MX2011013085A - Monoesteres y diesteres de acidos grasos insaturados en acido ascorbico y sus usos cosmeticos. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un compuesto con la siguiente fórmula general (I) (ver fórmula (I)) en donde: R1 es una cadena hidrocarburo de un ácido graso insaturado de C12 a C24 incluyendo al menos una insaturación; y R2 y R3 en forma independiente o simultánea son: un hidrógeno o un C1-C3 alquilo o un fenilo; y R4: un átomo de hidrógeno COR1, en donde R1' es una cadena hidrocarburo de un ácido graso insaturado de C12 a C24 incluyendo al menos una insaturación, ventajosamente 1 a 6 y de preferencia 1 a 4.

Description

MONOÉSTERES Y DIÉSTERES DE ÁCIDOS GRASOS INSATURADOS EN ÁCIDO ASCÓRBICO Y SUS USOS COSMÉTICOS DESCRIPCIÓN La presente invención se refiere a derivados de ácido ascórbico y a composiciones farmacéuticas o cosméticas que contienen los mismos, al método para' su preparación y a los usos de los mismos, en particular como medicamento o como un ingrediente cosmético activo. , Ácido ascórbico es un ácido orgánico que tiene propiedades antioxidantes. Las fuentes naturales de ácido ascórbico son frutas y vegetales frescos, en particular frutos cítricos. ¡ En razón de sus propiedades antioxidantes, el ácido ascórbico a menudo se emplea en la industria de agro-alimentos como conservadores bajo el número de código E300 en la lista de aditivos para alimentos. El ácido ascórbico también se emplea en la industria cosmética por sus propiedades anti-radicales y queratoliticas conocidas.

El ácido ascórbico está en la forma de un polvo blanco que fácilmente se colorea al aire o en la prese cia de humedad. Ácidos grasos insaturados corresponden a ácidos grasos que tienen una o más insaturaciones .

El término ácido graso monoinsaturado se emplea cuando comprende una sola insaturación . El término ácido graso poliinsaturado se emplea cuando comprende varias insaturaciones . Ácidos grasos insaturados también pueden originarse de plantas. Ácidos grasos insaturados se dividen en diferentes clases. Estas clases se definen por la posición de la primer insaturación partiendo del lado opuesto al grupo ácido.

En particular, se hace una distinción entre tres clases principales de ácidos grasos insaturados: omegá 3, omega 6 y omega 9. Los ácidos grasos cis insaturados de las series omega 3, omega 6 y omega 9 comprenden varios asi denominados ácidos grasos esenciales. Estos ácidos grasos se dice que son esenciales ya que sólo pueden proporcionarse por ingesta de alimentos.

Los ácidos grasos monoinsaturados omega 9 cuyo i constituyente principal es ácido oléico (C18:l) se cohoce que tienen efectos benéficos en la prevención de enfermedad cardiovascular.

Los ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs= Polyunsaturated Fatty Acids) que pertenecen a las clases omega 3 y omega 6, también se conoce que tienen efectos preventivos contra enfermedad cardiovascular y cáncer. Se recomienda particularmente por la agencia de seguridad para alimentos francesa AFSSAP, observar una proporción entre ácidos grasos insaturados omega 3 y omega 6 en alimentos, es decir una proporción de un ácido alfa linolénico pcj>r 5 ácidos linoléicos. i Además de sus efectos metabólicos, son capaces de modificar la expresión de genes gue codifican proteínas intracelulares . Estos efectos de genes de PUFAs parece , que operan por receptores nucleares denominados receptor activado proliferador de peroxisoma (PPARs = Peroxysome Proliferator Activated Receptor) . Los PPARs pertenecen a la familia de receptores nucleares hormonales de tipo esteroide. Forman heterodimeros con los receptores Receptor X Retinóico (RXR = Retinoic X Receptor) de ácido retinóico y modulan la expresión de genes. Por lo tanto, los PUFAs ?3 parecen ser reguladores negativos de respuesta inflamatoria, que inhiben la ruta de activación NF-KB por la inducción de la expresión de IKBa el inhibir principal de la ruta NF-KB (Ren J and Chung SH. J Agrie Food C em. 2007 55: 5073-80). Además, los PUFAs ?3 tienen acción inhibitoria en la síntesis de ácido araquidónico para el beneficio de la síntesis de ácidos doicohexanóicp y eicosapentanóico (Calder PC. Lipids: 2001: 36, 1007-24).

Los ácidos grasos insaturados, en particular ácidos grasos poliinsaturados, se conocen por 1 sus propiedades dermatológicas (Monpoint S, Guillot B, i Truchetet F et al. Essential fatty acids in dermatology.

Ann Dermatol Venereol, 1992, 119: 233-239). En particular, ácido linoléico es un ácido graso poliinsaturado involucrado en la fabricación de la membrana celular. Una deficiencia en el ácido linoléico lleva a sequedad de la piel y la presencia de alergia.

Los compuestos de la invención son diésteres o monoésteres de ácido graso insaturado en ácido ascórbico cuyos hidroxilos en las posiciones 5 y 6 se protegen por un acetal cíclico y más particularmente un acetal cíclico de acetona (acetonida) . Esta función es fácilmente hidrolizable en un medio ligeramente ácido, es decir en la piel, que tiene un pH ácido entre 5.2 y 7. El acetal cíclico por lo tanto protegerá el ácido ascórbico contra oxidación de su cadena lateral. El uso de un acetal cíclico permite que se obtenga una estructura de tamaño aceptable con fuerte solubilidad en las fases grasas.

Los ésteres de ácidos grasos también pueden romperse fácilmente por las esterasas presentes en la piel, que permiten la liberación de ácidos grasos insaturados (Redoules, D. , Tarroux, R., Assalit, M.F. and Perié, ,J.J. Characterization and assay of five enzymatic activities in the stratum corneum using tape-stripping, Skin Pharmacol. Appl. Skin Physiol., 12, 182-192 (1999)). La ruptura de los ésteres de ácidos grasos insaturados por las esterasas I presentes en la piel, por lo tanto permiten la lenta i difusión de ingredientes activos, que corresponden1 al concepto de suministro de fármaco.

Para los compuestos de la fórmula (I) de acuerdo con la presente invención, la acción de las esterasas de la piel en los enlaces éster lleva a la liberación de un ácido graso insaturado y de una molécula de ácido ascórbico cuando se emplea un monoéster de ácido graso insaturado; o de dos ácidos grasos insaturados y de una molécula de ácido ascórbico por el monoéster en la posición 2 cuando se emplea un diéster de ácido graso insaturado.

En particular para diésteres de ácidos grasos insaturados, la acción de las esterasas primero llevará a la formación de un monoéster de un ácido graso insaturado y a la liberación de ácido ascórbico, después a la libera'ción de ácido ascórbico y de otro acido graso insaturado (Esquema 1) . i Esquema 1: Ejemplo de reacción de ruptura por esterasas de la piel Acidez de Este rasa HO Bis Éster Mono éster Ácido linoléico Acidez de Este rasa 10 OH Acido 1 ascórbico Acido linoléico 15 Por lo tanto, el objeto de la presente invención es un compuesto de la siguiente fórmula general (I) : , 20 en donde 25 Ri es una cadena hidrocarburo derivada de un ácido graso insaturado Ci2 a C24 que comprende al menos una insaturación, ventajosamente 1 a 6 y de preferencia 1 a 4; y R2 y R3 son en forma independiente o simultánea: un hidrógeno o Ci-C3 alquilo o un Fenilo; y i R4 es un átomo de hidrógeno o CORi' , en donde Ri' es una cadena hidrocarburo derivada de un ácido graso insaturado C12 a C24 que comprende al menos | una insaturación, ventajosamente 1 a 6 y de preferencia 1 a 4.

Por "insaturación" en el significado de la invención se entiende un doble enlace C=C.

Por "ácido graso insaturado" en el significadp de la presente invención, se entiende un ácido carboxilico de cadena recta (RiC02H) o ácido (Ri'C02H) que comprende entre 12 y 24 átomos de carbono, de preferencia 14 a 18 átomos de carbono, más preferible 18 átomos de carbono (incluyendo el átomo de carbono de la función ácido carboxilico) y, que comprende al menos un doble enlace C=C, de preferencia 1 a 4 dobles enlaces C=C, estos dobles enlaces de preferencia tienen una configuración cis.

Por "cadena hidrocarburo de un ácido graso insaturado" en el significado de la presente invención, se entienden las cadenas hidrocarburo (Rj.) o (Ri' ) enlazadas a la función ácido del ácido graso insaturado (RiC02á) o (Ri'C02H) . Ri y Ri' por lo tanto representan una cadena hidrocarburo recta que comprende 11 a 23, de preferencia 13 a 17 y además de preferencia 17 átomos de carbono y que comprende al menos uno de preferencia 1 a 4 dobles enlaces C=C, estos dobles enlaces de preferencia tienen una configuración cis. De acuerdo con la invención, si R4 representa COR]/ , Ri y Ri' pueden ser iguales o diferentes.

Los ácidos grasos insaturados pueden ser ápido lauroléico (Ci2:i) , ácido miristoléico (Ci4 :i) , ácido palmitoléico (Ci6:i) , ácido oléico (Ci8:i) , ácido ricinoleico (Ci8:i) ; ácido gadoléico (C2o:i) ácido erúcico (C22:i) o¡-ácido linoléico (Ci8:3) ; ácido estearidónico (Ci8: ) , ácido eicosatrienóico (C2o:3) , ácido eicosatetraenóico ( C20 : 4 ) ácido eicosapentaenóico (C2o:s) , ácido doicosapentaenoico (C 22:5) , ácido docosahexaenóico (C22:6) , ácido tetracosapentaenóico (C2 :5) , ácido tetracosahexaenóico (C 2 :6) ácido linoléico (Ci8-.2) ácido gamma-linolénico (Ci8:3) , ácido eicosadienóico (C2o:2) ácido dihomo-gamma-linolénico (C20:3) ácido araquidónico (C2o:4) , ácido doicosatetraenóico (C22:2) / ácido doicosapentedóico (C22:5) , ácido adrénico (C22:4) y ácido caléndico (Ci8:3) .

Ventajosamente, los compuestos de la invención son aquellos para los cuales Ri es un ácido graso insaturado seleccionado del grupo compuesto por ácido oléico (Ci8:i) , ácido linoléico (Ci8:2) , ácido a-linolénico (Ci8:3) y ácido ?-linolénico (Cis:3) · 1 Ventajosamente, los compuestos de la invención son aquellos en donde, cuando R4 representa COR]/ , Ri ' es un ácido graso insaturado seleccionado de entre el grupo i que comprende ácido oléico (Ci8:i), ácido linoléico (Ci8:2) ácido -linoléico (Ci8:3) y ácido ?-linolénico ( Ci8:3) .

Por "alquilo" en el significado de la presente i invención se entienden cadenas hidrocarburo alifático rectas o ramificadas, saturadas, y comprenden el número especificado de átomos de carbono. Puede hacerse mención por ejemplo de metilo, etilo y propilo. ¡ Ventajosamente, los compuestos de la invención son aquellos para los cuales R2 y R3 representan un C1.-C3 alquilo.

Ventajosamente, los compuestos de la invención son aquellos para los cuales R2 y R3 representan un metilo.

Ventajosamente, los compuestos de la invención son aquellos para los cuales Ri representa la cadena de hidrocarburo de un ácido graso insaturado C1 a Ci8 que comprende 1 a 3 insaturaciones .

Ventajosamente, los compuestos de la inven ión son aquellos para los cuales, cuando R4 representa CORi ' , Ri ' representa la cadena hidrocarburo de un ácido graso insaturado C1 a Cíe que comprende 1 a 3 insaturaciones.

De acuerdo con una modalidad de la invención, los compuestos de la fórmula (I) son aquellos para los cuales R4 representa CORi' .

De acuerdo con otra modalidad de la invención, los compuestos de la fórmula (I) son aquellos para ¡ los cuales R4 representa un átomo de hidrógeno.

En particular, los compuestos de la invención pueden seleccionarse de entre las siguientes moléculas: i 1. Molécula de la fórmula general (I) en donde R4 representa CORif dioctadeca-9, 12-dienoato de (9Z, 9'Z, 12Z, 12' Z) -2- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -5-???-2, 5- | dihidrofuran-3 , 4-diilo dioctadeca-9, 12, 15-trienoato de (9Z, 9'Z, 12Z, 12'Z, 15Z, 15' Z) -2- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -5- i oxo-2, 5-dihidrofuran-3, -diilo, dioctadeca-6, 9, 12-trienoato de (6Z, 6'Z, 9Z, 9'Z, 12Z, 12' Z) -2- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -5-<?xo-2, 5-dihidrofuran-3, 4-diilo dioleato de ( Z ) -2- ( 2 , 2-dimetil-l , 3-dioxolan-4-il) -5-???-2, 5-dihidrofuran-3, 4-diilo . 2. Molécula general de la fórmula (I) en donde R4 representa un átomo de hidrógeno (9Z, 12Z) -5- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il ) -4-hidroxi-2-oxo-2 , 5-dihidrofuran-3-ilo octadeca-9/ 12-dienoato (9Z, 12Z, 15Z) -5- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan 4-il) -4-hidroxi-2-oxo-2 , 5-dihidrofuran-3-ilo octacieca-9, 12, 15-trienoato (6Z, 9Z, 12Z) -5- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -4-hidroxi-2-oxo-2 , 5-dihidrofuran-3-ilo octadeca-6, 9, 12-trienoato I 5- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il ) -4-hidroxi- i 2-oxo-2, 5-dihidrofuran-3-ilo oleato.

Un objeto adicional de la presente invención es un compuesto de la fórmula (I) para su uso como medicamento.

Un objeto adicional de la presente invención es un compuesto de la fórmula general (I) para su uso como un ingrediente activo cosmético.

En particular, un objeto adicional de la invención es un compuesto de la fórmula general (I) paira su uso como ingrediente activo despigmentante, ingrediente activo antienvejecimiento, ingrediente activo antioxidante, ingrediente activo hidratante, ingrediente activo antiinflamatorio o como un ingrediente activo para estimular el recrecimiento o neo formación del cabello en la cabeza y/o el cuerpo.

La invención también se extiende a una composición farmacéutica o cosmética caracterizada porque comprende al menos un compuesto de la fórmula general (I) en combinación con un excipiente farmacéutica o cosméticamente aceptable, en particular adaptado para administración transcutánea .

En la presente invención por "farmacéutica o cosméticamente aceptable" se entiende útil en ; la preparación de una composición farmacéutica o cosmética que en general es segura, no tóxica y no es indeseable en forma biológica o de otra forma y que es aceptable para uso terapéutico o cosmético en forma notable por aplicación tópica.

Las composiciones farmacéuticas o cosméticas1 de la invención pueden estar en formas que son usualménte conocidas para administración tópica en la piel o cuero cabelludo, es decir en particular lociones, espumas, geles, dispersiones, emulsiones, champús, rocíos, sueros, máscaras, aceite corporal o cremas, con excipientes que permiten particularmente la penetración en la piel a fin de mejorar las propiedades y acceso del ingrediente activo.

Las composiciones farmacéuticas o cosméticas de la invención también pueden estar en la forma de geles para inyección (en combinación por ejemplo con ácido hialurónico, colágeno o alginato...) usualménte empleadas como rellenos de arrugas.

Estas composiciones, además del o de los compuestos de la presente invención en general contienen un medio fisiológico aceptable en general basado en agua o solvente, por ejemplo alcoholes, éteres o glicoles. También pueden contener agentes surfactantes , agentes complej antes , agentes conservadores, agentes estabilizantes, emulsificantes, espesantes, agentes gelificantes, humectantes, emolientes, elementos en trazas, aceites esenciales, fragancias, agentes colorantes, agentes de acabado mate, filtros químicos o minerales, agentes hidratantes o aguas de baño de hidromasaje (spa) , etc.

Estas composiciones también pueden contener otros ingredientes activos que llevan a un efecto sinergistico complementario u opcional.

Ventajosamente, las composiciones de la presente invención comprenden de 0.01% a 10% en peso, de preferencia 0.1% a 5% en peso de el o los compuestos de la fórmula general ( I ) . ; Estas composiciones se pretenden 1 más particularmente para despigmentar la piel y/o el cabelló de la cabeza y/o pelo del cuerpo, para el tratamiento y/o prevención de envejecimiento de la piel, para hidratar la epidermis, estimular el recrecimiento del cabello en la cabeza y/o de pelo del cuerpo, o para tratar inflamación de la piel.

Un objeto adicional de la presente invención es un método cosmético para tratar y/o evitar envejecimiento de la piel.

El objeto de la invención también se extiende a un método para blanquear o aclarar piel humana y/o pelo corporal y/o cabello de la cabeza al aplicar una composición cosmética que contiene cuando menos un compuesto de la fórmula general (I). , i Un objeto adicional de la invención se refiere a un método para preparar un compuesto de la fórmula (I) al acoplar un ácido graso insaturado, cuya función carboxílica es una forma activada, con un derivado de ácido ascórbico de la fórmula (II). í Esquema 2 : Método para la preparación de un compuesto de la fórmula (I) (DCM = diclorometano) (en donde R¾ puede representar CORi' o un átomo hidrógeno) La reacción de acoplamiento de la invención t realiza en la presencia de una base y opcionalmente en presencia de un auxiliar de acoplamiento.

La base puede ser piridina por ejemplo o trietilamina .

El auxiliar de acoplamiento puede ser por ej mplo 4-dimetilaminopiridina .

Por "forma activada" en el significado de la presente invención se entiende una función de ácido i carboxilico modificada para hacerla más activa respecto a los nucleófilos. Estas formas activadas son bien conocidas por la persona con destreza en la técnica y en particular pueden ser un cloruro ácido. \ La presente invención se comprenderá mejor a la luz de los siguientes ejemplos no limitantes.

EJEMPLO (1) : Síntesis de los compuestos dé la invención.

Molécula de la fórmula general (I) en donde R4 representa CORi' : 1.1 Método general A: partiendo de un cloruro de un ácido graso insaturado y piridina 1.1a Molécula 1: diactodeca-9, 12-dienoato de (9Z,9'Z, 12Z, 12' Z)-2- ( 2 , 2-dimetil-l , 3-dioxolan-4-il ) -5-oxo-2 , 5-dihid ofuran-3, 4-diil- Ruta 1; A una solución de ácido 5 6-0- Isopropiliden-ascórbico (1.08 g, 5 mmoles, 1 eq.) y 4- i Dimetilaminopiridina (61 mg, 0.5 mmol, 0.1 eq. ) en 10 i^l de piridina anhidra y bajo nitrógeno, se agregan 2.9 g de cloruro de linoleoilo (10 mmoles, 2 eq.), después la mezcla se deja bajo agitación a temperatura ambiente por 16 horas. La reacción se sigue por cromatografía en capa delgada (TLC = Thin Layer Chromatography) .

Después de regresar a temperatura ambiente, el solvente se evapora, luego el residuo se extrae con una mezcla éter/agua. La fase orgánica se lava dos veces con solución HC1 1N, después con solución NaCl-saturado . Después de secar sobre sulfato de magnesio, se obtiene un aceite después de evaporación del solvente.

El residuo después se purifica en sílice cdn la mezcla de heptano/etil acetato (100:0 a 70:30) o por · HPLC preparativa. El producto obtenido en la forma de un aceite incoloro se seca al vacio durante la noche. 1.49 g se obtienen con un rendimiento de 40%.

XH R N (400 Hz, CDC13) : d: 0.83 (2t, 6H) ; 1.27-1.39 (m, 34H) ; 1.68 (m, 4H) ; 2.06 (m, 8H) ; 2.53 (2t, 4H) ; 2.77 (2t, 4H) ; 4.01 (dd, 1H) ; 4.18 (dd, 1H) ; 4.35 (td, 1H) ; 5.14 (d, 1H) ; 5.35 (m, 8H) . 13C RMN (100 MHz, CDC13) : d: 14.01; 22.6-÷33.6 (alifático) ; 65.19; 72.9; 75.3; 76.7; 77; 110.8; 122.0; 127-130; 150.8; 167.7; 168, 169.

Ruta 2 : Ácido 5 , 6-O-Isopropiliden-ascórbico (ll g) se coloca en suspensión en diclorometano (19 mi). Piridina (0.79 mi) se agrega y el medio de reacción se vuelve heterogéneamente blanco (T=15 grados C) . Después de i 10 minutos bajo agitación, el medio de reacción se enfria a 0 grados C utilizando un baño de hielo. Una solución de cloruro de linoleoilo (2.98 mi) en diclorometano (6 mi) se agrega sobre un periodo de 5 minutos, después de lo cual el baño de hielo se retira y el medio de reacción se deja bajo agitación 30 minutos.

El medio de reacción se lavó con agua (3 x 50; mi) con una solución de sulfato de cobre al 2% (p/v) (2 x 50 mi) y después de nuevo con agua (50 mi) . La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, después concentra al vacío para dar por resultado un aceite color café (3.3 g; Rendimiento 96%).

Este aceite se almacena en una atmósfera de nitrógeno a -18 grados C. 1.2 Método general B: partiendo de un cloruro de t ácido graso insaturado y trietilamina 1.2a Molécula 2: I dioctadeca-9, 12, 15-trienoato de (9Z,9'Z, 12Z, 12'Z, 15Z, 15' Z) -2- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -5-oxo- 2 , 5-dihidrofuran-3 , 4-diil - A una solución de ácido 5, 6-O-Isopropiliden- ascórbico (432 mg, 2 mmoles, 1 eq. ) y trietilamina (960 µ?, 7 mmoles, 3.5 eq. ) en 20 mi de diclorometano anhidro y bajo nitrógeno, se agregan 1.91 mi de cloruro de linolenóilo (6 mmoles, 3 eq., 70%, técnico), después, la mezcla se deja bajo agitación a temperatura ambiente por 16 horas. La reacción es seguida por TLC.

Después de regresar a temperatura ambiente, el solvente se evapora y el residuo se extrae con una mezcla de éter/agua. La fase orgánica se lava dos veces | con solución HC1 1N, después con solución saturada de NfaCl. Después de secar sobre sulfato de magnesio, se obtiene un aceite después de evaporación del solvente. El residuo después se purifica en sílice con la mezcla heptanos/etil acetato (100:0 a 70:30) o por HPLC preparativa. El producto obtenido en la forma de un aceite incoloro se seca al vacio durante la noche. | 604 mg se obtienen con un rendimiento de 41%. 1ti RMN (400 Hz, CDCI3) : d: 0.91 (2t, 6H) ; 1.27-1.39 (m, 30H) ; 1.67 (m, 4H) ; 2.06 (m, 4H) ; 2.53 (2t, 4H) ; 2.79 (2t, 4H) ; 4.09 (dd, 1H) ; 4.18 (dd, 1H) ; 4.36 (td, 1H) ; 5.14 (d, 1H) ; 5.38 (m, 12H) . 1.2b Molécula 3: dioctadeca-6, 9, 12-trienoato de (6Z, 6'Z, 9Z, Í9'Z, 12Z, 12' Z) -2- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il ) -5-oxo?2, 5-dihidrofuran-3, 4-diil- Partiendo de 2.5 equivalentes de cloruro de gamma linolenoilo (98%) .

Aceite incoloro con un rendimiento de 68%. i ¾ RMN (400 MHz, CDC13) : d: 0.89 (2t, 6H) ; 1.27-1.44 (m, 20H) ; 1.47 (m, 4H) ; 1.68 (m, 4H) / 2.06 (m, (8H) ; 2.55 (m, 4H); 2.80 (m, 8H) ; 4.01 (dd, 1H) ; 4.18 (dd, ,1H) ; 4.36 (td, 1H); 5.14 (d, 1H) ; 5.37 (m, 12H) . 1.2.c Molécula 4 dioleato de (Z) -2- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -5-???-2, 5-dihidrofuran-3, 4-diil- Partiendo de 2.5 equivalentes de cloruro de oleoilo (98%) .

Aceite incoloro con un rendimiento de 53% después de purificación.

XH RMN (400 MHz, CDC13) : 5: 0.88 (2t, 6H) ; 1.26-1.55 (m, 46H); 1.67 (m, 4H) ; 2.00 (m, 8H) ; 2.53 (m, 4H) ; 2.77 (2t, 4H) ; 4.09 (dd, 1H) ; 4.18 (dd, 1H) ; 4.36 (td, 1H) ; 5.14 (d, 1H) ; 5.34 (m, 4H) .

EJEMPLO (2) : Síntesis de los compuestos dé la invención Molécula de la fórmula general (I) en donde R4 representa un átomo de hidrógeno 2.1 Molécula 5 (9Z, 12 Z) -5- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-i]1) -4-hidroxi-2-oxo-2 , 5-dihidrofuran-3-il octadeca-9, J 12-dienoato- í En un matraz de tres cuellos, bajo nitrógeno, se prepara una suspensión de ácido 5, 6-O-Isopropiliden-ascórbico (5.5 g 25.44 mmoles) en 110 mi de acetona después de lo cual 3.53 mi de trietilamina se agregan.! La formación de un precipitado blanco abundante. Cloruró de linoleoílo (3.55 mi; 11.06 mmoles) después se agrega; por gotas durante 3 minutos y la mezcla se deja bajo agitación 10 minutos a temperatura ambiente. La mezcla de nuevp se vuelve transparente y después se forma un pequeño precipitado de cloruro de trietilamonio . El sólido se filtra a través de un filtro sinterizado y el filtrado se retira para obtener un aceite. Este aceite se disuelv¡e en 100 mi de etil acetato y lava 3 veces con solución de NaCl saturada. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, filtra y evapora para llegar a 4.76 g dé un sólido café dando rendimiento de 90%. I 1H RMN (300 MHz, CDCI3) : d: 0.90 (t,3H); 1.27-1.39 (m, 20H) ; 1.70 (m, 2H) ; 2.06 (m, 4H) ; 2.58 (t, 2H) ; |2.78 (t, 2H); 4.13 (dd, 1H) ; 4.20 (dd, 1H) ; 4.43 (m, 1H) ; 4.65 (d, 1H) ; 5.37 (m, 4H) . ! [M+Na]+ = 501.2; [2 +Na]+ = 979.7 [M-H]" = 477.3; [2 -H]" = 955.7 2.2 Molécula 6 5- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il ) -4-hidroxi-2-oxo-2 , 5-dihidrofuran-3-il oleato - Mismo modo de operación que para la molécula 5 partiendo de cloruro de oleoilo.

Sólido blanco, Rendimiento: 96%; 1 1H RMN (300 MHz , CDC13) : d: 0.89 (t, 3H) ; 1.28- 1.42 (m, 26H) ; 1.69 (m, 2H) ; 2.02 (m, 4H) ; 2.62 (m, 2H) ; 4.15 (dd, 1H) ; 4.22 (dd, 1H) ; 4.45 (td, 1H) ; 4.70 (d, J.H) ; 5.36 (m, 2H) .

[M+Na]+ = 503.2 [ -H]~ = 479.3 2.3 Molécula 7 (9Z, 12Z, 15Z)-5-(2,2-dimetil-l,3-dioxolan-4-il)-4-hidroxi-2-oxo-2 , 5-dihidrofuran-3-il ocatdeca-9, 12,! 15-trienoato- Mismo modo de operación que para la molécula 5 partiendo de cloruro de linolenoilo.

Sólido café. Rendimiento: 91%.

XH R N (300 MHz, CDC13) : d: 0.99 (t, 3H) ; 1.30-1.42 (m, 14H) ; 1.72 (m, 2H) ; 2.08 (m, 4H) ; 2.62 (m, 2H) ; 2.82 (m, 4H); 4.15 (dd, 1H) ; 4.22 (dd, IH) ; 4.45 (td, 1H) ; 4.70 (d, 1H) ; 5.38 (m, 6H) .

[M+Na]+ = 499.1 [M+H]+ = 477.2 i EJEMPLO (3) : Composición de acuerdo con! la invención 1. Una crema Ingredientes Nombre INCI Por ciento (marcas) Agua purificada Agua QS* a 100% Glicerina Glicerina 3 EDTA**, 2Na EDTA Disodio 0.1 Fenoxietanol Fenoxietanol 0.35 Sepiplus™ 400 Poliacrilato-13 1 y Poliisobuteno y Polisorbato 20 y agua I 1 Simulsol™ 165 Gliceril 4 estearato y PEG estearato *** 100 Lanette® 16 Cetil alcohol 1 Myritol®318 Triglicéridos 6 Cáprico/ca- prilico Primol® 352 Parafina liquida 4 Cetiol® CC Dicaprilol 4 carbonato i 9Z,9'Z, 12Z, 12' Z) -2- (2,2- dimetil-1 , 3- Molécula 1 dioxolan-4-il ) - 0.5 5-oxo-2 , 5- dihidrofuran- 3, 4-diil dioctadeca-9, 12- dienoato Chlorphenesin Clorfenesina 0.27 Micropearl M100 Metil 1 ' polimetacrilato Fragancia Fragancia 0.1 ' Cont .

Ingredientes (marca) Función Agua Purificada Glicerina Humectante EDTA** , 2Na Agente complejante Fenoxietanol Agente conservador Sepiplus™ 400 Agente gelificante y estabilizante Simulsol™ 165 Agente emulsifi-cante Lanette® 16 Factor de consistencia Myritol®318 Emoliente 1 Primol® 352 Emoliente Cetiol® CC Emoliente Ingrediente activo Molécula 1 Clorfenesina Agente Conservador Micropearl M100 Polvo Fragancia Fragancia QS: es.

*EDTA: ácido etilendiamintetraacético ***PEG: polietilen glicol 2. Un aceite corporal Ingredientes Nombre INCI Por (marca) ciento Agua Agua QS a purificada 100% Glicerina Glicerina EDTA* * , 2Na EDTA disodio p.i Fenoxietanol Fenoxietanol 0.35 Synthalen® K Carbomer 0.2 Pemulen® TR1 un copolimero de áci 0.3 acrilico y alquil metacrilato Myritol®318 Triglicérido cáprico/caprilico Primol® 352 Parafina liquida (9Z, 9'Z, 12Z, 12'Z)-2- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan- 4-il) -5-OXO-2, 5- Molécula 1 dihidrofuran-3, 4-diil 0.5 dioctadeca-9, 12-dienoato Chlorphenesin Clorfenesina 0.21? Fragancia Fragancia 0.1 I Cont .

Ingredientes (marca) Función i Agua purificada Glicerina Humectante EDTA* * , 2Na Agente complejante Fenoxietanol Agente conservador Synthalen® K Agente gelificante y estabilizante Pemulen® TR1 Agente gelificant|e y estabilizante Myritol®318 Emoliente Primol® 352 Emoliente Molécula 1 Ingrediente activo 1 1 '111,1 Clorfenesina Agente conservador Fragancia Fragancia QS: c.s.

**EDTA: ácido etilendiamintetraacético EJEMPLO (4) : Resultados de pruebas biológicas 4.1 Objetivos de pruebas biológicas La matriz extracelular (ECM = ExtraCellular Matrix) es una estructura dinámica que tiene un papel i i estructural, regulatorio para tejidos. La ECM de la dermis se forma de fibras (colágeno y elastina) y de sustancia fundamental (agua, sales minerales, glicoproteinas, ácido hialurónico y proteoglicanos ) . Imparte a la piel su turgescencia y propiedades mecánicas: firmeza, elasticidad y tonicidad. La ECM se somete permanentemente a re-arreglo en relación al equilibrio entre la síntesis y degradación de sus macromoléculas constituyentes. ECM se forma de cuatro tipos de macromoléculas: colágeno, elastina, glicoproteinas estructurales y glicosaminoglicanos (tales como ácido hialurónico) . i Colágenos son proteínas fibrosas que son altamente abundantes en la dermis. En su mayoría, son colágenos fibrilares de tipo I, III y V. Colágenos forman el componente esencial de la red fibrosa y juegan un papel mecánico impartiendo resistencia y elasticidad a la piel.

La degradación de ECM se establece sobre el curso de algunos procesos fisiológicos (sanado de cicatrices, desarrollo embrionario, angiogénesis...) , pero también durante procesos patológicos (artritis, artrosis, aterosclerosis , desarrollo de tumores y formación de metástasis...) (Fisher et al., N. Engl . J. Med. 333: 1,419, 1997; Shapiro SD Current Opinión in Cell Biology 10: 602, 1998). Los componentes de ECM primordialmente se degradan por enzimas de tipo endopeptidasa denominadas raetaloproteinasas de matriz (MMPs = matrix metalloproteinases) (Nagase and Woessner, J. Biol. Chem. 274: 21491, 1999). MMPs toman una parte activa e el proceso de sanado de cicatrices, pero también contribuyen a aflojamiento de la piel y el inicio de arrugas. MMPs son enzimas de tipo zinc endopeptidasa .

MMP-1, o colagenasa intersticial, primordialmente degrada la triple hélice de colágenos fibrilares tipo I, y también degrada colágenos II, II, VIII y X (Káhari VM and Saarialho-Kere U, Exp. Dermatol. 6: 199, 1997). MMP-1' por lo tanto juega un papel crucial en el inicio de la degradación de colágenos. Esta actividad colagenolitica también se asocia con sanado de cicatrices. Estromelisina tipo I (MMP-3) degrada glicoproteinas tales como fibronectina y laminina, algunos proteoglicanos , elastina, gelatina y colágenos IV y V. A nivel de la piel, MMP-ls y MMP-3s se expresan tanto por los queratinocitos como| por fibroblastos. Durante envejecimiento de la piel, también se observa una reducción en la cantidad de ácido hialurónico tanto a nivel epidérmico como dérmico. Esta reducción es el resultado de una disminución en la síntesis de ácido hialurónico y un incremento en actividad de hialuronidasa (Stern R, Maibach HI (2008) Hyaluronan in skin: aspects of aging and its pharmacologic modulation. Clin Dermatol 26: 22) .

Además, numerosos estudios evidencian un auitiento en citocinas pro-inflamatorias (IL-6, IL-8 ...) dudante envejecimiento (Franceschi et al, Mechanisms oí ageing and develop ent , 92, 2006). Este contexto pro-inflamatorio o "inflamación más enve ecimiento" parece estar involucrado directamente en el inicio de algunos síntomas ; de envejecimiento, en particular a nivel de la piel (Mocchegiani et al., Biomed Central, 1:5, 2004; Licastro et al., Neurobiol . Aging, 2006). Las interleucinas , citoquinas producidas por linfocitos T, después son expresadas (IL-6 or IL-8).

Para evidencia la actividad de los compuestos de la fórmula general (I) contra envejecimiento de la pi$l y contra inflamación, el efecto de estos compuestos se midió en la expresión de genes de MP-1, MMP-3 y IL8 en fibroblastos dérmicos humanos tratados con H202, de esta manera imitando el proceso de senescencia celular. El efecto de estos compuestos de la fórmula general (I) también se midió en la síntesis de ácido hialurónico y en actividad de hialuronidasa . El estímulo de la síntesis de ácido hialurónico también permite que se mejore y/o restaure la hidratación de la piel (Bissett DL. J. Cosmet. Dermatol. 2006 Dec. 5(4): 309-15. Glucosamine: an ingredient with skin and other benefits).

En forma similar, para evidenciar la actividad despigmentante de los compuestos de la fórmula general (I) de acuerdo con la invención, el efecto de estos compuestos se midió en la síntesis de melanina por enrayo colorimétrico en una línea celular de melanomas murinos : línea B16-F10.

Además, el efecto de los compuestos de la formula general (I) en el re-crecimiento del cabello de cabeza y/o pelo del cuerpo también se evaluó al medir su actividad en estímulo de la proliferación de células de papila dérmica y estímulo de crecimiento de folículo de cabello humano. < 4.2.1. Protocolo de prueba para la expresión de genes de M P-1, MMP-3 y IL8 en fibroblastos humanos.

- Tratamiento celular , Fibroblastos dérmicos humanos (aislados de piel operativa descartada) se cultivaron en medio de cultivo DMEM + FCS al 10%. Las células fueron pre-tratadas con vitamina C y el compuesto a probar por 16 horas a 37 grados C y después se estimularon con H2O2. Las células después se reemplazaron en DMEM con vitamina C y dioctadeca-9, 12-dienoato de (9Z, 9'Z, 12Z, 12' Z) -2- (2, 2-dimetil-l!, 3-dioxolan-4-il ) -5-???-2 , 5-dihídrofuran-3 , -diilo . 72 horas después del fin de la tensión o del esfuerzo, los fibroblastos entraron en senescencia: los fibroblastos senescentes no se proliferan más pero permanecen metabólicamente activos (Hayflick, J. Invest. Dermatol. , 73; 8-14, 1979) . Las células después se lisaron con el amortiguador de lisis del equipo RNeasy® (QIAGEN) .

Transcripción inversa y PCR en tiempo real Los ARNs extraídos se convirtieron en j ADN complementario siguiendo las indicaciones del equipe) de Transcripción Inversa Quantitect por Qiagen. Análisis PCR l en tiempo real se realizó utilizando un aparato termociclador de fluorescencia iQ Icycler (BIO-RAD) .

El nivel de expresión de los ARNms que codifican MMP-1, MMP-3, IL8 se analizó utilizando la técnica de PCR en tiempo real. Para normalizar el nivel de expresión del gen de interés, se eligió la estrategia de análisis desarrollada por Vandesompela et al., Genome Biol., 3: RESEARCH0034 (2002) . Utilizando los valores ACT obtenidos durante una primera PCR, el algoritmo de la versión del i programa Genorm 3.4 (Vandesompele J et al., Genome Biol. 3: RESEARCH0034 2002) compara el nivel de estabilidad de tres genes de referencia bajo condiciones experimentales precisas de la prueba celular y permiten la determinación del gen de referencia más estable. En nuestro modelo, los tres genes de referencia probados fueron los siguientes: ß-actina (ß-actina Humana), (gliceraldehído-3-fosfato dehidrogenasa humana (GAPDH = Human glyceraldehydé-3-phosphate dehydrogenase) ) (polipéptido zeta proteína de activación de tirosina-3-monooxigenasa, triptopgan—5-monooxigenasa YWHAZ) .

La primera etapa normaliza los valores Ct que se obtienen para el gen de interés en relación a los valores Ct que se obtienen para el gen de referencia, por pada condición experimental.

Lo siguiente por lo tanto se calculó: 1 ACt Ctgen de interés — Ctgen de referencia Estos valores ACt representan los valores en bruto no transformados que se utilizan para análisis estadístico.

La segunda etapa del cálculo determina ' la variación en el número de copias del gen de interés durante tratamiento. Para hacerlo AACt se calcula: AACt = ACtNHF no-tratado — ACtfjHF tratado Para el control no tratado, este QR por lo tanto es igual a l. Es por tanto posible calcular un factor de inducción o inhibición del gen de interés en comparación con este control. 4.2.2 Resultados de la prueba en la expresión de MMP-1, MMP-3 y IL8 en fibroblastos humanos Análisis estadístico Análisis estadístico se realizó utilizando una prueba denominada "ANOVA de una vía" . Análisis de varianza utilizando la prueba de Dunnett, permite entonces comparación por cada uno de los genes analizados de los valores ACt de los fibroblastos de adulto normal con los compuestos en la presencia de H202 en ambos casos. Esta prueba da entonces el "valor p" que caracteriza, la significancia de los resultados que se obtienen para aíribas condiciones. El grado de significancia se estableció como sigue: - significante para p < 0.05 (*) - muy significante para p < 0.005 (**) - altamente significante para p < 0.001 (***) - no-significante para p > 0.05.

- Análisis de la expresión de los mRNAs de MMP-1, M P-3 y IL-8 en fibroblastos dérmicos humanos senescentes tratados o no tratados con los compuestos de la invención • Análisis de la cantidad relativa de mRNAs Los fibroblastos dérmicos humanos se incubaron en la presencia de ácido ascórbico o dioctadeca-9, 12-dienpato de (9Z, 9'Z, 12Z, 12' Z) -2- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il ) -5-OXO-2 , 5-dihidrofuran-3 , 4-diil (=ingrediente activo 1 en la Tabla 2) antes y después de estimularse con H202. Para analizar el efecto de estos extractos en la expresión de mRNAs modulado por H202, las muestras tratadas con los ingredientes activos y estimuladas con H202, se compararon con la muestra estimulada solamente con H202. Por cada muestra, el nivel de expresión de mRNA de interés tuvo que normalizarse con el nivel de expresión de mRNA del gen, de referencia más estable • Análisis de por ciento de actividad También es posible calcular por ciento ' de inhibición del nivel de expresión de los diferentes m NAs por los ingredientes activos a evaluar, utilizando1 la fórmula : %inhibición = (RQH202 _ RQ8ln-tratar) _ (RQ H202+ing activo RQno-tratado ) x 100 RQ H202 no-tratado RQ Tabla 1: Cantidad relativa de mRNAs de M -1, P-3 y IL-8 de fibroblastos jóvenes o senescentes, y por ciento de inhibición del nivel de expresión de mRNA por los ingredientes activos probados.

MMP-1 RQ % Inhibición H202 3.6 Ácido ascórbico (3 3.2 18 µ?) Molécula 1 (3 µ?) 0.9 105*** MMP-3 RQ % Inhibición H202 5.9 Ácido ascórbico (3 3.5 50* µ?) Molécula 1 (3 µ?) 1.9 81*** IL-8 RQ % Inhibición H202 3.1 Ácido ascórbico (3 1.2 g2 * ** µ?) Molécula 1 (3 µ?) 0.9 102*** La molécula 1 de (dioctadeca-9, 12-dienoato de (9Z, 9'Z, 12Z, 12' Z) -2- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -5-oxo-2 , 5-dihidrofuran-3 , 4-diil ) inhibe en forma ¡más substancial la expresión de MMPl, MMP3 y IL-8 que el ácido ascórbico .

La presente invención se refiere al uso de compuestos de la formula general (I) para evitar y/o tratar envejecimiento de la piel.

La presente invención también se extiende al uso de compuestos de la fórmula (I) para tratamiento de reacciones inflamatorias de la piel. 4.3.1 Protocolo de prueba para el ensayo1 de melanina en moléculas B16-F10 - Principio: Esto es una prueba para medir la síntesis de melanina por ensayo coloriraétrico en una línea celular de melanomas raurinos: línea B16-F10. Esta prueba permite la evaluación de la propiedad despigmentante de ingredientes activos.

Las células B16-F10 se sembraron en placas de 96-pozos en el medio DMEM suplementado con suero bovino fetal (FCS = Fetal Calf Serum)) e incubaron por 24 horas á 37 grados C, G02 al 5%. Las células después se estimularon con a-MSH (para estimular la síntesis de melanina, 1 el estímulo observado fue aproximadamente 150%) y trataron 72 horas con los ingredientes activos a probar. Cada concentración del ingrediente activo se probó al menos en triplicado.. El total de melanina seguido por melanina intracelular disuelta en amortiguador de lisis, después* se ensaya por lectura de absorbencia a 405 nm. El total' de proteínas se determinó en el lisado y los resultados se expresan en mg de melanina/mg de proteínas. El por ciento de actividad se calcula como sigue: % actividad = Promedio normalizado de control - Promedio normalizado tratado x 100 Promedio normalizado de control Un valor negativo indica una inhibición, mientras gue un valor positivo indica síntesis inducida de melanina. 4.3.2 Resultados del ensayo de melanina en células B16-F10.

Tabla 2 : Por ciento de inhibición de melanina intracelular y valores IC50. 100 - 50 20 10 IQ50 µ? µ? µ? µ? µ? Vitamina C -22 -5 -7 5 nd* Molécula 1 -71 -41 -21 -9 67 Molécula 2 nd nd -53 -11 20 Molécula 3 nd nd -50 -25 20 Molécula 4 nd -44 -6 16 53 Molécula 5 -78 -35 -13 -4 66 Molécula 6 -49 -7 nd nd 105 *nd = no-determinado Los resultados de estas pruebas (Tabla 2) muestran que la inhibición de la síntesis de melariina intracelular por las moléculas 1, 2, 3, 4, 5, 6 es mayor que la de vitamina C.

La presente invención también se refiere al uso de compuestos de la fórmula qeneral (I) para despigmeritar la piel y/o pelo corporal y/o cabello en la cabeza. 4.4.1 Protocolo de ensayo para la síntesis de ácido hialuronico j Los queratinocitos HaCaT se cultivan en medio de cultivo DMEM + FCS al 10%. Las células se tratan con los ingredientes activos a probar (Tabla 1) por 48 horas a 37 i grados C. El ácido hialurónico (HA = Hyaluronic Acid) sintetizado se ensaya en el medio de cultivo utilizando un equipo tipo ELISA (Echelon®) .

El por ciento de actividad se determina como i sigue porcentaje de variación en comparación cori el control %p/C = ( [HA] ingr . activo / [HA]control x 100) - 100 4.4.2 Resultados del ensayo de ácido hialurónico en la linea de queratinocitos humanos HaCaT Tabla 3: Por ciento de estimulo de la síntesis de ácido hialurónico.

Concentración 2 µ? 20 µ? 30 µ? 300 µ? Vitamina C * 9 19 Molécula 1 132 70 1 * *nd = no-determinado Los resultados de estas pruebas (Tabla 3) muestran que la vitamina C, utilizada a concentraciones biológicamente activas (30 y 300 µ?) no tuvo efecto en la síntesis de ácido hialurónico en queratinocitos HaCaT.

Molécula 1, en 2 y 20 µ?, estimula fuertemente la síntesis de ácido hialurónico: +132% + 70%.

La presente invención por lo tanto se refiere al uso de los compuestos de la formula general I para¡ la prevención y/o tratamiento de envejecimiento de la piel.» La invención también se extiende al uso de compuestos de la fórmula general I para mejorar y/o restaurar hidratacióí de la piel (Bissett DL. J. Cosmet. Dermatol. 2006 Dec. 5 !(4) : 309-15. Glucosamine : an ingredient with skin an dother benefits) . 4.5.1 Protocolo de ensayo para actividad de hialuronidasa : La actividad de hialuronidasa se mide por el ensayo de ácido hialurónico (HA) residual. El substrato se fija a un portador después se coloca en la presencia de una enzima y una cantidad de compuesto a probar. El HA residual, es decir el HA no-hidrolizado se ensaya utilizando un sistema de detección HA-Elisa: Enfeayo inmunosorbente ligado por enzima hialuronano (Echelon Biosciences®) . 0.5 unidad de hialuronidasa de origen bovino (BTH, Hialuronidasa de Testículos Bovinos) se pre-incuba a 37 grados C con el compuesto a probar. Esta mezcla se depositó en HA fijo a la superficie de un pozo de microplacas. La reacción enzimática se llevó a cabo a pH 7.2n a 37 grados C. El lavado fue seguido por una etapa de reconocimiento de HA residual por hialuronectma (NH) . | La cantidad de NH enlazado se midió por ELISA utilizando un anticuerpo anti-NH conjugado con fosfatasa alcalina, j El I substrato sal disodio de p-nitrofenil fosfato (pnNpp) dé la t fosfatasa permite detección espectrométrica a 4051 nm.

I (Delpech B et al., Analytical Biochemistry 149, 555 j(565 i (1985); Robert Stern et al. Analytical Biochemistry 251, i 263-269 (1997)) . Intensidad OD se correlacionó con: la i cantidad HA residual. La cantidad de HA residual éstá t enlazada directamente con la actividad enzimática. Eri la presencia de un inhibidor, entre mayor sea la cantidacjl de HA residual mayor se inhibe la muestra. Un por cient† de inhibición de hialuronidasa se expresará. ¡ Por lo tanto, las actividades enzimáticas netas • - I se calcula que representan la diferencia en actividad bruta I promedio sin enzima y la actividad bruta de la enzima con o i sin el compuesto a probar. ¡ El por ciento de inhibición enzimática relacionado al compuesto a probar se calculó como sigue: % de inhibición = (Máxima actividad enzimática neta) - Actividad enzimática neta en la presencia ¡ del compuesto a probar) / Actividad enzimática neta máxima j í en donde la actividad enzimática neta máxima representa el promedio de actividad enzimática neta1 de 0.5U. ! 4.5.2 Resultado del ensayo de actividad hialuronidasa Tabla 4 : Medición de inhibición enzimática a ¡ diferentes dosis (promedio como porcentaje) ConcenMolécula Molécula Molécula tración 1 4 5 500 µ? 122 * 250 µ? 119 * * 200 µ? * * 150 µ? * 100 µ? 113 * * 50 µ? 76 111 76 40 µ? 86 30 µ? 66 * * 25 µ? 46 * * 20 µ? 44 * * ? 10 µ? 21 72 31 5 µ? 14 * * Cont.

ConcenMolécula 6-ascorbil Ácido tración 6 palmitato ascórbico 500 µ? * * 4 250 µ? 112 * 200 µ? * 79 150 µ? * 100 µ? * 73 1 ? 50 µ 106 71 * ! 40 µ? k * * 30 µ? * * 25 µ? * 57 20 µ * * 10 µ? 34 31 * 5 µ? * * * *No-determinado Los resultados de estas pruebas (Tabla 4) muestran que la vitamina C, utilizada a estas concentraciones (100 y 500 µ?) no tiene efecto en hialuronidasa (BTH) .

Los resultados de estas pruebas muestran qu^ 6-ascorbil palmitato inhibe ventajosamente la hialuronidasa, de 10 a 250 µ?, con efecto de dosis.

Las moléculas 1, 4, 5 y 6 de 5 µ? a 500 µ? inhiben fuertemente hialuronidasa: molécula 1 tiene un efecto de dosis y su IC50 está en la región de 25 a 30 µ .

Moléculas 1, 4, 5 y 6 son equivalentes a o más activas que ascorbil palmitato que se considera es la molécula de referencia (A. Botzki et al, JBC Vol. 279 N°44, pp 45990-450007) .

Los resultados de estas pruebas muestran que la inhibición de hialuronidasa por las moléculas 1, 4, 5 y 6 es equivalente a o mayor que la de ascorbil palmitato y vitamina C. La actividad de anti-hialuronidasa de las moléculas descritas es por lo tanto mayor que la del ácido ascórbico y 6-ascorbil palmitato. ¡ La presente invención por lo tanto se refiere al uso de compuestos de la fórmula general I para1 la prevención y/o tratamiento de envejecimiento de la piel y t para mejorar y/o restaurar hidratación de la piel. 4.6.1 Protocolo para el estimulo in vi tro de la proliferación de células de papilas dérmicas.

Células de papilas dérmicas humanas (Promocell) se colocaron en cultivo y mantuvieron en un cultivo de paso temprano en el medio DMEM suplementado con FCS al 10%. Después se sembraron en una placa de 96-pozos en medio DMEM suplementado con FCS al 10% por 12 horas. El medio de cultivo se reemplazó por medio DMEM libre de suero después por DMEM suplementado con FCS al 1% y moléculas 1, 2, 3 ? y 4 a las diferentes concentraciones probadas. Después de incubación por 60 h, la proliferación celular se evalué al incorporar BrdU. 4.6.2 Resultados de prueba de proliferación estimulada in vitro de células de papilas dérmicas.

Los diagramas en la Figura 1 anexa muestran el aumento en incorporación de BrdU y la proliferación celular estimulada de las células, en la presencia de las diferentes moléculas (como un % del control). j La Molécula 1 estimula la proliferación de las células de las papilas dérmicas con efecto de dosis y mejor i actividad a la concentración de 12.5 µ? (169% de proliferación) . Similarmente, la molécula 4 induce I proliferación con estimulo de 113.9% a la concentracióh de 6.25 µ?. Las Moléculas 2 y 3 también inducen proliferación de las células pero en una proporción menor que I las moléculas 1 y 4.

La presente invención también se refiere al| uso de compuestos de la fórmula general (I) para estimular recrecimiento de cabello de la cabeza y/o pelo del cuerpo. 4.7.1 Protocolo para estimulo de crecimiento de folículo de cabello humano Biopsias de la región occipital de un cuero cabelludo humano, se obtuvieron de desechos de operación. Los folículos de cabello se aislaron por micro-disección bajo amplificación binocular. Se colocaron individualmente en cultivo siguiendo la técnica de Philpott (Philpott MP et al, J Cell Sci. 97 : 463-471, 1990). Los folículos del cabello en fase anagén se incubaron en platos de cultiyo de i 24-pozos en la presencia de medio de William suplementado con 10 pg/mL de Insulina, 10 pg/mL de Transferina, 10 ng/mL de Hidrocortisona, Glutamax I 1 mM, 100 U/mL de Penicilina, 100 pg/mL de Estreptomicina, 250 ng/mL de Anfotericina B y en la presencia de las moléculas 3 o 4 por 11 dias. ¡ El medio de incubación se renovó en forma regular. El alargamiento (en µp?) de cada folículo del cabello se midió a un cultivo por 4 y 8 días en imágenes capturadas de los folículos del cabello. 4.7.2 Resultados de la prueba para crecimiento estimulado del folículo de cabello humano Los diagramas en la Figura 2 anexa muestrari el efecto de moléculas 3 y 4 en el alargamiento de los folículos del cabello después de incubación por 4 y 8 días.

La siguiente tabla (Tabla 5) da los porcentajes de crecimiento que se obtienen por cada condición de tratamiento y los porcentajes para crecimiento de cabello estimulado que se obtiene con las moléculas 3 y en comparación con el control. ' Tabla 5: Porcentajes de crecimiento y porcentajes de estímulo de crecimiento del cabello Días de D4 D8 D4 D8 incubación %Creci- %Creci- %activi- %Activi- miento miento dad dad Sin- 44 77 0 0 tratamiento Molécula 3 52 85 25 18 Molécula 4 51 84 19 12 Las Moléculas 3 y 4 a la concentración de 15!µ?, estimulan significativamente el crecimiento de cabello con 25% y 19% de crecimiento estimulado respectivamente después de cultivo por 4 días.

La presente invención también se refiere al uso de los compuestos de la fórmula general (I) para estimular el re-crecimiento del cabello de cabeza y/o pelo del cuerpo. 4.8.1. Protocolo para evaluación de degeneración de bulbo piloso j La degeneración del folículo cuando cesa la cinética después de 11 días de cultivo, se evalú¾por observación de daño morfológico del bulbo del cabello (redondeo, deformación) . El porcentaje de apoptosis se calcula al contar el número de folículos de cabello apoptósicos respecto al número total de folículos. 4.8.2 Resultados de la evaluación de la degeneración de bulbo piloso La siguiente tabla (Tabla 6) muestra el efecto de la molécula 4 en la supervivencia de folículos del cabello después de un tiempo de incubación de 11 días.

Tabla 6: Supervivencia de folículos del cabello después de 11 días de incubación Número de bulbos apoptosicos a Dll (Número total de folículos) Número % de , apoptosis Control 9 (12) 75 Molécula 4 15 µ? 6(12) 50 La Molécula 4 permite marcado limitado de la degeneración del cabello (50% de cabello apoptósico contra 75% para el control) . Por lo tanto, la molécula 4 parece tener un efecto anti-apoptósico que permite que se mantenga la supervivencia del cabello.

La presente invención también se refiere al 1 uso de compuestos de la fórmula general (I) para estimular el re-crecimiento del cabello de la cabeza y/o pelo del cuerpo.

Claims (18)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de la fórmula general (I) : (I) en donde: · Ri es una cadena de hidrocarburos de un ácido graso insaturado Ci2 a C24 que comprende al menos 'una insaturación, ventajosamente 1 a 6, y de preferencia 1 a 4; y - R2 y R3 independientemente o en forma simultánea representan: un hidrógeno o Ci-C3 alquilo o un fenilo; y - R4 : - un átomo de hidrógeno o COR:.' , en donde Ri' es ¡una cadena hidrocarburo de un ácido grasó insaturado Ci2 a: C2 que comprende al menos una insaturación, ventajosamente 1 a 6, y de preferencia 1 a 4.

2. El compuesto de la fórmula general (I) de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R2 y R3 representan un ??-?3 alquilo.

3. El compuesto de la fórmula general (I) de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, caracterizado porque R2 y R3 representan un metilo.

4. El compuesto de la fórmula general (I) de conformidad con una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque: Ri representa la cadena hidrocarburo de un ácido graso insaturado Ci4 a Ci8 que comprende 1 a 3 insaturaciones .

5. El compuesto de la fórmula general (I) de conformidad con una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque: Ri' representa la cadena hidrocarburo de un ácido graso insaturado Ci4 a Ci9 que comprende 1 a 3 insaturaciones.

6. El compuesto de la fórmula general (I)¡ de i conformidad con una de las reivindicaciones 1 a : 5, caracterizado porque el ácido graso insaturado se elige del grupo compuesto por: ácido lauroleico (Ci2:i) , ácido miristoleico (Ci4:i) , ácido palmitoleico (Ci6:i) , ácido oleico (Ci8:i) ácido ricinoleico (Ci8:i) ; ácido gadoleico (C2o:i) ácido erucico (C22:i) , ácido -linolénico (Ci8: 3 ) ; ácido estearidónico (Ci8:4) , ácido eicosatrienóico (C2o: 3 ) ácido eicosatetraenóico (C2o:4) / ácido eicosapentaenóico (C2o:s) , ácido docosapentaenóico (C 22 : 5 ) , ácido docosahexaenóico (C22: 6 ) ácido tetracosapentaenóico (C24 : 5 ) , ácido tetracosahexaenóico (C 24 : 6 ) , ácido linoleico (Ci8:2) ácido gamma-linolénico (Ci8 : 3 ) , ácido eicosadienóico (C2o:2) ; ácido dihomo-gamma-linolénico (C2o: 3 ) , ácido araquidónico {Cz -.i) ácido docosatetraenóico (C22:2) , ácido docosapentaencico (C22-. 5 ) ácido adrénico (C22-.4 ) y ácido caléndico (Ci8; 3 ) . ;

7. El compuesto de la fórmula general de conformidad con una de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque el ácido graso insaturado se elige del grupo compuesto de: ácido oleico (Ci8:i) , ácido linol ico (Ci8:2) ácido a-linolénico (Ci8:3) y ácido ?-linolérico (Ci8:3) -

8. El compuesto de la fórmula general (I) de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque R4 representa CORi' .

9. El compuesto de la fórmula general (I) de I conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque Ri y Ri' pueden ser iguales o diferentes.

10. El compuesto de la fórmula general (I) de conformidad con una de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque R4 es un átomo de hidrógeno.

11. El compuesto de la fórmula general (I) de conformidad con una de las reivindicaciones 1 a ; 10, caracterizado porque se elige de entre: j dioctadeca-9, 12-dienoato de (9Z, 9'Z, 12Z, 12'zj-2-(2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -5-oxo2, 5-dihidrofuran-3 , 4-diilo dioctadeca-9, 12, 15-trienoato de (9Z, 9'Z, 12Z, 12' Z, 15Z, 15'Z)-2- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -5-oxo-2, 5-dihidrofuran-3 , 4-diilo j dioctadeca-6, 9, 12-trienoato de (6Z, 6'Z, 9Z, 9'Z, 12Z, 12' Z) -2- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -5-OXO-2, 5- dihidrofuran-3, -diilo dioleato de (Z) -2- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -5-oxo-2, 5-dihidrofuran-3, -diilo (9Z, 12Z) -5- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -4-hidroxi-2-oxo-2 , 5-dihidrofuran-3-il octadeca-9, 12-dienoato (9Z, 12Z, 15Z) -5- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -4-hidroxi-2-oxo-2, 5-dihidrofuran-3-il octadeca-9, 12, 15-trienoato (6Z, 9Z, 12Z) -5- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -4-hidroxi-2-oxo-2, 5-dihidrofuran-3-il octadeca-6, 9, 12-trienoato • 5- (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il) -4-hidroxi-2-oxo-2, 5-dihidrofuran-3-il oleato.

12. El compuesto de la fórmula general (I) de conformidad con una de las reivindicaciones 1 a 11, caracterizado para su uso como medicamento o como, un ingrediente cosmético activo. I

13. El compuesto de la fórmula general (I) de conformidad con una de las reivindicaciones 1 a 11, para su uso como ingrediente activo despigmentante, ingrediente activo anti-envej ecimiento, ingrediente activo hidratante, ingrediente activo anti-inflamatorio, ingrediente activo para estimular re-crecimiento del cabello de cabeza y/o pelo del cuerpo, o ingrediente activo anti-oxidante .

14. Una composición para administración tópica, caracterizada porque comprende al menos un compuesto dé la fórmula general (I) tal como se define en una de l las reivindicaciones 1 a 11.

15. La composición para administración tópica de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque comprende al menos 0.01% a 10% en peso de un compuesto de la fórmula general (I) y de preferencia de 0.1% a 5% en peso de un compuesto de la fórmula general (I) .

16. La composición para administración tópica de conformidad con una de las reivindicaciones 14 ó 15, caracterizada porque se pretende para despigmentar la piel y/o cabello de la cabeza y/o pelo de cuerpo, para el tratamiento y/o prevención de envejecimiento de la piel, para hidratar la epidermis, para estimular el re-crecimiento del cabello de cabeza y/o cuerpo, o para el tratamiento de inflamación de la piel.

17. Un método para sintetizar compuestos de la fórmula general (I) de conformidad con cualquiera de , las reivindicaciones 1 a 11, caracterizado por acoplar un ácido graso insaturado cuya función carboxilica está en forma activa, con un derivado de ácido ascórbico de la siguiente fórmula (II) : (ID

18. El método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque la reacción de acoplamiento se realiza partiendo de un ácido graso insaturado cuya función de ácido carboxilico se activa en la forma de un cloruro de ácido, en la presencia de una base y opcionalmente un auxiliar de acoplamiento.