MX2010011463A - 2,6-diamino-pirimidin-5-il-carboxamidas como inhibidores de syk o jak quinasas. - Google Patents

2,6-diamino-pirimidin-5-il-carboxamidas como inhibidores de syk o jak quinasas.

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Zhaozhong J Jia
Yonghong Song
Qing Xu
Mukund Mehrotra
Jack W Rose
Wolin Huang
Chandrasekar Venkataramani
Anjali Pandey
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Abstract

La presente invención está dirigida a compuestos de fórmula I-V y tautómeros correspondientes o sales farmacéuticamente aceptadas, ésteres y profármacos correspondientes que actúan como inhibidores de quinasa syk. La presente invención también está dirigida a intermediarios utilizados en la elaboración de dichos compuestos, la preparación de dichos compuestos, composiciones farmacéuticas que contienen dichos compuestos, métodos para inhibir la activada de quinasa syk, métodos para inhibir la acumulación de plaquetas y métodos para prevenir o tratar una cantidad de enfermedades mediadas al menos parcialmente por actividad de quinasa syk, como enfermedades cardiovasculares, enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes y trastornos proliferativos de células. La Fórmula (I) Y1 es seleccionada del grupo que consiste en: (a) y (b), Z es O o S, D1 es seleccionada del grupo que consiste en: (a) fenilo sustituido por un grupo, R5 (b) naftilo (c) C3-8cicloalquilo (d) heteroarilo (e) heterociclolo.

Description

2,6-DIAMIN0-PIRIMIDIN-5-IL-CARB0XAMIDAS COMO INHIBIDORES DE SYK O JAK QUINASAS REFERENCIAS CRUZADAS A SOLICITUDES RELACIONADAS
[0001] Esta solicitud reivindica el beneficio de la solicitud provisoria de patente de los EE. UU. N.° 61/120.348, presentada el 5 de diciembre de 2008; de la solicitud provisoria de patente de los EE. UU . N.° 61/120.346, presentada el 5 de diciembre de 2008; de la de la solicitud provisoria de patente de los EE . UU . N.° 61/045.406, presentada el 16 de abril de 2008; y de la solicitud provisoria de patente de los EE. UU . N.° 61/045.499, presentada el 16 de abril de 2008; · la totalidad de cuyas revelaciones se incorpora en la presente en su totalidad, a título de referencia.
ANTECEDENTES de la invención
[0002] Esta invención está orientada a compuestos de pirimidina-5-carboxamida que actúan como inhibidores de la tirosina quinasa del bazo (syk, spleen tyrosine kinase) y/o de las JAK quinasas. Esta invención está también orientada a composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos de pirimidin-5-carboxamida y a métodos para utilizar los compuestos o composiciones para tratar una condición caracterizada por otras indicaciones. La invención también está orientada a métodos para producir los compuestos descritos en la presente.
Estado de la técnica
[0003] Las proteina quinasas constituyen una gran familia de enzimas estructuralmente relacionadas entre si que son responsables del control de una variedad de procesos de transducción de señales dentro de las células (Véanse, por ejemplo, Hardie y Hanks, The Protein Kinase Facts Book, I y II, Academic Press, San Diego, Calif., 1995). Se considera que las proteina quinasas han evolucionado a partir de un gen ancestral en común debido al hecho de haber conservado su estructura y función catalítica. Casi todas las quinasas contienen un dominio catalítico similar de 250-300 aminoácidos. Las quinasas pueden clasificarse en familias por medio de los sustratos que fosforilan (por ejemplo, la proteína tirosina, la proteína serina/treonina, los lípidos,. etc.). Se han identificado motivos de secuencias que en términos generales correspondes a cada una de estas familias (Véanse, por ejemplo, Hanks & Hunter, (1995), FASEB J. 9:576-596; Knighton et al., (1991), Science 253:407-414; Hiles et al., (1992), Cell 70:419-429; Kunz et al., (1993), Cell 73:585-596; García-Bustos et al., (1994), EMBO J. 13:2352-2361).
[0004] Muchas enfermedades están asociadas con respuestas celulares anormales desencadenadas por accidentes o acontecimientos mediados por proteína quinasas. Estas enfermedades incluyen enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias, enfermedades de los huesos, enfermedades metabólicas , enfermedades neurológicas y neurodegenerativas, cáncer, enfermedades cardiovasculares, alergias, asma, enfermedad de Alzheimer y enfermedades relacionadas con las hormonas. Como consecuencia, se han realizado importes esfuerzos en la química médica para hallar inhibidores de las proteína quinasas para su uso como agentes terapéuticos.
[0005] La señalización mediada por el motivo de activación de la tirosina de inmunoreceptor (ITAM, immunoreceptor tyrosine activation motif) se ha presentado como un acontecimientos primario en las trayectorias de señalización responsables de patologías humanas. La señalización ITA -mediada es responsable del retardo de las señales de activación iniciadas en los inmunoreceptores clásicos tales como los receptores de células-T, receptores de células-B, receptores de Fe en inmunocélulas y en el GPVI y FcyRIIa en las plaquetas relacionadas con moléculas intracelulares situadas corriente abajo tales como syk y ZAP-70 (Underhill, D.M y Goodridge, H. S., Trends Inmunol., 28:66-73, 2007) .
[0006] La ligación de un ligando a un receptor que contiene ITAM desencadena acontecimientos de señalización, lo que permite el reclutamiento de proteínas de una familia de tirosina quinasas no receptoras llamada la familia Src. Estas quinasas fosforilan residuos de tirosina dentro de la secuencia del ITAM, que es una región con la que interactúan los dominios tándem de SH2 sea sobre syk sea sobre ZAP-70.
[0007] Syk, junto con Zap-70, es un miembro de la familia syk de las proteina tirosina quinasas. La interacción de syk o de ZAP-70 con secuencias de ITAM difosforilado induce un cambio de conformación en las quinasas que permite la fosforilación de la tirosina quinasa propiamente dicha. Los miembros fosforilados de la familia Syk activan una pluralidad de proteínas de trayectorias de señalización corriente abajo que incluyen el dominio Src homólogo 2 (SH2) que contiene fosfoproteína leucocito-específica de 76 kDa (SLP-76) , Linker de la activación de células -T (LAT) y PLC (fosfolipasa C)y2.
[0008] Las patologías humanas atribuidas a una señalización disfuncional ITAM-mediada incluyen las enfermedades autoinmunes tales como la artritis reumatoide, lupus sistémico, esclerosis múltiple, anemia hemolítica, púrpura inmune-trombocitopenia , y trombocitopenia heparina-inducida y arteriesclerosis. Es interesante observar que se considera que muchas de las enfermedades mencionadas arriba se deben al enlace cruzado de los receptores Fe por anticuerpos que, por intermedio de syk, activan una cascada de de señalización en células germinales, basófilas y otras inmunocélulas , lo que tiene como resultado la liberación de mediadores de células responsables de reacciones inflamatorias. La liberación de mediatores y la producción de citoquinas en las reacciones alérgicas e inflamatorias dependientes de la estimulación de IgE a partir de células germinales y basófilos pueden controlarse mediante la inhibición de la actividad de tirosina quinasa de syk (Rossi, A.B. et al., J Allergy Clin Immunol . , 118:749-755, 2006). En la inmunotrombocitopenia, las plaquetas ligadas por anticuerpos son liberadas por el bazo mediante un proceso mediado por Fe receptor/ITAM/syk (Crow, A.R. et al., Blod, 106: abstract 2165, 2005). La trombocitopenia inducida por droga, causada por inmunocomplej os heparina-plaqueta factor 4 que activan las plaquetas FcyRIIa, también implican syk de señalización corriente abajo del acoplamiento del receptor (Reilly, M.P., Blod, 98:2442-2447, 2001).
[0009] Los agonistas de plaqueta inducen la señalización de integrina dentro-fuera , resultando la ligación de fibrinógeno y agregación de plaquetas. Esto inicia una señalización fuera -dentro que produce una mayor estimulación de las plaquetas. El syk se activa durante ambas fases de la señalización de la integrina, y se observa que la inhibición del syk inhibe la adhesión de las plaquetas a las proteínas inmovilizadas (Law, D.A. et al., Blod, 93:2645-2652, 1999). La liberación de ácido araquidónico y de serotonina, y la agregación de las plaquetas inducida por colágeno, son marcadamente inhibidas en las plaquetas derivadas de ratones syk deficientes (Poole, A. et al., EMBO J. , 16:2333-2341, 1997). Por lo tanto, los inhibidores de syk también pueden tener una acción de anticoagulación.
[0010] Debido al rol que desempeña el syk en las activaciones de plaquetas Ig-inducidas , es probable que sea importante en la arteriosclerosis y en la reestenosis. La arteriesclerosis es una clase de enfermedades caracterizada por el engrosamiento y endurecimiento de las paredes arteriales de los vasos sanguíneos. Si bien todos los vasos sanguíneos están expuestos a esta severa condición degenerativa, son la aorta y las arterias coronarias que sirven al corazón, las más frecuentemente afectadas. La arteriosclerosis tiene una profunda importancia clínica ya que puede incrementar el riesgo de ataques cardíacos, infartos de miocardio, accidentes cerebrovasculares y aneurismas.
[0011] El tratamiento tradicional para la arteriosclerosis incluye procedimientos de recanalización para los bloqueos menos serios y cirugía de bypass coronario para los bloqueos más importantes. Una seria desventaja de los procedimientos intravasculares es que, en una cantidad significativa de personas tratadas, algunos de los vasos tratados, o todos ellos, desarrollan una reestenosis (es decir, vuelven a angostarse) . Por ejemplo, la reestenosis de arteria coronaria aterosclerótica después de PTCA se presenta en el 10-50% de los pacientes tratados con este procedimiento, y esto subsiguientemente obliga a una angioplastia posterior o a un injerto de bypass de arteria coronaria. Por otra parte, la reestenosis de una arteria coronaria aterosclerótica después de la colocación de un stent tiene lugar en el 10-20% de los pacientes tratados con este procedimiento, y subsiguientemente requiere tratamientos de repetición para mantener un adecuado flujo de sangre a través de la arteria afectada. Por lo general la reestenosis se presenta en un periodo de tiempo relativamente breve, por ejemplo, aproximadamente inferior a seis meses, después del tratamiento.
[0012] Si bien no se han determinado los procesos hormonales y celulares exactos que promueven la reestenosis, se considera que la reestenosis se debe en parte a lesiones mecánicas en las paredes de los vasos sanguíneos causados por el catéter del balón o por otro dispositivo intravascula . Por ejemplo, el proceso del PTCA, además de abrir la arteria obstruida, también lesiona las células de los músculos lisos arteriales coronarios residentes (SMCs, smooth muscle cells) . En respuesta esta lesión, las plaquetas adheridas, los macrófagos infiltrantes, los leucocitos, o las células de los músculos lisos como tales liberan factores de crecimiento derivados de las células tales como el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF, platelet-derived growth factor) , con subsiguiente proliferación y migración de SMCs mediales a través de la lámina elástica interna de la túnica intima del vaso. La continuación de la proliferación y la hiperplasia de los SMCs intímales, y lo que es significativo, la producción de grandes cantidades de matriz extracelular a lo largo de un período de tres a seis meses tiene como resultado un rellenado y angostamiento del espacio vascular suficientes para obstruir de manera significativa el flujo de la sangre.
[0013] Además del rol que syk desempeña en las activaciones de las plaquetas inducidas por Ig, sky desempeña un papel muy importante en la señalización mediada por colágeno. La proteina adhesiva primaria responsable de la adhesión y activación de las plaquetas es el colágeno. El colágeno es una proteina filamentosa contenida dentro de las capas fibróticas de ateromas que se exponen a la sangre durante la ruptura de las placas. El colágeno funciona inicialmente ligando el factor de Von illebrand que restringe las plaquetas mediante la ligación de la membrana de las plaquetas, el GPIb. El colágeno funciona secundariamente mediante el acoplamiento de dos receptores de colágeno sobre plaquetas, el GPVI y la integrina 2ß1.
[0014] Gel GPVI existe en las membranas de las plaquetas en forma de un complejo con FcRy, lo que es una interacción requerida para la expresión del GPVI. La activación del FcyRIIa sobre las plaquetas tiene como resultado un cambio en la forma, secreción y trombosis de las plaquetas. La señalización mediante el complejo GPVI/FcRy es iniciado por la fosforilación de tirosina del dominio de ITAM del FCRy seguido por reclutamiento de syk. La activación del GPVI conduce a la inducción de múltiples funciones de las plaquetas que incluyen: la activación de las integrinas a2ß1 para llevar a cabo la adhesión firme de las plaquetas, y el GP Ilb-IIIa que media la agregación de las plaquetas y el desarrollo de la trombosis; la secreción de las plaquetas, lo que permite la entrega de proteínas inflamatorias tales como CD40L, RANTES y TGF a las paredes de los vasos; y la expresión de P-selectina, lo que permite el reclutamiento de leucocitos. Por ello se cree los inhibidores de syk pueden inhibir los acontecimientos trombóticos mediados por la adhesión, activación y agregación de las plaquetas.
[0015] Se ha informado que la fosforilación de tirosina de proteína intracelular (activación) inducida por estimulación de un receptor para el anticuerpo IgG, FcyR, y la fagocitosis mediada por FcyR son considerablemente inhibidas en los macrofagos derivados de ratones deficientes en syk (Crowley, M.T. et al., J. Exp. Med. , 186:1027-1039, 1997). Esto sugiere que el syk tiene un rol marcadamente importante en la fagocitosis FcyR-mediada de los macrofagos.
[0016] También se ha informado que un oligonucleótido antisentido de syk suprime la inhibición de la apoptosis de los eosinófilos inducida por GM-CSF (Yousefi, S. et al., J. E. Med., 183:1407-1414, 1996), lo que muestra que el syk es esencial para la señal de extensión de la vida, de los eosinófilos causada por el GM-CSF y similares. Dado que la extensión de la vida de los eosinófilos está estrechamente relacionada con la transición de las enfermedades a un estado crónico en los trastornos alérgicos, tales como el asma, los inhibidores de syk también pueden servir como agentes terapéuticos para la inflamación eosinófila crónica.
[0017] El syk es importante para la activación de las células-B por medio de un receptor del antigeno de las células -B, e interviene en el metabolismo del fosfatidilinositol y del incremento en la concentración del calcio intracelular causada por la estimulación del receptor del antigeno (Hutchcroft, J E. et al., J. Biol. Chem. , 267:8613-8619, 1992; y Takata, M. et al., EMBO J. , 13:1341-1349, 1994). Por lo tanto, los inhibidores del syk pueden utilizarse para controlar la función de las células-B y, por lo tanto se prevé que servirán como agentes terapéuticos para las enfermedades relacionadas con anticuerpos.
[0018] El Syk se liga al receptor del antigeno de las células T, experimenta rápidamente una fosforilación de tirosina por intermedio de la ligación reticulada del receptor y actúa sinérgicamente sobre las señales intracelulares mediadas por las Src tirosina quinasas tales como el Lck (Couture, C. et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USAr 91:5301-5305, 1994; y Couture, C. et al., Mol. Cell. Biol., 14:5249-5258, 1994). El syk se halla presente en las poblaciones de células T maduras, tales como las células T ?? . intraepiteliales y las células T nativas aß, y se ha informado de que es capaz de fosforilar múltiples componentes de la cascada de señalización de TCR (Latour, S. et. al., Mol Cell Biol., 17:4434-4441, 1997). Como consecuencia, los inhibidores de syk pueden servir como agentes para inhibir la inmunidad celular mediada por el receptor de antigeno de células T.
[0019] Los estudios de hibridación genómica comparativos recientes han identificado el syk como otro gen importante en la patogénesis del linfoma de células de manto (MCL, antle Cell Lymphoma) (Chen, R. et al. Journal of Clinical Oncology, 2007 ASCO Annual eeting Proceedings ( Post-Meeting Edition) . Vol 25, No 18S (June 20 Supplement), 2007: 8056). El MCL representa el 5-10% de todos los linfomas no Hodgkins, y se trata de una forma de linfoma de difícil tratamiento. Su pronóstico es el peor entre los linfomas de células B, con una supervivencia media de tres años. Se ha informado que el Syk está sobreexpresado en el MCL (Rinaldi, A, et al., Br. J. Haematol . , 2006; 132:303-316) y que el Syk media las señales de supervivencia de mTOR (mammalian target of Rapamycin, objetivo humano de la rapamicina) en los linfomas no Hodgkin foliculares, células de manto, células de Burkitt, y de células B difusas (Leseux, L., et . al, Blod, 2006; 108:4156-4162) .
[0020] Diversas líneas de evidencia sugieren que muchos linfomas de células B dependen de las señales de supervivencia mediadas por el BCR (B-cell receptor, receptor de células B) . El BCR de señalización induce la oligomerización y fosforilación de motivos activados basados en Iga y ß inmunorreceptor tirosina por las quinasas de la familia SRC. La fosforilación de ITAM tiene como resultado el reclutamiento y activación del syk que inicia acontecimientos corriente abajo y amplifica la señal de BCR original. Dado el rol del BCR tónico de señalización en la célula B normal y en la supervivencia syk-dependiente de las cepas de células no Hodgkins in vitro (Chen, L., et al., Blod, 2006; 108:3428-3433), la inhibición del syk es un objetivo de tratamiento racional prometedor para determinados linfomas de células B y para la leucemia linfocitica crónica (CLL; chronic lymphocytic leukemia) (Stefania Gobessi, Luca Laurenti, Pablo Longo, Laura Carsetti, Giuseppe Leone, Dimitar G. Efremov, Constitutive activation of the protein tyrosine kinase Syk in Chronic Lymphocytic Leukemia B-cells, Blod, 2007, 110, Abstract 1123) . Los datos recientes muestran que la administración de un inhibidor de multiquinasa que inhiba el syk, puede tener una actividad clínica significativa en los pacientes de CLL (Friedberg J et al, Blod 2008; 112(11), Abstract 3).
[0021] El potencial oncogénico del Syk (spleen tyrosine kinase, tirosina quinasa de bazo) ha sido descrito en una variedad de diferentes ambientaciones . Desde el punto de vista clínico, la sobreexpresion de Syk ha sido informada en el Linfoma de Células de Manto (Mantle Cell Lymphoma) (Rinaldi, A, et al., Br. J. Hae atol., 2006; 132:303-316) y la proteína de fusión TEL-Syk (Translocated ETS Leucemia, Leucemia ETS Translocalizada) generada por la translocación cromosomal ( t ( 9 ; 12 ) (q22; l2 ) ) conduce a una actividad acrecentada de Syk y está asociada con el síndrome mieloplástico (Kuno, Y., et al., Blod, 2001; 97:1050-1055) . Se induce la leucemia en ratones mediante la transferencia adoptiva de células de medula ósea que expresan el TEL-Syk humano (Wossning, T., JEM, 2006; 203:2829-2840). Además, en las células de médula ósea primaria de ratones, la sobreexpresión de Syk resulta en un desarrollo IL-7 independiente en cultivo (Wossning, T., et al., JEM, 2006; 203:2829-2840).
[0022] Es interesante comprobar que el Syk de señalización parece ser necesario para el desarrollo y supervivencia de las células B en humanos y ratones. La pérdida inducible del receptor de células B (Lam, K. , et al., Cell, 1997; 90:1073-1083) o Igcx (Kraus, M., et al., Cell, 2004; 117:787-800) tiene como resultado la pérdida de células B periféricas en los ratones. La sobreexpresión de la proteína tirosina fosfatasa PTP-RO, de la que se sabe que regula negativamente la actividad del Syk, inhibe la proliferación e induce la apoptosis en cepas de células derivadas de linfomas no Hodgkin (Chen, L., et al., Blod, 2006; 108:3428-3433). Finalmente, los linfomas de células B raramente presentan una pérdida de la expresión de BCR, y la terapia anti-idiotipo raramente conduce a una resistencia (Kuppers, R. Nat Rev Cáncer, 2005; 5:251-262).
[0023] La intervención del BCR (antigen-specific B cell receptor, receptor de células B antígeno-específico) activa múltiples trayectorias de señalización que en última instancia regulan el status de la activación de las células, promoviendo la supervivencia y la expansión clonal. La señalización por intermedio del BCR se hace posible por su asociación con dos otros miembros de la superfamilia de la inmunoglobulina, Iga y Ig3, cada uno de los cuales lleva un motivo de activación inmunotirosin-basado (ITAM, inmuno-tyrosine based activation motif) (Jumaa, · Hendriks et al. Annu Rev Inmunol 23: 415-45 (2005) . El dominio del ITAM es directamente fosforilado por las quinasas de la familia Src en respuesta a la intervención de BCR. El Syk (spleen tyrosine kinase, tirosina quinasa de bazo) se acopla con, y fosforila, el ITAM, proceso éste que refuerza su actividad de quinasa, resultando la autofosforilación del Syk y la fosforilación de tirosina de múltiples sustratos situados corriente abajo (Rolli, Gallwitz et al. Mol Cell 10(5): 1057-69 (2002). Esta trayectoria de señalización es activa en las células B que empieza en la transición desde la etapa prodesarrollo a predesarrollo de las células B, cuando se expresa el pre-BCR. De hecho, el desarrollo de las células B se detiene en la etapa de las células B en los ratones Syk knockout (Cheng, Rowley et al. 1995; Turner, Mee et al. Nature 378(6554): 303-6 (1995). La pérdida inducible del receptor de células B (Lam, Kuhn et al. Cell 90(6): 1073-83 (1997) o Iga (Kraus, Alimzhanov et al. Cell 117(6): 787-800 (2004) tiene como resultado la pérdida de células B en los ratones. Las células B humanas también parecen requerir Syk para su proliferación y supervivencia. La sobreexpresión de la proteina tirosina fosfatasa PTP-RO, que es un regulador negativo de la actividad del Syk, inhibe la proliferación e induce la apoptosis en cepas de células derivadas de linfomas no Hodgkin (NHL) (Chen, Juszczynski et al. Blod 108(10): 3428-33 (2006) . El knock down de Syk por siRNA en la cepa NHL SUDHL-4 condujo a un bloqueo en la transición Gl/S del ciclo de las células (Gururajan, Dasu et al. J Inmunol 178(1): 111-21 (2007). En su conjunto, estos datos sugieren que el Syk de señalización es necesario para el desarrollo, proliferación, y aún la supervivencia de células B humanas y de ratón.
[0024] A la inversa, el potencial oncogénico del Syk ha sido descrito en una cantidad de diferentes entornos. Clínicamente, la sobreexpresión del Syk ha sido objeto de informes en el caso del Linfoma de las Células de Manto (Mantle Cell Lymphoma) (Rinaldi, Kwee et al. Br J Haematol 132(3): 303-16 (2006) y la proteína de fusión TEL-Syk (Translocated ETS Leucemia. Leucemia de ETS translocalizada) generada por translocación cromosomal (t(9;12) (q22;pl2)) conduce a una mayor actividad de Syk y está asociado con el síndrome mielodisplásico ( uno, Abe et al. Blod 97(4): 1050-5 (2001). Se induce la leucemia mediante la transferencia adoptiva de células de médula ósea que expresan TEL-Syk humano ( ossning, Herzog et al. J Exp Med 203(13): 2829- 40 (2006) . Por otra parte, en las células de médula ósea de ratón, la sobreexpresión de Syk resulta en un desarrollo IL-7 independiente en cultivo (Wossning, Herzog et al. 2006). Se ha informado de manera coherente que el Syk media las señales de supervivencia de mTOR (mammalian target of Rapamycin, objetivo humano de rapamacina) en NHL de células B foliculares, de manto, de Burkitt y grandes difusas (Leseux, Hamdi et al. Blod 108(13): 4156-62 (2006) . Los estudios adicionales recientes también .sugieren que las señales de supervivencia Syk-dependientes pueden desempeñar un rol en las enfermedades malignas de las células B, lo que incluye el DLBCL, el linfoma de las células de manto y el linfoma folicular (Gururajan, Jennings et al. 2006; Irish, Czerwinski et al. J Inmunol 176(10): 5715-9 (2006). Dado el rol del BCR tónico de señalización en las células B normales y en la supervivencia Syk-dependiente de las cepas NHL de células in vitro, la inhibición especifica del Syk puede demostrar ser una promesa para el tratamiento de determinados linfomas de las células B.
[0025] En tiempos recientes, se ha informado que el R406 (Rigel Pharmaceuticals ) inhibe la señalización de ITAM en respuesta a diversos estímulos, lo que incluye la activación de Syk inducida por FcDRl y BCR (Braselmann, Taylor et al. J Pharmacol Exp Ther 319(3): 998-1008 (2006). Es interesante comprobar que este inhibidor ATP-competitivo resulta también ser activo contra las Flt3, cKit, y JAK quinasas, pero no contra la Src quinasa (Braselmann, Taylor et al. 2006). Las mutaciones de activación a Flt3 están asociadas a AML, y la inhibición de esta quinasa se halla actualmente bajo desarrollo clínico (Burnett y Knapper Hematology Am Soc Hematol Educ Program 2007: 429-34 (2007). La sobreactivación de la tirosina quinasa cKit está también asociada con enfermedades malignas hematológicas , y son un objetivo para la terapia de cáncer (Heinrich, Griffith et al. Blod 96(3): 925-32 (2000). De manera similar, la señalización de JAK3 interviene en leucemias y linfomas, y en la actualidad se utiliza como objetivo terapéutico potencial (Heinrich, Griffith et al. 2000). Es importante que la actividad inhibidora de múltiples quinasas del R406 atenúa la señalización de BCR en cepas de linfomas de células y muestras de linfoma humano, resultando la apoptosis de aquellas (Chen, Monti et al. Blod 111(4): 2230-7 (2008). Por otra parte, una prueba clínica de fase II fue objeto de un informe de resultados favorables logrados con este compuesto en el NHL refractario y en la leucemia linfocítica crónica (Friedberg JW et al, Blod 2008; 112(11), Abstract 3). Si bien el mecanismo exacto de acción no está claro para el R406, los datos sugieren que la inhibición de las quinasas que median la supervivencia de señalización en los linfocitos es beneficiosa desde el punto de vista clínico.
[0026] Estudios adicionales recientes también sugieren que las señales de supervivencia syk-dependientes pueden desempeñar un rol en las enfermedades malignas de las células B, lo que incluye el DLBCL, el linfoma de las células de manto y el linfoma folicular (véanse por ejemplo, S. Linfengshen et al. Blod, Feb. 2008; 111: 2230-2237; J. M. Irish et al. Blod, 2006; 108: 3135-3142; A. Renaldi et al. Brit J. Haematology, 2006; 132: 303-316; M. Guruoajan et al. J. Inmunol, 2006; 176: 5715-5719; L. Laseux et al. Blod, 2006; 108: 4156-4162.
[0027] Las Patentes y Solicitudes de Patente que describen compuestos de pirimidindiamina sustituida incluyen: la Solicitud de Patente de los EE.UU. Ser. No. 10/355,543 presentada el 31 de enero de 2003 (US2004 /0029902A1 ) , la Solicitud Internacional Serie No. PCT/US03/03022 presentada el 31 de enero de 2003 (WO 03/063794), la Solicitud de Patente de los EE.UU. Ser. No. 10/631,029 presentada el 29 de julio de 2003, la Solicitud Iternational Serie No. PCT/US03/24087 (WO 04/014382), la Solicitud de Patente de los EE.UU. Ser. No. 10/903,263 presentada el 30 de julio de 2004, y la Solicitud Internacional Serie N.° PCT/US2004/24716 (WO 05/016893), cuyas revelaciones se incluyen en la presente a titulo de referencia. También se describen compuestos de pirimidindiamina sustituida en las publicaciones de Solicitudes Internacionakes Números: WO 02/059110, WO 03/074515, WO 03/106416, WO 03/066601, WO 03/063794, WO 04/046118, WO 05/016894, WO 05/122294, WO 05/066156, WO 03/002542, WO 03/030909, WO 00/39101, WO 05/037800 y en la Pub. de los EE.UU. N.° 2003/0149064.
[0028] Si bien en este campo se han hecho progresos, en la especialidad sigue habiendo una necesidad de compuestos que inhiban las syk quinasas, como también de métodos para tratar condiciones en un paciente, tales como la reestenosis, trombosis, y/o la inflamación, que puedan beneficiarse de tal inhibición. Por otra parte, también seria deseable la disponibilidad de compuestos que de manera selectiva inhiban una de estas quinasas en comparación con otras quinasas. La presente invención satisface esta necesidad, y otras.
BREVE síntesis de la invención
[0029] La presente invención provee nuevos compuestos que tienen una actividad como inhibidores de la actividad del syk (que en la presente también reciben la designación de "inhibidores de syk") , de la actividad de quinasa (que en la presente también reciben la designación de "inhibidores de JAK"), y también provee métodos para su preparación y uso, y provee composiciones farmacéuticas que contienen los mismos. Tales compuestos tienen la siguiente estructura (I): (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, siendo D1, E1 y Y1 como se definen en lo que sigue.
[0030] La presente invención también provee una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo y/o diluyente farmacéuticamente aceptable.
[0031] Los compuestos de la presente invención son útiles en una amplia gama de aplicaciones terapéuticas, y pueden utilizarse para tratar una variedad de condiciones, mediadas al menos parcialmente por la actividad del syk, tanto en hombres como en mujeres, así como también en mamíferos en general (que en la presente también reciben la designación de "sujeto"). Por ejemplo, tales condiciones incluyen, pero no se limitan a, las asociadas con enfermedad cardiovascular, enfermedad inflamatoria o enfermedad autoinmune. Más específicamente, los compuestos de la presente invención tienen una utilidad para condiciones o trastornos que incluyen, pero no se limitan a: reestenosis, trombosis, inflamación, trombocitopenia inducida por heparina, cardiomiopatía dilatada, enfermedad de las células en hoz, aterosclerosis, infarto de miocardio, inflamación vascular, angina inestable, síndromes coronarios agudos, alergia, asma, artritis reumatoide, enfermedades medidas por las células B tales como el linfoma que no es de Hodgkin, síndrome antifosfolípido, lupus, soriasis, esclerosis múltiple, enfermedad renal de etapa final, anemia hemolítica, púrpura inmune trombocitopénica y leucemia linfocítica crónica. Por lo tanto, en una forma de realización, se revelan métodos que incluyen la administración de una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), típicamente en la forma de una composición farmacéutica, a un sujeto que lo necesite.
[0032] Las condiciones asociadas con enfermedad cardiovascular se seleccionan del grupo consistente en síndrome coronario agudo, infarto de miocardio, angina inestable, angina refractaria, trombosis coronaria oclusiva que se presenta después de terapia postrombolítica o de la angioplastia poscoronaria, un síndrome cerebrovascular trombóticamente mediado, apoplejía embólica, apoplejía trombótica, ataques isquémicos transitorios, trombosis venosa, trombosis de las venas profundas, embolismo pulmonar, coagulopatía , coagulación intravascular diseminada, púrpura trombocitopénica trombótica, thromboangiitis obliterans, enfermedad trombótica asociada con thrombocitopenia inducida por heparina, complicaciones trombóticas asociadas con circulación extracorpórea, complicaciones trombóticas asociadas con instrumentación tales como cateterización cardiaca u otras instrumentaciones intravasculares, bomba de balón intra-aórtico, stent coronario o válvula cardiaca, y condiciones que requieran la colocación de dispositivos protésicos.
[0033] La presente invención también provee un método para inhibir la actividad de la syk quinasa de una muestra de sangre, que comprende poner en contacto dicha muestra con un compuesto de la presente invención.
[0034] Además, la presente invención provee compuestos en formas purificadas, asi como compuestos intermedios químicos.
[0035] Estos aspectos, rasgos y ventajas, y otros, de la invención se pondrán en evidencia con referencia a las siguientes descripción detallada y figuras. A tal efecto, en la presente se consignan diversas referencias que describen con mayor detalle la información de antecedentes, procedimientos, compuestos y/o composiciones, y cada uno de los mismos se incorpora en la presente a título de referencia, en su totalidad.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS figuras
[0036] La Figura 1 muestra cómo el Syk sirve como un mediador clave de la señalización mediada por el receptor de Fe en la biología celular y en múltiples enfermedades.
[0037] La Figura 2 muestra cómo el apuntamiento al gen del Syk indicó que el Syk sirve como un mediador clave en la biología de las plaquetas arteriales y como un objetivo selectivo para tratar la trombosis arterial.
[0038] La Figura 3 muestra una síntesis general de los compuestos de la presente invención.
[0039] Las Figuras 4A, B y C proveen las Tablas 2A, B y C que ilustran compuestos de la presente invención y syk IC50S .
[0040] La Figura 5 provee la Tabla 3 que ilustra compuestos de la presente invención y syk IC50s.
[0041] La Figura 6 provee la Tabla 4 que ilustra compuestos de la presente invención y syk IC5os .
[0042] Las Figuras 7A y 7 B proveen las Tablas 5 A y B que ilustran compuestos de la presente invención y syk IC50S .
[0043] La Figura 8 muestra una serie de compuestos que fueron identificados por selectivamente inhibir el Syk en ensayos con quinasa purificada. Los compuestos de la Figura 8A) (Ejemplo 596 y Ejemplo 87 y P420-89) fueron seleccionados a 300 nM con respecto al panel de quinasa purificada de Millipore (270 quinasas ensayadas con ATP 10µ ) a efectos de determinar la potencia y selectividad con respecto al Syk. Los datos se han representado como un heat-map, definido en la parte inferior. El subconjunto de la Figura 8B) de las quinasas purificadas que tenía >80% de inhibición mediante cualquiera de los tres compuestos. El ejemplo 596 solamente inhibió el Syk y MLK1. El Ejemplo 87 a 50nM (~10x mayor que su Syk IC50) sólo inhibió el Syk. El P420-89 inhibió múltiples quinasas, que incluyen Syk, JAK2 y JAK3. El IC50 de la inhibición del Syk para cada compuesto ha sido indicado a la izquierda del heat map. En cada panel en el heat-map se indica la inhibición porcentual de la quinasa.
[0044] La Figura 9 muestra la inhibición selectiva del Syk en cepas de células que no son de linfoma de Hodgkin. Se estimularon células B con anticuerpo anti-BCR en la presencia de las concentraciones indicadas de inhibidores específicos de Syk en los Ejemplos 596 y 87 (Figura 9A y Figura 10B) o el inhibidor dual de Syk/JAK, P420-89 (Figura 9C) . Seguidamente se llevaron a cabo los análisis de Western blot de lisatos de células enteras para evaluar la actividad de la Syk quinasa (pBLNK Y84 y BLNK total; dos geles arriba) y de la actividad de la Src quinasa (pSyk Y352 y Syk total; dos geles abajo) . Se llevaron a cabo experimentos 2-3 veces para cada uno, los gráficos de barra representan media ± S.D. de pBLNK Y84. Los IC50s calculados de inhibición de Syk quinasa se han representado arriba de los gráficos .
[0045] La Figura 11 provee una comparación de la inhibición Syk-específlea y dual de Syk/JAK en cep_as de células NHL. Se estimularon células B con anti-BCR (Figura 11A) , o IL-4 (Figura 11B) durante 15 min en la presencia de diversas concentraciones de cada inhibidor, como se indica. Seguidamente se evaluaron las células para establecer la inhibición de las trayectorias de señalización mediante citometria de fosfo-flujo. En la Figura 11A) los gráficos de barra (media ± S.D., n=3) representan la actividad de Src (pSyk Y352 MFI) y la actividad de Syk (pERK Y204 MFI) después de la estimulación por PCR bajo las diversas condiciones de tratamiento. En la Figura 11B) los gráficos de barra ilustran pSTAT-6 Y641 MFI (media + S.D., n=3) después de estimulación con IL-4 en la presencia de diversas concentraciones de cada inhibidor, como se indica.
[0046] La Figura 12 muestra cómo los inhibidores Syk-especificos anulan la proliferación y supervivencia de, e inducen la apoptosis en cepas de células de NHL. Los tipos de células de NHL Syk-dependiente "de tipo BCR" y Syk-independiente "que no son de tipo BCR" han sido descritas en lo que precede (Polo, Juszczynski et al. Proc Nati Acad Sci U S A 104(9): 3207-12 (2007) . Figura 12A) : las células fueron tratadas durante 72h con 1 y 3µ? del inhibidor Syk-especifico del Ejemplo 87. Se determinó la apoptosis mediante análisis FACS de caspasa 3 activa; los datos se representan como histogramas. Figura 12B) : se ensayaron cepas de células adicionales para establecer su sensibilidad al Syk especifico (Ejemplo 596 y Ejemplo 87) vs inhibición dual de Syk/JAK (P420-89) . Los gráficos de barra representan media ± S.D. (n=3) del porcentaje de células caspasa 3 positivas según cada condición .
[0047] La Figura 13 muestra cómo la inhibición selectiva del Syk impide la activación BCR-inducida de las células B primarias de ratón. La Figura 13 provee una comparación entre la inhibición de Syk-especifica y la inhibición dual de Syk/JAK en cepas de células. Se estimularon células B con anti-BCR (Figura 13C) durante 15 min en la presencia de diversas concentraciones de cada inhibidor, como se indica. Seguidamente se evaluaron las células para establecer la inhibición de las trayectorias de señalización mediante citometria de fosfo-flujo. Figura 13C) : trazos de citometria de flujo (media ± S.D., n=3) que representan la actividad de Src (pSyk Y352 MFI) y la actividad de Syk (pERK Y204 MFI) después de estimulación por BCR bajo las diversas condiciones de tratamiento.
[0048] La Figura 14 muestra la eficacia en un modelo ratón de artritis mediante la inhibición especifica de Syk
[0049] La Figura 15 muestra cómo la histopatologia en un modelo ratón confirma el puntaje clínico para un inhibidor Syk específico .
[0050] La Figura 16 muestra el efecto dosis dependiente de la inhibición de Syk/JAK en un modelo ratón de artritis.
[0051] La Figura 17 provee un modelo de inmunotrombocitopenia de ratón.
[0052] La Figura 18 muestra cómo la inhibición del Syk impide la formación de tumores de NHL en un modelo ratón con xenoinjerto de una cepa de células de NHL. El Ejemplo 87 de inhibidor selectivo de Syk impide la formación de tumores en ratones que c- recibieron xenoinj ertos . Los ratones recibieron dosis diarias de 10, 15, o 20 mg/kg de Ejemplo 87 o de vehículo de control, a partir el día de la inoculación de las células tumorales. A): se determinaron los pesos de los tumores a las 4 semanas postinoculación para cada condición de tratamiento. Las diferencias estadísticas con respecto al vehículo utilizado como control se ilustran como valores P dentro del gráfico. B) : Los gráficos de barra ilustran conteos de células sanguíneas normales (media ± S.D., n=13 a 15) de ratones tratados con cada concentración del Ejemplo 87 o del vehículo utilizado como control.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA invención
[0053] Tal como se usa en la presente, los términos de abajo tienen los siguientes significados, a menos que se especifique otra cosa: 0 1. Abreviaturas y definiciones
[0054] Las abreviaturas usadas en la presente son convencionales, a menos que se defina de otra manera. Se usan las siguientes abreviaturas: AcOH = ácido acético, AIBN azobisisobutironitril (también azobisisobutilonitrilo ) , ac. acuoso, Boc = t-butilcarboxi, Bz - bencilo, BOP hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitris (dimetilamino) -fosfonio, BPO = peróxido de benzoílo, nBuOH = n-butanol, CBr4 = tetrabromometano, mCPBA = ácido m-cloroperoxibenzoico, CH2C12 o DCM = diclororaetano, Cs2C03 = carbonato de cesio, CuC12 = cloruro de cobre; DPPA = difenilfosforilazida ; DIBAL = hidruro de diisobutilaluminio, DIEA = base de Hunig o diisopropiletilamina, DME = éter dimetilico, DMF = dimetilformamida, DMSO dimetilsulfóxido, Et3N = trietilamina, EtOAc = acetato de etilo, g = gramo, HATU = 2-hexafluorofosfato de ( ??-7-Azabenzotriazol-l-il) -1, 1, 3, 3-tetrametiluronio, H2 = hidrógeno; H20 = agua; HBr = bromuro de hidrógeno; HC1 = cloruro de hidrógeno, HIV = virus dé inmunodeficiencia humana, HPLC = cromatografía líquida a alta presión, h = hora, -IgE = inmunoglobulina E, IC50 = la concentración de un inhibidor que se requiere para el 50% de inhibición de una enzima in vitro, IPA = alcohol isopropílico, kg kilogramo, KCN = cianuro de potasio, KOH = hidróxido de potasio, K2P04 = fosfato de potasio, LDA = diisopropilamina de litio, LÍA1H4 = hidruro de litio y alumino = LiOH: hidróxido de litio; MeCN = acetonitrilo; MS = espec. de masa, m/z = relación de masa a carga, Hz = megahertz, MeOH = metanol, µ? = micromolar, pL = microlitro, mg = miligramo, rara = milímetro, m = milimolar, mmol = milimol, mL = mililitro, mOD/min = unidades de densidad milioptica por minuto, min = minuto, M = molar, Na2C03 = carbonato de sodio, ng = nanogramo, NaHC03 = bicarbonato de sodio; NaN02 = nitrito de sodio; NaOH = hidróxido de sodio; Na2S203 = bisulfato de sodio; Na2S04 = sulfato de sodio; NBS = N-broraosuccinamida ; NH4C1 = cloruro de amonio; NH40Ac = acetato de amonio; NaSMe = metiltiolato de sodio, NBS = N-bromosuccinamida, n-BuLi = n-butil-litio, nm = nanómetro, nM = nanomolar, N = normal, N P = N-metilpirrolidina, RMN = resonancia magnética nuclear, Pd/C = paladio sobre carbón, Pd(PPh3)4 = Tetrakis-(trifenil-fosfina) -paladio, pM = picomolar, Pin = pinacolato, PEG = polietilenglicol , PPh3 o Ph3P = trifenilfosfina, RLV = virus de leucemia de Raucher, Ra-Ni = níquel Rainey, S0C12 = cloruro de tionilo, TA = temperatura ambiente, TEA = trietilamina , THF = tetrahidrofurano, TFA = ácido trifluoroacético, TLC cromatografía líquida en capa fina, TMS = trimetilsililo, Tf = trifluorometilsulfonilo y TSC = citrato trisódico.
[0055] Se nota aquí que, como se usa en esta memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares "un", "una", "el" y "la" incluyen la referencia plural, a menos que el contexto claramente dictamine otra cosa.
[0056] "Alquilo" en sí o como parte de otro sustituyente, implica, a menos que se establezca otra cosa, un radical hidrocarbonado alifáctico completamente saturado de cadena lineal o ramificada que tiene la cantidad de átomos de carbono designada. Por ejemplo, "alquilo Ci-8" se refiere a un radical hidrocarbonado lineal o ramificado con 1 a 8 átomos de carbono que se deriva por eliminación de un átomo de hidrógeno de un átomo de carbono simple de un alcano principal. La frase "alquilo no sustituido" se refiere a grupos alquilo que no contienen grupos distintos de radicales hidrocarbonados alifáticos completamente saturados. Asi, la frase incluye grupos alquilo de cadena lineal tales como metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo, undecilo, dodecilo, y similares. La frase también incluye isómeros de cadena ramificada de grupos alquilo de cadena lineal tales como isopropilo, t-butilo, isobutilo, sec-butilo, y similares. Los grupos alquilo representativos incluyen grupos alquilo de cadena lineal y ramificada que tienen 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ó 12 átomos de carbono. Otros grupos alquilo representativos incluyen grupos alquilo de cadena lineal y ramificada que tienen 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 u 8 átomos de carbono.
[0057] "Alquenilo" en si o como parte de otro sustituyente se refiere a una cadena lineal o ramificada, que puede ser mono- o poliinsaturada, que tiene la cantidad de átomos de carbono designada. Por ejemplo, "alquenilo C2-C ' implica un radical alquenilo que tiene de 2, 3, 4, 5, 6, 7 u 8 átomos que se deriva por eliminación de un átomo de hidrógeno de un átomo de carbono simple de un alcano principal. Los ejemplos incluyen, pero sin limitación, vinilo, 2-propenilo, es decir -CH=C(H) (CH3) , CH=C(CH3)2, -C(CH3)=C(H)2, -C { CH3 ) =C ( H ) ( CH3 ) , -C (CH2CH3) =CH2, butadienil por ejemplo 2- (butadienilo ) , pentadienilo, por ejemplo 2 , -pentadienilo y 3- (1, 4-pentadienilo) y hexadienilo, entre otros, y homólogos y estereoisómeros superiores de ellos. Un grupo alquenilo "sustituido" incluye grupos alquenilo en donde un átomo no carbono o no hidrógeno está unido con un carbono doble unido con otro carbono y aquellos en los que un átomo no carbono o no hidrógeno está unido a un carbono no implicado en un enlace doble con otro carbono. Cada sitio de instauración puede tener configuración cis o trans respecto de los enlaces dobles.
[0058] El término "alquinilo", en si o como parte de otro sustituyente, implica un radical hidrocarbonado de cadena lineal o ramificada, que puede ser mono- o poliinsaturada, que tiene la cantidad de átomos de carbono designada. Por ejemplo, "alquinilo C2-C8" implica un radical alquinilo que tiene de 2 a 8 átomos de carbono que se deriva por eliminación de un átomo de hidrógeno de un átomo de carbono simple de un alcano principal. "Alquinilo no sustituido" se refiere a grupos de cadena lineal y ramificada tales como los descritos respecto a grupos alquilo no sustituidos tal como se definió con anterioridad, excepto en que se usó al menos un enlace triple que existe entre dos átomos de carbono. Los ejemplos incluyen, pero sin limitación, etinilo, por ejemplo -C=C(H), 1-propinilo, por ejemplo, -C=C(CH3), -C=C (CH2CH3) , - C(H2)C=C(H), -C (H) 2C=C (CH3) y -C (H) 2C=C (CH2CH3) entre otros y homólogos e isómeros superiores de ellos. Un grupo alquinilo "sustituido" incluye grupos alquinilo en donde un átomo no carbono o no hidrógeno está unido con un carbono triple unido con otro carbono y aquellos en los que un átomo no carbono o no hidrógeno está unido con un carbono no implicado en un enlace triple con otro carbono.
[0059] "Alquileno" en si o como parte de otro sustituyente implica un radical divalente derivado de un alcano, tal como se ejemplifica con -CH2CH2CH2CH2- . Típicamente, un grupo alquileno tendrá de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 u 8 átomos de carbono que se deriva por eliminación de un átomo de hidrógeno de un átomo de carbono simple de un alquilo principal.
[0060] "Cicloalquilo" o "carbociclo", en sí o en combinación con otros términos, a menos que se establezca otra cosa, implica versiones cíclicas de "alquilo", "alquenilo" y "alquinilo", en donde todos los átomos del anillo son carbono. "Cicloalquilo" o "carbociclo" se refiere a un grupo mono- o policíclico. Cuando se usa en conexión con sustituyentes de cicloalquilo, el término "policíclico" se refiere en la presente a estructuras cíclicas de alquilo fusionadas y no fusionadas. "Cicloalquilo" o "carbociclo" puede formar un anillo en puente o un anillo espiro. El grupo cicloalquilo puede tener uno o varios enlaces dobles o triples.
El término "cicloalquenilo" se refiere a un grupo cicloalquilo que tiene al menos un sitio de instauración de alquenilo entre los vértices del anillo. El término "cicloalquinilo" se refiere a un grupo cicloalquilo que tiene al menos un sitio de instauración de alquinilo entre los vértices del anillo. Cuando se usa "cicloalquilo" en combinación con "alquilo", como en cicloalquil C3-8-alquileno C3-8, la porción de cicloalquilo tiene la cantidad establecida de átomos de carbono (por ejemplo, de 3 a 8 átomos de carbono) , mientras que la porción de alquileno tiene de 1 a 8 átomos de carbono. Los sustituyentes de cicloalquilo típicos tienen de 3 a 8 átomos del anillo. Los ejemplos de cicloalquilo incluyen ciclopentilo, ciclohexilo, 1-ciclohexenilo, 3-ciclohexenilo, cicloheptilo, y similares.
[0061] "Arilo" en sí o como parte de otro sustituyente se refiere a un grupo hidrocarbonado aromático poliinsaturado con 6 a 14 átomos de carbono, que puede ser un anillo simple o múltiples anillos (hasta tres anillos) que están fusionados entre sí o ligados covalentemente . Así, la frase incluye, pero sin limitación, grupos tales como fenilo, bifenilo, antracenilo, naftilo, a modo de ejemplo. Los ejemplos no limitativos de grupos arilo no sustituidos incluyen fenilo, 1-naftilo, 2-naftilo y 4-bifenilo. El "grupo arilo sustituido" incluye, por ejemplo, CH20H (un átomo de carbono y un heteroátomo que reemplaza un átomo de carbono) y -CH2SH. El término "heteroalquileno" en sí o como parte de otro sustituyente implica un radical divalente derivado de heteroalquilo, tal como se ejemplifica con -CH2-CH2-S-CH2CH2- y -CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2- . Para grupos heteroalquileno, los heteroátomos también pueden ocupar uno o ambos términos de la cadena (por ejemplo, alquilenoxi, alquilendioxi , alquilenamino, alquilendiamino, y similares). Además, para los grupos de unión alquileno y heteroalquileno, no está implicada ninguna orientación del grupo de unión.
[0062] Los términos "heterociclo", "heterociclilo" o "heterocíclico" se refieren a un grupo cíclico no aromático saturado o insaturado con al menos un heteroátomo. Tal como se usa en la presente, el término "heteroátomo" incluye oxígeno (O) , nitrógeno (N) , azufre (S) y silicio (Si). Cada heterociclo puede estar unido a cualquier carbono de anillo o heteroátomo disponibles. Cada heterociclo puede tener uno o varios anillos. Cuando están presentes múltiples anillos, pueden estar fusionados entre sí o unidos covalentemente . Cada heterociclo contiene típicamente 1, 2, 3, 4 ó 5 heteroátomos seleccionados de modo independiente. Con preferencia, estos grupos contienen 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ó 10 átomos de carbono, 0, 1, 2, 3, 4 ó 5 átomos de nitrógeno, 0, 1 ó 2 átomos de azufre y 0, 1 ó 2 átomos de oxígeno. Con mayor preferencia, estos grupos contienen 1, 2 ó 3 átomos de nitrógeno, 0-1 átomos de azufre y 0-1 átomos de oxígeno. Los ejemplos no limitativos de grupos heterociclo incluyen morfolin-3-ona, piperazin-2-ona , piperazin-l-óxido, piridin-2-ona, piperidina, morfolina, piperazina, isoxazolina, pirazolina, imidazolina, pirazol-5-ona, pirrolidin-2 , 5-diona, imidazolidin-2, 4-diona, pirrolidina, tetrahidroquinolinilo, decahidroquinolinilo, tetrahidrobenzooxazepinilo, dihidrodibenzooxepina , y similares.
[0063] "Heteroarilo" se refiere a un radical aromático cíclico o policíclico que contiene de uno a cinco heteroátomos seleccionados de N, 0 y S, en donde los átomos de nitrógeno y azufre están opcionalmente oxidados y los átomos de nitrógeno están opcionalmente cuaternizados . Un grupo heteroarilo puede estar unido al resto de la molécula a través de un heteroátomo o a través de un átomo de carbono y puede contener 5 a 10 átomos de carbono. Los ejemplos no limitativos de grupos heteroarilo incluyen 1-pirrolilo, 2-pirrolilo, 3-pirrolilo, l-pirazolilo, 3-pirazolilo, 2-imidazolilo, 4-imidazolilo, pirazinilo, 2-oxazolilo, 4-oxazolilo, 5-oxazolilo, 3-isoxazolilo, 4-isoxazolilo, 5-isoxazolilo, 2-tiazolilo, 4-tiazolilo, 5-tiazolilo, 2-furilo, 3-furilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 2-pirimidilo y 4-pirimidilo . Si no se establece específicamente, los sustituyentes para cada uno de los sistemas de anillos arilo y heteroarilo observados están seleccionados del grupo de sustituyentes aceptables descritos en la presente. "Heteroarilo sustituido" se refiere a un grupo heteroarilo no sustituido tal como sé definió con anterioridad en donde uno o varios de los miembros del anillo está unido a un átomo no hidrógeno tal como se describió con anterioridad respecto a los grupos alquilo sustituidos y grupos arilo sustituidos. Los sustituyentes representativos incluyen grupos alquilo de cadena lineal y ramificada -CH3, -C2H5, -CH2OH, -OH, -OCH3, -OC2H5 , -OCF3, -OC(=0)CH3, -OC(=0)NH2, -0C (=0) N (CH3) 2 , -CN, -N02, -C(=0)CH3, -C02H, -CO2CH3 , -CONH2 , -NH2, -N (CH3) 2 , -NHSO2CH3 , -NHCOCH3 , -NHC (=0) OCH3 , -NHS02CH3, -S02CH3, -S02NH2 y halo.
[0064] "Heteroarilo biciclico" se refiere a un radical aromático biciclico que contiene de uno a cinco heteroátomos seleccionados de N, 0 y S, en donde los átomos de nitrógeno y azufre están opcionalmente oxidados y los átomos de nitrógeno están opcionalmente cuaternizados . Un grupo heteroarilo biciclico puede estar unido al resto de la molécula a través de un heteroátomo o a través de un átomo de carbono y puede contener 5 a 10 átomos de carbono. Los ejemplos no limitativos de grupos heteroarilo biciclicos incluyen 5-benzotiazolilo, purinilo, 2-bencimidazolilo, benzopirazolilo, 5-indolilo, azaindole, 1-isoquinolilo, 5-isoquinolilo, 2-quinoxalinilo, 5-quinoxalinilo, 3-quinolilo y 6-quinolilo. Si no se establece específicamente, los sustituyentes para cada uno de los sistemas de anillos arilo y heteroarilo establecidos con anterioridad están seleccionados del grupo de sustituyentes aceptables descritos en la presente.
[0065] "Arilheteroarilo" o "arileneheteroarilo" se refiere a un radical en donde un resto de heteroarilo está unido a un resto de arilo de una manera no fusionada. El grupo arilo está unido con el resto de la molécula a través de un átomo de carbono y puede contener de 5 a 10 átomos de carbono. Los ejemplos no limitativos de arilo y grupos heteroarilo se describen con anterioridad. El término "fenilheterarilo" o "fenilenheteroarilo" se refiere a un resto de heteroarilo unido al resto de fenilo que está unido con el restó de la molécula.
[0066] "Arilheterociclilo" o "arileneheterociclilo" se refiere a un radical en donde un resto de heterociclilo está unido con un resto de arilo de una manera no fusionada. El grupo arilo está unido con el resto de la molécula a través de un átomo de carbono y puede contener de 5 a 10 átomos de carbono. Los ejemplos no limitativos de arilo y los grupos heterociclilo se describen con anterioridad. El término "fenilheterociclilo" o "fenilenheterociclilo" se refiere a un resto de heteroarilo unido al resto de fenilo que está unido con el resto de la molécula.
[0067] En cada una de las formas de realización anteriores que designan una cantidad de átomos, por ejemplo, "Ci-s", incluyen todas las formas de realización posibles que tiene un átomo inferior. Los ejemplos no limitativos incluyen Ci-7, C2-8, C2-7, C3-8, C3-7, y similares.
[0068] Cada uno de los términos en la presente (por ejemplo, "alquilo", "heteroalquilo" , "arilo" y "heteroarilo" ) incluye las formas tanto "no sustituidas" como las opcionalmente "sustituidas" del radical indicado, a menos que se indique de otro modo. Típicamente cada radical está sustituido con 0, 1, 2, 3, 4 ó 5 sustituyentes , a menos que se indique de otro modo. Los ejemplos de sustituyentes para cada tipo de radical se proveen más abajo.
[0069] "Sustituido" se refiere a un grupo tal como se define en la presente en donde uno o varios enlaces con un carbono o hidrógeno están reemplazados por un enlace con un átomo no hidrógeno y no carbono "sustituyentes" tales como, pero sin limitación, un átomo de halógeno tales como F, Cl, Br y I; un átomo de oxígeno en grupos tales como grupos hidroxilo, grupos alcoxi, grupos ariloxi y grupos aciloxi; un átomo de azufre en grupos tales como grupos tiol, grupos sulfuro de alquilo y de arilo, grupos sulfona, grupos sulfonilo y grupos sulfóxido; un átomo de nitrógeno en grupos tales como amino, alquilaminas , dialquilaminas, arilaminas, alquilarilaminas, diarilaminas , alcoxiamino, hidroxiamino, acilamino, sulfonilamino, N-óxidos, imidas y enaminas; y otros heteroátomos en diversos otros grupos. "Sustituyentes" también incluyen grupos en donde uno o varios enlaces con un átomo de carbono o hidrógeno está reemplazado por un enlace de orden superior (por ejemplo, un enlace doble o triple) con un heteroátomo tales como oxigeno en grupos oxo, acilo, amido, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, carboxilo y éster; nitrógeno en grupos tales como iminas, oximas, hidrazonas y nitrilos. Los "sustituyentes" también incluyen grupos en donde uno o varios enlaces con átomos de carbono o de hidrógeno están reemplazados por un enlace con un grupo cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo. Los "sustituyentes" representativos incluyen, entre otros, grupos en los que uno o varios enlaces con un átomo de carbono o de hidrógeno están reemplazados por uno o varios enlaces con grupo flúor, cloro o bromo. Otro "sustituyente" representativo es el grupo trifluorometilo y otros grupos que contienen el grupo trifluorometilo . Otros "sustituyentes" representativos incluyen aquellos en los que uno o varios enlaces con un átomo de carbono o hidrógeno están reemplazados por un enlace con un átomo de oxigeno de modo que el grupo alquilo sustituido contenga un grupo hidroxilo, alcoxi o ariloxi. Otros "sustituyentes" representativos incluyen grupos alquilo que tienen un grupo amina o un grupo alquilamina, dialquilamina, arilamina, (alquil) (aril) amina, diarilamina, heterociclilamina, diheterociclilamina, (alquil) (heterociclil) amina o (aril) (heterociclil) amina sustituido o no sustituido. Otros "sustituyentes" representativos incluyen aquellos en los que uno o varios enlaces con átomos de carbono o hidrógeno están reemplazados por un enlace con un grupo alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo o heterociclilo .
[0070] Los grupos definidos en la presente pueden incluir prefijos y/o sufijos que se usan comúnmente en la técnica para crear grupos sustituyentes adicionales bien reconocidos. Como ejemplos, "alquilamino" se refiere a un grupo de la fórmula -NRaRb. A menos que se establezca de otro modo, para los siguientes grupos con Ra, Rb, Rc, Rd y Re : Ra y Rb están seleccionados cada uno, de modo independiente, de H, alquilo, alcoxi, tioalcoxi, cicloalquilo, arilo, heteroarilo o heterociclilo o se unen opcionalmente con los átomos a los que están unidos para formar un grupo cíclico. Cuándo Ra y Rb se unen al mismo átomo de nitrógeno, se pueden combinar con el átomo de nitrógeno para formar un anillo de 5, 6 ó 7 miembros. Por ejemplo, -NRaRb incluye 1-pirrolidinilo y 4-morfolinilo .
[0071] Rc, Rd, Re y Rf están seleccionados cada uno, de modo independiente, de alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo, heteroarilo, heterociclilo o alquilenarilo, tal como se define en la presente.
[0072] Típicamente, un radical particular tendrá 0, 1, 2 ó 3 sustituyentes, con aquellos grupos que tienen dos o menos sustituyentes preferidos en la presente invención. Con mayor preferencia, un radical será no sustituido o será monosustituido. Con máxima preferencia, un radical no será sustituido.
[0073] "Sustituyentes" para los radicales alquilo y heteroalquilo (asi como aquellos grupos mencionados como alquileno, alquenilo, heteroalquileno, heteroalquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterociclilo) pueden ser una variedad de grupos seleccionados de: -0Ra, =0, = Ra, =N-0Ra, -NRaRb, -SRa, halógeno, -SiRaRb Rc, -0C(0)Ra, -C(0)Ra, -C02R3, -C0NRaRb, 0C(0)NRaRb, -NRbC (0) Ra, -NRa-C (0) NRbRc, -NRa-S02NRbRc, -NRbC02 Ra, -NH-C (NH2)=NH, -NRaC (NH2 ) =NH, -NH-C (NH2 ) =NRa, -S (0) Ra, -S02Ra, -S02NRaRb, -NRbS02R, -CN y -N02, en una cantidad de va de cero a tres, con aquellos grupos que tienen cero, uno o dos sustituyentes preferidos en particular.
[0074] En algunas formas de realización, "sustituyentes" para los radicales alquilo y heteroalquilo están seleccionados de: -0Ra, =0, - NRaRb, -SRa, halógeno, -SiRaRbR°, -0C(0)Ra, -C (0) Ra, -C02Ra, -C0NRaRb, -0C(0)NRaRb, -NRbC (0) Ra, -NRbC02Ra, -NRa-S02NRbRc, -S(0) Ra, -S02Ra, -S02NRaRb, -NRCS02R, -CN y -N02, en donde Ra y Rb son tal como se definieron con anterioridad. En algunas formas de realización, los sustituyentes están seleccionados de: -0Ra, =Or - NRaRb, halógeno, -0C (0) Ra, -C02Ra, -C0NRaRb, -0C(0)NRaRb, -NRbC (0) Ra, -NRbC02Ra, -NRa-S02NRbRc, -S02Ra, -S02NRaRb, -NR"S02R, -CN y -N02.
[0075] Los ejemplos de alquilo sustituido son: -(CH2)3NH2, -(CH2) 3NH (CH3) , -(CH2)3NH(CH3)2, ~CH2C (=CH2 ) CH2NH2, -CH2C (=0) CH2NH2, -CH2S (=0) 2CH3, -CH2OCH2NH2, -C02H. Los ejemplos de sustituyentes de alquilo sustituido son: CH2OH, -OH, -OCH3, -OC2H5, -OCF3, OC(=0)CH3, -OC(=0)NH2, -0C (=0)N (CH3)2, -CN, -N02, -C(=0)CH3, -C02H, -C02CH3, -CONH2, -NH2, -N (CH3)2, -NHS02CH3, -NHCOCH3, -NHC (=0) 0CH3, -NHSO2CH3, -SO2CH3, -S02NH2 y halo.
[0076] De modo similar, los "sustituyentes" de los grupos arilo y grupos heteroarilo son variados y están seleccionados de: -halógeno, -ORa, -OC(0) Ra, -NRaRb, -SRa, -Ra, -CN, -N02, -C02R3, -C0NRaRb, -C(O) Ra, -OC(0)NRaRb, -NRbC(0) Ra, -NRbC(0)2Ra, -NRa-C(0)NRbRc, -NH-C (NH2 ) =NH, -NRaC (NH2 ) =NH , -NH-C (NH2 ) =NRa, -S (O) Ra, -S(0) 2 Ra, -S(0) 2NRa'Rb, -N3, -CH(Ph)2, perfluoroalcoxi Ci_8 y perfluoroalquilo Ci_g, en una cantidad que va de cero a la cantidad total de valencias abiertas en el sistema de anillos aromáticos; y en donde Ra, R y Rc están seleccionados, de modo independiente, de hidrógeno, alquilo C1- 6 y heteroalquilo, arilo no sustituido y heteroarilo, (aril no sustituido ) -alquilo Ci-8 y (aril no sustituido) oxi-alquilo Ci_8.
[0077] Dos de los "sustituyentes" en átomos del anillo arilo o heteroarilo adyacentes pueden estar opcionalmente reemplazados por un sustituyente de la fórmula -T-C (0) - (CH2) q-U-, en donde T y U son, de modo independiente, -NH-, -O-, -CH2- o un enlace single y q es 0, 1 ó 2. Alternativmente, dos de los sustituyentes en átomos del anillo arilo o heteroarilo adyacente puede estar opcionalmente reemplazado por un sustituyente de la fórmula -A-(CH2)r-B-, en donde A y B son, de modo independiente, -CH2-, -O-, -NH-, -S-, -S(0)-, -S(0)2-, -S(0) 2NRa- o un enlace simple y r es 1, 2 ó 3. Uno de los enlaces simples del nuevo anillo asi formado puede estar opcionalmente reemplazado por un enlace doble. Alternativamente, dos de los sustituyentes en átomos del anillo arilo o heteroarilo adyacentes pueden estar opcionalmente reemplazados por un sustituyente de la fórmula - (CH2 ) s-X- (CH2 ) t-, en donde s y t son, de modo independiente, números enteros de 0 a 3 y X es -0-, -NRa- , -S- , -S(0)-, -S (0) 2- o -S (0) 2NRa- . El sustituyente Ra en -NRa- y -S (0) 2NRa- está seleccionado de hidrógeno o alquilo Ci-6 no sustituido. De otro modo, R' es tal como se definió con anterioridad.
[0078] A menos que se indique otra cosa, la nomenclatura de sustituyentes que no se definen explícitamente en la presente se logra al denominar la porción terminal de la funcionalidad seguida por la funcionalidad adyacente hacia el punto de unión. Por ejemplo, el sustituyente "arilalquiloxicarbonilo" se refiere al grupo (aril) -( alquil ) -0-C (0) - .
[0079] El término "acilo" se refiere al grupo -C(=0)Rc en donde R° es alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo, heteroarilo o heterociclilo . Acilo incluye el grupo "acetilo" -C(=0)CH3.
[0080] "Acilamino-" se refiere al grupo -NRaC(=0)Rc en donde Rc es alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo, heteroarilo o heterociclilo.
[0081] "Aciloxi" se refiere a -OC(=0)-Rc en donde Rc es alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo, eteroarilo o heterociclilo .
[0082] "Alcoxi" se refiere a -ORd en donde Rd es alquilo tal como se define en la presente. Los ejemplos representativos de grupos alcoxi incluyen metoxi, etoxi, t-butoxi, trifluorometoxi, y similares.
[0083] "Alcoxiamino" se refiere al grupo -NHORd en donde Rd es alquilo .
[0084] "Alcoxicarbonilo" se refiere a -C(=0)ORd en donde Rd es alquilo. Los grupos alcoxicarbonilo representativos incluyen, por ejemplo, los que se muestran a continuación.
Estos grupos alcoxicarbonilo pueden estar también sustituidos tal como será obvio para los expertos en las técnicas de química orgánica y medicinal junto con la descripción en la presente.
[0085] "Alcoxicarbonilamino" se refiere a -NRaC(=0)ORd en donde Rd es alquilo.
[0086] "Alcoxisulfonilamino" se refiere al grupo -NRaS (=0) 2-ORd en donde Rd es alquilo.
[0087] "Alquilcarbonilo" se refiere al grupo -C(=0)Rc en donde Rc es alquilo.
[0088] "Alquilcarboniloxi" se refiere a -0C(=0)-Rc en donde Rc es alquilo.
[0089] "Alquilcarbonilamino" se refiere a -NRaC(=0)Rc en donde Rc es alquilo. Los grupos alquilcarbonilamino representativos incluyen, por ejemplo, -NHC (=0) CH3, -NHC (=0) CH2CH3, NHC (=0) CH2NH (CH3) , -NHC (=0) CH2N (CH3) 2 o -NHC (=0) (CH2) 3OH .
[0090] "Alquilsulfañilo", "alquiltio" o "tioalcoxi" se refiere al grupo S-Rd, en donde Rd es alquilo.
[0091] "Alquilsulfonilo" se refiere a -S(=0)2Re en donde Re es alquilo. Los grupos alquilsulfonilo empleadps en compuestos de la presente invención son típicamente grupos alquil Ci-6-sulfonilo .
[0092] "Alquilsulfonilamino" se refiere a -NRaS (=0) 2~Re en donde Re es alquilo.
[0093] "Alquiniloxi" se refiere al grupo -O-alquinilo, en donde alquinilo es tal como se define en la presente. Alquiniloxi incluye, a modo de ejemplo, etiniloxi, propiniloxi, y similares.
[0094] "Amidino" se refiere al grupo -C (=NRa) NRbRc, en donde R y Rc están seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heteroarilo, heterociclico y en donde Rb y Rc se unen opcionalmente con el nitrógeno unido para formar un grupo heterociclico o heterociclico sustituido. Ra está seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heteroarilo, heterociclic, heterociclico sustituido, nitro, nitroso, hidroxi, alcoxi, ciano, -N=N-N-alquilo, -N (alquil) S02-alquilo, - -N=N=N-alquilo, acilo y -SC>2-alquilo .
[0095] "Amino" se refiere a un radical monovalente -NRaRb o radical divalente -NRa-. El término "alquilamino" se refiere al grupo -NRaRb en donde Ra es alquilo y Rb es H o alquilo. El término "arilamino" se refiere al grupo -NRaR en donde, al menos un Ra o Rb es arilo. El término "(alquil) (aril) amino" se refiere al grupo -NRaRb en donde Ra es alquilo y Rb es arilo. Adicionalmente, para los grupos dialquilamino, las porciones de alquilo puede ser iguales o diferentes y también se pueden combinar para formar un anillo de 3-7 miembros con el átomo de nitrógeno al que cada uno está unido. Conforme a ello, un grupo representado como -NRaRb incluye piperidinilo, pirrolidinilo, morfolinilo, azetidinilo, y similares.
[0096] "Aminocarbonilo" o "aminoacilo" se refiere a la amida -C(=0)-NRaRb. El término "alquilaminocarbonilo" se refiere en la presente al grupo -C(=0)-NRaRb en donde Ra es alquilo y Rb es H o alquilo. El término "arilaminocarbonil" se refiere en la presente al grupo -C(=0)-NRaRb en donde Ra o Rb es arilo. Los grupos aminocarbonilo representativos incluyen, por ejemplo, los mostrados a continuación. Esos grupos aminocarbonilo también pueden estar sustituidos tal como resultará evidente para los expertos en las técnicas de química orgánica y medicinal junto con la descripción en la presente.
[0097] "Aminocarbonilamino" se refiere al grupo -NRaC (0) NRaRb, en donde Ra es hidrógeno o alquilo y Ra y Rb están seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heteroarilo, heterocíclico y en donde Ra y Rb se unen opcionalmente junto con el nitrógeno unido a ellos para formar un grupo heterocíclico o heterocíclico sustituido.
[0098] "Aminosulfonilo" se refiere a -S(0)2NRaRb en donde R está seleccionado de modo independiente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, arilo, arilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, cicloalquenilo, cicloalquenilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heterociclico, heterociclico sustituido y en donde Ra y R se unen opcionalmente junto con el nitrógeno unido a ellos para formar un grupo heterociclico o heterociclico sustituido y alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, cicloalquenilo, cicloalquenilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heterociclico y heterociclico sustituido son tal como se definen en la presente.
[0099] "Aminosulfoniloxi" se refiere al grupo -0-S02NRaRb, en donde Ra y Rb están seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heteroarilo y heterociclico; Ra y R se unen opcionalmente junto con el nitrógeno unido a ellos para formar un grupo heterociclico o heterociclico sustituido.
[0100] "Aminosulfonilamino" se refiere al grupo -NRa-S02NRbRc, en donde Ra es hidrógeno o alquilo y Rb y Rc están seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, arilo, arilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, cicloalquenilo, cicloalquenilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heterociclico y heterociclico sustituido y en donde Rb y Rc se unen opcionalmente junto con el nitrógeno unido a ellos para formar un grupo heterociclico o heterociclico sustituido y en donde alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, cicloalquenilo, cicloalquenilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heterociclico y heterociclico sustituido son tal como se definen en la presente.
[0101] "Aminotiocarbonilo" se refiere al grupo -C ( S ) NRaRb, en donde Ra y Rb están seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, arilo, arilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, cicloalquenilo, cicloalquenilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heterociclico y heterociclico sustituido y en donde Ra y Rb se unen opcionalmente junto con el nitrógeno unido a ellos para formar un grupo heterociclico o heterociclico sustituido y en donde alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, cicloalquenilo, cicloalquenilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heterociclico y heterociclico sustituido son tal como se definen en la presente.
[0102] "Aminotiocarbonilamino" se refiere al grupo •NRaC ( S ) NRaR , en donde Ra es hidrógeno o alquilo y Rb y Rc se unen opcionalmente junto con el nitrógeno unido a ellos para formar un grupo heterociclico o heterociclico sustituido.
[0103] "Arilcarbo.nilo" se refiere al grupo -C(=0)Rc en donde Rc es arilo.
[0104] "Arilcarbonilamino" se refiere a -NRaC(=0)Rc en donde Rc es arilo.
[0105] "Arilcarboniloxi" se refiere a -0C(=O)-Rc en donde Rc es arilo.
[0106] "Ariloxi" se refiere a -ORd en donde Rd es arilo. Los ejemplos representativos de grupos ariloxi incluyen fenoxi, naftoxi, y similares.
[0107] "Ariloxicarbonilo" se refiere a -C(=0)0Rd en donde Rd es arilo.
[0108] "Ariloxicarbonilamino" se refiere a -NRaC(=0)0Rd en donde Rd es arilo.
[0109] "Arilsulfanilo", "ariltio" o "tioariloxi" se refiere al grupo S-Rd en donde Rd es arilo.
[0110] "Arilsulfonilo" se refiere a -S(=0)2Re en donde Re es arilo .
[0111] "Arilsulfonilamino" se refiere a -NRaS (=0) 2-Re en donde Re es arilo.
[0112] "Ariltio" se refiere al grupo -S-arilo, en donde arilo es tal como se define en la presente. En otras formas de realización, el azufre puede estar oxidado en restos -S(0)- o -SO2-. El sulfóxido puede existir como uno o varios estereoisómeros .
[0113] "Azido" se refiere a -N3.
[0114] "Enlace", cuando se usa un elemento en un grupo de Markush, significa que el correspondiente grupo no existe y los grupos de ambos lados están unidos directamente.
[0115] "Carbonilo" se refiere al grupo divalente -C(=0)-.
[0116] "Carboxi" o "carboxilo" se refiere al grupo -C02H .
[0117] "Carboxiléster" o "carboxiéster" se refiere a los grupos -C(=0)ORc.
[0118] " (Carboxilester ) amino" se refiere a los grupos -NRa-C(0)ORc, en donde Ra es alquilo o hidrógeno.
[0119] " (Carboxilester ) oxi" o "Carbonato éster" se refiere a los grupos -0-C(=0)ORc.
[0120] "Ciano" se refiere a -CN.
[0121] "Cicloalcoxi" se refiere a -ORd en donde Rd es cicloalquilo .
[0122] "Cicloalcoxicarbonilo" se refiere a -C(=0)ORd en donde Rd es cicloalquilo.
[0123] "Cicloalcoxicarbonilamino" se refiere a -NRaC(=0)0Rd en donde Rd es cicloalquilo.
[0124] "Cicloalquilalquileno" se refiere a un radical -RxRy en donde Rx es un grupo alquileno y Ry es un grupo cicloalquilo tal como se define en la presente, por ejemplo, ciclopropilmetilo, ciclohexenilpropilo, 3-ciclohexil-2-metilpropilo, y similares.
[0125] "Cicloalquilcarbonilo" se refiere al grupo -C(=0)Rc en donde Rc es cicloalquilo.
[0126] "Cicloalquilcarbonilamino" se refiere a -NRaC(=0)Rc en donde Rc es cicloalquilo.
[0127] "Cicloalquilcarboniloxi" se refiere a -OC(=0)-Rc en donde Rc es cicloalquilo.
[0128] "Cicloalquilsulfonilamino" se refiere a -NRaS (=0) 2-Re en donde Re es cicloalquilo.
[0129] "Cicloalquiltio" se refiere a -S-cicloalquilo . En otras formas de realización, el azufre puede estar oxidado en restos -S(0)- o -SO2-. El sulfóxido puede existir como uno o varios estereoisómeros .
[0130] "Cicloalquenilox" se refiere a -O-cicloalquenilo .
[0131] "Cicloalqueniltio" se refiere a -S-cicloalquenilo . En otras formas de realización, el azufre se puede oxidar en restos de sulfinilo o sulfonilo. El sulfóxido puede existir como uno o varios estereoisómeros.
[0132] "Ester" se refiere a -C(=0)ORd en donde Rd es alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo o heterociclilo .
[0133] "Guanidino" se refiere al grupo -NHC (=NH) H2.
[0134] "Halo" o "halógeno" en si o como parte de otro sustituyente , significan, a menos que se establezca otra cosa, un átomo de flúor, cloro, bromo o yodo. Además, los términos tales como "haloalquilo" incluyen alquilo en donde uno o varios hidrógenos están sustituidos con átomos de halógeno que pueden ser iguales o diferentes, en una cantidad que va de uno al máximo número de halógenos permitidos, por ejemplo, para alquilo, (2m'+l), en donde m' es la cantidad total de átomos de carbono en el grupo alquilo. Por ejemplo, el término "haloalquilo Ci-s" incluye trifluorometilo, 2, 2, 2-trifluoroetilo, 4-clorobutilo, 3-bromopropilo, y similares. El término "perhaloalquilo" implica, a menos que se establezca otra cosa, alquilo sustituido con (2m'+l) átomos de halógeno, en donde m' es la cantidad total de átomos de carbono en el grupo alquilo. Por ejemplo, el término "perhaloalquilo Ci_8", incluye trifluorometilo, pentacloroetilo, 1 , 1 , 1-trifluoro-2-bromo-2-cloroetilo, y similares. Además, el término "haloalcoxi" se refiere a un radical alcoxi sustituido con uno o varios átomos de halógeno.
[0135] "Heteroalquilo" implica un radical alquilo tal como se define en la presente con uno, dos o tres sustituyentes seleccionados, de modo independiente, de ciano, -ORw, -NRxRy y -S(0)nRz (en donde n es un número entero de 0 a 2), entendiendo que el punto de unión del radical heteroalquilo es a través de un átomo de carbono del radical heteroalquilo. Rw es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, cicloalquil-alquilo, arilo, araalquilo, alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo, carboxamido o mono- o di-alquilcarbamoilo . Rx es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, cicloalquil-alquilo, arilo o araalquilo. Ry es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, cicloalquil-alquilo, arilo, araalquilo, alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo, carboxamido, mono- o di-alquilcarbamoilo o alquilsulfonilo . Rz es hidrógeno (siempre que n sea 0) , alquilo, cicloalquilo, cicloalquil-alquilo, arilo, araalquilo, amino, mono-alquilamino, di-alquilamino o hidroxialquilo . Los ejemplos representativos incluyen, por ejemplo, 2-hidroxietilo, 2 , 3-dihidroxipropilo, 2-metoxietilo, benciloximetilo, 2-cianoetilo y 2-metilsulfonil-etilo . Para cada uno de los anteriores, Rw, Rx, Ry y Rz pueden estar además sustituidos con amino, flúor, alquilamino, di-alquilamino, OH o alcoxi. Además, el prefijo que indica la cantidad de átomos de carbono (por ejemplo, C1-C10) se refiere a la cantidad total de átomos de carbono en la porción del grupo heteroalquilo exclusive de las porciones de ciano, -ORw, -NRxRy o -S(0)nRz.
[0136] "Heteroarilcarbonilo" se refiere al grupo -C(=0)Rc en donde Rc es heteroarilo.
[0137] "Heteroarilcarbonilamino" se refiere a -NRaC(=0)Rc en donde R° es heteroarilo.
[0138] "Heteroarilcarboniloxi" se refiere a -OC(=0)-Rc en donde Rc es heteroarilo.
[0139] "Heteroariloxi" se refiere a -0Rd en donde Rd es heteroarilo .
[0140] "Heteroariloxicarbonilo" se refiere a -C(=0)0Rd en donde Rd es heteroarilo.
[0141] "Heteroariloxicarbonilamino" se refiere a -NRaC(=0)ORd en donde Rd es heteroarilo.
[0142] "Heteroarilsulfonillamino" se refiere a -NRaS (=0) 2-Re en donde Re es heteroarilo.
[0143] "Heteroariltio" se refiere al grupo -S-heteroarilo . En otras formas de realización, el azufre se puede oxidar en restos de -S (0) - o -S02-. El sulfóxido puede existir como uno o varios estereoisómeros .
[0144] "Heterociclilalquilo" o "Cicloheteroalquil-alquilo" implica un radical -RxRy en donde Rx es un grupo alquileno y Ry es un grupo heterociclilo tal como se define en la presente, por ejemplo, tetrahidropiran-2-ilmetilo, 4- ( 4-substituted-fenil ) piperazin-l-ilmetilo, 3-piperidiniletilo, y similares.
[0145] "Heterocicloxicarbonilamino" se refiere a -NRaC(=0)ORd en donde Rd es heterociclilo.
[0146] "Heterociclilcarbonilo" se refiere a -C(=0)Rc en donde Rc es heterociclilo.
[0147] "Heterociclilcarbonilamino" se refiere a -NRaC(=0)Rc en donde Rc es heterociclilo.
[0148] "Heterociclilcarboniloxi" se refiere a -0C(=0)-Rc en donde Rc es heterociclilo .
[0149] "Heterocicliloxi" se refiere a -ORd en donde Rd es heterociclilo .
[0150] "Heterocicliloxicarbonilo" se refiere a -C(=0)ORd en donde Rd es heterociclilo.
[0151] "Heterociclilsulfonilo" se refiere a -S(=0)2Re en donde Re es heterociclilo.
[0152] "Heterociclilsulfonilamino" se refiere a -NRaS (=0) 2-Re en donde Re es heterociclilo.
[0153] "Heterocicliltio" se refiere al grupo -S-heterocicilo . En otras formas de realización, el azufre puede estar oxidado en restos de -S(O)- o -SO2-. El sulfóxido puede existir como uno o varios estereoisómeros .
[0154] "Hidroxi" o "hidroxilo" se refiere al grupo -OH.
[0155] "Hidroxiamino" se refiere al grupo -NHOH .
[0156] "Nitro" se refiere a -N02.
[0157] "Nitroso" se refiere al grupo -NO.
[0158] Los términos "opcional" u "opcionalmente" tal como se usan a lo largo de la memoria descriptiva significan que el evento o circunstancia descrita más abajo puede ocurrir pero no necesariamente y que la descripción incluye instancias en las que el evento o circunstancia ocurren e instancias en las que no. Por ejemplo, "grupo heterociclo opcionalmente mono- o disustituido con un grupo alquilo implica que el alquilo puede estar presente pero no necesariamente y la descripción incluye situaciones en las que el grupo heterociclo es mono- o disustituido con un grupo alquilo y situaciones en las que el grupo heterociclo no está sustituido con el grupo alquilo.
[0159] "Opcionalmente sustituido" significa un anillo que está opcionalmente sustituido de modo independiente con sustituyentes . Un sitio de un grupo que no está sustituido puede estar sustituido con hidrógeno.
[0160] "Oxo" se refiere al grupo divalente =0.
[0161] "Sulfanilo" se refiere al grupo -SRf en donde Rf es tal como se define en la presente.
[0162] "Sulfinilo" se refiere al grupo -S (=0) -Re en donde Re es tal como se define en la presente.
[0163] "Ácido sulfónico" se refiere al grupo -S(0)2-0H.
[0164] "Sulfonilo" se refiere al grupo -S(0)2-Re en donde Re es tal como se define en la presente.
[0165] "Sulfonilamino" se refiere a -NRaS (=0) 2-Re en donde Ra está seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heteroarilo y heterociclilo y Re es tal como se define en la presente .
[0166] "Sulfoniloxi" se refiere al grupo -OS02-Rc.
[0167] Los compuestos que tienen la misma fórmula molecular pero que difieren en la naturaleza o secuencia de la ligación de sus átomos o en la disposición de sus átomos en el espacio reciben la denominación de "isómeros". Los isómeros que difieren en la disposición de sus átomos en el espacio reciben la denominación de "estereoisómeros". Los términos "estereoisómero" y "estereoisómeros" se refieren a compuestos que existen en diferentes formas estereoisoméricas si tienen uno o más centros asimétricos o un doble enlace con sustitución asimétrica y, por ello pueden producirse como estereoisómeros individuales o como mezclas. Los estereoisómeros incluyen enantiómeros y diastereómeros . Los estereoisómeros que no son imágenes especulares entre si reciben la denominación de "diastereómeros" y aquellos que son imágenes especulares no-superponibles entre si reciben la denominación de "enantiómeros". Si un compuesto tiene un centro asimétrico, por ejemplo, si está ligado a cuatro grupos diferentes, es posible un par de enantiómeros. Un enantiómero puede caracterizarse por la configuración absoluta de su centro asimétrico, y se describe de acuerdo con las reglas de secuenciado de Cahn y Prelog, o mediante la manera en que la molécula hace rotar el plano de la luz polarizada y se designa como dextrógiro o levógiro (es decir, como isómeros ( +) o (-) , respectivamente) . Un compuesto quiral puede existir sea como enantiómero individual o como una mezcla del mismo. Una mezcla que contiene iguales proporciones de los enantiómeros lleva la designación de "mezcla racémica". A memos que se indique otra cosa, la descripción tiene por objeto incluir tanto los estereoisómeros individuales asi como las mezclas. Los métodos para la determinación de la estereoquímica y la separación de los estereoisómers son bien conocidos en la especialidad (Véase la exposición en el Capítulo 4 de Advanced Organic Chemistry, 4th edition J. March, John Wiley y Sons, New York, 1992) y difieren en la quiralidad de uno o más estéreocentros .
[0168] "Tioacilo" se refiere a los grupos Ra-C(S)-.
[0169] "Tiol" se refiere al grupo -SH.
[0170] "Tautómero" se refiere a formas alternativas de una molécula que difieren en la posición de un protón, tales como los tautómeros enol-ceto e imina-enamina, o las formas tautoméricas de grupos heteroarilo que contienen una disposición de átomos -N=C(H)-NH-, tales como pirazoles, imidazoles, bencimidazoles, triazoles y tetrazoles. Una persona con la pericia habitual en la especialidad reconocería que son posibles otras disposiciones de átomos anulares tautoméricos .
[0171] Se da por entendido que en todos los grupos sustituidos arriba definidos, los polímeros a los que se llega definiendo sustituyentes con otros sustituyentes a si mismos (por ejemplo, arilo sustituido que tiene un grupo arilo sustituido que a su vez está sustituido con un grupo arilo sustituido, etc.) no están destinados a quedar incluidos en la presente. En tales casos, el número máximo de tales sustituciones es de tres. Por ejemplo, las sustituciones en serie de grupos arilo sustituidos están limitadas a -arilo sustituido- (arilo sustituido) -arilo sustituido .
[0172] La expresión "grupo protector" se refiere a un grupo de átomos que, cuando están fijados a un grupo funcional reactivo en una molécula, enmascaran, reducen o impiden la reactividad del grupo funcional. Típicamente, un grupo protector puede ser removido selectivamente como se desee durante el transcurso de una síntesis. Pueden encontrarse ejemplos de grupos protectores en: Greene y Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, 3rd Ed., 1999, John Wiley & Sons, NY y Harrison et al., Compendium of Synthetic Organic Methods, Vols. 1-8, 1971-1996, John Wiley & Sons, NY. Los grupos protectores de amino representativos incluyen a título no limitativo: formilo, acetilo, trifluoracetilo, bencilo, benciloxicarbonilo ("CBZ"), ter-butoxicarbonilo ("Boc") , trimetilsililo ( "TMS" ) , 2-trimetilsilil-etansulfonilo ("TES"), trifilo y grupos trifilo sustituidos, aliloxicarbonilo, 9-fluorenilmetiloxicarbonilo ("FMOC"), nitro-veratriloxicarbonilo ("NVOC") y similares. Los grupos protectores de hidroxi incluyen a título no limitativo, aquellos en los que el grupo hidroxi sea está acilado o alquilado tales como éteres de bencilo y trifilo, así como también éteres de alquilo, éteres de tetrahidropiranilo, éteres de trialquilsilo (por ejemplo, grupos TMS o TIPPS) y éteres de alilo.
[0173] La expresión "sales farmacéuticamente aceptables" tiene por objeto incluir sales de los compuestos activos que se preparan con ácidos o bases relativamente no tóxicos, en función de los sustituyentes particulares encontrados en los compuestos descritos en la presente. Si los compuestos de la presente invención contienen funcionalidades relativamente ácidas, puede obtenerse y sales por adición de bases, para lo cual se pone contacto la forma neutra de dichos compuestos con una cantidad suficiente de la base deseada, sea tal cual sea en un solvente inerte adecuado. Los ejemplos de sales derivadas a partir de bases inorgánicas farmacéuticamente aceptables incluyen aluminio, amonio, calcio, cobre, férrico, ferroso, liquido, magnesio, manganeso, potasio, sodio, zinc y similares. Las sales derivadas de bases orgánicas farmacéuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, lo que incluye las aminas sustituidas, las aminas cíclicas, las aminas que se presentan en la naturaleza, y similares, tales como arginina, betaína, cafeína, colina, N, N' -dibenciletilendiamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol , 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, residuos de poliamina, procaína, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, trometamina y similares. Si los compuestos de la presente invención contienen funcionalidades relativamente básicas, es posible obtener sales por adición de ácido para lo cual se ponen en contacto la forma neutra de dichos compuestos con una cantidad suficiente del ácido deseado, sea el estado puro sea en un solvente inerte adecuado. Los ejemplos de sales por adición de ácido, farmacéuticamente aceptables, incluyen aquellas derivadas de ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido nítrico, ácido carbónico, ácido mono hidrógeno carbónico, ácido fosfórico, ácido monohidrógeno-fosfórico, ácido sulfúrico, ácido monohidrógeno-sulfúrico, ácido yodhídrico, o ácido fosforoso y similares, como también las sales derivadas a partir de ácidos orgánicos relativamente no tóxicos tales como ácido acético, ácido propiónico, ácido isobutírico, ácido malónico, ácido benzoico, ácido succínico, ácido subérico, ácido fumárico, ácido mandélico, ácido itálico, ácido bencensulfónico, ácido p-tolilsulfónico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido metanosulfónico, y similares. También se incluyen las sales de aminoácidos tales como arginato y similares, y las sales de ácidos orgánicos tales como ácido glucurónico ácido galacturónico, y similares (Véanse, por ejemplo, Berge, S.M. et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Phar aceutical Science, 66:1-19, 1977). Determinados compuestos específicos de la presente invención contienen funcionalidades tanto básicas como ácidas que permiten que los compuestos sean convertidos en sales de adición sea de base sea de ácido.
[0174] Las formas nuestras de los compuestos pueden ser regenerados poniendo el contacto con una base o ácido y aislando el compuesto progenitor de una manera convencional. La forma progenitora del compuesto difiere de las diversas formas de sal en determinadas propiedades físicas, tales como la solubilidad en solventes polares, pero por lo demás para los fines de la presente invención las sales son equivalentes a la forma progenitora del compuesto.
[0175] Además de las formas de sal, la presente invención provee compuestos que se hallan en una forma de éster profarmacológico . Los "profármacos" de los compuestos descritos en la presente son aquellos compuestos que experimentan fácilmente cambios químicos bajo condiciones fisiológicas de manera de proveer los compuestos de la presente invención. Además, es posible convertir los profármacos en los compuestos de la presente invención mediante métodos químicos o bioquímicos en un entorno ex vivo. Por ejemplo, es posible convertir los profármacos lentamente en los compuestos de la presente invención cuando se los colocada en el reservorio de un parche transdérmico con un enzima adecuado o con un reactivo químico. Los profármacos son frecuentemente, pero no necesariamente, inactivas desde el punto de vista farmacológico hasta que se conviertan en la droga activa. Típicamente se obtienen los profármacos enmascarando un grupo funcional en la droga del cual se creen que se requiere parcialmente necesario para la actividad con un progrupo (que se define lo que sigue) a efectos de formar un prorresto que experimenta una transformación, tal como un desdoblamiento, bajo las condiciones especificados de uso para liberar el grupo funcional, y por ende la droga activa. El desdoblamiento del prorresto puede tener lugar de manera espontánea, tal como mediante reacción de hidrólisis, o puede ser catalizado o inducido por otro agente, tal como una enzima, por la luz, por un ácido o por una base, o mediante un cambio de exposición o mediante un exposición a un parámetro físico o ambiental, tal como un cambio de temperatura. El agente puede ser endógeno con respecto a las condiciones de uso, tal como una enzima presente en las células en las cuales se administra el profármaco o las condiciones ácidas del estómago, o es posible suministrárselo como agente exógeno.
[0176] La expresión "progrupo" se refiere a un tipo de grupo protector que cuando se lo utiliza para enmascarar un grupo funcional dentro de una droga activa de manera de formar un prorresto, convierte la droga en una prodroga. Típicamente, los progrupos están fijados al grupo funcional de la droga por medio de enlaces que son desdoblables bajo condiciones de uso específicas. Por lo tanto, un progrupo es una porción de un prorresto que se desdobla de manera de liberar el grupo funcional bajo las condiciones de uso especificas. A titulo de ejemplo especifico, un prorresto de amida de la fórmula -NH-C(0)CH3 comprende el progrupo -C(0)CH3.
[0177] En la especialidad es bien conocida una amplia variedad de progrupos, asi como de los prorrestos correspondientes, adecuados para enmascarar grupos funcionales en los compuestos inhibidores selectivos del syk para obtener profármacos. Por ejemplo, es posible enmascarar un grupo funcional hidroxilo como un prorresto sulfonato, éster (tales como acetato o maleato) o carbonato, que puede ser hidrolizada in vivo de manera de proveer el grupo hidroxilo. Un grupo funcional amino puede estar enmascarado como un prorresto amida, carbamato, imina, urea, fosfenilo, fosforilo o sulfenilo, que puede hidrolizarse in vivo de manera de proveer el grupo amino. Un grupo carboxilo puede estar enmascarado como un éster (que incluye ésteres y tioésteres de metilo, etilo, pivalaoiloximetilo y sililo) , prorresto amida o hidrazida, que puede hidrolizarse in vivo de manera de proveer el grupo carboxilo. La invención incluye aquellos ésteres y grupos acilo conocidos en la especialidad para modificar la solubilidad o características de hidrólisis para su uso como formulaciones de liberación prolongada o de profármaco. Otros ejemplos específicos de progrupos adecuados y de sus respectivas prorrestos serán evidentes para las personas con pericia la especialidad.
[0178] Determinados compuestos de la presente invención puede existir en formas no solvatadas asi como en formas solvatadas, que incluyen las formas hidratadas. El término "solvato" se refiere a un complejo formado por combinación de moléculas de solvente con moléculas o iones del soluto. El solvente puede ser un compuesto orgánico, un compuesto inorgánico, o una mezcla de ambos. Algunos ejemplos de solventes incluyen a titulo no limitativo: metanol, N, N-dimetilformamida, tetrahidrofurano, metilsulfóxido, y agua. En general, las formas solvatadas son equivalentes a las formas no solvatadas, y están destinadas a quedar abarcadas dentro de los alcances de la presente invención. Determinados compuestos de la presente invención puede existir en múltiples formas, cristalinas o amorfas. En general, todas las formas físicas son equivalentes para los fines considerados por la presente invención, y están destinadas a recaer dentro de los alcances de la presente invención.
[0179] Determinados compuestos de la presente invención poseen átomos de carbono asimétricos (centros ópticos) o enlaces dobles; los racematos, diastereómeros , isómeros geométricos, regioisómeros e isómeros individuales (por ejemplo, enantiómeros ) están destinados, todos ellos, a quedar abarcados dentro de los alcances de la presente invención. Estos isómeros pueden ser resueltos o sintetizados asimétricamente mediante la utilización de métodos convencionales para hacer que los isómeros sean "ópticamente puros", es decir sustancialmente libres de sus otros isómeros. Por ejemplo, si se desea un enantiómero particular de un compuesto de la presente invención, es posible prepararlo mediante síntesis asimétrica, o mediante derivación con un auxiliar quiral, separándose la mezcla diastereomérica resultante y desdoblándose el grupo auxiliar a efectos de proveer los enantiómeros puros deseados. Como alternativa, si la molécula contiene un grupo funcional básico, o un grupo funcional ácido, tal como carboxilo, se forman las sales diastereoméricas con un ácido o base ópticamente activa adecuada, seguido por resolución de los diastereómeros así formados mediante cristalización fraccionada o mediante medios cromatográficos bien conocidos en la especialidad, y la siguiente recuperación de los enantiómeros puros .
[0180] Los compuestos de la presente invención también podrán contener proporciones no naturales de isótopos atómicos en uno o más de los átomos que constituyen tales compuestos. Por ejemplo, los compuestos pueden estar radioetiquetados con isótopos radiactivos, tales como por ejemplo tritio (3H) , iodo-125 (125I) o carbono -14 (14C) . Todas las variaciones isotópicas de los compuestos de la presente invención, radioactivos o no, están destinadas a quedar abarcadas entre los alcances de la presente invención .
[0181] El término "administración" se refiere a la administración oral, la administración en forma de un supositorio, el contacto tópico, la administración intravenosa, intraperitoneal , intramuscular, intralesional , intranasal o subcutánea, o la implantación de un dispositivo de liberación lenta, por ejemplo, una bomba mini-osmótica, a un sujeto. La administración puede tener lugar por cualquier vía, lo que incluye la vía parenteral y transmucosal (pór ejemplo, bucal, sublingual, palatal, gingival, nasal, vaginal, rectal, o transdérmica) . La administración parenteral incluye, por ejemplo, la administración intravenosa, intramuscular, intraarteriolar , intradérmica, subcutánea, intraperitoneal, intraventricular e intracranial . Otros modos de entrega incluyen a titulo no limitativo, el uso de formulaciones liposomales, la infusión intravenosa, los parches transdérmicas, etc.
[0182] El término "agonista" o "activador" se refiere a un agente o molécula que se liga a un receptor de la invención, estimula, incrementa, abre, activa, facilita, refuerza la activación o actividad enzimática, sensibiliza o regula ascendentemente la actividad de un receptor de la invención.
[0183] El término "antagonista" o "inhibidor" se refiere a un agente o molécula que inhibe o se liga a, bloquea parcial o totalmente la estimulación o actividad, disminuye, cierra, impide o retarda la activación o actividad enzimática, desactiva, desensibiliza o regula descendentemente la actividad de un receptor de la invención. Tal como se lo utiliza la presente, el término "antagonista" también incluye un agonista reverso o inverso .
[0184] Tal como se la utiliza en la presente, la expresión "condición o trastorno responsable de la modulación del syk" y los términos y frases relacionados, se refieren a una condición o trastorno asociados con una actividad inadecuada, por ejemplo, inferior o superior a la normal, del syk y que responde al menos parcialmente, o es afectada al menos parcialmente por, la modulación de syk (por ejemplo, el antagonista o agonista de syk tiene como resultado una mejoría en el bienestar del paciente, por lo menos en algunos pacientes) . La actividad funcional adecuada del syk podría ser el resultado de la expresión del syk en células que normalmente no expresan el receptor, mayor que la producción normal del syk, o más lento que la activación metabólica normal o eliminación del syk o de sus metabolitos activos, la expresión acrecentada de syk o del grado de desactivación intercelular (lo que conduce a, por ejemplo, trastornos y condiciones inflamatorias e inmunorrelacionados) o a una expresión disminuida del syk. Una condición o trastorno asociados con syk puede incluir una "condición o trastorno mediada por syk".
[0185] Tal como se la utiliza en la presente, la expresión "una condición o trastorno mediados por lo menos parcialmente por la actividad de la syk quinasa", y las expresiones y términos relacionados, se refieren a una condición o trastorno caracterizados por una actividad inadecuada del syk, por ejemplo, mayor que la normal. La actividad funcional inadecuada del syk puede ser el resultado de la expresión del syk en células que normalmente no expresan el syk, o una expresión acrecentada del syk o un mayor grado de activación intercelular (lo que conduce a, por ejemplo, trastornos y condiciones inflamatorias e inmunorrelacionadas ) . Una condición o trastorno mediados por lo menos en parte por la actividad de la syk quinasa, puede estar completa o parcialmente mediada por una actividad funcional inadecuada del syk. Sin embargo, una condición o trastorno mediados por lo menos en parte por la actividad de la syk quinasa es una en la cual la modulación del syk tiene como resultado algún efecto sobre la condición o trastornos subyacentes (por ejemplo, un antagonista del syk tiene como resultado alguna mejoría en el bienestar del paciente, por lo menos en algunos pacientes) .
[0186] Tal como se lo utiliza en la presente, el término "inflamación" se utiliza para referirse a la infiltración de células blancas de la sangre (por ejemplo, leucocitos, monocitos, etc.) en el área que se está tratando por reestenosis.
[0187] La expresión "intervención" se refiere a una acción que producen un efecto sobre o que está destinado a alterar el curso del proceso de una enfermedad. Por ejemplo, la expresión "intervención vascular" se refiere al uso de un procedimiento intravascular tal como angioplastia o a un stent para abrir un vaso sanguíneo obstruido.
[0188] La expresión "dispositivo intravascular" se refiere a un dispositivo que es útil para un procedimiento de recanalización vascular a efectos de restaurar el flujo de la sangre a través de un vaso sanguíneo obstruido. Los ejemplos de dispositivos intramusculares incluyen sin limitación, stents, catéteres de globo, injertos venosos/arteriales autólogos, injertos venosos/arteriales de prótesis, catéteres vasculares, y shunts vasculares.
[0189] Tal como se la utiliza en la presente, la expresión "JAK" se refiere a una Janus quinasa (RefSeq Accession No. P-43408) o a una variante de la misma que es capaz de mediar la expresión de los genes in vitro o in vivo. Las variantes de JAK incluyen proteínas sustancialmente homologas al JAK nativo, es decir, proteínas que tienen una o más supresiones, inserciones o sustituciones que se presentan naturalmente o no naturalmente (por ejemplo, derivados, homólogos y fragmentos de JAK). La secuencia de aminoácidos de una variante de JAK es preferiblemente idéntica en al menos aproximadamente 80% a la de un JAK nativo, más preferentemente idéntica en al menos aproximadamente 90%, y más preferentemente aún, idéntica en por lo menos aproximadamente 95%.
[0190] La expresión "leucocito" se refiere a cualquiera de las diversas células sanguíneas que tienen un núcleo y un citoplasma, separadas dentro de una delgada capa blanca cuando se centrifuga sangre entera, y ayudan a proteger al cuerpo contra infecciones y enfermedades. Los ejemplos de leucocitos incluyen a título no limitativo los neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfocitos y monocitos .
[0191] La expresión "mamífero" incluye sin limitación seres humanos, animales domésticos (por ejemplo, perros o gatos), animales de granja (vacas, caballos, o cerdos), monos, conejos, ratones, y animales de laboratorio.
[0192] La expresiones "modular", "modulación" y similares se refieren a la capacidad de un compuesto de incrementar o disminuir la función y/o expresión del syk, pudiendo dicha función incluir la actividad reguladora de la transcripción y/o la ligación a proteína. La modulación puede tener lugar in vitro o in vivo. La modulación, como se describe en la presente, incluye la inhibición, antagonismo, antagonismo parcial, activación, agonismo o agonismo parcial de una función o característica asociados con el syk, sea directamente sea indirectamente, y/o la regulación ascendente o regulación descendente de la expresión del syk, sea directamente sea indirectamente. En una forma de realización preferida, la modulación es directa. Los inhibidores o antagonistas son compuestos que por ejemplo se ligan a, bloquean total o parcialmente la estimulación, disminuyen, impiden, inhiben, retardan la activación, desactivan, desensibilizan, o regulan descendentemente la transducción de señales. Los activadores o agonistas son compuestos que, por ejemplo se ligan a, estimulan, incrementan, abren, activan, facilitan, refuerzan la activación, activan, sensibilizan o regulan ascendentemente la transducción de señales . La capacidad de un compuesto de inhibir la función del syk puede demostrarse en un ensayo bioquímico, por ejemplo, un ensayo de ligación, o un ensayo basado en células, por ejemplo, un ensayo de transfección transitoria.
[0193] Las expresiones "moduladores" de la actividad se utilizan para referirse a "ligandos", "antagonistas" y "agonistas" identificados mediante ensayos in vítro y in vivo para establecer su actividad y sus homólogos y miméticos. Los moduladores incluyen los ligandos, antagonistas, agonistas, moléculas y similares que se presentan naturalmente y los sintéticos. Los ensayos para identificar los antagonistas y agonistas incluyen, por ejemplo, la aplicación de compuestos moduladores putativos a células, en la presencia o ausencia de un receptor de la invención, y seguidamente determinar los efectos funcionales sobre la actividad de un receptor de la invención. Las muestras o ensayos que comprenden un receptor de la invención que han sido tratados con un activador, inhibidor, o modulador potenciales, son comparados con muestras de control sin el inhibidor, activador, o modulador, para examinar la amplitud del efecto. A las muestras de control (no tratadas con moduladores) se les asigna un valor de actividad relativo del 100%. Se logra la activación cuando el valor de la actividad de un receptor referido a un control es de aproximadamente 80%, opcionalmente 50% o 25-1%. Se logra la activación cuando el valor de la actividad de un receptor de la invención con respecto al control es superior en un 110%, opcionalmente en un 150%, opcionalmente en un 200-500%, o en un 1.000-3.000%.
[0194] El término "paciente" se refiere a animales humanos y no humanos, en especial mamíferos. Los ejemplos de pacientes comprenden a título no limitativo, a seres humanos, vacas, perros, gatos, caprinos, ovinos, porcinos y conejos.
[0195] Con referencia ahora a las composiciones de la invención, la expresión "vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable" se refiere a un portador o excipiente que es útil para preparar una composición farmacéutica que en términos generales es segura, carece de toxicidad y que no es indeseable desde el punto de vista biológico u otro, e incluye un vehículo o excipiente que es aceptable para uso veterinario y también para uso farmacéutico humano. Tal como se la utiliza en la memoria descriptiva y en las reivindicaciones, la expresión "vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable" incluye tanto uno como más de tales vehículos o excipientes.
[0196] Las expresiones "cantidad farmacéuticamente efectiva", "cantidad terapéuticamente efectiva" o "dosis terapéuticamente efectiva" se refiere a la cantidad de compuesto sujeto que suscitará la respuesta biológica o médica de un tejido, sistema, animal o humano que el investigador, veterinario, médico u otro clínico desee obtener. La expresión "cantidad terapéuticamente efectiva" incluye aquella cantidad de un compuesto que, cuando se lo administre, es suficiente para impedir el desarrollo de, o para aliviar en alguna medida, uno o más de los síntomas de la condición o trastorno que se está tratando. La cantidad terapéuticamente efectiva variará en función del compuesto, trastorno o condición y de su gravedad, y de la edad, peso, etc., del mamífero que debe ser tratado.
[0197] La expresión "plaqueta" se refiere a una célula diminuta, no nucleada, de forma de disco que se encuentra en el plasma sanguíneo de los mamíferos y que funciona de manera de promover la coagulación de la sangre.
[0198] Las expresiones "impide", "impedir", y las variante gramática de las mismas, tales como se las utilizan en la presente, se refieren a un método para retardar o excluir parcial o totalmente la presentación o recurrencia de un trastorno o condición y/o uno o más de sus síntomas concurrentes o para impedir que un sujeto adquiera o readquiera un trastorno o condición o para reducir el riesgo corrido por un sujeto de adquirir o readquirir un trastorno o condición o uno más de sus síntomas concurrentes.
[0199] La expresión "recanalización" se refiere al proceso de restaurar el flujo o para volver a unir un canal no interrumpido del cuerpo, tal como un vaso sanguíneo.
[0200] La expresión "reestenosis" se refiere al reestrechamiento o bloqueo de una arteria en el mismo sitio en el que se ha efectuado el tratamiento, tal como una angioplastia o un procedimiento de stent.
[0201] Las expresiones "selectivamente" o "específicamente" cuando se refieran a la ligación a un receptor, se refieren a una reacción de ligación que es determinante de la presencia del receptor, frecuentemente en una población heterogénea de receptores y de otros elementos biológicos. Por lo tanto, bajo condiciones designadas, los compuestos se ligan a un receptor particular por lo menos dos veces el segundo plano, y más típicamente más de 10 a 100 veces el segundo plano. La ligación específica de un compuesto bajo tales condiciones requiere que se seleccione un compuesto en base a su carácter específico con respecto a un receptor particular. Por ejemplo, es posible seleccionar moléculas orgánicas pequeñas de manera de operar solamente aquellos compuestos que de manera especifica o selectiva se liguen a un receptor seleccionado y que no lo hagan a otros receptores o proteínas. Puede utilizarse una variedad de formatos de ensayo para seleccionar compuestos que sean selectivos con respecto a un receptor en particular. Por ejemplo, se utilizan de manera rutinaria ensayos de clasificación de elevada performance (High-throughput screening assays) a efectos de seleccionar compuestos que sean selectivos son respecto a un receptor en particular.
[0202] Tal como se la utiliza en la presente, la expresión "anemia de las células falciformes" se refiere a un trastorno heredado de las células rojas de la sangre en la que ambos alelos de hemoglobina codificarán la proteína hemoglobina de hoz (S) , es decir, el genotipo S/S. La presencia de hemoglobina anormal tiene como resultado la producción de células de forma desusual, que no sobreviven la duración de tipo usual en la circulación de la sangre. Por ello resulta una anemia. El término "anemia" se refiere a una disminución de las células rojas en la sangre y/o de la hemoglobina en la sangre.
[0203] La expresión "enfermedad de las células de forma de hoz" se refiere a un trastorno heredado de las células rojas de la sangre en la que un alelo de hemoglobina codifica la proteína hemoglobina de hoz (S) , y el otro alelo codifica otra proteína que es usual de la hemoglobina, tal como la hemoglobina (S), (C) , (D), (E) , y ((3Thal). Los ejemplos de genotipo de la enfermedad de las células en hoz incluyen, sin limitación, los genotipos S/S, S/C, S/D, S/E, y S/3Thal. Los tipos más comunes de enfermedad de células en forma de hoz incluyen la anemia de las células en hoz, la enfermedad de la hemoglobina C en forma de hoz, la talasemia beta-plus de hoz, y la talasemia beta-cero de hoz.
[0204] En la presente, el "sujeto" incluye por definición animales tales como los mamíferos, que incluyen a título no limitativo, los primates (por ejemplo, los humanos), vacas, ovejas, caprinos, caballos, perros, gatos, conejos, ratas, ratones y similares. En formas de realización preferidas, el sujeto es un ser humano.
[0205] Tal como se la utiliza en la presente, la expresión "syk" se refiere a una tirosina quinasa de bazo (spleen tyrosine kinase) (RefSeq Accession No. P-043405) o a una variante de la misma que es capaz de mediar una respuesta celular a los receptores de células T in vitro o in vivo. Las variantes syk incluyen proteínas sustancialmente homologas al syk nativo, es decir, proteínas que tienen una o más supresiones, inserciones o sustituciones de aminoácidos que se presentan naturalmente o no naturalmente (por ejemplo, derivados, homólogos y fragmentos de syk) . La secuencia de la variante de syk es preferiblemente de por lo menos aproximadamente el 80% idéntico a la de un syk nativo, más preferiblemente por lo menos aproximadamente 90%. y más preferentemente aún, al menos aproximadamente 95%. [ 0206 ] La expresión "inhibidor de syk" se refiere a cualquier agente que inhiba la actividad catalítica de la tirosina quinasa de bazo. [ 0207 ] La expresión "trombosis" se refiere al bloqueo o coagulación de un vaso sanguíneo causado por el agrupamiento de células, siendo el resultado la obstrucción del flujo de la sangre. La expresión "trombosis" se refiere al coágulo que se forma dentro de un vaso sanguíneo. [ 0208 ] Las expresiones "tratar", "tratamiento" y las variaciones gramaticales de las mismas, tal como se las utiliza en la presente, incluyen retardar, aliviar, mitigar o reducir, parcial o completamente la intensidad de uno o más síntomas concurrentes de un trastorno o condición y/o aliviar, mitigar o impedir una o más causas de un trastorno o condición. Los tratamientos de acuerdo con la invención pueden aplicarse a título preventivo, profiláctico, paliativo o como remedio. [ 0209] La expresión "vaso" se refiere a cualquier canal para transportar un fluido, tal como una arteria o vena. Por ejemplo, un "vaso sanguíneo" se refiere a cualquiera de los vasos a través de los cuales la sangre circula en el cuerpo. La expresión "lumen o luz libre" de un vaso sanguíneo se refiere al espacio interior o cavidad abierta del vaso sanguíneo. 2. Formas de la invención a . Compuestos
[0210] La presente invención provee en un grupo de formas de realización, un compuesto que tiene la fórmula (I): (I) o uno de sus tautómeros o sales farmacéuticamente aceptables, en donde : Y1 está seleccionado del grupo que consiste en: Z es 0 o S; D1 está seleccionado del grupo que consiste en: (a) fenilo sustituido con un grupo, R5, en donde el fenilo también está opcionalmente sustituido con 1 a 2 sustituyentes , R7a, seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci-8, alcoxi Ci_8, halo, alquil Ci_8-sulfonilo y heterociclilo; R5 está seleccionado del grupo que consiste en: (i) heteroarilo; (ii) heterociclilo; (iii) alquil Ci-8-heterociclilo; (iv) fenilenheteroarilo (v) fenilenheterociclilo (vi) -L-fenilo; (vii) -L-heterociclilo; y (viii) aciloxi; L está seleccionado del grupo que consiste en -C0-, -0-, -SO2-, -CONH- y -CONHCH2-; cada R5 también está opcionalmente sustituido con 1 a 2 sustituyentes seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci-s, hidroxialquilo C1-8 , aminoalquilo C1-8 alquil Ci-8-amino, alquil Ci_8-carbonilo, aminocarbonilo, ciano, hidroxi, oxo, halo, haloalquilo Ci-8, aminosulfonilo, cicloalquilo C3-8 y arilo; (b) naftilo sustituido con un sustituyente , R7b, seleccionado del grupo que consiste en halógeno, alquil Ci-e- carbonilo, alquil Ci-8-sulfonilo, aminosulfonilo, heterociclilcarbonilo y aminocarbonilo; (c) cicloalquilo C3-8, opcionalmente sustituido con 1 a 2 sustituyentes, R7c, seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci-s, alcoxi Ci-s, halo, alquil Ci_8-sulfonilo y heterociclilo; (d) heteroarilo; opcionalmente sustituido con 1 a 2 sustituyentes , Rd, seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en: alquilo Ci-8, amino, hidroxilo, oxo, halo, alcoxi Ci-8, hidroxialquilo Ci_8, aminoalquilo Ci-8, alquil Ci-8-carbonilo, haloalquilo Ci-8, cicloalquilo C3-8, aminocicloalquilo Ci-8, arainoalquilen Ci-s-carbonilo, aminocarbonilo, alquilen Ci_8-aminoalquilen Ci-8-carbonilo, alcoxi Ci-8-alquilen Ci-8-carbonilo, hidroxialquilen Ci_8-carbonilo, hidroxialcoxi Ci-8-carbonilo, alcoxi Ci-8-carbonilamino, arilo, arilalcoxi Ci-g-carbonilamino , r alquil Ci_8-sulfonilo, aminoalquilen Ci-8-sulfonilo, aminosulfonilo, alquilen Ci-8-aminoalquilen Ci_8-sulfonilo, alcoxi Ci-8-alquilen Ci-8-sulfonilo, hidroxialquilen Ci_8-sulfonilo, hidroxialcoxi Ci_8-sulfonilo, aminosulfonilo y alquil Ci_8-heterociclilo; y (e) heterociclilo; con 1 a 2 sustituyentes, R7e, seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci_8, alcoxi Ci-8, halo, alquil Ci_8-sulfonilo y heterociclilo; cada E1 está seleccionado de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci_8, alquenilo C2-8, alquinilo C2-8, alcoxi Ci-8, alquil Ci-8-tio, aminocarbonilo, alcoxi Ci-8-carbonil-alquileno Ci_8, alcoxi Ci-8-carbonil Ci_8alcoxi Ci-8, alcoxi Ci_8-carbonilamino, oxo, halo, ciano, haloalquilo Ci-8, haloalcoxi Ci_8, aminosulfonilo, heteroarilsulfinilo; amino, hidroxilo, arilalquileno Ci-8, fenilo, aminoalquilo Ci_8, aminocicloalquilo C3-8 , heterociclilo, heteroarilo y heterociclilalquileno Ci_8; cada Rla, Rl y Rlc está seleccionado de modo independiente del grupo que consiste en: H, alquilo Ci_8, hidroxialquilo Ci-8, haloalquilo C1-8 , amino, alquil Ci-g-amino, alcoxi Ci-8-carbonilaminoalquileno Ci_8, cicloalquilo C3-8, heteroarilo, alquil Ci-8-cicloalquilo C3-8 , alquil Ci-8-t ioalquilo Ci_8, alquil Ci-8-sulfonilalquileno Ci_8, aminocarbonilo, alcoxi Ci_8-alquilo Ci_8, haloalquilo Ci-8, arilo y heterociclilo; en donde el arilo está opcionalmente sustituido con hidroxilo, alcoxi Ci_8, halo o haloalquilo Ci-8; o tomado junto con R3 y los átomos a los que están unidos para formar un anillo cicloalquilo C3_s o heterocicloalquilo; R2 está seleccionado del grupo que consiste en H, amino, alquil Ci-8-amino, hidroxicarbonilamino Ci_8 alcoxicarbonilamino , arilalcoxi Ci-8-carbonilamino e hidroxilo; R3 está seleccionado del grupo que consiste en H, alquilo Ci-8, alquil Ci-8-amino, amino aminoalquilo Ci_8, carboxi, alquil Ci_8-aminoalquilo Ci-8, alcoxi Ci-8-alquilo Ci_8, hidroxialquilo Ci_8; carboxialquilo Ci_8, cicloalquil C3_8-alquilo Ci_8, ariloxialquilo C1-8 , arilalquilo Ci_8, heteroarilalquilo Ci-8 e hidroxialcoxi Ci-s e hidroxialcoxi Ci-8; o se puede combinar con Rlc o R4 y los átomos a los que están unidos para formar un anillo cicloalquilo C3-8 o heterociclilo; R4 es H o alquilo o se puede combinar con R3 y los átomos a los que están unidos para formar un anillo cicloalquilo C3-8 o heterociclilo; el subíndice n es 0, 1, 2, 3 ó 4; y el subíndice m es un número entero de 1, 2 ó 3; y la línea ondulada indica el punto de unión con el resto de la molécula.
[0211] En un grupo de formas de realización, Y1 es:
[0212] En un grupo de formas de realización, Y1 es:
[0213] En un grupo de formas de realización, Z es O. En otro grupo de formas de realización, Z es S .
[0214] En un grupo de formas de realización, D1 es fenilo.
[0215] En un grupo de formas de realización, R5 es heteroarilo. En otro grupo de formas de realización, R5 es heterociclilo. En otro grupo de formas de realización, R5 es alquil Ci-8-heterociclilo . En otro grupo de formas de realización, R5 es fenilenheteroarilo . En otro grupo de formas de realización, R5 es fenilenheterociclilo . En otro grupo de formas de realización, R5 es -L-fenilo. En otro grupo de formas de realización, R5 es -L-heterociclilo . En otro grupo de formas de realización, R5 es aciloxi.
[0216] En otro grupo de formas de realización, D1 es naftilo.
[0217] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde D1- está seleccionado del grupo que consiste en: halógeno .
[0218] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde D1- está seleccionado del grupo que consiste en: En otro grupo de formas de realización, D1 es cicloalquilo C3 En otro grupo de formas de realización, D1 es heteroarilo. otro grupo de formas de realización, D1 es heterociclilo.
[0219] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto que tiene la fórmula (I) : (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, en donde : Y1 está seleccionado del grupo que consiste en: D1 está seleccionado del grupo que consiste en: (a) fenilo sustituido con un grupo heteroarilo R5, en donde el fenilo también está opcionalmente sustituido con 1 a 2 sustituyentes , R7a, seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci-g, alcoxi Ci-8, halo, alquil Ci-8~ sulfonilo y heterociclilo; y el heteroarilo también está opcionalmente sustituido con 1 a 2 sustituyentes seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci-g, hidroxialquilo Ci_8, aminoalquilo Ci-e, alquil Ci-s-carbonilo, aminocarbonilo, hidroxi, oxo, halo, haloalquilo Ci-8, aminosulfonilo y cicloalquilo C3-8; (b) naftilo sustituido un sustituyente, R7b, seleccionados del grupo que consiste en alquil Ci-e-sulfonilo, aminosulfonilo, heterociclilcarbonilo y aminocarbonilo; (c) cicloalquilo C3-8, opcionalmente sustituido con 1 a 2 sustituyentes , R7c, seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci-8, alcoxi Ci-g, halo, alquil Ci-8-sulfonilo y heterociclilo; (d) heteroarilo biciclico; opcionalmente sustituido con 1 a 2 sustituyentes, R7d, seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en: alquilo Ci-8, alquil Ci-8-carbonilo, aminoalquilen Ci_8-carbonilo, aminocarbonilo, alquilen Ci-8-aminoalquilen Ci_8-carbonilo, alcoxi Ci-s-alquilen Ci-8-carbonilo, hidroxialquilen Ci-s-carbonilo, hidroxialcoxi Ci-8-carbonilo, aminocarbonilo, amino, alcoxi Ci-8-carbonilamino, arilalcoxi Ci_8-carbonilamino, hidroxilo, alcoxi Ci-8, alquil Ci-8-sulfonilo, aminoalquilen Ci_8-sulfonilo, aminosulfonilo, alquilen Ci-8-aminoalquilen Ci_8-sulfonilo, alcoxi Ci-8-alquilen Ci-8-sulfonilo, hidroxialquilen Ci-8-sulfonilo, hidroxialcoxi Ci-8-sulfonilo, aminosulfonilo, oxo, halo, fenil heterociclilo y alquil Ci-8-heterociclilo; y · (e) heterociclilo; con 1 a 2 sustituyentes, R7e, seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci_8, alcoxi Ci-8, halo, alquil Ci_8-sulfonilo y heterociclilo ; cada E1 está seleccionado de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci_8, alquenilo C2-8, alquinilo C2-8, alcoxi Ci-8, alquil Ci_8-tio, aminocarbonilo, alcoxi Ci_8-carbonil-alquileno Ci-8, alcoxi Ci_8-carbonil Ci-8alcoxi Ci-8, alcoxi Ci_8-carbonilamino, oxo, halo, ciano, haloalquilo Ci_8, haloalcoxi Ci-8, aminosulfonilo, heteroarilsulfinilo; amino, hidroxilo, arilalquileno I-Q, fenilo, aminoalquilo Ci-8, aminocicloalquilo C3-8/ heterociclilo, heterarilo y heterociclilalquileno Ci_8; cada Rla, Rlb y Rlc está seleccionado de modo independiente del grupo que consiste en: H, alquilo Ci_8, hidroxialquilo Ci-8, amino, alquil Ci-8-amino, alcoxi Ci-8-carbonilaminoalquileno Ci-8, cicloalquilo C3-8, heteroarilo, alquil Cx-a-cicloalquilo C3_8, alquil Ci_8-tioalquilo Ci_8, alquil Ci-8-sulfonilalquileno Ci_8, aminocarbonilo, arilo y heterociclilo; en donde el arilo está opcionalmente sustituido con hidroxilo, alcoxi Ci-8, halo o haloalquilo Ci-8; o tomado junto con R3 y los átomos a los que están unidos para formar un anillo cicloalquilo C3-8 o heterocicloalquilo ; R2 está seleccionado del grupo que consiste en H, amino, arilalcoxi Ci_8-carbonilamino e hidroxilo; R3 está seleccionado del grupo que consiste en H, alquilo Ci-8, alquil Ci-8-amino, amino alquil Ci-8-aminoalquilo Ci_8, alcoxi Ci_8-alquileno Ci-8, hidroxialquilo Ci-8 e hidroxialcoxi Ci-8; o se puede combinar con Rlc o R4 y los átomos a los que están unidos para formar un anillo cicloalquilo C3-8 o heterociclilo; R4 es H o alquilo o se puede combinar con R3 y los átomos a los que están unidos para formar un anillo cicloalquilo C3-8 o heterociclilo; el subíndice n es 0, 1, 2, 3 ó 4; y el subíndice m es un número entero de 1, 2 ó 3; y la línea ondulada indica el punto de unión con el resto de la molécula.
[0220] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde D1 es cicloalquilo C3-8.
[0221] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde D1 está seleccionado del grupo que consiste en ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo .
[0222] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde D1 es heterociclilo.
[0223] ' La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto en donde cualquiera de los grupos heterociclilo de la fórmula I está seleccionado del grupo que consiste en: y
[0224] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde el heterociclilo está seleccionado del grupo que consiste en:
[0225] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto en donde un grupo heteroarilo del compuesto de la fórmula I está seleccionado del grupo que consiste en: . cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1 a 2 sustituyentes seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en: alquilo Ci-s, amino, hidroxilo, oxo, halo, alcoxi Ci-s, hidroxialquilo Ci-s, aminoalquilo Ci_8, alquil Ci-8-carbonilo, haloalquilo Ci-B, cicloalquilo C3-8, aminocicloalquilo Ci-8, aminoalquilen Ci_8-carbonilo, aminocarbonilo, alquilen Ci-g-aminoalquilen Ci-8- carbonilo, alcoxi Ci-8-alquilen Ci-g-carbonilo, hidroxialquilen Ci-s-carbonilo, hidroxialcoxi Ci-g-carbonilo, alcoxi Ci_8-carbonilamino, arilo, arilalcoxi Ci-8-carbonilamino, alquil Ci-8-sulfonilo, aminoalquilen Ci_8-sulfonilo, aminosulfonilo, alquilen Ci-8-aminoalquilen Ci_8-sulfonilo, alcoxi Ci-s-alquilen Ci-8-sulfonilo, hidroxialquilen Ci-8-sulfonilo, hidroxialcoxi Ci_8-sulfonilo, aminosulfonilo y alquil Ci-8-heterociclilo .
[0226] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto en donde un grupo heteroarilo del compuesto de la fórmula I es un grupo heteroarilo policiclico seleccionado del grupo que consiste en: seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en: alquilo Ci-8, alquil Ci-8-carbonilo, aminocicloalquilo Ci-s, aminoalquilen Ci-8-carbonilo, aminocarbonilo, alquilen Ci-8-aminoalquilen Ci-g-carbonilo, alcoxi Ci_8-alquilen Ci-8-carbonilo, hidroxialquilen Ci-s-carbonilo, hidroxialcoxi Ci-8-carbonilo, aminocarbonilo, amino, alcoxi Ci_8-carbonilamino, arilo, arilalcoxi Ci_8-carbonilamino, hidroxilo, alcoxi Ci-8, alquil Ci_8-sulfonilo, aminoalquilen Ci_8-sulfonilo, aminosulfonilo, alquilen Ci-8-aminoalquilen Ci-8-sulfonilo, alcoxi Ci-8-alquilen Ci_8-sulfonilo, hidroxialquilen Ci-s-sulfonilo, hidroxialcoxi Ci-8-sulfonilo, aminosulfonilo, oxo, halo, fenilo y alquil Ci-8-heterociclilo; y la linea ondulada indica el punto de unión con el resto de la molécula.
[0227] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde: D1 es heteroarilo biciclico.
[0228] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde D1 está seleccionado del grupo que consiste en: opcionalmente sustituido con 1 a 3 sust ituyentes R seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en: alquilo Ci-s, alquil Ci-s-carbonilo, aminoalquilen Ci-8-carbonilo, aminocarbonilo, alquilen Ci-8-aminoalquilen Ci-8-carbonilo, alcoxi Ci-8-alquilen Ci-s-carbonilo, hidroxialquilen Ci-8-carbonilo , hidroxialcoxi Ci-s-carbonilo, aminocarbonilo, amino, alcoxi i-g-carbonilamino, arilalcoxi Ci-g-carbonilamino, hidroxilo, alcoxi Ci-8, alquil Ci-e-sulfonilo, aminoalquilen Ci-e-sulfonilo, aminosulfonilo, alquilen Ci-s-aminoalquilen Ci-8-sulfonilo, alcoxi Ci-s-alquilen Ci-e-sulfonilo, hidroxialquilen Ci-e-sulfonilo, hidroxialcoxi Ci-e-sulfonilo, aminosulfonilo, oxo, halo, fenilo y alquil Ci-8-heterociclilo; y la linea ondulada indica el punto de unión con el resto de la molécula.
[0229] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde D1 está seleccionado del grupo que consiste en: ; y la linea ondulada indica el punto de unión con el resto de la molécula.
[0230] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde D1 está seleccionado del grupo que consiste en: resto de la molécula.
[0231] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde D1 está seleccionado del grupo que consiste en: y la linea ondulada indica el punto de unión con el resto de la molécula .
[0232] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde R5 está seleccionado del grupo que consiste en cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1 a 2 sustituyentes seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci-8, hidroxialquilo Ci_8, aminoalquilo Ci-8, alquil Ci-s-carbonilo, aminocarbonilo, hidroxi, oxo, halo, haloalquilo Ci-8, aminosulfonilo y cicloalquilo C3_8.
[0233] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde R5 está seleccionado del grupo que consiste en ; cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1 a 2 sustituyentes seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci-e, hidroxialquilo Ci-e, aminoalquilo Ci-s, alquil Ci-s-carbonilo, aminocarbonilo, hidroxi, oxo, halo, haloalquilo Ci-s, aminosulfonilo y cicloalquilo C3-8.
[0234] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde R5 está seleccionado del grupo que consiste en realización, un compuesto en donde cada E está seleccionado de modo independiente del grupo que consiste en alquilo Ci-8, heteroarilo, heterociclilo, halo, haloalquilo Ci_8, alcoxi Ci_8, acilo Ci-8 , aminoalquilo Ci-8, aminosulfonilo, alquil Ci-8-sulfonilo y acilamino.
[0236] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde cada E1 está seleccionado de modo independiente del grupo que consiste en
[0237] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde cada E1 está seleccionado de modo independiente del grupo que consiste en
[0238] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde R2 es amino.
[0239] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde el resto: es NH2 ; en donde X e Y están seleccionados cada uno de modo independiente del grupo que consiste en: CH2, NH, NCOCH3 y S.
[0240] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde el resto: está seleccionado del grupo que consiste en: en donde cada R a y R es de modo independiente H , hidroxilo, halo o su en átomos de carbono adyacentes, se pueden combinar con los átomos a los que están unidos para formar un anillo benceno fusionado; y cada R9a y R9b es de modo independiente H, hidroxilo, halo o, si están en átomos de carbono adyacentes, se pueden combinar con los átomos a los que están unidos para formar un anillo benceno fusionado; y la linea ondulada indica el punto de unión con el resto de la molécula.
[0241] La presente invención provee, realización, un compuesto en donde el resto en donde cada R a y R es de modo independiente H o se pueden combinar con los átomos a los que están unidos para formar un anillo benceno fusionado; y cada R9a y R9 es de modo independiente H o se pueden combinar con los átomos a los que están unidos para formar un anillo benceno fusionado; y la linea ondulada indica el punto de unión con el resto de la molécula.
[0242] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde: el resto: es en donde cada R y R es de modo independiente H o se puede combinar con los átomos a los que están unidos para formar un anillo benceno fusionado; y la linea ondulada indica el punto de unión con el resto de la molécula.
[0243] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto en donde el resto: es
[0244] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto en donde el resto: es
[0245] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto en donde Rlc está seleccionado del grupo que consiste en: alquilo Ci-s, hidroxialquilo Ci-e, alcoxi Ci-e-alquilo Ci-8 y haloalquilo Ci-8; R está seleccionado del grupo que consiste en H, amino y alquil Ci-8-amino; R3 está seleccionado del grupo que consiste en H, alquilo Ci_8, alquil Ci-8-amino, aminoalquilo Ci_8, carboxi, aminoalquil Ci-8-aminoalquilo Ci-8, alcoxi Ci_8-alquilo Ci_8, hidroxialquilo Ci_8, carboxialquilo I-Q, cicloalquil C3-8-alquilo Ci-g, ariloxialquilo Ci-8, arilalquilo Ci-8, heteroarilalquilo Ci-8 e hidroxialcoxi Ci-8; o se puede combinar con Rlc o R4 y los átomos a los que están unidos para formar un anillo cicloalquilo C3-8 o heterociclilo; R4 es H o alquilo o se puede combinar con R3 y los átomos a los que están unidos para formar un anillo cicloalquilo C3-8 o heterociclilo .
[0246] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, 'un compuesto que tiene la fórmula: en donde cada uno de X e Y está seleccionado de modo independiente del grupo que consiste en: CH2, NH, NCOCH3 y S.
[0247] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto que tiene la fórmula:
[0248] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto que tiene la fórmula: en donde cada uno de X e Y está seleccionado de modo independiente del grupo que consiste en: CH2, NH, NC0CH3 y S.
[0249] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto que tiene la fórmula:
[0250] La presente invención provee en otro grupo de formas realización, un compuesto que tiene a formula seleccionados grupo que consiste en:
[0251] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto que tiene la fórmula:
[0252] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto que tiene la fórmula:
[0253] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto que tiene la fórmula: en donde cada uno de X e Y está seleccionado de modo independiente del grupo que consiste en: CH2, NH, NCOCH3 y S.
[0254] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:
[0255] La presente invención provee, en otra forma realización, un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:
[0256] La presente invención provee en otra forma realización, un compuesto que tiene la fórmula: [ 0257 ] La presente invención provee en otra forma de realización, un compuesto que tiene la fórmula: presente invención provee en otra forma un compuesto que tiene la fórmula: [ 0259 ] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: [ 0260 ] La presente invención provee, realización, un compuesto en donde el resto es y la línea ondulada indica el punto de unión con el resto de la molécula . [ 0261 ] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto que tiene la fórmula: [ 0262 ] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto que tiene la fórmula: [ 0263 ] La presente invención provee en otro grupo de formas realización, un compuesto que tiene una fórmula seleccionado grupo que consiste en:
[0264] La presente invención provee en otro grupo de formas realización, un compuesto que tiene la fórmula:
[0265] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto que tiene la fórmula:
[0266] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde Rla está seleccionado del grupo que consiste en alquilo Ci-g, hidroxilalquilo Ci_8, cicloalquilo C3-8, arilo, heteroarilo y heterociclilo .
[0267] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde Rla está seleccionado del grupo que consiste en alquilo Ci_8, cicloalquilo C3-8, arilo, heteroarilo y heterociclilo.
[0268] La presente invención provee en otro grupo de formas de realización, un compuesto en donde el resto: está seleccionado del grupo que consiste en:
[0269] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto que tiene la estructura seleccionada del grupo que consiste en la fórmula Ila-c: Ha Ilb lie o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, en donde: E2a está seleccionado del grupo que consiste en alcoxi Ci_g, alquil Ci-8-cicloalquil C3_8-carbonilamino, alcoxi Ci-s-alquilen Ci- 8-carbonilamino, alcoxi Ci-8-carbonilamino y alquil Ci-e- carbonilamino ; R3 está seleccionado del grupo que consiste en H, halo, alquilo Ci-8 y alcoxi Ci-8; y R4 está seleccionado del grupo que consiste en H, alquilo Ci-g y alcoxi Ci-8-alquileno Ci-8.
[0270] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto que tiene la fórmula (lid): (Hd) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, en donde R3 es H o alquilo Ci-8.
[0271] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto que tiene formula:
[0272] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto que tiene la fórmula (lie): (He) en donde: D2 es un grupo arilo biciclico.
[0273] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde: D2 es naftilo, opcionalmente sustituido con 1 a 2 sustituyentes, E2b, seleccionados de modo independiente del grupo que consiste en halo, alcoxi Ci_8 y alquil Ci-8-aminocarbonilo .
[0274] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde D2 es
[0275] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde D2 es
[0276] La presente invención provee, en otra forma de realización, un compuesto en donde D2 está seleccionado del grupo que consiste en: y la linea ondulada indica el punto de unión con el resto de la molécula .
[0277] La presente invención provee en otra forma de realización, un compuesto que tiene la fórmula
[0278] En otra forma de realización, la presente invención provee un compuesto que tiene la estructura hallada en los Ejemplos .
[0279] En otra forma de realización, la presente invención provee un compuesto que tiene la estructura hallada en las Tablas .
[0280] Se da por entendido que en otro grupo de formas de realización, es también posible combinar cualquiera de las formas de realización antes descritas con otras formas de realización mencionadas en la presente, de manera de formar otras formas de realización de la invención. b. Métodos de síntesis
[0281] Los compuestos de la presente invención pueden prepararse mediante técnicas de síntesis orgánica conocidas, que incluyen los métodos descritos con mayor detalle en los Ejemplos. En términos generales, los compuestos de la estructura (I) arriba descrita pueden prepararse mediante la siguiente Figura 3, en la que todos los sustituyentes son como se definieron en lo que precede, a menos que se indique otra cosa.
[0282] Los compuestos que tiene la Fórmula I pueden prepararse de acuerdo con la Figura 3. Se convierte ácido carboxilico 1.1 en cloruro de ácido 1.2 mediante un procedimiento de un sólo paso con un agente de cloración, tal como cloruro de tionilo, y esterificación con un alcohol, tal como etanol, de manera de formar el compuesto 1.3 mediante el uso de compuestos similares a los que se describe en lo que sigue. Se diclora el éster 1.3 con un agente de cloración tal oxicloruro de fósforo. El desplazamiento selectivo del grupo 4-cloro de la 2,4-dicloropirimidina por una amina adecuada, tal como E1-D1-NH2 (disponible en el comercio o sintetizado mediante métodos conocidos por las personas con pericia en la especialidad) , bajo condiciones básicas, tales como con diisopropilamina (DIA), permite obtener los compuestos de la Fórmula 1.5. La hidrólisis subsiguiente del éster, desplazamiento del segundo grupo cloro con EDC y tratamiento con amoniaco, permite obtener el compuesto 1.7. También es posible preparar el compuesto éter de benzotriazolilo 1.7 mediante una ruta lineal. El desplazamiento del grupo éter de benzotriazolilo con una amina adecuada tal como Y1-NH2 (disponible en el comercio o sintetizado mediante métodos conocidos por las personas con pericia en la especialidad) , permite obtener el producto deseado 1, en el que E1-D1 y Y1 es como se definió en lo que precede.
[0283] Una persona con pericia en la especialidad reconocería que en determinadas formas de realización de la estructura (I) cuando E^D1 o Y1 comprende un heteroátomo terminal, puede ser ventajoso utilizar una estrategia de grupo protector. Es posible remover el grupo protector mediante métodos conocidos por las personas con pericia en la especialidad, de manera de obtener los compuestos de la estructura (1).
[0284] Los compuestos de la presente invención pueden por lo general utilizarse como la base libre. Como alternativa, los compuestos de esta invención pueden utilizarse en la forma de sales de adición de ácidos como se describe en lo que sigue. c . Inhibición de la syk quinasa
[0285] La actividad de un compuesto específico como un inhibidor de una syk quinasa puede ser evaluada in vitro o in vivo. En algunas formas de. realización, la actividad de un compuesto especificado puede ser evaluada en un ensayo celular. También podría evaluarse la selectividad en ensayos bioquímicos con quinasas aisladas.
[0286] Para evaluar la actividad inhibidora de la JAK quinasas, y para determinar el grado de selectividad del compuesto particular en comparación con la syk quinasa, pueden utilizarse tipos de ensayo similares. Una de las maneras para ensayar dicha inhibición es la detección del efecto de los compuestos de la presente invención sobre los productos genes de regulación ascendente o regulación descendente. En el ensayo Ramos/IL4, se estimulan células B con la citoquina Interleuquina-4 (IL-4) que conduce a la activación de la trayectoria de JAK/Stat por intermedio de la fosforilación de las quinasas de la familia JAK, JAK1 y JAK3, que a su vez fosforilan y activan el factor de transcripción Stat-6. Uno de los genes regulados ascendentemente por el Stat-6 activado es el receptor de IgE de baja actividad, CD23. Para estudiar el efecto de los inhibidores (por ejemplo, los compuestos pirimidindiamina 2 , 4-sustituidos descritos en la presente) sobre las JAK1 y JAK3 quinasas, se estimulan células B de Ramos con IL-4. A los 10' después de la estimulación, se someten las células a citometria de flujo intracelular para medir la amplitud de la fosforilación del STAT-6. A las 20 a 24 horas después de la estimulación, se tiñen las células para la regulación ascendente de CD23 y se las analiza mediante citometria de flujo. Una reducción de la cantidad de STAT-6 fosforilado y/o de CD23 de superficie de célula presente, comparado con las condiciones de control, indica que el compuesto de ensayo inhibe activamente la trayectoria de la JAK quinasa.
[0287] Adicionalmente, la estimulación por IL-6 de las células B de Ramos induce JAKs 1, 2, y Tyk2, lo que conduce a fosforilación de Stat-3 y Erk. A los 10' después de la estimulación, se someten las células a citometria de flujo intercelular a efectos de medir la capacidad del compuesto para inhibir estos acontecimientos de fosforilación. Para medir específicamente la actividad del JAK2, se utilizará la cepa de células Cellsensor irfl-bla HEL que expresa el gen informante de beta-lactamasa controlado por Stat5 (Invitrogen, Carlsbad, CA) . Estas células expresan un mutante JAK2 constitutivamente activo ( JAK2V617F) , hallado naturalmente en los neoplasmas mieloproliferativos (Constantinescu, S., et al., Trends Biochem. Sci., 2008; 33:122-31). Como medida de la actividad inhibidora de los compuestos sobre JAK2 se utiliza una reducción en la cantidad de expresión del gen informante de beta-lactamasa.
[0288] Adicionalmente, la actividad de los compuestos de la invención puede caracterizarse ensayando el efecto de los compuestos de la presente invención descritos en la presente sobre células epiteliales de pulmón A549 y células U937. Las células epiteliales de pulmón A549 y las células U937 regulan ascendentemente la expresión de superficie de ICAM-1 (CD54) en respuesta a una variedad de diferentes estímulos. Por ello, y utilizándose la expresión de ICAM-1 como lectura¦ de salida, es posible evaluar los efectos de los compuestos de ensayo sobre diferentes trayectorias de señalización en el mismo tipo de células. La estimulación con IL-?ß por intermedio del receptor de IL-?.ß activa la trayectoria de TRAF6/NFDB, siendo el resultado una regulación ascendente de ICAM-1. El IFN. gamma induce la regulación ascendente de ICAM-1 por intermedio de la activación de la trayectoria de JAK1/JAK2. La regulación ascendente de ICAM-1 puede cuantificarse mediante citometria de flujo a través de una curva de compuesto dosis, y se calculan los valores del ECso-
[0289] La actividad de los compuestos de la invención puede adicionalmente caracterizarse ensayando el efecto de los compuestos de la presente invención descritos en la presente sobre células epiteliales de pulmón A549 y células U937. Las células epiteliales de pulmón A549 y las células U937 regulan ascendentemente la expresión de superficie de ICAM-1 (CD54) en respuesta a una variedad de diferentes estímulos. Por ello, mediante el uso de la expresión de ICAM-1 como salida de lectura, es posible evaluar los efectos de los compuestos de ensayo sobre diferentes trayectorias de señalización en el mismo tipo de células. La estimulación con IL-?ß a través del receptor de IL-?.ß activa la trayectoria de TRAF6/NFDB, resultando la regulación ascendente de ICAM-1. El IFN. gamma induce la regulación ascendente de ICAM-1 por intermedio de la activación de la trayectoria de JAK1/JAK2. La regulación ascendente del ICAM-1 puede ser cuantificada mediante citometria de flujo a través de una curva de compuesto dosis, y se calculan los valores de EC50. En los ejemplos se describen con mayor detalle ejemplos de este tipo dados a título de ejemplo.
[0290] En términos generales, los compuestos activos descritos en la presente inhiben la trayectoria de la JAK quinasa con un IC50 en el intervalo de aproximadamente 1 mM o menos, medido en los ensayos descritos en la presente. Por supuesto, las personas con pericia comprenderán que los compuestos que exhiben IC50S menores (por ejemplo del orden de 100 µ?, 75 µ?, 50 µ?, 40 µ?, 30 µ?, 20 .µ?, 15 µ?, 10 µ , 5 µ?, 1 µ?, 500 ??, 100 ??, 10 ??, 1 ??, o aún inferior) pueden ser particularmente útiles en aplicaciones terapéuticas. En aquellos casos en que se desee una actividad especifica con respecto a un tipo de célula en particular, es posible ensayar el compuesto a efectos de establecer su actividad con el tipo de célula deseada, y efectuar un ensayo opuesto para establecer una falta de actividad contra otros tipos de células. El grado de "inactividad" deseado en tales ensayos o complementarios, o la relación deseada entre actividad e inactividad, puede variar para diferentes situaciones, y puede ser seleccionado por el usuario.
[0291] Típicamente, los compuestos activos también inhiben la expresión de CD23 estimulado por IL-4 en células B-células con un IC50 en el intervalo de aproximadamente 20 µ o menos, típicamente en el intervalo de aproximadamente 10 µ?, 1 µ?, 500 nM, 100 nM, 10 nM, 1 nM, o aún inferior. Un ensayo adecuado que puede utilizarse es el ensayo descrito en los Ejemplos, "Assay for Ramos B-cell Line Stimulated with IL-4. " En determinadas formas de realización, los compuestos activos de la presente invención tienen un IC50 de menos de o igual a 5 µ?, mayor de 5 µ? pero inferior a 20 µ , mayor de 20 µ?, o mayor de 20 µ? pero inferior a 50 µ en el ensayo descrito en los Ejemplos.
[0292] Típicamente, los compuestos activos también inhiben la expresión de ICAM1 (CD54) inducida por la exposición a IFN. gamma en células U937 . o A549 con un IC50 en el intervalo de aproximadamente 20 µ? o menos, típicamente en el intervalo de aproximadamente 10 µ?, 1 µ?, 500 nM, 100 nM, 10 nM, 1 nM, o aún inferior. El IC50 contra la expresión de ICAM (CD54) en células estimuladas con IFN. gamma puede determinarse en un ensayo celular funcional con una cepa de células A549 o U937 aislada. Los ensayos adecuados que pueden utilizarse abarcan los ensayos descritos en los Ejemplos, "A549 Epithelial Line Stimulated with IFNy" y "U937 IFN. gamma. ICAM1 FACS Assay, " respectivamente. En determinadas formas de realización, los compuestos activos de la presente invención tienen un IC50 de menos de o igual a 20 µ?, mayor que 20 µ?, o mayor que 20 µ? pero menos de 50 µ en los ensayos descritos en los Ejemplos. d. Composiciones y métodos de administración
[0293] Por otra parte, la presente invención provee composiciones que comprenden uno o más compuestos de la Fórmula (I) o una sal, éster o prodroga, farmacéuticamente aceptables, y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptables. Se comprenderá que en esta invención los compuestos de la Fórmula (I) pueden ser derivados en grupos funcionales de manera de proveer derivados prodroga que tienen la capacidad de convertirse in vivo de regreso en los compuestos progenitores. Los ejemplos de tales prodrogas incluyen los derivados éster fisiológicamente aceptables y metabólicamente lábiles tales como los ésteres de metoximetilo, los ésteres de metiltiometilo, o los ésteres de pivalaoiloximetilo derivados de un grupo hidroxilo del compuesto o una parte carbamoilo derivada de un grupo ammo del compuesto. Adicionalmente, cualesquiera equivalentes farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la Fórmula (I), similares a ésteres o carbamatos metabólicamente lábiles, que tienen la capacidad de producir los compuestos progenitores de la Fórmula (I) in vivo, se hallan dentro de los alcances de esta invención.
[0294] Tal como se la utiliza en la presente, la expresión "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a cualquier sal por adición de base o de ácido cuyos contraiones no son tóxicos para el paciente en las dosis farmacéuticas de las sal. En el campo farmacéutico hay una cantidad de sales farmacéuticamente aceptables bien conocidas. Si en estas composiciones se utilizan sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de esta invención, es preferible que dichas sales sean derivadas de ácidos y bases inorgánicos u orgánicos. Entre dichas sales de ácido se hallan los siguientes: acetato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, bencén sulfonato, bisulfato, butirato, citrato, alcanforato, alcanfor sulfonato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanosulfonato, fumarato, lucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, cloruro, bromhidruro, iodhidruro, 2-hidroxietanosulfonato, lactato, maleato, metanosulfonato, 2-naftalenesulfonato, nicotinato, oxalato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenil-propionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartrato, tiocianato, tosilato, undecanoato, hidrohaluros (por ejemplo, hidrocloruros e hidrobromuros ) , sulfatos, fosfatos, nitratos, sulfamatos, malonatos, salicilatos, metilen-bis-b-hidroxinaftoatos, gentisatos, isetionatos, di-p-toluaoiltartratos , etansulfonatos , ciclohexilsulfamatos , quinatos, y similares. Las sales por adición de bases, farmacéuticamente aceptables, incluyen sin limitación, aquellas derivadas de bases de metales alcalinos o alcalino férreos o de bases orgánicas convencionales, tales como trietilamina, piridina, piperidina, morfolina, N-metilmorfolina, sales de amonio, sales de metales alcalinos tales como sales de sodio y de potasio, sales de metales alcalino férreos tales como sales de calcio y de magnesio, sales de bases orgánicas tales como sales diciclohexilamina , N-metil-D-glucamina, y sales de aminoácidos tales como arginina, lisina, etc.
[0295] Por otra parte, los grupos que contienen nitrógeno básicos pueden estar cuaternizados con agentes como haluros de alquilo inferior tales como cloruros, bromuros e yoduros de metilo, etilo, propilo y butilo; dialquil sulfatos tales como sulfatos de metilo, dietilo, dibutilo y diamilo; haluros de cadena larga tales como cloruros, bromuros e yoduros de decilo, laurilo, miristilo y estearilo; haluros de aralquilo tales como bromuros de bencilo y de fenetilo, y otros. De esta manera se obtienen productos que son solubles o dispersibles en agua o aceite .
[0296] Los compuestos utilizados en las composiciones y métodos de esta invención también pueden modificarse mediante el agregado de funcionalidades agregadas para reforzar propiedades biológicas selectivas. Tales modificaciones son conocidas en la especialidad e incluyen aquellas que acentúan propiedades biológicas en un sistema biológico dado (por ejemplo, sangre, sistema linfático, sistema nervioso central, etc.), incrementan la disponibilidad oral, aumentan la solubilidad de manera de permitir la administración por inyección, alteran el metabolismo y alteran la velocidad de la excreción.
[0297] Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden producirse mediante métodos bien conocidos en la especialidad tales como los procesos convencionales de de granulación, mezclado, disolución, encapsulado, liofilización o emulsión, entre otros. Es posible producir las composiciones de diversas formas, que incluyen gránulos, precipitados, o en forma de partículas, polvos que incluyen los polvos secados por congelación, secados por rotación o secados por rociado, polvos amorfos, tabletas, cápsulas, jarabes, supositorios, inyecciones, emulsiones, elixires, suspensiones o soluciones. Las formulaciones pueden opcionalmente contener estabilizantes, modificadores del pH, surfactantes , modificadores de la biodisponibilidad, y combinaciones de los mismos.
[0298] La expresión "forma de dosis unitaria" se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de drogas calculada para producir la iniciación, tolerabilidad y/o efectos terapéuticos, deseados, en asociación con un excipiente farmacéutico adecuado (por ejemplo, una ampolla) . Además, es posible preparar composiciones más concentradas de las cuales es seguidamente producir composiciones más diluidas para dosis unitarias. Por lo tanto, las composiciones más concentradas contendrán sustancialmente más de, por ejemplo, al menos 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, o más veces la cantidad de uno o más inhibidores del syk.
[0299] Los métodos para preparar tales formas de dosis son conocidos por las personas con pericia en especialidad (ver, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. , Mack Publishing Co., Easton, PA (1990)). Además, es posible preparar sales farmacéuticamente aceptables de los inhibidores del syk de la presente invención (por ejemplo, sales por adición de ácido) , e incluírselas en las composiciones, mediante la utilización de procedimientos estándar conocidos por la persona con pericia en la especialidad de la química orgánica sintética, y se los describe, por ejemplo en: J. March, Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure, 4th Ed. (New York: Wiley-Interscience, 1992).
[0300] Típicamente las composiciones incluyen un vehículo o excipiente farmacéutico convencional, y pueden adicionalmente incluir otros agentes médicos, vehículos, adyuvantes, diluyentes, reforzadores de la permeación en los tejidos, solubilizantes , y similares. Es preferible que la composición contenga de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 90%, preferentemente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 75%, más preferentemente de aproximadamente 0,1% a 50%, más preferentemente aún de aproximadamente 0, 1% a 10% en peso de uno o más inhibidores de syk, consistiendo el resto en vehículo y/o excipientes farmacéuticos adecuados. Los excipientes adecuados pueden adoptarse a medida para la composición y vía de administración mediante métodos bien conocidos en la especialidad, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, supra.
[0301] Los vehículos farmacéuticamente aceptables que pueden utilizarse en estas composiciones incluyen los intercambiadores de iones, alúmina, estearato de aluminio, lecitina, proteínas de suero tales como albúmina de suero humano, sustancias tampón tales como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbatos de potasio, mezclas de glicérido parciales de ácidos grasos vegetales saturados, agua, sales o electrolitos tales como sulfato de protamina, hidrógenofosfato disódico, hidrógenofosfato de potasio, cloruro de sodio, sales de zinc, sílice coloidal, trisilicato.de magnesio, polivinil pirolidona, sustancias basadas en celulosa, polietilenglicol , carboximetilcelulosa de sodio, poliacrilatos , ceras, polímeros de bloque de polietileno-polioxipropileno, polietilenglicol y grasa de lanolina.
[0302] Los ejemplos de excipientes adecuados incluyen a título no limitativo: lactosa, dextrosa, sucrosa, sorbitol, manitol, almidones, goma de acacia, fosfato de calcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de calcio, celulosa microcristalina , polivinilpirrolidona , celulosa, agua, jarabe, metilcelulosa, etilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, y ácidos poliacrílicos tales como Carbopols. Las composiciones pueden adicionalmente incluir agentes de lubricación tales como talco, estearato de magnesio, y aceite mineral; agentes humectantes; agentes de emulsión; agentes de suspensión; agentes de conservación tales como metil-, etil-, y propil-hidroxi-benzoatos; agentes para ajustar el pH tales como ácidos y bases inorgánicos y orgánicos, agentes de endul zamiento ; y agentes saborizantes .
[0303] La administración de una composición que comprende uno o más inhibidores de syk con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables ventajosos puede llevarse a cabo por intermedio de cualquiera de los modos de administración aceptados. Por lo tanto, la administración puede ser por ejemplo, oral, tópica, intravenosa, subcutánea, transcutánea, transdérmica, intramuscular, intra-articulación, parenteral, intra-arteriola, intradérmica, intraventricular, intracraneana, intraperitoneal , intralesional , intranasal, rectal, vaginal, mediante inhalación o por intermedio de un reservorio implantado. La expresión "parenteral", tal como se utiliza en la presente, incluye las técnicas de inyección o infusión subcutánea, intravenosa, intramuscular, intra-articular , intra-sinovial , intrasternal , intratecal, intrahepático, intralesional e intracraneal. Es preferible que las composiciones se administren oralmente o por vía intravenosa. Las formulaciones de la invención pueden estar diseñadas para una acción breve, liberación rápida, o acción prolongada. Además, es posible administrar los compuestos de una manera local en lugar de sistémicamente , tal como la administración (por ejemplo, inyección) en forma de una formulación de liberación prolongada. De acuerdo con una forma de realización representativa, las composiciones de esta invención están formuladas para la administración farmacéutica a un mamífero, preferentemente un ser humano .
[0304] Las composiciones de la presente invención que contienen uno o más inhibidores de syk pueden administrarse de manera repetida, por ejemplo, al menos 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, o más veces, o la composición puede administrarse mediante infusión continua. Los sitios adecuados para la administración incluyen, pero no se limitan a, piel, bronquios, tracto gastrointestinal, ano, vagina, ojo y oído. Las formulaciones pueden tomar la forma de un sólido, semisólido, polvo liofilizado, o formas de dosis líquidas tales como, por ejemplo, tabletas, pildoras, cápsulas, polvos, soluciones, suspensiones, emulsiones, supositorios, enemas de retención, cremas, ungüentos, lociones, geles, aerosoles, o similares, preferentemente en formas de dosis unitarias adecuadas para la administración simple de dosis precisas .
[0305] Las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden estar en cualquier forma de dosis oralmente aceptable, lo que incluye tabletas, cápsulas, comprimidos, emulsiones, suspensiones, soluciones, jarabes, elixires, sprays, pildoras grandes, tabletas, polvos, gránulos, y formulaciones de liberación prolongada. Los excipientes adecuados para la administración oral incluyen tipos farmacéuticos de manitol, lactosa, almidón, estearato de magnesio, sodio sacarina, talco, celulosa, glucosa, gelatina, sucrosa, carbonato de magnesio, y similares. En el caso de tabletas para uso oral, los vehículos que se utilizan habitualmente incluyen lactosa y almidón de maíz. Típicamente también se añaden agentes de liberación tales como estearato de magnesio. Para una forma de cápsula, los diluyentes útiles incluyen lactosa y almidón de maíz seco. Si para uso oral se requieren suspensiones acuosas, se mezcla el ingrediente activo con agentes de emulsión y de suspensión. Si se desea, también es posible añadir determinados agentes endulzantes, saborizantes o colorantes.
[0306] En algunas formas de realización, las composiciones toman la forma de una pildora, tableta, o capsula, y por lo tanto, la composición puede contener, junto con uno o más inhibidores del syk, un diluente tal como lactosa, sucrosa, fosfato dicálcico, fosfato de calcio, y similares; un desintegrante tal como almidón o derivados del mismo; un lubricante tal como estearato de magnesio y similares; y/o un ligante tal como un almidón, goma de acacia, polivinilpirrolidona, gelatina, celulosa y derivados de los mismos. Es posible preparar una tableta mediante cualquiera de los procesos de compresión o moldeo conocidos por las personas con pericia en la especialidad. Es posible preparar tabletas comprimiendo en una máquina adecuada los inhibidores de syk en una forma de libre escurrimiento, por ejemplo, un polvo o gránulos, opcionalmente mezclados con ingredientes accesorios, por ejemplo, ligantes, lubricantes, diluyentes, desintegrantes o agentes de dispersión. Las tabletas moldeadas pueden prepararse moldeando en una máquina adecuada una mezcla de los inhibidores de syk en polvo con cualquier vehículo adecuado.
[0307] Como alternativa, las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden estar en la forma de supositorios para la administración rectal. Los mismos pueden prepararse mezclando el agente con un excipiente adecuado no irritante que es sólido a la temperatura ambiente pero líquido a temperatura rectal y que por ello se derretirá en el recto de manera de liberar la droga. Tales materiales incluyen manteca de cacao, cera de abejas, PEG (polietilenglicol) , grasa dura, y/o cocoglicérido hidrogenado. Las composiciones adecuadas para la administración rectal también pueden comprender un enema rectal unitaria que contiene uno o más inhibidores de syk y vehículos farmacéuticamente aceptables (por ejemplo, etanol acuoso al 50% o una solución acuosa de sal) que sea fisiológicamente compatible con el recto y/o colon. El enema rectal unitario contiene una punta aplicadora protegida por una tapa inerte, preferentemente hecha de polietileno, lubricada con un lubricante tal como petrolato blanco, y preferentemente protegido por una válvula de una sola vía para impedir el flujo inverso de la fórmula dispensada. El enema rectal unitario también tiene una longitud suficiente, preferentemente de aproximadamente dos pulgadas, para su inserción en el colon a través del ano.
[0308] Las composiciones liquidas pueden prepararse disolviendo o dispersando uno o más inhibidores de syk y opcionalmente uno o más adyuvantes farmacéuticamente aceptables en un vehículo tales como, por ejemplo, solución salina acuosa, dextrosa acuosa, glicerol, etanol, y similares, de manera de formar una solución o suspensión, por ejemplo, para la administración oral, topical, o intravenosa. Las formulaciones farmacéuticas pueden prepararse como suspensiones o soluciones mediante el uso de un líquido estéril, tal como aceite, agua, alcohol, y combinaciones de los mismos. Para la administración oral o parenteral pueden añadirse surfactantes , agentes de suspensión o agentes de emulsión, farmacéuticamente aceptables. Las suspensiones pueden incluir aceites, tales como aceite de maní, aceite de sésamo, aceite de semilla de algodón, aceite de maíz y aceite de oliva. La preparación de la suspensión también puede contener esteres de ácidos grasos, tales como oleato de etilo, miristato de isopropilo, glicéridos de ácidos grasos y glicéridos de ácidos grasos acetilados. Las formulaciones de las suspensiones pueden incluir alcoholes, tales como etanol, alcohol isopropílico, alcohol hexadecílico, glicerol y propilenglicol . En las formulaciones de suspensión también pueden utilizarse éteres, tales como poli (etilenglicol) , hidrocarburos de petróleo tales como aceite mineral y petrolato, y agua.
[0309] Las composiciones farmacéuticas de esta invención también pueden estar en una forma tópica, especialmente cuando el objetivo del tratamiento incluye áreas o órganos fácilmente accesibles mediante administración tópica, lo que incluye las enfermedades de los ojos, piel, o del trato intestinal inferior. Para cada una de estas áreas u órganos se preparan fácilmente formulaciones tópicas adecuadas. Para la administración tópica, la composición que contienen uno o más inhibidores de syk puede estar en la forma de emulsiones, lociones, geles, espumas, cremas, gelatinas, soluciones, suspensiones, ungüentos, y parches transdérmicos .
[0310] La aplicación tópica para el tracto intestinal inferior puede realizarse en una formulación de supositorio rectal. (Véase en lo que precede) o en una formulación adecuada para enema. También pueden utilizarse parches tópicamente transdérmicos. Para las aplicaciones tópicas, las composiciones farmacéuticas pueden formularse en un ungüento adecuado que contiene el componente activo suspendido o disuelto en uno o más vehículos. Los vehículos para la administración tópica de los compuestos de esta invención incluyen a título no limitativo: aceite mineral, petrolato líquido, petrolato blanco, propilenglicol , polioxietileno, compuesto de polioxipropileno, cera emulsionante y agua. Como alternativa, las composiciones farmacéuticas pueden formularse en forma de una loción o crema adecuadas que contienen los componentes activos suspendidos o disueltos en uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables. Los vehículos adecuados incluyen aceite mineral, monoestearato de sorbitano, polisorbato 60, cetil ásteres, cera, alcohol cetílico, 2-octildodecanol, alcohol bencílico y agua.
[0311] Las composiciones farmacéuticas de esta invención también pueden ser administradas mediante aerosol o inhalación nasal. Para la entrega por inhalación, las composiciones pueden ser entregadas en forma de un polvo seco o en forma líquida mediante un nebulizador. Tales composiciones se preparan mediante técnicas conocidas en la especialidad de las formulaciones farmacéuticas y pueden prepararse como soluciones en solución salina, para lo cual se emplea alcohol bencílico u otros agentes de conservación, promotores de adsorción adecuados, para reforzar la biodisponibilidad, fluorocarbonos y/o otros agentes de solubilización o de dispersión adecuados.
[0312] Para uso oftálmico, las composiciones farmacéuticas pueden formularse en forma de suspensiones micronizadas en solución salina estéril isotónica de pH ajustado, o, lo que es preferible, como soluciones en solución salina estéril isotónica de pH ajustado, sea con sea sin un agente de conservación, tal como cloruro de benzalconio. Como alternativa, para usos oftálmicos, las composiciones farmacéuticas pueden formularse en forma de un ungüento tal como ungüento.
[0313] Para la administración parenteral, las composiciones pueden estar en la forma de soluciones inyectables estériles y de polvos envasados estériles. Es preferible que las soluciones inyectables se formulen con un pH de aproximadamente 4,5 a aproximadamente 7,5.
[0314] Las formas inyectables estériles de las composiciones de esta invención pueden ser una suspensión acuosa u oleaginosa. Estas suspensiones pueden formularse de acuerdo con técnicas conocidas en la especialidad mediante el uso de adecuados agentes de dispersión o de humectación y de suspensión. Las preparaciones inyectables estériles también pueden ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o solvente no toxico parenteralmente aceptable, por ejemplo en forma de una solución en 1 , 3-butanodiol . Entre los vehículos y solventes aceptables que pueden emplearse se indican agua, solución de Ringer y soluciones isotónicas de cloruro de sodio. Además, como solvente y medio de suspensión se emplean convencionalmente aceites fijos. Para esta finalidad puede emplearse cualquier aceite fijo blanco que incluya mono- o di-glicéridos sintéticos. Los ácidos grasos tales como el ácido oleico y sus derivados glicéridos, son útiles en la preparación de inyectables, y también lo son los aceites naturales farmacéuticamente aceptables tales como el aceite de oliva o el aceite de castor, en sus versiones polioxietilados . Estas soluciones o suspensiones de aceite también pueden contener un diluente o dispersante de alcoholes de cadena larga tal como un agente de dispersión carboximetilcelulosa o similar que son de uso común en la formulación de formas de dosis farmacéuticamente aceptables, que incluyen emulsiones y suspensiones. Para los fines de la formación pueden utilizarse también otros surfactantes de uso común tales como Tweens, Spans y otros agentes emulsionantes o reforzadores de la biodisponibilidad que son de uso común en la preparación de formas de dosis sólidas, liquidas u otras, farmacéuticamente aceptables. Es posible formular los compuestos para su administración parenteral mediante inyección, tal como mediante inyección de bolo o infusión continua. Una forma de dosis unitaria puede estar en forma de ampollas o de contenedores de múltiples dosis.
[0315] Las composiciones de la presente invención también pueden proveerse en una forma liofilizada. Tales composiciones pueden incluir un tampón, por ejemplo, bicarbonato, para la reconstitución antes de la administración, o el tampón puede estar incluido en la composición liofilizada para la reconstitución con, por ejemplo, agua. Por otra parte, la composición liofilizada puede comprender un vasoconstrictor adecuado, por ejemplo, epinefrina. La composición liofilizada puede proveerse en una jeringa, opcionalmente envasada en combinación con el tampón para la reconstitución, de manera tal que la composición reconstituida pueda administrarse inmediatamente a un paciente.
[0316] Cualesquiera de las formas de dosis que contienen cantidades efectivas se hallan dentro de los limites de experimentación rutinaria y dentro de los alcances de la invención. Una dosis terapéuticamente efectiva puede variar en función de la vía de administración y de la forma de la dosis. El o los compuestos representativos de la invención son una formulación que presenta un elevado Índice terapéutico. El índice terapéutico es la relación entre las dosis de efecto toxico y la dosis de efecto terapéutico, y puede expresarse como la relación entre LD50 y ED50. El LD50 es la dosis que es letal para el 50% de la población, y el ED50 es la dosis terapéuticamente efectiva en el 50% de la población. El LD50 y el ED50 se determinan mediante procedimientos farmacéuticos estándar en cultivos de células animales o en animales experimentales.
[0317] Además de las formas de dosificación representativas descritas en lo que precede, los excipientes, portadores y las formas de dosificación farmacéuticamente aceptables son generalmente conocidos de las personas con pericia en la especialidad y se hallan incluidos en la invención. Debe entenderse que una dosificáción específica y un régimen de tratamiento para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de factores, que incluyen la actividad del compuesto especifico empleado, la edad, peso corporal, salud general, sexo y dieta del paciente, y del momento de la administración, velocidad de la excreción, combinación de drogas, criterio del médico a cargo y gravedad de la enfermedad particular que se está tratando. La cantidad del uno o más ingredientes activos también dependerá del compuesto particular y de otro agente terapéutico, caso de haberlo, presente en la composición. e. Métodos de uso
[0318] La invención provee métodos para inhibir o disminuir la actividad del syk asi como también para tratar o mejorar un estado, síntoma, condición, trastorno o enfermedad asociado con syk, en un paciente que lo necesite (por ejemplo, humano o no humano) . En una forma de realización, el estado, síntoma, condición, trastorno o enfermedad asociado con syk, es mediado, al menos parcialmente, por la actividad de la syk quinasa. En formas de realización más específicas, la presente invención provee un método para tratar una condición o trastorno mediados al menos parcialmente por la actividad de la syk quinasas en una enfermedad cardiovascular, enfermedad inflamatoria o enfermedad autoinmune .
[0319] En una forma de realización, la invención provee métodos para prevenir o tratar una condición en un mamífero, caracterizado por trombosis indeseada, que comprende el paso de administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto la presente invención. Tales condiciones incluyen a título no limitativo: reestenosis, síndrome coronario agudo, infarto de miocardio, angina inestable, angina refractaria, trombosis coronaria oclusiva que se presenta después de terapia trombolítica o después de angioplastia coronaria, un síndrome cerebrovascular trombóticamente mediado, apoplejía embólica, apoplejía trombótica, ataques isquémicos transitorios, trombosis venosa, trombosis de venas profundas, embolismo pulmonar, coagulopatía, coagulación intravascular diseminada, púrpura trombocitopénica trombótica, thromboangiitis obliterans, enfermedad trombótica asociada con trombocitopenia inducida por heparina, complicaciones trombóticas asociadas con la circulación extracorpórea, complicaciones trombóticas asociadas con la instrumentación tales como la cateterización cardíaca u otra cateterización intravascular, bomba de globo intra-aórtico, stent coronario o válvula cardiaca, condiciones que requieren la colocación de dispositivos de prótesis, y similares.
[0320] En otra forma de realización, la presente invención provee un método para tratar la trombosis, púrpura inmuno trombocítica, la trombocitopenia inducida por heparina, la cardiomiopatía dilatada, la enfermedad de las células falciformes, la aterosclerosis, infarto de miocardio, inflamación vascular, angina inestable o síndromes coronarios agudos.
[0321] En otra forma de realización, la presente invención también provee un método para tratar la alergia, asma, artritis reumatoide, enfermedad mediada por las células B tales como el linfoma que no sea de Hodgkin, síndrome antifosfolípido, lupus, psoriasis, esclerosis múltiple, enfermedad renal en etapa final, leucemia linfocítica crónica.
[0322] En otra forma de realización, la presente invención provee un método para tratar la anemia hemolítica o la púrpura inmune trombocitopénica .
[0323] Los compuestos descritos en la presente son también inhibidores potentes y/o selectivos de las JAK quinasas. Como consecuencia de esta actividad, los compuestos pueden utilizarse en una variedad de contextos vitro, in vivo, y ex vivo para regular o inhibir la actividad de las JAK quinasas, de cascadas de señalización en las que las JAK quinasas desempeñan un papel, y las respuestas biológicas llevadas a cabo por tales cascadas de señalización. Por ejemplo, en una forma de realización, los compuestos pueden utilizarse para inhibir la JAK quínasa, sea in vitro sea in vivo, en virtualmente cualquier tipo de células que exprese la JAK quinasas, tales como en células hematopoyéticas en las que, por ejemplo, se expresa predominantemente el JAK3. También pueden utilizarse para regular la transducción de la cascada de señales en las que las JAK quinasas, particularmente el JAK3, desempeña un rol. Tal transducción JAK-dependiente de cascadas de señales incluye pero no se limitan a, las cascadas de señalización de los receptores de citoquina que implican la cadena gamma común tales como por ejemplo las cascadas de señalización de los IL-4, IL-7, IL-5, IL-9, IL-15 y IL-21, o IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15, y IL-21. Los compuestos también pueden utilizarse in vitro o in vivo para regular, y en particular para inhibir, las respuestas celulares o biológicas afectadas por tal transducción, JAK-dependiente, de cascadas de señales. Tales respuestas celulares o biológicas incluyen, pero no se limitan a, la regulación ascendente de IL-4/Ramos CD23 y la proliferación de células T mediada por IL-2. Es importante comprobar que pueden utilizarse los compuestos para inhibir las JAK quinasas in vivo como un enfoque terapéutico para el tratamiento o prevención de enfermedades mediadas, totalmente o en parte, por una actividad de JAK quinasa (que en lo que sigue lleva la denominación de "enfermedades mediadas por JAK quinasa"). Los ejemplos, no limitantes de enfermedades mediadas por JAK quinasa que pueden ser tratadas o prevenidas con los compuestos incluyen a titulo no limitativo los siguientes: alergias, asmas, enfermedades autoinmunes tales como rechazo de transplantes (por ejemplo, de riñon, corazón, pulmón, hígado, páncreas, piel, intestino delgado, intestino grueso, reacción entre huésped e injerto (HVGR, host versus graft reaction) , y reacción entre injerto y huésped (GVHR, graft versus host reaction) , artritis reumatoide, y esclerosis lateral amiotrófica , enfermedades autoinmunes mediadas por las células T tales como esclerosis múltiple, psoriasis, y el síndrome de Sjógren; las enfermedades inflamatorias de Tipo II tales como la inflamación vascular (que abarca vasculitis, la arteritis, la aterosclerosis , y la enfermedad de las arterias coronarias) ; las enfermedades del sistema nervioso central tales como la apoplejía; las enfermedades pulmonares tales como la bronchitis obliterans y la hipertensión pulmonar primaria; las reacciones sólidas de hipersensibilidad de Tipo I; y las enfermedades malignas hematológicas tales como la leucemia y los linfornas.
[0324] Los ejemplos de enfermedades que son mediadas, por lo menos en parte, por la JAK quinasa y que pueden ser tratadas o prevenidas de acuerdo con los métodos incluyen a título no limitativo: las alergias, asma, las enfermedades autoinmunes tales como el rechazo a los trasplantes (por ejemplo, riñon, corazón, pulmón, hígado, páncreas, piel, reacción de rechazo de anfitrión versus injerto (HVGR) , etc.), la artritis reumatoide, y la esclerosis lateral amiotróficas, la psoriasis y el síndrome de Sjogren, las enfermedades inflamatoria de Tipo II tales como la información vascular (lo que incluye vasculitis, ateritis, aterosclerosis y la enfermedad de las arterias coronarias) u otras enfermedades inflamatorias tales como la osteoartritis , la enfermedad de los intestinos inflamatorios, la colitis ulcerante, la enfermedad de Crohn, la enfermedad idiopática de los intestinos inflamatorios, el colon espástico, la formación de cicatrices de bajo grado (por ejemplo, esclerodermia, fibrosis incrementada, queloides, cicatrices post-quirúrgicas, fibrosis pulmonar, espasmos vasculares, migraña, lesión de reperfusión e infarto post miocardio), y el complejo o síndrome de sicca, las enfermedades del sistema nervioso central tal como la apoplejía, las enfermedades pulmonares tales como bronchitis obliterous e hipertensión pulmonar primaria, tensión, hipersensibilidad de Tipo IV retardada o mediada por células, y las enfermedades sólidas hematologicas tales como leucemias y linfornas.
[0325] En otra forma de realización, esta invención provee un método para inhibir una actividad de una JAK quinasa, que comprende poner en contacto la JAK quinasa con una cantidad de un compuesto efectivo para inhibir una cantidad de' la JAK quinasa, en el cual método el compuesto ha sido seleccionado entre los compuestos de esta invención. En determinadas formas de realización de los métodos descritos en la presente, el método se lleva a cabo in vivo.
[0326] En otra forma de realización, esta invención provee un método para inhibir una actividad de una JAK quinasa, que comprende poner en contacto in vitro una JAK3 quinasa con una cantidad de un compuesto efectivo para inhibir una actividad de la JAK quinasa, en donde el compuesto ha sido seleccionado entre los compuestos de esta invención.
[0327] En una forma de realización especifica, los compuestos pueden utilizarse para tratar y/o prevenir el rechazo de los receptores de transplantes de órganos y/o tejidos (es decir, para tratar y/o prevenir el rechazo de aloinj ertos ) . Los aloinjertos pueden ser rechazados por intermedio de una inmunoreacción mediada por las células o humoral, del receptor contra los antigenos de transplante (histocompabilidad) presente sobre las membranas de las células del donante. Los antigenos más potentes son gobernados por un complejo de lugares genéticos que lleva la denominación de antigenos HLA (human leukocyte group A, leucocitos humanos del grupo A) . Junto con los antigenos de los grupos sanguíneos ABO, son los principales antígenos de trasplante detectables en humanos.
[0328] Por lo general, el rechazo después un trasplante puede descomponerse en tres categorías: hiper agudo, que tiene lugar horas o días después de trasplante, agudo, que tiene lugar después de días o meses después de trasplante, y crónico, que tiene lugar meses o años después del trasplante.
[0329] El rechazo hiperagudo es causado principalmente por la producción de anticuerpos del huésped que atacan el tejido del injerto. En una reacción de rechazo hiperagudo, los anticuerpos se observan en el sistema vascular del trasplante muy poco después del trasplante. Poco después tiene lugar la coagulación vascular lo que conduce a la isquemia, necrosis final y muerte. El infarto de injerto no responde a las terapias inmunosupresoras conocidas. Dado que los antigenos HLA pueden identificarse in vitro, se utiliza la selección pre-transplante para reducir de manera significativa el rechazo hiperagudo. Como consecuencia de esta selección, en la actualidad el rechazo hiperagudo es relativamente poco frecuente.
[0330] Se considera que el rechazo agudo es mediado por la acumulación de células especificas antigenas en el tejido del injerto. Las inmunorreacción mediada por las células T contra estos antigenos (es decir, HVGR o GVHR) es el principal mecanismo del rechazo agudo. La acumulación de estas células conduce a un daño en el tejido del injerto. Se cree que tanto las células T CD4+ helper como las células T CD8+ citotóxico intervienen en este proceso y que el antigeno representado por las células dendriticas del donante y del huésped. Las células T CD4+ helper ayudan a reclutar otras células efectoras, tales como macrófagos y eosinófilos, para el injerto. También intervienen las cascadas de señales de transducción de activación de células T (por ejemplo, las cascadas de CD28, CD40L, y CD2) .
[0331] En muchos casos es posible revertir el rechazo agudo mediado por células mediante la intensificación de la inmunoterapia . Después de una inversión exitosa, los elementos severamente dañados del injerto se curan por fibrosis, y el resto del injerto luce normal. Después de la resolución del rechazo agudo, es posible reducir a niveles muy bajos las dosis de las drogas inmunosupresores .
[0332] El rechazo crónico, que es un problema particular en los trasplantes renales, frecuentemente progresa de manera insidiosa a pesar de una terapia inmunosupresora incrementada. Se cree que esto se debe en gran parte a la hipersensibilidad de Tipo IV mediada por las células. El perfil patológico difiere del perfil patológico del rechazo agudo. Interviene primariamente el endotelio arterial con una proliferación extensiva que puede gradualmente ocluir el lumen del vaso, lo que conduce a isquemia, fibrosis, una túnica intima engrosada, y cambios ateroscleróticos . El rechazo crónico se debe principalmente a una obliteración progresiva de la vasculatura del injerto, y se asemeja a un proceso vasculitico lento.
[0333] En la hipersensibilidad de Tipo IV, las células T CD8 citotóxicas y las células T CD4 helper T reconocen el antigeno sintetizado sea intracelular sea extracelular cuando forma un complejo con moléculas MHC respectivamente de Clase I o de clase II. Los macrófagos funcionan como células presentadoras de antigeno y liberan el L-l, lo que promueve la proliferación de las células T helper. Las células T Helper liberan interferón gamma y IL-2, los que conjuntamente regulan las reacciones de hiperactividad retardadas mediadas por la activación de macrófagos y la inmunidad mediada por las células T. En el caso de los trasplantes de órganos, las células T citotóxicas destruyen las células del injerto al entrar en contacto con las mismas.
[0334] Ya que las JAK quinasas desempeñan un rol critico en la activación de las células T, los compuestos descritos en la presente pueden utilizarse para tratar y/o prevenir muchos aspectos del rechazo de trasplantes, y son particularmente útiles en el tratamiento y/o prevención de las reacciones de rechazo que son mediadas, por lo menos en parte, por las células T, tales como HVGR o GVHR. Los compuestos también pueden utilizarse para tratar y/o prevenir el rechazo crónico en los receptores de trasplante, y en particular, en los receptores de trasplantes renales. El compuesto también puede administrarse a un tejido u órgano antes de transplantarse el tejido u órgano en el receptor del trasplante.
[0335] En otra forma de realización, esta invención provee un método para una inmunoenfermedad mediada por células T, que comprende administrar a un paciente que adolezca de una enfermedad autoinmune tal una cantidad de un compuesto efectiva para tratar la enfermedad autoinmune, habiéndose seleccionado un compuesto entre los compuestos de la invención. En determinadas formas de realización de los métodos, la enfermedad autoinmune es la esclerosis múltiple (MS, . múltiple sclerosis) , psoriasis, o el síndrome de Sjógren. Tales enfermedades autoinmunes incluyen a título no limitativo aquellas enfermedades autoinmunes que frecuentemente llevan la designación de trastornos autoinmunes de órgano simple o de 'tipo de célula individual y aquellas enfermedades autoinmunes de las que frecuentemente se considera que en las mismas intervienen trastornos autoinmunes sistémicos. Los ejemplos no limitantes de enfermedades frecuentemente consideradas como trastornos autoinmunes de órganos simples o de tipos de células individuales incluyen: la tiroiditis de Hashimoto, la anemia hemolítica autoinmune, la gastritis trófica autoinmune de la anemia perniciosa, la encefalomielitis autoinmune, la orquitis autoinmune, la enfermedad de Goodpasture, la trombocitopenia autoinmune, la oftalmía simpática, myasthenia gravis, enfermedad de Graves, cirrosis biliar primaria, hepatitis agresiva crónica, colitis ulcerante y glomerulopatía membranosa. Los ejemplos no limitantes de enfermedades que frecuentemente se clasifican por el hecho de implicar trastornos autoinmunes sistémicos, incluyen: la eritematosis de lupus sistémico, artritis reumatoide, síndrome de Sjogren, síndrome de Reiter, la polimiositis-dermatomiositis, esclerosis sistémica, poliarteritis nodosa, esclerosis múltiple y penfigoide bullosa. Las enfermedades autoinmunes adicionales que pueden estar basadas en células beta. (humoral) o basadas en células T, incluyen el síndrome de Cogan, espondilitis anquilosante, granulomatosis de Wegener, alopecia autoinmune, diabetes incipiente de Tipo I o juvenil, y tiroiditis.
[0336] En términos generales, los tipos de enfermedades autoinmunes que pueden tratarse o prevenirse con tales prodrogas incluyen aquellos trastornos en las que interviene una lesión de los tejidos resultado de una respuesta humoral y/o célula-mediada a los inmunógenos o antígenos de origen endógeno y/o exógeno. Tales enfermedades se consideran frecuentemente como enfermedades en las que intervienen las reacciones de hipersensibilidad nonanafilácticas (es decir, de Tipo II, Tipo III y/o Tipo IV) .
[0337] Por lo general, las reacciones de hipersensibilidad de tipo PL son el resultado de la liberación de sustancias farmacológicamente activas, tales como histamina, desde las células germinales y/o células basófilas después de su contacto con un antígeno exógeno específico. Como se mencionó en lo que precede, tales reacciones de Tipo I desempeñan un papel en numerosas enfermedades, que incluyen el asma alérgica, la rinitis alérgica, etc.
[0338] Las reacciones de hipersensibilidad de Tipo II (que también se designan como reacciones de hipersensibilidad citotóxicas, dependientes de complementos citolíticos o estimuladoras de células) se presentan cuando las inmunoglobulinas reaccionan con componentes antigénicos de células o de tejido, o con un antigeno o hapteno que ha llegado a acoplarse intimamente a células o tejidos. Las enfermedades que se asocian comúnmente con las reacciones de hipersensibilidad de Tipo II incluyen a titulo no limitativo, la anemia hemolitica autoinmune, la eritroblastosis fetalis y la enfermedad de Goodpasture .
[0339] Las reacciones de hipersensibilidad de Tipo III (que también llevan la denominación de reacciones de hipersensibilidad de complejo tóxico, de complejo soluble, o de inmunocomplej o) son el resultado de la deposición de complejos antigeno-inmunoglobulina soluble circulante en vasos o en tejidos, que acompañan reacciones inflamatorias agudas en el sitio de la deposición del complejo autoinmune. Los ejemplos, no limitantes de enfermedades de reacción de Tipo III prototipicos incluyen la reacción de Arthus, la artritis reumatoide, la enfermedad del suero, el lupus erythematosis sistémico, determinados tipos de glomerulonefritis, esclerosis múltiple y penfigoide bullar.
[0340] Las reacciones de hipersensibilidad de Tipo IV (frecuentemente denominadas reacciones de hipersensibilidad del tipo celular, mediadas ' por células, retardadas o de tipo tuberculina) son causadas por linfocitos T sensibilizadas que resultan del contacto con un antigeno especifico. Los ejemplos, no limitantes de enfermedades de las que se consideran que involucran reacciones de tipo IV, abarcan la dermatitis de contacto y el rechazo de aloinjerto.
[0341] Las enfermedades autoinmunes asociados con cualquiera de las reacciones de hipersensibilidad no anafilácticas mencionadas arriba pueden ser tratadas o prevenidas mediante las prodrogas de acuerdo las fórmulas estructurales (I) y (la). En particular, los métodos pueden utilizarse para tratar o prevenir aquellas enfermedades autoinmunes que se caracterizan frecuentemente como trastornos autoinmunes de órganos simple o de tipo de célula simple que incluyen a titulo no limitativo: tiroiditis de Hashimoto, anemia hemolitica autoinmune, gastritis atrófica autoinmune de anemia perniciosa, encefalomielitis autoinmune, orquitis autoinmune, enfermedad de Goodpasture, trombocitopenia autoinmune, oftalmía simpatética, myasthenia gravis, enfermedad de Graves, cirrosis biliar primaria, hepatitis agresiva crónica, colitis ulcerante y glomerulopatía membranosa, así como también aquellas enfermedades autoinmunes frecuentemente caracterizadas porque en las mismas interviene un trastorno autoinmunes sistémico, que incluyen a título no limitativo: lupus erythematosis sistémico (SLE), artritis reumatoide, síndrome de Sjógren, síndrome de Reiter, polimiositis-dermatomiositis , esclerosis sistémica, poliarteritis nodosa, esclerosis múltiple y penfigoide bullosa.
[0342] Las personas con pericia en la especialidad comprenderán que muchas de las enfermedades autoinmune mencionadas están asociadas con síntomas severos, cuya mejoría provee un beneficio terapéutico significativo aún en aquellos casos en que no se mejore la enfermedad autoinmune subyacente.
[0343] La terapia en la cual se utilizan los compuestos descritos en la presente puede aplicarse sola, o puede aplicarse en combinación con otras terapias inmunosupresoras comunes o adjuntamente con las mismas, tales como, por ejemplo, los siguientes: mercaptopurina ; corticosteroides tales como prednisona; metilprednisolona y prednisolona; agentes alquilantes tales como ciclofosfamida ; inhibidores de calcineurina tales como la ciclosporina, sirolimus, y tacrolimus; los inhibidores de inosina monofosfato dehidrogenasa (IMPDH) tales como el micofenolato, micofenolato mofetil, y azatioprina ; y los agentes diseñados para suprimir la inmunidad celular dejando intacto la respuesta inmunológica humoral del receptor; y que incluyen diversos anticuerpos (por ejemplo, globulina antilifocito (ALG) , globulina antitimocito (ATG) , anticuerpos anti-célula T (0KT3) ) y la irradiación. Estos diversos agentes puede utilizarse de acuerdo con sus dosis estándar o comunes, como se especifica en la información de prescripción que acompaña las formas comercialmente disponibles de las drogas (Véase también: la información de prescripción en la edición 2006 de The Physician's Desk Reference) , cuyas revelaciones se incorporan en la presente a título de referencia. La azatioprina es comercializada actualmente por Salix Pharmaceuticals, Inc., bajo la designación comercial AZASAN la mercaptopurina es suministrada actualmente por Gate Pharmaceuticals, Inc., bajo la designación comercial PURINETHOL; la prednisona y la prednisolona son provistos actualmente por Roxane Laboratories, Inc.; la metil prednisolona es comercializada actualmente por Pfizer; el sirolimus (rapamicina) se comercializa por Wyeth-Ayerst bajo la designación comercial RAPAMUNE; el tacrolimus es comercializado actualmente por Fujisawa bajo la designación comercial PROGRAF; la ciclosporina es provista actualmente por Novartis bajo la designación comercial SANDIMMUNE y por Abbott bajo la designación comercial GENGRAF; los inhibidores de IMPDH tales como el micofenolato mofetil y el ácido micofenólico son provistos por Roche bajo la designación comercial CELLCEPT y por Novartis bajo la designación comercial MYFORTIC; la azatioprina la comercializa actualmente Glaxo Smith Kline bajo la designación comercial IMURAN; y los anticuerpos son actualmente comercializados por Ortho Biotech bajo la designación comercial ORTHOCLONE, por Novartis bajo la designación comercial SIMULECT (basiliximab) , y por Roche bajo la designación comercial ZENAPAX (daclizumab) .
[0344] En otra forma de realización, los compuestos podrían administrarse sea en combinación sea en forma adjunta con un inhibidor de una syk quinasa. La syk quinasa es una tirosina quinasa de la que se sabe que desempeña un rol crítico en el receptor de Fcy de señalización, asi como también en otras cascadas de señalización, tales como aquellas en las que interviene el receptor de señalización de las células B (Turner et al., (2000), Immunology Today 21:148-154) e integrinas beta(l), beta (2), y beta (3) en neutrófilos (Mocsai et al., (2002), Immunity 16:547-558). Por ejemplo, la syk quinasa desempeña un papel pivotante en la señalización del receptor de IgE de elevada afinidad en las células germinales, lo que conduce a la activación y subsiguiente liberación de múltiples liberadores químicos que desencadenan ataques alérgicos. Sin embargo, a diferencia de las JAK quinasas, que ayudan a regular las trayectorias que intervienen en las reacciones de hipersensibilidad de Tipo IV retardadas o mediadas por células, la syk quinasa ayuda a regular las trayectorias que intervienen en las reacciones de hipersensibilidad de Tipo I mediadas inmediatamente por IgE. Por otra parte, hay determinados compuestos que influyen sobre la trayectoria del syk y que puede influir o no sobre las trayectorias de JAK.
[0345] Se describen compuestos inhibidores de syk adecuados por ejemplo, en el documento Ser. No. 10/355,543 presentada el 31 de enero de 2003 (Publicación no. 2004/0029902); WO 03/063794; Ser. No. 10/631,029 presentada el 29 de julio de 2003; WO 2004/014382; Ser. No. 10/903,263 presentada el 30 de julio de 2004; PCT/US2004/24716 presentada el 30 de julio de 2004 (WO005/016893) ; Ser. No. 10/903,870 presentada el 30 de julio de 2004; PCT/US2004/24920 presentada el 30 de julio de 2004; Ser. No. 60/630, 808 presentada el 24 de noviembre de 2004; Ser. No. 60/645,424 presentada el 19 de enero de 2005; y Ser. No. 60/654,620, presentada el 18 de enero de 2005, cuyas revelaciones se incorporan en la presente a titulo de referencia. Los compuestos y los inhibidores de syk descritos de la presente podrían utilizarse solos o en combinación con uno o más tratamientos convencionales para el rechazo de trasplantes, como se describe lo que precede.
[0346] En una forma de realización específica, los compuestos pueden utilizarse para tratar o prevenir aquellas enfermedades en pacientes que o bien no responden inicialmente (son resistentes) o bien llegan a dejar de responder al tratamiento con un compuesto inhibidor del syk o a uno o más tratamientos actuales para la enfermedad en particular. Los compuestos también podrían utilizarse en combinación con compuestos inhibidores del syk en pacientes que son resistentes a los compuestos de syk o que no responden a los mismos. En lo que sigue se proveen compuestos inhibidores adecuados junto con los cuales pueden administrarse los compuestos.
[0347] En otra forma de realización, esta invención provee un método para una enfermedad autoinmune mediada por células T, que comprende administrar a un paciente que adolezca de una enfermedad autoinmune tal una cantidad de un compuesto efectivo para tratar la enfermedad autoinmune, habiéndose seleccionado el compuesto entre los compuestos de la invención descritos de la presente, y administrándose el compuesto en combinación o adjuntamente con un compuesto que inhibe la syk quinasa con un IC50 en el intervalo de por lo menos 10 µ?.
[0348] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir el rechazo de trasplantes de aloinjerto en el receptor de un trasplante, que comprende administrar al receptor del trasplante un compuesto que es efectivo para tratar o prevenir el rechazo, seleccionándose el compuesto entre los compuestos de la invención descritos en la presente. En otra forma de realización, se administra el compuesto a un tejido u órgano antes de transplantar el tejido u órgano en el receptor del trasplante.
[0349] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir el rechazo de un trasplante de aloinjerto en el receptor de un trasplante, siendo el rechazo un rechazo agudo, que comprende administrar al receptor del trasplante una cantidad de un compuesto efectiva para tratar o prevenir el rechazo, seleccionándose el compuesto entre los compuestos de la invención.
[0350] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir el rechazo de un trasplante de aloinjerto en receptor de un trasplante, siendo el rechazo un rechazo crónico, que comprende administrar al receptor del trasplante una cantidad de un compuesto efectiva para tratar o prevenir el rechazo, seleccionándose el compuesto entre los compuestos de la invención.
[0351] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir el rechazo del trasplante de aloinjerto en el receptor de un trasplante, en el que el rechazo es mediado por HVGR o GVHR, que comprende administrar al receptor del trasplante una cantidad de un compuesto efectiva para tratar o prevenir el rechazo, seleccionándose el compuesto entre los compuestos de esta invención descritos en la presente.
[0352] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir el rechazo de un transplante de un aloinjerto en el receptor de un trasplante, habiéndose seleccionado el trasplante de aloinjerto entre un riñon, un corazón, un hígado y un pulmón, que comprende administrar al receptor del trasplante una cantidad de un compuesto efectiva para tratar o prevenir el rechazo, seleccionándose el compuesto entre los compuestos de esta invención descritos en la presente.
[0353] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir el rechazo de un transplante de aloinjerto en el receptor de un trasplante, en el que el trasplante de aloinjerto ha sido seleccionado entre un riñon, un corazón, un hígado y un pulmón, que comprende administrar al receptor del trasplante una cantidad de un compuesto efectiva para tratar o prevenir el rechazo, habiéndose seleccionado el compuesto entre los compuestos de la invención descritos en la presente, administrándose el compuesto en combinación o adjuntamente con otro inmunosupresor .
[0354] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir el rechazo de un transplante de aloinjerto en el receptor de un trasplante, en donde el transplante de aloinjerto ha sido seleccionado entre un riñon, un corazón, un hígado y un pulmón, que comprende administrar al receptor del trasplante una cantidad de un compuesto efectiva para tratar o prevenir el rechazo, seleccionándose el compuesto entre los compuestos de la invención descritos en la presente, y administrándose compuesto en combinación o adjuntamente con otro inmunosupresor, seleccionándose el inmunosupresor entre ciclosporina, tacrolimus, sirolimus, un inhibidor de IMPDH, micofenolato, micofanolato mofetil, un anticuerpo anticélulas T, y 0KT3.
[0355] Los compuestos descritos en la presente son moderadores de citoquina de la señalización de IL-4. Como consecuencia, los compuestos podrían ralentizar la respuesta de las reacciones de hipersensibilidad de Tipo I. Por lo tanto, en una forma de realización específica, podrían utilizarse los compuestos para tratar tales reacciones y por ello las enfermedades asociadas con, mediadas por, o causadas por tales reacciones de hipersensibilidad (por ejemplo, las alergias) , a título profiláctico. Por ejemplo, una persona que sufra de alergia podría tomar uno o más de los compuestos JAK selectivos descritos en la presente antes de la exposición prevista a los alérgenos, a efectos de retardar la iniciación o progreso de una respuesta alérgica, o para directamente eliminar dicha respuesta.
[0356] Cuando se los utiliza para tratar o prevenir dichas enfermedades, los compuestos pueden administrarse aisladamente, como mezclas de uno más compuestos, o en forma de una mezcla o combinación con otros agentes útiles para tratar tales enfermedades y/o los síntomas asociados a dichos enfermedades. Los compuestos también pueden administrarse en mezcla o combinaciones con agentes útiles para tratar otros trastornos o enfermedades, tales como esferoides, estabilizadores de membranas, inhibidores de 5-lipoxigenasa (5L0) , inhibidores de la síntesis y de los receptores de los leucotrienos , inhibidores de la conmutación del isotipo IgE o de la síntesis de IgE, beta-agonistas, inhibidores de triptasa, aspirina, inhibidores de cicloxigenasa (COX) , metotrexato, drogas anti-TNF, anticuerpo anti CD20, inhibidores de PD4, inhibidores de p38, inhibidores de PDE4, y antihistaminas , para mencionar unos pocos. Los compuestos pueden administrarse de por si en la forma de prodrogas o como composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto activo o prodroga . [ 0357 ] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir una reacción de hipersensibilidad de Tipo IV, que comprende administrar a un sujeto una cantidad de un compuesto efectiva para tratar o prevenir la reacción de hipersensibilidad, seleccionándose el compuesto entre los compuestos de esta invención descritos en la presente. [ 0358 ] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir una reacción de hipersensibilidad de Tipo IV, que es práctico desde el punto de vista profiláctico, que comprende administrar a un sujeto una cantidad de un compuesto efectiva para tratar o prevenir la reacción de hipersensibilidad, seleccionándose el compuesto entre los compuestos de esta invención descritos en la presente, y se administra antes de la exposición a un alérgeno. [ 0359 ] En otra forma de realización, esta invención provee un método para inhibir la transducción de una cascada de señales en la que la JAK3 quinasa desempeña un rol, que comprende poner en contacto una célula que expresa un receptor que interviene en una cascada de señalizaciones de este tipo, con un compuesto, seleccionándose el compuesto entre los compuestos de esta invención descritos en la presente. [ 0360 ] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir una enfermedad mediada por la JAK quinasa, que comprende administrar a un sujeto una cantidad de compuesto efectiva para tratar o prevenir la enfermedad mediada por la JAK quinasa, seleccionándose de compuesto entre los compuestos de esta invención descritos en la presente.
[0361] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir una enfermedad mediada por la JAK quinasa, estando la enfermedad mediada por la JAK el HVGR o GVHR, que comprende administrar a un sujeto una cantidad de compuesto efectiva para tratar o prevenir la enfermedad mediada por la JAK quinasa, seleccionándose el compuesto entre los compuestos de la invención descritos en la presente.
[0362] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir una enfermedad mediada por la JAK quinasas, siendo la enfermedad mediada por la JAK el rechazo agudo de un aloinjerto, que comprenden administrar a un sujeto una cantidad de compuesto efectiva para tratar o prevenir la enfermedad mediada por la JAK quinasa, seleccionándose el compuesto entre los compuestos de la invención descritos en la presente .
[0363] En otra forma de realización, esta invención provee un método para tratar o prevenir una enfermedad mediada por la syk quinasa, siendo la enfermedad mediada por la JAK el rechazo crónico de un aloinjerto, que comprende administrar a un sujeto una cantidad de compuesto efectiva para tratar o prevenir la enfermedad mediada por la JAK quinasa, seleccionándose el compuesto entre los compuestos de la invención descritos en la presente .
[0364] Típicamente, los compuestos activos de la invención inhiben la trayectoria de syk. La actividad de un compuesto especificado como un inhibidor de una syk quinasa puede evaluarse in vitro o in vivo. En algunas formas de realización, la actividad de un compuesto especificado puede ensayarse en un ensayo celular.
[0365] La expresión "trastorno de proliferación de células" se refiere a trastorno caracterizado por la proliferación anormal de células. La expresión "trastorno de proliferación" no implica ninguna limitación con respecto a la velocidad del desarrollo de las células; simplemente implica una pérdida de los controles normales que influyen sobre el desarrollo y división de las células. Por lo tanto, en algunas formas de realización, las células de un trastorno de proliferación pueden tener las mismas velocidades de división que las células normales pero no responden a las señales que limiten tal desarrollo. Dentro del ámbito de "trastorno de proliferación de células" se encuentra un neoplasma o tumor, que es el desarrollo anormal de un tejido. La expresión "cáncer" se refiere a cualquiera de entre diversos neoplasmas malignos caracterizados por la proliferación de células que tienen la capacidad de invadir el tejido rodeante y/o de hacer metástasis en nuevos sitios de colonización.
[0366] En términos generales, los trastornos de proliferación que puede ser tratados con los compuestos revelados en la presente, se refieren a cualquier trastorno caracterizado por la proliferación aberrante de células. Los mismos incluyen diversos tumores y cánceres, benignos o malignos, que produce metástasis o no. Es posible apuntar a las propiedades especificas de los cánceres, tales como la invasión de los tejidos o la metástasis, mediante los métodos descritos en la presente. Los trastornos de células proliferantes incluyen una variedad de cánceres que incluyen, entre otros, cáncer ovárico, cáncer renal, cáncer gastrointestinal, cáncer de riñon, cáncer de vejiga, cáncer pancreático, carcinoma escamoso de los pulmones, y adenocarcinoma .
[0367] En algunas formas de realización, el trastorno de las células proliferantes tratado es un neoplasma hematopoyético, que es un desarrollo aberrante de las células del sistema hematopoyético. Las enfermedades hematopoyéticas malignas pueden tener sus orígenes en células germinales pluripotentes , células progenitoras multipotentes, células progenitoras dedicadas oligopotentes, células precursoras, y células terminalmente diferenciadas que intervienen en la hematopoyesis. Se cree que algunas enfermedades hematológicas malignas surgen de células germinales hematopoyéticas, que tienen la capacidad de su autorrenovación . Por ejemplo, las células capaces de desarrollar subtipos específicos de leucemia mieloide aguda (AML) (Cynthia K. Hahn, Kenneth N. Ross, Rose M. Kakoza, Steven Karr, Jinyan Du, Shao-E Ong, Todd R. Golub, Kimberly Stegmaier, Syk is a new target for AML differentiation, Blod, 2007, 110, Abstract 209) al ser transplantadas presentan los marcadores celulares superficiales de las células germinales hematopoyéticas, lo que implica las células germinales hematopoyéticas como la fuente de células leucémicas. Las blastocélulas que no tengan un marcador de células característico de las células germinales hematopoyéticas no parecen tener la capacidad de establecer tumores cuando se las transplanta (Blaire et al., 1997, Blod 89:3104-3112). El origen célular germinal de determinadas enfermedades hematológicas malignas también encuentran un respaldo en la observación de que las anormalidades cromosómicas específicas asociadas con tipos particulares de leucemia también pueden encontrarse en células normales así como también en blastocélulas leucémicas. Por ejemplo, la translocación recíproca t (9q34 ; 22qll) asociada con aproximadamente el 96% de leucemia mielógena crónica parece estar presente en las células de cepas mieloide, eritroide y linfoide, lo que sugiere que la aberración cromosómica se origina en las células germinales hematopoyéticas. Un subgrupo de células en determinados tipos de CML presenta el fenotipo de marcador de células germinales hematopoyéticas .
[0368] Si bien los neoplasmas hematopoyéticos se originan frecuentemente a partir de células germinales, las células progenitoras dedicadas o las células más terminalente diferenciadas de una cepa de desarrollo, también pueden ser la fuente de algunas leucemias. Por ejemplo, la expresión forzada de la proteina de fusión Bcr/Abl (asociada con leucemia mielógena crónica en células progenitoras mieloides comunes o de granulocito/macrófago) produce una condición similar a leucemia. Además, algunas aberraciones cromosómicas asociadas con subtipos de leucemia no se hallan en la población de células con un fenotipo marcador de células germinales hematopoyéticas, pero se los encuentra en una población de células que presentan marcadores de un estado más diferenciado de la trayectoria hematopoyética (Turhan et al., 1995, Blod 85:2154-2161). Por lo tanto, si bien las células progenitoras dedicadas y otras células diferenciadas puede tener solamente un potencial limitado para la división de células, las células leucémicas pueden haber adquirido la capacidad de desarrollarse de manera no regulada, y en algunos casos imitan las características de las células germinales hematopoyéticas (Passegue et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 2003, 100:11842-9).
[0369] En algunas formas de realización, el neoplasma hematopoyético tratado es un neoplasma, en donde las células anormales se han derivado de y/o presentan el fenotipo característico de la cepa linfoide. Los neoplasmas linfoides pueden dividirse en neoplasmas de células B, neoplasmas de células T y NK, y linfoma de Hodgkin. Por su parte, los neoplasmas de las células B pueden subdividirse en neoplasma de células N precursoras y neoplasma de células B maduras/periféricas. Entre los neoplasmas de células B dados a titulo de ejemplo se encuentra la leucemia/linforna linfoblástico B precursora (linfoma linfoblástico agudo de las células B precursoras) mientras que entre los neoplasmas de células B maduras/periférica dado a título ejemplo se encuentra el linfoma linfoblástico de leucemia linfocítica crónica de las células B/linfocítico pequeño, la leucemia prolinfocítica de las células B, el linfoma linfoplasmático, el linfoma de las células B de la zona esplénica marginal, la leucemia de las células vellosas, el mieloma/plasmacitoma de las células del plasma, el linfoma de las células B de la zona marginal extranodal de tipo MALT, el linfoma de las células B de la zona marginal nodal, el linfoma folicular, el linfoma de las células de manto, el linfoma de las células B mediastinales , el linfoma de efusión primaria, y el linfoma de Burkitt/ leucemia de células de Burkitt. Por otra parte, los neoplasmas de las células T y Nk se subdividen en neoplasma de células T precursoras y neoplasma de las células T maduras (periféricas). Los ejemplos de neoplasmas de células T precursoras abarcan el linforna/leucemia linfoblástico T precursora (leucemia linfoblástico aguda de las células T precursoras) mientras que los ejemplos de neoplasmas de células T maduras (periférica) abarcan la leucemia linfocitica granular de las células T, la leucemia agresiva de las células NK, el linforna/leucemia de las células T adultas (HTLV-1), el linfoma de las células NK/T extranodales , el linfoma de las células T de tipo nasal, de tipo enteropatia, el linfoma de las células T gamma -delta hepatosplénicas , el linfoma de las células T similar a paniculitis subcutánea, el síndrome Mycosis fungoides/Sezary, el linfoma anaplástico de las células grandes, el linfoma de las células T periféricas, de células T/cero, cutánea primarias, el linfoma de las células T periféricas, no caracterizadas de alguna otra manera, el linfoma angioinmunoblástico de las células T, el linfoma anaplástico de las células grandes, de tipo células T/cero, sistémicas primarias. El tercer miembro de los neoplasmas linfoides es el linfoma de Hodgkin, también conocido como enfermedad de Hodgkin. Los diagnósticos de esta clase dados a título de ejemplo, que pueden tratarse con los compuestos incluyen, entre otros, el linfoma de Hodgkin con predominio de linfocitos nodulares, y diversas formas clásicas de la enfermedad de Hodgkin, entre los cuales a título de ejemplo puede mencionarse el linfoma nodular de esclerosis de Hodgkin (tipos 1 y 2), el linfoma clásico rico en linfocitos de Hodgkin, el linfoma de celularidad mixta de Hodgkin, y el linfoma de agotamiento de linfocitos de Hodgkin. En diversas formas de realización, cualquiera de los neoplasmas linfoides que esté asociados con una actividad aberrante de JAK puede tratarse con los compuestos inhibidores de syk.
[0370] En algunas formas de realización, el neoplasma hematopoyético es tratado como un neoplasma mieloide. Este grupo comprende una gran clase de trastornos proliferativos de células en los que interviene o se exhibe el fenotipo característico de las células de la cepa mieloide. Los neoplasmas mieloides pueden subdividirse en enfermedades mioproliferantes, enfermedades mielodisplásticas/mieloproliferantes, y leucemias mieloides agudas. Las enfermedades mieloproliferantes abarcan por ejemplo la leucemia mielógena crónica (por ejemplo, la leucemia de cromosoma Filadelfia positivo ( t ( 9 ; 22 ) (qq3 ; qll ) ) , la leucemia neutrófila crónica, el síndrome de la leucemia eosinófila crónica/hipereosoinófila, la mielofibrosis idiopática crónica, la policitemia vera, y la trombocitopemia esencial. Las enfermedades mielodisplásticas / mieloproliferantes abarcan por ejemplo la leucemia mielomonocítica crónica, la leucemia mielógena crónica, y la leucemia mielomonocítica juvenil. Los síndromes mielodisplásticas dadas a título de ejemplo abarcan la anemia refractaria, con sideroblastos anulares y sin sideroblastos anulares, la citopenia refractaria (síndrome mielodisplástico ) con displasia multicepa, la anemia refractaria (síndrome mielodisplástico ) sin blastos en exceso, el síndrome 5q, y el síndrome mielodisplástico. En diversas formas de realización, cualquiera de los neoplasmas mieloides que están asociados con la actividad aberrante de syk, pueden ser tratados con los compuestos inhibidores de syk.
[0371] En algunas formas de realización, los compuestos pueden utilizarse para tratar leucemias mieloides agudas (AML) que representan una gran clase de neoplasmas mieloides que tiene su propia subdivisión de trastornos. Estas subdivisiones incluyen, entre otros, AMLs con traslocaciones citogénicas recurrentes, AML con displasia multicepa, y otros AML que no están categorizados de otra manera. Los AMLs con traslocaciones citogénicas recurrentes incluyen entre otros AML con t(8;21) (q22 q22), AML1 (CBF-alfa) /ETO, leucemia promielolítica aguda (AML con t (15; 17) (q22;qll-12) y variantes, PML/RAR-alpha) , AML como eosinófilos de médula de hueso anormales (inv (16) (pl3q22) o t (16; 16) (pl3;qll) , CBFb/MYHllX) , y AML con anormalidades llq23 (MLL) . Los AML dados a título ejemplo con displasia de multicepa son aquellos que están asociados con o sin síndrome mielodisplástico anterior. Las otras leucemias mieloides agudas no clasificados dentro del grupo definible incluyen AML mínimamente diferenciado, AML sin maduración, AML con maduración, leucemia mielocítica aguda, leucemia eritroide aguda, leucemia megacaricitica aguda, leucemia basófila aguda, y panmielosis aguda con mielofibrosis .
[0372] Dentro del contexto de la presente invención, el término "tratamiento" se refiere a un alivio de los síntomas asociados con un trastorno o enfermedad, o por otra parte a una detención del avance o empeoramiento de dichos síntomas, o a la prevención y profilaxis de la enfermedad o trastorno.
[0373] La expresión "mamífero" incluye los organismos que expresan el syk. Los ejemplos de mamíferos incluyen ratones, ratas, vacas, ovejas, porcinos, caprinos, caballos, osos, monos, perros, datos y preferiblemente seres humanos. En esta definición se incluyen también los organismos transgénicos que expresan el syk.
[0374] Los métodos inventivos comprenden administrar una cantidad efectiva de compuesto o composición descritos en la presente a un mamífero o a un animal no humano. Tal corno se la utiliza en la presente, la expresión "cantidad efectiva" de un compuesto o composición de la invención incluye aquellas cantidades que antagonizan o inhiben el syk. Un a cantidad que antagonice o inhiba el syk puede detectarse por ejemplo mediante cualquier ensayo capaz de determinar la actividad del syk, los que incluyen el descrito más adelante como un método de ensayo ilustrativo. Las cantidades efectivas pueden también incluir aquellas cantidades que alivian los síntomas de un trastorno de syk asociado tratable mediante la inhibición del syk. Por lo tanto, la expresión "antagonistas de syk" incluye los compuestos que interactúan con el syk, y que modulan, por ejemplo, inhiben o disminuyen, la capacidad de un segundo compuesto, por ejemplo, otro ligando de syk, para interactuar con el syk. Los compuestos que se ligan al syk son preferiblemente antagonistas del syk. La expresión "compuesto que se liga al syc" (por ejemplo, que exhibe una afinidad de ligación con respecto al receptor) incluye aquellos compuestos que interactúan con el syk, siendo el resultado la modulación de la actividad del syk. Los compuestos que se ligan al Syk pueden identificarse mediante un método in vitro (por ejemplo, basado en células y no basado en células) o in vivo. En lo que sigue se da una descripción de los métodos in vi tro .
[0375] La cantidad de compuesto presente en los métodos y composiciones descritos en la presente deberían ser suficientes para causar una disminución detectable en la gravedad del trastorno, medida mediante cualquiera de los ensayos descritos en los ejemplos. La cantidad necesaria de modulador de syk dependerá de la efectividad del modulador para el tipo de células dado y de la duración de tiempo requerida para tratar el trastorno. Por otra parte, en determinadas formas de realización, las composiciones de esta invención pueden comprender otro agente terapéutico. Si se utiliza un segundo agente, es posible administrar el segundo agente sea en forma de una dosis por separado sea como parte de una dosis individual con los compuestos o composiciones de esta invención. Si bien es posible utilizar uno o más de los compuestos inventivos en una aplicación de monoterapia para tratar un trastorno, enfermedad o síntoma, también pueden utilizarse en una terapia de combinación, en la que el uso del compuesto o composición de acuerdo con la invención (agente terapéutico) se combina con el uso de uno o más agentes terapéuticos para tratar el mismo tipo, y/o otros tipos de trastornos, síntomas y enfermedades. La terapia de combinación incluye la administración de los dos o más agentes terapéuticos simultáneamente o secuencialmente . Los agentes pueden ser administrados en cualquier orden. Como alternativa, los múltiples agentes terapéuticos pueden combinarse en forma de una única composición que puede ser administrada al paciente. Por ejemplo, una composición farmacéutica simple podría comprender el compuesto o sus sal, éster o prodroga del mismo, farmacéuticamente aceptable, de acuerdo con la Fórmula I, otro agente terapéutico (por ejemplo, metotrexato) o un tautómero del mismo o una sal, éster o prodroga, farmacéuticamente aceptables de los mismos, y un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptables .
[0376] La invención comprende un compuesto que tiene la fórmula I, un método para preparar un compuesto inventivo, un método para preparar una composición farmacéutica a partir de al menos un compuesto inventivo y al menos un vehículo o excipientes farmacéuticamente aceptables, y un método para utilizar uno más compuestos a efectos de tratar una variedad de trastornos, síntomas y enfermedades (por ejemplo, inflamatorias, autoinmunes, neurológicas, neurodegenerativas, oncológicas y cardiovasculares), tales como RA, osteoartritis , IBD (irritable bowel disease, enfermedad de los intestinos irritables), asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica COPD y MS . Los compuestos de acuerdo con la invención y sus sales farmacéuticamente aceptables y las composiciones neutras que pueden formularse junto con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptables, y la composición resultante, puede ser administradas in vivo a mamíferos, tales como hombres, mujeres y animales, para tratar una variedad de trastornos, síntomas interminables. Por otra parte, los compuestos inventivos pueden utilizarse para preparar un medicamento que es útil para tratar una variedad de trastornos, síntomas y enfermedades.
[0377] La totalidad de los compuestos de la presente invención son sea inhibidores potentes de las syk quinasas, que presentan IC50S en el respectivo ensayo en el intervalo de menos de 5 µ , estando la mayoría de ellos en el intervalo nanomolar, y estando varios de ellos en el intervalo sub-nanomolar . En algunas formas de realización, los compuestos de la presente invención pueden ser inhibidores "duales" de syk/J7AK ya que inhiben tanto la syk como la JAK quinasa en algún grado. En otras formas de realización, los compuestos de la presente invención pueden selectivamente inhibir las syk . quinasas, pero no inhibir de manera apreciable una o más JAK quinasas. En otras formas de realización, los compuestos de la presente invención pueden inhibir de manera selectiva la JAK quinasa, pero no inhibir de manera apreciable una o más syk quinasas. f. Kits
[0378] Y otro aspecto de la invención consiste en proveer un kit que comprende contenedores separados en un solo envase, en donde los compuestos farmacéuticos inventivos, sus composiciones y/o sales de las mismas, se utilizan en combinación con vehículos farmacéuticamente aceptables, para tratar estados, trastornos, síntomas y enfermedades en los cuales el syk desempeña un rol.
EJEMPLOS
[0379] Se ofrecen los siguientes ejemplos a efectos de ilustrar la invención reivindicada, pero no para limitarla.
[0380] Los materiales de partida y reactivos de acuerdo con la invención utilizados en la preparación de estos compuestos se encuentran por lo general disponibles en el comercio por intermedio de proveedores comerciales tales como Aldrich Chemical Co., o se preparan mediante métodos conocidos por las personas con pericia en la especialidad siguiéndose los procedimientos establecidos en referencias tales como Fieser y Fieser's Reagents for Organic Synthesis; iley & Sons: New York, 1967-2004, Volumes 1-22; Rodd' s Che istry of Carbón Compounds , Elsevier Science Publishers, 1989, Volumes 1-5 y Supplementals; y Organic Reactions, Wiley & Sons: New York, 2005, Volumes 1-65.
[0381] Si se desea, los materiales de partida y los compuestos intermedios de los esquemas de las reacciones de síntesis pueden aislarse y purificarse mediante técnicas convencionales que incluyen a título no limitativo: filtración, destilación, cristalización, cromatografía y similares. Dichos materiales pueden caracterizarse mediante medios convencionales que incluyen constantes físicos y datos espectrales.
[0382] A menos que se especifique otra cosa, las reacciones descritas en la presente se llevan preferentemente a cabo bajo una atmósfera inerte a presión atmosférica y en un intervalo de temperaturas de reacción de aproximadamente -78 °C a aproximadamente 150 °C, más preferentemente de aproximadamente 0 °C a aproximadamente 125 °C, y más preferiblemente y convenientemente a temperatura ambiente, por ejemplo, de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 75 °C .
[0383] Con referencia a los siguientes ejemplos, los compuestos de la presente invención fueron sintetizados mediante los métodos descritos la presente, o con otros métodos, que son bien conocidos en la especialidad.
[0384] Los compuestos y/o compuestos intermedios pueden caracterizarse mediante HPLC (high performance liquid chromatography, cromatografía de líquidos de alta performance) , para lo cual se utiliza un sistema de cromatografía Aguas Alliance con un Módulo de Separación 2695 (Milford, Mass.). Las columnas analíticas pueden ser columnas C-18 SpeedROD RP-18E Columns de Merck KGaA (Darmstadt, Germany) . Como alternativa, la caracterización puede llevarse a cabo mediante un sistema de Aguas Unity (UPLC) con columnas Aguas Acquity UPLC BEH C-18 2.1 mm x 15 mm. Puede utilizarse un gradiente para la elución, empezándose típicamente con 95% de acetonitrilo/95 % de agua y continuándose hasta 95 % de acetonitrilo sobre un intervalo de tiempo de 15 minutos para el sistema Alliance system y 1 minuto para el sistema Acquity. Todos los solventes pueden contener ácido trifluoroacético (THA) al 0,1 %. Los compuestos pueden detectarse medíante absorción de luz ultravioleta (UV) a sea 220 sea 254 nm. Los solventes de HPLC pueden ser de EMD Chemicals, Inc. (Gibbstown, NJ) . En algunos casos es posible evaluar la pureza mediante cromatografía de capa delgada (TLC, thin layer chromatography) , para lo cual se utilizan placas de silicagel con respaldo de vidrio tales como, por ejemplo, placas de EMD Silica Gel 60 2,5 cm x 7,5 cm. Los resultados de la TLC pueden detectarse fácilmente bajo la luz ultravioleta, o mediante el empleo de otras técnicas de vapor de yodo o de teñido.
[0385] Los análisis de espectrometría de masa pueden llevarse a cabo en uno de dos instrumentos de Agilent 1100 serie LCMS y con el sistema Acquity con acetonitrilo / agua como fase móvil. En un sistema puede utilizarse TFA como el modificador y medir en modo ion posi-tivo [informado como MH+, (M+l) o (M+H)+], y en el otro puede utilizarse sea ácido fórmico sea acetato de amonio en modos de ión tanto positivo [informado como MH+, (M+l) o (M+H)+] y negativo [informado como M-, (M-l) o (M-H)"].
[0386] Puede llevarse a cabo el análisis de RMN (Resonancia Magnética Nuclear) sobre alguno de los compuestos con un Varían 400 MHz NMR (Palo Alto, Calif.). La referencia espectral puede ser sea TMS sea el conocido corrimiento espectral del solvente.
[0387] Es posible evaluar la pureza de algunos compuestos de la invención mediante análisis elemental (Robertson Microlit, Madison NJ. ) .
[0388] Los puntos de fusión pueden determinarse en un aparato de Laboratory Devices Mel-Temp (Holliston, Mass.).
[0389] Las separaciones pueden llevarse a cabo en función de necesidad, sea utilizando un sistema de cromatografía Sql6x sea SglOOc y columnas de gel de sílice preempacadas, todo ello comprado a Teledyne Isco, (Lincoln, NE) . Como alternativa, los compuestos y los compuestos intermedios pueden ser purificados mediante cromatografía de columna de flash por medio de la utilización de material de empaque de gel de sílice (malla 230-400), o mediante HPLC, para lo cual se utiliza una columna de fase inversa C-18. Los solventes típicos empleados para los sistemas Isco y para la cromatografía de columnas de flash pueden ser diclorometano, metanol, acetato de etilo, hexano, acetona, hidroxiamina acuosa y trietilamina . Los solventes típicos utilizados para la HPLC de fase inversa pueden tener concentraciones variables de acetonitrilo y agua con ácido triflioracético al 0,1%.
Métodos Generales
[0390] Los siguientes esquemas de reacciones de síntesis son meramente ilustrativos de algunos métodos mediante los cuales es posible sintetizar los compuestos de la invención; es posible efectuar diversas modificaciones en estos esquemas de reacción de síntesis, y estas modificaciones serán evidentes para una persona con pericia en la especialidad que haga referencia a la revelación contenida en esta solicitud.
Ejemplo 1.4- (4- (4-acetilpiperazin-l-il) fenilamino ) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida [ 0391 ] Etapa 1: A una solución agitada de ácido carboxilico 72 . 1 (85 g, 540 mmol) en cloruro de tionilo (425 mL) se añadió piridina (8,5 mL, 0,11 mmol) lentamente. La reacción se agitó a 75 °C durante lo cual se concentró y se secó al vacio en un polvo amarillo claro. Este sólido amarillo lentamente se diluyó con 750 mL de etanol y se calentó a reflujo. Al día siguiente, se determinó que la reacción estaba completa por medio de HPLC y luego se enfrió en un baño de hielo y el sólido se filtró y se lavó con éter dietilico para dar como resultado éster etílico 72 . 2 en forma de un polvo blanquecino (91 g, 87% para dos etapas). MS experimental para C7H8N204 como (M+H)+ 185.0. [ 0392 ] Etapa 2: El éster 72 . 2 (22 g, 120 mmol) se disolvió en oxicloruro de fósforo (60 mL, 600 mmol) y la mezcla se trató con N, N-dietilanilina (27 mL, 167 mmol) y la mezcla se calentó hasta 105 °C hasta que la reacción se determinó completa por HPLC. Luego se enfrió hasta temperatura ambiente y lentamente se añadió a 1 L de hielo picado dando como resultado la formación de un precipitado beige que se recogió por filtración y se secó al vacio para dar como resultado dicloruro 72.3 en forma de un polvo amarillo claro (22,5 g, 85%). XH RMN (DMSO-d6, 400 MHz) : d 9,13 (s, 1H), 4,37 (q, 2H) , 1,32 (t, 3H) .
[0393] Etapa 3: Dicloropirimidina 72.3 (500 mg, 2,3 mmol) se disolvió en NMP (10 mL) y se agitó en baño de hielo. A ello se añadió una solución de anilina 72.4 (540 mg, 2,5 mmol) y etildiisopropilamina (DIEA, 0,82 mL, 4,6 mmol) en 10 mL de NMP gota a gota usando un embudo adicional. La mezcla se agitó durante 1 hora, se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera, se concentró y se sometió a columna flash para aislar el compuesto 72.5 en forma de un sólido blanco (905 mg, 97%). MS experimental para C19H22C IN5O3 como (M+H)+ 404, 1.
[0394] Etapa 4: El éster etílico 72.5 (5 mg, 2,2 mmol) se disolvió en 100 mL de THF. A ello se añadieron hidróxido de litio hidratado (190 mg, 4,4 mmol) y 10 mL de agua. La mezcla se agitó durante 1 hora y a ello se añadió con cuidado solución 1 N de HC1 hasta que el pH alcanzó 3. La mezcla se concentró al vacío para eliminar THF. El sólido blanco se trituró y se aisló usando un embudo de Büchner. Se lavó con agua y se secó en horno de vacío para dar el compuesto 72.6 (900 mg, 99%) en forma de un sólido blanco. MS experimental para Ci7Hi8ClN503 como (M+H)+ 376,1.
[0395] Etapa 5: Ácido carboxílico 72.6 (900 mg, 2,2 mmol) se disolvió en 30 mL de N P. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (690 mg, 3,6 mmol) e hidrato de HOBt (490 mg, 3,6 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 90 minutos. A ello se añadió luego amoniaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 24 mL, 12 mmol) . La mezcla se agitó. Luego se concentró al vacio y se extrajo en agua y cloroformo. La fase de cloroformo se separó y se lavó con salmuera cuatro veces. La fase de cloroformo luego se secó sobre MgS04 y se concentró al vacio para obtener el compuesto 72.7 en forma de un sólido amarillo claro (720 mg, 63%) . MS experimental para C23H23N9O3 como (M+H)+ 474.2.
[0396] Etapa 6: Éter de benzotriazolilo 72.7 (100 mg, 0,21 mmol) se disolvió en 3 mL de DMSO. A ello se añadió cis-1,2-diaminociclohexano (124 x , 1,05 mmol) . La mezcla se agitó durante 1 hora en baño a 120 °C en un recipiente sellado. Esta mezcla luego se sometió a HPLC preparativa para aislar el compuesto racémico del titulo 72. MS experimental para C23H32N8O2 como (M+H)+ 453,2. UV ?=240, 297 nm.
Ejemplo 2.2- ( (IR, 2S ) -2-aminociclohexi lamino ) -4- (4- (1, 1-dioxo) tiomorfolinofenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0397] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con 4- (1,1-dioxo) tiomorfolinoanilina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para C21H29N7O3 S como (M+H)+ 460,2. UV ?=236, 312 nm. Ejemplo 3. - (4- ( lH-pirazol-l-il ) fenilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) pirimidin-5-carboxamida 74.4 74
[0398] Etapa 1: Dicloropirimidina 72.3 (1,12 g, 5,05 mmol) se disolvió en 60 mL de DMF y se agitó a temperatura ambiente. A ello se añadieron 4- ( lH-pirazol-l-il) anilina 74.1 (0,96 g, 6,1 mmol) en una porción y etildiisopropilamina (DIEA, 1,58 mL, 9,1 mmol) gota a gota usando una jeringa. La mezcla se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. A ello se añadió luego tiometóxido de sodio (885 mg, 12,6 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche, se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera tres veces, se secó sobre MgS04, se concentró al vacío y se sometió a columna flash para obtener el compuesto 50.2 en forma de un sólido blanco. MS experimental para Ci7Hi7N502S como (M+H) + 356, 1.
[0399] Etapa 2: El éster etílico 74.2 de la Etapa 1 se disolvió en 200 mL de THF. A ello se añadieron hidróxido de litio hidratado (424 mg, 10,1 mmol) y 20 mL de agua. La mezcla se agitó durante 2 días a temperatura ambiente. Se concentró al vacío para eliminar THF y se trató con cuidado con HC1 1 N hasta que el pH alcanzó 3. Se trituró un sólido blanco de la solución. Se aisló usando un embudo de Büchner, se lavó con agua fría, se secó en horno de vacío para dar el compuesto 74.3 (1,12 g, 68% para 2 etapas). MS experimental para C15H13N5O2 S como (M+H)+ 328,1.
[0400] Etapa 3: Ácido carboxílico 74.3 (1,12 g, 3,4 mmol) se disolvió en 60 mL de DMF. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (0,98 g, 5,1 mmol) e hidrato de HOBt (0,69 g, 5,1 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. A ello se añadió luego amoníaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 34 mL, 17 mmol). La mezcla se agitó durante 2 horas. Luego se concentró al vacío para eliminar dioxano. A ello se añadió 300 mL de agua. Se trituró un sólido amarillo claro. Se aisló usando un embudo de Büchner, se lavó con agua fría, se secó en horno de vacío para dar el compuesto 74.4 (1,12 g, 99%). MS experimental para Ci5Hi4N6OS como (M+H)+ 327,1.
[0401] Etapa 4: El compuesto 74.4 (50 mg, 0,15 mmol) se disolvió en 4 mL de NMP. A ello se añadió MCPBA (65% puro, 45 mg, 0,17 mmol). Se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. A ello se añadieron luego cis-1 , 2-diaminociclohexano (53 pL, 0,45 mmol) y DIEA (78 yL, 0,45 mmol). La mezcla se agitó durante 50 minutos en baño a 90 °C. Esta mezcla luego se sometió a HPLC preparativa para aislar el compuesto racémico del titulo 74. MS experimental para C2oH24N80 como (M+H)+ 393, 2. UV ?=239, 304 nm. RMN (CD3OD) : d 8,41 (s, 1H) , 8,12 (m, 1H) , 7,70 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,63 (d, J=7,2 Hz, 2H) , 7,62 (s, 1H) , 6,43 (dd, J=2,4, 2,0 Hz, 1H), 4,27 (m, 1H) , 3,60 (m, 1H) , 1,83-1,45 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 4.4-(4-(l,2, 3-tiadiazol-4-il ) fenilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0402] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 3 con 4- (1,2,3-tiadiazol-4-il) anilina para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para Ci9H22N8OS como (M+H)+ 411,2. UV ?=231, 311 nm. RMN (CD3OD) : d 9,24 (s, 1H) , 8,56 (s, 1H) , 8,15 (d, J=5,6 Hz, 2H), 7,84 (m, 2H) , 4,43 (m, 1H) , 3,76 (m, 1H) , 1,91-1,60 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 5.2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4- (piridin-4-il ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0403] Etapa 1: Dicloropirimidina 72.3 (3,02 g, 13,6 mmol) se disolvió en 100 mL de DMF y se agitó a temperatura ambiente. A ello se añadieron 4-yodoanilina 77.1 (3, 59 g, 16,3 mmol) en una porción y etildiisopropilamina (DIEA, 4,25 mL, 24,4 mmol) gota a gota usando una jeringa. La mezcla se agitó durante 2,5 horas a temperatura ambiente. A ello se añadió luego tiometoxido de sodio (2,38 g, 34 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h, se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera tres veces, se secó sobre MgS04, se trató con carbón activado, se concentró al vacio para obtener el compuesto crudo 77.2 en forma de un sólido marrón claro (4,50 g, 79%). MS experimental para ??4??4??3023 como (M+H)+ 416,1.
[0404] Etapa 2: Yodobenceno 77.2 (620 mg, 1,5 mmol) se disolvió en 20 mL de dioxano y 10 mL de agua. A ello se añadieron ácido borónico 77.3 (406 mg, 3,3 mmol), Na2CC>3 ( 480 mg, 4,5 mmol) y Pd(PPh3)2Cl2 (211 mg, 0,3 mmol). La mezcla se desgasificó usando corriente de argón durante 3 minutos y se agitó en baño de 85 °C bajo argón durante 1 hora. La mezcla se concentró y se diluyó con cloroformo. Se lavó con salmuera, se secó sobre MgS04, se concentró y se sometió a columna flash para aislar el compuesto 77.4 (300 mg, 55%). S experimental para Ci9Hi8N402S como (M+H) + 367,1.
[0405] Etapa 3: El éster etílico 77.4 (300 mg, 0,82 mmol) se disolvió en 30 mL de THF. A ello se añadieron hidróxido de litio hidratado (104 mg, 2,46 mmol) y 10 mL de agua. La mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Se concentró al vacío para eliminar THF y se trató con cuidado con HC1 1 N hasta que el pH alcanzó 3. Se trituró un sólido amarillo claro de la solución. Se aisló usando un embudo de Büchner, se lavó con agua fría, se secó en horno de vacío para dar el compuesto 77.5 (250 mg, 90%). MS experimental para Ci7Hi N402S como (M+H)+ 339,1.
[0406] Etapa 4: Ácido carboxílico 77.5 (250 mg, 0,74 mmol) se disolvió en 10 mL de DMF. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (213 mg, 1,1 mmol) e hidrato de HOBt (150 mg, 1,1 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 90 minutos. A ello se añadió luego amoníaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 7,4 mL, 3,7 mmol) . La mezcla se agitó durante la noche. Luego se concentró al vacío para eliminar dioxano. A ello se añadió agua 100 mL. Se trituró un sólido amarillo claro. Se aisló usando un embudo de Büchner, se lavó con agua fría, se secó en horno de vacío para dar el compuesto 77.6 (230 mg, 92%) . MS experimental para Ci7Hi5N5OS como (M+H)+ 338,1.
[0407] Etapa 5: El compuesto 77.6 (25 mg, 0,074 mmol) se disolvió en 3 mL de NMP. A ello se añadió MCPBA (65% puro, 22 mg, 0,081 mmol). Se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. A ello se añadió luego cis-1 , 2-diaminociclohexano (70 pL, 0,60 mmol) . La mezcla se agitó durante 30 minutos en baño a 90 °C. Esta mezcla luego se sometió a HPLC preparativa para aislar el compuesto racémico del título 77. MS experimental para C22H25 7O como (M+H)+ 404,2. UV ?=238, 337 nm.
Ejemplo 6.2-( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (piridin-3-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0408] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 5 con ácido piridin-3-borónico para reemplazar ácido piridin-4-borónico 77.3.
MS experimental para C22H25N70 como (M+H)+ 404, 2. UV ?=239, 311 nm, E emplo 7.2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 4- (piridin-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0409] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con 4-(piridin-2-il) anilina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para C22H25 70 como (M+H)+ 404,2. UV ?=241, 330 nm. Ejemplo 8.2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (pirimidin-5-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0410] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 5 con ácido pirimidin-5-borónico para reemplazar ácido piridin-4-borónico 77.3. MS experimental para C2iH24 80 como (M+H)+ 405,2. UV ?=243. 308 nm. RMN (CD3OD) : d 9,13 (s, 1H) , 9,08 (s, 2H) , 8,55 (s, 1H) , 7,82 (m, 4H), 4,44 (m, 1H) , 3,74 (m, 1H) , 1,94-1,60 (m, 8H) ppm. E emplo 9.2- ( (1R,2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4 - (tiazol-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0411] Etapa 1: El compuesto 81.1 se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 5 para 77.3 con 4- (tiazol-4-il) anilina para reemplazar la anilina 77.1. MS experimental para C15H13N5OS2 como (M+H)+ 344, 1.
[0412] Etapa 2: El compuesto 81.1 (100 mg, 0,29 mmol) se disolvió en 4 mL de NMP. A ello se añadió MCPBA (65% puro, 93 mg, 0,35 mmol) . Se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. A ello se añadieron luego una solución de (lS,2R)-2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo 81.2 (0,3 M, 2 mL, 0,60 mmol) y DIEA (156 i , 0,90 mmol) . La mezcla se agitó durante 1 hora en baño a 90 °C. Esta mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con solución saturada acuosa de NaHC03 dos veces y agua. La fase orgánica se secó sobre MgS04 y se concentró al vacio para obtener el compuesto crudo 81.3. MS experimental para C25H31N703S como (M+H)+ 510,2.
[0413] Etapa 3: El compuesto 81.3 se agitó en una mezcla 1:1 de TFA y diclorometano a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se concentró al vacio y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto del titulo. MS experimental para C20H23 OS como (M+H)+ 410,2. UV ?=239, 313 nm. RMN (CD3OD) : d 9,07 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,53 (s, 1H) , 8,01 (d, J=8,8 Hz, 2H) , 7,91 (s, 1H), 7,71 (d, J=7,2 Hz, 2H) , 4,40 (m, 1H) , 3,74 (m, 1H) , 1,94-1,59 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 10. 4- (4 - ( 1 , 2 , 3-tiadiazol-4-il ) fenilamino) -2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0414] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 y el Ejemplo 9 con 4- ( 1 , 2 , 3-tiadiazol-4-il ) anilina para reemplazar la anilina 74.1.
MS experimental para C19H22N8OS como (M+H)+ 411,2. UV ?=233, 308 nm. RMN (CD30D) : d 9,24 (s, 1H) , 8,56 (s, 1H) , 8,15 (d, J=5,6 Hz, 2H) , 7,84 (m, 2H) , 4,43 (m, 1H) , 3,76 (m, 1H) , 1,91-1,60 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 11. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4 - ( 4 - (piridin-3- il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0415] compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 5 con ácido piridin-3- borónico para reemplazar ácido piridin-4-borónico 77.3. MS experimental para C22H25 7O como (M+H)+ 404, 2. UV ?=240, 311 nm. RMN (CD3OD) d 9,05 (d, J=2,0 Hz, 1H) , 8,70 (dd, J=5,6, 1,2 Hz, 1H), 8,61 (d, J=6,8 Hz, 1H) , 8,56 (s, 1H) , 7,93-7,81 (m, 5H) , 4,45 (m, 1H), 3,75 (m, 1H) , 1,92-1,59 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 12. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- (pirimidin-5- il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0416] Etapa 1: El compuesto 83.1 se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 para 72.7 con 3- (pirimidin-5-il ) anilina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para C21H15N9O2 como (M+H)+ 426,1.
[0417] Etapa 2: El compuesto 83.1 (150 mg, 0,35 mmol) se disolvió en 5 mL de NMP. A ello se añadieron una solución de ( 1S, 2R) -2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo 81.2 (0,3 M, 2,3 mL, 0,70 mmol) y DIEA (185 }i~Lf 1,06 mmol) . La mezcla se agitó durante 40 minutos en baño a 90 °C. Esta mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera tres veces. La fase orgánica se secó sobre MgS04 y se concentró al vacio para obtener el compuesto crudo 83.2. MS experimental para C26H32 803 como (M+H)+ 505,2.
[0418] Etapa 3: El compuesto 83.2 se agitó en una mezcla 1:1 de TFA y diclorometano a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se concentró al vacio y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto del titulo. MS experimental para C2iH24 80 como (M+H)+ 405, 2. UV ?=245 nm. RMN (CD30D) : d 9,17 (s, 1H) , 9,10 (s, 2H), 8,55 (s, 1H) , 8,11 (m, 1H) , 7,70 (m, 1H) , 7,58 (m, 2H), 4,37 (m, 1H) , 3,61 (m, 1H) , 1,91-1,50 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 13. 2 - ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- (piridin-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0419] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 5 y el Ejemplo 9 con ácido piridin-3-borónico para reemplazar ácido piridin-4-borónico 77.3. S experimental para C22H25 70 como (M+H)+ 404,2. UV ?=240, 312 nm.
Ejemplo 14. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( - (tiazol-5-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida [042.0] Etapa 1: Yodobenceno 77.2 (400 mg, 0,96 mmol) se disolvió en 10 mL de tolueno. A ello se añadieron 5-tributilstanniltiazol (430 mg, 1,15 mmol) y Pd(PPh3)4 (115 mg, 0,1 mmol). La mezcla se desgasificó usando corriente de argón durante 3 minutos y se calentó bajo una atmósfera de argón durante 1 hora. Se concentró al vacio y se sometió a columna flash de sílice para aislar el compuesto 85.2 (160 mg, 45%) . S experimental para Ci7Hi6N402S2 como (M+H)+ 373, 1.
[0421] Etapa 2: El éster etílico 85.2 (160 mg, 0,43 mmol) se disolvió en 30 mL de THF. A ello se añadieron hidróxido de litio hidratado (55 mg, 1,3 mmol) y 5 mL de agua. La mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Se concentró al vacío para eliminar THF y se trató con cuidado con HC1 1 N hasta que el pH alcanzó 3. Se trituró un sólido amartillo claro de la solución. Se aisló usando un embudo de Büchner, se lavó con agua fría, se secó en horno de vacío para dar el compuesto 85.3 (120 mg, 81%) . MS experimental para Ci5Hi2N402S2 como (M+H)+ 345, 1.
[0422] Etapa 3: Ácido carboxílico 85.3 (100 mg, 0,29 mmol) se disolvió en 10 mL de DMF. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (86 mg, 0,45 mmol) e hidrato de HOBt (61 mg, 0,45 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. A ello se añadió luego amoníaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 3 mL, 1,5 mmol). La mezcla se agitó durante la noche. Luego se concentró al vacío para eliminar dioxano. A ello se añadió agua 100 mL. Se trituró un sólido amarillo claro. Se aisló usando un embudo de Büchner, se lavó con agua fría, se secó en horno de vacío para dar el compuesto 85.4 (75 mg, 76%). MS experimental para C15H13N5OS2 como (M+H)+ 344,1.
[0423] Etapa 4: El compuesto 85.4 (75 mg, 0,22 mmol) se disolvió en 5 mL de NMP. A ello se añadió CPBA (65% puro, 64 mg, 0,24 mmol) . Se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. A ello se añadieron luego una solución de (lS,2R)-2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo 81.2 (0,3 M, 1,5 mL, 0,45 mmol) y DIEA (115 pL, 0,66 mmol). La mezcla se agitó durante 90 minutos en baño a 90 °C. Esta mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con solución acuosa saturada de NaHC03 dos veces y agua. La fase orgánica se secó sobre gS04 y se concentró al vacío para obtener el compuesto crudo 85.5. MS experimental para C25H3i 703S como (M+H)+ 510,2.
[0424] Etapa 5: El compuesto 85.5 se agitó en una mezcla 1:1 de TFA y diclorometano a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se concentró al vacío y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto del título. MS experimental para C20H23N7OS como (M+H)+ 410,2. UV ?=240, 318 nm.
Ejemplo 15. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4-(4-(tiazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0425] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 14 con 2-tributilstanniltiazol para reemplazar 5-tributilstanniltiazol 85.1. S experimental para C20H23 7OS como (M+H)+ 410,2. UV ?=243. 332 nm. RMN (CD3OD) : d 8,53 (s, 1H) , 8,00 (d, J=8,0 Hz, 2H), 7,86 (d, J=3,2 Hz, 1H) , 7,77 (d, J=8,0 Hz, 2H) , 7,61 (d, J=3,2 Hz, 1H) , 4,42 (m, 1H) , 3,74 (m, 1H) , 1,92-1,60 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 16. 4- ( 4- ( lH-pirazol-l-il ) fenilamino) -2-((lR,2S)-2-aminocielohexi lamino) pirimidin-5-carboxamida
[0426] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 y el Ejemplo 9. MS experimental para C20H2 8O como (M+H)+ 393, 2. UV ?=240, 302 nm. RMN (CD3OD) : d 8,41 (s, 1H) , 8,12 (m, 1H) , 7,70 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,63 (d, J=7,2 Hz, 2H) , 7,62 (s, 1H) , 6,43 (dd, J=2,4, 2,0 Hz, 1H), 4,27 (m, 1H) , 3,60 (m, 1H) , 1,83-1,45 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 17. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- (piridin-3-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0427] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 y el Ejemplo 9 con 3- (piridin-3-il ) anilina para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C22H25N7O como (M+H)+ 404, 2. UV ?=248 nm. RMN (CD3OD) : d 9,05 (s, 1H), 8,73 (m, 1H) , 8,59 (m, 1H) , 8,54 (s, 1H) , 8,00 (s amplio, 1H) , 7,92 (m, 1H) , 7,80 (m, 1H) , 7,63-7,61 (m, 2H), 4,33 (m, 1H) , 3,62 (m, 1H) , 1,91-1,47 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 18. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4-morfolinofenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0428] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 5 y el Ejemplo 9 con 4-morfolinoanilina para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C21H29N702 como (M+H)+ 412,2. UV ?=243. 294 nm. RMN (CD3OD) : d 8,45 (s, 1H) , 7,49 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,04 (d, J=9,2 Hz, 2H) , 4,30 (m, 1H) , 3,85 (m, 4H) , 3,71 (m, 1H) , 3,19 (m, 4H) , 1,88-1,56 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 19. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (pirimidin-5-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0429] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 5 y el Ejemplo 9 con ácido pirimidin-5-borónico para reemplazar ácido piridin-4-borónico 77.3. MS experimental para C2iH24N80 como (M+H)+ 405,2. UV ?=242, 307 nm. RMN (CD3OD) : d 9,13 (s, 1H) , 9,08 (s, 2H) , 8,55 (s, 1H), 7,82 (m, 4H) , 4,44 (m, 1H) , 3,74 (m, 1H) , 1,95-1,58 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 20. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( - (morfolinometil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0430] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 y el Ejemplo 9 con 4- (morfolinometil ) anilina para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C22H31 7O2 como (M+H)+ 426,3. UV ?=244, 293 nm. Ejemplo 21. 2-( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) -4- (4- (piridazin-4 -il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0431] compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 14 con 4-tributilstannilpiridazina para reemplazar 5-tributilstanniltiazol 85.1. MS experimental para C2iH24N80 como (M+H)+ 405,3. UV ?=239, 327 nm. RMN (CD3OD) : d 9,59 (m, 1H) , 9,21 (d, J=9,2 Hz, 1H) , 8,58 (s, 1H), 8,08 (m, 1H) , 7,96-7,85 (m, 5H) , 4,47 (m, 1H) , 3,77 (m, 1H) , 1,93-1,59 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 22. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (pirazin-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0432] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 14 con 2-tributilstannilpirazina para reemplazar 5-tributilstanniltiazol 85.1. MS experimental para C2iH24 80 como (M+H)+ 405,3. UV ?=235, 319 nm. RMN (CD3OD) : d 9,11 (s, 1H) , 8,66 (s amplio, 1H) , 8,56 (s, 1H) , 8,51 (s amplio, 1H) , 8,14 (m, 2H) , 7,85 (m, 2H) , 4,44 (m, 1H), 3,77 (m, 1H) , 1,92-1,58 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 23. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (piridin-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0433] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 5 y el Ejemplo 9. M experimental para C22H25N7O como (M+H)+ 404, 2. UV ?=239, 334 nm RMN (CD3OD) : d 8,76 (d, J=6,8 Hz, 2H) , 8,60 (s, 1H) , 8,29 (d J=6,4 Hz, 2H) , 8, 05-7, 96 (m, 4H) , 4,49 (m, 1H) , 3,76 (m, 1H) 1,93-1,60 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 24. 4- ( 4- ( 1H-1 , 2 , 3-triazol-l-il ) fenilamino ) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0434] Etapa 1: El compuesto 72.3 (1,18 g, 5,3 mmol) se disolvió en 40 mL de NMP y se agitó a temperatura ambiente. A ello se añadieron clorhidrato de 4-azidoanilina 95.1 (1,00 g, 5,9 mmol) y luego DIEA (2,21 mL, 12,7 mmol) gota a gota usando siringe. La mezcla se agitó durante 1 hora y se diluyó con acetato de etilo. Se lavó con salmuera cuatro veces, se secó y se concentró al vacio para obtener el compuesto 95.2 (1,59 g, 94%). MS experimental para CI3HIIC1N602 como (M+H)+ 319,2.
[0435] Etapa 2: El éster etílico 95.2 (1,59 g, 5,0 mmol) se disolvió en 50 mL de THF. A ello se añadieron hidróxido de litio hidratado (420 mg, 10 mmol) y 5 mL de agua. La mezcla se agitó durante 4 horas y a ello se añadió con cuidado solución 3 N de HCl hasta que el pH alcanzó 3. La mezcla se concentró al vacío para eliminar THF. El residuo se extrajo en acetato de etilo y se lavó con salmuera dos veces. Se secó y se concentró al vacio para dar el compuesto 95.3 (1,58 g, 99%) en forma de un sólido. MS experimental para CnHClN602 como (M+H)+ 291,2.
[0436] Etapa 3: Ácido carboxilico 95.3 (1,58 g, 5,0 mmol) se disolvió en 40 mL de DMF. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (1,44 g, 7,5 mmol) e hidrato de HOBt (1,02 g, 7,5 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 50 minutos. A ello se añadió luego amoniaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 50 mL, 25 mmol) . La mezcla se agitó durante 7 horas. Luego se concentró al vacio y un sólido se trituró. Se recogió, se lavó y se secó en horno de vacio para obtener el compuesto 95.4 (1,30 g, 67%). MS experimental para C17H12N10O2 como (M+H)+ 389, 3.
[0437] Etapa 4: El compuesto 95.4 (300 mg, 0,77 mmol) se disolvió en 20 mL de NMP. A ello se añadieron una solución de ( 1S, 2R) -2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo 81.2 (0,3 M, 5,1 mL, 1,5 mmol) y DIEA (400 µL, 2,3 mmol). La mezcla se agitó durante 90 minutos en baño a 90 °C. Esta mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera tres veces. La fase orgánica se secó sobre MgS04, se concentró al vacio y se sometió a columna flash para obtener el compuesto 95.5 (420 mg, 90%). MS experimental para C22H29N9O3 como (M+H)+ 467,3.
[0438] Etapa 5: El compuesto 95.5 (420 mg, 0,70 mmol) se agitó en 10 mL de metanol. A ello se añadieron trimetilsililacetileno (200 mg, 1,4 mmol) , Cul (400 mg, 2,1 mmol) y DBU (313 L, 2,1 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. Se diluyó con acetato de etilo, se lavó con solución acuosa de cloruro de amonio saturado y salmuera dos veces. La fase orgánica se secó, se filtró y se concentró al vacio para obtener el compuesto crudo 95.6. MS experimental para C24H31N9O3 como (M+H) + 494,4.
[0439] Etapa 6: El compuesto crudo 95.6 se agitó en una mezcla 1:1 de TFA y diclorometano a temperatura ambiente durante 90 minutos. Se concentró al vacio y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto del titulo. MS experimental para C19H23 9O como (M+H)+ 394, 4. UV ?=242, 300 nm.
Ejemplo 25. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) -4- (4- (1-metil-lH-imidazol-2-il ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0440] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 14 con l-metil-2-tributils.tannilimidazol para reemplazar 5-tributilstanniltiazol 85.1. MS experimental para C2iH26 80 como (M+H)+ 407, 4. UV ?=241, 300 nm. RMN (CD3OD) : d 8,97 (s, 1H) , 8,59 (s, 1H) , 7,90 (m, 2H) , 7,64 (m, 3H), 4,46 (m, 1H) , 3,91 (s, 3H) , 3,73 (m, 1H) , 1,92-1,58 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 26. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (2-oxopiridin-1 (2H) -il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0441] Etapa 1: Yodobenceno 77.2 (440 mg, 1,06 mmol) se disolvió en 10 mL de DMSO. A ello se añadieron 2-hidroxipiridina 97.1 (202 mg, 2,12 mmol), K2C03 (293 mg, 2,12 mmol), Cul (61 mg, 0,32 mmol) y 8-hidroxiquinolina (46 mg, 0,32 mmol). La mezcla se agitó en baño de 120 °C durante 5 horas. A la mezcla se añadieron hidróxido de litio hidratado (126 mg, 3 mmol) y 10 mL de agua. La mezcla se agitó durante la noche. A ello se añadió con cuidado HC1 1 N hasta que el pH alcanzó 3. La mezcla se filtró a través de celite y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto 97.2 (75 mg, 20%). MS experimental para C17H14N4O3S como (M+H)+ 354, 3.
[0442] Etapa 2: Ácido carboxilico 97.2 (75 mg, 0,21 mmol) se disolvió en 10 mL de DMF. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (61 mg, 0,32 mmol) e hidrato de HOBt (44 mg, 0,32 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 90 minutos. A ello se añadió luego amoniaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 2 mL, 1 mmol) . La mezcla se agitó durante 2 horas. Luego se concentró al vacio y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto 97.3 (40 mg, 53%). MS experimental para Ci7Hi5N502S como (M+H) + 355, 3.
[0443] Etapa 3: El compuesto 97.3 (40 mg, 0,11 mmol) se disolvió en 5 mL de N P. A ello se añadió MCPBA (65% puro, 37 mg, 0,14 mmol). Se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. A ello se añadieron luego una solución de (lS,2R)-2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo 81.2 (0,3 , 0,73 mL, 0,22 mmol) y DIEA (115 µL, 0,66 mmol). La mezcla se agitó durante 1 hora en baño a 90 °C. Esta mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con solución acuosa saturada de NaHC03 dos veces y agua. La fase orgánica se secó sobre MgS04 y se concentró al vacio para obtener el compuesto crudo 97.3. MS experimental para C27H33N704 como (M+H) + 520, .
[0444] Etapa 4: El compuesto 97.4 se agitó en una mezcla 4:1 de TFA y diclorometano a 50° C durante 1 hora. Se concentró al vacío y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto del título. MS experimental para C22H25N7O2 como (M+H)+ 420,4. UV ?=241, 296 nm.
[0445] Ejemplo 27. 4- ( 4- ( lH-imidazol-l-il ) fenilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0446] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 3 y el Ejemplo 9 con 4- ( lH-imidazol-l-il ) anilina para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C2oH24N80 como (M+H)+ 393, 4. UV ?=246, 292 nm. RMN (CD3OD) : d 9,41 (s, 1H) , 8,59 (s, 1H) , 8, 05-7, 95 (m, 3H), 7,79-7,76 (m, 3H) , 4,46 (m, 1H) , 3,71 (m, 1H) , 1,93-1,59 (ra, 8H) ppm.
Ejemplo 28. 2-( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( - (piperidin-1-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0447] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 y el Ejemplo 9 con 4- (piperidin-l-il ) anilina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para C22H31N7O como (M+H)+ 410,4. UV ?=24ß, 287 nm. RMN (CD3OD) : d 8,55 (s, 1H) , 7,81 (m, 2H) , 7,59 (m, 2H) , 4,41 (m, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,58 (m, 4H) , 2,02 (m, 4H) , 1,90-1,80 (m, 8H), 1,60 (m, 2H) ppm.
Ejemplo 29. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3-fluoro-4-morfolinofenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0448] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 y el Ejemplo 1 con 3-fluoro-4-morfolinoanilina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para C2iH28 N702 como (M+H)+ 430, 4. UV ?=239, 309 nm. RMN (CD3OD) : d 8,49 (s, 1H) , 7,63 (m, 1H) , 7,22 (m, 1H) , 7,08 (dd, J=9,6, 8,8 Hz, 1H) , 4,34 (m, 1H) , 3,85 (m, 4H) , 3,76 (m, 1H), 3,08 (m, 4 H) , 1,92-1,58 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 30. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4- ( 3- (trifluorometil) -lH-pirazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0449] compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 3 y el Ejemplo 9 con 4- (3- (trifluorometil) -lH-pirazol-l-il) anilina para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C21H23 F3N8O como (M+H)+ 461,4. UV ?=241, 236 nm. RMN (CD3OD) : d 8,54 (s, 1H) , 8,38 (s amplio, 1H) , 7,85-7,80 (m, 4H) , 6,84 (d, J=2,0 Hz, 1H) , 4,41 (m, 1H) , 3,71 (m, 1H), 1,91-1,59 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 31. 4- ( 3- ( lH-pirazol-l-il ) fenilamino ) -2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0450] compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 3 y el Ejemplo 3- ( lH-pirazol-l-il ) anilina para reemplazar la anilina 74.] experimental para C20H24N8O como (M+H)+ 393,4. UV ?=247 nm.
Ejemplo 32. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-fluoro-4 pirazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0451] Una mezcla de 3 , 4-difluoronitrobenceno (1,00 mL, 9,03 mmol), pirazol (0,615 g, 9,04 mmol) y K2C03 (2,50 g, 18,1 mmol) en DMF (10 mL) se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El agua (30 mL) se añadió para inducir una precipitación. El precipitado se recogió, se secó al vacio para dar 1- (2-fluoro-4-nitrofenil) -lH-pirazol en forma de un sólido (1,80 g) . MS 208,3 (M+H)
[0452] Una suspensión de 1- (2-fluoro-4-nitrofenil) -lH-pirazol (1,80 g, 8,70 mmol) y Pd-C (10%, 0,200 g) en MeOH (20 mL) (con 10 gotas de HC1 6 N) se hidrogenó bajo balón de H2 durante la noche. La mezcla se filtró a través de celite. El filtrado se concentró al vacio. El residuo se secó al vacio para dar 3-fluoro-4- (1H-pirazol-l-il) bencenamina en forma de un sólido (1,55 g) . MS 178,3 (M+H)
[0453] A una solución de 2 , 4-dicloropirimidin-5-carboxilato de etilo (280 mg, 1,27 mmol) y 3-fluoro-4- ( lH-pirazol-1-il ) bencenamina (230 mg, 1,30 mmol) en CH3CN (8 mL) a temperatura ambiente, se añadió DIEA (0,442 mL, 2,54 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 48 h. El agua (15 mL) se añadió para inducir una precipitación. El precipitado se recogió, se secó al vacio para dar 2-cloro-4- (3-fluoro-4- (lH-pirazol-1-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxilato de etilo en forma de un sólido (275 mg) . MS 362,3 y 364,3 (M+H, patrón de Cl)
[0454] A una solución de 2-cloro-4- (3-fluoro-4- (lH-pirazol-1-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxilato de etilo (275 mg, 0,761 mmol) en THF (4 mL) , LiOH 1 N acuoso (1,25 mL, 1,25 mmol) se añadió. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Después de acidificar la mezcla con HCl 1 N, los sólidos blancos se precipitaron, que se recolectaron y se secaron al vacio para dar ácido 2-cloro-4- ( 3-fluoro-4- ( lH-pirazol-1-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxílico (230 mg) . MS 334,3 y 336,3 (M+H, patrón de Cl)
[0455] A una solución de ácido 2-cloro-4- ( 3-fluoro-4- ( 1H-pirazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxílico (230 mg, 0,690 mmol) y HOBt (158 mg, 1,03 mmol) en DMF (4 mL) , se añadió EDC (200 mg, 1,04 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. El amoniaco (0,5 M en dioxano, 6,00 mL, 3,00 mmol) se añadió. Se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El agua y EtOAc se añadieron. La fase orgánica se separó, se lavó con HC1 1 N, luego con 5% de NaHC03, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio para dar 2- ( ??-benzo [d] [ 1 , 2 , 3 ] triazol-1-iloxi)-4-(3-fluoro-4-( lH-pirazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida (184 mg) . MS 432,4 (M+H)
[0456] Una solución de ( 1S, 2R) -2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo (0,30 M en NMP, 2,00 mL, 0,600 mmol) en NMP (2 mL) se añadió a 2- ( ??-benzo [d] [ 1 , 2 , 3 ] triazol-l-iloxi ) -4- ( 3-fluoro-4- ( 1H-pirazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida (184 mg, 0,427 mmol). DIEA (0,150 mL, 0,863 mmol) también se añadió. La mezcla se agitó a 90 C durante la noche. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, se añadió agua para inducir una precipitación. El precipitado se recogió, luego se disolvió en CH2C12 (5 mL) y TFA (4 mL) . La solución se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Se concentró al vacio. El residuo se purificó por HPLC para dar el compuesto del titulo (103 mg) . MS 411,5 (M+H). UV D=238,8, 304,8 nm.
Ejemplo 33. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3-fluoro-4-(tiazol-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0457] Una mezcla de 2 , 5-diyodofluorobenceno (1,36 g, 3,90 mmol) , ter-butilcarbamato (0,454 g, 3,88 mmol), xantphos (0,233 g, 0,40 mmol) y Cs2C03 (polvo seco, 2,48 g, 7,61 mmol) en THF (12 mL) se desgasificó con Ar antes de cargar con Pd2(dba)3 (0,071 g, 0, 078 mmol). Se agitó a 75 °C durante la noche. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, se añadieron agua y EtOAc. La fase orgánica se separó, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio. El residuo se cargó a una columna flash, se eluyó con 0-10% de EtOAc en hexano para dar 3-fluoro-4-yodofenilcarbamato de ter-butilo (716 mg) .
[0458] Una solución de 3-fluoro-4-yodofenilcarbamato de ter-butilo (500 mg, 1,48 mmol) y 4- (tributilstannil) tiazol (0,578 mL, 1,80 mmol) en dioxano (6 mL) se desgasificó con Ar antes de cargar con Pd(Ph3P)4 (170 mg, 0,147 mmol) . Se agitó a 100 °C durante 34 h, luego se concentró al vacio. El residuo se cargó a una columna flash, se eluyó con 0-25% de EtOAc en hexano para dar 3-fluoro-4- (tiazol-4-il ) fenilcarbamato de ter-butilo (270 mg) . MS 295.3 (M+H)
[0459] Una solución de 3-fluoro-4- (tiazol-4-il ) fenilcarbamato de ter-butilo (270 mg, 0,92 mmol) en CH2C12 (2 mL) y TFA (4 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 60 min. Luego se concentró al vacio. El residuo se disolvió en CH2C12 (20 mL) , que se lavó con 5% de NaHC03, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio para dar 3-fluoro-4- (tiazol-4-il) bencenamina (145 mg) en forma de base libre. MS 195.2 (M+H)
[0460] A una solución de 2 , 4-dicloropirimidin-5-carboxilato de etilo (165 mg, 0,746 mmol) y 3-fluoro-4- (tiazol-4-il ) bencenamina (145 mg, 0, 747 mmol) en CH3CN (5 mL) a temperatura ambiente, se añadió DIEA (0,260 mL, 1,49 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante, durante lo cual los sólidos se precipitaron. El precipitado se recogió, se secó al vacio para dar 2-cloro-4- (3-fluoro-4- ( tiazol-4-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxilato de etilo en forma de un sólido (186 mg) . MS 379,3 y 381.3 (M+H, patrón de Cl)
[0461] A una suspensión de 2-cloro-4- ( 3-fluoro-4- (tiazol-4-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxilato de etilo (186 mg, 0,491 mmol) en THF (4 mL) , LiOH 1 N acuoso (1,00 mL, 1,00 mmol) se añadió. La suspensión se volvió clara con agitación. La mezcla se agitó luego a temperatura ambiente durante la noche. Después de acidificar la mezcla con HC1 1 N, los sólidos blancos se precipitaron, que se recolectaron y se secaron al vacio para dar ácido 2-cloro-4- ( 3-fluoro-4- (tiazol-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxilico (158 mg) . MS 351,2 y 353,3 (M+H, patrón de Cl)
[0462] A una solución de ácido 2-cloro-4- ( 3-fluoro-4- (tiazol-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxílico (158 mg, 0,450 mmol) y HOBt (103 mg, 0,673 mmol) en D F (4 mL) , se añadió EDC (130 mg, 0,678 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. El amoniaco (0,5 M en dioxano, 4,50 mL, 2,25 mmol) se añadió. Se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El agua y EtOAc se añadieron. La fase orgánica se separó, se lavó con 5% de NaHCC , se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio. El residuo se disolvió en H20 y CH3CN (50:50). La materia insoluble se recogió y se secó al vacio para dar 2- ( ??-benzo [d] [ 1 , 2 , 3 ] triazol-1-iloxi) -4- (3-fluoro-4- (tiazol-4-il ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida en forma de un sólido (36 mg) . MS 449,4 (M+H)
[0463] Una solución de ( 1S, 2R) -2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo (0,30 M en NMP, 1,00 mL, 0,300 mmol) en NMP (1 mL) se añadió a 2- (??-benzo [d] [1, 2, 3] triazol-l-iloxi ) -4- (3-fluoro-4-(tiazol-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida (12 mg, 0,027 mmol). DIEA (0,050 mL, 0,29 mmol) también se añadió. La mezcla se agitó a 90 C durante lh. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, se añadió TFA (1 mL) . La solución se agitó a temperatura ambiente durante 60 min. La mezcla se purificó por HPLC para dar el compuesto del titulo (5 mg) . MS 428, 4 (M+H) . UV ?=229,8, 313,8 nm.
Ejemplo 3 . 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-fluoro-4- (1H-imidazol-l-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0464] Una mezcla de 3 , -difluoronitrobenceno (1,00 mL, 9,03 mmol), imidazol (0,615 g, 9,04 mmol) y K2C03 (2,50 g, 18,1 mmol) en DMF (10 mL) se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El agua (20 mL) se añadió para inducir una precipitación. El precipitado se recogió, se secó al vacio para dar 1- (2-fluoro-4-nitrofenil) -lH-imidazol en forma de un sólido (1,81 g) . MS 208,2 (M+H)
[0465] Una mezcla de 1- (2-fluoro-4-nitrofenil ) -lH-imidazol (1,81 g, 8,74 mmol) y Pd-C (10%, 0,200 g) en MeOH (20 mL) (que contenia 10 gotas de HC1 6 N) se hidrogenó bajo balón de H2 durante la noche. La mezcla se filtró a través de celite. El filtrado se concentró al vacio. El residuo se secó al vacio para dar 3-fluoro-4- ( IH-imidazol-l-il ) bencenamina en forma de un sólido (1,37 g) . S 178,3 (M+H)
[0466] A una solución de 2 , 4-dicloropirimidin-5-carboxilato de etilo (280 mg, 1,27 mmol) y 3-fluoro-4- ( lH-imidazol-1-il) bencenamina (230 mg, 1,30 mmol) en CH3CN (8 mL) a temperatura ambiente, se añadió DIEA (0, 442 mL, 2,54 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El agua y EtOAc se añadieron. La fase orgánica se separó, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio para dar 2-cloro- -( 3-fluoro-4- ( lH-imidazol-1-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxilato de etilo en forma de un sólido (383 mg) . MS 362,4 y 364,3 (M+H, patrón de Cl)
[0467] A una solución de 2-cloro-4- ( 3-fluoro-4- ( lH-imidazol-1-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxilato de etilo (383 mg, 1,06 mmol) en THF (5 mL) , se añadió LiOH 1 N acuoso (2,00 mL, 2,00 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. THF se eliminó al vacio. Después de acidificar con HC1 1 N, la mezcla se purificó por HPLC para dar ácido 2-cloro-4- ( 3-fluoro-4- (IH-imidazol-l-il) fenilamino ) pirimidin-5-carboxílico (68 mg) . MS 334,1 y 336,1 (M+H, patrón de Cl)
[0468] A una solución de ácido 2-cloro-4- ( 3-fluoro-4- ( 1H-imidazol-l-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxilico (68 mg, 0,20 mmol) y HOBt (63 mg, 0,41 mmol) en DMF (2 mL) , se añadió EDC (60 mg, 0,31 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. El amoniaco (0,5 M en dioxano, 0,800 mL, 0,40 mmol) se añadió. Se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Más EDC (100 mg, 0,52 mmol) se añadió. Se agitó durante anoter 24 h. El agua y EtOAc se añadieron. La fase orgánica se separó, se lavó con 5% de NaHCC>3, se secó sobre Na2SC>4, se concentró al vacio para dar 2- (??-benzo [d] [1, 2, 3] triazol-l-iloxi) -4- (3-fluoro-4- (1H-imidazol-l-il ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida (57 mg) . MS 432,2 (M+H)
[0469] Una solución de ( 1S , 2R) -2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo (0,30 M en NMP, 1,00 mL, 0,300 mmol) en NMP (1 mL) se añadió a 2- ( ??-benzo [d] [ 1 , 2 , 3 ] triazol-l-iloxi ) -4- ( 3-fluoro-4- ( 1H-imidazol-l-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida (57 mg, 0,13 mmol). DIEA (0,100 mL, 0,57 mmol) también se añadió. La mezcla se agitó a 90 °C durante 1 h. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, agua y EtOAc se añadieron. La fase orgánica se separó, se lavó con 5% de NaHC03, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio. El residuo se disolvió en CH2C12 (1 mL) y TFA (1 mL) . La solución se agitó a temperatura ambiente durante 60 min. Se concentró al vacio. El residuo se purificó por HPLC para dar el compuesto del titulo (23 mg) . MS 411,3 (M+H) . UV 0247,8, 299,8 nm.
Ejemplo 35. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-fluoro-4- (4-metil-lH-pirazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida El compuesto del titulo se preparó análogamente de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 34. MS 425,3 (M+H). UV ?=247,8, 311,8 nm.
Ejemplo 36. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (2-fluoro-4- (1H-pirazol-l-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0470] El compuesto 107.1 se sintetizó tal como se muestra en el Ejemplo 1 para 72.7 usando 2-fluoro-4- ( lH-pirazol-l-il ) anilina para reemplazar 72.4.
A 107,1 (0,054 g, 0,125 mmol) se añadió una solución de (1S, 2R) -2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo 81.2 (0,3 M, 0,6 mL, 0,18 mmol) y DIEA (33 \iL, 0,18 mmol). Después de agitar durante 2 h a 65 °C de baño, la mezcla se diluyó con agua, los precipitados resultantes se recogieron por filtración para dar 107.2. ? una mezcla de 107.2 en DCM (0,5 mL) se añadió TFA (0,5 mL) , tras lo cual se agitó a temperatura ambiente durante 10 min, la solución se concentró y el residuo se purificó por HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo 107. MS experimental para C20H23FN8O como (M+H)+ 411,1. UV: ? = 201, 6, 240, 4, 289, 0.
Ejemplo 37. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (tiazol-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0471] Etapa 1: A una mezcla de yodobenceno 108.1 (200 mg, 0,46 mmol) en tolueno (2 mL) se añadió 5-tributilstanniltiazol 108.2 (173 mg, 0,46 mmol) y Pd(PPh3)4 (53 mg, 0,046 mmol). La mezcla se desgasificó usando corriente de argón durante 3 minutos y se calentó bajo una atmósfera de argón durante 2 hora. Se concentró al vacío y se sometió a columna flash de sílice para aislar el compuesto 108.3 (100 mg) .
[0472] Etapa 2: A una mezcla de éster etílico 108.3 (84 mg, 0,22 mmol) en THF (0,8 mL) se añadió una solución de hidróxido de litio hidratado (8 mg, 0,35 mmol) en agua (0,5 mL) . Después de agitar durante 2 horas a temperatura ambiente, se concentró al vacío para eliminar THF y se trató con cuidado con HC1 1 N hasta que el pH alcanzó 3. Los precipitados resultantes se recogieron por filtración para dar el compuesto 108.4 (74 mg) .
[0473] Etapa 3: A una mezcla de carboxílico 108.4 (74 mg) en DMF (1 mL) se añadieron clorhidrato de EDC (60 mg) e hidrato de HOBt (48 mg) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. A ello se añadió luego amoníaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 1 mL) . La mezcla se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Luego se concentró' al vacío para eliminar dioxano. A ello se añadió agua, los precipitados se recogieron por filtración para dar el compuesto 108.5.
[0474] Etapa 4: El compuesto 108.5 (55 mg, 0,16 mmol) se disolvió en 0,3 mL de N P. A ello se añadió MCPBA (65% puro, 47 mg, 0,18 mmol) . Se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. A ello se añadieron luego una solución de (lS,2R)-2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo 57.2 (0,3 M, 0,8 mL, 0,24 mmol) y DIEA (57 L, 0,32 mmol). La mezcla se agitó durante 60 minutos a 80 °C de baño. Esta mezcla se diluyó con agua, los precipitados resultantes se recogió por filtración para dar 108.6, que se agitó en una mezcla 1:1 de TFA y diclorometano a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se concentró al vacio y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto del titulo. S experimental para C20H23N7OS como (M+H) + 410, 2. UV: ? = 202, 8, 245,2.
Ejemplo 38. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (2-fluoro-4-(tiazol-4-il) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0475] El compuesto del titulo se sintetizó tal como se muestra en el Ejemplo 14. MS experimental para C20H22 EN7OS como (M+H)+ 428,5. UV: ? = 240,4, 312,8 Ejemplo 39. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (tiazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0476] El compuesto del título se sintetizó tal como se muestra en el Ejemplo 37 usando 2-tributilstanniltiazol para reemplazar 5-tributilstanniltiazol 108.2. MS experimental para C20H23 7OS como (M+H)+ 410,2 UV: ? = 206,3, 242,8, 291,4 Ejemplo 40. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (tiazol-5-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0477] El compuesto del título 111 se sintetizó tal como se muestra en el Ejemplo 37 usando 4-tributilstanniltiazol para reemplazar 5-tributilstanniltiazol 108.2. MS experimental para C20H23N7OS como (M+H)+ 410,5 UV: ? = 201,6, 244,0, 277.1 Ejemplo 41. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (piridin-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0478] El compuesto del título se sintetizó tal como se muestra en el Ejemplo 37 usando 2-tributilstannilpiridina para reemplazar 5-tributilstanniltiazol 108.2. MS experimental para C22H25N7O como ( +H)+ 404, 2; UV: ? = 242,8, 292,6 Ejemplo 42. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- (pirazin-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0479] El compuesto del título se sintetizó tal como se muestra en el Ejemplo 37 usando 2-tributilstannilpirazina para reemplazar 5-tributilstanniltiazol 108.2. MS experimental para C2iH24 80 como (M+H)+ 405, 3 UV: ? = 244, 0, 289,0 Ejemplo 43. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (piridazin-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0480] El compuesto del título se sintetizó tal como se muestra en el Ejemplo 37 usando 4-tributilstannilpiridazina para reemplazar 5-tributilstanniltiazol 108.2. MS experimental para C2iH24 80 como (M+H) + 405,2 UV: ? = 246,3 Ejemplo 44. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (1-metil-lH-imidazol-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0481] El compuesto del título se sintetizó tal como se muestra en el Ejemplo 37 usando l-metil-2-tributilstannil-lH-imidazol para reemplazar 5-tributílstanniltiazol 108.2. MS experimental para C2iH26 80 como (M+H) + 407, 2. UV: ? = 242,8 Ejemplo 45. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 6-metoxipiridin-3-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0482] Etapa 1: A una mezcla de yodobenceno 108.1 (300 mg, 0,72 mmol) en p-dioxano (5 mL) se añadieron ácido 6-metoxipridin-3-ilborónico 116.1 (121 mg, 0,80 mmol) y Na2C03 1 M (21 mL) seguido por PdC12(PPh3)2 (51 mg, 0,07 mmol). La mezcla se desgasificó usando corriente de argón durante 3 minutos y se calentó a 85 °C bajo una atmósfera de argón durante 2 horas. Se diluyó con DCM, la capa orgánica se lavó con NaHCÜ3 saturado, salmuera, se secó y se concentró para dar el residuo crudo, que se purificó por cromatografía en columna para dar 116.2 (160 mg) .
[0483] Etapa 2: A una mezcla de éster etílico 116.2 (160 mg) en THF (1,6 mL) se añadió una solución de hidróxido de litio hidratado (20 mg) en agua (1 mL) . Después de agitar durante 24 horas a temperatura ambiente, se concentró al vacio para eliminar THF y se trató con cuidado con HCl 1 N hasta que el pH alcanzó 3. Los precipitados resultantes se recogieron por filtración para dar el compuesto 116.3.
[0484] Etapa 3: A una mezcla de carboxilico 116.3 en DMF (1,8 mL) se añadieron clorhidrato de EDC (193 mg) e hidrato de HOBt (153 mg) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 min. A ello se añadió luego amoniaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 2 mL) . La mezcla se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Luego se concentró al vacio para eliminar dioxano. A ello se añadió agua, los precipitados se recogieron por filtración para dar el compuesto 116.4.
[0485] Etapa 4: El compuesto 116.4 (80 mg, 0,22 mmol) se disolvió en 0,5 mL de NMP. A ello se añadió MCPBA (65% puro, 64 mg, 0,24 mmol). Se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. A ello se añadieron luego una solución de (lS,2R)-2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo 81.2 (0,3 M, 1,2 mL, 0,3 mmol) y DIEA (78 µ?,, 0,44 mmol). La mezcla se agitó durante 60 minutos a 85°C de baño. Esta mezcla se diluyó con agua, los precipitados resultantes se recogió por filtración para dar 116.5, que se agitó en una mezcla 1:1 de TFA y diclorometano a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se concentró al vacio y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto del título. MS experimental para C23H2 N702 como ( +H) + 434, 3 UV: ? = 247, 5 Ejemplo 46. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4- ( 6-metoxipiridin-3-il ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0486] El compuesto del título se sintetizó tal como se muestra en el Ejemplo 45 usando 4- (4-yodofenilamino) -2- (metiltio)pirimidin-5-carboxilato de etilo para reemplazar 108.1. MS experimental para C23H27N7O2 como (M+H)+ 434, 3. UV: ? = 240, 4, 306, 8 Ejemplo 47. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3-metil-4-morfolinofenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0487] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 y el Ejemplo 9 con 3-metil-4-morfolinoanilina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para C22H31 7O2 como (M+H)+ 426,3. UV: ? = 240,4, 296, 1 Ejemplo 48 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (2-aminopiridin-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0488] Etapa 1: Una mezcla de ácido 4-Nitro-fenil-Borónico (159 mg, 0,95 mmol), N, -Bis ( ter-butiloxicarbonil ) amino-4-yodopiridina (US6831175) (200 mg, 0,47 mmol), carbonato de potasio (329 mg, 2,38 mmol), Tetrakis (trifenilfosfina) -paladio (0) (220 mg, 0,19 mmol), DME (5 mL) , agua (0,6 mL) se calentó en microondas (Emry's Optimizer) a 120 °C durante 15 min. La reacción se repitió cuatro veces más. Las reacciones combinadas se vertieron en acetato de etilo y se lavaron con agua (2x) , salmuera (lx) y se concentraron. El concentrado se purificó luego por cromatografía flash en columna de gel de sílice (3:7 acetato de etilo/Hexanos ) para proporcionar N,N-Bis(ter-butiloxicarbonil ) amino- ( 4-nitrofenil ) piridina 119.1. MS experimental para C21H25N3O6 como (M+H)+ 416,0.
[0489] Etapa 2: El compuesto 119.1 (955 mg, 2,3 mmol) se disolvió en etanol (40 mL) con algunas gotas de ácido acético y se hidrogenó a 1 atmósfera de hidrógeno en presencia de Pd/C al 10% (húmedo) durante 5 h. La reacción se filtró, se concentró para dar 119.2 (782 mg, 88%) en forma de un sólido marrón oscuro. MS experimental para C21H27N3O4 como (M+H)+ 386,0.
[0490] Etapa 3: A una solución de Dicloropirimidina 119.3 (180 mg, 0,816 mmol) en acetonitrilo (3 mL) se añadió una suspensión de 119.2 (314 mg, 0,816 mmol), diisopropilamina (0,16 mL, 0,897 mmol) en acetonitrilo (8 mL) a 0 °C. La mezcla de reacción se calentó lentamente hasta temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción luego se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (2x) . Las capas combinadas de acetato de etilo se lavaron con salmuera, se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron a presión reducida para obtener 119.4. MS experimental para C28H32CI 5O6 como (M+H)+ 570,0.
[0491] Etapa 4: Ester etílico crudo 119.4 (460 mg, 0,81 mmol) se diluyó con 1,4-dioxano (5 mL) seguido por hidróxido de litio acuoso (1,0 M, 0,8 mL, 0,8 mmol) y se agitó a temperatura ambiente hasta convertir todo el material de partida en el ácido carboxílico. La reacción luego se diluyó con agua (30 mL) y se acidificó con HC1 1 N (1,0 mL) . La suspensión resultante luego se filtró, se lavó con agua y se secó dando 385 mg del ácido carboxílico 119.5 (88%). MS experimental para C26H28C1N5C>6 como (M+H) + 542, 0.
[0492] Etapa 5: Al ácido carboxílico 119.5 (385 mg, 0,71 mmol), EDC (204 mg, 1,06 mmol), HOBt (163 mg, 1,06 mmol) en N,N-dimetilformamida (3,6 mL) se añadió amoníaco (0,5 M en 1,4-dioxano, 3,6 mL, 1,8 mmol) y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción luego se diluyó con agua y el precipitado se recogió por filtración para dar como resultado el producto deseado 119.6 (394 mg, 87%). MS experimental para C32H33N9O6 as (M+H-Boc) + 540 , 0.
[0493] Etapa 6 y Etapa 7: Una mezcla de Éter de benzotriazolilo 119.6 (90 mg, 0,140 mmol), (lS,2R)-2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo (36 mg, 0,170 mmol), DIPEA (0,07 mL, 0,420 mmol) en iso-propanol (2 mL) se calentó en microondas (Emry's Optimizer) a 130 °C durante 20 min. La mezcla de reacción se concentró y luego se trató con HC1 4,0 M en dioxano (6,0 mL) . Después de 1 hora a temperatura ambiente, se concentró la mezcla de reacción y se diluyó con agua y acetonitrilo y se purificó directamente por HPLC preparativa para dar como resultado el producto deseado 119 (43,6 mg, 75%) en forma de un sólido tostado, después de liofilización. MS experimental para C22H26F2N80 como (M+H)+ 419,5.
Ejemplo 49. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4 - ( 4- ( 4- ( aminometil) piperidin-l-il ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0494] El compuesto anterior se preparó usando (l-(4-aminofenil) piperidin-4-il) metilcarbamato de ter-butilo (preparado a partir de 4-Fluoronitrobenceno) usando un procedimiento similar al descrito en el Ejemplo 48. MS experimental para C23H34N80 como (M+H) + 439,6.
Ejemplo 50. 4- ( - (1H-1, 2 , 4-triazol-l-il) fenilamino) -2- ( (lR,2S)-2-aminociclohexil-amino) pirimidin-5-carboxamida 4- (4- (lH-1, 2, -triazol-l-il) fenilamino) -2-cloropirimidin-5-carboxilato de etilo 121.1:
[0495] A una solución de 2 , -dicloropirimidin-5-carboxilato de etilo (1,4) (600 mg, 2,714 mmol), en CH3CN (12 mL) , se añadió DIEA (0,750 mL, 4,313 mmol, 1,589 equiv) , seguido por 4-(lH-l, 2, 4-triazol-l-il ) anilina (465 mg, 2,902 mmol, 1,07 equiv). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 h, luego se diluyó con agua (6 x) para precipitar ii. El producto sólido se recogió por filtración, se enjuagó con agua (100 mL) y se secó al aire; rendimiento, 850 mg (91 %) . Ácido 4- (4 - (1H-1, 2, -triazol-l-il) fenilamino) -2-cloropirimidin-5-carboxilico 121.2:
[0496] A una solución de 4- ( 4- ( 1H-1, 2, 4-triazol-l-il) fenilamino) -2-cloropirimidin-5-carboxilato de etilo (ii) (870 mg, 2,523 mmol), en THF (12 mL) , se añadió LiOH 1 M (3,30 mL, 3,30 mmol, 1,30 equiv) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Luego, el THF se extrajo por rotavap y la mezcla acuosa se acidificó con HC1 2 N hasta pH 2. El producto sólido precipitado se recogió por filtración, se enjuagó con agua y se secó al aire; rendimiento 712 mg (89 %) . 4- (4- (1H-1, 2, 4-triazol-l-il) fenilamino) -2- (lH-benzo [d] [ 1 , 2 , 3 ] triazol-l-iloxi ) pirimidin-5-carboxamida 121.3:
[0497] A una solución de ácido 4- ( 4- ( 1H-1 , 2 , -triazol-l-il) fenilamino) -2-cloropirimidin-5-carboxilico (iii) (730 mg, 2,305 mmol) en DMF (15 mL) , a temperatura ambiente, se añadió HOBt (470 mg, 3,478 mmol, 1,508 equiv) y EDC.HC1 (690 mg, 3,599 mmol, 1,561 equiv) y la mezcla se agitó durante 45 minutos. Luego, se enfrió hasta 0 °C y se trató con NH3 0,5 M en dioxano (14,0 mi, 7,0 mmol, 3,0 equiv) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 18 h. Luego, se diluyó con agua (7 x) para precipitar iv. Se recogió por filtración, se enjuagó con agua y se secó al aire; rendimiento 841 mg (88 %). MS : 415,1 (M+H) y 437, 1 (M+Na) . 4- (4- (1H-1, 2, -triazol-l-il) fenilamino) -2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -pirimidin-5-carboxamida 121:
[0498] A una solución de cis-ciclohexan-1 , 2-diamina (100 mg, 0,876 mmol, 6,08 equiv), en CH3CN (1. 50 mL) , se añadió 4-(4-(lH-1,2, 4-triazol-l-il) fenilamino) -2- (??-benzo [d] [1,2, 3] triazol-l-iloxi) pirimidin-5-carboxamida (iv) (60 mg, 0,144 mmol) y la mezcla se agitó durante 19 horas. Luego, se diluyó con agua (8 x) y el producto sólido se recogió por filtración, se enjuagó con agua y se secó al aire. Se purificó por RP HPLC para obtenerlo en forma de su sal de TFA; rendimiento 59 mg (81 %). MS : 394,1 (M+H) y 416,1 (M+Na) .
Ej emplo 51. 2-((lR,2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4- ( isoxazol-5-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida : [ 0499] 2- (??-benzo [d] [ 1 , 2 , 3] triazol-l-iloxi ) -4- ( 4- ( isoxazol-5-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 122 . 1 : Este compuesto se preparó usando el procedimiento descrito para la síntesis de 121 . 3 a partir de 2 , 4-dicloropirimidin-5-carboxilato de etilo (1,4) y 4- ( isoxazol-5-il ) anilina . (1S, 2R) -2- ( 5-carbamoil-4- (4- ( isoxazol-5-il ) fenilamino) pirimidin-2-ilamino) ciclohexilcarbamato de ter-butilo 122 .2 :
[0500] El compuesto 210.1 (100 mg, 0,241 mmol), en N-metilpirrolidinona (NMP) se mezcló con (lS,2R)-2- aminociclohexilcarbamato de ter-butilo (0,3 mmol, 1,244 equiv) y DIEA (0,120 mL, 0,690 mmol, 2,83 equiv) y se calentó hasta 50 °C durante 4 h. Luego, se dividió en EtOAc y agua. El extracto de EtOAc combinado se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró para obtener 210.2, que se usó como tal para la siguiente reacción. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4-(4-(isoxazol-5-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 122 :
[0501] El 122.2 crudo se diluyó con CH2C12 (5 mL) y anilsol (0,700 mL, exceso) se añadió, seguido por CF3COOH (5 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h y luego se concentró hasta sequedad. Se purificó por RP-HPLC para obtener 210 puro como puffs incoloros, 101 mg (83 %). MS : 394, 3 (M + H) . Ejemplo 52. 4- ( 4- ( lH-tetrazol-l-il ) fenilamino) -2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0502] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 4-(lH-tetrazol-l-il) anilina en etapa 1. MS : 395,28 (M + H) .
Ejemplo 53. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (oxazol-5-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0503] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 4-( oxazol-5-il ) anilina en etapa 1.
Ejemplo 54. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 3- (oxazol-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0504] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-(oxazol-4-il) anilina en etapa 1. MS: 394,28 (M + H) .
Ejemplo 55. 4- ( 3- ( 1H-1 , 2 , 4-triazol-l-il ) fenilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidina 5-carboxamida :
[0505] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-(1H-1, 2, 4-triazol-l-il) anilina en etapa 1. MS: 394,2 (M + H) .
Ejemplo 56. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 3- ( 5-metil-1, 2, 4-oxadiazol-3-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0506] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-(5-metil-l, 2, -oxadiazol-3-il) anilina en etapa 1. MS : 409,28 (M + H) .
Ejemplo 57. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 2-metiltiazol-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0507] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-(2-metiltiazol-4-il) anilina en etapa 1. MS : 424,37 (M + H) .
Ejemplo 58. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 4- ( 5-metil-1,2, -oxadiazol-3-il) fenilamino) pirimidi -5-carboxamida : Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 4-(5-metil-1, 2, 4-oxadiazol-3-il) anilina en etapa 1. I S: 409, 5 (M + H) .
Ejemplo 59. 4- (3- ( lH-pirazol-5-il ) fenilamino) -2-((lR,2S)-2-aminociclohexil amino) pirimidin-5-carboxamida :
[0508] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-(lH-pirazol-5-il) anilina- en etapa 1. MS : 393,0 (M + H) .
Ejemplo 60. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4- (tiofen-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida : [ 0509] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 4-(tiofen-2-il) anilina en etapa 1. MS : 410,0 (M+ H) .
Ejemplo 61. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3-metoxi-4-(oxazol-5-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida : [ 0510 ] Este compuesto se sintetizó usando el esquema d síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3 metoxi-4- (oxazol-5-il) anilina en etapa 1. MS : 424, 5 (M + H) .
Ejemplo 62. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4- ( 3-metil-lH pirazol-l-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0511] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 4-(3-metil-lH-pirazol-l-il) anilina en etapa 1. MS : 407,5 (M + H) . Ejemplo 63. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (2-oxopirrolidin-l-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0512] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 1-(3-aminofenil) pirrolidin-2-ona en etapa 1. MS: 410,5 (M + H) .
Ejemplo 64. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (3, 5-dimetil-lH-pirazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0513] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 4-(3, 5-dimetil-lH-pirazol-l-il) anilina en etapa 1. MS : 421,5 (M + H) .
Ej emplo 65. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3-metoxi-5- ( 1H-tetrazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0514] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-metoxi-5- ( lH-tetrazol-l-il ) anilina en etapa 1. IMS: 425, 4 (M + H) . Ejemplo 66. 4- (3- (lH-tetrazol-l-il) fenilamino) -2-((lR,2S)-2-aminociclohexil amino) pirimidin-5-carboxamida :
[0515] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-(lH-tetrazol-l-il) anilina en etapa 1. MS : 395.5 (M + H) .
Ejemplo 67. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 3- ( 5-metil-lH-tetrazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0516] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-(5-metil-lH-tetrazol-l-il) anilina en etapa 1. MS: 409, 5 (M + H) . Ejemplo 68. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- (1-metil-lH-tetrazol-5-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0517] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-(l-metil-lH-tetrazol-5-il) anilina en etapa 1. MS : 409,5 (M + H) . Ejemplo 69. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( - ( 5-metil-1,2, -oxadiazol-3-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0518] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 4-(5-metil-l, 2, 4-oxadiazol-3-il) anilina en etapa 1. MS: 409,5 (M + H) .
Ejemplo 70. 4- (3- ( lH-pirrol-l-il ) fenilamino) -2-((lR,2S)-2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0519] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-(lH-pirrol-l-il) anilina en etapa 1. MS :¦ 392,5 ( + H) .
Ejemplo 71. 4 - ( - ( lH-pirrol-l-il ) fenilamino) -2-((lR,2S)-2-aminocielohexilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0520] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 4- (lH-pirrol-l-il) anilina en etapa 1. MS : 392,4 (M + H) .
Ejemplo 72. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (5-metilfuran-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0521] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-(5-metilfuran-2-il) anilina en etapa 1. MS : 407,5 ( + H) .
Ej emplo 73. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- (pirrolidin-1-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida :
[0522] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-(pirrolidin-l-il) anilina en etapa 1. MS : 396,6 (M + H) .
Ejemplo 74. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3-morfolinofenilamino) pirimidin-5-carboxamida : Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 3-morfolinoanilina en etapa 1. MS : 412,5 (M + H) .
Ejemplo 75. 4 - (4- (1, 3, 4-oxadiazol-2-il ) fenilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexil amino) pirimidin-5-carboxamida :
[0523] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de compuesto 122 y usando 4-(1, 3, 4-oxadiazol-2-il) anilina en etapa 1. MS: 395,3 (M + H) .
Ejemplo 76. 4-(3-(2H-tetrazol-5-il) fenilamino) -2-((lR,2S)-2-aminociclohexil amino) pirimidin-5-carboxamida :
[0524] El compuesto 147.4: 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 3-cianofenilamino) pirimidin-5-carboxamida se sintetizó usando el procedimiento descrito para la síntesis de Ejemplo 77. MS : 352, 2 (M + H) .
[0525] El compuesto 147: 4- ( 3- (2H-tetrazol-5-il) fenilamino) -2-( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida se sintetizó haciendo reaccionar compuesto 147.4 (75 mg, 0,213 mmol), azida sódica (90 mg, 1,384 mmol, 6,5 equiv) y bromuro de zinc (53 mg, 0,235 mmol) en isopropanol/agua (1:1) (4 mL) se calentó hasta reflujo durante 14 horas, cuando un análisis de HPLC mostró una reacción completa. Luego, la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y se acidificó con HC1 1 N hasta pH 1, se filtró a través de celite, el filtrado se concentró hasta sequedad para obtener el compuesto del titulo, 179, se purificó por RP-HPLC. MS : 395.1 (M + H) , 417,2 (M + Na).
[0526] Ejemplo 78. 4- (4- (2H-tetrazol-5-il) fenilamino) -2-( (IR, 2S) -2-aminociclohexil amino) pirimidin-5-carboxamida :
[0527] Este compuesto se sintetizó usando el esquema de síntesis descrito para la síntesis de Ejemplo 5 y usando 4-cianoanilina en etapa 1. MS : 395.1 (M + H) , 417,2 (M + Na).
[0528] Ejemplo 79. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3-fluoro-4- (3- (trifluorometil ) -lH-pirazol-1-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 149.1 149.2 149.3 149.4
[0529] La mezcla de trifluorometilpirazol 149.1 (1,00 g, 7,35 mmol) , 3 , 4-difluoro-l-nitrobenceno 149.2 (0,68 mL, 6,13 mmoL) y carbonato de cesio (3,00 g, 9,2 mmol) en 20 mL de DMF seca se agitó en 50 °C de baño durante 4 horas. Se diluyó con 300 mL de acetato de etilo y se lavó con agua 4 veces. La fase orgánica se secó sobre MgS04 y se filtró para obtener una solución de producto crudo 149.3. A esta solución se añadió una cantidad catalítica de Pd/C al 10%. A ello se cargó una suspensión agitada en un balón de hidrógeno durante la noche. La mezcla se filtró y se concentró al vacío para obtener la anilina cruda 149.4. S experimental para CioH7F4N3 como (M+H)+ 246/3. Se purificó usando columna flash.
[0530] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con anilina 149.4 para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C21H22 E4 8O como (M+H)+ 479, 3. UV ?=243. 302 nm. RMN (CD3OD) : d 8,47 (s, 1H) , 8,07 (s amplio, 1H) , 7,84 (m, 1H) , 7,72 (m, 1H) , 7,39 (m, 1H) , 6,74 (d, J=2,0 Hz, 1H) , 4,33 (m, 1H) , 3,66 (m, 1H) , 1, 83-1,49 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 80. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3, 4-bis (3-(trifluorometil) -IH-pirazol-l-il ) fenilamino) pirimidin-5- carboxamida 150.1 150.2 150.3 150.4 [ 0531 ] La mezcla de trifluorometilpirazol 150 . 1 (2,00 g, 14,7 mmol) , 3, -difluoro-l-nitrobenceno 150 . 2 (1,17 g, 7,3 mmoL) y carbonato de cesio (5,5 g, 17 mmol) en 30 mL de DMF seca se agitó en 50 °C de baño durante la noche. Se diluyó con 300 mL de acetato de etilo y se lavó con agua cuatro veces. La fase orgánica se secó sobre MgS04 y se filtró para obtener una solución de producto crudo 150 . 3 . A esta solución se añadió una cantidad catalítica de Pd/C al 10%. A ello, se cargó una suspensión agitada en un balón de hidrógeno durante la noche. La mezcla se filtró y se concentró al vacío para obtener la anilina cruda 150 . 4 . MS experimental para Ci4H9F6N5 como (M+H)+ 362,2. Se purificó usando columna flash. [ 0532 ] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 3 con anilina 150.4 para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C25H24 F6N10O como (M+H)+ 595.3. UV ?=24ß, 301 nm. RMN (CD30D) : d 8,61 (s, 1H) , 8,45 (s amplio, 1H) , 7, 78-7, 65 (m, 4H) , 6,75 (d, J=2,0 Hz, 1H) , 6,72 (d, J=2,4 Hz, 1H) , 4,41 (m, 1H) , 3,59 (m, 1H) , 1,86-1,48 (m, 8H) ppm.
[0533] Ejemplo 81. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-morfolino-4- (lH-pirazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 151.2 151.3 151.4 151.5
[0534] La mezcla de pirazol 151.1 (0,50 g, 7,4 mmol) , 3,4-difluoro-l-nitrobenceno 151.2 (0,68 mL, 6,1 mmoL) y carbonato de cesio (3,0 g, 9,2 mmol) en 15 mL de NMP seco se agitó en un tubo sellado en 80 °C de baño durante 3 horas para dar el compuesto 151.3. Al tubo sellado de reacción se añadió luego morfolina (1,6 mL, 18,4 mmol) . La mezcla se agitó en baño de 120 °C durante 24 horas. Se diluyó con 300 mL de acetato de etilo y se lavó con agua cuatro veces. La fase orgánica se secó sobre gSC y se filtró para obtener una solución de producto crudo 151.4. A esta solución se añadió una cantidad catalítica de Pd/C al 10%. A ello, se cargó una suspensión agitada en un balón de hidrógeno durante la noche. La mezcla se filtró y se concentró al vacío para obtener la anilina cruda 151.5. MS experimental para C13H16 4O como (M+H)+ 245,2. Se purificó usando columna flash.
[0535] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con anilina 151.5 para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C24H3i 902 como (M+H)+ 478,3. UV ?=247 nm.
[0536] Ejemplo 82. 4- ( 3- ( lH-imidazol-l-il ) fenilamino) -2-( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida 152.1 152.2 152.3 152.4
[0537] La mezcla de imidazol 152.1 (0,64 g, 9,4 mol) , 3-fluoro-l-nitrobenceno 152.2 (0,50 mL, 4,7 mmoL) y carbonato de cesio (3,1 g, 9,4 mmol) en 15 mL de NMP seco se agitó en un tubo sellado en baño de 120 °C durante 3 horas. Se diluyó con 300 mL de acetato de etilo y se lavó con agua cuatro veces. La fase orgánica se secó sobre MgS04 y se filtró para obtener una solución de producto crudo 152.3. A esta solución se añadió una cantidad catalítica de Pd/C al 10%. A ello, se cargó una suspensión agitada en un balón de hidrógeno durante la noche. La mezcla se filtró y se concentró al vacío para obtener la anilina cruda 152.4. MS experimental para C9H9N3 como (M+H)+ 160,1.
[0538] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 3 con anilina 152.4 para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C24H31 9O2 como (M+H)+ 478,3. UV ?=241 nm.
[0539] Ejemplo 83. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (5-metil-1, 3,4-tiadiazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0540] Etapa 1: Yodobenceno 77.2 (500 mg, 1,2 mmol) se disolvió en 12 mL de dioxano en un tubo sellado. A ello se añadieron bromotiadiazol 153.1 (240 mg, 1,3 mmol), hexametildiestaño (0,25 mL, 1,2 mmol) y Pd(PPh3)4 (280 mg, 0,24 mmol) . La mezcla se desgasificó usando corriente de argón durante 3 minutos y se agitó en 110 °C de baño durante 90 min. Se concentró al vacio y se sometió a columna flash de sílice para aislar el compuesto 153.2 (130 mg, 28%). MS experimental para C17H17N5O2S2 como (M+H)+ 388, 1.
[0541] Etapa 2: El éster etílico 153.2 (130 mg, 0,34 mmol) se disolvió en 20 mL de THF. A ello se añadieron hidróxido de litio hidratado (42 mg, 1,0 mmol) y 3 mL de agua. La mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Se concentró al vacío para eliminar THF y se trató con cuidado con HC1 1 N hasta que el pH alcanzó 3. Un sólido amarillo se trituró de la solución. Se aisló usando un embudo de Büchner, se lavó con agua fría, se secó en horno de vacio para dar el compuesto 153.3. MS experimental para Ci5H13N502S2 como (M+H)+ 360,1.
[0542] Etapa 3: Ácido carboxilico 153.3 (0,34 mmol) se disolvió en 10 mL de D F. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (100 mg, 0,51 mmol) e hidrato de HOBt (70 mg, 0,51 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. ? ello se añadió luego amoniaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 3,4 mL, 1,7 mmol) . La mezcla se agitó durante la noche. Luego se concentró al vacio para eliminar dioxano. La mezcla luego se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto 153.4 (22 mg, 18% para 2 etapas). MS experimental para Ci5Hi,N6OS2 como (M+H)+ 359, 1.
[0543] Etapa 4: El compuesto 153.4 (22 mg, 0,06 mmol) se disolvió en 5 mL de NMP. A ello se añadió MCPBA (65% puro, 21 mg, 0,072 mmol). Se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. A ello se añadieron luego una solución de (lS,2R)-2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo 81.2 (0,3 M, 0,4 mL, 0,12 mmol) y DIEA (31 pL, 0,18 mmol). La mezcla se agitó durante 80 minutos en baño a 90 °C. Esta mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con solución acuosa saturada de Na2CC>3 dos veces y agua. La fase orgánica se secó sobre MgS04 y se concentró al vacio para obtener el compuesto crudo 153.5. MS experimental para C25H32 8O3S como (M+H)+ 525,3.
[0544] Etapa 5: El compuesto 153.5 se agitó en una mezcla 1:1 de TFA y diclorometano a temperatura ambiente durante 1 hora. Se concentró al vacio y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto del titulo. MS experimental para C2oH24 8OS como (M+H)+ 425, 3. UV ?=241, 319 nm.
[0545] Ejemplo 84. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (2-metil-lH-imidazol-l-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 154.1 154.2 154.3 154.4
[0546] La mezcla de 2-metilimidazol 154.1 (1,52 g, 18,6 mmol), 4-fluoro-l-nitrobenceno 154.2 (1,0 mL, 9,4 mmoL) y carbonato de potasio (1,30 g, 9,4 mmol) en 20 mL de DMF seca se agitó en 100 °C de baño durante la noche. Se diluyó con 300 mL de acetato de etilo y se lavó con agua 4 veces. La fase orgánica se secó sobre MgSOg y se filtró para obtener una solución de producto crudo 154.3. A esta solución se añadió una cantidad catalítica de Pd/C al 10%. A ello, se cargó una suspensión agitada en un balón de hidrógeno durante la noche. La mezcla se filtró y se concentró al vacio para obtener la anilina cruda 154 . 4 . MS experimental para C10H11 3 como (M+H)+ 174.1. Se purificó usando columna flash. [ 0547 ] compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 3 con anilina 154 . 4 para reemplazar la anilina 74 . 1 . MS experimental para C2iH26 80 como (M+H)+ 407,3. UV ?=246, 293 nm. RMN (CD3OD) : d 8,60 (s, 1H) , 7,96 (m, 2H) , 7,70 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,66-7,61 (m, 4H) , 4,47 (m, 1H), 3,73 (m, 1H) , 2,60 (s, 3H) , 1,92-1,59 (m, 8H) ppm. [ 0548] Ejemplo 85. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (2-metil-lH-imidazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 155.1 155.2 155.3 155.4 [ 0549] La mezcla de 2-metilimidazol 155 . 1 (0,77 g, 9,4 mmol), 3-fluoro-l-nitrobenceno 155 . 2 (0,50 mL, 4,7 mmoL) y carbonato de cesio (3,07 g, 9,4 mmol) en 15 mL de NMP seco se agitó en baño de 120 °C durante 6 horas. Se diluyó con 300 mL de acetato de etilo y se lavó con agua 4 veces. La fase orgánica se secó sobre MgS04 y se filtró para obtener una solución de producto crudo 155.3. A esta solución se añadió una cantidad catalítica de Pd/C al 10%. A ello, se cargó una suspensión agitada en un balón de hidrógeno durante la noche. La mezcla se filtró y se concentró al vacío para obtener la anilina cruda 155.4. MS experimental para C10H11N3 como (M+H)+ 174,1. Se purificó usando columna flash.
[0550] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 3 con anilina 155.4 para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C2iH26N80 como (M+H)+ 407,3. UV ?=243. 285 nm. RMN (CD3OD) : d 8,58 (s, 1H) , 8,06 (m, 1H) , 7,83 (m, 1H) , 7,73-7,71 (m, 2H) , 7,64 (m, 1H) , 7,44 (m, 1H) , 4,41 (m, 1H) , 3,66 (m, 1H) , 2,62 (s, 3H) , 1, 89-1,55 (m, 8H) ppm.
[0551] Ejemplo 86. 4- ( 3- ( 1H-1 , 2 , 3-triazol-l-il ) fenilamino) -2-( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida 156.1 156.2 156.3 156.4 156.5 156.6
[0552] La mezcla de 1H-1, 2 , 3-triazol 156.1 (0,55 mL 9,4 mmol), ^ 3-fluoro-l-nitrobenceno 156.2 (0,50 mL, 4,7 mmoL) y carbonato de cesio (3,07 g, 9,4 mmol) en 15 mL de NMP seco se agitó en baño de 120 °C durante 17 horas. Se diluyó con 300 mL de acetato de etilo y se lavó con agua 4 veces. La fase orgánica se secó sobre MgS04 y se filtró para obtener una solución de productos crudos 156.3 y -J^Q 156.4 en una relación de casi 1:1. A esta solución se añadió una cantidad catalítica de Pd/C al 10%. A ello, se cargó una suspensión agitada en un balón de hidrógeno durante la noche. La mezcla se filtró y se concentró al vacío para obtener anilinas crudas 156.5 y 156.6. MS experimental para C8H8N4 como (M+H) + 15 161,1. Las dos anilinas se purificaron usando columna flash.
[0553] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 3 con anilina 156.5 para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C19H23 9O como (M+H)+ 394, 3. UV ?=244 nm. RMN (CD3OD) : d 8,90 (s, 1H) , 8,63 20 (d, J=l,2 Hz, 1H) , 8,57 (s, 1H) , 7,95 (d, J=l,2Hz, 1H) , 7,62-7,58 (m, 2H) , 7,43 (m, 1H) , 4,68 (m, 1H) , 3,73 (m, 1H) , 1,91-1,53 (m, 8H) ppm.
[0554] Ejemplo 87. 4- ( 3- ( 1H-1 , 2 , 3-triazol-2-il) fenilamino ) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0555] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 3 con anilina 156.6 (mostrada en el Ejemplo 1) para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C19H23N9O como (M+H)+ 394, 3. UV ?=250 nm. RMN (CD3OD) : d 8,77 (s, 1H), 8,46 (s, 1H) , 7,88 (s, 2H) , 7,83 (d, J=7,6 Hz, 1H) , 7,45 (dd, J=8,4, 8,0 Hz, 1H) , 7,23 (d, J=8,0 Hz, 1H), 4,52 (m, 1H) , 3,58 (m, 1H) , 1,82-1,43 (m, 8H) ppm.
[0556] Ejemplo 88. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) - -( 4 -( 4 - (hidroximetil ) -1H-1,2, 3-triazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5- carboxamida
[0557] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el esquema (Ejemplo 45) con alcohol propargílico para reemplazar trimetilsililacetileno . MS experimental para C20H25N9O2 como (M+H)+ 424, 3. UV ?=242, 300 nm.
[0558] Ejemplo 89. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (4-(aminometil) -1H-1, 2, 3-triazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0559] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el esquema (Ejemplo 45) con propargilamina para reemplazar trimetilsililacetileno . MS experimental para C20H26 10O como (M+H)+ 423, 3. UV ?=242, 301 nm.
[0560] Ejemplo 90. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (4-carbamoil-lH-1 , 2, 3-triazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0561] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el esquema (Ejemplo 45) con amida de ácido propinoico para reemplazar trimetilsililacetileno . MS experimental para C20H24 10O2 como (M+H)+ 437,3. UV ?=242, 300 nm.
[0562] Ejemplo 91. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4-(metilsulfonil ) -3-morfolinofenilamino) pirimidin-5-carboxamida 161.1 161.2 161.3 161.4
[0563] La mezcla de tiometóxido de sodio (2,85 g, 40,6 mmol) y 3, -difluoro-l-nitrobenceno 161,1 (3,0 mL, 27,1 mmoL) en 20 mL de NMP seco se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Se diluyó con 300 mL de acetato de etilo y se lavó con agua cuatro veces. La fase orgánica se secó sobre MgS04, se concentró al vacio y se disolvió en 270 mL de DCM. A ello se añadió MCPBA (65%, 14,3 g, 54 mmol) en pequeñas porciones. La mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente, se diluyó con más DCM, se lavó con NaOH 0,1 N tres veces y salmuera. Esta solución se secó sobre MgS04 y se concentró al vacio para dar 161.2 crudo.
[0564] 161.2 crudo (490 mg, 2,2 mmol) se disolvió en 10 mL de NMP seco. A ello se añadió morfolina (1,2 mL, 6,6 mmol). La mezcla se agitó a 60 °C de baño durante 1 hora. Se diluyó con acetato de etilo 300 mL, se lavó con salmuera tres veces, se secó sobre MgS04 y se filtró para obtener una solución de producto crudo 161.3. A esta solución se añadió una cantidad catalítica de Pd/C al 10%. A ello, se cargó una suspensión agitada en un balón de hidrógeno durante la noche. La mezcla se filtró y se concentró al vacío para obtener la anilina cruda 161.4. MS experimental para CiiHi6N203S como (M+H)+ 257,1. Se purificó usando columna flash.
[0565] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 3 con anilina 161.4 para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C22H3iN704S como (M+H)+ 490,3. ?? ?=249, 301 nm.
Ejemplo 92. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4-fluoro-3- (2H-1,2, 3-triazol-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida [ 0566] Etapa 1: La mezcla de 3-bromo-4-fluoroanilina (860 mg, 4,53 mmol), 1, 2, 3-triazol (1,05 mL, 18,1 mmol) , K3P04 (1,92 g, 9,06 mmol), Cul (430 mg, 2,27 mmol), N, N' -dimetiletilendiamina (0,29 mL, 2,72 mmol) en 10 mL de dioxano y 5 mL de DMSO se agitó en un tubo sellado a 120 °C durante 5 días. Se obtuvo una mezcla de 243 . 1 y 243 . 2 (en relación de 1,5:1) junto con materiales de partida restantes. A la mezcla se vertió EtOAc 250 mL. Se agitó vigorosamente, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre MgSC , se filtró, se concentró al vacio y se sometió a columna flash. El compuesto 243 . 1 se sometió a columna a 70% de EtOAc en hexano y compuesto 243 . 2 a 90%EtOAc en hexano.
Etapa 2: A la mezcla de anilina 243 . 1 (255 mg, 1,44 mmol) y 4-cloro-2-metiltio-5-pirimidincarboxilato de etilo ( 243 . 3 , CAS 5909-24-0, 336 mg, 1,44 mmol) en 15 mL de DMF se añadió DIEA (0,5 mL, 2,88 mmol). La mezcla se agitó a 85 °C durante 5 horas. A ello se añadió 250 mL de EtOAc, se lavó con salmuera x3, se secó, se filtró y se concentró al vacio para obtener el compuesto 243.4 con rendimiento cuantitativo. MS experimental para Ci6H15FN602S como (M+H)+ 375, 1.
[0567] Etapa 3: El compuesto preparado con anterioridad (1,44 mmol) se disolvió en 80 mL de THF y 10 mL de agua. A ello se añadió hidrato de LiOH (302 mg, 7,2 mmol) . La mezcla se agitó durante la noche. Se concentró al vacio para eliminar THF. Al residuo se añadió HC1 1 N hasta que el pH alcanzó 2. El producto sólido se aisló por filtración. Se lavó bien con agua fría y se secó en horno de vacio para dar el compuesto 243.5 con rendimiento cuantitativo en forma de un sólido tostado. MS experimental para Ci4HiiFN602S como (M+H)+ 347, 1.
[0568] Etapa 4: El compuesto antes preparado 243.5 (468 mg, 1,35 mmol) se agitó en 25 mL de DMF. A ello se añadieron EDC.HC1 (390 mg, 2,03 mmol) e hidrato de HOBt (311 mg, 2,03 mmol). La mezcla se agitó durante 1 h y HPLC indicó que todo el material de partida 243.5 se había consumido. A esta mezcla se añadió luego amonio (solución 0,5 N en dioxano, 8,1 mL, 4,05 mmol). La mezcla se agitó durante 3 horas y se concentró al vacío para eliminar dioxano. El agua se añadió al residuo y el sólido se trituró. Este sólido se aisló por filtración, se lavó con agua fría bien y se secó en horno de vacío para dar el compuesto 243 . 6 en forma de un sólido tostado. MS experimental para C14H12 FN7OS como (M+H)+ 346, 1. [ 0569] Etapa 5: El compuesto antes preparado 243 . 6 (100 mg, 0,29 mmol) se disolvió en 5 mL de NMP. A ello se añadió MCPBA (65% puro, 92 mg, 0,35 mmol) . Se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos para obtener una mezcla del correspondiente sulfóxido y sulfona. A ello se añadieron luego DIEA (160 L, 0,90 mmol) y luego ( 1S , 2R) -2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo ( 81 . 2 , 94 mg, 0,45 mmol). La mezcla se agitó durante 3 horas en baño a 90 °C. Luego se diluyó con 150 mL de EtOAc, se lavó con Na2C03 saturado y salmuera x2, se secó sobre MgS04, se filtró y se concentró al vacio. El residuo luego se expuso a mezcla 1:1 de TFA y DCM durante 1 h. Se concentró y se sometió a HPLC en fase inversa para aislar el compuesto del título 243 . MS experimental para C19H22FN9O como (M+H)+ 412,3. UV ?=247 nm. RMN (CD3OD) : d 8,58 (m, 1H) , 8,55 (s, 1H) , 8,05 (s, 2H) , 7,45-7,43 (m, 2H) , 4,53 (m, 1H), 3,64 (m, 1H) , 1,86-1,54 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 93. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4-ciano-3- (2H-l,2,3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema : aislado por col, flash
[0570] Etapa 1: 2-fluoro-4-nitrobenzonitrilo (2,98 g, 18 mmol) se disolvió en 40 mL de NMP. A ello se añadieron 1 , 2 , 3-triazol (1,1 mL, 18,8 mmol) y K2CO3 (2,98 g, 21,6 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 h para dar el compuesto 230.1 y 230.2 (menos polar) en relación 1,3:1. La mezcla se extrajo en acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera x3. Se secó, se concentró y se sometió a columna flash de sílice para aislar el compuesto deseado 230.2 usando 20% acetato de etilo en hexano .
[0571] Etapa 2: El compuesto 230.2 de la Etapa 1 se disolvió en 300 mL de acetato de etilo. A ello se añadió 500 mg de Pd/C al 10%. La mezcla se colocó en un agitador Parr bajo 45 psi de presión de hidrógeno durante la noche. La mezcla se filtró a través de celite, que se lavó bien usando metanol . El filtrado se concentró y se sometió a columna flash de sílice para aislar anilina 230,3 (0,59 g, 18% para 2 etapas).
[0572] Etapa 3: El compuesto 230,4 (0,66 g, 3,0 mmol) se disolvió en 20 mL de NMP. A ello se añadieron compuesto 230,3 (0,55 g, 3,0 mmol) y luego DIEA (0,78 mL, 4,5 mmol) . La mezcla se agitó a 75°C durante 24 h. A ello se añadió luego NaSMe (0,42 g, 6,0 mmol) . La mezcla se agitó a 70 °C durante la noche. La mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera x 4, se secó, se concentró al vacío. El residuo luego se disolvió en 50 mL de THF. A ello se añadieron LiOH.H20 (1,26 g, 30 mmol) y 50 mL de agua. La mezcla se agitó durante 90 min a temperatura ambiente. Se acidificó usando HC1 6 N hasta que el pH alcanzó 2. El precipitado sólido se recogió por filtración. Se lavó con agua y se secó en horno de vacío. Era el compuesto crudo 230.5.
[0573] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 93 usando el compuesto 230.5. MS experimental para C20H22N10O como ( +H)+ 419,4. UV ?=259, 314 nm.
Ejemplo 94. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-ciano-5- (2H-1,2, 3-triazol-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0574] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 92. MS experimental para C20H22 10O como (M+H)+ 419,3. UV ?=252 nm. RMN (CD30D) : d 9,03 (s, 1H) , 8,61 (s, 1H) , 8,16 (m, 1H) , 8,02 (s, 2H) , 7,91 (m, 1H) , 4,62 (m, 1H) , 3,69 (m, 1H) , 1,94-1, 58 (m, 8H) ppm.
Ej emplo 95. 2-((lR,2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3-ciano-5- ( 1H-1,2,3-triazol-l-il) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0575] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 93. MS experimental para C20H22 10O como (M+H)+ 419,4. UV ?=244, 288 nm. RMN (CD3OD) : d 9,15 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,63 (s, 1H) , 7,99-7,97 (m, 3H) , 4,67 (m, 1H) , 3,72 (m, 1H) , 1 , 90-1 , 58 (m, 8?) ppm.
Ejemplo 96. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- ( 6-metoxipiridin-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 233.1 233.2 233.3 [ 0576 ] El compuesto asequible en comercios 233.1 (2,3 g, 12,2 mmol) y ácido borónico 233,2 (1,68 g, 12,2 mmol) se colocaron en 40 mL de dioxano y 20 mL de agua. ? ello se añadieron K2CO3 (5,05 g, 36,6 mmol) y Pd(Ph3P)2Cl2 (0,86 g, 1,22 mmol). La mezcla se burbujeó con corriente de argón durante 3 min y se mandó a baño de 85 °C bajo argón. La mezcla se agitó durante 90 min. Se concentró al vacio para eliminar dioxano. La mezcla ten se extrajo con cloroformo x . El extracto orgánico se secó y se concentró al vacio para obtener la anilina cruda 233.3. [ 0577 ] El compuesto del titulo luego se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 86 usando anilina 233,3. MS experimental para C23H27 702 como (M+H)+ 434,4. UV ?=245, 296 nm.
Ejemplo 97. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 4-metoxipirimidin-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0578] El compuesto del titulo se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 96. MS experimental para C22H26 8O2 como (M+H)+ 435, 4. UV ?=250 nm. RMN (CD30D) : d 8,53 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,92(m, 1H) , 7,77 (m, 1H) , 7, 54-7, 50 (m, 3H) , 6,79 (d, J=8,0 Hz, 1H) , 4,30 (m, 1H) , 4,01 (s, 3H) , 3,64 (m, 1H) , 1,85-1,36 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 98. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- ( 5-fluoropirimidin-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0579] El compuesto del titulo se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 96. MS experimental para C2iH23FN80 como (M+H)+ 423,3. UV ?=249 nm.
Ejemplo 99. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (4-metil-lH-1,2, 3-triazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0580] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 86. MS experimental para C20H25N9O como (M+H)+ 408, 4. UV ?=245 nm.
Ejemplo 100. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (4-metil-2H-1,2, 3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0581] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 87. MS experimental para C20H2sN9O como (M+H)+ 408, 4. UV ?=251 nm.
Ejemplo 101a. 4- (3- (2H-tetrazol-2-il ) fenilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida 238.1 238.2
[0582] La mezcla de 3-yodoanilina (0,5 mL, 4,2 mmol), tetrazol (0,88 g, 12,6 mmol), K3P04 (2,67 g, 12,6 mmol), Cul (400 mg, 2,1 mmol), DMEDA (0,27 mL, 2,5 mmol) en 6 mL de dioxano y 6 mL de DMSO se agitó a 105°C en un recipiente sellado durante 3 días para dar limpiamente una mezcla de anilina 238.1 (menos polar) y 238.2 en la relación de 17:1 (determinada por HPLC) . Se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera x2. Se secó, se concentró y se sometió a columna flash de sílice para aislar anilina 238.1 usando 40% acetato de etilo en hexano.
[0583] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 86. MS experimental para Ci8H22 ioO como (M+H)+ 395.4. UV ?=250 nm. RMN (CD3CN) : d 9,02 (s, 1H), 8,87 (s, 1H) , 7,98 (d, J=8,0Hz, 1H) , 7,67-7,53 (m, 3H) , 4,83 (ra, 1H), 3,67 (m, 1H) , 1,8-1,4 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 101b. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3-metil-5-(2H-tetrazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema : 239.1 239.2
[0584] La mezcla de 3-bromo-5-metilanilina . HC1 (0,94 g, 4,2 mmol) , tetrazol (0,88 g, 12,6 mmol) , K3P04 (4,45 g, 21 mmol) , Cul (400 mg, 2,1 mmol), D EDA (0,27 mL, 2,5 mmol) en 6 mL de dioxano y 6 mL de DMSO se agitó a 105°C en un recipiente sellado durante 3 días para dar limpiamente de modo exclusivo anilina 239.1. La anilina 239.2 no era experimental por HPLC/LCMS. Se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera x2. Se secó, se concentró y se sometió a columna flash de sílice para aislar anilina 239.1 usando 40% acetato de etilo en hexano.
[0585] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 86. MS experimental para Ci9H24N10O como (M+H)+ 409,4. UV ?=250 nm. RMN (CD3CN) : d 8,85 (s, 1H), 8,80 (s, 1H) , 8,58 (s, 1H) , 7,83 (s, 1H) , 4,83 (m, 1H) , 3,68 (m, 1H), 2,50 (s, 3H) , 1,8-1,4 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 102. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- ( 4-metil-4H-l,2,4-triazol-3-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0586] compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 86 con la correspondiente anilina. MS experimental para C20H25N9O como (M+H)+ 408, . UV ?=24ß, 304 nm.
Ej emplo 103. (lH-benzo [d] imidazol-l-il) fenilanino) ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema : 241.1
[0587] La mezcla de 3-yodoanilina (0,5 mL, 4,2 mmol) , bencimidazol (1,5 g, 12,6 mmol), K3P04 (2, 67 g, 12,6 mmol), Cul (400 mg, 2,1 mmol), DMEDA (0,27 mL, 2,5 mmol) en 6 mL de dioxano y 6 mL de DMSO se agitó en un recipiente sellado a 120 °C durante 2 días para obtener de forma pura anilina 241,1. La mezcla se diluyó con 300 mL de acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera, se secó, se filtró, se concentró, se sometió a columna flash de sílice con 70% de acetato de etilo en hexano para aislar anilina 241,1 (730 mg, 83%) en forma de sólido blanco.
[0588] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 89 con la anilina. MS experimental para C24H26N80 como (M+H)+ 443, 4. UV ?=249 nm. RMN (CD3OD) : d 9,07 (s, 1H), 8,56 (s, 1H) , 8,29 (s, 1H) , 7,87(m, 1H) , 7,74 (m, 3H) , 7,56 (m, 3H) , 4,14 (m, 1H) , 3,50 (m, 1H) , 1,72-1,11 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 104. 4- ( 3- ( lH-indazol-l-il ) fenilamino) -2-((lR,2S)-2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida (242. A) y 4-(3-(2H-indazol-2-il) fenilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida (242. B) 242.1 242.2 [ 0589 ] La mezcla de 3-yodoanilina (0,5 mL, 4,2 mmol) , indazol (1,5 g, 12,6 mmol), K3P0 (2,67 g, 12,6 mmol), Cul (400 mg, 2,1 mmol), DMEDA (0,27 mL, 2,5 mmol) en 6 mL de dioxano y 6 mL de DMSO se agitó en un recipiente sellado a 120 °C durante 17 h para obtener de forma pura anilina 242.1 (menos polar) y anilina 242.2 en la relación de 6,9:1 (determinada por HPLC) . La mezcla se diluyó con 300 mL de acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera, se secó, se filtró, se concentró, se sometió a columna flash de sílice para aislar las dos anilinas. [ 0590 ] Los dos compuestos del título se prepararon usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 86 con las correspondientes anilinas. Con la anilina 242.1, se preparó el compuesto 242. A: MS experimental para C2 H26 80 como (M+H)+ 443,4. UV ?=247, 301 nm. Con la anilina 242.2, se preparó el compuesto 242. B: MS experimental para C2 H26N80 como (M+H)+ 443, 4. UV ?=240, 295 nm. El compuesto 104A: RMN (CD3OD) : d 8,57 (m, 1H) , 8,56 (s, 1H) , 8,31 (s, 1H) , 7,87(m, 1H) , 7,83 (m, 3H) , 7,59 (m, 2H) , 7,51 (m, 1H), 7,33 (m, 1H) , 7,28 (m, 1H) , 4,34 (m, 1H) , 3,60 (m, 1H) , 1,80-1,22 (m, 8H) ppm. El compuesto 104B: RMN (CD3OD) : d 8,84 (s, 1H) , 8,78 (m, 1H) , 8,55 (s, 1H) , 7, 78-7, 76 (m, 2H) , 7,68 (d, J=9,2 Hz, 1H) , 7,57 (m, 1H) , 7, 42-7, 34 (m, 2H) , 7,13 (m, 1H) , 4,46 (m, 1H), 3,63 (m, 1H) , 1,85-1,19 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 105. 4- (3- ( ??-benzo [d] [1, 2, 3] triazol-l-il ) fenilamino) -2-( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida (243. A) y 4- (3- (2H-benzo[d] [ 1, 2 , 3 ] triazol-2-il ) fenilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) pirimidin-5-carboxamida (243. B) Esquema : 243.1 243.2 [ 0591 ] La mezcla de 3-yodoanilina (0,5 mL, 4,2 mmol) , indazol (1,5 g, 12,6 mmol), K3P04 (2,67 g, 12,6 mmol), Cul (400 mg, 2,1 mmol), DMEDA (0,27 mL, 2,5 mmol) en 6 mL de dioxano y 6 mL de DMSO se agitó en un recipiente sellado a 120 °C durante 17 h para obtener de forma pura anilina 243.1 y anilina 243.2 (menos polar) en la relación de 7,5:1 (determinada por HPLC) . La mezcla se diluyó con 300 mL de acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera, se secó, se filtró, se concentró, se sometió a columna flash de sílice para aislar las dos anilinas. [ 0592 ] Los dos compuestos del título se prepararon usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 85 con las correspondientes anilinas. Con la anilina 243.1, se preparó el compuesto 2432. A: MS experimental para C23H25N90 como (M+H)+ 444,4. UV ?=246, 291 nm. Con la anilina 243.2, se preparó el compuesto 243. B: MS experimental para C23H25N9O como (M+H)+ 444, 4. UV ?=234, 303 nm. El compuesto 105A: RMN (CD3OD) : d 8,78 (m, 1H) , 8,56 (s, 1H) , 8,12 (d, J=8,4 Hz, 1H) , 7,95 (d, J=8,4 Hz, 1H) , 7,68 (m, 3H), 7,54 (m, 1H) , 7,47 (m, 1H) , 4,57 (m, 1H) , 3,68 (m, 1H) , 1,90-1,44 (m, 8H) ppm. El compuesto 105B: RMN (CD3OD) : d 9,07 (s, 1H) , 8,55 (s, 1H), 8,16 (d, J=7,6 Hz, 1H) , 7,92 (m, 2H) , 7,59 (m, 1H), 7,49 (m, 2H) , 7,42 (m, 1H) , 4,61 (m, 1H) , 3,67 (m, 1H) , 1,93-1,59 (m, 8H) ppm.
E emplo 106. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (imidazo [1, 2-a] piridin-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0593] compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 86 ' con la biarilanilina (asequible en comercios) . MS experimental para C24H26 80 como (M+H)+ 443, 4. UV ?=240, 292 nm.
Ejemplo 107. 4- (3- (2H-benzo [b] [ 1 , ] oxazin-4 ( 3H) -il) fenilamino) -2-( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema : 245.1 245.2 245.3 245.4
[0594] La mezcla de compuesto 245.1 asequible en comercios (600 mg, 4,44 mmol), 3-yodo-l-nitrobenceno (245, 2, 1, 11 g, 4,44 mmol), Pd(dba)2 (128 mg, 0,22 mmol), Ph5FcP(tBu)2 (313 mg, 0,44 mmol) y NaOtBu (640 mg, 0,66 mmol) en 8 mL de tolueno se agitó a 50 °C bajo argón durante (21 h) . El compuesto 245.2 se formó de forma pura. La mezcla se diluyó con 300 mL de acetato de etilo, se lavó con salmuera x3, se secó, se filtró a través de un tapón de sílice delgado. El filtrado se sometió a tratamiento de 200 mg de Pd/C al 10% a 50 psi H2 de agitador Parr durante la noche. La mezcla se filtró a través de celite y el celite se lavó bien con metanol. El filtrado se concentró al vacío para obtener la anilina cruda 245,4 (870 mg, 87% para 2 etapas).
[0595] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 12 con la anilina preparada con anterioridad. S experimental para C25H29N7O2 como (M+H)+ 460, 4. UV ?=243. 290 nm.
Ejemplo 108. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 4-fenilpiperazin-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema : 245.1 245.2 La mezcla de 3-fluoro-l-nitrobenceno (1,0 mL, 9,4 mmol), N-fenilpiperazina (2,87 mL, 18,8 mmol) y carbonato de cesio (6,13 g, 18,8 mmol) en NMP se agitó a 128°C durante tres noches. Se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera x2, se secó, se concentró y se purificó usando columna flash de sílice para obtener el compuesto 245,1 (1,19 g, 45%). Se disolvió en 200 mL de acetato de etilo y se trató con 500 mg de Pd/C al 10% bajo 50 psi de presión de hidrógeno en un agitador Parr durante la noche. La mezcla se filtró a través de celite y el celite se lavó bien con metanol. El filtrado se concentró al vacío para obtener la anilina 245.2.
[0596] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 12 con la anilina preparada con anterioridad. MS experimental para C27H34 8O como (M+H)+ 487,5. UV ?=245 nm.
Ejemplo 109. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (quinolin-6-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema :
[0597] La mezcla de 6-bromoquinolina (870 mg, 4,2 mmol), ácido borónico (580 mg, 4,2 mmol), Pd(Ph3P)2Cl2 (590 mg, 0,84 mmol), K2CO3 (1,74 g, 12,6 mmol) en 20 mL de dioxano y 10 mL de agua se desgasificó usando corriente de argón durante 3 min y se agitó a 85°C bajo argón durante 90 min. La mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera, se secó, se concentró, se sometió a columna flash de sílice con 60% acetato de etilo en hexano para aislar la anilina caracterizada. á
[0598] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 86 con la anilina preparada con anterioridad. MS experimental para C26H27 7O como (M+H)+ 454,4. UV ?=263 nm.
Ejemplo 110. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) -4- (3- (quinolin-3-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0599] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 109. MS experimental para C26H27 7O como (M+H)+ 454, 4. UV ?=249 nm.
[0600] Ejemplo 112. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4-( l-metil-lH-pirazol-3-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0601] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 83 con 3-yodo-l-metilpirazol para reemplazar 2-bromo-5-metil-1 , 3 , 4-tiadiazol 153.1. MS experimental para C2iH26N80 como (M+H)+ 407, 3. UV ?=240, 311 nm.
[0602] Ejemplo 113. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) -4- (4-( l-metil-lH-pirazol-4-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0603] compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 83 con 4-yodo-l-metilpirazol para reemplazar 2-bromo-5-metil-l , 3 , 4-tiadiazol 153.1. MS experimental para C2iH26N80 como (M+H)+ 407,3. UV ?=239, 314 nm.
[0604] Ejemplo 114. 4- (4- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2-( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0605] compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 87 con 4-fluoro-l-nitrobenceno para reemplazar 3-fluoro-l-nitrobenceno . MS experimental para C19H23N9O como (M+H)+ 394, 3. UV ?=239, 310 nm.
RMN (CD3OD) : d 8,54 (s, 1H) , 8,12 (m, 2H) , 7,93 (s, 2H) , 7,81 (m, 2H), 4,40 (m, 1H) , 3,73 (m, 1H) , 1,94-1,58 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 115. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-fluoro-5-(2H-1, 2 , 3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0606] El compuesto anterior se preparó usando 3-fluoro-5-yodoanilina usando un procedimiento igual al descrito en el Ejemplo 92. MS experimental para C19H22FN90 como (M+H)+ 412,3. UV ?=250 nm.
Ejemplo Il6. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4-metoxi-3-(2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0607] El compuesto anterior se preparó usando 3-yodo-4-metoxianilina usando un procedimiento igual al descrito en el Ejemplo 92. 3-Yodo-4-metoxianilina se preparó de 3-yodo-4-metoxi-1-nitrobenceno comercial por hidrogenación con 5% de Pt sobre carbón sulfonado en EtOAc. MS experimental para C20H25N9O2 como (M+H)+ 424,3. UV ?=244, 295 nm.
Ejemplo 117. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-metoxi-5-(2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0608] El compuesto anterior se preparó usando 3-bromo-5-metoxianilina usando un procedimiento igual al descrito en el Ejemplo 92. 3-Bromo-5-metoxianilina se preparó de 3-bromo-5-metoxi-l-nitrobenceno comercial por hidrogenación con 5% de Pt sobre carbón sulfonado en EtOAc . MS experimental para C20H25N9O2 como (M+H)+ 424,3. UV ?=249 nm.
Ejemplo 118. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4-metil-3- (2H-l,2,3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0609] El compuesto anterior se preparó usando 4-metil-3- (2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il ) anilina usando un procedimiento igual al descrito en el Ejemplo 87. 4-Metil-3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) anilina se preparó a partir de 3-fluoro-4-metil-l-nitrobenceno comercial y 1 , 2 , 3-triazol seguido por hidrogenación con 10% de Pd sobre carbón en EtOAc, tal como se muestra en el Ejemplo 106. MS experimental para 'C20H25N9O como (M+H)+ 408,3. UV ?=243'. 281 nm. d 1,5-1,9 (m, 8H) , 2,36 (s, 3H) , 3,60-3, 70 (m, 1H) , 4, 40-4, 50 (m, 1H) , 7,35-7,43 (m, 2H) , 8,00 (s, 2H) , 8,28-8,33 (m, 1H) , 8,53 (s, 1H) Ejemplo 119. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-metil-5- (2H-1,2, 3-triazol-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0610] El compuesto anterior se preparó usando 3-bromo-5-metilanilina comercial usando un procedimiento igual al descrito en el Ejemplo 92. MS experimental para C20H25N9O como (M+H)+ 408, 3. UV ?=248 nm. d 1,5-1,9 (m, 8H) , 2,45 (s, 3H) , 3,65-3,75 (m, 1H) , 4,6-4,7 (s, 1H) , 7,12-7,18 (m, 1H) , 7,72 (s, 1H) , 7,98 (s, 2H) , 8,56 (s, 1H), 8,72-8,78 (m, 1H) Ejemplo 120. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- (pirimidin-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 149.4 249.3
[0611] Etapa 1: La mezcla de 3- ( 4 , 4 , 5, 5-tetrametil-l , 3 , 2-dioxaborolan-2-il ) anilina (670 mg, 3,06 mmol), 2-bromopirimidina (486 mg, 3,06 mmol), Pd(PPh3)2Cl2 (430 mg, 0,61 mmol), K2C03 (1,27 g, 9,18 mmol) en 20 mL de dioxano y 10 mL de agua se desgasificó usando corriente de argón durante 5 minutos y se agitó a 85°C bajo argón durante 2 horas. Se diluyó con 300 mL de EtOAc y se lavó con agua y salmuera x2. La fase orgánica luego se secó, se concentró al vacio y se sometió a columna flash para dar el compuesto 249,1 (sólido blanco, 440 mg, 84% de rendimiento, fuera de columna con 60% de EtOAc en hexano) . MS experimental para C10H9N3 como (M+H)+ 172.1.
[0612] Etapa 2: A la mezcla de anilina 249.1 (440 mg, 2,57 mmol) y 4-cloro-2-metiltio-5-pirimidincarboxilato de etilo (243.3, CAS 5909-24-0, 600 mg, 2,57 mmol) en 20 mL de DMF se añadió DIEA (0,90 mL, 5,14 mmol). La mezcla se agitó a 80 °C durante 10 horas. A ello se añadió 350 mL de EtOAc, se lavó con salmuera x2, se secó, se filtró y se concentró al vacio para obtener el compuesto 249.2 con rendimiento cuantitativo. MS experimental para Ci8Hi7 502S como (M+H)+ 368,1.
[0613] Etapa 3: El compuesto preparado con anterioridad (2,57 mmol) se disolvió en 50 mL de THF y 5 mL de agua. A ello se añadió hidrato de LiOH (540 mg, 12,9 mmol). La mezcla se agitó durante la noche. Se concentró al vacio para eliminar THF. Al residuo se añadió HC 1 1 N hasta que el pH alcanzó 2. El producto sólido se aisló por filtración. Se lavó bien con agua fría y se secó en horno de vacio para dar el compuesto 249.3 con rendimiento cuantitativo en forma de un sólido tostado. MS experimental para C16H13N5O2 S como (M+H)+ 340,1.
[0614] Etapa- 4: El compuesto antes preparado 249.3 (2,57 mmol) se agitó en 20 mL de DMF. A ello se añadieron EDC.HC1 (740 mg, 3,86 mmol) e hidrato de HOBt (590 mg, 3,86 mmol). La mezcla se agitó durante 1 h y HPLC indicó que todo el material de partida 249,3 se había consumido. A esta mezcla se añadió luego amonio (solución 0,5 N en dioxano, 15 mL, 7,5 mmol). La mezcla se agitó durante 2 horas y se concentró al vacío para eliminar dioxano. El agua se añadió al residuo y el sólido se trituró. Este sólido se aisló por filtración, se lavó con agua fría bien y se secó en horno de vacío para dar el compuesto 249,4 en forma de un sólido tostado. MS experimental para Ci6Hi4N60S como (M+H) + 339, 1.
[0615] Etapa 5: El compuesto antes preparado 249.4 (150 mg, 0,44 mmol) se disolvió en 6 mL de NMP. A ello se añadió MCPBA (65% puro, 140 mg, 0,53 mmol). Se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos para obtener una mezcla del correspondiente sulfóxido y sulfona. A ello se añadieron luego DIEA (230 L, 1,32 mmol) y luego (1S, 2R) -2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo (81.2, 142 mg, 0,66 mmol) . La mezcla se agitó durante 2 horas en baño a 90 °C. Luego se diluyó con 150 mL de EtOAc, se lavó con a2C03 saturado y salmuera x2, se secó sobre MgS04, se filtró y se concentró al vacío. El residuo luego se expuso a mezcla 1:1 de TFA y DC durante 1 h. Se concentró y se sometió a HPLC en fase inversa para aislar el compuesto del título 249. MS experimental para C2iH24N80 como (M+H)+ 405, 3. UV ?=249 nm. RMN (CD3OD) : d 8,63 (s, 1H), 8,59 (s, 1H) , 8,57 (s, 1H) , 8,24 (s, 1H) , 8,01 (m, 1H) , 7,27 (m, 2H) , 7,12 (dd, J=4 , 8 , 4,8 Hz, 1H) , 4,24 (m, 1H) , 3,37 (m, 1H), 1,64-1,21 (m, 8H) ppm.
Ej emplo 121. 2-((lR,2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4- (pirimidin-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0616] El compuesto anterior se preparó usando 4- (4, 4,5,5-tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolan-2-il) anilina comercial usando un procedimiento igual al descrito en el Ejemplo 120. MS experimental para C2iH24N80 como ( +H)+ 405,3. UV ?=231, 314 nm. RMN (CD3OD) : d 8,83 (d, J=4 , 8 Hz, 2H) , 8,56 (s, 1H) , 8,45 (m, 2H), 7,81 (m, 2H) , 7,35 (dd, J=5,2, 4,8 Hz, 1H) , 4,44 (m, 1H) , 3,78 (m, 1H), 1,82-1, 62 (m, 8H) ppm.
[0617] Ejemplo 122. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3-( l-metil-lH-pirazol-3-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0618] El compuesto anterior se preparó usando 3-yodo-l-metilpirazol comercial usando un procedimiento igual al descrito en el Ejemplo 120. MS experimental para C H^NsO como (M+H) + 407, 3. UV ?=249 nm.
Ejemplo 123. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (1-metil-lH-pirazol-4-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0619] El compuesto anterior se preparó usando 4-yodo-l-metilpirazol comercial usando un procedimiento igual al descrito en el Ejemplo 120. MS experimental para C2iH26 80 como (M+H) + 407, 3. UV ?=247 nm.
Ejemplo 124. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 3- (imidazo [l,2-a]piridin-6-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida A
[0620] El compuesto anterior se preparó usando 6-bromoimidazo [ 1 , 2-a ] piridina comercial usando un procedimiento igual al descrito en el Ejemplo 120. MS experimental para C24H26 80 como (M+H)+ 443, 3. UV ?=247 nm. RMN (CD30D) : d 9,17 (s, 1H) , 8,57 (s, 1H), 8,31 (dd, J=9, 6, 1,6 Hz, 1H) , 8,30 (d, J=l,6 Hz, 1H), 8,09 (d, J=2,4 Hz, 1H) , 8,03 (d, J=9,2 Hz, 1H) , 7,95 (s amplio, 1H), 7,87 (s, 1H) , 7,63 (s amplio, 2H) , 4,35 (m, 1H) , 3,66 (m, 1H) , 1,90-1,48 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 125. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4- ( imidazo [l,2-a]piridin-6-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0621] El compuesto anterior se preparó usando 6-bromoimidazo [1, 2-a] piridina comercial y 4- ( 4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-1 , 3 , 2-dioxaborolan-2-il ) anilina usando un procedimiento igual al descrito en el Ejemplo 120. MS experimental para C24H26 8O como (M+H)+ 443,3. UV ?=245, 303 nm.
Ejemplo 126. 4- ( lH-indazol-6-ilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0622] Etapa 1: A una solución agitada de ácido carboxilico 202.1 (85 g, 540 mmol) en cloruro de tionilo (425 raL) se añadió piridina (8,5 mL, 0,11 mmol) lentamente. La reacción se agitó a 75 °C durante lo cual se concentró y se secó al vacio en un polvo amarillo claro. Este sólido amarillo lentamente se diluyó con 750 mL' de etanol y se calentó a reflujo. Al día siguiente, se determinó que la reacción estaba completa por medio de HPLC y luego se enfrió en un baño de hielo y el sólido se filtró y se lavó con éter dietilico para dar como resultado éster etílico 202.2 en forma de un polvo blanquecino (91 g, 87% para dos etapas). MS experimental para 07?8?204 como (M+H)+ 185.0.
[0623] Etapa 2: El éster 202.2 (22 g, 120 mmol) se disolvió en oxicloruro de fósforo (60 mL, 600 mmol) y la mezcla se trató con N, N-dietilanilina (27 mL, 167 mmol) y la mezcla se calentó hasta 105 °C hasta que la reacción se determinó completa por HPLC. Luego se enfrió hasta temperatura ambiente y lentamente se añadió a 1 L de hielo picado dando como resultado la formación de un precipitado beige que se recogió por filtración y se secó al vacio para dar como resultado dicloruro 202.3 en forma de un polvo amarillo claro (22,5 g, 85%). XH RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 9,13 (s, 1H), 4,37 (q, 2H) , 1,32 (t, 3H) .
[0624] Etapa 3: Dicloropirimidina 202.3 (1,04 g, 4,7 mmol) se disolvió en NMP (30 mL) y se agitó en baño de hielo. A ello se añadieron 6-aminoindazol 202.4 (690 mg, 5,2 mmol) y luego gota a gota etildiisopropilamina (DIEA, 1,64 mL, 9,4 mmol). La mezcla se agitó durante 40 minutos y a ello se añadió tiometóxido de sodio (660 mg, 9,4 mmol). La mezcla se agitó durante la noche, se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera tres veces y se concentró al vacio para dar el compuesto crudo 202.5 en forma de un sólido marrón claro en rendimiento cuantitativo. MS experimental para C15H15N5O2 S como (M+H)+ 330,1.
[0625] Etapa 4: El éster etílico 202.5 (4,7 mmol) se disolvió en 60 mL de THF. A ello se añadieron hidróxido de litio hidratado (236 mg, 5,6 mmol) y 20 mL de agua. La mezcla se agitó durante la noche y a ello se añadió con cuidado solución 1 N de HC1 hasta que el pH alcanzó 2. La mezcla se concentró al vacío para eliminar THF. El sólido blanco se trituró y se aisló usando un embudo de Büchner. Se lavó con agua y se secó en horno de vacío para dar el compuesto 202.6 (1,14 g, 81%) en forma de un sólido blanco. MS experimental para Ci3HiiN502S como (M+H)+ 302,1. [ 0626 ] Etapa 5: Ácido carboxilico 202 . 6 (1,14 g, 3,8 mmol) se disolvió en 30 mL de DMF. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (1,09 g, 5,7 mmol) e hidrato de HOBt (770 mg, 5,7 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. A ello se añadió luego amoniaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 22 mL, 11,4 mmol). La mezcla se agitó durante 2 horas. Luego se concentró al vacio y se extrajo en agua y acetato de etilo. La fase orgánica se separó y se lavó con salmuera cuatro veces. La fase orgánica luego se secó sobre MgS04 y se concentró al vacio para obtener el compuesto 202 . 7 en forma de un sólido amarillo claro (820 mg, 72%). S experimental para Ci3Hi2N6OS como (M+H)+ 301, 1. [ 0627 ] Etapa 6: El compuesto 202 , 7 (36 mg, 0,12 mmol) sé disolvió en 3 mL de NMP. A ello se añadió MCPBA (65% puro, 48 mg, 0,18 mmol). Se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. A ello se añadió luego cis-1 , 2-diaminociclohexano (71 L, 0,60 mmol) . La mezcla se agitó durante 90 minutos en baño a 90 °C. Esta mezcla luego se sometió a HPLC preparativa para aislar el compuesto racémico del titulo 202 . MS experimental para Cis^ sO como (M+H)+ 367,2. UV ?=245, 300 nm.
Ejemplo 127. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (benzo [d] tiazol-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida [ 0628 ] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 126 con 6-aminobenzotiazol para reemplazar 6-aminoindazol 202 . 4 . MS experimental para Ci8H2i 7OS como (M+H)+ 384,2. UV ?=241, 298 nm. Ejemplo 128. 4- ( ??-benzo [d] [1,2,3] triazol-6-ilamino )-2-((lR,2S)-2-aminociclohexilamino ) pirimidin-5-carboxamida 3 [ 0629 ] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 126 con 5/6-aminobenzotriazol para reemplazar 6-aminoindazol 202 . 4 . MS experimental para Ci7H2iN90 como (M+H)+ 368, 2. UV ?=246, 295 nm. Ejemplo 129. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (2-metilbenzo [d] tiazol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0630] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 126 con 5-amino-2-metilbenzotiazol para reemplazar 6-aminoindazol 202,4. MS experimental para Ci9H23 7OS como ( +H)+ 398,2. UV ?=246, 295 nm. Ejemplo 130. 4- (lH-indol-6-ilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida 6
[0631] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 126 con 6-aminoindol para reemplazar 6-aminoindazol 202.4. MS experimental para C19H23N7O como (M+H)+ 366,2. UV ?=239, 309 nm.
Ejemplo 131. 4- ( lH-indazol-5-ilamino) -2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0632] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 126 con 5-aminoindazol para reemplazar 6-aminoindazol 202.4. MS experimental para Ci8H22N80 como (M+H) + 367 , 2. UV ?=245, 294 nm. Ejemplo 132. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) -4- (quinolin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida 208.4 208
[0633] Etapa 1: Dicloropirimidina 202.3 (500 mg, 2,3 mmol) se disolvió en NMP (20 mL) y se agitó en baño de hielo. A ello se añadieron 6-aminoquinolina 208.1 (390 mg, 2,7 mmol) y luego gota a gota etildiisopropilamina (DIEA, 0,72 mL, 4,1 mmol). La mezcla se agitó durante 2 horas, se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera tres veces y se concentró al vacio para dar el compuesto crudo 208.2 en forma de un sólido marrón claro en rendimiento cuantitativo. MS experimental para Ci6Hi3Cl 402 como (M+H)+ 329, 1.
[0634] Etapa 2: El éster etílico 208.2 (2,3 mmol) se disolvió en 30 mL de THF. A ello se añadieron hidróxido de litio hidratado (193 mg, 4,6 mmol) y 6 mL de agua. La mezcla se agitó durante 7 horas y a ello se añadió con cuidado solución 1 N de HC1 hasta que el pH alcanzó 5. La mezcla se concentró al vacío para eliminar THF y se extrajo con acetato de etilo 5 times. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron y se concentraron al vacío para dar ácido crudo 208.3. MS experimental para C14H9C IN4O2 como (M+H)+ 301, 1.
[0635] Etapa 3: Ácido carboxílico 208,3 (220 mg, 0,73 mmol) se disolvió en 18 mL de NMP. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (210 mg, 1,1 mmol) e hidrato de HOBt (150 mg, 1,1 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. A ello se añadió luego amoníaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 7,3 mL, 3,65 mmol). La mezcla se agitó durante 2,5 horas. Luego se concentró al vacío y se extrajo en agua y acetato de etilo. La fase orgánica se separó y se lavó con salmuera tres veces. La fase orgánica luego se secó sobre MgS04 y se concentró al vacío para obtener el compuesto 208.4 en forma de un sólido (180 mg, 62%). MS experimental para C2oHi4N802 como ( +H) + 399, 1.
[0636] Etapa 6: El compuesto 208.4 (72 mg, 0,18 mmol) se disolvió en 3 mL de N P. A ello se añadió cis-1,2-diaminociclohexano (100 µ?_, 0,90 mmol). La mezcla se agitó durante 90 minutos en baño a 90 °C. Esta mezcla luego se sometió a HPLC preparativa para aislar el compuesto racémico del titulo 208. MS experimental para C20H23 7O como (M+H)+ 378,2. UV ?=241, 283 nm .
Ejemplo 133. 4- ( ??-benzo [d] imidazol-6-ilamino ) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0637] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 132 con 6-amino-??-benzo [d] imidazol-l-carboxilato de ter-butilo para reemplazar la 6-aminoquinolina 208.1. MS experimental para Ci8H22N80 como (M+H)+ 367,2. UV ?=243. 294 nm.
Ejemplo 134. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) - - (benzo [d] tiazol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida [ 0638 ] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 126 con 5-aminobenzotiazol para reemplazar 6-aminoindazol 202 . 4 . MS experimental para CigH2iN7OS como (M+H)+ 384,2. UV ?=246, 292 nm. Ejemplo 135. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( imidazo [ 1 , 2-a] piridin-6-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida [ 0639 ] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 126 con imidazo [ 1 , 2-a] piridin-6-amina para reemplazar 6-aminoindazol 202 , 4 . MS experimental para Ci8H22N80 como (M+H)+ 367,2. UV ?=250 nm.
Ejemplo 136. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 2 , 3-dihidrobenzo [b] [1, 4 ] dioxin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0640] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 132 con 2,3-dihidrobenzo [b] [1, ] dioxin-6-amina para reemplazar 6-aminoquinolina 208.1. MS experimental para C20H23N7O como ( +H) + 385.2. UV ?=240, 294 nm. RMN (CD30D) : d 8,45 (s, 1H) , 7,31 (d, J=2,4Hz, 1H), 6,91 (dd, J=8,4, 2,0 Hz, .1H) , 6,85 (d, J=8,8 Hz, 1H) , 4,27 (m, 5H) , 3,79 (m, 1H) , 1,94-1,58 (m, 8H) ppm.
E emplo 137. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( quinoxalin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0641] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 126 con 6-aminoquinoxalina para reemplazar 6-aminoindazol 202.4. MS experimental para C19H22N80 como (M+H)+ 379,2. UV ?=242 nm. RMN (CD3OD) : d 8,87 (s, 1H) , 8,82 (s, 1H) , 8,74 (m, 1H) , 8,61 (s, 1H), 8,10 (d, J=8,8 Hz, 1H) , 7,87 (d, J=8,4 Hz, 1H) , 4,54 ( 1H), 3,82 (m, 1H) , 1,99-1,62 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 138. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) - (benzo [c] [1,2,5] tiadiazol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0642] El compuesto racémico anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 132 con 2,1,3-benzotiadiazol-5-amina para reemplazar 6-aminoquinolina 208,1. MS experimental para C17H2oN8OS como (M+H)+ 385.2. UV ?=243 nm. RMN (CD3OD) : d 8,73 (m, 1H) , 8,60 (s, 1H) , 7,96 (m, 1H) , 7,63 (dd, J=9,6, 2,0 Hz, 1H) , 4,48 (m, 1H) , 3,87 (m, 1H) , 1,98-1,63 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 139. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (2-metilquinolin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida etapa 3
[0643] Etapa 1: A una solución de Dicloropirimidina 215.1 (700 mg, 3,16 mmol) en acetonitrilo (8 mL) se añadió una suspensión de 6-amino-2-metilquinolina (500 mg, 3,16 mmol), diisopropilamina (0,61 mL, '3,5 mmol) en acetonitrilo (10 mL) a 0 °C. La mezcla de reacción se calentó lentamente hasta temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción luego se diluyó con agua y el precipitado se recogió por filtración para dar como resultado el producto deseado 215,2 (964 mg, 89%). MS experimental para C17H15C IN O2 como (M+H)+ 343, 1.
[0644] Etapa 2: El éster etílico 215.2 (960 mg, 2,81 mmol) se diluyó con 1,4-dioxano (7,5 mL) y etanol (2 mL) , seguido por hidróxido de litio acuoso (1,0 M, 2,8 mL, 2,8 mmol) y se agitó a temperatura ambiente hasta convertir todo el material de partida en el ácido carboxílico. La reacción luego se diluyó con y se acidificó con HC1 1 N (3,0 mL) . La suspensión resultante luego se filtró, se lavó con agua y se secó dando 870 mg del ácido carboxilico 215.3 (98%). MS experimental para C 15H11CIN4O2 como (M+H)+ 316, 1.
[0645] Etapa 3: Al ácido carboxilico 215.3 (870 mg, 2,76 mmol), EDC (792 mg, 4,14 mmol) , HOBt (560 mg, 4,14 mmol) en N,N-dimetilformamida (14 mL) se añadió amoniaco (0,5 M en 1,4-dioxano, 14 mL, 6,9 mmol) y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción luego se diluyó con agua (100 mL) y el precipitado se recogió por filtración para dar como resultado el producto deseado 215.4 (1,10 g, 97%). MS experimental para C2iHi6 802 como (M+H)+ 413, 1.
[0646] Etapa 4: Una mezcla de Éter de benzotriazolilo 215,4 (75 mg, 0,182 mmol), cis-1 , 2-diaminociclohexano (25 mg, 0,218 mmol), DIPEA (0,1 mL, 0,546 mmol) en iso-propanol (3 mL) se calentó en microondas (Emry' s Optimizer) a 130 °C durante 20 min.
[0647] La mezcla de reacción luego se diluyó con agua y acetonitrilo y se purificó directamente por HPLC preparativa para dar como resultado el producto deseado, 215, después de liofilización . MS experimental para C21H25N7O como (M+H)+ 392,2. Ejemplo 140. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( quinolin-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0648] El compuesto anterior se preparó usando 5-Aminoquinolina usando un procedimiento similar al descrito en el Ejemplo 129. MS experimental para C20H23 7O como (M+H)+ 378, 3.
Ejemplo 141. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminocíelohexilamino) -4- (2-metilquinolin-8-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0649] El compuesto anterior se preparó usando 8-Amino-2-metilquinolina usando un procedimiento similar al descrito en el Ejemplo 140. MS experimental para C2iH25 70 como (M+H)+ 392,3.
Ejemplo 142. 2- ( ( 1S, 2R) -2-aminociclohexilamino) -4- (quinolin-8-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0650] El compuesto anterior se preparó usando 8-Aminoquinolina usando un procedimiento similar al descrito en el Ejemplo 139. MS experimental para C20H23N7O como (M+H)+ 378, 3.
Ejemplo 143. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (2- (morfolinometil ) quinolin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida El compuesto anterior se preparó usando 2- (morfolinometil ) quinolin-6-amina (J. Med.Chem 2006, 49, 7095) usando un procedimiento similar al descrito en el Ejemplo 139. MS experimental para C25H32N8O2 como (M+H)+ 477.4.
Ejemplo 144. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (2 , 2-difluorobenzo [d] [1,3] dioxol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida 220.4 220.5 220
[0651] Etapa 1: A una solución de Dicloropirimidina 220.1 (700 mg, 3,16 ramol) en acetonitrilo (10 mL) se añadió una suspensión de 2 , 2-difluoro-5-aminobenzodioxol (549 mg, 3,16 mmol) , diisopropilamina (0,61 mL, 3,5 mmol) en acetonitrilo (5 mL) a 0 °C. La mezcla de reacción se calentó lentamente hasta temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción luego se diluyó con agua (50 mL) y el precipitado se recogió por filtración para dar como resultado el producto deseado 220.2 (1,03 g, 91%). MS experimental para Ci4Hi0Cl F2N304 como (M+H) + 358, 1.
[0652] Etapa 2: El éster etílico 220.2 (1,03 g, 2,9 mmol) se diluyó con 1,4-dioxano (7,5 mL) seguido por hidróxido de litio acuoso (1,0 M, 2,9 mL, 2,9 mmol) y se agitó a temperatura ambiente hasta convertir todo el material de partida en el ácido carboxilico. La reacción luego se diluyó con agua (20 mL) y se acidificó con HC1 1 N (3,6 mL) . La suspensión resultante luego se filtró, se lavó con agua y se secó dando 950 mg del ácido carboxilico 220 , 3 (99%). MS experimental para Ci2H6Cl G2?304 como (M+H)+ 330, 0. [ 0653 ] Etapa 3: Al ácido carboxilico 220 , 3 (950 mg, 2,89 mmol), EDC (828 mg, 4,33 mmol) , HOBt (663 mg, 4,33 mmol) en N, N-dimetilformamida (14 mL) se añadió amoniaco (0,5 M en 1,4-dioxano, 14 mL, 6,9 mmol) y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción luego se diluyó con agua (60 mL) y el precipitado se recogió por filtración para dar como resultado el producto deseado 220 . 4 (1,26 g, 99%). MS experimental para CisHu^NvC^ como (M+H)+ 428, 2. [ 0654 ] Etapa 4 y Etapa 5: Una mezcla de éter de benzotriazolilo 220 . 4 (75 mg, 0,176 mmol), (lS,2R)-2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo (45 mg, 0,211 mmol), DIPEA (0,1 mL, 0,530 mmol) en iso-propanol (3 mL) se calentó en microondas (Emry's Optimizer) a 130 °C durante 20 min. La mezcla de reacción se concentró y luego se trató con HC1 4,0 M en dioxano (5,0 mL) . Después de 1 hora a temperatura ambiente, se concentró la mezcla de reacción y se diluyó con agua y acetonitrilo y se purificó directamente por HPLC preparativa para dar como resultado el producto deseado 220 , después de liofilización . MS experimental para Ci8H2oE2N603 como (M+H) + 407 , 28.
Ejemplo 145 Se prepararon los siguientes compuestos usando un procedimiento similar al descrito en el Ejemplo 143.
Tabla 1.
Ejemplo 167. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( ' - ( 2-oxopiridin-1 ( 2H) -il ) bifenil-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0655] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120. MS experimental para C28H29N7O2 como ( +H)+ 496,5. UV ?=245 nm. R N (CD3OD) : d 8,51 (s, 1H), 8,12 (s, 1H) , 7,79 (d, J=8,8 Hz, 2H) , 7,63 (m, 2H) , 7,55-7,49 (m, 5H) , 6,65 (m, 1H) , 6,50 (m, 1H) , 4,25 (m, 1H) , 3,58 1H) , 2,54 (t, 2H) , 1,84-1,40 (m, 8H) ppm Ej emplo 168. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( ' - (2-oxopiperidin-l-il ) bifenil-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0656] compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120. MS experimental para C28H33N-7O2 como (M+H)+ 500,5. UV ?=249 nm. RMN (CD3OD) : d 8,50 (s, 1H), 8,09 (s, 1H) , 7,68 (d, J=8,8 Hz, 2H) , 7, 49-7, 43 (m, 3H) , 7,36 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 4,21 (m, 1H) , 3,71 (t, 2H) , 3,57 (m, 1H) , 2,54 (t, 2H), 1,98 (m, 4H) , 1,83-1,36 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 169. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3 '- (2-oxopiridin-1 (2H) -il) bifenil-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0657] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120. MS experimental para C28H29 7O2 como ( +H)+ 496, 5. UV ?=244 nm.
Ejemplo 170 2. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3 ' - (2-oxopiperidin-l-il ) bifenil-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0658] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120. MS experimental para C28H33N7O2 como (M+H)+ 500,5. UV ?=24ß nm.
Ejemplo 171. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4 ' -morfolinobifenil-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0659] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120. MS experimental para C27H33N702 como (M+H)+ 488,4. UV ?=247 nm.
Ejemplo 172. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3 ' -morfolinobifeni1-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0660] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120. MS experimental para C27H33N702 como (M+H)+ 488, 4. UV ?=246 nm.
Ejemplo 173. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3 ' -morfolinobifeni1-4-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0661] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120. MS experimental para C27H33N702 como (M+H)+ 488, 4. UV ?=238, 309 nm.
Ejemplo 174. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4 ' -morfolinobifenil-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0662] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120. MS experimental para C27H33 702 como (M+H) + 488 , 4. UV ?=241, 314 nm.
Ejemplo 175. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 3 , 6-dihidro-2H-piran-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 257.1 257.2 257.3
[0663] Diisopropilamina (1,63 mL, 11,68 mmol) se disolvió en 10 mL de THF seco y se agitó en baño de hielo. A ello se añadió n-butil-litio (2,5 M en hexano, 4,67 mL, 11,68 mmol) gota a gota.
La mezcla se agitó durante 20 min y se dejó a -78 °C de baño. A ello se añadió la solución de cetona 257,1 (0,92 mL, 10 mmol) en 10 mL de THF gota a gota. La mezcla se agitó durante 30 min. A ello se añadió la solución de N-fenilbis (trifluorometansulfonimida) (PhNTf2, 4,17 g, 11,68 mmol) en 10 mL de THF. La mezcla se movió al baño de hielo y se agitó durante la noche. Se concentró al vacio y se sometió a columna flash de silice para aislar el compuesto 257,2 usando 20% acetato de etilo en hexano.
[0664] El compuesto 257,2 (920 mg, 4,0 mmol) se mezcló con ácido borónico 257,3 (550 mg, 4,0 mmol), Pd(Ph3P)2Cl2 (562 mg, 0,8 mmol), K2C03 (1,1 g, 8,0 mmol) en 30 mL de dioxano y 15 mL de agua. La mezcla se desgasificó usando corriente de argón durante 3 min y se agitó bajo argón a 85°C durante 3,5 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera x2, se secó, se concentró y se sometió a columna flash para aislar anilina 257,4 (300 mg) en forma de sólido blanco.
[0665] El compuesto del titulo se preparó con anilina 257,4 usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120. MS experimental para C22H28 6O2 como (M+H)+ 409, 4. UV ?=246 nm.
Ejemplo 176. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) -4- (3- (tetrahidro-2H-piran-4-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0666] El compuesto del titulo se preparó a partir del Ejemplo 175 usando hidrogenación con catálisis estándar tratando la solución de Ejemplo 175 en metanol con Pd/C al 10% bajo balón de H2 durante la noche. MS experimental para C22H30N6O2 como (M+H) + 411,4. UV ?=241, 290 nm.
Ejemplo 177. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 4- ( 3 , 6-dihidro-2H-piran-4-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0667] El compuesto del titulo se preparó usando la química similar mostrado para el Ejemplo 175. MS experimental para C22H28 6O2 como (M+H)+ 409, 4. UV ?=239, 309 nm. RMN (CD3OD) : d 8,51 (s, 1H), 7,60 (d, J=7,2 Hz, 2H) , 7,50 (d, J=8,0 Hz, 2H) , 6,23 (s, 1H), 4,36-4,30 (m, 3H) , 3,94 (t, 2H) , 3,72 (m, 1H) , 2,53 (m, 2H) , 1,90-1,58 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 178. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (tetrahidro-2H-piran-4-il ) fenilamíno) pirimidin-5-carboxamida
[0668] El compuesto del titulo se preparó a partir del Ejemplo 175 usando hidrogenación con catálisis estándar tratando la solución de Ejemplo 175 en metanol con Pd/C al 10% bajo balón de H2 durante la noche. MS experimental para C22H30N6O2 como (M+H)+ 411,4. UV ?=243. 296 nm.
Ejemplo 179. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4 - ( fenilsulfonil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0669] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120 con la correspondiente anilina que era asequible en comercios. MS experimental para C23H26 6O3 S como (M+H)+ 467,3. UV ?=232, 306 nm. Ejemplo 180. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4-fenoxifenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0670] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120 con la correspondiente anilina que era asequible en comercios. MS experimental para C23H26 6O2 como (M+H)+ 419,3. UV ?=238, 290 nm. Ejemplo 181a. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4- ( tetrahidro-2H-piran-4-iloxi ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0671] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120 con la correspondiente anilina que era asequible en comercios. MS experimental para C22H3oN603 como (M+H)+ 427,3. UV ?=241, 291 nm. Ejemplo 181b. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4- ( tetrahidro-2H-piran-4-ilsulfonil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema : 266.1 266.2 266.3
[0672] 4-Nitrotiofenol (400 mg, 2,55 mmol) se disolvió en 10 mL de DMF. A ello se añadieron carbonato de cesio (1,67 g, 5,1 mmol) y 4-bromotetrahidropirano (0,84 g, 5,1 mmol). La mezcla se agitó a 50 °C durante 90 min. Se diluyó en acetato de etilo y se lavó con salmuera x3. La fase orgánica se secó, se concentró al vacío para obtener el compuesto crudo 266.1. Se disolvió en 100 mL de DCM. A ello se añadió MCPBA (1,98 g, 7,5 mmol) en pequeñas porciones. La mezcla se agitó durante 30 min, se diluyó con acetato de etilo, se lavó con solución saturada de carbonato de sodio y salmuera. La fase orgánica se secó, se concentró y se sometió a columna flash de sílice para aislar el compuesto 266,2 (320 mg, 47% para 2 etapas) usando 1:1 acetato de etilo y hexano.
[0673] El compuesto 266,2 (320 mg, 1,18 mmol) se disolvió en 150 mL de acetato de etilo. A ello se añadió 200 mg de Pd/C al 10%. La mezcla se agitó bajo balón de H2 durante la noche. La mezcla se filtró a través de celite. El celite se lavó bien. El filtrado se concentró al vacio para obtener la anilina 266,3 (260 mg, 91%) en forma de sólido blanco.
[0674] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120 con anilina 266,3. MS experimental para C22H30N6O4S como (M+H)+ 475,3. UV ?=250, 301 nm.
Ejemplo 182. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (morfolinosulfonil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0675] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120 con la correspondiente anilina que era asequible en comercios. MS experimental para C21H29 7O4 S como (M+H) + 476, 4. UV ?=249, 300 nm. Ejemplo 183. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (morfolin-4-carbonil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0676] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120 con la correspondiente anilina que era asequible en comercios. S experimental para C22H29 7O3 como (M+H)+ 400, 4. UV ?=244, 297 nra. Ejemplo 184. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 3- ( tetrahidro-2H-piran-4-iloxi ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema :
[0677] 3-Nitrofenol (500 mg, 3,6 mmol) se disolvió en 15 mL de DMF. A ello se añadieron carbonato de cesio (2,35 g, 7,2 mmol) y luego 4-bromotetrahidropirano (2,4 g, 14,4 mmol). La mezcla se agitó a 70 °C durante la noche. La reacción se completó sólo en un 30%. Se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua, carbonato de sodio saturado y salmuera, se secó sobre MgS04, se filtró. Al filtrado que contenia compuesto crudo 269,1 se añadió Pd/C al 10% 1,0 g. La mezcla se agitó bajo balón de H2 durante la noche. La mezcla se filtró, se concentró y se purificó usando columna flash de sílice para obtener la anilina 269.2 (102 mg, 15% de rendimiento general) en forma de sólido.
[0678] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120 con anilina 269,2. MS experimental para C22H3oN603 como (M+H)+ 427, 4. UV ?=244, 287 nm. Ejemplo 185 2- (4- (2- ( (1R,2S) -2-aminociclohexilamino) -5- carbamoilpirimidin-4-ilamino ) fenoxi) acetato de ter-butilo ( racemato) K2C03 (6,00 g, 43,4 mmol) en DMF (50 mL) , bromoacetato de t butilo (2,90 mL, 19,6 mmol) se añadió. La mezcla se agitó temperatura ambiente durante 5 h. El agua y EtOAc se añadieron La fase orgánica se separó, se lavó con agua, luego con aq. NaOH 1 N y salmuera. Se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio para dar 2- (4-nitrofenoxi) acetato de ter-butilo en forma de un sólido.
[0680] A la solución del sólido en MeOH (40 mL) , se añadió Pd-C (10%, 410 mg) . La mezcla se hidrogenó bajo balón de hidrógeno for 20 h. Luego se filtró a través de celite. El filtrado se concentró al vacio para dar 2- (4-aminofenoxi) acetato de ter-butilo .
[0681] El compuesto del titulo se sintetizó análogamente usando 2- ( 4-aminofenoxi ) acetato de ter-butilo y cis-1,2-diaminociclohexano. MS 457,2 (M+H) ; UV 243.8, 290,0.
Ejemplo 186 ácido 2- ( - (2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -5-carbamoilpirimidin-4-ilamino) fenoxi) acético (racemato)
[0682] Una solución de aminociclohe ilamino) -5-carbamoilpirimidin- ilamino) fenoxi) acetato de ter-butilo racemato (180 mg, 0,395 mmol) en TFA (4 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Luego se concentró al vacio. El residuo se purificó por HPLC para dar el compuesto del titulo (60 mg) . MS 401,2 (M+H) .
Ejemplo 187 2- (3- (2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -5-carbamoilpirimidin-4-ilamino) fenoxi) acetato de ter-butilo ( racemato )
[0683] El compuesto del titulo se sintetizó análogamente como compuesto 2- (4- (2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -5-carbamoilpirimidin-4-ilamino) fenoxi) acetato de ter-butilo (racemato), usando 3-nitrofenol en lugar del 4-nitrofenol . MS 457,2 (M+H); UV 242,6, 290,0.
Ejemplo 188 ácido 2- ( 3- (2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -5-carbamoilpirimidin-4-ilamino) fenoxi) acético (racemato)
[0684] El compuesto del titulo se sintetizó análogamente as compuesto ácido 2- (4- (2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -5-carbamoilpirimidin-4-ilamino) fenoxi) acético (racemato). MS 401,2 (M+H) ; UV 242, 6, 290 n .
Ejemplo 189 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 1-metil-lH-pirazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0685] El compuesto del título se sintetizó análogamente usando l-metil-lH-pirazol-4-amina . MS 331,4 (M+H). UV 241,2, 292,1 nm Ejemplo 190 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 1-metil-lH-pirrol-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0686] Al hidruro de sodio (300 mg, 60% en aceite mineral, 7,50 mmol) en un recipiente, que se lavó con hexano dos veces, una solución de 3-nitropirrol (500 mg, 4,46 mmol) y yodometano (0,560 mL, 8,97 mmol) en DMF (4 mL) se añadió. Se produjo gas hidrógeno. La mezcla se agitó luego a temperatura ambiente durante 20 h. El agua y EtOAc se añadieron. La fase orgánica se separó, se lavó con agua, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio para dar l-metil-3-nitro-lH-pirrol (494 mg) .
[0687] Una mezcla de l-metil-3-nitro-lH-pirrol (488 mg, 3,87 mmol) y Pd-C (10%, 110 mg) en MeOH (15 mL) (que contenia 8 gotas de HC1 6 N) se hidrogenó bajo balón de hidrógeno durante 20 h. La mezcla se filtró a través de celite. Al filtrado, se añadió HC1 4 N en dioxano (2 mL) . La solución se concentró al vacio para dar clorhidrato de l-metil-lH-pirrol-3-amina en forma de un sólido (514 mg) .
[0688] El compuesto del titulo se sintetizó luego análogamente usando clorhidrato de l-metil-lH-pirrol-3-amina . MS 330,3 (M+H) ; UV 237, 6, 313, 1 nm.
Ejemplo 191 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 1-fenil-lH-pirazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0689] Una mezcla de 4-nitropirazol (270 mg, 2,38 mmol) , yodobenceno (485 mg, 2,38 mmol), 8-hidroxiquinolina (60 mg, 0,41 mmol) y K2C03 (600 mg, 4,34 mmol) en DMSO (3 mL) se desgasificó con argón antes de cargar con Cul (45 mg, 0,23 mmol). La mezcla en un tubo sellado se calentó a 130 °C durante 20 h. El agua se añadió para inducir una precipitación. El precipitado se recogió para dar 4-nitro-l-fenil-lH-pirazol (454 mg) .
[0690] Una mezcla de 4-nitro-l-fenil-lH-pirazol (440 mg, 2,32 mmol) y dihidrato de SnC12 (2,18 g, 9,66 mmol) en EtOAc (15 mL) se agitó a 80 C durante 3 h. NaOH acuoso 1 N se añadió para llevar el pH a 12. La mezcla se filtró a través de celite. La fase orgánica se separó, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio. El residuo se purificó por HPLC para dar 1-fenil-lH-pirazol-4-amina en forma de un sólido (173 mg) .
[0691] El compuesto del titulo se sintetizó luego análogamente usando 1-fenil-lH-pirazol-4-amina . MS 393,4 ( +H) ; UV 240,0, 303, 2.
Ej emplo 192 2-((lR,2S) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( -metiltiofen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida reflujo [ 0692 ] Una solución de 4-metiltiofen-2-carboxilico (1,42 g, 10, 0 mmol) , trietilamina (1,50 mL, 10, 8 mmol ) y difenilfosporilazida (2,15 mL, 10,0 mmol) en tBuOH (20 mL) se agitó a reflujo durante 5 h. tBuOH se eliminó al vacio. Et20 y agua se añadieron. La fase orgánica se lavó con 5% de aHC03, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio. El residuo se purificó por una columna de gel de sílice, que se eluyó con 0-10% de EtOAc en hexano para dar 4-metiltiofen-2-ilcarbamato de ter-butilo en forma de un sólido (0,880 g) .
[0693] Una solución de 4-metiltiofen-2-ilcarbamato de ter-butilo (0,880 g, 4,13 mmol) en CH2C12 (8 mL) y TFA (6 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Los solventes se eliminaron al vacío para dar 4-metiltiofen-2-amina en forma de sal de ácido trifluoroacético (0,920 g) . [ 0694 ] El compuesto del título se sintetizó luego análogamente usando 4-metiltiofen-2-amina . MS 347,3 (M+H) ; UV 244,9, 326,1 nm. Ejemplo 193 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 5-metiltiofen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida reflujo
[0695] Una solución de ácido 5-metiltiofen-2-carboxílico (1,42 g, 10,0 mmol), trietilamina (1,50 mL, 10,8 mmol) y difenilfosporilazida (2,15 mL, 10,0 mmol) en tBuOH (20 mL) se agitó a reflujo durante 5 h. tBuOH se eliminó al vacio. Et20 y agua se añadieron. La fase orgánica se lavó con 5% de NaHC03, luego con NaOH 1 N y se filtró. El filtrado se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio para dar 5-metiltiofen-2-ilcarbamato de ter-butilo en forma de un sólido (0,825 g) .
[0696] Una solución de 5-metiltiofen-2-ilcarbamato de ter-butilo (0,825 g, 3,87 mmol) en CH2C12 (10 mL) y TEA (6 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 20 h. Los solventes se eliminaron al vacio para dar 5-metiltiofen-2-amina en forma de sal de ácido trifluoroacético (0,870 g) .
[0697] El compuesto del titulo se sintetizó luego análogamente usando 5-metiltiofen-2-amina . MS 347,3 (M+H) ; UV 247,3, 325,6 nm. Ejemplo 194 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (1-fenil-lH-pirrol-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida Ph [ 0698 ] Una mezcla de 3-nitropirrol (270 2,41 mmol) , yodobenceno (0,267 mL, 2,39 mmol), 8-hidroxiquinolina (60 mg, 0,41 mmol) y K2C03 (600 mg, 4,34 mmol) en DMSO (3 mL) se desgasificó con argón antes de cargar con Cul (45 mg, 0,23 mmol). La mezcla en un tubo sellado se calentó a 130 °C durante 20 h. El agua y EtOAc se añadieron. La fase orgánica se separó, se lavó con HC1 1 N, luego con 5% de NaHCC>3, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio para dar 3-nitro-l-fenil-lH-pirrol (410 mg) . [ 0699 ] Una mezcla de 3-nitro-l-fenil-lH-pirrol (410 mg, 2,18 mmol) y dihidrato de SnC12 (2,00 g, 8,86 mmol) en EtOAc (15 mL) se agitó a 80 °C durante 3 h. NaOH acuoso 1 N se añadió para llevar el pH a 12. La mezcla se filtró a través de celite. La fase orgánica se separó, se lavó con 5% de NaHC03, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio para dar 1-fenil-lH-pirrol-3-amina en forma de un sólido (323 mg) .
[0700] El compuesto del titulo se sintetizó luego análogamente usando 1-fenil-lH-pirrol-3-amina . MS 392,4 (M+H) ; UV 240,0, 314,3 nM.
Ejemplo 195 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- ( 6- (dimetilamino) piridin-3-il) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0701] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 45 con ácido 6-(dimetilamino) piridin-3-ilborónico para reemplazar ácido borónico 116.1. MS experimental para C24H3o 80 como (M+H)'+ 447, 3. UV: ? = 244,0, 316,4 Ejemplo 196 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3, 5-difluoro-4-morfolinofenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0702] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con 3 , 5-difluoro- -morfolinoanilina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para C21H27F2N7O2 como (M+H)+ 448, 1. UV: ? = 240, 4, 304, 5.
Ejemplo 197 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (bifenil-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0703] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con bifenil-4-amina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para C23H26 6O como (M+H)+ 403,4. UV: ? = 239,3, 308,7.
Ejemplo 198 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (isoxazol-3-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0704] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con 3- ( isoxazol-3-il) anilina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para C20H23 7O2 como (M+H)+ 394,4. UV: ? = 243.6, 286, 5.
Ejemplo 199 4- ( 4- ( 4H-1 , 2 , 4-triazol-4-ilfenilamino) -2- ( (lR,2S)-2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0705] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con 4-(4H-l,2,4-triazol-4-il) anilina para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C19H23N9O como (M+H)+ 394, 4. UV: ? = 245,2, 293, 8.
Ejemplo 200 4 - ( 3- ( 4H-1 , 2 , 4-triazol-4-ilfenilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0706] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 3 con 3-(4H-l,2,4-triazol-4-il) anilina para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C19H23 9O como (M+H)+ 394, 4. UV: ? = 239,9.
Ejemplo 201 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4- (isoxazol-3-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0707] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con 4- ( isoxazol-3-il) anilina para reemplazar la anilina 74.1. MS experimental para C2oH23N702 como (M+H)+ 394, 4. UV: ? = 244, 0, 303,3 Ejemplo 202 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (5-metilisoxazol-3-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida [ 0708 ] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con 3-(5-metilisoxazol-3-il ) anilina para reemplazar la anilina 74 . 1 . MS experimental para C21H25 7O2 como (M+H)+ 408,4. UV: ? = 243.6, 287,1.
Ejemplo 203. 2-((lS,2R)-2- (5-carbamoil-4- (m-tolilamino ) pirimidin-2-ilamino) ciclohexilamino) acetato de metilo [ 0709 ] MS experimental para C2iH28 603 como (M+H)+ 413,1. = 241, 4, 288, 8.
Ejemplo 204. Ácido 2- ( ( 1S , 2 ) -2- ( 5-carbamoil tolilamino) pirimidin-2-ilamino) ciclohexilamino) acético [ 0710 ] MS experimental para C20H26 6O3 como (M+H)+ 399,2. UV: ? = 240,5, 287,8.
Ejemplo 205 2-((lS, 2R) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4-metoxi-3- metilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0711] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con 4-metoxi-3-metilanilina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para Ci9H26 602 como (M+H)+ 371,2. UV: ? = 238,1, 292,6.
Ejemplo 206 2-((lS, 2R) -2-aminociclohexilamino) -4- (3, 4-dimetoxifenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0712] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con 3,4-dimetoxianilina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para Ci9H26N603 como (M+H)+ 387,1. UV: ? = 236,9, 286,6.
Ejemplo 207 2-((lS, 2R) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-fenoxifenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0713] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con 3-fenoxianilina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para C23H26 6O2 como (M+H)+ 419,3. UV: ? = 240,4, 292,6.
Ejemplo 208. 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- (bifenil-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0714] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 1 con bifenil-3-amina para reemplazar la anilina 72.4. MS experimental para C23H26 60 como (M+H)+ 403,4. UV: ? = 246,3 Ejemplo 209 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (naftalen-1-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0715] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 152 con naftalen-1-amina para reemplazar la anilina 208.1. MS experimental para C2iH24 60 como (M+H)+ 377, 1- Ejemplo 210. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 6-metoxinaftalen-2-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0716] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 152 con 6-metoxinaftalen-2-amina para reemplazar la anilina 208.1. MS experimental para C22H26 6O2 como (M+H)+ 407,2. UV: ? = 227,5, 319, 9.
Ejemplo 211a. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 6-fluoronaftalen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0717] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 152 con 6-fluoronaftalen-2-amina para reemplazar la anilina 208.1. S experimental para C2iH23FN60 como (M+H)+ 395.1. UV: ? = 212,2, 244,0, 306,8.
Ejemplo 211b: 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamíno) -4- ( 6-carbamoilnaftalen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0718] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 152 con 6-carbamoilnaftalen-2-amina para reemplazar la anilina 208.1. MS experimental para C22H25 7O2 como (M+H)+ 420,2. UV: ? = 223,9, 318,8.
Ejemplo 212. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 6- (metilcarbamoil ) naftalen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0719] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 152 con 6-(metilcarbamoil ) naftalen-2-amina para reemplazar la anilina 208.1. MS experimental para C23H27N7O2 como (M+H)+ 434, 3. UV: ? = 219.2, 235,7, 318,8.
Ejemplo 213. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 6- (dimetilcarbamoil ) naftalen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0720] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 152 con 6-(dimetilcarbamoil ) naftalen-2-amina para reemplazar la anilina 208.1. MS experimental para C24H29N7O2 como (M+H)+ 448, 2. UV: ? = 218,0, 314,0.
Ejemplo 214. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( -cloronaftalen-l-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0721] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 152 con 4-cloronaftalenil-l-amina para reemplazar la anilina 208.1. MS experimental para C2iH23ClN60 como (M+H)+ 411,2, 413,1 (patrón de Cl) . UV: ? = 223, 9, 293, 8.
Ejemplo 215. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 6-bromonaftalen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0722] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 152 con 4-bromonaftalenil-2-amina para reemplazar la anilina 208.1. MS experimental para C2iH23Br 60 como ( +H)+ 455, 1, 457, 1 (patrón de Br) .
Ej emplo 217. 2-((lR,2S) -2-aminociclohexilamino) -4-(6-(morfolin-4-carbonil) naftalen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0723] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 152 con 6- (morfolin-4-carbonil) naftalenil-2-amina para reemplazar la anilina 208.1. S experimental para C26H31 7O3 como (M+H)+ 490, 4. UV: ? = 220,4, 315,2.
Ejemplo 218. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0724] Etapa 1: A una solución de 2 , 4-dicloropirimidin-5-carboxilato de etilo (328 mg, 1,48 mmol) y l-metil-lH-indol-4-amina (260 mg, 1,78 mmol) en CH3CN (6 mL) a temperatura ambiente, se añadió DIEA (0,4 mL, 2,22 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. El agua (15 mL) se añadió para inducir una precipitación. El precipitado se recogió, se secó al vacio para dar 2-cloro-4- ( l-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxilato de etilo en forma de un sólido.
[0725] Etapa 2: A una solución de 2-cloro-4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxilato de etilo (crudo de la etapa 1) en THF (4 mL) , se añadió LiOH 1 N acuoso (2,25 mL, 2,25 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Después de acidificar la mezcla con HC1 1 N, los sólidos blancos se precipitaron, que se recolectaron y se secaron al vacio para dar ácido 2-cloro-4- ( l-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxilico (325 mg) . MS 303,3, 305,3 (M+H, patrón de Cl)
[0726] Etapa 3: A una solución de ácido 2-cloro-4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxilico (325 mg, 1,08 mmol) y HOBt (198 mg, 1,29 mmol) en DMF (4 mL) , se añadió EDC (248 mg, 1,29 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. El amoniaco (0,5 en dioxano, 8,00 mL y 4,00 mmol) se añadió. Se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El agua y EtOAc se añadieron. La fase orgánica se separó, se' lavó con HCl 1 N, luego con 5% de NaHC03, se secó sobre a2S04, se concentró al vacio para dar 2- ( ??-benzo [d] [ 1, 2 , 3 ] triazol-l-iloxi ) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida (378 mg) . MS 401,4 (M+H)
[0727] Etapa 4: A un sólido de 2- ( ??-benzo [d] [ 1 , 2 , 3 ] triazol-l-iloxi ) -4- ( l-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida (100 mg, 0,25 mmol) en vial se añadió (1S, 2R) -2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo (solución 0,3 M en NMP, 1,25 mL, 0,375 mmol) y DIPEA (0,09 mL, 0,5 mmol). Se calentó a 80 °C durante 2 h, se enfrió y se purificó por HPLC preparativa para dar 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( l-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida (21 mg) . MS experimental para C20H25N7O como (M+H)+ 380, 4. UV: ? = 219,2, 241, 6, 336,7.
Ejemplo 219a. 4- ( lH-indol-4-ilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0728] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con lH-indol-4-ilamina para reemplazar l-metil-lH-indol-4-ilamina . MS experimental para C19H23N7O como (M+H)+ 366, 3. UV: ? = 216,7, 239,9, 330,3.
Ejemplo 219b. 4- (lH-indazol-4-ilamino) -2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0729] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con lH-indazol-4-ilamina para reemplazar l-metil-lH-indol-4-ilamina . MS experimental para Ci8H22N80 como (M+H)+ 367, 4. UV: ? = 205,8, 240,5, 314,3 Ejemplo 219c. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (1-metil-lH-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0730] compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con 1-metil-lH-indazol-4-ilamina para reemplazar l-metil-lH-indol-4-ilamina . MS experimental para Ci9H24N80 como ( +H)+ 381.4. UV: ? = .
Ejemplo 220. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (2-metil-2H-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0731] compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con 2-metil-2H-indazol-4-ilamina para reemplazar l-metil-lH-indol-4-ilamina . MS experimental para Ci9H24N80 como (M+H)+ 381,5. UV: ? = 210,6, 243, 0, 329, 1.
Ej emplo 221. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (2-metilbenzo [d] oxazol-7-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0732] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con 2-metilbenzo [d] oxazol-7-ilamina para reemplazar l-metil-lH-indol-4-ilamina. MS experimental para C19H23 7O2 como (M+H)+ 382, 4. UV: ? = 238, 1.
Ejemplo 222. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (benzo [c] [1,2,5] tiadiazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0733] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con benzo [c] [1, 2, 5] tiadiazol-4-ilamina para reemplazar 1-metil-lH-indol-4-ilamina . MS experimental para C17H20 8OS como (M+H)+ 385.3. UV: ? = 234,5, 298,5, 315,2.
E emplo 223. 2-((lR,2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (quinoxalin-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0734] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con quinoxalinil-5-amina para reemplazar l-metil-lH-indol-4-ilamina . MS experimental para Ci9H22N8OS como (M+H)+ 379,3. UV: ? = 203,4, 245, .
Ejemplo 224. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (benzo [d] tiazol-7-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0735] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con benzo [d] tiazol-7-ilamina para reemplazar l-metil-lH-indol-4-ilamina. MS experimental para Ci8H2iN7OS como (M+H)+ 384, 3. UV: ? = 205,1, 242,8, 290,2.
Ejemplo 225. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 1-metil-lH-benzo [d] imidazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0736] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con 1-metil-lH-benzo [d] imidazol-4-ilamina para reemplazar l-metil-lH-indol-4-ilamina. MS experimental para Ci9H24N80 como (M+H)+ 381,4. UV: ? = 202,8, 239,3.
Ejemplo 226. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (2-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0737] ' El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con 2-metil-lH-indol-4-ilamina para reemplazar 1-metil-lH-indol-4-ilamina . MS experimental para C20H25N7O como (M+H)+ 380, 4. UV: ? = 220,4, 239,3, 336,7.
Ejemplo 227. 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (2-fenil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0738] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con 2-fenil—1H— indol-4-ilamina para reemplazar l-metil-lH-indol-4-ilamina . MS experimental para C25H27N70 como (M+H)+ 442, 5. UV: ? = 241,6, 293, 8.
Ejemplo 228. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 1 , 2-dimetil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0739] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con 1 , 2-dimetil-lH-indol-4-ilamina para reemplazar l-metil-lH-indol-4-ilamina . MS experimental para C21H27N7O como (M+H)+ 394, 4. UV: ? = 222,8, 242,8.
Ejemplo 229. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminocíclohexilamino ) -4- (2, 3-dihidro- lH-pirrolo [ 1, 2-a] indol-8-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0740] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 120 con 2,3-dihidro-??-pirrolo [1, 2-a] indol-8-amina para reemplazar 1-metil-lH-indol-4-ilamina. MS experimental para C22H27 70 como (M+H)+ 406, 5. UV: ? = 222, 8, 241,6.
Ejemplo 230. 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (benzo- [d] isoxazol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0741] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con benzo-[d] isoxazol-5-ilamina para reemplazar l-metil-lH-indol-4-ilamina . MS experimental para C18H21N7O2 como (M+H)+ 368, 4. UV: ? = 203,9, 236,9, 294, 9.
Ejemplo 231. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamíno) -4- (1-etil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0742] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218 con 1-etil-lH-indol-4-ilamina para reemplazar l-metil-lH-indol-4-ilamina . MS experimental para C21H27N7O como (M+H)+ 394, 4. UV: ? = 220,2, 242, 6.
Ejemplo 232. 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohe ilamino )-4-(3-(3,4-dimetoxifenil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema :
[0743] Carbonato de potasio (1,81 g, 13,1 mmol) se disolvió en una mezcla 2:1 de dioxano/agua (45 mL) . Esta solución se añadió a ácido 3, 4-dimetoxifenilborónico (300,1; 799 mg, 4,39 mmol) [CAS 122775-35-3] y 3-bromoanilina (300,2; 756 mg, 4,39 mmol) [CAS 591-19-5] . La solución resultante se desgasificó con argón durante 5 minutos. Bis (trifenilfosfina) paladio (II) dicloruro (598 mg, 0,85 mmol) [CAS 13965-03-2] se añadió y la reacción se agitó durante 3 h a 85 °C en un tubo sellado. La reacción se enfrió y se diluyó con EtOAc (300 mL) , se lavó con salmuera (3x100 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró y se concentró. El residuo resultante se sometió a cromatografía flash (gradiente de 20% al 70% de EtOAc en hexanos) que dio como resultado en 360 mg de 300.3 (36%) .
[0744] A 300.3 (360 mg, 1,57 mmol) en DMF (15 mL) se añadió éster etílico del ácido 4-cloro-2- (metiltio) -5- pirimidincarboxílico (365 mg, 1,57 mmol) [CAS 5909-24-0] y DIEA (562 i , 3,14 mmol) . La mezcla de reacción se agitó durante 3 h a 80 °C en un tubo sellado. La reacción se enfrió, se añadió agua y se formó un precipitado. El precipitado se filtró, se lavó con agua fria y se secó para dar 300.4 en rendimiento cuantitativo.
[0745] El sólido resultante (667 mg, 1,57 mmol) se disolvió en THF (10 mL). A ello se añadió LiOH (188 mg, 7,85 mmol) en H20 (5 mL) . La reacción se agitó durante 30 min y se acidificó hasta pH~3 con 1 M HC1. El THF se eliminó al vacio y se añadió agua helada a la mezcla de reacción. El sólido resultante se filtró, se lavó con agua y se secó para dar 497 mg (88%) de 300,5.
[0746] Ácido carboxilico 300.5 (460 mg, 1,15 mmol) se disolvió en 10 mL de DMF. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (328 mg, 1,72 mmol) e hidrato de HOBt (232 mg, 1,72 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. El amoniaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 7 mL, 3,5 mmol) se añadió y la mezcla y se agitó durante 1 h. El dioxano se eliminó al vacio y se añadió agua helada a la mezcla de. reacción. El sólido resultante se filtró, se lavó con agua y se secó para dar 445 mg (97%) de 300.6.
[0747] El compuesto 300.6 (70 mg, 0,18 mmol) se disolvió en 4 mL de NMP. A ello se añadió mCPBA (70% de pureza mínima, 50 mg, 0,21 mmol) que se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos .
[0748] A ello se añadieron luego una solución de (lS,2R)-2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo (0,3 M, 0,9 mL, 0,27 mmol) y DIEA (94 µ?,, 0,54 mmol). La mezcla se agitó durante 3 h a 90 °C en un tubo sel-lado. La mezcla se enfrió, se diluyó con EtOAc, se lavó con una solución acuosa saturada de Na2C03, agua y salmuera. La fase orgánica se secó sobre MgS04 y se concentró para dar el intermediario crudo que se agitó en una mezcla 1:1 de TFA y DCM a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla de reacción se concentró al vacio y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto del titulo. MS experimental para C25H30 6O3 como (M+H)+ 463,3. UV D=210. 243 nm. d 1, 40-1, 83 (m, 8H) , 3,60-3,68 (m, 1H) , 3,88 (s, 3H) , 3,92 (s, 3H) , 4,43-4,51 (m, 1H) , 7,60-7,66 (m, 1H) , 7,90 (d, 1H) , 8,04 (s, 2H) , 8, 52-8, 58 (m, 1H) , 8, 62 (s, 1H) .
Ejemplo 233: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 3- ( 4-metoxifenil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0749] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la mostrada en el Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 4-metoxifenilborónico [CAS 5720-07-0] en lugar de ácido 3,4- dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3] . S experimental para C24H28 6O2 como (M+H)+ 433, 4. UV 0248 nm. d 1, 25-1,80 (m, 8H) , 3, 58-3, 64 (m, 1H) , 3,83 (s, 3H) , 4,20-4, 28 (m, 1H) , 7,02 (d, 2H) , 7,36-7,48 (m, 3H) , 7,59 (d, 2H) , 8,03 (br s, 1H) , 8,55 (s, 1H) Ejemplo 234: 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (2, 3, 4-trimetoxifenil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0750] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 3,4,5-trimetoxifenilborónico [CAS 182163-96-8] en lugar de ácido 3,4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3] . MS experimental para C26H32N604 como (M+H)+ 493, 4. UV D=245 nm. d 1, 20-1,80 (m, 8H) , 3,61-3,68 (m, 1H) , 3,80 (s, 3H) , 3,92 (s, 6H) , 4,15-4,22 (m, 1H) , 6,92 (s, 2H), 7,45 (br s, 3H) , 8,05 (br s, 1H) , 8,55 (s, 1H) .
Ejemplo 235: 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 3-metoxifenil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0751] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 3-metoxifenilborónico [CAS 10365-98-7] se usó en lugar de ácido 3, -dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3]. MS experimental para C24H28N6O2 como (M+H)+ 433, 3. UV D=241 niti.
Ejemplo 236: 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (2, 3-dihidrobenzofuran-5-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0752] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido (2,3-dihidrobenzo [b] furan-5-il) borónico [CAS 227305-69-3] en lugar de ácido 3, 4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3]. MS experimental para C25H28 6O2 como (M+H)+ 445, 3. UV D=245, 276 nm. Ejemplo 237: 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (2-metoxifenil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0753] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 2-metoxifenilborónico [CAS 5720-06-9] en lugar de ácido 3,4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3] . MS experimental para C24H28 6O2 como (M+H)+ 433, 3. UV D=244, 288 nm.
Ejemplo 238: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 4-fluorofenil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0754] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 4-fluorofenilborónico [CAS 1765-93-1] se usó en lugar de ácido 3,4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3] . MS experimental para C23H2sFN60 como (M+H)+ 421,3. UV D=245 nm. d 1, 35-1,85 (m, 8H) , 3, 58-3,65 (m, 1H) , 4,25-4,31 (m, 1H) , 7,09-7,18 (m, 1H) , 7,40-7,54 (m, 6H), 8,11 (br s, 1H) , 8,53 (s, 1H) .
Ejemplo 239: 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (3-fluorofenil ) fenilamíno ) pirimidin-5-carboxamida
[0755] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 3-fluorofenilborónico [CAS 768-35-4] en lugar de ácido 3,4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3] . MS experimental para C23H25FN60 como ( +H)+ 421,3. UV D=242 nm.
Ejemplo 240: 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 3- ( 2 , 5-dimetoxifenil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0756] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 2,5-dimetoxifenilborónico [CAS 107099-99-0] en lugar de ácido 3,4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3] . MS experimental para C25H30 6O3 como (M+H)+ 463,3. UV 0=246 nm.
Ejemplo 241: 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4-(3-(2,4-dimetoxifenil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0757] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 2,4-dimetoxifenilborónico [CAS 133730-34-4] en lugar de ácido 3,4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3] . S experimental para C25H30N6O3 como (M+H)+ 463, 3. UV D=245, 288 nm.
Ejemplo 242: 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 3, 4-difluorofenil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0758] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 3,4-difluorofenilborónico [CAS 168267-41-2] en lugar de ácido 3,4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3] . MS experimental para C23H24E2N60 como (M+H)+ 439,3. UV D=245 nm.
Ejemplo 243: 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 3- ( 2 , 3-dimetoxifenil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0759] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 2,3-dimetoxifenilborónico [CAS 40972-86-9] en lugar de ácido 3,4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3] . MS experimental para C25H30 6O3 como (M+H)+ 463,3. UV D=244, 288 nm.
Ejemplo 244: 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- (benzo [d] [1,3] dioxol-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0760] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usaron 3-(4, 4,5,5-tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolan-2-il) anilina [CAS 210907-84-9] y 4-bromo-1, 3-benzodioxol [CAS 6698-13-1] como parejas de acoplamiento. MS experimental para C24H26 6O3 como (M+H)+ 447, 4. UV ?=242 nm.
Ejemplo 245: 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (2, 3-dihidrobenzo [b] [1,4] dioxin-6-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0761] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usaron 3-(4, 4,5,5-tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolan-2-il ) anilina [CAS 210907-84-9] y 6-yodobenzodioxano [CAS 57744-67-9] como parejas de acoplamiento. MS experimental para C25H28N6O3 como (M+H)+ 461,4. UV 0211, 243 nm. d 1,35-1,85 (m, 8H) , 3, 58-3,65 (m, 1H) , 4, 30-4, 38 (m, 5H) , 6,95 (d, 1H), 7,10-7,18 (m, 2H) , 7,30-7,36 (m, 1H) , 7,38-7,45 (m, 2H), 8,14 (br s, 1H) , 8,50 (s, 1H) Ejemplo 246: 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4- ( 2 , 3-dihidrobenzo [b] [1,4] dioxin-6-il) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0762] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usaron 4- (4, 4,5,5-tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolan-2-il) anilina [CAS 214360-73-3] y 6-yodobenzodioxano [CAS 57744-67-9] como parejas de acoplamiento. MS experimental para C25H28 6O3 como (M+H)+ 461,4. UV 0242, 316 nm. d 1,50-1,95 (m, 8H) , 3,70-3,78 (m, 1H) , 4,25 (s, 4H) , 4,34-4,41 (m, 1H), 6,90 (d, 1H) , 7,08-7,15 (m, 2H) , 7,58-7,68 (m, 4H) , 8,50 (s, 1H) .
Ejemplo 247: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 3- ( 4-metil-3 , 4-dihidro-2H-benzo [b] [1,4] oxazin-7-?1 ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0763] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usaron 3- (4, 4,5,5-tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolan-2-il) anilina [CAS 210907-84-9] y 7-bromo-4-metil-3, 4-dihidro-2H-benzo [1, ] oxazina [CAS 154264-95-6] como parejas de acoplamiento. MS experimental para C26H3iN702 como (M+H)+ 474.4. UV D=216, 238, 303 nm.
Ejemplo 248: 2- (( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- ( 4- piperidinilfenil ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida .
[0764] La biarilanilina inicial se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232 usando 3- (4, 4 , 5, 5-tetrametil- 1, 3, 2-dioxaborolan-2-il) anilina [CAS 210907-84-9] y N-(4- bromofenil ) piperidina [CAS 22148-20-5] como parejas de acoplamiento. La anilina resultante se hizo reaccionar con 72.3 y se sometió a la posterior química mostrada en el Ejemplo 13 para obtener el compuesto del título. S experimental para C28H35N70 como (M+H)+ 486,5. UV D=252 nm.
Ejemplo 249: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 3- piperidinilfenil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0765] La biarilanilina inicial se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232 usando 3- ( 4 , 4 , 5, 5-tetrametil- 1, 3, 2-dioxaborolan-2-il) anilina [CAS 210907-84-9] y N-(3- bromofenil) piperidina [CAS 84964-24-9] como parejas de acoplamiento. La anilina resultante se hizo reaccionar con 72.3 y se sometió a la posterior química mostrada en el Ejemplo 13 para obtener el compuesto del título. S experimental para C28H35N7O como (M+H)+ 486,5. UV 0=247 nm.
Ejemplo 250: 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (4- pirrolidinilfenil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0766] La biarilanilina inicial se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232 usando 3- ( 4 , 4 , 5, 5-tetrametil- 1, 3, 2-dioxaborolan-2-il) anilina [CAS 210907-84-9] y N-(4- bromofenil) pirrolidina [CAS 22090-26-2] como parejas de acoplamiento. La anilina resultante se hizo reaccionar con 72.3 y se sometió a la posterior química mostrada en el Ejemplo 13 para obtener el compuesto del título. MS experimental para C27H33N70 como (M+H)+ 472.5. UV 0246 nm.
Ejemplo 251: 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 4- pirrolidin-2-oxo-ilfenil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0767] Este ejemplo era un subproducto en la formación del Ejemplo 250. MS experimental para C27H31N7O2 como (M+H)+ 486, 5. UV ?=248, 282 nm.
Ejemplo 252 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- ( 3-pirrolidin-2-oxo-ilfenil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0768] La biarilanilina inicial se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232 usando 3- ( 4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolan-2-il) anilina [CAS 210907-84-9] y N-(3-bromofenil ) pirrolidina [CAS 219928-13-9] como parejas de acoplamiento. La anilina resultante se hizo reaccionar con 72.3 y se sometió a la posterior química mostrada en el Ejemplo 13 para obtener el compuesto del título. MS experimental para C27H31N7O2 como (M+H)+ 486,5. UV D=245 nm.
Ejemplo 253: 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) -4- (benzo [d] [1,3] dioxol-5-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0769] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 1,3-benzodioxol-5-borónico [CAS 94839-07-3] en lugar de ácido 3,4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3] . MS experimental para C24H26N6O3 como (M+H)+ 447, 3. UV ?= 239, 274. 296 nm. d 1,35-1,85 (m, 8H), 3,58-3,65 (m, 1H) , 4,25-4,31 (m, 1H) , 6,00 (s, 2H) 6,93 (d, 1H), 7,10-7,18 (m, 2H) , 7, 37-7, 50 (m, 3H) , 8,08 (br s, 1H) , 8,53 (s, 1H) Ejemplo 254: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 2-metilsulfonilfenil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida .
[0770] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 2- metilsulfonilfenilborónico [CAS 330804-03-0] en lugar de ácido 3 , 4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3]. S experimental para C24H28N 6O3S como (M+H)+ 481.4. UV ?= 240, 285 nm.
Ejemplo 255: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 3-metilsulfonilfenil ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0771] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 3-metilsulfonilfenilborónico [373384-18-0] en lugar de ácido 3,4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3] . MS experimental para C24H28 6O3S como (M+H)+ 481.4. UV ?= 246 nm.
Ejemplo 256: 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (4-metilsulfonilfenil ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0772] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 4- metilsulfonilfenilboronico [149104-88-1] se usó en lugar de ácido 3, 4-dimetoxifenilboronico [CAS 122775-35-3]. S experimental para C24H28 6O3 S como (M+H)+ 481.4. UV ?= 250 nm. d 1, 25-1, 85 (m, 8H) , 3,18 (s, 3H), 3,58-3,65 (m, 1H) , 4,21-4,28 (m, 1H) , 7,52-7,62 (m, 3H) 7,93 (d, 2H), 8,07 (d, 2H) , 8,17 (br s, 1H) , 8,57 (s, 1H) Ejemplo 257: 2- ( (IR, 2S) -2-a inociclohexilamino) -4- (4- tS-metilsulfonilfenil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0773] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usaron ácido 3-metilsulfonilfenilboronico [373384-18-0] y 4-yodoanilina [CAS 540-37-4] como parejas de acoplamiento. MS experimental para C24 H28 6O3S como (M+H)+ 481.4. UV ?= 235, 308 nm.
Ejemplo 259: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4 - ( 4- ( 4-metilsulfonilfenil ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida Este compuesto se preparó utilizando la misma química del Ejemplo 232. Sin embargo, se usaron ácido 4- metilsulfonilfenilborónico [149104-88-1] y 4-yodoanilina [CAS 540-37-4] como parejas de acoplamiento. MS experimental para C24H28 6O3S como (M+H)+ 481.3. UV ?= 239, 313 nm.
Ej emplo 260: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- (3- ( quinolin-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida La biarilanilina inicial se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232 usando 3- (4, 4, 5, 5-tetrametil-l, 3, 2-dioxaborolan-2-il) anilina [CAS 210907-84-9] y 4-bromoquinolina [CAS 3964-04-3] como parejas de acoplamiento. La anilina resultante se hizo reaccionar con 72.3 y se sometió a la posterior química mostrada en el Ejemplo 13 para obtener el compuesto del título. MS experimental para C26H2 NiO como (M+H) + 454, 4. UV L 239, 302 nm.
Ejemplo 261: 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (quinolin-8-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0775] La biarilanilina inicial se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232 usando 3- (4, 4, 5, 5-tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolan-2-il) anilina [CAS 210907-84-9] y 8-bromoquinolina [CAS 16567-18-3] como parejas de acoplamiento. La anilina resultante se hizo reaccionar con 72.3 y se sometió a la posterior química mostrada en el Ejemplo 13 para obtener el compuesto del título. MS experimental para C26H27 70 como (M+H) + 454 , 4. UV O240, 301 nm.
Ejemplo 262 : 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (quinolin-5-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0776] Este compuesto se preparó utilizando la misma química que la del Ejemplo 232. Sin embargo, se usó ácido 5-quinolinilborónico [CAS 355386-94-6] en lugar de ácido 3,4-dimetoxifenilborónico [CAS 122775-35-3] . La anilina resultante se hizo reaccionar con 72.3 y se sometió a la posterior química mostrada en el Ejemplo 13 para obtener el compuesto del título. MS experimental para C26H27N70 como (M+H)+ 454,5. UV D=241, 302 nm. Ejemplo 264: 2- (( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3-dibenzofuranamino) pirimidin-5-carboxamida
[0777] Este compuesto se preparó haciendo reaccionar 3-aminodibenzofurano asequible en comercios [CAS 4106-66-5] con 300.4 y DIEA. Las posteriores reacciones utilizando la química mostrada en el Ejemplo 232 dieron el compuesto del título. MS experimental para C23H24N602 como ( +H)+ 417,4. UV d=212, 236, 322 nm.
Ejemplo 265: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 2-dibenzofuranamino) pirimidin-5-carboxamida
[0778] 2-Bromodibenzofurano (331.1; 942 mg, 3,81 mmol) [CAS 86-76-0], carbamato de ter-butilo (670 mg, 5,72 mmol) [CAS 4248-19-5] y CS2CO3 se añadieron a dioxano desgasificado. Xantphos (330 mg, 0,51 mmol) [CAS 161265-03-8] y Pd2(dba)3 (175 mg, 0,19 mmol) [CAS 51364-51-3] se añadieron posteriormente. La reacción se calentó bajo argón a 85 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se sometió a cromatografía flash para dar 331.2 que se disolvió en 4 N HCl/dioxano. La reacción se agitó durante 12 h y luego se concentró al vacío para obtener 331.3 (200 mg) . Esta anilina se hizo reaccionar con 72.3 y se sometió a la posterior química mostrada en el Ejemplo 120 para obtener el compuesto del título para obtener el compuesto del título. MS experimental para C23H24N6O2 como (M+H)+ 417,4. UV L 210. 244, 289 nm.
Ejemplo 266: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 9-metil-9H-carbazol-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida 332.1 332.2 332.3
[0779] A 3-bromocarbazol (332,1) (530 mg, 2,15 mmol) [CAS 1592-95-6] en DMF (-20 mL) a 0 °C se añadió NaH en DMF (~5 mL) . La reacción se calentó hasta temperatura ambiente y luego se calentó a 60 °C durante 1 h. La solución se dejó enfriar hasta temperatura ambiente y el yodometano se añadió gota a gota. La reacción se calentó a 12 h 60 °C en un tubo sellado. La mezcla de reacción se enfrió se diluyó con EtOAc y se lavó con agua (4 veces), salmuera, se secó sobre MgS04 y se concentró para obtener 332.2 (550 mg) .
[0780] El intermediario 332.2 se sometió a química mostrada en el Ejemplo 265 para obtener 332.3. Esta anilina se hizo reaccionar con 72.3 y se sometió a la posterior química mostrada en el Ejemplo 13 para obtener el compuesto del título para obtener el compuesto del título. MS experimental para C23H24N6O como (M+H)+ 430,4. UV 0=238, 296 nm.
Ejemplo 267. 4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il ) fenilamino) -2- ( (IR, 2R) -2-aminocielohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0781] compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 87 con ( IR, 2R) -ciclohexan-1 , 2-diamina asequible en comercios y DIEA. MS experimental para C19H23N9O como (M+H)+ 394,4. UV ?=250 nm.
Ejemplo 268. 4- ( 3- ( 2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il ) fenilamino) -2- ( (1S, 2S) -2-aminocielohexilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0782] El compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 87 con ( 1S , 2S ) -ciclohexan-1 , 2-diamina asequible en comercios y DIEA. MS experimental para C19H23N9O como (M+H) + 394, 4. UV ?=250 nm.
Ejemplo 269. 4- (3- (2H-1, 2 , 3-triazol-2-il) fenilamino ) -2- ( (IR, 3S) -3-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida (racémico)
[0783] El compuesto racémico del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 87 con cis-ciclohexan-1 , 3-diamina asequible- en comercios y DIEA. MS experimental para C19H23N9O como (M+H)+ 394, 4. UV ?=252 nm.
Ejemplo 270. 4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- ( (IR, 3R) -3-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida (racémica)
[0784] compuesto racémico del titulo se preparó usando misma química mostrada para el Ejemplo 87 con trans-ciclohexan-1, 3-diamina asequible en comercios y DIEA. MS experimental para C19H23N90 como (M+H) + 394, 4. UV ?=252 nm.
Ejemplo 271. 4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- ( (1S, 4S) -4-aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0785] compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 87 con cis-ciclohexan-1 , 4-diamina asequible en comercios y DIEA. MS experimental para C19H23 9O como (M+H) + 394, 4. UV ?=252 nm.
Ejemplo 272. 4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- ( (IR, 4R) -4 -aminociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0786] El compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 417 con trans-ciclohexan-1, 4-diamina asequible en comercios y DIEA. MS experimental para C19H23 90 como ( +H) + 394, 4. UV ?=252 nm.
Ejemplo 273. 4- ( 3- ( 2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il ) fenilamino) -2- ( (1S, 2S) -2-aminociclopentilamino) pirimidin-5-carboxamida (racémica)
[0787] El compuesto racémico del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 417 con trans-ciclopentan-1,2-diamina asequible en comercios y DIEA. MS experimental para Ci8H2iN90 como (M+H)+ 380, 4. UV ?=251 nm.
Ejemplo 274: 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) -5- (trifluorometil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 335.1 335.2 335,3 335.4
[0788] Una mezcla de 3-bromo-5- ( trifluorometil ) anilina 335.1 (1,08 g, 4,50 mmol) [CAS 54962-75-3, 1H-1, 2, 3-triazol 335.2 (1,04 mL, 18,0 mmol), K3P04 (1,91 g, 9,00 mmol), Cul (428 mg, 2,25 mmol), N, N' -dimetiletilendiamina (0,29 mL, 2,70 mmol) en 12 mL de dioxano y 3 mL de D SO se agitó en un tubo sellado a 120 °C durante 5 días. Se obtuvo una mezcla de 335.3 y 335.4 (en una relación de -1,4:1). La mezcla se diluyó con EtOAc (250 mL) , se lavó con agua, salmuera, se secó sobre MgS04, se filtró y se concentró al vacío. La mezcla cruda se sometió a flash cromatografía en columna para aislar 335.3.
[0789] La anilina 335.3 se hizo reaccionar con 300.4 de acuerdo con las condiciones de reacción destacadas en el Ejemplo 232. La química del esquema se completó para obtener el compuesto del título. MS experimental para C20H22 F3N9O como (M+H)+ 462, 3. UV ?=259 nm. d 1,50-2,00 (m, 8H) , 3,61-3,68 (m, 1H) , 4,80-4,88 (m, 1H) , 7,80 (s, 1H), 8,05 (s, 2H) , 8,15 (s, 1H) , 8,60 (s, 1H) , 9,05 (s, 1H) Ejemplo 275 : 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-metil-4- (2H-l,2,3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0790] Una mezcla de 4-fluoro-3-metilnitrobenceno 337.1 (819 mg, 5,28 mmoL) [CAS 455-88-9], 1H-1 , 2 , 3-triazol 335.2 (1,23 mL 21,1 mmol) [CAS 288-36-8] y carbonato de cesio (3,44 g, 10,6 mmol) en 25 mL de N P seco se agitó en un tubo sellado a 120 °C durante 24 h. Se enfrió, se diluyó con 400 mL de acetato de etilo y se lavó con agua. La fase acuosa luego se extrajo con EtOAc (2x200 mL) . La fase orgánica combinada se lavó con agua y salmuera, se secó sobre MgS04 y se filtró para obtener una solución de productos crudos 337.2 y 337.3 con una relación -1:1. Esta solución se concentró hasta 100 mL y una cantidad catalítica de Pd/C al 10% se añadió. A ello, se cargó una suspensión bajo balón de hidrógeno con agitación. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró al vacío para obtener anilinas crudas 337.4 y 337.5. MS experimental para C9Hi0N4 como (M+H)+ 175,1. Las dos anilinas se purificaron usando columna flash.
[0791] La anilina 337.4 se hizo reaccionar con 300.4 y se sometió a la química mostrada en el Ejemplo 232 para obtener el compuesto del título. MS experimental para C20H25N9O como (M+H) + 408,4. UV 0=239, 296 nm. d 1,5-2,0 (m, 8H) , 2,38 (s, 3H) , 3,65-3,75 (m, 1H), 4,35-4,45 (m, 1H) , 7,52-7,62 (m, 1H) , 7,65-7,75 (m, 2H) , 7, 95 (s, 2H) , 8,55 (s, 1H) .
Ejemplo 276: 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-metil-4- (1H-pirazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0792] Este compuesto se preparó utilizando la química en el Ejemplo 275. Específicamente, se hicieron reaccionar pirazol [CAS 288-13-1] y 337.1 para formar 3-metil-4- ( ??-pira zol-1-il) benzenamina . Esta anilina se hizo reaccionar luego con 300.4 de acuerdo con las condiciones destacadas en el Ejemplo 232. La química del esquema se completó para obtener el compuesto del título. MS experimental para C2iH26 80 como (M+H)+ 407,5. UV D=238, 296 nm. d 1,5-2,0 (m, 8H) , 2,25 (s, 3H) , 3,60-3,70 (m, 1H) , 4,35-4,45 (m, 1H), 6,55 (s, 1H) , 7,40 (d, 1H) , 7,60-7,68 (m, 2H) , 7,75 (br s, 1H), 7,82 (br s, 1H) , 8,55 (s, 1H) .
Ejemplo 277: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 3- ( 2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il) -4- ( trifluorometil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0793] Este compuesto se preparó utilizando un procedimiento modificado de la química en el Ejemplo 275. Notablemente, se usó 2-Fluoro-4-nitro-l-trifluorometilbenceno [CAS 69411-67-2] en lugar de 2-Fluoro-l-metil-4-nitrobenceno [CAS 1427-07-2] y la reacción inicial de desplazamiento se agitó a 45 °C durante 3 h. Después de la hidrogenación, la anilina resultante se hizo reaccionar con 300.4 de acuerdo con las condiciones destacadas en el Ejemplo 232. La química del esquema se completó para obtener el compuesto del título. MS experimental para Ci7Hi8F3N90 como (M+H)+ 462,3. UV ?= 245, 295 nm. d 1,50-1,95 (m, 8H) , 3,58-3,64 (m, 1H), 4,43-4,51 (m, 1H) , 7,60-7,66 (m, 1H) , 7,90 (d, 1H) , 8,04 (s, 2H), 8,52-8,58 (m, 1H) , 8,62 (s, 1H) .
Ejemplo 278: 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3- (1H-1, 2, 3-triazol-l-il) -4- (trifluorometil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 1-sustituido precursor del compuesto del la reacción descrita en el Ejemplo 277. ogenación, la anilina resultante se hizo de acuerdo con las condiciones destacadas en el E em lo 232. La química del esquema se completó para obtener del titulo. MS experimental para C17H13 F3N9O como UV ?= 245, 295 nm. d 1,45-1,85 (m, 8H) , 3,58-3,64 4,46 (m, 1H) , 7,63-7,71 (m, 1H) , 7,89-7,97 (m, 2H) , ) , 8,49-8,56 (m, 1H) , 8,62 (s, 1H) . 279: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino ) -4- ( 3- o) pirimidin-5-carboxamida nilanilina asequible en comercios se hizo n 72.3 y se sometió a la posterior química mostrada o 87 para obtener el compuesto del título. MS ara Ci9H24 60 como (M+H)+ 353, 4. UV ?= 244 nm.
Ejemplo 280: 2- (cis-2-aminociclohexilamino) -4- (4-vinilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida El compuesto del titulo se sintetizó utilizando la química en el Ejemplo 11. Sin embargo, en lugar de anilina 72.4, se usó 4-vinilanilina [CAS 1520-21-4]. MS experimental para C19H24 6O como (M+H)+ 353,4. UV ?= 236, 310 nm.
Ejemplo 281: 2- (cis-2-amino-cis-3-metilciclohexilamino) -4- ( 3-metilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida Este compuesto se sintetizó utilizando la misma química mostrada en el Ejemplo 302.
MS experimental para Ci9H26 60 como (M+H)+ 355, 4. UV D=242, 289 nm. d 1,00 (d, 3H), 1, 20-1, 95 (m, 7H) , 2,40 (s, 3H) , 3,18 (s, 3H) , 3,72-3, 80 (m, 1H) , 4,02-4,10 (m, 1H) , 7,07-7,14 (m, 1H) 7,25-7,35 (m, 2H), 7,41-7,48 (m, 1H) , 8,54 (s, 1H) .
Ejemplo 282: 2- (cis-2-amino-cis-3-metilciclohexilamino) -4- (3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0796] Este compuesto se sintetizó utilizando la misma química mostrada en el Ejemplo 303. MS experimental para C20H28N6O como (M+H)+ 369, 4. UV O240, 290 nm. d 1,00 (d, 3H) , 1,20-1, 95 (m, 7H) , 2,38 (s, 6H), 3, 70-3, 78 (m, 1H) , 4,04-4,12 (m, 1H) , 6,95 (s, 1H) , 7,19-7,25 (m, 2H) , 8,50 (s, 1H) .
Ejemplo 283 : 2- (cis-2-amino-cis-3-metilciclohexilamino) -4- (3- (2H-l,2,3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0797] Este compuesto se sintetizó utilizando la misma química mostrada en el Ejemplo 298. MS experimental para C20H25N9O como (M+H)+ 408, 4. UV 0=250 nm. d 0, 75-0, 85 (m, 3H) , 1,20-1,95 (m, 7H) , 3,62-3,70 (m, 1H) , 4,20-4,26 (m, 1H) , 7, 38-7,42 (m, 1H) , 7,55 (t, 1H) , 7, 89-7, 94 (m, 1H) , 7,97 (s, 2H) , 8,56 (s, 1H) , 8,66-8,70 (m, 1H) .
Ejemplo 284 : 2- (cis-6-aminociclohex-3-enilamino) -4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida Este compuesto se sintetizó utilizando la misma química mostrada en el Ejemplo 298. [ 0798 ] MS experimental para Ci9H2iN90 como (M+H)+ 392,3. UV ?=250 nm.
Ejemplo 285: 2- ( ( IR, 2S ) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-fluoro-4-(2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida [ 0799 ] La 3-fluoro-4- ( 2H-1 , 2 , 3-triazol ) anilina intermediaria se preparó haciendo reaccionar 1H-1 , 2 , 3-triazol y 4-bromo-3-fluoroanilina [CAS 656- 65- 5 ] de acuerdo con el Ejemplo 92. Este intermediario se hizo reaccionar luego con 300 . 4 de acuerdo con las condiciones de reacción destacadas en el Ejemplo 232. La química del esquema se completó para obtener el compuesto del título. MS experimental para C19H22FN9O como (M+H)+ 412,4. UV ?=242, 305 nm. d 1,5-2,0 (m, 8H) , 3,75-3,85 (m, 1H) , 4,40-4,50 (m, 1H), 7,45 (d, 1H) , 7,75-7,85 (m, 1H) , 7,95-8,1 (m, 3H) , 8,60 (s, 1H) .
Ejemplo 286: 2-((lSR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( fenetilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0800] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 9. MS experimental para Ci9H26N0 como (M+H)+ 355,4. UV: ? = 232,2.
Ejemplo 287 2- ( (1S, 2R) -1-amino-l, 2, 3, 4-tetrahidronaftalen-2-ilamino) -4- (ciclopropilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0801] El compuesto anterior se preparó usando procedimiento similar al descrito. MS experimental para C18H2 como (M+H)+ 339,2.
Ejemplo 288. 2- (( IR, 2S ) -2-amino-l , 2 , 3 , 4-tetrahidronaftalen-1 ilamino) -4- (ciclopropilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0802] El compuesto anterior se preparó usando un procedimiento similar al descrito. MS experimental para C18H22 6O como (M+H)+ 339,2.
Ejemplo 289. 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (naftalen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida etapa 3 215.1 215.2 215.3
[0803] Etapa 1: A una solución de Dicloropirimidina 215.1 (700 mg, 3,16 mmol) en acetonitrilo (8 mL) se añadió una suspensión de 6-amino-naftileno (3,16 mmol), diisopropilamina (0,61 mL, 3,5 mmol) en acetonitrilo (10 mL) a 0 °C . La mezcla de reacción se calentó lentamente hasta temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción luego se diluyó con agua y el precipitado se recogió por filtración para dar como resultado el producto deseado 215.2.
[0804] Etapa 2: El éster etílico 215.2 (960 mg, 2,81 mmol) se diluyó con 1,4-dioxano (7,5 mL) y etanol (2 mL) , seguido por hidróxido de litio acuoso (1,0 M, 2,8 mL, 2,8 mmol) y se agitó a temperatura ambiente hasta convertir todo el material de partida en el ácido carboxílico. La reacción luego se diluyó con y se acidificó con HC1 1 N (3,0 mL) . La suspensión resultante luego se filtró, se lavó con agua y se secó dando 870 mg del ácido carboxílico 215.3.
[0805] Etapa 3: Al ácido carboxílico 215.3 (870 mg, 2,76 mmol), EDC (792 mg, 4,14 mmol), HOBt (560 mg, 4,14 mmol) en N,N-dimetilformamida (14 mL) se añadió amoníaco (0,5 M en 1,4-dioxano, 14 mL, 6,9 mmol) y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción luego se diluyó con agua (100 mL) y el precipitado se recogió por filtración para dar como resultado el producto deseado 215.4.
[0806] Etapa 4: Una mezcla de éter de benzotriazolilo 215.4 (75 mg, 0,182 mmol), cis-1 , 2-diaminociclohexano (25 mg, 0,218 mmol), DIPEA (0,1 mL, 0,546 mmol) en isopropanol (3 mL) se calentó en microondas (Emry's Optimizer) a 130 °C durante 20 min.
[0807] La mezcla de reacción luego se diluyó con agua y acetonitrilo y se purificó directamente por HPLC preparativa para dar como resultado el producto deseado, 215, después de liofilización. MS experimental para C2iH22 60 como (M+H)+ 377.3. Ejemplo 290 2- ( ( 1S, 2R) -1-amino-l , 2 , 3 , -tetrahidronaftalen-2-ilamino) -4- (ciclopropilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0808] El compuesto anterior se preparó usando un procedimiento similar al descrito en la presente. MS experimental para Ci8H22 60 como (M+H)+ 339,2.
Ejemplo 291. 2- (( IR, 2S ) -2-amino-l , 2 , 3 , 4-tetrahidronaftalen-1-ilamino) -4- (ciclopropilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0809] El compuesto anterior se preparó usando un procedimiento similar al descrito. MS experimental para Ci8H22N60 como (M+H)+ 339,2.
Ejemplo 293: ácido 2-((lS, 2R) -2- ( 5-carbamoil-4- (m-tolilamino) pirimidin-2-ilamino) ciclohexilamino ) acético
[0810] El compuesto anterior se preparó usando un procedimiento similar al descrito en la presente. S experimental para C2oH26 603 como (M+H)+ 399,2. UV: ? = 240, 5, 212, 2, 287,8.
Ejemplo 294 : 2- (cis- -aminociclohexilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0811] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 271. MS experimental para C20H25N7O como (M+H)+ 380, 4. UV: ? = 245, 4.
Ejemplo 295: 2- (cis-2-aminociclopentilamino) -4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida Este compuesto se sintetizó utilizando la misma química mostrada en el Ejemplo 87.
[0812] MS experimental para Ci8H2iN90 como ( +H)+ 380,4. UV ?=249 nm.
Ejemplo 296: 2- (cis-2-aminociclopentilamino) -4- (3-metilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0813] El compuesto 344 se sintetizó utilizando una química similar a la experimental en el Ejemplo 1. El benzotrizol que contenía el precursor 344.1 se hizo reaccionar con cis-diamina 343.4 para dar el compuesto del título. MS experimental para Ci7H22 60 como (M+H) + 327 , 4. UV D=240, 287 nm.
Ejemplo 297: 2- (cis-2-aminociclopentilamino) -4- ( 3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0814] El compuesto 345 se sintetizó utilizando una química similar a la experimental en el Ejemplo 1. El benzotrizol que contenía el precursor 345.1 se hizo reaccionar con cis-diamina 343.4 para dar el compuesto del título. MS experimental para Ci8H24 60 como (M+H)+ 341,4. UV D=217, 239, 290 nm.
Ejemplo 298. 4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- ( (3R, 4R) -3-aminotetrahidro-2H-piran-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema : 1 79.1 179.2 1 79.3
[0815] Etapa 1: 3, -Di-O-acetil-D-arabinal [CAS 3945-17-3] (179,1) se preparó por medio de un método de la literatura estándar o se adquirió como reactivo químico asequible en comercios. Este (5,0 g, 25 mmol) se disolvió en 100 mL de metanol. A ello se añadió 1,0 gramo de Pd/C al 10% y la mezcla se agitó bajo un balón de hidrógeno durante la noche para dar el compuesto 179.2. La mezcla se filtró para eliminar Pd/C. El filtrado se trató con metóxido de sodio (5,4 g, 100 mmol) a temperatura ambiente durante la noche. Se neutralizó con HC1 6 N (20 mL) en baño de hielo. La mezcla se concentró al vacío hasta sequedad. El residuo se trató con 500 mL de acetato de etilo y vigorosamente se agitó a 45°C durante 30 min. La suspensión se filtró usando un embudo Buchner de grado fino. El filtrado se concentró al vacío y se bombeó durante para obtener diol 179,3 (2, 82 g, 95%) .
[0816] Etapa 2: Diol 179,3 (205 mg, 1,74 mmol) se disolvió en 10 mL de DCM seca. A ello se añadieron piridina (0,35 mL, 4,34 mmol) y en el baño de hielo Tf20 (0, 63 mL, 3,74 mmol) . La reacción se controló con TLC (tinción: molibdato de amonio (12,5 g) , sulfato de Ce (IV) (5 g) , 10% H2SO4 500 mL; se calentó usando calor fuerte proveniente de un cañón de calor después de sumergir). La reacción se agitó durante 15 min. A la mezcla se añadieron 24 mL de DMF y 3 mL de HMPA. Luego, la azida sódica (2,28 g, 35 mmol) se añadió. La mezcla se agitó luego a 50 °C durante 3 h (la reacción se completó en 1,5 h por TLC) . La mezcla se diluyó con acetato de etilo, se filtró, se lavó con salmuera. La fase orgánica se secó, se concentró y se sometió a columna flash de sílice para aislar diazida 179,4 (220 mg, 75%).
[0817] Etapa 3: Diazida 179.4 (220 mg, 1,3 mmol) se disolvió en 40 mL de acetato de etilo. Se trató con Pd/C al 10% bajo balón de H? durante la noche. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró al vacío para dar diamina cruda 179.5.
[0818] Etapa 4: El intermediario 179.6 se preparó usando anilina 156.6 (Ejemplo 66) usando la misma química mostrada en el Ejemplo 1. MS experimental para Ci4Hi3N7OS como (M+H)+ 328,2.
[0819] Etapa 5: Metiltiopirimidina 179.6 (105 mg, 0,32 mmol) se disolvió en 2 mL de NMP y se trató con MCPBA (102 mg, 0,38 mmol) a temperatura ambiente durante 45 min. A ello se añadieron DIEA (226 µL, 1,3 mmol) y diamina 179.5 preparados en la Etapa 3. La mezcla se agitó durante 2 h a 90 °C durante 2 horas. Dos productos principales experimentales eran 179 y 179.7 a 1,58 min y 1,55 min por HPLC analítica en fase inversa (5 min de corrida) en la relación de 1,7:1 en favor de 179. El compuesto 179 se aisló de la mezcla usando HPLC preparativa en fase inversa. MS experimental para C18H2iN902 como (M+H)+ 396, 3. UV ?=249 nm. RMN (CD3OD) : d 8,66 (s, 1H) , 8,52 (s, 1H) , 7,93 (s, 2H) , 7,82 (m, 1H) , 7,47 (m, 1H) , 7,27 (m, 1H) , 4,40 (m, 1H), 4,00 (m, 1H) , 3,78 (m, 1H), 3,72 (m, 1H) , 3,55 (m, 1H) , 3,42 (m, 1H) , 2,00 (m, 1H) , 1,86 (m, 1H) ppm.
Ejemplo 299. 4- ( 3- ( 2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il ) fenilamino) -2- ( (3S, 4S) -4-aminotetrahidro-2H-piran-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0820] Este compuesto se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 298 usando 3, 4-Di-O-acetil-L-arabinal [CAS 3945-18-4], asequible en comercios, para reemplazar 3,4-Di-O-acetil-D-arabinal [CAS 3945-17-3] . El compuesto del título era el producto menor aislado de la mezcla de reacción en la etapa final. MS experimental para C18H21N9O2 como (M+H)+ 396,3. UV ?=250 nm. RMN (CD3OD) : d 8,73 (s, 1H) , 8,58 (s, 1H) , 8,09 (s, 2H) , 7,90 (m, 1H), 7,54 (m, 1H) , 7,34 (m, 1H) , 4,50 (m, 1H) , 4,06 (m, 1H) , I I 3,83 (m, 1H) , 3,76 (m, 1H) , 3,63 (m, 1H) , 3,60 (m, 1H) , 3,43 (m, Í I ¦ 1H) , 2,08 (m, 1H), 1,92 (m, 1H) ppm.
I I Ejemplo 300. 4- ( 3- ( lH-pirazol-l-il ) fenilamino) -2- ( ( 3R, R) -3-i j aminotetrahidro-2H-piran-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida ímica como o) -4- ímica como o) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0823] Este compuesto se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 298. MS experimental para C17H22N6O2 como (M+H)+ 343,3. UV ?=240, 288 nm.
Ejemplo 303. 2- ( (3R, 4R) -3-aminotetrahidro-2H-piran-4-ilamino ) -4- (3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0824] Este compuesto se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 298. MS experimental para Ci8H24N602 como (M+H)+ 357,4. UV ?=240, 290 nm.
Ejemplo 304. 2- ( (3R, 4R) -3-aminotetrahidro-2H-piran-4-ilamino) -4- ( 3-metoxifenilamino) pi imidin-5-carboxamida
[0825] Este compuesto se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 298. MS experimental para C17H22 6O3 como (M+H)+ 359,4. UV ?=240, 283 nm. RMN (CD30D) : d 8,46 (s, 1H) , 7,29 (m, 1H), 7,26 (m, 1H) , 6,99 (m, 1H) , 6,74 (m, 1H) , 4,25 (m, 1H) , 4,03 (m, 1H) , 3,89 (m, 1H) , 3,79 (m, 1H) , 3,77 (s, 3H) , 3,62 (m, 1H) , 3,55 (m, 1H) , 2,02 (m, 1H) , 1,82 (m, 1H) ppm.
Ejemplo 305. 2- ( (3S, 4S) -4-aminotetrahidro-2H-piran-3-ilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0826] Este compuesto se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 299. MS experimental para C17H22 6O2 como (M+H)+ 343,3. UV ?=241, 287 nm. RMN (CD3OD) : d 8,53 (s, 1H) , 7,47 (m, 1H) , 7,37 (m, 1H) , 7,28 (m, 1H) , 7,02 (m, 1H) , 4,50 (m, 1H) , 4,05 (m, 1H) , 4,01 (m, 1H) , 3,73-3,68 (m, 2H) , 3,57 (m, 1H) , 2,38 (s, 3H) , 2,05 (m, 1H) , 1,87 (m, 1H) ppm.
Ejemplo 306. 2- ( ( IR, 2R) -2-amino-3 , 3-difluorociclohexilamino) -4 - (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida (racémica) Esquema :
[0827] Etapa 1: 2-Ciclohexen-l-ol (5,0 mL, 50 mmol) se disolvió en 100 mL de DCM. A ello se añadieron piridina (12,2 mL, 150 mmol) y TBDMSC1 (12,1 g, 80 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentró al vacio para eliminar la piridina. El residuo se extrajo en 300 mL de acetato de etilo y 200 mL de agua. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó, se concentró y se purificó usando columna flash de. sílice usando 15% acetato de etilo en hexano. El compuesto 187.1 se obtuvo así en forma de un aceite (10,1 g, 94%) .
[0828] Etapa 2: El compuesto 187,1 (10,1 g, 47,7 mmol) se disolvió en 70 mL de acetonitrilo . A ello se añadió NMO (solución acuosa al 50%, 22,5 mL, 95,4 mmol) y 0s04 (solución acuosa al 4%, 9,1 mL, 1,43 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente. Se diluyó con 600 mL de acetato de etilo, se lavó con salmuera, bicarbonato de sodio saturado, se secó, se concentró y se purificó por columna flash de sílice usando 60% acetato de etilo en hexano para dar el compuesto 187,2 (10,8 g, 92%) en forma de un aceite.
[0829] Etapa 3: Diol 187,2 (10,8 g, 43,9 mmol) se disolvió en 200 mL de DCM. En baño de hielo, se añadieron piridina (17,7 mL, 219 mmol) y gota a gota MsCl (8,2 mL, 105 mmol). La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se diluyó con 500 mL de DCM, se lavó con salmuera x3, se secó, se concentró, se purificó usando columna flash de sílice con 45% acetato de etilo en hexano para dar el compuesto 187,3 (16,8 g, 95%) en forma de un aceite.
[0830] Etapa 4: El compuesto 187,3 (15,7 g, 39 mmol) se disolvió en 80 mL de DMF y 20 mL de HMPA. A ello se añadió azida sódica (16,5 g, 253 mmol). La mezcla se agitó a 100 °C durante la noche (24 h) . La mezcla se diluyó con 800 mL de acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera x2, se secó, se concentró y se purificó por columna flash de sílice usando 10% acetato de etilo en hexano para aislar diazida 187.4 (3,16 g, 27%) en forma de un aceite.
[0831] Etapa 5: El compuesto 187,4 (1,21 g, 4,1 mmol) se disolvió en 60 mL de THF seco. A ello se añadió TBAF (1,0 M en THF, 8,2 mL, 8,2 mmol) . La mezcla se agitó durante 2 h. Se neutralizó con metanol, se concentró al vacío y se sometió a columna flash de sílice usando 40-50% acetato de etilo en hexano para aislar el compuesto 187, 5 (854 mg, 99%) en forma de un aceite .
[0832] Etapa 6: El compuesto 187,5 (450 mg, 2,5 mmol) se disolvió en 100 mL de acetato de etilo. Pd/C al 10% (500 mg) se añadió. La mezcla se agitó bajo balón de H2 durante 20 h. Se filtró a través de celite. El celite se lavó bien usando acetato de etilo. El filtrado se concentró y se sometió a columna flash de sílice para aislar el compuesto 187, 6 (650 mg, 79%) en forma de sólido. MS experimental para C16H30 2O5 como (M+H) + 331, 3.
[0833] Etapa 7: El compuesto 187,6 (72 mg, 0,22 mmol) se disolvió en 10 mL de DCM seca. A ello se añadieron tamiz molecular 4A (activado) (100 mg) , NMO (sólido, 39 mg, 0,33 mmol) y por último TPAP (8 mg, 0,022 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Se concentró y se cargó directamente en una columna flash de sílice para aislar el compuesto 187,7 (77 mg, 100%) en forma de sólido. MS experimental para Ci6H28 205 como (M+H)+ 329,3. [ 0834 ] Etapa 8: Cetona 187,7 (134 mg, 0,41 mmol) se disolvió en 10 mL de DCM. A ello se añadió DAST (110 µ?,, 0,82 mmol). La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se cargó directamente en una columna flash de sílice para aislar el compuesto 187.8 (MS experimental para C16H28 F2N2O4 como (M+H) + 351,2) usando 20% de acetato de etilo en hexano. Luego se trató con TFA puro a temperatura ambiente durante 1 h y se concentró hasta sequedad para obtener el compuesto 187.9. MS experimental para CgHis FsNs como (M+H)+ 151,2. [ 0835 ] Etapa 9: El compuesto 187.10 (72 mg, 0,2 mmol) se disolvió en 3 mL de NMP. A ello se añadió DIEA (350 \iL, 2 mmol) y todo el compuesto crudo 187.9 preparado en la Etapa 8. La mezcla se agitó a 90 °C durante 2 h y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto del título 187 (racémico) . MS experimental para Ci8H22F2N60 como (M+H)+ 377.2. UV ?=239, 292 nm. RMN (CD30D) : d 8,51 (s, 1H) , 7,45 (m, 1H) , 7,34 (m, 1H) , 7,25 (m, 1H) , 7,02 (m, 1H) , 4,61 (m, 1H) , 4,10 (m, 1H) , 2,36 (s, 3H) , 1,8-2,1 (m, 6H) ppm.
Ejemplo 307. 4- ( 3- ( 2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il ) fenilamino ) -2- ( (IR, 2R) -2-amino-3, 3-difluorociclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida ( racémica )
[0836] El compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 306. MS experimental para C19H21 F2N9O como ( +H) + 430, 4. UV ?=250 nm.
Ejemplo 308. 2- ( (IR, 2R, 3R) -2-amino-3-fluorociclohexilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida (racémica) Esquema . 1S 9
[0837] Etapa 1: El compuesto 187.6 (descrito en el Ejemplo 306) (350 mg, 1,06 mmol) se disolvió en 20 mL de DCM. ? -78 °C, a ello se añadió una solución de DAST (280 µ?., 2,12 mmol) en 10 mL de DCM gota a gota. La mezcla se agitó en el baño de enfriamiento durante 45 min, se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera, se concentró y se sometió a columna flash para aislar el compuesto 189.1 en 30% de rendimiento. MS experimental para C16H29FN2C como (M+H)+ 333,2. Se trató con 3 mL de TFA puro durante 20 min. La mezcla se concentró hasta sequedad para obtener el compuesto crudo 189.2. MS experimental para C6H13FN2 como (M+H)+ 133, 1.
[0838] Etapa 2: El compuesto 187,10 (108 mg, 0,3 mmol) se disolvió en 3 mL de NMP. A ello se añadió DIEA (260 pL, 1,5 mmol) y todo el compuesto crudo 189.2 preparado en la Etapa 1. La mezcla se agitó a 90 °C durante 2 h y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto del titulo 189 (racémico) . MS experimental para Ci8H23FN60 como (M+H)+ 359,2. UV ?=240, 292 nm. RMN (CD3OD) : d 8,51 (s, 1H), 7,45 (m, 1H) , 7,38 (m, 1H), 7,24 (m, 1H) , 6,97 (m, 1H) , 4,83-4,78 (m, 2H) , 3,65 (m, 1H), 2,36 (s, 3H), 1,8-2,2 (m, 6H) ppm.
Ejemplo 309. 4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- ( ( IR, 2R, 3R) -2 -amino-3-flúorociclohexilamino) pirimidin-5- rboxamida (racémica)
[0839] El compuesto del titulo se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 308. MS experimental para C19H22FN9O como (M+H)+ 412,4. UV ?=251 nm.
Ejemplo 310. 2- ( (IR, 2R, 3S) -2-amino-3-hidroxiciclohexilamino) -4-(m-tolilamino ) pirimidin-5-carboxamida (racémica, 191A) y 2-( (1S, 2S, 6R) -2-amino-6-hidroxiciclohexilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida (racémica, 191B) Esquema .
[0840] Etapa 1: El compuesto 187.4 (descrito en el Ejemplo 306) (180 mg, 0,60 mmol) se disolvió en 50 mL de acetato de etilo. A ello se añadió Pd/C al 10% (100 mg) y la mezcla se agitó durante la noche bajo un balón de hidrógeno. La mezcla se filtró a través de celite, que luego se lavó bien con metanol . El filtrado se concentró al vacio para obtener el compuesto 191.1 con rendimiento cuantitativo en forma de un aceite. MS experimental para C12H28 2OS 1 como (M+H)+ 245,3.
[0841] Etapa 2: El compuesto 191.1 de la Etapa 1 se disolvió en 5 mL de NMP. A ello se añadieron DIEA (313 L, 1,8 mmol) y el compuesto 187.10 (108 mg, 0,3 mmol) . La mezcla se agitó a 90 °C durante 90 min. A ello se añadieron luego 10 mL de metanol, 10 mL de TFA y 3 mL de agua. La mezcla se agitó a 80 °C durante 2 h. Se concentró al vacio y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar los compuestos racémicos del titulo 191. A y 191. B. La relación de 191. A (menos polar) y 191. B era de 7:1 por HPLC analítica. El compuesto 191. A: MS experimental para 0?8?24?6?2 como ( +H)+ 357,3. UV ?=243. 294 nm. El compuesto 191. B: MS experimental para Cigl^ eC^ como (M+H)+ 357,3. UV ?=243. 290 nm. Ejemplo 311. 4- ( 3- ( 2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il ) fenilamino) -2- ( (IR, 2R, 3S) -2-amino-3-hidroxiciclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida (racémica, 192. A) y 4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- ( (1S, 2S, 6R) -2-amino-6-hidroxiciclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida (racémica, 192. B)
[0842] Los dos compuestos racémicos del título se prepararon usando la misma química mostrada para el Ejemplo 310. La relación de 192. A (menos polar) y 192. B era de 1,6:1 por HPLC analítica. El compuesto 192. A: S experimental para C19H23N9O2 como (M+H) + 410,4. UV ?=250 nm. El compuesto 192. B: MS experimental para C19H23N9O2 como (M+H)+ 410,4. UV ?=249 nm.
Ejemplo 312. 2- ( (IR, 2R, 3S) -2-amino-3-metoxiciclohexilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida (racémica, 193. ) y 2-( (1S, 2S, 6R) -2 -amino-6-metoxiciclohexilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida (racémica, 193. B) Esquema . 193.A 1 93.B
[0843] Etapa 1: El compuesto 187.4 (descrito en el Ejemplo 306) (1,21 g, 4,1 mmol) se disolvió en 60 mL de THF seco. A ello se añadió TBAF (1,0 M en THF, 8,2 mL, 8,2 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Se concentró y se cargó en una columna flash de sílice para aislar el compuesto 193,1 (854 mg, 99%) en forma de sólido.
[0844] Etapa 2: El compuesto 193,1 (124 mg, 0,68 mmol) se disolvió en 10 mL de THF seco. A ello se añadieron NaH (60% en peso en aceite mineral, 55 mg, 1,36 mmol) y 5 min más tarde, yodometano (0,42 mL, 6,8 mmol). La mezcla se agitó durante 1 h. Se concentró al vacío y se cargó en una columna flash de sílice para aislar el compuesto 193,2 (115 mg, 85%) en forma de un aceite .
[0845] Etapa 3: El compuesto 193,2 (115 mg, 0,58 mmol) preparado en la Etapa 2 se disolvió en 80 mL de acetato de etilo.
A ello se añadieron 100 mg de Pd/C al 10% y la mezcla se agitó bajo balón de H2 durante la noche. Se filtró a través de celite y el celite se lavó bien con metanol. El filtrado se concentró al vacio para dar el compuesto 193.3.
[0846] Etapa 4: Todo el compuesto 193.3 preparado en la Etapa 3 se disolvió en 3 mL de NMP. A ello se añadieron el compuesto 187.10 (180 mg, 0,5 mmol) y DIEA (0,26 mL, 1,5 mmol). La mezcla se agitó a 90 °C durante 1 h para dar una mezcla de 193. A (menos polar) y 193. B en la relación de 6:1. Los dos compuestos racémicos del titulo se aislaron usando HPLC preparativa en fase inversa. El compuesto 193. A: MS experimental para Ci9H26 602 como (M+H)+ 371,3. UV ?=247, 295 nm. El compuesto 193. B: MS experimental para C19H26N602 como (M+H) + 371, 3. UV ?=242, 289 nm. Ejemplo 313. 2- ( (ls, s) -4-aminociclohexilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida A una mezcla de trans-4-aminociclohexanol (2,07 g, 13,6 mmol) y NaHC03 (3,50 g, 41,7 mmol) en H20 (20 mL) a temperatura ambiente, se añadió una solución de cloroformiato de bencilo (1,92 mL, 13,6 mmol) en dioxano (15 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 h. El precipitado blanco se recogió en forma de ( IR, 4R) -4-hidroxiciclohexilcarbamato de bencilo (3,37 g) .
[0847] A una suspensión de (lR,4R)-4-hidroxiciclohexilcarbamato de bencilo (1,14 g, 4,58 mmol) y trietilamina (1,30 mL, 9,34 mmol) en CH2C12 (15 mL) a temperatura ambiente, se añadió cloruro de metansulfonilo (0,425 mL, 5,49 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 h. Más cloruro de metansulfonilo (0,425 mL, 5,49 mmol) y trietilamina (1,00 mL) se añadieron. Se continuó agitando durante 48 h. La solución de reacción se lavó con 5% de NaHC03, luego con HC1 1 N. La fase orgánica se separó, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio para dar (lR,4R)-4- (benciloxicarbonil ) ciclohexil metansulfonato en forma de un sólido (1,13 g) .
[0848] Una mezcla de ( IR, 4R) -4- (benciloxicarbonil) ciclohexil metansulfonato (1,13 g, 3,46 mmol) y NaN3 (0,674 g, 10,4 mmol) en DMF (10 mL) se agitó a 100 C durante 20 h. El agua y EtOAc se añadieron. La fase orgánica se separó, se lavó con agua, se secó sobre Na2S04, se concentró al vacio para dar (ls,4s)-4-azidociclohexilcarbamato de bencilo (0,819 g) .
[0849] Una mezcla de (ls, 4s) -4-azidociclohexilcarbamato de bencilo (400 mg, 1,46 mmol) y Pd-C (10%, 70 mg) en MeOH (20 mL) (que contenia 5 gotas de HC1 6 N) se hidrogenó bajo balón de hidrógeno durante 20 h. Se filtró a través de celite. El filtrado se concentró al vacio para dar ( ls , 4s ) -ciclohexan-1, 4-diamina (223 mg) .
[0850] A una solución de ( ls , 4s ) -ciclohexan-1 , -diamina (60 mg, 0,40 mmol) y TEA (0,208 mL, 1,50 mmol) en DMF (2 mL) y MeOH (1 mL) , se añadió el compuesto 2- ( ??-benzo [d] [ 1, 2 , 3] triazol-1-iloxi ) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida (65 mg, 0,18 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 h. Se concentró al vacio. El residuo se purificó por HPLC para dar el compuesto del titulo (30 mg) . MS 341,2 ( +H) ; UV 247,8, 298,8. Ejemplo 314. 2- ( (4-aminotetrahidro-2H-piran-4-il) metilamino) -4-(m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0851] El compuesto 187,10 (tal como se muestra en el Ejemplo 306) (70 mg, 0,19 mmol) se disolvió en 3 mL de NMP. A ello se añadieron asequible en comercios 4- (aminometil) tetrahidro-2H-piran-4-amina (78 mg, 0,38 mmol) y DIEA (0,20 mL, 1,14 mmol). La mezcla se agitó a 90 °C durante 2 h. De esta mezcla se aisló el compuesto del titulo usando HPLC preparativa en fase inversa. MS experimental para Ci8H24 602 como (M+H)+ 357, 3. UV ?=240 nm.
[0852] Ejemplo 315. (R) -4- ( lH-indazol-6-ilamino) -2- (l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0853] Etapa 1: A una solución agitada de ácido carboxilico 165.1 (85 g, 540 mmol) en cloruro de tionilo (425 mL) se añadió piridina (8,5 mL, 0,11 mmol) lentamente. La reacción se agitó a 75 °C durante lo cual se concentró y se secó al vacio en un polvo amarillo claro. Este sólido amarillo lentamente se diluyó con 750 mL de etanol y se calentó a reflujo. Al dia siguiente, se determinó que la reacción estaba completa por medio de HPLC y luego se enfrió en un baño de hielo y el sólido se filtró y se lavó con éter dietilico para dar como resultado éster etílico 165.2 en forma de un polvo blanquecino (91 g, 87% para dos etapas). MS experimental para C7H8N204 como (M+H)+ 185,0.
[0854] Etapa 2: El éster 165.2 (22 g, 120 mmol) se disolvió en oxicloruro de fósforo (60 mL, 600 mmol) y la mezcla se trató con N, N-dietilanilina (27 mL, 167 mmol) y la mezcla se calentó hasta 105 °C hasta que la reacción se determinó completa por HPLC. Luego se enfrió hasta temperatura ambiente y lentamente se añadió a 1 L de hielo picado dando como resultado la formación de un precipitado beige que se recogió por filtración y se secó al vacio para dar como resultado dicloruro 165.3 en forma de un polvo amarillo claro (22,5 g, 85%). H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 9,13 (s, 1H) , 4,37 (q, 2H) , 1,32 (t, 3H) .
[0855] Etapa 3: Dicloropirimidina 165.3 (1,04 g, 4,7 mmol) se disolvió en NMP (30 mL) y se agitó en baño de hielo. A ello se añadieron 6-aminoindazol 165.4 (690 mg, 5,2 mmol) y luego gota a gota etildiisopropilamina (DIEA, 1,64 mL, 9,4 mmol). La mezcla se agitó durante 40 minutos y a ello se añadió tiometóxido de sodio (660 mg, 9,4 mmol). La mezcla se agitó durante la noche, se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera tres veces y se concentró al vacio para dar el compuesto crudo 165.5 en forma de un sólido marrón claro en rendimiento cuantitativo. MS experimental para C15H15 5O2 S como (M+H)+ 330,1.
[0856] Etapa 4: El éster etílico 165.5 (4,7 mmol) se disolvió en 60 mL de THF. A ello se añadieron hidróxido de litio hidratado (236 mg, 5,6 mmol) y 20 mL de agua. La mezcla se agitó durante la noche y a ello se añadió con cuidado solución 1 N de HC1 hasta que el pH alcanzó 2. La mezcla se concentró al vacío para eliminar THF. El sólido blanco se trituró y se aisló usando un embudo de Büchner. Se lavó con agua y se secó en horno de vacío para dar el compuesto 165.6 (1,14 g, 81%) en forma de un sólido blanco. MS experimental para C13H11N5O2 S como (M+H)+ 302,1.
[0857] Etapa 5: Ácido carboxilico 165.6 (1,14 g, 3,8 mmol) se disolvió en 30 mL de DMF. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (1,09 g, 5,7 mmol) e hidrato de HOBt (770 mg, 5,7 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. A ello se añadió luego amoniaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 22 mL, 11,4 mmol). La mezcla se agitó durante 2 horas. Luego se concentró al vacio y se extrajo en agua y acetato de etilo. La fase orgánica se separó y se lavó con salmuera cuatro veces. La fase orgánica luego se secó sobre MgSC y se concentró al vacio para obtener el compuesto 165.7 en forma de un sólido amarillo claro (820 mg, 72%). MS experimental para Ci3Hi2N6OS como ( +H) + 301, 1.
[0858] Etapa 6: El compuesto 165.7 (40 mg, 0,13 mmol) se disolvió en 3 mL de NMP. A ello se añadió MCPBA (65% puro, 53 mg, 0,18 mmol). Se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. A ello se añadieron luego H-D-Leu-NH2 HC1 (108 mg, 0,65 mmol) y DIEA (230 L, 1,3 mmol). La mezcla se agitó durante 90 minutos a 120 °C de baño. Esta mezcla luego se sometió a HPLC preparativa para aislar el compuesto del titulo 165. MS experimental para Ci8H22N802 como ( +H) + 383,2. UV ?=246, 303 nm.
[0859] Ejemplo 316. (R) -4- ( lH-indazol-6-ilamino) -2- (1-amino-l-oxopropan-2-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0860] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con H-D-Ala-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Leu-NH2 HC1. MS experimental para Ci5Hi6N802 como (M+H) + 341, 2. UV ?=245, 302 nm.
[0861] Ejemplo 317. (R) -4- ( lH-indazol-6-ilamino) -2- (2-amino-2-oxo-1-feniletilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0862] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con H-D-Phe-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Leu-NH2 HC1. MS experimental para CzoHis sOz como (M+H)+ 403,2. UV ?=249, 298 nm.
[0863] Ejemplo 318. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (quinolin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida 169.1 169.4 169.5 169
[0864] Etapa 1: Dicloropirimidina 169.1 (500 mg, 2,3 mmol) se disolvió en NMP (20 mL) y se agitó en baño de hielo. A ello se añadieron 6-aminoquinolina 169.2 (390 mg, 2,7 mmol) y luego gota a gota etildiisopropilamina (DIEA, 0,72 mL, 4,1 mmol). La mezcla se agitó durante 2 horas, se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera tres veces y se concentró al vacio para dar el compuesto crudo 169.3 en forma de un sólido marrón claro en rendimiento cuantitativo. S experimental para Ci6Hi3ClN^02 como (M+H)+ 329, 1.
[0865] Etapa 2: El éster etílico 169.3 (2,3 mmol) se disolvió en 30 mL de THF. A ello se añadieron hidróxido de litio hidratado (193 mg, 4,6 mmol) y 6 mL de agua. La mezcla se agitó durante 7 horas y a ello se añadió con cuidado solución 1 N de HC1 hasta que el pH alcanzó 5. La mezcla se concentró al vacío para eliminar THF y se extrajo con acetato de etilo 5 times. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron y se concentraron al vacío para dar ácido crudo 169.4. MS experimental para C14H9C IN4O2 como (M+H)+ 301, 1.
[0866] Etapa 3: Ácido carboxilico 169,4 (220 mg, 0,73 mmol) se disolvió en 18 mL de NMP. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (210 mg, 1,1 mmol) e hidrato de HOBt (150 mg, 1,1 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. A ello se añadió luego amoníaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 7,3 mL, 3,65 mmol). La mezcla se agitó durante 2,5 horas. Luego se concentró al vacío y se extrajo en agua y acetato de etilo. La fase orgánica se separó y se lavó con salmuera tres veces. La fase orgánica luego se secó sobre MgS04 y se concentró al vacío para obtener el compuesto 169.5 en forma de un sólido (180 mg, 62%). MS experimental para C20Hi4 8O2 como (M+H)+ 399, 1.
[0867] Etapa 6: El compuesto 169.5 (71 mg, 0,18 mmol) se disolvió en 3 mL de NMP. A ello se añadieron H-D-Leu-NH2 HC1 (150 mg, 0,90 mmol) y DIEA (0,31 mL, 1,8 mmol). La mezcla se agitó durante 90 minutos a 120 °C de baño. Esta mezcla luego se sometió a HPLC preparativa para aislar el compuesto racémico del titulo 169. MS experimental para C20H23 7O2 como (M+H)+ 394,2. UV ?=241, 283 nm.
[0868] Ejemplo 319. (R) -2- (l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (benzo [d] tiazol-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0869] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 6-aminobenzotiofeno para reemplazar 6-aminoindazol 165.4. MS experimental para Ci8H2iN702S como (M+H)+ 400,2. UV ?=243. 303 nm.
[0870] Ejemplo 320. (R) -4- ( lH-indol-5-ilamino) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0871] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 6-aminoindol para reemplazar 6-aminoindazol 165.4. MS experimental para C19H23 7O2 como (M+H)+ 382,2. UV ?=245 nm.
[0872] Ejemplo 321. (R) -4- ( lH-indazol-5-ilamino) -2- (l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0873] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 5-aminoindazol para reemplazar 6-aminoindazol 165.4. MS experimental para Ci8H22N802 como ( +H)+ 383.2. UV ?=247, 301 nm.
[0874] Ejemplo 322. (R) -2- (l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (3- (metilsulfonil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0875] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis en el Ejemplo 315 con 3-(metilsulfonil ) anilina para reemplazar 6-aminoquinolina 169,2. MS experimental para Ci8H24N604S como (M+H)+ 421,2. UV ?=249, 285 nm.
[0876] Ejemplo 323. (R) -2- (l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (4- (metilsulfonil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0877] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 4-(metilsulfonil) anilina para reemplazar 6-aminoquinolina 169.2. S experimental para como (M+H)+ 421,2. UV ?=250, 300 nm.
[0878] Ejemplo 324. (R) -4- (4- ( 4-acetilpiperazin-l-il) fenilamino) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0879] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con l-(4-(4-aminofenil) piperazin-l-il) etanona para reemplazar 6-aminoquinolina 169,2. MS experimental para C23H32 8O3 como (M+H) + 469, 3. UV ?=243. 296 nm.
[0880] Ejemplo 325. ( (R) -4- ( ??-benzo [d] imidazol-6-ilamino) -2-( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0881] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 1H-benzo [d] imidazol-6-amina para reemplazar 6-aminoquinolina 169,2.
MS experimental para Ci'8H22 802 como (M+H)+ 383.2. UV ?=244, 297 nm.
[0882] Ejemplo 327. (R) -4- ( lH-indazol-5-ilamino ) -2- (1-amino-l-oxopropan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0883] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con H-D-Ala-NH2 HCl para reemplazar H-D-Leu-NH2 HC1. MS experimental para Ci5Hi6N802 como (M+H)+ 341,2. UV ?=245, 299 nm.
[0884] Ejemplo 328. (R) -2- (l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (4- (N-metilacetamido) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0885] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con N-(4-aminofenil ) -N-metilacetamida para reemplazar 6-aminoquinolina 169.2. MS experimental para C20H27 7O3 como (M+H)+ 414,2. UV ?=245, 296 nm.
[0886] Ejemplo 329. (R) -2- ( l-amino-l-oxopropan-2-ilamino ) -4-(4- (N-metilacetamido) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0887] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con H-D-Ala-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Leu-NH2 HC1. MS experimental para C17H21N7O3 como (M+H)+ 372.2. UV ?=244, 295 nm.
[0888] Ejemplo 330. (R) -2- ( l-amino-l-oxopropan-2-ilamino) -4-(benzo [d] tiazol-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0889] compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con H-D-Ala-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Leu-NH2 HC1. MS experimental para Ci5H15 702S como (M+H)+ 358,1. UV ?=244, 303 nm. RMN (CD3OD) : d 9,22 (s, 1H), 8,51 (m, 2H) , 8,07 (d, J=8,8 Hz, 1H) , 7,71 (d, J=8,8 Hz, 1H) , 4,44 (m, 1H) , 1,55 (d, J=6,8 Hz, 3H) ppm.
Ejemplo 331. (R) -2- (l-amino-l-oxopropan-2-ilamino) -4- (benzo [d] tiazol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0890] compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 5-aminobenzotiofeno para reemplazar 6-aminobenzotiofeno . MS experimental para Ci5Hi5N702S como (M+H)+ 358,1. UV ?=249, 292 nm. RMN (CD3OD) : d 9,34 (s, 1H) , 8,67 (s, 1H) , 8,51 (s, 1H) , 8,10 (d, J=8,8 Hz, 1H) , 7,59 (d, J=8,8 Hz, 1H) , 4,64 (m, 1H) , 1,55 (d, J=7,2 Hz, 3H) ppm.
[0891] Ejemplo 332. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (benzo [d] tiazol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0892] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 5-aminobenzotiofeno para reemplazar 6-aminobenzotiofeno . MS experimental para C18H2iN702S como (M+H) + 400,2. UV ?=247, 295 nm. Ejemplo 333. (R) -2- ( l-amino-l-oxopropan-2-ilamino) -4- ( imidazo [1, 2-a] piridin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0893] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con imidazo [ 1, 2-a] piridin-6-amina para reemplazar 6-aminobenzotiofeno . MS experimental para Ci5Hi6N802 como (M+H) + 341, 2. UV ?=250 nm.
Ejemplo 334. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- ( imidazo [1, 2-a] piridin-6-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con imidazo [ 1, 2-a] piridin-6-amina para reemplazar 6-aminoindazol 165.4. MS experimental para Ci8H22 802 como ( +H)+ 383.2. UV ?=252 nm.
Ej emplo 335. (R) -4- ( lH-indol-5-ilamino) -2- ( l-amino-l-oxopropan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0894] compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con H-D-Ala-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Leu-NH2 HC1. MS experimental para Ci6Hi7N702 como (M+H)+ 340,2. UV ?=224 nm. RMN (CD30D) : d 8,38 (s, 1H) , 7,84 (m, 1H) , 7,40 (m, 1H) , 7,26 (m, 2H) , 6,51 (s, 1H) , 4,44 (m, 1H), 1,50 (d, J=7,6 Hz, 3H) ppm. 8,82 (s, 1H) , 8,74 (m, 1H) , 8,61 (s, 1H) , 8,10 (d, J=8,8 Hz, 1H) , 7,87 (d, J=8,4 Hz, 1H) , 4,54 (m, 1H), 3,82 (m, 1H) , 1,99-1,62 (m, 8H) ppm.
Ejemplo 336. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (2, 3-dihidrobenzo [b] [1,4] dioxin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0895] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 2,3-dihidrobenzo [b] [ 1 , ] dioxin-6-amina para reemplazar 6-aminoquinolina 169.2. MS experimental para Ci9H24 604 como (M+H) + 401,2. UV ?=243. 310 nm.
Ejemplo 337. (R) -2- ( l-amino-l-oxopropan-2-ilamino) -4- (2, 3-dihidrobenzo [b] [1,4] dioxin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con H-D-Ala-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Leu-NH2 HC1. MS experimental para Ci6Hi8 604 como (M+H)+ 359,2. UV ?=243. 312 nm.
Ejemplo 338. (R) -2- (l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4-(quinoxalin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0896] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con quinoxalin-6-amina para reemplazar 6-aminoindazol 165.4. MS experimental para CigH22N802 como (M+H)+ 395.2. UV ?=243 nm.
Ejemplo 339. (R) -2- ( 1-amino-l-oxopropan-2-ilamino ) -4- (quinoxalin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0897] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con H-D-Ala-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Leu-NH2 HC1. MS experimental para Ci6Hi6N802 como (M+H) + 353, 2. UV ?=242 nm.
Ejemplo 340. (R) -4- (4- ( lH-pirazol-l-il) fenilamino) -2- (l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0898] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 4- ( lH-pirazol-1-il) anilina para reemplazar 6-aminoindazol 165.4. MS experimental para C20H24 8O2 como (M+H) + 409, 2. UV ?=241, 308 nm. Ejemplo 341. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (4-( tiazol-4-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0899] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 4-(tiazol-4-il) anilina para reemplazar 6-aminoindazol 165.4. MS experimental para C20H23 7O2 S como (M+H)+ 426,2. UV ?=240, 314 nm.
Ejemplo 342. (R)-4-(4-(l,2, 3-tiadiazol-4-il ) fenilamino) -2- ( 1-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0900] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 4- (1,2, 3-tiadiazol-4-il ) anilina para reemplazar 6-aminoindazol 165.4. MS experimental para C19H22N8O2 S como (M+H ) + 427,2. UV ?=233, 311 nm. Ejemplo 343. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4-(benzo[c] [1,2,5] tiadiazol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0901] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con benzo [ c] [ 1 , 2 , 5 ] tiadiazol-5-amina para reemplazar 6-aminoquinolina 169.2. MS experimental para Ci7H2oN802S como (M+H)+ 400, 2. UV ?=240 nm.
Ejemplo 344. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- ( 4-(piridin-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0902] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 4- (piridin-2- il) anilina para reemplazar 6-aminoquinolina 169.2. MS experimental para C22H25 7O2 como (M+H)+ 420, 2. UV ?=244, 314 nm. Ejemplo 345. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (4-morfolinofenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0903] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 4-morfolinoanilina para reemplazar 6-aminoquinolina 169.2. MS experimental para C2iH29 703 como (M+H)+ 428, 2. UV ?=244, 294 nm. Ejemplo 346. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (3-fluoro-4 -morfolinofenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0904] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 3-fluoro-4-morfolinoanilina para reemplazar 6-aminoquinolina 169.2. MS experimental para C2iH28FN703 como (M+H)+ 446, 2. UV ?=240, 310 nm. Ejemplo 347 (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- ( 3- morfolinofenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0905] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 3-morfolinoanilina para reemplazar 6-aminoquinolina 169.2. S experimental para C21H29N7O3 como (M+H)+ 428, 2. UV ?=24ß nm.
Ejemplo 348a. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino ) -4- (4- (piperidin-l-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0906] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 4- (piperidin-l-il) anilina para reemplazar 6-aminoquinolina 169.2. MS experimental para C22H31N7O2 como (M+H)+ 426,2. UV ?=247, 291 nm. Ejemplo 348b. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (4-(pirrolidin-l-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0907] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 4- (pirrolidin-l-il)anilina para reemplazar 6-aminoquinolina 169.2. MS experimental para C2iH29 702 como (M+H)+ 412,2. UV ?=247, 292 nm. Ejemplo 349a. (R) -4- (4- ( lH-imidazol-l-il ) fenilamino) -2- (1-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0908] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 4-(lH-imidazol-l-il ) anilina para reemplazar 6-aminoquinolina 169.2. MS experimental para C2oH24 802 como (M+H)+ 409, 2. UV ?-247, 297 nm. Ejemplo 349b. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (3-(pirimidin-5-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0909] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 3- (pirimidin-5-il)anilina para reemplazar 6-aminoquinolina 169.2. MS experimental para C21H24 8O2 como (M+H)+ 421,2. UV ?=247 nm.
Ej emplo 350. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- ( 3- (piridin-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0910] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 3- (piridin-4-il) anilina para reemplazar 6-aminoindazol 165.4. MS experimental para C22H25N7O2 como (M+H)+ 420,2. UV ?=241, 314 nm.
[0911] Ejemplo 351. (R) -2- (l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (3- (piridin-3-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0912] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 3- (piridin-3-il) anilina para reemplazar 6-aminoindazol 165.4. S experimental para C22H25N7O2 como (M+H)+ 420,2. UV ?=250 nm.
Ejemplo 352. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino ) -4- (3- (piridin-3-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0913] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 3-(lH-imidazol-l-il ) anilina para reemplazar 6-aminoindazol 165.4. MS experimental para C20H24 8O2 como (M+H)+ 409,2. UV ?=243. 284 nm. Ejemplo 353. (R) -4- (3- ( lH-pirazol-l-il) fenilamino) -2- (l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0914] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 3- ( lH-pirazol-1-il) anilina para reemplazar 6-aminoindazol 165.4. MS experimental para C20H24N8O2 como (M+H ) + 409, 2. UV ?=250 nm.
Ej emplo 354. (R) -2- ( l-amino-l-oxopropan-2-ilamino) -4- (4- (oxazol- 5-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0915] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 4-(oxazol-5-il) anilina para reemplazar 6-aminobenzotiofeno . MS experimental para Ci7Hi7N703 como (M+H)+ 368,2.
Ejemplo 355. (R) -4- ( 4- ( 1H-1 , 2 , 4-triazol-l-il ) fenilamino ) -2- ( 1-amino-l-oxopropan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0916] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 4-(lH-l,2,4-triazol-l-il) anilina para reemplazar 6-aminobenzotiofeno . MS experimental para C16H17N9O2 como (M+H)+ 368,2.
Ejemplo 356. (R) -2- ( l-amino-l-oxopropan-2-ilamino) -4- (2- (morfolinometil) quinolin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0917] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con 2-(morfolinometil) quinolin-6-amina para reemplazar 6-aminobenzotiofeno . MS experimental para C22H26N8O3 como (M+H) + 451,2.
Ejemplo 357. ( R) -4- (3- ( 2H-1 , 2, 3-triazol-2-il) fenilamino ) -2- ( 1-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0918] El compuesto 179.6 (100 mg, 0,31 mmol) se disolvió en 5 mL de NMP. A ello se añadió MCPBA (97 mg, 0,37 mmol) y la mezcla se agitó durante 30 min. A ello se añadió DIEA (0,32 mL, 1,86 mmol) y luego asequible en comercios H-D-Leu-NH2 - HC1 (155 mg, 0,93 mmol) . La mezcla se agitó a 120 °C durante 3 h. De esta mezcla el compuesto del titulo se aisló usando HPLC preparativa en fase inversa. MS experimental para C19H23 9O2 como (M+H)+ 410,3. UV ?=251 nm.
Ejemplo 358. (R) -4- ( 3- ( 2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il ) fenilamino) -2- ( 1-amino-l-oxobutan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0919] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 357. MS experimental para C17H19N9O2 como (M+H)+ 382, 3. UV ?=250 nm.
Ejemplo 359. ( R) -4 - ( 3- ( 2H-1 , 2, 3-triazol-2-il) fenilamino ) -2- ( 1- amino-l-oxopropan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0920] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 357. MS experimental para Ci6Hi7N902 como (M+H)+ 368, 3. UV ?=251 nm.
Ejemplo 360. 4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- (2-amino- 20 2-oxoetilamino) pirimidin-5-carboxamida I El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 357. MS experimental para C15H15N9O2 como (M+H)+ 354, 3. UV ?=250 nm.
Ejemplo 361. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (4-(3, 6-dihidro-2H-piran-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0921] compuesto del título se preparó usando la química similar mostrado para el Ejemplo 357. MS experimental C22H28 6O3 como (M+H)+ 425,4. UV ?=240, 313 nm.
Ejemplo 362. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4 (tetrahidro-2H-piran-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0922] El compuesto del título se preparó a partir del Ejemplo 361 usando hidrogenación con catálisis estándar tratando la solución de Ejemplo 261 en metanol con Pd/C al 10% bajo balón de H2 durante la noche. MS experimental para C22H30 6O3 como (M+H) + 427, . UV ?=244, 298 nm.
Ejemplo 363. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (4-( tetrahidro-2H-piran-4-iloxi ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0923] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con la correspondiente anilina que era asequible en comercios. MS experimental para C22H30 6O4 como (M+H)+ 443,4. UV ?=244, 295 nm. Ejemplo 364. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (4-( tetrahidro-2H-piran-4-ilsulfonil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0924] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315 con la correspondiente anilina (síntesis mostrada para el compuesto 266). S experimental para C22H30N 6O5 S como (M+H)+ 491,4. UV ?=251, 302 nm.
Ej emplo 365. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- ( 4- (morfolinosulfonil ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida Ejemplo 366 (R) -2- ( l-amino-3-metil-l-oxobutan-2-ilamino ) -4- ( ciclobutilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0925] Éter de benzotriazolilo 1.7 (509 mg, 0,17 mmol), clorhidrato de (R)-valina (30 mg, 0,26 mmol), diisopropiletilamina (89 uL, 0,51 mmol) y 5 mL de 1,4-dioxano se combinaron y se calentaron hasta 120 °C durante la noche. La mezcla de reacción luego se enfrió, se diluyó con agua y se purificó por HPLC preparativa para dar el compuesto deseado. MS experimental para C14H22N6O2 como (M+H)+ 307, 3.
Ej emplo 367. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- ( 4-metiltiofen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0926] El compuesto del título se sintetizó luego análogamente usando 4-metiltiofen-2-amina . MS 363,3 (M+H) ; UV 201,6, 244,3, 326, 1 nm.
Ejemplo 368. (R) -2- (l-amino-3-metil-l-oxobutan-2-ilamino) -4- (4-metiltiofen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0927] El compuesto del título se sintetizó luego análogamente usando 4-metiltiofen-2-amina . MS 349,3 (M+H); UV 202,9, 251,0, 324,8 nm.
Ejemplo 369. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0928] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 318. MS experimental para C20H25 7O2 como (M+H)+ 396,3. UV: ? = 216, 9, 244, 0.
Ejemplo 370. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (2-metil-2H-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0929] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 318. MS experimental para C19H24N802 como (M+H)+ 397.4. UV: ? = 213, 3, 244,0, 333, 1.
Ejemplo 371. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (1H-indazol-4 -ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0930] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 318. MS experimental para Ci8H22 802 como (M+H)+ 383,4. UV: ? = 241,6, 318,8.
Ej emplo 372. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino ) -4- ( 1-metil-lH-indazol-4 -ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0931] El compuesto del título se preparó usando, el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 318. MS experimental para Ci9H24N802 como (M+H)+ 397, 4. UV: ? = 207, 5, 244, 0, 325, 9.
Ejemplo 373. (R) -2- (-amino-3-metil-loxobutan-2-ilamino) -4- (3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0932] Las etapa 1 & 2 son iguales a las descritas para el Ejemplo 100.
[0933] Etapa 3: Dicloropirimidina 165.3 (5,09 g, 22,6 mmol) se disolvió en acetonitrilo (50 mL) y se agitó en baño de hielo. A ello se añadieron 3, 5-dimetilanilina (2,19 g, 18,2 mmol) y luego gota a gota etildiisopropilamina (DIEA, 5,74 mL, 33,9 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante, se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera tres veces y se concentró al vacio para dar el compuesto crudo 4 en forma de un sólido marrón claro 2,4 gm (88% de rendimiento). S experimental para Ci5Hi6Cl 302 como (M+H) + 306, 09.
[0934] Etapa 4: El áster etílico 4 (9,8 mmol) se disolvió en 20 mL de THF. A ello se añadieron hidróxido de litio hidratado (530 mg, 10,2 mmol) y 15 mL de agua. La mezcla se agitó durante la noche y a ello se añadió con cuidado solución 1 N de HC1 hasta que el pH alcanzó 2. La mezcla se concentró al vacío para eliminar THF. El sólido blanco se trituró y se aisló usando un embudo de Büchner. Se lavó con agua y se secó en horno de vacio para dar el compuesto 5 (2,14 g, 81%) en forma de un sólido blanco. MS experimental para C13H12CIN3O2 como (M+H)+ 278, 1.
[0935] Etapa 5: Ácido carboxilico 5 (1,09 g, 3,6 mmol) se disolvió en 30 mL de DMF. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (1,24 g, 6,4 mmol) e hidrato de HOBt (870 mg, 6,4 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C a ello se añadió luego amoniaco (solución 0,4 M comercial en dioxano, 16 mL, 8,3 mmol) . La mezcla se agitó durante 2 horas. Luego se concentró al vacio y se extrajo en agua y acetato de etilo. La fase orgánica se separó y se lavó con salmuera cuatro veces. La fase orgánica luego se secó sobre MgS04 y se concentró al vacio para obtener el compuesto 6 en forma de un sólido (150 mg, 55%). MS experimental para Ci9H17N702 como (M+H)+ 376,1.
[0936] Etapa 6: El compuesto 6 (188 mg, 0,5 mmol) se disolvió en 3 mL de NMP. A ello se añadieron H-D-Val-NH2 HC1 (174 mg, 1,5 mmol) y DIEA (0,200 mL, 1,0 mmol). La mezcla se agitó durante 90 minutos a 120 °C de baño. Esta mezcla luego se sometió a HPLC preparativa para aislar el compuesto del titulo 7. MS experimental para Ci8H24 602 como (M+H) + 357 , 20.
Ejemplo 374. (R) -2- (-amino-3-metil-loxobutan-2-ilamino) -4- ( 3, 5-dimetoxifenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0937] El" compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con 3,5-dimetoxianilina para reemplazar 3, 5-dimetilanilina. MS experimental para C18H24N6O4 como (M+H)+ 388.
Ejemplo 375. (R) -2- (-amino-3-metil-loxobutan-2-ilamino) -4- ( 3-bromofenilamino) pirimidin-5-carboxamida .
[0938] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con 3-bromoanilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci6H19BrN602 como (M+H)+ 407.
Ejemplo 376. (R) -2- (-amino-3-metil-loxobutan-2-ilamino) -4- (3-etoxifenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0939] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con 3-etoxianilina para reemplazar 3, 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci8H24N603 como (M+H)+ 373 Ejemplo 377. (R) -2- (-amino-3-metil-loxobutan-2-ilamino) -4- (3- etilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con 3-etilanilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci8H24N602 como (M+H)+ 356, 3 Ejemplo 378. (R) -2- (-amino-3-metil-loxobutan-2-ilamino) -4- ( 3- ( trifluorometil ) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida '
[0940] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con 3- trifluorometilanilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci7Hi9F3N602 como (M+H)+ 396,3 Ejemplo 379. (R) -2- (-amino-3-metil-loxobutan-2-ilamino) -4- (3- cianofenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0941] compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con 3-aminobenzonitrilo para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para C17H19N7O2 como (M+H)+ 353, 38 Ejemplo 380. (R) -2- (-amino-3-metil-loxobutan-2-ilamino) -4- (3-metoxífenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0942] compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con 3-metoxianilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para C17H22N603 como (M+H)+ 358,4 Ejemplo 381. (R) -2- ( -amino-3-metil-loxobutan-2-ilamino) -4- (3- (m-tolilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0943] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con m-toluidina para reemplazar 3, 5-dimetilanilina . MS experimental para 017?22 6?2 como (M+H)+ 343 Ejemplo 382. (R) -2- (l-amino-l-oxopropan-2-ilamino) -4- (3,5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0944] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con H-D-Ala-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1. MS experimental para Ci6H2o 602 como (M+H)+ 328, 2.
Ejemplo 383. (R) -2- (l-amino-l-oxopropan-2-ilamino) -4- (3, 5-dimetoxifenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0945] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 382 con 3,5-dimetoxianilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci6H2o 604 como (M+H)+ 360, 3.
Ejemplo 384. (R) -2- ( l-amino-l-oxopropan-2-ilamino) -4- ( 3- bromofenilamino) pirimidin-5-carboxami
[0946] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 382 con 3-bromoanilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci4Hi5BrN604 como (M+H)+ 360,3.
Ejemplo 385. ( R) -2- ( l-amino-l-oxopropan-2-ilamino ) -4 - ( 3-etilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0947] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 382 con 3-etilanilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci6H2oN602 como (M+H)+ 328, 3.
Ejemplo 386. ( R) -2- ( l-amino-l-oxopropan-2-ilamino ) - - (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0948] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 382 con m-toluidina para reemplazar 3, 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci5HiaN602 como (M+H)+ 314, 34.
Ejemplo 387. (R) -2- ( l-amino-l-oxopropan-2-ilamino ) -4- ( 3-metoxifenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0949] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 382 con 3-metoxianilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci5Hi8N603 como (M+H) + 330, 34.
Ejemplo 388. (R) -2- (2-amino-2-oxo-l-feniletilamino) -4- ( 3 , 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0950] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con H-D-Phe-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1. MS experimental para C21H22 6O2 como. (M+H)+ 328, 2.
Ejemplo 389. (R) -2- (2-amino-2-oxo-l-feniletilamino) -4- ( 3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0951] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con H-D-Phe-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1 y 3 , 5-dimetoxianilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para C21H22N6O4 como (M+H)+ 423.
Ejemplo 390. (R) -2- (2-amino-2-oxo-l-feniletilamino) -4- (3-metoxifenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0952] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con H-D-Phe-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1 y 3-metoxianilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para C20H20 6O3 como (M+H)+ 392, 4.
Ejemplo 391. (R) -2- (2-amino-2-oxo-l-feniletilamino) -4- (3-trifluorometilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0953] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con H-D-Phe-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1 y 3-trifluorometilanilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para C20H17 F3 6O2 como (M+H)+ 430, 39.
Ejemplo 392. (R) -2- (2-amino-2-oxo-l-feniletilamino) -4- (3-bromofenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0954] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con H-D-Phe-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1 y 3-bromoanilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci9Hi7BrN602 como (M+H)+ 441,29.
Ejemplo 393. (R) -2- ( l-amino-3-hidroxi-l-oxo-2-ilamino) -4- ( 3 , 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0955] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con H-D-Ser-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1. MS experimental para Ci6H2oN603 como (M+H) + 344 , 37.
Ejemplo 394. (R) -2- ( l-amino-3-hidroxi-l-oxo-2-ilamino ) -4- (3-etilfenilamino) irimidin-5-carboxamida
[0956] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con H-D-Ser-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1 y 3-etilanilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci6H20 6O3 como (M+H)+ 344, 37.
Ejemplo 396. (R) -2- ( l-amino-3-hidroxi-l-oxo-2-ilamino) -4- ( 3-m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0957] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con H-D-Ser-NH2 HCl para reemplazar H-D-Val-NH2 HCl y m-toluidina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para C15H18N5O3 como (M+H) + 330, 34.
Ejemplo 397. (R) -2- ( l-amino-3-hidroxi-l-oxo-2-ilamino) -4- ( 3-bromofenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0958] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con H-D-Ser-NH2 HCl para reemplazar H-D-Val-NH2 HCl y 3-bromoanilina para reemplazar 3, 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci4Hi5Br 603 como (M+H)+ 395.22.
Ejemplo 398. (R) -2- ( l-amino-3-hidroxi-l-oxo-2-ilamino) -4- (3- metoxifenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0959] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con H-D-Ser-NH2 HC1 para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1 y 3-metoxianilina para reemplazar 3 , 5-dimetilanilina . MS experimental para Ci5Hi8N604 como (M+H)+ 346, 34.
Ejemplo 399. (R) -2- (2-amino-2-oxo-l-m-toliletilamino) -4- (3,5-dimetilfenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0960] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con ( S ) -2-amino-2-m-tolilacetamida para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1. MS experimental para C22H24N602 como (M+H) + 404 , 47.
Ejemplo 400. (R) -2- (2-amino-l- ( 3-clorofenil) -2-oxoetilamino ) -4-(3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0961] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con ( S ) -2-amino-2-( 3-clorofenil ) acetamida para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1. MS experimental para C2iH2iClN602 como ( +H) + 424, 89.
Ejemplo 401. (R) -2- (2-amino-l- ( 3-fluorofenil ) -2-oxoetilamino) -4-(3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0962] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con (S) -2-amino-2-(3-fluorofenil) acetamida para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1. MS experimental para C2iH2iFN602 como (M+H) + 408 , 43.
Ejemplo 402. (R) -2- ( 2-amino-2-oxo-l-p-toliletilamino) -4- (3,5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0963] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con ( S ) -2-amino-p-tolilacetamida para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1. MS experimental para C22H24N602 como (M+H) + 404, 47.
Ejemplo 403. (R) -2- ( 2-amino-2-oxo- 3 (trifluorometilfenil) etilamino) -4- (3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0964] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con ( S ) -2-amino-2-(3-fluorometilfenil) acetamida para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1. MS experimental para C22H2iF3N602 como (M+H ) + 404, 7.
Ejemplo 404. (R) -2- ( 2-amino-2-oxo-l (piridin-3-il ) etilamino) -4-(3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0965] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con ( S ) -2-amino-2-(piridin-3-il ) acetamida para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1. MS experimental para C20H21 7O2 como (M+H)+ 391, 43.
Ejemplo 405. (R) -2- (2-amino-l ( 4-metoxifenil ) -2-oxoetilamino ) -4-(3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0966] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con ( S ) -2-amino-2-( -metoxifenil) acetamida para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1. MS experimental para C22H24N603 como (M+H) + 420, 47.
Ejemplo 406. (R) -2- (2-amino-l ( 3-hidroxifenil ) -2-oxoetilamino) -4-(3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0967] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con (S) -2-amino-2-( 3-hidroxifenil ) acetamida para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1. MS experimental para C21H22N6O3 como (M+H) + 406, 44.
Ejemplo 407. (R) -2- (2-amino-l ( 34-hidroxifenil ) -2-oxoetilamino) -4-(3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0968] El compuesto anterior se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 373 con (S) -2-amino-2-(4-hidroxifenil) acetamida para reemplazar H-D-Val-NH2 HC1. MS experimental para C2iH22 603 como (M+H) + 406, 44.
Ejemplo 408: (R) -2- ( l-amino-3-metil-l-oxobutan-2-ilamino) -4-(benzo [d] tiazol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0969] A una solución agitada de 368.1 (110 mg, 0,347 mmol) se añadió mCPBA (65%, 130 mg, 0,49 mmol). La reacción se agitó durante 30 min a temperatura ambiente después de lo cual se añadieron DIEA (-0,3 mL) y 368.2 asequible en comercios (180 mg, 1,18 mmol). La reacción se calentó durante 3 h a 120 °C en un tubo sellado. La reacción se enfrió, se volvió ligeramente ácida con TFA en agua y se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para obtener el compuesto del titulo (28 mg) . MS experimental para C17H19N7O2S como ( +H) + 386,3. UV D=248, 294 nm Ej emplo 409 : (R) -2- ( 1-amino-l-oxobutan-2-ilamino ) -4- (quinolin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0970] El intermediario 369.1 se hizo reaccionar con 346.1 de acuerdo con el Ejemplo 408. La HPLC preparativa en fase inversa dio como resultado el compuesto del titulo. MS experimental para Ci8H19N702 como (M+H)+ 366, 2. UV O240, 283 nm. d 1,15 (t, 3H) , 1,90-2,10 (m, 2H), 3,10-3,35 (m, 2H) , 4, 32-4, 40 (m, 1H) , 7,80-7,90 (m, 1H) , 8,07-8,18 (m, 2H) , 8,59 (s, 1H) , 8,70-8,75 (m, 1H) , 8, 95-9, 05 (m, 2H) .
Ejemplo 410: (R) -2- (l-amino-3-metil-l-oxobutan-2-ilamino) -4-(benzo [d] tiazol-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0971] El intermediario 371.1 se hizo reaccionar con 368.2 de acuerdo con la química descrita en el Ejemplo 408. La HPLC preparativa en fase inversa dio como resultado el compuesto del título. MS experimental para Ci7Hi9N702S como (M+H)+ 386, 4. UV ?=243. 302 nm.
Ejemplo 411: (R) -2- ( l-amino-l-oxobutan-2-ilamino) -4- (benzo [d] tiazol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0972] El intermediario 368.1 se hizo reaccionar con 346.1 de acuerdo con la química descrita en el Ejemplo 408. La HPLC preparativa en fase inversa dio como resultado el compuesto del título. MS experimental para C16H17N7O2 S como (M+H)+ 372.3. UV ?=246, 293 nm Ejemplo 412. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino ) -4- (1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0973] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 417. MS experimental para C20H25 7O2 como ( +H) + 396,3. UV: ? = 216, 9, 244, 0.
Ejemplo 413. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (2-metil-2H-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315. MS experimental para C19H24 802 como (M+H)+ 397, 4. UV: ? = 213,3, 244,0, 333,1.
Ejemplo 414. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (1H-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0974] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315. MS experimental para Ci8H22 802 como (M+H)+ 383, 4. UV: ? - 241,6, 318,8.
Ejemplo '415. (R) -2- ( l-amino-4-metil-l-oxopentan-2-ilamino) -4- (1-metil-lH-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0975] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 315. MS experimental para Ci9H24N802 como (M+H)+ 397, 4. UV: ? = 207, 5, 244, 0, 325, 9.
Ejemplo 416. 2- (2-aminoetilamino) -4- ( 3, 5-dimetilfenilamino ) pirimidin-5-carboxamida Esquema :
[0976] El compuesto 195,1 (64 mg, 0,17 mmol) se disolvió en 3 mL de NMP. A ello se añadió etilendiamina asequible en comercios (41 mg, 0,68 mmol). La mezcla se agitó a 90 °C durante 2 h. De esta mezcla el compuesto del título se aisló usando HPLC preparativa en fase inversa. MS experimental para Ci5H2oN60 como (M+H)+ 301,2. UV ?=240, 292 nm.
Ejemplo 417. 4- ( 3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- (2-aminoetilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema
[0977] El compuesto 179,6 (50 mg, 0,15 mmol) se disolvió en 3 mL de NMP. A ello se añadió MCPBA (49 mg, 0,18 mmol) y la mezcla se agitó durante 30 min. A ello se añadió etilendiamina (36 mg, 0,60 mmol) . La mezcla se agitó a 90 °C durante 2 h. De esta mezcla el compuesto del titulo se aisló usando HPLC preparativa en fase inversa. MS experimental para Ci5H1N90 como (M+H)+ 340, 3.
UV ?=249 nm.
Ejemplo 418. 4- ( 3- (2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il ) fenilamino) -2- ( 3- aminopropilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[0978] El compuesto del titulo se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 417. MS experimental para Ci6Hi9N90 como (M+H)+ 354,4. UV ?=251 nm.
Ejemplo 419. 4- ( 3- ( 2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il ) fenilamino ) -2- ( 4 -aminobutilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0979] El compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 417. MS experimental para Ci7H2iN90 como (M+H)+ 368,4. UV ?=252 nm.
Ejemplo 420. 4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il ) fenilamino) -2- (2-amino-2-metilpropilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0980] El compuesto del titulo se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 417. MS experimental para CnH2iN90 como (M+H)+ 368, 4. UV ?=249 nm.
Ejemplo 421. 4- ( 3- ( 2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il ) fenilamino) -2- ( ( 4-aminotetrahidro-2H-piran-4-il ) metilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0981] El compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 417. MS experimental para C19H23N9O2 como (M+H) + 410,4. UV ?=249 nm.
Ejemplo 422. 4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- (2- (metilamino) etilamino) pirimidin-5-carboxamida HN—
[0982] El compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 417 con 2-aminoetil (metil) carbamato de ter-butilo asequible en comercios, seguido por tratamiento de TFA para clivar el grupo BOC. MS experimental para Ci5Hi9N90 como (M+H)+ 354,4. UV ?=250 nm.
Ejemplo 423. 4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- ( (IR, 2S) -2-hidroxiciclohexilamino) pirimidin-5-carboxamida (racémica)
[0983] El compuesto racémico del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 417 con asequible en comercios cis-2-amino-l-ciclohexanol y DIEA. MS experimental para C19H22N8O2 como (M+H)+ 395, 4. UV ?=254 nm.
Ejemplo 424. (R) -4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- (1-aminopropan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema : q) q [ 0984 ] Etapa 1: H-D-Ala-NH2. HC1 asequible en comercios (2,0 g, 16 mmol) se disolvió en 60 mL de agua y 20 mL de dioxano. A ello se añadieron BzCl (2,7 mL, 19,3 mmol) y carbonato de sodio (5,1 g, 48 mmol) . La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera x3, se secó, se concentró. El residuo se extrajo luego en 450 mL de hexano y 50 mL de DCM, se agitó vigorosamente a 30 °C durante 30 min, se filtró. El compuesto 210.1 (>90% de rendimiento) se quedó en fase sólida y la mayor parte de las impurezas y subproductos estaban en el filtrado. [ 0985 ] Etapa 2: El compuesto 210.1 (16 mmol) de la Etapa 1 se disolvió en 100 mL de THF. A ello se añadió BH3.Me2S (3,8 mL, 40 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó hasta 85°C y se calentó a reflujo moderado durante 5 h. Se enfrió hasta temperatura ambiente. A ello se añadió 100 mL de agua. La mezcla se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Luego, K2C03 (6,62 g, 48 mmol) y BOC20 (7,00 g, 32 mmol) se añadieron. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera x3, se secó, se concentró, se sometió a columna flash de sílice con 35% acetato de etilo en hexano para aislar el compuesto 210.3 (1,22 g, 25% para 3 etapas en general) en forma de sólido blanco.
[0986] Etapa 3: El compuesto 210.3 (3,96 mmol) de la Etapa 2 se disolvió en 200 mL de acetato de etilo. A ello se añadió 500 mg de Pd/C al 10% y la mezcla se agitó bajo balón de H2 durante la noche. Se filtró a través de celite y el celite se enjuagó bien con metanol. El filtrado se concentró al vacío para obtener el compuesto 210.4 en forma de un aceite espeso. Se disolvió en NMP para preparar una solución de detención 0,20 M.
[0987] Etapa 4: El compuesto 179,6 (100 mg, 0,30 mmol) se disolvió en 6 mL de NMP. A ello se añadió MCPBA (96 mg, 0,36 mmol). La mezcla se agitó durante 40 min a temperatura ambiente. A ello se añadieron DIEA (0,21 mL, 1,2 mmol) y compuesto 210.4 (0,20 M, 3 mL, 0,60 mmol). La mezcla se agitó a 90 °C durante 2 h. Se enfrió hasta temperatura ambiente, se diluyó con acetato de etilo, se lavó con Na2CC>3 saturado x2 y salmuera, se secó, se concentró al vacio. El residuo se trató con TFA puro a temperatura ambiente durante 1 h y luego se concentró. El residuo luego se sometió a HPLC preparativa en fase inversa para aislar el compuesto del titulo. MS experimental para Ci6Hi9NgO como ( M+H ) + 354, 3. UV ?=250 nm.
Ejemplo 425. (R) -2- (l-aminopropan-2-ilamino) -4- (3- (pirimidin-2- il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0988] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo 5 esquema químico mostrado para el Ejemplo 424 con compuesto 249.4 (dado en el Ejemplo 172). MS experimental para Ci8H2o 80 como (M+H)+ 365,3. UV ?=247 nm.
Ejemplo 426. (R) -2- (l-aminopropan-2-ilamino) -4- (m- tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0989] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema químico mostrado para el Ejemplo 424 con el compuesto 187.10 (dado en el Ejemplo 187). MS experimental para C15H20N6O como (M+H)+ 301, 3. UV ?=243. 289 nm.
Ejemplo 427. (R) -2- ( l-aminopropan-2-ilamino) -4- (3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0990] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema químico mostrado para el Ejemplo 424 con compuesto 185.1 (dado en el Ejemplo 195) . MS experimental para C16H22 60 como (M+H)+ 315,3. UV ?=243, 289 nm.
Ejemplo 428. (S) -4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- (2-aminopropilamino) pirimidin-5-carboxamida El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 424. MS experimental para C16Hi9N90 como (M+H)+ 354,3. UV ?=250 nm.
[0991] Ejemplo 215. (S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (3- (pirimidin-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 424. MS experimental para Ci8H2oN80 como (M+H)+ 365, 3. UV ?=247 nm.
Ejemplo 216. (R) -4- ( 3- ( 2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il ) fenilamino) -2- ( 1-amino-3-metilbutan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0992] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 424. MS experimental para Ci8H23N90 como (M+H)+ 382, 4. UV ?=251 nm.
Ejemplo 217. (R) -2- ( l-amino-3-metilbutan-2-ilamino) -4- ( 3- (pirimidin-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0993] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 424. MS experimental para C2oH24N80 como (M+H)+ 393, 4. UV ?=249 nm.
Ejemplo 218. (S) -4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- ( 1-amino-3-hidroxipropan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0994] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 424. MS experimental para C16H19N902 como (M+H)+ 370, 3. UV ?=248 nm.
Ejemplo 219. (S ) -4- ( 3- ( 2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il ) fenilamino) -2- ( 1-amino-3-metoxipropan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema 219.1 219.2
[0995] El compuesto 219.1 se preparó usando la misma química para el compuesto 210.3 mostrada en el Ejemplo 414. El compuesto 219,1 (2,0 g, 6 mmol) se disolvió en 100 mL de DCM. A ello se añadieron esponja de protones (3,2 g, 15 mmol) a temperatura ambiente. 3 min más tarde, se añadió Me30+BF4~ (2,2 g, 15 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. Se diluyó con 500 mL de acetato de etilo, se lavó con salmuera x2, se secó, se concentró, se sometió a columna flash de sílice (40% acetato de etilo en hexano) para dar el compuesto 219,2 (1,77 g, 87%) en forma de sólido blanco.
[0996] El compuesto del título se completó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 424 con compuesto 218,2. MS experimental para Ci7H2iN902 como (M+H)+ 384, 3. UV ?=249 nm.
Ejemplo 220. (S) -2- ( l-amino-3-metoxipropan-2-ilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0997] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 219. MS experimental para Ci6H22 602 como (M+H)+ 331,3. UV ?=240, 289 nm.
Ejemplo 221. (R) -4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) -2- ( 1-amino-4-metilpentan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0998] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 424. MS experimental para Cigl^s gO como (M+H)+ 396, 4. UV ?=250 nm.
Ejemplo 428. (R) -4- (3- ( lH-pirazol-l-il) fenilamino) -2- (l-amino-4-metilpentan-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[0999] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 424. MS experimental para C2oH26N80 como (M+H)+ 395, 4. UV ?=247 nm.
Ejemplo 429. (R) -2- ( l-amino-4-metilpentan-2-ilamino ) -4- (3- (pirimidin-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1000] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 424. MS experimental para C2iH26N80 como (M+H)+ 405, 4. UV ?=247 nm.
Ejemplo 431. (R) -2- ( l-amino-4-metilpentan-2-ilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1001] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 424. MS experimental para Ci8H26 60 como (M+H)+ 343, 4. UV ?=244, 288 nra.
Ejemplo 432. (R) -2- ( l-amino-4-metilpentan-2-ilamino) -4- ( 3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1002] El compuesto del título se preparó usando el esquema químico similar mostrado para el Ejemplo 424. MS experimental para Ci9H28 60 como (M+H)+ 357, 4. UV ?=241, 290 nm.
Ejemplo 433 2- ( 4-aminobutilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1003] A una solución de 1 , 4-díaminobutano (0,48 g, 5,5 mmol) en DMF (5 mL) , una solución de compuesto 2-(lH-benzo [d] [1, 2, 3] triazol-l-iloxi) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida (0,53 g, 1,47 mmol) en DMF (5 mL) se añadió gota a gota. Se agitó luego a temperatura ambiente durante 20 h. Se concentró al vacio. El residuo se purificó por HPLC para dar el compuesto del titulo en forma de sal de ácido trifluoroacético (0,55 g) . MS 315,2 (M+H) ; UV 249,7.
Ejemplo 434. (S) -2- (2-amino-3-ciclopropilpropilamino) -4- (1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1004] compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C20H25N7O como (M+H)+ 380, 4. UV: ? = 219,8, 241, 1, 330,3.
Ej emplo 435. (S) -2- (2-aminobutilamino) -4- ( l-etil-lH-indol-4- ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1005] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C19H25 70 como (M+H)+ 368, 4. UV: ? = 219,2, 240, 4, 331,9.
Ejemplo 436. (S) -2- (2-amino-2-ciclopropiletilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol- -ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1006] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C19H23N7O como (M+H)+ 366,4. UV: ? = 220, 2, 241, 4, 330,6. R N (CD3OD) : d 8,27 (s, 1H) , 8,08 (s, 1H) , 7,85 (d, J=2,4 Hz, 1H) , 7,34 (s, 1H) , 7,06-7,00 (m, 3H) , 6,80 (m, 1H) , 6,12 (m, 1H) , 4,18 (m, 1H), 2,67 (m, 2H) , 1,19 (m, 3H) , 0,97 (m, 1H) , 0,42-0,31 (m, 6H) ppm.
Ejemplo 437. ( S ) -2- ( 2-aminobutilamino) -4- ( l-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1007] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci8H23N70 como (M+H)+ 354, 4. UV: ? = 219,2, 240,4, 333,1.
Ejemplo 438. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- ( 1-etil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1008] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C20H27N7O como (M+H)+ 398, 4. UV: ? = 219,3, 239,4, 326,7.
Ejemplo 439. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1009] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para d7H21N702 como (M+H)+ 356,4. UV: ? = 216, 7, 238, 7, 327,2.
Ejemplo 440. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1010] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C18H23N702 como (M+H)+ 370, 4. UV: ? = 219,2, 239, 3, 331,9.
Ejemplo 441. (R) -2- (2-amino-3-metilbutilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1011] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C19H25 7O como (M+H)+ 368, 4. UV: ? = 220,4, 325, 9.
Ejemplo 442. 2-((2R, 3R) -2—amino-3-metoxilbutilamino) -4- ( 1-etil-lH-indol-4-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1012] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C20H27 7O2 como (M+H)+ 398, 4. UV: ? = 220,4, 239, 9, 331,6.
Ejemplo 443. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1013] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C19H25 7O2 como (M+H)+ 384, 3. UV: ? = 219, 2, 239, 3, 331,9.
Ejemplo 444. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- (lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1014] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci8H23 702 como (M+H)+ 370,3. UV: ? = 215, 7, 238, 1, 327, 1.
Ejemplo 445. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (2-metil-2H-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1015] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para CnH22N802 como (M+H)+ 371,3. UV: ? = 214, 9, 241, 7, 324, 1.
Ejemplo 446. (R) -2- (2-amino-4-metoxipropilamino) -4- ( 1-metil-lH-]_ø indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1016] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C19H25 702 como (M+H)+ 384,3. UV: ? = 219, 2, 240, 4, 331, 9.
Ejemplo 447. (R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino ) -4- (2, 3-dihidro- ??-pirrolo [ 1 , 2-a ] indol-8-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1017] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C20H25N7O2 como (M+H)+ 396,4. UV: ? = 203, 9, 244, 0, 303,3.
Ejemplo 448. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- (2-metil-2H-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1018] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C18H24N802 como (M+H)+ 385, 4. UV: ? = 208, 6, 240,4, 283, 1, 324, 7.
Ejemplo 449. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- (2, 3-dihidro-??-pirrolo [ 1 , 2-a] indol-8-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1019] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C21H27N7O2 como ( +H)+ 410,4. UV: ? = 221,6, 336,7.
Ejemplo 450. (S) -2- ( 2-amino-4-metoxipropilamino ) -4- (2, 3-dihidro-lH-pirrolo[l, 2-a] indol-8-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1020] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C21H2 N7O2 como (M+H)+ 410,4. UV: ? = 222, 8, 336,7.
Ejemplo 451. 2-((2R, 3R) -2-amino-3-metoxilbutilamino) -4- (2 , 3-dihidro-lH-pirrolo [1, 2-a] indol-8-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1021] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C2iH27 702 como (M+H)+ 410,4. UV: ? = 221, 6, 335, 5.
Ejemplo 452. (S) -2- (2-amino-3, 3-dimetilbutilamino) -4- (1-metil-lH-indol-4-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1022] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C2oH27N70 como (M+H)+ 382, 4. UV: ? = 219,2, 239,3, 327,1.
Ejemplo 453 (S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (3- (3-fluorofenilcarbamoil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida (41)
[1023] Etapa 1: Ester de dicloropirimidina 41,1 (3,44 g, 15,5 mmol) se disolvió en acetonitrilo (20 mL) y se agitó en baño de hielo. A ello se añadió una solución de anilina 41.2 (3,0 g, 14,1 mmol) y etildiisopropilamina (DIEA, 3,85 mL, 35,5 mmol) en 10 mL de acetonitrilo gota a gota usando un embudo adicional. La mezcla se agitó durante 1 hora, el solvente se evaporó seguido por dilución con agua para precipitar el compuesto 41.3 en forma de un sólido amarillo (4,2 g, 75%). MS: (M+H)+ 416,09
[1024] Etapa 2: El éster etílico 41.3 (2 g, 5 mmol) se disolvió en 10 mL de THF. A ello se añadieron hidróxido de litio hidratado (275 mg, 6,5 mmol) y 10 mL de agua. La mezcla se agitó durante 1 hora y a ello se añadió con cuidado solución 1 N de HC1 hasta que el pH alcanzó 3. La mezcla se concentró al vacío para eliminar THF. El sólido blanco se trituró y se aisló usando un embudo de Büchner. Se lavó con agua y se secó en horno de vacío para dar el compuesto 41.4 (1,65 g, 89%) en forma de un sólido blanco. MS : (M+H) + 388,06
[1025] Etapa 3: Ácido carboxilico 41.4 (1 g, 2,7 mmol) se disolvió en 15 mL de DMF. A ello se añadieron clorhidrato de EDC (934 mg, 4,86 mmol) e hidrato de HOBt (660 mg, 4,86 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 90 minutos. A ello se añadió luego amoniaco (solución 0,5 N comercial en dioxano, 14 mL, 6,75 mmol) a 0 °C. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. A la mezcla de reacción added agua para obtener el compuesto 41.5 en forma de un sólido blanco (1,26 g, 86%) . MS: (M+H)+ 485.14.
[1026] Etapa 4: Éter de benzotriazolilo 41.5 (500 mg, 1 mmol) se disolvió en 15 mL de ACN . A ello se añadió (S ) -ter-butil-1-aminopropane-2-il-carbamato (373 mg, 2,1 mmol). La mezcla se agitó durante la noche a 50 °C. Después de enfriar, se añadió agua y se agitó durante 1 h para obtener el compuesto 41.6 en forma de un sólido blanco (0,541 g, 92%). MS experimental para C26H3oF 704 como (M+H) + 524 , 24.
[1027] Etapa 5: El compuesto 41.6 (100 mg, 0,2 mmol) se agitó en una mezcla 1:1 (5 mL) de TFA y diclorometano a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se concentró al vacio seguido por adición de éter diisopropilico para obtener el compuesto N.° 41 en forma de un sólido blanco (50 mg, 59%) . MS experimental para C21H22 F 7O2 como (M+H)+ 424, 19.
Ejemplo 454 (S) -2- ( 2-aminopropilamino) -4- (3- (4- clorofenilcarbamoil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida (57) 57
[1028] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 453 con 3-amino-N- ( 4-clorofenil ) enzamida para reemplazar la 3-amino-N- ( 3-fluorofenil ) benzamida . MS experimental para C21H22C I 7O2 como (M+H)+ 440.
Ejemplo 455. ( S ) -2- ( 2-aminopropilamino ) -4 -( 3- ( isoxazol-3-ilcarbamoil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1029] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 453 con 3-amino-N-( isoxazol-3-il ) benzamida para reemplazar la 3-amino-N- ( 3-fluorofenil) benzamida . MS experimental para Ci8H2o 803 como (M+H)+ 396 Ejemplo 456. (S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (3- ( fenilcarbamoil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1030] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 453 con 3-amino-N-fenilbenzamida para reemplazar a 3-amino-N- ( 3-fluorofenil ) benzamida . MS experimental para C2iH23N703 como (M+H) + 406 Ejemplo 457. ( S ) -2- ( 2-aminopropilamino ) -4- ( 4-carbamoil-3-metoxifenilamino) pirimidin-5-carboxamida ( 121 )
[1031] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 453 con 4-amino-2-metoxibenzamida para reemplazar a 3-amino-N- ( 3-fluorofenil ) benzamida . MS experimental para CigH2iN 03 como (M+H) + 360 Ejemplo 458. (S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (3- ( 5-metiltiazol-2-ilcarbamoil) fenilamin) opirimidin-5-carboxamida (123)
[1032] compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 453 con 3-amino-N- ( 5-metiltiazol-2-il ) benzamida para reemplazar a 3-amino-N- ( 3-fluorofenil ) benzamida . MS experimental para Ci9H22N802S como (M+H)+ 427 Ejemplo 459. (S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (3- ( ( 5-clorotiazol-2-ilmetilcarbamoil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida (125)
[1033] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 453 con 3-amino-N- (( 5-clorotiazol-2-il) metil) benzamida para reemplazar a 3-amino-N- ( 3-fluorofenil ) benzamida . MS experimental para CigH^ClNeC^S como (M+H)+ 447 Ej emplo 460. (S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (3- (metoxifenilcarbamoil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1034] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 453 con 3-amino-N- ( 4-metoxifenil ) benzamida para reemplazar a 3-amino-N- ( 3-fluorofenil ) benzamida . MS experimental para C22H25 7O3 como (M+H) + 436 Ejemplo 461. ( S ) -2- ( 2-aminopropilamino) - - ( 3- ( 3-clorofenilcarbamoil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1035] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 453 con 3-amino-N- ( 3-clorofenil ) benzamida para reemplazar a 3-amino-N- ( 3-fluorofenil ) benzamida . MS experimental para C21H22CIN7O2 como (M+H)+ 440 Ejemplo 462. S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (3- ( 4-fluorofenilcarbamoil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida ????2
[1036] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 453 con 3-amino-N- ( 4-fluoroofenil ) benzamida para reemplazar a 3-amino-N- ( 3-fluorofenil ) benzamida . MS experimental para C21H22F 7O2 como (M+H)+ 424 Ejemplo 463. S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (3- (benzo [d] tiazol-2-ilcarbamoil) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1037] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 453 con 3-amino-N-(benzo [d] tiazol-2-il) benzamida para reemplazar a 3-amino-N- ( 3-fluorofenil) benzamida . MS experimental para C22H22 8O2 S como (M+H) + 463
[1038] Los compuestos Nros. 140, 141, 144, 156. 163, 164, 166, 172. 173, 176, 177. 180, 191 194, 200, 201, 213, 215, 218, 221, 222, 228, 233, 237, 238 y 239 se prepararon usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 453.
Ejemplo 464: ( S ) -2- (2-aminopropilamino ) -4- ( 4-metil-3- (2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 333.1 333 [ 1039 ] Este compuesto se preparó de una manera análoga a 81 en el Ejemplo 87. Sin embargo, en lugar del derivado de 4-(tiazol-4-ilo) 81 . 1 , se usó el derivado de 4-metil-3- (2H-1, 2 , 3-triazol-2-ilo) . Además, en lugar de ( 1S, 2R) -2-aminociclohexilcarbamato de ter-butilo 81 . 2 , se usó éster ter-butílico de ácido N-((S)-2-amino-l-metiletil) carbámico 333 . 2 [CAS 146552-71-8]. MS experimental para Ci7H2iN90 como (M+H)+ 368,4. UV ?= 242 nm.
Ejemplo 465: (S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (5-metil-3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 334.1 334
[1040] Este compuesto se preparó de una manera análoga a 333 en el Ejemplo 464. Sin embargo, en lugar del derivado de 4-metil-3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-ilo) 333.1, se usó el derivado de 5-metil-3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-ilo) 334.1. MS experimental para Ci7H21N90 como (M+H)+ 368,3. UV ?= 246 nm Ejemplo 466: (S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) -5- (trifluorometil ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1041] El compuesto del titulo se preparó de acuerdo con el esquema 464 usando 335.3 como la anilina de partida. MS experimental para Ci7H18F3N90 como (M+H)+ 422,3. UV ?= 260 nm Ejemplo 467: (R) -2- ( l-aminobutan-2-ilamino) -4- ( 3- metilfenil ) pirimidin-5-carboxamida 'IIHBoc 346.1 346.2 346.3 346.4 [1 042] El clorhidrato de (R) - (-) -2-butanamida asequible en comercios (346.1; 2,41 g, 17,4 mmol) [CAS 103765-03-3] se disolvió en agua/dioxano (60 mL/20 mL) que contenia Na2CC>3 (5,53 g, 52,2 mmol). A la solución agitada, se añadió cloroformiato de bencilo (2,81 mL, 20,9 mmol) [CAS 501-53-1]. La reacción se agitó durante 96 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (400 mL) y agua (100 mL) . Las capas se separaron y las capas orgánicas luego se lavaron con agua (2x150 mL) y salmuera (2x150 mL) . La capa de EtOAc se secó (MgSC ) y se concentró. El sólido blanco resultante se trituró con 360 mL de hexanos/50 mL de CH2CI2 durante 1 h. El sólido se filtró, se lavó con hexanos y se secó para dar 346.2 (3,46 g) .
[1043] A una solución agitada de 346.2 (3,46 g, 14,7 mmol) en THF anhidro (100 mL) se añadió BH3-Me2S (3,45 mL, 36,6 mmol) gota a gota. La solución resultante se calentó bajo una atmósfera de argón a 85 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió y se añadió agua helada lentamente (100 mL) . La solución resultante se agitó durante 1 h. A continuación, K2C03 se añadió (6,08 g, 44,1 mmol) seguido por Boc anhídrido (6,40 g, 29,4 mmol). La reacción se agitó durante 18 h y luego se diluyó con EtOAc. La capa orgánica se lavó con 5% de K2C03, 5% de NaHC03, agua y salmuera. Luego se secó sobre MgS04 y se concentró para obtener 346.3.
[1044] 346.3 crudo se disolvió en -50 mL de EtOAc y se añadió una cantidad catalítica de Pd/C al 10%. A esta suspensión, se cargó un balón de hidrógeno con agitación. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró al vacío para obtener 346.4.
[1045] El intermediario 346.4 se hizo reaccionar con 344.1 de acuerdo con la química descrita en el Ejemplo 13. Después de la desprotección de Boc, la HPLC preparativa en fase inversa dio como resultado el compuesto del título. MS experimental para Ci6H22N60 como (M+H)+ 315,4. UV L 238, 284 nm.
Ejemplo 468: (R) -2- (l-aminobutan-2-ilamino) -4- (3, 5- dimetilfenil) pirimidin-5-carboxamida
[1046] El intermediario 346.4 se hizo reaccionar con 345.1 de acuerdo con la química descrita en el Ejemplo 13. Después de la desprotección de Boc, la HPLC preparativa en fase inversa dio como resultado el compuesto del título. MS experimental para Ci7H24N60 como (M+H)+ 329,5. UV O240, 290 nm. d 1,05 (t, 3H) , 1,70-1,80 (m, 2H), 2,33 (s, 6H) , 3,15-3,35 (m, 2H) , 4,16-4,23 (m, 1H), 6,90 (s, 1H), 7,19-7,25 (m, 2H) , 8,50 (s, 1H) Ejemplo 469: ( R) -2- ( l-aminobutan-2-ilamino ) -4 - ( 3- ( 2H-1 , 2,3-triazol-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1047] El intermediario 346.4 se hizo reaccionar con 343.5 de acuerdo con la química descrita en el Ejemplo 424. Después de la desprotección de Boc, la HPLC preparativa en fase inversa dio como resultado el compuesto del título. MS experimental para C17H21N9O como (M+H)+ 368, 4. UV D=248 nm. d 1,05 (t, 3H) , 1,70-1,80 (m, 2H), 3,10-3,35 (m, 2H) , 4,55-4,61 (m, 1H) , 7,35 (d, 1H) , 7,55 (t, 1H), 7,92 (d, 1H), 8,00 (s, 2H) , 8,58 (s, 1H) , 9,00 (s, 1H) Ejemplo 470: (R) -2- (l-aminobutan-2-ilamino) -4- (3- (pirimidin-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 349.1 349
[1048] El intermediario 346.4 se hizo reaccionar con 349.1 de acuerdo con la química descrita en el Ejemplo 424. Después de la desprotección de Boc, la HPLC preparativa en fase inversa dio como resultado el compuesto del título. MS experimental para Ci9H22 80 como ( +H)+ 379, 5. UV D=248 nm. d 1,05 (t, 3H) , 1,70-1,80 (m, 2H), 3,10-3,35 (m, 2H) , 4, 48-4, 55 (m, 1H) , 7,41 (t, 1H) , 7,55-7,60 (m, 2H) , 8, 25-8, 35 (m, 1H) , 8,55 (s, 1H) , 8,89 (d, 2H) , 9,00 (s, 1H) Ejemplo 471: 2- ( ( R) -l-aminobutan-2-ilamino) -4- ( 3- ( lH-pirazol-1-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 350.1 350
[1049] El intermediario 346.4 se hizo reaccionar con 350.1 de acuerdo con la química descrita en el Ejemplo 424. Después de la desprotección de Boc, la HPLC preparativa en fase inversa dio como resultado el compuesto del título. MS experimental para Ci8H22 80 como ( +H)+ 367, 4. UV D=246 nm. d 1,05 (t, 3H) , 1,70-1,80 (m, 2H) , 3,10-3,35 (m, 2H) , 4, 48-4, 55 (m, 1H) , 6,58 (br s, 1H) , 7,30 (d, 1H), 7,50-7, 62 (m, 2H) , 7,80 (br s, 1H) , 8,32 (br s, 1H) , 8,55 (s, 1H), 8,68 (br s, 1H) Ejemplo 472 : (R) -2- ( l-amino-3-ciclopropilpropan-2-ilamino) -4- (3-(2H-1, 2, 3-triazol-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 354.5
[1050] El intermediario 354.5 se hizo reaccionar con 343.5 de acuerdo con la química descrita en el Ejemplo 424. Después de la desprotección de Cbz, la HPLC preparativa en fase inversa dio como resultado el compuesto del título. MS experimental para C19H23N9O como (M+H)+ 394, 4. UV O250 nm.
Ejemplo 473: (R) -2- ( l-amino-3-ciclopropiletilamino ) -4- ( 3- ( 2H-l,2,3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1051] El compuesto del título se preparó de una manera análoga a Ejemplo 424. MS experimental para Ci8H2iN90 como (M+H) + 380, 4. UV D=250 nm. d 0, 50-0, 85 (m, 4H) , 1,15-1,25 (m, 1H) , 3,10-3,35 (m, 2H), 3, 90-4, 00 (m, 1H) , 7,30-7, 36 (m, 1H) , 7,60 (t, 1H) , 7, 93-8, 00 (m, 1H) , 8,05 (s, 2H) , 8,56 (s, 1H) , 8,90 (br s, 1H) . Ejemplo 474: 2- (( 1-aminociclopropilmetil ) amino ) -4- ( 3- (2H-1 , 2 , 3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1052] El compuesto del titulo se preparó de una manera análoga a Ejemplo 424. MS experimental para C17H19N9O como (M+H)+ 366, . UV D=248 nm.
Ejemplo 475: 2- (( 1-aminociclopropilmetil ) amino ) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1053] El compuesto del titulo se preparó de una manera análoga a Ejemplo 424. MS experimental para C13H21 7O como (M+H)+ 352,4. UV D=217, 239, 331 nm.
Ejemplo 476: 2- ( (1-aminociclopropilmetil) amino) -4- (3, 5- dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1054] El compuesto del titulo se preparó de una manera análoga a Ejemplo 424. MS experimental para Ci7H22N60 como ( +H) + 327,4. UV 0=241, 290 nm.
Ejemplo 478 : 2- (l-amino-4, 4, 4-trifluorobutan-2-ilamino) -4- (3- (2H-1,2, 3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida 360.1 360.2 360.3 360.4 ción de protección CF, desprotec CF: de Cbz Cbz J ' BocHN "H BocHN H NHCbz NH; 360.5 360.6
[1055] El intermediario 360.6 se hizo reaccionar con 343.5 de acuerdo con la química descrita en el Ejemplo 424. Después de la desprotección de Boc, la HPLC preparativa en fase inversa dio como resultado el compuesto del titulo. MS experimental para CnHi8F3N90 como (M+H)+ 422, 4. UV D=245 nm. 2,70-2,80 (m, 2H) , 4, 25-4, 35 (m, 1H) , 7,35-7,41 (m, 1H) , 7, 49-7, 55 (m, 1H) , 7,88-7,94 (m, 1H), 7,98 (s, 2H) , 8,59 (s, 1H) , 8,86 (br s, 1H) .
Ejemplo 479: 2- ( (1-metilaminociclopropilmetil) amino) -4- (3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1056] El intermediario 345.1 se hizo reaccionar con 1-(aminometil ) -N-metilciclopropanamina de acuerdo con el Ejemplo 408. La HPLC preparativa en fase inversa dio como resultado el compuesto del titulo. MS experimental para Ci8H24N60 como (M+H) + 341, 5. UV D=240 nm.
Ejemplo 480. (S) -2- (2-amino-3-ciclopropilpropilamino) -4- (1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1057] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C20H25N7O como (M+H)+ 380, 4. UV: ? = 219, 8, 241, 1, 330,3.
Ejemplo 481. (S) -2- (2-aminobutilamino) -4- ( l-etil-lH-indol-4¦ ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1058] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci9H25N70 como (M+H)+ 368,4. UV: ? = 219,2, 240, 4, 331, 9.
Ejemplo 482. (S) -2- (2-amino-2-ciclopropiletilamino ) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1059] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci9H23N70 como (M+H)+ 366, 4. UV: ? = 220,2, 241,4, 330, 6.
Ejemplo 483. (S) -2- (2-aminobutilamino) -4- (l-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1060] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci8H23N70 como (M+H)+ 354, 4. UV: ? = 219, 2, 240, 4, 333, 1.
Ejemplo 484. ( R) -2- ( 2-amino-3-etoxipropilamino ) - - ( 1-etil-lH-indol-4 -ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1061] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C20H27 7O como (M+H)+ 398, 4. UV: ? = 219,3, 239,4, 326,7.
Ejemplo 485. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1062] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H2iN702 como (M+H)+ 356,4. UV: ? = 216,7, 238, 7, 327,2.
Ejemplo 486. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1063] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci8H23N702 como (M+H)+ 370, 4. UV: ? = 219,2, 239,3, 331,9.
Ejemplo 487. (R) -2- (2-amino-3-metilbutilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1064] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci9H25N70 como (M+H)+ 368, 4. UV: ? = 220,4, 325,9.
Ejemplo 488. 2-((2R, 3R) -2—amino-3-metoxilbutilamino) -4- ( 1-etil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1065] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C20H27 7O2 como (M+H) + 398 , 4. UV: ? = 220,4, 239, 9, 331,6.
Ejemplo 489. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1066] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C1CJH25N7O2 como (M+H)+ 384, 3. UV: ? = 219,2, 239,3, 331,9.
Ejemplo 490. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- (lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1067] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C18H23N7O2 como (M+H) + 370 , 3. UV: ? = 215, 7, 238,1, 327,1.
Ejemplo 491. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (2-metil-2H-indol-4-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1068] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para CnH22N802 como (M+H)+ 371,3. UV: ? = 214, 9, 241, 7, 324, 1.
Ejemplo 492. (R) -2- (2-amino-4-metoxipropilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1069] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci9H25N702 como (M+H)+ 384, 3. UV: ? = 219, 2, 240, 4, 331, 9.
Ejemplo 493. (R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino ) -4- (2, 3-dihidro-lH-pirrolo [ 1 , 2-a] indol-8-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1070] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C20H25 7O2 como (M+H)+ 396, 4. UV: ? = 203,9, 244,0, 303,3.
Ejemplo 494. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- (2-metil-2H-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1071] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C18H24N802 como (M+H)+ 385, 4. UV: ? = 208,6, 240,4, 283,1, 324, 7.
Ejemplo 495. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- (2, 3-dihidro-lH-pirrolo[l,2-a] indol-8-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1072] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C2iH27N702 como (M+H) + 410, 4. UV: ? = 221, 6, 336,7.
Ejemplo 496. (S) -2- (2-amino-4-metoxipropilamino) -4- (2, 3-dihidro-lH-pirrolo [1, 2-a] indol-8-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1073] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C2iH27 702 como (M+H)+ 410,4. UV: ? = 222, 8, 336,7.
Ejemplo 497. 2-((2R, 3R) -2-amino-3-metoxilbutilamino) -4- (2, 3-dihidro-lH-pirrolo [1, 2-a] indol-8-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1074] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C2iH27 702 como (M+H)+ 410,4- UV: ? = 221, 6, 335, 5.
Ejemplo 498. (S) -2- ( 2-amino-3 , 3-dimetilbutilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1075] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C20H27N7O como (M+H)+ 382, 4. UV: ? = 219,2, 239,3, 327,1.
Ejemplo 499. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( 6-carbomoilnaftalen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1076] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C2oH23 703 como (M+H)+ 410,2. UV: ? = 224,9, 316,2.
E emplo 500. (R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( 1 , 2-dimetil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1077] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci9H25 702 como (M+H)+ 384, 4. UV: ? = 223,9.
Ejemplo 501. 2- ( (2R, 3R) -2-amino-3-metoxibutilamino) -4- (2-metil-2H-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1078] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci8H2iN802 como (M+H)+ 385,3. UV: ? = 203, 9, 241, 6.
Ejemplo 502. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (2-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1079] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci8H23 702 como (M+H)+ 370, 4. UV: ? = 220,4, 333, 1.
Ejemplo 503. (S) -2- (2-amino-4-metoxibutilamino) -4- (2-metil-2H-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1080] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ciaí^ gOa como (M+H)+ 385, 4. UV: ? = 209,8, 240,4, 283,1, 325, 9.
Ejemplo 504. (S) -2- (2-amino-3-ciclopropilpropilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1081] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci8H2,N60 como (M+H)+ 341,4. UV: ? = 241,7, 285.9.
Ej emplo 505. 2- ( ( 2R, 3R) -2-amino-3-metoxibutilamino) -4- ( lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1082] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C18H23N702 como (M+H)+ 370,4. UV: ? = 216,7, 238,1, 324, 8.
Ejemplo 506. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (naftalen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1083] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci9H22N602 como (M+H) + 367, 2. UV: ? = 213, 3, 239,3, 305,6.
Ejemplo 507. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- (2-metil-lH-indol-4 -ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1084] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C19H25N7O2 como ( +H) + 384, 4. UV: ? = 220, 4, 240, 4.
Ejemplo 508. (R) -2- (2-amino-3-fenoxipropilamino) -4- (1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1085] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C23H25N7O2 como (M+H)+ 432, 4. UV: ? = 218, 6, 242,3.
Ejemplo 509. (S) -2- (2-amino-4-metilpentilamino) -4- (1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1086] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C20H27N7O como (M+H)+ 382,4. UV: ? = 219,8, 241,7.
Ejemplo 510. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (3, 5- dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1087] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H24 602 como (M+H)+ 345,4. UV: ? = 240,3, 290, 0.
Ejemplo 511. 2- ( (2R, 3R) -2-amino-3-metoxibutilamino) -4- ( 1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1088] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C19H25 702 como (M+H)+ 384, 4. UV: ? = 218,0 Ejemplo 512. (R) -2- (2-amino-3-fenoxipropilamino) -4- (2-metil-2H-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1089] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. S experimental para C22H25 8O2 como (M+H)+ 433,4. UV: ? = 211,3, 242,3, 330,9.
Ejemplo 513. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (bifenil-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1090] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C2iH24N602 como (M+H)+ 393, 4. UV : ? = 202,8, 246,3.
Ejemplo 514. (R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino ) -4- ( 6-metoxinaftalen-2-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1091] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C20H24 6O3 como (M+H)+ 397,0. ÜV: ? = 221,6, 315,2.
Ejemplo 515. (R) -2- (2-amino-3-fenoxipropilamino) -4- (bifenil-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1092] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C26H26 602 como (M+H)+ 455, 4. UV: ? = 203, 4, 246,6.
Ejemplo 516. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( 6- (metilcarbamoilnaftalen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1093] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C2iH25N703 como (M+H)+ 424, 4. UV: ? = 222, 8, 316, 4.
Ejemplo 517. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino ) -4- ( 1-metil-lH-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1094] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H22N802 como (M+H)+ 371,5. UV: ? = 208, 8, 241, 7, 316, 7.
Ejemplo 518. (S) -2- (2-aminobutilamino) -4- (3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1095] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci7H24N60 como (M+H)+ 329,5. UV: ? = 240, 5, 288, 4.
Ejemplo 519. (S) -2- ( 2-aminobutilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin- 5-carboxamida
[1096] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci6H22N60 como (M+H)+ 315,4. UV: ? = 241,1, 286, 5.
Ejemplo 520. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( lH-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1097] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C16H2o 802 como (M+H)+ 357,3. UV: ? = 206, 3, 240, 4, 311,6.
Ejemplo 521. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (3, 5-dimetoxifenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1098] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C17H24N604 como (M+H)+ 377, 3. UV: ? = 203, 8, 235,5, 290,0.
Ej emplo 522. ( R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino ) -4- (6- (morfolin-4-carbonil) naftalen-2-ilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1099] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C24H29N704 como (M+H)+ 480, 4. UV: ? = 218,0, 311,6.
Ejemplo 523. Ácido 2-amino-3- ( 5-carbamoil ) -4- (m- tolilamino) pirimidin-2-ilamino) propanoico
[1100] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci5Hi8N603 como (M+H)+ 331,1· UV: ? = 239,3, 289,0.
Ejemplo 524. (S) -2- ( 2-amino-3-ciclopropilpropilamino) -4- (3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1101] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C19H26 60 como (M+H)+ 355, 5. UV: ? =.241,1, 287, 7.
Ejemplo 525. (S) -2- (2-amino-3-metilbutilamino) -4- (m-tolilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1102] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci7H24N60 como (M+H)+ 329, 4. UV: ? = 241, 7, 285.9.
Ejemplo 526. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (naftalen-1-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1103] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C19H22 602 como (M+H)+ 367, 4. UV: ? = 219,2, 282,8.
Ejemplo 527. (S) -2- (2-amino-2-ciclopropiletilamino) -4- (m-tolilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1104] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci7H22N60 como (M+H) + 327, 4. UV: ? = 241, 7, 286, 5.
Ejemplo 528. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( 6- (dimetilcarbamoil) naftalen-2-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1105] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C22H27N7O3 como (M+H)+ 438, 2. UV: ? = 216,9, 309,2.
Ejemplo 529. 2- ( ( 2R, 3R) -2-amino-3-metoxibutilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1106] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H24N602 como (M+H)+ 345, 4. UV: ? = 240, 4, 284, 2.
Ejemplo 530. (S) -2- (2-amino-2-ciclopropiletilamino) -4- (3, 5- dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1107] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para d8H24N60 como (M+H)+ 341,4. UV: ? = 241, 4, 287, 7.
Ejemplo 531. (R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (3- (piridin-3-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1108] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C2oH23N702 como (M+H)+ 394, 4. UV: ? = 242, 8.
Ejemplo 532. (R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino ) -4- (3- (tiazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1109] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para CigH2iN702S como (M+H ) + 400, 2. UV: ? = 240,4, 290,2.
Ejemplo 533. (S) -2- (2-amino-3-ciclopropilpropilamino) -4- (3- (2H-1,2, 3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci9H23N90 como (M+H ) + 394, 4. UV: ? = 204,6, 251,5.
Ejemplo 534. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (3, 4-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1110] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H24N602 como (M+H)+ 345,5. UV: ? = 239,3, 291,4.
Ejemplo 535. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (3- (isoxazol-3-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci8H21N703 como (M+H)+ 384, 3. UV: ? = 242, 3, 285, 4.
Ejemplo 536. Ácido (S) -3-amino-4- (5-carbamoil) -4- (m-tolilamino) pirimidin-2-ilamino) butanoico
[1111] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci6H2oN603 como (M+H)+ 345,1. UV: ? = 239, 3, 285.4.
E emplo 537. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- ( 1H-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1112] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C^^NsOz como (M+H)+ 371,3. UV: ? = 202,8, 238,1, 308,0.
Ejemplo 538. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- ( 1-metil-lH-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1113] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci8H24N802 como (M+H)+ 385, 3. UV: ? = 208,6, 240,4, 319,9.
Ejemplo 539. (R) -2- ( 2-aminobutilamino) -4- ( 3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1114] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci7H2iN90 como (M+H)+ 368, 4. UV: ? = 203,9, 249,9.
Ejemplo 540. (S) -2- (2-amino-4-metoxibutilamino) -4- (bifenil-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1115] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C22H26N6O2 como (M+H)+ 407, 4. UV: ? - 202,1, 246,0.
Ejemplo 541. (S) -2- (2-amino-3, 3-dimetilbutilamino) -4- (unto!ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1116] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci8H26N60 como (M+H)+ 343, 4. UV: ? = 240,5.
Ejemplo 542. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (benzo [d] tiazol-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1117] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H2iN702S como (M+H)+ 374, 4. UV: ? = 238,7, 295.1.
Ejemplo 543. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (4-cloro-3-metilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1118] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci5H2ilN602 como (M+H)+ 365,2, 367,1 (patrón de Cl) . UV: ? = 215,7, 240,4, 289,0.
Ejemplo 544. (R) -2- (2-amino-3-etoxipropilamino) -4- (m-tolilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1119] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H24 602 como (M+H)+ 345,6. UV: ? = 238, 1, 284, 2.
Ejemplo 545. (R) -2- (2-amino-3-isopropoxipropilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1120] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci8H26N602 como (M+H)+ 359,8. UV: ? - 241, 6, 286, 6.
Ejemplo 546. ( S ) -2- ( 2-amino-3-metilbutilamino ) -4- ( 3 , 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1121] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci7H24N60 como (M+H)+ 343, 5. UV: ? = 239,9, 284,7.
Ejemplo 547. 2- ( ( 2R, 3R) -2-amino-3-metoxibutilamino) -4- ( 1H-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1122] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C1 H22N8O2 como (M+H)+ 371,4. UV: ? = 238,1, 299,7.
Ejemplo 548. (R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (3-metoxifenil) pirimidin-5-carboxamida
[1123] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci6H22N603 como (M+H)+ 347,2. UV: ? = 239,7.
Ejemplo 549. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (3- etilfenil ) pirimidin-5-carboxamida
[1124] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H24N602 como (M+H)+ 345, 2. UV: ? = 239, 3, 286,6.
Ejemplo 550. (S) -2- (2-amino-4- (fluorofenil) propilamino) -4- (1-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1125] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C23H24FN70 como (M+H)+ 434,5. UV: ? = 215, 5, 241, 7, 330,9.
Ejemplo 551. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (3- (2H-1, 2, 3-triazol-2-il) fenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1126] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H2iN902 como (M+H)+ 384, 3. UV: ? = 249, 9.
Ejemplo 552. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( 3- ( 1H-pirazol-l-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1127] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C18H22 802 como (M+H) + 383 , 3. UV: ? = 247,2.
Ejemplo 553. (R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino ) -4- ( 3- (pirimidin-5-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1128] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C19H22 8O2 como (M+H)+ 395,3. UV: ? = 243,6.
Ejemplo 554. (R) -2- (2-amino-3-hidroxipropilamino) -4- (m-tolil) pirimidin-5-carboxamida
[1129] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C15H20N6O2 como (M+H)+ 317,2. UV: ? = 238,1, 286,6.
Ejemplo 555. (R)- 4- (l-metil-lH-indol-4-ilamino) -2- (piperidin-3-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1130] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci9H23N70 como ( +H)+ 366, 4. UV: ? = 218,0, 241, 6, 335, 5.
Ejemplo 556. (R) -2- (2-amino-3-hidroxi-3-metilbutilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1131] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H24N602 como (M+H)+ 345,2. UV: ? = 239, 3.
Ejemplo 557. (S) -2- (2-amino-4-metoxibutilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1132] El compuesto del título se preparó «usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C17H24N602 como (M+H)+ 345, 4. UV: ? = 240,5, 286,5.
Ejemplo 558. 4- (l-metil-lH-indol-4-ilamino) -2- (2- (metilamino) etilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1133] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C17H2iN70 como (M+H)+ 340, 4. UV: ? = 220,4, 239,3.
Ejemplo 559. 2- ( (2R, 3S) -2-amino-3-metoxibutilamino) -4- (m-tolil ) pirimidin-5-carboxamida
[1134] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H24N602 como (M+H)+ 345,2. UV: ? = 239, 3, 285.4.
Ejemplo 560. 2- ( (2R, 3S) -2-amino-3-metoxibutilamino) -4- (3- metoxifenil) pirimidin-5-carboxamida
[1135] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C17H24N603 como (M+H)+ 361,2. UV: ? = 239, 3.
Ejemplo 561. ( R) -2- (2-ámino-3-metoxipropilamino) -4- ( 3- ( 1H-imidazol-l-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1136] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para como (M+H)+ 383,5. UV: ? = 238, 1, 281.9.
Ejemplo 562. (R) -2- (l-amino-4-metil-l-tioxopentan-2-ilamino) -4-( l-metil-lH-indol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1137] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 318. MS experimental para C20H25N7OS como (M+H)+ 412,4. UV: ? = 250,3.
Ejemplo 563. 2- ( ( 2R, 3R) -2-amino-3-metoxibutilamino ) -4- ( 1-metil-lH-indazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1138] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci8H24 802 como (M+H)+ 385, 3. UV: ? = 208, 6, 240, 4, 311, 6.
Ejemplo 564. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( 4-metoxi-3-metilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1139] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H24 603 como (M+H)+ 361,2. UV: ? = 238, 1, 292, 6.
Example565. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (benzo [d] tiazol-7-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1140] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci6Hi9N702S como (M+H)+ 374,3. UV: ? = 232, 6, 287, 8.
Ejemplo 566. (S) -2- (2-amino-4-metilpentilamino) -4- (3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1141] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para CigH28 60 como (M+H)+ 357,4. UV: ? = 239,3, 287,8.
Ejemplo 567. (S) -2- (2-amino-2-ciclopropiletilamino) -4- (3- (2H-1,2, 3-triazol-2-il ) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1142] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para d8H21N90 como (M+H)+ 380,4. UV: ? = 204,6, 250,9.
Ejemplo 568. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( 4-fluoro-3-metilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1143] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C16H2iFN602 como (M+H)+ 349,0. UV: ? = 211,0, 239,3.
Ejemplo 569. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( 3- trifluorometilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1144] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci6H19F3N602 como (M+H) + 385, 2. UV: ? = 242,8.
Ejemplo 570. 2-amino-3- ( 5-carbamoil ) -4- (m-tolilamino) pirimidin-2-ilamino) propanoato de metilo
[1145] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci6H2o 603 como (M+H)+ 345, 1. UV: ? = 238,1, 290,2.
Ejemplo 580. (R) -2- (2-amino-3-fenoxipropilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1146] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C2iH24N602 como (M+H)+. UV: ? = 213,3, 239, 3.
Ejemplo 581. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (benzo [d] tiazol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1147] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci6Hi9N702S como (M+H)+ 374, 3. UV: ? = 243.6, 292,1.
Ejemplo 582. (S) -2- (2-amino-4-metilpentilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1148] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci8H26 60 como (M+H)+ 343, 4. UV: ? = 239f3, 285.4.
Ejemplo 583. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (3, 4-dimetoxifenilamino ) pirimidin-5-carboxamida
[1149] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci7H24 604 como (M+H)+ 377, 1. UV: ? = 235, 7, 285.4.
Ejemplo 584. (S) -2- (2-amino-3- (tiazol-4-il) propilamino) -4- (m-tolilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1150] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci8H2iN7OS como (M+H)+ 384, 1. UV: ? = 240, 4, 287, 8.
Ejemplo 585. (R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino ) -4- (benzo [c] [1,2,5] tiadiazol-4-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1151] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci5H18N802S como (M+H) + 375,2. UV: ? = 235,7, 315,2.
Ejemplo 586. (R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino ) -4- (4- (pirimidin-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1152] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C19H22N8O2 como (M+H)+ 395, 4. UV: ? = 230,1, 311,2.
Ejemplo 587. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- ( quinoxalin-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1153] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C17H20 8O2 como (M+H)+ 369,2. UV: ? = 245, 4.
Ejemplo 588. ( R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino ) -4- ( 4 - (dimetilamino) -3-metilfenililamino) pirimidin-5-carboxamida
[1154] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci8H27 702 como (M+H)+ 374, 3.
Ejemplo 589. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (4- (2-metoxietoxi) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1155] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para ClsH25^eO^ como (M+H)+ 391,4. UV: ? = 202,8, 239,9, 282,2.
Ejemplo 590. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (3-metil-4-morfolinofenililamino) pirimidin-5-carboxamida
[1156] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C20H29N7O3 como (M+H)+ 416,2. UV: ? = 238, 1, 293, 8.
Ejemplo 591. (R) -2- ( 2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (2, 3-dihidrobenzo [b] [1,4] dioxin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1157] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C17H22N604 como (M+H)+ 375,3. UV: ? = 239,3, 292,7.
Ejemplo 592. (S) -2- (2-amino-3, 3-dimetilbutilamino) -4- (3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1158] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para- Ci9H28 60 como (M+H)+ 357, 4. UV: ? = 240, 4.
Ejemplo 593. (S) -2- (2-amino-4- (fluorofenil)propilamino) -4- (3, 5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1159] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para C22H25FN60 como (M+H)+ 409, 4. UV: ? = 241, 7, 288, 4.
Ejemplo 594. (R) -2- (2-amino-3-metoxipropilamino) -4- (benzo [d] isoxazol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1160] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para Ci6Hi9N703 como (M+H)+ 358,3. UV: ? = 203,9, 235,7, 292, 6.
Ejemplo 595. (R) -2- ( 2-amino-3-hidroxi-3-metilbutilamino ) -4- (3,5-dimetilfenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1161] El compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 596. MS experimental para C17H24 602 como (M+H)+ 359,2. UV: ? = 239,3.
Ejemplo 596 Boc 243.1 243.2 243.3 1. MsCI. Et3N 2. NaN3. TBAI .NH, 3. Pd/C . H2 BocHN 243.4 243.5 243.4 243
[1162] Síntesis de 243.2: A una suspensión de NaH (6g, 0,25 mol) en THF (220 mL) a 0 °C se añadió eOH (18 mL) gota a gota, la mezcla se agitó luego a temperatura ambiente durante 1 h y la solución resultante se usó a continuación.
[1163] A una solución de N-Boc L-serina 243.1 (6 g, 0,029 mol) en THF (300 mL) se añadió 120 mL de la solución anterior y Mel (3 mL) . Después de agitar durante a temperatura ambiente durante 1 h, se añadió la solución anterior restante, seguido de más Mel (6 mL) y la mezcla se agitó durante 18 h más. La mezcla luego se concentró al vacio para eliminar THF, el residuo se disolvió en agua; la solución acuosa se lavó con éter y se acidificó con ácido cítrico hasta pH 2. La solución acuosa acidificada se extrajo con EtOAc (3X), la capa de EtOAc se combinó, se lavó con a2S203 diluido, salmuera, se secó y se concentró para dar una mezcla de 243.2 y se recuperó 243.1. El residuo se extrajo en H20 (100 mL) y se extrajo con DCM (3X) . La capa de DCM se combinó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2S04 y se concentró al vacío para dar 243.2 en forma de un aceite amarillo pálido (3,2 g) .
[1164] Síntesis de 243.3: A una solución de 243.2 (3,2 g, 14,60 mmol) en THF (20 mL) a -15 °C se añadió N-metilmorfolina (1,60 mL, 14,60 mmol) y cloroformiato de isobutilo (1,91 mL, 14,60 mmol). Después de agitar durante 5 min a -15 °C, la mezcla se añadió una solución de borhidruro de sodio (1,66 g, 43,8 mmol) en agua (7 mL) lentamente (evolución de gas) . La mezcla se mantuvo bajo agitación a -15 °C durante 10 min y se diluyó con EtOAc, las capas orgánicas se lavaron con agua, NaHC03 saturado, salmuera, se secaron y se concentraron para dar el residuo crudo, que se purificó por columna (Hex/EtOAc = 2:1 a 2:3) para dar 243.3 (2,1 g, 70%) .
[1165] Síntesis de 243.4: A una solución de 243.3 (2,1 g, 10,24 mol) en DCM (30 mL) a 0 °C se añadió Trietilamina (2,15 mL, 15,36 mmol) y cloruro de metansulfonilo (1,19 mL, 15,36 mmol) . Después de agitar durante a 0 °C durante 30 min, se diluyó con DCM, las capas orgánicas se lavaron con agua, NaHC03 saturado, salmuera, se secaron y se concentraron para dar mesilato crudo.
[1166] A una solución del mesilato crudo anterior en DMF (20 mL) se añadió NaN3 (1,95 g, 30,72 mmol) y TBAI (37 mg, 0,124 mmol) . Después de calentar a 75 °C durante 2 h, se diluyó con EtOAc, las capas orgánicas se lavaron con agua, salmuera, se secaron y se concentraron para dar azida cruda (1,7 g) .
[1167] A una solución de la azida cruda anterior (1,7 g) en EtOAc (16 mL) se añadió Pd/C (400 mg) y se cargó con H2 (1 atm) . Después de agitar durante a temperatura ambiente durante 15 h, Pd/C se filtró y el filtrado se concentró para dar 243.4 (1,5 g) .
[1168] Síntesis de 243: A una muestra sólida de 243.5 (0,76 g, 2,1 mmol) en tubo sellado se añadió una solución de 243.4 (0,75 g, 3,68 mmol) en AcCN (8,5 mL) . Después de calentar a 65 °C durante 5 h, la mezcla se enfrió y se añadió agua (40 mL) . Los precipitados se recogieron por filtración para dar el producto de acoplamiento (0,85 g) .
[1169] A una suspensión del producto de acoplamiento anterior (0,85 g) en DC (6 mL) se añadió TFA (2 mL) . Después de agitar durante a temperatura ambiente durante 15 min, la mezcla se concentró y el residuo se purificó por HPLC preparativa para dar F (0,99 g) en forma de sal de TFA.
Ejemplo 597 H,C 0 H O N aOCH3. el OH 1- NN'Hvl, cloroformiato de isobutilo OH BocHN BocHN OH O BocHN O 2. NaBH4 243.1 243.2 243.3 243.5 243.4 243
[1170] Síntesis de 243.2: A una suspensión de NaH (6 g, 0,25 mol) en THF (220 mL) a 0 °C se añadió MeOH (18 mL) gota a gota, la mezcla se agitó luego a temperatura ambiente durante 1 h y la solución resultante se usó a continuación.
[1171] A una solución de N-Boc L-serina 243.1 (6 g, 0,029 mol) en THF (300 mL) se añadieron 120 mL de la solución anterior y Mel (3 mL) . Después de agitar durante a temperatura ambiente durante 1 h, el resto de la solución anterior se añadió, seguido por more Mel (6 mL) y la mezcla se agitó durante 18 h más. La mezcla luego se concentró al vacio para eliminar THF, el residuo se disolvió en agua; la solución acuosa se lavó con éter y se acidificó con ácido cítrico hasta pH 2. La solución acuosa acidificada se extrajo con EtOAc (3X), la capa de EtOAc se combinó, se lavó con Na2S203 diluido, salmuera, se secó y se concentró para dar una mezcla de 243.2 y se recuperó 243.1. El residuo se extrajo en H20 (100 mL) y se extrajo con DCM (3X) . La capa de DCM se combinó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2S04 y se concentró al vacío para dar 243.2 en forma de un aceite amarillo pálido (3,2 g) .
[1172] Síntesis de 243.3: A una solución de 243.2 (3,2 g, 14,60 mmol) en THF (20 mL) a -15 °C se añadió N-metilmorfolina (1,60 mL, 14,60 mmol) y cloroformiato de isobutilo (1,91 mL, 14,60 mmol) . Después de agitar durante 5 min a -15 °C, la mezcla se añadió una solución de borhidruro de sodio (1,66 g, 43,8 mmol) en agua (7 mL) lentamente (evolución de gas) . La mezcla se mantuvo bajo agitación a -15 °C durante 10 min y se diluyó con EtOAc, las capas orgánicas se lavaron con agua, NaHC03 sat . , salmuera, se secó y se concentró para dar el residuo crudo, que se purificó por columna (Hex/EtOAc = 2:1 a 2:3) para dar 243.3 (2, 1 g, 70%) .
[1173] Síntesis de 243.4: A una solución de 243.3 (2,1 g, 10,24 mmol) en DCM (30 mL) a 0 °C se añadió Trietilamina (2,15 mL, 15,36 mmol) y cloruro de metansulfonilo (1,19 mL, 15,36 mmol) . Después de agitar durante a 0 °C durante 30 min, se diluyó con DCM, las capas orgánicas se lavaron con agua, NaHC03 saturado, salmuera, se secaron y se concentraron para dar mesilato crudo.
[1174] A una solución del mesilato crudo anterior en DMF (20 mL) se añadió NaN3 (1,95 g, 30, 72 mmol) y TBAI (37 mg, 0,124 mmol) . Después de calentar a 75 °C durante 2 h, se diluyó con EtOAc, las capas orgánicas se lavaron con agua, salmuera, se secaron y se concentraron para dar azida cruda (1,7 g) .
[1175] A una solución de la azida cruda anterior (1,7 g) en EtOAc (16 mL) se añadió Pd/C (400 mg) y se cargó con H2 (1 atm) . Después de agitar durante a temperatura ambiente durante 15 h, Pd/C se filtró y el filtrado se concentró para dar 243.4 (1,5 g) .
[1176] Síntesis de 243: A una muestra sólida de 243.5 (0,76 g, 2,1 mmol) en tubo sellado se añadió una solución de 243.4 (0,75 g, 3,68 mmol) en AcCN (8,5 mL) . Después de calentar a 65 °C durante 5 h, la mezcla se enfrió y se añadió agua (40 mL) . Los precipitados se recogieron por filtración para dar el producto de acoplamiento (0,85 g) .
[1177] A una suspensión del producto de acoplamiento anterior (0,85 g) en DCM (6 mL) se añadió TFA (2 mL) . Después de agitar durante a temperatura ambiente durante 15 min, la mezcla se concentró y el residuo se purificó por HPLC preparativa para dar F (0,99 g) as sal de TFA.
Ejemplo 598. (S) -2- (2-amino-2-ciclopropiletilamino) -4- (2-amino- 3 , 3-dimetilbutilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1178] compuesto del título se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci9H25 90 como (M+H)+ 396, 4. UV: ? = 248, 7.
Ej emplo 599. 2- ( l-acetilpiperidin-4-ilamino) -4- ( ciclopropilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1179] El compuesto del titulo se preparó usando el mismo esquema de síntesis mostrado en el Ejemplo 218. MS experimental para Ci5H22 602 como (M+H)+ 319,4. UV: ? = 238,7.
Ejemplo 600. (S) -2- ( 2-aminopropilamino) -4-( ciclobutilamino) pirimidin-5-carboxamida 3.1 3.2 3.3 3.4
[1180] Etapa 1: A una solución agitada de alcohol 3,1 (4,16 g, 24 mmol) en diclorometano (30 mL) se añadió diisopropiletilamina (5,8 mL, 33 mmol) seguido por cloruro de metansulfon'ilo (2,23 mL, 29 mmol) que se añadió gota a gota. Después de 30 min, la reacción se diluyó con HC1 1 M y las dos fases se separaron. La capa orgánica luego se lavó con carbonato de sodio (saturado, acuoso) y se secó sobre sulfato de magnesio. La concentración dio como resultado el producto deseado 3,2 en forma de un sólido marrón claro (5,07 g, 83%). 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) : d 6,93 (d, 1H) , 4,03 (d, 2H) , 3,72 (m, 1H) , 3,15 (s, 3H) , 1, 37 (s, 9H) , 1, 06 (d, 3H) .
[1181] Etapa 2: esilato 3,2 (2,0 g, 7,9 mmol) se disolvió en 20 mL de DMF, se trató con azida sódica (2,6g, 39,5 mmol) y se calentó hasta 80 °C durante la noche. Al día siguiente, la reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se dividió con agua y acetato de etilo y las dos capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio. La concentración dio como resultado la azida 3.3 deseada que se usó inmediatamente para la siguiente etapa. XH RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 6,91 (d, 1H) , 3,62 (m, 1H) , 3,20 (d, 2H) , 1,38 (s, 9H) , 1,01 (d, 3H) .
[1182] Etapa 3: La azida cruda de la etapa anterior 3.3 se diluyó con metanol (20 mL) , se trató con aproximadamente 200 mg de Pd/C (10% en peso, húmedo) y se colocó bajo una atmósfera de hidrógeno. Después de tres horas, la mezcla se filtró a través de celite y se concentró para dar como resultado una cantidad cuantitativa de la amina deseada que se cristalizó después de reposar en un sólido ceroso blanco. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz ) : d 6,52 (d, 1H), 3,38 (m, 1H) , 2,42 (m, 2H) , 1,36 (s, 9H) , 0,96 (d, 3H) .
[1183] Etapa 4: Éter de benzotriazolilo 1,7, intermediario 3,4, diisopropiletilamina y 5 mL de 1,4-dioxano se combinaron y se calentaron hasta 120 °C durante la noche. La mezcla de reacción luego se enfrió, se diluyó con agua y se purificó por HPLC preparativa para dar el compuesto deseado. MS experimental para Ci2H2oN60 como (M+H)+ 265,2.
Ejemplo 601 : 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (4-bromo-3- (2H-l,2,3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1184] El compuesto 601-1 (150 mg, 0,46 mmol) se disolvió en 15 mL de DMF. A ello se añadió N-bromosuccinimida (NBS, 122 mg, 0,69 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente- durante 12 min. Todo el compuesto 601-1 se había convertido así en el correspondiente sulfóxido. A ello se añadió nuevamente N-bromosuccinimida (122 mg, 0,69 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. A ello se añadieron DIEA (0,4 mL, 2,3 mmol) y compuesto 601-2 (200 mg, 0,92 mmol). La mezcla se agitó a 90 °C durante 3 h para dar productos 601-3 y 601-4 en la relación de 4:1. La mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera x3, se secó, se concentró y se sometió a columna flash para aislar el compuesto 601-3 y compuesto 601-4.
[1185] El compuesto 601-3 se trató con 1:1 TFA y DCM a temperatura ambiente. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se concentró y se sometió a HPLC en fase inversa para aislar el compuesto del titulo. MS experimental para C19H22BrN90 como (M+H)+ 472, 3, 474, 3. ?=246, 294 nm.
Ejemplo 602 : 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- (3-bromo-5- (2H-l,2,3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1186] El compuesto 602-1 (tal como se preparó en el Ejemplo 601) se trató con 1:1 TFA y DCM a temperatura ambiente. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se concentró y se sometió a HPLC en fase inversa para aislar el compuesto del titulo. MS experimental para Ci9H22BrN90 como (M+H)+ 472, 3, 474, 3. ?=253, 272 nm.
Ejemplo 603: 2- ( ( IR, 2S) -2-aminociclohexilamino) -4- ( 4-cloro-3- ( 2H- -triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida Esquema :
[1187] El compuesto 603-1 (150 mg, 0,46 mmol) se disolvió en 15 mL de DMF. A ello se añadió N-clorosuccinimida (NCS, 300 mg, 2,2 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 80 min. A ello se añadieron DIEA (0,4 mL, 2,3 mmol) y compuesto 603- 2 (200 mg, 0,92 mmol). La mezcla se agitó a 90 °C durante 2 h para dar los productos 603-5 y 603-6 en la relación de 2,6:1. La mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera x3, se secó, se concentró y se sometió a columna flash para aislar el compuesto 603-5 y compuesto 603-6.
[1188] El compuesto 603-5 se trató con TFA a temperatura ambiente. La mezcla se agitó durante 30 m a temperatura ambiente. Se concentró y se sometió a HPLC en fase inversa para aislar el compuesto del titulo. MS experimental para C19H22CIN9O como (M+H) + 428, 3. ?=246, 291 nm.
Ejemplo 604 : 2- ( (IR, 2S) -2-aminociclohexilamino ) -4- (3-cloro-5- (2H-l,2,3-triazol-2-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1189] El compuesto 604-6 (tal como se preparó en el Ejemplo 603) se trató con TFA a temperatura ambiente. La mezcla se agitó durante 30 m a temperatura ambiente. Se concentró y se sometió a HPLC en fase inversa para aislar el compuesto del titulo. MS experimental para Ci9H22ClN90 como (M+H)+ 428, 3. ?=252 nm.
Ejemplo 605: (S) -4- (4- (1, 2, 3-tiadiazol-4-il) fenilamino) -2- (2-aminopropilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1190] El compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 424. UV ?=230, 306 nm. MS experimental para Ci6Hi8N8OS como (M+H) + 371,3. RMN (CD3OD) : d 9,23 (s, 1H), 8,54 (s, 1H) , 8,15 (m, 2H) , 7,81 (m, 2H) , 3,70 (m, 2H) , 3,46 (m, 1H) , 1,32 (d, J=6,8 Hz, 3H) ppm.
Ejemplo 606: (S) -2- (2-aminopropilamino) -4- ( 4- (tiazol-4-il) fenilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1191] El compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 424. UV ?=238, 311 nm. MS experimental para C17H19N70S como (M+H) + 370, 3. RMN (CD3OD) : d 9,05 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,51 (s, 1H) , 8,00 (d, J=8,0 Hz, 2H) , 7,89 (s, 1H) , 7,70 (d, J=7,2 Hz, 2H) , 3,70 (m, 2H) , 3,47 (m, 1H) , 1,30 (d, J=6, 0 Hz, 3H) ppm.
Ejemplo 607 (S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (quinoxalin-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1192] El compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 424. UV ?=242, 273 nm. MS experimental para Ci6Hi8N80 como (M+H)+ 339,3. RMN (CD3OD) : d 8,85 (s, 1H), 8,82 (s, 1H) , 8,86 (s, 1H) , 8,59 (s, 1H) , 8,10 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,84 (d, J=-8,4 Hz, 1H) , 3,75 (m, 2H) , 3,62 (m, 1H) , 1,38 (d, J=6,0 Hz, 3H) ppm.
Ejemplo 608 (S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (benzo [d] tiazol-5-ilamino) pirimidin-5-carboxamida
[1193] El compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 424. UV ?=246, 291 nm. MS experimental para Ci5Hi7N7OS como (M+H)+ 344,3. RMN (CD3OD) : d 9,34 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,56 (s, 1H) , 8,11 (d, J=8,8 Hz, 1H) , 7,52(d, J=8,8 Hz, 1H) , 3,78-3, 54 (m, 3H) , 1,29 (d, J=6, 4 Hz, 3H) ppm.
Ejemplo 609 (S) -2- (2-aminopropilamino) -4- (benzo [d] tiazol-6-ilamino) pirimidin-5-carboxamida H NH2
[1194] El compuesto del título se preparó usando la misma química mostrada para el Ejemplo 424. UV ?=241, 297 nm. MS experimental para Ci5H17N7OS como (M+H)+ 344,3. RMN (CD3OD) : d 9,24 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,41 (s, 1H) , 8,10 (d, J=8,8 Hz, 1H) , 7,72(d, J=8,8 Hz, 1H) , 3,71-3,44 (m, 3H) , 1,23 (d, J=6, 4 Hz, 3H) ppm.
Ejemplo 610
[1195] En este ejemplo se ilustran métodos para evaluar los compuestos de la invención, junto con los resultados obtenidos para tales ensayos. Las actividades in vitro e in vivo del syk humano de los compuestos inventivos pueden determinarse mediante diversos procedimientos conocidos en la especialidad, tales como un ensayo para establecer su capacidad de inhibir la actividad del syk del plasma humano. Las actividades potentes para la inhibición del syk humano presentadas por los compuestos inventivos pueden medirse mediante un valor de IC5o (expresado en nM) . El valor del IC50 es la concentración (expresada en nM) del compuesto, requerida para proveer una inhibición del 50% de la actividad proteolítica del syk humano. Cuanto más pequeño sea el valor del IC50, tanto más activo (potente) es un compuesto en cuanto a su actividad para inhibir el syk.
[1196] Un ensayo in vitro para detectar y medir la actividad de la inhibición contra el syk es como sigue: Inhibición de la fosforilación por syk de la actividad de tirosina
[1197] La potencia de las moléculas candidato para inhibir la fosforilación por syk de la actividad de tirosina se evalúa midiendo la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir la fosforilación, mediado syk, de la tirosina de un sustrato syk-especifico .
[1198] La fosforilación por SYK de la actividad de tirosina se mide mediante una tecnología LANCE™ Technology desarrollada por Perkin Elmer Life y Analytical Sciences (Boston, MA) . El LANCE™ se refiere a aplicaciones de fluorometría homogénea resuelta en tiempo, por lo cual se utilizan técnicas tales como ensayo de transferencia de resonancia de fluorescencia resuelta en tiempo (TR-FRET, time-resolved fluorescence resonance energy transfer assay) (Para los procedimientos en general, véase: Perkin Elmer Application Note- How to Optimize a Tyrosine Kinase Assay Using Time Resolved Fluorescence-Based LANCE Detection, wwww.perkinelmer.com/lifesciences). El principio de ensayo implica la detección de un sustrato fosforilante que utiliza transferencia de energía desde un anticuerpo, revestido con europio fosfoespecí fico, con respecto a estreptovidina-aloficianina como un aceptor.
[1199] Para ensayar la capacidad de las moléculas candidato para inhibir la fosforilación por SYK, de la actividad de la tirosina, se reconstituyen las moléculas en DMSO al 30%, y se las diluye serialmente 1:3 con la dilución final que contiene DMSO en ausencia de la molécula candidato. La concentración final del DMSO en el ensayo es del 3%. Los ensayos de quinasa se llevan a cabo como una reacción de dos partes. La primera reacción es una reacción de quinasa y que comprende una molécula candidato, la enzima SYK recombinante activa de longitud completa (Millipore, CA) y sustrato biotina-DEEDYESP-OH SYK-especifico etiquetado con biotina. La segunda reacción implica la terminación de la reacción de la quinasas y la adición simultánea de los reactivos de detección: el reactivo anti-fosfotirosina etiquetado con europio (Eu-W1024-PY100, Perkin Elmer, Boston, MA) y el reactivo de detección estreptavidina-aloficocianina (SA-APC, Prozyme, CA) . La reacción de la quinasa se lleva a cabo en una placa de microtitulación de 96 cavidades, negra, con fondo en "U". El volumen final de la reacción es de 50 i y contiene una concentración final de 1 nM de SYK activo, 550 nM de sustrato SYK, y 100 µ? ATP diluido en un tampón que contiene Tris 50 mM pH 7,5, MgCl2 5 mM, y DTT lmM. Se permite que la reacción continúe durante una hora a temperatura ambiente. El tampón de apagado contiene Tris 100 mM pH 7,5, NaCl2 300 mM, EDTA 20 mM, Brij35 al 0.02%, y BSA al 0,5%. Se añaden los reactivos de detección a la mezcla reactiva, con las siguientes diluciones: 1:500 para Eu-W1024-PY100 y 1:250 para SA-APC. Se termina la reacción de la quinasa mediante la división de 50 de tampón de apagado que contiene los reactivos de detección. Se permite que la detección continúe durante una hora a temperatura ambiente. La detección del sustrato fosforilado en la ausencia de inhibidores se mide mediante el instrumento TR-FRET, Analyst HT (Molecular Probes, Sunnyvale, CA) y se establece la condición para las mediciones mediante la utilización de CriterionHost Reléase 2.0 (Molecular Probes, Sunnyvale, CA) . Los ajustes utilizados son como sigue: excitación 360 nm, emisión 665 - 7.5 nm, divisor de haz 350 nm 50/50, flash 100 pulsos, retardo 60 us, integración 400' us, altura z 2 rain. La inhibición de la actividad de la SYK-tirosina quinasa se calcula en forma de la máxima respuesta observada en la presencia de inhibidor, en comparación con la correspondiente a la ausencia de inhibidor. Los IC50s fueron derivados mediante análisis de regresión no lineal.
[1200] Se utilizó la citometria de fosfo-flujo intracelular para ensayar la inhibición del compuesto de ensayo en cuanto a la actividad de Syk en cepas de células de linfoma no Hodgkin intactas Ramos y SUDHL-6. Se hicieron alícuotas de lOxlO6 células en desarrollo de fase logarítmica; se activa la Syk quinasas mediante la incubación de células durante 10 minutes con 3 pg/ml de anticuerpo especifico con respecto al receptor de las células B. Inmediatamente después se fijan las células en paraformaldehido al 1% durante 5 minutos a la temperatura ambiente, se lavó en solución tamponada de fosfato, y seguidamente se impermeabilizó mediante incubación durante dos horas en metanol helado. Se lavaron las células nuevamente en solución tamponada de fosfato, y seguidamente se incubó durante 30 minutos con anticuerpo especifico para el Erk fosforilado (Y204) y BLNK (Y84), que son indicadores de la actividad de la Syk quinasas, y el Syk fosforilado (Y352), que es una medida de la actividad de la quinasa de la familia de las Src. Todos los anticuerpos fueron adquiridos a BD Pharmingen (San José, CA) . Después de la incubación con anticuerpos, se lavaron las células nuevamente y se las sometió a citometria de flujo. En la Tabla 1 se muestran datos representativos que detallan la inhibición de la señalización del receptor de las células B por los compuestos, en forma de intervalos de IC50.
[1201] También se evaluaron los efectos antiproliferativos de los compuestos sobre las cepas de células de linfoma no Hodgkin SUDHL-4, SUDHL-6, y Toledo. El SUDHL-4 y el SUDHL-6 PRI requieren la señalización del receptor de las células B para su desarrollo y supervivencia, mientras que la cepa de células (que en este caso sirve como control negativo) no la requiere. Se hicieron alícuotas de células en cada cavidad de una placa de 96 cavidades, y se incubó con concentraciones crecientes de compuesto durante 72 horas, después de lo cual se determinó la supervivencia y la proliferación de las células mediante la utilización del ensayo de MTT (Chemicon International, Inc., Temecula, CA) , para lo cual se siguieron los procedimientos indicados por el fabricante. Los datos se detallan en las Tablas y en las figuras de la presente en forma de valores de IC50 más o menos la desviación estándar, obtenidos 5 ó 6 experimentos independientes .
[1202] Se evaluó la inducción de la apoptosis en cepas de células B de linfoma no Hodgkin, SUDHL-4, SUDHL-ß, y Toledo, mediante el marcador de apoptosis Caspase 3. Se incubaron las células con compuesto 1, 3 ó 10 µ? durante 24, 48, y 72 horas. A la conclusión de cada instante de tiempo, se procesaron las células para el análisis de citometria de flujo, para lo cual se utilizaron los protocolos relacionados con el Monoclonal Rabbit Anti-Active Caspase-3 Antibody Kit (Kit de anticuerpo Caspasa 3 activo del conejo, monoclonal) (BD Pharmingen) . Los datos tomados de dos experimentos independientes se han presentado en las Tablas 7A y 7B, que representan el porcentaje de células totales que experimentan una apoptosis después de incubación bajo las condiciones indicadas.
[1203] La actividad de Syk no se requiere solamente para la señalización, proliferación y supervivencia de las células B, como se muestra, sino que también es critica para la activación celular después de la ligación cruzada del receptor de las células B. La activación de las células B conduce a una expresión incrementada de la superficie de las células de varias proteínas que intervienen en la señalización de las células, en la presentación del antígeno, y en la adhesión. Entre los mismos, CD80, CD86, y CD69 se miden comúnmente para determinar el status de la activación de las células B. Para ello se hicieron alícuotas de células B primarias de ratón tomadas del bazo, y se las incubó con concentraciones crecientes del compuesto (de 0,05 a 2 µ ) en la presencia de IgD anti ratón de caprino ( eBiosciences , Inc., San Diego, CA) durante 20 horas para ligar cruzadamente el receptor de las células B. A continuación se lavaron las células y se las incubó durante 30 minutos sobre hielo con anticuerpos específicos para los marcadores de activación de las células, CD80, CD86, y CD69. Las células B fueron identificadas entre la población reunida mediante teñido con el marcador de las células B, el CD45RO. Todos los anticuerpos fueron adquiridos a BD Pharmingen. En la Tabla 8 se ilustra el intervalo de IC50 en el que estos compuestos inhibieron la activación inducida por receptor de las células B, de las células B primarias de ratón.
[1204] En la siguiente tabla, la actividad en los ensayos del Syk y/o Jak se provee como sigue: +++++ = IC50 < 0,0010 µ?; ++++ = 0,0010 µ? < IC5o < 0,010 µ?, +++ = 0,010 µ? < IC50 < 0,10 µ?, ++ = 0,10 µ < IC50 < 1 µ?, + = IC50 > 1 µ?.
Tabla 6a: Ejemplo uv P MH+ Syk IC50 1 240, 297 452, 6 453,2 ++ 2 236, 312 459, 6 460, 1 ++ 3 239, 304 392, 5 393, 2 ++ 4 231, 311 410,5 411,2 +++ 5 238, 337 403, 5 404,2 +++ 6 239, 311 403, 5 404, 2 +++ 7 241, 330 403,5 404,2 +++ 8 243. 308 404 ,5 405, 2 +++ 410,2 ' 9 239, 313 409,5 +++ 410, 4 10 233, 308 410,5 411,2 +++ 11 240, 311 403, 5 404, 2 +++ 405, 2 12 245 404 , 5 +++ 405, 3 13 240, 312 403, 5 404, 2 +++ 14 240, 318 409, 5 410, 2 +++ 15 243, 332 409,5 410, 2 +++ 16 240, 302 392,5 393,2 +++ Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 393, 3 393, 4 17 248 403,5 404,2 ++++ 412,2 18 243, 294 411,5 +++ 412, 3 19 242, 307 404,5 405, 3 +++ 20 244, 293 425, 5 426, 3 ++ 21 239, 327 404, 5 405, 4 +++ 22 235, 319 404, 5 405, 4 +++ 23 239, 334 403,5 404, 4 +++ 24 242, 300 393, 5 394, 4 +++ 25 241, 300 406, 5 407, 4 +++ 26 241, 296 397.4 398, 4 ++ 393,2 27 246, 292 392,5 +++ 393, 5 28 246, 287 409,5 410,5 ++ 29 239, 309 429,5 430, 4 +++ 30 241, 236 460, 5 461, 4 ++ 31 247 392, 5 393, 4 ++++ 411,3 32 410, 5 ++ 411,5 33 427,5 428,4 +++ Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 34 410, 5 411, 3 +++ 35 424, 5 425, 3 ++ 201, 6, 36 240, 4, 410,5 411, 09 ++ 289, 0 202, 8, 37 409,5 410,2, 411,2 ++++ 245,2 240,4, 38 427,5 428,5, 429,4 +++ 312, 8 206, 3, 39 242,8, 409,5 410,2, 411,4 ++++ 291, 4 201, 6, 40 244,0, 409,5 410,5, 411,6 ++++ 277,1 242,8, 41 403, 5 404,2, 405,3 +++ 292, 6 244,0, 42 404,5 405, 3, 406,5 +++ 289, 0 43 246, 3 404, 5 405,2, 406,2 +++ 44 242,8 406,5 407,2, 408,2 +++ 45 247, 5 433, 5 434,3, 435,3 +++ Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 240, 4, 46 433, 5 434,3, 435,3 +++ 306, 8 240, 4, 47 425,5 426, 3, 427,3 +++ 296, 1 48 418, 5 419,5 (M+l) +++ 49 438, 6 439, 6 (M+l) ++ MS: 394,2 (M + 50 393,5 +++ H) MS: 394,3 (M + 51 393, 5 +++ H) MS: 395,28 (M 52 394, 4 ++ + H) MS: 394,28 (M 53 393, 5 +++ + H) MS: 409,28 (M 56 408, 5 +++ + H) MS: 424,37 (M 57 423,5 +++ + H) MS: 409,32 (M 58 408, 5 +++ + H) MS: 393,0 59 392, 5 ++++ (M+H) Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 MS: 410 ( + 60 408, 5 +++ H) MS : 424 , 5 (M + 61 423,5 +++ H) MS: 407, 5 (M + 62 406, 5 +++ H) MS: 410,5 (M + 63 409,5 +++ H) MS: 421, 5 (M + 64 420, 5 ++ H) MS : 425, 4 (M + 65 424, 5 ++++ H) MS : 395, 5 (M + 66 394, 4 ???? H) MS: 409,5 (M + 67 408, 5 +++ H) MS: 409,5 68 408,5 +++ (M+H) MS: 409,5 69 408, 5 +++ (M+H) MS: 392, 5 (M + 70 391, 5 ++++ H) Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 MS: 392, 4 (M + 71 391, 5 +++ H) MS: 407,5 (M + 72 406, 5 +++ H) MS : 396, 6 (M + 73 395, 5 +++ H) MS: 412,5 74 411,5 +++ (M+H) MS: 395, 3 (M + 75 394, 4 +++ H) MS: 395,2 (M + 76 394, 4 ++++ H) MS: 395, 2 (M + 78 394, 4 +++ H) 79 243, 302 478,5 479, 4 ++ 80 246, 301 594, 5 595, 4 + 81 247 477.6 478,4 + 82 241 392, 5 393, 4 ++++ 83 241, 319 424 ,5 425, 3 +++ 84 246, 293 406,5 407, 3 ++ 85 243, 285 406, 5 407, 3 ++ 86 244 393, 5 394, 3 ++++ Ejemplo uv PM MH+ Syk IC50 394 394 (M+H) 394,3 87 250 393, 5 394,8 (M +H) ++++ ES(+ ) MS ES(+ ) MS [M+l]=394 88 242, 300 423, 5 424, 3 +++ 89 242, 301 422, 5 423, 3 +++ 90 242, 300 436, 5 437, 3 +++ 91 249, 301 489,6 490, 3 + 92 247 411, 4 412, 3 +++ 93 259 418, 5 419, 4 + 94 252 418, 5 419,4 ++ 95 244, 288 418,5 419, 4 ++ 96 245, 296 433, 5 434, 4 +++ 98 249 422, 5 423,4 +++ 101a 250 394, 4 395.3 +++ 101b 250 408, 5 409, 3 ++++ 102 246, 304 407, 5 408, 3 +++ 103 249 442,5 443,3 +++ 104a 240, 295 442,5 443, 4 +++ Ejemplo ÜV PM MH+ Syk IC50 104b 240, 295 442,5 443,4 +++ 105a 234, 303 443,5 444,4 +++ 105b 234, 303 443,5 444,4 +++ 106 240, 292 442,5 443,3 ·)-++ 107 243. 290 459, 6 460, 3 ++ 108 245 486, 6 487,5 ++ 109 263 453, 6 454, 3 +++ 110 249 453,6 454, 3 +++ 111 240, 311 406,5 407, 3 +++ 113 239, 314 406,5 407, 3 ++++ 114 239, 310 393, 5 394, 3 +++ 115 250 411,4 412, 3 +++ 116 244, 295 423, 5 424,3 ++++ 117 249 423, 5 424, 3 ++++ 118 243. 281 407, 5 408,3 ++++ PM = 407,47, 119 248 407, 5 ++++ M+H=408, 8 405, 3 120 249 404, 5 +++ 405, 4 121 231, 314 404, 5 405, 3 +++ 122 249 406, 5 407, 3 ++++ 123 247 406, 5 407, 3 +++ Ejemplo uv PM MH+ Syk IC50 124 247 442,5 443, 3 +++ 125 245, 303 442,5 443, 3 +++ 384, 1 127 241, 298 383,5 +++ 384, 2 128 246, 295 367, 4 368, 1 +++ 129 246, 295 397.5 398, 1 +++ 130 239, 309 365, 4 366, 2 ++++ 378, 1 132 241, 283 377, 5 ++++ 378,2 (M+l) 133 243, 294 366, 4 367, 2 +++ 134 246, 292 383, 5 384, 2 +++ 135 250 366,4 367, 1 +++ 136 240, 294 384, 4 385.1 +++ 137 242 378, 4 379,2 +++ 138 243 384, 5 385, 1 ++ 139 391, 5 392,2 (M+l) +++ 140 377,5 378, 34 +++ 142 377.5 378,34 (M+l) ++ 143 476,6 477,40 (M+l) +++ 144 406,4 407,28 (M+l) ++ 146 381, 4 382,35 (M+l) +++ 147 439,5 440,38 (M+l) ++ Ejemplo uv PM MH+ Syk IC50 148 397, 4 398,31 (M+l) +++ 149 409,5 410,36 (M+l) +++ 150 402, 5 403,32 (M+l) +++ 151 395,5 396,35 (M+l) ++++ 152 393, 5 394,14 (M+l) ++++ 153 411,5 412,5 (M+l) +++ 154 397, 4 398,5 (M+l) ++ 155 407, 5 408,6 (M+l) +++ 156 468, 6 469, 4 + 378,2 (M+l) 157 377, 5 378.5 (M+l) ++++ 378.6 (M+l) 158 380, 5 381,17 (M+l) ++++ 159 380,5 381,17 (M+l) ++++ 160 380, 5 381,17 (M+l) +++ 161 462, 6 463,32 (M+l) +++ 162 397, 5 398,2 (M+l) +++ 163 379, 5 380,4 (M+l) +++ 165 432, 5 433,2 (M+l) ++++ 166 411,5 412,2 (M+l) ++ 167 245 495, 6 496, 3 +++ 168 249 499, 6 500, 3 +++ Ejemplo uv PM MH+ Syk IC50 496 169 244 495.6 +++ 496, 3 170 246 499, 6 500, 3 +++ 488 171 247 487,6 +++ 488,3 172 246 487,6 488,3 +++ 173 238, 309 487,6 488,3 +++ 174 241, 314 487,6 488,3 +++ 409 175 246 408,5 +++ 409, 4 176 241, 290 410,5 411, 4 ++ 409, 3 177 239, 309 408,5 +++ 409, 4 178 243, 296 410, 5 411, 3 ++ 179 232, 306 466, 6 467, 3 ++ 180 238, 290 418, 5 419, 3 ++ 181 241, 291 426, 5 427, 3 +++ 183 244, 297 439,5 440, 3 ++ 243,8, 185 456,5 457, 2 ++ 290, 0 401, 2, 186 400, 4 ++ racemato Ejemplo uv PM MH+ Syk IC50 242, 6, 457,2, 187 456, 5 ++ 290, 0 racemato 242,6, 401,2, 188 400, 4 +++ 290, 0 racemato 241, 2, 189 330, 4' 331, 4 ++ 292, 1 237, 6, 190 329, 4 330, 3 ++ 313, 1 240,0, 191 392, 5 393, 4 +++ 303, 2 244, 9, 192 346, 5 347, 3 ++++ 326, 1 247, 3, 193 346, 5 347, 3 +++ 325, 6 240, 0, 194 391, 5 392, 4 +++ 314, 3 244,0, 195 446, 6 447,3, 448,4 +++ 316, 4 240,4, 196 447,5 448,1, 449,2 ++ 304, 5 239, 3, 197 402, 5 403, 4 +++ 308, 7 Ejemplo uv PM MH+ Syk IC50 243, 6, 198 393, 5 394,4, 395,5 ++++ 286, 5 245,2, 199 393, 5 394,4, 395,4 ++ 293, 8 200 239, 9 393, 5 394, 5 ++ 243, 6, 202 407, 5 408, 4 +++ 287,1 241,4, 203 412, 5 413,1, 414,2 ++ 288,8 240, 5, 204 398, 5 399,2, 400,2 +++ 287,8 238, 1, 205 370,5 371,2, 372.3 +++ 292, 6 236, 9, 206 386, 5 387,1, 388,2 +++ 286, 6 240,4, 207 418, 5 419,3, 420,3 ++ 292, 6 209 376,5 377,1, 378,5 +++ 227, 5, 210 406, 5 407,2, 408,5 ++++ 319, 9 212, 2, 211a 394, 5 395,1, 396,3 ++++ 244,0, Ejemplo uv PM MH+ Syk IC50 306, 8 223, 9, 211b 419,5 420,2, 421,4 + +++ 318, 8 5 219,2, 212 235, 7, 433, 5 434,3, 435,3 ++ + 318, 8 1 1 218, 0, 213 447, 5 448,2, 449,4 ++++ i 1 314,0 i · 1 (10 223, 9, 214 410, 9 411,2, 413,1 ++ 293, 8 ! i I ! 215 455, 4 455,1, 457,1 ++++ í 216 381, 4 382, 3 +++ 1 ! 220, , 217 489, 6 490,4, 491,4 ++++ ¡ ¡15 315, 2 11 i ; " i µ 219,2, 11 1 ¡ 11 ! : 218 241, 6, 379,5 380, 4 ++++ 11 336, 7 219 395.5 396, 3 ++++ ¡20 i ; 216,7, j 1 219 239, 9, 365, 4 366,3, 367,4 ++++ + ! 1 ''· 11 330, 3 1 ! 220 210, 6, 380, 5 381, 5 ++++ 1 ! 1 í I ' I ¡ Ejemplo UV P MH+ Syk IC50 203, 9, 230 236, 9, 367, 4 368, 4 +++ 294, 9 220, 2, 231 393, 5 394, 4 ++++ 242, 6 PM = 462,5; 232 210, 243 462, 6 +++ M+l = 463, 3 PM = 432, 5, 233 248 432, 5 +++ M+l = 433, PM = 492, 6, 234 245 492, 6 ++ M+l = 493, 4 PM = 432,5, 235 241 432, 5 +++ M+l = 433,3 445 236 245, 276 444 ,5 PM = 444,5, ++++ M+l = 445,3 PM = 432,5, 237 244, 288 432, 5 +++ M+l = 433,3 PM = 420,5; 238 245 420,5 ++++ M+l = 421,3 PM = 420,5; 239 242 420, 5 +++ M+l = 421,3 Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 PM = 462,5; 240 246 462, 6 +++ M+l = 463,3 PM = 438,5; 242 245 438, 5 +++ M+l = 439, 3 243 244, 288 462, 6 463, 3 +++ PM = 460,5; 245 211, 243 460, 5 ++++ M+l = 461,2 PM = 460,5; 246 242, 316 460, 5 +++ M+l = 461,2 216, 238, PM = 473,6, 247 473,6 +++ 303 M+l = 474, PM = 485,6; 248 252 485, 6 +++ M+l = 486,4 PM = 485, 6; 249 247 485,6 +++ M+l = 486,4 PM = 471,6; 250 246 471,6 +++ M+l = 472.4 PM = 485, 6; 251 248, 282 485.6 +++ M+l = 486, 4 PM = 485, 6; 252 245 485,6 +++ M+l = 486, 4 253 239, 274, 446, 5 PM = 446, 5; ++++ Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 296 M+l = 447,3 PM = 480, 6; 254 240, 285 480,6 + M+l = 481, 4 PM = 480, 6; 255 246 480,6 ++++ M+l = 481, 4 PM = 480,6; 256 250 480,6 +++ M+l = 481,4 257 235, 308 480,6 481,4 +++ 259 239, 313 480,6 481,4 +++ 260 239, 302 453, 6 454, 4 ++ 261 240, 301 453, 6 454,4 ++ 262 241, 302 453, 6 454, 4 ++ 212, 236, 264 416, 5 417, 4 +++ 322 210, 244, 265 416, 5 417, 3 +++ 289 266 238, 296 429,5 430, 3 +++ 267 250 393, 5 394, 3 ++ 268 250 393, 5 394, 3 +++ 269 252 393, 5 394, 3 ++ 270 252 393, 5 394, 3 + 272 252 393, 5 394, 3 + Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 273 251 379, 4 380, 3 + PM = 461,4, 274 259 461, 5 +++ M+l = 462,2 PM = 407,47, 275 239, 296 407, 5 +++ M+l = 408, PM = 406,48, 276 238, 296 406,5 ++ M+l = 407,5 PM = 461,4, 277 245, 295 461, 5 +++ M+l = 462, PM = 461,4, 278 245, 295 461,5 ++ M+l = 462,4 279 244 352, 4 353,2 ++++ 280 236, 310 352, 4 353,2 +++ 281 242, 289 354, 5 355,3 +++ 282 240, 290 368, 5 369, 3 +++ 283 250 407,5 408, 4 +++ 284 391,4 392, 4 +++ PM = 411,44, 285 242, 305 411,4 +++ M+l = 412,2 377, 1 292 376, 5 377,1 (M+l) ++++ 377,3 (M+l) Ejemplo uv PM MH+ Syk IC50 377,1, 378,2 294 245, 4 379, 5 380, 4 ++ 295 249 379, 4 380, 4 ++ 296 240, 287 326, 4 327, 4 ++ 217, 239, 297 340, 4 341, 4 +++ 290 298 249 395,4 396, 3 +++ 299 250 395, 4 396, 3 ++ 300 246 394,4 395, 3 +++ 301 249 406, 5 407, 3 ++ 302 240, 288 342,4 343, 3 +++ 303 240, 290 356, 4 357, 3 ++++ 304 240, 283 358, 4 359, 3 +++ 305 241, 287 342, 4 343, 3 ++ 306 239, 292 376, 4 377, 3 ++ 308 240, 292 358, 4 359, 2 +++ 310a 243, 294 356, 4 357, 3 ++ 310b 243, 290 356, 4 357, 3 +++ 311 249 409,5 410, 3 +++ 312a 247, 295 370, 5 371, 3 ++ 312b 242, 289 370, 5 371, 3 ++ 314 240 356, 4 357, 3 ++ Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 315 246, 303 382, 4 383, 1 +++ 316 245, 302 340,3 341, 1 + + 317 249, 298 402, 4 403, 1 + + 394, 1 318 241, 283 393, 5 ++ + 394,2 (M+l) 319 243, 303 399,5 399, 1 +++ 320 245 381, 4 382, 1 +++ 321 247, 301 382, 4 383, 2 +++ 322 249, 285 420,5 421, 1 + 323 250, 300 420, 5 421, 1 + + 324 243, 296 468, 6 469, 2 ++ 325 244, 297 382, 4 383,2 +++ 327 245, 299 340,3 341,2 ++ 328 245, 296 413,5 414,2 ++ 330 244, 303 357, 4 358,2 ++ 331 249, 292 357, 4 358, 2 ++ 332 247, 295 399,5 400, 2 +· ++ 333 250 340, 3 341, 1 ++ 334 252 382, 4 383, 1 +++ 335 224 339, 4 340, 1 ++ 336 243, 310 400, 4 401, 1 + + 337 243, 312 358, 4 359, 1 + + Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 338 243 394, 4 395.2 +++ 339 242 352, 4 353, 2 ++ 340 241, 308 408,5 409, 2 ++ 341 240, 314 425, 5 426,2 +++ 342 233, 311 426, 5 427,2 +++ 343 240 400, 5 406, 1 ++ 344 244, 314 419,5 420, 2 ++ 345 244, 294 427, 5 428,3 +++ 346 240, 310 445,5 446, 3 ++ 347 246 427,5 428,3 ++ 349 247, 292 411,5 412, 3 ++ 350 241, 314 419,5 420,3 351 250 419,5 420,3 ++ MS: 396, 4 (M + 352 243, 284 395.5 +++ H) 353 250 408, 5 409, 3 ++ MS: 368,17 (M 354 367, 4 ++ + H) MS: 368,29 (M 355 367, 4 ++ + H) 356 450, 5 451,35 (M+l) +++ 357 251 409, 5 410, 3 ++ Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 Turbopul- 379 353, 4 veriza-ción MS ++ [M+l] =354 Turbopul- 380 358,4 veriza-ción MS ++ [M=l]=359 Turbopul- 381 342, 4 veriza-ción MS ++ [M+l] =343 Turbopul- 383 360, 4 veriza-ción ++ [M+l]=361 Turbopul- 385 328, 4 veriza-ciórT MS ++ [M+l] =329 ES (+) MS [M+H]=315 386 314, 3 Turbopul- ++ veriza-ción MS [M+l]=315 Turbopul- 387 330, 3 ++ veriza-ción MS i 51 Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 [M+l]=331 Turbopul- veriza-ción 1 389 422, 4 ++ 5 espec. de masa [M+l] =423 ) . 1 Turbopul- i 1 1 390 392, 4 veriza-ción MS ++ 11 ? I 11 [M+l] =393 1 ! !IO Turbopul- 1 i 11 11 391 430, 4 veriza-ción ++ 11 11 1 1 I i [M+l] =431 i t 1 i i Turbopul- 392 441,3 ++ 1 verización=442 1 1 ¡15 Turbopul- 1 ! i ; 1 1 393 344,4 veriza-ción MS ++ 1 i 1 ' 1 1 [M+l]=345 i : l Turbopul- 1 ' · . ¡ ? 394 344, 4 veriza-ción MS ++ 1 !20 [M+l] =345 ! 1 1 i 1 i 1 1 Turbopul- 1 ¡ ? ? 1 I 396 330, 3 veriza-ción MS ++ 11 11 1 1 [M+l]=331 ¡ i 1 i I t I Ejemplo uv PM MH+ Syk IC50 Turbopul- 397 395,2 veriza-ción MS ++ [M]=395 Turbopul- 398 346, 3 veriza-ción MS ++ [M+l]=347 Turbopul- 399 404, 5 veriza-ción MS ++ [M+l] =405 Turbopul- 400 424,9 veriza-ción MS ++ [M+l]=425 Turbopul- 401 408, 4 veriza-ción MS ++ [M+l] =409 Turbopul- 402 404 , 5 veriza-ción MS ++ [M+l]=405 Turbopul- 404 391, 4 veriza-ción MS ++ [M+l]=392 405 420,5 Turbopul- ++ Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 327, 1 214,9, 445 241,7, 370, 4 371, 3 ++++ 324, 1 203, 9, 447 244,0, 395, 5 396, 4 ++++ 303, 3 208,6, 240,4, 448 384, 4 385, 4 +++ 283, 1, 324, 7 221, 6, 449 409,5 410,4 +++ 336, 7 222, 8, 450 409,5 410,4 +++ 336, 7 221, 6, 451 409,5 410, 4 +++ 335, 5 219,2, 452 239, 3, 381,5 382,4, 383,5 +++ 327, 1 Turbopul- 454 439,9 +++ verización MS Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 verización MS [ +l]=463 1 PM = 367,4, 465 246 367, 4 ++ + ? 5 M+l = 368,3 ¡ i 467 238, 284 314, 4 415, 4 ++ + i 1 468 240, 290 328, 4 329, 4 +++ 1 1 1 469 248 367, 4 368, 4 +++ + I 470 248 378, 4 379, 4 ++ + i ! ra 471 246 366, 4 367, 4 ++ + 1 i o 1 ! 473 250 379, 4 380, 4 +++ 1 i t l i 478 245 421,4 422, 3 +++ 11 479 240 340, 4 341, 5 +++ 1 219,2, 15 481 240,4, 367, 5 368, 4 ++++ 1 331, 9 1 220, 2, 1 482 241,4, 365, 4 366, 4 ++++ 1 330, 6 ' 1 20 219,2, 483 240,4, 353, 4 354, 4 +++ + 333, 1 ! 484 219,3, 397, 5 398, 4 ++ + + E emplo uv P MH+ Syk IC50 240, 3, 510 344, 4 345,4, 346,5 + + + 290, 0 511 218 383, 5 384,4 +++ 211,3, ! 5 1 512 242, 3, 432, 5 433, 4 +++ ? 330, 9 1 202, 8, ? 513 392, 5 393, 4 ++ + 1 246, 3 I 1 1 1 1 i ,10 221,6, 514 396,5 397,0, 398,4 ++ + 315, 2 ¡ 1 203, 4, 515 454, 5 455, 4 ++ + 246, 6 i > 222, 8, 516 423, 5 424,4, 425,1 ++ + 316, 4 i : 1 1 208, 8, 1 I 517 241,7, 370, 4 371, 5 + + + j i i 316, 7 i 240,5, 518 328, 4 329,5 ++ + ¡20 288, 4 1 i ¡ 241, 1, 1 : 519 314, 4 315, 4 + + + 286, 5 1 1 t 520 206, 3, 356, 4 357, 3 ++ + 1 Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 240,4, 311, 6 203,8, 521 235, 5, 376, 4 377,30, 378,42 +++ 290, 0 218, 0, 522 479,5 480,4 +++ 311, 6 239,3, 523 330, 3 331,1, 332,1 +++ 289, 0 241, 1, 524 354, 5 355, 5 +++ 287,7 241,7, 525 328, 4 329, 4 +++ 285.9 219,2, 367,1, 368,2 526 366, 4 +++ 282, 8 367, 4 241,7, 527 326, 4 327, 4 +++ 286, 5 241,4, 530 340, 4 341, 4 +++ 287,7 531 242, 8 393, 5 394, 4 +++ 240, , 532 399,5 400,2, 401,5 +++ 290, 2 Ejemplo UV P MH+ Syk IC50 204, 6, 533 393,5 394, 4 +++ 251, 5 242,3, 535 383,4 384, 3 +++ 5 285, 4 239,3, 536 344, 4 345,1, 356,1 +++ 285, 4 I 202, 8, 537 238, 1, 370, 4 371, 3 +++ !lO 308, 0 1 208, 6, 1 ' ! i 538 240,4, 384, 4 385.3 +++ i ? 1 319, 9 203, 9, 539 367, 4 368, 4 ++ + ¡15 249, 9 i ! i 202, 1, 540 406, 5 407, 4 +++ 246, 0 1 215, 7, ! I I 543 240, , 364, 8 i 365,2, 367,1 +++ ¡20 289, 0 239, 9, 546 342, 4 343, 5 + + + 1 j 1 ! 284,7 l 547 238, 1, 370, 4 371, 4 ++ + Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 240,4, 311, 6 238, 1, 564 360, 4 361,2, 362,3 ++ 292, 6 232, 6, 565 373, 4 374.3 +++ 287,8 239,3, 566 356, 5 357, 4 ++ 287,8 204, 6, 567 379, 4 380, 4 ++ 250, 9 569 242, 8 384, 4 385,2, 386,4 ++ 238, 1, 570 344, 4 345, 1, 346,2 ++ 290, 2 243.6, 581 373, 4 374, 3 ++ 292, 1 239, 3, 582 342, 4 343, 4 ++ 285, 4 235, 7, 583 376,4 377,1, 378,2 ++ 285, 4 240,4, 584 383.5 384,14, 385,06 ++ 287,8 585 235, 7, 374.4 375,2 ++ Ejemplo UV PM MH+ Syk IC50 315, 2 230, 1, 586 394, 4 395,4, 396, 3 + + 311, 2 587 245, 4 368, 4 i 5 369,2, 370, 1 + + 588 373, 5 374,3, 375,3 ++ 202, 8, 589 239, 9, 390, 4 391, 4 ++ 282, 2 i10 238, 1, 590 415, 5 416,2, 417, 4 + + 293, 8 ! 239, 3, i 591 374.4 375,3 ++ 292, 7 592 240, 4 356, 5 357, 4 ++ ¡15 241, 7, 593 408, 5 409, 4 ++ 288, 4 1 1 203, 9, i 1 1 594 235, 7, 357, 4 358, 3 ++ 292, 6 ¡20 595 239, 3 358, 4 359,2, 360,4 + + í 11 I I 1 598 248, 7 395,5 396,4 ++ I I Inhibición de la función de plaquetas, mediada por GPVI, in vitro
[1205] La capacidad de las moléculas candidato -de inhibir las funciones, mediadas por syk, de las plaquetas, se ensaya midiendo la inhibición de la movilización o agregación de calcio de las plaquetas humanas inducidas por convulxina del agonista GPVI especifico. La movilización del calcio se evalúa en plaquetas humanas lavadas en un formato de microtitulación de 96 cavidades. Se evalúa la agregación en un ensayo de microtitulación de 96 cavidades (Para una idea general de los procedimientos, Véase Jantzen, H. M. et al. (1999) Thromb. Hemost. 52:111-117) o mediante agregometria de transmisión de luz en cubeta estándar, utilizándose plasma rico en plaquetas humanas (PRP, platelet-rich plasma) .
Inhibición de la movilización de calcio in vivo, mediada por convulxina
[1206] La inhibición de la movilización de calcio inducida por convulxina fue determinada en plaquetas humanas lavadas mediante el uso del kit FLIRP Calcium 3 Assay Kit (Molecular Devices, Sunnyvale, CA) . Para la preparación de las plaquetas lavadas, se reúne sangre venosa humana de voluntarios saludables, libres de droga, en ACD (citrato de sodio 85 mM, glucosa 111 mM, ácido cítrico 71,4 mM) que contiene PGI2 (1,25 mi de ACD que contiene PGI2 0,2 µ? final; el PGI2 era de Sigma, St. Louis, MO) . El plasma rico en plaquetas (PRP, platelet-rich plasma) se prepara mediante centrifugación a 160 X g durante 20 minutos a temperatura ambiente. Se preparan plaquetas lavadas mediante centrifugación de PRP durante diez minutos a 730 g y se resuspende la pella de plaquetas en CGS (citrato de sodio 13 m , glucosa 30 mM, NaCl 120 mM, 2 mi de CGS/10 mi de volumen de sangre original) . Después de incubación a 37 °C durante 15 minutes, se reúnen las plaquetas por centrifugación a 730 g durante 10 minutos y se resuspende con una concentración de 3 X 108 plaquetas/ml en tampón Hepes-Tyrode (Hepes 10 mM, NaCl 138 mM, glucosa 5,5 mM, KC1 2,9 mM, NaHC03, 12 mM, pH 7,4). Esta suspensión de plaquetas se mantiene durante >45 minutos a la temperatura ambiente antes de su uso en ensayos de movilización del calcio.
[1207] Para los ensayos de movilización del calcio en placas de 96 cavidades, se incubaron volúmenes iguales de 3 X 108 plaquetas lavadas/ml con volúmenes iguales de reactivo de ensayo A de calcio 3 suspendido en solución de sal equilibrada de Hank 1 X, pH 7,4, tampón Hepes 20 mM. El volumen total de reacción de 0,2 ml/cavidad incluye una mezcla de 1,5 x lOVml plaquetas lavadas/reactivo de ensayo A calcio 3, Eptifibatide 10 µ? (Millennium Pharmaceuticals Inc, Cambridge, MA) , diluciones seriadas (1:3) de los compuestos de ensayo en DMSO al 0,75%. Se añade DMSO solo a 1 cavidad de cada 8 conjuntos de manera de permitir una lectura máxima de la movilización del calcio. Después de veinte minutos de preincubación a la temperatura ambiente, se carga la lectora de microplaca de 96 cavidades en el FlexStation (Molecular Devices, Sunnyvale, Calif) . Mediante SOFTMax Pro se establecen las condiciones experimentales del FlexStation para medir la movilización del calcio. Los ajustes utilizados se detallan en lo que sigue. Modo de ensayo de los parámetros de fluorescencia: flex, excitación 485 nM, 525 nM con un corte de 515 nM; sensibilidad PMT de los parámetros-6, altura de la pipeta 230 µ?, tiempo de lectura 2 minutos y 40 segundos, intervalos de lectura 2 segundos, temperatura -23-25°C. Después de dieciocho segundos de lectura de linea de base, se inicia la movilización del calcio mediante la adición de convulxina hasta una concentración final de 125 ng/ml. Se calculó la inhibición de la movilización del calcio como la máxima respuesta observada en la presencia del inhibidor, comparado con la respuesta en ausencia del inhibidor. Los IC50S fueron derivados mediante análisis de regresión no lineal.
Inhibición de la agregación in vitro, mediado por las plaquetas
[1208] Para la preparación de plasma rico en plaquetas humanas para ensayos de agregación se reunió sangre venosa humana de voluntarios saludables libres de drogas, en citrato de sodio al 0,38 % (0,013 M, pH 7,0 final). Se preparó plasma rico en plaquetas (PRP, platelet-rich plasma) mediante centrifugación de sangre entera 160 x g durante 20 minutos a temperatura ambiente. Se retiró la capa de PRP, se transfirió a un tubo nuevo, y se ajustó el conteo de las plaquetas, de manera de lograr una concentración de las plaquetas de ~3 x 108 plaquetas/ml mediante el uso del plasma pobre en plaquetas (PPP, platelet-poor plasma). El PPP se prepara por centrifugación de la muestra restante de sangre (después de la remoción del PRP) durante 20 minutos a 800 x g. Esta preparación de PRP puede utilizarse seguidamente para ensayos de agregación sea en una placa de 97 presiones sea en agregometria de cubetas estándar.
[1209] La inhibición de la agregación inducida por convulxina se determina en placas de microtitulación de 96 cavidades de fondo plano, para lo cual se utiliza un dispositivo de sacudidas de microtitulación y una lectura de placas, de manera similar al procedimiento descrito por Frantantoni et al., Am. J. Clin. Pathol. 94, 613 (1990). Todos los pasos se llevan a cabo a temperatura ambiente. Para la agregación en placas de 96 cavidades se utiliza plasma rico en plaquetas (PRP) ; el volumen total de la reacción de 0,2 ml/cavidad incluye 190 µ? de PRP (~3 x 108 plaquetas/ml, véase en lo que precede) , y 5 µ? de sea dilución serial de compuestos de ensayo en DIVISO al 30% sea tampón (para las cavidades de control) . Después de veinte minutos de preincubación a la temperatura ambiente se añaden 5 µ? de 320 ng/ml de solución de agonista convulxina a cada cavidad de manera de obtener una concentración final de 8 ng/ml de convulxina. Seguidamente se someten las placas a agitación durante cinco minutos sobre un dispositivo para sacudir placas de microtitulación, y se obtiene una lectura de cinco minutos en la lectora de placas de microtitulación (Softmax, Molecular Devices, Menlo Park, Calif.). Se calcula la agregación a partir de la disminución de OD a 650 nm a t=5 minutos. Se derivaron las IC50 mediante análisis de regresión no lineal.
[1210] También se determinó la agregación inducida por convulxina para los ensayos de agregación de transmisión de luz en las cubetas; se prepararon diluciones seriales (1:2) de compuesto de ensayo en DMSO al 30% en una placa de 96 cavidades y fondo en "V" (la concentración final del DMSO en la cubeta era del 0,3%). El compuesto de ensayo (5 µ? de diluciones seriales en DMSO) fue preincubado con PRP durante 20 minutos antes de la iniciación de las reacciones de agregación, gue se llevaron a cabo en un agregómetro ChronoLog mediante la adición de agonista (125-250 ng/ml de convulxina) a 495 \i de PRP a 37 °C. Se registró la reacción de agregación durante 4 minutos, y se determinó la extensión máxima de la agregación mediante la diferencia de la amplitud de la agregación en la linea de base, comparado con la agregación máxima que tiene lugar durante el periodo de cuatro minutos del ensayo. Se calculó la inhibición de la agregación en forma de agregación máxima observada en la presencia del inhibidor, comparada con la agregación en ausencia del inhibidor. Se derivaron los ICs0s mediante análisis de regresión no lineal.
En las Tablas 2- 5 se dan ejemplos de los compuestos y de sus valores de syk y PRP IC50.
Ensayo del flujo del calcio en células de Ramos, inducido por ligación cruzada con BCR
[1211] Se subcultivan células de Ramos (2G6.4C10, linfoma de Burkitt, Número de Item de ATCC: CRL-1923) a razón de 5 xlO5 células/ml en un medio fresco 3 ó 4 días antes de los experimentos. Se cosechan las células y se las resuspende en medio fresco a razón de 8 x 106 células/ml antes de la carga con un material de teñido. Se añade un volumen igual de teñido de carga de Calcium 3 (Molecular Device) , y se mezcla en la suspensión de células. Las células de carga se dispensan en una placa de 96 cavidades y se incuban durante 30 minutos. Seguidamente se añaden los compuestos en las células cargadas con el material de teñido, y se incuba durante otros 30 minutos. Se centrifugan las células a 1.000 rpm durante 30 minutos antes de la medición de la fluorescencia en el FlexStation. Se lleva a cabo la estimulación de BCR mediante la adición de 5 yg/ml de fragmento de anticuerpo IgM antihumano de mono (AffiniPure F(ab')2, Jackson InmunoResearch Laboraotries).
Ensayo del flujo del calcio en células Jurkat, inducido por ligación cruzada con TCR
[1212] El protocolo es muy similar al del flujo del calcio para las células B descrito en el capitulo precedente. Las únicas diferencias son que las células T (clon E6-1, leucemia aguda de células T, Número de ítem de ATCC: Tib-152) y C D3 antihumano (CD3 antihumano purificado de tipo funcional, clon 0KT3, eBioscience, N.° 16-0037) reemplazaron las células B y el IgM antihumano. Se mantiene la misma densidad de las células, pero se utiliza una concentración de 100 ng/ml.
Secreción de IL-2 en células de Jurkat, inducida por la ligación cruzada de TCR
[1213] Los procedimientos para la propagación de las células y para la incubación de compuesto son los mismos que los descritos en el ensayo del flujo de calcio de Jurkat en el capitulo precedente. Se aplica un recubrimiento con anticuerpo (anti CD3, OKT3) sobre una placa fresca (sin células) a razón de 100 ng/cavidad. Se suspenden las células a razón de 8 x 106 células/ml y se las incuba con compuestos durante 30 minutos en una placa por separado. Al final de la incubación se transfieren las células a la placa recubierta de anticuerpo y se las somete a incubación durante 16 horas. Después de la incubación se transfieren las células a la placa recubierta de anticuerpo, y se someten a incubación durante 16 horas. Se utilizan 100 µ? de medio de células para la medición del IL-2 después de la incubación. Se determina el nivel del IL-2 mediante un kit IL-2 ELISA (Human IL-2 ELISA kit II, BD Bioscience, No. 550611) .
Ejemplo 611 Selección con Millipore Upstate KinaseProfiler™
[1214] Este ensayo es una medición directa del efecto del compuesto sobre la actividad catalítica del JAK3. Se obtuvo JAK3 humano purificado de secuencia (GenBank AF513860) (residuo 781 -C-terminal) a partir de células de insectos. Se mide la hidrólisis catalítica del ATP mediante un método de ligación con filtro radiométrico . La incubación de la quinasa con sustrato 33[P]ATP y sustrato conduce a la incorporación de 33[P] en el sustrato, que puede seguidamente separarse de los otros componentes de la reacción, por filtración. Se llevaron a cabo ensayos con ATP 10 µ? y en la ausencia o presencia de compuesto 1, 0,3 ó 0,1 µ?. Se expresó la actividad como % de inhibición del control .
Ejemplo 612 Selección con Ambit KinomeScan
[1215] Este ensayo es un ensayo de ligación de competición dependiente del sitio de ATP, en el que unas quinasas humanas de interés son fusionadas a una etiqueta propietaria (proprietary tag, bacteriófago T7) . Se mide la cantidad de quinasas ligada a un ligando inmovilizado, dirigido a sitio activo, en la presencia y ausencia del compuesto de ensayo. Los ensayos de Ambit' s JAK utilizan dominios de quinasa y no proteínas de longitud completa. El dominio utilizado para la ligación de JAK1 es el dominio de seudoquinasas, mientras que para la ligación del JAK3 es el dominio catalítico (Mazen W Karaman, Sanna Herrgard, Daniel K Treiber, et. al. A Quantitative analysis of kinase inhibitotr selectivity. Nature Biotechnology, 2008, Volume 26, No. 1, Page 127-132) .
Tabla 6b Potencia y carácter especifico de la inhibición quinasa (IC50 expresado en nM) Ejemplo 605 Ensayo celular con JAK3/STAT6
[1216] La estimulación de las células B de Ramos por la interleuquina 4 (IL4) conduce a una señalización a través de JAK1/JAK3, siendo el resultado la fosforilación de STAT6 (transductores de señales y activadores de la transcripción) . Es posible evaluar el efecto de los compuestos sobre la inhibición de JAK3 y/o JAK1 midiendo la cantidad de STAT6 fosforilado. Esto se lleva a cabo mediante Western blotting por medio de un anticuerpo fosfo-STAT6 especifico.
[1217] Unas células B de Ramos fueron suspendidas en medio RPMI tamponado con Hepes 10 mM (2 x 107 células/ml) . Las células (90 µ?) fueron inoculadas con 10 µ? de 3,3 µ?/p?? de interleuquina 4 (R & D Systems Inc, cat # 204-IL; concentración final: 0,33 µ?/???) . Las incubaciones fueron de 10 minutos a 37° C en la ausencia o presencia de 2 µ? del compuesto diluido en DMSO al 30 %. Se terminaron las reacciones mediante la adición de volúmenes iguales de tampón de lisis 2x (TRIS-HC1 100 mM pH 8, Triton-X-100 al 0,2%, EDTA 5 mM, NaCl 250 mM, glicerol al 20 %, PMSF 1,25 mM, ortovanadato de sodio 5 mM, ß-glicerofosfato 5 mM, cóctel inhibidor de proteasa EDTA completo (Sigma) ) .
[1218] Se incubaron las muestras con 1 µ? de la nucleasa, benzonasa (Novagen, cat # 71205-3) durante una hora, a la temperatura ambiente, seguidamente se añadieron 50 µ? 5x de tampón de carga (TRIS 330 mM pH 6,8, SDS al 9,5 %, glicerol al 34 %, azul bromofenol al 0,01 %, beta-mercaptoetanol al 10%).
[1219] Unos lisatos de células (15 µ??) fueron sometidos a un SDS-PAGE (Novex 4-12 %, geles de TRIS glicina, Invitrogen) bajo condiciones de reducción, seguido por transferencia de electroblot sobre membranas de microcelulosa . Seguidamente se incubaron las membranas en tampón de bloqueo Zymed (Invitrogen) durante 1 hora a la temperatura ambiente (TA) y seguidamente durante la noche a 4 °C con 1:500 anti fosfotirosina - STAT6 (Cell Signaling Technology, cat # 9364) anticuerpo primario en tampón de bloqueo Zymed. Después de 5 lavados de 10 minutos con solución salina Tris-tamponada, NP40 al 0,25 % (TBSN) , se incubaron los blots durante 1 hora a temperatura ambiente en la presencia de anticuerpo secundario anti conejo de mono HRP-conjugado 1:10.000 (Amersham Biosciences, cat # NA934V) en tampón de bloqueo Zymed. Después de 4 lavados durante 10 minutos con TBSN, se visualizaron los blots mediante ECL (Pierce Western Lightening, Perkin Elmer cat # NEL101) . A efectos de determinar el contenido total de ß3, se despojaron los blots, se los lavó cuatro veces con TBSN, y se los reensayó con anticuerpo C3A 1:2000 C3A en tampón bloque durante la noche a 4 °C. Después de 4 x 10 min lavados con TBSN, se incubaron los blots con anticuerpo secundario antirratón caprino 1: 10.000 el tampón bloqueante, se lavó cuatro veces más con TBSN y se expuso a reactivo Western Lightening. Mediante densitometria se determinaron los niveles de estimulación con respecto al segundo plano y la amplitud de la inhibición del compuesto.
Ejemplo 606 Ensayo de inhibición de la actividad de quinasa JAK para linea celular B Ramos estimulada con IL-4 Estos ejemplos ilustran métodos para evaluar las actividades in vitro e in vivo de la quinasa JAK humanas de los compuestos inventivos que pueden determinarse por medio de varios procedimientos conocidos en el estado de la técnica, como por ejemplo la prueba sobre su capacidad para inhibir la actividad de la quinasa JAK presente en el plasma humano. Las potentes afinidades para la inhibición de quinasa JAK humana que exhiben los compuestos inventivos pueden medirse mediante un valor ICs0 (en nm) . El valor IC50 es la concentración (en nm) del compuesto necesario para proporcionar 50% de inhibición de la actividad de la quinasa JAK humana. Cuanto menor sea el valor IC50, más activo (potente) será el compuesto para inhibir la actividad de quinasa JAK.
Un ensayo in vitro para detectar y medir la actividad de inhibición contra la quinasa JAK es el siguiente: La actividad de los compuestos para las quinasas JAK se confirma en ensayos celulares designados para analizar la inhibición de JAK. Brevemente, la inhibición de JAK se prueba en células B ramos humanas activadas con citoquinas interleucina-4 (IL-4) . Entre veinte y veinticuatro horas después de la estimulación, las células se tiñen para la regulación positiva de CD23 y se analizan por medio de FACS (distribuidor celular activado por fluorescencia) . La estimulación de las céculas B con IL-4 conduce a la activación del patrón JAK/STAT a través de la fosforilación de la quinasa JAK, JAK1 y JAK 3, que a su vez fosforilan y activan factores de transcripción STAT-5 y STAT-6. La baja afinidad del receptor IgE (CD23) es regulada positivamente por STAT-5 activado.
Para el ensayo, se cultivan células B Ramos humanas (ATCC, Catálogo No. CRL-1596) en el medio de cultivo celular RPMI 1640 (Cellgro, Catálogo No. 10-040-C ) que contiene 10% de suero fetal bovino (JRH, Catálogo No. 12106-500M) de conformidad con el protocolo de propagación proporcionado junto con las células, y se mantienen a una densidad de aproximadamente 3,5 X 105 células/ml. El día previo al ensayo, las células se diluyen a 3,5 X 105 células/ml para asegurarse de que se encuentren en la fase de crecimiento logarítmico. Se centrifugan las células y se suspenden en el medio de cultivo celular RPMI 1640 (Cellgro, MediaTech, Inc., Herndon, Virginia, Catálogo No. 10-040-CM) que contiene 5-10% de suero fetal bovino (FBS) , se desactivan con calor (JRH Biosciences, Inc, Lenexa, Kansas, Catálogo No. 12106-500M) según el protocolo de propagación ATCC. Se mantienen las células a una densidad de 3,5 X 104"5 células/ml . El día previo al experimento, se diluyen las células B Ramos en 3,5 X 105 células/mL para asegurarse de que se encuentren en la fase de crecimiento logarítmico y las alícuotas se colocan en una placa para cultivo celular de 96 orificios. Las células se incuban con el compuesto de prueba (disuelto en dimetilsulfóxido) o dimetilsulfóxido (control) durante una hora a 37°C y luego son estimuladas con IL-4 (Pepotech, Catálogo No. 200-04) durante 20-24 horas (la concentración final es de 50 Unidades/ml) .
Luego las células se centrifugan y se suspenden en RPMI con un 5% de suero. Las células 5X104 se usan por punto en una placa para cultivo de tejidos de 96 orificios. Las células se preincuban con el compuesto o DMSO (Sigma-Aldrich, St . Louis, Missouri, Catálogo No. D2650) que actúa como vehículo de control durante 1 hora a 37° C en incubadora. Luego se estimulan las células con IL-4 (Peprotech Inc., Rocky Hill, Nueva Jersey, Catálogo No. 200-04) para obtener una concentración final de 50 unidades/mL durante 20-24 horas. Luego se centrifugan las células y se tiñen con anti-CD23-PE (BD Pharmingen, San Diego, California, Catálogo No. 555711) y se analizan mediante la prueba FACS (distribuidor celular activado por fluorescencia) . La detección se realiza con un Sistema de Citómetro de Flujo BD LSR I, comprado a Becton Dickinson Biosciences de San José, California.
La proliferación se mide con un Ensayo de Viabilidad Celular por Luminiscencia CellTiter-Glo . RTM . (Promega) , el cual determina la cantidad de células viables en cultivo sobre la base de la medición de la adenosina trifosfato (ATP, por sus siglas en inglés) existente, como indicador de las células metabólicamente activas. El sustrato se descongela y se lo lleva a temperatura ambiente. Luego de mezclar el reactivo Cell Titer-Glo con el diluyente, se agregan 100 µL en cada orificio. Las placas se mezclan en un agitador orbital durante dos minutos para inducir la lisis y se incuban a temperatura ambiente durante diez minutos adicionales para permitir que la señal se equilibre. La detección se realiza con un contador de varios niveles Wallac Victor2 1420 comprado a Perkin Elmer, Shelton, Connecticut.
El segundo día, las células A549 se preincuban con un compuesto de prueba 2 , 4 -pirimidina diamina o DMSO (control) (Sigma-Aldrich, St. Louis, Misuri, Catálogo No. D2650) durante 1 hora. Luego las células se estimulan con IFNy (75 ng/mL) (Peprotech Inc., Rocky Hill, Nueva Jersey, Catálogo No. 300-02) y se dejan incubar durante 24 horas. El intervalo de la dosis en la prueba final es de 30 µ? a 14 nM en un medio de 200 ? F12K que contiene 5% FBS, 0,3% DMSO.
El tercer día se retira el medio celular y las células se lavan con 200 µ? de PBS (fosfato sódico estabilizado) . Cada orificio se tripsiniza para disociar las células, y luego se neutraliza mediante el agregado de 200 µ? medio F12K completo. Las células sedimentan y se tiñen con un anticuerpo conjugado APC ICAM-1 de ratón (CD54) (BD Pharmingen, San Diego, California, Catálogo No. 559771) durante 20 minutos a 4o C. Las células se lavan con una solución reguladora FACS con hielo frío (PBS+2% FBS) y la expresión ICAM-1 de superficie se analiza mediante citometría de flujo. La detección se realiza mediante el uso de un Sistema de Citómetro de Flujo BD LSR I, comprado a BD Biosciences de San José, California. Los eventos son controlados para la separación en vivo y la media geométrica se calcula (Becton-Dickinson CellQuest software versión 3.3, Franklin Lakes, Nueva Jersey). La media geométrica se gráfica contra la concentración del compuesto para generar una curva de respuesta a la dosis.
Ejemplo 607: Inhibición de transducción de señal mediada por Syk a través del receptor célula B en líneas celulares del linfoma no-Hodgkin .
Las células fueron pre-tratadas durante 1 hora sin el compuesto (0,02 a 2uM) o con éste antes de la estimulación del receptor de célula B señalizado por incubación de células con 3 9/??1 de anticuerpos anti-ratón durante 10 minutos a 37°C. El flujo Ca2+ se midió con el tinte Calcium 3 y el FlexStation (Dispositivo Molecular) . La señalización del receptor de célula B se ensayó con Citometría intracelular de flujo de fosfato, y se siguieron los protocolos proporcionados por BD Pharmingen (San José, California) . La activación de Syk se midió por inducción de fosforilación tirosina BLNK en posición amino ácido 84 (pBLNK Y84) e inducción de fosforilación de tirosina ERKl/2 en posición amino ácido 204 (pERK Y204) . La activación de miembro Lyn de la familia Src se midió por inducción de fosforilación de tirosina Syk en posición amino ácido 352 (pSyk Y352) . La información se presenta como µ? IC50s . Cada compuesto realmente inhibió el flujo del receptor de célula B inducido por Ca2+ y la activación de Syk, pero no el miembro Lyn de la familia Src.
Tabla 7A: Ramos Ejemplo 87 Tabla 7B: Tabla 7C: Tabla 7D: Ejemplo 608: la inhibición de Syk ejerce un efecto anti-proliferativo sobre las líneas celulares del linfoma no- Hodgkin Las células fueron incubadas con concentraciones en aumento de cada compuesto, y luego se evaluaron a las 72 horas para analizar el alcance de la proliferación con el ensayo MTT (empresa, ciudad, estado) , siguiendo el protocolo proporcionado por el fabricante. La información se presenta con valores µ? IC50, representando el medio más/menos de la desviación estándar a partir de 5 ó 6 experimentos. Cada compuesto inhibió la proliferación de líneas celulares SUDHL-4 and -6, que dependen de Syk para su supervivencia y señales de crecimiento, en el rango µ? bajo. Las células Toledo que no requieren Syk, fueron claramente menos sensibles a los efectos anti-proliferativos de la inhibición de Syk.
Tabla 8 Ejemplo 609: La inhibición de Syk induce la apoptosis en líneas celulares del linfoma no-Hodgkin La información representa dos experimentos independientes para evaluar el efecto de inhibición de Syk y Syk/JAK sobre la supervivencia de líneas celulares B amplias difusas de linfoma no-Hodgkin. Las líneas celulares SUDHL-4 y SUDHL-6 dependen de señalización del receptor de célula B mediado por Syk para su supervivencia, mientras que las células Toledo no. Las células se incubaron con compuestos en las concentraciones y períodos indicados; la inducción de apoptosis se midió por citometría de flujo con el Kit de Detección Caspase 3 (Sigma-Aldrich, Saint Luis, Misuri) . La información se presenta como el porcentaje del total de células positivas para la detección de apoptosis, caspase 3. Tal como se esperaba, la inhibición de Syk resultó en la inducción de apoptosis en líneas celulares SUDHL-4 y -6, pero no en la línea celular Toledo.
Tabla 9A: SUDHL-4 Ejemplo 87 24h 48h 72h luM 8,7 10, 7 9,9 3uM 18, 5 32,3 32, 6 lOuM 34, 5 59,4 75, 3 SUDHL-6 Ejemplo 87 24h 48h 72h luM 11 20,2 20,4 3uM 22, 5 54, 9 71 lOu 12 , 1 27,3 38,7 Toledo Ejemplo 87 24h 48h 72h luM 0, 6 0,3 1,2 3uM 0,8 0 1,8 Tabla 9B SUDHL-4 Ejemplo 87 24h 48h 72h luM 6,6 7,2 7,6 3uM 13, 6 19,7 23,4 lOuM 20,4 43, 9 57,4 SUDHL-6 Ejemplo 87 Tabla 9C: Ejemplo 596 Ejemplo 610: Inhibición de la activación de células B primarias en ratones por medio de inhibidores de Syk Los espelenocitos primarios de ratones se pre-trataron durante 1 hora con concentraciones en aumento de cada compuesto (0,05 - 2µ ) antes del agregado de suero de control o suero de cabra anti-ratón IgD. La activación de células B inducida por Anti-IgD se midió 16 horas después por citometría de flujo, tiñéndose para los marcadores de activación CD80/86 y CD69. La información representa los rangos IC50 para la inhibición de la activación de células B.
Tabla 10: Tabla 11: CD69 CD80/86 Ejemplo 87 <0, 05 0, 125-0, 25 Ejemplo 596 0, 125-0, 25 0, 125-0, 25 Ejemplo 611: modelo de ratón de trompocitopenia mediada inmunitariamenté La trombocitopenia inmunitaria es causada por anticuerpos dirigidos contra las glicoproteínas de la superficie de las plaquetas, anticuerpos contra complejos que contienen drogas en la superficie de las plaquetas, o células recubiertas por anticuerpos o complejos inmunes que interactuan con la superficie de la plaqueta. Los compuestos seleccionados fueron evaluados según su capacidad para inhibir el despeje (clearance) de plaquetas en un ratón modelo con trombocitopenia ocasionada por anticuerpos. En este modelo, un despeje rápido de las plaquetas circulantes (aproximadamente 50%) resulta de la administración intravenosa de anticuerpo GPIIb de rata anti-ratón (clon MWReg30) (BD Biosciences, Pharmingen) . Para evaluar la capacidad de inhibición del despeje de plaquetas, los compuestos se suspendieron en 0,5% de metil celulosa en agua y se administraron por sonda vía oral (100 ul/ratón) previo a la inyección de anticuerpos cuando el compuesto alcanzaría una máxima concentración de plasma (generalmente 1 - 2 horas según experimentos farmacocinéticos por separado para compuestos individuales) . A las 4 y a las 8 horas luego de la inyección del anticuerpo, se obtuvieron muestras de sangre terminal de grupos de vehículo y de ratones bajo tratamiento con el producto (n=5-10 ratones/grupo) por medio de punción cardíaca. La sangre se anticoaguló con citrato trisódico o EDTA. Las muestras de sangre completas se midieron para conocer las cantidades de plaquetas en un analizador hematológico (Hemavet, Drew Scientific) . La sangre restante se procesó para medir las concentraciones de plasma y del compuesto por espectometría de masa.
El despeje de plaquetas se determinó por la medición de la diferencia en el número de plaquetas entre el grupo promedio de tratamiento sin anticuerpos y los animales a los que se les había administrado el anticuerpo de rata anti-ratón GPIIb. La inhibición del despeje de plaquetas se determinó mediante la comparación de la diferencia entre el despeje de plaquetas en animales bajo tratamiento con vehículo y con compuesto.
Tabla 12. * demuestra una reducción estadísticamente significativa en el i ! puntaje de inflamación clínica en comparación con el vehículo de control analizado por el test de dos vías, no RANDOMIZAdo , prueba-t de estudiante Dosis del compuesto Pico promedio Inhibición concentración promedio (%) plasma (µ?) punta e inflamación Ejemplo 596 10,2 µ? 88% * 100 mg/kg/día EJEMPLO 596 4,4 µ? 27% * 30 mg/kg/día * demuestra una reducción estadísticamente significativa en el puntaje de inflamación clínica en comparación con el vehículo de control analizado por el test de dos vías, no RANDO IZAdo, prueba-t de estudiante Ejemplo 612: Modelo de ratón de anticuerpos de colágeno que inducen artritis La actividad inhibitoria de los compuestos seleccionados se investigó en un modelo de ratón de anticuerpos de colágeno que inducen artritis (CAIA) . La artritis inducida por colágeno es mediada por autoanticuerpos a colágeno de tipo II y complemento, por lo tanto la artritis puede ser inducida por la administración de anticuerpos policlonales o una mezcla de anticuerpos monoclonales a colágeno tipo II. El modelo CAIA (Chondrex, Inc., Redmond, Washington) emplea una mezcla de 4 clones que reconocen epítopos individuales aglomerados en un fragmento de péptido amino ácido 83 de colágeno tipo II. Estos epítopos comparten secuencias de amino ácidos comunes con muchas especies diferentes de colágeno de tipo II entre las que se incluyen pollos, ratones, ratas, bovinos, porcinos, monos y humanos. El modelo utiliza un cóctel de anticuerpos monoclonal seguido por un lipopolisacárido (LPS) bacteriano para inducir una artritis severa y consistente en ratones dentro de los 7 días. Este modelo se desarrolló sobre la hipótesis de que las toxinas bacterianas absorbidas a través del tracto gastrointestinal tienen un rol sinergético y patológico con anticuerpos al colágeno tipo II en el desencadenamiento de artritis en pacientes con Artritis Reumatoidea .
Para estos experimentos, el cóctel de anticuerpos monoclonal (Lote OC-708) se introdujo mediante inyección intravenosa en la vena de la cola en una dosis de 4 mg/ratón (40 mg/ml) en el día 0 seguido por una inyección intraperitoneana de LPS diluido en salina normal en una dosis de 25 ug/ratón en un ratón de 8 semanas de edad, de sexo femenino, Balb/C (Charles River, Inc.). La dosificación de los productos de prueba comenzó justo antes o justo después de la IV inyección del cóctel de anticuerpos. Los compuestos se suspendieron en 0,5% de metilcelulosa en agua y se administraron a través de sonda vía oral (100 ul/ratón) diariamente a lo largo del estudio que tuvo una duración de 7-10 días. Los puntajes de inflamación clínica se determinaron a diario. Los puntajes de inhibición de la inflamación clínica se determinaron en base a la diferencia entre los ratones tratados con el vehículo y los tratados con el producto al final del experimento. Las concentraciones de plasma representan picos de concentración una hora después de la última dosis en el día de finalización del estudio.
Tabla 13. * demuestra una reducción estadísticamente significativa en el puntaje de inflamación clínica en comparación con el vehículo de control analizado por el test-t de dos vías de estudiante, no RANDOMIZado Ejemplo 613: Inhibición de JAKl/3 inducida por IL-4 induce la fosforilación de Stat-6 en células B Ramos Las células B Ramos se pre-trataron durante 1 hora con concentraciones en aumento del compuesto, tal como se indicó previo al agregado de IL-4. Las células se incubaron con IL-4 durante 10 minutos, y luego se les realizó citometría de flujo intracelular para medir el porcentaje de inhibición ' de Stat-6 inducido por IL-4.
Ejemplo 614: Inhibición de JAKl/3 inducida por IL-4 induce la fosforilación de Stat-6 en células B Ramos Las células B Ramos se pre-trataron durante 1 hora con concentraciones en aumento del compuesto, como se indicó antes del agregado de IL-4. Las células se incubaron con IL-4 durante 10 minutos, y luego se les realizó citometría de flujo intracelular para medir el porcentaje de inhibición de Stat-6 inducido por IL-4.
Ejemplo 615 Ensayo de proliferación de células T primarias humanas estimuladas con IL-2 Las células T primarias humanas derivaron de sangre periférica y se preactivaron a través de la estimulación del receptor de célula T y proliferación CD28 in Vitro en respuesta a la citosina interleucina-2 (IL-2) . Esta respuesta proliferativa depende de la activación de JAK-1 y JAK-3' quinasas tirosina, las que fosforilan y activan el factor de transcripción Stat-5.
Las células T primarias humanas se preparan de la siguiente manera. Se obtiene sangre completa de un voluntario saludable, se mezcla 1:1 con PBS, se estratifica por la técnica Fycoll Hypaque (Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, Nueva Jersey, Catálogo No. 17-1440-03) en 2:1 sange/PBS: radio fycoll y se centrifuga durante 30 minutos a 4°C a 1750 revoluciones por minuto. Los linfocitos en el suero: interface ficoll se recuperan y se lavan dos veces con 5 volúmenes de PBS. Las células se re-suspenden en un medio Yssel (Gemini Bio-productos , Woodland, California, Catálogo No. 400-103) que contiene 40 U/mL recombinante IL2 (R and D Systems, Mineápolis, Minesota, Catálogo 202-IL (20 /¿g) ) y se siembran en un matraz pre-cubierto con l^g/mL anti-CD3 (BD Pharmingen, San Diego, California, Catálogo No. 555336) y 5 g/mL anti-CD28 (Immunotech, Beckman Coulter of Brea California, Catálogo #IM1376) . Las células T primarias son estimuladas durante 3 a 4 días, luego se transfieren a un matraz fresco y se mantienen en RPMI con 10% de FBS y 40 U/ml IL-2.
Las células T primarias se lavan dos veces con PBS para remover el IL-2 y son resuspendidas en medio Yssel a 2X 106 células/mL. 50 ^L de suspensión celular que contienen 80 U/mL IL-2 se agregan en cada orificio de una placa de fondo plano de 96 orificios. Para el control sin estimulación, se omite IL-2 de la última columna de la placa. Los compuestos se disuelven seriadamente en dimetil sulfóxido (DMSO, 99,7% puro, cultivo celular testeado, Sigma-Aldrich, St . Louis, Misuri, Catálogo No. D2650) de 5 mM en diluciones de 3 pliegues y luego se disuelve 1:250 en medio Yssel . 50 µ? de compuesto 2X se agregan en cada orificio por duplicado y se dejan proliferar las células durante 72 horas a 37° C.
La proliferación se mide con el Ensayo de Viabilidad Celular por Luminiscencia CellTiter-Glo . RTM . , que determina la cantidad de células viables en cultivo sobre la base de la cantidad de ATP existente, como indicador de las células metabólicamente activas. El sustrato se descongela y se lo lleva a temperatura ambiente. Luego de mezclar el reactivo Cell Titer-Glo con el diluyente, se agregan 100/xL en cada orificio. Las placas se mezclan en un agitador orbital durante dos minutos para inducir la lisis y se incuban a temperatura ambiente por diez minutos adicionales para permitir que la señal se equilibre. La detección se realiza con un contador de varios niveles Wallac Victor2 1420 comprado a Perkin Elmer, Shelton, Connecticut .
Ejemplo 616 Línea epitelial A549 estimulada con IFNy Células epiteliales A549 regulan positivamente la expresión de superficie ICAM-1 (CD54) en respuesta a una variedad de estímulos diferentes. Por lo tanto, usando una expresión ICAM-1 como lector, se pueden determinar los efectos del compuesto en diferentes patrones de señalización para el mismo tipo celular. IFNy regula positivamente ICAM-1 a través de la activación del patrón JAK/Stat. En este ejemplo, la regulación positiva de ICAM-1 por IFNY se determina.
La línea celular A549 de carcinoma epitelial de pulmón provino de la Colección de Tipos de Cultivo Norteamericana. El cultivo de rutina se realiza con un medio F12K (Mediatech Inc., Lenexa, Kansas, Catálogo No. 10-025-CV) con 10% de suero fetal bovino, 100 unidades internacionales de penicilina y 100 ng/mL de estreptomicina (medio completo F12k) . Las células se incuban en una atmósfera humidificada de 5% C02 a 37° C. Antes de su empleo en el ensayo, las células A549 se lavan con PBS y se tripsinizan (Mediatech Inc., Catálogo No. 25-052-CI) para levantar las células. La suspensión celular en tripsina se neutraliza con medio completo F12K y se centrifuga para sedimentar las células. El sedimento celular se re-suspende en un medio F12K completo a una concentración de 2 , 0X 105/mL. Las células se siembran a 20000 por orificio, 100 /iL de volumen total, en una placa de fondo plano para cultivo de tejidos para su adhesión durante la noche. El segundo día, las células A549 se pre-incuban con el compuesto de prueba 2 , 4 -pirimidina diamina o DMSO (control) (Sigma-Aldrich, St. Louis, Misuri, Catálogo No. D2650) durante 1 hora. Luego las células se estimulan con IFNy (75 ng/mL) (Peprotech Inc., Rocky Hill, Nueva Jersey, Catálogo No. 300-02) y se dejan incubar durante 24 horas. El rango de dosis final del compuesto de prueba es de 30 µ? a 14 n en un medio de 200 µL F12K que contiene 5% FBS , 0,3% D SO.
El tercer día se retira el medio celular y las células se lavan con 200 µ? de PBS (fosfato sódico estabilizado) . Cada orificio se tripsiniza para disociar las células, y luego se neutraliza mediante el agregado de 200 µ? medio F12K completo. Las células se sedimentan y se tiñen con APC anticuerpo conjugado ICA -1 de ratón (CD54) (BD Pharmingen, San Diego, California, Catálogo No. 559771) durante 20 minutos a 4o C. Las células se lavan con solución reguladora FACS con hielo frío (PBS+2% FBS) y la expresión ICAM-1 de superficie se analiza mediante citometría de flujo. La detección se realiza mediante el uso de un Sistema de Citómetro de Flujo BD LSR I, comprado a BD Biosciences de San José, California. Los eventos son controlados para la separación en vivo y la media geométrica se calcula (Becton-Dickinson CellQuest software versión 3.3, Franklin Lakes, Nueva Jersey). La media geométrica se gráfica contra la concentración del compuesto para generar una curva de respuesta a la dosis.
Ejemplo 617 Ensayo FACS U937 IFNylCAMl Las células monocíticas humanas U937 regulan positivamente la expresión de superficie ICAM-1 (CD54) en respuesta a una variedad de estímulos diferentes. Por lo tanto, al usar una expresión ICAM-1 como lector, se pueden determinar los efectos del compuesto en diferentes patrones de señalización para el mismo I i : I¦ tipo celular. IFNy regula positivamente ICAM-1 a través de la I i ! activación del patrón JAK/Stat. En este ejemplo, la regulación I positiva de ICAM-1 por IFNy se determina.
J . La línea celular monocítica humana U937 se compra a ATCC de |j Rockville, Maryland, catálogo número CRL-1593.2, y se cultiva en j¡ un medio RPMI-1640 que contiene 10% (v/v) FCS . Las células U937 I i !J se reproducen en 10% del medio celular RPMI. Luego las células se j i ubican en placas en una concentración de 100000 células cada i i i 160^L en placas de fondo plano de 96 orificios. Luego los ij^Q compuestos de prueba se diluyen de la siguiente manera: 10 mM del i ; compuesto de prueba se diluyen en 1:5 en DMSO (3 10 mM i ¡ compuesto de prueba en 12 µL DMSO) , seguido por una dilución I i j j seriada 1:3 del compuesto de prueba en DMSO (6 L compuesto de I ' prueba diluido seriadamente en 12 L DMSO para proporcionar ! 1 lj_5 diluciones de 3 pliegues). Luego se transfieren 4 µL del i i j j compuesto de prueba a 76 L de 10% RPMI lo que resulta en una j j solución 10X (100 µ? compuesto de prueba, 5% DMSO) . Para los jj orificios de control, 4 µL de DMSO se diluyen en 76 µL 10% RPMI.
¡ ! El ensayo se realiza en duplicado con 8 puntos (8 concentraciones i i 120 de dilución de 3 pliegues de 10 µL) y con 4 orificios con DMSO i i ¡ ' únicamente (orificios de control) bajo condiciones de estímulo y I ¡I ¡' 4 orificios con DMSO únicamente sin condiciones de estímulo.
I I l! ! I La placa con el compuesto diluido se mezcla 2X utilizando un I i ¡¡ multimek (Beckman Coulter of Brea, Calif.) y luego se transfieren ! i i ! I 1 I I ! i 20 µ:.. de los compuestos diluidos a la placa de 96 orificios que contiene 160 µ?-? de células, que luego se mezclan nuevamente dos veces a baja velocidad. Luego las células y los compuestos se pre- incuban durante 30 minutos a 37°C con 5% C02.
La mezcla de estimulación 10X se realiza mediante la preparación de una solución de 100 ng/ml de IFNy humano en 10% RPMI . Luego las células y el compuesto se estimulan con 20 µ?, de la mezcla de estimulación IFNy para proporcionar una concentración final de 10 ng/mL IFNy, 10 µ del compuesto de prueba y 0.5% DMSO. Las células se mantienen bajo condiciones de estimulación durante 18-24 horas a 37 °C con 5% C02.
Las células se transfieren a una placa de 96 orificios con fondo redondeado para su teñido y luego se mantienen en hielo a lo largo de la duración del proceso de coloración. Luego se las células se centrifugan a 1000 rpm durante 5 minutos a 4o C y seguidamente se retira el sobrenadante. Luego de la remoción del sobrenadante, se agrega 1 L APC de anticuerpo ICA -1 conjugado de ratón cada 100 L solución reguladora FACS. Luego las células son incubadas en hielo a oscuras durante 30 minutos. Luego de la incubación se agregan 150 L de solución reguladora FACS y las células se centrifugan a 1000 rpm durante 5 minutos a 4o C. , y seguidamente se extrae el sobrenadante. Luego de la remoción del sobrenadante, se agregan 200µL de solución reguladora FACS y las células se re-suspenden. Luego de la suspensión, las células se centrifugan a 1000 rpm durante 5 minutos a 4o C. Antes de la resuspensión de las células en 150 /.L de solución reguladora FACS se extrae el sobrenadante.
La detección se realiza con un Sistema de Citometría de Flujo BD LSR I, comprado a BD Biosciences de San José, California. Las células vivas se controlan para la separación en vivo y el medio geométrico de ICAM-APC se mide (Becton-Dickinson CellQuest software versión 3.3, Franklin Lakes, Nueva Jersey). Se analiza el % de células vivas y la expresión ICAM-1. Los ensayos para los compuestos de prueba se realizan en paralelo con un compuesto de control de actividad conocida. El EC50 para el compuesto de control es generalmente 40-100 nM.
Ejemplo 618 Análisis de señalización de células B Las líneas celulares B de linfoma no-Hodgkin SUDHL-4 (#ACC 495) , SUDHL-6 (#ACC572), y Karpas-422 (#ACC32) se obtuvieron de DSMZ (Braunschweig, Alemania) ; Toledo (#CRL-2631) y Ramos (#CRL-1596) se obtuvieron de la Colección de Tipos de Cultivo Norteamericana (ATCC; Manassas, Virginia) . Todas las células se mantuvieron en un medio celular RPMI (Invitrogen, Carlsbad, California) complementado con 10% de suero fetal bovino (ATCC) y penicilina/estreptomicina (Invitrogen) , y se mantuvieron en una incubadora de cultivo de tejido humidificada a 37 °C. Los I anticuerpos usados en estos estudios incluyen anticuerpos policlonales de cabra anti IgG (H+L) F(ab) '2 y anticuerpos IgM durante la noche a 4°C en metanol pre-enfriado (-80°C) (empresa, domicilio) . Las células fijas y permeabilizadas se lavaron seguidamente una vez en PBS, una segunda vez en PBS que contenía 1% de albúmina de suero bovino (BSA) (Sigma-Aldrich, St . Louis, Misuri) , y luego se colorearon con los anticuerpos indicados diluidos 1:20 en PBS + 1% BSA. Luego de 30 minutos, las células se lavaron una vez en PBS y se les realizó citometría de flujo con FACS Calibur (Becton Dickenson) . Para el análisis Western blot, se estimularon 106 células durante 30 minutos con 2µg/ml de los anticuerpos indicados BCR-específieos . La señalización finalizó con la re-suspensión de las células en la solución de lisis y su incubación en hielo durante 1 hora. Los residuos celulares se extrajeron por centrifugado, y los lisatos proteínicos sedimentados se resolvieron por 10% SDS-PAGE y se analizaron con los anticuerpos indicados en cumplimiento de las recomendaciones del fabricante. En los casos indicados, las células se pre-trataron durante 1 hora a 37 °C con inhibidores de Syk o vehículo de control (0,5% DMSO) en varias concentraciones previo a la estimulación con anticuerpo anti-BCR.
Ejemplo 619 Inhibición selectiva de la actividad Syk Se analizó la capacidad de los compuestos para inhibir Syk purificado. Se determinó que ejemplo 596 y ejemplo 87 (dos compuestos de una serie de Syk-específico como se muestra en la Tabla Ib) y P420-89 (de una serie con actividades inhibitorias duales Syk y JAK) suprimen la actividad quinasa Syk con IC50s de 43nM, 6nM, y 31nM, respectivamente. La selectividad de estos compuestos para Syk se determinó mediante la evaluación de cada uno con un panel de 270 quinasas purificadas independientes a 300nM (Millipore) . El porcentaje de inhibición relativo al vehículo de control se calculó y los números se convirtieron a un mapa de calor; la no inhibición se representó en verde, la combinación en aumento con rojo indica un porcentaje en aumento de inhibición con amarillo representa el 50% de inhibición y el rojo representa un 100% de inhibición (Figura 9) . Tal como se muestra en la Figura 9A, ejemplo 596 y ejemplo 87 fueron altamente Syk específicos (primera y segunda filas, respectivamente) mientras que P420-89 inhibió quinasas múltiples (tercera fila) . El subgrupo de quinasas que fueron inhibidas en un =80% por cualquiera de los tres compuestos se muestra en la Figura 9B. Ejemplo 596 inhibió Syk y MLK-1 (primera fila) . A 300nM ejemplo 87 inhibió 10 quinasas diferentes (segunda fila) . Al ser re-analizados a 50nM (aproximadamente lOx por encima de su valor Syk IC50 de 6nM) , sin embargo, Syk fue la única quinasa que permaneció inhibida (tercera fila) . P420-89 inhibió Syk, JAK2 y JAK3 , junto con muchas otras quinasas (cuarta fila) .
Con el uso del panel Milipore de quinasas purificadas EJEMPLO 87 (IC5o = lnM) se inhibió el 98% de la actividad de quinasa Syk purificada a 50nM. Los valores IC50 se determinaron para aquellas quinasas que fueron inhibidas en >80% a 300nM en el panel para quinasa Millipore.
En contraste, el inhibidor multi -quinasa P420-89 es más similar a R788 de Rigel . A 300nM( P420-89 inhibió Syk en 88%, junto con >80% de inhibición de 32 quinasas adicionales. Entre éstas estaban JAK 2 y 3 (93% y 85% inhibidas, respectivamente) , Flt-3 (83-92% inhibidas) , y cKit (95-97% inhibidas) , todos objetivos para la manipulación terapéutica de la función linfocitaria.
Ejemplo 620 Ensayo del flujo de calcio e inhibición selectiva de Syk en líneas celulares B de linfoma no-Hodgkin Las células Ramos se cultivaron (se mantuvieron aproximadamente 0,5 xl06 células/ml) en medio de reproducción entre 3 y 4 días antes de los experimentos. Las células se recolectaron y se re-suspendieron en un medio fresco a 8x106 células/ml antes de la carga de tinte. Se agregó un volumen equivalente de tinte Calcium 3 (Molecular Device, Sunneyvale, California) a las suspensiones celulares. Las células cargadas se colocaron en una placa de 96 orificios y se incubaron durante 20 minutos. Luego se agregaron los inhibidores de Syk a las células cargadas y se incubaron durante otros 30 minutos. Las células B se estimularon con anticuerpo 5µg/ml anti-µ. Los cambios en la concentración intracelular Ca2+ se midieron con FlexSTATion (Molecular Devices, Sunnyvale, California) .
La selectividad y potencia de la inhibición de Syk en células B se analizó inicialmente por medio de Western blot, con lo que se midió la inducción mediada por BCR de pSyk Y525/526 y pBLNK Y84, ambas medidas de la actividad quinasa Syk, y la inducción de pSyk Y352, una medida de la actividad quinasa Src . Las células SUDHL-6 B fueron estimuladas con anticuerpo específico anti-BCR durante 30 minutos en presencia o ausencia de cada inhibidor de Syk o vehículo de control. El tratamiento con 0,16 o ?µ? de cada compuesto redujo la autoforforilación Syk inducida por BCR (Y525/526) en aproximadamente 40% y 60%, respectivamente, según lo estimado por densitometría (información no mostrada) . Se usó un rango expandido de concentraciones para seguir evaluando el efecto de estos compuestos sobre la actividad quinasa Syk y Src inducida por BCR. Como se muestra en la Figura 10, A-C, cada compuesto inhibió actividad Syk (pBLNK Y84) con valores IC50 que iban desde los 0,16 a ?µ?, mientras que no se observó ningún efecto sobre la actividad Src (pSyk Y352) tan elevada como 2.5µ?. La capacidad de cada compuesto para suprimir los eventos de señalización más distantes al BCR también se midió. Las células se estimularon nuevamente con anticuerpo anti-BCR en presencia o ausencia de varias concentraciones de cada inhibidor Syk. La inducción de pSyk Y352 se midió como un control de especificidad, mientras que la de pERKl/2/Y204 se usó como medida de señalización dependiente de Syk más lejana (Jiang, Craxton et al. J Exp Med 188(7) : 1297-306 (1998) . La Figura 13C muestra parcelas FACS representativas que ilustran el efecto del inhibidor Syk más específico y potente de los tres, ejemplo 87, en la señalización BCR. A 125nM, la activación ERKl/2 se suprimió completamente, mientras que las células estimuladas seguían dando coloración positiva para Syk Y352. Se repitió este experimento, en el cual el efecto de los tres compuestos sobre la actividad Src y Syk se determinó (Figura 11A) . Concentraciones de menos de 125nM fueron suficientes para suprimir la señalización Syk inducida por BCR a ERKl/2. En contraste, se necesitaron concentraciones mucho más grandes para lograr una supresión modesta de la actividad Src: un efecto sobre Src que no se observó por medio de la prueba de Western blot (Figura 10, A-C) . Ninguno de estos inhibidores de Syk suprimió la fosforilación de tirosina ERKl/2 inducida por RMA, con lo que se demostró que estos compuestos no inhiben los eventos de señalización flujo debajo de la proteína quinasa C (PKC) .
Mientras que los ejemplos 596 y 87 específicamente inhibieron Syk en ensayos celulares y purificados, P420-89 además demostró actividad contra quinasas JA purificadas. Estos compuestos se analizaron con relación a la inhibición de la señalización de IL-4 a STAT-6 via JAKl/3 en células B, un patrón de señalización que no precisa Syk. Los compuestos específicos Syk no suprimieron la señalización IL4 en concentraciones de 2µ?. Por otro lado, P420-89 sí suprimió señalización IL4, con un IC50 de alrededor de 125nM (Figura 11B) .
Esto demuestra que la inhibición selectiva de Syk suprimió el flujo Ca2+ inducido por BCR en células B con valores IC50 de alrededor de ?????. Esto sugiere que al inhibir Syk, estos compuestos suprimen el patrón de señalización, bloqueando la respuesta celular.
La inhibición selectiva de Syk es suficiente para suprimir la señalización BCR sin afectar Src (Figuras 10, 11 y 13) o JAK (Figura 11B) . Ejemplo 87, la proliferación suprimida de líneas celulares NHL con potencia equivalente al inhibidor multi- quinasa, P420-89 (Tabla, Figura 18C) . Además, ejemplo 87 y P420-89 indujeron en igual medida la apoptosis en estas células (Figura 12B) . Esta información demuestra el rol de la señalización Syk en la supervivencia de las líneas celulares NHL y demuestra que no se necesita la inhibición de otras quinasas aparte de la quinasa Syk para alcanzar este efecto.
Ejemplo 621 Caspasa 3 y ensayos de proliferación: inhibidor de Syk interrumpe la proliferación y supervivencia de líneas celulares b de linfoma no-Hodgkin.
La inducción de apoptosis se midió con un kit para apoptosis de anticuerpo PE conjugado monoclonal activo caspasa 3 (Becton Dickenson) siguiendo el protocolo proporcionado. Las células se suspendieron en un medio de reproducción (0,5x106 células/ml) y se trataron con las concentraciones indicadas de cada inhibidor de Syk o vehículo de control durante 24, 48, ó 72 horas antes de realizar el análisis FACS . El ensayo TT (3- (bromuro de 4,5-Dimetiltiazol-2-il) -2 , 5-difeniltetrazolio, un tetrazol) (nombre de la empresa) se usó como medida de la viabilidad y crecimiento celular, siguiendo protocolos proporcionados por el fabricante. Las células se trataron con las concetraciones indicadas de cada inhibidor de Syk o vehículo de control durante 72 horas.
Las células SUDHL-4 y SUDHL-6 se clasificaron previamente como "tipo-BCR" (Monti, Savage et al. Blood 105(5): 1851-61 (2005); Polo, Juszczynski et al. Proc Nati Acad Sci U S A 104(9) : 3207-12 (2007) y sensibles a la inhibición de Syk por R406 (Chen, onti et al. 2008) . Las líneas celulares de Toledo y Karpas-422 que carecen de expresión BCR y BLNK, respectivamente (Gabay, Ben-Bassat et al. Eur J Haematol 63(3) : 180-91 (1999); Sprangers, Feldhahn et al. Oncogene 25(36) : 5056-62 (2006) , habiéndose entonces adaptado a sobrevivir independientemente de las señales BCR, no fueron sensibles a R406 (Chen, Monti et al. 2008) . La proliferación de estas líneas celulares cuando fueron cultivadas en presencia o ausencia de varias concentraciones de cada inhibidor de Syk durante 72 horas se analizó. Como se muestra en la Tabla de la Figura 18C, cada compuesto suprimió la proliferación de líneas celulares SUDHL dependientes de Syk con valores IC50 en rango bajo µ?, Las células Toledo precisaron concentraciones mucho mayores para que su proliferación se vea afectada. La supresión dual de quinasas Syk y JAK por P420-89 no pareció tener un efecto antiproliferativo superior en relación con la inhibición de Syk solamente.
La inhibición selectiva de Syk fue suficiente para inducir la apoptosis en líneas celulares NHL "tipo BCR" . Las células se incubaron con 1 ó 3µ? del inhibidor específico de Syk ejemplo 87 durante 72 horas. Como se demostró en la Figura 12A, las células SUDHL-4 y -6 atravesaron apoptosis, mientras que las células Toledo y Karpas-422 no (Figura 12A) . Al repetirse los experimentos, la inhibición específica de Syk en los ejemplos 596 y 87 indujo a la apoptosis solamente respecto de las líneas celulares SUDHL y Ramos. En comparación, P420-89, el cual inhibe quinasas Syk y JAK fuertemente, indujo la apoptosis en todas las líneas celulares de "tipo BCR" , así como también en Karpas-422 y JJN-3, una línea celular de múltiple mieloma que carece de BCR, y expresión BLNK (Sprangers, Feldhahn et al. Oncogene 25(36) : 5056-62 (2006). Las células Toledo permanecieron insensibles a los tres compuestos (Figura 12B) . En un experimento por separado, las células SUDHL- 6 y Toledo fueron igualmente sensibles a la inducción de apoptosis en un tratamiento de 72 horas con ?µ? PMA. Esta información demuestra la necesidad específica de Syk para la supervivencia de determinadas líneas celulares NHL.
Ejemplo 622 Estudios sobre xeno implantes y análisis sobre tumores y concentración de plasma La inhibición de Syk protege contra la formación de tumores en un ratón modelo xeno implantado. Los ratones se recibieron (empresa) y se aclimataron en el lugar durante por lo menos tres días antes de su utilización. Se inyectaron subcutáneamente células Ramos (3x106) en el área del flanco de la pata de ratones concientes con una aguja calibre 27 y el volumen de inyección fue de menos de 0 , 5ml . Luego de la inyección, los ratones se distribuyeron aleatoriamente en grupos de tratamiento (n = 15) y se les proporcionaron dos diarias por sonda vía oral con un vehículo o 10, 15 ó 20mg/kg del inhibidor de Syk ejemplo 87. Los pesos corporales se obtuvieron por lo menos una vez por semana y se tomaron medidas del calibre de los tumores dos veces a la semana a partir de que tumores palpables se formaron hasta el final del estudio. El volumen tumoral se determinó por medición del calibre usando una fórmula [largo máximo x ancho x altura x n/6] . Se continuó inyectando la dosis dos veces al día del vehículo o del ejemplo 87 hasta que el vehículo o cualquiera de los grupos de tratamiento mostrasen tumores que excedieran 1,5 gramos de tamaño. Para el momento de la finalización (5 semanas después de la inoculación Ramos) los ratones fueron anestesiados con un cóctel de ketamina. Se obtuvo una muestra de sangre para realizar un hemograma completo y determinar la concentración de plasma por medio de una punción cardíaca y se practicó eutanasia a los ratones por dislocación cervical. Se extirparon los tumores y se los pesó. Una mitad del tumor se congeló rápidamente en nitrógeno líquido para determinar la concentración del ejemplo 87 en el tejido tumoral y la otra mitad se colocó el 10% de formalina tamponeada para su investigación histológica.
El efecto de la inhibición de Syk en la formación de tumores Ramos en un ratón modelo al que se le realizó un xeno implante fue analizado. Los ratones recibieron dos dosis diarias de 10, 15 ó 20mg/kg ejemplo 87 o un vehículo de control a partir del día de 84 la inoculación de la célula tumoral . Las mediciones de calibre comenzaron en el momento en que se comenzaron a formar los tumores, aproximadamente tres semanas después de la inoculación del tumor, y se repitieron cada tres días hasta la finalización del estudio. El estudio finalizó cuando el peso del tumor comenzó a alcanzar aproximadamente l,5mg, y en ese momento los tumores se extirparon y se pesaron. Se realizó un análisis farmacocinético sobre las muestras de tumor y de plasma.
Cada muestra de tumor se homogeneizó en 3ml de salino por gramo de tumor con el Kontes® Microtube Pellet Pestle® Rods and Motor (Kimble Chase, Vineland, Nueva Jersey) . Se analizaron muestras de plasma y de tumor para determinar la concentración del ejemplo 87 por medio de un espectómetro de masas tándem - cromatografía líquida (LC/MS/MS) . Brevemente, las muestras de plasma y de tumor se procesaron en una placa de filtro de 96 orificios Captiva™ (0,2 pm, Varían, Inc., Palo Alto, California). Se precipitaron alícuotas de plasma y muestras de tumor homogeneizadas con acetonitrilo que contenía 200 ng/mL de: Compuesto A, 5 el estándar interno. La mezcla se sometió a agitación vorticial y se refrigeró a 4°C durante 30 minutos para permitir una precipitación completa de la proteína. La mezcla se filtró en una placa de recolección de 96 orificios. El filtrado se inyectó en un Sciex API3000 LC/MS/MS equipado con un electrospray asistido por turbonebulización . Ejemplo 87 y el Compuesto A se separaron en una columna Phenomenex Luna 5µ HILIC (4,6 x 100 tnm, 5mm; Phenomenex, Torrance, California) . Una mezcla de gradiente de fase móvil con un 10% de fase A móvil (0,1% ácido fórmico en agua) y un 90% de fase B móvil (0,1% de ácido fórmico en 90% acetonitrilo, 10% agua) a 65% fase B móvil se programó por 1,1 minutos seguido por un gradiente de fase B móvil de 65% a 90% durante 0,01 minutos. Las áreas pico del producto ión m/z 394/360 de ejemplo 87 se midieron respecto de las del producto ión m/z 357/295 del Compuesto A (estándar interno) en modo ión positivo. El rango analítico fue de 2 a 5000 ng/ml.
El análisis farmacocinético reveló que en un estado uniforme, las concentraciones de tumor del ejemplo 87 siguieron los perfiles de concentración-tiempo vistos con plasma en los grupos dosificados con 10, 15 y 20 mg/kg. Se observaron incrementos no lineales en Cmax, AUC (0-8) , y tumor Cmin a medida que se aumentó la dosis, pero se notó un incremento proporcional a la dosis en el plasma Cmin. Medio Cmax y AUC (0-8) en plasma fue al menos dos pliegues mayor al de aquel presente en el tumor para todas las dosis con que se experimentó, concentraciones medias de nadir (Cmin) fueron mayores en el tumor que en el plasma (Tabla 14A) , lo que indica una acumulación de ejemplo 87 en el compartimiento tumoral.
Tabla 14A Determinado a partir del plasma Régimen de Tmax Cmin Cmax AUC (0-8) dosificación (hr) (ng/mL) (ng/mL) (ng*hr/mL) 10 mg/kg BID 1,50 17, 6 179 738 15 mg/kg BID 1, 50 26,6 343 1671 20 mg/kg BID 4, 00 39,5 570 3191 Determinado a partir del tumor Régimen de Tmax Cmin Cmax AUC (0-8) dosificación (hr) (ng/mL) (ng/mL) (ng*hr/mL) 10 mg/kg BID 8,00 24, 5 55, 2 353 15 mg/kg 4,00 67, 8 163 475 BID* 20 mg/kg BID 4,00 125 252 1453 Tabla 14B Nota: Muestras Nadir (0), 1,5, 4, y 8h se tomaron en el día de recolección siguiente a la dosis AM. La segunda dosis no se administró el día de la recolección; por lo tanto, los valores farmacocinéticos precedentes se determinaron luego de una sola dosis AM en estado uniforme.
* Solamente una muestra de tumor estuvo disponible para el momento de las 8 horas y puede haber sido un valor atípico (concentraciones de tumor a las 8 horas - 608ng/ml) ; por lo tanto, los parámetros farmacocinéticos se determinaron entre las 0 y las 4 horas para el grupo de dosificación con 15mg/kg EJEMPLO BID 87. Consecuentemente, la proporción tumor/plasma AUC (0-8) y AUC para este grupo de dosificación puede haber sido subestimada .
La diferencia entre el plasma y el tumor Cmin se tornó más prominente a medida que la dosis se incrementó, como lo indica el incremento de las proporciones tumor/plasma determinados a partir de Cmin (Tabla 14B) . Las proporciones tumor/plasma que se determinaron a partir de Cmax y AUC (0-8) fueron similares en los diferentes grupos de dosificación. Las concentraciones de tumor se mantuvieron por encima de 60, 170, y 640n a lo largo de todo el intervalo de dosificación en estado uniforme con relación al ejemplo 87 en 10, 15, y 20 mg/kg, respectivamente.
Los ratones que recibieron dosis de las tres concentraciones del ejemplo 87 fueron protegidos contra el crecimiento el tumor Ramos in vivo. Esto se hizo evidente en principio a partir de las mediciones de calibre (información que no se muestra) , que revelaron un rango reducido de crecimiento del tumor en presente del inhibidor de Syk. Una vez finalizado el estudio, se practicó eutanasia a los ratones y los tumores se extirparon y se pesaron; la información consta en la Figura 18A. Consistentemente con las mediciones de calibre, se logró una reducción estadísticamente significativa en el peso promedio del tumor en todos los grupos que recibieron una dosis, respecto de los de vehículo de control. Esta información revela que concentraciones sub-micromolares de ejemplo 87 pueden prevenir la formación de tumores por una línea celular NHL agresiva en ratones.
Los ratones que recibieron una dosis de inhibidor de Syk no mostraron cantidades reducidas en ningún subgrupo de células blancas sanguíneas. De hecho, el único efecto que se observó fue un aumento en la cantidad de linfocitos en los ratones que fueron tratados con 15mg/kg ejemplo 87, lo cual no sucedió con los ratones que recibieron dosis de 10 ó 20mg/kg (Figura 18B) . El porcentaje relativo de cada subtipo celular analizado tampoco se vio afectado por el inhibidor de Syk (información no mostrada) . En promedio, los ratones tratados con vehículo de control tuvieron un incremento del 9,45% en el peso corporal. Por otro lado, los ratones tratados con 10, 15, y 20mg/kg ejemplo 87, tuvieron un incremento promedio de 0,27%, una reducción de 1,67%, y una reducción del 2,27% del peso corporal, respectivamente, en el transcurso del estudio. Sin embargo, no hubo relación entre el porcentaje de cambio en el peso corporal y el crecimiento del tumor (R2 = 0,27). Esta información sugiere que la inhibición del crecimiento del tumor realmente fue mediada por la supresión de la actividad Syk.
El inhibidor de Syk específico del ejemplo 87 también se probó respecto de su actividad en un ratón modelo con un tumor Ramos al que se le practicó un xeno implante. En todas las concentraciones probadas, se observaron reducciones estadísticamente significativas en el crecimiento del tumor en ratones que recibían dosis BID del ejemplo 87. La concentración más baja con que se experimentó fue de 10mg/kg, con la que se alcanzaron concentraciones de tumor en un rango de 64 a 140nM en el transcurso de un día. La supresión in vivo del crecimiento tumoral con estas concentraciones es consistente con concentraciones de <125nM que lograron suprimir el flujo Ca2+ inducido por BCR y señalización BCR distante para pERK Y204 (Figuras 11 y 13) . La inhibición farmacológica selectiva de Syk resulta en efectos sobre la proliferación y supervivencia de las líneas celulares NHL. Esta información sugiere que el direccionamiento selectivo de Syk puede de la misma forma tener beneficios clínicos en una variedad de trastornos proliferativos de células B.
Como se detalla en la presente, Syk ha sido experimentado con relación al desarrollo, proliferación y supervivencia de las células B. Además, Syk fue implicado como oncogén. La expresión de Syk constitutivamente activa en células de médula ósea transferidas induce la leucemia en ratones y la sobre actividad de Syk se asocia con una variedad de linfornas en humanos. Debido al rol de Syk en la biología de las células B, su inhibición selectiva puede ser suficiente para proporcionar un beneficio clínico en trastornos proliferativos de la célula B, mientras que reduce toxicidades que pueden surgir debido a la supresión de otras quinasas que no constituyen el objetivo.
La presente invención proporciona una cantidad de realizaciones. Es claro que los ejemplos pueden modificarse para proporcionar otras realizaciones de esta invención. Por lo tanto, se aprecia que el alcance de esta invención está definido por las reivindicaciones adjuntas y no por las realizaciones específicas, que fueron representadas a modo de ejemplo.
Todas las patentes estadounidenses, publicaciones de solicitudes de patente estadounidenses, solicitudes de patente estadounidenses, patentes extranjeras, solicitudes de patente extranjeras y documentos que no sean patentes mencionados precedentemente en esta Descripción y/o incluidos en el listado de la Hoja de Información sobre la Solicitud, se incorporan a la presente por vía de referencia, en su totalidad. En virtud de esto se podrá apreciar que, si bien las realizaciones específicas de la invención fueron descriptas con efectos ilustrativos, se pueden realizar diversas modificaciones sin desviarse del espíritu de la invención. Por lo tanto, está invención se encuentra limitada únicamente por las reivindicaciones adjuntas.

Claims (1)

  1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto representado por la fórmula (I) : (I) o un tautómero correspondiente o una sal farmacéuticamente aceptable, en donde: Y1 se selecciona de un grupo que consiste en: Z es 0 o S, D1 se selecciona de un grupo que consiste en: (a) fenilo sustituido por un grupo R5, en donde el fenilo es, opcionalmente , sustituido por 1 a 2 sustituyentes , R7a se selecciona de forma independiente de entre un grupo que consiste en Ci_8alquilo, Ci-8alcoxi, halo, C1-8alquilosulfonilo y heterociclilo, R5 se selecciona de un grupo que consiste en: (i) heteroarilo, (ii) heterociclilo, (iii) Ci-8alquilenoheterociclilo, (iv) fenilenoheteroarilo, (v) fenilenoheterociclilo, (vi) -L-fenilo, (vii) -L-heterociclilo y (viii) acetoxido, L se selecciona de un grupo que consiste en -C0- , -0-, -S02-, - I I CONH- y CONHCH2, cada R5 es, opcionalemete , sustituido por 1 a 2 sustituyentes , seleccionados de forma independiente de un grupo que consiste en C1-8alquilo, hidroxiCi-8alquilo- , aminoCi-8alquilo, C1-8alquiloamino, C1-8alquilocarbonilo, aminocarbonilo, ciano, hidroxi, oxo, halo, haloCi-8alquilo, aminosulfonilo, C3-8cycloalquilo y arilo, (b) un sustituyente naftil sustituido, R7b, seleccionado de un grupo que consiste en halógeno, Ci-8alquilocarbonilo, Ci-8alquilosulfonilo, aminosulfonilo, heterociclilocarbonilo y aminocarbonilo, (c) C3-8cicloalquilo, opcionalmente , sustituido por 1 a 20 2 sustituyentes, R7c, seleccionados de forma independiente de un grupo que consiste en Ci-8alquilo, Ci-8alcoxilo, halo, Ci-8alquilosulfonilo y heterociclilo, (d) heteroarilo, opcionalmente, sustituido por 1 a 2 sustituyentes, R7d, que se seleccionan de forma independiente del grupo que consiste en: Ci-8 alquilo, amino, hidroxilo, oxo, halo, Ci-8 alcoxilo, hidroxiCi-8alquilo- , aminoCi-8alquilo , Ci-8alquilocarbonilo, haloCi-8alquilo, C3-8cicloalquilo, C1-8aminocicloalquilo, aminoCi-8alquilenocarbonilo, aminocarbonilo , Ci-8alquilenoaminoCi-8alquilenocarbonilo, Ci-8alcoxiyC1-8alquilenocarbonilo, hidroxiCi-8alquilenocarbonilo , hidroxiCi-8alcoxicarbonilo, Ci-8 alcoxicarboniloamino, arilo, ariloCi-8 alcoxicarboniloamino, Ci-8alquilosulfonilo, aminoCi-8alquilenosulfonilo, aminosulfonilo, C1-8alquilenoaminoCi-8alquilenosulfonilo , Ci-8alcoxiCi-8alquilenosulfonilo, hidroxiCi-8alquilenosulfonilo, hidroxiCi-8alcoxisulfonilo, aminosulfonilo y Ci-8alquiloheterociclilo y (e) heterociclilo, con 1 a 2 sustituyentes , R7e, que se seleccionan de forma independiente del grupo que consiste en Ci-8alquilo, Cx-8alcoxi, halo, Ci-8alquilosulfonilo y heterociclilo, cada E1 se selecciona de forma independiente del grupo que consiste en Ci-8 alquilo, C2-8 alquenilo, C2-8alquinilo , Ci-8alcoxi, Ci-8alquiltio, aminocarbonilo, Ci-8alcoxicarboniloCi-8alquileno, Ci-8alcoxicarboniloCi-8Ci-8alcoxi , Ci-8alcoxicarboniloamino , oxo , halo, ciano, haloCi-8alquilo, haloC1-8alcoxilo, aminosulfonilo, heteroarilosulfinilo, amino, hidroxilo, Ci-8ariloalquileno, fenilo, aminoC1-8alquilo, aminoC3-8cicloalquilo , heterociclilo, heteroarilo y heterocicliloCi-8alquileno, cada Rla, Rlb y Rlc se selecciona de forma independiente del grupo que consiste en: H, Ci-8alquilo, hidroxiloCi-8alquilo, Ci-8haloalquilo, amino, > Ci-8alquiloamino, Ci-8 alcoxicarboniloaminoCi-8 alquileno, C3-8cicloalquilo , heteroarilo, Ci-8 alquiloC3-8cicloalquilo, Ci-8alquiltioCi-8 alquilo, Ci-8alquilosulfoniloCi-8 alquileno, aminocarbonilo, Ci-8alcoxiCi-8alquilo, haloCi_8alquilo, arilo y heterociclilo, e donde el arilo se sustituye, opcionalmente , por hidroxilo, Ci-8alcoxi, halo o haloCi-8alquilo o es tomado en conjunto con R3 y los átomos a los cuales está unido para formar un anillo C3-8 cicloalquilo o hetercicloalquilo, R2 se selecciona del grupo que consiste en H, amino, Ci-8alquiloamino, hidroxicarboniloamino Ci-8alcoxicarboniloamino, ariloCi_8alcoxicarboniloamino e hidroxilo, R3 se selecciona del grupo que consiste en H, Ci-8alquilo, Ci-8alquiloamino , amino aminoCi-8alquilo , carboxilo, Ci-8alquiloaminoCi-8alquilo, Ci-8alcoxiCi-8alquilo , hidroxiloCi-8alquilo , carboxiloCi-8alquilo , C3-8cicloalquiloCi-8alquilo, ariloxiloCx-ealquilo, ariloCi-8alquilo , heteroariloCi-8alquilo e hidroxiloCi-8alcoxi e hidroxiloCi-8alcoxi o puede combinarse con Rlc o R4 y los átomos a los cuales está unido para formar un anillo C3-8 cicloalquilo o heterociclilo, R4 es H o alquilo o puede combinarse con R3 y los átomos a los cuales está unido para formar un anillo C3-8 cicloalquilo o heterociclilo, el subíndice n es O, 1, 2, 3 o 4 y el subíndice m es una número entero que puede ser 1, 2 o 3 y la línea ondulada indica el punto de unión al resto de la molécula. 2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en donde Y1 es : compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en donde 4. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes en donde Z es S . 5. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes en donde Z es 0. 6. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3 en donde Z es S. 7. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes en donde D1 es fenilo. 8. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 7 en donde R5 es heteroarilo . 9. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 7 en donde R5 es heterocililo . 10. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 7 en donde R5 es alquilenoheterociclilo . 11. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 7 en donde R5 es feilenoheteroarilo . 12. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 7 en donde R5 es fenilenohetericiclilo . 13. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 7 en donde R5 es -L-fenilo. 14. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 7 en donde R5 es -L-heterocililo . 15. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 13 o 14 en donde L es -C0- . 16. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 13 o 14 en donde L es -0- . 17. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 13 o 14 en donde L es -S02- . 18. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 13 o 14 en donde L es -C0NH- . 19. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 13 o 14 en donde L es -C0NHCH2-. 20. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 7 en donde R5 es acetoxilo. 21. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3 en donde D1 es naftilo. 22. Un compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3 en donde D1 es seleccionado del grupo que consiste en: X es halógeno. 23. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3 en donde D1 es C3-8cicloalquilo . 24. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3 en donde D1 es seleccionado del grupo que consiste en ciclopropilo , ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo. 25. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3 en donde D1 es heteroarilo. 26. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3 en donde D1 es heterociclilo . 27. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes En donde el grupo heteroarilo, sólo o como parte del grupo que contiene una porción de heteroarilo, es seleccionado del grupo que consiste en: , N , N'NH, N , ivT , N - N-N ~NA N , y ^ cada uno de los cuales es, opcionalmente, sustituido por 1 a 2 sustituyentes que se seleccionan de forma independiente del grupo que consiste en: C1-8 alquilo, amino, hidroxilo, oxo, halo, Ci-8 alcoxi, hidroxiCi_8alquilo- , aminoCi-8alquilo, Ci-8alquilocarbonilo, haloCi-8alquilo, C3-8cicloalquilo, Ci_8aminocicloalquilo , aminoCi_8alquilenocarboilo , aminocarbonilo, Ci-8alquilenoaminoCi-8alquilenocarbonilo, Ci-8alcoxiCi_8alquilenocarbonilo, hidroxiCi-8alquilenocarbonilo, hidroxiCi-8alcoxicarbonilo, Ci-8 alcoxicarboilamino, arilo, ariloCi-8 alcoxicarboilamino, Ci-8alquilosulfonilo, aminoCi-8alquilenosulfonilo, aminosulfonilo, Ci-aalquilenoaminoCx-salquilenosulfonilo, Ci-8alkoxiCi-8alquilenosulfoninlo, hidroxiCi-8alquilenosulfonilo, hidroxiCx-galcoxisulfonilo, aminosulfonilo y C1-8alquiloheterociclilo . 28. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes En donde el grupo heteroarilo, sólo o como parte del grupo que contiene una partícula de heteroarilo, es seleccionado del grupo que consiste en: que se seleccionan de forma independiente del grupo que consiste en: Ci-8 alquilo, Ci-8alquilocarboilo, Ci-8aminocicloalquilo, aminoCi-8alquilenocarbonilo, aminocarbonilo, Ci-8alquilenoaminoC1-8alquilenocarbonilo, Ci-8alkoxiCi-8alquilenocarbonilo, hidroxiCi-8alquilenocarbonilo, hidroxiCi_8alcoxicarboilo, aminocarbonilo, amino, Ci-8 alcoxicarboiloamino, arilo, ariloCi-s alcoxicarbonilamino, hidroxilo, C1-8 alcoxi, Ci-8alquilosulfonilo, aminoC1-8alquilenonesulfonilo, aminosulfonilo, Ci-8alquilenoaminoCi-8alquilenosulfonilo, Ci-8alcoxiCi-8alquilenosulfonilo, hidroxiCi-8alquilenosulfonilo, hidroxiCi-8alcoxisulfonilo, aminosulfonilo, oxo, halo, fenilo y Ci_8alquiloheterociclilo y la línea ondulada indica el punto de unión al resto de la molécula. 29. Un compuesto de acuerdo con las reivindicaciones l a 3 en donde R5 es seleccionado del grupo que consiste en: cada uno de los cuales es, opcionalmente sustituido por 1 a 2 sustituyentes , seleccionados de forma independiente del grupo que consiste en Ci-8alquilo, hidroxiCi-8alquilo- , aminoCi.8alquilo, Ci-8alquilocarbonilo, aminocarbonilo, hidroxi, oxo, halo, haloCi-8alquilo, aminosulfonilo y C3-8cicloalquilo . 30. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 29 en donde R5 es seleccionado del grupo que consiste en: y \=/ , cada uno de los cuales es, opcionalmente sustituido por 1 a 2 sustituyentes , seleccionados de forma independiente del grupo que consiste en Ci-8alquilo, hidroxiCi-8alquilo- , aminoCi_8alquilo , C1-8alquilocarbonilo, aminocarbonilo, hidroxi, oxo, halo, haloCi-8alquilo, aminosulfonilo y C3-8cicloalquilo . 31. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 29 en donde R5 es seleccionado del grupo que consiste en 32. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en donde D1 es heteroarilo bicíclico. 33. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 32 en donde D1 es seleccionado del grupo que consiste en: opcionalmente , por 1 a 3 R sustituyentes seleccionados de forma independiente del grupo que consiste en: Ci-8 alquilo, Ci-8alquilocarbonilo, aminoCi-8alquilenocarbonilo, aminocarbonilo, Ci-8alquilenoaminoCi-8alquilenocarbonilo, Ci-8alcoxiCi-8alquilenocarbonilo, hidroxiCi-8alquilenocarbonilo, hidroxiCi-8alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, amino, Ci-8 alcoxicarboniloamino, arilolCi-8 alcoxicarboniloamino, hidroxilo, Ci-8 alcoxi, Ci-8alquilosulfonilo, aminoCi-8alquilenosulfonilo , aminosulfonilo, Ci-8alquilenoaminoCi-8alquilenosulfonilo, Ci-8alcoxiCi-8alquilenosulfonilo, hidroxiCi-8alquilenosulfonilo, hidroxiCi-8alcoxisulfonilo, aminosulfonilo, oxo, halo, feilo y Ci-8alquiloheterociclilo y la línea ondulada indica el punto de unión al resto de la molécula. 34. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 33 en donde es seleccionado del grupo que consiste en: 35. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 34 en donde D1 es seleccionado del grupo que consiste en: y la línea ondulada indica el punto de unión al resto de la molécula. 36. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 34 en donde D1 es seleccionado del grupo que consiste en: la línea ondulada indica el punto de unión al resto de la molécula . 37. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 36, seleccionado del grupo que consiste en: 38. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde E1 es seleccionado de forma independiente del grupo que consiste en Ci-8alquilo, heteroarilo, heterociclilo, halo, Ci-8haloalquilo, Ci-8alcoxi, Ci-8acilo, aminoCi-8alquilo, aminosulfonilo, Ci-8alquilosulfonilo y acilamino. 39. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 38 en donde cada E1 es seleccionado de forma independiente del grupo que cada E1 es seleccionado de forma independiente del grupo que consiste en 41. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes en donde R2 es amino . compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde porción: en donde X e Y son, cada uno, seleccionados de forma independiente del grupo que consiste en CH2, NH, NCOCH3 y S. 43. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde la porción: es seleccionada del grupo que consiste en: en donde cada R8a y R8b es, independientemente, H, hidroxilo, halo o, si se encuentran en carbonos adyacentes, pueden combinarse con los átomos a los cuales están unidos para formar un anillo de benceno fusionado y cada R9a y R9b es, independientemente, H, hidroxilo, halo o, si se encuentran en carbonos adyacentes, pueden combinarse con los átomos a los cuales están unidos para formar un anillo de benceno fusionado y la línea ondulada indica el punto de unión al resto de la molécula. 44. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde la porción: en donde cada R8a y R8b es, independientemente, H o pueden combinarse con los átomos a los cuales están unidos para formar un anillo de benceno fusionado y la línea ondulada indica el punto de unión al resto de la molécula. 45. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde compuesto es representado por la fórmula: en donde cada X e Y son seleccionadas de forma independiente grupo que consiste en CH2, NH, NCOCH3 y S. 46. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde compuesto es representado por la fórmula: 47. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde compuesto es representado por la fórmula: en donde cada X e Y son seleccionadas de forma independiente del grupo que consiste en CH2, NH, NCOCH3 y S. 48. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde el compuesto es representado por la fórmula: 49. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde compuesto es representado por la fórmula: 50. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde el compuesto es representado por la fórmula seleccionada del grupo que consiste en: 51. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde el compuesto es representado por la fórmula seleccionada del grupo que consiste en: en donde cada X e Y son seleccionadas de forma independiente del grupo que consiste en CH2, NH, NCOCH3 y S. 52. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde el compuesto es representado por la fórmula seleccionada del grupo que consiste en: el ado I I 717 56. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 54 representado por la fórmula: 57. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 54 representado por la fórmula: 58. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 54 representado por la fórmula: 59. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 3 en donde la porción : y la línea ondulada indica el punto de unión al resto de la molécula . 60. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 59 en donde el compuesto es representado por la fórmula: 61. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 59 en donde compuesto es representado por la fórmula: 62. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 59 en donde el compuesto es representado por una fórmula seleccionada del grupo que consiste en: 63. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 59 en donde Ría es seleccionado del grupo que consiste en Ci-8alquilo, C3-8cicloalquilo , arilo, heteroarilo y heterociclilo. 64. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde la porción: es seleccionada del grupo que consiste en: 65. Un compuesto que tiene una estructura seleccionada del grupo que consiste en fórmula Ila-c: Ha Ilb lie o un tautómero correspondiente o una sal farmacéuticamente aceptable En donde: E2a es seleccionado del grupo que consiste en Ci-8 alcoxi, Ci-8alquiloC3-8cicloalquilocarboniloamino, Ci-8alcoxiCi-8alquilenocarboniloamino- , Ci-8alcoxicarboniloamino y Ci-8alquilocarboniloamino, R3 es seleccionado del grupo que consiste en H, halo, Ci-8alquilo y Ci-8alcoxi y R4 es seleccionado del grupo que consiste en H, Ci-8alquilo y Ci-8alcoxi Ci-8alquileno . 66. Un compuesto representado por la fórmula (lid) : (Hd) o un tautómero correspondiente o una sal farmacéuticamente aceptable En donde R3 es H o Ci-8alquilo. 67. Un compuesto representado por la fórmula 68. Un compuesto representado por la fórmula (He) (He) en donde D2 es un grupo arilo bicíclico, compuesto de acuerdo con la reivindicación 68 en donde es naftilo, opcionalmente, sustituido por 1 a 2 sustituyentes E2b, seleccionados de forma independiente de grupo que consiste en halo, Ci-ealcoxi y Ci-8alquiloaminocarbonilo . compuesto de acuerdo con la reivindicación 68 en donde es y la línea ondulada indica el punto de unión al resto de la molécula . 71. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 68 en donde D2 es y la línea ondulada indica el punto de unión al resto de la molécula . 72. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 68 en donde D2 es seleccionado del grupo que consiste en: y la línea ondulada indica el punto de unión al resto de la molécula . 73. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 68 representado por la fórmula: 74. Un compuesto que tiene la estructura que se encuentra descripta en los Ejemplos. 75. Un compuesto que tiene la estructura que se encuentra descripta en las Tablas. 76. Un compuesto que tiene la estructura que se encuentra descripta en las Figuras. 77. Una composición que comprende un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes en combinación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable. 78. Un método para inhibir quinasa syk o JAK o una vía de transducción de señal mediado al menos parcialmente por actividad de quinasa syk que comprende el paso de conectar una célula con un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes . 79. Un método para tratar un trastorno o enfermedad mediado al menos parcialmente por actividad de quinasa syk en un sujeto que comprende el paso de administrarle al sujeto que necesita ese tratamiento una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición de acuerdo con la reivindicación. 80. El método de acuerdo con la reivindicación 79 en donde el trastorno o enfermedad son seleccionados del grupo que consiste en enfermedad cardiovascular, enfermedad inflamatoria, enfermedad autoinmune y trastorno proliferativo de células. i 81. El método de acuerdo con la reivindicación 79 en donde dicha enfermedad cardiovascular es seleccionada del grupo que consiste en restenosis, trombosis, púrpura trombocitopénica inmune, I trombocitopenia inducida por heparina, cardiomiopatía dilatada, ! _ enfermedad de células falciformes, arterioesclerosis , infarto de ij miocardio, inflamación vascular, angina inestable y síndromes I ! coronarios agudos . I ¡ 82. El método de acuerdo con la reivindicación 79 en donde dicha i enfermedad inflamatoria es seleccionada del grupo que consiste en alergia, asma, artritis reumatoidea, enfermedades mediadas por ii células B como el linfoma no-Hodgkin, síndrome anti-fosfolípido, ¡ lupus, soriasis, esclerosis múltiple y enfermedad renal en fase I ¡ terminal . i : 83. El método de acuerdo con la reivindicación 79 en donde dicha I ¡ \ enfermedad cardiovascular es seleccionada del grupo que consiste ! I en trombosis, púrpura trombocitopénica inmune y trombocitopenia I ! i |! inducida por heparina. i i I I 20 I I I I I I 84. El método de acuerdo con la reivindicación 79 en donde dicha l i I I ¡ 1 enfermedad inflamatoria es artritis reumatoidea o linfoma no- I i ' '¦ Hodgkin. 85. El método de acuerdo con la reivindicación 79 En donde dicha enfermedad de células falciformes es seleccionada del grupo que consiste en anemia drepanocí ica, enfermedad de hemoglobina C falciforme, talasemia beta-plus falciforme y talasemia beta-cero falciforme . 86. El método de acuerdo con la reivindicación 79 en donde dicha enfermedad relacionada con el sistema inmunológico es seleccionada del grupo que consiste en una enfermedad mediada por células T, una enfermedad autoinmune, rechazo de huésped vs . injerto, rechazo de injerto vs . huésped, una reacción hipersensible de Tipo IV y rechazo alográfico. 87. El método de acuerdo con la reivindicación 79 en donde dicha enfermedad autoinmune es seleccionada del grupo que consiste en anemia hemolítica, púrpura trombocitopénica inmune, esclerosis múltiple, síndrome de Sjorgen, diabetes, artritis reumatoidea, lupus y soriasis. 88. El método de acuerdo con la reivindicación 79 en donde dicho trastorno proliferativo de células es leucemia, linfoma, trastornos mieloproliferativos , malignidades hematológicas y mielofibrosis idiopática crónica. 89. El método de acuerdo con la reivindicación 79 en donde dicho trastorno es leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica crónica o linfoma no relacionado con el mal de Hodgkin. 90. Un kit que comprende una composición de acuerdo con la reivindicación 77, almacenado e instrucciones de uso.
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