MX2013008050A - Probioticos en bebidas de frutas. - Google Patents
Probioticos en bebidas de frutas.Info
- Publication number
- MX2013008050A MX2013008050A MX2013008050A MX2013008050A MX2013008050A MX 2013008050 A MX2013008050 A MX 2013008050A MX 2013008050 A MX2013008050 A MX 2013008050A MX 2013008050 A MX2013008050 A MX 2013008050A MX 2013008050 A MX2013008050 A MX 2013008050A
- Authority
- MX
- Mexico
- Prior art keywords
- strain
- probiotic
- fruit
- acid
- probiotic bacteria
- Prior art date
Links
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 title claims abstract description 171
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 title claims abstract description 171
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 title claims abstract description 105
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 title claims abstract description 16
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims abstract description 158
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 129
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 56
- 241000218587 Lactobacillus paracasei subsp. paracasei Species 0.000 claims abstract description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 76
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 claims description 51
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 28
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 24
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 claims description 23
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 14
- 235000018290 Musa x paradisiaca Nutrition 0.000 claims description 11
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 claims description 11
- 230000035899 viability Effects 0.000 claims description 11
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 9
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 9
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 9
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 claims description 9
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 claims description 9
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 8
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims description 7
- 240000009088 Fragaria x ananassa Species 0.000 claims description 7
- 235000004936 Bromus mango Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000016623 Fragaria vesca Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000011363 Fragaria x ananassa Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000014826 Mangifera indica Nutrition 0.000 claims description 6
- 240000007228 Mangifera indica Species 0.000 claims description 6
- 235000009184 Spondias indica Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 6
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 claims description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 5
- 235000013572 fruit purees Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 5
- 244000144730 Amygdalus persica Species 0.000 claims description 4
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 claims description 4
- 240000007651 Rubus glaucus Species 0.000 claims description 4
- 235000011034 Rubus glaucus Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000009122 Rubus idaeus Nutrition 0.000 claims description 4
- 240000001890 Ribes hudsonianum Species 0.000 claims description 3
- 235000016954 Ribes hudsonianum Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000001466 Ribes nigrum Nutrition 0.000 claims description 3
- 240000000851 Vaccinium corymbosum Species 0.000 claims description 3
- 235000003095 Vaccinium corymbosum Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000017537 Vaccinium myrtillus Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000021014 blueberries Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 claims description 3
- 244000099147 Ananas comosus Species 0.000 claims description 2
- 235000007119 Ananas comosus Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000011430 Malus pumila Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000070406 Malus silvestris Species 0.000 claims description 2
- 235000015103 Malus silvestris Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000006909 Tilia x europaea Species 0.000 claims description 2
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 claims description 2
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000004571 lime Substances 0.000 claims description 2
- 240000008790 Musa x paradisiaca Species 0.000 claims 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims 1
- 241000894007 species Species 0.000 claims 1
- 238000009941 weaving Methods 0.000 claims 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 47
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 41
- 235000015205 orange juice Nutrition 0.000 description 24
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 20
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 240000005561 Musa balbisiana Species 0.000 description 10
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 10
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 10
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 10
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 8
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 8
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 8
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 8
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 8
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 8
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 7
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 7
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 7
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 6
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 6
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 5
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 5
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 5
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 240000001717 Vaccinium macrocarpon Species 0.000 description 4
- 235000012545 Vaccinium macrocarpon Nutrition 0.000 description 4
- 235000002118 Vaccinium oxycoccus Nutrition 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 235000004634 cranberry Nutrition 0.000 description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 4
- 235000019674 grape juice Nutrition 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 4
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 3
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 3
- 206010013911 Dysgeusia Diseases 0.000 description 3
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 3
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 3
- BDKLKNJTMLIAFE-UHFFFAOYSA-N 2-(3-fluorophenyl)-1,3-oxazole-4-carbaldehyde Chemical compound FC1=CC=CC(C=2OC=C(C=O)N=2)=C1 BDKLKNJTMLIAFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVKXKIBYHWRLOJ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyethyl methanesulfonate Chemical compound CS(=O)(=O)OCCO JVKXKIBYHWRLOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 235000013949 black currant juice Nutrition 0.000 description 2
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 235000008486 nectar Nutrition 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 235000013997 pineapple juice Nutrition 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 229940087562 sodium acetate trihydrate Drugs 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 235000021012 strawberries Nutrition 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRKQWNFPTBNUKE-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-1,2-dinitroguanidine Chemical compound [O-][N+](=O)N(C)\C(N)=N/[N+]([O-])=O SRKQWNFPTBNUKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WVXRAFOPTSTNLL-NKWVEPMBSA-N 2',3'-dideoxyadenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1CC[C@@H](CO)O1 WVXRAFOPTSTNLL-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241001134770 Bifidobacterium animalis Species 0.000 description 1
- 241000186012 Bifidobacterium breve Species 0.000 description 1
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 description 1
- 241000186015 Bifidobacterium longum subsp. infantis Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000207199 Citrus Species 0.000 description 1
- 241001672694 Citrus reticulata Species 0.000 description 1
- 101100373011 Drosophila melanogaster wapl gene Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 244000307700 Fragaria vesca Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 1
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 1
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 description 1
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 description 1
- 241001147746 Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis Species 0.000 description 1
- 241001468157 Lactobacillus johnsonii Species 0.000 description 1
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 1
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 1
- 241000186604 Lactobacillus reuteri Species 0.000 description 1
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 description 1
- 235000014837 Malpighia glabra Nutrition 0.000 description 1
- 240000003394 Malpighia glabra Species 0.000 description 1
- 244000294611 Punica granatum Species 0.000 description 1
- 235000014360 Punica granatum Nutrition 0.000 description 1
- 241000219100 Rhamnaceae Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 244000151637 Sambucus canadensis Species 0.000 description 1
- 235000018735 Sambucus canadensis Nutrition 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 235000015197 apple juice Nutrition 0.000 description 1
- 150000007514 bases Chemical class 0.000 description 1
- 229940118852 bifidobacterium animalis Drugs 0.000 description 1
- 229940004120 bifidobacterium infantis Drugs 0.000 description 1
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 description 1
- 235000007123 blue elder Nutrition 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 235000015155 buttermilk Nutrition 0.000 description 1
- 238000009924 canning Methods 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 235000007124 elderberry Nutrition 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 235000008995 european elder Nutrition 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000021022 fresh fruits Nutrition 0.000 description 1
- 235000020400 fruit nectar Nutrition 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000015201 grapefruit juice Nutrition 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- 230000007366 host health Effects 0.000 description 1
- 230000000774 hypoallergenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 1
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 description 1
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 1
- 229940001882 lactobacillus reuteri Drugs 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940061634 magnesium sulfate heptahydrate Drugs 0.000 description 1
- CDUFCUKTJFSWPL-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate tetrahydrate Chemical compound O.O.O.O.[Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O CDUFCUKTJFSWPL-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000004483 pasc Anatomy 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000012808 pre-inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001393 triammonium citrate Substances 0.000 description 1
- 235000011046 triammonium citrate Nutrition 0.000 description 1
- 235000015192 vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/52—Adding ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/02—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation containing fruit or vegetable juices
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/38—Other non-alcoholic beverages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/70—Clarifying or fining of non-alcoholic beverages; Removing unwanted matter
- A23L2/84—Clarifying or fining of non-alcoholic beverages; Removing unwanted matter using microorganisms or biological material, e.g. enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/165—Paracasei
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Non-Alcoholic Beverages (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Dairy Products (AREA)
Abstract
La presente invención se relaciona con un método de producir una bebida de fruta prebiótica que comprende un alto recuento viable de bacterias probióticas adaptadas a ácido, tal como cepas de Lactobacillus paracasei subesp. Paracasei, y una bebida de fruta prebiótica que se puede obtener por tal método.
Description
PROBIOTICOS EN BEBIDAS DE FRUTAS
Campo de la Invención
La presente invención se refiere a un método para preparar una bebida de fruta que comprende un alto recuento de probióticos vivos. La presente invención además se refiere a una bebida de fruta probiótica que se pueden obtener mediante tal método y el uso de bacterias prpbióticas adaptadas a ácido para la preparación de una bebida de fruta probiótica.
Antecedentes de la Invención
Algunas bacterias son conocidas por tener propiedades probióticas, en este caso, tienen un efecto beneficioso sobre la salud del huésped cuando se ingieren en cantidades viables apropiadas. En particular, las cepas bacterianas que pertenecen a los géneros Lactobacillus y Bifidobacterium han sido objeto de muchos estudios que muestran efectos clínicos ¿ preventivos en diferentes campos y en ciertas funciones fisiológicas. Estos probióticos son generalmente seguros y, especialmente capaces de promover el correcto funcionamiento de la flora intestinal. Además de evidencias claras de que tiene efectos positivos sobre la salud del consumidor, para que una bacteria cumpla con la definición de probióticos, tiene que ser capaz de sobrevivir y colonizar los intestinos y sobrevivir a los duros procesos de . producción y
ef. 242315
almacenamiento de la comida. La evidencia clínica indica que la dosis diaria de bacterias probióticas debe ser de por lo menos 109 CFU para asegurar la eficacia de probióticos.
El mercado de los productos probióticos sigue creciendo. Los probióticos se han implementado especialmente en los productos lácteos en los que las bacterias de ácido láctico están relativamente bien adaptadas al medio. Ahora jugos de naranja, así como otros tipos de jugos de frutas y bebidas que contienen puré de fruta y jugo de fruta se han identificado como importantes vehículos de cultivos probióticos que tienen los beneficios de ambos frutas y probióticos .
Adicionalmente , bebidas de frutas, que no contienen componentes de leche, son excelentes formas de administración de los probióticos hipoalergénicos , tales como L. casei 431® (Chr. Hansen, Hoersholm, Dinamarca).
Sin embargo, más bien el medio ambiente ácido de jugos de fruta causa una gran reducción del recuento de células inicial cuando se agrega la mayor parte del probiótico de referencia, por ejemplo un jugo de naranja. Para la aplicación exitosa de cultivos probióticos en bebidas de frutas, las concentraciones apropiadas de células probióticas se tienen que asegurar durante la vida útil. Por lo tánto, el aumento de la supervivencia de los cultivos probióticos en el jugo de naranja y otras bebidas de frutas es considerado como
muy crítico.
Los métodos para producir una bebida de frutas que contiene cantidades eficaces de lactobacilos vivos son conocidos en la técnica, tal como en la Patente Europea EP 0113055, que se relaciona con un método que comprende poner un jugo de frutas en contacto con un agente sólido para eliminar los componentes bacteriostáticos y después proliferar lactobacilos en el jugo de fruta a un pH de 4.0 o inferior.
Sin embargo, en tales bebidas de frutas es posible observar el crecimiento bacteriano y/o actividad que inducen una producción de gas y sabor desagradable que los hace inapropiados para el consumo.
La Solicitud de Patente Estadounidense US 2010/0086646 se refiere a jugo de planta fresca y/o producto alimenticio a base de leche que comprende probióticos vivos y un monoácido débil protonado dietético con un pH entre 3 y 4, este último impide que los probióticos produzcan sabor falso y/o gas en el producto alimenticio.
La solicitud de -patente del PCT O 2010/132017 se refiere a una bebida de jugo de fruta ; probiótjica que comprende por lo menos una cepa de bacterias probióticas y por lo menos un reductor de formación de gas seleccionado de acerola, granada, arándano, arqnia, grosella negra; espino cerval o baya de saúco. v
La adición de monoácidos puede afectar las propiedades organolépticas del producto alimenticio y también se ha visto que afecta negativamente la tasa de supervivencia de las bacterias probióticas. La adición de reductores de formación de ácido también parece afectar negativamente la tasa de supervivencia de las bacterias probióticas. La adición de agentes para la eliminación de compuestos bacteriostáticos y/o para reducir el sabor falso y/o gas en el producto alimenticio puede, además, resultar costosa.
Por lo tanto, sigue habiendo una necesidad en ,el campo técnico para proporcionar métodos alternativos para la producción de bebidas de frutas probióticas con un alto valor probiótico, en el que la bebida de frutas probiótica exhibe un buen sabor y sin sabor desagradable y producción de gas, y en el que la bebida de frutas probiótica tiene un vida útil larga. Especialmente, existe una necesidad de métodos que no implican la adición de agentes sólidos, monoácidos u otros compuestos que puedan afectar las cualidades organolépticas de la bebida de fruta.
La presente invención propone un método alternativo de producción de una bebida de fruta que comprende bacterias probióticas que han sido adaptadas a ácido antes de la inoculación en la bebida de frutas.
Sumario de la Invención
Un objeto de la presente invención es proporcionar una
bebida de frutas probiótica que contiene bacterias probióticas robustas capaces de sobrevivir el ambiente ácido de la bebida de fruta. Es otro objeto de la presente invención proporcionar una bebida de fruta probiótica con un buen sabor. Sin embargo, otro objeto de la presente invención es proporcionar tal bebida de fruta probiótica que tiene una vida útil larga.
Con el fin de obtener un alto UFC/ml de bacterias probióticas en bebidas de frutas sin la adición de cantidades en exceso de bacterias probióticas los inventores de la presente invención han estado trabajando en la mejora de la tolerancia al ácido de las bacterias probióticas haciendo así las bacterias probióticas robustas frente a pH bajo.
La presente invención se basa en el hallazgo de que las bacterias probióticas pueden ser adaptadas a ácido por propagación sin la estabilización del pH durante un cierto período de tiempo sin afectar significativamente el rendimiento resultante en la fermentación.
Los bacterias probióticas adaptadas ¦ a ácido son extremadamente útiles como composiciones probióticas para la adición a las bebidas de frutas con un pH bajo (por debajo de 4.2) . Combina todas las capacidades beneficiosas > de las bacterias probióticas con el alto valor nutritivo de las frutas .
El método de la presente invención no implica la adición
a la bebida de fruta de compuestos químicos que podrían afectar las cualidades organolépticas de la bebida de fruta probiótica .
En consecuencia, en un primer aspecto, la presente invención se refiere a un método para producir una bebida de fruta probiótica, el método comprende:
(a) adaptación a ácido de por lo menos una cepa de bacterias probióticas durante la propagación;
(b) inoculación de una bebida de fruta con por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido del paso
(a) ; y
(c) opcionalmente , envasar la bebida de fruta probiótic .
De acuerdo con una modalidad de la presente invención la adaptación a ácido de las bacterias probióticas en el paso (a) se lleva a cabo mediante:
(i) propagación de por lo menos una cepa de bacterias probióticas sin estabilización de pH a una : temperatura en el intervalo de 25°C hasta 43°C, y preferiblemente desde 25 °C hasta 40°C, en un medio apropiado que tiene un pH inicial de entre aproximadamente 6.0 y aproximadamente 7.0, el medio tiene una composición que permite el medio para alcanzar un pH de entre aproximadamente 5.0 hasta aproximadamente 4.0;
(ii) la cosecha de por lo menos una cepa de bacterias
probióticas adaptadas a ácido;
(iii) opcionalmente concentrar por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido;
y
(iv) opcionalmente congelar o liofilizar por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido.
En una modalidad preferida, el medio en el paso (i) tiene una composición que permite que el medio alcance un pH de entre aproximadamente 5.0 y aproximadamente 4.0 después de por lo menos 8 horas de propagación.
En aún una modalidad preferida adicional, la cepa probiótica adaptada a ácido se concentra en el paso (iii) , en este caso, después de cosechar las bacterias adaptadas al ácido .
Un segundo aspecto de la presente invención se refiere a una bebida de fruta probiótica que se puede obtener por el método de acuerdo con el primer aspecto. La invención también se refiere a una bebida de fruta probiótica que comprende la cepa Lactobacillus paracasei subsp. paracasei CRL431 (L. casei 431®) . '
Un tercer aspecto de la presente invención se refiere a un método para obtener un cultivo de una cepa probiótica adaptada a ácido, el método comprende los pasos de:
(a) propagar una cepa probiótica sin la estabilización del pH a una temperatura en el intervalo desde 25°C hasta
43°C, y preferiblemente desde 25°C hasta 40°C, en un medio apropiado que tiene un pH inicial de entre aproximadamente 6.0 hasta aproximadamente 7.0, el medio que tiene una composición que permite que el medio alcance un pH de entre aproximadamente 5.0 hasta aproximadamente 4.0;
(b) cosechar la cepa probiótica adaptada a ácido;
(c) opcionalmente concentrar la cepa probiótica adaptada a ácido; y
(d) opcionalmente congelar o liofiiizar ía cepa probiótica adaptada a ácido.
En una modalidad preferida, el medio en el paso (a) tiene una composición que permite que el medio alcance un pH de entre aproximadamente 5.0 y aproximadamente 4.0 después de por lo menos 8 horas de propagación.
En una modalidad especialmente preferida, la cepa probiótica adaptada a ácido se concentra en ; el pasc¡> (c) en este caso, después de cosechar las bacterias probióticas adaptadas a ácido.
Un cuarto aspecto se refiere a un cultivo de una cepa probiótica adaptada a ácido que se puede obtener por un método de acuerdo con el tercer aspecto de la invención.
Un quinto aspecto se refiere al uso de un cultivo de una cepa probiótica adaptada a ácido de acuerdo con el cuarto aspecto de la invención para la producción de una bebida de fruta probiótica.
Breve Descripción de las Figuras
La Figura 1 ilustra la acidificación de medio MRS (Difco) por L. casei 431®. Las células adaptadas a ácido fueron cosechadas a pH 5.0, pH 4.5, y pH 4.0 por centrifugación.
La figura 2 representa los recuentos de células de L. casei 431® durante producción a gran escala.
La Figura 3 muestra el recuento de células de L. casei 431® cuando se adicionan a un jugo de fresa/plátano para no adaptadas (diamante) , alternativamente adaptadas bien a pH 4.0 (triángulo) o pH 5.0 (cuadrado) durante la producción y después agregadas en bajas (5xl07 UFC/ mi, símbolos cerrados) o altas (lxlO8 UFC/ml, símbolos abiertos) concentraciones.
La figura 4 muestra el recuento de células de L. casei 431® cuando se adicionan a un jugo tropical para no adapatadas (diamante) , alternativamente adaptadas ya )sea a pH 4.0 (triángulo) o pH 5.0 (cuadrado) durante la producción y después agregadas en bajas (5xl07 UFC/ml, símbolos cerrados) o altas (1x10s de UFC/ml, símbolos abiertos) concentraciones.
La figura 5 muestra el recuento de células de L. casei
431® cuando son adicionadas a un jugo de fruta roja para no adapatadas (diamante) , alternativamente adaptadas ya sea a pH 4.0 (triángulo) o pH 5.0 (cuadrado) durante la producción y después agregadas en bajas (5xl07 UFC/ml, símbolos cerrados) o altas (lxlO8 de UFC/ml, símbolos abiertos) concentraciones.
La Figura 6 ilustra los recuentos de células de L. casei 431® cuando son adicionadas a un jugo de naranja al 100% para no adaptadas (control), adaptadas ya sea a pH 4.0, 4.5 o 5.0 durante la producción y después agregadas en concentraciones de 1.5xl08 UFC/ml.
La Figura 7 muestra los recuentos de células de L. casei 431® para no adaptadas (control) y adaptadas ya sea a pH 4.0, 4.5 o 5.0 durante la producción y después se almacena en forma de gránulos congelados a -50°C, y probadas periódicamente para viabilidad del cultivo descongelado mediante vertido de placas .
La Figura 8 ilustra los recuentos de células de L. casei 431® no adaptadas (control) o adaptadas a pH 4.0 durante la producción, almacenadas en forma de gránulos congelados a -50°C durante 6 meses y después se agregó a jugo de naranja almacenado a 8°C para el período de tiempo indicado en el eje .
La Figura 9 muestra el recuento de células de L. casei 431® cuando se agregan al jugo de naranja para las células no adaptadas (cuadradas) , alternativamente células adaptadas a pH 4.0 (triángulo) durante la producción y después se almacenaron a 8°C.
Descripción Detallada de la Invención
Definiciones
En el presente contexto, el término "jugo de fruta" se
refiere a que el líquido contenido naturalmente en la fruta preparado por compresión o macerado mecánicamente frutas frescas sin la presencia de calor y disolventes. El "jugo de fruta" puede consistir de jugo de un tipo de fruta o una mezcla de más de un tipo de fruta.
El término "bebida de fruta" en el presente contexto se refiere a una bebida que tiene un contenido de jugo de fruta de entre 0 y 29%. 1
El término "néctar" en el presente contexto se refiere a una bebida que tiene un contenido de jugo de fruta de entre 30 a 99% de jugo de fruta.
En el presente contexto, el término "puré" se refiere a las frutas preparadas por molido, prensado y/o presión en la consistencia de un líquido espeso o una pasta suave y sin la presencia de calor y solventes. El "Puré" está hecho de 100% de fruta en lugar de ser hecho de sólo el jugó de la fruta.
i
En el presente contexto, el término "bebida de frutas" se refiere a una bebida que comprende !jugo de fruta, concentrado de frutas y/o puré de fruta. El : término "bebida de fruta" cubre "jugo de fruta", "bebida de fruta" yi "Néctar" tal como se define en este documento. La "bebida de fruta" puede ser una pasta que contiene, o uno de los que ; la pulpa ha sido eliminada por una operación como centrifugación. Las bebidas de frutas pueden contener, además, por ¡ejemplo, avena, soya, almendras, suero de leche y/o ieche no
fermentada, por ejemplo, en la forma de leche en polvo. En una modalidad particularmente preferida, las bebidas de frutas de la invención no contienen componentes lácteos, tales como leche.
En el presente contexto, el término (bacteria) "adaptada a ácido" se refiere a bacterias vivas que se hacen tolerantes a bajo pH por la exposición gradual a la disminución de los niveles de pH durante el cultivo. En consecuencia, el proceso de cepas bacterianas probióticas adaptadas a ácido generalmente incluyen el cultivo de estas cepas en la presencia de niveles progresivamente más bajos de pH, por ejemplo, hasta que se alcanza un pH de entre 4.0 y 5.0. Preferiblemente, las bacterias probióticas que se someten a sí mismas a adaptación de ácido producen ácido durante su propagación que se acumula en el medio. Más preferiblemente, las bacterias probióticas que producen ácido pertenecen al grupo de las bacterias del ácido láctico. Alternativamente, cuando las bacterias probióticas que se someten a adaptación de ácido no producen ácido naturalmente, la reducción del pH también se puede lograr mediante la adición externa de un ácido .
El proceso de adaptación a ácido se lleva : a cabo preferiblemente mediante la propagación de las bacterias probióticas en un medio sin la estabilización de pH. La expresión "sin la estabilización de pH" significa que no se
toman medidas para contrarrestar la disminución de pH gradualmente. Por ejemplo, en una modalidad, el medio que se inoculó con las bacterias probióticas normalmente no contiene agentes amortiguadores que podrían mantener el pH estable durante la formación o adición de ácido. Alternativamente, cuando el medio de partida contiene una cierta concentración de agentes amortiguadores, el cultivo puede ser continuado hasta que se agota la capacidad del agente amortiguador, y ningunos agentes amortiguadores adicionales se agregan durante el cultivo. En particular, no se agregan compuestos básicos durante el cultivo para neutralizar la disminución de PH.
Por "mal sabor" se entiende un sabor anormal del producto alimenticio. El mal sabor es desagradable para el consumidor, por lo que no se busca. Las denominadas notas "positivas" también se pueden detectar en el ;productp, tales como, por ejemplo, las notas del tipo fruta. Puesto que estos sabores no son desagradables para el consumidor, no están comprendidos en el "mal sabor" de acuerdo con la presente invención.
En el presente contexto, el término "envasar" la bebida de fruta probiótica se refiere al envasado final de la bebida de fruta probiótica para obtener un producto que puede ser ingerido por ejemplo, por una persona o un grupo de personas. Un envase apropiado por lo tanto puede ser una botella o caja
de cartón o similares, y una cantidad apropiada puede ser, por ejemplo 10 mi hasta 5000 mi, pero actualmente se prefiere que la cantidad en un envase sea desde 50 mi hasta 1000 mi, tal como desde 200 mi hasta 1000 mi.
El término "bacterias probióticas" se refiere a bacterias viables que son administradas en cantidades apropiadas a un consumidor con el fin de lograr un efecto de promoción de salud en el consumidor. Los probióticos pueden ser administrados como forma de dosificación discreta, por ejemplo, como cápsulas, suspensiones, y similares. Alternativamente, las bacterias probióticas se administran en la forma de un suplemento alimenticio o dietético. Las bacterias probióticas son capaces de sobrevivir a las condiciones del tracto gastrointestinal después de la ingestión y colonizar el intestino del consumidor.
Diferentes tipos de bacterias se han utilizado en la técnica como las bacterias probióticas, incluyendo las bacterias del género Lactobacillus , tales como Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus casei, Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus lactis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri y Lactobacillus johnsonii, el género Bifidobacterium, tal como Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium longum, y similares. Cepas probióticas también se han descrito:; de otros
géneros, tales como Escherichia y Bacillus.
En el presente contexto, el término "mutante" debe ser entendido como una cepa derivada, o una cepa que se puede derivar de una cepa de la invención (o de la cepa madre) por medio de por ejemplo ingeniería genética, radiación y/o tratamiento químico. El mutante también puede ser un mutante espontáneo. Se prefiere que el mutante sea un mutante funcionalmente equivalente, por ejemplo, un mutante que tiene sustancialmente las mismas, o mejoradas, propiedades (por ejemplo, con respecto a sabor, post-acidificación, velocidad de acidificación, y/o capacidad para ser adaptados a ácido) como la cepa madre . Tal mutante es una parte de la presente invención. Especialmente, el término "mutante" se refiere a una cepa obtenida sometiendo una cepa de la invención a cualquier tratamiento de mutagenización usado de forma convencional incluyendo tratamiento con un mutágeno; químico tal como etano metano sulfonato (EMS) o N-metil-N' -nitro-N-nitroguanidina (NTG) , luz UV, o a un mutante espontáneo. Un mutante puede haber sido sometido a varios tratamientos de mutagenización (un solo tratamiento debe entenderse como un paso demutagenización seguido por un paso de detección/selección) , pero actualmente se prefiere que no más de 20, o no más de 10, o no más de 5, tratamientos (o pasos de detección/selección) se lleven a cabo. .En un mutante actualmente preferido, menos de 5%, o menos de 1% o! incluso
menos de 0.1% de los nucleótidos en el genoma bacteriano se han desplazado con otro nucleótido, o eliminado, en comparación con la cepa madre.
En el presente contexto, el término "variante" debe ser entendido como una cepa que es funcionalmente equivalente a una cepa de la invención, por ejemplo, que tiene sustancialmente las mismas, o propiedades mejoradas, por ejemplo, con respecto a sabor, post-acidificación, velocidad de acidificación, y/o capacidad para ser adaptadas a ácido) . Tales variantes, que pueden ser identificadas utilizando técnicas de detección apropiadas, son una parte de la presente invención.
El uso de los términos "un" y "una" y "la" y referentes similares en el contexto de la descripción de la invención (especialmente en el contexto de las siguientes reivindicaciones) deben interpretarse que cubren tanto el singular como el plural, a menos que indique lo contrario en este documento o se contraindique claramente por el contexto. Los términos "que comprende" , "tiene" , "que incluye" y "que contiene" se deben interpretar como términos abiertos (en este caso, que significa "que incluye, pero no limitado a,") a menos que se indique lo contrario.
La recitación de intervalos de valores en este documento son simplemente previstos para servir como un ¦ método abreviado de referirse individualmente a cada valor Separado
que cae dentro del intervalo, a menos que se indique lo contrario en este documento, y cada valor separado se incorpora en la especificación como si fuera recitado individualmente en este documento. Todos los ; métodos descritos en este documento pueden realizarse en cualquier orden apropiado a menos que se indique lo contrario en este documento o de otra manera se contradiga claramente por el contexto. El uso de cualquiera y de todos los ejemplos, o del lenguaje ejemplar (por ejemplo, "tal como") proporcionados en este documento, sólo tiene por objeto entender mejor la invención y no plantea una limitación en el alcance de la invención a menos que se reivindique lo contrarios Ningún lenguaje en la especificación debería ser interpretado como una indicación de cualquier elemento no reivindicado como esencial para la práctica de la invención.
Implementación y aspectos de la invención
Cepas de bacterias probióticas, tales como las de los géneros Lactobacillus y Bifidobacterium, se pueden .'Utilizar en las bebidas. Sin embargo, son sensibles a los ambientes ácidos y el recuento de células viables se reduce rápidamente cuando se inocula en un medio de pH 4.2 o inferior, j
Los inventores de la presente invención sorprendentemente observaron que mediante adaptación la ácido,
y
una cepa de bacterias probióticas aumentó signif cativamente su supervivencia en bebidas de frutas, que generalmente
tienen un H bajo en el intervalo de 3-4 debido al ácido de la fruta. En bebidas de frutas, la viabilidad de las bacterias probióticas adaptadas a ácido no fueron afectadas esencialmente por el pH bajo por un máximo de 10 semanas de almacenamiento en frío y la alta viabilidad en ambientes ácidos se mantuvieron congelados durante el almacenamiento de las bacterias.
Además, no se detectaron malos sabores cuando las bacterias probióticas adaptadas a ácido se agregaron a las bebidas de frutas, tales como bebidas de fruta de fruta roja, fruta tropical y f esa/plátano.
Por lo tanto, la presente invención en un primer aspecto se refiere a un método para producir una bebida de fruta probiótica mediante la inoculación de una bebida de fruta con por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido.
Ejemplos de bebidas de frutas apropiadas para sU uso en la presente invención son aquellas que tienen valorés de pH bajos, en particular aquellas que comprenden jugos de cítricos tales como jugo de naranja, jugo dé fruta de uva, jugo de limón y jugo de mandarina y mezclas de los; mismos. Otros ejemplos de bebidas de frutas son bebidas de frutas que contienen jugo de manzana. , ,¿,
Las bebidas de frutas apropiadas para, el usó en la presente invención pueden ser, por ejemplo jugos de frutas,
jugos de frutas de concentrados, jugos de fruta y néctares de fruta que comprenden opcionalmente purés de frutas y/o agua.
El contenido total de jugo de fruta y/o puré de fruta en la bebida de fruta es generalmente entre aproximadamente 20% hasta aproximadamente 99.99% en peso, preferiblemente entre aproximadamente 30% hasta 95% en peso, más preferiblemente entre aproximadamente 40% hasta 90% en peso, aún más preferiblemente entre aproximadamente 50% hasta 80% en peso, y lo más preferiblemente 60% hasta 70% en peso.
En una modalidad, la bebida de fruta de la presente invención no contiene sustancialmente componentes de leche, pero puede comprender jugo de vegetales, concentrado vegetal y/o puré de vegetales.
En una modalidad, el pH de estas bebidas de frutas está en el intervalo de entre 3.2 y 4.2, preferiblemente entre 3.5 Y 3.9.
En una modalidad preferida, la bebida de frutia en su totalidad o en parte, está hecha de frutas seleccionadas del grupo que consiste de fresa, plátano, uva, naranja, manzana, mango, durazno, arándanos, piña, lima, frambuesa y grosella negra y mezclas de los mismos. '
De acuerdo con una modalidad preferida de la invención, la bebida de frutas comprende puré de fresa, puré de plátano, jugo de uva, jugo de naranja, puré de mango, puré de melocotón y puré de arándano.
De acuerdo con otra modalidad preferida de la invención, la bebida de fruta comprende jugo de piña, jugo de naranja, puré de plátano, puré de mango y jugo de limón.
De acuerdo con otra modalidad preferida de la invención, la bebida de frutas comprende puré de frambuesa, jugo de grosella negra, puré de arándano, jugo de uva, puré de fresas y puré de plátano.
Por lo menos una bacteria probiótica es adaptada a ácido en un medio apropiado mediante propagación sin la estabilización del pH. En una modalidad, por lo menos una bacteria probiótica se propaga sin la estabilización del pH a una temperatura en el intervalo desde 25°C hasta 43 °C, preferiblemente en el intervalo desde 25°C hasta 40°C en un medio que tiene un pH inicial de entre aproximadamente 6.0 y aproximadamente 7.0, el medio tiene una composición que permite que el medio alcance un pH de entre ' aproximadamente 5.0 y aproximadamente 4.0, preferiblemente después de por lo menos 8 horas de propagación, produciendo de ese modo por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido; por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido es cosechada; por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido es preferiblemente concentrada, y por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido está opcionalmente congelada o liofilizada.
El medio utilizado para la adaptación a ácido1 de las
bacterias probióticas tiene preferiblemente una composición que permite que el medio alcance un pH de entre aproximadamente 5.0 y aproximadamente 4.0 durante la propagación de las bacterias probióticas. Esto significa que el pH del medio disminuye debido a la producción de ácido por las bacterias probióticas, o, alternativamente, por una adición continua o escalonada de ácido al cultivo. Por lo tanto, el medio no contiene ninguno de los componentes esenciales que se descompondrían o de lo contrario se convertirían en ineficaces o incluso tóxicos a un pH entre aproximadamente 5.0 y aproximadamente 4.0. Los componentes esenciales del medio son compuestos que se requieren para la propagación de bacterias probióticas, tales como nutrientes, fuentes de carbono y nitrógeno, vitaminas y similares.
El medio utilizado para la propagación en una modalidad preferida comprende por lo menos 0.4% de extracto de levadura y por lo menos 2% de azúcar.
Los medios apropiados que se pueden usar para la propagación de bacterias probióticas, en particular bacterias de ácido láctico, son bien conocidos en la técnica. Por ejemplo, si las bacterias probióticas para ser utilizadas son bacterias de ácido láctico, cualquiera del los medios de cultivo disponibles en el comercio para las bacterias de ácido láctico se pueden utilizar, tal como medio de lactobacilos MRS (de Man, Rogosa y Sharpe) . Un medio MRS
ejemplar que puede ser utilizado para la propagación de bacterias probióticas contiene 1.0% de peptona, 0.8% de extracto de carne, 0.4% de extracto de levadura, 2.0% de glucosa, 0.5% de acetato de sodio trihidratado, 0.1% de polisorbato 80 (también conocido como Tween 80), 0.2% de hidrógeno fosfato de dipotasio, 0.2% de citrato de triamonio, 0.02% de magnesio de sulfato heptahidratado y 0.005% de sulfato de manganeso tetrahidratado, pH de 6.0-7.0 a 25°C. Cuando se usa este medio para adaptación a ácido de las bacterias probióticas, se prefiere particularmente que el componente de fosfato de hidrógeno de dipotasio se omita de modo que el medio es incapaz de proporcionar un pH estable a pesar de la producción de ácido por las bacterias o durante la adición externa de ácido. En una modalidad aún más preferida, tanto el componente de fosfato hidrógeno de dipotasio y el componente de acetato de sodio trihidratado se omiten del medio MRS anterior. Sin embargo, tal como se describió en otra parte en este documento, también es posible mantener componentes amortiguadores en los medios utilizados para adaptación de ácido de las bacterias probióticas. En este caso, se producirá la caída del pH después dé que la capacidad amortiguadora se ha agotado. El ¡cultivó]: de las bacterias probióticas no incluye ninguna adición externa de bases. :
Generalmente, la persona experimentada' en la" técnica
conocerá de medios apropiados para la propagación de bacterias probióticas. Los medios anteriores, con o sin componentes amortiguadores, son apropiados para la propagación en cultivos iniciadores, tales como cultivos iniciadores que tienen un volumen de aproximadamente 100 mi, aproximadamente 500 mi, aproximadamente 1000 mi, aproximadamente 2000 mi, aproximadamente 4000 mi o más, asi como para cultivos de bacterias a gran escala, tales como cultivos en un volumen de más de 50 1, más de 100 1, más de 200 1, o más de 400 1. Tales cultivos a gran escala típicamente se llevarán a cabo en un fermentador . EÍ uso de un medio apropiado se ejemplifica más adelante en el Ejemplo 1.
El pH inicial del medio es el pH del medio antes de la adición de bacterias probióticas. En una modalidad preferida, el pH inicial del medio está entre aproximadamente 6.0 y 7.0, preferiblemente entre aproximadamente 6.2 y aproximadamente 6.6.
En una modalidad de la invención, el medio alcanza el pH de entre aproximadamente 5.0 y aproximadamente 4.0, preferiblemente después de por lo menos 6 horas, por lo menos 8 horas, por lo menos 10 horas de la propagación de las bacterias probióticas, y más preferiblemente después de por lo menos 12 horas de propagación de bacterias probióticas. En una modalidad particularmente preferida, el medio alcanza el
pH de entre aproximadamente 5.0 y aproximadamente 4.0 después de por lo menos 8 horas .
Las bacterias probióticas pueden causar una caída en el pH durante la propagación debido a la producción de ácido láctico durante la fermentación. En una modalidad preferida, el medio utilizado en el método de la presente invención permite esta caída de pH, debido a que no o esencialmente no contiene agentes amortiguadores que mantendrían el pH estable a pesar de la formación de ácido láctico durante la propagación.
Preferiblemente, las bacterias probióticas se propagan sin la estabilización del pH a una temperatura en el intervalo desde 25°C hasta 43°C, preferiblemente en el intervalo desde 25°C hasta 40°C, más preferiblemente en el intervalo desde 30 hasta 40°C, y más preferiblemente a aproximadamente 37 °C . i't
En una modalidad preferida de la presente invención, por lo menos una cepa de bacterias probióticas ^pertenece a los géneros Lactobacillus o Bifidobacterium .
En una modalidad más preferida de la presente invención, por lo menos una cepa de bacterias probióticas pertenece a la especie Lactobacillus paracasei . Si se utiliza Lactpbacillus paracasei, la temperatura para la propagación es preferiblemente 37 o 38 °C.
La cepa Lactobacillus paracasei subsp. paracasei CRL431
(L. casei 431®) fue depositada de acuerdo con el Tratado de Budapest sobre el reconocimiento Internacional del Depósito de Microorganismos para los propósitos de procedimiento de materia de Patente con el Centro de colección de tejidos tipo de Estados Unidos, 10801 University Blvd. , Manassas, VA 20110, USA el 24 de enero 1994 con el número de acceso ATCC 55544. La bacteria probiótica bien conocida está disponible en el comercio de Chr. Hansen A/S, 10-12 Boege Alie, DK-2970 Hoersholm, Dinamarca, bajo el nombre del producto Prdbio-Tec® F-DVS L. casei-431®, número de artículo 501749, y bajo el nombre de producto Probio-Tec® C-Powder-30, artículo número 687018.
En una modalidad aún más preferida de la presente invención por lo menos una cepa de bacterias probióticas se selecciona del grupo que consiste de Lactobacillus paracasei subesp. paracasei cepa CRL431 (L. casei 431®), que fue depositada en el Centro de colección de tejidos tipo de Estados Unidos bajo el número de acceso ATCC55544, un mutante de la misma y una variante de la misma.
Los métodos para la cosecha y la concentración de las bacterias probióticas adaptadas a ácido son bien conocidos en la técnica. Por ejemplo, la cosecha de las bacterras puede lograrse mediante centrifugación de los cultivos bacterianos para eliminar el sobrenadante de los medios; de cultivo. La centrifugación será lo suficientemente suave para evitar la
rotura de las bacterias . Métodos para la cosecha de las células por centrifugación se conocen comúnmente e incluyen, por ejemplo, centrifugación a 2000 hasta 6000 xg durante 2-20 minutos. Las bacterias también pueden ser cosechadas por otras técnicas que se han descrito en el contexto de la fermentación bacteriana, tal como filtración, por ejemplo, filtración cruzada. Métodos para la concentración son igualmente conocidos en la técnica. Por ejemplo, la concentración de las bacterias puede lograrse mediante centrifugación y posterior resuspensión en un volumen más pequeño, técnicas de liofilización o filtración de membrana, tales como filtración a través de columnas o filtros.:
Generalmente, la bebida de fruta es inoculada con por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido en una cantidad (CFU/ml inicial) de aproximadamente lxlO4 a lxlO10 UFC/ml, más preferiblemente en una cantidad de aproximadamente lxlO5 a lxlO9 UFC/ml, e incluso más preferiblemente en una cantidad de aproximadamente lxlO6 a lxlO8 UFC/ml.
Sorprendentemente, la viabilidad de las bacterias probióticas es particularmente alta después de la adaptación descrita anteriormente a condiciones acidas y se mantendrá alta después de un tiempo de almacenamiento de varios meses a una temperatura de 4-10°C. La viabilidad de por lo menos una cepa de bacteria probiótica adaptada a ácido en una modalidad
es por lo menos 50% de la UFC/ml inicial después del almacenamiento durante por lo menos 30 días a una temperatura de 8°C en la bebida de fruta, de manera que después de por lo menos 42 días de almacenamiento a una temperatura de 8°C, tal como después de por menos 70 días de almacenamiento a una temperatura de 8°C.
En una modalidad preferida, la viabilidad de por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido es por lo menos 60% de la CFU/ml inicial, preferiblemente por lo menos 70% de la CFU/ml inicial, y más preferiblemente por lo menos 80% de la CFU/ml inicial bajo las condiciones antes mencionadas de almacenamiento.
La medición del recuento de células viables se lleva a cabo mediante la cuantificación del número de unidades formadoras de colonias (CFU, por sus siglas en inglés) en diluciones en serie por el recuento de colonias en placas de agar, de acuerdo con métodos estándar en la técnica. El medio apropiado y las condiciones de incubación se dan en los Ejemplos a continuación.
Después de la cosecha y/o concentración, las bacterias adaptadas a ácido son opcionalmente congeladas o liofilizadas . Por ejemplo, las bacterias probióticas pueden ser congeladas a aproximadamente -20°C, preferiblemente a aproximadamente -80°C, o menos. El procedimiento de congelación se lleva a cabo preferiblemente tan prorito como
sea posible, preferiblemente por congelación por choque, para evitar el daño celular. La congelación por choque puede por ejemplo llevarse a cabo vertiendo un recipiente que contiene las bacterias en nitrógeno líquido. Por lo tanto, en una modalidad particularmente preferida, las bacterias probióticas adaptadas a ácido son congeladas por choque a aproximadamente -196°C. Los métodos de liofilización son bien conocidos en la técnica. Durante el liofilizado el material es congelado y después, la presión circundante se reduce para permitir que el agua congelada en el material se sublime directamente de la fase sólida a la fase gaseosa. Después de la congelación o congelación por choque de las bacterias adaptadas a ácido, las bacterias se pueden almacenar a aproximadamente -20°C, a aproximadamente -55°C, a aproximadamente -80°C, o en nitrógeno líquido a -196°C. Se prefiere particularmente almacenar las bacterias adaptadas a ácido a aproximadamente -55°C.
De acuerdo con una modalidad de la presente invención, la bebida de fruta probiótica está convenientemente envasada en un envase sellado que contiene de 10 a 5000 mi del producto, tal como de 50 a 1000 mi o entre 200 y 1000 mi .
En un segundo aspecto, la presente invención se refiere a una bebida de fruta probiótica que puede obtener por el método de acuerdo con el primer aspecto de la invención, en el que la bebida de fruta probiótica comprende por lo menos
una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido.
En una modalidad por lo menos una cepa de bacterias probióticas está presente en la bebida de fruta en una cantidad desde aproximadamente lxlO4 hasta lxlO10 UFC/ml, más preferiblemente en una cantidad de aproximadamente lxlO5 hasta lxlO9 UFC/ml, y aún más preferiblemente en una cantidad de aproximadamente lxlO6 hasta lxlO8 UFC/ml después de por lo menos 30 días de almacenamiento a una temperatura de 8°C, tal como después de por lo menos 42 días de almacenamiento a una temperatura de 8°C.
La medición del recuento de células viables se lleva a cabo mediante la cuantificación del número de unidades formadoras de colonias (CFU) en diluciones en serie por recuento de colonias en placas de agar, de acuerdo con métodos estándares en la técnica. El medio apropiado y las condiciones de incubación se dan en los Ejemplos a continuación.
En un tercer aspecto, la presente invención está dirigida a un método para obtener un cultivo de una cepa probiótica adaptada a ácido mediante propagación sin la estabilización de pH. En una modalidad preferida, r.
las bacterias probióticas se propagan sin l estabilización del pH a una temperatura en el intervalo desde 25 °C hasta 43°C, más preferiblemente en el intervalo desde 25°C hasta 40°C en un medio que tiene un pH inicial de entre
aproximadamente 6.0 y aproximadamente 7.0, el medio tiene una composición que permite que el medio llegue a un pH de entre aproximadamente 5.0 y aproximadamente 4.0 después de por lo menos 8 horas de propagación, produciendo de ese modo las bacterias probióticas adaptadas a ácido; las bacterias probióticas adaptadas a ácido son cosechadas; las bacterias probióticas adaptadas a ácido son concentradas, y las bacterias probióticas adaptadas a ácido están opcionalmente congeladas o liofilizadas .
En una modalidad preferida, el medio comprende por lo menos 0.4% de extracto de levadura y por lo menos 2% de azúcar .
El pH inicial del medio es el pH del medio antes de la adición de bacterias probióticas. En una modalidad preferida, el pH inicial del medio es entre aproximadamente" 6.2 y aproximadamente 6.6.
En una modalidad preferida de la invención, el medio alcanza el pH de entre aproximadamente 5.0 y aproximadamente 4.0 después de por lo menos 10 horas de propagación de las bacterias probióticas, preferiblemente después de 'por lo menos 12 horas de la propagación de las bacterias probióticas. ,
En una modalidad preferida, las bacterias probióticas pertenecen a los géneros Lactobacillus o Bifidobacterium .
En una modalidad más preferida de la presente invención, por lo menos una cepa de bacterias probióticas pertenece a la especie Lactobacillus paracasei.
En una modalidad aún más preferida de la presente invención por lo menos una cepa de bacterias probióticas es seleccionada del grupo que consiste de la cepa Lactobacillus paracasei subesp. paracasei CRL431 (L . casei 431®) que ha sido depositada en American Tissue Type Collection bajo el número de acceso ATCC55544, un mutante de la misma y una variante de la misma.
Un cuarto aspecto de la presente invención se refiere a un cultivo de una cepa de bacteria probiótica adaptada a ácido de acuerdo con el tercer aspecto de la invención.
Un quinto aspecto se refiere al uso de un cultivo de acuerdo con el cuarto aspecto para la producción de una bebida de fruta probiótica.
En una modalidad preferida, la bebida d fruta probiótica tiene un pH de como máximo 4.2.
La presente invención se ilustra adicionalmente mediante los siguientes ejemplos no limitativos.
Ejemplos
Ejemplo 1. Producción de L. casei 431® adaptada a ácido
Medio MRS de Difco (ref.288110) fue inoculado 1% (V/V) con L. casei 431® a partir de una solución madre congelada. El cultivo se hizo crecer durante la noche a 37°C hasta que
el H fue inferior a 3.9 y se almacena a 5°C hasta su uso. Este cultivo de una noche fue utilizado para inocular 4 1 (1%, V/V) de medio MRS (Difco) y se incubó durante la noche a 37°C hasta que el pH fue inferior a 3.9 y se almacenó a 5°C hasta su uso. Este paso de pre- inoculación se hace con el fin de obtener una cantidad suficiente de inoculo para la fermentación. Un biorreactor que contiene 400 1 de un medio apropiado a 10°C se inoculó con todo el volumen de pre-inóculo. La fermentación se inició mediante el aumento de la temperatura a 35°C y la fermentación fue seguida por el control de la disminución en el pH como una indicación del metabolismo de los carbohidratos en la producción de ácido láctico. Durante esta caída en el pH de las células se adaptan poco a poco a la de pH bajo. Las células adaptadas a ácido fueron cosechadas a un pH de 5.0, 4.5, y 4.0 por centrifugación. El tiempo de fermentación fue entre 10-17 horas, dependiendo del punto de cosecha (Figura 1).
La masa de células concentradas se congeló instantáneamente en nitrógeno líquido (-196°C) y se almacenó a -55°C hasta su uso.
Ejemplo 2. Optimización de los criterios de cosecha para L. casei 431® adaptada a ácido '
Con el fin de obtener un número máximo de células viables, el criterio de cosecha óptimo se determinó como sigue. Un biorreactor se inoculó con pre-inóculo y la
fermentación se inició, como se describe en el ejemplo 1. Las muestras de fermentado se tomaron cada 30 minutos a partir de 11 horas después de la inoculación (correspondiente a pH 4.5) hasta que el pH estaba por debajo de 4.0 y la viabilidad se evaluó mediante la determinación del número de unidades formadoras de colonias (CFU) (Figura 2) . El CFU se determinó por vertido a placas de diluciones de diez veces apropiadas en agar MRS seguido por incubación anaeróbica durante 3 días a 37°C.
Los recuentos de células se incrementaron hasta 12 h después de la inoculación (que corresponde a un pH de 4.24) y 15 se mantuvo a un nivel constante a lo largo de la fermentación. Esto indica que las células son robustas y permanecen viables incluso cuando el pH cae por debajo de 4.0. Un pH <4.0 se determinó como el criterio de cosecha óptimo proporcionando una cantidad suficiente de ácido adaptado y células viables dentro de un tiempo de ' proceso factible. ;
Ejemplo 3. Supervivencia y calidad organoléptica de. varias bebidas de frutas adicionadas con L. casei 431® adaptadas
L. casei 431® producida de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 1 se utilizó para la| inoculación de diferentes bebidas a base de frutas compuestas de los siguientes ingredientes :
Jugo de fresa y plátano (pH 3.75)
31% de puré de fresas
26% de puré de plátano
Jugo de uva, j go de naranja, puré de mango, puré de melocotón y puré de arándanos hasta 100%
Jugo Tropical (pH 3.88)
32% de jugo de piña
32% de jugo de naranja
26% de puré de plátano
7% de puré de mango
3% de jugo de limón
Jugo de fruta roja (pH 3.55)
16% de diferentes frutas rojas (puré de frambuesa, jugo de grosella negra, puré de arándano )
Jugo de uva, puré de fresas y puré de plátano hasta 100% F-DVS del cultivo probiótico se diluyó en solución salina de peptona para asegurar que los recuentos de ; células iniciales de cualquiera de 5xl07 o lxlO8 UFC/ml se obtuvieron mediante la adición de un inoculo de 1% v/v para cajas de cartón de los diferentes jugos de frutas. Los jugos fueron inoculados con L. casei 431® adaptada a pH 4.0 o pH 5.0 y como un control, la L. casei 431® no adaptada. Como un control para el análisis sensorial, cajas '¦ de cartón se inocularon con el mismo volumen de solución salina de peptona. Los jugos inoculados se almacenaron protegidos de la luz a 8°C. Los recuentos de células de L. casei 431® se
determinaron periódicamente mediante el vertido a placas de diluciones de diez veces apropiadas en MRS agar seguido por incubación anaeróbica durante 3 días a 37°C. Las evaluaciones sensoriales se llevaron a cabo por un panel de 3 evaluadores sensoriales entrenados durante almacenamiento.
Los recuentos de células de L. casei 431® en los diferentes jugos se ilustran en las Figuras 3, 4 y 5. Las bacterias de L. casei 431® adaptadas a ácido no se vieron afectadas por el almacenamiento durante por lo menos 30 días en medio ácido de pH 3.5 a 3.9, mientras que bacterias L. casei 431 ® no adaptadas tenían una viabilidad menor de 1000 veces en las bebidas de frutas.
Las evaluaciones sensoriales durante 30 días de almacenamiento no mostraron cambios organolépticos en ninguna de las bebidas de frutas adicionadas con L. casei 431® en comparación con las mismas bebidas de frutas 'adicionadas con un volumen correspondiente de peptona salina.
Ejemplo 4. Supervivencia de L. casei 431® en el jugo de naranja cuando es adaptada a tres valores de pH diferentes L. casei 431® producida de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 1 se utilizó para la inoculación de jugo de naranja al 100% (pH 3.8). F-DVS del 'cultivo probiótico se diluyó en solución salina dé peptona para asegurar que los recuentos de células iniciales de 1.5xl08 UFC/ml se obtuvieron mediante la adición de un inoculo de 1%
v/v para cajas de cartón de jugo de naranja. Los jugos estaban ya sea inoculados con L. casei 431 ® adaptada a pH 4.0, pH 4.5 o pH 5.0, y como control, la L. casei 431 ® no-adaptada. Se almacenaron los jugos protegidos de la luz a 8°C durante 42 días y se tomaron muestras periódicamente para determinar el recuento de células mediante vertido a placas de diluciones de 10 veces apropiadas en MRS agar seguido por incubación anaeróbica durante 3 días a 37°C.
Como se ilustra en la Figura 6, el recuento de células de L. casei 431 ® fue bastante constante cuando se adaptan a un pH de 4.0, 4.5 o 5.0 durante la producción, mientras que se observaron reducciones significativas para el recuento de células de L. casei 431 ® no adaptadas.
Ejemplo 5. Estabilidad de L. casei 431 adaptada durante el almacenamiento congelado.
L. casei 431® producida de acuerdo con el ejemplo 1 se almacena en forma de granulos congelados a -50°C, y s-jé prueba con regularidad para viabilidad. Los recuentos de células se determinaron en el cultivo descongelado mediante el vertido a 5 placas con diluciones de 10 veces apropiadas en agar SRA seguido por incubación anaeróbica durante 3 días a 37<°C. Como se ilustra en la Figura 7, los recuentos de células 'tanto de no-adaptadas, así como las L. casei 431® adaptadas a ün pH de 4.0, 4.5 o 5.0 durante la producción fue muy cónstante durante por lo menos 6 meses cuando se almacena a -50°C.
Las modalidades preferidas de esta invención se describen en este documento, incluyendo el mejor modo conocido por los inventores para llevar a cabo la invención. Variaciones de estas modalidades preferidas pueden llegar a ser evidentes para las personas experimentadas en la técnica durante la lectura de la descripción anterior. Los inventores esperan que las personas experimentadas en la técnica empleen las variaciones según sea apropiado, y los inventores pretenden que la invención pueda ser practicada de otro modo que como se describe específicamente en este documento. Por lo tanto, la presente invención incluye todas las modificaciones y equivalentes de la materia objeto recitadas en las reivindicaciones anexas a la misma de acuerdo a lo permitido por la ley aplicable. Por otra parte, cualquier combinación de los elementos anteriormente descritos en todas las variaciones posibles de los mismos está abarcada por la invención a menos que se indique lo contrario en este documento o de otra manera se contradiga claramente por el contexto.
Ejemplo 6. Supervivencia de L. casei 431® en el jugo después de almacenamiento en congelación a largo plazo.
Después de 6 meses de almacenamiento a -50°C en forma de granulos congelados, la supervivencia se determinó en 25 jugos de naranja al 100% para el lote de L. casei 431
adaptadas a pH 4.0 durante la producción. F-DVS del cultivo probiótico se diluyó en solución salina de peptona para asegurar que los recuentos de células iniciales de 10a UFC/ml se obtienen mediante la adición de un inoculo de 1% (v/v) a cajas de cartón de jugo de naranja. Como un control, a otros envases de cartón de jugo de naranja al 100% se adicionó la L. casei 431® no adaptada almacenada durante 6 meses a -50°C. Los jugos se almacenaron a 8°C protegidos de la luz y se toman muestras periódicamente para determinaciones de recuento de células de L. casei 431 ® mediante vertido en placas de diluciones de 10 veces apropiadas en MRS agar seguido por incubación anaeróbica durante 3 días a 37°C.
Como se ilustra en la Figura 8, los recuentos de células de L. casei 431 ® eran bastante constantes cuando se adaptan a un pH de 4.0 durante la producción, almacenadas durante 6 meses a -50°C y después almacenadas en frío en jugo de naranja durante 6 semanas. Por el contrario, las reducciones de recuento de células significativas, se observaron para L. casei 431® no adaptada cuando se almacena durante 6 meses a -50°C y se adiciona al jugo de naranja. Esto ilustra que la buena supervivencia de color naranja de la L. casei 431® adaptada a pH 4.0 durante la producción se mantiene incluso después de un almacenamiento congelado largo del cultivo a -5Ó°C.
Ejemplo 7. Estabilidad durante el almacenamiento a largo plazo de L. casei 431 ® adaptada en jugo de naranja al 100%.
L. casei 431® producida de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 1 se utilizó para la inoculación de jugo de naranja al 100% (pH 3.8). F-DVS del cultivo probiótico se diluyó en solución salina de peptona para asegurar que los recuentos de células iniciales de aprox. Ie08 CFU/ml se obtuvieron mediante la adición de un inóculo de 1% v/v para cajas de cartón de jugo de fruta. Los jugos o bien fueron inoculados con L. casei 431® adaptada a pH 4.0 o como un control, la L. casei 431® de "control" no-adaptada. Los jugos de naranja se almacenaron protegidos de la luz a 8°C durante 70 días y se tomaron muestras periódicamente para la determinación de recuente de células mediante vertido a placas de diluciones de 10 veces en MRS agar seguido por incubación anaeróbica durante 3 días a 37 °C.
Como se ilustra en la Figura 9, los recuentos de células de L. casei 431® eran bastante constantes cuando se adaptan a un pH de 4.0 durante la producción y después almacenado en frío en jugo de naranja por hasta 10 semanas. ; Por el contrario, se observaron reducciones significativas de recuento de células desde el primer punto de muestreo; a las 3 semanas de almacenamiento para la L. casei 431 ® no adaptada, conservada en frío en el jugo de naranja. Esto ilustra la supervivencia superior de la L. casei 431® adaptada a pH 4.0
en el jugo de naranja incluso hasta 10 semanas de almacenamiento en frío.
REFERENCIAS
Patente Europea EP 0113055
Solicitud de Patente US 2010/0086646
Solicitud de patente PCT WO 2010/132017
Todas las referencias citadas en este documento de patente se incorporan en este documento en su totalidad por referencia .
Se hace constar que con relación a esta fecha, él mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.
Claims (21)
1. Un método para producir una bebida de fruta probiótica, caracterizado porque comprende: (a) adaptación a ácido de por lo menos una cepa de bacterias probióticas durante la propagación; (b) inoculación de una bebida de frutas con por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido del paso (a) ; y (c) opcionalmente, envasar la bebida de fruta probiótica.
2. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la adaptación de ácido en el paso (a) comprende: ; (i) la propagación de por lo menos una cepa de bacterias probióticas sin estabilización de pH a una temperatura en el intervalo desde 25°C hasta 43 °C, preferiblemente en el intervalo desde 25°C hasta 40°C, en un medio apropiado que tenga un pH inicial de entre aproximadamente 6.0 . y aproximadamente 7.0, el medio tiene una composición que permite que el medio alcance un pH de entre aproximadamente 5.0 y aproximadamente 4.0; (ii) la cosecha de por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido; (iii) opcionalmente concentrar por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido; y (iv) opcionalmente congelar o liofilizar por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido.
3. Un método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el medio en el paso (i) comprende por lo menos 2% de azúcar y 0.4% de extracto de levadura.
4. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque en el paso (b) la bebida de fruta es inoculada con por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido en una cantidad (CFU inicial por mi de bebida de fruta) desde aproximadamente lxlO4 hasta lxlO10 UFC por mi de bebida de fruta, más preferiblemente en una cantidad de aproximadamente lxlO5 hasta lxlO9 UFC por mi de bebida de fruta, e incluso más preferiblemente en una cantidad desde aproximadamente lxlO6 hasta lxlO8 UFC por mi de bebida de fruta.
5. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la viabilidad de por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido es por lo menos 50% del CFU inicial por mi de bebida de fruta después de un almacenamiento durante por lo menos 30 días a una temperatura de 8°C en la bebida de fruta, tal como después de por lo menos 42 días de almacenamiento a una temperatura de 8°C, tal como después de por lo menos 70 días de almacenamiento a una temperatura de 8°C.
' 6. Un método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la viabilidad de por lo menos una cepa de bacterias probióticas adaptadas a ácido es por lo menos 60% de CFU inicial por mi de bebida de fruta, tal como por lo menos 70% de CFU inicial por mi de bebida de fruta, tal como por lo menos 80% de UFC inicial por mi de bebida de fruta.
7. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el pH de la bebida de fruta probiótica está en el intervalo de 3.2 a 4.2, tal como en el intervalo de 3.5 a 3.9.
8. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque por lo menos una cepa de bacterias probióticas se' selecciona del grupo que consiste de Lactobacillus y Bifidobacterium.
9. Un método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque por lo menos una cepa de bacterias probióticas pertenecen a la especie Lactobacillus paracasei.
10. Un método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque por lo menos una : cepa bacterias probióticas es seleccionada del grupo que consiste dé la cepa Lactobacillus paracasei subesp. paracasei CRL431 (L. casei 431®) que se depositó en la Colección de tejido Tipo Americana bajo el número de acceso ATCC55544, un mutante de la misma y una variante de la misma.
11. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la bebida de fruta probiótica comprende desde 20% hasta 99.99% en peso de jugo de fruta y/o puré de fruta.
12. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la bebida de fruta se hace a partir de frutas seleccionadas del grupo que consiste de fresa, plátano, uva, naranja, manzana, mango, durazno, arándanos, piña, lima, frambuesa y grosella negra y mezclas de los mismos.
13. Una bebida de fruta probiótica caracterizada porque se puede obtener por el método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores.
14. Una bebida de fruta probiótica de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque está presente en la bebida de fruta de por lo menos una cepa de bacterias probióticas en una cantidad de aproximadamente lxlO4 hasta lxlO10 UFC/ml, más preferiblemente en una cantidad desde aproximadamente lxlO5 hasta lxlO9 UFC/ml, . e incluso más preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 1x10s hasta lxlO8 UFC/ml después de por lo menos 30 días de almacenamiento a una temperatura de 8°C.
15. Un método para obtener un cultivo de una cepa de bacteria probiótica adaptada a ácido, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) propagación de una cepa bacteriana probiótica sin estabilización de pH a una temperatura en el intervalo desde 25°C hasta 43°C, preferiblemente en el intervalo desde 25°C hasta 40°C en un medio apropiado que tiene un pH inicial de entre aproximadamente 6.0 y aproximadamente 7.0, el medio tiene una composición que permite que el medio alcance un pH de entre aproximadamente 5.0 y aproximadamente 4.0; (b) cosechar las células; (c) opcionalmente concentrar las células; y (d) opcionalmente congelar o liofilizar las células.
16. Un método de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque el medio en el paso (a) comprende por lo menos 2% de azúcar y 0.4% de extracto de levadura.
17. Un método de conformidad con cualquier de las reivindicaciones 15 y 16, caracterizado porque la, cepa de bacterias probióticas pertenece a los géneros Lactobácillus o Bifidobacterium .
18. Un método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque la cepa de bacterias probióticas pertenece a la especie Lactobácillus paracasei .
19. Un método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la cepa de bacterias probióticas es seleccionada del grupo que consiste de la cepa Lactobacillus paracasei subes . paracasei CRL431 (L. casei 431®), que fue depositada en el Centro de Colección de Tejido Tipo Norteamericano bajo el número de acceso ATCC55544, un mutante de la misma y una variante de la misma.
20. Un cultivo de una cepa de bacteria probiótica adaptada a ácido caracterizado porque se puede obtener por el método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 15 a 19.
21. El uso de un cultivo de una cepa de bacteria probiótica adaptada a ácido de conformidad con la reivindicación 20, para la producción de una bebida de fruta probiótica .
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP11151624 | 2011-01-21 | ||
| EP11158249 | 2011-03-15 | ||
| PCT/EP2012/050930 WO2012098254A1 (en) | 2011-01-21 | 2012-01-23 | Probiotics in fruit beverages |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| MX2013008050A true MX2013008050A (es) | 2013-09-16 |
| MX352698B MX352698B (es) | 2017-12-05 |
Family
ID=45509520
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| MX2013008050A MX352698B (es) | 2011-01-21 | 2012-01-23 | Probioticos en bebidas de frutas. |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9693578B2 (es) |
| EP (1) | EP2665378B1 (es) |
| JP (2) | JP6046636B2 (es) |
| KR (1) | KR101972140B1 (es) |
| CN (1) | CN103857297B (es) |
| AR (1) | AR084912A1 (es) |
| BR (1) | BR112013018626A2 (es) |
| EA (1) | EA027964B1 (es) |
| ES (1) | ES2811978T3 (es) |
| MX (1) | MX352698B (es) |
| WO (1) | WO2012098254A1 (es) |
Families Citing this family (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2721140B1 (en) | 2011-06-19 | 2016-11-23 | Abogen, Inc. | Devices, solutions and methods for sample collection |
| JP2017516477A (ja) * | 2014-05-27 | 2017-06-22 | ディーエヌエー ジェノテック インク | 頑丈な微生物の生存能力を安定化および維持するための組成物および方法 |
| KR101635590B1 (ko) * | 2014-07-15 | 2016-07-20 | 세명대학교 산학협력단 | 트랜스-레스베라트톨(trans-Resveratrol)의 함량이 증대된 발효 블루베리 조성물 및 이의 제조 방법 |
| CN104522786B (zh) * | 2015-01-21 | 2016-08-24 | 北京电子科技职业学院 | 一种蓝莓乳酸发酵饮料及其制备方法 |
| CA3010920A1 (en) | 2016-01-19 | 2017-07-27 | Synergia Life Sciences Pvt. Ltd | A liquid probiotic composition stable at ambient temperature |
| CN108882718A (zh) * | 2016-01-21 | 2018-11-23 | 科·汉森有限公司 | 使用干酪乳杆菌生产发酵乳制品的方法 |
| EP3454675A1 (en) | 2016-05-11 | 2019-03-20 | Chr. Hansen A/S | Lactic acid bacteria for a heat-treated food product for storage at ambient temperature |
| CA3063991A1 (en) | 2017-05-26 | 2018-11-29 | Sami Labs Limited | Beverage compositions containing bacillus coagulans mtcc 5856 |
| CN107334025A (zh) * | 2017-08-08 | 2017-11-10 | 安徽永骏生物科技有限公司 | 一种蓝莓发酵饮料 |
| CN107821896A (zh) * | 2017-12-05 | 2018-03-23 | 合肥海昭生物科技有限公司 | 一种活体复合益生菌饮品 |
| CA3088630A1 (en) | 2017-12-15 | 2019-06-20 | Solarea Bio, Inc. | Microbial compositions and methods for treating type 2 diabetes, obesity, and metabolic syndrome |
| US20190388480A1 (en) * | 2018-06-22 | 2019-12-26 | Tropicana Products, Inc. | Method of Increasing Probiotic Viability in Food Products |
| CA3111795A1 (en) | 2018-09-05 | 2020-03-12 | Solarea Bio, Inc. | Methods and compositions for treating musculoskeletal diseases |
| US11980647B2 (en) | 2018-09-05 | 2024-05-14 | Solarea Bio, Inc. | Methods and compositions for treating musculoskeletal diseases, treating inflammation, and managing symptoms of menopause |
| WO2021002449A1 (ja) * | 2019-07-03 | 2021-01-07 | 国立大学法人弘前大学 | 白神山地に生息するキハダ由来の新規乳酸菌 |
| WO2023092150A1 (en) | 2021-11-22 | 2023-05-25 | Solarea Bio, Inc. | Methods and compositions for treating musculoskeletal diseases, treating inflammation, and managing symptoms of menopause |
| WO2023135136A1 (en) | 2022-01-11 | 2023-07-20 | Chr. Hansen A/S | Method for producing bacteria |
| CN116076638A (zh) * | 2022-09-21 | 2023-05-09 | 福建成酿生物科技有限公司 | 一种益生菌发酵杨梅饮料的制备方法及其产品 |
| WO2024111464A1 (ja) * | 2022-11-22 | 2024-05-30 | 株式会社ヤクルト本社 | ラクチカゼイバチルス・パラカゼイの胃酸胆汁酸耐性向上方法 |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6021B2 (ja) | 1982-11-30 | 1985-01-05 | 麒麟麦酒株式会社 | 乳酸菌飲料およびその製造法 |
| US6033691A (en) * | 1996-06-13 | 2000-03-07 | Sancor Cooperativas Unidas Limitada | Process for manufacturing a biologically active fermented milk product and product obtained by the process |
| KR100356672B1 (ko) * | 2001-12-27 | 2002-10-19 | 주식회사 바이로박트 | 신규한 락토바실러스 속 미생물 및 그 용도 |
| DE602004005029T2 (de) * | 2003-05-22 | 2007-11-08 | Synbiotics Ab | Probiotische zusammensetzung mit mindestens zwei milchsäurebakterienstämmen, die zur kolonisierung des magen-darm-trakts fähig sind und in kombination damit die eigenschaften, im darm zu überleben, an den darm zu binden, gegen infektion zu schützen und ballaststoffe zu fermentieren, aufweisen |
| FR2866898B1 (fr) | 2004-02-27 | 2006-06-09 | Gervais Danone Sa | Concentrat liquide de bacteries adaptees et viables pour un usage alimentaire |
| US7608700B2 (en) | 2004-03-08 | 2009-10-27 | North Carolina State University | Lactobacillus acidophilus nucleic acid sequences encoding stress-related proteins and uses therefor |
| US20050220964A1 (en) * | 2004-04-06 | 2005-10-06 | Noe Rizo | Process for preparing low-calorie drinks and the low-calorie beverages resulting therefrom |
| JP4859353B2 (ja) | 2004-07-08 | 2012-01-25 | 株式会社アドバンテスト | 増幅回路、及び試験装置 |
| JP4300157B2 (ja) * | 2004-07-12 | 2009-07-22 | カゴメ株式会社 | チルド飲料およびその製造方法 |
| FR2886817B1 (fr) * | 2005-06-10 | 2007-08-24 | Gervais Danone Sa | Produit alimentaire enrichi en probiotique et appauvri en acides organiques |
| FR2909526B1 (fr) | 2006-12-08 | 2011-04-01 | Gervais Danone Sa | Produit alimentaire comprenant des probiotiques et un monoacide faible protone |
| CN101715303A (zh) * | 2007-04-27 | 2010-05-26 | 格伦多拉无添加果汁公司 | 具有益生菌的果汁饮料 |
| WO2009037136A2 (en) | 2007-09-21 | 2009-03-26 | Kerry Group Services International Limited | A probiotic composition |
| WO2010023248A1 (en) * | 2008-08-28 | 2010-03-04 | Chr. Hansen A/S | Bacterial Composition |
| SE533778C2 (sv) | 2009-05-14 | 2011-01-11 | Probi Ab | Probiotisk fruktdryck |
| CN101637291A (zh) | 2009-08-14 | 2010-02-03 | 陈斌 | 两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料及其制作工艺 |
| PL215852B1 (pl) | 2010-09-16 | 2014-02-28 | Inst Biotechnologii Przemyslu Rolno Spozywczego Im Prof Waclawa Dabrowskiego | Sposób wytwarzania fermentowanych, prozdrowotnych napojów owocowych |
-
2012
- 2012-01-23 EA EA201391067A patent/EA027964B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2012-01-23 BR BR112013018626A patent/BR112013018626A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2012-01-23 AR ARP120100207A patent/AR084912A1/es active IP Right Grant
- 2012-01-23 MX MX2013008050A patent/MX352698B/es active IP Right Grant
- 2012-01-23 KR KR1020137022100A patent/KR101972140B1/ko active IP Right Grant
- 2012-01-23 ES ES12700706T patent/ES2811978T3/es active Active
- 2012-01-23 US US13/980,796 patent/US9693578B2/en active Active
- 2012-01-23 EP EP12700706.0A patent/EP2665378B1/en not_active Revoked
- 2012-01-23 CN CN201280006072.6A patent/CN103857297B/zh active Active
- 2012-01-23 JP JP2013549838A patent/JP6046636B2/ja active Active
- 2012-01-23 WO PCT/EP2012/050930 patent/WO2012098254A1/en active Application Filing
-
2016
- 2016-08-12 JP JP2016158879A patent/JP2017006138A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BR112013018626A2 (pt) | 2016-10-18 |
| JP2017006138A (ja) | 2017-01-12 |
| KR101972140B1 (ko) | 2019-04-24 |
| AR084912A1 (es) | 2013-07-10 |
| CN103857297B (zh) | 2016-08-10 |
| EP2665378B1 (en) | 2020-05-27 |
| EA027964B1 (ru) | 2017-09-29 |
| EP2665378A1 (en) | 2013-11-27 |
| MX352698B (es) | 2017-12-05 |
| JP2014502849A (ja) | 2014-02-06 |
| ES2811978T3 (es) | 2021-03-15 |
| WO2012098254A1 (en) | 2012-07-26 |
| KR20140005988A (ko) | 2014-01-15 |
| US9693578B2 (en) | 2017-07-04 |
| EA201391067A1 (ru) | 2013-12-30 |
| JP6046636B2 (ja) | 2016-12-21 |
| CN103857297A (zh) | 2014-06-11 |
| US20130295226A1 (en) | 2013-11-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2665378B1 (en) | Probiotics in fruit beverages | |
| JP4918412B2 (ja) | 果菜発酵物及び果菜発酵物含有飲食品 | |
| CN107348272A (zh) | 一种益生菌果蔬酵素饮料及其制备方法 | |
| Tamminen et al. | Fermentation of carrot juice by probiotics: Viability and preservation of adhesion | |
| TW201625284A (zh) | 新穎的雷曼氏乳桿菌菌株（ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）與其用於抑制黃嘌呤氧化酶及治療痛風之代謝產物 | |
| Randazzo et al. | Survival of Lactobacillus rhamnosus probiotic strains in peach jam during storage at different temperatures | |
| NO326833B1 (no) | Stamme av bakterier av arten Lactobasillus paracasei underart paracasei, preparat for anvendelse i naeringsmidler og produkt inneholdende stammen | |
| KR20130028710A (ko) | 락토바실루스·플란타룸에 속하는 신규 유산균 및 그의 이용 | |
| Sivudu et al. | A Comparative study on Probiotication of mixed Watermelon and Tomato juice by using Probiotic strains of Lactobacilli | |
| EP2568815B1 (en) | Synergistic fermentation of lactobacillus rhamnosus and lactobacillus paracasei subsp paracasei | |
| WO2012023578A1 (ja) | 乳酸菌および／またはビフィズス菌の生残性向上剤 | |
| CA2790414A1 (en) | Method for constructing novel bacterium belonging to the genus bifidobacterium | |
| WO2011129693A1 (en) | Probiotics-containing liquid fruit product | |
| WO2011114182A1 (en) | Dried fermented dairy product containing a high density of living bifidobacteria | |
| EP2011859A1 (en) | Pediococcus pentosaceus lactose-positive strain and a complex of fructan-containing exopolysaccharides synthesized by the strain | |
| Ricci et al. | Cocoa powder as delivery medium for probiotic Lactobacillus strains | |
| JP6921350B1 (ja) | ヤエザクラの花から分離したラクトバチルス・プランタルムに属する新規乳酸菌及びその利用 | |
| KR101302465B1 (ko) | 김치로부터 분리된 유산균 및 상기 유산균을 이용한 발효식품 | |
| ES2329800T3 (es) | Aceitunas de mesa que contienen microorganismos probioticos. | |
| CN104651262B (zh) | 一种植物乳杆菌冻干制剂及其制备方法和应用 | |
| Olaniyi et al. | Antimicrobial characteristics of lactic acid bacteria in African yam bean-based drink. | |
| WO2023135136A1 (en) | Method for producing bacteria | |
| ALIU | PRODUCTION OF PROBIOTIC FRUIT JUICE (ORANGE AND WATERMELON) USING LACTIC ACID BACTERIA ISOLATED FROM FRESH COW MILK | |
| Pereiraa et al. | Probiotic cashew apple juice | |
| Tantiado et al. | Assessment of Lactobacillus spp. populations from tuba inoculated in different beverages |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FG | Grant or registration |