MX2011010262A - Fenil acetato de l-ornitina y metodos para elaborar el mismo. - Google Patents

Fenil acetato de l-ornitina y metodos para elaborar el mismo.

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Keith Anderson
Jim Behling
Christine Henderson Dougan
Stephen William Watt
Peter Manini
Attilia Figini
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Ocera Therapeutics Inc
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Abstract

La presente invención se refiere a formas cristalinas de fenil acetato de L-ornitina y métodos para elaborar las mismas. La forma cristalina puede, en algunas modalidades, ser las formas I, II, III y V o mezclas de las mismas. Las formas cristalinas pueden ser formuladas para tratar sujetos con trastornos hepáticos, tales como encefalopatía hepática. Por consiguiente, algunas modalidades incluyen formulaciones y métodos para administrar fenil acetato de L-ornitina.

Description

FENIL ACETATO DE L-ORNITINA Y METODOS PARA ELABORAR EL MISMO Campo de la Invención La presente solicitud se refiere a los campos de química farmacéutica, bioquímica y medicina. En particular, se refiere a sales de fenil acetato de L-ornitina y métodos para elaborar y usar las mismas.
Antecedentes de la Invención La hiperamonemia es una marca de la enfermedad hepática y se caracteriza por un exceso de amoníaco en la corriente sanguínea. La encefalopatía hepática es una consecuencia clínica primaria de hiperamonemia progresiva y es un síndrome neuropsiquiátrico complejo, el cual puede complicar la falla hepática crónica o aguda. Se caracteriza por cambios en el estado mental que incluyen un amplio intervalo de síntomas neuropsiquiátricos que varían de signos menores de función cerebral alterada que manifiesta síntomas psiquiátricos y/o neurológicos , aún coma profundo. La acumulación de amoníaco no metabolizado se ha considerado como el factor principal involucrado en la patogénesis de encefalopatía hepática, pero mecanismos adicionales pueden estar asociados.
El monoclorhidrato de L-ornitina y otras sales de L-ornitina están disponibles para su uso en el tratamiento de hiperamonemia y encefalopatía hepática. Por ejemplo, la REF.: 224171 Publicación Estadounidense No. 2008/0119554, la cual está con ello incorporada por referencia en su totalidad, describe composiciones de L-ornitina y fenil acetato para el tratamiento de encefalopatía hepática. La L-ornitina se ha preparado por métodos de conversión enzimática. Por ejemplo, las Patentes Estadounidenses Nos. 5,405,761 y 5,591,613, las cuales están con ello incorporadas por referencia en su totalidad, describen conversión enzimática de arginina para formar sales de L-ornitina. El fenil acetato de sodio está comercialmente disponible, y también disponible como una solución inyectable para el tratamiento de hiperamonemia aguda. La solución inyectable es comercializada como AMMONUL.
Aunque formas · de sal pueden exhibir propiedades de degradación mejoradas, ciertas sales, particularmente sales de sodio o cloro, pueden ser indeseables cuando se tratan pacientes que tienen enfermedades asociadas con la enfermedad hepática, tal como encefalopatía hepática. Por ejemplo, una alta absorción de sodio puede ser peligrosa para pacientes cirróticos propensos a ascitos, sobrecarga de fluido y desequilibrio electrolítico. De manera similar, ciertas sales son difíciles de administrar intravenosamente debido a una presión osmótica incrementada, es decir, la solución es hipertónica. Altas concentraciones de exceso de sal pueden requerir diluir grandes volúmenes de solución para administración intravenosa lo cual, a su vez, conduce a sobrecarga de fluido excesiva. Por consiguiente, existe una necesidad para la preparación de sales de fenil acetato y L-ornitina las cuales sean favorables para el tratamiento de encefalopatía hepática u otras condiciones en donde la sobrecarga de fluido y el desequilibrio electrolítico son prevalentes .
Breve Descripción de la Invención Algunas modalidades descritas en la presente incluyen una composición que comprende una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina.
En algunas modalidades, la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende al menos un pico característico, en donde el pico característico se selecciona del grupo que consiste de aproximadamente 6.0°, 13.9°, 14.8°, 17.1°, 17.8° y 24.1° 2T . En algunas modalidades, la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende al menos tres picos característicos, en donde los picos característicos se seleccionan del grupo que consiste de aproximadamente 6.0°, 13.9°, 14.8°, 17.1°, 17.8o ' y 24.1° 2T . En algunas modalidades, la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende picos característicos hasta aproximadamente 6.0°, 13.9°, 14.8°, 17.1°, 17.8° y 24.1° 2T .
En algunas modalidades, la forma cristalina tiene un punto de fusión de aproximadamente 202° C. En algunas modalidades, la forma cristalina exhibe un análisis cristalográfico de rayos-X de cristal único con parámetros de cristal aproximadamente igual a los siguientes: dimensiones de unidad de célula: a=6.594(2) Á, b=6.5448(18) Á, c=31.632(8) Á, a=90°, ß=91.12 (3) 0 , ?=90°; Sistema de cristal: Monoclínico; y Grupo de espacio: ?2?. En algunas modalidades, la forma cristalina es representada por la fórmula [C5H13N202] [C8H702] .
Algunas modalidades tienen la forma cristalina que exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende al menos un pico característico, en donde el pico característico se selecciona del grupo que consiste de aproximadamente 4.9°, 13.2°, 17.4°, 20.8° y 24.4° 2T. En algunas modalidades, la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende al menos tres picos característicos, en donde los picos característicos se seleccionan del grupo que consiste de aproximadamente 4.9°, 13.2°, 17.4°, 20.8° y 24.4° 2T . En algunas modalidades, la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende picos característicos hasta aproximadamente 4.9°, 13.2°, 17.4°, 20.8° y 24.4° 2T.
Algunas modalidades tienen la forma cristalina que comprende moléculas de agua y/o etanol . En algunas modalidades, la forma cristalina comprende aproximadamente 11% en peso de las moléculas como se determina por análisis termogravimétricos . En algunas modalidades, la forma cristalina se caracteriza por calorimetría de exploración diferencial ya que comprende un endoterma a aproximadamente 35° C. En algunas modalidades, la cristalina tiene un punto de fusión hasta aproximadamente 203° C.
Algunas modalidades tienen la forma cristalina que exhibe un análisis cristalográfico de rayos-X de cristal único con parámetros de cristal aproximadamente igual a los siguientes: dimensiones de unidad de célula: a=5.3652(4) Á, b=7.7136(6) Á, c=20.9602 (18) Á, a=90°, ß=9 .986 ( 6 ) ° , ?=90°; Sistema de cristal: Monoclínico ,· y Grupo de Espacio: ?2?. En algunas modalidades, la forma cristalina es representada por la fórmula [C5H13 202] [C8H702] EtOH-H20.
Algunas modalidades tienen la forma cristalina que exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende al menos un pico característico, en donde el pico característico se selecciona del grupo que consiste de aproximadamente 5.8°, 14.1°, 18.6°, 19.4°, 22.3° y 24.8° 2T. En algunas modalidades, la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende al menos tres picos característicos, en donde los picos característicos se seleccionan del grupo que consiste de aproximadamente 5.8°, 14.1°, 18.6°, 19.4°, 22.3° y 24.8° 2T . En algunas modalidades, la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende picos característicos hasta aproximadamente 5.8o, 14.1°, 18.6°, 19.4o, 22.3° y 24.8° 2T.
En algunas modalidades, la forma cristalina se caracteriza por calorimetría de exploración diferencial ya que comprende un endoterma a aproximadamente 40° C. En algunas modalidades, la forma cristalina comprende un punto de fusión hasta aproximadamente 203° C.
En algunas modalidades, la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende al menos un pico característico, en donde el pico característico se selecciona del grupo que consiste de aproximadamente 13.7°, 17.4°, 19.8°, 20.6° y 23.7° 2T . En algunas modalidades, la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos -X que comprende al menos tres picos característicos, en donde el pico característico se selecciona del grupo que consiste de aproximadamente 13.7°, 17.4°, 19.8°, 20.6° y 23.7° 2T . En algunas modalidades, la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende picos característicos hasta aproximadamente 13.7°, 17.4°, 19.8°, 20.6° y 23.7° 2T.
En algunas modalidades, la forma cristalina se caracteriza por calorimetría de exploración diferencial ya que comprende un endoterma a aproximadamente 174° C. En algunas modalidades, la forma cristalina tiene un punto de fusión de aproximadamente 196° C. En algunas modalidades, la forma cristalina comprende un portador farmacéuticamente aceptable .
Algunas modalidades descritas en la presente tienen una composición que comprende: al menos aproximadamente 50% en peso de una forma cristalina de sal de fenil acetato de L-ornitina y al menos aproximadamente 0.01% en peso de ácido benzoico o una sal del mismo.
En algunas modalidades, la composición comprende al menos aproximadamente 0.10% en peso de ácido benzoico o una sal del mismo. En algunas modalidades, la composición comprende no más de 5% en peso de ácido benzoico o una sal del mismo. En algunas modalidades, la composición comprende no más de 1% en peso de ácido benzoico o una sal del mismo.
En algunas modalidades, la composición además comprende al menos 10 ppm de plata. En algunas modalidades, comprende al menos 20 ppm de plata. En algunas modalidades, la composición además comprende al menos 25 ppm de plata. En algunas modalidades, comprende no más de 600 ppm de plata. En algunas modalidades, la composición comprende no más de 100,. ppm de plata. En algunas modalidades, la composición comprende no más de 65 ppm de plata.
En algunas modalidades, aproximadamente 50 mg/mL de la composición en agua es isotónica con fluidos corporales. En algunas modalidades, la solución isotónica tiene una osmolaridad en el intervalo de aproximadamente 280 hasta aproximadamente 330 mOsm/kg.
En algunas modalidades, la composición tiene una densidad en el intervalo de aproximadamente 1.1 hasta aproximadamente 1.3 kg/m3.
Algunas modalidades descritas en la présente incluyen un proceso para elaborar una sal de fenil acetato de L-ornitina que comprende: intermezclar una sal de L-ornitina, una sal de benzoato y un solvente para formar una solución intermediaria; intermezclar fenil acetato con la solución intermediaria; y aislar una composición que comprende al menos 70% de fenil acetato de L-ornitina cristalina en peso.
En algunas modalidades, el proceso comprende remover al menos una porción de una sal de la solución intermediaria antes de intermezclar el fenil acetato, en donde la sal no es una sal de L-ornitina. En algunas modalidades, el proceso comprende agregar ácido clorhídrico antes de remover al menos una porción de la sal .
En algunas modalidades, intermezclar la L-ornitina, la sal de benzoato y el solvente comprende: dispersar la sal de L-ornitina en agua para formar una primera solución; dispersar la sal de benzoato en DMSO para formar una segunda solución; e intermezclar la primera solución y la segunda solución para formar la solución.
En algunas modalidades, la composición comprende al menos aproximadamente 0.10% en peso de sal de benzoato. En algunas modalidades, la composición comprende no más de 5% en peso de sal de benzoato. En algunas modalidades, la composición comprende no más de 1% en peso de sal de benzoato.
En algunas modalidades, la sal de L-ornitina es clorhidrato de L-ornitina. En algunas modalidades, la sal de benzoato es benzoato de plata.
En algunas modalidades, la composición comprende al menos 10 ppm de plata. En algunas modalidades, la composición comprende al menos 20 ppm de plata. En algunas modalidades, la composición comprende al menos 25 ppm de plata. En algunas modalidades, la composición comprende no más de 600 ppm de plata. En algunas modalidades, la composición comprende no más de 100 ppm de plata. En algunas modalidades, la composición comprende no más de 65 ppm de plata.
En algunas modalidades, el fenil acetato es en una sal de metal álcali. En algunas modalidades, la sal de metal álcali es fenil acetato de sodio.
En algunas modalidades, la composición comprende no más de 100 ppm de sodio. En algunas modalidades, la composición comprende no más de 20 ppm de sodio.
En algunas modalidades, la L-ornitina está en una sal de haluro. En algunas modalidades, la sal de haluro es clorhidrato de L-ornitina.
En algunas modalidades, la composición comprende no más de 0.1% en peso de cloruro. En algunas modalidades, la composición comprende no más de 0.01% en peso de cloruro.
Algunas modalidades descritas en la presente incluyen una composición obtenida por cualquiera de los procesos descritos en la presente.
Algunas modalidades descritas en la presente incluyen un proceso para elaborar una sal de fenil acetato de L-ornitina que comprende: incrementar el valor de pH de una solución que comprende una sal de L-ornitina al menos hasta que una sal intermediaria precipita, en donde la sal intermediaria no es una sal de L-ornitina; aislar la sal intermediaria de la solución; intermezclar ácido fenil acético con la solución; y aislar la sal de fenil acetato de L-ornitina de la solución.
En algunas modalidades, el valor de pH se incrementa para al menos 8.0. En algunas modalidades, el valor de pH se incrementa para al menos 9.0. En algunas modalidades, incrementar el valor de pH comprende agregar un modificador de pH seleccionado del grupo que consiste de hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, metóxido de sodio, t-butóxido de potasio, carbonato de sodio, carbonato de calcio, dibutilamina, triptamina, hidruro de sodio, hidruro de calcio, butillitio, bromuro de etilmagnesio o combinaciones de los mismos.
Algunas modalidades descritas en la presente incluyen un método para tratar o aliviar hiperamonemia en un sujeto administrando una cantidad terapéuticamente efectiva de una forma cristalina de sal de fenil acetato de L-ornitina.
En algunas modalidades, la forma cristalina es administrada oralmente.
En algunas modalidades, la forma cristalina se selecciona del grupo que consiste de Forma I, Forma II, Forma III, Forma V, en donde: la Forma I exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que tiene picos característicos hasta aproximadamente 4.9°, 13.2°, 17.4°, 20.8° y 24.4° 2T; la Forma II exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que tiene picos característicos hasta aproximadamente 6.0°, 13.9°, 14.8°, 17.1°, 17.8° y 24.1° 2T; la Forma III exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que tiene picos característicos hasta aproximadamente 5.8°, 14.1°, 18.6°, 19.4°, 22.3° y 24.8° 2T; y la Forma V exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que tiene picos característicos hasta aproximadamente 13.7°, 17.4°, 19.8°, 20.6° y 23.7° 2T.
En algunas modalidades, la forma cristalina es la Forma I. En algunas modalidades, la forma cristalina es la Forma II. En algunas modalidades, la forma cristalina es la Forma III. En algunas modalidades, la forma cristalina es la Forma V.
En algunas modalidades, al menos dos formas cristalinas seleccionadas del grupo que consiste de Forma I, Forma II, Forma III y Forma V, son administradas. En algunas modalidades, al menos dos formas cristalinas son administradas a aproximadamente el mismo tiempo.
En algunas modalidades, la forma cristalina se administra de 1 a 3 veces diariamente. En algunas modalidades, la cantidad terapéuticamente efectiva está en el intervalo de aproximadamente 500 mg hasta aproximadamente 50 g- En algunas modalidades, el sujeto se identifica por tener encefalopatía hepática. En algunas modalidades, el sujeto se identifica por tener hiperamonemia .
Algunas modalidades descritas en la presente incluyen un proceso para elaborar una sal de fenil acetato de L-ornitina que comprende: intermezclar una sal de L-ornitina, fenil acetato de plata y un solvente para formar una solución, en donde la sal de L-ornitina es una sal de metal álcali; y aislar fenil acetato de Lrornitina de la solución.
Algunas modalidades descritas en la presente incluyen un método para tratar o aliviar hiperamonemia que comprende administrar intravenosamente una cantidad terapéuticamente efectiva de una solución que comprende fenil acetato de L-ornitina, en donde la cantidad terapéuticamente efectiva comprende no más de 500 mL de la solución.
En algunas modalidades, la solución comprende al menos aproximadamente 25 mg/mL de fenil acetato de L-ornitina. En algunas modalidades, la solución comprende al menos aproximadamente 40 mg/mL de fenil acetato de L-ornitina. En algunas modalidades, la solución comprende no más de 300 mg/mL. En algunas modalidades, la solución es isotónica con fluido corporal .
Algunas modalidades descritas en la presente incluyen un método para comprimir fenil acetato de L-ornitina, el método comprende aplicar presión a una forma metastable de fenil acetato de L-ornitina para inducir un cambio de fase .
En algunas modalidades, la forma metastable es amorfa. En algunas modalidades, la forma metastable exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende al menos un pico característico, en donde el pico característico se selecciona del grupo que consiste de aproximadamente 4.9°, 13.2°, 20.8° y 24.4° 2T .
En algunas modalidades, la presión se aplica por un tiempo predeterminado. En algunas modalidades, el tiempo predeterminado es aproximadamente 1 segundo o menos . En algunas modalidades, la presión es al menos aproximadamente 500 psi (3447.3 Kpa) .
En algunas modalidades, el cambio de fase proporciona una composición que tiene una densidad en el intervalo de aproximadamente 1.1 hasta aproximadamente 1.3 kg/m3 después de aplicar la presión.
En algunas modalidades, el cambio de fase proporciona una composición que exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos -X que comprende al menos un pico característico, en donde el pico característico se selecciona del grupo que consiste de aproximadamente 6.0°, 13.9°, 14.8°, 17.1°, 17.8° y 24.1° 2T.
Algunas modalidades descritas en la presente incluyen una composición obtenida aplicando presión a una forma metastable de fenil acetato de L-ornitina para inducir un cambio de fase.
Breve Descripción de las Figuras La FIGURA 1 es un patrón de difracción en polvo de rayos -X de la Forma I.
La FIGURA 2 muestra resultados de calorimetría de exploración diferencial para la Forma I.
La FIGURA 3 muestra análisis térmicos diferenciales/gravimétricos termogravimétricos de la Forma I.
La FIGURA 4 muestra el espectro de resonancia magnética nuclear 1H obtenido de una muestra de la Forma I.
La FIGURA 5 muestra resultados de adsorción de vapor dinámico para la Forma I .
La FIGURA 6 es un patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma II.
La FIGURA 7 muestra resultados de calorimetría de exploración diferencial para la Forma II.
La FIGURA 8 muestra análisis térmicos diferenciales/gravimétricos termogravimétricos de la Forma II.
La FIGURA 9 muestra el espectro de resonancia magnética nuclear 1H obtenido de una muestra de la Forma II.
La FIGURA 10 muestra resultados de adsorción de vapor dinámico para la Forma II.
La FIGURA 11 es un patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma III.
La FIGURA 12 muestra resultados de calorimetría de exploración diferencial para la Forma III.
La FIGURA 13 muestra análisis térmicos diferenciales/gravimétricos termogravimétricos de la Forma III .
La FIGURA 14 muestra el espectro de resonancia magnética nuclear 1H obtenido de una muestra de la Forma III.
La FIGURA 15 muestra resultados de adsorción de vapor dinámico para la Forma III.
La FIGURA 16 es un patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma V.
La FIGURA 17 muestra resultados de calorimetría de exploración diferencial para la Forma V.
La FIGURA 18 muestra análisis térmicos diferenciales/gravimétricos termogravimétricos de la Forma V.
La FIGURA 19 muestra el espectro de resonancia magnética nuclear 1H obtenido de una muestra de la Forma V.
La FIGURA 20 muestra resultados de adsorción de vapor dinámico para la Forma V.
La FIGURA 21 muestra el espectro de resonancia magnética nuclear 1H obtenido de una muestra de benzoato de L-ornitina .
La FIGURA 22 muestra el espectro de resonancia magnética nuclear ""? obtenido de una muestra de fenil acetato de L-ornitina.
Descripción Detallada de la Invención Descritos en la presente están métodos para elaborar sales de fenil acetato de L-ornitina, y en particular, formas cristalinas de la sal. Estos métodos permiten la producción a gran escala de formas farmacéuticamente aceptables de fenil acetato de L-ornitina usando procesos económicos. Sin embargo, las formas cristalinas de fenil acetato de L-ornitina, que incluyen Forma I, II, III y V también se describen. Las sales de fenil acetato de L-ornitina permiten administración intravenosa con carga de sodio concomitante insignificante, y por lo tanto minimizan la cantidad de fluido i.v. que se requiere.
La presente solicitud se refiere a nuevas formas cristalinas de sales de fenil acetato de L-ornitina, así como también a métodos para elaborar y usar las sales de fenil acetato de L-ornitina. La sal ventajosamente exhibe estabilidad a largo plazo sin cantidades significantes de sodio o cloruro. Como un resultado, el fenil acetato de L-ornitina se espera proporcione un perfil de seguridad mejorado comparado con otras sales de L-ornitina y fenil acetato. También, el fenil acetato de L-ornitina exhibe tonicidad inferior comparado con otras sales, y por lo tanto puede ser administrado intravenosamente a concentraciones superiores. Por consiguiente, el fenil acetato de L-ornitina se espera proporcione mejoramientos clínicos significantes para el tratamiento de encefalopatía hepática.
La presente solicitud también se refiere a varios polimorfos de fenil acetato de L-ornitina. La ocurrencia de diferentes formas de cristal (polimorfismo) es una propiedad de algunas moléculas y complejos moleculares. Complejos de sal, tales como fenil acetato de L-ornitina, pueden dar origen a una variedad de sólidos que tienen distintas propiedades físicas como punto de fusión, patrón de difracción de rayos -X, huella de impresión de absorción infrarroja y espectro de N R. Las diferencias en las propiedades físicas de polimorfos resultan de la orientación e interacciones intermoleculares de moléculas adyacentes (complejos) en el sólido de volumen. Por consiguiente, polimorfos pueden ser distintos sólidos que portan el mismo ingrediente farmacéutico activo aún teniendo distintas propiedades fisicoquímicas ventajosas y/o desventajosas comparadas con otras formas en la familia polimorfa.
Método para Elaborar Sal de Fenil Acetato de L-Ornitina Algunas modalidades descritas en la presente incluyen un método para elaborar una sal de fenil acetato de L-ornitina. El fenil acetato de L-ornitina puede ser producido, por ejemplo, a través de una sal intermediaria, tal como benzoato de L-ornitina. Como se muestra en el Esquema de reacción 1, una sal de L-ornitina de Fórmula I se puede hacer reaccionar con una sal de benzoato de Fórmula II para obtener el intermediario de benzoato de L-ornitina.
Esquema de Reacción I (III) Varias sales de L-ornitina se pueden usar en el compuesto de Fórmula I, y por lo tanto X en la Fórmula I puede ser cualquier ión capaz de formar una sal con L-ornitina distinta de ácido benzoico o ácido fenil acético. X puede ser un anión monoatómico, tal como, pero no limitado a, un haluro (por ejemplo, fluoruro, cloruro, bromuro y yoduro) . X también puede ser un anión poliatómico, tal como, pero no limitado a, acetato, aspartato, formiato, oxalato, bicarbonato, carbonato, bitrato, sulfato, nitrato, isonicotinato, salicilato, citrato, tartrato, pantotenato, bitartrato, ascorbato, succinato, maleato, gentisinato, fiimarato, gluconato, glucaronato, sacarato, formiato, glutamato, metansulfonato, etansulfonato, bencensulfonato, p-toluensulfonato, pamoato (es decir, 1 , 1 ' -metilen-bis- (2-hidroxi-3 -naftoato) , fosfato y similares. En algunas modalidades, X es un anión monovalente. En algunas modalidades, X es cloruro.
De manera similar, la sal de benzoato de Fórmula II no está particularmente limitada, y por lo tanto Y en la Fórmula II puede ser cualquier ión apropiado capaz de formar una sal con ácido benzoico. En algunas modalidades, Y puede ser un catión monoatómico, tal como un ión de metal álcali (por ejemplo, Li+, Na+, y K+) y otros iones monovalentes (por ejemplo, Ag+) . Y puede ser también un catión poliatómico, tal como amonio, L-arginina, dietilamina, colina, etanolamina, lH-imidazol, trolamina, y similares. En algunas modalidades, Y es un ión inorgánico. En algunas modalidades, Y es plata.
Muchas otras sales posibles de L-ornitina y ácido benzoico se pueden usar para los compuestos de Fórmulas I y II, respectivamente, y pueden ser fácilmente preparados por aquellos expertos en la técnica. Véase, por ejemplo, Bighley L.D., et al., "Salt forms of drugs and absorption, " In: Swarbrick J. , Horlan J.C., eds. Encyclopedia of pharmaceutical technology, Vol. 12. New York: Marcel Dekker, Inc. pp . 452-499, la cual se incorpora con ello por referencia en su totalidad.
El intermediario de benzoato de L-ornitina (es decir, Formula III) puede ser preparado intermezciando soluciones que incluyen compuestos de Fórmulas I y II. Como un ejemplo, los compuestos de Fórmulas I y II pueden ser disueltos separadamente en agua y dimetilsulfóxido (DMSO) , respectivamente. Las dos soluciones pueden entonces ser intermezcladas de manera que la L-ornitina y ácido benzoico reaccionan para formar la sal de Fórmula III. Alternativamente, los dos compuestos de sal pueden ser directamente disueltos en una solución única. En algunas modalidades, L-ornitina y ácido benzoico son disueltos en solventes separados, y subsecuentemente intermezclados . En algunas modalidades, L-ornitina es disuelta en una solución acuosa, el ácido benzoico es disuelto en un solvente orgánico, y las soluciones de L-ornitina y ácido benzoico son subsecuentemente intermezcladas .
Ejemplos no limitantes de solventes los cuales se pueden usar cuando se intermezclan las sales de L-ornitina y benzoato incluyen acetonitrilo, dimetilsulfóxido (DMSO) , ciclohexano, etanol, acetona, ácido acético, 1-propanol, dimetilcarbonato, N-metil-2-pirrolidona (NMP) , acetato de etilo (EtOAc) , tolueno, alcohol isopropílico (IPA) , diisopropil éter, nitrometano, agua, 1,4-dioxano, tdietil éter, etilen glicol, acetato de metilo (MeOAc) , metanol, 2-butanol, eumeno, etil formiato, acetato de isobutilo, 3-metil-l-butanol, anisol, y combinaciones de los mismos. En algunas modalidades, la solución de benzoato de L-ornitina incluye agua. En algunas modalidades, la solución de benzoato de L-ornitina incluye DMSO.
Después de intermezclar sales de benzoato y L-ornitina, los contraiones X e Y pueden formar un precipitado que puede ser removido de la solución intermezclada usando métodos conocidos, tales como filtración, centrifugación y similares. En algunas modalidades, X es cloruro, Y es plata, y la reacción produce un precipitado que tiene AgCl . Aunque el Esquema de reacción 1 muestra los compuestos de Fórmulas I y II como sales, también está dentro del alcance de la presente solicitud premezclar la base libre de L-ornitina y ácido benzoico para formar el intermediario de benzoato de L-ornitina. Consecuentemente, formar y aislar el precipitado es opcional .
La cantidad relativa de sales de benzoato y L-ornitina que son intermezcladas no está limitada; sin embargo la relación molar de L-ornitina a ácido benzoico puede opcionalmente estar en el intervalo de aproximadamente 10:90 y 90:10. En algunas modalidades, la relación molar de benzoato de L-ornitina puede estar en el intervalo de aproximadamente 30:70 y 30:70. En algunas modalidades, la relación molar de L-ornitina a benzoato puede estar en el intervalo de aproximadamente 40:60 y 60:40. En algunas modalidades, la relación molar de L-ornitina a benzoato es aproximadamente 1:1.
En modalidades donde X e Y son ambos iones inorgánicos (por ejemplo, X e Y son cloruro y plata, respectivamente) , cantidades adicionales de sal que contiene-X pueden ser agregadas para fomentar además la precipitación del contraión Y. Por ejemplo, si X es cloruro y Y es plata, la relación molar de clorhidrato de L-ornitina a benzoato de plata puede ser mayor de 1:1 de manera que un exceso de cloruro está presente con relación a la plata. Por consiguiente, en algunas modalidades, la relación molar de L-ornitina a ácido benzoico es mayor de aproximadamente 1:1. Sin embargo, la sal de cloruro adicional no se requiere para ser suministrada de una sal de L-ornitina (por ejemplo, clorhidrato de L-ornitina) . Por ejemplo, soluciones dilutas de ácido clorhídrico pueden ser agregadas a la solución para remover además plata. Aunque no está particularmente limitado cuanta sal que contiene-X adicional se agrega, es preferiblemente agregada antes de que el AgCl se aisle inicialmente .
Como se muestra en el Esquema de reacción 2, el benzoato de L-ornitina se puede hacer reaccionar con una sal de fenil acetato de Fórmula IV para formar el fenil acetato de L-ornitina. Por ejemplo, fenil acetato de sodio puede ser intermezclado con una solución de benzoato de L-ornitina para formar el fenil acetato de L-ornitina. Varias sales de fenil acetato se pueden usar, y por lo tanto Z en la Fórmula IV puede ser cualquier catión capaz de formar una sal con fenil acetato distinta de ácido benzoico o L-ornitina. En algunas modalidades, Z puede ser un catión monoatómico, tal como un ión de metal álcali (por ejemplo, Li+, Na+, y K+) y otros iones monovalentes (por ejemplo, Ag+) . Z puede ser también un catión poliatómico, tal como amonio, L-arginina, dietilamina, colina, etanolamina, lH-imidazol, trolamina, y similares. En algunas modalidades, Z es un ión inorgánico. En algunas modalidades, Z es sodio.
La cantidad relativa de sales de fenil acetato y L-ornitina que son intermezcladas también no está limitada; sin embargo la relación molar de L-ornitina a fenil acetato puede opcionalmente estar en el intervalo de aproximadamente 10:90 y 90:10. En algunas modalidades, la relación molar de L-ornitina a fenil acetato puede estar en el intervalo de aproximadamente 30:70 y 30:70. En algunas modalidades, la relación molar de L-ornitina a fenil acetato puede estar en el intervalo de aproximadamente 40:60 y 60:40. En algunas modalidades, la relación molar de L-ornitina a ácido benzoico es aproximadamente 1:1.
Esquema de Reacción 2 (IV) El fenil acetato de L-ornitina de Fórmula V puede entonces ser aislado de la solución usando técnicas conocidas. Por ejemplo, evaporando cualquier solvente hasta que el fenil acetato de L-ornitina cristaliza, o alternativamente agregando un anti-solvente miscible en la solución de fenil acetato de L-ornitina hasta que el fenil acetato de L-ornitina precipita de la solución. Otros medios posibles para aislar el fenil acetato de L-ornitiná son ajustar la temperatura de la solución (por ejemplo, reducir la temperatura) hasta que el fenil acetato de L-ornitina precipita. Como se discutirá en detalle adicional en una sección posterior, el método de aislar el fenil acetato de L-ornitina afecta la forma cristalina que se obtiene.
El fenil acetato de L-ornitina aislado puede ser sometido a varios procesamientos adicionales, tales como secado y similares. En algunas modalidades, el fenil acetato de L-ornitina puede ser subsecuentemente intermezclado con una solución diluta de HCl para precipitar la plata residual. El fenil acetato de L-ornitina puede nuevamente ser aislado de la solución usando métodos similares descritos anteriormente.
Como podría apreciarse por una persona ordinaria, guiada por las enseñanzas de la presente solicitud, el fenil acetato de L-ornitina puede ser de manera similar preparado usando una sal intermediaria distinta de benzoato de L-ornitina. De este modo, por ejemplo, L-ornitina, o una sal del mismo (por ejemplo, clorhidrato de L-ornitina) , pueden ser intermezclados con una solución que tiene ácido acético. El acetato de L-ornitina puede entonces ser intermezclado con ácido fenil acético, o una sal del mismo (por ejemplo, fenil acetato de sodio) , para obtener el fenil acetato de L-ornitina. El Esquema de reacción 4 ilustra un proceso ejemplar para formar el fenil acetato de L-ornitina usando acetato de L-ornitina como una sal intermediaria. En algunas modalidades, la sal intermediaria puede ser una sal farmacéuticamente aceptable de L-ornitina. Por ejemplo, la sal intermediaria de L-ornitina puede ser un acetato, aspartato, formiato, oxalato, bicarbonato, carbonato, bitrato, sulfato, nitrato, isonicotinato, salicilato, citrato, tartrato, pantotenato, bitartrato, ascorbato, succinato, maleato, gentisinato, fumarato, gluconato, glucaronato, sacarato, formiato, benzoato, glutamato, metansulfonato , etansulfonato, bencensulfonato, p-toluensulfonato, pamoato (es decir, 1, 1' -metilen-bis - (2-hidroxi- 3 -naftoato) o fosfato. El ácido libre del intermediario es preferiblemente un ácido más débil con relación al ácido fenil acético. En algunas modalidades, el intermediario es una sal de L-ornitina con un componente anión que exhibe un valor pKa que es superior que el valor de pKa del ácido fenil acético. Como un ejemplo, para acetato de L-ornitina, ácido acético y ácido fenil acético exhiben valores de pKa de aproximadamente 4.76 y 4.28, respectivamente .
Esquema de Reacción 3 o ???.?,? OH2 A H20 NH¾ HCI OH H,0 El fenil acetato de L-ornitina también puede ser preparado, en algunas modalidades, sin formar una sal intermediaria, tal como benzoato de L-ornitina. El Esquema de reacción 4 ilustra un proceso ejemplar para preparar el fenil acetato de L-ornitina sin una sal intermediaria. Un modificador de pH puede ser agregado a una solución de sal de L-ornitina (por ejemplo, como se ilustra en el Esquema de reacción 4 por el compuesto de Fórmula I) hasta que una sal precipita de la solución, en donde la sal no es una sal de L-ornitina. Como un ejemplo, metóxido de sodio (NaOMe) puede ser agregado a una solución de clorhidrato de L-ornitina hasta que el cloruro de sodio precipita de la solución para dejar una base libre de L-ornitina. El precipitado puede ser opcionalmente aislado de la solución usando técnicas conocidas, tales como filtración, centrifugación y similares. La base libre de L-ornitina (por ejemplo, como se ilustra en el Esquema de reacción 4 por el compuesto de Fórmula I-a) puede ser intermezclada con ácido fenil acético, o una sal del mismo (por ejemplo, como se ilustra en el Esquema de reacción 4 por el compuesto de Fórmula IV) , para obtener el fenil acetato de L-ornitina. El fenil acetato de L-ornitina de Fórmula V puede entonces ser aislado como se describe previamente .
Esquema de reacción 4 Un modificador de pH puede incluir un compuesto básico, o un precursor anhidro del mismo, y/o una base químicamente protegida. Ejemplos no limitantes de modificadores de pH incluyen hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, metóxido de sodio, t-butóxido de potasio, carbonato de sodio, carbonato de calcio, dibutilamina, triptamina, hidruro de sodio, hidruro de calcio, butillitio, bromuro de etilmagnesio y combinaciones de los mismos. También, la cantidad de modificador de pH a ser agregada no está particularmente limitada; sin embargo la relación molar de L-ornitina a modificador de pH puede estar opcionalmente en el intervalo de aproximadamente 10:90 y 90:10. En algunas modalidades, la relación molar de L-ornitina a modificador de pH puede estar en el intervalo de aproximadamente 30:70 y 30:70. En algunas modalidades, la relación molar de L-ornitina a modificador de pH puede estar en el intervalo de aproximadamente 40:60 y 60:40. En algunas modalidades, la relación molar de L-ornitina a modificador de pH es aproximadamente 1: 1. El modificador de pH puede, en algunas modalidades ser agregado para ajustar el valor de pH a al menos aproximadamente 8.0; al menos aproximadamente 9.0; o al menos aproximadamente 9.5.
Otro proceso para formar el fenil acetato de L-ornitina, en algunas modalidades, incluye hacer reaccionar una sal de metal álcali de L-ornitina con una sal de fenil acetato. Como un ejemplo, clorhidrato de L-ornitina puede ser intermezclado con fenil acetato de plata y un solvente. AgCl puede entonces precipitar y es opcionalmente aislado de la solución. El fenil acetato de L-ornitina restante también puede ser aislado usando métodos conocidos. Este proceso puede ser completado usando en generar los mismos procedimientos y condiciones resumidas anteriormente. Por ejemplo, las cantidades molares relativas de L-ornitina a fenil acetato pueden ser 10:90 a 90:10; 30:70 a 70:30; 40:60 a 60:40; o aproximadamente 1:1. También, el fenil acetato de L-ornitina puede ser aislado evaporando el solvente, agregando un anti- solvente, y/o reduciendo la temperatura.
Composiciones de fenil acetato de L-ornitina También descritas en la presente están composiciones de fenil acetato de L-ornitina. Las composiciones de la presente solicitud ventajosamente tienen cantidades inferiores de sales inorgánicas, particularmente sales de metal álcali y/o sales de haluro, y por lo tanto son particularmente adecuadas para administración oral y/o intravenosa a pacientes con encefalopatía hepática. Mientras tanto, estas composiciones pueden exhibir perfiles de estabilidad similares comparados con otras sales (por ejemplo, mezclas de clorhidrato de L-ornitina y fenil acetato de sodio) . Las composiciones pueden, en algunas modalidades, obtenerse por los procesos descritos en la presente solicitud. Por ejemplo, cualquiera de los procesos descritos usando benzoato de L-ornitina como un intermediario puede proporcionar las composiciones de la presente solicitud.
Las composiciones, en algunas modalidades, pueden incluir una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina (por ejemplo, Formas I, II, III y/o V descritas en la presente) . En algunas modalidades, la composición puede incluir al menos aproximadamente 20% en peso de una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina (preferiblemente al menos aproximadamente 50% en peso, y más preferiblemente al menos aproximadamente 80% en peso) . En algunas modalidades, la composición consiste esencialmente de una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina. En algunas modalidades, la composición incluye una mezcla de al menos dos (por ejemplo, dos, tres o cuatro formas) de las Formas I, II, III, y V.
Las composiciones, en algunas modalidades, incluyen la Forma II. Por ejemplo, las composiciones pueden incluir al menos aproximadamente 20%; al menos aproximadamente 50%; al menos aproximadamente 90%; al menos aproximadamente 95%; o al menos aproximadamente 99% de la Forma II. De manera similar, las composiciones también pueden incluir, por ejemplo, Formas I, III o V. Las composiciones pueden incluir opcíonalmente al menos aproximadamente 20%; al menos aproximadamente 50%; al menos aproximadamente 90%; al menos aproximadamente 95%; o al menos aproximadamente 99% de las Formas I, II, III y/o V.
También dentro del alcance de la presente solicitud están formas amorfas de fenil acetato de L-ornitina. Se conocen en la técnica varios métodos para preparar formas amorfas. Por ejemplo, una solución de fenil acetato de L-ornitina se puede secar bajo vacío por liofilización para obtener una composición amorfa. Véase Solicitud de P.C.T. WO 2007/058634, la cual se publicó en inglés y designa los EUA, y está con ello incorporada por referencia para describir métodos de liofilización .
Se prefiere que la composición tenga cantidades inferiores (si las hay) de iones o sales de alquilo y halógeno, en particular sodio y cloro. En algunas modalidades, la composición comprende no más de aproximadamente 100 ppm de metales álcalis (preferiblemente no más de aproximadamente 20 ppm, y muy preferiblemente no más de aproximadamente 10 ppm) . En algunas modalidades, la composición comprende no más de aproximadamente 100 ppm de sodio (preferiblemente no más de aproximadamente 20 ppm, y muy preferiblemente no más de aproximadamente 10 ppm) . En algunas modalidades, la composición comprende no más de aproximadamente 0.1% en peso de haluros (preferiblemente no más de aproximadamente 0.01% en peso) . En algunas modalidades, la composición comprende no más de aproximadamente 0.1% en peso de cloruro (preferiblemente no más de aproximadamente 0.01% en peso) .
El contenido reducido de metales álcalis y haluros proporciona una composición adecuada para preparar soluciones isotónicas concentradas. Como tal, estas composiciones pueden ser más fácilmente administradas intravenosamente comparadas con, por ejemplo, administrar mezclas de clorhidrato de L-ornitina y fenil acetato de sodio. En algunas modalidades, aproximadamente 45 hasta aproximadamente 55 mg/mL de solución de fenil acetato de L-ornitina en agua (preferiblemente aproximadamente 50 mg/mL) es isotónica con fluidos corporales (por ejemplo, la solución exhibe una osmolaridad en el intervalo de aproximadamente 280 hasta aproximadamente 330 mOsm/kg) .
Las composiciones también pueden incluir cantidades residuales del anión a partir de una sal intermediaria formada durante el proceso de elaborar la composición de fenil acetato de L-ornitina. Por ejemplo, algunos de los procesos descritos en la presente proporcionan composiciones que tienen ácido benzoico o una sal del mismo. En algunas modalidades, la composición comprende al menos aproximadamente 0.01% en peso de ácido benzoico o una sal del mismo (preferiblemente al menos aproximadamente 0.05% en peso, y más preferiblemente aproximadamente 0.1% en peso) . En algunas modalidades, la composición comprende no más de aproximadamente 3% en peso de ácido benzoico o una sal del mismo (preferiblemente no más de aproximadamente 1% en peso, y más preferiblemente no más de aproximadamente 0.5% en peso) . En algunas modalidades, la composición incluye una sal, o un ácido de la misma, en el intervalo de aproximadamente 0.01% hasta aproximadamente 3% en peso (preferiblemente aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 1%) , en donde la sal se selecciona de acetato, aspartato, formiato, oxalato, bicarbonato, carbonato, bitrato, sulfato, nitrato, isonicotinato, salicilato, citrato, tartrato, pantotenato, bitartrato, ascorbato, succinato, maleato, gentisinato, fumarato, gluconato, glucaronato, sacarato, formiato, benzoato, glutamato, metansulfonato, etansulfonato, bencensulfonato, p-toluensulfonato, pamoato (es decir, 1,1'-metilen-bis- (2-hidroxi-3-naftoato) o fosfato.
De manera similar, una composición preparada usando un intermediario de acetato puede tener cantidades residuales de ácido acético o acetato. En algunas modalidades, la composición incluye al menos aproximadamente 0.01% en peso de ácido acético o acetato (preferiblemente al menos aproximadamente 0.05% en peso, y más preferiblemente aproximadamente 0.1% en peso). En algunas modalidades, la composición incluye no más de aproximadamente 3% en peso de ácido acético o acetato (preferiblemente no más de aproximadamente 1% en peso, y más preferiblemente no más de aproximadamente 0.5% en peso) .
Las composiciones también pueden incluir cantidades inferiores de plata. Procesos ejemplares descritos en la presente utilizan, por ejemplo, benzoato de plata, pero todavía proporcionan composiciones con cantidades sorprendentemente inferiores de plata. De este modo, en algunas modalidades, la composición incluye no más de aproximadamente 600 ppm de plata (preferiblemente no más de aproximadamente 100 ppm, y más preferiblemente no más de aproximadamente 65 ppm) . En algunas modalidades, la composición incluye al menos aproximadamente 10 ppm de plata (alternativamente al menos aproximadamente 20 o 25 ppm de plata-) .
Composiciones Farmacéuticas Las composiciones de fenil acetato de L-ornitina de la presente solicitud pueden ser también formuladas para administración a un sujeto (por ejemplo, un humano) . El fenil acetato L-ornitina, y por consiguiente las composiciones descritas en la presente, pueden ser formulados para administración con un portador farmacéuticamente aceptable o diluyente. El fenil acetato de L-ornitina puede de este modo ser formulado como un medicamento con un portador (es) y/o excipiente ( s ) farmacéuticamente aceptables estándares como es rutina en la técnica farmacéutica. La naturaleza exacta de la formulación dependerá de varios factores que incluyen la ruta deseada de administración. Típicamente, el fenil acetato de L-ornitina es formulado para administración oral, intravenosa, intragástrica, subcutánea, intravascular o intraperitoneal .
El portador o diluyente farmacéutico puede ser, por ejemplo, agua o una solución isotónica, tal como 5% de dextrosa en agua o salina normal. Formas orales sólidas pueden contener, junto con el compuesto activo, diluyentes, por ejemplo, lactosa, dextrosa, sacarosa, celulosa, almidón de maíz o almidón de papa lubricantes, por ejemplo, sílice, talco, ácido esteárico, estearato de magnesio o calcio, y/o polietilen glicoles; agentes enlazantes, por ejemplo, almidones, goma arábica, gelatina, metilcelulosa, carboximetilcelulosa o polivinilpirrolidona; agentes desagregantes, por ejemplo, almidón, ácido algínico, alginatos o glicolato almidón de sodio; mezclas efervescentes, colorantes; endulzantes; agentes humectantes, tales como lecitina, polisorbatos , laurilsulfatos ; y, en general, sustancias farmacológicamente inactivas y no tóxicas usadas en formulaciones farmacéuticas. Tales preparaciones farmacéuticas pueden ser manufacturadas en maneras conocidas, por ejemplo, por medio de procesos de mezclado, granulación, tableteado, recubrimiento de azúcar o recubrimiento de película.
Las dispersiones líquidas para administración oral pueden ser jarabes, emulsiones o suspensiones. Los jarabes pueden contener como portadores, por ejemplo, sacarosa o sacarosa con glicerina y/o manitol y/o sorbitol.
Las suspensiones y emulsiones pueden contener un portador, por ejemplo una goma natural, agar, alginato de sodio, pectina, metilcelulosa, carboximetilcelulosa, o alcohol polivinílico . Las suspensiones o soluciones para inyecciones intramusculares pueden contener, junto con el fenil acetato de L-ornitina, un portador farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, agua estéril, aceite de oliva, oleato de etilo, glicoles, por ejemplo, propilenglicol, y si se desea, una cantidad adecuada de clorhidrato de lidocaína.
El medicamento puede consistir esencialmente de fenil acetato de L-ornitina y un portador farmacéuticamente aceptable. Tal medicamento por lo tanto no contiene sustancialmente otros aminoácidos en adición a L-ornitina y fenil acetato. Además, tal medicamento contiene cantidades insustanciales de otras sales en adición al fenil acetato de L-ornitina .
Formulaciones orales pueden en general incluir dosificaciones de fenil acetato de L-ornitina en el intervalo de aproximadamente 500 mg hasta aproximadamente 100 g. Por consiguiente, en algunas modalidades, la formulación oral incluye las composiciones e fenil acetato de L-ornitina descritas en la presente en el intervalo de aproximadamente 500 mg hasta aproximadamente 50 g. En algunas modalidades, la formulación oral está sustancialmente libre de sales y haluros de metal álcali (por ejemplo, no contiene más cantidades indicadoras de sales y haluros de metal álcali) .
Formulaciones intravenosas también pueden en general incluir dosificaciones de fenil acetato de L-ornitina en el intervalo de aproximadamente 500 mg hasta aproximadamente 100 g (preferiblemente aproximadamente 1 g hasta aproximadamente 50 g) . En algunas modalidades, la formulación intravenosa está sustancialmente libre de sales y haluros de metal álcali (por ejemplo, no contiene más cantidades indicadoras de sales y haluros de metal álcali) . En algunas modalidades, la formulación intravenosa tiene una concentración de aproximadamente 5 hasta aproximadamente 300 mg/mL de fenil acetato de L-ornitina (preferiblemente aproximadamente 25 hasta aproximadamente 200 mg/mL, y más preferiblemente aproximadamente 40 hasta aproximadamente 60 mg/mL) .
La composición, o medicamento que contiene la composición, puede ser opcionalmente colocado en envases sellados. El envase sellado puede reducir o prevenir la humedad y/o aire ambiental de entrar en contacto con la composición o medicamento. En algunas modalidades, el envase incluye un sello hermético. En algunas modalidades, el envase es sellado bajo vacío o con un gas inerte (por ejemplo, argón) dentro del envase sellado. Por consiguiente, el envase puede inhibir o reducir la velocidad de degradación para la composición o medicamento almacenado dentro del envase. Se conocen varios tipos de envases sellados en la técnica. Por ejemplo, la Patente Estadounidense Número 5,560,490, está con ello incorporada por referencia en su totalidad, describe un envase sellado ejemplar para medicamentos.
Composiciones con Densidad Mejorada Los solicitantes han encontrado sorprendentemente que las composiciones con mayor densidad se pueden obtener aplicando suficiente presión a composiciones que tienen la Forma I (descrita abajo) para inducir una transición a la Forma II (descrita abajo). Por ejemplo, aplicando 3 toneladas de fuerza por 90 minutos a las Formas I y II proporcionando densidades de 1.197 kg/m3 y 1.001 kg/m3, respectivamente. De manera sorprendente, la Forma I es convertida a la Forma II bajo estas condiciones; por lo tanto la mayor densidad parece ser explicada por las diferentes formas cristalinas como el material de partida.
Por consiguiente, descritos en la presente están métodos para incrementar la densidad de la composición de fenil acetato de L-ornitina que tiene la Forma I aplicando presión a la composición suficiente para inducir una transición a la Forma II. La cantidad apropiada de fuerza o presión para induce el cambio de fase puede variar con la cantidad de tiempo que la fuerza o presión se aplica. De este modo, una persona de habilidad ordinaria, guiada por las enseñanzas de la presente solicitud, puede determinar cantidades apropiadas de presión y tiempo para induce el cambio de fase. En algunas modalidades, al menos aproximadamente 1 ton de fuerza se aplica (preferiblemente al menos aproximadamente 2 toneladas, y más preferiblemente aproximadamente 3 toneladas) . En algunas modalidades, al menos aproximadamente 500 psi (3447.3 KPa) de presión se aplica (preferiblemente al menos aproximadamente 1000 psi (6894.7 KPa), y más preferiblemente al menos aproximadamente 2000 psi (13789.5 KPa) ) .
La cantidad de tiempo para aplicar la presión no está particularmente limitada, y como se discute anteriormente, variará dependiendo de la cantidad de tiempo. Por ejemplo, cuando se aplican grandes fuerzas (por ejemplo, 10 toneladas) a un punzón de tamaño de tableta, el tiempo puede ser aproximadamente 1 segundo o menos . En algunas modalidades, el tiempo para aplicar presión es un tiempo predeterminado. El tiempo puede ser, por ejemplo, aproximadamente 0.1 segundos; aproximadamente 1 segundo; al menos aproximadamente 1 minuto; al menos aproximadamente 5 minutos; o al menos aproximadamente 20 minutos.
En algunas modalidades, la composición incluye al menos aproximadamente 10% en peso de la Forma I. En algunas modalidades, la composición incluye al menos aproximadamente 30% en peso de la Forma I.
Sin ser ligado por cualquier teoría particular, los Solicitantes creen que la mayor densidad puede resultar, al menos en parte, del componente solvato de etanol presente en la Forma I. Aplicar presión al solvato puede facilitar formar una estructura más densa con algunos defectos (por ejemplo, límites de grano). Consecuentemente, en algunas modalidades, métodos para incrementar la densidad de una composición de fenil acetato de L-ornitina que tiene componentes solvatos incluye aplicar presión a la composición suficiente para inducir una transición a la Forma II. En algunas modalidades, la presión es al menos aproximadamente 500 psi (3447.3 KPa) (preferiblemente al menos aproximadamente 1000 psi (6894.7 KPa) , y más preferiblemente al menos aproximadamente 2000 psi(13789.5 KPa)). En algunas modalidades, el tiempo para aplicar presión es un tiempo predeterminado. En algunas modalidades, la composición incluye al menos aproximadamente 10% de la forma de solvato (preferiblemente al menos aproximadamente 30%, y más preferiblemente al menos aproximadamente 50%) .
Las composiciones de fenil acetato de L-ornitina descritas en la presente pueden por lo tanto tener densidades superiores comparadas con las composiciones obtenidas mediante, por ejemplo, precipitar una forma cristalina. En algunas modalidades, la composición tiene una densidad de al menos aproximadamente 1.1 kg/m3 (preferiblemente al menos aproximadamente 1.15 kg/m3, y más preferiblemente al menos aproximadamente 1.18 kg/m3). En algunas modalidades, la composición tiene una densidad de no más de aproximadamente 1.3 kg/m3 (preferiblemente no más de aproximadamente 1.25 kg/m3, y más preferiblemente no más de aproximadamente 1.22 kg/m3) . En algunas modalidades, la composición tiene una densidad de aproximadamente 1.2 kg/m3.
Formas Cristalinas de Fen.il acetato de L-ornitina También descritas en la presente están formas cristalinas de fenil acetato de L-ornitina, y en particular, Forma I, Forma II, Forma III, y Forma V cristalinas. El fenil acetato de L-ornitina puede, en algunas modalidades, obtenerse usando los procesos descritos anteriormente y después cristalizados usando cualquiera de los métodos descritos en la presente.
Forma I Las condiciones precisas para formar la Forma I cristalina pueden ser empíricamente determinadas y es solamente posible para dar un número de métodos los cuales se han encontrado por ser adecuados en la práctica.
De este modo, por ejemplo, la Forma I cristalina puede en general obtenerse cristalizando el fenil acetato de L-ornitina bajo condiciones controladas. Como un ejemplo, se precipita el fenil acetato de L-ornitina de una solución saturada agregando etanol a temperaturas reducidas (por ejemplo, 4o o -21° C) . Solventes ejemplares para la solución que proporcionan la Forma I cristalina después de agregar etanol incluyen, pero no se limitan a, ciclohexanona, 1-propanol, dimetilcarbonato, N-metilpirrolidina (NMP) , dietil éter, 2-butanol, eumeno, etil formiato, acetato de isobutilo, 3-netil-l-butanol, y anisol .
Por consiguiente, en el contexto del proceso para elaborar el fenil acetato de L-ornitina descrito anteriormente, el proceso puede proporcionar la Forma I utilizando métodos de aislamiento particulares. Por ejemplo, el fenil acetato de L-ornitina puede ser aislado agregando etanoles a temperatura reducida para proporcionar la Forma I.
La Forma I cristalina se caracteriza usando varias técnicas las cuales se describen en más detalle en la sección de métodos experimentales . La FIGURA 1 muestra la estructura cristalina de la Forma I como se determina por difracción en polvo de rayos-X (XRPD) . La Forma I, la cual se puede obtener por los métodos descritos anteriormente, exhibe picos característicos hasta aproximadamente 4.9°, 13.2°, 17.4°, 20.8° y 24.4° 2T. De este modo, en algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina tiene uno o más picos característicos (por ejemplo, uno, dos, tres, cuatro o cinco picos característicos) seleccionados de aproximadamente 4.9°, 13.2°, 17.4°, 20.8°, 24.4° 2T.
Como es bien entendido en la técnica, debido a la variabilidad experimental cuando los patrones de difracción de rayos-X son medidos en diferentes instrumentos, las posiciones pico son asumidas por ser iguales si los valores dos teta (2T) se agregan dentro de 0.2° (es decir, + 0.2°).
Por ejemplo, la Farmacopea Estadounidense declara que si el ajuste angular de los 10 picos de difracción más fuerte se agrega dentro de ± 0.2° con aquel de un material de referencia, y las intensidades relativas de los picos no varían por más de 20%, se confirma la identidad. Por consiguiente, posiciones pico dentro de 0.2° de las posiciones mencionadas en la presente se asumen por ser idénticas .
La FIGURA 2 muestra resultados obtenidos por calorimetría de exploración diferencial (DSC) para la Forma I. Estos resultados indican un endoterma a 35° C, el cual está posiblemente asociado con una desolvatación y/o deshidratación a la Forma II. Una segunda transición hasta aproximadamente 203° C indica el punto de fusión para el cristal. Para explorar la existencia posible de una transición de desolvatación y/o degradación, la Forma I se analizó por análisis térmicos diferenciales/gravimétricos termograviraétricos (TG/DTA) , los cuales se muestran en la FIGURA 3. La Forma I exhibe una pérdida de 11.28% en peso a aproximadamente 35° C, y por lo tanto estos resultados además sugieren que la Forma I exhibe una transición de desolvatación y/o deshidratación a aproximadamente 35° C. El punto de fusión de aproximadamente 203° C también podría ser observado por pruebas de TGA. Por consiguiente, en algunas modalidades, la forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina se caracteriza por calorimetría de exploración diferencial ya que tiene un endoterma a aproximadamente 35° C. En algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina exhibe una pérdida de peso de aproximadamente 11% a aproximadamente 35° C, como se determina por TGA. En algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina exhibe un punto de fusión de aproximadamente .203 ° C.
La FIGURA 4 muestra integrales de resonancia magnética nuclear (NMR) y cambios químicos para la Forma I. Las integrales confirman la presencia de fenil acetato de L-ornitina: 7.5 (CH aromático), 3.8 (CH adyacente a NH2) , 3.6 (CH2 unidad de fenil acetato), 3.15 (CH2 adyacente a NH2) y 1.9 (unidades alifáticas CH2) ppm (integrales: 5:1:2:2:4 protones; 1.2, 0.25, 0.5, 0.5, 1.0). No se observaron protones amina y protones hidroxilo debido al intercambio de protón en tanto el zwitterión como el sitio de formación de sal. Mientras tanto, la FIGURA 5 muestra resultados de adsorción de vapor dinámico (DVS) para la Forma I, y muestra una absorción de agua de aproximadamente 0.2% en peso. Los resultados de XRPD después de análisis de DVA (no mostrado) confirman que la Forma I no transiciona a un polimorfo diferente. La Forma I puede por lo tanto ser caracterizada como no higroscópica y estable durante un amplio intervalo de humedad.
Al día 7 de estudio de estabilidad de la Forma I a 40°C/75%RH se indica que una transformación a la Forma II ocurre bajo estas condiciones. La Forma I también se convierta á la Forma II a temperaturas elevadas (por ejemplo, 80° o 120° C) , con o sin aplicar un vacío, después de 7 o 14 días. Por consiguiente, la Forma I es metastable.
También se usó difracción de rayos-X de cristal único (SXRD) para determinar la estructura de la Forma I a -20° y -123° C, y los resultados son resumidos en las TABLAS 1 y 2. Los resultados confirman que la Forma I es un solvato que tiene moléculas de agua y etanol dentro de la unidad de célula. En algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina puede ser representada por la fórmula C15H28N2O6. En algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina puede ser representada por la fórmula [CsHnN202] [C8H702] EtOHiH20. En algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina exhibe un análisis cristalográfico de rayos-X de cristal único con parámetros de cristal aproximadamente igual a los siguientes: dimensiones de unidad de célula de a=5.3652(4) Á, b=7.7136(6) Á, c=20.9602 (18) Á, a=90°, ß=9 .986 ( 6) ° , ?=90°; un sistema de cristal monoclínico, y un grupo de espacio P2i.
TABLA 1 - Datos Cristalográficos de la Forma I Recolectados a -20°C Fórmula empírica C15H28N206 o [C5H13N202] [C8H702] EtOH.H20 Peso de Fórmula 332.39 Sistema de cristal monoclínico Grupo de espacio P2X Dimensiones de unidad de a=5.3652(4) Á, a=90°, célula b=7.7136(6) Á, ß=94.986 ( 6) ° , c=20.9602 (18) Á, ?=90 Volumen 864.16 (12)Á3 Número de reflexiones . 1516 (2.5°<?<28°) Densidad (calculada) 1.277 mg/cm3 TABLA 2 - Datos Cristalográficos de la Forma I Recolectados a -123°C Fórmula empírica C1SH28N206 o [C5H13N202] [C8H702] EtOH.H20 Peso de Fórmula 332.39 Sistema de cristal monoclínico Grupo de espacio P2i Dimensiones de unidad de a=5.3840(9) Á, o¡=90°, célula b=7.7460(12) Á, ß=95.050 ( 12 ) 0 , c=21.104(4) Á, ?=90 Volumen 864.16 (3)Á3 Número de reflexiones 1477 (2.5°<?<18°) Densidad (calculada) 1.259 mg/cm3 Forma II Las condiciones precisas para formar la Forma I cristalina pueden ser empíricamente determinadas y es solamente posible para dar un número de métodos los cuales se han encontrado por ser adecuados en la práctica .
De este modo, por ejemplo, la Forma I cristalina puede ser preparada por cristalización bajo condiciones controladas. La Forma I cristalina puede ser preparada mediante, por ejemplo, evaporar una solución orgánica saturada de fenil acetato de L-ornitina. Ejemplos no limitantes de soluciones orgánicas que se pueden usar para obtener la Forma II incluyen etanol, acetona, benzonitrilo, diclorometano (DCM) , dimetil sulfóxido (DMSO) , acetato de etilo (EtOAc) , acetonitrilo (MeCN) , acetato de metilo (MeOAc) , nitrometano, terc-butil metil éter (TBME) , tetrahidrofurano , y tolueno. Otros solventes pueden proporcionar una mezcla de la Forma I y II, tal como, pero no limitado a, 1,4 dioxano, 1-butanol, ciclohexano, IPA, THF, MEK, MeOAc y agua.
La Forma II también se puede obtener precipitando el fenil acetato de L-ornitina a partir de una solución orgánica saturada agregando un anti-solvente para el fenil acetato de L-ornitina, como IPA. La Forma II puede ser precipitada sobre un intervalo amplio de temperaturas (por ejemplo, temperatura ambiente, 4o C, y -21° C) . Ejemplos no limitantes de solventes adecuados para la solución orgánica saturada incluyen ciclohexanona, 1-propanol, dimetil carbonato, N-metilpirrolidona (N P) , diisopropil éter, dietil éter, etilen glicol, dimetilformamida (DMF) , 2-butanol, eumeno, acetato de isobutilo, 3-metil-1-butanol, y anisol. Alternativamente, los mismos solventes listados (por ejemplo, ciclohexanona) pueden ser usados para formar una solución de fenil acetato de L-ornitina, y la Forma II puede ser precipitada agregando etanol a condiciones ambientales . Como otro ejemplo, la Forma II puede ser también obtenida formando una suspensión de fenil acetato de L-ornitina con los solventes orgánicos listados y someter a ciclos la temperatura entre 25° y 40° C cada 4 horas por aproximadamente 18 ciclos (o 72 horas) . , Por consiguiente, en el contexto de los procesos para elaborar el fenil acetato de L-ornitina descrito anteriormente, el proceso puede proporcionar la Forma II utilizando métodos de aislamiento particulares. Por ejemplo, el fenil acetato de L-ornitina puede ser aislado agregando IPA, o evaporando el solvente orgánico, para proporcionar la Forma II.
La FIGURA 6 muestra la estructura cristalina de la Forma II como se determina por XRPD . La Forma II, la cual se puede obtener por los métodos descritos anteriormente, exhibe picos característicos hasta aproximadamente 6.0°, 13.9°, 14.8o, 17.1°, 17.8° y 24.1° 2T. De este modo, en algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina tiene uno o más picos característicos (por ejemplo, uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis picos característicos) seleccionados de aproximadamente 6.0°, 13.9°, 14.8°, 17.1°, 17.8o y 2 .12° T.
La FIGURA 7 muestra resultados obtenidos por calorimetría de exploración diferencial (DSC) para la Forma II. Estos resultados indican un punto de fusión de aproximadamente 202° C, el cual es aproximadamente el mismo como el punto de fusión para la Forma I. Esto sugiere que la Forma I transiciona a la Forma II después del calentamiento arriba de aproximadamente 35° C. La Forma II también se analizó usando TG/DTA, como se muestra en la FIGURA 8, y exhibe una pérdida de peso de aproximadamente 9.7% asociada con el solvente residual. El punto de fusión de aproximadamente 202° C podría también ser observados por pruebas TGA. Por consiguiente, en algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina exhibe un punto de fusión de aproximadamente 202° C.
Un estudio de estabilidad al día 7 de la Forma II a 40°C/75%RH falla para producir un cambio de fase observable. En efecto, la Forma II fue estable durante 14 días cuando se expone a temperaturas elevadas, variando pH, lu2 UV u oxígeno. Por consiguiente, la Forma II es considerada estable.
La FIGURA 9 muestra integrales de resonancia magnética nuclear (NMR) y cambios químicos para la Forma II. Las integrales confirman la presencia de fenil acetato de L-ornitina: 7.5 (CH aromático), 3.8 (CH adyacente a NH2) , 3.6 (CH2 unidad de fenil acetato), 3.15 (CH2 adyacente a NH2) y 1.9 (unidades alifáticas CH2) ppm (integrales: 5: 1:2:2:4 protones; 7.0, 1.4, 2.9, 3.0, 5.9). No se observaron protones amina y protones hidroxilo debido al intercambio de protón en tanto el zwitterión como el sitio de formación de sal. Mientras tanto, La FIGURA 10 muestra resultados de adsorción de vapor dinámico (DVS) para la Forma II, y muestra una absorción de agua de aproximadamente 0.3% en peso. Los resultados de XRPD después del análisis de DVA (no mostrado) confirman que la Forma II no transiciona a un polimorfo diferente. La Forma II puede por lo tanto ser caracterizada como no higroscópica y estable sobre un amplio intervalo de humedad .
También se usó difracción de rayos-X de cristal único (SXRD) para determinar la estructura de la Forma II a 23° y -123° C, y los resultados se resumen en las TABLAS 3 y 4. Los resultados demuestran que la Forma II es anhidra y por lo tanto estructuralmente diferente de la Forma I . En algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina puede ser representada por la fórmula C13H20N2O4. En algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina puede ser representada por la fórmula [C5H13 202] [CaH02] . En algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina exhibe un análisis cristalográfico de rayos-X de cristal único con parámetros de cristal aproximadamente igual a los siguientes: dimensiones de unidad de célula de a = 6.594(2) Á, = 90°, b = 6.5448(18) Á, ß=91.12(3)°, c = 31.632(8) Á, ?= 90°; un sistema de cristal monocíclico; y un grupo de espacio ?2?.
TABLA 3 - Datos Cristalográficos de la Forma II Recolectados a -23°C Fórmula empírica C13H20N2O4 O [C5H13N202] [C8H702] Peso de Fórmula 268.31 Sistema de cristal monoclínico Grupo de espacio ?2? Dimensiones de unidad de a = 6.594(2) Á, a= 90°, célula b = 6.5448(18) Á, ß=91.12(3)°, c = 31.632(8) Á, ?= 90°; Volumen 1364.97 (7)Á3 Número de reflexiones 3890 (3°<?<20.5°) Densidad (calculada) 1.306 mg/cm3 TABLA 4 - Datos Cristalográficos de la Forma II Recolectados a -123°C Fórmula empírica C13H20N2O4 o [C5H13N202] [C8H702] Peso de Fórmula 332.39 Sistema de cristal monoclínico Grupo de espacio P21 Dimensiones de unidad de a=5.3652(4) Á, a=90°, célula b=7.7136(6) Á( ß=9 .986 (6) °, c=20.9602 (18) Á, ?=90 Volumen 864.16 (3)Á3 Número de reflexiones 1516 (2.5°<?<28°) Densidad (calculada) 1.277 mg/cm3 Forma III Las condiciones precisas para formar la Forma III cristalina pueden ser empíricamente determinadas y es solamente posible para dar un número de métodos los cuales se han encontrado por ser adecuados en la práctica.
De este modo, por ejemplo, la Forma III se puede obtener colocando una solución saturada de fenil acetato de L-ornitina en ambiente de temperatura enfriada de aproximadamente -21° c, donde la solución es una mezcla de acetona y agua (por ejemplo, volumen de partes iguales de acetona y agua) . Como otro ejemplo, agregar IPA a una solución saturada de fenil acetato de L-ornitina en 2-butano! puede proporcionar la Forma III cuando se completa a condiciones ambientales. Adem s, la Forma III se puede obtener, por ejemplo, agregando IPA a una solución saturada de fenil acetato de L-ornitina en isobutil acetato cuando se completa a temperaturas reducidas de aproximadamente -21° C.
Por consiguiente, en el contexto de los procesos para elaborar el fenil acetato de L-ornitina descrito anteriormente, el proceso puede proporcionar la Forma III utilizando solventes particulares y métodos de aislamiento. Por ejemplo, el fenil acetato de L-ornitina puede ser formado dentro de una mezcla de acetona y agua, y subsecuentemente colocado en un ambiente enfriado de aproximadamente -21° C para proporcionar la Forma III.
La FIGURA 11 muestra la estructura cristalina de la Forma III como se determina por XRPD. La Forma III, la cual se puede obtener por los métodos descritos anteriormente, exhibe picos característicos hasta aproximadamente 5.8°, 14. Io, 18.6°, 19.4°, 22.3° y 24.8° 2T. De este modo, en algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina tiene uno o más picos característicos (por ejemplo, uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis picos característicos) seleccionados de aproximadamente 5.8°, 14. Io, 18.6°, 19.4°, 22.3° y 24.8° 2T .
La FIGURA 12 muestra resultados obtenidos por calorimetría de exploración diferencial (DSC) para la Forma III. Estos resultados indican un punto de fusión de aproximadamente 203° C, el cual es aproximadamente el mismo como el punto de fusión para la Forma I y Forma II. Adicionalmente , la Forma III exhibe un endoterma a aproximadamente 40° C. La Forma III también se analizó usando TG/DTA, como se muestra en la FIGURA 13, y no exhibe pérdida de peso significante antes del punto de fusión. La Forma III puede por lo tanto ser caracterizada como anhidra. El punto de fusión de aproximadamente 203° C podría también ser observado por pruebas TGA. Por consiguiente, en algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina exhibe un punto de fusión de aproximadamente 203° C. En algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina se caracteriza por calorimetría de exploración diferencial ya que tiene un endoterma a aproximadamente 40° C. En algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina es anhidra.
Un estudio de estabilidad al día 7 de la Forma III a 40°C/75%RH indica que una transformación a la Forma II ocurre bajo estas condiciones. Por el contrario, la Forma II es estable a temperaturas elevadas, con o sin vacío, por periodos de 7 o 10 días. Por consiguiente, la Forma III es muy probablemente metastable, pero más estable que la Forma I .
La FIGURA 14 muestra integrales de resonancia magnética nuclear (NMR) y cambios químicos para la Forma III . Las integrales confirman la presencia de fenil acetato de L-ornitina: 7.5 (CH aromático), 3.8 (CH adyacente a NH2) , 3.6 (CH2 unidad de fenil acetato), 3.15 (CH2 adyacente a NH2) y 1.9 (unidades alif ticas CH2) ppm (integrales: 5:1:2:2:4 protones; 4.2, 0.8, 1.7, 1.7, 3.0). No se observaron protones amina y protones hidroxilo debido al intercambio de protón en tanto el zwitterión como el sitio de formación de sal. Mientras tanto, La FIGURA 15 muestra resultados de adsorción de vapor dinámico (DVS) para la Forma III, y muestra una absorción de agua de aproximadamente 2.0% en peso. Los resultados de XRPD después del análisis de DVS (no mostrado) confirman que la Forma III no transiciona a un polimorfo diferente. La Forma III por lo tanto exhibe mayor absorción de agua comparada con las Formas I y II; sin embargo la Forma III es todavía caracterizada como no higroscópica y estable sobre un amplio intervalo de humedad a temperatura ambiente.
Forma V Las condiciones precisas para formar la Forma V cristalina pueden ser empíricamente determinadas y es solamente posible para dar un número de métodos los cuales se han encontrado por ser adecuados en la práctica.
De este modo, por ejemplo, la Forma V se puede obtener colocando una solución saturada de fenil acetato de L-ornitina en un ambiente de temperatura enfriada de aproximadamente -21° C, donde la solución es ciclohexanona . Como otro ejemplo, la misma solución saturada puede proporcionar la Forma V cuando se evapora el solvente.
La Forma V también se forma de soluciones saturadas de fenil acetato de L-ornitina que tienen diisopropil éter como un solvente. Por ejemplo, una solución saturada que tiene una relación de solvente de aproximadamente 1 a 2 de diisopropil éter y IPA proporcionará la Forma V cuando se coloca en un ambiente de temperatura enfriado de aproximadamente 4o C. De manera similar, una solución que tiene solamente el solvente diisopropil éter puede proporcionar la Forma V cuando se coloca en un ambiente de temperatura elevada de aproximadamente -21° C.
La FIGURA 16 muestra la estructura cristalina de la Forma V como se determina por XRPD. La Forma V, la cual se puede obtener por los métodos descritos anteriormente, exhibe picos característicos hasta aproximadamente 13.7o, 17.4°, 19.8°, 20.6° y 23.7° 2T. De este modo, en algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina tiene uno o más picos característicos (por ejemplo, uno, dos, tres, cuatro, o cinco picos característicos) seleccionados de aproximadamente 13.7°, 17.4°, 19.8°, 20.6° y 23.7° 2T.
La FIGURA 17 muestra resultados obtenidos por calorimetría de exploración diferencial (DSC) para la Forma V. Estos resultados indican un punto de fusión de aproximadamente 196° C, el cual está por debajo del punto de fusión de otras formas. La Forma V también exhibe un endoterma a aproximadamente 174° C. La Forma V también se analizó usando análisis térmico gravimétrico (TGA) , como se muestra en la FIGURA 18, y no exhibe pérdida de peso significante antes del punto de fusión. La Forma V puede por lo tanto ser caracterizada como anhidra. El punto de fusión de aproximadamente 196° C podría también ser observado por pruebas TGA. Por consiguiente, en algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina exhibe un punto de fusión de aproximadamente 196° C. En algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina se caracteriza por calorimetría de exploración diferencial ya que tiene un endoterma a aproximadamente 174° C. En algunas modalidades, una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina es anhidra.
La FIGURA 19 muestra integrales de resonancia magnética nuclear (NMR) integrales y cambios químicos para la Forma V. Las integrales confirman la presencia de fenil acetato de L-ornitina: 7.5 (CH aromático), 3.8 (CH adyacente a NH2) , 3.6 (CH2 unidad de fenil acetato), 3.15 (CH2 adyacente a NH2) y 1.9 (unidades alifáticas CH2) ppm (integrales: 5: 1 : 2:2:4 protones; 4.2, 0.8, 1.7, 1.7, 3.0). No se observaron protones amina y protones hidroxilo debido al intercambio de protón en tanto el zwitterión como el sitio de formación de sal. Mientras tanto, La FIGURA 19 muestra resultados de adsorción de vapor dinámico (DVS) para la Forma V, y muestra una absorción de agua de aproximadamente 0.75% en peso. Los resultados de XRPD después del análisis de DVS (no mostrado) sugieren que la Forma V transiciona a la Forma II, pero la composición química está sin cambio. La Forma V es por lo tanto caracterizada como no higroscópica, pero no estable sobre un amplio intervalo de humedad.
Un estudio de estabilidad al día 7 de la Forma V a 40°C/75%RH indica que la transformación a la Forma II ocurre bajo estas condiciones; sin embargo la composición química está sin cambio. Por consiguiente, la Forma V es muy probablemente metastable .
Métodos para Tratar Descompensación Hepática o Encefalopatía hepática El fenil acetato de L-ornitina, y por consiguiente cualquiera de las composiciones de fenil acetato de L-ornitina descritas en la presente, puede ser administrado a un sujeto para tratar o aliviar el comienzo de descompensación hepática o encefalopatía hepática. El fenil acetato de L-ornitina puede de este modo ser administrado para mejorar la condición de un sujeto, por ejemplo un sujeto que sufre de enfermedad hepática crónica después de un evento precipitante. Como otro ejemplo, el fenil acetato de L-ornitina puede ser administrado para combatir o retardar el comienzo de descompensación hepática o encefalopatía hepática .
El Fenil acetato de L-ornitina puede ser administrado en combinación a un sujeto para tratamiento de encefalopatía hepática. El fenil acetato de L-ornitina puede ser administrado para mejorar la condición de un paciente que sufre de encefalopatía hepática. El fenil acetato de L-ornitina puede ser administrado para aliviar los síntomas asociados con encefalopatía hepática. El fenil acetato de L-ornitina puede ser administrado para combatir encefalopatía hepática. El fenil acetato de L-ornitina puede ser administrado para prevenir o reducir la probabilidad de un episodio encefalopático hepático inicial en una persona en riesgo de episodios encefalopáticos hepáticos. El fenil acetato de L-ornitina puede ser administrado para disminuir la severidad de un episodio ecenfalopático hepático inicial en una persona en riesgo de episodios encefalopáticos hepáticos. El fenil acetato de L-ornitina puede ser administrado para retardar un episodio ecenfalopático hepático inicial en una persona en riesgo de episodios encefalopáticos hepáticos.
El desarrollo de descompensación hepática y encefalopatía hepática involucra comúnmente "eventos precipitantes" (o "ataques agudos"). Tales eventos precipitantes incluyen sangrado gastrointestinal, infección (sepsia) , trombosis de vena portal y deshidratación. El comienzo de tal ataque agudo es probablemente para conducir a hospitalización. El paciente puede sufrir de uno de estos ataques agudos o una combinación de estos ataques agudos.
Un sujeto quien ha tenido o es sospechoso de que tiene un ataque agudo se trata de conformidad con la invención con el fenil acetato de L-ornitina para prevenir o reducir la probabilidad de progreso del hígado al estado descompensado. Consecuentemente, el fenil acetato de L-ornitina puede prevenir o reducir la probabilidad de las consecuencias médicas de descompensación hepática tal como encefalopatía hepática. El fenil acetato de L-ornitina se puede usar para preservar la función hepática. El uso de fenil acetato de L-ornitina puede de este modo extender la vida de un paciente con enfermedad hepática. En una modalidad, las consecuencias metabólicas de un sangrado gastrointestinal tal como hiperamonemia , hipoisoleucemia y síntesis de proteína reducida en el periodo post -sangrado son prevenidas .
Típicamente, el tratamiento de sujetos puede comenzar tan pronto como sea posible después del comienzo o el comienzo sospechoso de un evento precipitante (ataque agudo) . Preferiblemente, el tratamiento del sujeto comienza previo a ataques agudos repetidos. Más preferiblemente, el tratamiento del sujeto comienza después del primer ataque agudo. De este modo, en algunas modalidades, el sujeto tratado con el fenil acetato de L-ornitina se identifica por tener el comienzo o el comienzo sospechoso de un evento precipitante (ataque agudo) .
El tratamiento se da típicamente prontamente después del inicio de un ataque agudo. El tratamiento puede comenzar después de que se ha detectado el (los) síntoma (s) de un ataque agudo o ataque agudo sospechoso por ejemplo, por un médico tal como un especialista, un paramédico o una enfermera. El tratamiento puede comenzar después de la hospitalización del sujeto. El tratamiento puede de este modo comenzar dentro de 6 horas, dentro de 3 horas, dentro de 2 horas o dentro de 1 hora después que se ha detectado el (los) síntoma(s) de un ataque agudo o ataque agudo sospechoso. El tratamiento del sujeto puede por lo tanto comenzar de 1 a 48 horas, por ejemplo de 1 a 36 horas o de 1 a 24 horas después que se ha detectado el (los) síntoma (s) de un ataque agudo o ataque agudo sospechoso.
El tratamiento puede ocurrir por hasta 8 semanas, por ejemplo hasta 6 semanas, hasta 4 semanas o hasta 2 semanas después que se ha detectado el (los) síntoma (s) de un ataque agudo o ataque agudo sospechoso. El tratamiento puede por lo tanto ocurrir por hasta 48 horas, por ejemplo por hasta 36 horas o por hasta 24 horas después que se ha detectado el (los) síntoma (s) de un ataque agudo o ataque agudo sospechoso. Típicamente, el tratamiento ocurre con el tiempo cuando la recuperación del evento precipitante agudo es evidente.
También se puede usar fenil acetato de L-ornitina para tratar o aliviar hiperamonemia . De este modo, el fenil acetato de L-ornitina puede ser administrado a pacientes identificados porque ya tienen niveles en exceso de amoníaco en la sangre, o pacientes que exhiben síntomas de exceso de amoníaco en la sangre. El fenil acetato de L-ornitina puede ser también administrado para reducir el riesgo de hiperamonemia. En algunas modalidades, el fenil acetato de L-ornitina puede ser administrado diariamente, por un periodo indefinido de tiempo. Por ejemplo, las dosificaciones diarias pueden ser administradas por la vida del paciente, o hasta que un especialista determina si el paciente no exhibe más un riesgo de hiperamonemia . En algunas modalidades, una cantidad terapéuticamente efectiva del fenil acetato de L-ornitina se administra para reducir el riesgo de hiperamonemia. En algunas modalidades, una cantidad terapéuticamente efectiva de fenil acetato de L-ornitina es administrada oralmente para la profilaxis de hiperamonemia .
Una cantidad terapéuticamente efectiva del fenil acetato de L-ornitina se administra al sujeto. Como será fácilmente aparente para un experto en la técnica, la dosificación in vivo útil para ser administrada y el modo particular de administración variarán dependiendo de la edad, peso, la severidad de la aflicción y especies de mamíferos tratadas, los compuestos particulares empleados, y el uso específico para el cual estos compuestos son empleados. (Véase por ejemplo, Fingí et al. 1975, en "The Pharmacological Basis of Therapeutics " , el cual está con ello incorporado en la presente por referencia en su totalidad, con referencia particular a Ch. 1, p. 1) . La determinación de niveles de dosificación efectivos, que son los niveles de dosificación necesarios para lograr el resultado deseado, pueden ser realizados por un experto en la técnica usando métodos farmacológicos de rutina. Típicamente, aplicaciones clínicas humanas de productos son comenzadas a niveles de dosificación inferior, con niveles de dosificación siendo incrementados hasta que se logra el efecto deseado. Alternativamente, estudios in vitro aceptables pueden ser usados para establecer dosis útiles y rutas de administración de las composiciones identificadas por los presentes métodos usando métodos farmacológicos establecidos.
Una dosis típica de fenil acetato de L-ornitina puede ser desde aproximadamente 0.02 hasta aproximadamente 1.25 g/kg de peso corporal (preferiblemente desde aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 0.6 g/kg de peso corporal) . Una dosificación puede por lo tanto ser desde aproximadamente 500 mg hasta aproximadamente 50 g (preferiblemente aproximadamente 5 g hasta aproximadamente 40 g, y más preferiblemente aproximadamente 10 g hasta aproximadamente 30 g) .
Una dosis diaria única puede ser administrada. Alternativamente, dosis múltiples; por ejemplo dos, tres, cuatro o cinco doses pueden ser administradas. Tales dosis múltiples pueden ser administradas durante un periodo de un mes o dos semanas o una semana. En algunas modalidades, una dosis única o dosis múltiples tal como dos, tres, cuatro o cinco dosis pueden ser administradas diariamente.
EJEMPLOS Y METODOS EXPERIMENTALES Se describen modalidades adicionales en detalle adicional en los siguientes ejemplos, los cuales no son en cualquier forma planeados para limitar el alcance de las reivindicaciones .
Difracción en Polvo de Rayos X (XRPD) Se llevó a cabo el análisis XRPD en un Bruker D8 advance o Seimens D5000, se exploraron las muestras entre 4 o y 50° 2T. En modalidades que usan el dispositivo Bruker D8 , aproximadamente 5 mg de una muestra fue suavemente comprimida en el soporte de muestra de placa de 96 cavidades única de tierra negra cero XRPD. La muestra después se cargó en un Difractrómetro Bruker D8-Discover en forma de transmisión y analizada usando las siguientes condiciones experimentales. Operador D8-Discover Origen de Datos en Bruto BRUKER-binary V3 ( . RAW) Ejes de Exploración Gonio Posiciones de Partida [°2T] 4.0000 Posición Final [°2T] 49.9800 Tamaño de Etapa [°2T] 0.0200 Tiempo de Etapa de Exploración [s] 39.1393 Tipo de Exploración Continuo Desfase [°2?] 0.0000 Tipo de ranura de divergencia Fija Tamaño de Ranura de Divergencia 2.0000 Longitud de espécimen [mm] 10.00 Tamaño de Ranura de recepción [mm] 0.1000 Temperatura de medición [°C] 25.00 Material de Ánodo Cu K-Alfal [Á] 1.54060 K-Alfa2 [Á] 1.54443 K-Beta [Á] 1.39225 Proporción K-A2/K-A1 0.50000 Ajustes del Generador 40 mA, 40 kV Tipo de Difractrometro Desconocido Número de Difractrometro 0 Radio Geniómetro [mm] 250.00 Enfoque de Dist. -Ranura Diverg [mm] 91.00 Monocromador de Haz Incidental No Rotación No En algunas modalidades usando el dispositivo Seimens D5000, aproximadamente 5 mg de la muestra fue suavemente comprimida en un portaobjetos de vidrio que contiene una capa delgada de grasa de soporte. La muestra después se cargó en un Difractrometro Seimens D50000 que corre en forma de reflexión y se analiza, mientras gira, usando las siguientes condiciones experimentales.
Origen de Datos en Bruto Siemens-binary V2 ( . RAW) Posición de Partida [°2T] 3.0000 Posición Final [°2T] 50.000 Tamaño de Etapa [°2T] 0.0200 Tiempo de Etapa de Exploración [s] 0.8 Tipo de Exploración Continuo Desfase [°2T] 0.0000 Tipo de ranura de divergencia Fija Tamaño de Ranura de Divergencia 1.0000 Longitud de espécimen [mm] Variado Tamaño de Ranura de recepción [mm] 0.2000 Temperatura de medición [°C] 20.00 Material de Ánodo Cu K-Alfal [Á] 1.54060 K-Alfa2 [Á] 1.54443 K-Beta [Á] 1.39225 Proporción K-A2/K-A1 0.50000 (nominal) Ajustes del Generador 40 mA, 40 kV Tipo de Difractrómetro d5000 Número de Difractrómetro 0 Radio Geniómetro [mm] 217.50 Monocromador de Haz Incidental No Monocromador de Haz de Difracción (Grafito) Rotación Si Difracción de Rayos X de Cristal Único (SXRD) Todas las mediciones se llevaron a cabo usando un Difractrómetro Buker Smart Apex que opera con radiación Mo-Ka. A menos que se especifique de otra forma los datos se obtuvieron en imágenes 60 ?-explorador 10 s recolectadas en tres ajustes separados de 2T y <p.
Calorimetría de Exploración Diferencial (DSC) Se pesaron aproximadamente 5 mg de la muestra en una charola DSC de aluminio y se selló con una tapa de aluminio perforado (no herméticamente) . La charola de muestra entonces se cargó en un Seiko DSC6200 (equipado con un enfriador) , se enfrió, y se mantuvo a 25 °C. Una vez que se obtuvo la respuesta de flujo al estable, la muestra y la referencia después se calentaron hasta aproximadamente 250 °C a una velocidad de exploración de 10°C/min y la respuesta de flujo al calor resultante se monitoreó. Antes del análisis, el instrumento fue a la temperatura y se calibró el flujo de calor usando una referencia de Indio estándar. Se llevó a cabo en análisis de muestra por el software de medición Muse en donde las temperaturas de eventos térmicos son citados como la temperatura de inicio, se midió de conformidad con las especificaciones del fabricante.
Análisis Gravimétrico/Diferencial Térmico Termogravimétrico (TG/DTA) Se pesaron aproximadamente 5 mg de la muestra en una charola de aluminio y se cargó en un analizador término termogravimétrico/diferencial térmico simultáneamente (DTA) y se mantuvo a temperatura ambiente. Las muestras después se calentaron a una velocidad de 10°C/min a partir de 25 "C hasta 300 °C durante lo cual se monitoreó el tiempo de carga en el peso de muestra junto con cualquier evento térmico (DTA) . Se usó nitrógeno como el gas de purga, a una velocidad de flujo de 20 cm3/min. Antes del experimento el instrumento se pesó y se calibró la temperatura usando un peso de referencia de 100 mg y una referencia estándar de Indio, respectivamente.
Adsorción de Vapor Dinámica (DVS) Se colocaron aproximadamente 10 mg de muestra en una charola de balanza de adsorción de vapor de malla de alambre y se cargó en una balanza de adsorción de vapor dinámica DVS-1 proporcionada por Scientific and Medical Systems (SMS) . La muestra después se secó manteniendo un 0% de humedad ambiental hasta que no se registró cambio de peso adicional. La muestra entonces se sometió a un perfil incrementado de 0-90% de humedad relativa (RH) a 10% de incrementos, manteniendo la muestra en cada etapa hasta que se ha logrado un peso estable (99.5% de finalización de la etapa) . Después de la finalización del ciclo de adsorción, la muestra después se secó usando el mismo procedimiento. El cambio en peso durante los ciclos adsorción/desorción entonces se trazaron, permitiendo que la naturaleza higroscópica de la muestra sea determinada.
Resonancia Magnética Nuclear 1H (NMR) Se realizó la ¾ NMR en un Bruker AC200. Se realizó una NMR en cada muestra en d-H20 y cada muestra se preparó a aproximadamente 5 mg de concentración. Se proporcionaron los espectros de NMR para benzoato de L-ornitina y fenil acetato de L-ornitina en las FIGURAS 21 y 22, respectivamente.
Aproximaciones de Solubilidad Se colocaron, aproximadamente porciones de 25 mg de la muestra en viales, se agregaron 5 incrementos de volumen del solvente apropiado. Entre cada adición, la mezcla se verificó para disolución y si no hay disolución aparente, la mezcla se calienta a 50 °C, y se verifica nuevamente. El procedimiento se continuó hasta que se observó disolución o cuando se han agregado 100 volúmenes del solvente.
Determinaciones de Solubilidad por HPLC Se prepararon suspensiones de cada solvente y las muestras se agitaron por aproximadamente 48 horas a 25°C. Cada muestra entonces se extrajo a través de un filtro, y lo filtrado se transfirió a un vial de HPLC para análisis. A partir de los datos, se determinó la solubilidad de fenil acetato de L-ornitina para cada solvente.
Experimentos de Ciclización de Temperatura Usando la información reunida de las aproximaciones de solubilidad, se prepararon suspensiones de la muestra en 24 sistemas de solvente seleccionado. Las suspensiones están a temperatura de ciclización de 40°C o 25°C en ciclos de 4 horas por un periodo de 72 horas. Los sólidos se verificaron visualmente para cualquiera de los signos obvios de degradación (es decir, cambios de color) y después, si no se ha degradado, se aislan por filtración. Los sólidos después se dejaron secar a condiciones ambientales por aproximadamente 24 horas antes del análisis.
Experimentos de Enfriamiento Forzoso Se realizaron experimentos de enfriamiento forzado colocando soluciones saturadas de la muestra, en los 24 sistemas de solvente seleccionado, en ambientes de 4°C y -21°C por aproximadamente 48 horas. Se recuperó cualquier material sólido y los sólidos se dejaron secar en condiciones ambientales por aproximadamente 24 horas antes del análisis. Experimentos de Evaporación Se condujeron experimentos de evaporación permitiendo a las soluciones saturadas de la muestra evaporarse libremente en condiciones ambientales. El material sólido entonces se recuperó después que el material se ha evaporado a sequedad y se analizó.
Experimentos de Adición de Anti-solvente Se condujeron experimentos de adición anti-solvente agregando anti-solvente a las soluciones saturadas de la muestra. La adición se continuó hasta que no existe precipitación adicional u las muestras se ajustaron a varias temperaturas por 24 horas: elevada, ambiente, 4°C o -21°C. Lo sólido después se aisló y se secó en condiciones ambientales por aproximadamente 24 horas antes del análisis.
Microscopio de Luz Polarizada (PLM) Se determinó la presencia de cristalinidad (birrefringencia) usando un microscopio óptico polarizado Leica Leitz DMRB equipado con una cámara de alta resolución Leica y software de captura de imagen (Firecam V.1.0) . Todas las imágenes se registraron usando un objetivo lOx, a menos que se declare de otra forma.
Análisis de Plata Todos los análisis de plata se llevaron a cabo en un ICP-MS Agilent 7500ce.
Proporciones de Disolución Intrínsecas Se comprimió aproximadamente 100 mg de cada forma en discos colocando el material en un troquel (diámetro 12 mm) y se comprime el troquel bajo 5 toneladas de presión en una prensa hidráulica por aproximadamente 2 minutos . El instrumento de disolución, Sotax AT7 configura a EP2 y USP2 en las cuales se usan paletas para agitar la mezcla. Cada forma se probó bajo las siguientes condiciones de pH; 1.0, 4.5 y 6.7, en la forma de disco estacionario (es decir, los discos se agregan al tiempo = 0 segundos y se dejan hundirse al fondo del medio) . Se extrajeron alícuotas de 1 cm3 del medio de las ollas de disolución en los tiempos 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 y 120 segundos y se prueban para concentraciones de API por HPLC. Se trazaron curvas de disolución y a partir de los primeros 6 o 7 puntos en las curvas, se calcularon las curvas de proporción de disolución. Todas las pruebas se llevaron a cabo a 37 "C y una velocidad de paleta de 150 rpm.
Detalles del Instrumento UV HPLC Instrumento : Agilent 1200 Columna : Gemini C18, 5 pm, 150.0 x 4.6mm Temperatura de columna: 40°C Fase Móvil A: Amortiguador de Fosfato Fase Móvil B: Acetonitrilo Elución : Gradiente ?: 210 nm Volumen de inyección: 10 µ? Velocidad de Flujo: 1 ml/min Cromatografía de Capa Delgada (TLC) Se aplicó una mancha pequeña de solución que contiene la muestra a una placa, a aproximadamente un centímetro de la base. La placa después se sumergió en el tanque de TLC (contenedor sellado) que contiene mezcla de solvente metanol : acetato de etilo (95:5) . El solvente se movió hacia la placa por acción de capilaridad y cubrió la mezcla de muestra, la cual se disolvió y se llevó hasta la placa por la mezcla de solvente. Se señaló el número de manchas y se calcularon los valores Rf para cada mancha.
Infrarrojo (IR) Se llevó a cabo la espectroscopia infrarroja en un espectrómetro Bruker ALPHA P. Se colocó suficiente material en el centro de la placa del espectrómetro y se obtuvieron los espectros usando los siguientes parámetros Resolución: 4 cm-1 Tiempo de Exploración Fondo: 16 exploraciones Tiempo de Exploración de Muestra: 16 exploraciones Recolección de Datos: 4000 hasta 400 cm-1 Espectro de Resultado: Transmitancia Software: OPUS versión 6 Estudios de Estabilidades; pH 1, 4, 7, 10 y 14 Ambientales Se prepararon suspensiones (solución supersaturada: se agregaron aproximadamente 250 µ? de solución de pH y sólido hasta que no se observó más disolución y ca. 100 mg de sólido) para cada forma en una variedad de pH ambientales; 1, 4, 7, 10 y 13.2. Las suspensiones se agitaron constantemente por un periodo de 14 días y se tomaron medidas en los puntos de tiempo 7 y 14 días. Se prepararon amortiguadores apropiados para cada pH y se detalla adicionalmente abajo.
Se preparó un amortiguador que tiene un valor de pH 1 disolviendo 372.75 mg de cloruro de potasio en 25 mi de agua desionizada para dar una solución 0.2M. Subsecuentemente, se agregó 67 mi de ácido clorhídrico 0.2 M (este se preparó de una solución 5 M; se agregó 10 mi a 40 mi de agua desionizada dando una solución 1 M la cual se diluyó adicionalmente; se agregó 20 mi a 80 mi de agua desionizada dando la solución 0.2 M requerida) para lograr el pH deseada.
Se preparó un amortiguador que tiene un valor pH de 4 disolviendo 1.02 g de ftalato hidrógeno de potasio en 50 mi de agua desionizada para dar una solución 0.1 M.
Se preparó un amortiguador que contiene un valor pH de 7 disolviendo 680.00 mg de fosfato de potasio monobásico en 50 mi de agua desionizada para dar una solución 0.1 M. Subsecuentemente, se agregó 29.1 mi de hidróxido de sodio 0.1 (este se preparó de una solución 1 M; se agregó 5 mi a 45 mi de agua desionizada dando la solución a 0.1 M requerida) para lograr el pH deseado.
Se preparó un amortiguador que tiene un valor pH de 10 disolviendo 210.00 mg de bicarbonato de sodio en 50 mi de agua desionizada para dar una solución 0.05 M. Subsecuentemente, se agregó 10.7 mi de hidróxido de sodio 0.1 M (este se preparó de una solución 1 M; se agregó 5 mi a 45 mi de agua desionizada dando la solución a 0.1 M requerida) para lograr el pH deseado.
Un amortiguador que tiene un valor pH de 13.2 disolviendo 372.75 mg de cloruro de potasio en 25 mi de agua desionizada para dar una solución 0.2 M. Subsecuentemente, se agregó 66 mi de hidróxido de sodio 0.2 M (este se preparó de una solución 1 M; se agregó 20 mi a 80 mi de agua desionizada dando la solución a 0.2 M requerida) tomando el pH a 13. Entonces se agregó por goteo hidróxido de sodio 1 M para lograr el pH deseado .
Ejemplo 1: Preci itación de Formas Cristalinas Se sometieron soluciones estándar de fenil acetato de L-ornitina a ciclización de temperatura, enfriamiento forzado, evaporación o adición de antisolvente como se describió anteriormente. Lo precipitado se analizó por PLM y XRPD para determinar la forma cristalina (si la hay) . Los resultados se resumieron en la TABLA 5.
Se identificaron seis únicas formas cristalinas de los estudios de precipitación, Formas I-VI. Sin embargo, las Formas IV y VI se obtuvieron de soluciones de ácido acético, y los resultados NMR confirmaron estas formas por ser acetato de L-ornitina. Mientras tanto, las Pruebas 540-611 utilizan muestras de fenil acetato de L-ornitina originalmente aislado por la adición de ant i - solvente de etanol. Muchos de estos ejemplos producen la Forma I, la cual es un solvato de etanol, y por lo tanto se cree que estas muestras originalmente incluyen etanol residual. Consecuentemente, la Forma I no puede ser reproducida por ciertas condiciones si la muestra original no incluye etanol residual.
TABLA 5 - Ejemplos de Preparación de Formas Cristalinas Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 1 Temp. de Ciclización ciclohexanona Forma II 2 Enfriamiento Controlado ciclohexanona No Sólido 3 Enf iamiento ciclohexanona Forma V Controlado Í-21°C) 4 Evaporación ciclohexanona Forma V 5 Adición de Anti-solvente cic1ohexanona No Sólido (IPA) a Temperatura Elevada 6 Adición de Anti-solvente ciclohexanona Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 7 Adición de Anti-solvente ciclohexanona Forma II (IPA) (4°C) 8 Adición de Anti-solvente ciclohexanona Forma II (IPA) Í-21°C) 9 Adición de anti-solvente ciclohexanona Forma II (Etanol) a Temperatura Ambiente 10 Adición de Anti-solvente ciclohexanona Forma I (Etanol) (4°C) 11 Adición de Anti-solvente ciclohexanona Forma I (Etanol) (-21 °C) 12 Temp. de Ciclización Etanol/acetona Forma II (50 -50) 13 Enfriamiento Controlado Etanol/acetona No Sólido (4°C) (50:50) 14 Enfriamiento Controlado Etanol/acetona Forma III (-21 °C) (50 :50) 15 Evaporación Etanol/acetona Forma II (50:50) 16 Adición de Anti-solvente Etanol/acetona Forma II (IPA) a Temperatura (50 :50) El pvarfa 17 Adición de Anti-solvente Etanol/acetona Forma II (IPA) a Temperatura (50 :50) Airih-i pnt- p 18 Adición de Anti-solvente Etanol/acetona Forma II (IPA) (4°C) (50 :50) 19 Adición de Anti-solvente Etanol/acetona Forma II (IPA) (-21°C) (50 : 50) 20 Adición de Anti-solvente Etanol/acetona Forma II (Etanol) a Temperatura (50 :50) Ambiente 21 Adición de Anti-solvente Etanol/acetona Forma I (Etanol) (4°C) (50 :50) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 22 Adición de Anti-solvente Etanol/acetona Forma I (Etanol) (-21 °C) (50:50) 23 Temp. de Ciclización Ácido acético Forma IV 24 Enfriamiento Controlado Ácido acético No Sólido (4°C) 25 Enfriamiento Controlado Ácido acético No Sólido (-21 °C) 26 Evaporación Ácido acético Forma II 27 Adición de Anti-solvente Ácido acético Forma VI (IPA) a Temperatura Fl pvarta 28 Adición de Anti-solvente Ácido acético Forma IV (IPA) a Temperatura Ambiente 29 Adición de Anti-solvente Ácido acético Forma IV (IPA) (4°C) 30 Adición de Anti-solvente Ácido acético Forma IV (IPA) (-21 °C) 31 Adición de anti-solvente Ácido acético Forma IV (Etanol) a Temperatura Amhi pnt-p 32 Adición de Anti-solvente Ácido acético Forma IV (Etanol) (4°C) 33 Adición de Anti-solvente Ácido acético Forma IV (Etanol) (-21 °C) 34 Temp. de Ciclización 1-propanol Forma II 35 Enfriamiento Controlado 1-propanol Forma II (40G 36 Enfriamiento Controlado 1-propanol Forma II l - i orí 37 Evaporación 1-propanol Forma II 38 Adición de Anti-solvente 1-propanol Forma II (IPA) a Temperatura 39 Adición de Anti-solvente 1 -propanol Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 40 Adición de Anti-solvente 1-propanol Forma II (IPA) (4°C) 41 Adición de Anti-solvente 1-propanol Forma II (IPA) (-21°C) 42 Adición de anti-solvente 1-propanol Forma II (Etanol) a Temperatura Ambiente 43 Adición de Anti-solvente 1-propanol Forma I/II (Etanol) (4°C) 44 Adición de Anti-solvente 1-propanol Forma I (Etanol) (-21 °C) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 45 Temp. de Ciclización dimetilcarbonato Forma II 46 Enfriamiento Controlado dimetilcarbonato No Sólido (4°C) 47 Enfriamiento Controlado dimetilcarbonato Forma II (-21 »C) 48 Evaporación dimetilcarbonato Forma II 49 Adición de Anti- solvente dimetilcarbonato Forma II (IPA) a Temperatura El ovarla 50 Adición de Anti- solvente dimetilcarbonato Forma II (IPA) a Temperatura Ambi e.n e 51 Adición de Anti- solvente dimetilcarbonato Forma II (IPA) (4°C) 52 Adición de Anti- solvente dimetilcarbonato Forma II (IPA) (-21°C) 53 Adición de Anti- solvente dimetilcarbonato Forma II (Etanol) a Temperatura Amhi ente 54 Adición de Anti- solvente dimetilcarbonato Forma I (Etanol) (4°C) 55 Adición de Anti- solvente dimetilcarbonato Forma II (Etanol) (-21 °C) 56 , Temp. de Ciclización NMP Forma II 57 Enfriamiento Controlado NMP Forma II (4°C) 58 Enfriamiento Controlado NMP Forma II (-21 °C) 59 Evaporación NMP Forma II 60 Adición de Anti- solvente NMP Forma II (IPA) a Temperatura El ? ???? 61 Adición de Anti-solvente NMP Forma II (IPA) a Temperatura Amhi en e 62 Adición de Anti-solvente NMP Forma II (IPA) (4°C) 63 Adición de Anti-solvente NMP Forma II (IPA) (-21°C) 64 Adición de Anti-solvente NMP Forma II (Etanol) a Temperatura Amhi Rnt-.p 65 Adición de Anti-solvente NMP Forma I/II (Etanol) (4°C) 66 Adición de Anti-solvente NMP Forma II (Etanol) (-21 °C) 67 Temp. de Ciclización EtOAc/ciclohexano Forma II (1:2) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 68 Enfriamiento Controlado EtOAc/ciclohexano No Sólido (4°C) (1:2) 69 Enfriamiento Controlado EtOAc/ciclohexano No Sólido (-21°C) (1:2) 70 Evaporación EtOAc/ cic1ohexano Forma II (1:2) 71 Adición de Anti-solvente etOAc/ cic1ohexano Forma II (IPA) a Temperatura (1:2) Elevada 72 Adición de Anti-solvente etOAc/ciclohexano Forma II (IPA) a Temperatura (1:2) Amhi Pti f.p 73 Adición de Anti-solvente etOAc/ciclohexano Forma II ( T PA ) (4°C.) (1 :7) 74 Adición de Anti-solvente etOAc/cic1ohexano Forma II (IPA) (-21°C) (1:2) 75 Adición de Anti-solvente etOAc/cic1ohexano Forma II (Etanol) a Temperatura (1:2) Ambiente 76 Adición de Anti-solvente etOAc/ciclohexano Forma I (Etanol) (4°C) (1:2) 77 Adición de Anti-solvente etOAc / ciclohexano Forma I/II (Etanol) (-21 °C) (1:2) 78 Temp. de Ciclización etOAc/tolueno Forma II (1:2) 79 Enfriamiento Controlado etOAc/tolueno No Sólido (4°C) (1:2) 80 Enfriamiento Controlado etOAc/ tolueno Forma II (-21°C) (1:2) 81 Evaporación etOAc/tolueno (1 : 2) Forma II 82 Adición de Anti-solvente etOAc/tolueno Forma II (IPA) a Temperatura (1:2) Elevada 83 Adición de Anti-solvente etOAc/tolueno Forma II (IPA) a Temperatura (1:2) Amhi en t- p 84 Adición de Anti-solvente etOAc/tolueno Forma II (IPA) (4'C) (1:2) 85 Adición de Anti-solvente etOAc /tolueno Forma II (IPA) (-21°C) (1:2) 86 Adición de anti-solvente etOAc/tolueno Forma II (Etanol) a Temperatura (1:2) Amhi p.nhp 87 Adición de Anti-solvente etOAc/tolueno Forma I (Etanol) (4°C) (1:2) 88 Adición de Anti-solvente etOAc/tolueno Forma II (Etanol) (-21 °C) (1:2) 89 Temp. de Ciclización IPA/éter Forma II diisopropí lico (1:2) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 90 Enf iamiento Controlado IPA/éter Forma V (4°C) diisopropílico (1:2) 91 Enfriamiento Controlado IPA/éter Forma II (-21 °C) diisopropílico (1:2) 92 Evaporación IPA/éter Forma II diisopropílico (1:2) 93 Adición de Anti-solvente IPA/éter Forma II (IPA) a Temperatura diisopropílico Elevada (1:2) 94 Adición de Anti-solvente IPA/éter Forma II (IPA) a Temperatura diisopropílico Amhi enre M : 7. ) 95 Adición de Anti-solvente IPA/éter Forma II (IPA) (4°C) diisopropílico (1:2) 96 Adición de Anti-solvente IPA/éter Forma II (IPA) (-21°C) diisopropílico (1:2) 97 Adición de anti-solvente IPA/éter Forma II (Etanol) a Temperatura diisopropílico Ambiente (1:2) 98 Adición de Anti-solvente IPA/éter Forma I (Etanol) (4°C) diisopropílico (1:2) 99 Adición de Anti-solvente IPA/éter Forma I/II (Etanol) (-21 °C) diisopropílico (1:2) 100 Temp . de Ciclización DIPE Forma II 101 Enfriamiento Controlado DIPE No Sólido (4°C) 102 Enfriamiento Controlado DIPE Forma V (-21 °C) 103 Evaporación DIPE Forma II 104 Adición de Anti-solvente DIPE Forma II (IPA) a Temperatura Elevada 105 Adición de Anti-solvente DIPE Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 106 Anti-Solvente (IPA) DIPE Forma II Adición (4°C) 107 Adición de Anti-solvente DIPE Forma II (IPA) (-21°C) 108 Adición de anti-solvente DIPE Forma II (Etanol) a Temperatura Ambiente Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 109 Adición de Anti-solvente DIPE Forma I (Etanol) (4°C) 110 Adición de Anti-solvente DIPE Forma II (Etanol) (-21 °C) 111 Temp. de Ciclización nitrometano/agua No Sólido (20%) 112 Enf iamiento Controlado nitrometano/agua No Sólido (4°C) (20%) 113 Enfriamiento Controlado nitrometano/agua No Sólido (-21 °C) (20%) 114 Evaporación nitrometano/agua Forma II (20%) 115 Adición de Anti-solvente nitrometano/agua No Sólido (IPA) a Temperatura (20%) Rl pvaria 116 Adición de Anti-solvente nitrometano/agua Forma II (IPA) a Temperatura (20%) Ambiente 117 Adición de Anti-solvente nitrometano/agua Forma II (IPA) (4°C) (20%) 118 Adición de Anti-solvente nitrometano/agua Forma II (IPA) Í-21°C) (20%) 119 Adición de anti-solvente nitrometano/agua Forma II (Etanol) a Temperatura (20%) Ambiente 120 Adición de Anti-solvente nitrometano/agua Forma I (Etanol) (4°C) (20%) 121 Adición de Anti-solvente nitrometano/agua Forma I/II (Etanol) (-21 °C) (20%) 122 Temp. de Ciclización acetona/agua (20%) No Sólido 123 Enfriamiento Controlado acetona/agua (20%) Forma II (4° ) 124 Enfriamiento Controlado acetona/agua (20%) Forma II (-21 °c) 125 Evaporación acetona/agua (20%) Forma II 126 Adición de Anti-solvente acetona/agua (20%) Forma II (IPA) a Temperatura Elevada 127 Adición de Anti-solvente acetona/agua (20%) Forma II (IPA) a Temperatura Amhi ente 128 Adición de Anti-solvente acetona/agua (20%) Forma II (IPA) (4°C) 129 Adición de Anti-solvente acetona/agua (20%) Forma II (IPA) (-21°c) 130 Adición de anti-solvente acetona/agua (20%) Forma II (Etanol) a Temperatura Ambiente 131 Adición de Anti-solvente acetona/agua (20%) Forma I (Etanol) (4°C) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 132 Adición de Anti-solvente acetona/agua (20%) Forma II (Etanol) (-21 °C) 133 Temp. de Ciclización 1 , 4 dioxano/agua Forma II (20%) 134 Enfriamiento Controlado 1,4 dioxano/agua Forma II (4°C) (20%) 135 Enfriamiento Controlado 1,4 dioxano/agua No Sólido Í-21°C) (20%) 136 Evaporación 1,4 dioxano/agua Forma II (20%) 137 Adición de Anti-solvente 1,4 dioxano/agua Forma II (IPA) a Temperatura (20%) Kl evsrla 138 Adición de Anti-solvente 1,4 dioxano/agua Forma II (IPA) a Temperatura (20%) Ambiente 139 Adición de Anti-solvente 1 , 4 dioxano/agua Forma II (IPA) (4°C) (20%) 140 Adición de Anti-solvente 1 , dioxano/agua Forma II (TPA) (-21°C) (20%) 1 1 Adición de anti-solvente 1 , 4 dioxano/agua Forma II (Etanol) a Temperatura (20%) Ambiente 142 Adición de Anti-solvente 1 , 4 dioxano/agua Forma I (Etanol) (4°C) (20%) 143 Adición de Anti-solvente 1,4 dioxano/agua Forma II (Etanol) (-21 °C) (20%) 144 Temp. de Ciclización éter dietilico Forma II 145 Enfriamiento Controlado éter dietilico No Sólido (4°C) 146 Enfriamiento Controlado éter dietilico No Sólido í-21 °G 147 Evaporación éter dietilico Forma II 148 Adición de Anti-solvente éter dietilico Forma II (IPA) a Temperatura Elevada 149 Adición de Anti-solvente éter dietilico Forma II (IPA) a Temperatura AmhH pnt-p 150 Adición de Anti-solvente éter dietilico Forma II ( TPA ) Í4°C) 151 Adición de Anti-solvente éter dietilico Forma II (IPA) Í-21°C) 152 Adición de anti-solvente éter dietilico Forma II (Etanol) a Temperatura Ambiente 153 Adición de Anti-solvente éter dietilico Forma I (Etanol) (4°C) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 154 Adición de Anti-solvente éter dietílico Forma I/II (Etanol) (-21 °C) 155 Temp. de Ciclización etilen glicol Forma II 156 Enfriamiento Controlado etilen glicol No Sólido (4°C) 157 Enfriamiento Controlado etilen glicol No Sólido (-21 °C) 158 Evaporación etilen glicol No Sólido 159 Adición de Anti-solvente etilen glicol Forma II (IPA) a Temperatura Elevada 160 Adición de Anti-solvente etilen glicol Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 161 Adición de Anti-solvente etilen glicol Forma II (IPA) (4°C) 162 Adición de Anti-solvente etilen glicol Forma II (IPA) f-21°C) 163 Adición de anti-solvente etilen glicol Forma II (Etanol) a Temperatura Ambiente 164 Adición de Anti-solvente etilen glicol Forma II (Etanol) (4°C) 165 Adición de Anti-solvente etilen glicol Forma II (Etanol) (-21°C) 166 Temp. de Ciclización meOAc/agua (20%) No Sólido 167 Enfriamiento Controlado meOAc/agua (20%) No Sólido (4°C) 168 Enfriamiento Controlado meOAc/agua (20%) No Sólido (-21°C) 169 Evaporación meOAc/agua (20%) Forma II 170 Adición de Anti-solvente meOAc/agua (20%) Forma II (IPA) a Temperatura 171 Adición de Anti-solvente meOAc/agua (20%)' Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 172 Adición de Anti-solvente meOAc/agua (20%) Forma II (IPA) (4°C) 173 Adición de Anti-solvente meOAc/agua (20%) Forma II (IPA) (-21°C) 174 Adición de anti-solvente meOAc/agua (20%) Forma II (Etanol) a Temperatura Ambiente 175 Adición de Anti-solvente meOAc/agua (20%) Forma I/II (Etanol) (4°C) 176 Adición de Anti-solvente meOAc/agua (20%) Forma II (Etanol) (-21 °C) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 177 Temp. de Ciclización meOH/acetona Forma II (50 :50 178 Enfriamiento Controlado meOH/acetona No Sólido (4°C) (50 :50) 179 Enfriamiento Controlado meOH/acetona No Sólido (-21 °C) (50 :50) 180 Evaporación meOH/acetona Forma II (50 :50) 181 Adición de Anti-solvente meOH/acetona Forma II (IPA) a Temperatura (50 : 50) El evada 182 Adición de Anti-solvente meOH/acetona Forma II (IPA) a Temperatura (50 :50) Ambiente 183 Adición de Anti-solvente meOH/acetona Forma II (IPA) (4°C) (50:50) 184 Adición de Anti-solvente meOH/acetona Forma II (IPA) (-21°C) (50 :50) 185 Adición de anti-solvente meOH/acetona Forma II (Etanol) a Temperatura (50 :50) Ambiente 186 Adición de Anti-solvente meOH/acetona Forma I (Etanol) (4°C) (50 : 50) 187 Adición de Anti-solvente meOH/acetona Forma I/II (Etanol) (-21 °C) (50:50) 188 Temp. de Ciclización DMF Forma II 189 Enfriamiento Controlado DMF Forma II (4°C) 190 Enfriamiento DMF Forma II Controlado (-21°C) 191 Evaporación DMF Forma II 192 Adición de Anti-solvente DMF Forma II (IPA) a Temperatura El pvaris 193 Adición de Anti-solvente DMF Forma II (IPA) a Temperatura Amhi ente 194 Adición de Anti-solvente DMF Forma II (IPA) (4°C) 195 Adición de Anti-solvente DMF Forma II (IPA) (-21'C) 196 Adición de anti-solvente DMF Forma II (Etanol) a Temperatura Amhi pnrp 197 Adición de Anti-solvente DMF Forma I/II (Etanol) (4°C) 198 Adición de Anti-solvente DMF Forma II (Etanol) (-21 °C) 199 Temp. de Ciclización 2 -butano1 Forma II Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 200 Enfriamiento Controlado 2-butanol No Sólido (4°C) 201 Enf iamiento 2-butanol No Sólido Controlado (-21°C) 202 Evaporación 2-butanol Forma II 203 Adición de Anti-solvente 2-butanol Forma III (IPA) a Temperatura El p arfa 204 Adición de Anti-solvente 2 -butanol Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 205 Adición de Anti-solvente -butanol Forma II (IPA) (4°C) 206 Adición de Anti-solvente 2-butanol Forma II (IPA) (-21°C) 207 Adición de anti-solvente 2-butanol Forma II (Etanol) a Temperatura Ambiente 208 Adición de Anti-solvente 2-butanol Forma I/II (Etanol) (4°C) 209 Adición de Anti-solvente 2-butanol Forma I/II (Etannl ) (-21 °C) 210 Temp. de Ciclización eumeno Forma II 211 Enfriamiento Controlado eumeno No Sólido (4°C) 212 Enfriamiento Controlado eumeno No Sólido Í-P.l ° ) 213 Evaporación eumeno Forma II 214 Adición de Anti-solvente eumeno Forma II (IPA) a Temperatura Elevada 215 Adición de Anti-solvente eumeno Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 216 Adición de Anti-solvente eumeno Forma II (IPA) (4°C) 217 Adición de Anti-solvente eumeno Forma II (IPA) (-21°C) 218 Adición de anti-solvente eumeno Forma II (Etanol) a Temperatura Amhi snf.p 219 Adición de Anti-solvente eumeno Forma II (Etanol) (4°C) 220 Adición de Anti-solvente eumeno Forma I/II (Etanol) (-21 °C.) . 221 Temp. de Ciclización formiato de etilo Forma II 222 Enf iamiento Controlado formiato de etilo No Sólido (4°C) 223 Enfriamiento Controlado formiato de etilo Forma II (-21 °C) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 224 Evaporación formiato de etilo Forma II 225 Adición de Anti- solvente formiato de etilo Forma II (IPA) a Temperatura Elevada 226 Adición de Anti-solvente formiato de etilo Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 227 Adición de Anti-solvente formiato de etilo Forma II (IPA) (4°C) 228 Adición de Anti-solvente formiato de etilo Forma II ÍTPA) (-21°C) 229 Adición de anti-solvente formiato de etilo Forma II (Etanol) a Temperatura Amhi pnt- p 230 Adición de Anti-solvente formiato de etilo Forma I (Etanol) (4°C) 231 Adición de Anti-solvente formiato de etilo Forma I/II (Etanol) (-21 ° ) 232 Tem . de Ciclización acetato de Forma II 233 Enfriamiento Controlado acetato de No Sólido (4°C) isobutilo 234 Enfriamiento Controlado acetato de Forma II (-21 °C) isobutilo 235 Evaporación acetato de No Sólido i Rnhu i 1 o 236 Adición de Anti-solvente acetato de Forma II (IPA) a Temperatura isobutilo rci p a tia 237 Adición de Anti-solvente acetato de Forma II (IPA) a Temperatura isobutilo Ambiente 238 Adición de Anti-solvente acetato de Forma II (IPA) (4°C) isobutilo 239 Adición de Anti-solvente acetato de Forma III (IPA) (-21°C) isobutilo 240 Adición de anti-solvente acetato de Forma II (Etanol) a Temperatura isobutilo Ambiente 241 Adición de Anti-solvente acetato de Forma II (Etanol) (4°C) isobu ilo . 242 Adición de Anti-solvente acetato de Forma I/II (Etanol) (-21 °C) isobutilo 243 Temp. de Ciclización 3 -metil - 1-butanol Forma II 244 Enfriamiento Controlado 3 -metil -1-butanol No Sólido (4°C) 245 Enfriamiento Controlado 3 -metil-l-butanol No Sólido (-21 °C) 246 Evaporación 3-metil-l- butanol Forma II Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 247 Adición de Anti-solvente 3 -metil- l-butanol Forma II (IPA) a Temperatura Elevada 248 Adición de Anti-solvente 3 -metil- l-butanol Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 249 Adición de Anti-Solvente 3 -metil-l-butanol Forma II (IPA) (4°C) 250 Adición de Anti-solvente 3 -metil-l-butanol Forma II (IPA) (-21°C) 251 Adición de anti-solvente 3 -metil-l-butanol Forma II (Etanol) a Temperatura Amhi pn t- p 252 Adición de Anti-solvente 3 -metil-l-butanol Forma I/II (Etanol) (4°C 253 Adición de Anti-solvente 3 -metil -l-butanol Forma I/II (Etanol) (-21 °C) 254 Tem . de Ciclización anisol Forma II 255 Enfriamiento Controlado anisol No Sólido Í4°C) 256 Enfriamiento Controlado anisol Forma II (-21 °C) 257 Evaporación anisol Forma II 258 Adición de Anti-solvente anisol Forma II (IPA) a Temperatura F l p ra da 259 Adición de Anti-solvente anisol Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 260 Adición de Anti-solvente anisol Forma II (IPA) (4°C) 261 Adición de Anti-solvente anisol Forma 11/IV (IPA) (-21°C) 262 Adición de anti-solvente anisol Forma II (Etanol) a Temperatura Ambiente 263 Adición de Anti-solvente anisol Forma II (Etanol) (4°C) 264 Adición de Anti-solvente anisol Forma I (Etanol) (-21 °C) 265 Temp. de Ciclización IPA/acetato de Forma II isopropilo (1:2) 266 Enfriamiento Controlado IPA/acetato de No Sólido (4°C) isopropilo (1:2) 267 Enfriamiento Controlado IPA/acetato de No Sólido (-21°C) isopropilo (1:2) 268 Evaporación IPA/acetato de Forma II isopropilo (1:2) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 269 Adición de Anti-solvente ???/acetato de Forma II (IPA) a Temperatura isopropilo (1:2) Elevada 270 Adición de Anti-solvente IPA/acetato de Forma II (IPA) a Temperatura isopropilo (1:2) Ambiente 271 Adición de Anti-solvente IPA/acetato de Forma II (IPA) (4°C) isopropilo (1:2) 272 Adición de Anti-solvente IPA/acetato de Forma II (IPA) (-21°C) isopropilo (1:2) 273 Adición de anti-solvente IPA/acetato de Forma II (Etanol) a Temperatura isopropilo (1:2) Ambiente 274 Adición de Anti-solvente IPA/acetato de Forma II (Etanol (4°C) ? snnrnni 1n (1:5) 275 Adición de Anti-solvente IPA/acetato de Forma I (Etanol) (-21°C) isopropilo (1:2) 276 Temp. de Ciclización EtOH: H20 al 1% Forma II 277 Enfriamiento Controlado EtOH: H20 al 1% No Sólido (? G) 278 Enfriamiento Controlado EtOH:H20 al 1% No Sólido (-21 °C) 279 Evaporación¦ EtOH: H20 al 1% No Sólido 280 Adición de Anti-solvente EtOH: H20 al 1% No Sólido (IPA) a Temperatura Elevada 281 Adición de Anti-solvente EtOH:H20 al 1% No Sólido (IPA) a Temperatura Amhi pnt-p 282 Adición de Anti-solvente EtOH:H20 al 1% No Sólido (IPA) (4°C) 283 Adición de Anti-solvente EtOH:H20 al 1% No Sólido (IPA) (-21°C) 284 Adición de anti-solvente EtOH:H20 al 1% No Sólido (Etanol) a Temperatura Ambiente 285 Adición de Anti-solvente EtOH: H20 al 1% No Sólido (Etanol) (4°C) 286 Adición de Anti-solvente EtOH:H20 al 1% No Sólido (Etanol) (-21°C) 287 Temp. de Ciclización EtOH: H20 al 3% Forma II 288 Enfriamiento Controlado EtOH: H20 al 3% No Sólido (4°C) 289 Enfriamiento Controlado EtOH: H20 al 3% No Sólido (-21 °C) 290 Evaporación EtOH:H2Q al 3% No Sólido Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 291 Adición de Anti-solvente EtOH: H20 al 3% No Sólido (IPA) a Temperatura El ada 292 Adición de Anti-solvente EtOH: H20 al 3% No Sólido (IPA) a Temperatura Amh-i pnl-p 293 Adición de Anti-solvente EtOH:H20 al 3% No Sólido (IPA) (4°C) 294 Adición de Anti-solvente EtOH: H20 al 3% No Sólido (IPA) Í-21°C) 295 Adición de anti-solvente EtOH: H20 al 3% No Sólido (Etanol) a Temperatura Ambiente 296 Adición de Anti-solvente EtOH: H20 al 3% No Sólido (Etanol) (4°C) 297 Adición de Anti-solvente EtOH: H20 al 3% No Sólido (Etanol ) (-21 °C) 298 Temp. de Ciclización EtOH: H20 al 5% Forma II 299 Enfriamiento Controlado EtOH: H20 al 5% No Sólido (4°r) 300 Enfriamiento Controlado EtOH: H20 al 5% No Sólido (-21 °C) 301 Evaporación EtOH: H20 al 5% Forma II 302 Adición de Anti-solvente EtOH:H20 al 5% No Sólido (IPA) a Temperatura El pvaña 303 Adición de Anti-solvente EtOH: H20 al 5% Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 304 Adición de Anti-solvente EtOH: H20 al 5% No Sólido (IPA) (4'C) 305 Adición de Anti-solvente EtOH: H20 al 5% No Sólido (IPA) Í-21°C) 306 Adición de Anti-solvente EtOH: ?2? al 5% No Sólido (Etanol) a Temperatura Ambiente 307 Adición de Anti-solvente EtOH: H20 al 5% No Sólido (Etanol) (4°C) 308 Adición de Anti-solvente EtOH: H20 al 5% No Sólido (Etanol ) (-21 °C) 309 Temp. de Ciclización IPA: H20 al 1% Forma II 310 Enfriamiento Controlado IPA: H20 al 1% No Sólido (4°C) 311 Enfriamiento Controlado IPA: H20 al 1% No Sólido (-21 °C) 312 Evaporación IPA: HjO al 1% No Sólido 313 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 1% No Sólido (IPA) a Temperatura Elevada Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 314 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 1% No Sólido (IPA) a Temperatura 315 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 1% No Sólido (TPA) (4°C.) 316 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 1% No Sólido (TPA) (-21'C) 317 Adición de anti-solvente IPA: H20 al 1% No Sólido (Etanol) a Temperatura Amhi pntp 318 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 1% No Sólido (Etanol) (4°C) 319 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 1% No sólido (Etanol) (-21 °C) 320 Temp. de Ciclización IPA: H20 al 3% Forma II 321 Enfriamiento Controlado IPA: H20 al 3% No Sólido ??.?G? 322 Enfriamiento Controlado IPA: H20 al 3% No Sólido (-21 °C) 323 Evaporación IPA: H20 al 3% No Sólido 324 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 3% No Sólido (IPA) a Temperatura El aHa 325 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 3% No Sólido (IPA) a Temperatura Ambiente 326 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 3% No Sólido (IPA) (4°C) 327 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 3% No Sólido (IPA) (-21T.) 328 Adición de anti-solvente IPA: H20 al 3% No Sólido (Etanol) a Temperatura Amhi pntp 329 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 3% No Sólido (Etanol) Í4°C) 330 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 3% No Sólido (Etanol) (-21 °c) 331 Temp. de Ciclización IPA: H20 al 5% Forma II 332 Enfriamiento Controlado IPA: H20 al 5% No Sólido (4°0) 333 Enfriamiento Controlado IPA: H20 al 5% No Sólido (-7? °r) 334 Evaporación IPA: H20 al 5% Forma II 335 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 5% No Sólido (IPA) a Temperatura Elevada 336 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 5% No Sólido (IPA) a Temperatura Ambiente 337 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 5% No Sólido (IPA) (4°C) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 338 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 5% No Sólido (IPA) (-21-C) 339 Adición de anti-solvente IPA: H20 al 5% No Sólido (Etanol) a Temperatura Aimh-í pri1 340 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 5% No Sólido (Etanol) (4°C) 341 Adición de Anti-solvente IPA: H20 al 5% No Sólido (Etanol) (-21 °C) 342 Temp. de Ciclización AC : H20 al 1% Forma II 343 Enfriamiento Controlado ACN:H20 al 1% No Sólido (4°C) 344 Enfriamiento Controlado ACN:H20 al 1% No Sólido (-21°C) 345 Evaporación ACN:H20 al 1% Forma II 346 Adición de Anti-solvente ACN:H20 al 1% No Sólido (IPA) a Temperatura El pvaiia 347 Adición de Anti-solvente ACN:H20 al 1% No Sólido (IPA) a Temperatura Amhi pntp 348 Adición de Anti-solvente ACN:H20 al 1% No Sólido ( TPA) (4°r) 349 Adición de Anti-solvente ACN: H20 al 1% No Sólido (IPA) Í-21°C) 350 Adición de anti-solvente ACN:H20 al 1% No Sólido (Etanol) a Temperatura Amhi pnt.fi 351 Adición de Anti-solvente ACN:H20 al 1% No Sólido (Etanol) (4°C) 352 Adición de Anti-solvente ACN: H20 al 1% No Sólido (Etanol ) (-21 °C) 353 Temp. de Ciclización ACN: H20 al 6% Forma II 354 Enfriamiento Controlado ACN: H20 al 6% No Sólido (4°C) 355 Enfriamiento Controlado ACN: H20 al 6% No Sólido (-21 °C) 356 Evaporación ACN: H20 al 6% Forma II 357 Adición de Anti-solvente ACN: H20 al 6% No Sólido (IPA) a Temperatura El pvaria 358 Adición de Anti-solvente ACN: H20 al 6% No Sólido (IPA) a Temperatura Amhi pnf p 359 Adición de Anti-solvente AC : H20 al 6% No Sólido ( TPA ) (4°C) 360 Adición de Anti-solvente ACN: H20 al 6% No Sólido (IPA) Í-21°C) 361 Adición de anti-solvente ACN: H20 al 6% No Sólido (Etanol) a Temperatura Ambiente Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 362 Adición de Anti- solvente ACN: H20 al 6% No Sólido (Etanol) (4°C) 363 Adición de Anti-solvente ACN: H20 al 6% No Sólido (Etanol) (-21 °C) 364 Temp. de Ciclización ACN: H20 al 12% No Sólido 365 Enfriamiento Controlado ACN: H20 al 12% No Sólido (4°C) 366 Enfriamiento Controlado ACN: H20 al 12% No Sólido (-21 °C) 367 Evaporación ACN: H20 al 12% Forma II 368 Adición de Anti-solvente ACN: H20 al 12% No Sólido (IPA) a Temperatura 369 Adición de Anti-solvente ACN: H20 al 12% Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 370 Adición de Anti-solvente ACN: H20 al 12% No Sólido (IPA) (4°C) 371 Anti-Solvente (IPA) ACN: H20 al 12% Forma II Adición (-21°C) 372 Adición de anti-solvente ACN: H20 al 12% No Sólido (Etanol) a Temperatura ZVmhi pnfp 373 Adición de Anti-solvente ACN: H20 al 12% No Sólido (Etanol) (4°C) 374 Adición de Anti-solvente ACN: H20 al 12% No Sólido (Etanol) (-21 °C) 375 Temp. de Ciclización DMF: H20 al 5% Forma II 376 Enfriamiento Controlado DMF: H20 al 5% No Sólido (4°C) 377 Enfriamiento Controlado DMF: H20 al 5% No Sólido (-21 °C) 378 Evaporación DMF: H20 al 5% No Sólido 379 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 5% No Sólido (IPA) a Temperatura Elevada 380 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 5% No Sólido (IPA) a Temperatura Ambiente 381 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 5% No Sólido (IPA) (4°C) 382 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 5% No Sólido (IPA) (-21°C) 383 Adición de anti-solvente DMF: H20 al 5% No Sólido (Etanol) a Temperatura Ambiente 384 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 5% No Sólido (Etanol) (4°C) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 385 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 5% No Sólido (Etanol) (-21 °C) 386 Temp. de Ciclización DMF : H20 al 15% Forma II 387 Enfriamiento Controlado DMF: H20 al 15% No Sólido 388 Enfriamiento Controlado DMF: H20 al 15% No Sólido (-21°C) 389 Evaooración DMF: H,0 al 15% No Sólido 390 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 15% No Sólido (IPA) a Temperatura Elevada 391 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 15% No Sólido (IPA) a Temperatura Ambiente 392 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 15% No Sólido (IPA) (4"C) 393 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 15% No Sólido (IPA) l-2l'C! 394 Adición de anti-solvente DMF: H20 al 15% No Sólido (Etanol) a Temperatura Ambiente 395 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 15% No Sólido (Etanol) (4°C) 396 Adición de Anti-Solvente DMF: H20 al 15% No Sólido (Etanol) Í-21°C) 397 TeitiD. de Ciclización DMF: HO al 30% Forma II 398 Enfriamiento Controlado DMF: H20 al 30% Forma II (4°C) 399 Enfriamiento Controlado DMF: H20 al 30% Forma II (-21 °C) 400 Evaporación DMF: H20 al 30% Forma II 401 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 30% Forma II (IPA) a Temperatura Elevada 402 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 30% Forma II (IPA) a Temperatura AmHi pnl-p 403 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 30% Forma II (IPA) (4°C) 404 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 30% Forma II (IPA) Í-21°C) 405 Adición de anti-solvente DMF: H.O al 30% Forma II (Etanol) a Temperatura Ambiente 406 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 30% No Sólido (Etanol) (4°C) 407 Adición de Anti-solvente DMF: H20 al 30% Forma II (Etanol ) (-21 °C) 408 Temp. de Ciclización 1,4-dioxano: H20 al Forma II 1% Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 409 Enfriamiento Controlado 1,4-dioxano: H20 al No Sólido (4°C) 1% 410 Enfriamiento Controlado 1,4-dioxano: H20 al No Sólido (-21 °C) 1% 411 Evaporación 1,4-dioxano: H20 al No Sólido 1% 412 Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano: H20 No Sólido (IPA) a Temperatura al 1% Elevada 413 Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano: H20 al No Sólido (IPA) a Temperatura 1% Amhi pnt.p 414 Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano: H20 al No Sólido (IPA) (4°C.) 1% 415 Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano: H20 No Sólido (IPA) (-21°C) al 1% 416 Adición de anti-solvente 1,4-dioxano: H20 No Sólido (Etanol) a Temperatura al 1% Ambiente 417 Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano: H20 al No Sólido (Etanol) (4=>C) 1% 418 Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano: H20 No Sólido (Etanol) (-21 °C) al 1% 419 Temp. de Ciclización 1,4-dioxano: H20 Forma II al 3% 420 Enfriamiento Controlado 1,4-dioxano: H20 No Sólido (4°C) al 3% 421 Enfriamiento Controlado 1,4-dioxano: H20 No Sólido (-21 °C) al 3% 422 Evaporación 1,4-dioxano: H20 Forma II si n 423 Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano: H20 No Sólido (IPA) a Temperatura al 3% Elevada 424· Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano: H20 No Sólido (IPA) a Temperatura al 3% Ambiente 425 Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano: H20 No Sólido ÍTPA) Í4°C) al 3% 426 Adición de Anti-Solvente 1,4-dioxano: H20 No Sólido (IPA) (-21°C) al 3% 427 Adición de anti-solvente 1,4-dioxano: H20 No Sólido (Etanol) a Temperatura al 3% Ambiente 428 Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano: H20 No Sólido (Etanol) (4°C) al 3% 429 Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano: H20 No Sólido (Etanol) (-21 °C) al 3% Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 430 Temp. de Ciclización 1,4-dioxano : H20 Forma II al 10% 431 Enfriamiento Controlado 1, -dioxano: H20 No Sólido (4°C) al 10% 432 Enfriamiento Controlado 1 , 4-dioxano.· H20 No Sólido (-21 °C) al 10% 433 Evaporación 1, 4-dioxano: ?2? Forma II al 10% 434 Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano : H20 No Sólido (IPA) a Temperatura al 10% Elevada 435 Adición de Anti-solvente 1, 4-dioxano: H20 No Sólido (IPA) a Temperatura al 10% Ambiente 436 Adición de Anti-solvente 1, 4-dioxano: H20 No Sólido (IPA) (4°C) al 10% 437 Adición de Anti-solvente 1, 4-dioxano: H20 No Sólido (IPA) (-21°C) al 10% 438 Adición de anti-solvente 1, 4-dioxano: H20 No Sólido (Etanol) a Temperatura al 10% Ambiente 439 Adición de Anti-solvente 1,4-dioxano: H20 No Sólido (Etanol) (4°C) al 10% 440 Adición de Anti-solvente 1, 4-dioxano: H20 No Sólido (Etanol) (-21 °C) al 10% 441 Temp. de Ciclización MeOH: H20 al 5% Forma II 442 Enfriamiento Controlado MeOH: H20 al 5% No Sólido (4°C) 443 Enfriamiento Controlado MeOH: H20 al 5% No Sólido (-21°C) 444 Evaporación MeOH: H20 al 5% Forma II 445 Adición de Anti-solvente MeOH: ?2? al 5% Forma II (IPA) a Temperatura Elevada 44G Adición de Anti-solvente MeOH: H20 al 5% Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 447 Adición de Anti-solvente MeOH : H20 al 5% Forma II (IPA) (4°C) 448 Adición de Anti-solvente MeOH : H20 al 5% Forma II (IPA) (-21°C) 449 Adición de anti-solvente MeOH: H20 al 5% No Sólido (Etanol) a Temperatura Ambiente 450 Adición de Anti-solvente MeOH: H20 al 5% Forma II (Etanol) (4°C) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 451 Adición de Anti-solvente MeOH : H20 al 5% Forma II (Etanol) (-21 °C) 452 Temp. de Ciclización MeOH : H20 al 20% No Sólido 453 Enfriamiento Controlado MeOH: H20 al 20% Forma II (4°C) 454 Enf iamiento Controlado MeOH: H20 al 20% Forma II (-21°C) 455 Evaporación MeOH : H20 al 20% Forma II 456 Adición de Anti-solvente MeOH: H20 al 20% Forma II (IPA) a Temperatura Elevada 457 Adición de Anti-solvente MeOH: H20 al 20% Forma II (IPA) a Temperatura Ambiente 458 Adición de Anti-solvente MeOH: H20 al 20% Forma II (IPA) (4°C) 459 Adición de Anti-solvente MeOH: H20 al 20% Forma II (IPA) (-21°C) 460 Adición de anti-solvente MeOH: H20 al 20% Forma II (Etanol) a Temperatura Amhi pnt-p 461 Adición de Anti-solvente MeOH: H20 al 20% Forma II (Etanol) (4° ) 462 Adición de Anti-solvente MeOH : H20 al 20% Forma I/II (Etanol) (-21 °C) 463 Temp. de Ciclización MeOH: H20 al 50% Forma II 464 Enfriamiento Controlado MeOH: H20 al 50% Forma II (4°C) 465 Enf iamiento MeOH: H20 al 50% Forma II G?t-it rol adn (-21 °C) 466 Evaporación MeOH: H20 al 50% No Sólido 467 Adición de Anti-solvente MeOH : H20 al 50% Forma II (IPA) a Temperatura El pvsrta 468 Adición de Anti-solvente MeOH: H20 al 50% No Sólido (IPA) a Temperatura Ambiente 469 Adición de Anti-solvente MeOH: H20 al 50% Forma II (IPA) (4°C) 470 Anti-Solvente (IPA) MeOH: H20 al 50% No Sólido Adición (-21°C) 471 Adición de anti-solvente MeOH: H20 al 50% Forma II (Etanol) a Temperatura Ambiente 472 Adición de Anti-solvente MeOH: H20 al 50% Forma I (Etanol) (4°C) 473 Adición de Anti-solvente MeOH : H20 al 50% Forma I/II (Etanol) (-21 °C) 474 Temp. de Ciclización THF: H20 al 1% Forma II Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 475 Enfriamiento Controlado THF: H20 al 1% No Sólido 476 Enfriamiento Controlado THF: H20 al 1% No Sólido (-21 °C) 477 Evaporación THF: H20 al 1% Forma II 478 Adición de Anti-solvente THF: H20 al 1% No Sólido (IPA) a Temperatura Elevada 479 Adición de Anti-solvente THF: H20 al 1% No Sólido (IPA) a Temperatura Ambiente 480 Adición de Anti-solvente THF: H20 al 1% No Sólido (IPA) Í4°C) 481 Adición de Anti-solvente THF: H20 al 1% No Sólido (IPA) Í-21°C) 482 Adición de anti-solvente THF: H20 al 1% No Sólido (Etanol) a Temperatura Amhi (=>nt-p 483 Adición de Anti-solvente THF: H20 al 1% No Sólido (Etanol ) (4°C) 484 Adición de Anti-solvente THF: H20 al 1% No Sólido (Etanol) Í-21°C) 485 Tem . de Ciclización THF: H20 al 3% Forma II 486 Enfriamiento Controlado THF: H20 al 3% No Sólido (4°C) 487 Enfriamiento Controlado THF: H20 al 3% No Sólido (-21 °C) 488 Evaporación THF: H20 al 3% No Sólido 489 Adición de Anti-solvente THF: H20 al 3% No Sólido (IPA) a Temperatura Rl pvaria 490 Adición de Anti-solvente THF: H20 al 3% Forma II (IPA) a Temperatura Amhi pnt-p 491 Adición de Anti-solvente THF: H20 al 3% No Sólido (IPA) (4°C) 492 Adición de Anti-solvente THF: H20 al 3% No Sólido (IPA) (-21°C) 493 Adición de anti-solvente THF: H20 al 3% No Sólido (Etanol) a Temperatura Ambiente 494 Adición de Anti-solvente THF: H20 al 3% No Sólido (Etanol) (4°C) 495 Adición de Anti-solvente THF: H20 al 3% No Sólido (Etanol) (-21 °C) 496 Temp. de Ciclización THF: H20 al 5% No Sólido 497 Enfriamiento Controlado THF: H20 al 5% No Sólido (4°C) Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 498 Enfriamiento Controlado THF: H20 al 5% No Sólido (-21°C) 499 Evaporación THF: H20 al 5% Forma II 500 Adición de Anti- solvente THF: H20 al 5% No Sólido (IPA) a Temperatura Elevada 501 Adición de Anti- solvente THF: H20 al 5% No Sólido (IPA) a Temperatura Ambiente 502 Adición de Anti- solvente THF: H20 al 5% Forma II (IPA) (4°C) 503 Adición de Anti- solvente THF: H20 al 5% No Sólido (IPA) Í-21°C) 504 Adición de anti- solvente THF: H20 al 5% No Sólido (Etanol) a Temperatura Ambiente 505 Adición de Anti- solvente THF: H20 al 5% No Sólido (Etanol) (4°C) 506 Adición de Anti- solvente THF: H20 al 5% No Sólido (Etanol) (-21 °C) 507 Tem . de Ciclización butan-l-ol: H20 al Forma II 1% 508 Enfriamiento Controlado butan-l-ol: H20 al No Sólido (4°C) 1% 509 Enfriamiento Controlado butan-l-ol: H20 al No Sólido (-21°C) 1% 510 Evaporación butan-l-ol: H20 al Forma II n 511 Adición de Anti -solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (IPA) a Temperatura 1% K1 pvarta 512 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (IPA) a Temperatura 1% Ambiente 513 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (???) (4 I 1% 514 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (IPA) (-21°C) 1% 515 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (Etanol) a Temperatura 1% Ambiente 516 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (Etanol) (4°C) 1 % 517 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (Etanol) (-21 °C) 1% 518 Temp. de Ciclización butan-l-ol :H20 al Forma II 3% 519 Enfriamiento Controlado butan-l-ol: H20 al No Sólido (4°C) 3% Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 520 Enfriamiento Controlado butan-l-ol :H20 al No Sólido (-21 °C) 3% 521 Evaporación butan-l-ol: H20 al Forma II 1 % 522 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (IPA) a Temperatura 3% El p a iia 523 Adición de Anti -solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (IPA) a Temperatura 3% Amhi pnt-p 524 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (TPA) (4°C) 3% 525 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (IPA) (-21°C) 3% 526 Adición de anti -solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (Etanol) a Temperatura 3% Amhi pnt-p 527 Adición de Anti -solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (Etanol) (4°C) 3% 528 Adición de Anti- solvente butan-l-ol :H20 al No Sólido Í Rt-annT 1 - 2 1 Ti 3% 529 Temp. de Ciclización butan-l-ol: H20 al Forma II 5% 530 Enfriamiento Controlado butan-l-ol: H20 al No Sólido °r) ?% 531 Enfriamiento Controlado butan-l-ol: H20 al No Sólido (-21 °C) 5% 532 Evaporación butan-l-ol :H20 al Forma II 5% 533 Adición de Anti- solvente butan-l-ol :H20 al No Sólido (IPA) a Temperatura 5% Elevada 534 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al Forma II (IPA) a Temperatura 5% Amh-i pnf p 535 Adición de Anti- solvente butan-l-ol :H20 al No Sólido ( TPA) (4°C) 5% 536 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (TPA) l- 21°Cl 537 Adición de anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (Etanol) a Temperatura 5% Amhi pnt-p 538 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido (Etanol) (4°C) 5% 539 Adición de Anti- solvente butan-l-ol: H20 al No Sólido ( Etanol ) Í-21°C) 5% 540 Temp. de Ciclización 1 , 4 -dioxano Forma I 541 Evaporación 1,4-dioxano Forma I/II 542 Anti-Solvente Adición 1 , -dioxano No Sólido 543 Temp. de Ciclización 1-butanol Forma I Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 544 Evaporación 1-butanol Forma I/II 545 Adición de Anti-solvente 1-butanol Forma III (Hexano) (4°C) 546 Temp. de Ciclización Etanol Forma I 547 Evaporación Etanol Forma II 548 Adición de Anti-Solvente Etanol Forma I (Hexano) (4°C) 549 Temp. de Ciclización acetona Forma I 550 Evaporación acetona Forma II 551 Adición de Anti-solvente acetona Forma III (Hexano) (4 °C) 552 Temp. de Ciclización benzonitrilo Forma I 553 Evaporación benzonitrilo Forma II 554 Adición de Anti-solvente benzonitrilo Forma II (Hexano) (4°C) 555 Temo, de Ciclización ciclohexano Forma I 556 Evaporación ciclohexano Forma II 557 Adición de Anti-solvente ciclohexano No Sólido (Hexano) (4°C) 558 Temp. de Ciclización DCM Forma I 559 Evaporación DCM Forma II 560 Adición de Anti-solvente DCM Forma III (Hexano) ( °O 561 Temp. de Ciclización DMSO Forma I 562 Evaporación DMSO Forma II/II 563 Adición de Anti-solvente DMSO No Sólido/No (Hexano) (4°C) Sólido 564 Temp. de Ciclización EtOAC Forma I 565 Evaporación EtOAc Forma II 566 Adición de Anti-solvente EtOAc Forma III (Hexano) (4°C) 567 Temp. de Ciclización Heptano Forma I 568 Evaporación Heptano Forma I/II 569 Adición de Anti-solvente Heptano No Sólido/No (Hexano) (4°C) Sólido 570 Temp. de Ciclización IPA Forma I 571 Evaporación IPA Forma I/II 572 Adición de Anti-solvente IPA No Sólido (Hexano) (4°C) 573 Temp. de Ciclización IPA:Aqua(l%) Forma I 574 Evaporación IPAt gua (1%) Forma II 575 Adición de Anti-solvente IPA: Agua (1%) No Sólido/No (Hexano) (4°C) Sólido 576 Temp. de Ciclización MeCN Forma I 577 Evaporación MeCN Forma II Prueba Método de Cristalización Solvente Resultados 578 Adición de Anti-solvente MeCN Forma I/III (Hexano) Í4 ) 579 Temp. de Ciclización MeCN: Agua (1%) Forma I 580 Evaporación MeCN:Agua (1%) Forma I/II 581 Adición de Anti-solvente MeCN:Agua (1%) No Sólido (Hexano) Í4"C) 582 Temp. de Ciclización MEK Forma I 583 Evaporación MEK Forma I/II 584 Adición de Anti-solvente MEK Forma III (Hexano) (4°C) 585 Temp. de Ciclización MeOAc Forma I 586 Evaporación MeOAc Forma II 587 Adición de Anti-solvente MeOAc Forma III (Hexano) (4°C) 588 Temp. de Ciclización MeOH Forma I 589 Evaporación MeOH Forma I/II 590 Adición Anti-Solvente MeOH Forma III (Hexano) (4°C) 591 Temp. de Ciclización MIBK Forma I 592 Evaporación MIBK Forma II 593 Adición de Anti-solvente MIBK No Sólido (Hexano) (4°C) 594 Temp. de Ciclización Nitrometano Forma I 595 Evaporación Nitrometano Forma II 596 Adición de Anti-solvente Nitrometano Forma I (Hexano) (4°C) 597 Temp. de Ciclización TBME Forma I 598 Evaporación TBME Forma II 599 Adición de Anti-solvente TBME Forma I (Hexano) (4°C) 600 Temp. de Ciclización THF Forma I 601 Evaporación THF Forma II 602 Adición de Anti-solvente THF Forma I/III (Hexano! (4°C) 603 Temp. de Ciclización THF: agua (1%) Forma I 604 Evaporación THF: agua (1%) Forma I/II 605 Adición de Anti-solvente THF : agua (1%) No Sólido (Hpxannl Í4°C) 606 Temp. de Ciclización tolueno Forma I 607 Evaporación tolueno Forma II 608 Adición de Anti-solvente tolueno Forma III (Hexano) (4°C) 609 Temp. de Ciclización agua No Sólido 610 Evaporación agua Forma I/II 611 Adición de Anti-solvente agua Forma III (Hexano) (4°C) Ejemplo 2 Estudios de Disolución Intrínseca Se midieron las proporciones de disoluciones intrínsecas para las Formas I, II y III en condiciones de pH de 1.0, 4.5 y 6.7. Los resultados se reproducen abajo en la TABLA 6. En cada caso, se logró la disolución completa en menos de 3 minutos. Sorprendentemente, se observó una dependencia de pH para la Forma II; con la proporción de disolución intrínseca incrementada con el pH. En contraste, las Formas I y III parecen disolverse a proporciones independientes del pH.
TABLA 6 - Proporciones de Disolución Intrínseca Calculadas (mg/cm3/s) 1.0 4.5 6.7 Forma I 0.41 0.44 0.37 Forma II 0.26 0.34 0.62 Forma III 0.49 0.44 0.45 Ejemplo 3: Estudios de Solubilidad La solubilidad de fenil acetato de L-ornitina fue aproximadamente de conformidad con los métodos descritos anteriormente. Se probaron 24 sistemas de solventes: 1,4 dioxano, 1-butanol, etanol, acetona, benzonitrilo, ciclohexano, DCM, DMSO, EtOAc, Heptano, IPA, IPA (H20 al 1%) , MeCN, MeCn (H20 al 1%) , MEK, MeOAc, metanol, MIBK, Nitrometano, THF , THF (H20 al 1%) , Tolueno y agua. El fenil acetato de L-ornitina exhibió una solubilidad en agua, mientras que fenil acetato de L-ornitina fue sustancialmente insoluble en los sistemas de solvente restantes.
También se prepararon suspensiones de fenil acetato de L-ornitina en agua y la suspensión se filtró. La concentración filtrada se analizó por HPLC, y los resultados mostraron la solubilidad de fenil acetato de L-ornitina ser aproximadamente 1.072 mg/ml.
Las determinaciones de HPLC de solubilidad también se completaron para cinco solventes: etanol, acetona, metanol, DMSO e IPA. Estos resultados se resumieron en la TABLA 7.
TABLA 7 - Determinaciones de Solubilidad de HPLC Solvente Solubilidad Área del Pico Comentarios (mg/ml) EtOH < 0.0033 N/A Pico pequeño Ace ona 0 0 Contenido API más allá del límite inferior de cuantificación (LLOQ) MeOH 0.0033 1906.75 Pico resuelto DMSO > 0.0033 N/A Carga en pico DMSO IPA ¦ 0 0 Contenido API más allá del LLOQ Estos resultados indican que tanto la acetona como IPA son adecuados como anti- solventes para precipitar fenil acetato de L-ornitina. En contraste, los solventes con solubilidad medible son menos favorables para precipitar formas cristalinas de fenil acetato de L-ornitina.
Finalmente, se determinó la solubilidad de fenil acetato de L-ornitina en varias mezclas de IPA y agua usando HPLC. Los resultados se muestran en la TABLA 8.
TABLA 8 - Determinaciones de Solubilidad por HPLC (IPA/Agua) % de IPA Área del Pico Solubilidad (mg/ml) 100 0 0 90 295 0.0054 80 2634 0.0455 70 8340 ¦ 0.1433 Ejemplo 4: Proceso de Lote a Escala Pequeña para Producir Fenil Acetato de L-ornitina Se disolvieron aproximadamente 8.4 g (0.049 moles) de HC1 de L-ornitina en 42 mi de H20 y, separadamente, se disolvieron aproximadamente 11.4 g de benzoato de plata en 57 mi de DMSO. Subsecuentemente, se agregó la solución de benzoato de plata a la solución de HC1 de L-ornitina. Combinando las dos mezclas resultó en una precipitación exotérmica, inmediata de un sólido blanco cremoso (AgCl) . Lo sólido se removió por filtración a vacío y se retuvo lo filtrado (benzoato de L-ornitina en solución) . Se agregó 200 mi de IPA a lo filtrado y la mezcla se enfrió a 4°C. Un sólido cristalino precipitó después de aproximadamente 3 horas (benzoato de L-ornitina) el cual se aisló por filtración a vacío. Rendimiento: 60%.
Se disolvió 7.6 g (0.03 moles) del benzoato de L-ornitina en 38 mi de H20 y se disolvió aproximadamente 4.4 g de fenil acetato de sodio en 22 mi de H20. Subsecuentemente, se agregó la solución de fenil acetato de sodio a la solución de benzoato de L-ornitina y se dejó agitando por aproximadamente 10 minutos. Se agregó aproximadamente 240 mi de IPA (8:2 IPA:H20) y la solución se agitó por 30 minutos antes del enfriamiento a 4°C. Un sólido cristalino precipitó después de aproximadamente 3 horas a 4°C (fenil acetato de L-ornitina) . Lo precipitado se aisló por filtración a vacío y se lavó con 48-144 mi de IPA. Rendimiento: 57%.
Ejemplo 5: Proceso de Lote a Gran Escala para Producir Fenil Acetato de L-Ornitina Se prepararon dos lotes separados de fenil acetato de L-ornitina como sigue: Se disolvió aproximadamente 75 kg de monoclorhidrato de L-ornitina en 227 kg de agua. Se agregó a la solución resultante 102 kg de benzoato de plata disuelto en 266 kg de DMSO a temperatura ambiente dentro de las 2 horas. Inicialmente, se observó una exotermia fuerte y el cloruro de plata precipitó. El receptor que contiene la solución después se lavó con 14 kg de DMSO que se agregó a la masa de reacción. Para remover el cloruro de plata formado, la masa de reacción se filtró sobre un filtro de lentes preparados con 10 kg de Celite y un filtro GAF de 1 mm. Después de la filtración, lo filtrado se lavó con 75 kg adicionales de agua. La masa de reacción después se calentó a 35 ± 2°C y se agregaron 80 kg de fenil acetato de sodio. En este punto, la masa de reacción se agitó a 35 + 2°C por al menos 30 minutos.
Para precipitar el API final, se agregó 353 kg de alcohol isopropílico a la masa de reacción. La masa de reacción después se enfrió a 0 ± 3°C dentro de las 6 horas, se agitó por 1 hora y después el producto se aisló en una centrifugadora.
Se obtuvo aproximadamente 86 kg del producto húmedo terminado. El producto entones se secó a 40 + 5°C por aproximadamente 6.5 hasta 8 horas para proporcionar aproximadamente 75 kg de fenil acetato de L-ornitina. Rendimiento: 63.25. La TABLA 9 resume las mediciones que se refieren al producto final.
TABLA 9 - Resultados Analíticos para Proceso de Lote a Gran Escala Prueba Lote 1 Lote 2 Pureza 98.80% 98.74% Benzoato 0.17% 0.14% Plata 28 ppm 157 ppm Cloruro 0.006% 0.005% Sodio 7 ppm 26 ppm Impurezas totales 0.17% 0.14% Forma física Forma II Forma II Ejemplo 6: Reducción de Contenido de Plata en Fenil Acetato de L-Ornitina Se probaron el Lote 2 del Ejemplo 5 que exhibió altas cantidades de plata (157 ppm) y por consiguientes procedimientos para reducir el contenido de plata. Se completaron nueve ensayos; cada uno generalmente que incluye disolver aproximadamente 20 g de fenil acetato de L-ornitina del Lote 2 en 1.9 partes de agua, y entonces subsecuentemente agregar 10.8 partes de IPA. Se aisló una forma cristalina a 0°C por filtración.
Para cuatro ensayos, se agregaron 8.0 tng de depuradores de metal pesado SMOPEX 102 o SMOPEX 112 a la solución acuosa y se agitó por 2 horas. Los depuradores fallaron a reducir el contenido de plata por debajo de 126 ppm. Mientras tanto, a otro ensayo se aplicó las condiciones generales descritas anteriormente y redujo el contenido de plata a 179 ppm. En aún otro ensayo, se sometió a suspensión fenil acetato de L-ornitina en una solución de IPA, antes que se cristalizara; sin embargo este ensayo también falló para reducir el contenido de plata por debajo de 144 ppm.
Los últimos tres ensayos incluyeron agregar HCl diluido a la solución para precipitar la cantidad restante de plata como AgCl . Lo precipitado después se removió por filtración anterior. Los tres ensayos incluyeron agregar: (1) 1.0 g de HC1 al 0.33% a 20°C; (2) 1.0 g de HC1 al 0.33% a 30°C; y (3) 0.1 g de HC1 al 3.3% a 20°C. Los tres ensayos redujeron el contenido de plata a 30 ppm, 42 ppm y 33 ppm, respectivamente, y cada ensayo proporcionó más del 90% de fenil acetato de L-ornitina. Por lo tanto, la adición de HC1 fue efectiva en la reducción de la cantidad de plata residual.
Ejemplo 6: Proceso para Preparar Fenil Acetato de L-ornitina sin una Sal Intermediaria Como un procedimiento general, se suspendió clorhidrato de L-ornitina en un solvente. Después de que la. masa de reacción se calentó y se agregó un metóxido de sodio, base. Se formó NaCl y se removió del sistema por filtración. La masa de reacción se enfrió y se agregó un equivalente molar de ácido fenil acético a la masa de reacción para formar fenil acetato de L-ornitina. El producto final se aisló, se lavó y se secó. Se proporciona un sumario del ensayo para este proceso en la TABLA 10.
TABLA 10 - Proceso de Ensayos Ensayo Base Eq. de Base Solvente 1 NaOMe21%enMeOH 1.0 eq. MeOH 2 NaOMe21%enMeOH 0.95 eq. IPA 3 NaOMe21%enEtOH 1.0 eq. EtOH 4 NaOMe2l%enMeOH 1.0 eq. MeOH 5 NaOMe21%enMeOH 1.0 eq. MeOH p/ IPA para precipitación 6 NaOMe21%enMeOH 1.0 eq. Acetonitrilo 7 NaO e21¾en eOH 1.0 eq. Agua/IPA 8 NaOMe21%enMeOH 1.0 eq. Agua/IPA 9 NaOMe21%enMeOH 1.0 eq. n-butanol El fenil acetato de L-ornitina resultante se encontró que exhibió grandes cantidades de cloruro (al menos aproximadamente 1% en peso) , y presumiblemente incluye cantidades similares de sodio. Los rendimientos son aproximadamente 50% para los Ensayos 2, 4 y 5.
Ejemplo 7: Estudios de Estabilidad Térmica de las Formas I, n v m Se almacenaron muestras de las Formas I, II y III a temperaturas incrementadas y condiciones designadas como se resumió en la TABLA 11. Se aplicó vacío 600 psi (4136.8 Kpa) para lograr la presión reducida. Se probaron las composiciones finales por XRPD, NMR, IR y HPLC para determinar cualquier cambio del material.
Más notablemente, la Forma III no fue de transición a la Forma II bajo vacío a 120°C, pero más bien exhibió mayor degradación química comparada a las Formas I y II bajo estas condiciones. Mientras tanto, la Forma III se convierte a la Forma II y exhibió degradación química sustancial a 120°C sin vacío.
La Forma I se convirtió a la Forma II en todos los ensayos, pero más interesantemente, la Forma I exhibió degradación química sustancial a 120°C sin vacío. Así, la conversión de la Forma I no exhibió la misma estabilidad química como la Forma II, lo cual es sorprendente considerando el material ya convertido a la Forma II .
La Forma II fue estable y no se degrada químicamente en todos los ensayos. Así, la Forma II es más estable. Mientras tanto, la Forma III es más estable que la Forma I, pero ambas formas exhibieron degradación química sustancial a 120°C sin vacío.
TABLA 11 - Ensayos de Estabilidad Térmica Ensayo Inicial Temperatura Condición Periodo Resultados 1 Forma I 80° C no vacío 7 días Forma II, no degradación 2 Forma I 80° C vacío 7 días Forma II, no degradación 3 Forma I 80° C no vacío 14 días Forma II, no degradación 4 Forma I 80° C vacío 14 días Forma II, no degradación 5 Forma II 80° C no vacío 7 días Forma II, no degradación Ensayo Inicial Temperatura Condición Periodo Resultados 6 Forma II 80° C vacío 7 días Forma II, no degradación 7 Forma II 80° C no vacío 14 días Forma II, no degradación 8 Forma II 80° C vacío 14 días Forma II, no degradación 5 Forma 80° C no vacío 7 días Forma III, no III degradación 5 Forma 80° C no vacío 14 días Forma III, no III deqradación 6 Forma I 120° C no vacío 7 días Forma II (>96% API) 7 Forma I 120° C vacío 7 días Forma II (>99.9% API) 8 Forma I 120° C no vacío 14 días Forma II (37% API) 9 Forma I 120° C vacío 14 días Forma II (>96% API) 8 Forma II 120° C no vacío 7 días Forma II (98.6% API) 9 Forma II 120° C vacío 7 días Forma II (98.7% API) 10 Forma II 120° C no vacío 14 días Forma II (>95% API) 11 Forma II 120° C vacío 14 días Forma II (>95% API) 10 Forma 120° C no vacío 7 días Forma II (<30% API) III 11 Forma 120° C vacío 7 días Forma III (>95% API) III 12 Forma 120° C no vacío 14 días Forma II (<30% API) III Se resumieron los resultados HPLC para los ensayos que exhibieron degradación química (por ejemplo, Ensayo 10 de la TABLA 11) en la TABLA 12. Cada material degradado exhibió picos comunes en tiempos de retención relativos (RRT) de 1.9, 2.2, 2.4 y 2.7, lo cual sugiere una trayectoria de degradación común para diferentes formas.
TABLA 12 - Resultados de HPLC para Muestras de Degradación HPLC Muestra Forma Prueba de Punto Tiempo de Pico(s) de ID ID Probada estabilidad de retención de Pico Degradación/Imp tiempo principal (min) ureza (día) Tiempo de % de Tiempo de % de retención Área de retención Área de (min) Pico (min) pico 39 W00045/4 III 120°C 7 2.857 35.786 6.763 6.103 5/3 presión ambiental 7.582 45.161 42 W00045/4 III 120°C bajo 7 2.787 88.885 7.598 9.389 5/6 vacío (ca. 600 psi) 51 00045/4 I 120°C 14 3.499 37.826 6.766 3.948 5/1 presión ambiental 7.569 42.525 9.707 3.628 53 W00045/4 III 120°C 14 3.476 30.394 6.763 5.975 5/3 presión ambiental 7.583 56.459 56 W00045/4 III 120°C bajo 14 3.400 87.389 7.555 11.500 5/6 vacío (ca. 600 psi) Ejemplo 8 : Estudios de Estabilidad de Oxígeno de Formas I, II y III Se almacenaron las muestras de las Formas I, II y III en ambientes de oxígeno del 100% por 7 o 14 días y se analizan por NMR e IR. Los resultados establecen que las Formas I y II no muestran signos de degradación después de 14 días . Únicamente los resultados IR se completaron para la Forma III en a los 7 días, y estos resultados confirman que no existe degradación significante. Los resultados de TLC para todas las muestras indicaron una mancha única con valores Rf similares.
Ejemplo 9: Estudios de Solubilidad de Formas I, II y III Se expusieron las muestras de Formas I, II y III a radiación ultravioleta (UV) por 7 o 14 días. Una Lámpara UV universal CAMAG aplicó radiación a las muestras con ajuste de 254 mp . Los resultados NMR e IR no mostraron degradación de Formas I y II después de 14 días. Similarmente , la Forma III no exhibió degradación después de 7 días como se determinó por NMR e IR. Los resultados TLC para todas las muestras indicaron una mancha única con valores Rf similares.
Ejemplo 10: Estudios de Estabilidad de pH de Formas I, II y III Se formaron una suspensión de Formas I, II y III con agua y el valor de pH se ajustó a ya sea 1.0, 4.0, 7.0, 10.0 y 13.2. Las suspensiones se almacenaron por 7 o 14 días, y subsecuentemente se removieron los sólidos por filtración. La Forma I se convirtió a la Forma II en todas las muestras. Los resultados NMR e IR mostraron que las Formas I y II no se degradan después de 14 días en los pH variados, y similarmente los resultados de HPLC mostraron aproximadamente 98% de pureza o mayor de estas muestras. La Forma III también no exhibió degradación después de 7 días de conformidad con los resultados NMR e IR. Las pruebas de HPLC mostraron aproximadamente 95% de pureza o mayor; sin embargo los resultados IR mostraron que la Forma III se convirtió a la Forma II durante la prueba de 7 días. Los resultados de TLC para todas las muestras indicaron una mancha única con valores Rf similares.
Ejemplo 11: Estudios de Compresión de Formas I, II y III Las muestras de las Formas I, II y III se sometieron a 3 toneladas de fuerza usando una Prensa Hidráulica Moore por aproximadamente 90 minutos. La masa, diámetro y espesor de la tableta resultante se midieron para determinar la densidad. Las tabletas también se analizaron por NMR e IR. La Forma I pasó a una composición de Forma II con una densidad de 1.197 kg/m3. La Forma II no exhibió una transición y tiene una densidad final de 1.001 kg/m3. Finalmente, la Forma III no exhibió una transición y tiene una densidad final de 1.078 kg/m3.
Ejemplo 12: Proceso para Producir Fenil Acetato de L-ornitina por medio de un Intermediario de Acetato Se disolvió 25 mg de HC1 de L-ornitina en 5 volúmenes de H20, y después se agregó exceso de ácido acético (aproximadamente 5 volúmenes) para formar una suspensión. La suspensión se sometió a temperatura de ciclización aproximadamente 25°C y 40°C cada 4 horas por aproximadamente 3 días. Se agregó 1 equivalente de ácido fenilacético (con respecto a L-ornitina) y se agitó por aproximadamente 4-6 horas (posiblemente caliente) . Se usó IPA como un antisolvente, se agregó lo suficiente para obtener una proporción de 70:30 (IPA:H20) . Se aisló por filtración a vacío y se secó por aproximadamente 4-8 horas a 80 °C para remover cualquier residuo de ácido acético.
Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (80)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :
1. Una composición que comprende una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina, caracterizada porque la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende al menos tres picos característicos, en donde los picos característicos se seleccionan del grupo que consiste de aproximadamente 6.0°, 13.9°, 14.8°, 17.1°, 17.8° y 24.1° 2T.
2. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende picos característicos hasta aproximadamente 6.0°, 13.9°, 14.8°, 17.1°, 17.8° y 24.1° 2?.
3. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-2, caracterizada porque la forma cristalina tiene un punto de fusión de aproximadamente 202°C.
4. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, caracterizada porque la forma cristalina exhibe un análisis cristalográfico de rayos-X de cristal único con parámetros de cristal aproximadamente igual a los siguientes: dimensiones de unidad de célula: a=6.594(2) Á, b=6.5448(18) Á, c=31.632(8) Á, a=90°, ß=91.12(3)°, ?=90°; Sistema de cristal: Monoclínico; y Grupo de espacio: P2i.
5. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-4, caracterizada porque la forma cristalina es representada por la fórmula [C5H13N202] [C8H702] .
6. Una composición que comprende una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina, caracterizada porque la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos -X que comprende al menos tres picos característicos, en donde los picos característicos se seleccionan del grupo que consiste de aproximadamente 4.9°, 13.2°, 17.4°, 20.8° y 24.4° 2? .
7. La composición de conformidad con la reivindicación 6, caracterizada porque la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende picos característicos hasta aproximadamente 4.9°, 13.2°, 17.4°, 20.8° y 24.4° 2?.
8. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 6-7, caracterizada porque la forma cristalina comprende moléculas de agua y/o etanol.
9. La composición de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque la forma cristalina comprende aproximadamente 11% en peso de las moléculas como se determina por análisis termogravimétricos .
10. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 6-9, caracterizada porque la forma cristalina se distingue por calorimetría de exploración diferencial ya que comprende un endoterma a aproximadamente 35° C.
11. La composición de conformidad con la reivindicación 10, caracterizada porque además comprende un punto de fusión hasta aproximadamente 203° C.
12. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 6-11, caracterizada porque la forma cristalina exhibe un análisis cristalográfico de rayos -X de cristal único con parámetros de cristal aproximadamente igual a los siguientes: dimensiones de unidad de célula: a=5.3652(4) Á, b=7.7136(6) Á, c=20.9602 ( 18 ) Á, a=90°, ß=94.986 (6) 0 , ?=90°; Sistema de cristal: Monoclínico ; y Grupo de espacio: P2i.
13. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 6-12, caracterizada porque la forma cristalina es representada por la fórmula [C5H13N202] [C8H702] EtOH.H20.
14. Una composición que comprende una forma cristalina de fenil acetato de L-ornitina, caracterizada porque la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende al menos tres picos característicos, en donde los picos característicos se seleccionan del grupo que consiste de aproximadamente 5.8°, 14.1°, 18.6°, 19.4°, 22.3° y 24.8° 20.
15. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 14, caracterizada porque la forma cristalina exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende picos característicos hasta aproximadamente 5.8°, 14.1°, 18.6°, 19.4°, 22.3° y 24.8° 2? .
16. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 14-15, caracterizada porque la forma cristalina se distingue por calorimetría de exploración diferencial ya que comprende un endoterma a aproximadamente 40° C.
17. La composición de conformidad con la reivindicación 16, caracterizada porque además comprende un punto de fusión hasta aproximadamente 203° C.
18. Una composición caracterizada porque comprende: al menos aproximadamente 50% en peso de una forma cristalina de sal de fenil acetato de L-ornitina; y al menos aproximadamente 0.01% en peso de ácido benzoico o una sal del mismo.
19. La composición de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque comprende al menos aproximadamente 0.10% en peso de ácido benzoico o una sal del mismo .
20. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 18-19, caracterizada porque comprende no más de 5% en peso de ácido benzoico o una sal del mismo.
21. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 18-19, caracterizada porque comprende no más de 1% en peso de ácido benzoico o una sal del mismo.
22. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 18-21, caracterizada porque además comprende al menos 10 ppm de plata.
23. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 18-21, caracterizada porque además comprende al menos 20 ppm de plata.
24. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 18-21, caracterizada porque además comprende al menos 25 ppm de plata.
25. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 18-24, caracterizada porque comprende no más de 600 ppm de plata.
26. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 22-24, caracterizada porque comprende no más de 100 ppm de plata.
27. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 22-24, caracterizada porque comprende no más de 65 ppm de plata.
28. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 22-27, caracterizada porque aproximadamente 50 mg/mL de la composición en agua es isotónica con fluidos corporales.
29. La composición de conformidad con la reivindicación 28, caracterizada porque la solución isotónica tiene una osmolaridad en el intervalo de aproximadamente 280 hasta aproximadamente 330 mOsm/kg.
30. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 22-29, caracterizada porque tiene una densidad en el intervalo de aproximadamente 1.1 hasta aproximadamente 1.3 kg/m3.
31. Un proceso para elaborar la sal de fenil acetato de L-ornitina caracterizado porque comprende: intermezclar una sal de L-ornitina, una sal de benzoato y un solvente para formar una solución intermediaria; intermezclar fenil acetato con la solución intermediaria; y aislar una composición que comprende al menos 70% de fenil acetato de L-ornitina cristalino en peso.
32. El proceso de conformidad con la reivindicación 31, caracterizado porque además comprende remover al menos una porción de una sal de la solución intermediaria antes de intermezclar el fenil acetato, en donde la sal no es una sal de L-ornitina.
33. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque además comprende agregar ácido clorhídrico antes de remover al menos una porción de la sal.
34. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 31-32, caracterizado porque intermezclar la L-ornitina, la sal de benzoato y el solvente comprende: dispersar la sal de L-ornitina en agua para formar una primera solución; dispersar la sal de benzoato en DMSO para formar una segunda solución; e intermezclar la primera solución y la segunda solución para formar la solución.
35. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 31-34, caracterizado porque la composición comprende al menos aproximadamente 0.10% en peso de sal de benzoato.
36. El proceso de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porque la composición comprende no más de 5% en peso de sal de benzoato.
37. El proceso de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado porque la composición comprende no más de 1% en peso de sal de benzoato.
38. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 31-37, caracterizado porque la sal de L-ornitina es clorhidrato de L-ornitina.
39. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicacione°s 31-38, caracterizado porque la sal de benzoato es benzoato de plata.
40. El proceso de conformidad ' con la reivindicación 39, caracterizado porque la composición además comprende al menos 10 ppm de plata.
41. El proceso de conformidad con la reivindicación 40, caracterizado porque la composición comprende al menos 20 ppm de plata.
42. El proceso de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque la composición comprende al menos 25 ppm de plata.
43. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 39-42, caracterizado porque la composición comprende no más de 600 ppm de plata.
44. El proceso de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado porque la composición comprende no más de 100 ppm de plata.
45. El proceso de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado porque la composición comprende no más de 65 ppm de plata.
46. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 31-45, caracterizado porque el fenil acetato están en una sal de metal álcali.
47. El proceso de conformidad con la reivindicación 46, caracterizado porque la sal de metal álcali es fenil acetato de sodio.
48. El proceso de conformidad con la reivindicación 47, caracterizado porque la composición comprende no más de 100 ppm de sodio.
49. El proceso de conformidad con la reivindicación 48, caracterizado porque la composición comprende no más de 20 ppm de sodio.
50. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 31-49, caracterizado porque la L-ornitina está en una sal de haluro.
51. El proceso de conformidad ' con la reivindicación 50, caracterizado porque la sal de haluro es clorhidrato de L-ornitina.
52. El proceso de conformidad con la reivindicación 51, caracterizado porque la composición comprende no más de 0.1% en peso de cloruro.
53. El proceso de conformidad con la reivindicación 52, caracterizado porque la composición comprende no más de 0.01% en peso de cloruro.
54. Un proceso para elaborar la sal de fenil acetato de L-ornitina caracterizado porque comprende: incrementar el valor de pH de una solución que comprende una sal de L-ornitina al menos hasta que una sal intermediaria precipita, en donde la sal intermediaria no es una sal de L-ornitina; aislar la sal intermediaria de la solución; intermezclar ácido fenil acético con la solución; y aislar la sal de fenil acetato de L-ornitina de la solución.
55. El proceso de conformidad con la reivindicación 54, caracterizado porque el valor de pH se incrementa para al menos 8.0.
56. El proceso de conformidad con la reivindicación 55, caracterizado porque el valor de pH se incrementa para al menos 9.0.
57. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 54-56, caracterizado porque incrementar el valor de pH comprende agregar un modificador de pH seleccionado del grupo que consiste de hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, metóxido de sodio, t-butóxido de potasio, carbonato de sodio, carbonato de calcio, dibutilamina , triptamina, hidruro de sodio, hidruro de calcio, butillitio, bromuro de etilmagnesio o combinaciones de los mismos .
58. Un método para tratar o aliviar hiperamonemia en un sujeto administrando oralmente una cantidad terapéuticamente efectiva de una forma cristalina de sal de fenil acetato de L-ornitina, en donde la forma cristalina se selecciona del grupo que consiste de Forma I, Forma II, y Forma III, caracterizado porque: la Forma I exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que tiene picos característicos hasta aproximadamente 4.9°, 13.2°, 17.4°, 20.8° y 24.4° 2?; la Forma II exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que tiene picos característicos hasta aproximadamente 6.0°, 13.9°, 14.8°, 17.1°, 17.8° y 24.1° 2?; y la Forma III exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que tiene picos característicos hasta aproximadamente 5.8°, 14.1°, 18.6°, 19.4°, 22.3° y 24.8° 2? .
59. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 58, caracterizado porque la forma cristalina es la Forma I .
60. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 58, caracterizado porque la forma cristalina es la Forma II.
61. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 58, caracterizado porque la forma cristalina es la Forma III.
62. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 58, caracterizado porque al menos dos formas cristalinas seleccionadas del grupo que consiste de Forma I, Forma II, y Forma III, son administradas.
63. El método de conformidad con la reivindicación 62, caracterizado porque al menos dos formas cristalinas son administradas a aproximadamente el mismo tiempo.
64. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 58-63, caracterizado porque la forma cristalina se administra de 1 a 3 veces diariamente.
65. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 58-64, caracterizado porque la cantidad terapéuticamente efectiva está en el intervalo de aproximadamente '500 mg hasta aproximadamente 50 g.
66. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 58-65, caracterizado porque el sujeto se identifica por tener encefalopatía hepática.
67. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 58-65, caracterizado porque el sujeto se identifica por tener hiperamonemi .
68. Un proceso para elaborar la sal de fenil acetato de L-ornitina caracterizado porque comprende: intermezclar una sal de L-ornitina, fenil acetato de plata y un solvente para formar una solución, en donde la sal de L-ornitina es una sal de metal álcali; y aislar fenil acetato de L-ornitina de la solución.
69. Un método para tratar o aliviar hiperamonemia caracterizado porque comprende administrar intravenosamente una cantidad terapéuticamente efectiva de una solución que comprende fenil acetato de L-ornitina, en donde la cantidad terapéuticamente efectiva comprende no más de 500 mL de la solución.
70. El método de conformidad con la reivindicación 69, caracterizado porque la solución comprende al menos aproximadamente 25 mg/mL de fenil acetato de L-ornitina.
71. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 69-70, caracterizado porque la solución comprende al menos aproximadamente 40 mg/mL de fenil acetato de L-ornitina.
72. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 69-71, caracterizado porque la solución comprende no más de 300 mg/mL.
73. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 69-72, caracterizado porque la solución es isotónica con fluido corporal.
74. Un método para comprimir fenil acetato de L-ornitina, caracterizado porque comprende aplicar presión a una forma metastable de fenil acetato de L-ornitina para inducir un cambio de fase, en donde la forma metastable exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos -X que comprende al menos tres picos característicos, en donde los picos característicos se seleccionan del grupo que consiste de aproximadamente 4.9°, 17.4, 13.2°, 20.8° y 24.4° 2T.
75. El método de conformidad con la reivindicación 74, caracterizado porque la presión se aplica por un tiempo predeterminado .
76. El método de conformidad con la reivindicación 75, caracterizado porque el tiempo predeterminado es aproximadamente 1 segundo o menos .
77. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 74-76, caracterizado porque la presión es al menos aproximadamente 500 psi (3447.379 kpa) .
78. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 74-77, caracterizado porque el cambio de fase proporciona una composición que tiene una densidad en el intervalo de aproximadamente 1.1 hasta aproximadamente 1.3 kg/m3 después de aplicar la presión. '
79. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 74-78, caracterizado porque el cambio de fase proporciona una composición que exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X que comprende al menos tres picos característicos, en donde los picos característicos se seleccionan del grupo que consiste de aproximadamente 6.0°, 13.9°, 14.8°, 17.1°, 17.8° y 24.1° 2? .
80. Una composición caracterizada porque se prepara por el método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 74-79.
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Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT2153870E (pt) 2004-11-26 2014-03-12 Ucl Business Plc Composições compreendendo ornitina e fenilacetato ou fenilbutirato para tratamento de encefalopatia hepática
EA023051B1 (ru) 2009-04-03 2016-04-29 Осера Терапьютикс, Инк. Кристаллические формы фенилацетата l-орнитина и их применение
EP2799067B1 (en) 2009-06-08 2019-04-03 UCL Business PLC Treatment of brain inflammation using L-Ornithine Phenylacetate
US8068011B1 (en) 2010-08-27 2011-11-29 Q Street, LLC System and method for interactive user-directed interfacing between handheld devices and RFID media
BR112013008054B1 (pt) * 2010-10-06 2019-04-09 Ocera Therapeutics, Inc. Composição e processo para produção de sal de acetato de fenil l-ornitina
CN102993037B (zh) * 2012-11-20 2015-03-04 南京工业大学 一种l-鸟氨酸苯乙酸盐的制备方法
CN105481725B (zh) * 2014-09-18 2019-01-22 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 L-精氨酸苯乙酸盐的晶型及其制备方法
BR112017010761B1 (pt) 2014-11-24 2022-10-18 Ucl Business Plc Tratamento de doenças associadas à ativação de célula estrelada hepática com o uso de terapias de redução de amônia
CA2983146C (en) * 2015-04-20 2023-09-12 Ocera Therapeutics, Inc. Formulations of l-ornithine phenylacetate
CA2995823A1 (en) 2015-08-18 2017-02-23 Ocera Therapeutics, Inc. Treatment and prevention of muscle loss using l-ornithine in combination with at least one of phenylacetate and phenylbutyrate
EP3352748A4 (en) * 2015-09-25 2019-06-05 Ocera Therapeutics, Inc. TREATMENT AND PREVENTION OF NEURONAL CELL LOSS BY L-ORNITHIN IN COMBINATION WITH AT LEAST ONE PHENYL ACETATE AND PHENYL BUTYRATE
CN113768863A (zh) * 2015-11-13 2021-12-10 欧塞拉治疗有限公司 L-鸟氨酸苯乙酸盐制剂
US11219611B2 (en) * 2015-11-13 2022-01-11 Ocera Therapeutics, Inc. Formulations of L-ornithine phenylacetate
JOP20190146A1 (ar) 2016-12-19 2019-06-18 Axcella Health Inc تركيبات حمض أميني وطرق لمعالجة أمراض الكبد
JP7126520B2 (ja) * 2017-05-11 2022-08-26 オセラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｌ－オルニチンフェニルアセテートを製造する方法
JP7266581B2 (ja) 2017-08-14 2023-04-28 アクセラ・ヘルス・インコーポレイテッド 肝疾患の治療のためのアミノ酸組成物
US10596136B2 (en) 2018-06-20 2020-03-24 Axcella Health Inc. Compositions and methods for the treatment of fat infiltration in muscle
CN110707221B (zh) * 2019-09-25 2023-09-01 北京大学深圳研究生院 氨基酸离子液体在制备钙钛矿光电器件中钙钛矿层的应用
BR112022007268A2 (pt) * 2019-10-16 2022-07-05 Ocera Therapeutics Inc Dosagens e usos do fenilacetato de ornitina para o tratamento da hiperamonemia
WO2023240081A1 (en) * 2022-06-06 2023-12-14 Yale University Treatment, amelioration, and/or prevention of inflammatory and autoimmune diseases

Family Cites Families (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB965637A (en) 1962-04-23 1964-08-06 Tanabe Seiyaku Co L-ornithine l-aspartate
NL302572A (es) 1962-12-27
GB1067742A (en) 1963-09-16 1967-05-03 Kyowa Hakko Kogyo Kk Process for the preparation of l-ornithine l-aspartate
ZA716628B (en) 1970-10-15 1972-06-28 Richardson Merrell Spa Composition and method for treatment of hepatic disease and mental fatigue
FR2113774A1 (en) 1970-11-13 1972-06-30 Roques Ets Prepn of l-ornithine salts with org acids - using silver oxides
US4100161A (en) 1974-04-15 1978-07-11 The Johns Hopkins University Promotion of protein synthesis and suppression of urea formation in the body by keto analogs of essential amino acids
US3950529A (en) 1975-02-03 1976-04-13 Massachusetts General Hospital Amino acid formulations for patients with liver disease and method of using same
US4228099A (en) 1978-03-17 1980-10-14 The Johns Hopkins University Ornithine and arginine salts of branched chain keto acids and uses in treatment of hepatic and renal disorders
US4320146A (en) 1978-03-17 1982-03-16 The Johns Hopkins University Treatment of hepatic and renal disorders with ornithine and arginine salts of branched chain keto acids
US4352814A (en) 1979-04-18 1982-10-05 The Johns Hopkins University Treatment of hepatic and renal disorders with mixed salts of essential or semi-essential amino acids and nitrogen-free analogs
US4284647A (en) 1980-03-31 1981-08-18 The Johns Hopkins University Process for waste nitrogen removal
US4457942A (en) 1982-08-20 1984-07-03 Brusilow Saul W Process for waste nitrogen removal
US4783443A (en) 1986-03-03 1988-11-08 The University Of Chicago Amino acyl cephalosporin derivatives
US5139981A (en) 1987-06-24 1992-08-18 Union Carbide Chemicals & Plastics Technology Corporation Process for preparing silver(I)-exchanged resins
JP2522034B2 (ja) * 1988-12-27 1996-08-07 味の素株式会社 α−ケト酸・アミノ酸塩化合物及びその製造方法
JPH03273578A (ja) 1990-03-23 1991-12-04 Ricoh Co Ltd 対物レンズクリーニング装置
US5591613A (en) 1990-07-02 1997-01-07 Degussa Aktiengesellschaft Method for the preparation of D-arginine and L-ornithine
DE4020980C1 (es) * 1990-07-02 1991-09-26 Degussa Ag, 6000 Frankfurt, De
JP3127484B2 (ja) 1991-02-28 2001-01-22 味の素株式会社 肝炎治療薬
US5767086A (en) 1992-04-03 1998-06-16 Terrapin Technologies, Inc. Bone marrow stimulation by certain glutathione analogs
CA2144163A1 (en) 1992-09-09 1994-03-17 Fisons Limited Pharmaceutical packaging
US5571783A (en) 1993-03-09 1996-11-05 Clintec Nutrition Company Composition and method for treating patients with hepatic disease
JP3273578B2 (ja) 1993-09-21 2002-04-08 第一化学薬品株式会社 オルニチンと酸性アミノ酸類又はケト酸類との塩の製造法
US5856481A (en) 1994-07-28 1999-01-05 Syntex (U.S.A.) Inc. 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-purin-9-yl)methoxy-1,3-propanediol derivative
IL116674A (en) 1995-01-09 2003-05-29 Mendell Co Inc Edward Microcrystalline cellulose-based excipient having improved compressibility, pharmaceutical compositions containing the same and methods for the preparation of said excipient and of solid dosage form thereof
AU2251897A (en) 1996-02-13 1997-09-02 Trustees Of The University Of Pennsylvania, The Method of treating liver disorders
ZA986614B (en) 1997-07-25 1999-01-27 Gilead Sciences Nucleotide analog composition
GB9815567D0 (en) 1998-07-18 1998-09-16 Glaxo Group Ltd Antiviral compound
US6258849B1 (en) 1998-07-23 2001-07-10 Stanislaw R. Burzynski Treatment regimen for administration of phenylacetylglutamine, phenylacetylisoglutamine, and/or phenylacetate
AU4778700A (en) 1999-05-21 2000-12-12 Takeda Chemical Industries Ltd. Liver function controlling agents
US6768024B1 (en) 2000-08-04 2004-07-27 Lion Bioscience Ag Triamine derivative melanocortin receptor ligands and methods of using same
JP3211824B1 (ja) 2000-10-26 2001-09-25 味の素株式会社 分岐鎖アミノ酸含有医薬用顆粒製剤とその製造方法
JPWO2002074302A1 (ja) 2001-03-15 2005-07-14 独立行政法人理化学研究所 肝機能障害改善用アミノ酸組成物
US6503530B1 (en) 2001-11-01 2003-01-07 Chunghee Kimberly Kang Method of preventing development of severe metabolic derangement in inborn errors of metabolism
US20030105104A1 (en) 2001-11-27 2003-06-05 Burzynski Stanislaw R. Formulation of amino acids and riboflavin useful to reduce toxic effects of cytotoxic chemotherapy
US20040229948A1 (en) 2002-04-12 2004-11-18 Summar Marshall L. Method for preventing hepatic encephalopathic episodes
US20030195255A1 (en) 2002-04-12 2003-10-16 Summar Marshall L. Method for treating hepatic encephalopathies
CN1383815A (zh) 2002-05-08 2002-12-11 刘万忠 防治肝病、肝性脑病的鸟氨酸和门冬氨酸的复方制剂及其制备方法
US20040152784A1 (en) 2002-07-23 2004-08-05 Special Products Limited Pharmaceutical composition and method for treatment of a urea cycle deficiency or sickle-cell anaemia
WO2004019928A1 (ja) 2002-08-30 2004-03-11 Ajinomoto Co., Inc. 肝疾患治療剤
US20050059150A1 (en) * 2003-09-17 2005-03-17 Becton, Dickinson And Company Environments that maintain function of primary liver cells
MXPA03009902A (es) * 2003-10-29 2005-05-03 Manuel Francisco Lara Och Jose Compuestos para reducir la hiperamonemia en pacientes con cirrosis u otras incapacidad para la eliminacion de amonio.
JP5064037B2 (ja) * 2004-02-23 2012-10-31 ジェネンテック， インコーポレイテッド 複素環式自壊的リンカーおよび結合体
JP4954867B2 (ja) * 2004-05-06 2012-06-20 オステオロジックス エイ／エス 有機金属塩類を製造するための高収率で迅速な合成法
US20060045912A1 (en) 2004-08-30 2006-03-02 Peter Truog 4-phenylbutyric acid controlled-release formulations for therapeutic use
PT2153870E (pt) 2004-11-26 2014-03-12 Ucl Business Plc Composições compreendendo ornitina e fenilacetato ou fenilbutirato para tratamento de encefalopatia hepática
GB0426141D0 (en) * 2004-11-26 2004-12-29 Ucl Biomedica Plc Treatment
WO2007058634A1 (en) 2005-11-17 2007-05-24 Diagen Smartno Pri Ljubljani, D.O.O. Stable formulation of amorphous perindopril salts, a process for their preparation, especially industrial preparation, and their use in the therapy of hypertension
AU2015221466B2 (en) 2009-04-03 2017-02-02 Ocera Therapeutics, Inc. L-ornithine phenyl acetate and methods of making thereof
EA023051B1 (ru) 2009-04-03 2016-04-29 Осера Терапьютикс, Инк. Кристаллические формы фенилацетата l-орнитина и их применение
CA2763894A1 (en) 2009-06-02 2011-01-13 Salix Pharmaceuticals, Ltd. Use of rifaximin to maintain remission of hepatic encephalopathy
AU2014250643B2 (en) 2009-06-08 2016-07-14 Ocera Therapeutics, Inc. Treatment of portal hypertension and restoration of liver function using L-ornithine phenylacetate
EP2799067B1 (en) 2009-06-08 2019-04-03 UCL Business PLC Treatment of brain inflammation using L-Ornithine Phenylacetate
JP2011236160A (ja) 2010-05-11 2011-11-24 Shinshu Univ 非アルコール性肝疾患治療薬
BR112013008054B1 (pt) 2010-10-06 2019-04-09 Ocera Therapeutics, Inc. Composição e processo para produção de sal de acetato de fenil l-ornitina
SI2922576T1 (en) 2012-11-21 2018-04-30 Horizon Therapeutics, Llc Procedures for the administration and evaluation of medicines for the elimination of nitrogen for the treatment of hepatitis encephalopathy
BR112017010761B1 (pt) 2014-11-24 2022-10-18 Ucl Business Plc Tratamento de doenças associadas à ativação de célula estrelada hepática com o uso de terapias de redução de amônia
CA2983146C (en) 2015-04-20 2023-09-12 Ocera Therapeutics, Inc. Formulations of l-ornithine phenylacetate
CA2995823A1 (en) 2015-08-18 2017-02-23 Ocera Therapeutics, Inc. Treatment and prevention of muscle loss using l-ornithine in combination with at least one of phenylacetate and phenylbutyrate

Also Published As

Publication number Publication date
IL215449A0 (en) 2011-12-29
KR102217081B1 (ko) 2021-02-18
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BRPI1013657A2 (pt) 2016-04-26
US20120208885A1 (en) 2012-08-16
JP2020100624A (ja) 2020-07-02
WO2010115055A1 (en) 2010-10-07
JP2022088504A (ja) 2022-06-14
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IL215449B (en) 2019-01-31
LT2413924T (lt) 2018-02-12
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US10550069B2 (en) 2020-02-04
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DK2413924T3 (en) 2017-12-11
US20220162155A1 (en) 2022-05-26
US20180319736A1 (en) 2018-11-08
KR20220067001A (ko) 2022-05-24
SG10202010988WA (en) 2020-12-30
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KR102123243B1 (ko) 2020-06-17
US20180044281A1 (en) 2018-02-15
US9034925B2 (en) 2015-05-19
KR101844605B1 (ko) 2018-04-02
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SG174982A1 (en) 2011-11-28
AU2010232521B2 (en) 2015-07-16
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US11161802B2 (en) 2021-11-02
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KR101975726B1 (ko) 2019-05-07
CA2998344C (en) 2020-06-02
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US8173706B2 (en) 2012-05-08
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US20200239406A1 (en) 2020-07-30
PT2413924T (pt) 2018-01-04
CA3077846C (en) 2023-08-22
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