MX2008001056A

MX2008001056A - Uso de proteinas no enzimaticas de superficie activa para lavar textiles.

Info

Publication number: MX2008001056A
Application number: MX2008001056A
Authority: MX
Inventors: Thomas Subkowski; Dieter Boeckh; Hans-Georg Lemaire; Claus Bollschweiler; Ulf Baus; Marvin Karos; Thorsten Montag; Volker Schwendemann
Original assignee: Basf Ag
Priority date: 2005-08-01
Filing date: 2006-07-27
Publication date: 2008-03-19
Also published as: ATE485359T1; AU2006274836B2; CN101233220B; EP1913123B1; WO2007014897A1; ES2352970T3; DE502006008140D1; AU2006274836A1; US20090101167A1; CA2617092A1; ZA200801881B; KR20080041228A; JP5105441B2; BRPI0614703A2; JP2009503280A; CN101233220A; EP1913123A1

Abstract

La invencion se refiere al uso de proteinas no enzimaticas de superficie activa para lavar textiles, detergentes para lavar textiles que comprenden proteinas no enzimaticas de superficie activa y metodo para lavado usando dichas proteinas.

Description

USO DE PROTEÍNAS NO ENZIMATICAS DE SUPERFICIE ACTIVA PARA LAVAR TEXTILES DESCRIPCIÓN La presente invención se refiere al uso de proteinas no enzimáticas de interfase activa para lavar textiles. Además se refiere lavar composiciones para lavados textiles que comprenden proteínas no enzimática de interfase activa y a un proceso para lavado usando dichas proteinas. La remoción de suciedad, especialmente de manchas hidrofóbicas,' en lavados textiles en la actualidad tiene éxito a un grado satisfactorio solo a temperaturas relativamente altas. A temperaturas moderadas y especialmente a temperatura ambiente, aún hay demanda considerable para una mejora del desempeño de lavado. De acuerdo con la técnica anterior, se logra la remoción de manchas hidrofóbicas en particular con agentes tensioactivos y enzimas lipoliticas. El uso de proteínas enzimáticas como un aditivo para lavar composiciones se conocen en principio. Especialmente las proteasas se usan en composiciones de lavado, pero el uso de amilasas, celulasas o lipasas, también se conoce. Se dan detalles adicionales, por ejemplo, en "Waschmittel-Enzyme" [Washing composition enzymes] en Rómpp Chemie-Lexikon, Edición en línea, Versión 1.6, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgat, New York, Febr. 2005. También se sabe que se pueden usar proteínas para fijar auxiliares de lavado, por ejemplo, fijadores, protectores de UV, perfumó sustancias o auxiliares para quitar manchas, a la fibra. Para este fin, WO 98/00500 describe el uso de celulazas, derivados de celulasas, o proteínas similares a celulasas, y WO 01/26357 para este fin describe una proteína de fusión con un sitio de unión para celulosa a un sitio de unión para otros compuestos. Las proteínas de interfase activa se conocen en principio. Una clase de proteínas con actividad superficial particularmente fuerte es el de las "hidrofobinas" así llamadas. Las hidrofobinas tienen una afinidad marcada para las interfases y por lo tanto son adecuadas para revestir superficies. Por ejemplo, Teflón pueden hidrofilizarse revistiendo la superficie de teflón con hidrofobinas. Las hidrofobinas son pequeñas proteínas de aproximadamente 100 a 150 aminoácidos, que son características de hongos filamentosos, por ejemplo, Schizophyllumm commune. Generalmente tienen 8 unidades de cisteínas . Las hidrofobinas principalmente se pueden aislar de fuentes naturales. Sin embargo, también pueden obtenerse por medio de métodos de ingeniería genética. La solicitud previa PCT/EP2006/050719 describe dicho proceso de preparación para hidrofobinas . La técnica anterior propone el uso de hidrofobinas para varias aplicaciones. WP 96/41882 propone el uso de hidrofobinas como emulsificantes, espesantes substancias de superficie activa, para hidrofilizar superficies hidrofóbicas, para mejorar la resistencia al agua de sustratos hidrofilitos, para preparar emulsiones de aceite en agua o emulsiones de agua en aceite. Además, se proponen las aplicaciones farmacéuticas tales como la producción de ungüentos o cremas y aplicaciones cosméticas tales como protección de la piel o la producción de champús o enjuagues para cabello. EP 1 252 516 describe la cubierta de ventanas, lentes de contacto, biosensores, equipo médico, excipientes para realizar pruebas o para almacenamiento, cascos de barcos, partículas sólidas o marcos o estructuras de vehículos de pasajeros con una solución que comprende hidrofobinas a una temperatura de 30° a 80 °C. WO 03/53383 describe el uso de hidrofobina para tratar materiales de queratina en aplicaciones cosméticas. WO 03/10331 describe un sensor revestido con hidrofobina, por ejemplo un electrodo de prueba a la cual las sustancias adicionales, por ejemplo, sustancias electroactivas, anticuerpos o enzimas se unen en una forma no covalente. El uso de proteinas no enzimáticas de interfase activa, especialmente de hidrofobinas, como un aditivo para eliminar suciedad para lavar composiciones no ha sido descrita a la fecha. Un objeto de la invención fue proveer composiciones de lavado mejoradas y procesos mejorados para lavar textiles. No deberá ser notorio especialmente para un desempeño de lavado mejorado en el caos de lavar a bajas temperaturas. Consecuentemente, se ha encontrado el uso de proteínas no enzimáticas de interfase activa para lavar textiles . En un segundo aspecto de la invención, se han encontrado composiciones de lavado que comprenden proteínas no enzimáticos de interfases activas. En un tercer aspecto de la invención, un proceso para lavado en el cual se ha encontrado un licor de lavado que comprende proteínas no enzimáticas de interfase activa. En una modalidad particular del proceso, el lavado se lleva a cabo a una temperatura de no más de 60 °C. En una modalidad particularmente preferida de la invención, las proteínas no enzimáticas de interfase activa en cada caso son hidrofobinas.

Sorprendentemente, se ha encontrado que la adición de las proteínas no enzimáticas de interfase activa al licor de lavado enjuaga una mejora importante en la acción de lavado. Fue particularmente sorprendente que este efecto es a temperaturas de lavado bajas y también en el caso de usa cantidades extremadamente pequeñas de proteínas. Por ejemplo, aún a una concentración solo de aproximadamente 2.5 ppm de proteína en el licor de lavado en combinación con una composición de lavado convencional a una temperatura de lavado de solo 25°C, se encuentra una mejora en la acción de lavado de hasta 8%. Además de la mejora de la acción de separación de suciedad, una acción de inhibición de color grisáceo también se observó para manchas oleosas de color. Las manchas hidrofóbicas que pueden lavarse de los textiles en el transcurso del lavado pueden volverse a depositar en la lavandería en forma finamente dividida y por lo tanto conduce al color gris o decoloración. Por su naturaleza, este efecto es particularmente notorio en telas de color blanco o pálido. Este problema ocurre especialmente cuando los agentes tensioactivos y el sistema de mejorador están a una baja dosis. La adición de la invención de proteínas no enzimáticas de interfase activa reduce este redepósito y por lo tanto mejora la blancura de la tela lavada comparado con las telas que se han lavado sin la adición de dichas proteínas.

Los detalles específicos de la invención son los siguientes : Para llevar a cabo la invención, se usan las proteínas no enzimáticas de interfase activa. El término "no enzimático" se pretende que signifique que las proteínas tienen preferiblemente ningún o por lo menos ninguna acción enzimática importante. El termino "interfase activa" se pretende que signifique que la proteína usada tiene la capacidad de influenciar las propiedades de interfases. Las interfases en cuestión pueden ser interfases de sólido-sólido, sólido-líquido, sólido-gaseoso, líquido-líquido o líquido gaseoso. En particular, pueden ser interfases sólido-líquido o líquido-líquido. En el caso de una interfase sólido-líquido, la propiedad, por ejemplo, puede ser hidrofilicidad o hidrofobicidad de la superficie sólida, que cambia bajo la influencia de la proteína usada. La carga en la hidrofilicidad o hidrofobicidad puede medirse en una forma conocida por la medición del ángulo de contacto de una gota de agua en la superficie revestida y no revestida. Una propiedad de interfase adicional es el cambio en la tensión superficial de un líquido, que puede medirse por métodos conocidos .

Para llevar a cabo la invención, se da preferencia al uso de proteínas que tienen superficie activa aún a bajas concentraciones. Las proteínas adecuadas son especialmente aquellas que tienen propiedades importantes de interfase activa aún a concentraciones de 0.05 a 50 ppm. En una modalidad preferida de la invención, las proteínas usadas son aquellas que caracterizan la propiedad de ocasionar un incremento en en ángulo de contacto de una gota de agua (5 µl) de por lo menos 20° después de la aplicación a una superficie de vidrio a temperatura ambiente, comparado con el ángulo de contacto de una gota de agua igualmente grande con la superficie de vidrio no revestida. Se da preferencia al uso de proteínas para las cuales el incremento del ángulo de contacto es de por lo menos 25°, más preferiblemente de por lo menos 30°. El desempeño de las mediciones de ángulo de contacto se conoce en principio a los expertos en la materia. Las condiciones experimentales exactas para un método adecuado a manera de ejemplo para medir el ángulo de contacto se detallan en la parte experimental. En una modalidad particularmente preferida de la invención, las proteínas usadas son hidrofobinas. En el contexto de la presente invención, el término "hirofobinas" deberán entenderse después para significar polipéptidos de la fórmula estructural general (I) .

Xn-C -X1-50-C -Xo-5~C -X?-?oo_C -X?-?oo~C -X?-50~C _X?-50~C -Xm (I) en donde X puede ser cualquiera de los 20 aminoácidos presentes en la naturaleza (Phe, Leu, Ser, Tyr, Cys, Trp, Pro, His, Gln, Arg, lie, Met., Thr, Asn, Lys, Val, Ala, Asp, Glu, Gly) . En la fórmula, los radicales X pueden ser iguales o . diferentes en cada caso. Los índices junto X son cada uno el número de aminoácidos en la secuencia de par particular X, X es cisteína, alanina, serina, glicina, metionina, o treonina, en donde por lo menos cuatro de los residuos designados con C son cisteína, y los índices n y m son cada uno independientemente números naturales entre 0 y 500, preferiblemente entre 15 y 300. Los polipéptidos de la fórmula (I) también se caracterizan por la propiedad que llevan a un incremento en el ángulo de contacto de una gota de agua de por lo menos 20°, preferiblemente por lo menos 25° y más preferiblemente 30° a temperatura ambiente después del revestimiento de una superficie de vidrio, comparado en cada caso con el ángulo de contacto de una gota de agua igualmente grande con la superficie de vidrio no revestida. Los aminoácidos diseñados con C1 a C8 preferiblemente son sisteinas; sin embargo, pueden reemplazarse también por otros aminoácidos con llenado de espacios similares preferiblemente por alanina, serina, treonina, metionina o glicina. Sin embargo, por lo menos cuatro, preferiblemente por lo menos 5, más preferiblemente por lo menos 6 y en particular por lo menos 7 de las posiciones C1 a C8 deberán consistir de cisteinas. En las proteínas de la invención, las cisteinas pueden estar presentes en forma reducida o forma de puentes de disulfuro unos con otros. La preferencia particular se da a la formación intramolecular a puentes de C-C, especialmente que con por lo menos un puente de disulfuro intramolecular, preferiblemente 2, más preferiblemente 3 y más preferiblemente 4 puentes de disulfuro intramolecular. En el caos del intercambio descrito antes de cisteinas para aminoácidos con llenado de espacios similares, tales como posiciones C se intercambian ventajosamente en pares que pueden formar puentes de disulfuro intramoleculares entre otros. Si las cisteinas, serinas, alaninas, glicinas, metioninas, o treoninas también se usan en las posiciones designadas con X, la numeración de las posiciones C individuales en las fórmulas generales pueden cambiar correspondientemente. Se da preferencia al uso de hidrofobinas de la fórmula general (II) Xn-C -X3-25~C -Xo-2-C -X5-50-C -X2-i5~C -X0-2-C -X3-35~C -Xm (II) para realizar la presente invención, en donde X, C y los índices además de X y C son cada uno definidos antes, los índices n y m son cada uno números entre 0 y 350, preferiblemente de 15 a 300, las proteínas caracterizan adicionalmente el cambio ilustrado antes en el ángulo de contacto, y además, por lo menos 6 de los residuos designados con C son cisteina. Más preferiblemente, todos los residuos C son cisteina. Se da preferencia particular para usar hidrofobinas de la fórmula general (III) Xn-C -X5-9-C -C -Xn-39-C -X2-23~C -X5-9-C -C -X6-i8~C -X (III) en donde X, C y los índices además de X son cada uno como se definió antes, los índices n y me son cada uno números entre 0 y 200, y las proteinas caracterizan adicionalmente el cambio ilustrado antes en ángulo de contacto y por lo menos 6 de los residuos designados con C son cisteina. Más preferiblemente, todos los residuos C son cisteina. Los residuos de Xn y Xm pueden ser secuencias de péptidos que también se unen naturalmente a una hidrofobina. Sin embargo, uno o ambos residuos también pueden ser secuencias de péptidos que naturalmente no se unen a una hidrofobina. Se entiende que esto también significa aquellos residuos de Xn y/o Xm en los cuales una secuencia de péptidos que ocurre naturalmente en una hidrofobina se mide por una secuencia de péptidos que no ocurre naturalmente en una hidrofobina. Si Xn y/o Xm son secuencias de péptidos que no se unen naturalmente a hidrofobinas, dichas secuencias generalmente son de por lo menos 20, preferiblemente por lo menos 35, más preferiblemente por lo menos 50 y, por ejemplo, por lo menos 100 aminoácidos de longitud. Las secuencias, por ejemplo, pueden ser secuencias de 20 a 500, preferiblemente de 30 a 400 y más preferiblemente de 35 a 100 aminoácidos. Dicho residuo que no se une naturalmente a una hidrofobina también será denominado de aquí en adelante como una pareja de fusión. Se pretende que esto exprese que las proteínas pueden consistir de por lo menos una porción de hidrofobina y una porción de pareja de fusión que no ocurre junto en esta forma en la naturaleza. La porción de pareja de fusión puede seleccionarse de una multitud de proteínas. También es posible que solo una pareja de fusión única se una a la porción de hidrofobina, o también es posible que una pluralidad de parejas de fusión se unan a una porción de hidrofobina, por ejemplo la terminación amino (Xn) y en la terminación carboxilo (Xm) de la porción de hidrofobina. Sin embargo, también es posible, por ejemplo, que dos parejas de fusión se unan a una posición (Xn o Xm) de la proteína de la invención.

Las parejas de fusión particularmente adecuadas son proteínas que están presentes en la naturaleza en microorganismos, especialmente en E. coli o Bacillus subtilis. Ejemplos de dichas parejas de fusión son las secuencias yaad (SEC ID NO: 15 y 16) , yaae (SEC ID NO: 17 y 18) y tioredoxina. También son muy adecuados los fragmentos o derivados de estas secuencias que comprende solo algo, por ejemplo de 70 a 99%, preferiblemente de 5 a 50%, y más preferiblemente de 10 a 40% de las secuencias mencionada so en las cuales se han cambiado los aminoácidos o nucleótidos individuales comparado con la secuencia mencionada, en cuyo caso los porcentajes se basan cada uno en el numero de aminoácidos . En una modalidad adicional preferida, la hidrofobina de fusión, así como la pareja de fusión mencionada, como un grupo Xn o Xm o como un constituyente terminal de dicho grupo, también tiene un dominio de afinidad así llamado (etiqueta de afinidad/seguimiento de afinidad) . En una forma conocida en principio, este comprende grupos de ancla que pueden interactuar con grupos complementarios particulares y pueden servir para trabajo y purificación más fácil de las proteínas. Ejemplos de dichos dominios de afinidad comprenden grupos (His)*, (Arg)k, (Asp)k o (Cys)k, en donde k generalmente es un número natural de 1 a 10. Preferiblemente puede ser un grupo (His)]., en donde k es de 4 a 6. En este caso, .el grupo Xn y/o Xm puede consistir exclusivamente de dicho dominio de afinidad, o ya sea un radical Xn o Xm que se une naturalmente o no se une naturalmente a una hidrofobina se extiende por un dominio de afinidad terminal. Las proteínas usadas de acuerdo con la invención son hidrofobinas o derivados de las mismas también se pueden modificar en su secuencia de polipéptidos, por ejemplo por glicosilación, acetilación o por entrelazamiento químico, por ejemplo con glutaraldehído. Una propiedad de las hidrofobinas o derivados de las mismas usadas de acuerdo con la invención es el cambio en propiedades de superficie cuando las superficies se revisten con las proteínas. El cambio en las propiedades de superficie se pueden determinar experimentalmente, por ejemplo, midiendo el ángulo de contacto de una gota de agua antes y después del revestimiento de la superficie con la proteína y determinando la diferencia de las dos mediciones. El desempeño de mediciones del ángulo de contacto se conoce en principio por los expertos en la materia. Las mediciones se basan en temperatura ambiente y gotas de agua de 5 µl y el uso de palcas de vidrio como sustratos. Las condiciones experimentales exactas para un ejemplo de un método adecuado para medir el ángulo de contacto se dan en la sección experimental. Bajo las condiciones mencionadas en la misma, las proteínas de fusión usadas de acuerdo con la invención tienen la propiedad de incrementar el ángulo de contacto por lo menos por 20°, preferiblemente por lo menos 25°, más preferiblemente por lo menos 30°, comparado en cada caso el ángulo de contacto de una gota de agua igualmente grande con la superficie de vidrio no revestida. Las hidrofobinas particularmente preferidas para llevar a cabo la presente invención son las hidrofobinas del tipo de dewA, rodA, hypA, sc3, basfl, basf2, que se caracterizan estructuralmente en la siguiente lista de secuencias. También solo pueden ser partes o derivados de las mismas. También es posible para una pluralidad de porciones, preferiblemente 2 ó 3, de estructura idéntica o diferente, que se unan entre ellas y se unan a una secuencia de polipéptidos adecuada correspondiente que no se una a una hidrofobina en la naturaleza. También particularmente adecuado de acuerdo con la invención son las proteínas de fusión yaad-Xa-dewA-his (SEC ID NO: 20), yaad-Xa-rodA-his (SEC ID NO: 22) o yaad-Xa-basf1-his (SEC ID NO: 24) truncando la pareja de fusión de yaad. En lugar de la pareja de fusión de yaad completa (SEC ID NO: 16) con 294 aminoácidos, puede ser ventajoso el uso de un residuo de yaad truncado. El residuo truncado, podrá comprender por lo menos 20, más preferiblemente por lo menos 35 aminoácidos. Por ejemplo, se puede usar un radical truncado que tiene de 20 a 293, preferiblemente de 25 a 250, más preferiblemente de 35 a 150 y, por ejemplo, de 35 a 100 aminoácidos. N ejemplo de dicha proteína es yaad40-Xa-dewA-his (SEC ID NO: 26) , que tiene un residuo de yaad truncado de 40 aminoácidos. Un sitio de separación entre la hidrofobina y la pareja de fusión o las parejas de fusión pueden utilizarse para liberar la hidrofobina pura en forma no derivada (por ejemplo por separación de BrCN en metionina, separación de factor de Xa, separación de enterocinasa, separación de trombina, separación de TEV, etc.). También es posible generar proteínas de fusión en sucesión de una pareja de fusión, por ejemplo yaad y yaae, y una pluralidad de hidrofobinas, aún de diferente secuencia, por ejemplo DewA-RodA o Sc3-DewA, Sc3-RodA. Es igualmente posible usar fragmentos de hidrofobina (por ejemplo truncaciones de N o C terminal) o muteina que tiene hasta 70% de homología. Las construcciones óptimas en cada caso se selecciona en relación con el uso particular, es decir, las fases líquidas que serán separadas. Las hidrofobinas usadas de acuerdo con la invención usadas para lavado de textiles pueden prepararse químicamente por métodos conocidos de síntesis de péptidos, por ejemplo por síntesis de fase sólida Merrifield. Las hidrofobinas presentes en la naturaleza se pueden aislar de fuentes naturales por medio de métodos adecuados. Se hace referencia a manera de ejemplo a Wósten y otros, Eur. J Cell Bio. 63, 122-129 (1994) o WO 96/41882. Un método de producción de ingeniería genética para las hidrofobinas sin parejas de fusión de Talaromyces thermophilus se describió en US 2006/0040349. Las proteínas de fusión pueden prepararse por métodos de ingeniería genética, en la cual una secuencia de ácidos nucleicos, especialmente la secuencia de ADN, que codifica la pareja de fusión y una que codifica la porción de hidrofobina se combinan en tal manera que la proteína deseada se genera en un organismo huésped como resultado de la expresión de genes de la secuencia de ácidos nucleicos combinados. Dicho proceso de preparación se describió por ejemplo, en PCT/EP2006/050719. Los organismos huésped adecuados (organismos de producción) para el método de preparación mencionado pueden ser procariotes (incluyendo archaea) o eucariote, particularmente bacterias que incluyen halobacteria y metanococcia, hongos, células de insectos, células de plantas y células de mamíferos, más preferiblemnte Escherichia coli, Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, • Aspergillus oryzae, Aspergillus nidulans, Aspergillus niger, Pichia pastoris, Pseudomonas spec., lactobacilli, Hansenula polumorpha, Trichoderma reesei, SF9 (o células relacionadas) , entre otros.

La invención también provee el uso de construcciones de expresión que comprenden, bajo el control genético de secuencias de ácidos nucleicos reguladores, una secuencia de ácidos nucleicos que codifica un polipéptido usado de acuerdo con la invención y también vectores que comprenden por lo menos una des estas construcciones de expresión. Las construcciones usadas comprenden preferiblemente, 51 corriente arriba de la secuencia de codificación particular, un promotor y, 31 corriente abajo, una secuencia de terminador y si es apropiado elementos reguladores comunes adicionales, en cada caso ligadas operativamente a la secuencia de codificación. En el contexto de la presente invención, se entiende que un "enlace operativo" es la disposición secuencias del promotor, secuencia de codificación, terminador y si es apropiado elementos reguladores adicionales de manera que cada uno de los elementos reguladores puede cumplir su función como se pretende en la expresión de la secuencia de codificación. Ejemplos de secuencias ligables operativamente son secuencias que se dirigen al blanco, y también mejoradores, señales de poliadenilación y similares. Los elementos reguladores adicionales comprenden marcadores seleccionables, señales de amplificación, orígenes de replicación y similares. Las secuencias reguladoras adecuadas son, por ejemplo, descritas en Goeddel, Gene Expresson Technology: Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, CA (1990) . Además de estas secuencias de regulación, la regulación natural de estas secuencias aún puede estar presentes corriente arriba de los genes estructurales reales, y, si es apropiado, se han modificado genéticamente de tal manera que intercambian la regulación natural e incrementan la expresión de los genes. Una construcción de ácidos nucleicos preferidos puede comprender ventajosamente una o más secuencias "mejoradoras" así llamadas, unidas funcionalmente con el promotor, que permite la expresión incrementada de la secuencia de ácidos nucleicos. También en el extremo 3' de las secuencias de ADN, es posible que se inserten las secuencias ventajosas adicionales, tal como elementos reguladores o terminadores adicionales. Los ácidos nucleicos pueden estar presentes en la construcción en una o más copias. También es posible que los marcadores adicionales tales como resistencias de antibióticos o genes que complementan auxotrofias estén presentes en la construcción, si es apropiado para la selección de la construcción.

Las secuencias de regulación ventajosas para Ja preparación están presentes, por ejemplo, en promotores tales como el promotor cos, tac, trp, tet, trp-tet, lpp, lac, lpp-lac, laclq-T7, T5, T3, gal, trc, ara, rhaP J rhaPBAD) SP6, lambda-PR o imlambda-P, que encuentran uso ventajosamente en bacterias gram negativas. Las secuencias de regulación ventajosa adicionales, están presentes, por ejemplo, en los promotores gram-positivos amy y SP02, y en los promotores de levaduras o fúngicos ADC1, MFalfa, AC, P-60, CYC1, GAPDH, TEF, rp28, ADH. También es posible usar promotores sintéticos para la regulación. Para la expresión en un organismo huésped, la construcción de ácido nucleico se inserta ventajosamente en un vector, por ejemplo, un plásmido o un fago que permite la expresión óptima de los genes en el huésped. Aparte de los plásmidos y fagos, también se entiende que los vectores significan os otros vectores conocidos para los expertos en la materia, por ejemplo, virus tales como SV40, CMV, baculovirus y adenovirus, transposones, elementos de IS, fásmidos, cósmidos, y ADN lineal o circular, y también el sistema de Agrobacterium. Estos vectores pueden replicarse autónomamente en el organismo huésped o replicase cromosomalmente. Los plásmidos adecuados son por ejemplo, en E. coli pLG338, pACYC184, pBR322, pUC18, pUC19, pKC30, pRep4, pHSl, pKK223-3, pDHE19.2, pHS2, pPLc236, pMBL24, pLG200, pUR290, pIN-III"3-Bl, tgtll o pBdCl, en Streptomyces pIJIOl, pIJ364, pIJ702 o pIJ361, en Bacillus pUBUO, . pC194, o pBD214, en Corynebacterium pSA77 o pAJ667, en hongos pALSl, pIL2 o pBD214, en Corynebcterium pSA77 o pAJ667 en hongos pALSl, pIL2 o pBB116, en levaduras 2alfa, pAG-1, YEp6, YEpl3 o pEMBLYe23 o en plantas pLBV23, pGHIac+, pBIN19, pAK2004 o pDH51. Los plásmidos mencionados constituyen una pequeña selección de los plásmidos posibles. Los plásmidos adicionales se conocen por los expertos en la materia y se pueden tomar, por ejemplo, del libro de Cloning Vectors (Eds. Pouweis P. H. y otros, Elsevier, Amsterdam-New Yrk-Oxford, 1985, ISBN 0 444 904018) . Ventajosamente, la construcción de ácidos nucleicos, para la expresión de los genes adicionales presentes, adicionalmente también comprenden secuencias reguladoras 3' y/o 5 ' -terminales para mejorar la expresión, que se selecciona para la expresión óptima dependiendo del organismo huésped y gen o genes seleccionados. Estas secuencias reguladoras se pretende que permiten la expresión controlada de los genes y la expresión de proteínas. Dependiendo en el organismo huésped, puede significar, por ejemplo, que el gen se expresa o sobre-expresa solo después de la inducción o que puede expresarse y/o sobreexpresarse inmediatamente. Las secuencias reguladoras o factores pueden influenciar positivamente de manera preferida y por lo tanto incrementar la expresión de genes de los genes introducidos. Por lo tanto, una amplificación de los elementos reguladores pueden efectuarse ventajosamente en el nivel de transcripción usando señales de transcripción fuertes tales como promotores y/o mejoradores. Además, también es posible mejorar la traslación, por ejemplo, mejorando la estabilidad del ARNm. En una modalidad adicional del vector, el vector comprendiendo la construcción de ácidos nucleicos o el ácido nucleico también se puede introducir en los microorganismos ventajosamente en la forma de un ADN lineal e integrarse en el genoma del organismo huésped por medio de recombinación heterólogo u homologa. Este ADN lineal puede consistir de un vector linearizado tal como un plásmido o solo la construcción de ácidos nucleicos o el ácido nucleico. Para una expresión óptica de genes heterólogos en organismos, es ventajoso alterar las secuencias de ácidos nucleicos de acuerdo con el "uso de codón" específico usado en el organismo. El "uso de codón" pede determinarse fácilmente con referencia a las evaluaciones de computadora u otros, genes conocidos del organismo en cuestión.

Un cásete de expresión se prepara por fusión de un promotor adecuado con una secuencia de nucleótidos de codificación adecuado y una señal de terminador o señal de poliadenilación. Con este fin, se han usado las técnicas de recombinación y clonación comunes, como se describió por ejemplo, en T. Maniatis, E. F. Fritsch y J. Sambrook, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Sprilg Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY (1989) y en T. J. Silhavy, M. L. Bellan y L. W. Enquist, Experiments with Gene Fusions, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY (1984) y en Ausubel, F. M. y otros, Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Assoc. and Wiley Interscience (1987) . Para la expresión en un organismo huésped adecuado, la construcción de ácidos nucleicos recombinantes o construcción de genes se inserta ventajosamente en un vector específico para huésped que permite una expresión óptima de los genes en el huésped. Los vectores son bien conocidos para los expertos en la técnica y pueden tomarse, por ejemplo, de "Cloning Vectors" (Puwels P.H. y otros, eds., Elsevier, Amsterdam-New York-Oxford, 1985) . Con la ayuda de vectores, es posible preparar microorganismos recombinantes que se han transformado, por ejemplo, con por lo menos un vector y se pueden usar para la producción de las hidrofobinas o derivados el mismo usados de acuerdo con la invención. Ventajosamente, las construcciones recombinantes descritas antes se introducen en un sistema huésped adecuado y expresado. Se da preferencia al uso de métodos de clonación y transfección familiarizados con los expertos en la materia, por ejemplo coprecipitación, fusión de protoplastos, electroporación, transfección retroviral y similares, con el fin de tomar la expresión de los ácidos nucleicos mencionados en el sistema de expresión particular. Los sistemas adecuados se describen, por ejemplo, en Current Protocols in Molecular Biology. F. Ausubel y otros, ed., Wiley Interscience, New York 1997, o Sambrook y otros, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2a. edición, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989. También es posible preparar microorganismos recombinados homologamente. Con este fin, se preparó un vector que comprende por lo menos una sección de un gen que se va a usar o secuencia de codificación, en la cual, si es apropiado, por lo menos una supresión, adición o sustitución de aminoácidos se ha introducido con el fin de cambiar, por ejemplo, para alterar funcionalmente la secuencia (vector de "eliminación"). La secuencia introducida, por ejemplo, también pede ser una forma homologa de un microorganismo relacionado o será derivado de una fuente de mamífero, levadura o insecto. El vector usado para la recombinación homologa puede configurarse alternativamente de manera que el gen endógeno en el caso de recombinación homologa se ha mutado o alterado de otra manera, pero aún codifica la proteína funcional (por ejemplo, la región reguladora corriente arriba puede cambiar de manera que se cambia la expresión de la proteína endógena) . La sección cambiada del gen usado de acuerdo con la invención está en el vector de recombinación homologa. La construcción de vectores adecuaos para recombinación homologa se describió, por ejemplo, en Thomas, K. R. y Capecchi, M.R. (1987) Cell 51: 503. En principio, todos los organismos procarióticos o eucarióticos son útiles como organismos huésped recombinantes para dichos ácidos nucleicos o construcciones de ácidos nucleicos. Ventajosamente, los organismos huéspedes usados son microorganismos tales como bacterias, hongos o levaduras. Ventajosamente, se usan bacterias gram positivas o gram negativas, preferiblemente bacterias de las familias Enterobacteriaceae, Pseudomonadaceae, Rhizobiaceae, Streptomycetaceae o Nocardiaceae, más preferiblemente bacterias de los géneros Esccherichia, Pseudomonas, Steptomyces, Nocardia, Burkholderia, Salmonella, Agrobacterium o Thodococcus. Los organismos usados en el proceso de preparación para proteinas de fusión recién descritas son, dependiendo el organismo huésped, desarrollados o cultivados en una forma conocida por los expertos en la materia. Los microorganismos se desarrollan generalmente en un medio líquido que comprende una fuente de carbono, usualmente en forma de azúcares, una fuente de nitrógeno, usualmente en la forma de fuentes de nitrógeno orgánico tal como extracto de levaduras o sales como sulfato de amonio, elementos traza tales como hierro, sales de manganeso y magnesio, y también, si es apropiado, vitaminas, a temperaturas entre 0 y 100°C, preferiblemente entre 10 a 60°C, con elaboración de oxigeno. El pH del liquido de nutrientes puede mantenerse a un valor fijo, es decir, se reguló o no durante el desarrollo. El desarrollo puede efectuarse en forma de lotes, forma de semilotes o continuamente. Los nutrientes pueden introducirse al inicio de la fermentación o volverse a llenar semicontinuamente o continuamente. Las enzimas pueden aislarse de los organismos por el proceso descrito en los ejemplos o se pueden usar para la reacción como un extracto crudo. Las hidrofobinas usadas de acuerdo con la invención, o funcional, los fragmentos biológicamente activos de los mismos, se pueden preparar por medio de un proceso para preparación recombinante, en la cual se cultiva un microorganismos productor de polipéptido, la expresión de las proteínas se induce si es apropiado y se aislan del cultivo. Las proteínas también se pueden producir de esa manera en una escala industrial si se desea. El microorganismo recombinante puede cultivarse y fermentarse por procesos conocidos. Las bacterias pueden propagarse, por ejemplo, en medio TB o LB y a una temperatura de 20 a 40°C y un pH de 6 a 9. Las condiciones de cultivo adecuadas como se describió específicamente, por ejemplo, en T. Maiatis, E. F. Fritsch y J. Sambrook, Molecular Cloning: A laboratory Manual, Cpld Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY (1989) . Los parámetros de fusión facilitan la preparación de las hidrofobinas considerablemente. Las hidrofobinas de fusión se producen con rendimientos significativamente mejores que las hidrofobinas sin las parejas de fusión. Si las proteínas no se secretan en el medio de cultivo, las células luego se alteran y el producto se obtiene del lisato por procesos de aislamiento de proteínas conocidos. Según se desea, las células pueden alterarse por ultrasonido de alta frecuencia, por alta presión, por ejemplo en una célula de presión francesa, por osmolisis, por la acción de los detergentes, enzimas líticas o solventes orgánicos por homogenizadores o por combinación de una pluralidad de los procesos listados. Las proteínas pueden purificarse por procesos cromatográficos conocidos, tales como cromatografía de tamiz molecular (filtración de gel) tal como cromatografía de Q Sepharose, cromatografía de intercambio iónico y cromatografía hidrofóbica y también con otros procesos comunes tales como ultrafiltración, cristalización, salación, diálisis y electroforesis de gel nativo. Los procesos adecuados se describen, por ejemplo, en Cooper, F. G., Biochemische Arbeltsmethoden [Biochemical Techniques], Verlag Walter de Gruyter, Berlin, New York, o en Scopes, R., Proteina Purifiction, Springer Verlag, New York, heidelberg, Berlin. Puede ser particularmente ventajoso para facilidad del aislamiento y purificación de las hidrofobinas de fusión proporcionándolas con grupos de ancla específicos que pueden unirse a grupos complementariamente correspondientes en soportes sólidos, especialmente polímeros adecuados. Dichos soportes sólidos, por ejemplo, se pueden usar como un relleno para columnas de cromatografía, y la eficiencia de la separación generalmente puede incrementarse significativamente de esta forma. Dichos procesos de separación también son conocidos como cromatografía de afinidad. Para la incorporación de los grupos de ancla, es posible usar, en la preparación de las proteínas, sistemas de vector u oligonucleótidos que extienden el ADNc por secuencias de nucleótidos particulares y por lo tanto codifican proteínas alteradas o proteínas de fusión. Para purificación más fácil, las proteínas modificadas comprenden las "etiquetas" así llamadas, que funcionan como anclas, por ejemplo, la modificación conocida como el ancla hexa-histidina. Las hidrofobinas de fusión modificadas con anclas de histidina pueden purificarse cromatográficamente, por ejemplo, usando níquel-Sepharose como el relleno de columna. La hidrofobina de fusión puede eluirse de nuevo subsiguientemente de la columna por medio de agentes adecuados para elusión, por ejemplo, una solución de imidazol . En un proceso de purificación simplificado, es posible dispensar con purificación cromatográfica. Con este fin, las células se remueven primero del caldo de fermentación por medio de un método adecuado, por ejemplo, por microfiltración o por centrifugación. Subsecuentemente, las células pueden alterarse por medio de métodos adecuados, por ejemplo, por medio de los métodos ya mencionados, y los desechos celulares pueden separarse de los cuerpos de inclusión. El último puede efectuarse ventajosamente por centrifugación. Finalmente, los cuerpos de inclusión pueden alterarse en una forma conocida en principio con el fin de liberar las hidrofobinas de fusión. Esto puede realizarse, por ejemplo, por medio de ácidos, bases y/o detergentes. Los cuerpos de inclusión con las hidrofobinas de fusión usadas de acuerdo con la invención generalmente pueden disolverse completamente aún usando NaOH 0.1 M dentro de aproximadamente 1 h. La pureza de las hidrofobinas de fusión obtenidas por este proceso simplificado generalmente es de 60 a 80% en peso basado en la cantidad de todas las proteínas. Las soluciones obtenidas por el proceso de purificación simplificado describo se puede usar para realizar esta invención sin purificación adicional. Sin embargo, las hidrofobinas de fusión también pueden aislarse como un sólido de las soluciones. Por ejempio, esto se puede realizar de una forma conocida en principio por secado por congelación o secado por aspersión. En una modalidad preferida de la invención, el aislamiento puede efectuarse por medio de secado por aspersión. El secado por rociado puede realizarse con la solución purificada cromatográficamente, pero también es posible con preferencia al uso de soluciones obtenidas después del proceso de purificación simplificado por la preparación de los cuerpos de inclusión. Para realizar el secado por aspersión, se pueden neutralizar las soluciones si es apropiado. Un rango de pH de 7 a 9 se ha encontrado particularmente ventajoso. También se puede observar generalmente concentrar ligeramente las soluciones de partida. Una concentración de sólido útil en la solución de partida se ha encontrado que es de hasta 30% en peso. Un contenido de sólidos de >5% conduce generalmente a un polvo de producto fino. Subsiguientemente, la solución puede secarse por aspersión en una forma conocida en principio. El aparato adecuado para secar por aspersión esta comercialmente disponible. Las condiciones de secado por aspersión óptimas varían con el tipo unitario y paso deseado. Las temperaturas de entrada de 1230 a 180 °C y temperaturas de salida de 50 a 80°C se han encontrado favorables para soluciones de hidrofobina. Opcionalmente, es posible usar auxiliares, para azúcares del ejemplo, manitol, dextrano o maltodextrina, para el secado por aspersión. Se ha encontrado que una cantidad útil es de 0 a 30% en peso, preferiblemente de 5 a 20% en peso de dichos auxiliares basados en hidrofobina. Las hidrofobinas preparadas como se describió se pueden usar ya sea directamente como proteínas de fusión o después de la eliminación y remoción de la pareja de fusión, como hidrofobinas "puras". Cuando se pretende una remoción de la pareja de fusión, se deberá incorporar un sitio de separación potencial (sitio de reconocimiento específico para proteasas) en la proteína de fusión entre una porción de hidrofobina y porción de parejas de fusión. Los sitios de separación adecuados son especialmente aquellas secuencias de péptidos que de alguna manera no ocurren en la porción de hdidrofobina ni en la porción de parejas de fusión, que pueden determinarse fácilmente con herramientas bioinformáticas. Los ejemplos particularmente adecuados son la separación de BrCN en metionina, o separación mediada por proteasa con la separación de Factor Xa, separación de enterocinasa, separación de trombina o separación de TEV (proteasa de virus de gravado con tabaco) . Para el uso de la invención para lavado textil, las proteínas no enzimáticas de interfase activa se pueden usar principalmente como un componente de una composición de lavado y se pueden agregar de esta forma al licor de lavado. Sin embargo, también es posible agregar la proteina no ezimática con interfase activa al licor de lavado por separado, y usar una composición de lavado que está libre de las proteínas no enzimáticas con interfase activa. La adición separada puede efectuarse por la adición de la proteína en forma sólida, como una solución o como una formulación, se apreciará que los dos métodos de adición también se combinan. La cantidad de la proteína no enzimática de interfase. activa en el licor de lavado se determina por el experto en la materia de acuerdo con el efecto deseado. Una cantidad útil generalmente se ha encontrado que es de 0.05 a 50 ppm, preferiblemente de 0.1 a 30 ppm, más preferiblemente de 0.2 a 20 ppm, aún más preferiblemente de 0.5 a 10 ppm y, por ejemplo de 1 a 6 ppm. * Las composiciones de lavado de la invención comprenden por lo menos una sustancia de lavado activa y por lo menos una proteína no enzimática de interfase activa.

Por lo menos una proteína no enzimática de interfase activa preferiblemente es una proteína que ocasiona el cambio en el ángulo de contacto mencionado en la salida, más preferiblemente por lo menos una hidrofobina. Se apreciará que también es posible usar mezclas de diferentes proteínas. Si se usan hidrofobinas, se pueden usar como una hidrofobina "pura" o también en la forma de las proteinas de fusión mencionadas antes. Se ha encontrado que los ejemplos útiles para realizar la presente invención son las proteínas de fusión del tipo de yaad-Xa-dewA-his (SEC ID NO: 20), tipo de yaad-Xa-rodA-his (SEC ID NO: 22) o tipo de yaad-Xa-basf1-his (SEC ID NO: 24) . Se ha encontrado que un ejemplo particularmente útil es yaad-Xa-dewA-his (SEC ID NO: 20) con pareja de fusión de yaad completa o ya sea con una pareja de fusión truncada, por yaad40-Xa-dewA-his (SEC ID NO J 26) . El término "composición de lavado para lavado textil" es auto-explicatoria y restrictiva al mismo tiempo. Las composiciones de lavado para lavar textiles, se usan por ejemplo en forma de polvos, granulos, pellas, pastas, tabletas, genes o líquidos, generalmente en solución acuosa (licor de lavado) . Su acción consiste de un entrejuego relativamente complejo de proceso químicos y fisicoquímicos. Las composiciones de lavado comprenden por lo menos una sustancia activa con agua, pero generalmente una pluralidad de diferentes sustancias activas en el lavado que interactúan para dar un resultado de lavado óptimo. Los componentes activos en el lavado importantes de composiciones de lavado son especialmente agentes tensioactivos y también aglutinantes, co-aglutinantes, sistemas de blanqueo y enzimas de composición de lavado. Es adicionalmente posible usar aditivos típicos, por ejemplo fragancias, inhibidores de corrosión, inhibidores de transferencia de colorantes, inhibidores de espuma o abrillantadores ópticos como componentes de composiciones de lavado. Los agentes tensioactivos no iónicos adecuados son en particular: alcoholes de C8-C22 alcoxilados, tales como alcoxilatos de alcohol graso, alcoxilatos de alcohol oxo y etoxilatos de alcohol Guerbet: la alcoxilación se puede efectuar con óxido de etileno, óxido de propileno y/o óxido de butileno. Los copolímeros de bloque o copolímeros aleatorios pueden estar presentes. Por 1 mol de alcohol, normalmente comprenden de 2 a 50 mol, preferiblemente de 3' a 20 mol, de por lo menos un óxido de alquileno. Un óxido de alquileno preferido es óxido de etileno. Los alcoholes preferiblemente tienen de 10 a 18 átomos de carbono. alcoxilatos de alquilfenil, en particular etoxilatos de alquilfenol, que comprenden cadenas de alquilo de Ce-C? y de 5 a 30 mol de óxido de alquileno/mol . - poliglucósidos de alquilo que comprenden cadenas alquilo de Cs-C22, preferiblemente C?0-C?8 y generalmente de 1 a 20, preferiblemente de 1.1 a 5, unidades de glucósido. N-alquilglucamidas, alcoxilatos de amida de ácidos grasos, alcoxilatos de alcanolamida de ácidos grasos, y copolímeros de bloque de óxido de etileno, óxido de propileno y/o óxido de butileno. Los agentes tensioactivos aniónicos adecuados son, por ejemplo: - sulfatos o alcoholes (grasos) que tiene de 8 a 22, preferiblemente de 10 a 18, átomos de carbono, en particular sulfatos de alcohol de Cg-Cp, sulfatos de alcohol de C?2-C?8, por ejemplo un alcohol graso, y luego sulfatan el producto de alcoxilación. Para la alcoxilac-ión, se da preferencia al uso de óxido de etileno. - alquilbencensulfonatos de Ca-C2o lineales (LAS) , preferiblemente alquilbencensulfonatos de Cg-C?3 y alquiltoluensulfonatos de Cg-C?3. - alcansulfonatos, en particular alcansulfonatos de CB-C24, preferiblemente Cío-Ciß. - jabones, tales como sales de sodio y potasio de ácidos carboxílicos de Cs-C2 . Los agentes tensioactivos aniónicos se agregan a la composición de lavado preferiblemente en la forma de sales. Las sales adecuadas son, por ejemplo, sales de metales alcalinos tales como sales de sodio, potasio y litio, y sales de. amonio tales como hidroxietilamonio, di (hidroxietil) amonio y tri (hidroxietil) amonio. Los agentes tensioactivos catiónicos adecuados incluyen: - alquilaminas de C7-C26; - sales de N, N-dimetil-N- (hidroxialquilo de C2-C4) (alquilo de C7-C2s) amonio; compuestos de mono y di- (alquilo de C-C25> dimetilamonio cuaternizados con agentes de alquilación: - cuaternarios de éster, en particular mono, di y trialcanolaminas esterificadas cuaternariamente particulares que se han esterificado con ácidos carboxílicos de C8-C22; - cuaternarios de imidazolina, en particular sales de 1-alquilimidazolinio particulares de las fórmula II o III en la cual las variables se definen de la siguiente manera: R3 es alquilo de C?-C25 o alquenilo de C2-C25; R4 es alquilo de C?~C ; R5 es alquilo de C?~C4 o un radical de C1-(CO)-X-(CH2)m-radical (X: -0- o-NH-; m: 2 ó 3) , en donde por lo menos un radical de R3 es alquilo de C7-C22. Los agentes tensioactivos anfotéricos adecuados, son, por ejemplo, compuestos alquilbetaínas, alquilamido betainas, aminopropionatos, minoglicinatos y inidazolio anfotérico. Si el proceso de lavado, aglutinantes (también conocidos como aglutinantes inorgánicos heterogéneos, HIBs) sirven para suavizar el agua. El soporte de la acción de lavado por su alcalinidad y la lixiviación de iones calcio y magnesio fuera de los puentes de suciedad y fibra, y promueven la dispersión de suciedad pigmentaria en el licor de lavado. Los aglutinantes inorgánicos adecuados son en particular: - alumi isilicatos cristalinos y amorfos que tiene propiedades de intercambio iónico, en zeolitas particulares, varios tipos de zeolitas son adecuadas, especialmente las zeolitas A, X, B, P, MAP y HS en su forma de Na o en formas en las cuales Na se ha intercambiado parcialmente para otros cationes tales como Li, K, Ca, Mg o amonio. - silicatos cristalinos, especialmente disilicatos y silicatos de láminas, por ejemplo d- y ß-Na2Si205. Los silicatos se pueden usar en forma de su metal alcalino, sales de metales alcalinotérreos o amonio; se da preferencia a silicatos de sodio, litio y magnesio. silicatos amorfos, tales como metasilicato de sodio y disilicato amorfo. - los carbonatos e hidrogenocarbonatos : estos se pueden usar en forma de su metal alcalino, metal acalinotérreo o sales de amonio. Se da preferencia a carbonatos de sodio, litio y magnesio e hidrogenocarbonatos, especialmente carbonato de sodio y/o hidrogenocarbonato de sodio. polifosfatos, tales como trifosfato de t pentasodio. Los co-aglutinantes trabajan sinergísticamente con los aglutinantes, por ejemplo, por una clase de almacén absorción de iones calcio o magnesio más rápidamente que los aglutinantes y luego pasándolos en los aglutinantes. Además, puede evitar su crecimiento por adsorción en semillas cristalinas. Los co-aglutinantes orgánicos adecuados son en particular: - ácidos carboxílicos de peso molecular bajo tales como ácido cítrico, ácido cítrico hidrofóbicamente modificado, v.gr, ácido agárico, ácido málico, ácido tartárico, ácido glucónico, ácido glutárico, ácido succínico, ácido imidodisuccínico, ácido oxidisuccínico, ácido propantricarboxílico, ácido butantetracarboxílico, ácido ciclopentantetracarboxílico, ácidos alquil- y alquenilsuccínico y ácidos aminopolicarboxílico, v.gr., ácidonitrilotriacético, ácido ß-alaninadiacético, ácido etilendiamintetraacético, ácido serinadiacético, ácido isoserinadiacético, ácido N- (2-hidroxietil) iminoacético, ácido etilendiamindisuccínico y ácido metil y etilglicinadiacético. - ácidos carboxílicos oligoméricos y poliméricos tales como homopolímeros de ácido acrílico y ácido aspártico, ácidos oligoméricos, copolimeros de ácido maleico con ácido acrílico, ácido metacrílico o olefinas de C2-C22, v.gr., isobuteno u a-olefinas de cadena larga, éteres vinil alquilo de Ci-Cs, acetato de vinilo, propionato de vinilo, esteres metacrilicos de alcoholes de C?-C y estireno. Se da preferencia a los homopolímeros de ácido acrílico y copolímeros de ácido acrílico con ácido malico. Los ácidos carboxílicos oligoméricos y poliméricos se usan en forma de ácido o como la sales de sodio. Los blanqueadores adecuados son, por ejemplo, aductos de peróxido de hidrógeno a sales inorgánicas, tales como monohidrato de perborato de sodio, tetrahidrato de perborato de sodio y perhidrato de carbonato de sodio y pacidos percarboxílicos tales como ácido ftalimidopercaproico . Los activadores de blanqueador adecuados son, por ejemplo, N, N, N' ,N ' -tetraacetiletilendiamina (TAED), p-nonanoliloxibencensulfonato de sodio y metiisulfato de N-metilmorfolinoacetonitrilo. Las enzimas usadas con preferencia en composiciones de lavado son proteasas, lipasas, amilasas, celulasas, oxidasas y peroxidasas. Los inhibidores de transferencia de colorante adecuados son homopolímeros, copolímeos y polímeros de injerto de 1-vinilpirrolidona, 1-vinilimidazol, N-óxido de 4-vinilpiridina, u homo y copolímeros de 4-vinilpiridina que se han hecho reaccionar con ácido cloroacético. El tipo y cantidad de los componentes usados se determinaron por los expertos en la materia de acuerdo con el uso final de la composición de lavado. Pro ejemplo, normalmente se usan blanqueadores en composiciones de lavado de trabajo pesado pero no en composiciones de lavado de trabajo ligero. Se pueden encontrar más detalles de la composición de composiciones de lavado y componentes de composiciones de lavado, por ejemplo en "Waschmittel" [Wasing compositions] en Rdmpp Chemie-Lexikon, Online edición, Versión 2.6, Georg-Thieme-Verlag Stuttgrt, New York, Febr. 2005, o en "Detergents" en Ullmann's Encyclopedia of Indutrial Chemistry, 6a. Edición, 2000, Electronic Reléase, Wieley-VCH-Verlag, Weinheim, 2000. Los agentes tensioactivos preferidos para llevar a cabo la presente invención son agentes tensioactivos aniónicos y/o agentes tensioactivos no iónicos. Las proteínas no enzimáticas de interfase activa usadas de acuerdo con la invención, especialmente hidrofobinas, se pueden usar particularmente de manera ventajosa con una combinación de alquilbencensulfonatos lineales o sulfatos de alcohol graso con éter sulfatos de alquilo o alcoxilatos de alquilo. Es particularmente posible de manera ventajosa para usar agentes tensioactivos aniónicos y/o no iónicos basados en alcoholes de Cs-Cis y/o sus productos de alcoxilación, opcionalmente en una mezcla con agentes tensioactivos adicionales. Los radicales alcoxi son preferiblemente aquellos que comprenden esencialmente unidades de óxido de etileno y/o unidades de óxido de propileno, preferiblemente unidades de óxido de etileno. Por ejemplo, pueden ser radicales de 1 a 25 unidades de óxido de etileno, preferiblemente de 3 a 20 y más preferiblemente de 5 a 15 unidades, o radicales que comprenden óxido de etileno y unidades de óxido de propileno, en cuyo caso el último puede comprender en cada caso por lo menos 50% molar, preferiblemente 60 % molar, de unidades de óxido de etileno, con base en el número tota de todas las unidades alcoxi. Ejemplos de agentes tensioactivos preferidos comprenden alcoholes de Cs-Ciß alcoxilados, tal como alcoxilatos de alcoholes grasos, alcoxilatos de alcohol oxo, alcoxilatos de alcohol Guerbet, sulfatos de alcoholes de C8-Cis, alcoholes de Cs-Cie alcoxilados sulfatados (éter sulfatos alquilo) o alquilbencensulfonatos de C8-Ci8 lineales (LAS, preferiblemente alquilbencensulfonatos de Cg-C?3 lineales y alquiltoluensulfonatos de Cg-C?3. Se da preferencia particular a productos de alcoxilación de 2-propiheptanol y tridecanol y los sulfatos del mismo. La cantidad de proteínas de interfase activa no enzimáticas en la composición de lavado se juzga por el experto en la materia de acuerdo con las propiedades deseadas de la composición de lavado. En este contexto, la cantidad se selecciona ventajosamente de manera que, en el caso de dosificar la composición de lavado de acuerdo con las instrucciones, se obtienen las concentraciones especificadas antes de la proteína no enzimática de interfase activa. Se ha encontrado que una cantidad útil es de 0.002 a 2.5% en peso de las proteínas no enzimáticas de interfase activa basadas en la cantidad total de todos los componentes de la composición de lavado. La cantidad preferiblemente es de 0.01 a 1.5% en peso, más preferiblemente de 0.025 a 1.0 % en peso, aún más preferiblemente de 0.05 a 0.5% en peso y, por ejemplo, de 0.1 a 0.3% en peso. En una modalidad preferida, las composiciones de lavado de la invención comprenden de 0.01 a 1.5% en peso de proteínas no enzimáticas de interfase activa, de 0.5 a 40% en peso de agentes tensioactivos, preferiblemente agentes tensioactivos aniónicos y/o no iónicos, de 59 a 99.45% en peso de aditivos activo de lavado adicional o auxiliares de formulación. Los componentes (c) usados pueden ser preferiblemente lipasas y/o polímeros anfifílicos, por ejemplo copolímeros de bloque de óxido de etileno-óxido de propileno. Las composiciones de lavado de la invención pueden producirse por métodos conocidos en principio para los expertos en la materia. Los detalles de procesos de producción para las composiciones de lavado se dan, por ejemplo, en las referencia "Rómpp Chemie-Lexikon" o "Ullmann's" mencionadas antes. > Las proteínas no enzimáticas de interfase activa se pueden usar para producir la composición de lavado como una solución o como un sólido. Las proteínas sólidas pueden obtenerse partiendo de las soluciones de las proteínas por medio de métodos conocidos por los expertos en la materia, por ejemplo, secado por aspersión o secado por congelación. En la producción de la composición de lavado, sé deberá asegurar que la tensión térmica en las proteínas no enzimáticas de interfase activa no es tan alta. Desde luego el límite es guiado, por el tipo de proteína. En el caso de uso de hidrofobinas, se ha encontrado que es útil no exceder una temperatura de producto de 120 °C. La temperatura del proceso, es decir, por ejemplo, la temperatura de la corriente de gas en un secador por aspersión, desde luego puede ser provisto altamente que la temperatura del producto no excede el límite crítico. Las técnicas para incorporación moderada de componentes en composiciones de lavado se conocen por los expertos en la materia. Las composiciones de lavado pulverizantes se pueden producir, por ejemplo, por un primer paso, produciendo un producto crudo de lodos acuosos de los componentes térmicamente estables de la composición de lavado por medio de secado por aspersión, y mezcla este producto crudo en un segundo paso con los componentes térmicamente sensibles bajo condiciones moderadas. Generalmente se prevé introducir las proteínas no enzimáticas de interfase activa usadas de acuerdo con la invención en este segundo paso, sin ninguna intención de restringir la invención a la misma.

El proceso de acuerdo con la invención para materiales de textiles de lavado comprenden por lo menos los pasos de: Llenar un aparato de lavado con los materiales textiles para lavarse y un licor de lavado acuoso, Aplicar energía mecánica a la mezcla de materiales textiles y licor de lavado, removiendo el licor de lavado acuoso y enjuagando opcionalmente los materiales textiles, y secar los materiales textiles. El aparato de lavado puede ser cualquier tipo de máquina de lavado. Sin embargo, el término deberá también incluir recipientes que normalmente se usan para lavar a mano, por ejemplo, tinas de lavado o recipientes de lavado. En el paso (a) , el aparato de lavado se llena primero con los textiles y un licor de lavado acuso, la secuencia siendo no importante. El licor de lavado comprende, de una forma conocida en principio, por lo menos una sustancia activa para lavado. De acuerdo con la invención, el licor de lavado acuoso además comprende por lo menos una proteína no enzimática de interfase activa. Las proteínas preferidas y han sido mencionadas. La adición de las proteínas son enzimáticas de interfase activa se pueden someter vía la composición de lavado, o puede efectuarse por separado. Preferiblemente se efectúa en el inicio del ciclo de lavado, pero desde luego puede someterse en un último tiempo. La operación de lavado en el paso del proceso (b) se promueve en una forma conocida por la acción de energia mecánica en la mezcla de materiales textiles y licor de lavado. La energía mecánica puede introducirse por máquinas de lavado, por ejemplo por medio de tambores giratorios, o, en el caso de lavado a mano, las manos y/o otros auxiliares. La temperatura en el transcurso de operación de lavado se selecciona por el experto en la materia de acuerdo con las circunstancias. Por ejemplo, la temperatura puede ser 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 75, 80, 85, 90, 95 o 100°C. Las ventajas particulares de la invención se manifiestan muy particularmente ' en el caso de lavado a temperaturas de moderadas a bajas. En una modalidad preferida de la invención, la operación de lavado se somete a una temperatura no mayor a 60 °C, especialmente no mayor a 50 °C. Una escala de temperatura particularmente ventajosa para realizar el proceso de lavado de acuerdo con la invención es de 5 a 45°C, muy particularmente de preferencia de 15 a 35°C y, por ejemplo, de 20 a 30°C. La concentración de las proteínas no enzimáticas de interfase activa en el transcurso de la operación de lavado se selecciona por el experto en la materia. Las escalas de concentración preferidas ya se mencionaron antes.

Si la adición se efectúa vía las composiciones de lavado de la invención, se usan normalmente en una cantidad de 0.05 a 25 g/1, preferiblemente de 0.25 a 15 gYl, más preferiblemente de 0.5 a 10 g/1, aún más preferiblemente de 1 a 5 g/1 y, por ejemplo, de 1.5 a 4 g/1, basado en cada caso en el licor de lavado. Después de la operación de lavado actual, el licor de lavado se remueve de una forma conocida en principio. En general, los materiales textiles subsiguientemente se enjuagan por una o más operaciones de enjuague y finalmente se secan Pasos del proceso (d) y (e) ) . En el transcurso del enjuague, se pueden usar suavizantes de telas tales como un aditivo. El proceso de acuerdo con la invención es adecuado para limpiar todo tipo de materiales textiles. Estos pueden ser fibras de textiles, telas de textiles semiterminadas y terminadas y prendas terminadas producidas de los mismos. Estos pueden ser textiles comunes para ropa, u otros textiles domésticos, por ejemplo, alfombras, cortinas, manteles y estructuras textiles que sirven para fines técnicos. Estos también pueden incluir estructuras no configuradas, por ejemplo, lanas, estructuras lineales tales como bramante, bordados, hilados, hilos, cuerdas, encajes, tejidos, cordones, y también estructuras tridimensionales, por ejemplo, fieltro, tejidos, no tejidos y borlas. Los materiales textiles pueden consistir de material de origen natural, por ejemplo, algodón, lana o lino, o de materiales sintéticos tales como poliacrilonitrilo, poliamida o poliéster. Se apreciará que también pueden ser telas mezcladas, por ejemplo algodón/poliéster o algodón/poliamida. Los siguientes ejemplos se pretende que ilustren además la invención. Parte A: Preparación y prueba de hidrofobinas usadas de acuerdo con la invención. Ejemplo 1 Preparaciones para clonar yaad-Hise/yaaE-HiS6. Una reacción en cadena de polimerasa se llevó a cabo con la ayuda de lo oligonucleótidos Hal570 y Hal571 (Hal 572/Hal573) . El ADN de modelo usado fue ADN genómico de la bacteria Bacillus subtillis. El fragmento de RCP resultante comprendido de la secuencia de codificación del gen de Bacillus subtillis yaaD/yaaE, y un sitio de .separación de restricción de Ncol y Bglll respectivamente en cada extremo. El fragmento de ADN se usó como un inserto y se clonó en el vector pQE60 de Qiagen, que se ha linearizado anteriormente con las endonucleasas de restricción Ncol ,y Bglll. Los vectores QE60YAAD#2/pQE60YaaE#5 así formado pueden usarse para expresar proteínas que consisten de YAAD::HIS6 o YAAE::HIS6.

Hal570 gcgcgcccatggctcaaacaggtactga Hal571 gcagatctccagccgcgttcttgcatac Hal572 ggccatgggattaacaataggtgtactagg Hal573 gcagatcttacaagtgccttttgcttatattcc Ejemplo 2 Clonación de hidrofobina yaad DewA-His6 Una reacción en cadena de polimerasa se llevó a cabo con la ayuda de los oligonucleótidos KaM 416 y KaM 417. El ADN de patrón usado fue ADN genómico del molde de Aspergillus nidulans. El fragmento de RCP resultante comprendió la secuencia de codificación del gen de hidrofobina dewA y un sitio de separación de factor de proteinasa Xa N-terminal. El fragmento de RCP se purificó y cortó con el BAMHI de endonucleasa de restricción. Este fragmento de ADN se usó como un inserto y se clonó en el vector pQE60YAAD"2 que se ha linearizado anteriormente con la endonucleasa de restricción de Bglll. El vector #508 así formado se puede usar para expresar una proteína de fusión que consiste de YAAD: :Xa: :dewA: :His6. KaM416 : GCAGCCCATCAGGGATCCTCAGCCTTGGTACCAGCGC KaM417 : CCCGTAGCTAGTGGATCCATTGAAGGCCGCATGAAGTTCTCCGTCTCCGC Ejemplo 3 Clonación de hidrofobina yaad RodA-His6 El plásmido #513 se clonó análogamente al plásmido #508 usando los oligonucleótidos KaM 434 y KaM 435. KaM434: GCTAAGCGGATCCATTCAAGGCCGCATGAAGTTCTCCATTGCTGC KaM435 : CCAATGGGGATCCGAGGATGGAGCCAAGGG Ejemplo 4: Clonación de hidrofonina yaad HypA-His6 Clonación de HypA en pQE60 (#522) Los oligonucleótidos KaM449/KaM450 se usaron para llevar a cabo un RCP. El patrón de ADN usados fue el HypA de plásmido en pCR2.1, producido por Nadicom. El fragmento resultante comprendido de la secuencia de codificación del gen de HypA de hidrofobina sin codón de inicio y tope. El fragmento de RCP se purificó por medio de electroforésis de gel y se corta con las endonucleasas de restricción de Ncol y BamHl . Este fragmento se usó como un inserto y se liguen el vector pQE60 que se ha cortado anteriormente con Ncol y Bglll. KaM449 : GTTACCCCATGGCGATCTCTCGCGTCCTTGTCGCT KaM450 : GCCTGAGGATCCGAGGTTGACATTGACAGGAGAGC 6xH?s-tag Elemento f (pQE60-. HypA) amp (2242-3099) Clonación de HypA en pQE60+YAAD (#523) Los oligonucleótidos KaM451/KaM452 se usaron para llevar a cabo un RCP. El patrón de ADN usado fue el HypA del plásmido en pCR2.1, producido por Nadicom. El fragmento resultante compendió la secuencia del Gen HypA de hidrofobina sin codón de inicio o tope. El fragmento de RCP se purificó por medio de electroforesis de gel y se corta con las endonucleasas de restricción Bglll y BamHI. Este fragmento se usó como un inserto y se ligó en el vector pQEdO + YAAD que se cortó antes con Bglll.

KaM451 : CGTAGTAGATCTATGATCTCTCGCGTCCTTGTCGCTGC KaM452: CGACTAGGATCC3AGGTTGACATTGACAGGAGAGC Elemento operador promotor T5/lac Ampicillm Ej emplo 5 Clonación de hidrofobina yaad HypA-His6 Clonación de HypB en pQE60 (#524) Los oligonucleótidos KaM453/KaM454 se usaron para llevar a cabo un RCP. El Patrón de ADN usado fue el plásmido HypB en puC19, producido por Nadicom. El fragmento resultante comprendió la secuencia del gen de hidrofobina HypB sin codón de inicio y tope. El fragmento de RCP se purificó por medio de electroforesis de gel y se cortó con las endonucleasas de restricción Ncol y BamHI . Este fragmento se usó como un inserto y se ligó en el vector pQE60 que se cortó anteriormente con Ncol y Bglll.

KaM453: GCTTATCCATGGCGGTCAGCACGTTCATCACTGTCG KaM454 : GCTATGGATCCCACATTGGCATTAATGGGAGTGC Elemento operador promotor T5/lac Ampiciliip Clonación de HypB en pQE60 + YAAD (#525) Los oligonucleótidos KaM455/KaM456 se usaron para llevar a cabo una RP. El patrón de ADN usado fue el plásmido HypB en puC19, producido por Nadicom. El fragmento resultante compendió la secuencia de codificación del gen de HypB de hidrofobina sin codón de inicio y tope. El fragmento de RCP se purificó por medio de electroforesis de gel y se corto con las endonucleasas de restricción Bglll y BamHI. Este fragmento se uso como un inserto y se ligó en el vector pQW60 + YAAD cortado anteriormente con Bglll. KaM455 : GCTAACAGATCTATGGTCAGCACGTTCATCACTGTC KaM456 : CTATGAGGATCCCACATTGGCATTAATGGGAGTGC Elemento operador promotor T5 RBS Ampicillin Ej emplo 6 Clonación de hidrofobina yaad BASF1-HÍS6 El plásmido #507 se clonó análogamente al plásmido "508 usando los oligonucleótidos KaM 417 y KaM 418. El patrón de ADN usado fue una secuencia de ADN sintética - hidrofobina BASF 1 (Véase apéndice) .

KaM417 : CCCGTAGCTAGTGGATCCATTGAAGGCCGCATGAAGTTCTCCGTCTCCGC KaM418 : CTGCCATTCAGGGGATCCCATATGGAGGAGGGAGACAG Ejemplo 8 Clonación de hidrofobina de yaad SC3-HÍS6 El plásmido #526 se clonó análogamente al plásmido #508 usando los oligonucleótidos KaM464 y KaM465. El patrón de ADn usado fue ADNc de Schyzophyllum commune (ver apéndice) . KaM464 : CGTTAAGGATCCGAGGATGTTGATGGGGGTGC KaM465 : GCTAACAGATCTATGTTCGCCCGTCTCCCCGTCGT Ejemplo 9 Fermentación de la cepa de E. coli recombinante hidrofobina yaad DewA-His6. La inoculación de 3 ml de medio liquido de LB con una cepa de E. coli que expresa hidrofobina yaad DewA-Hisß en tubos Greiner de 15 ml. La incubación durante 8 horas a 37 °C en un agitador a 200 rpm. En cada caso se inocularon dos matraces Erlenmeyer de 1 litro con amortiguadores y 250 ml de medio LB (+100 µg/ml de ampici-lina) se inocularon con 1 m den cada caso de cultivo prelimitar y se incubaron durante 9 h a 37°C en un agitador a 180 rpm. Se inoculan 13.5 1 de medio LB (+ 100 µg/ml de ampicilina) con 0.5 1 de cultivo preliminar (ODeoo nm 1:10 medido contra H20) en un fermentador de 20 1. En un OD6onm de -3.5, adición de 140 ml de 100 mM IPTG. Después de 3 horas, el fermentador se enfrió a 10°C y se centrifuga el caldo de fermentación. Se usa la pella de células para purificación adicional .

Ejemplo 10 Purificación de la proteína de fusión de hidrofobina recombinante (Purificación de proteinas de fusión de hidrofobina que da una etiqueta de HÍS6 C-terminal) 100 g de pellas de células (100-500 mg de hidrofobina) se constituyeron a un volumen total 200 ml con 50 mM de solución reguladora de fosfato de sodio, pH 7.5, y se resuspendió. La suspensión se trató con un tipo Ultraturrax T25 (Janke y Kunkel; IKA-Labortechnik) durante 10 minutos y se incubó subsiguientemente con 500 unidades de Benzonasa (Merck, Darmstadt; orden no. 1.01697.0001) a temperatura ambiente durante 1 hora para degradar los ácidos nucleicos. Antes de la alteración x de células, la filtración se efectuó con un cartucho de vidrio (Pl) . Para la alteración de células y para la división del ADN genómico restante, dos ciclos homogenizantes se llevan a cabo a 1500 bar (Microfluidizador M-110EH; Microfluidics Corp.). El homogenado se centrifugó (Sorvall RC-5B, rotor GSA, taza de centrífuga de 250 ml, 60 minutos, 4°C, 12 000 rpm, 23 000 g) , el sobrenadante se colocó en hielo y la pella se resuspendió en 100 ml de solución reguladora de fosfato de sodio, pH 7.5.

La centrifugación y la resuspensión se repitió tres veces, la solución reguladora de fosfato de sodio comprendiendo 1% SDS y la tercera repetición. Después de la resuspensión, la mezcla se agitó durante una hora y se llevó a cabo una centrifugación final (Sorvall RC-5B, rotor de GSA, taza de centrífuga 250 ml, 60 minutos, 4°C, 12 000 rpm, 23 000 g) . De acuerdo con el análisis de SDS-PAGE, está presente la hidrofobina en el sobrenadante después de la centrifugación final (figura 1) . Los experimentos muestran que la hidrofobina probablemente están presentes en la forma de cuerpos de inclusión en las células de E. coli correspondientes. 50 ml del sobrenadante que comprende hidrofobina se aplican a una columna de 50 ml de Sepharose de níquel de Alto Desempeño 17-5268-02 (Amersham) que se ha equilibrado con solución reguladora 50 mM Tris-Cl pH 8.0. La columna se lavó con solución reguladora de 50 mM de Tris-Cl pH 8.0 que comprende 200 mM de imidazol. Para remover el imidazol, la solución se dializó contra solución reguladora 50 mM Tris-Cl pH 8.0. La Figura 1 muestra la purificación de la hidrofobina preparada: Línea 1: Aplicación a columna de níquel-Sepharose (dilución 1:10) Línea 2: A través de flujo = eluato de paso de lavado Líneas 3-5: OD 280 Máxima de las fracciones de elusión. La hidrofobina de la Figura 1 tiene un peso molecular de aproximadamente 53 kD. Algunas de las bandas más pequeñas representan productos de degradación de la hidrofobina.

Ejemplo 11 Prueba de desempeño; caracterización de la hidrofobina por cambio en ángulo de contacto de una gota de agua en vidrio Sustrato: Vidrio (vidrio de ventana, Súddeutsche Glas, Mannheim) Se usó la hidrofobina de fusión del ejemplo 10. Concentración de hidrofobina: 100 µg/ml en solución acuosa; aditivo: 50 MM acetato de sodio pH 4 + 0.1% polioxietileno (20) -monolaurato de sorbitán (Tween® 20). - Incubación de placas de vidrio durante la noche (temperatura 80°C), luego se lavó el revestimiento en agua destilada, - luego ' incubación 10 min / 80°C / solución de dodeciisulfato de sodio (SDS) 1% en agua destilada, - lavado en agua destilada.

Las muestras se secaron bajo aire y el ángulo de contacto (en grados) de una gota de 5 µl de agua se determinó a temperatura ambiente. El ángulo de contacto se midió en un sistema de ángulo de contacto Dataphysics OCA 15+, Software SCA 20.2.0. (Noviembre 2002) . La medición se efectuó de acuerdo con las instrucciones del fabricante. El vidrio no tratado dio un ángulo de contacto de 30 ± 5°; un revestimiento con la hidrofobina funcional de acuerdo con el ejemplo 8 (yaad-dewA-hisß) dieron ángulos de contacto de 75± 5°.

Parte B: Uso de proteínas no enzimáticas de interfase activa para lavado textil. Descripción de prueba general: Para probar la acción, se llevaron a cabo pruebas de lavado en un aparato de prueba comercialmente disponible (Launder-o-meter, de Atlas, EUA) . Se llevaron a cabo pruebas en cada caso con y sin adición de las proteínas al licor de lavado. Para las pruebas, se usaron tela de prueba comercialmente disponible y tela de prueba producida domésticamente .

El desempeño de las pruebas de lavado: Las piezas de 30 x 30 mm se cortaron con cada una las telas de prueba mencionadas y cosidas en algodón blanqueado no teñido de punto. En el caso de tela de prueba comercial, en cada caso 2 tiras 850 mm x 200 mm) se lavaron bajo las condiciones dadas junto con 5 g de tela de mezclas de algodón/poliéster blancos en cada caso con 4 (para telas 1-4) o en cada caso 2 (en el caso de telas 5 y 6) diferentes telas de prueba cosidas. En el caso de tela de prueba autoproducida, 2 puntos en cada caso de 0.1 g de grasa o aceite con color se gotearon en una cinta de algodón (50 mm x 200 mm algodón blanqueado no teñido tejido) y se trataron a 50 °C durante 30 minutos. Se usó rojo Sudan para el teñido. Después del lavado la tela se enjuagó en 250 ml de agua corriente durante 5 min. y luego se secaron. La acción de lavado se evaluó por mediciones de reflectancia a 420 nm antes y después del lavado. En cada caso se llevó a cabo una prueba con adición de proteínas no ezimáticas con interfase activa y, bajo condiciones comparativas, una prueba sin dicho aditivo pero de alguna manera se llevó a cabo bajo condiciones exactamente idénticas.

Los porcentajes listados en las tablas de resultados reportan el incremento en la acción de lavado en la prueba con adición de proteínas comparado con la prueba sin la adición de proteínas, calculado de acuerdo con la fórmula: Incremento en acción de lavado [%] = (IE- I?E)/(Iblanco-lA)*100 IE en cada caso significa la reflectancia de la tela de prueba después del lavado de prueba, IA la reflectancia antes del desempeño del lavado de prueba. O indica la prueba comparativa sin adición de la invención de las proteínas. Ibianco indica la reflectancia de la tela limpia sin teñido. El redepósito de suciedad consecuentemente se evaluó comparando la reflectancia de la tela blanca limpia sin manchas antes del lavado y después del lavado, en cada caso para la prueba sin adición y sin adición de proteínas.

Ejemplo 12 Parámetros de prueba: Proteína usada Proteína Hidrofobina fusionada yaad-Xa-dew A-his (SEC ID NO: 19) Concentraron de proteína: Ver tabla 1 Composición de lavado Composición de lavado en polvo disponible comercialmente (White Cat, China 2003) Cantidad de licor de lavado 250 ml por lata Dosis de composición de 2.0 g/1 lavado Relación de licor 20:1 Dureza de agua 2.5 mmol/l (molar Ca: Mg= 3:1) Temperatura de agua 25°C Tiempo de lavado 30 minutos La proteína se agregó como una solución acuosa diluida. El lavado de prueba se llevó a cabo y evaluó de acuerdo con la descripción general dada antes. Los resultados se recopilaron en la Tabla 1.

Ejemplo 13: Parámetros de prueba: Proteína usada Hidrofobin proteína fusionada yaad-Xa-dew A-his (SEC ID NO: 19) Concentraron de proteína: Ver tabla 1 Composición de lavado Composición de lavado pulverulento disponible comercialmente (Ariel, China 2004, de Procter & Gamble) Cantidad de licor de lavado 250 ml por lata Dosis de composición de 2.0 g/1 lavado Relación de licor 20:1 Dureza de agua 2.5 mmol/l (molar Ca: Mg= 3:1) Temperatura de agua 25°C Tiempo de lavado 30 minutos El lavado de prueba se llevó a cabo y se evaluó de acuerdo con la descripción general dada antes. Los resultados se recopilaron en la tabla 1.

Tabla 1: Resultados del lavado de Prueba En todas las pruebas, se logró una mejora importante en la acción de lavado.

Ejemplo 14: Para el siguiente lavado de prueba, una formulación de modelo para una composición de lavado compuesta de un agente tensioactivo aniónico, en cada caso se usó un agente tensioactivo y un aglutinante. Parámetros de Prueba Parámetros de prueba: Proteína usada Proteína Hidrofobina fusionada yaad-Xa-dew A-his (SEC ID NO: 26) Concentraron de proteína: Ver tabla 2 Agente tensioactivo 400 ppm de sodio C?2?4 -sulfato de anionico alcohol graso Coagente tensioactivo no en cada caso 30ppm de un C13/15-iónico oxo alcohol etoxilado, ver tabla 2 para tipo de radical alcoxilado 205 ppm de carbonato de sodio.

Aglutinante 250 ppm de carbonato de sodio Cantidad de licor de 250 ml por lata lavado Dosis de composición de 2.0 g/1 lavado Relación de licor 20:01 Dureza de agua 2.5 mmol/l (molar Ca: Mg= 3:1) Temperatura de agua 25°C Tiempo de lavado 30 minutos El lavado de prueba se llevó a cabo y se evaluó de acuerdo con la descripción general dada antes. Estos resultados se resumen en la Tabla 2.

Tabla 2: Resultados del lavado de prueba EO = óxido de etileno, PO = óxido de propileno Parámetros de Prueba Parámetros de prueba: Proteína usada Proteína A: Proteína Hidrofobina fusionada yaad-Xa-dew A-his (SEC ID NO: 19) Proteína B: Proteína Hidrofobina fusionada yaad-Xa-dew A-his (SEC ID NO: 26) Concentraron de proteína: Ver tabla 3 Agente tensioactivo 400 ppm de sodio N-anionico dodecilbencenosulfonato Coagente tensioactivo no en cada caso 30 ppm, ver tabla 3 iónico para tipo 250 ppm de carbonato de sodio Aglutinante 250 ppm de carbonato de sodio Cantidad de licor de 250 ml por lata lavado Dosis de composición de 2.0 g/1 lavado Relación de licor 20:01 Dureza de agua 2.5 mmol/l (molar Ca: Mg= 3:1) Temperatura de agua 25°C Tiempo de lavado 30 minutos Este lavado de prueba se realizó y evaluó de acuerdo con la descripción general dada antes. Los resultados se resumen en la tabla 3.

Tabla 3: Resultados del lavado de Prueba EO = óxido de etileno, PO = óxido de propileno En todas las pruebas, se logró una mejora en la acción del lavado en cada caso. La hidrofobina de fusión con una pareja de fusión de yaad truncada (B) (40 aminoácidos) logró mejores resultados en cada caso que la hidrofobina de fusión (A) con una pareja de fusión de yaad completa (294 aminoácidos) . Asignación de los nombres de secuencia a ADN y secuencias de polipéptidos en la lista de secuencias.

Claims

REIVINDICACIONES

1.- El uso de proteínas de interfase activa no enzimaticas para lavado textil, donde las proteínas son caracterizadas por la propiedad de brindar un incremento en el ángulo de contacto de gota de agua de por lo menos 20° después la aplicación a un superficie de vidrio a una habitación de temperatura, comparado con el ángulo de contacto de una gota de agua igualmente larga con la superficie de cristal descubierta, las proteínas son hidrofobinas.

2.- El uso como de acuerdo con la reivindicación 1, en donde las proteínas son una fusión de hidrofobinas, la fusión comprende de 20 a 500 aminoácidos.

3.- El uso de acuerdo con la reivindicación 2, en donde por lo menos una de las hidrofobinas es seleccionada de un grupo de yaad-Xa-dewA-his (SEC ID NO: 20), yaad-Xa-rodA-his (SEC ID NO: 22) ó yaad Xa-basfl-his (SEC ID NO: 24), con el previsto que yaad puede en cada caso la fusión yaad puede ser truncada y puede tener de 20 a 293 aminoácidos.

4.- El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde las proteínas son usadas en una concentración de 0.05 a 50 ppm en el licor de lavado.

5.- El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde las proteínas son usadas en combinación con agente tensioactivos aniónicos y/o no aniónicos, que comprende una combinación de alquilbencenosulfanatos lineales o sulfatos de alcohol grasos con sulfatos de alquil éter o alquil acoxilado.

6.- Una composición de lavado para lavado textil comprende por lo menos una substancia de lavado activa, en donde la composición de lavado que además comprenden por lo menos una proteína de no enzimatica de interfase activa, donde es caracterizada por la propiedad de traer un incremento en el ángulo de contacto de gota de agua de por lo menos 20° después de la aplicación a superficie de cristal a una habitación de temperatura, comparado con el ángulo de contacto de gota de agua igualmente larga con la superficie de cristal descubierta, la proteína ha sido una hidrofobina.

7. - La composición de lavado de acuerdo con la reivindicación 6, en donde la proteína es una hidrofobina de fusión, la fusión comprende de 20 a 500 aminoácidos.

8.- El lavado de composición de acuerdo con la reivindicación 7, en donde por lo menos una hidrofobina es seleccionada de un grupo de yaad-Xa-dewA- su (SEC ID NO: 20), yaad-Xa-rodA.su (SEC ID NO: 22) o yaad-Xa-basf1-his (SEC ID NO: 24), con el previsto de yaad en cada caso puede ser truncada y tiene de 20 a 293 aminoácidos.

9.- El lavado de composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en donde la cantidad de proteinas no enzimaticas de interfase activas son de 0.002 a 2.5 % por peso basado en todos los componentes de la composición de lavado.

10.- La composición de lavado de acuerdo con la reivindicación 9, que comprende: (a) de 0.01 a 1.5 % por peso de proteínas no enzimaticas de interfase activa, (b) de 0.5 a 40% por peso de agente tensioactivo, y (c) de 59 a 99.45% por peso de aditivos de lavado activos ó asistentes de formulación.

11.- El lavado de composición de acuerdo con la reivindicación 10, en donde los agentes tensioactivos son agentes tensioactivos aniónicos y/o no aniónicos.

12.- La composición de lavado de acuerdo con la reivindicación 11, en donde los agentes tensioactivos son un combinación de alquibencenosulfanatos lineales ó sulfatos de alcohol grasosos con sulfatos de éter alquil ó alquil alcoxilados.

13.- Un proceso de lavar materiales textiles comprende por lo menos los siguientes pasos: (a) llenado de aplicación de lavado con los materiales textiles para se lavados y un licor de lavado acuoso. (b) aplicación de energía mecánica para la combinación de materiales textiles y licor de lavado. (c) remueve de licor de lavado acuoso y opcionalmente se enjuagan los materiales textiles, y (d) secado de materiales textiles, en donde el licor de lavado acuoso comprende por lo menos una proteína enzimatica de interfase activa, donde es caracterizada por la propiedad de traer un incremento en el ángulo de contacto de gota de agua de por lo menos 20° después de la aplicación a la superficie de cristal de temperatura de habitación, comparada con el ángulo de contacto de una gota de agua igualmente larga con la superficie de cristal descubierta, la proteína fue una hidrofobina.

14.- El proceso de acuerdo con la reivindicación 13, donde la proteína es una hidrofobina de fusión, la fusión comprende de 20 a 500 aminoácidos.

15.- El proceso de acuerdo con la reivindicación 14, donde por lo menos una hidrofobina es seleccionada de un grupo de yaad-Xa-dewA-his (SEC ID NO: 20), yaad-Xa-rodA-his (SEC ID NO: 22), ó yaad-Xa-basf1-his (SEC ID NO: 24), con el previsto que yaad en caso puede ser truncado de 20 a 293 aminoácidos .

16.- El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 15, donde las proteínas son usadas en combinación- con agentes tensioactvos aniónicos y/o no aniónicos, que comprenden una combinación alquilbencenosulfanatos lineales ó sulfatos de alcohol grasosos con sulfatos alquil éter ó alquil alcoxilados.

17.- El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 15, donde la operación de lavado es sometida a una temperatura no mayor a 60 °C.

18.- El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 15, donde la operación de lavado es sometida a una temperatura de 5 a 35 °C.

19.- El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 15, donde la operación de lavado es sometida a una temperatura de 5 a 35 °C.

20.- El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 15, donde la proteína- es usada en una concentración de 0.05 a 50 ppm en el licor de lavado.