JP5444007B2 - ヒドロホビンで変性された連続気泡フォーム - Google Patents
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Description
Xn−C1−X1-50−C2−X0-5−C3−X1-100−C4−X1-100−C5−X1-50−C6−X0-5−C7−X1-50−C8−Xm (I)
(但し、Xは、20種の天然に生じるアミノ酸(Phe、Leu、Ser、Tyr、Cys、Trp、Pro、His、Gln、Arg、IIe Met、Thr、Asn、Lys、Val、Ala、Asp、Glu、Gly)の何れかが可能である)のポリペプチドを意味しているものとして理解されるべきである。ここで、Xの横の各インデックス(指標)は、対応する部分配列(part-sequence)X中のアミノ酸の数を表し、Cは、システイン、アラニン、セリン、グリシン、メチオニン又はトレオニンであり、Cとされる基(ラジカル)の少なくとも4つは、システインであり、そしてインデックスnとmは、相互に独立して0〜500の範囲、この増しkは15〜300の範囲の自然数である)のポリペプチドを意味していると理解されるべきである。
室温で、ガラス表面を被覆した後、水滴の接触角を、(同じ大きさの水滴と未被覆のガラス表面との接触角を比較した場合に、)少なくとも20°、好ましくは少なくとも25°及び特に好ましくは30°増加させる。
Xn−C1−X3-25−C2−X0-2−C3−X5-50−C4−X2-35−C5−X2-15−C6−X0-2−C7−X3-35−C8−Xm (II)
(但し、X、C及びXとCの横のインデックスは、上述した意味であり、インデックスnとmは、0〜350、好ましくは15〜300の数である)のヒドロホビンを使用することが好ましく、このプロテインは、上述した接触角の変化が顕著であり、及び更に、Cと称される基の少なくとも6つがシステインである。
Xn−C1−X5-9−C2−C3−X11-39−C4−X2-23−C5−X5-9−C6−C7−X6-18−C8−Xm (III)
(但し、X、C及びXとCの横のインデックスは、上述した意味であり、インデックスnとmは、0〜200の数である)のヒドロホビンを使用することが特に好ましく、このプロテインは、上述した接触角の変化が更に顕著であり、及び更に、Cと称される基の少なくとも6つがシステインである。特に好ましくは、全ての基Cがシステインである。
このことは、プロテインが少なくとも1つのヒドロホビン部分と(自然には一緒に生じることがない)1つの融合パートナーから成ることができることを意味することが意図されている。融合パートナーとヒドロホビン部分の融合ヒドロホビンは、例えば、WO2006/082251、WO2006/082253及びWO2006/131564に開示されている。
Xn又はXmの1つとして、又はこのような基の末端成分としての特定の融合パートナーの他に、いわゆるアフィニティードメイン(アフィニティー標識/アフィニティータイル)も有している。これらは、所定の補足基(complementary group)と相互作用可能なであり、及びプロテインの後処理(work-up)及び精製に使用可能な、原則として公知のアンカー基である。このようなアフィニティードメインの例は、(His)k、(Arg)k、(Asp)k、(Phe)k、又は(Cys)k基(但し、kは、通常、1〜10の自然数である)を含む。好ましくは、(His)k基(但し、kは、通常、4〜6のである)である。ここで、基Xn及び/又はXmは、もっぱら、このようなアフィニティードメインで構成されて良く、又は自然に、又は非自然的にヒドロホビンに結合した基Xn又はXmが、末端に配置されたアフィニティードメインによって延長される。
実施例のために、完全な融合パートナーyaadを有する融合ヒドロホビン(yaad−Xa−dewA−his;ヒドロホビンAと称する)及び40アミノ酸に短縮された融合ヒドロホビンyaad40−Xa−dewA−his(ヒドロホビンB)を使用した。WO2006/082253に記載された手順に従って製造を行なった。
基材:
ガラス(ウインドウガラス、Suddeutsche glass,Mannheim)
試験のために、融合ヒドロホビンを含むスプレー乾燥した生成物を、(50mM NaアセテートpH4及び0.1質量%のポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート(Tween(登録商標)20)を加えた状態で、)水中に溶解させた。生成物の濃度:水溶液中100μg/ml。
−小ガラスプレートで一晩培養(温度80℃)し、次に被覆物を蒸水で洗浄、
−次に培養10分/80℃/蒸留水中1%ナトリウムドデシルサルフェート(SDS)溶液、
−蒸留水で洗浄。
実施例1及び2:次の変性
各場合において、密度が9kg/m3の連続気泡メラミンホルムアルデヒドフォーム(Basotect(登録商標)、BASF AG)の立方体形状のサンプル(7cm×7cm×7cm)を、ガラスフラスコ中に置き、そしてヒドロホビンA又はヒドロホビンBの溶液で飽和(過剰供給)させた。飽和したフォームの立方体を、15h、60℃で加熱した。次に水溶液を移した。フォームの立方体を絞り、吸収した液体の大部分を除去し、高純度水で数回洗浄し、そして絞り、及び40℃で質量が一定になるまで乾燥させた。変性したフォームの密度を表1に示す。
実施例1に従う未変性のフォームの水の吸収を上述したように測定した。データーを表1に示す。
実施例1に従う未変性のフォームの水の吸収を、上述したように測定した。データーを表1に示す。
実施例1に従う未変性のフォームを疎水化(hydrophobicization)のために、菜種油に含浸させ、絞り出し、そして乾燥させた。質量増加と水の吸収を上述のように測定した。データーを表1に示す。
EP−A633283の実施例1のデータ;密度が11kg/m3のメラミン−ホルムアルデヒド連続気泡フォーム(Basotect(登録商標)、BASF AG)を、上述の手順に従って、シリコーン油(silicone oil)で含浸させた。
実施例と比較例は、ヒドロホビンを使用した場合、未変性の連続気泡フォームが、卓越した方法で、疎水化できることを示しており、そしてこれにもかかわらず、密度の増加は僅かであった。
フォームの製造過程におけるヒドロホビンの添加による変性(modification)
WO01/94436に記載された方法に従って、製造を行った。発泡剤含有メラミン−ホルムアルデヒド予備縮合物(初期縮合物)を発泡させる直前に、0.5質量%の固体部分(固体画分)に基くヒドロホビンAを、水溶液の状態で追加的に加えた。得られたフォームを最初に100℃で乾燥させ、そして次に220℃で熱処理した。このようにして製造されたフォームは、水面に置いても沈むことがなく、この一方で、ヒドロホビンを加えることなく同一の方法で製造したフォームは、水に沈んだ。
ガラスフラスコ中で、それぞれ直方形のサンプル(1.5cm×0.5cm×0.3cm=0.225cm3)を、それぞれ処理に使用される2cm3の溶液で満たすか又は飽和させ、そして所定の時間と温度で処理した。ここで、上記サンプルは、密度が9kg/cm3の連続気泡メラミン−ホルムアルデヒドフォーム(Basotec(登録商標),BASF AG)である。処理の後、サンプルを絞り、洗浄し、そして40℃で質量が一定になるまで乾燥した。
第1の実験シリーズでは、緩衝剤を有し、及びCaCl2が加えられた水中のヒドロホビンAの被覆処方物を使用した(50mmol/l tris/HCl緩衝剤、 1mmol/CaCl2;緩衝溶液のpH;pH8)。ヒドロホビンの濃度、温度及び時間を変化させた。コントロールのために、各場合において、ヒドロホビンを加えていない溶液を使用した。結果を表2に示す。
(溶液:50mmol/l tris−HCl緩衝剤、 1mmol/lCaCl2;pH8)
+は水滴が沈まなかったことを示す、すなわち、疎水化された。
−は水滴が沈んだことを示す、すなわち、疎水化されなかった。
0は、水滴が部分的に/ゆっくりと沈んだことを示す、すなわち、部分的に疎水化された。
ヒドロホビンを加えなかった全てのサンプルの結果:−。
第2の実験シリーズでは、緩衝剤を有し、及びCaCl2が加えられた水中のヒドロホビンAの被覆処方物を使用した(50mmol/l Naアセテート緩衝剤、 1mmol/lCaCl2;緩衝化溶液のpH;pH5)。ヒドロホビンの濃度、温度及び時間を変化させた。コントロールのために、各場合において、ヒドロホビンを加えていない溶液を使用した。結果を表2
に示す。
(溶液:50mmol/lNaアセテート緩衝剤、 1mmol/lCaCl2;pH5)
+は水滴が沈まなかったことを示す、すなわち、疎水化された。
−は水滴が沈んだことを示す、すなわち、疎水化されなかった。
1は、水滴が部分的に/ゆっくりと沈んだことを示す、すなわち、部分的に疎水化された。
ヒドロホビンを加えなかった全てのサンプルの結果:−。
第3の実験シリーズでは、被覆生成物へのマイクロ波の影響が調査された。マイクロ波発生源は、標準の商用国産マイクロ波装置で、最大出力が1000Wで、レベル1〜9の9段階の出力レベルが著説可能なものであった。
全てのコントロールサンプル:−
被覆物の温度抵抗性の調査
未変性のフォームを上述のように、ヒドロホビンで最初に被覆した。処理のために、ヒドロホビンAを1000mg/l含む溶液(50mmol/l tris−HCl緩衝剤、 1mmol/lCaCl2;pH8)を使用した。上述したマイクロ波装置を使用して被覆した(1分;200W)。
全てのコントロールサンプル:−;n.d.:測定不能
ヘキサン/水混合物又はベンジン/水混合物の分離
分離試験のために、実施例2に従って製造したメラミン−ホルムアルデヒドフォームを使用した(すなわち、ヒドロホビンBで変性したフォーム)。
以下の実験のために、実施例2に従って製造されたメラミン−ホルムアルデヒドフォーム(すなわち、ヒドロホビンBで変性されたフォーム)を、同様に使用した。
粗製オイル(原油)/水乳濁液の製造
分離実験のために、完全に脱塩した水中の粗製オイル(原油)(Wintershall,Emlichheim well 301/83 2005年2月04日より、)を製造した。乳濁液化は、ultra−turraxを使用し(4分間、24000rpm)水をオイルを強く攪拌することによって行った。分離漏斗を使用して、過剰のオイルレンズ(oil lense)を除去した。オイル濃度は1000ppmであった。
乳濁液を3個の容器に、等量に分け、そして各場合において、メラミン−ホルムアルデヒド樹脂に基くフォームの部分(切片)を漬けた。フォームは、各場合において、ヒドロホビンAで処理したフォーム、及びヒドロホビンBで処理したフォーム(実施例1及び2に従う)及び、比較の目的で、未処理のサンプルであった。各サンプルを、乳濁液内に24時間、維持した。
図2:比較用の未変性フォーム
容器を、完全に脱塩した水で満たし、そして各場合において、粗製オイルの薄い層(Wintershall, Landau 2005年2月04日より;20℃での薄−液、<10%水)を注いだ。
図3:実験の開始
図4:実験の間
図5:実験終了後のフォーム
Claims (18)
- メラミンホルムアルイデヒド縮合生成物に基いた連続気泡フォームであって、
フォームが少なくとも1種のヒドロホビンで変性されていることを特徴とする連続気泡フォーム。 - 3〜100kg/m3の密度を有することを特徴とする請求項1に記載の連続気泡フォーム。
- メラミン/ホルムアルデヒドモル割合が、1:1〜1:5であることを特徴とする請求項1又は2に記載の連続気泡フォーム。
- ヒドロホビンの量が5〜10g/m3であることを特徴とする請求項1〜3の何れか1項に記載の連続気泡フォーム。
- 未変性の連続気泡フォームが、ヒドロホビンの水溶液で処理されることを特徴とする請求項1〜4の何れか1項に記載の連続気泡フォームを製造する方法。
- 処理が20〜120℃の温度で行われることを特徴とする請求項5に記載の方法。
- 処理が、加熱して行われ、及び該加熱がマイクロ波の照射によって行われることを特徴とする請求項5に記載の方法。
- 前記水溶液中の少なくとも1種のヒドロホビンの濃度が0.1μg/ml〜1000μg/mlの範囲であることを特徴とする請求項5〜7の何れか1項に記載の方法。
- 前記連続気泡フォームの製造が、少なくとも1種のヒドロホビンの存在下に行なわれることを特徴とする請求項1〜4の何れか1項に記載の変性された連続気泡フォームを製造する方法。
- メラミン−ホルムアルデヒド縮合生成物に基く変性された連続気泡フォームを製造する方法であり、及び少なくとも1種のメラミン−ホルムアルデヒド(MF)予備縮合物、分散剤、硬化剤及び発泡剤を含む混合物が、加熱下に発泡され、及び硬化され、そして製造が、少なくとも1種のヒドロホビンの存在下に行なわれることを特徴とする請求項9に記載の方法。
- 予備縮合物のメラミン/ホルムアルデヒドのモル割合が、1:1〜1:5の範囲であることを特徴とする請求項10に記載の方法。
- 請求項1〜4の何れか1項に記載の変性された連続気泡フォームを、絶縁材料として使用することを特徴とする方法。
- 請求項1〜4の何れか1項に記載の変性された連続気泡フォームを、航空機中のノイズ及び/又は熱の絶縁に使用する方法。
- 請求項1〜4の何れか1項に記載の変性された連続気泡フォームを、有機液体を吸収するために使用する方法。
- 請求項1〜4の何れか1項に記載の変性された連続気泡フォームを、液体貯蔵の漏れとにじみの防止材として使用する方法。
- 請求項1〜4の何れか1項に記載の変性された連続気泡フォームを、液−液分離のために使用する方法。
- 液−液分離が、オイル−水の混合物からのオイルの分離であることを特徴とする請求項16に記載の方法。
- 請求項1〜4の何れか1項に記載の変性された連続気泡フォームを、殺菌可能な材料として使用する方法。
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