímeros también mejora el funcionamiento de las enzimas, de acuerdo con la invención. a) Polímeros de poliamina N-óxido Los polímeros de poliamina N-óxido adecuados para uso contienen unidades que tienen la siguiente fórmula estructural: en donde P es una unidad polimerizable, en donde el grupo R-N-O se puede unir o en donde el grupo R-N-O forma parte de la unidad polimerizable o una combinación de ambos. O O O II II II , co, c -o-.-s-, -N- , AesNC, x es 0 ó 1 ; R son grupos alifáticos, alifáticos etoxilados, aromáticos, heterocíclicos o alíclicos o cualquier combinación de los mismos, en donde el nitrógeno del grupo N-O puede estar unido, o en donde el nitrógeno del grupo N-O es parte de estos grupos. El grupo N-O puede estar representado por las siguientes estructuras generales: (Ri)? _N'_R2 )y N'_ÍR 1>X ( 3)Z en donde R1 , R2 y R3 son grupos alifáticos, aromáticos, heterocíclicos o alicíclicos o combinaciones de los mismos, X o/e y o/y z es 0 ó 1 , y en donde el nitrógeno del grupo N-O puede estar unido o en donde el nitrógeno del grupo N-O forma parte de estos grupos. El grupo N-O puede ser parte de la unidad polimerizable (P) o se puede unir á la estructura principal polimérica o una combinación de ambas. Los poliamina N-óxidos adecuados en donde el grupo N-O forma parte de la unidad polimerizable comprende poliamina N-óxidos, en donde R se selecciona de grupos alifáticos, aromáticos, alicíclicos o heterocíclicos. Una clase de poliamina N-óxidos comprende el grupo de poliamina N-óxidos en donde el nitrógeno del grupo N-O forma parte del grupo R. Los poliamina N-óxidos preferidos son aquellos en los que R es un grupo heterocíclico tal como piridina, pirrol, imidazol, pirrolidina, piperidina, quinolina, acridina y derivados de los mismos. Otra clase de poliamina N-óxidos comprende el grupo de poliamina N-óxidos en donde el nitrógeno del grupo N-O está unido al grupo R. Otros poliamina N-óxidos adecuados son los poliamina óxidos en donde el grupo N-O está unido a la unidad polimerizable. La clase preferida de estos poliamina-N-óxidos son poliamina N-óxidos que tienen la fórmula general (I) en donde R son grupos aromáticos, heterocíclicos o alicíclicos en donde el nitrógeno del grupo funcional N-O es parte del grupo R. Los ejemplos de estas clases de poliamina óxidos en donde R es un compuesto heterocíclico tal como plridina, pirrol, imidazol y derivados del mismo. Otra clase preferida de poliamina N-óxidos son las poliamina óxidos que tienen la fórmula general (I) en donde R son grupos aromáticos, heterocíclicos o alicíclicos, en donde el nitrógeno del grupo funcional N-O está unido a los grupos R. Los ejemplos de estas clases son poliamina óxidos en donde los grupos R pueden ser aromáticos tales como fenilo. Cualquier estructura principal polimérica se puede utilizar en la medida en que el polímero de amina óxido formado sea soluble en agua y tenga propiedades inhibidoras de transferencia de colorante. Los ejemplos de estructuras principales poliméricas adecuadas son polivinilos, polialquilenos, poliésteres, poliéteres, poliamida, poliimidas, poliacrilatos y mezclas de los mismos. Los polímeros de amina N-óxido de la presente invención típicamente tienen una proporción de amina respecto a amina N-óxido de 10:1 a 1 :1 ,000,000. Sin embargo, la cantidad de grupos amina óxido presentes en el polímero de poliamina óxido puede variar por copolimerización apropiada o por un grado apropiado de N-oxidación. Preferiblemente, la proporción de amina respecto a amina-óxido es de 2:3 a 1 :1 ,000.000. De manera más preferible de 1 :4 a 1 ,000.000, de manera mucho más preferible de 1 :7 a 1 :1 ,000.000. Los polímeros de la presente invención en realidad abarcan copolímeros aleatorios o de bloque en donde un tipo de monómero es una amina N-óxido y el otro tipo de monómero es ya sea una amina N-óxido o no. La unidad de amina óxido de las poliaminas N-óxido tiene una PKa < 10, preferiblemente PKa < 7, de manera más preferible PKa < 6. Las poliamina óxidos se pueden obtener en casi cualquier grado de polimerización. El grado de polimerización no es crítico con la condición de que el material tenga la potencia de solubilidad en agua y suspensión de colorantes que se desea. Típicamente, el peso molecular promedio está dentro del intervalo de 500 a 1 ,000.000, de manera preferible de 1 ,000 a 50,000, de manera más preferible de 2,000 a 30,000, y de manera mucho más preferible de 3,000 a 20,000. b) Copolímeros de N-vinilpirrolidona y N-vinilimidazol Los polímeros de N-vinilimidazol N-vinilpirrolidona utilizados en la presente invención tienen un intervalo de peso molecular promedio de 5,000-1 ,000.000, preferiblemente de 5,000-200,000. Los polímeros altamente preferidos para uso en composiciones detergentes de acuerdo con la presente invención comprenden un polímero que se selecciona de copolímeros de N-vinilimidazol, N-vinilpirrolidona, en donde el polímero tiene un intervalo de peso molecular promedio de 5,000 a 50,000, de manera más preferible de 8,000 a 30,000, de manera mucho más preferible de 10,000 a 20,000. El intervalo de peso molecular promedio se determina por dispersión de luz como se describe en Barth H.G. and Mays J.W. Chemical Analysis Vol. 113, "Modern Methods of Polymer Characterization".

Los copolímeros de N-vinilimidazol y N-vinilpirrolidona altamente preferidos tienen un intervalo de peso molecular promedio de 5,000 a 50,000; de manera más preferible de 8,000 a 30,000; y de manera mucho más preferible de 10,000 a 20,000. Los copolímeros de N-vinilimidazol y N-vinilpirrolidona caracterizados porque tienen un intervalo de peso molecular promedio proporcionan excelentes propiedades inhibidoras de transferencia de colorante y al mismo tiempo no afectan de manera adversa el funcionamiento limpiador de las composiciones detergentes formuladas con los mismos. El copolímero de N-vinilimidazol y N-vinilpirrolidona de la presente invención tiene una proporción molar de N-vinilimidazol respecto a N-vinilpirrolidona de 1 a 0.2, de manera más preferible de 0.8 a 0.3, de manera mucho más preferible de 0.6 a 0.4. c) Polivinilpirrolidona Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de la tela de la presente invención también pueden utilizar polivinilpirrolidona ("PVP") que tiene un peso molecular promedio de aproximadamente 2,500 a aproximadamente 400,000, preferiblemente de aproximadamente 5,000 a aproximadamente 200,000, de manera más preferible de aproximadamente 5,000 a aproximadamente 50,000, y de manera mucho más preferible de aproximadamente 5,000 a aproximadamente 15,000. Las polivinilpirrolidonas adecuadas están disponibles comercialmente de ISP Corporation, New York, NY y Montreal, Canadá bajo los nombres de producto PVP K-15 (peso molecular por viscosidad de 10,000), PVP K-30 (peso molecular promedio de 40,000), PVP K-60 (peso molecular por viscosidad de 160,000) y PVP K-90 (peso molecular promedio de 360,000). Otras polivinilpirrolidonas adecuadas las cuales están disponibles comercialmente de BASF Cooperation que incluye Sokalan HP 165 y Sokalan HP 12; polivinilpirrolidonas conocidas por las personas expertas en el campo de detergentes (véase por ejemplo EP-A-262,897 y EP-A-256,696). d) Poliviniloxazolidona: Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención también pueden utilizar poliviniloxazolidona como un agente polimérico inhibidor de transferencia de colorante. Tales poliviniloxazolidonas tienen un peso molecular promedio de aproximadamente 2,500 a aproximadamente 400,000, de manera preferible de aproximadamente 5,000 a aproximadamente 200,000, de manera más preferible de aproximadamente 5,000 a aproximadamente 50,000, y de manera mucho más preferible de aproximadamente 5,000 a aproximadamente 15,000. e) Polivinilimidazol: Las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas de la presente invención también pueden utilizar polivinilimidazol como un agente polimérico inhibidor de transferencia de colorante. Tales polivinilimidazoles ít? tienen un promedio de aproximadamente 2,500 a aproximadamente 400,000, preferiblemente de aproximadamente 5,000 a aproximadamente 200,000, de manera más preferible de aproximadamente 5,000 a aproximadamente 50,000, y de manera más preferible de aproximadamente 5,000 a aproximadamente 15,000. f) Polímeros reticulados: Los polímeros reticulados son polímeros cuya estructura principal está interconectada en un cierto grado: estos enlaces pueden ser de naturaleza química o física, posiblemente con N grupos activos en la estructura principal o en las ramas; los polímeros reticulados se han descrito en Journal of Polymer Science, volumen 22, páginas 1035-1039. En una modalidad, los polímeros reticulados se fabrican de manera tal que forman una estructura rígida tridimensional la cual puede atrapar colorantes en los poros formados por la estructura tridimensional. En otra modalidad, los polímeros reticulados atrapan a los colorantes por hinchado. Tales polímeros reticulados se describen en la solicitud de Patente copendiente 94870213.9.

Método de lavado Las composiciones de la invención se pueden utilizar esencialmente en cualquier método de lavado o limpiado, que incluye métodos de enjuagado, métodos de pretratamiento y métodos con etapas de enjuagado para los cuales se puede agregar una composición auxiliar de enjuagado separada. El proceso descrito en la presente comprende fibras de contacto, de trastes o cualquier superficie dura adicional con una solución limpiadora de la manera habitual y como se ejemplifica en lo siguiente. El proceso de la invención se lleva a cabo convenientemente en el curso del proceso de limpiado. El método de limpiado preferiblemente se lleva a cabo de 5°C a 95°C, especialmente entre 10°C y 60°C. El pH de la solución de tratamiento es preferiblemente de 7 a 12. Los métodos preferidos de lavado de trastes manual incluyen la aplicación de una solución concentrada a las superficies de los trastes o el enjuagado en un volumen grande de una solución diluida de composición detergente. Los siguientes ejemplos significan composiciones que ejemplifican la presente invención, pero no necesariamente significan limitar o definir de alguna otra manera el alcance de la invención. En las composiciones detergentes y/o para el cuidado de telas, los niveles de enzima se expresan por enzima pura en peso de la composición total y, a menos que se especifique de otra manera, los ingredientes del detergente se expresan en peso de las composiciones totales. Las identificaciones abreviadas de los componentes en la presente tienen los siguientes significados: LAS Alquilbencensulfonato sódico lineal de Cn-13. TAS Sebo alquil sulfato sódico. CxyAS Alquilsulfato de sodio de C?x - C?y.

CxySAS (2,3)alquilsulfato secundario sódico de C?x-C?y. CxyEz Alcohol primario lineal predominantemente C?x-C?y condensado con un promedio de z moles de óxido de etileno. CxyEzS Alquilsulfato sódico de C?x-C?y condensado con un promedio de z moles de óxido de etileno. QAS R2.N+(CH3)2(C2H4OH) con R2 = C12-C14. QAS 1 R2.N+(CH3)2(C2H4OH) con R2 = Cß-Cn. APA Amidopropildimetilamina de Cs-Cio. Jabón Alquilcarboxilato lineal sódico derivado de una mezcla 80/20 de ácidos grasos de sebo y de coco. No iónico Alcohol graso etoxilado/propoxilado mixto de C3-C15 con un grado promedio de etoxilación de 3.8 y un grado promedio de propoxilación de 4.5. Neodol 45-13: Etoxilado de alcohol primario lineal de C14-C15, vendido por Shell Chemical CO. STS Toluensulfonato sódico. CFAA Alquil N-metilglucamida de C12-C14. TFAA Alquil N-metilglucamida de C16-C18. TPKFA Ácidos grasos cortados completos superiores de C?2- Silicato Silicato de sodio amorfo (proporción SiO2:Na2O = 1.6- 3.2).

Metasilicato Metasilicato sódico (proporción S¡O2:Na2? = 1.0). Zeolita A Aluminicato sódico hidratado de fórmula Nai2(Al?2Si?2)i2-27H2? que tiene un tamaño de partícula primario en el intervalo de 0.1 a 10 micrómetros (peso expresado sobre una base anhidra). Na-SKS-6 Silicato estratificado cristalino de fórmula d-Na2SÍ2?s. Citrato Citrato trisódico dihidratado de actividad 86.4% con una distribución de tamaño de partícula entre 425 y 10 850 micrómetros. Cítrico Ácido cítrico anhidro. Borato Borato de sodio. Carbonato Carbonato de sodio anhidro con un tamaño de partícula entre 200 y 900 micrómetros. 15 Bicarbonato Carbonato ácido de sodio anhidro con una distribución de tamaño de partícula entre 400 y 1200 micrómetros. Sulfato Sulfato de sodio anhidro. Mg Sulfato Sulfato de magnesio anhidro. STPP Tripolifosfato sódico. 20 TSPP Pirofosfato tetrasódico. MA/AA Copolímero aleatorio de acrilato/maleato 4:1 , peso molecular promedio de aproximadamente 70,000- 80,000. <B- Jurt, _-*| £ -f MA/AA 1 Copolímero aleatorio de acrilato/maleato 6:4, peso molecular promedio de aproximadamente 10,000. AA Polímero de poliacrilato sódico de peso molecular promedio 4,500. PA30 Ácido poliacrílico de peso molecular promedio entre aproximadamente 4,500-8000. 480N Copolímero aleatorio de acrilato/metacrilato 7:3 con peso molecular promedio de aproximadamente 3,500. Poligel/carbopol: Poliacrilatos reticulados de peso molecular elevado PB1 Perborato de sodio anhidro monohidratado de fórmula nominal NaB?2.H2?2 PB4 Perborato de sodio tetrahidratado de fórmula nominal NaBO2.3H2.H2O2. Percarbonato: Percarbonato de sodio anhidro de fórmula nominal 2Na2CO3.3H2O2. NaDCC Dicloroisocianurato de sodio. TAED Tetraacetiletilendiamina. NOBS Nonanoiloxibencensulfonato en forma de sal de sodio. NACA-OBS (6-nonamidocappl)oxibencensulfonato. DTPA Ácido dietilentriaminopentaacético. HEDP Ácido 1 ,1-hidroxietianodifosfónico, DETPMP Dietiltriaminapenta(metilen)fosfonato, vendido por Monsanto bajo el nombre comercial Dequest 2060.

EDDS Isómero (S,S) de ácido etilendiamino-N.N'-disuccínico en forma de su sal de sodio. MnTACN 1 ,4,7-trimetil-1 ,4,7-triazaciclononano de manganeso. Blanqueador : Ftalocianina de zinc sulfonada encapsulada en polímero soluble de dextrina Blanqueador 1 Aluminoftalocianina sulfonada encapsulada en polímero soluble de dextrina. PAAC Sal de cobalto (lll) de pentaaminaacetato. Parafina Aceite de parafina vendido bajo el nombre comercial Winog 70 por Wintershall. NaBz Benzoato de sodio. BzP Peróxido de benzoilo. Mananasa Mananasa de Bacillus agaradherens, NCIMB 40482 Proteasa Enzima proteolítica vendida bajo el nombre comercial Savinase, Alcalase, Durazym por Novo Nordisk A/S, Maxacal, Maxapem vendida por Gist-Brocades y proteasas descritas en las patentes WO91/06637 y/o WO95/10591 y/o EP 251 446. Amilasa Enzima amilolítica vendida bajo el nombre comercial Purafact Ox AmR descrita en WO 94/18314, WO96/05295 vendida por Genencor; TermamylMR, FungamylMR y DuramylMR, todos disponibles de Novo Nordisk A/S y descritas en WO95/26397. 1Í6 Lipasa Enzima lipolítica vendida bajo el nombre comercial Lipolase, Lipolase Ultra por Novo Nordisk A/S y Lipomax por Gist-Brocades. Celulasa Enzima celulítica vendida bajo el nombre comercial Carezyme, Celluzyme y/o Endolase por Novo Nordisk A/S. CMC Carboximetilcelulosa sódica. PVP Polímero de polivinilo con un peso molecular promedio de 60,000. PVNO Polivinilpiridina-N-óxido con un peso molecular promedio de 50,000. PVPVI : Copolímero de vinilimidazol y vinilpirrolidona con un peso molecular promedio de 20,000. Abrillantador 1 : 4,4'-bis(2-sulfostiril)bífenil disódico. Abrillantador 2: 4,4'-bis(4-anilino-6-morfolino-1 ,3,5-triazil-2-i)estilben-2:2'- disulfonato disódico. Antiespumante de Silicona Controlador de espuma de polidimetilsiloxano con un copolímero siloxano-oxialquileno como agente dispersante con una proporción de controlador de espuma respecto al agente dispersante de 10:1 a 100:1. Supresor de Jabonadura Silicona 12%/sílice, alcohol estearílico 18%, almidón 70% en forma granular. Opacificante Mezcla de monoestireno de látex basada en agua vendida por BASF Aktiengesellschaft bajo el nombre comercial Lytron 621. SRP 1 Poliésteres rematados en extremo aniónicamente. SRP 2 Copolímero de bloque poli(1 ,2-propilentereftalato) corto dietoxilado. QEA bis((C2H5O)(C2H4?)n)(CH3)-N+-C6H?2-N+-(CH3) b¡s((C2H5OMC2H4O))n en donde n = de 20 a 30. PEÍ Polietilenimina con un peso molecular promedio de 1800 y un grado de etoxilación promedio de 7 residuos etilenoxi por nitrógeno. SCS Cumenosulfonato sódico. HMWPEO Óxido de polietileno de peso molecular elevado. PEGx Polietilenglicol de un peso molecular de x PEO Óxido de polietileno, con un peso molecular promedio de 5,000. TEPAE Tetraetilenpentaamina etoxilato BTA Benzotriazol. PH Medido como una solución 1% en agua destilada a 20°C. . ..- *j EJEMPLO 1 Se prepararon las siguientes composiciones detergentes de lavandería de alta densidad, de acuerdo con la presente invención: I II lll IV LAS 8.0 2.0 6.0 6.0 TAS 0.5 0.5 1.0 0.1 C46(S)AS 2.5 C25AS 7.0 4.5 5.5 C68AS 5.0 C25E5 10.0 4.6 4.6 C25E7 3.4 C25E3S 2.0 5.0 4.5 QAS 0.8 QAS 1 - 0.8 0.5 1.0 Zeolita A 18.0 18.1 20.0 18.1 Cítrico - 2.5 - 2.5 Carbonato 13.0 10.0 10.0 13.0 Na-SKS-6 - 10.0 - 10.0 Silicato 1.4 0.3 0.5 0.3 Citrato 1.0 3.0 - -Sulfato 26.1 6.0 - -Mg sulfato 0.2 . 0.2 MA/AA 0.3 4.0 1.0 1.0 CMC 0.2 0.2 0.4 0.4 PB4 9.0 _ _ _ Percarbonato 18.0 18.0 TAED 0.4 3.9 4.2 NACA-OBS 2.0 DETPMP 0.25 0.25 SRP 1 0.2 0.2 EDDS 0.25 0.5 0.5 CFAA 1.0 2.0 - - HEDP 0.3 0.3 0.4 0.4 QEA - 0.2 - 0.5 Mananasa 0.001 0.02 0.001 0.002 Proteasa 0.009 0.04 0.05 0.03 Amilasa 0.002 0.006 0.008 0.008 Celulasa - 0.0007 0.0007 0.0007 Lipasa - 0.01 0.01 0.01 Blanqueador 15 20 20 Fotoactivado (ppm) PVNO/PVPVI 0.1 Abrillantador 1 0.09 0.09 0.09 Perfume 0.3 0.4 0.4 0.4 Silicona antiespumante 0.5 0.3 0.3 Densidad en g/litro 850850 850 850 Diversos y menores hasta 100% EJEMPLO 2 Se prepararon las siguientes composiciones detergentes de lavandería granular de utilidad particular bajo condiciones Europeas de lavado a máquina, de acuerdo con la presente invención: I II lll IV V VI LAS 5.5 7.5 5.0 5.0 6.0 7.0 TAS 1.25 1.9 0.8 0.4 0.3 C24AS/C25AS 2.2 5.0 5.0 5.0 2.2 C25E35S 0.8 1.0 1.5 3.0 1.0 C45E7 3.25 3.0 TFAA 2.0 C25E5 5.5 QAS 0.8 QAS 1 0.7 1.0 0.5 1.0 0.7 STPP 19.7 Zeolita A 19.5 25.0 19.5 20.0 17.0 NaSKS-6/ácido Cítrico 10.6 10.6 (79:21 ) Na-SKS-6 9.0 10.0 10.0 Carbonato 6.1 21.4 9.0 10.0 10.0 18.0 Bicarbonato 2.0 7.0 5.0 2.0 Silicato 6.8 0.3 0.5 Citrato 4.0 4.0 Sulfato 39.8 5.0 12.0 Mg sulfato 0.1 0.2 0.2 MA/AA 0.5 1.6 3.0 4.0 1.0 1.0 CMC 0.2 0.4 1.0 1.0 0.4 0.4 PB4 5.0 12.7 Percarbonato 18.0 15.0 TAED 0.5 3.1 5.0 NACA-OBS 1.0 3.5 2.5 DETPMP 0.25 0.2 0.3 0.4 0.2 HEDP 0.3 0.3 0.3 0.3 QEA 1.0 1.0 1.0 Mananasa 0.001 0.002 0.002 0.001 0.002 0.001 Proteasa .009 0.03 .03 0.05 0.05 0.02 Lipasa .003 0.003 .006 0.006 0.006 0.004 Celulasa 0.0006 0.0006 0.00050.00050.00070.0007 Amilasa 0.002 0.002 0.006 0.006 0.01 0.003 PVNO/PVPVI 0.2 0.2 PVP 0.9 1.3 0.9 "lü?si?. 1$2 SRP 1 0.2 0.2 0.2 Blanqueador 15 27 20 20 Fotoactivado (ppm) Blanqueador 15 Fotoactivado 1 (ppm) Abrillantador 1 0.08 0.2 0.09 0.15 Abrillantador 2 0.04 Perfume 0.3 0.5 0.4 0.3 0.4 0.3 Silicona antiespumante 0.5 2.4 0.3 0.5 0.3 2.0 Densidad en g/litro 750 750 750 750 750 750 Diversos y menores Hasta 100% EJEMPLO 3 Se prepararon las siguientes composiciones detergentes granulares de acuerdo con la presente invención: I II lll IV V VI Polvo soplado LAS 23.0 8.0 7.0 9.0 7.0 7.0 TAS 1.0 C45AS 6.0 6.0 5.0 8.0 C45AES 1.0 1.0 1.0 C45E35 2.0 4.0 .*& Zeolita A 10.0 18.0 14.0 12.0 10.0 10.0 MA/AA 0.5 2.0 MA/AA 1 7.0 AA 3.0 3.0 2.0 3.0 3.0 Sulfato 5.0 6.3 14.3 11.0 15.0 19.3 Silicato 10.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 Carbonato 15.0 20.0 10.0 20.7 8.0 6.0 PEG 4000 0.4 1.5 1.5 1.0 1.0 1.0 DTPA 0.9 0.5 0.5 Abrillantador 2 0.3 0.2 0.3 0.1 0.3 Aspersión sobre C45E7 2.0 2.0 2.0 C25E9 3.0 C23E9 1.5 2.0 2.0 Perfume 0.3 0.3 0.3 2.0 0.3 0.3 Aglomerados C45AS 5.0 5.0 2.0 5.0 LAS 2.0 2.0 2.0 Zeolita A 6.5 6.5 7.0 7.5 Carbonato 4.0 4.0 5.0 4.0 PEG 4000 0.5 0.5 0.5 Diversos, (agua, etc.) 2.0 2.0 2.0 2.0 Aditivos secos QAS 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 Cítrico 2.0 PB4 12.0 1.0 PB1 4.0 1.0 3.0 2.0 Percarbonato 2.0 9.0 Carbonato 5.3 1.8 4.0 4.0 NOBS 4.0 6.0 . 0.6 Metilcelulosa 0.2 Na-SKS-6 8.0 STS 2.0 1.0 Ácido culmeno Sulfónico 1.0 2.0 mananasa 0.001 0.002 0.001 0.02 0.001 0.02 Proteasa 0.02 0.02 0.02 0.01 0.02 0.02 Lipasa 0.004 0.004 0.004 0.008 Amilasa 0.003 0.002 0.003 Celulasa 0.0005 0.0005 0.0005 0.0007 0.0005 0.0005 PVPVI 0.5 0.1 PVP 0.5 PVNO 0.5 0.3 QEA 1.0 SRP 1 0.2 0.5 0.3 0.2 Silicona antiespumante 0.2 0.4 0.2 0.4 0.1 Mg sulfato 0.2 0.2 Diversos y menores hasta 100% EJEMPLO 4 Las siguientes composiciones detergentes se preparan de acuerdo con la presente invención: 10 Polvo soplado Zeolita A 14.0 15.0 15.? Sulfato - 5.0 - LAS 3.0 3.0 3.0 15 QAS 1.0 1.5 1.5 DETPMP 0.4 0.2 0.4 EDDS - 0.4 0.2 CMC 0.4 0.4 0.4 MA/AA 4.0 2.0 2.0 20 Aglomerado LAS 5.0 5.0 5.0 TAS 2.0 2.0 2.0 Silicato 3.0 3.0 3.0 Zeolita A 8.0 8.0 8.0 Carbonato 8.0 8.0 4.0 Aspersión Perfume 0.3 0.3 0.3 C45E7 2.0 2.0 2.0 C25E3 2.0 Aditivos secos Citrato 5.0 2.0 Bicarbonato - 3.0 - Carbonato 8.0 15.0 10.0 TAED 6.0 2.0 5.0 PB1 14.0 7.0 10.0 PEO - - 0.2 Arcilla de bentonita - - 10.0 Mananasa 0.001 0.02 0.0015 Proteasa 0.03 0.03 0.03 Lipasa 0.008 0.008 0.008 Celulasa 0.001 0.001 0.001 Amilasa 0.01 0.01 0.01 Silicona antiespumante 5.0 5.0 5.0 Sulfato - 3.0 - Densidad (g/litro) 850 850 850 Diversos y menores hasta 100% EJEMPLO 5 Se preparan las siguientes composiciones detergente de acuerdo con la presente invención: IV LAS 18.0 14.0 23.0 20.0 QAS 0.7 1.0 1.0 0.7 TFAA ß 1.0 _ _ C23E56.5 10 C45E7 - 1.0 - - C45E3S 1.0 2.5 1.0 - STPP 32.0 18.0 30.0 22.0 Silicato 9.0 5.0 9.0 8.0 Carbonato 11.0 7.5 10.0 5.0 Bicarbonato - 7.5 - - PB1 3.0 1.0 - - PB4 - 1.0 - - NOBS 2.0 1.0 - - DETPMP - 1.0 - - DTPA 0.5 - 0.2 0.3 SRP 1 0.3 0.2 - 0.1 MA/AA 1.0 1.5 2.0 0.5 CMC 0.8 0.4 0.4 0.2 PEÍ - 0.4 Sulfato 20.0 10.0 20.0 30.0 Mg sulfato 0.2 0.4 0.9 Mananasa 0.001 0.02 0.001 0.002 Proteasa 0.03 0.03 0.02 0.02 Amilasa 0.008 0.007 0.004 Lipasa 0.004 0.002 Celulasa 0.0003 0.0001 Blanqueador fotoactivado 30 ppm 20 ppm 10 ppm Perfume 0.3 0.3 0.1 0.2 Abrillantador 1/2 0.05 0.02 0.08 0.1 Diversos y menores Hasta 100% EJEMPLO 6 Se preparan las siguientes composiciones líquidas para lavado de trastes, de acuerdo con la presente invención: IV V C17ES 28.5 27.4 19.2 34.1 34.1 Amina óxido 2.6 5.0 2.0 3.0 3.0 Glucosamida de C12 6.0 Betaína 0.9 - - 2.0 2.0 QAS 0.5 0.5 0.8 0.2 0.5 xilenosulfonato 2.0 4.0 - 2.0 - Neodol C11E9 _ - 5.0 _ _ Polihidroxi ácido graso amida 6.5 6.5 Dietilenpentaacetato sódico - 0.03 (40%) TAED 0.06 0.06 Sacarosa 1.5 1.5 Etanol 4.0 5.5 5.5 9.1 9.1 Alquildifenilóxidodisulfanato - - - - 2.3 Formiato de Ca - - - 0.5 1.1 Citrato de amonio 0.06 0.1 - Cloruro de sodio - 1.0 - Cloruro de magnesio 3.3 - 0.7 Cloruro de calcio - - 0.4 Sulfato de sodio _ .. 0.06 Sulfato de magnesio 0.08 - - - - Hidróxido de magnesio - - - 2.2 2.2 Hidróxido de sodio - - - 1.1 1.1 Peróxido de hidrógeno 200 ppm 0.16 0.006 - - Mananasa 0.001 0.005 0.001 0.02 o.o: Proteasa 0.017 0.005 0.0035 0.003 0.002 Perfume 0.18 0.09 0.09 0.2 0.2 Agua y menores hasta 100% EJEMPLO 7 Se preparan las siguientes composiciones limpiadoras líquidas de superficies duras de acuerdo con la presente invención: I II lll IV V Mananasa 0.001 0.001 0.001 0.02 0.02 Amilasa 0.01 0.002 0.005 - - Proteasa 0.05 0.01 0.02 - - Peróxido de hidrógeno - - - 6.0 6.8 Acetiltrietilcitrato _ _ _ 2.5 _ DTPA 0.2 Butilhidroxitolueno 0.05 EDTA* 0.05 0.05 0.05 Cítrico/Citrato 2.9 2.9 2.9 1.0 LAS 0.5 0.5 0.5 C12 AS 0.5 0.5 0.5 C10AS - - - 1.7 C12(E)S 0.5 0.5 0.5 E6.5 no iónico de C12,13 7.0 7.0 7.0 Neodol 23-6.5 12.0 Dobanol 23-3 - 1.5 Dobanol 91-10 - 1.6 C25AE1.85 6.0 - QAS1 0.5 0.4 0.5 0.5 1.0 Sulfonato de parafina de Na - 6.0 -Perfume 1.0 1.0 1.0 0.5 0.2 Propanodiol 1.5 -Tetraetileno etoxilado 1.0 _ pentaimina 2, butiloctanol 0.5 Hexilcarbitol** 1.0 1.0 1.0 SCS 1.3 1.3 1.3 pH se ajusta a 7-12 7-12 7-12 Diversos y agua hasta 100% *Na4 ácido etilendiaminodiacético **Dietilenglicol monohexiléter EJEMPLO 8 Se prepara la siguiente composición en aspersión para limpieza de superficies duras y remoción de moho casero, de acuerdo con la presente invención: Mananasa 0.005 Amilasa 0.01 Proteasa 0.01 Na octilsulfato 2.0 Na dodecilsulfato 4.0 QAS 1.0 Na hidróxido 0.8 Silicato 0.04 Butilcarbitol* 4.0 Perfume 0.35 Agua/menores hasta 100% *Dietilenglicolmonobutiléter 148 LISTADO DE SECUENCIAS SOLICITANTE: NOMBRE: The Procter & Gamble Company CALLE: One Procter & Gamble Plaza CIUDAD: Cincinnati, OHIO PAÍS: E.U. A. CÓDIGO POSTAL: 45202 TÍTULO DE LA INVENCIÓN: Composiciones detergentes que comprenden una mananasa y un agente tensioactivo catiónico NÚMERO DE SECUENCIAS: 6 FORMA LEGIBLE EN COMPUTADORA: TIPO DE MEDIO: Diskette COMPUTADORA: compatible con PC IBM SISTEMA OPERATIVO: PC-DOS/MS-DOS SOFTWARE: Patentln Reléase # 1.0 Versión 1.25 (EPO) SEQ ID NO: 1 CARACTERÍSTICAS DE SECUENCIA: LONGITUD: 1407 pares de bases TIPO: ácido nucleico TIPO DE CADENA: única TOPOLOGÍA: lineal TIPO DE MOLÉCULA: ADN genómico FUENTE ORIGINAL CARACTERÍSTICA NOMBRE/CLAVE: CDS POSICIÓN: 1-1482 DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 1 ATGAAAAAAAAGTTATCACAGATTTATCATTTAATTATTTGCACACTTATAAT AAGTGTGGGAATAATGGGGATTACAACGTCCCCATCAGCAGCAAGTACAG GCTTTTATGTTGATGGCAATACGTTATATGACGCAAATGGGCAGCCATTTG TCATGAGAGGTATTAACCATGGACATGCTTGGTATAAAGACACCGCTTCAA CAGCTATTCCTGCCATTGCAGAGCAAGGCGCCAACACGATTCGTATTGTTT TATCAGATGGCGGTCAATGGGAAAAAGACGACATTGACACCATTCGTGAA GTCATTGAGCTTGCGGAGCAAAATAAAATGGTGGCTGTCGTTGAAGTTCAT GATGCCACGGGTCGCGATTCGCGCAGTGATTTAAATCGAGCCGTTGATTA TTGGATAGAAATGAAAGATGCGCTTATCGGTAAAGAAGATACGGTTATTAT TAACATTGCAAACGAGTGGTATGGGAGTTGGGATGGCTCAGCTTGGGCCG ATGGCTATATTGATGTCATTCCGAAGCTTCGCGATGCCGGCTTAACACACA CCTTAATGGTTGATGCAGCAGGATGGGGGCAATATCCGCAATCTATTCAT GATTACGGACAAGATGTGTTTAATGCAGATCCGTTAAAAAATACGATGTTC TCCATCCATATGTATGAGTATGCTGGTGGTGATGCTAACACTGTTAGATCA AATATTGATAGAGTCATAGATCAAGACCTTGCTCTCGTAATAGGTGAATTC GGTCATAGACATACTGATGGTGATGTTGATGAAGATACAATCCTTAGTTAT TCTGAAGAAACTGGCACAGGGTGGCTCGCTTGGTCTTGGAAAGGCAACAG TACCGAATGGGACTATTTAGACCTTTCAGAAGACTGGGCTGGTCAACATTT AACTGATTGGGGGAATAGAATTGTCCACGGGGCCGATGGCTTACAGGAAA CCTCCAAACCATCCACCGTATTTACAGATGATAACGGTGGTCACCCTGAAC CGCCAACTGCTACTACCTTGTATGACTTTGAAGGAAGCACACAAGGGTGG CATGGAAGCAACGTGACCGGTGGCCCTTGGTCCGTAACAGAATGGGGTG CTTCAGGTAACTACTCTTTAAAAGCCGATGTAAATTTAACCTCAAATTCTTC ACATGAACTGTATAGTGAACAAAGTCGTAATCTACACGGATACTCTCAGCT CAACGCAACCGTTCGCCATGCCAATTGGGGAAATCCCGGTAATGGCATGA ATGCAAGACTTTACGTGAAAACGGGCTCTGATTATACATGGCATAGCGGTC CTTTTACACGTATCAATAGCTCCAACTCAGGAACAACGTTATCTTTTGATTT AAACAACATCGAAAATAGTCATCATGTTAGGGAAATAGGCGTGCAATTTTC AGCGGCAGATAATAGCAGTGGTCAAACTGCTCTATACGTTGATAACGTTAC TTTAAGATAG SEQ ID NO: 2 CARACTERÍSTICAS DE SECUENCIA: LONGITUD: 493 aminoácidos TIPO: aminoácido TOPOLOGÍA: lineal TIPO DE MOLÉCULA: proteína DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 2 MKKKLSQIYHLIICTLIISVGIMGITTSPSAASTGFYVDGNTLYDANGQPFVMRGI NHGHAWYKDTASTAIPAIAEQGANTIRIVLSDGGQWEKDDIDTIREVIELAEQN KMVAWEVHDATGRDSRSDLNRAVDYWIEMKDALIGKEDTVIINIANEWYGS WDGSAWADGYIDVIPKLRDAGLTHTLMVDAAGWGQYPQSIHDYGQDVFNAD PLKNTMFSIHMYEYAGGDANTVRSNIDRVIDQDLALVIGEFGHRHTDGDVDED TILSYSEETGTGWLAWSWKGNSTEWDYLDLSEDWAGQHLTDWGNRIVHGA DGLQETSKPSTVFTDDNGGHPEPPTATTLYDFEGSTQGWHGSNVTGGPWS VTEWGASGNYSLKADVNLTSNSSHELYSEQSRNLHGYSQLNATVRHANWGN PGNGMNARLYVKTGSDYTWHSGPFTRINSSNSGTTLSFDLNNIENSHHVREI GVQFSAADNSSGQTALYVDNVTLR SEQ ID NO: 3 CARACTERÍSTICAS DE SECUENCIA: LONGITUD: 1407 pares de bases TIPO: ácido nucleico TIPO DE CADENA: sencilla TOPOLOGÍA: lineal TIPO DE MOLÉCULA: ADN genómico DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 3 ATGAAAAAAAAGTTATCACAGATTTATCATTTAATTATTTGCACACTTATAAT AAGTGTGGGAATAATGGGGATTACAACGTCCCCATCAGCAGCAAGTACAG GCTTTTATGTTGATGGCAATACGTTATATGACGCAAATGGGCAGCCATTTG TCATGAGAGGTATTAACCATGGACATGCTTGGTATAAAGACACCGCTTCAA CAGCTATTCCTGCCATTGCAGAGCAAGGCGCCAACACGATTCGTATTGTTT TATCAGATGGCGGTCAATGGGAAAAAGACGACATTGACACCATTCGTGAA GTCATTGAGCTTGCGGAGCAAAATAAAATGGTGGCTGTCGTTGAAGTTCAT GATGCCACGGGTCGCGATTCGCGCAGTGATTTAAATCGAGCCGTTGATTA TTGGATAGAAATGAAAGATGCGCTTATCGGTAAAGAAGATACGGTTATTAT TAACATTGCAAACGAGTGGTATGGGAGTTGGGATGGCTCAGCTTGGGCCG ATGGCTATATTGATGTCATTCCGAAGCTTCGCGATGCCGGCTTAACACACA CCTTAATGGTTGATGCAGCAGGATGGGGGCAATATCCGCAATCTATTCAT GATTACGGACAAGATGTGTTTAATGCAGATCCGTTAAAAAATACGATGTTC TCCATCCATATGTATGAGTATGCTGGTGGTGATGCTAACACTGTTAGATCA AATATTGATAGAGTCATAGATCAAGACCTTGCTCTCGTAATAGGTGAATTC GGTCATAGACATACTGATGGTGATGTTGATGAAGATACAATCCTTAGTTAT TCTGAAGAAACTGGCACAGGGTGGCTCGCTTGGTCTTGGAAAGGCAACAG TACCGAATGGGACTATTTAGACCTTTCAGAAGACTGGGCTGGTCAACATTT AACTGATTGGGGGAATAGAATTGTCCACGGGGCCGATGGCTTACAGGAAA CCTCCAAACCATCCACCGTATTTACAGATGATAACGGTGGTCACCCTGAAC CGCCAACTGCTACTACCTTGTATGACTTTGAAGGAAGCACACAAGGGTGG CATGGAAGCAACGTGACCGGTGGCCCTTGGTCCGTAACAGAATGGGGTG CTTCAGGTAACTACTCTTTAAAAGCCGATGTAAATTTAACCTCAAATTCTTC ACATGAACTGTATAGTGAACAAAGTCGTAATCTACACGGATACTCTCAGCT CAACGCAACCGTTCGCCATGCCAATTGGGGAAATCCCGGTAATGGCATGA ATGCAAGACTTTACGTGAAAACGGGCTCTGATTATACATGGCATAGCGGTC CTTTTACACGTATCAATAGCTCCAACTCAGGAACAACGTTATCTTTTGATTT AAACAACATCGAAAATATCATCATGTTAGGGAAATAG SEQ ID NO: 4 CARACTERÍSTICAS DE SECUENCIA: LONGITUD: 468 aminoácidos TIPO: aminoácido TOPOLOGÍA: lineal TIPO DE MOLÉCULA: proteína DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 4 MKKKLSQIYHLIICTLIISVGIMGITTSPSAASTGFYVDGNTLYDANGQPFVMRGI NHGHAWYKDTASTAIPAIAEQGANTIRIVLSDGGQWEKDDIDTIREVIELAEQN KMVAWEVHDATGRDSRSDLNRAVDYWIEMKDALIGKEDTVIINIANEWYGS WDGSAWADGYIDVIPKLRDAGLTHTLMVDAAGWGQYPQSIHDYGQDVFNAD PLKNTMFSIHMYEYAGGDANTVRSNIDRVIDQDLALVIGEFGHRHTDGDVDED TILSYSEETGTGWLAWSWKGNSTEWDYLDLSEDWAGQHLTDWGNRIVHGA DGLQETSKPSTVFTDDNGGHPEPPTATTLYDFEGSTQGWHGSNVTGGPWS VTEWGASGNYSLKADVNLTSNSSHELYSEQSRNLHGYSQLNATVRHANWGN PGNGMNARLYVKTGSDYTWHSGPFTRINSSNSGTTLSFDLNNIENIIMLGK SEQ ID NO: 5 CARACTERÍSTICAS DE SECUENCIA: LONGITUD: 1029 pares de bases TIPO: ácido nucleico TIPO DE CADENA: sencilla TOPOLOGÍA: lineal TIPO DE MOLÉCULA: ADN genómico DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 5 5' AAT TGG CGC ATA CTG TGT CGC CTG TGA ATC CTA ATG CCC AGC AGA CAÁ CAÁ AAA CAG TGA TGA ACT GGC TTG CGC ACC TGC CGA ACC GAA CGG AAA ACÁ GAG TCC TTT CCG GAG CGT TCG GAG GTT ACÁ GCC ATG ACÁ CAT TTT CTA TGG CTG AGG CTG ATA GAA TCC GAA GCG CCA CCG GGC AAT CGC CTG CTA TTT ATG GCT GCG ATT ATG CCA GAG GAT GGC TTG AAA CAG CAÁ ATA TTG AAG ATT CAÁ TAG ATG TAA GCT GCA ACG GCG ATT TAA TGT CGT ATT GGA AAA ATG GCG GAA TTC CGC AAA TCA GTT TGC ACC TGG CGA ACC CTG CTT TTC AGT CAG GGC ATT TTA AAA CAC CGA TTA CAÁ ATG ATC AGT ATA AAA ACÁ TAT TAG ATT CAG CAÁ CAG CGG AAG GGA AGC GGC TAA ATG CCA TGC TCA GCA AAA TTG CTG ACG GAC TTC AAG AGT TGG AGA ACC AAG GTG TGC CTG TTC TGT TCA GGC CGC TGC ATG AAA TGA ACG GCG AAT GGT TTT GGT GGG GAC TCA CAT CAT ATA ACC AAA AGG ATA ATG AAA GAA TCT CTC TAT ATA AAC AGC TCT ACÁ AGA AAA TCT ATC ATT ATA TGA CCG ACÁ CAÁ GAG GAC TTG ATC ATT TGA TTT GGG TTT ACT CTC CCG ACG CCA ACC GAG ATT TTA AAA CTG ATT TTT ACC CGG GCG CGT CTT ACG TGG ATA TTG TCG GAT TAG ATG CGT ATT TTC AAG ATG CCT ACT CGA TCA ATG GAT ACG ATC AGC TAA CAG CGC TTA ATA AAC CAT TTG CTT TTA CAG AAG TCG GCC CGC AAA CAG CAÁ ACG GCA GCT TCG ATT ACÁ GCC TGT TCA TCA ATG CAÁ TAA AAC AAA AAT ATC CTA AAA CCA TTT ACT TTC TGG CAT GGA ATG ATG AAT GGA GCG CAG CAG TAA ACÁ AGG GTG CTT CAG CTT TAT ATC ATG ACÁ GCT GGA CAC TCA ACÁ AGG GAG AAA TAT GGA ATG GTG ATT CTT TAA CGC CAÁ TCG TTG AGT GAA TCC GGG ATC 3' SEQ ID NO: 6 CARACTERÍSTICAS DE SECUENCIA: LONGITUD: 363 aminoácidos TIPO: aminoácido TOPOLOGÍA: lineal TIPO DE MOLÉCULA: proteína DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 6 ydhT 1 LFKKHTISLLIIFLLASAVLAKPIEAHTVSPVNPNAQQTTKTVMNWLAHL 50 ydhT 51 PNRTENRVLSGAFGGYSHDTFSMAEADRIRSATGQSPAIYGCDYARGWLE 100 ydhT 101 TANIEDSIDVSCNGDLMSYWKNGGIPQISLHLANPAFQSGHFKTPITNDQ 150 ydhT 51 YKNILDSATAEGKRLNAMLSKIADGLQELENQGVPVLFRPLHEMNGEWFW 5 200 ydhT 201 WGLTSYNQKDNERISLYKQLYKKIYHYMTDTRGLDHLIWVYSPDANRDFK 250 ydhT 251 10 TDFYPGASYVDIVGLDAYFQDAYSINGYDQLTALNKPFAFTEVGPQTANG 300 ydhT 301 SFDYSLFINAIKQKYPKTIYFLAWNDEWSAAVNKGASALYHDSWTLNKGE 350 15 ydhT 351 IWNGDSLTPIVE*. 363

Claims (9)

1. «53 NOVEDAD Dß LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES 5 1.- Una composición detergente y/o para el cuidado de telas, que comprende una enzima mananasa y un agente tensioactivo catiónico. 2.- Una composición detergente y/o para el cuidado de telas de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la mananasa está presente a un nivel de 0.0001 % a 2%, preferiblemente de 0.0005% a 10 0.5%, de manera más preferible de 0.001% a 0.02% de enzima pura en peso de composición total. 3.- Una composición detergente y/o para el cuidado de telas de conformidad con las reivindicaciones 1-2, caracterizada además porque el agente tensioactivo catiónico está comprendido a un nivel de 0.2 a 25%, 15 preferiblemente de 1 % a 8% en peso de la composición total. 4.- Una composición detergente y/o para el cuidado de telas de conformidad con las reivindicaciones 1-3, caracterizada además porque el agente tensioactivo catiónico se selecciona de un agente tensioactivo de amonio y/o sus derivados etoxilados. 20 5.- Una composición detergente y/o para el cuidado de telas de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada además porque el agente tensioactivo de amonio es un halogenuro de alquiltrimetilamonio, un halogenuro de alquildimetilhidroxialquilamonio, un halogenuro de alquilmetilbis-hidroxialquil- amonio y/o mezclas de los mismos. 6.- Una composición detergente y/o para el cuidado de telas de conformidad con la reivindicación 5, caracterizada además porque el agente tensioactivo de amonio se selecciona de cloruro de 5 alquilhidroxietildimetilamonio de C12-14, cloruro de alquilhidroxietildimetilamonio de C8-C11 y/o mezclas de los mismos. 7.- Una composición detergente y/o para el cuidado de telas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada además porque comprende además un agente tensioactivo aniónico, 10 preferiblemente un alquilsulfato y/o sulfonato. 8.- Una composición detergente y/o para el cuidado de telas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada además porque comprende además un agente tensioactivo no iónico, preferiblemente un agente tensioactivo alquiletoxilado no iónico que tiene una 15 longitud de cadena de C8 a C20, preferiblemente de C12 a C16 y que tiene un grado de etoxilación de 2 a 9, preferiblemente de 3 a 7; un agente tensioactivo alquilmetilglucamida con una longitud de cadena alquilo de C8 a C20, preferiblemente de C12 a C18; y/o mezclas de los mismos. 9.- Una composición detergente y/o para el cuidado de telas de 20 conformidad con las reivindicaciones 1-4, caracterizada además porque el agente tensioactivo catiónico comprende dos longitudes de cadena alquilo largas. 10.- Un método para limpiar una tela, vajilla y/o una superficie dura, con una composición detergente y/o para el cuidado de telas, de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes.