ME00239B - Polimerna jedinjenja polialkilena i njihova upotreba - Google Patents
Polimerna jedinjenja polialkilena i njihova upotrebaInfo
- Publication number
- ME00239B ME00239B MEP-2008-356A MEP2008356A ME00239B ME 00239 B ME00239 B ME 00239B ME P2008356 A MEP2008356 A ME P2008356A ME 00239 B ME00239 B ME 00239B
- Authority
- ME
- Montenegro
- Prior art keywords
- group
- alkyl
- saturated
- unsaturated
- substituted
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 269
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 title claims description 141
- 229920001281 polyalkylene Polymers 0.000 title 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 claims abstract description 144
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 76
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims abstract description 63
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims abstract description 41
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 claims abstract description 23
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims abstract description 23
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 claims abstract 26
- 208000010710 hepatitis C virus infection Diseases 0.000 claims abstract 12
- 208000006154 Chronic hepatitis C Diseases 0.000 claims abstract 11
- -1 CONR' Inorganic materials 0.000 claims description 456
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 325
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 235
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 184
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 183
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 183
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 claims description 183
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 claims description 163
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 163
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 163
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 161
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 148
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 142
- 150000001299 aldehydes Chemical group 0.000 claims description 142
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 141
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 137
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 137
- LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N glyoxal Chemical compound O=CC=O LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 133
- 125000003837 (C1-C20) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 108
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 104
- 125000004404 heteroalkyl group Chemical group 0.000 claims description 101
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 99
- 125000002877 alkyl aryl group Chemical group 0.000 claims description 98
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 93
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 91
- 125000004414 alkyl thio group Chemical group 0.000 claims description 91
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 claims description 91
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 91
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M phosphonate Chemical group [O-]P(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 91
- 150000001409 amidines Chemical group 0.000 claims description 90
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims description 90
- 150000007942 carboxylates Chemical group 0.000 claims description 90
- 150000002466 imines Chemical group 0.000 claims description 90
- LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N phosphoryl Chemical group [P]=O LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 90
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 90
- 150000007970 thio esters Chemical group 0.000 claims description 90
- DUYAAUVXQSMXQP-UHFFFAOYSA-M thioacetate Chemical group CC([S-])=O DUYAAUVXQSMXQP-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 90
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical group [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 89
- 125000002813 thiocarbonyl group Chemical group *C(*)=S 0.000 claims description 89
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 86
- 125000004397 aminosulfonyl group Chemical group NS(=O)(=O)* 0.000 claims description 86
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 claims description 86
- AWIJRPNMLHPLNC-UHFFFAOYSA-N methanethioic s-acid Chemical group SC=O AWIJRPNMLHPLNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 83
- ACVYVLVWPXVTIT-UHFFFAOYSA-M phosphinate Chemical group [O-][PH2]=O ACVYVLVWPXVTIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 80
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical group 0.000 claims description 73
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 claims description 71
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 71
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 71
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M Methacrylate Chemical compound CC(=C)C([O-])=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 71
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 71
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 claims description 71
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 71
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical compound C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 71
- PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N iodoacetamide Chemical compound NC(=O)CI PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 71
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 claims description 71
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 claims description 71
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 claims description 71
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 71
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 claims description 71
- KGIGUEBEKRSTEW-UHFFFAOYSA-N 2-vinylpyridine Chemical compound C=CC1=CC=CC=N1 KGIGUEBEKRSTEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 70
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 70
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 70
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 70
- 150000003457 sulfones Chemical class 0.000 claims description 70
- CYWHLOXWVAWMFO-UHFFFAOYSA-N 3-sulfanyl-1h-pyridine-2-thione Chemical compound SC1=CC=CN=C1S CYWHLOXWVAWMFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 69
- 150000002118 epoxides Chemical class 0.000 claims description 68
- 125000004170 methylsulfonyl group Chemical group [H]C([H])([H])S(*)(=O)=O 0.000 claims description 68
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 claims description 68
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 67
- 229940015043 glyoxal Drugs 0.000 claims description 62
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 claims description 59
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 50
- 125000006701 (C1-C7) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 45
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 43
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 43
- 125000005418 aryl aryl group Chemical group 0.000 claims description 43
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 41
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 claims description 40
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims description 34
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 33
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 claims description 30
- 108010005716 Interferon beta-1a Proteins 0.000 claims description 28
- 229960004461 interferon beta-1a Drugs 0.000 claims description 27
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 24
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 claims description 21
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 claims description 21
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 claims description 19
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 claims description 19
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 18
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 claims description 18
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 claims description 18
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 17
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 15
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 15
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 claims description 15
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 14
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 13
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 11
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims description 8
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 6
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 5
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 claims description 5
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims description 4
- 239000000693 micelle Substances 0.000 claims description 4
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 claims description 4
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 claims description 4
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 4
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 4
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 3
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims description 3
- 125000006273 (C1-C3) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 claims description 2
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 2
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 claims 11
- 229960000329 ribavirin Drugs 0.000 claims 11
- HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N ribavirin Natural products O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1N=CN=C1 HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N 0.000 claims 11
- IWUCXVSUMQZMFG-RGDLXGNYSA-N 1-[(2s,3s,4r,5s)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-1,2,4-triazole-3-carboxamide Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-RGDLXGNYSA-N 0.000 claims 10
- ABEXEQSGABRUHS-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecyl 16-methylheptadecanoate Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCCOC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC(C)C ABEXEQSGABRUHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 10
- 241000764238 Isis Species 0.000 claims 10
- 229960004150 aciclovir Drugs 0.000 claims 10
- MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N aciclovir Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COCCO)C=N2 MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 10
- 229960002963 ganciclovir Drugs 0.000 claims 10
- IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N ganciclovir Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2COC(CO)CO IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 10
- 238000005417 image-selected in vivo spectroscopy Methods 0.000 claims 10
- 238000012739 integrated shape imaging system Methods 0.000 claims 10
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims 10
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims 10
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims 10
- 229960002555 zidovudine Drugs 0.000 claims 10
- HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N zidovudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N 0.000 claims 10
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 6
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims 5
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical group [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims 5
- 239000010452 phosphate Chemical group 0.000 claims 5
- 125000000020 sulfo group Chemical group O=S(=O)([*])O[H] 0.000 claims 5
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 claims 2
- 125000005420 sulfonamido group Chemical group S(=O)(=O)(N*)* 0.000 claims 2
- 101100258315 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) crc-1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 claims 1
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims 1
- 230000001279 glycosylating effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000047 product Substances 0.000 claims 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 9
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 8
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 4
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 4
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 4
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 4
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 4
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 3
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 3
- 125000003808 silyl group Chemical group [H][Si]([H])([H])[*] 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 2
- 229960003161 interferon beta-1b Drugs 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 125000000008 (C1-C10) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 206010065051 Acute hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 206010065553 Bone marrow failure Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 1
- 208000020401 Depressive disease Diseases 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 1
- 101001054334 Homo sapiens Interferon beta Proteins 0.000 description 1
- 206010022004 Influenza like illness Diseases 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010033647 Pancreatitis acute Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 230000006819 RNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 description 1
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical group NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 208000037621 acute hepatitis C virus infection Diseases 0.000 description 1
- 201000003229 acute pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 229940003504 avonex Drugs 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Chemical group 0.000 description 1
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000012317 liver biopsy Methods 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229920000233 poly(alkylene oxides) Polymers 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 229920000098 polyolefin Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000029983 protein stabilization Effects 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 229920005604 random copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 229940038850 rebif Drugs 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- VIDRYROWYFWGSY-UHFFFAOYSA-N sotalol hydrochloride Chemical compound Cl.CC(C)NCC(O)C1=CC=C(NS(C)(=O)=O)C=C1 VIDRYROWYFWGSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 102000014898 transaminase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
- C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
- C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
- C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
- C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
- C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/31—Somatostatins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
- A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
- A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
- C08G65/34—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from hydroxy compounds or their metallic derivatives
- C08G65/48—Polymers modified by chemical after-treatment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L71/00—Compositions of polyethers obtained by reactions forming an ether link in the main chain; Compositions of derivatives of such polymers
- C08L71/02—Polyalkylene oxides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L2203/00—Applications
- C08L2203/02—Applications for biomedical use
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Virology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Neurology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Hematology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Polyethers (AREA)
Abstract
Ovaj pronalazak se odnosi na nova jedinjenja polialkilenglikola i na postupke za njihovu upotrebu. Naročito, jedinjenja koja sadrže nove konjugate polietilenglikola se koriste sama ili u kombinaciji sa antivirusnim agensima, za tretiranje virusnih infekcija, kao što je hronični hepatitis C.
Description
Ovaj pronalazak se odnosi na nova jedinjenja polialkilenglikola, konjugate ovih polimera i proteina, i na njihovu upotrebu.
Kovalentno vezivanje hidrofilnih polimera, kao što su polimeri polialkilenglikola, poznatih takođe i kao polialkilenoksidi, za biološki aktivne molekule i površine interesantno je u biotehnologiji i medicini.
Naročito mnogo istraživanja je usmereno na upotrebu konjugata poli(etilenglikol)-a (PEG), poznatih takođe i kao poli(etilenoksid)-i (PEO), za poboljšavanje rastvorljivosti i stabilnosti i za produžavanje poluvremena života molekula u krvotoku.
U njegovom najobičnijem obliku PEG je linearni polimer koji se sa oba kraja završava hidroksilnom grupom:
HO-CH2CH2O-( CH2CH2O)n-CH2CH2-OH
Gornji polimer, alfa-,omega-dihidroksipoli(etilenglikol), može se takođe predstaviti kao HO-PEG-OH, gde se podrazumeva da simbol -PEG- predstavlja sledeću strukturnu celinu:
-CH2CH2O-(CH2CH2O)-n-CH2-CH2-
gde se n tipično kreće od oko 4 do oko 10.000. PEG se obično koristi kao metoksi-PEG-OH, ili m-PEG, gde je na jednom kraju relativno inertna metoksi grupa, dok je na drugom kraju hidroksi grupa, koja je predmet jednostavnih hemijskih modifikacija. Pored toga, nasumični ili blok kopolimeri različitih alkilenoksida (npr. etilenoksid i propilenoksid) blisko su povezani sa PEG u pogledu njihove hernije i u mnogim primenama mogu zameniti PEG.
Da bi se kuplovao PEG na izabrani molekul, često je potrebno da se PEG aktivira pripremanjem derivata PEG koji ima reaktivnu funkcionalnu grupu, bar na jednom kraju. Funkcionalna grupa se bira na osnovu vrste reaktivne grupe sa kojom raspolaže molekul koji treba da se kupluje sa PEG.
PEG je polimer koji ima svojstvo rastvorljivosti u vodi i u mnogim organskim rastvaračima, netoksičan je i nema imunogenicitet. Jedna od upotreba PEG je kovalentno vezivanje za nerastvorne molekule, kako bi se kao rezultat dobio "konjugat” PEG-molekul koji je rastvoran.
Na primer, pokazano je da lek paclitaxel, koji je nerastvoran u vodi, kada se kupluje sa PEG postaje rastvoran u vodi. Greenvvald et al., J. Org. Chem. 1995, 60, 331-336.
Pristup preko proleka, gde se lekovi oslobađaju razgradnjom kompleksnijih molekula (prolekova) pod fiziološkim uslovima, predstavlja snažnu komponentu u oslobađanju lekova. Prolekovi mogu, na primer, da se formiraju vezivanjem PEG za lekove, preko veza koje se mogu razgraditi pod fiziološkim uslovima. Trajanje PEG prolekova in vivo zavisi od vrste funkcionalne grupe (ili grupa) koja formira veze između PEG i leka Obično, estarske veze, koje se formiraju reakcijom Peg-karboksilnih kiselina, ili aktiviranih PEG-karboksilnih kiselina, sa alkoholnim grupama na leku, hidrolizuju pod fiziološkim uslovima oslobađajući lek, dok su amidne i karbamidne veze, formirane sa aminskim grupama na leku, stabilne i ne hidrolizuju da bi se oslobodio lek. Pokazano je da hidrolitičko oslobađanje lekova iz PEG estara može povoljno da se do izvesne mere kontroliše preko kontrole broja vezujućih metilenskih grupa u distanceru, između krajnjeg kiseonika na PEG i karbonilne grupe pripojene karboksilne kiseline, ili derivata karboksilne kiseline. Na primer, Harris et al., u U.S. Patent-u No. 5,672,662, opisuju PEG-butanoinsku kiselinu i PEG-propanoinsku kiseinu i njihove aktivirane derivate, kao alternativu karboksimetil-PEG jedinjenjima, gde je poželjna manja hidrolitička reaktivnost u odgovarajućim estarskim derivatima. Videti, uopšteno, publikaciju PCT WO 01/46291.
Faktor koji ograničava upotrebljivost potencijalnih supstanci za primenu u medicinskom tretmanu, kada se daju parenteralno, je što se u kratkom vremenu eliminišu iz tela. Ovo eliminisanje se može dogoditi kao rezultat razgradnje pomoću proteaza, ili izbacivanja, korišćenjem normalnih puteva eliminacije proteina, kao što je filtriranje kroz bubrege. Oralno ordiniranje ovih supstanci je još problematičnije, jer pored proteolize u stomaku, visoka kiselost u stomaku uništava ove supstance pre nego što stignu u namenjeno tkivo, kao metu Problemi koji su povezani sa ovim putevima ordiniranja proteina su dobro poznati u farmaceutskoj industriji i koriste se razne strategije u pokušajima da se isti reše. Objavljeno je mnogo radova koji se bave stabilizovanjem proteina. Poznati su razni načini konjugovanja proteina sa polimernim materijalima, uključujući upotrebu dekstrana, polivinilpirolidona, glikopeptida, polietilenglikola i poliaminokiselina. Objavljeno je da kod parenteralnih aplikacija dobijeni konjugovani polipeptidi zadržavaju njihova biološka svojstva u pogledu rastvorljivosti u vodi.
Od posebnog interesa je povećavanje biološke aktivnosti interferona, uz smanjenje toksičnosti, koju prati upotreba ovih proteina pri tretmanu humanih pacijenata. Interferoni su familija malih proteina i glikoproteina koja se nalazi u prirodi, a stvara ih i izlučuje većina ćelija sa jezgrom, kao odgovor na virusnu infekciju, i druge antigenske stimulanse. Interferoni čine ćelije rezistentnim prema virusnoj infekciji, i pokazuju širok spektar dejstava na ćelije. Oni ispoljavaju njihove ćelijske aktivnosti vezivanjem za specifične membranske receptore na površini ćelije. Kada se jednom vežu za ćelijsku membranu, interferoni iniciraju složeni niz unutarćelijskih događanja. Ispitivanja in vitro su pokazala da su to indukovanje nekih enzima, suzbijanje proliferacije ćelije, imunomodulatorne aktivnostu, kao što je pojačanje fagocitne aktivnosti makrofaga, pa porast specifične citotoksičnosti limfocita za ciljane ćelije, i inhibicija replikacije virusa u ćelijama zaraženim virusom.
Interferoni su ispitani u tretmanu niza kliničkih stanja bolesti. U tretmanu multiple skleroze uspostavljena je upotreba humanog interferona-beta. Nedavno su u Evropi i u SAD licencirana dva oblika rekombinantnog interferona-beta, za tretiranje ove bolesti: interferon-beta-1 a (AVONEX®, Biogen, Ine., Cambridge, MA, i REBIF®, Serono, Ženeva, Švajcarska) i interferon-beta-1 b (BETASEROB®, Berlex, Richmond, CA). Interferon-beta-1 a se stvara u ćelijama sisara, korišćenjem prirodne humane sekvencije gena, i glikozilovan je, dok se interferon-beta-1 b stvara u bakterijama E. coli, korišćenjem modifikovane humane sekvencije gena, koja sadrži genetskim inženjeringom podešenu supstituciju cisteina u serin, u položaju 17 aminokiselina, i nije glikozilovan.
Ne-humani interferoni, koji obuhvataju i alfa- i beta-interferon, poznato je da suzbijaju virus humane imunodeficijencije (HIV) i kod akutno- i kod hronično-inficiranih ćelija. Videti, Poli i Fauci, AIDS Research and Human Retroviruses, 1992, 8(2), 191-197. Zahvaljujući njihovoj antivirusnoj aktivnosti, interferoni, a naročito alfa interferoni, stekli su značajnu pažnju kao terapeutski agensi u tretmanu bolesti srodnih sa virusom hepatitisa C (FICV). Videti Floofnagle et al, "Virai Hepatitis 1981 iniemationai £>ymposiurn", Fiiaaenja, ieo2, t-ranKiin institute Press; Hoofnagle et al., New Engl. J. Med. 1986, 315, 1575-1578; Thomson, Lancei, 1987, i, 539-541; Kiyosawa et ai., u "Virai Hepatitis and Liver Disease”, urednik Zuckemnan, Allen K. Liss, New York, str. 895-897; Hoofnagle et al., Sem. Liv. Dis. 1985, 9, 259-263.
Konjugati interferon-poiimer su opisani, na prirner u U.S. Patent No. 4,766,106, U.S. Patent No., 4,917,888, European Patent Application No., 0 236 987, European Patent Application No. 0 510 356 i u International Application Publication No. WO 95/13090.
Hronicni nepaiitis v, je poamuKia Doiesi Koja sporo napreauje, a znatno utiče na kvalitet života. Pored poboljšanja u kvalitetu sakupljanja krvi dobrovoljnih davalaca i nedavnom obavljanju testiranja krvi dobrovoljnih davalaca na HCV, procenjena događanja akutne infekcije među osobama koje primaju transfuziju je između 5 i 10%. Videti Aiter et ai., u "Virai Hepatitis and Liver Disease", urednik Zuckerman, Allen K. Liss, New York, str. 537-542. Dakle, približno od 3 miliona osoba u SAD, koje tokom godine primaju transfuzije, akutni hepatitis C će se razviti kod oko 150,000. Mada će mnogi pacijenti, koji su dobili hepatitis C, imati subkiinički, ili blag obiik bolesti, kod približno 50% to će uznapredovati do hroničnog stanja bolesti, koje karakteriše fluktuacija abnormalnosti serum transaminaze i innamatorna oštećenja kod biopsije jetre, Krocenjuje se da će se ciroza razviti kod i do 20% iz ove grupe. Videti Koretz et al., Gastroenterology, 1985, 88, 1251-1254.
Poznato je da interefoni utiću na mnoštvo ćeiijskih funkcija, uključujući repiikaciju DNK, sinetezu RNK i proteina, i to i u normalnim i abnormalnim ćelijama. Dakle, citotoksični efekti interferona se ne ograničavaju na tumor iii ćeiije inficirane virusom, već se takođe manifestuju u normalnim, zdravim ćelijama. Kao rezultat toga, tokom terapije interferonom može doći do nepoželjnih sporednih efekata, naročito kada se zahtevaju visoke doze. Ordiniranje interferona može da dovede
do mijelosupresije, što dovodi do smanjenog broja crvenih krvnih zrnaca i umanjenog sadržaja belih krvnih zrnaca i trombocita. Interferoni obično izazivaju simptome nalik gripu (npr. groznica, zamor, glavobolja i jeza), gastrointestinalne poremećaje (npr. anoreksija, mučnina i dijareja), vrtoglavicu i kašalj. Čest je slab uzdržani odgovor pacijenata sa HCV na tretman sa ne-PEG-ilovanim interferonom, pa taj tretman može da izazove ozbiljne sporedne efekte, uključujući, ali bez ograničavanja na iste, retinopatiju, tiroiditis, akutni pankreatitis i depresiju.
Nepoželjni sporedni efekti koji prate terapiju interferonom, često ograničavaju terapeutsku korist režima tretmana interferonom. Dakle, postoji potreba da se održe ili poboljšaju terapeutske koristi ove terapije, uz smanjenje ili eliminaciju nepoželjnih sporednih efekata.
Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja polialkilenglikola, na konjugate tih jedinjenja i na njihovu upotrebu.
U jednom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na aktivirani polimer polialkilenglikola koji ima strukturu u skladu sa Formulom I:
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
X i Y su, nezavisno, O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR', S02NR' iii NR';
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene bicikiične i prernošćene bicikiične prstenaste strukture), supstituisana iii nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril,
gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, i gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, sulfamoil, sulfonat, silil, etar i alkiltio;
R’, Z i Z’ svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, a gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, sulfamoil, sulfonat, silil, etar i alkiltio;
R je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule I i biološki aktivnog jedinjenja, ili njegovog prekursora; m je 0 ili 1;
n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1, 2 ili 3.
U sledećem aspektu ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje aktiviranog polietilenglikol (PGC) koje ima strukturu u skladu sa Formulom la:
gde su
P polimer polialkilenglikola,
m je nula ili jedan; n je ceo broj od jedan do pet, i
X i Y nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS, SO, SO2, CONR’, SC^NR’ ili NR’;
Q je C3-C8 zasićeni ili nezasićeni ciklični alkil ili ciklični heteroalkil,
supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa. Ukoliko su prisutni, supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfmat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, sulfamoil, sulfonat, silil, etar i alkiltio. Heterociklične i krabociklične grupe obuhvataju pripojene biciklične ili premošćene biciklične prstenaste strukture;
R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu. Supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio.
Jedinjenja koja sadrže hiralne ugljenike mogu biti u R konfiguraciji, S konfiguraciji ili mogu biti racemati.
U jednoj realizaciji, R predstavlja karboksilna kiselina, estar, aldehid,
aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid,
hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksalni ostatak.
U nekim realizacijama P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturnu Formulu II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde E predstavlja vodonik ili CrC^ alkil grupu ravnog ili račvastog lanca, i a predstavlja ceo broj od 4 do 10.000. Na primer, E može biti metil grupa.
U drugim realizacijama E može da predstavlja obeležje koje se može detektovati, kao što su na primer, radioaktivan izotop, fluorescentni ostatak, fosforescentni ostatak, hemiluminiscentni ostatak ili kvantna tačka.
U još jednoj realizaciji E predstavlja ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule I i biološki aktivnog jedinjenja, ili njegovog prekursora. Na primer, E može biti karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksalni ostatak.
U još nekim realizacijama, E ima strukturu u skladu sa Formulom III ili Formulom IV:
gde su
Q, X, Y, Z, m i n, svaki nezavisno, definisani gore, a W, svaki nezavisno, predstavlja vodonik ili Ci-C?alkil;
R” je ostatak koji je pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule lili biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i
R" je ostatak koji je pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
Na primer, R” i R’” mogu biti karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksalni ostatak. R” i R’” mogi biti isti kao, ili različiti od R.
U naročitoj realizaciji Q je supstituisani ili nesupstituisani alkaril.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na aktivirani PEG, koji ima strukturu u skladu sa Formulom (V):
gde su
P, X, Y, R’, Z, R, m i n već definisani, a
Ti i T2 svaki nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa. Supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksii, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
L može biti odsutno (npr. kada je d jednako nuli), ili može biti od jedan do četiti (npr. n je ceo broj od jedan do četiri) L supstituenta u aromatičnom prstenu, pored supstituenata T-, i T2, a svaki L, nezavisno, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa, ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa. Supstituenti se biraju između halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksii, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R je ostatak koji je pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule V i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora. Na primer, R se bira između karboksitne kiseline, estra, aldehida, aldehid hidrata, acetala, hidroksi, zaštićenog hidroksi, karbonata, alkenila, akrilata, metakrilata, akrilamida, supstituisanog ili nesupstituisanog tiola, halogena, supstituisanog ili nesupstituisanog amina, zaštićenog amina, hidrazida, zaštićenog hidrazida, sukcmimidila, izocijanata, izotiocijanata, ditiopiridina, vinilpiridina, jodoacetamida, epoksida, hidroksisukcinimidila, azola, maleimida, sulfona, alila, vinilsulfona, trezila, sulfo-N-sukcinimidila, diona, mezila, tozila ili glioksala.
U jednoj realizaciji polimera aktiviranog polialkilenglikola Formule V, P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde E predstavlja vodonik ili C1-C20 alkil grupu ravnog ili račvastog lanca, i a predstavlja ceo broj od 4 do 10.000. Na primer, E može biti metil. U drugim realizacijama E može biti obeležje koje se može detektovati, kao što su na primer, radioaktivan izotop, fluorescentni ostatak, fosforescentni ostatak, hemiluminiscentni ostatak ili kvatna tačka.
U sledećem aspektu, P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II:
Formula II E - (O - CH2CH2)a-
gde E predstavlja ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule V i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj između 4 i 10.000. Na primer E se bira između karboksilne kiseline, estra, aldehida, aldehid hidrata, acetala, hidroksi, zaštićenog hidroksi, karbonata, alkenila, akrilata, metakrilata, akrilamida, supstituisanog ili nesupstituisanog tiola, halogena, supstituisanog ili nesupstituisanog amina, zaštićenog amina, hidrazida, zaštićenog hidrazida, sukcinimidila, izocijanata, izotiocijanata, ditiopiridina, vinilpiridina, jodoacetamida, epoksida, hidroksisukcinimidila, azola, maleimida, sulfona, alila, vinilsulfona, trezila, sulfo-N-sukcinimidila, diona, mezila, tozila ili glioksalnog ostatka.
U sledećem aspektu, E ima strukturu u skladu sa Formulom III ili Formulom IV:
gde su:
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili
nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde aikil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
X, Y, Z, m i n su defmisani ranije;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
R” je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; i
R’” je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U nekim realizacijama R” i R’” mogu biti isti kao, ili različiti od R, a biraju se između karboksilne kiseline, estra, aldehida, aldehid hidrata, acetala, hidroksi, zaštićenog hidroksi, karbonata, alkenila, akrilata, metakrilata, akrilamida, supstituisanog ili nesupstituisanog tiola, halogena, supstituisanog ili nesupstituisanog amina, zaštićenog amina, hidrazida, zaštićenog hidrazida, sukcinimidila, izocijanata, izotiocijanata, ditiopiridina, vinilpiridina, jodoacetamida, epoksida, hidroksisukcinimidila, azola, maleimida, sulfona, alila, vinilsulfona, trezila, sulfo-N-sukcinimidila, diona, mezila, tozila ili glioksalnog ostatka. U jednoj realizaciji jedinjenja Formule V, ako su prisutni, X i Y su kiseonik.
U sledećem aspektu ovaj pronalazak se odnosi na aktivirani PGC koji ima strukturu u skladu sa Formulom VI:
gde su:
P je polimer polialkilenglikola;
m je nula ili jedan;
n je nula ili ceo broj od jedan do pet;
X i Y nezavisno, su 0, S, CO, C02, COS; SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’;
Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena CrC2oalkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
R’ i Z nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C-i-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, d je nula ili ceo broj od jedan do četiri, i
L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena Ci-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkaril grupa. Supstituenti se biraju između: halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tiofomnijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio ostatka.
U jednoj realizaciji aktivirani PGC, u skladu sa Formulom VI, ima strukturu u skladu sa Formulom VII ili Formulom VIII:
U jednoj realizaciji jedinjenja aktiviranog polialkilenglikola Formule VII i VIII, P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde E predstavlja vodonik ili CrC^ alkil grupu ravnog ili račvastog lanca, i a predstavlja ceo broj od 4 do 10.000. Na primer, E može biti metil. U drugim realizacijama E je obeležje koje se može detektovati, kao što su na primer, radioaktivan izotop, fluorescentni ostatak, fosforescentni ostatak, hemiluminiscentni ostatak ili kvatna tačka.
U sledećem aspektu, P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II:
Formula II E - (0 - CH2CH2)a-
gde E predstavlja ostatak koji je pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule VII ili VIII i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj između 4 i 10.000. Na primer E se bira između karboksilne kiseline, estra, aldehida, aldehid hidrata, acetala, hidroksi, zaštićenog hidroksi, karbonata, alkenila, akrilata, metakrilata, akrilamida, supstituisanog ili nesupstituisanog tiola, halogena, supstituisanog ili nesupstituisanog amina, zaštićenog amina, hidrazida, zaštićenog hidrazida, sukcinimidila, izocijanata, izotiocijanata, ditiopiridina, vinilpiridina, jodoacetamida, epoksida, hidroksisukcinimidila, azola, maleimida, sulfona, alila, vinilsulfona, trezila, sulfo-N-sukcinimidila, diona, mezila, tozila ili glioksalnog ostatka.
U sledećem aspektu, E ima strukturu u skladu sa Formulom III ili Formulom IV:
gde su:
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio. Heterociklične i karbociklične grupe obuhvataju i pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture;
X, Y, Z, m i n su definisani ranije;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
R” je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; i
R’” je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U nekim realizacijama R” i R’” mogu biti isti kao, ili različiti od R, a biraju se između karboksilne kiseline, estra, aldehida, aldehid hidrata, acetala, hidroksi, zaštićenog hidroksi, karbonata, alkenila, akrilata, metakrilata, akrilamida, supstituisanog ili nesupstituisanog tiola, halogena, supstituisanog ili nesupstituisanog amina, zaštićenog amina, hidrazida, zaštićenog hidrazida, sukcinimidila, izocijanata, izotiocijanata, ditiopiridina, vinilpiridina, jodoacetamida, epoksida, hidroksisukcinimidila, azola, maleimida, sulfona, alila, vinilsulfona, trezila, sulfo-N-sukcinimidila, diona, mezila, tozila ili glioksalnog ostatka.
U jednoj realizaciji jedinjenja aktiviranog polialkilenglikola Fiormule VIII, supstituenti na prstenu su locirani u meta položaju. U drugim realizacijama supstituenti na prstenu su locirani u para položaju.
U sledećoj realizaciji, jedinjenje aktiviranog polialkilenglikola u skladu sa Formulom VI ima strukturu u skladu sa Formulom IX:
gde su:
P je polimer polialkilenglikola;
n i u svaki nezavisno, su nula ili ceo broj od jedan do pet; i Z je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca.
U jednoj realizaciji jedinjenja Formule IX, supstituenti na prstenu su locirani u meta položaju. U drugoj realizaciji jedinjenja Formle IX, supstituenti na prstenu su locirani u para položaju.
U drugoj realizaciji jedinjenja Formule IX, P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde E predstavlja vodonik ili Ci-C2o alkil grupu ravnog ili račvastog lanca, obeležje koje se može detektovati ili ostatak koji je pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule IX i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a predstavlja ceo broj od 4 do 10.000.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak obuhvata aktivirani polimer polialkilenglikola, koji ima strukturu u skladu sa Formulom X:
Formula X
gde su:
P je polimer polialkilenglikola;
X je 0, S, CO, C02, COS; SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’;
R’ je vodonik, zasićena ili nezasićena Ci-C2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, supstituisana ili nesupstituisana, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićeni ili nezasićenu Ci-C2o alkil ili heteroalkaril grupu i gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio;
Z i Z’ pojedinačno, su vodonik zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, supstituisana ili nesupstituisana, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićeni ili nezasićenu Ci-C^ alkil ili heteroalkaril grupu i gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio, pod uslovom da bar jedan od Z i Z’ nije vodonik;
R je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule X i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; n svaki ezavisno, je nula ili ceo broj od 1 do 5; i
p je 1, 2 ili 3.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak obuhvata aktivirano jedinjenje polialkilenglikola (PGC) koje ima strukturu u skladu sa Formulom Xa:
U ovim jedinjenjima:
P predstavlja polimer polialkilenglikola, kao što je na primer, PEG ili mPEG;
X je O, S, CO, C02, COS; SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’,
R’ ukoliko je prisutan, predstavlja vodonik, zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, supstituisana ili nesupstituisana, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićeni ili nezasićenu C-i-C^ alkil ili heteroalkaril grupu i gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio;
Z je zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, supstituisana ili nesupstituisana, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićeni ili nezasićenu Ci-C2o alkil ili heteroalkaril grupu i gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio;
R je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule X i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; i
n je nula ili ceo broj od 1 do 5, tako da je između nula i pet metilenskih grupa između X i Z, koji sadrži atom ugljenika.
U jednoj realizaciji R se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
U sledećoj realizaciji P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde E predstavlja vodonik ili Ci-C2o alkil grupu ravnog ili račvastog lanca, ili obeležje koje se može detektovati, i a predstavlja ceo broj od 4 do 10.000. U sledećoj realizaciji, E može biti metil.
U još jednoj realizaciji P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II, gde E predstavlja ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule X i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a predstavlja ceo broj od 4 do 10.000.
U sledećoj realizaciji E se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal. Alternativno, E može imati strukturu u skladu sa Formulom III:
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
X i Y nezavisno, su 0, S, CO, C02, COS; SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’;
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R’ i Z svaki nezavisno, su opisani gore; m je 0 ili 1;
W, svaki nezavisno, predstavlja vodonik ili CrC7alkil;
n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i
R” je ostatak koji je pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora. Heterociklične i karbociklične grupe obuhvataju pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture.
U još jednoj realizaciji E ima strukturu u skladu sa Formulom IV:
gde su:
X, Z i n svaki nezavisno, već definisani;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i
R’” je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U sledećoj realizaciji R” se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen,
supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
U sledećoj realizaciji R’” se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen,
supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
U sledećoj realizaciji E predstavlja obeležje koje se može detektovati. Pored toga, E se može birati iz grupe koju čine radioaktivan izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
U još jednoj realizaciji aktivirani PGC, u skladu sa ovim pronalaskom, ima strukturu u skladu sa Formulom XI:
gde su:
P je polimer polialkilenglikola; i
n i Z su već definisani.
U sledećoj realizaciji, aktivirani polialkilenglikol ima strkturu u skladu sa Formulom XII:
gde su n, a i Z defmisani gore. U jednoj realizaciji Z može da bude metil. U nekim ralizacijama n je jednako jedan.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak obuhvata jedinjenje aktiviranog polialklenglikola koje ima strukturnu formulu u skladu sa Formulom XIII:
gde a predstavlja ceo broj od 4 do 10.000.
Ovaj pronalazak se takođe odnosi na sastav jedinjenja aktiviranog polialkilenglikiola iz ovog pronalaska i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora. U raznim realizacijama biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor se biraju iz grupe koju čine peptid, analog peptida, protein, enzim, mali molekul, boja, lipid, nukleozid, oligonukleotid, analog oligonukleotida, šećer, oligosaharid, ćelija, virus, lipozom, mikročestica, površina i micela.
U sledeće aspektu, ovaj pronalazak daje sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XIV:
Formula XIV
gde su
P je polimer polialkileglikola;
X i Y nezavisno su O, S, CO, C02, COS; SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’;
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena CrC20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R‘, Z i Z’ svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C-i-C2o alkil ili heteroalkil grupa, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena Ci-C2o alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* je ostatak za povezivanje;
B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor;
m je 0 ili 1;
n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1, 2 ili 3.
U sledećem aspektu ovaj pronalazak obuhvata sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XIVa:
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS; SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’;
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tiofomnijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R‘ i Z svaki nezavisno, su vodonik zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkil grupa, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* je ostatak za povezivanje, koji se formira reakcijom između R i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora;
B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor; m je 0 ili 1; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
U jednoj realizaciji R* je ostatak za povezivanje, koji se formira reakcijom R sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom. Na primer, R je ostatak koji se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
U sledećoj realizaciji P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde E predstavlja vodonik ili CrC2o alkil grupu ravnog ili račvastog lanca, ili obeležje koje se može detektovati, i a predstavlja ceo broj od 4 do 10.000. U ovoj realizaciji E može biti metil.
U sledećoj realizaciji P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde E predstavlja ostatak koji je pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule XIV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000. U još jednoj realizaciji, E može ovde biti veza sa drugim biološki aktivnim jedinjenjem B. Alternativno, E može formirati vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem koje je različito od B. E može takođe da formira i dodatnu vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem B.
U raznim realizacijama E se može birati iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal. U sledećoj realizaciji E može imati strukturu u skladu sa Formulom III:
gde su
Q, X, Y, Z, m i n, svaki nezavisno, već definisani;
W, svaki nezavisno, predstavlja vodonik ili CrC7alkil; i
R” je ostatak koji je pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule lili
biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U sledećoj realizaciji E ima strukturu u skladu sa Formulom IV:
gde su
X, Z i n, svaki nezavisno, već definisani;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i
R’” je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U raznim realizacijama R” se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
Slično, u sledećim realizacijama R’” se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin,
jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
U sledećim realizacijama E predstavlja obeležje koje se može detektovati. Na primer, E se može birati iz grupe koju čine radioaktivan izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
U raznim realizacijama Q je supstiuisani ili nesupstituisani alkaril.
U narednom aspektu, ovaj pronalazak daje sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XV:
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
m je nula ili jedan;
d je nula ili ceo broj od jedan do četiri; i
n je nula ili ceo broj od jedan do pet;
X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS; SO, S02, CONR', S02NR’ ili NR’;
T-i i T2 nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosfori I, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R’ i Z svaki nezavisno, je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* je ostatak za povezivanje koji se stvara reakcijom između R i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i
B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R.
Na primer, R može biti ostatak koji se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen,
supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
U sledećoj realizaciji P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde E predstavlja vodonik ili Ci-C2o alkil grupu ravnog ili račvastog lanca, ili obeležje koje se može detektovati, i a predstavlja ceo broj od 4 do 10.000. U ovoj realizaciji E može biti metil.
U sledećem aspektu, P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde E predstavlja ostatak koji je pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule XV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000. U još jednoj realizaciji, E se može birati iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal. Pored toga, E može imati strukturu u skladu sa:
gde su
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili
nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, fomnil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
X, Y, Z, m i n, svaki nezavisno, već su definisani;
W, svaki nezavisno, predstavlja vodonik ili CrCzalkil; i
R” je ostatak koji je pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule lili
biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U sledećoj realizaciji E ima strukturu u skladu sa Formulom IV:
gde su:
X, Z i n, svaki nezavisno, već su definisani;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i
R’” je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U još jednoj realizaciji R" se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
Slično, u drugoj realizaciji R’” se može izabrati iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sutfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
U drugim realizacijama E predstavlja obeležje koje se može detektovati. Na primer, E može da se bira iz grupe koju čine radioaktivan izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
U drugom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XVI:
gde su
m je 0 ili 1;
n je 0 ili ceo broj od 1 do 5;
P je polimer polialkilenglikola;
X i Y nezavisno su 0, S, CO, C02, COS; SO, S02, CONR', S02NR’ ili NR’;
Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili su zasićena ili nezasićena Ci-C2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
R’ i Z svaki nezavisno, je vodonik, zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; d je 0 ili ceo broj od 1 do 4;
L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični
heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa. Supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio grupa;
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i
B je biološki aktivno jedinjenja ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R.
Na primer, R može biti ostatak koji se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
U jednoj realizaciji R* je metilenska grupa, a B je biološki aktivan molekul koji ima amino grupu, pri čemu metilenska grupa formira vezu sa amino grupom na B.
U nekim realizacijama amin je aminski kraj peptida, amin u bočnom bočnom lancu aminokiselina peptida, ili amin suptituenta za glikozilaciju glikozilovanog peptida. Na primer, peptid može biti interferon, kao što je inteferon-beta, npr. interferon-beta-1a.
U nekim realizacijama jedinjenje u skladu sa Formulom XVI ima strukturu u skladu sa Formulom XVII:
Formula XVII
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
Z je vodonik ili zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; n je 0 ili ceo broj od 1 do 5;
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i
B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R.
Na primer, R može biti ostatak koji se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
U jednoj realizaciji R* u Formuli XVII je metilenska grupa, a B je biološki aktivan molekul koji ima amino grupu, gde metilenska grupa formira vezu sa amino grupom na B.
U nekim realizacijama ovaj amin je aminski kraj peptida, amin u bočnom bočnom lancu aminokiselina peptida, ili amin supstituenta za glikozilaciju glikozilovanog peptida. Na primer, peptid može biti interferon, kao što je interferon-beta, npr. interferon-beta-1a.
U drugim realizacijama jedinjenje u skladu sa Formulom XVI imaju strukturu u skladu sa Formulom XVIII:
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
R* je ostatak za povezivanje;
B je biološki aktivan molekul; i n je jedan ili dva.
U jednoj realizaciji, R* u Formuli XVIII je metilenska grupa, a B je biološki aktivan molekul koji ima amino grupu, gde metilenska grupa formira vezu sa amino gupom na B.
U nekim realizacijama ovaj amin je aminski kraj peptida, amin u bočnom lancu aminokiselina peptida, ili amin supstituenta za glikozilaciju glikozilovanog peptida. Na primer, peptid može biti interferon, kao što je interferon-beta, npr. interferon-beta-1a.
U nekim realizacijama jedinjenje u skladu sa Formulom XVI, P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule (II):
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde E predstavlja vodonik, C1-C20 alkil grupu ravnog ili račvastog lanca (npr. metil), obeležje koje se može detektovati, ili ostatak koji je pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule XVI i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000. Kada E predstavlja obeležje koje se može detektovati, ovo obeležje može biti, na primer, radioaktivan izotop,
fluorescentni ostatak, fosforescentni ostatak, hemiluminiscentni ostatak i kvantna tačka.
U sledećoj realizaciji, gde E predstavlja ostatak koji može da formira vezu između jedinjenja Formule XVI i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, E se bira iz grupe: karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal ostataka.
U sledećoj realizaciji, E ima strukturu u skladu sa Formulom III ili Formulom IV:
gde su:
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
X, Y, Z, m i n su definisani ranije;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
R” je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; i
R’” je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U nekim realizacijama R” i R’” mogu biti isti kao, ili različiti od R, a biraju se između karboksilne kiseline, estra, aldehida, aldehid hidrata, acetala, hidroksi, zaštićenog hidroksi, karbonata, alkenila, akrilata, metakrilata, akrilamida, supstituisanog ili nesupstituisanog tiola, halogena, supstituisanog ili nesupstituisanog amina, zaštićenog amina, hidrazida, zaštićenog hidrazida, sukcinimidila, izocijanata, izotiocijanata, ditiopindina, vinilpiridina, jodoacetamida, epoksida, hidroksisukcinimidila, azola, maleimida, sulfona, alila, vinilsulfona, trezila, sulfo-N-sukcinimidila, diona, mezila, tozila ili glioksalnog ostatka.
U nekim realizacijama jedinjenja u skladu sa formulom XVI, to jedinjenje može imati strukturu u skladu sa Formulom XIX:
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
n i u svaki nezavisno, su nula ili ceo broj jeadn do pet;
Z je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i
B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R.
U jednoj realizaciji R* u Formuli XIX je metilenska grupa, a B je biološki aktivan molekul koji ima amino grupu, gde ova metilenska grupa formira vezu s amino grupom na B.
U nekim realizacijama ovaj amin je aminski kraj peptida, amin u bočnom lancu aminokiselina peptida, ili amin supstituenta za glikozilaciju glikozilovanog peptida. Na prirner, peptid može biti interferon, kao što je interferon-beta, npr. interferon-beta-1a.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na sastav u skladu sa Formulom
XX:
gde su
m je 0 ili 1; d je 0 ili ceo broj 1 do 4; a je ceo broj od 4 do 10.000; n je 0 ili ceo broj od 1 do 5;
X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR’ ili NR’;
Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili su zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkil grupa, ravnog ili račvastog lanca;
R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa, ravnog ili račvastog lanca;
L ako je prisutan, svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena Ci-C2o alkil ili heteroalkil grupa, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkaril grupa. Supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil,
karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pipojene biciklične ili premošene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa. Supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
R* i R** nezavisno, su ostaci za povezivanje, a formiraju se reakcijom R i R” sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i B i B’ svaki od njih je biološki aktivno jedinjenja ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R i R", respektivno.
U nekim realizacijama B i B’ su ista vrsta biološki aktivnog jedinjenja. U drugim realizacijama B i B’ su različita biološki aktivna jedinjenja. U još nekim realizacijama B i B’ su isti biološki aktivan molekuli. U dodatnim realizacijama R* i R** su isti. U drugim realizacijama R* i R** su različiti.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na sastav u skladu sa Formulom
XXI:
gde su
m je 0 ili 1; d je 0 ili ceo broj 1 do 4;
a je ceo broj od 4 do 10.000;
n je 0 ili ceo broj 1 do 5;
X i Y nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR' ili NR’;
Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili su zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkil grupa;
R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroakil grupa ravnog ili račvastog lanca;
L ukoliko je prisutan, nezavisno, je zasićena ili nezasićena Ci-C20 alkil ili heteroalkil grupa, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena Ci-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
W svaki nezavisno je vodonik ili C1-C7 alkil;
R* i R** nezavisno, su ostaci za povezivanje koji se formiraju reakcijom R i R” sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom, i B i B’ svaki je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R i R”, respektivno.
U nekim realizacijama B i B’ su ista vrsta biološki aktivnog jedinjenja. U drugim realizacijama B i B’ su isti biološki aktivan molekul. U dodatnim realizacijama, R* i R** su isti. U drugim realizacijama R* i R** su različiti.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak obuhvata sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXII:
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
X je O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR' ili NR’;
R’ je vodonik, je zasićena ili nezasićena C-i-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena Cr-C2o alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
Z i Z’ svaki nezavisno, su vodonik, je zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio, pod uslovom da bar jedan od Z ili Z’ nije vodonik;
R* je ostatak za povezivanje;
B je biološki aktivan molekul;
n svaki je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1, 2 ili 3.
U narednom aspektu, ovaj pronalazak obuhvata sastav koji ima strukturu u skaldu sa Formulom XXIIa:
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
X je O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR’ ili NR’; n je 0 ili ceo broj 1 do 5;
R’ je vodonik, je zasićena ili nezasićena C1-10 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
Z je zasićena ili nezasićena C-i-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili ravastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* je ostatak za povezivanje, koji se formira reakcijom R sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i
B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle knjugovanja sa R.
U jednoj realizaciji R* se formira reakcijom sa ostatkom koji se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal, sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom.
U dodatnoj realizaciji P je polietilenglikol koji ima strukturu prikazanu Formulom II:
Formula II
E-(O-CH2CH2)a-
gde E predstavlja vodonik, C1-C20 alkil grupu ravnog ili račvasrog lanca, ili obeležje koje se može detektovati; i a je ceo broj od 4 do 10.000. U ovoj realizaciji E može biti metil.
U drugoj realizaciji, P je polietilenglikol koji ima strukturu Formule II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde E predstavlja ostatak koji je pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule II i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000. U ovoj realizaciji E se može vezati za biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, koje se razlikuje od B. U drugim realizacijama E formira dodatnu vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem B.
U raznim realizacijama E se može birati iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid,
epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
U drugim realizacijama E ima strukturu u skladu sa Formulom III:
gde su:
P je polimer polialkilenglikola;
X i Y nezavisno su O, S, CO, CO2l COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR’ ili NR’;
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C-i-C^ alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, fomnil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R’ i Z svaki nezavisno, su opisani gore; m je 0 ili 1;
n svaki nezavisno je 0 ili ceo broj 1 do 5;
R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; i W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alki.
U sledećoj realizaciji E ima strukturu u saglasnosti sa Formulom IV:
gde su:
X, Z i n nezavisno, već su definisani;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i
R’” je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U još nekim realizacijama R” se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
U još nekim realizacijama R’” se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
U dodatnim realizacijama E je obeležje koje se može detektovati. Na primer, E se može birati iz grupe koju čine radioaktivan izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
U drugim realizacijama R* je metilen, a B je biološki aktivan molekul, vezan preko amina. Na primer, ovaj amin je aminski kraj peptida. U drugoj realizaciji ovaj peptid je interferon, kao što je interferon-beta-1a.
U sledećoj realizaciji ovaj pronazak predstavlja sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXIII:
gde su n, a, R*, B i Z definisani gore. U jednoj realizaciji Z je metil, a n je jedan.
U još jednom aspektu, ovaj pronalazak obuhvata sastav u skladu sa Formulom
XXIV:
gde je
m jednako 0 ili 1;
a je ceo broj od 4 do 10.000;
n svaki nezavisno je nula ili ceo broj od 1 do 5;
X i Y nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR’ ili NR’;
R’ i Z nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
W svaki nezavisno je vodonik ili C1-C7 alkil;
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* i R** nezavisno, su ostaci za povezivanje koji se formiraju reakcijom R i R” sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom, i
B i B’ svaki, je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R i R”, respektivno.
U nkeim realizacijama B i B’ su ista vrsta biološki aktivnog jedinjenja. U drugim realizacijama B i B’ su različita biološki aktivna jedinjenja. U još nekim drugim realizacijama B i B’ su isti biološki aktivan molekul. U dodatnim realizacijama R* i R** su isti. U nekim realizacijama R* i R** su različiti.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak obuhvata sastav u skladu sa Formulom
XXV:
gde su
X je O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR', SO2NR’ ili NR’; a je ceo broj od 4 do 10.000; n svaki nezavisno je 0 ili ceo broj od 1 do 5;
Z svaki nezavisno, je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili
heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
W svaki nezavisno, je vodonik ili Ci-Czalkil;
R* i R** nezavisno, su ostaci za povezivanje koji se formiraju reakcijom R i R” sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom, i
B i B’ svaki je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R i R”, respektivno.
U nekim realizacijama B i B’ su ista vrsta biološki aktivnog jedinjenja. U drugim realizacijama B i B’ su različita biološki aktivna jedinjenja. U još nekim
ralizacijama B i B' su isti biološki aktivan molekuli. U dodatnim realizacijama R* i R** su isti. U drugim realizacijama R* i R** su različiti.
Ovaj pronalazak obuhvata farmaceutski preparat koji sadrži sastave iz ovog pronalaska zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem. U raznim realizacijama farmaceutski preparat sadrži takođe i dodatni biološki aktivan agens. Na primer, biološki aktivan agens se može odabrati iz grupe koju čine peptid, analog peptida, protein, enzim, mali molekul, boja, lipid, nukleozid, oligonukleotid, analog olegonukleotida, šećer, oligosaharid, ćelija, virus, lipozom, mikročestica, površina i micela. U drugoj realizaciji biološki aktivni agens je antivirusni agens.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na sastav koji sadrži proizvod reakcije jedinjenja Formule I i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora
(B).
U jednoj realizaciji, ovaj sastav ima strukturu u skladu sa Formulom XIV:
gde su sve varijable definisane gore;
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
U drugom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na sastav koji je proizvod reakcije jedinjenja Formule V i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora. U jednoj realizaciji ovaj sastav ima strukturu u skladu sa Formulom XV:
gde su sve varijable definisane gore; a
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
U još jednoj realizaciji ovaj asav ima strukturu u skladu sa Formulom XX ili XXI:
gde su sve varijable definisane gore;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju B, ili njegovom prekursoru;
R** je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R” ili R’” sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju B’, ili njegovom prekursoru; i B i B’ su, nezavisno, biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
U nekim realizacijama B i B’ su ista vrsta biološki aktivng jedinjenja. U drugim realizacijama B i B’ su različita bološki aktivna jedinjenja. U još nekim
realizacijama B i B’ su isti biološki aktivan molekul. U dodatnim realizacijama, R i R** su isti. U drugim realizacijama, R* i R** su različiti.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na sastav koji je proizvod reakcije jedinjenja Formule VI i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U jednoj realizaciji ovaj sastav ima strukturu u skladu sa Formulom XVI:
gde su sve varijable definisane gore; a
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
U sledećem aspektu ovaj pronalazak se odnosi na sastav koji je proizvod reakcije jedinjenja Formule VII i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U jednoj realizaciji ovaj sastav ima strukturu u skladu sa Formulom XVII:
gde su sve varijable definisane gore; a
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i
B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na sastav koji je proizvod reakcije jedinjenja Formule VIII i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U jednoj realizaciji, ovaj sastav ima strukturu u skladu sa Formulom XVIII:
gde su sve varijable definisane gore; a
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
U sledećem aspektu ovaj pronalazak se odnosi na sastav koji je proizvod reakcije jedinjenja Formule IX i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U jednoj realizaciji ovaj sastav ima strukturu u skladu sa Formulom XIX:
gde su sve varijable definisane gore; a
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na sastav koji je proizvod reakcije jedinjenja Formule X i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U jednoj realizaciji, ovaj sastav ima strukturu u skladu sa Formulom XXII:
gde su sve varijable definisane gore; a
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
U sledećoj realizaciji, ovaj sastav ima strukturu u skladu sa Formulom XXIV:
gde su sve varijable definisane gore;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju B ili njegovom prekursoru;
R** je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R” sa reaktivnim ostatakom na biološki aktivnom jedinjenju B’ ili njegovom prekursoru; i B i B’ su nezavisno, biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
U nekim realizacijama B i B’ su ista vrsta biološki aktivnog jedinjenja. U drugim realizacijama B i B' su različita biološki aktivna jedinjenja. U još nekim realizacijama B i B’ su isti biološki aktivan molekul. U dodatnim realizacijama R* i R** su isti. U drugim realizacijama R* i R** su različti.
U drugim realizacijama ovaj sastav ima strukturu u skladu sa Formulom XXV:
Formula XXV
gde su sve varijable definisane gore;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
R* i R** su, nezavisno, ostaci za povezivanje koji se formiraju reakcijom R i R” sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i
B i B’ svaki je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R i R”, respektivno.
U nekim realizacijama B i B’ su ista vrsta biološki aktivnog jedinjenja. U drugim realizacijama B i B’ su različita biološki aktivna jedinjenja. U još nekim realizacijama B i B’ su isti biološki aktivan molekul. U dodatnim realizacijama R* i R** su isti. U drugim realizacijama R* i R** su različiti.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak obuhvata postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, koji se sastoji od ordiniranja tome pacijentu efikasne količine preparata koji ima strukturu u skladu sa Formulom XIV:
Formula XIV
P - X - (CH2)2- Q - (Y)m - (CH2)n — [ - C - ]P - (CH2)n - R* - B
Z
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
X i Y nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR’ ili NR’;
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-Cs ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične ili premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril;
gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R’, Z i Z’ svaki nezavisno, su vodonik, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ranog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* je ostatak za povezivanje;
B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor; m je 0 ili 1;
n svaki je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1, 2 ili 3.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, odiniranjem tome pacijentu efikasne količine preparata koji ima strukturu u skladu sa Formuloma XIVa:
gdeje
P polimer polialkilenglikola;
m je 0 ili 1;
n je 0 ili ceo broj od 1 do 5;
X i Y nezavisno su O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR’, SC2NR’ ili NR’;
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R’ i Z svaki nezavisno, je vodonik, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i
B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R.
U jednoj realizaciji B je biološki aktivan peptid, kao što je interferon. Na primer, taj interferon može da bude interferon-beta-1 a.
U narednim realizacijama ovaj preparat takođe obuhvata biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens.. Na primer, antivirusni agens mož da se bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS-14803.
U raznim realizacijama virusna infekcija koja treba da se tretira je hronični hepatitis C.
U još jednoma spektu, ovaj pronalazak obuhvata postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji ordiniranjem tome pacijentu efikasne količine preparata koji ima strukturu u skladu sa Formulom XV:
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
m je 0 ili 1;
d je 0 ili ceo broj od 1 do 4;
n je 0 ili ceo broj od 1 do 5;
X i Y nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR' ili NR’;
Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili su zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R’ i Z svaki nezavisno, je vodonik, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i
B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R.
U raznim realizacijama B je biološki aktivan peptid, kao što je interferon. Na primer, u jednoj realizaciji B je interferon-beta-1-a.
U sledećoj realizaciji ovaj preparat sadrži još biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens. U drugim realizacijama antivirusni agens može da se bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISI-14803. Uzgred, virusna infekcija može biti hronični hepatatis C.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak obuhvata postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji ordiniranjem tome pacijentu efikasne količine preparata koji ima strukturu u skladu sa Formulom XVI:
gde su
P je polmier polialkilenglikola;
m je 0 ili 1;
d je 0 ili ceo broj 1 do 4; n je 0 ili ceo broj 1 do 5;
X i Y nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR’ ili NR’;
Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
R’ i Z svakinezavisno, je vodonik, zasićena ili nezasićena Ci-C2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena Ci-C2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i
B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R.
U raznim realizacijama B je biološki aktivan peptid, kao što je interferon. Na primer, B može biti interferon-beta-1a.
U sledećim realizacijama ovaj preparat sadrži još biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens. U drugim realizacijama antivirusni agens može da se bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISI-14803.
U drugoj realizaciji, virusna infekcija može biti hronični hepatatis C.
U narednom aspektu, ovaj pronalazak obuhvata postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji ordiniranjem tome pacijentu efikasne količine preparata koji ima strukturu u skladu sa Formulom XX:
gde su
m je 0 ili 1;
d je 0 ili ceo broj od 1 do 4;
a je ceo broj od 4 do 10.000;
n je 0 ili ceo broj od 1 do 5;
X i Y, nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR', SO2NR’ ili NR’;
Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili su zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik ili zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (ključujući pripojene biciklične ili premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* i R** su nezavisno, ostaci za povezivanje, koji se formiraju reakcijom R i R” sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i
B i B’ svaki je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R i R”, respektivno.
U nekim realizacijama B i B’ su ista vrsta biološki aktivnog jedinjenja. U drugim realizacijama B i B' su različita biološki aktivna jedinjenja. U još nekim realizacijama B i B’ su isti biološki aktivan molekul. U dodatnim realizacijama R* i R** su isti. U drugim realizacijama R* i R** su različiti.
U raznim realizacijama B je biološki aktivan peptid, kao što je interferon. Na primer, u jednoj realizaciji Bje interferon-beta-1a.
U drugim realizacijama ovaj preparat sadrži još biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivimsna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens. Na primer, antivirusni agens može da se bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS-14803.
U sledećoj realizaciji virusna infekcija je hronični hepatitis C.
U narednom aspektu, ovaj pronalazak obuhvata postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji ordiniranjem tom pacijentu efikasne količine preparata koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXI:
gde su
m je 0 ili 1;
d je 0 ili ceo broj od 1 do 4;
a je ceo broj od 4 do 10.000;
n svaki je 0 ili ceo broj od 1 do 5;
X i Y nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR’ ili NR’;
Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili su zasićena ili nezasićena Ci-C2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* i R** nezavisno, su ostaci za povezivanje koji se formiraju reakcijom R i R” sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i
B i B’ svaki je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R i R”, respektivno.
U nekim realizacijama B i B’ su ista vrsta biološki aktivnog jedinjenja. U drugim realizacijama B i B’ su različita biološki aktivna jedinjenja. U još nekim realizacijama B i B’ su isti biološki aktivan molekul. U dodatnim realizacijama R* i R** su isti. U drugim realizacijama R* i R** su različiti.
U raznim realizacijama B je biološki aktivan peptid, kao što je interferon Na primer, u jednoj realizaciji B je interferon-beta-1a.
U drugoj realizaciji ovaj preparat sadrži biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens. Na primer, antivirusni agens može da se bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS-14803.
U sledećoj realizaciji virusna infekcija je hronični hepatitis C.
U naredoj realizaciji ovaj pronalazak obuhvata postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji ordiniranjem tom pacijentu efikasne količine preparata koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXII:
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
X je O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR’ ili NR’;
R’ je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
Z i Z’ svaki nezavisno, je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio, pod uslovom da najmanje jedan od Z i Z’ nije vodonik;
R* je ostatak za povezivanje;
B je biološki aktivan molekul;
m je 0 ili 1;
n svaki je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1,2 ili 3.
U narednom aspektu ovaj pronalazak obuhvata postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, koja se sastojiu ordiniranju tome pacijentu efikasne količine preparata koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXIIa:
gde su
P je polimer polialkilenglikola;
m je 0 ili 1;
n je 0 ili ceo broj od 1 do 5;
X je O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR’ ili NR’;
R’ je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
Z je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro,
azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i
B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R.
U raznim realizacijama B je biološki aktivan peptid, kao što je interferon. Na primer, u jednoj realizaciji B je interferon-beta-1a.
U drugim realizacijama ovaj preparat sadrži biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens. Na primer, antivirusni agens može da se bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX^t97, VX-950 i ISIS-14803.
U sledećoj realizaciji virusna infekcija je hronični hepatitis C.
U još jednom aspektu, ovaj pronalazak obuhvata postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, ordiniranjem tom pacijentu efikasne količine preparata koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXIV:
gde su
m je 0 ili 1;
a je ceo broj od 4 do 10.000; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5;
X i Y nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR', SO2NR’ ili NR’;
R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične ili premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, supstituisani ili nesupstituisani alkaril; gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* i R** svaki nezavisno, su ostaci za povezivanje koji se formiraju reakcijom R i R” sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i B i B’ svaki je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R i R”, respektivno.
U nekim realizacijama B i B’ su ista vrsta biološki aktivnog jedinjenja. U drugim realizacijama B i B’ su različita biološki aktivna jedinjenja. U još nekim realizacijama B i B’ su isti biološki aktivan molekul. U dodatnim realizacijama R* i R** su isti. U drugim realizacijama R* i R** su različiti.
U raznim realizacijama B je biološki aktivan peptid, kao što je interferon. Na primer, u jednoj realizaciji B je interferon-beta-1a.
U drugim realizacijama ovaj preparat sadrži biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens. Na primer, antivirusni agens može da se bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS-14803.
U drugim realizacijama virusna infekcija je hronični hepatitis C.
U još jednom aspektu, ovaj pronalazak obuhvata postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, ordiniranjem tom pacijentu efikasne količine preparata koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXV:
gde su
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; a je ceo broj od 4 do 10.000; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5;
X je O, S, CO, CO2, COS; SO, SO2, CONR’, SO2NR’ ili NR’;
Z svaki nezavisno je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
R* i R** nezavisno, su ostaci za povezivanje koji se formiraju reakcijom R i R” sa biološki alktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i
B i B’ svaki je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle knjugovanja sa R i R”, respektivno.
U nekim realizacijama B i B’ su ista vrsta biološki aktivnog jedinjenja. U drugim realizacijama B i B’ su različita biološki aktivna jedinjenja. U još nekim realizacijama B i B’ su isti biološki aktivan molekul. U dodatnim realizacijama R* i R** su isti. U drugim realizacijama R* i R** su različiti.
U raznim realizacijama B je biološki aktivan peptid, kao što je interferon. Na primer, u jednoj realizaciji B je interferon-beta-1a.
U drugim realizacijama ovaj preparat sadrži biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens. Na primer, antivirusni agens može da se bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS-14803.
U sledećoj realizaciji virusna infekcija je hronični hepatitis C.
Ovaj pronalazak se takođe odnosi na postupak za retiranje pacijenta podložnog infekciji heptitisa C, ordiniranjem tom pacijentu kombinacije bilo koga od sastava iz ovog pronalaska i antivirusnog agensa. U raznim realizacijama, sastav i antivirusni agens se ordiniraju simultano, sekvencijalno ili alternativno.
U jednoj realizaciji antiviusni agens je ribavirin.
Ukoliko se drugačije ne definiše, svi tehnički i naučni termini koji se ovde koriste imaju isto značenje koje obično shvata onaj ko je uobičajeno verziran u stanje tehnike na koje se ovaj pronalazak odnosi. Mada postupci i materijali, slični ili ekvivalentni ovima koji su ovde opisani, mogu da se koriste u praktikovanju ili testiranju ovog pronalaska, pogodni postupci i materijali su opisani niže. Sve publikacije, patentne prljave, patenti i druge reference koji se pominju ovde, priključeni su u celini kroz citat. U slučaju konflikta, ova prijava, uključujući definicije, preuzima kontrolu. Pored toga, materijali, postupci i primeri služe ilustrovanju i nije im namera da budu ograničavajući.
Druge karakteristike i prednosti ovog pronalaska postade jasni iz detaljnog opisa koji sledi, i iz patentnih zahteva.
Ovaj pronalazak biće još shvatljiviji iz sledećeg opisa pozivajući se na slike gde su:
Slika 1 je redukujući SDS-PAGE gel, koji pokazuje čistoću nemodifikovanog UFN-p-1a i 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-p-1 a: Red A: markeri molame mase (odozdo na gore; 100 kDa, 68 kDa, 45 kDa, 27 kDa i 18 kDa, respektivno); Red B: 4 pg nemodifikovanog IFN-p-1a; Red C: 4 pg 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-p-1a.
Slika 2 prikazuje tragove hromatografije sa isključivanjem po veličini kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-p-1a: Slika 2A: standardi molame mase; Slika 2B: 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-p-1 a; Slika 2C: nemodifikovani IFN-p-1 a.
Slika 3 grafik hromatografije sa isključivanjem po veličini 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-p-1 a.
Slika 4 je redukujući SDS-PAGE gel koji pokazuje čistoću nemodifikovanog IFN-p-1a i 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-p-1 a: Red A: 2,5 pg 20 kDa mPEG-O-pfenilacetladehid-midifikovani IFN-p-1 a; Red B: 2,5 pg nemodifikovanog IFN-p-1 a; Red C: markeri molarne mase (odozgo na dole, 100 kDa, 68 kDa, 45 kDa, 27 kDa i 18 kDa, respektivno).
Slika 5 pokazuje zapis hromatografije sa isključivanjem po veličini za 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-p-1 a; Slika 5A: standardi molarne mase; Slika 2B: 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-p-1 a.
Slika 6 je redukujući SDS-PAGE gel koji pokazuje stabilnosti 20 kD mPEG-p-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-p-1 a: Red A: markeri molarne mase (odozgo na dole: 100 kDa, 68 kDa, 45 kDa, 27 kDa, 18 kDa i 15 kDa, respektivno); Redovi B, C, D i E: 2 pg 20 mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-p-1 a, uzet iz test u dane: 0, 2, 5 i 7, respektivno.
Slike 7A-B pokazuju antivirusnu aktivnost raznih PEG-ilovanih uzoraka humanog IFN-p-1 a, u funkciji koncentracije proteina: Slika 7A: nemodifikovani IFN-p-1 a (o), 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifiovani IFN-p-1 a; (□), 20 kDa mPEG-O-2-metilpripionaldehid-modifikovani IFN-β-1 a (trouglovi) i 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1 a (rombovi); Slika 7B: nemodifikovani IFN-β-1 a (o), 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-
modifikovani IFN-β-1 a (trouglovi) i 20 kDa mPEG-O-m-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-β-1 a (rombovi).
Slike 8 A-B su grafici koji prikazuju farmakokinetiku nemodifikovanog i raznih PEG-ilovanih uzoraka humanog IFN-β-1 a; Slika 8A: nemodifikovani IFN-β-1 a (gornji dijagram) i IFN-β-1 a modifikovan sa 20 kDa mPEG-O-2-
metilpropionaldehidom (donji dijagram); Slika 8B: IFN-β-1 a modifikovan sa 20 kDa mPEG-O-p-metilfenil-O-2-metilpropionaldehidom (gornji dijagram) i sa 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehidom (donji dijagram).
Slike 9 A-B su grafici koji prikazuju farmakokinetiku nemodifikovanog i raznih PEG-ilovanih uzoraka humanog IFN-β-1 a; Slika 9A: nemodifikovani IFN-β-1 a (gornji dijagram) i IFN-β-1 a modifikovan sa 20 kDa mPEG-O-p-
fenilpropionaldehidom (donji dijagram); Slika 9B: IFN-β-1 a modifikovan sa 20 kDa mPEG-O-m-fenilacetaldehida (gornji dijagram) i 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehidom (donji dijagram).
Slika 10 je histogram gde se porede pojedinačna ordinranja 2' kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanim IFN-β-1 a sa dnevnim ordiniranjem nemodifikovanog IFN-β-1 a, pri smanjujućem broju radijalno orijentisanih novih krvnih sudova kod miševa soja nu/nu, koji su nosili SK-MEL-1 ćelije humanog malignog melanoma: tretman sa tečnim nosačem kao kontrolom jedanput samo 1. dana (stubac A); tretman sa 1 MU (5 pg) nemodifikovanog IFN-β-1 a svakodnevno u dane 1-9 zaključno (stubac B); tretman sa 1 MU (10 pg) 20 kDa
mPEG-O-2-metilpropionaldhid-modifikovanim IFN-β-1 a, jedanput dnevno samo 1. dana (stubac C); i tretman sa tečnim nosačem kao kontrolom u dane 1-9, zaključno (stubac D).
DETALJAN OPIS PRONALASKA
Ovaj pronalazak je usmeren na jedinjenja i postupke koji su korisni pri tretiranju raznih bolesti i poremećaja. Kao što će biti detaljno objašnjeno u nastavku, te bolesti i poremećaji su, naročito, one koje su podložne tretmanu terapije sa interferonom, uključujući, ali bez ograničavanja, virusne infekcije, kao što su infekcije hepatitisa i autoimune bolesti, kao što je multipla skleroza.
Jedinjenja iz ovog pronalaska su nova jedinjenja aktiviranog polialkilenglikola, u skladu sa Formulom I:
gde P predstavlja polimer rastvoran u vodi, kao što je polimer polialkilenglikola. Lista takvih polimera, ali bez ograničavanja, sadrži druge homopolimere polialkilenoksida, kao što su polipropilenglikoli, polioksietilovani polioli, njihovi kopolimen i blok kopolimeri. Drugi primeri pogodnih u vodi rastvornih i ne-peptidnih polimemih skeleta, su poli(oksietilovani poliol), poli(olefinski alkohol), poli(vinilpirolidon), poli(hidroksipropilmetakrilamid), poli(a-hidroksi kiselina), poli(vinil alkohol), polifosfazen, polioksazolin, poli(N-akriloilmorfolin) i njihovi kopolimeri, terpolimeri i smeše. U jednoj realizaciji, polimerni skelet je poli(etilenglikol) ili monometoksi polietilenglikol (mPEG), koji ima prosečnu molekulsku težinu od oko 200 Da do oko 400,000 Da. Treba znati da su za praktikovanje ovog pronalaska pogodni takođe i drugi srodni polimeri, i da u tom smislu upotreba naziva PEG ili poli(etilenglikol) namenu uključuje, a ne isključuje. Naziv PEG uključuje poli(etilenglikol) u bilo kome od njegovih oblika, uključujući
alkoksi PEG, difunkcionalni PEG, više-grani PEG, viljuškasti PEG, račvasti PEG, viseći PEG ili PEG sa razgradivim vezama.
U klasi jedinjenja predstavljenih Formulom I, ima između nula i pet metilenskih grupa između Y i ugljenika sadržanog u Z (npr. n je nula ili je ceo broj od jedan do pet), a m je nula ili jedan, dok je Y prisutan ili odsutan.
X i Y su nezavisno, O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’. U nekim realizacijama X i Y predstavljaju kiseonik.
Q je zasićeni ili nezacićeni C3-Ce ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde je alkil zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkaril grupa. Supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, sulfamoil, sulfonat, silil, etarili alkiltio.
Z supstituent je vodonik, zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde je alkil zasićena ili nezasićena C-i-C^ alkil ili heteroalkaril grupa. Supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, sulfamoil, sulfonat, silil, etar ili alkiltio.
Kada X ili Y predstavlja NR’, R’ može biti vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde je alkil zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa. Supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, sulfamoil, sulfonat, silil, etar ili alkiltio.
R je reaktivna funkcionalna grupa, tj. aktivirajući ostatak koji je u stanju da reaguje formirajući spoj ili vezu između jedinjenja Formule I i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora. Dakle, R predstavlja "aktivirajuću grupu” aktiviranih polialkilenglikolnih jedinjenja (PGC), predstavljenih Formulom I. R može biti, na primer, karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopihdin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimiidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal. U naročitim realizacijama R je aldehid hidrat.
Specifični primeri R u literaturi su N-sukcinimidilkarbonat (videti, npr. U.S. Patent No 5,281,698 i 5,468,478), amin (videti npr. Buckmann et al., Makromol. Chem. 1981, 182, 1379; Zaplinsky et al. Eur. Polym. J, 1983, 19, 1177), hidrazid (videti npr. Andresz et al. Makromol. Chem. 1978, 179, 301), sukcinimidilpropionat i sukcinimidilbutanoat (videti npr. Olson et al., u ”Poly(ethylene glycol) Chemistry & Biological Applications”, urednici Hanris i Zaplinsky, ACS, VVashington, DC, 1977 str. 17O-181; videti takođe U.S. Patent No. 5,672,662), sukcinimidilsukcinat (videti npr., Abuchovvski et al. Cancer Biochem. Blophys. 1984, 7, 175; i Joppich et al. Macrolol. Chem. 1979, 180, 1381), sukcinimidilestar (videti npr. U.S. Patent
No. 4,670,417), benzotriazolkarbonat (videti npr. U.S. Patent No. 5,650,234), glicidiletar (videti npr. Pitha et al, Eur. J. Biochem. 1979, 94, 11; Elling et al., Biotech. Appl. Biochem. 1991, 13, 354), oksikarbonilimidazol (videti npr. Beauchamp et al., Anal. Biochem. 1983, 131, 25 i Tondelli et al., J. Controlled Release 1985, 1, 251), p-nitrofenilkarbonat (videti npr. Veronese et al. Appl. Biochem. Biotech. 1985, U, 141 i Sartore et al., Appl. Biochem. Biotech. 1991, 27, 451O), aldehid (videti npr. Harris et al., J. Polym. Sci. Chem.Ed. 1984, 22, 341, U.S. Patent No. 5,824,784 i U.S. Patent No. 5,252,714), maleimid (videti npr. Goodson et al., Bio/Technology 1990, 8, 343, Romani et al, Chemistry of Peptides and Proteins, 1984, 2, 29, i Kogan, Synthetic Comm. 1992, 22, 2417), orto-piridildisulfid (videti npr. VVoghiren et al., Bioconj. Chem. 1993, 4, 314), akrilol (videti npr. Sawhney et al., Macromolecules, 1993, 26, 581), vinilsulfon (videti npr. U.S. Patent No. 5,900,461). Pored toga, mogu i dva molekula iz ovog pronalaska da budu povezana sa aminokiselinom lizin, formirajući disupstituisani lizin, koji se zatim može još aktivirati sa N-hidroksisukcinimidom, formirajući N-sukcinimidil ostatak (videti npr. U.S. Patent No. 5,932,462).
Nazivi "funkcionalna grupa”, "aktivan ostatak”, "aktivna grupa”, "aktivirajuća grupa”, "aktivirajući ostatak”, "reaktivno mesto”, "hemijski reaktivna grupa” i "hemijski reaktivan ostatak”, koriste se u stanju tehnike i ovde da označe određene, definisane delove ili jedinke molekula. Ovi termini su donekle sinonimi u stanju tehnike u herniji, a ovde se koriste da označe delove molekula koji imaju karakterističnu hemijsku aktivnost i koji su tipično reaktivni sa drugim molekulima. Naziv "aktivan”, kada se koristi zajedno sa funkcionalnim grupama, namera je da obuhvati one funkcionalne grupe koje lako reaguju sa elektrofilnim ili nukleofilnim grupama na drugim molekulima, nasuprot onim grupama koje zahtevaju jake katalizatore ili krajnje nepraktične reakcione uslove da bi reagovale. Na primer, kao što je poznato u stanju tehnike, naziv "aktivan estar” obuhvata one estre koji lako reaguju sa nukleofilnim grupama, kao što su amini. Tipično, aktivan estar će reagovati sa aminom u vodenoj sredini unutar nekoliko minuta, dok neki estri, kao što su metil- ili etilestri, zahtevaju jak katalizator da bi reagovali sa nukleofilnom grupom.
U jedinjenjima iz ovog pronalaska definisanim gore, funkcionalna grupa R postaje mesto za povezivanje R*, nakon što je reagovala sa biološki aktivnim molekulom formirajući spoj ili vezu između jedinjenja aktiviranog polialkilenglikola (PGC) i biološki aktivnog jedinjenja. Dakle, B je biološki aktivno jedinjenje posle konjugovanja sa PGC, a R* je ostatak formiran reakcijom R sa aktiviranim PGC sa jednom ili više reaktivnih funkcionalnih grupa na biološki aktivnom jedinjenju B, tako da rezultat predstavlja jedinstvena kovalentna veza između PGC i biološki aktivnog jedinjenja. U poželjnoj realizaciji R* je ostatak koji se formira reaktijom R na aktiviranom PGC sa jednom reaktivnom funkcionalnom grupom na biološki aktivnom jedinjenju, tako da dolazi do kovalentnog spajanja između aktiviranog jedinjenja polialkilenglikola (PGC) i biološki aktivnog jedinjenja.
Poželjno je da biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor (B) ne utiče štetno njegovim prisustvom na PGC. Pored toga, B ili prirodno poseduje funkcionalnu grupu koja je u stanju da reaguje i formira vezu sa aktiviranim PGC, ili se modifikuje da bi sadržalo takvu reaktivnu grupu.
Kako se ovde koristi, naziv prekursor B je neaktivan ili manje aktivan oblik B, koji se menja u aktivan ili aktivniji oblik, respektivno, nakon dolaska u dodir sa fiziološkim uslovima, npr. ordiniranjem nekom subjektu. Te promene mogu biti konformacione ili strukturne promene, uključujući, ali bez ograničavanja, pramenu iz zaštićenog u nezaštićeni oblik B. Kako se ovde koriste, te promene ne obuhvataju oslobađanje konjugovanog PGC iz ovog pronalaska.
Kao što se podrazumeva u stanju tehnike, naziv "zaštićen” odnosi se na prisustvo zaštitne grupe ili ostatak koji sprečava reagovanje hemijski reaktivne funkcionalne grupe pod određenim uslovima reakcije. Zaštitna grupa će varirati, zavisno od vrste hemijski reaktivne grupe koja se štiti. Na primer, ukoliko je hemijski reaktivna grupa amin ili hidrazid, zaštitna grupa se može odabrati iz grupe terc-butoksikarbonil (i-Boc) i 9-fluorenilmetoksikarbonil (Fmoc). Ukoliko je hemijski reaktivna grupa tiol, zaštitna grupa može biti orto-piridilsulfid. Ukoliko je hemijski reaktivna grupa karboksilna kiselina, kao što je butanoinska ili propionska kiselina, ili hidroksi grupa, zaštitna grupa može biti benzil ili alkil grupa, kao što su metil ili etil. U ovom pronalasku smogu koristiti i druge zaštitne grupe, koje su poznate u stanju tehnike.
Nazivi "ostatak za povezivanje”, "spoj” ili "linker” ovde se koriste da označe ostatke ili veze formirane kao rezultat hemijske reakcije i to su tipično kovalentni spojevi. Dakle, spoj predstavljen vezom R*-B u gronjim formulama, potiče iz reakcije između aktiviranog ostatka R na PGC i biološki aktivnog jedinjenja, tj. B'. R* je ostatak za povezivanje formiran iz R posle reakcije sa B’, a B je biološki aktivno jedinjenje konjugovano sa PGC, reakcijom funkcionalne grupe na B’ sa R.
Kako se ovde koristi, naziv "biološki aktivno jedinjenje” se odnosi na ona jedinjenja koja pokazuju jedan ili više bioloških odgovora ili aktivnosti, kada se ordiniraju subjektu, i sadrže reaktivne grupe koje imaju reaktivne ostatke koji su u stanju da reaguju sa ili da se konjuguju sa najmanje jednim aktiviranim PGC iz ovog pronalaska. Naziv "biološki aktivan molekul”, "biološki aktivan ostatak” ili "biološki aktivan agens”, kada se ovde koriste, označavaju bilo koju supstancu koja može da utiče na fizička ili biohemijska svojstva bilo kog subjekta, uključujući, ali bez ograničavanja, viruse, bakterije, gljivice, biljke, životinje i humana bića. Naročito, biološki aktivni molekuli koji se ovde koriste, su bilo koja supstanca koja je namenjena dijagnozi, lečenju, ublažavanju, tretmanu, prevenciji bolesnih humanih bića ili drugih životinja, ili bilo kome drugačijem poboljšavanju fizičkog ili mentalnog stanja humanih ili animalnih bića.
Primeri biološki aktivnih molekula su, ali bez ograničavanja, peptidi, analozi peptida, proteini, enzimi, mali molekuli, boje, lipidi, nukleozidi, oligonukleotidi, analozi oligonukleotida, šećeri, oligosaharidi, ćelije, virusi, liozomi, mikročestice, površine i micele.
Klase biološki aktivnih agenasa koji su pogodni za upotrebu u ovom pronalasku su, ali bez ograničavanja, hemokini, limgokini, antitela, rastvorljivi receptori, anti-tumorni agensi, agensi protiv anksioznosti, hromoni, faktori rasta, antibiotici, fungicidi, fungistatički agensi, antivirusni agensi, steroidni agensi, antimikrobni agensi, germicidni agensi, antipiretički agensi, antidijabetički agensi, bronhodilatatori, agensi protiv dijareje, agensi za koronarnu dilataciju, glikozidi, spazmolitici, antihipertenzivni agensi, antidepresanti, agensi protiv anksioznosti, drugi psihoterapeutski agensi, kortikosteroidi, analgetici, kontraceptivi, nesteroidni anti-inflamatorni tekovi, agensi za snižavanje glukoze u krvi, agensi za snižavanje holesterola, antikonvulzanti, drugi antiepileptički agensi, imunomodulatori, antiholinergici, simpatolitici, simpatomimetici, vazodilatatomi agensi, antikoagulanti, antiaritmici, prostaglandini koji imaju razna farmakološka dejstva, diuretici, pomoćna sredstva za spavanje, antihistaminički agensi, antineoplastični agensi, onkolitički agensi, antiandrogeni, agensi protiv malarije, agensi protiv lepre i razne druge vrste lekova. Videti Goodman i Gilman "The Basis of Therapeutics” (Deveto izdanje, Pergamon Press Ine., USA, 1966) i The Merck lndex (Trinaestro izdanje, Merck & Co., Ine. USA, 2001), svaki je ovde priključen kroz citat.
Biološki aktivna jedinjenja su bilo koje jedinjenje koja ispoljava biološki odgovor u njegovom postojećem obliku, ili bilo koje jedinjenje koje ispoljava biološki odgovor kao rezultat hemijske konverzije njegove strukture iz njegovog postojećeg oblika. Na primer, biološki aktivna jedinjenja su bilo koje jedinjenje koje sadrži zaštitnu grupu, koja, kada se otcepi, daje jedinjenje koje ispoljava biološki odgovor. Ovo otcepljivanje može biti rezultat, na primer, reakcije in vivo tog jedinjenja sa endogenim enzimima, ili reakcijom pre ordiniranja tog jedinjenja, uključujući reakciju sa aktiviranim PGC iz ovog pronalaska. Kao sledeći primer, biološki aktivna jedinjenja će takođe obuhvatiti bilo koje jedinjenje koje podleže stereotransformaciji, in vivo ili ex vivo, uz formiranje jedinjenja koje pokazuje biološki odgovor ili dejstvo.
Biološki aktivna jedinjena tipično sadrže nekoliko reaktivnih mesta na kojima je moguće kovalentno spajanje aktiviranog PGC. Na primer, aminske grupe mogu da podlegnu acilovanjima, sulfhidril grupe mogu podleći reakcijama adicije i alkilovanja, karbonilne i karboksilne grupe mogu podleći acilovanjima, a aldehidne i hidroksilne grupe mogu podleći aminovanju i redukcionom aminovanju. Jedna ili više od ovih reakcija može da se koristi prilikom dobijanja biološki aktivnih jedinjenja modifikovanih poliakilenglikolom, iz ovog pronalaska. Pored toga, biološki aktivna jedinjenja se mogu modifikovati tako da formiraju reaktivne ostatke na tim jedinjenjima, koji olakšavaju te reakcije i dovode do konjugovanja sa aktiviranim PGC.
Oni koji su uobičajeno verzirani u stanje tehnike shvataju da su na raspolaganju brojni reakcioni mehanizmi za olakšavanje konjugovanja aktiviranog PGC sa biološki aktivnim jedinjenjem. Na primer, ako je aktivirajući ostatak R hidrazidna grupa, ona se može kovalentno kuplovati na sulfhidrilni, šećerni ili karbonilni ostatak na biološki aktivnim jedinjenjima (nakon što se ti ostaci podvrgnu oksidaciji, dajući aldehide). Reakcija hidrazidnih aktivirajućih ostataka (R) sa aldehidima na biološki aktivnim jedinjenja (B’) stvara hidrazonski spoj (R*-B). Kada R predstavlja maleimidnu grupu, ona može da reaguje sa sulfhidril grupom formirajući stabilan tioetarski spoj. Ukoliko sulfhidrili nisu prisutni na biološki aktivnom jedinjenju, oni se mogu stvoriti preko redukcije disulfida ili tiolovanjem sa 2-iminotiolanom ili sa SATA. Kada R predstavlja imidoestar, on će reagovati sa primarnim aminima na B’ formirajući imidoamidni spoj. Imidoestarsko konjugovanje se obično obavlja između pH 8,5-9,0. Kada se povezuje aktivirani PGC za biološki aktivne proteine, imidoestri pružaju prednost u odnosu na druge grupe R, zato što ne utiču na ukupno naelektrisanje proteina. Oni nose pozitivno naelekstrisanje pri fiziološkom pH, kao i primarni amini koje zamenjuju. Reakcije imidoestra se obavljaju između 0°C i sobne temperature (npr. na 4°C), ili na povišenim temperaturama, u anhidrovanim uslovima. Kada R predstavlja NHS-estar, njegov glavni cilj su primami amini. Pristupačne a-aminske grupe, na primer one koje su prisutne na N-krajevima peptida i proteina, reaguju sa NHS estrima, formirajući kovalentnu amidnu vezu.
U nekim realizacijama R*-B predstavlja hidrolitički stabilan spoj. Hidrolitički stabilan spoj znači da je taj spoj suštinski stabilan u vodi i da ne reaguje sa vodom u korisnoj oblasti pH, npr. taj spoj je stabilan pod fiziološkim uslovima u dužem periodu vremena, možda čak i neograničeno. U drugim realizacijama, R*-B je hidrolitički nestabilan ili razgradiv spoj. Hidrolitički nestabilan spoj znači da je taj spoj razgradiv u vodi ili u vodenim rastvorima, uključujući naprimer, krv. Enzimatski nestabilni ili razgradivi spojevi označavaju takođe da se taj spoj može razgraditi sa jednim ili više enzima.
U stanju tehnike se podrazumeva da polialkilen i srodni polimeri mogu posedovati razgradive spojeve u polimemom skeletu, ili u linkerskoj grupi između polimernog skeleta i jedne ili više krajnjih funkcionalnih grupa molekula PGC. Na primer, estarski spojevi, formirani reakcijom, npr. PGC karboksinih kiselina ili aktivianih PGC karboksilnih kiselina, sa alkoholnim grupama na biološki aktivnom jedinjenju, obično hidrolizuju pod fiziološkim uslovima oslobađajući taj agens Druge hidrolitički degradabilne spojeve obuhvataju karbonatni spojevi, iminski spojevi, koji potiču iz reakcije amina i aldehida (videti npr. Ouchi et al., Polymer Preprints, 1997, 38(1), 582-3); fosfatni estarski spojevi se formiraju reagovanjem alkohola sa fosfatnom grupom; acetalni spojevi, koji su proizvodi reakcije aldehida i alkohola; ortoestarski spojevi koji su proizvod reakcije formijata i alkohola; peptidni spojevi formirani pomoću aminske grupe, npr. na kraju PGC, i karboksilne grupe peptida; i oligonukleotidni spojevi formirani pomoću fosforamiditne grupe, npr. sa kraja polimera, i 5’-hidroksi grupe na oligonukleotidu.
Polialkilenglikol, P, može biti polietilenglikol koji ima strukturnu Formulu II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde je a ceo broj od 4 do 10.000, a E je vodonik ili ravna ili račvasta Ci-C2o alkilgrupa, obeležje koje se može detektovati, ili ostatak podesan za formiranje veze između jedinjenja Formule I i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
Dakle, kada E predstavlja ostatak koji je pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule I i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, E može biti karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal. Podrazumeva se da E treba da bude kompatibilno sa R, tako da se reakcija između E i R ne odigrava.
Pod "obeležje koje se može detektovati” podrazumeva se obeležje za koje je moguća detekcija. Primeri bez ograničavanja su izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke. Ostala obeležja koja se mogu detektovati su biotin, cistein, histidin, hemaglutinin, myc ili flg privesci.
U nekim realizacijama E ima strukturu u skladu sa Formulom III ili Formulom IV:
Formula IV
Svaki od Q, X, Y, Z, m i n je definisan gore, a svaki Wje, nezavisno, vodonik ili C-1-C7 alkil.
U ovoj klasi jedinjenja ostatak R” je pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; a R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
R” i R’” mogu da budu karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi,zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal. Podrazumeva se da R” i R’” treba da su kompatibilni sa R, tako da se ne odigrava reakcija sa R.
Kako se ovde koristi, R” i R’”, posle konjugovanja sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom, formiraju ostatke za povezivanje, kako su definisani gore. Dakle, R** je ostatak za povezivanje formiran reakcijom R” ili R’” grupe na aktiviranom PGC sa reaktivnom funkcionalnom grupom na biološki aktivnom jedinjenju, tako da dođe do kovalentnog spajanja između PGC i biološki aktivnog jedinjenja. R i R” ili R’” mogu biti isti ostatak ili različiti ostaci, a biološki aktivno jedinjenje vezano za svaki može biti isto ili različito.
Kako se ovde koristi, naziv ”alkil” se odnosi na radikal zasićenih alifatičnih grupa, uključujući alkil grupe ravnog lanca, račvaste alkil grupe, cikloalkil (aliciklične) grupe, cikloalkil grupe supstituisane sa alkil i alkil grupe supstituisane sa cikloalkil. U poželjnim realizacijama alkil ravnog lanca ili račvastog lanca ima 30 ili manje atoma ugljenika u njegovom skeletu (npr. C1-C30 za ravan lanac, C3-C30 za račvasti lanac), a poželjnije 20 ili manje. Slično, poželjni cikloalkili imaju od 310 atoma ugljenika u strukturi njihovog prstena, poželjnije 5, 6 ili 7 atoma ugljenika u strukturi prstena.
Pored toga, naziv ”alkil” (ili "niži alkil”) namera je da obuhavti i "nesupstituisane alkile” i "supstituisane alkile”, a ovi poslednji se odnose na alkil ostatke koji imaju supstituente koji zamenjuju vodonik na jednom ili više ugljenika ugljovodoničnog skeleta. Ti supstituenti su, na primer, halogen, hidroksil, karbonil (kao što je karboksi), alkoksikarbonil (formil ili acil), tiokarbonil (kao što je tioestar, tioacetat ili tioformijat), alkoksi, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, alkiltio, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil ili aromatični ili heteroaromatični ostatak. Oni koji su verzirani u stanje tehnike znaju da ostaci koji su supstituisani na ugljovodoničnom lancu i sami mogu biti supstiuisani, ukoliko je to potrebno. Na primer, supstituenti na supstituisanom alkilu mogu obuhvatiti supstituisane i nesupstituisane oblike amino, azido, imino, amido, fosforil (uključujući fosfonat i fosfinat), sulfonil (uključujući sulfat, sulfonamido, sulfamoil i sulfonat), i silil grupe, kao i etre, alkiltio, karbonile (uključujući ketone, aldehide, karboksilate i estre), -CF3, -CN i slično. Cikloalkili mogu još biti supstituisani sa alkil-ima, alkenil-ima, alkoksi-ma, alkiltio-ima, aminoalkil-ima, alkil-ima supstituisanim sa karbonil, -CF3, -CN i slično.
Naziv "aralkil”, kao se ovde koristi, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa aril grupom (npr. aromatičnom ili heteroaromatičnom grupom). Primeri aralkil grupa su, ali bez ograničavanja, benzil i uobičajenije (CH2)n-Ph, gde je Ph fenil ili supstituisani fenil, a n je 1, 2 ili 3.
Nazivi "alkenil” i "alkinil” se odnose na nezasićene alifatične grupe, analogne po dužini i mogućim supstitucijama sa alkilima, opisanim gore, ali koji sadrže najmanje jednu dvogubu ili trogubu vezu, respektivno.
Ukoliko je broj atoma ugljenika specificiran, ”niži alkil” se ovde koristi da označi alkil grupu, definisanu gore, koja ima od jedan do deset ugljenika, poželjnije od jedan do šest atoma ugljenika u strukturi njenog skeleta. Slično, "niži alkenil” i "niži alkinil” imaju slične dužine lanaca. Poželjne alkil grupe su niži alkili. U poželjnim realizacijama, supstituent koji se ovde označava kao alkil, je niži alkil.
Naziv ”aril”, kako se ovde koristi, obuhvata 5-, 6- i 7-člane aromatične grupe sa jednim prstenom, koje mogu da sadrže od nula do četiri heteroatoma, na primer, benzen, pirol, furan, tiofen, imidazol, oksazol, tiazol, triazol, pirazol, pirdin, pirazin, piridazin i pirimidin, i slično. One aril grupe koje imaju heteroatome u prstenastoj strukturi, mogu se takođe nazivati "aril heterocikli" ili "heteroaromatici”. Aromatični prsten može biti supstituisan u jednom ili više položaja prstena, sa supstituentima opisanim gore, kao što su na primer, halogen, azid, alkil, aralkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, hidroksil, alkoksil, amino, nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfonat, fosfinat, karbonil, karboksil, silil, etar, alkiltio, sulfonil, sulfonamido, keton, aldehid, estar, heterociklil, aromatični ili heteroaromatični ostaci, -CF3, -N, ili slično. Naziv "aril” obuhvata takođe policiklične prstenaste sisteme, koji imaju dva ili više prstenova, u kojima su dva ili više ugljenika zajednički za dva spojena prstena (ovi prsteni se zovu "pripojeni prstenovi”), gde je najmanje jedan od tih prstenova aromatičan, npr. drugi ciklični prstenovi mogu biti cikloalkili, cikloalkeni, cikloalkini, arili i/ili heterociklili.
Nazivi orto, meta i para koriste se za 1,2-, 1,3- i 1,4-disupstituisane benzene, respektivno. Na primer, 1,2-dimetilbenzen i orto-dimetilbenzen su sinonimi.
Nazivi "heterociklil” ili ”heterociklična grupa” se odnose na 3- do 1O-članu prstenastu strukturu, poželjnije 3- do 7-člane prstenove, u čijoj prstenastoj strukturi su jedan do četiri heteroatoma. Heterocikli mogu takođe biti policiklični. Heterociklične grupe su, na primer, tiofen, tiantren, furan, piran, izobenzofuran, hromen, ksanten, fenoksantiin, pirol, imidazol, pirazol, izotiazol, izoksazol, piridin, pirazin, pirimidin, piridazin, indolizin, izoindol, indol, indazol, purin, hinolizin, izohinolin, hinolin, ftalazin, nafthiridin, hinoksalin, hinazolin, cinolin, pteridin, karbazol, karbolin, fenanthridin, akridin, pirimidin, fenantrolin, fenazin, fenarsazin, fenotiazin, furazan, fenoksazin, pirolidin, oksolan, tiolan, oksazol, piperidin, piperazin, morfolin, laktoni, laktami, kao što su azetidinoni i pirolidinoni, suitami, sultoni i slično. Heterociklični prsten može biti supstituisan u jednom ili više položaja, sa supstituentima koji su opisani gore, kao što su na primer, halogen, azid, alkil, aralkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, hidroksil, alkoksil, amino, nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfonat, fosfinat, karbonil, karboksil, silil, etar, alkiltio, sulfonil, sulfonamido, keton, aldehid, estar, heterociklil, aromatični ili heteroaromatični ostaci, -CF3, -CN, ili slično.
Naziv "karbocikl”, kako se ovde koristi, odnosi se na aromatični ili ne-aromatični prsten u kome je svaki atom u prstenu ugljenik.
Heterocikli i karbocikli obuhvataju i pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture.
Kako se ovde koristi, naziv ”nitro” označava -N02, naziv "halogen” označava -F, -Cl, -Br ili -I, naziv "sulfhidril” označava -SH, naziv "hidroksil” označava -OH, i naziv "sulfonil” označava -S02.
Nazivi ”amin” i "amino” su poznati u stanju tehnike i odnose se i na nesupstituisane i na supstituisane amine, npr. ostatak koji se može predstaviti opštom formulom:
gde R9, R-io i R’10, svaki nezavisno, predstavljaju vodonik, alkil, alkenil, -(CH2)m-R8 ili R9 i R10, uzeti zajedno sa atomom N sa kojim su spojeni, čine heterocikl, koji ima 4 do 8 atoma u prstenastoj strukturi; R8 predstavlja aril, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl ili policikl, i m je nula ili ceo broj od 1 do 8.
Naziv "alkilamin" ovde se koristi da označi amino grupu, kako je definisana gore, koja ima pripojen supstituisan ili nesupstituisan alkil, tj. najmanje jedan od R9 i R10 je alkil grupa.
Naziv ”acilamino” je poznat u stanju tehnike i odnosi se na ostatak koji se može predstaviti opštom formulom:
gde je R9 definisano gore, a R’n predstavlja vodonik, alkil, alkenil ili -(Chhjm-Rs, gde je R8 definisano gore.
Naziv ”amido” je poznat u stanju tehnike kao karbonili supstituisan sa amino i obuhvata ostatak koji se može predstaviti opštom formulom:
gde su R9, R10 definisani gore. Poželjne realizacije amida ne obuhvataju imide, koji mogu biti nestabilni.
Naziv "amidin” je poznat u stanju tehnike kao grupa koja se može predstaviti opštom formulom:
gde su R9, R10 defmisani gore.
Naziv "gvanidin” je poznat u stanju tehnike kao grupa koja se može predstaviti opštom formulom:
gde su R9, Rio definisani gore.
Naziv "alkittio” se odnosi na alkil grupu, kako je definisana gore, koja ima prikačen za nju sumporni radikal. U poželjnim realizacijama "alkiltio” ostatak se predstavlja jednim od: -S-alkil, -S-alkenil, -S-alkinil i -S-(CH2)m-R8, gde je R8 definisano gore. Reprezentativne alkiltio grupe su metiltio, etiltio i slično.
Naziv "karbonil” je poznat u stanju tehnike i obuhvata ostatke koji se mogu predstaviti opštom formulom:
gde je X veza, ili predstavlja kiseonik ili sumpor, a Rn predstavlja vodonik, alkil, alkenil, -(CH2)m-R8, ili farmaceutski prihvatljivu so, R’n predstavlja vodonik, alkil, alkenil ili -(CH2)m-R8, gde je R8 definisano gore. Ukoliko X predstavlja kiseonik, a R11 ili R’ri nije vodonik, ova formula predstavlja ”estar”. Ukoliko X predstavlja kiseonik, a Rn je kao što je definisano gore, ovaj ostatak se ovde odnosi na karPoksilnu grupu, a posebno, ako je Rn vodonik, ova formula predstavlja "karboksilnu kiselinu”. Ukoliko X predstavlja kiseonik, a R’n je vodonik, ova formula predstavlja "formijat”. Obično, ukoliko se atom kiseonika u gornjoj formuli zameni sumporom, tada formula predstavlja ”tiolkarbonil” grupu. Ukoliko X predstavlja sumpor, a Rn i R’n nisu vodonik, formula predstavlja ”tioestar”. Ukoliko X predstavlja sumpor, a Rn je vodonik, formula predstavlja ”tiokarboksilnu kiselinu”. Ukoliko X predstavlja sumpor, a R’n je vodonik, formula predstavlja "tioformijat”. S druge strane, ukoliko X predstavlja vezu, a Rn nije vodonik, gornja formula predstavlja "ketonsku” grupu. Ukoliko X predstavlja vezu, a Rn je vodonik, gornja formula predstavlja "aldehidnu” grupu.
Nazivi "alkoksil” ili "alkoksi”, kako se ovde koriste, odnose se na alkil grupu, kako je ovde definisana, koja ima pripojen kiseonični radikal. Reprezentativne alkoksil grupe su metoksi, etoksi, propiloksi, terc-butoksi i slično. ”Etar” predstavlja dva ugljovodonika kovalentno povezana preko kiseonika. U skladu sa tiim, supstituent alkila, koji čini taj alkil etrom je, ili podseća na alkohol, kao što to predstavlja jedan između sledećih: -O-alkil, -O-alkenil, -O-alkinil, -O-(CH2)m-R8, gde su m i R8 opisani gore.
Naziv "sulfonat” je poznat u stanju tehnike i obuhvata ostatak koji se može predstaviti opštom formulom:
gde je R41 elektronski par, vodonik, alkil, cikloalkil ili aril.
Naziv "sulfat” je poznat u stanju tehnike, a obuhvata ostatak koji se može predstaviti opštom formulom:
gde je R41 definisano gore.
Naziv "sulfonamido” je poznat u stanju tehnike, a obuhvata ostatak koji se može predstaviti opštom formulom:
gde su R9 i R’n, definisani gore.
Naziv ”sulfamoil” je poznat u stanju tehnike, a obuhvata ostatak koji se može predstaviti opštom formulom:
gde su Rg i R-io definisani gore.
Naziv "sulfonil” je poznat u stanju tehnike, a obuhvata ostatak koji se može predstaviti opštom formulom:
gde se R44 bira iz grupe koju čine vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, heterociklil, aril ili heteroaril.
Naziv "sulfoksido”, kakose ovde koristi, osdnosi se na ostatak koji se može predstaviti opštom formulom:
gde se R44 bira iz grupe koju čine vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, heterociklil, aralkil ili aril.
Podrazumeva se da "supstitucija” ili "supstituisan sa” obuhvata implicitan uslov da je ta supstitucija u skladu sa dozvoljenom valencom supstituisanog atoma i supstituenta, i da supstitucija dovodi do stabilnog jedinjenja, npr. koje spontano ne podleže transformaciji, kao što su premeštanje, ciklizacija, eliminisanje itd.
Kako se ovde koristi, naziv "supstituisan” podrazumeva se da obuhvata sve dozvoljene supstituente organskih jedinjenja. U širokom aspektu, dozvoljeni supstituenti su aciklični i ciklični, račvasti i ne-račvasti, karbociklični i heterociklični, aromatični i ne-aromatični supstituenti organskih jedinjenja.
Ilustrativni supstituenti su na primer, oni koji su opisani gore. Dozvoljeni supstituenti mogu biti jedan ili više istih ili različitih za odgovarajuća organska jedinjenja. Za potrebe ovog pronalaska, heteroatomi, kao što je azot, mogu da imaju vodonične supstituente i/ili bilo koje dozvoljene supstituente organskih jedinjenja koji su ovde opisani, a zadovoljavaju valence tih heteroatoma. Ovaj pronalazak nema nameru da na bilo koji način bude ograničen dozvoljenim supstituentima organskih jedinjenja.
Šira lista skraćenica koje koriste uobičajeno verzirani organski hemičari nalazi se u prvoj svesci svakog godišta časopisa Journal ofOrganic Chemistr/, ova lista je tipično predstavljena u tabeli pod naslovom "Standard List of Abbreviations”. Skraćenice, sadržane u toj listi i sve skraćenice koje koriste uobičajeno verzirani organski hemičari, priključene su ovde kroz citat.
U nekim realizacijama jedinjenja iz ovog pronalaska imaju strukturu u skladu sa Formulom V:
gde su X, Y, m, n, Z i R’ definisani gore, a R je aktivirajući ostatak, definisan gore, koji je pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule V i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora. U naročitim realizacijama, R je aldehid hidrat.
P je deifnisano gore, a može se predstaviti Formulom II:
Formula II E - (O-CH2CH2)a -
gde je E opisano gore, a u nekim realizacijama može biti predstavljeno Formulom III ili IV.
Ti i T2 su, nezavisno, odsutni ili zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeniC3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana ril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa. Supstituenti mogu da budu halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkosil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio.
Ukoliko je d jednko nuli, nema dodatnih supstituenata (L) na aromatičnom prstenu. Ukoliko d predstavlja ceo broj od 1 do 4, ovi supstituenti (L) mogu biti zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeniC3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana ril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa. Supstituenti mogu da budu halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkosil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio.
Ako je R aldehid, jedinjenja spadaju među ona koja predstavlja Formula VI:
gde su sve varijable definisane gore.
Na primer, ukoliko X i Y predstavljaju kiseonik, a R je aldehid, jedinjenja iz ovog pronalaska predstavlja jedinjenje J.
gde supstituenti T-i i T2 mogu biti u orto, meta ili para položaju.
Ukoliko supstituenti Ti i T2 predstavljaju alkil grupe ravnog lanca, a d je nula, ova jedinjenja predstavlja Formula IX:
gde je svaki u, nezavisno, nula ili ceo broj od jedan do pet, a sve druge varijable su definisane gore. U naročitoj realizacji, Z je vodonik ili metil.
Posebna klasa jedinjenja koja pripadaju Formuli IX, može se predstaviti Formulama VII i VIII:
Formula VIII
Neki reprezentativna jedinjenja aktiviranih polialkilenglikola su kao što sledi, gde je polimer polialkilenglikola PEG ili mPEG:
U nekim realizacijama, jedinjenja ovog pronalaska predstavlja Formula X:
gde su, kao i gore, n je nula ili ceo broj od jedan do pet, a X je 0, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, SONR’ ili NR’.
Ukoliko X predstavlja NR’, tada R’ može biti vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeniC3-Cs ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a
supstituenti se biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkosil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio.
Z može biti zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeniC3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana ril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa. Ukoliko su prisutni, supstituenti mogu da budu halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkosil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio.
Kao što je gore definisano, R je aktivirajući ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule X i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora. U nekim realizacijama R je aldehid hidrat.
P je polimer polialkilenglikola, definisan gore, a može se predstaviti Formulom II:
Formula II E - (O-CH2CH2)a-
gde su E i a definisani gore, a u nekim realizacijama mogu se predstaviti Formulama III ili IV. U nekim realizacijama E je metil, pa stoga P predstavlja mPEG.
Kada R predstavlja aldehid, a X kiseonik, ova jedinjenja spadaju unutar strukture u skladu sa Formulom XI:
gde su P, Z i n definisani za Formulu X.
Ukoliko P predstavlja mPEG, jedinjenja opisuje Formula XII:
a kada je n jednako jedan, i Z je metil, jedinjenja predstavlja Formula XIII:
Formula XIII
gde a predstavlja ceo broj od 4 do 10.000.
Primeri puteva sinteze za dobijanje jedinjenja u skladu sa ovim pronalaskom izneti su u Primerima u nastavku.
Ovaj pronalazak obuhvata takođe sastave aktiviranih jedinjenja polialkilenglikola (PGC) iz ovog pronalaska sa jednim ili više biološki aktivnih jedinjenja. Kao što je gore opisano, biološki aktivna jedinjenja su ona jedinjenja koja pokazuju biološki odgovor ili dejstvo kada se ordiniraju nekom subjektu. Nekonjugovana biološki aktivna jedinjenja mogu se ordinirati subjektu pored jedinjenja iz ovog pronalaska. Pored toga, biološki aktivna jedinjenja mogu da sadrže reaktivne
grupe koje su u stanju da reaguju sa i da se konjuguju sa najmanje jednim aktiviranim PGC iz ovog pronalaska.
Ovaj pronalazak obuhvata takođe konjugate novih PGC sa biološki aktivnim jedinjenjima. U jednoj realizaciji, ovi konjugati se formiraju iz jedinjenja Formule I i biološki aktivnog jedinjenja (B), kao što opisuje Formula XIV:
Kao i gore,
m je nula ili jedan, tako da je Y odsutno ili prisutno; n je nula ili ceo broj od jedan do pet;
X i Y, nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’;
Q je zasićeni ili nezasićeniC3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana ril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkaril grupa. Ukoliko su prisutni, supstituenti mogu da budu halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkosil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R' i Z, svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeniC3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana ril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkaril grupa, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkosil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa odgovarajućom funkcionalnom grupom na biološki aktivnom jedinjenju B, kao što je opisano gore. Na primer, R* se formira reakcijom ostatka kao što je karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksalna funkcija, sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom;
P je polimer polialkilenglikola definisan gore, a može se prikazati Formulom II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde je E vodonik, CrC20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca (npr. metil), obeležje koje se može detektovati ili ostatak koji je u stanju da formira vezu između jedinjenja Formule XIV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora. Kao i gore, a je ceo broj od 4 do 10.000.
Ukoliko E predstavlja obeležje koje se može detektovati, to obeležje može biti radioaktivan izotop, fluorescentni ostatak, fosforescentni ostatak, hemiluminiscentni ostatak ili kvantna tačka.
Ukoliko je E ostatak koji je u stanju sa formira vezu između jedinjenja Forule XIV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, E može formirati vezu sa drugim molekulom biološki aktivnog jedinjenja (B), tako da je aktivirano jedinjenje polialkilenglikola vezano za bilo koji kraj molekula iste vrste biološki aktivnog jedinjenja, dajući dimerni molekul.
U nekim realizacijama E formira vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem različitim od B, stvarajući heterodimer biološki aktivnih jedinjenja ili njihovih pekursora.
U drugim realizacijama E formira dodatnu vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem B, tako da su i E i R vezani preko različitih funkcionalnih grupa istog molekula biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
Ukoliko je E u stanju da formira vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom, E može biti isto ili različito od R, i da se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksalni ostatak.
Ukoliko je E u stanju da formira vezu sa biološki aktivnim molekulom ili njegovim prekursorom, E može da ima strukturu u skladu sa Formulom III ili Formulom IV:
gde su
Q, X, Y, Z, m i n, nezavisno, kao što su definisani gore;
W, svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; i
R’” je ostatak koji je pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili nejgovog prekursora.
R” i R’” se nezavisno, biraju iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil,
akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksalni ostatak.
Ukoliko je Q u Formuli XIV supstituisani ili nesupstituisani alkaril, konjugat se formira između aktiviranog polialkilenglikola Formule V i biološki aktivnog molekula (B), a opisan je u skladu sa Formulom XV:
gde su
Ti i T2, nezavisno, odsutni ili su zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeniCa-Cs ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa. Ukoliko su prisutni, supstituenti mogu da budu halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkosil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio. Unekim realizacijama Ti i T2, ukoliko su prisutni, su zasićena ili nezasićena Ci-C2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca.
d je nula (npr. nema L supstituenata na aromatičnom prstenu) ili je ceo broj od 1 do 4;
L ukoliko je prisutan, svaki predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeniCa-Ca ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana ril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa. Supstituenti mogu da budu halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkosil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio.
Sve druge varijable su kao što je opisano gore, uključujući P, koji je polimer polialkilenglikola, a može se predstaviti Formulom II:
Formula II E - (O-CH2CH2)a -
gde je E vodonik, CrC20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca (npr. metil), obeležje koje se može detektovati, ili ostatak koji je pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule XV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora. Kao i gore, a je ceo broj od 4 do 10.000.
Ukoliko E predstavlja obeležje koje se može detektovati, ovo obeležje može biti na primer, radioaktivan izotop, fluorescentni ostatak, fosforescentni ostatak, hemiluminiscentni ostatak ili kvatna tačka.
Ako je E ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule XV i biološki aktivnog jedinjenja B, E može da formira vezu i sa drugim molekulom biološki aktivnog jedinjenja (B), tako da je aktivirano jedinjenje polialkilenglikola vezano za bilo koji od krajeva molekula iste vrste biološki aktivnog jedinjenja, stvarajući dimerni molekul.
U nekim realizacijama E formira vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem različitim od B, stvarajući heterodimer biološki aktivnih jedinjenja ili njihovih prekursora.
U drugim realizacijama E formira dodatnu vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem B, tako da su i E i R vezani preko različitih funkcionalnih grupa istog molekula za biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
Ako je E u stanju da formira vezu sa biološki aktivnim molekulom ili njegovim prekursorom, E može biti isto ili različito od R, a bira se iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksalni ostatak.
Ako E može da formira vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom, u nekim realizacijama E može biti Formula III ili Formula IV:
gde su
Q, X, Y, Z, m i n, nezavisno, kao što su definisani gore;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; i
R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
R” i R’” se nezavisno, biraju iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil,
akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksalni ostatak.
Ako su vezani sa oba kraja biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, ovi bifunkcionalni molekuli se mogu predstaviti u skladu sa Formulom XX ili Formulom XXI:
gde je svaki od
X i Y, T-i i T2, R’ i Z, L, Q, m, n, a i n opisan gore;
W svaki nezavisno, je vodonik, ili C1-C7 alkil;
R* i R** su, nezavisno, ostaci za povezivanje, koji se formiraju reakcijom R i R” sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom; i B i B’ svaki je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, posle konjugovanja sa R i R”, respektivno.
U nekim reaizacijama B i B’ su ista vrsta biološki aktivnog jedinjenja. U drugim realizacijama B i B’ su različita biološki aktivna jedinjenja. U još nekim realizacijama, B i B’ su isti biološki aktivan molekul. U dodatnim realizacijama R* i R** su isti. U drugim realizacijama R* i R** su različiti. Na primer, u nekim realizacijama E može da formira vezu sa drugim molekulom biološki aktivnog jedinjenja (B=B’), tako da je aktivirani PGC vezan sa bilo kog kraja sa molekulom iste vrste biološki aktivnog jedinjenja, dajući dimerni molekul. U nekim realizacijama, E formira vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem koje se razlikuje od B (B nije B’), stvarajući heterodimer biološki aktivnih jedinjenja ili njihovih prekursora. U drugim realizacijama E formira dodatnu vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem B, tako da su i E (preko R” ili R’”) i R vezani preko različtih funkcionalnih grupa za isti molekul biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
U nekim realizacijama R* ili R** je metilenska grupa, a B i B’ je biološki aktivan molekul koji sadrži amino grupu, pri čemu metilenska grupa formira vezu sa amino grupom na B. Na prirner, amin može da bude amino kraj peptida, amin aminokiseline u bočnom lancu peptida, ili amin supstituenta za glikozilovanje glikozilovanog peptida. U nekim realizacijama, peptid je interferon, kao što je interferon-beta, npr. interferon-beta-1a. U nekim realizacijama ova vrsta veze se formira reakcijom redukcionog alkilovanja.
Ukoliko su Ti i T2 supstituenti Formule XV alkil grupe ravnog lanca, X i Y predstavljaju kiseonik, a d je nula, pa konjugate predstavlja Formula XIX:
gde je u, svaki nezavisno, nula ili ceo broj od jedan do pet, a sve druge varijable su definsiane gore. U naročitim realizacijama, Z je vodonik ili metil.
Posebne klase jedinjenja koja pripadaju Formuli XV, mogu se prikazati Formulama XVII i XVIII, koja se formiraju reakcijom Formula VII i VIII, respektivno, sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom:
gde SU:
n je nula ili ceo broj od jedan do pet;
P je polimer polialkilenglikola, kao što je opisan gore;
Z je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
R* je ostatak za povezivanje, kao što je opisan gore;
B je biološki aktivan molekul.
Ova jedinjenja mogu biti bifunkcionalna ili monofunkcionalna, zavisno od identiteta E, kao što je opisano gore.
U nekim realizacijama R* je metilenska grupa, a B je biološki aktivan molekul koji sadrži amino grupu, pri čemu metilenska grupa formira vezu sa amino grupom na B. Na primer, amin može biti amino kraj peptida, amin aminokiseline u bočnom lancu peptida, ili amin supstituenta za glikozilovanje glikozilovanog peptida. U nekim realizacijama peptid je interferon, kao što je intereron-beta, npr. interferon-beta-1a. U nekim realizacijama, ova vrsta veze se formira reakcijom redukcionog alkilovanja.
Konjugati iz ovog pronalaska se mogu takođe formirati reakcijom jedinjenja u skladu sa Formulom X sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom, formirajući konjugat u skladu sa Formulom XXII:
gde su
B je biološki aktivan molekul, kao što je opisano gore;
n je nula ili ceo broj od jedan do pet;
X je O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’,
R’ je vodonik, zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog
ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeniC3-Cs ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana ril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili
nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena CrC20 alkil ili heteroalkaril grupa. Ukoliko su prisutni, supstituenti mogu da budu halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkosil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
Z je zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeniC3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil,
supstituisana ili nesupstituisana ril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili
nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena Ci-C20 alkil ili heteroalkaril grupa. Supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkosil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil,
aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa odgovarajućom funkcionalnom grupom na biološki aktivnom jedinjenju B, kao što je opisano gore. Na primer, R* se formira reakcijom ostatka kao što je karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid,
sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksalna funkcija, sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom.
U nekim realizacijama Z je metil, a n je jedan.
P je polimer polialkilenglikola definisan gore, a može se prikazati Formulom II:
Formula II E-(O-CH2CH2)a-
gde je E vodonik, Ci-C2o alkil grupa ravnog ili račvastog lanca (npr. metil), obeležje koje se može detektovati ili ostatak koji je u stanju da formira vezu između jedinjenja Formule XXII i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora. Kao i gore, a je ceo broj od 4 do 10.000.
Ukoliko E predstavlja obeležje koje se može detektovati, to obeležje može biti radioaktivan izotop, fluorescentni ostatak, fosforescentni ostatak, hemiluminiscentni ostatak ili kvantna tačka.
Ukoliko je E ostatak koji je u stanju sa formira vezu sa biološki aktivnim molekulom, kao rezultat se dobije bifunkcionalni molekul. E može formirati vezu sa drugim molekulom biološki aktivnog jedinjenja (B), tako da je aktivirano jedinjenje polialkilenglikola vezano sa bilo kog kraja za molekul iste vrste biološki aktivnog jedinjenja, dajući dimemi molekul.
U nekim realizacijama E formira vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem različitim od B, stvarajući heterodimer biološki aktivnih jedinjenja ili njihovih pekursora.
U drugim realizacijama E formira dodatnu vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem B, tako da su i E i R vezani preko različitih funkcionalnih grupa istog molekula biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
Ako je E u stanju da formira vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom, E može biti isto ili različito od R, i da se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksalni ostatak.
U nekim realizacijama E može imati strukturu u skladu sa Formulom III ili Formulom IV:
gde su
Q, X, Y, Z, m i n, nezavisno, definisani gore;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil;
R” je ostatak koji se poogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule lili biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; i
R’” je ostatak koji je pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili nejgovog prekursora.
R” i R’” se nezavisno, biraju iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-
N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksalni ostatak, a mogu biti isti ili različiti od R.
Ukoliko su vezani za oba kraja biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, ovi bifunkcionalni molekuli se mogu predstaviti u skladu sa Formulom XXIV ili Formulom XXV:
gde su
Xi Y svaki nezavisno, 0, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’, R’ i Z svaki nezavisno, je vodonik, zasićenia ili nezasićena CrC*) alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca;
Q je zasićeni ili nezasićeniC3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana ril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkaril grupa. Ukoliko su prisutni, supstituenti mogu da budu halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkosil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio;
W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; m je nula ili jedan;
a je ceo broj od 4 do 10.000; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5;
R* i R** nezavisno, su ostaci za povezivanje, kao što su opisani gore; i B i B’, nezavisno, su biološki aktivan molekuli, a mogu biti isti ili različiti.
U nekim realizacijama E (preko R” ili R’”) može da formira vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem (B) tako da je aktiviranojedinjenje polialkilenglikola vezano preko bilo koga kraja za molekul iste vrste biološki aktivnog jedinjenja, stvarajući dimemi molekul.
U nekim realizacijama E (preko R” ili R’”) može da formira vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem različitim od B, stvarajući heterodimer biološki aktivnih jedinjenja ili njihovih prekursora.
U drugim realizacijama E (preko R” ili R’”) formira dodatnu vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem B, tako da su i E i R vezani preko različitih funkcionalnih grupa za isti molekul biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
R” i R’” mogu biti isti kao i različiti od R, a biraju se iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehid hidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, sukcinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksalni ostatak.
U nekim realizacijama, R* ili R** je metilenska grupa, a B ili B’ je biološki aktivan molekul koji sadrži amino grupu, pri čemu metilenska grupa formira vezu sa amino grupom u B. Na primer, amin može biti amino kraj peptida, amin aminokiseline bočnog lanca peptida, ili amin ostatka za glikozilovanje glikozilovanog peptida. U nekim realizacijama ovaj peptid je inteferon, kao što je interferon-beta, npr. interferon-beta-1-a. U nekim realizacijama ova vrsta veze se formira reakcijom redukcionog alkilovanja.
Konjugati iz ovog pronalaska mogu se dobiti kuplovanjem biološki aktivnog jedinjenja na jedinjenje polialkilenglikola, kao što je opisano u Primerima. U nekim realizacijama ovo kuplovanje se postiže reakcijom redukcionog alkilovanja.
Interesantna biološki aktivna jedinjenja predstavljaju bilo koju supstancu namenjenu dijanozi, olakšavanju lečenjem, tretmanu ili prevenciji bolesti kod humanih ili drugih animalnih bića, ili da na drugi način poboljša fizičko ili mentalno stanje humanih ili animalnih bića. Primeri biološki aktivnih jedinjenja su, ali bez ograničavanja, peptidi, analozi peptida, proteini, enzimi, mali molekuli, boje, lipidi, nukleozidi, oligonukleotidi, analozi oligonukleotida, šećeri, oligosaharidi, ćelije, virusi, lipozomi, mikročestice, površine i micele. Ova klasa jedinjenja obuhvata takođe i prekursore tih vrsta molekula. Klase biološki aktivnih agenasa, pogodne za upotrebu u ovom pronalasku su, ali bez ograničavanja, citokini, hemokini, limfokini, rastvorni receptori, antitela, antibiotici, fungicidi, antivursni agensi, anti-inflamatorni agensi, anti-tumomi agensi, kardiovaskularni agensi, anti-anksiozni agensi, hormoni, faktori rasta, steroidni agensi i slično.
Biološki aktivno jedinjenje može biti peptid, kao što je interferon, uključujući interferon-beta (npr. interferon-beta-1-a) ili interefron-alfa.
Zato što polimeme modifikacije na PGC iz ovog pronalaska smanjuju antigenske odgovore, da bi se koristio kao terapuetsko sredstvo, strani peptid ne treba da je potpuno analogan. Na primer, peptid, kao što je interferon, koji se koristi za dobijanje polimernih konjugata, može se dobiti iz ekstrakta sisara, kao što je humani, preživarski ili goveđi interferon, ili može biti proizveden sintetski ili rekombinantno.
Na primer, u jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na jedinjenja i postupke za tretiranje stanja podložnih tretmanu interferonom alfa ili beta. Ordiniranje polialkilenglikola konjugovanog sa interferonom-beta (u nastavku ”PGC IFN-beta”, ”PGC IFN-β", npr. "PEG IFN-beta”, ”PEG-ilovani IFN-beta" ili TEG-ilovani IFN-β”) daje poboljšane terapeutske efekte, uz suštinsko umanjenje ili potpuno eliminisanje nepoželjnih sporednih efekata, koji su normalno povezani sa konvencionalnom primenom režima tremana interferonom-alfa ili -beta.
PGC IFN-beta se može dobiti pripajanjem polialkilenskog polimera za krajnju amino grupu molekula IFN-beta. Jednostruko aktivirani molekul polialkilenglikola se može konjugovati sa N-krajem IFN-beta reakcijom redukcionog alkilovanja.
Konjugat PGC-IFN-beta se može formulisati, na primer, kao tečnost ili kao liofilizovani prah za injekcije. Smisao konjugvanja IFN-beta sa PGC je da se poboljša oslobađanje proteina značajnim produžavanjem njegovog poluvremena u plazmi, čime se dobija produžena aktivnost IFN-beta.
Naziv "interferon” ili ”IFN”, kako se ovde koristi, označava familiju visoko homolognih vrsta specifičnih proteina koji inhibiraju reprodukciju virusa i ćelijsku proliferaciju, i modulišu imuno odgovor. Humani interferoni su grupisani u dve klase; Tip 1, uključujući α- i (3-interferon, i Tip II, koga predstavlja samo y-interferon. Razvijeni su rekombinantni oblici svake ove grupe, i komercijalno su pristupačni. Podvrste svakog od ovih tipova se zasnivaju na antigensko/ strukturnim karakteristikama.
Nazivi ”beta interferon”, ”betα-interferon”, ”beta IFN”, beta-IFN”, ”p interferon”, ”p-interferon”, ”IFN beta”, ”IFN-beta”, ”IFN β”, ”IFN-β” i "interferon humanog fibroplasta” ovde se naizmenično koriste, da opišu članove grupe interferona beta, koji imaju različitu sekvenciju aminokiselina, zato što su ilzolovani i sekvencionirani DNK kodirani peptidi.
Pored toga, nazivi "beta interferon 1a”, ”beta interferon-1a”, ”beta-interferon 1a”, ”beta-interferon-1a”, ”beta IFN 1a”, ”beta IFN-1a”, ”beta-IFN 1a”,”beta-IFN-1a”, ”p interferon 1a”, ”p interferon-1a”, ”p-interferon 1a”, ”p-interferon-1a”, ”p IFN 1a”, ”P IFN-1a”, ”p—IFN 1a”, ”p-IFN-1a”, "interferon beta 1a”, "interferon beta-1a”, ”interferon-beta 1a”, ”interferon-beta-1a”, "interferon p 1a”, "interferon p~1a”, ”interferon-p 1a”, ”interferon-p-1a”, ”IFN p 1a”, ”IFN p-1a”, ”IFN-β1a”, ”IFN-p-1a”, ovde se koriste naizmenično, da opišu rekombinantno- ili sintetski-dobijeni interferon-beta, koji ima sekvienciju aminokiselina koja se nalazi u prirodi (divlji tip).
Pojava tehnologije rekombinantne DNK, primenjena na proizvodnju interferona, dozvolila je da se nekoliko humanih interferona uspešno sintetizuju, čime je omogućena masovna fermentacija, proizvodnja, izolovanje i prečišćavanje raznih interferona do homogenosti. Rekombinantno proizvedeni interferon zadržava neke ili većinu njegovih in vitro i in vivo antivirusnih i imunomodulatornih aktivnosti. Podrazumeva se takođe, da rekombinantne tehnike mogu takođe da obuhvate mesto za glikozilovanje prilikom adicije ostatka ugljenog hidrata na rekombinantno izvedenom pilpeptidu.
Podrazumeva se takođe, da konstrukcija plazmida rekombinantne DNK, sadrži sekvencije koje kodiraju najmanje jedan deo interferona humanog fibroplasta i ekspresiju polipeptida koji ima imunološku ili biološku aktivnost interferona humanog fibroplasta. Konstrukcija hibridnih gena beta-interferona, koja sadrži kombinacije raznih podvrsta sekvencija, može da se obavi tehnikama koje su poznate onima koji su verzirani u stanje tehnike.
Tipični pogodni rekombinantni beta-interfereoni, koji se mogu koristiti za praktikovanje ovog pronalaska, su, ali bez ograničavanja, interferon beta-1a, kao što je AVONEX®, dostupan iz firme Biogen, Ine., Cambridge , MA i interferon-beta-1b, kao što je BETASERON®, dostupan iz firme Ber1ex, Richmond, CA.
Postoje mnogi mehanizmi po kojima genski proizvodi, izazvani sa IFN, obezbeđuju zaštitne efekte protiv virusne infekcije. Ti inhibitomi vimsni efekti dešavaju se u raznim fazama ciklusa života virusa. Videti U.S. Patent No. 6,030,785. Na primer, IFN može da inhibira otkrivanje virusnih čestica, penetraciju i/ili spajanje izazvano virusima.
Uslovi koji se mogu tretirati u skladu sa ovim pronalaskom su obično takvi da su osetljivi na tretman sa interferonom. Na primer, osetljivi uslovi su oni koji bi pozitivno ili povoljno odgovorili (pošto su ovi nazivi poznati u stanju tehnike u medicini) na terapiju zasnovanu na interferonu-beta. Za svrhe ovog pronalaska, uslovi koji se mogu tretirati terapijom sa interferonom-beta, koji su ovde opisani, su oni uslovi u kojima tretman sa interferonom-beta pokazuje izvesnu efikasnost, ali gde negativni sporedni efekti tretmana sa intereferonom-p prevagnjuju nad korisnim. Tretman u skladu sa postupcima iz ovog pronalaska dovodi suštinski do umanjenja ili eliminisanja sporednih efekata, u poređenju sa konvencionalnim tretmanom sa interferonom-beta. Pored toga, uslovi za koje se tradicionalno misli da su nepodesni na treman sa interferonom-beta, ili oni za koje je nepraktično tretiranje sa podnošljivim dozama IFN-β, mogu se tretirati u skladu sa postupcima iz ovog pronalaska.
Jedinjenja PGC IFN-β iz ovog pronalaska mogu se koristiti sama ili u kombinaciji sa jednim ili više agenasa koji su korisni za tretiranje posmatranog stanja. Obavljeno je najmanje jedno probno ispitivanje rekombinantnog interferona beta-1a za tretman hroničnog hepatitisa C. Videti uopšteno, Habersetzer et al., Liver, 2000, 30, 437-441, koji je ovde priključen kroz citat.
Na primer, ova jedinjenja se mogu ordinirati u kombinaciji sa dobro poznatim antivirusnim agensima za tretiranje virusnih infekcija. Videti Kakumu et al., Gastroenterology, 1993, 105, 507.12, i Pepinsky et al., J. Pharmacology and Experimental Therapeutics, 2001, 297, 1059-1066, koji su ovde priključeni kroz citat.
Kako se ovde koristi, naziv "antivirusni agensi” može da obuhvati na primer, male molekule, peptide, šećere, proteine, molekule izvedene iz virusa, inhibitore proteaze, analoge nukleotida i/ili analoge nukleozida. Kako se ovde koristi, naziv ”mali molekul” se odnosi na organski molekul sa manje od oko 2500 amu (atomske masene jedinice), poželjno sa manje od oko 1000 amu. Primeri pogodnih antivirusnih jedinjenja su, ali bez ograničavanja, ribavirin, levovirin, MB6866, zidovudine 3TC, FTC, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISI-14803.
Egzemplarna stanja koja se mogu tretirati sa interferonom su, ali bez ograničavanja, poremećaji proliferacije ćelije, naročito multipla skleroza, kancer (npr. leukemija ćelija dlake, Kaposi-ev sarkom, hronična mijelogena leukemija, multipli melanom, karcinom bazalnih ćelija i maligni melanomi, kancer jajnika, limfom T ćelija kože) i virusne infekcije. Bez ograničavanja, tretman interferonom može da se koristi za tretiranje stanja koja bi profitirala iz inhibiranja replikacije virusa osetljivih na interferon. Na primer, interferon se može koristiti sam ili u kombinaciji sa AZT u tretmanu virusa humane imunodeficitamosti (HIV)/SIDA ili u kombinaciji sa ribavirinom, prilikom tretmana HCV. Virusne infekcije, koje se mogu tretirati u skladu sa ovim pronalaskom su, ali bez ograničavanja, hepatitis A, hepatisi B, hepatitis C, drugi hepatitisi koji nisu A/B, virus herpesa, Epstein-Barr-ov virus (EBV), citomegalovirus (CMV), herpes simpleks, humani virus herpesa tip 6 (HHV-6), papiloma, virus boginja, picoma virus, adenovirus, rinovirus, humani T lumfotropni virus- tip 1 i 2 (HTLV-1/-2), humani rotavirus, besnilo, retrovirusi uključujući HIV, encefalitis i respiratorne virusne infekcije. Postupci iz ovog pronalaska mogu se takođe koristiti za modifikaciju raznih imuno odgovora.
Opažena je korelacija između genotipa HCV i odgovora na terapiju interferonom. Videti U.S. Patent No. 6,030,785; Enomoto et al., J. Med. 1996, 334, 77-81; Enomoto et al. J. din. Invest. 1995, 96, 224-30. Procenat odgovora kod pacijenata inficiranih sa HCV-1b je manji od 40%. Videti U.S. Patent No.
6,030,785. Slični, niski procenti odgovora su opaženi kod pacijenata inficiranih sa HCV-1a. Videti, ibidum, i Hoofnagel et al., lntervirology, 1994, 37, 87-100. Međutim, procenat odgovora kod pacijenata inficiranih sa HCV-2 je skoro 80%. Videti U.S. Patent No. 6,030,785; Fried et al., Semin. Liver Dis. 1995, 15, 82-91. Ustvari, nađeno je da sekvencija aminokiselina diskretnog regiona NS5A proteina genotipa HCV 1b korelira sa osetljivošću na interferon. Videti U.S. Patent No. 6,030,785, koji je ovde priključen kroz citat. Videti takođe, Enomoto et al., 1996; Enomoto et al., 1995. Ovaj region je identifikovan kao region koji određuje osetljivost na interferon (ISDR). Videti, ibidum.
Konjugat PGC IFN-beta se ordinira u farmakološki efikasnoj količini za tretiranje bilo kog od stanja opisanih gore, a zasniva se na aktivnosti IFN beta ovog polimernog konjugata. Naziv "farmakološki efikasna količina” označava količinu leka ili farmaceutskog agensa koja će izazvati biološki ili medicinski odgovor tkiva, sistema, animalnog ili humanog bića, koji zahteva istraživač ili lekar. To je količina koja je dovoljna da izazove značajan pozitivan klinički odgovor, uz održavanje smanjenog iznosa sporednih efekata. Količina PGC IFN-beta koja se može ordinirati subjektu kome je to potrebno, je u opsegu od 0,01-100 pg/kg, ili poželjnije od 0,01-10 pg/kg, ordinirana u jednoj ili u podeljenim dozama.
Ordiniranje opisanih doza može biti svaki drugi dan, ali poželjno je da se odigrava jedanput nedeljno ili jedanput svake druge nedelje. Doze se ordiniraju injekcijama u periodu od najmanje 24 nedelje.
Ordiniranje ove doze može biti oralno, površinsko, intravenozno, potkožno, untramuskularno ili nekim drugim prihvatljivim sistemskim postupkom. Na osnovu praćene ordinirajućeg lekara, količina ordiniranog leka i režim tretmana koji se koriste, naravno da će zavisiti od starosti, pola i istorije bolesti pacijenta koji se tretira, broja neutrofila (npr. ozbiljnosti neutropenije), ozbiljnosti specifičnog stanja bolesti i tolerancije pacijenta prema tretmanu, što se pokazuje preko lokalne toksičnosti i sistemskih sporednih efekata.
U praksi, konjugati iz ovog pronalaska se ordiniraju u količinama koje su dovoljne da inhibiraju ili spreče neželjena medicinska stanja ili bolest kod subjekta, kao što je sisar, a koriste se u obliku koji je najpogodniji za tu svrhu. Poželjno je da su preparati pogodni za internu upotrebu, pa obuhvataju efikasnu količinu farmakološki aktivnog jedinjenja iz ovog pronalaska, samog ili u kombinaciji sa drugim aktivnim agensom, zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača. Ova jedinjenja su naročito korisna zbog toga što imaju vrlo nisku, ukoliko je uopšte imaju, toksičnost.
Ovde opisani konjugati mogu činiti aktivan sastojak farmaceutskog preparata i tipično se ordiniraju u smeši sa pogodnim farmaceutskim razblaživačima, dodacima ili nosačima (kolektivno će se ovde nazivati materijalima "nosača”), koji se pogodno biraju u skladu sa namenjenim oblikom ordiniranja, tj. oralnim, tabletama, kapsulama, eliksirima, sirupima i slično. Ovi preparati tipično sadrže efikasnu količinu aktivnog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, a pored toga, mogu takođe da sadrže bilo koji od materijala nosača, koji se uobičajeno koriste u farmaceutskoj nauci. Zavisno od namenjenig načina ordiniranja, ovi preparati mogu biti čvrsti, polu-čvrsti, ili tečni, kao oblik za doziranje, kao što su na primer, sredstva za injektiranje, tablete, supozitorije, pilule, kapsule sa vremenskim oslobađanjem, prahovi, tečnosti, suspenzije ili slično, poželjno u jediničnim dozama.
Konvencionalni farmaceutski preparati, koji sadrže farmakološki efikasnu količinu nekog konjugata, npr. PGC IFN-beta, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačima, adjuvantima, razblaživačima, prezervativima i/ili solubilizatorima, mogu se koristiti u praksi ovog pronalaska. Farmaceutski preparati interferona obuhvataju razblaživače različitih pufera (npr. arginin, Tris-HCI, acetat, fosfat), koji imaju opseg pH i jonskih jačina, nosače (npr. serum humanog albumina), solubilizatore (npr. Tween, polisorbat) i prezervative (npr. benzilalkohol). Videti na primer U.S. Pat. No. 4,496,537.
Ordiniranje ovde opisanih aktivnih jedinjenja ide preko bilo koga od prihvaćenih načina ordiniranja terapeutskih agenasa. Ovi postupci obuhvataju sistemsko ili lokalno ordiniranje, kao što su oralno, nazalno, parenteralno, transdermalno, potkožno ili površinsko ordiniranje.
Na primer, za oralno ordiniranje u obliku tablete ili kapsule (npr. želatinska kapsula), komponenta aktivnog leka se može kombinovati sa oralnim, netoksičnim, farmaceutski prihvatljivim, inertnim nosačem, kao što su etanol, glicerin, voda i slično. Pored toga, ukoliko se želi ili je neophodno, u smešu mogu biti takođe ugrađeni: pogodna veziva, lubrikanti, dezintegracioni agensi i agensi za bojenje. Pogodna veziva su škrob, magnezijum-aluminijum-silikat, škrobna pasta, želatin, metilceluloza, natrijum-karboksimetilceluloza i/ili polivinilpirolidon, šećeri, kukuruzni zaslađivači, prirodne i sintetske gume, kao što su akacija, tragant ili natrijum-alginat, polietilenglikol, voskovi i slično. Lubrikanti, koji se koriste u ovim oblicima za doziranje su natrijum-oleat, natrijum-stearat, magnezijum-stearat, natrijum-benzoat, natrijum-acetat, natrijum-hlorid, silicijum-dioksid, talk, stearinska kiselina, njena magnezijumova ili kalcijumova so, i/ili polietilenglikol, i slično. Dezintegranti su, ali bez ograničavanja, škrob, metilceluloza, agar, bentonit, ksantan guma, škrobovi, agar, alginska kiselina ili njena natrijumova so, ili smeše za penušanje, i slično. Razblaživači su, npr. laktoza, dekstroza, saharoza, manitol, sorbitol, celuloza i/ili glicin.
Konjugati iz ovog pronalaska se mogu takođe ordinirati u takvim oralnim oblicima za doziranje, kao što su, sa vremenskim oslobađanjem ili uzdržanim oslobađanjem, u tabletama ili kapsulama, pilulama, prahovima, granulama, eliksirima, tinkturama, suspenzijama, sirupima i emulzijama.
Tečni, a naročito injektibilni preparati, mogu na primer, da se dobiju rastvaranjem, dispergovanjem itd. Aktivno jedinjenje se rastvori u, ili pomeša sa farmaceutski prihvatljivim rastvaračem, kao što su na primer, voda, rastvor soli, dekstroza u vodi, glicerin, etanol i slično, formirajući oblik injektibilnog rastvora ili suspenzije. Pored toga, mogu se formulisati i čvrsti oblici, pogodni za rastvaranje u tečnosti, pred injektiranje. Injektibilni preparati su poželjni u izotoničnim rastvoroma ili suspenzijama u vodi. Preparati se mogu sterilisati i/ili da sadrže adjuvante, kao što su agensi za prezervaciju, stabilizaciju, kvašenje ili emulgovanje, promoteri rastvaranja, soli za regulisanje osmotskog pritiska i/ili puferi. Pored toga, oni mogu takođe da sadrže druge terapeutski vredne supstance.
Konjugati iz ovog pronalaska mogu se ordinirati intravenozno (npr. kao bolus ii kao infuzija), intraperitonealno, potkožno ili intramuskularno, a svi ovi oblici su poznati onima koji su uobičajeno verzirani u stanje tehnike u farmaciji. Injektibilni preparati se mogu dobiti u konvencionalnim oblicima, kao tečni rastvori ili kao siuspenzije.
Parenteralno ordiniranje injektibilnih preparata koristi se obično za potkožne, intramuskulame ili intravenozne injekcije i infuzije. Na primer, ako se koristi potkožna injekcija, oslobađa se 0,01-100 pg/kg, ili poželjnije 0,01-10 pg/kg PEG-ilovanog IFN-beta tokom nedelju dana, dve injekcije od 0,005-50 pg/kg, ili poželjnije 0,005-5 pg/kg, respektivno, mogu se ordinirati unutar 0 do 72 h. Pored toga, jedan od pristupa parenteralnog ordiniranja koristi implantaciju sistema koji se sporo oslobađa ili zadržano oslobađa, koji predpostavlja da se održava konstantan nivo doziranja, u skladu sa U.S. Patent No. 3,710,795, koji je ovde priključen kroz citat.
Pored toga, poželjni konjugati iz ovog pronalaska mogu se ordinirati u intranazalnom obliku, preko površinske upotrebe u pogodnim intranazalnim tečnim nosačima, ili transdermalnim putevima, koristeći oblike transdenmalnih flastera za kožu koji su dobro poznati onima koji su verzirani u stanje tehnike. Da bi se ordiniralo u obliku transdermalnog sistema za oslobađanje, ordiniranje doze će, naravno, tokom režima doziranja biti kontinualno, a ne sa prekidima. Drugi poželjni površinski preparati su kreme, losioni, aerosoli, sprejovi i gelovi, gde je ordinirana doza 10-100 puta veća od doze koja se tipično daje parenteralnim ordiniranjem.
Za čvrste preparate, dodaci koji se koriste su manitol, laktoza, škrob,
magnezijum-stearat, natrijum-saharinat, talk, celuloza, glukoza, saharoza, magnezijum-karbonat i slično, farmaceutskog kvaliteta. Gore definisano aktivno jedinjenje može se takođe formulisati kao supozitonje, koristeći kao nosač na primer, polialkilenglikole, kao što je na primer propilenglikol. U nekim
realizacijama, pogodno je da se ove supozitorije pripremaju iz masnih emulzija ili suspenzija.
Konjugati iz ovog pronalaska se mogu takođe ordinirati u obliku lipozomskog sistema za oslobađanje, kao mali unilamelami mehurići, veliki unilamelami
mehurići i multilamelarni mehurići. Lipozomi se mogu formulisati iz raznih
fosfolipida, koji sadrže holesterol, stearilamin ili fosfatidilholine U nekim realizacijama film lipidnih komponenata je hidratisan sa vodenim rastvorom leka, formirajući lipidni sloj koji kapsulira lek, kao što je opisano u U.S. Patent-u No. 5,262,564.
Konjugati iz ovog pronalaska se mogu takođe oslobađati upotrebom imunoglobulinskih fuzija, kao individualnih nosača, sa kojima se kupluju molekuli ovog jedinjenja.
Jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu takođe kuplovati sa rastvomim polimerima, kao nosačima leka na cilj. Ti polimeri mogu biti polivinilpirolidon, kopolimer pirana, polihidroksipropil-metakrilamid-fenol, polihidroksietil-aspanamidfenol ili polietilenoksidpolilizin, supstituisan sa palmitoil ostacima. Ovi konjugati se mogu takođe kuplovati na proteine, kao što su na primer, receptorski proteini i albumin. Pored toga, jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu kuplovati na klasu biodegradabilnih polimera, koji su korisni za ostvarivanje kontrolisanog oslobađanja leka, kao što su na primer, polimlečna kiselina, poliepsilon-kaprolakton, polihidroksibutema kiselina, poliortoestri, poliacetali, polihidroksipirani, policijanoakrilati i umreženi ili amfipatični blok kopolimeri hidrogelova.
Ukoliko se želi, farmaceutski preparati se mogu ordinirati tako da sadrže manje količine netoksičnih pomoćnih supstanci, kao što su agensi za vlaženje ili emulgovanje, agensi za puferovanje pH i druge supstance, kao što su na primer, natrijum-acetat, trietanolaminoleat itd.
Režim doziranja koji koristi ove konjugate bira se u skladu sa raznim faktorima, uključujući tip, vrstu, starost, masu, pol i medicinsko stanje pacijenta, ozbiljnost stanja koje treba da se tretira, put ordiniranja, bubrežne i jetrene funkcije pacijenta i naročito jedinjenje ili so koji se koriste. Posmatraju se takođe aktivnost jedinjenja iz ovog pronalaska i osetljivost pacijenta na sporedne efekte. Uobičajeno verziran lekar ili veterinar može lako da odredi i prepiše efiksanu količinu leka potrebnu za prevenciju, suprotstavljanje ili zaustavljanje napredovanja stanja.
Oralne doze iz ovog pronalaska, kada se koriste za indicirane efekte, kreću se između oko 0,01-100 pg/kg/dan oralno, ili poželjnije 0,01-10 pg/kg/dan oralno. Poželjno je da se ovi preparati daju u obliku tableta koje sadrže 0,5-5000 pg, ili poželjnije 0,5-500 pg aktivnog sastojka.
U bilo kome od puteva ordiniranja mogu se koristiti podeljene ili jednostruke doze. Na primer, jedinjenje iz ovog pronalaska se može ordinirati dnevno ili nedeljno, jednom dozom ili se ukupna doza može ordinirati u podeljenim dozama, dve, tri ili četiri.
Bilo koji od gornjih farmaceutskih preparata može da sadrži kao aktivan sastojak 0,1-99%, 1-70% ili poželjno 1-50% aktivnih jedinjenja iz ovog pronalaska.
Kao što je gore opisano, tok bolesti i odgovor na tretman lekom mogu se pratiti kliničkim ispitivanjem i laboratorijskim nalazima. Efikasnost terapije iz ovog pronalaska se određuje domašajem do koga su ranije opisani znaci i simptomi nekog stanja, npr. hroničnog hepatitisa, ublaženi, i domašajem do koga su umanjeni ili potpuno eliminisani normalni sporedni efekti od interferona (tj. simptomi nalik gripu, kao što su groznica, glavobolja, jeza, mijalgija, zamor itd., kao i simptomi povezani sa centralnim nervnim sistemom, kao što su depresija, parestezija, neusaglašene kontrakcije itd.).
U nekim realizacijama, polialkilovano jedinjenje iz ovog pronalaska (npr. PEG-ilovani interferon) se ordinira zajednički sa jednim ili više farmaceutskih agenasa koji su korisni za tretiranje tog posebnog stanja. Na primer, polialikolvani protein se može ordinirati u kombinaciji sa dobro poznatim antivirusnim agensom, ili sa agensom za tretman virusne infekcije. Ova antivirusna jedinjenja su naprimer, ribavirin, levovirin, MB6866 i zidovudin 3TC, FTC, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS-14803.
Konjugat i antivirusni agens se mogu ordinirati simultano (npr. ovi agensi se zajedno ordiniraju pacijentu), sekvencijalno (npr. agensi se ordiniraju pacijentu jedan posle drugog) ili alternativno (npr. agensi se ordiniraju pacijentu u ponovljenim serijama, kao što su: agens A, zatim agens B, zatim agens A, itd.)
U praktikovanju ovog pronalaska, poželjni PGC IFN-beta (npr. PEG IFN-beta) može se ordinirati pacijentima inficiranim sa virusom hepatitisa C. Poželjna je upotreba PEG IFN-beta-1a.
Za tretman, pacijenti se biraju među pacijentima sa pozitivnim antitelima na anti-FICV, sa aktivnim hepatitisom, koji je dokumentovan biopsijom.
Da bi se pratio tok replikacije HCV kod subjekata, kao odgovor na tretman lekom, mogu se meriti HCV RNK u uzorcima seruma, na primer, pomoću testa reakcije ugneždenog lanca polimeraze, koji koristi dva seta prajmera, koji se izvode iz NS3 i NS4 nestmkturalnih regiona gena iz genoma HCV. Videti Farci et al, New Engl. J. Med. 1991, 325, 98-104; Ulrich et al., J. Clin. Invest. 1990, 86, 16091614.
Antivimsna aktivnost se može meriti promenama titra HCV-RNK. Podaci o HCV-RNK se mogu analizirati poređenjem titara na kraju tretmana, sa osnovnim merenjima pre tretmana. Smanjenje HCV-RNK za 4 nedelje pruža dokaz antivirusne aktivnosti nekog jedinjenja. Videti Kleter et al., Antimicrob. Agents Chemother. 1993, 37(3), 595-97; Orito et al., J. Medical. Virology, 1995, 46, 109115. Promene za najmanje dva reda veličina (>2 log) interpretiraju se kao dokaz antivirusne aktivnosti.
Osoba koja pati od infekcije hroničnim hepatitisom C može da pokazuje jedan ili više od sledećih znakova ili simptoma: (a) povišenu alanin aminotransferazu (ALT) u serumu, (b) pozitovan test na anti-HCV antitela, (c) prisustvo HCV, koje se pokazuje pozitivnim testom na HCV-RNK, (d) klinička obeležja hronične bolesti jetre, (e) hepatoćelijsko oštećenje. Ovi kriterijumi se ne moraju koristiti samo za dijagnozu hepatitisa C, nego se mogu koristiti i za ocenjivanje odgovora pacijenta na tretman lekom.
Povišena alanin aminotransferaza (ALT) i asparagin aminotransferaza (AST), poznato je da prate nekontrolisani hepatitis C, a kompletan odgovor na tretman obično se definiše kao normalizacija ovih enzima u serumu, a naročito ALT. Videti Daviš et al., New. Eng. J. Med. 1989, 321. 1501-1506. ALT je enzim koji se oslobađa kada se uništavaju ćelije jetre i simptomatičan je za infekciju sa HCV. Interferon izaziva sintezu enzima 2’,5’-oligoadenilat sintetaze (2’5’OAS), koja zatim dovodi do degradacije mRNK virusa. Videti Houglum, Clinical Pharmacology, 1983, 2, 2O-28. Povišenje sadržaja 2’5’OAS u serumu koincidira sa smanjenjem saržaja ALT.
Histološko ispitivanje uzoraka biopsije jetre može se koristiti kao drugi kriterijum za ocenjivanje. Videti npr. Knodell et al., Hepatology, 1981, 1, 431-435, čiji Indeks histološke aktivnosti (portalna inflamacija, delimična ili premošćujuća nekroza, povrede režnjeva i fibroza) pružaju metodu za ocenjivanje aktivnosti bolesti.
Bezbednost i tolerabilnost tretmana se mogu odrediti kliničkim ocenjivanjima i brojanjem belih krvnih zrnaca i neutrofila. Ovo se može ocenjivati periodičnim praćenjem hematoloških parametara, npr. brojem belih krvnih zrnaca, neutrofila, trombocita i crvenih krvnih zrnaca.
Razne druge formulacije za produženo ili uzdržano oslobađanje mogu se dobiti koristeći konvencionalne postupke, koji su dobro poznati u stanju tehnike.
Mnoge modifikacije i varijacije ovog pronalaska mogu da se učine bez odstupanja od njegovog duha i obima, što je jasno onima koji su verzirani u stanje tehnike. Specifične realizacije koje se ovde nude služe samo kao primer, a ovaj pronalazak je ograničen samo u svetlu priključenih patentnih zahteva, zajedno sa punim obimom ekvivalenata na koje su ti patenti zahtevi naslovljeni. Sve patentne publikacije koje su ovde citirane priključene su činom navođenja.
PRIMERI Primer 1
Sinteza aktiviranih polialkilenglikola A) Alkilovanie alkohola
Aktivirani polialkilenglikoli se sintetizuju alkilovanjem polialkilenglikola koji na slobodnom kraju imaju hidroksil funkcionalnost. Generička reakcija je skicirana u Shemi I:
Polialkilenglikol (P-OH) reaguje sa alkilhalidom (A), formirajući etar (B). Jedinjenje B se zatim hidroksiluje, formirajući alkohol (C), koji se oksidiše do aldehida (D). U ovim jedinjenjima n je ceo broj od nula do pet, a Z je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca. Z može takođe da bude zasićeni ili nezasićeni C3-C7 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroari grupa, ili supstituisana ili nesupstituisana alkaril (alkil je zasićeni ili nezasićeni C1-C20 alkil) ili heteroalkaril grupa. Za supstituisana jedinjenja supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio. Tipično, P-OH je polietilenglikol (PEG) ili monometoksipolietilenglikol (mPEG), koji ima molekulsku težinu od 5.000 do 40.000 Daltona (Da).
Na primer, sinteza mPEG-O-2-metilpropionaldehida je skicirana u Shemi II.
Tretira se mPEG-OH, molekulske težine 20.000 Da (mPEG-OH 20 kDa; 2,0 g, 0,1 mmol, Sunibo) sa NaH (12 mg, 0,5 mmol) u THF (35 ml_). Zatim se u ovu smešu doda 50 ekvivalenata 3-bromo-2-metilpropena (3,34 g, 5 mmol) i katalitička količina Kl. Dobijena smeša se 16 h meša pod refluksom. Zatim se doda voda (1 ml_), a rastvarač ukloni pod vakuumom. U ostatak se doda CH2CI2 (25 ml_), pa odvoji organski sloj, osuši iznad anhidrovanog natrijum-sulfata, a zapremina se smanji na približno 2 ml_. Ovaj ChhCh-ski rastvor se u kapima dodaje u etar (150 ml_). Sakupi se dobijeni beli talog, dajući 1,9 g jedinjenja 1.
1H NMR (CDCI3, 400 MHz) opaženo 5: 4,98 (s, 1H), 4,91 (s, 1H), 1,74 (s, 3H).
Doda se jedinjenju 1 (1,9 g, 0,1 mmol) u THF (20 mL) i CH2CI2 (2 ml_), na 0°C, BH3 u THF (1,0 M, 3,5 mL). Ova smeša se 1 h meša u kupatilu sa ledom. Ovoj smeši lagano se dodaje NaOH (2,0 M, 2,5 mL), a zatim 30% H202 (0,8 mL). Reakcija se zagreje na sobnu temperaturu i meša 16 h. Sledi se gornja procedura obrade (CH2CI2, taloženje iz etra), dajući 1,8 g 2, kao belu čvrstu supstancu.
1 H NMR (CDCb, 400 MHz) opaženo 6 1,80 (m, 1H), 0,84 (d, 3H).
Jedinjenje 2 (250 mg) se rastvori u CH2CI2 (2,5 mL), pa se doda Dess-Martin-ov perjodinat (DMP, 15 mg), i 30 min meša na sobnoj temperaturi. U ovu smešu se doda zasićeni NaHC03 i Na2S203 (2 mL), pa se smeša 1 h meša na sobnoj temperaturi. Sledi se gornja procedura obrade, dajući 3 (mPEG-O-2-metilpropionaldehid, 120 mg) kao belu čvrstu supstancu.
1H NMR (CDCb, 400 MHz) opaženo δ9,75 (s, 1H), 2,69 (m, 1H), 1,16 (d, 3H).
Slična procedura se sledi za aromatične alkohole, kao što pokazuje Shema III:
Obično, reaguje aromatični alkohol (E) sa alkilhalidom (A), formirajući monoetar (F). Preostala alkoholna grupa u jedinjenju F se zatim konvertuje u halid (npr. bromid) u Jedinjenju G, koje reaguje sa polialkilenglikolom (P-OH), dajući etar(H). Ovo jedinjenje se zatim konvertuje u aldehid (J), preko hidroborovanja u primami alkohol (I), posle čega sledi oksidacija. U ovim jedinjenjima, n predstavlja ceo broj od nula do pet, d je nula ili ceo broj od jedan do četiri, a Z je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca. Z može takođe da bude zasićeni ili nezasićeni C3-C7 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroari grupa, ili supstituisana ili nesupstituisana alkaril (alkil je zasićeni ili nezasićeni 0^020 alkil) ili heteroalkaril grupa. Za supstituisana jedinjenja supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfmat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio. Pored toga, Ti i T2 su, nezavisno, odsutni ili zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, a mogu biti jedan u odnosu na drugi u orto, meta ili para položaju. Svaki L (ukoliko je prisutan) je nezavisno, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C7 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroari grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde je alkil zasićeni ili nezasićeni C1-C20 alkil, ili heteroalkaril grupa. Za supstituisana jedinjenja supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, fonmil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfmat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio.
Obično P-OH je polietilenglikol (PEG) ili monometoksipolietilenglikol (mPEG), koji ima molekulsku težinu 5.000 do 40.000 Da.
Na primer, sinteza mPEG-O-p-metilfenil-O-2-metilpropionaldehida (8), pokazana je u Shemi IV:
U rastvor 4-hidroksibenzilalkohola (2,4 g, 20 mmol) u THF (50 mL) i vodi (2,5 mL), prvo se doda natrijum-hidroksid (1,5 g, 37,5 mmol), a zatim 3-bromo-2-metilpropen (4,1 g, 30 mmol). Ova reakciona smeša se 16 h zagreva pod refluksom. U smešu se doda 10% limunska kiselina (2,5 mL), pa se rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se ekstrahuje etilacetatom (3x15 mL), a kombinovani organski slojevi se operu zasićenim NaCI (10 mL), osuše i koncentrišu, dajući jedinjenje 4 (3,3 g, 93%).
1H NMR (CDCI3i 400 MHz) opaženo δ7,29 (m, 2H), 6,92 (m, 2H) 5,14 (s, 1H),
5.01 (s, 1H), 4,56 (s, 2H), 4,46 (s, 2H), 1,85 (s, 3H).
Dodaju se mezilhlorid (MsCI, 2,5 g, 15,7 mmol) i trietilamin (TEA, 2,8 mL, 20 mmol) u rastvor jedinjenja 4 (2,0 g, 11,2 mmol) u CH2CI2 (25 mL), na 0°C, pa se reakcija drži u frižideru 16 h. Uobičajena obrada daje svetložuto ulje (2,5 g, 87%). 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) opaženo 6 7,31 (m, 2H), 6,94 (m, 2H), 5,16 (s, 1H),
5.01 (s, 1H), 5,03 (s, 2H), 4,59 (s, 2H), 4,44 (s, 2H), 3,67 (s, 3H), 1,85 (s, 3H). Ovo ulje (2,4 g, 9,4 mmol) se rastvori u THF (20 mL), pa se doda LiBr (2,0 g, 23,0 mmol). Reakciona smeša se 1 h zagreva pod refluksom, pa se ohladi na sobnu teperaturu. U smešu se doda voda (2,5 mL), a rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se ekstrahuje etilacetatom (3x15 mL), a sjedinjeni organski slojevi operu zasićenim NaCI (10 mL), osuše iznad anhidrovanog Na2S04 i koncentrišu, dajući željeni bromid 5 (2,3 g, 96%), kao svetložuto ulje.
1H NMR (CDCI3, 400 MHz) opaženo δ 7,29 (m, 2H), 6,88 (m, 2H), 5,11 (s, 1H), 4,98 (s, 1H), 4,53 (s, 2H), 4,44 (s, 2H), 1,83 (s, 3H).
Tretira se m-PEG-OH 20 kDa (2,0 g, 0,1 mmol, Sunbio) sa NaH (12 mg, 0,5 mmol) u THF (35 mL), pa se u smešu doda jedinjenje 5 (0,55 g, 22,8 mmol) i katalitička količina Kl. Dobijena smeša se 16 h zagreva pod refluksom. U smešu se doda voda (0,1 mL), pa se rastvarač ukloni pod vakuumom. U ostatak se doda CH2CI2 (25 mL), pa se odvoji organski sloj, osuši iznad anhidrovanog Na2S04l a zapremina smanji na približno 2 mL. Ukapavanje etarskog rastvora (150 mL) vodi stvaranju belog taloga koji se sakupi, dajući 6 (1,5 g), kao beli prah.
1H NMR (CDCh, 400 MHz) opaženo δ 7,21 (d, 2H), 6,90 (d, 2H), 5,01 (s, 1H), 4,99 (s, 1H), 4,54 (s, 2H), 4,43 (s, 2H), 1,84 (s, 3H).
U rastvor jedinjenja 6 (1,0 g, 0,05 mmol) u THF (10 mL) i CH2CI2 (2 mL), ohlađen na 0°C, doda se BH3/THF (1,0 M; 3,5 mL), pa se reakcija meša 1 h. Lagano se dodaje 2,0 M rastvor NaOH (2,5 mL), a zatim 30% H202 (0,8 mL). Reakciona smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu, pa se meša 16 h. Sledi se gornja procedura obrade (CH2CI2, taloženje iz etra), dajući 7 (350 mg), kao belu čvrstu supstancu. 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) opaženo δ7,21 (d, 2H), 6,84 (d, 2H), 4,54 (s, 2H), 2,90 (m, 2H), 1,96 (d, 3H).
Jedinjenje 7 (150 mg, 0,0075 mmol) se rastvori u CH2CI2 (1,5 mL), pa se doda DMP (15 mg), a reakciona smeša se 1,5 h meša na sobnoj temperaturi. 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) opaženo δ9,76 (s, 1H), 7,21 (d, 2H), 6,78 (d, 2H), 4,44 (s, 2H), 4,14 (m, 2H), 2,85 (m, 1H), 1,21 (d, 3H). U smešu se doda zasićeni NaHC03 (0,5 mL) i Na2S203 (0,5 mL), pa se nastavi još 1 h sa mešanjem na sobnoj temperaturi. Sledi se gornja procedura obrade (rastvaranje u CH2CI2, taloženje iz etra), dajući 8 (92 mg) kao belu čvrstu supstancu.
Slično se sintetizuje mPEG-O-/T7-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid (9), kao što je skicirano u Shemi V.
U rastvor 3-hidroksibenzilalkohola (2,4 g, 20 mmol) u THF (50 ml_) i vodi (2,5 mL) prvo se doda natrijum-hidroksid (1,5 g, 37,5 mmol), a zatim 3-bromo-2-metilpropen (4,1 g, 30 mmol). Reakciona smeša se 16 h zagreva pod refluksom. U smešu se doda 10% limunska kiselina (2,5 mL), pa se rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se ekstrahuje etilacetatom (3x15 mL), a sjedinjeni organski slojevi se operu zasićenim NaCI (10 mL), osuše i koncentrišu, dajući jedinjenje 10 (3,2 g, 90%). 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) opaženo S 7,26 (m, 1H), 6,94 (m, 2H), 6,86 (m, 1H), 5,11 (s, 1H), 5,01 (s, 1H), 4,61 (s, 1H), 4,44 (s, 2H), 1,82 (s, 3H).
Doda se MsCI (2,5 g, 15,7 mmol) i TEA (2,8 mL, 20 mmol) u rastvor jedinjenja 10 (2,0 g, 11,2 mmol) u CH2CI2 (25 mL), na 0°C, pa se reakcija drži u frižideru 16 h. Uobičajena obrada daje svetložuto ulje (2,5 g, 87%). 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) opaženo δ7,31 (m, 1H), 7,05 (m, 2H), 6,91 (m, 1H), 5,16 (s, 1H), 5,04 (s, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,46 (s, 2H), 3,71 (s, 3H), 1,84 (s, 3H). Ovo ulje (2,4 g, 9,4 mmol) se rastvori u THF (20 mL), pa se doda LiBr(2,0 g, 23,0 mmol). Reakciona smeša se 1 h zagreva pod refluksom, a zatim ohladi na sobnu temperaturu. U smešu se doda voda (2,5 mL), pa se rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se ekstrahuje etilacetatom (3x15 mL), a sjedinjeni organski slojevi operu zasićenim NaCI (10 mL), osuše iznad anhidrovanog Na2S04 i koncentrišu, dajući željeni bromid 11 (2,2 g, 92%), kao svetložuto ulje. 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) opaženo δ7,29 (m, 1H), 6,98 (m, 2H), 6,85 (m, 1H), 5,14 (s, 2H), 4,98 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,44 (s, 2H), 1,82 (d, 3H).
Tretira se m-PEG-OH 20 kDa (2,0 g, 0,1 mmol, Sunbio) sa NaH (12 mg, 0,5 mmol) u THF (35 mL), pa se u smešu doda jedinjenje 11 (0,55 g, 22,8 mmol) i katalitička količina Kl. Dobijena smeša se 16 h zagreva pod refluksom. U smešu se doda voda (1,0 mL), pa se rastvarao ukloni pod vakuumom. U ostatak se doda CH2CI2 (25 mL), pa se odvoji organski sloj, osuši iznad anhidrovanog Na2S04, a zapremina smanji na približno 2 mL. Ukapavanje etarskog rastvora (150 mL) vodi stvaranju belog taloga koji se sakupi, dajući 12 (1,8 g), kao beli prah. 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) opaženo δ7,19 (m, 1H), 6,88 (m, 2H), 6,75 (m, 1H), 4,44 (s, 2H), 4,54 (s, 2H), 4,10 (m, 2H), 1,82 (d, 3H).
U rastvor jedinjenja 12 (1,0 g, 0,05 mmol) u THF (7,5 mL) i CH2CI2 (2,5 mL), ohlađen na 0°C, doda se BH3/THF (1,0 M; 3,5 mL), pa se reakcija meša 1 h. Lagano se dodaje 2,0 M rastvor NaOH (3 mL), a zatim 30% H202 (0,85 mL). Reakciona smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu, pa se meša 16 h. Sledi se gornja procedura obrade (CH2Cb, taloženje iz etra), dajući 13 (450 mg), kao belu čvrstu supstancu. 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) opaženo δ7,15 (m, 1H), 6,84 (m, 2H), 6,69 (m, 1H), 4,50 (s, 2H), 2,90 (m, 2H), 1,95 (d, 3H). Jdinjenje 13 (200 mg, 0,01 mmol) se rastvori u CH2Cl2 (1,5 mL), pa se doda DMP (20 mg), a reakciona smeša se 1 h meša na sobnoj temperaturi. 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) opaženo δ9,74 (s, 1H), 7,17 (m, 1H), 6,86 (m, 2H), 6,74 (m, 1H), 4,48 (s, 2H), 4,15 (m, 2H), 2,78 (m, 1H), 1,22 (d, 3H). U ovu smešu se doda zasićeni NaHC03 (0,5 mL) i Na2S203 (0,5 mL), pa se nastavi još 1 h sa mešanjem na sobnoj temperaturi. Sledi se gornja procedura obrade (rastvaranje u CH2CI2, taloženje iz etra), dajući 9 (142 mg) kao belu čvrstu supstancu.
B) Generisanie reakcijom sa aromatičnim alkoholima
Aktivirani polialkilenglikoli se sintetizuju Mitsunobu-ovom reakcijom između polialkilenglikola, koji ima na slobodnom kraju hidroksilnu funkcionalnost, i aromatičnog alohola. Reakciona shema je skicirana u Shemi VI.
Polialkilenglikol (P-OH) reaguje sa alkoholom (K), formirajući etar (L). U ovim jedinjenjima m je nula ili jedan, d je nula ili ceo broj od jedan do četiri, i n je nula ili ceo broj od jedan do pet. Y je O, S; CO, CO2, COS, SO, SO2, CONR’, S02NR’ i NR’. T-i i T2 su, nezavisno, adsutni ili su zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca. R’ i Z su, nezavisno, vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca. Svaki L (ukoliko je prisutan), nezavisno, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C7 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroari grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril. Alkil je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, a supstituenti mogu biti halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tiofonmijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sutfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio.
P je polimer polialkilenglikola. Obično, P-OH je polialkilenglikol (PEG) ili monometoksipolialkilenglikol (mPEG), koji ima molekulsku težinu 5.000 do 40.000 Da.
Na primer sinteza mPEG-O-p-fenilacetaldehida (16) je skicirana u Shemi VII.
Sintetizuje se 4-hidroksifenilacetaldehid (15) kao što je opisano u Heterocycles, 2000, 53, 777-784. Rastvori se 4-hidroksifenetilalkohol (Jedinjenje 14, 1,0 g, 7,3 mmol, Aldrich) u dimetilsulfoksidu (8 ml_, Aldrich). Uz mešanje, lagano se dodaje TEA (2,2 mL, 16 mmol, Aldrich). Potpuno se rastvori kompleks piridin/sumpor-trioksid (S03py) (2,5 g, 16 mmol, Aldrich) u dimetilsulfoksidu (9 mL, Aldrich), pa se ovaj rastvor u kapima dodaje u alkohol, uz snažno mešanje. Posle 1 h mešanja na sobnoj temperaturi, reakcija se razblaži sa CH2CI2, a zatim opere vodom ohlađenom u ledu. Osuši se organski sloj iznad Na2S04, filtrira i koncentriše do suva. Prečišćavanje koristi hromatografiju na silikagelu, sa heksan-etilacetatom kao eluentom (5:1, a zatim 2:1), dajući 488 mg (49%) 4-hidroksifenilacetaldehida (15).
Azeotropiraju se četiri puta sa toluenom mPEG-OH 20 kDa (101 mg, 0,005 mmol) i 4-hidroksifenilacetaldehid (15) (39 mg, 0,29 mmol), a zatim razmute u anhidrovanom CH2CI2 (2 mL, Aldrich). Ovom rastvoru se doda trifenilfosfin (PPh3, 66 mg, 0,25 mmol, Aldrich), a zatim, uz mešanje, diizopropilazodikarboksilat (DIAD, 49 pL, 0,25 mmol, Aldrich). Posle 3 dana mešanja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se u kapima dodaje, uz snažno mešanje, dietiletru. Nastali talog se izoluje filtriranjem, pa tri puta opere dietiletrom. Sirovi materijal se razmuti u CH2CI2 i opere vodom. Organski sloj se osuši iznad Na2S04, filtrira i koncentriše do suva. Ovaj materijal se razmuti u minimumu CH2CI2, a zatim, uz mešanje, istaloži ukapavanjem dietiletra. Ovaj materijal se sakupi filtriranjem
opere tri puta dietiletrom i osuši, dajući 63 mg (62%) mPEG-0 -p-fenilacetaldehida (16).
Sinteza mPEG-O-p-fenilpropionaldehida (17) se obavlja na sličan način.
Analogno 4-hidroksifenilacetaldehidu (Heterocycles, 2000, 53, 777-784) sintetizuje se 4-hidroksifenilpropionaldehid. Rastvori se 3-(4-hidroksifenil)-1 -propanol (1,0 g, 6,6 mmol, Aldrich) u dimetilsulfoksidu (8 ml_, Aldrich). Uz mešanje, lagano se dodaje TEA (2,0 ml_, 14 mmol, Aldrich). Potpuno se rastvori kompleks piridin/sumpor-trioksid (SOpy) (2,3 g, 15 mmol, Aldrich) u dimetilsulfoksidu (9 mL, Aldrich), pa se ovaj rastvor u kapima dodaje u alkohol, uz snažno mešanje. Posle 1 h mešanja na sobnoj temperaturi, reakcija se razblaži sa CH2Cb, a zatim opere vodom ohlađenom u ledu. Organski sloj se osuši iznad Na2S04, filtrira i koncentriše do suva. Prečišćavanje, koristeći gel hromatografiju, sa heksan-etilacetatom kao eluentom (5:1, a zatim 2:1), daje 745 mg (75%) 4-hidroksifenilpropionaldehida.
Azeotropiraju se četiri puta sa toluenom mPEG-OH 20 kDa (100 mg, 0,005 mmol) i 4-hidroksifenilpropionaldehid (40 mg, 0,27 mmol), a zatim razmute u anhidrovanom CH2CI2 (2 mL, Aldrich). Ovom rastvoru se uz mešanje dodaju trifenilfosfin (66 mg, 0,25 mmol, Aldrich), a zatim diizopropilazodikarboksilat (49 pL, 0,25 mmol, Aldrich). Posle 3 dana mešanja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se ukapava, uz snažno mešanje, u dietiletar. Nastali talog se izoluje filtriranjem, pa tri puta opere dietiletrom. Sirovi materijal se razmuti u CH2CI2 i opere vodom. Organski sloj se osuši iznad Na2S04, filtrira i koncentriše do suva. Ovaj materijal se razmuti u minimumu CH2CI2, a zatim taloži ukapavanjem dietiletra, uz mešanje. Ovaj materijal se sakupi filtriranjem, tri puta opere dietietrom i suši, dajući 60 mg (60%) mPEG-O-p-fenilpropionladehida (17).
Na ovaj način se dobija takođe mPEG-O-m-feniiacetaldehid (18).
18
Analogno 4-hidroksifenilacetaldehidu (Heterocycles, 2000 53, 777-784), dobija se 3-hidroksifenilacetaldehid. Rastvori se 3-hidroksifenetil alkohol (1,0 g, 7,5 mmol, Aldrich) u dimetilsutfoksidu (8 mL, Aldrich). Uz mešanje, lagano se dodaje TEA (2,0 mL, 14 mmol, Aldrich). Poptuno se rastvori kompleks piridin/sumpor-trioksid (SC>3 py) (2,4 g, 15 mmol, Aldrich) u dimetilsulfoksidu (8 mL, Aldrich), pa se ovaj rastvor u kapima dodaje alkoholu, uz snažno mešanje. Posle 1 h mešanja na sobnoj temperaturi, reakcija se tretira vodom ohlađenom u ledu, pa ekstrahuje sa CH2CI2. Organski sloj se osuši iznad Na2S04, filtrira i koncentriše do suva. Prečišćavanje je hromatografijom na silikagelu, sa heksan-etilacetatom kao eluentom (3:1, pa 1:1), dajući 225 mg (22%) 3-hidroksifenilacetaldehida.
Azeotropiraju se četiri puta sa toluenom mPEG-OH 20 kDa (307 mg, 0,015 mmol) i 3-hidroksifenilacetaldehid (117 mg, 0,86 mmol), a zatim razmute u anhidrovanom CH2CI2 (5 mL, Aldrich). Ovom rastvoru se uz mešanje dodaju trifenilfosfin (200 mg, 0,76 mmol, Aldrich), a zatim diizopropilazodikarboksilat (147 pL, 0,75 mmol, Aldrich). Posle 3 dana mešanja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se ukapava, uz snažno mešanje, u dietiletar. Nastali talog se izoluje filtriranjem, pa tri puta opere dietiletrom i suši, dajući 284 mg (93%) mPEG-O-m-fenilacetadehida (18).
Hiralna jedinjenja PEG-cinamat-N-hidroksi-sukcinamida (NHS) se generišu, na primer, kao što je pokazano u Shemama VIII i IX:
Jedinjenja PEG-dihidrourokanat-NHS takođe su generisana, preko Mitsunobu-ove reakcije, kao što je pokazano u Shemi X:
Jedinjenja PEG-dihidrocinamat-NHS su takođe generisana, iz aromatičnog alkohola, kao što je pokazano u Shemi XI:
Generisani su PEG-benzofurani i PEG-indoli, kao što pokazuju Sheme XII i XIII:
C) Genensanie reakcijom PEG-amina
Reaguju PEG-amini sa alkilhalidima, generišući PEG-amide. Primer generisanja PEG-amid-biciklooktan-NHS konjugata je pokazan u Shemi XIV:
Konjuguje se PEG-primarni amin sa arilhalidom, formirajući konjugat PEG-sekundami amin, koji zatim reaguje pod Heck-ovim uslovima (stereospecifično kuplovanje, katalizovano paladijumom, alkena sa organskim halidima ili triflatima, koji nemaju sp3 hibridizovane p-vodonike) sa NHS-alkenom, formirajući željeni PEG-konjugat. Sinteza konjugata koji sadrži pirimidin, je pokazana u Shemi XV:
Na ovaj način su sintetizovani takođe konjugati PEG-sulfonamid, kao što je pokazano u Shemi XVI:
D) Jedinienia penetisana reakcijom sa heterociklima
PEG jedinjenja reaguju sa azotima heterocikla, koji su u prstenu ili koji nisu u prstenu, formirajući reaktivne vrste PEG. Reprezentativne reakcije su pokazane u Shemama XVII za aminopirolidin, i u XVIII za razne piperazine:
Primer2
Pobijanje peotidnih koniugata
Peptidni konjugati, u skladu sa ovim pronalskom, mogu se dobiti reagovanjem proteina sa aktiviranim molekulom PEG. Na primer, interferon (IFN) može da reaguje sa PEG-aldehidom, u prisustvu rdukcionog sredstva (npr. natrijum-cijanoborohidrida), pomoću redukcionog alkilovanja, dajući preko aminske veze konjugat PEG-protein. Videti npr. European Patent 0154316 B1.
Humani IFN-β-1 a se PEG-iluje sa sledećim aktiviranim polialkilenglkolima iz ovog pronalaska: 20kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehidom, 20 kDa mPEG-O-p-metilfenil-O-2-metilpropionaldehidom, 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehidom, 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehidom, 20 kDa mPEG-O-p-fenilpropionaldehidom i 20 kDa mPEG-O-m-fenilacetaldehidom. PEG-ilovani proteini se prečišćavaju do homogenosti iz njihovih respektivnih reakcionih smeša, pa se podvrgavaju nizu testova karakterizacije, da se utvrdi njihov identitet, čistoća i moć modifikovanih proteina.
Sledi detaljan opis dobijanja i karakterizacije humanog IFN-β-1 a, modifikovanog sa 20kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehidom, sa 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehidom i sa 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehidom.
A) Pobijanje i karakterizaciia 20 kDa mPEG-O-2-metilDnopionaldehid-modifi kovanog !FN-B-1a
Humani IFN-β-1 se PEG-iluje na njegovom N-kraju sa 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehidom. Proizvod hernije redukcionog alkilovanja se koristi da se ugradi PEG u skelet IFN-β-1 a, što za rezultat daje stvaranje aminske veze koja je krajnje stabilna protiv razgradnje. Ovaj PEG-ilovani IFN-β-1 a se podvrgne ekstenzivnoj karakterizaciji, uključujući analizu SDS-PAGE, hromatografiju sa isključivanjem po veličini (SEC), dobijanje mape peptida i ocenu aktivnosti u antivirusnom testu in vitro. Čistoća proizvoda, merena pmoću SDS-PAGE i SEC je veća od 90%. U PEG-ilovanom uzorku nema podataka o agregatima. Zaostali nivo nemodifikovanog IFN-β-1 a u proizvodu bio je ispod granice kvantitativnog određivanja, i smatra se da predstavlja oko 1% proizvoda. Specifična aktivnost PEG-ilovanog IFN-β-1 a u testu anti-virusne aktivnosti je približno dva puta umanjena, u odnosu na nemodifikovani IFN-β-1 a (EC50 = 32 pg/mL za 20 kDa mPEG-O-2-metilproionaldehid-modifikovani IFN-β-1 a, u odnosu na EC50 = 14 pg/mL za nemodifikovani IFN-β-1 a). Masa PEG-ilovanog IFN-β-1 a se formuliše sa 40 pg/mL u slanom fosfatnom puferu (PBS) sa pH 7,3, koji sadrži 14 mg/mL seruma humanog albumina (HSA), slično formulaciji koja se konsti za AVONEX® (Biogen, Cambridge, MA), koji je podvrgnut ekstenzivnoj karakterizaciji. Materijal se isporučuje kao smrznuta tečnost, koja se čuva na -70°C.
Svojstva 20 kDa mPEG-O-2-metitpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a su sabrana u Tabeli 1:
1. Dobijanje 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifiokvanog IFN-j3-1a Razblaži se 10 mL neformulisanog AVONEX®-a (masa IFN-β-1a intermedijara, masa kliničke šarže leka je prošla sve testove za upotrebu humanih bića, sa 250 pg/mL u 100 mM natrijum-fosfatu, pH 7,2, i 200 mM NaCI) sa 12 mL 165 mM MES, pH 5,0, i 50 pL 5 M HCI. Ovaj uzorak se prebaci u kolonu od 300 pL SP-Sepharose FF (Pharmacia). Kolona se opere sa 3x300 pL 5 mM natrijum-fosfata, sa pH 5,5 i 75 mM NaCI, pa se protein eluira sa 5 mM natrijum-fosfataom, pH 5,5 i 600 mM NaCI. Analiziraju se frakcije od eluiranja, preko njihove absorbancije na 280 nm, pa se ocenjuje koncentracija IFN-β-1au uzorcima, korišćenjem vrednosti 1,51 za koeficijent ekstinkcije, u rastvoru od 1 mg/mL. Sakupe se frakcije pika, dajući IFN-β-1a koncentracije 3,66 mg/mL, koje se zatim razblaže vodom na 1,2 mg/mL.
U 0,8 mL IFH-p-1a, iz sjedinjenog razblaženog eluata SP-Sepharose, dodaje se 0,5 M natrijum-fosfat, pH 6,0 do 50 mM, natrijum-cijanoborohidrid (Aldrich) se dodaje do 5 mM, a 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid se dodaje do 5 mg/mL. Uzorak se inkubira 16 h na sobnoj temperaturi, u mraku. PEG-ilovani
IFN-β-1 a se prečišćava iz ove reakcione smeše na koloni od 0,5 ml_ SP-Sepharose FF, kao što sledi: razblaži se 0,6 mL reakcione smeše sa 2,4 mL 20 mM MES, pH 5,0, pa se prebaci u kolonu SP-Sepharose. Ova kolona se pere sa natrijum-fosfatom, pH 5,5, 75 mM NaCI, a zatim se PEG-ilovani IFN-β-1 a eluira iz kolone sa 25 mM MES, pH 6,4 i 400 mM NaCI. PEG-ilovani IFN-β-1a se dalje prečišćava na koloni Superose 6 HR 10/30 FPLC sizing, sa 5 mM natrijum-fosfatom, pH 5,5 i 150 mM NaCI, kao mobilnom fazom. Ova kolona za razdvajanje po veličini (25 mL) se ispire sa 20 mL/h, a sakupljaju se frakcije od 0,5 mL. Frakcije od eluiranja se analiziraju na sadržaj proteina, preko absorbancije na 280 nm, pa se sakupe i odredi koncentracija proteina u sakupljenom eluatu. Koncentracija PEG-ilovanog IFN-β-1 a se daje u ekvivalentima IFN, zato što ostatak PEG ne doprinosi absorbaciji na 280 nm. Uzmu se uzorci sakupljenog eluata radi analize, a ostatak se razblaži na 30 pg/mL sa puferom za fomnulisanje koji sadrži HSA, i podeli u alikvote od 0,25 mL/fiola, koji se čuvaju na -70°C.
2. U V spektar prečišćenog
20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1 a UV spektar (24O-340 nm) 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1 a dobije se korišćenjem uzorka mase, koja je prethodno formulisana sa HSA. PEG-ilovani uzorak pokazuje maksimum absorpcije na 278-279 nm, a minimum absorpcije na 249-250 nm, što je saglasno sa istim za masu nemodifikovanog intermedijara IFN-β-1 a. Koncentracija proteina u PEG-ilovanom proizvodu je ocenjivana iz spektra, koristeći za koeficijent ekstinkcije vrednost £28o0,1% = 1,51. Koncentracija proteina PEG-ilovane mase je 0,23 mg/mL. Nije opaženo zamućenje u uzorku, jer nedostaje absorbancija na 320 nm.
3. Karakterizacija 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1 a pomoću SDS-PAGE
Podvrgne se 4 pg nemodifikovanog i 20 kDa mPEG-O-2-metilproiponaldehid-modifikovani IFN-β-1 a analizi SDS-PAGE, pod redukcionim uslovima, sa 1O-20% gradijentom gela. Gel je obojen sa Coomassie-vim brilijant plavim R-250, i pokazan je na Slici 1 (red A, markeri molekulske težine (odozgo na dole: 100 kDa, 68 kDa, 45 kDa, 27 kDa i 18 kDa, respektivno); Red B je nemodifikovani IFN-β-1a; Red C je 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1a). SDS-PAGE analiza 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a je otkrila jednu glavnu traku, prividne mase 55 kDa, što je saglasno sa modifikacijom sa jednim PEG. Nisu detektovani oblici više mase, koji bi poticali od prisustva dodatnih PEG grupa. U prečišćenom PEG-ilovanom proizvodu otkriven je nemodifikovani IFN-β-1a; međutim, količina je ispod granice kvantitativnog određivanja. Sadržaj nemodifikovanog IFN-β-1a u preparatu je procenjen da iznosi samo oko 1% od ukupnog proteina.
4. Karakterizacija 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog !FN-p-1a pomoću hromatografije sa isključivanjem po veličini (SEC) Nemodifikovani i 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1a su podvrgnuti SEC na analitičkoj koloni Superose 6 HR 10/30 FPLC sizing, koristeći PBS, pH 7,2, kao mobilnu fazu. Kolona se ispira sa 20 mL/h, a eluat se prati preko absorbancije na 280 nm, kao što pokazuje Slika 2. Slika 2A: standardi molekulske težine (tiroglobulin od 670 kDa; gama-globulin od 158 kDa; ovalbumin od 44 kDa; mioglobin od 17 kDa; vitamin B12 od 1,3 kDa). Slika 2B: 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1a; Slika 2C: nemodifikovani IFN-β-1a. 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1a se eluira kao jedan oštar pik, sa prividnom molekulskom težinom od približno 200 kDa, što je saglasno sa velikom hidrodinamičkom zapreminom PEG. Nije opaženo prisustvo agregata. Nemodifikovani IFN-β-1a je detektovan, ali ispod granice kvantitativnog određivanja. Na bazi veličine pika, nemodifikovani IFN-β-1a iznosi 1% ili manje od proizvoda, što je saglasno sa opažanjem pri korišćenju SDS-PAGE.
5. Analiza 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog
IFN-/3-1a pomoću mape peptida.
Specifičnost reakcije PEG-ilovanja je ocenjivana preko mape peptida. Nemodifikovani i 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1 a se razlažu endoproteinazom Lys-C iz Achromobacter-a (Wako Bioproducts), a dobijeni proizvodi cepanja se frakcionišu pomoću HPLC sa reversnom fazom, na koloni Vydac C4, koristeći 30 min gradijent od 0 do 70% acetonitrila u 0,1% TFA. Eluat iz kolone je praćen preko absorbancije na 214 nm.
Svi predviđeni peptidi iz lizata IFN-β-1a pomoću endoproteinaze Lys-C, identifikovani su ranije pomoću sekvencioniranja N-kraja i masenom spektrometrijom (Pepinsky et al., J. Pharmacology and Expen'mental Therapeutics, 2001, 297, 1059), a od ovih, samo je peptid koji sadrži N-kraj IFN-p-1a promenjem modifikovanjem sa 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehidom; što je vidljivo preko njegovog nestanka iz mape peptida. Prema tome, podaci iz mape pokazuju da je PEG ostatak specifično spojen sa ovim peptidom. Ovi podaci još pokazuju da PEG modifikacija cilja na N-kraj proteina, zato što samo modifikacija N-kraja dovodi do specifičnog gubitka ovog peptida.
B) Dobiianje i karakterizaciia 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilproDionaldehid-modifikovanop IFN-/3-1 a
Humani IFN-β-1a je PEG-ilovan sa N-kraja, sa 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilproionaldehidom. Ovaj proizvod hernije redukcionog alkilovanja se koristi za ugrađivanje PEG u skelet IFN-β-1 a, što dovodi do stvaranja aminske veze, koja je krajnje stabilna prema razgradnji. PEG-ilovani IFN-β-1 a se podvrgne ekstenzivnoj karakterizaciji, uključujući analizu SDS-PAGE, SEC, mapu peptida i ocenu aktivnosti u anti-virusnom testu in vitro. Čistoća proizvoda, merena pomoću SDS-PAGE i SEC, bila je veća od 95%. U uzorku PEG-ilovanog IFN-β-1a nije bilo dokaza o agregatima. Zaostali sadržaji nemodifikovanog IFN-β-1 a u proizvodu bili su ispod granice kvantitativnog određivanja, ali smatra se da predstavljaju oko 1% od proizvoda. Specifična aktivnost PEG-lovanog IFN-β-1 a u testu anti-virusne aktivnosti je približno dvostruko smanjenja u odnosu na nemodifikovani IFN-β-1 (EC50 = 31 pg/mL za 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilproionaldehid-modifikovani IFN-β-1 a, u odnosu na EC50 =14 pg/mL za nemodifikovani IFN-β-1 a). Masa PEG-ilovanog IFN-β-1 a se formuliše sa 30 µL/mL u PBS, pH 7,2, koji sadrži 15 mg/mL HSA, slično formulaciji koja se koristi za AVONEX®, koji je bio podvrgnut ekstenzivnoj karakterizaciji. Materijal se isporučuje kao smrznuta tečnost, koja se čuva na -70°C.
Svojstva 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilproionaldehid-modifikovanog IFN-β-1 a su sabrana u Tabeli 2.
1. Dobijanje 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1 a
Razblaži se 80 ml_ neformulisanog AVONEX®-a (IFN-β-1 a masa intermedijara, masa kliničke šarže leka je prošla sve testove za upotrebu humanih bića, sa 254 µL/mL u 100 mM natrijum-fosfatu, pH 7,2, i 200 mM NaCI) sa 96 mL 165 mM MES, pH 5,0, i 400 pL 5 M HCI. Ovaj uzorak se prebaci u kolonu od 1,2 mL SP-Sepharose FF (Pharmacia). Ova kolona se opere sa 6,5 mL 5 mM natrijum-fosfata, sa pH 5,5 i 75 mM NaCI, pa se protein eluira sa 5 mM natrijum-fosfataom, pH 5,5 i 600 mM NaCI. Analiziraju se frakcije od eluiranja, preko njihove absorbancije na 280 nm, pa se ocenjuje koncentracija IFN-β-1 a u uzorcima, korišćenjem vrednosti 1,51 za koeficijent ekstinkcije, u rastvoru od 1 mg/mL. Sakupe se frakcije pika, dajući koncentracije IFN-β-1 a od 4,4 mg/mL. U 2,36 mL sjedinjenog eluata iz SP-Sepharose sa 4,4 mg/mL IFN-β-1a, dodaje se 0,5 M natrijum-fosfat, pH 6,0 do 50 mM, natrijum-cijanoborohidrid (Aldrich) se dodaje do 5 mM, a 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid se dodaje do 10 mg/mL. Uzorak se inkubira 21 h na sobnoj temperaturi, u mraku. PEG-ilovani IFN-β-1a se prečišćava iz ove reakcione smeše na koloni od 8,0 mL SP-Sepharose FF, kao što sledi: razblaži se 9,44 mL reakcione smeše sa 37,7 mL 20 mM MES, pH 5,0, pa se prebaci u kolonu SP-Sepharose. Ova kolona se pere sa natrijum-fosfatom, pH 5,5, 75 mM NaCI, a zatim se PEG-ilovani IFN-β-1a eluira iz kolone sa 25 mM MES, pH 6,4 i 400 mM NaCI. PEG-ilovani IFN-β-1a se dalje prečišćava na koloni Superose 6 FIR 10/30 FPLC sizing, sa 5 mM natrijum-fosfatom, pH 5,5 i 150 mM NaCI, kao mobilnom fazom. Ova kolona za razdvajanje po veličini (25 mL) se ispire sa 24 mL/h, a sakupljaju se frakcije od 0,25 mL. Sjedinjene frakcije od eluiranja se analiziraju na sadržaj proteina, pomoću SDS-PAGE, pa se određuje koncentracija proteina u sjedinjenom eluatu. Koncentracija PEG-ilovanog IFN-β-1a se daje u ekvivalentima IFN, posle podešavanja doprinosa PEG absorbanciji na 280 nm, koristeći za koeficijent ekstinckije 2, pri 1 mg/mL u rastvoru PEG-ilovanog IFN-β-1a. Uzmu se uzorci sakupljenog eluata radi analize, a ostatak se razblaži na 30 µL/mL sa puferom za formulisanje koji sadrži HSA, podeli u alikvote od 0,25 mL/fiola, i čuva na -70°C.
2. U V spektar prečišćenog
20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-/3-1a UV spektar (24O-340 nm) 20 kDa mPEG-O-/7?-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a dobije se korišćenjem uzorka mase koji je prethodno formulisan sa FISA. PEG-ilovani uzorak pokazuje maksimum absorpcije na 278279 nm, a minimum absorpcije na 249-250 nm, što je saglasno sa istim za masu nemodifikovanog intermedijara IFN-β-1a. Koncentracija proteina u PEG-ilovanom proizvodu je ocenjivana iz spektra, koristeći za koeficijent ekstinkcije vrednost S2800,1% = 2,0. Koncentracija proteina PEG-ilovane mase je 0,42 mg/mL. Nije opaženo zamućenje u uzorku, jer nedostaje absorbancija na 320 nm.
3. Karakterizacija 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a pomoću SDS-PAGE
Podvrgne se 2,1 µL 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilproiponaldehid-modifikovanog IFN-β-1a analizi SDS-PAGE, pod redukcionim uslovima, sa 4-20% gradijentom gela. Gel je obojen sa Coomassie-vim brilijant plavim R-250. SDS-PAGE analiza 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a je otkrila jednu glavnu traku, prividne mase 55 kDa, što je saglasno sa modifikacijom sa jednim PEG. U prečišćenom PEG-ilovanom proizvodu otkrivenje nemodifikovani IFN-β-1a; međutim, količina je ispod granice kvantitativnog određivanja. Sadržaj nemodifikovanog IFN-β-1a u preparatu je procenjen da iznosi samo oko 1% od ukupnog proteina.
4. Karakterizacija 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a pomoću hromatografije sa
isključivanjem po veličini (SEC)
Podvrgne se 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-
modifikovanog IFN-β-1a SEC na analitičkoj koloni Superose 6 HR 10/30 FPLC sizing, koristeći PBS, pH 7,2, kao mobilnu fazu. Kolona se ispire sa 24 ml_/h, a eluat se prati preko absorbancije na 280 nm. PEG-ilovani IFN-β-1a se eluira kao jedan oštar pik, bez dokaza o prisustvu agregata (Slika 3).
5. Analiza 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a pomoću mape peptida.
Specifičnost reakcije PEG-ilovanja je ocenjivana preko mape peptida. Lizuje se 13,3 µL nemodifikoanog i 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a sa 20 mas% endoproteinaze Lys-C iz Achromobacter-a (Wako Bioproducts), u PBS koji sadrži 5 mM DTT, 1 mM EDTA, pri pH 7,6, na sobnoj temperaturi, u trajanju 30 h (krajnja zapremina = 100 pL). Zatim se dodaju 4 µL 2M DTT i 100 µL 8M uree, pa se uzorci 1 h inkubiraju na sobnoj temperaturi. Ovi peptidi se odvoje pomoću HPLC sa reversnom fazom, na koloni
Vydac C18 (214TP51), koristeći 70 min gradijent od 0 do 63% acetonitrila u 0,1% TFA. Eluat iz kolone je praćen preko absorbancije na 214 nm.
Svi predviđeni peptidi iz lizata IFN-β-1a pomoću endoproteinaze Lys-C, identifikovani su ranije pomoću sekvencioniranja N-kraja i masenom spektrometrijom (Pepinsky et al., J. Pharmacology and Experimental Therapeutics, 2001, 297, 1059), a od ovih, samo je peptid koji sadrži N-kraj IFN-p-1a promenjem modifikovanjem sa 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehidom; što je vidljivo preko njegovog nestanka iz mape peptida. Prema tome, podaci iz mape pokazuju da je PEG ostatak specifično spojen sa ovim peptidom.Ovi podaci još pokazuju da PEG modifikacija cilja na N-kraj proteina, zato što samo modifikacija N-kraja dovodi do specifičnog gubitka ovog peptida.
C) Pobijanje i karakterizaciia 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanop IFN-β-1a
Humani IFN-β-1a je PEG-ilovan sa N-kraja, sa 20 kDa mPEG-O-p-fenilacet-aldehidom. Ovaj proizvod hernije redukcionog alkilovanja se koristi za ugrađivanje PEG u skelet IFN-β-1 a, što dovodi do stvaranja aminske veze, koja je krajnje stabilna prema razgradnji. PEG-ilovani IFN-β-1a se podvrgne ekstenzivnoj karakterizaciji, uključujući analizu SDS-PAGE, SEC, mapu peptida i ocenu aktivnosti u antivirusnom testu in vitro. Čistoća proizvoda, merena pomoću SDS-PAGE i SEC, bila je veća od 95%. U uzorku PEG-ilovanog IFN-β-1a nije bilo dokaza o agregatima. Zaostali sadržaji nemodifikovanog IFN-β-1a u proizvodu bili su ispod granice kvantitativnog određivanja, ali smatra se da predstavljaju oko 1% od proizvoda. U testu stabilnosti nije dokazana agregacija ili razgradnja 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-β-1a, u puferu Tris od pH 7, 4, nakon 7 dana inkubacije na 37°C. Specifična aktivnost PEG-lovanog I FN-p-1 a u testu anti-virusne aktivnosti je približno dvostruko smanjenja u odnosu na nemodifikovani iFN-p-1 (EC50 = 31 µL/mL za 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-β-1a, u odnosu na EC50 = 14 µL/mL za nemodifikovani IFN-β-1a). Masa PEG-ilovanog IFN-β-1a se formuliše sa 30 µL/mL u PBS, pH 7,3, koji sadrži 14 mg/mL HSA, slično formulaciji koja se koristi za AVONEX®, koji je bio podvrgnut ekstenzivnoj karakterizaciji. Materijal se isporučuje kao smrznuta tečnost, koja se čuva na -70°C.
Svojstva 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-β-1a su sabrana u Tabeli 3.
1. Dobijanje 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifiokvanog !FN-p~1a Razblaži se 20 mL neformulisanog AVONEX®-a (masa IFN-β-1a intermedijara, masa kliničke šarže leka je prošla sve testove za upotrebu humanih bića, sa 250 µL/mL u 100 mM natrijum-fosfatu, pFH 7,2, i u 200 mM NaCI) sa 24 mL 165 mM MES, pH 5,0, i 100 µL 5 M HCI i 24 µL vode. Ovaj uzorak se prebaci u kolonu od 600 µL SP-Sepharose FF (Pharmacia). Ova kolona se opere 2*900 µL sa 5 mM natrijum-fosfatom, sa pH 5,5 i 75 mM NaCI, pa se protein eluira sa 5 mM natrijum-fosfataom, pH 5,5 i 600 mM NaCI. Analiziraju se frakcije od eluiranja, preko njihove absorbancije na 280 nm, pa se ocenjuje koncentracija IFN-β-1a u uzorcima, korišćenjem vrednosti 1,51 za koeficijent ekstinkcije, u rastvoru od 1 mg/mL. Sjedine se frakcije pika, dajući koncentraciju IFN-β-1a od 2,3 mg/mL. U 1,2 mL sjedinjenog eluata IFN-β-1a iz SP-Sepharose, dodaje se 0,5 M natrijum-fosfat, pH 6,0 do 50 mM, natrijum-cijanoborohidrid (Aldrich) se dodaje do 5 mM, a 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid se dodaje do 10 mg/mL. Uzorak se inkubira 18 h na sobnoj temperaturi, u mraku. PEG-ilovani IFN-β-1a se prečišćava iz ove reakcione smeše na koloni od 0, 75 ml_ SP-Sepharose FF, kao što sledi: razblaži se 1, 5 ml_ reakcione smeše sa 7, 5 mL 20 mM MES, pH 5, 0, 7, 5 mL vode i 5 µL 5M HCI, pa se prebaci u kolonu SP-Sepharose. Ova kolona se pere sa natrijum-fosfatom, pPI 5, 5, 75 mM NaCI, a zatim se PEG-ilovani IFN-p-1a eluira iz kolone sa 20 mM MES, pH 6, 0 i 600 mM NaCI. PEG-ilovani IFN-β-1a se dalje prečišćava na koloni Superose 6 HR 10/30 FPLC sizing, sa 5 mM natrijum-fosfatom, pH 5, 5 i 150 mM NaCI, kao mobilnom fazom. Ova kolona za razdvajanje po veličini (25 mL) se ispire sa 20 mL/h, a sakupljaju se frakcije od 0, 5 mL. Jedinjene frakcije od eluiranja se analiziraju na sadržaj proteina, pomoću absorbancije na 280 nm, pa se određuje koncentracija proteina u sjedinjenom eluatu. Koncentracija PEG-ilovanog IFN-β-1a se daje u ekvivalentima IFN, posle podešavanja doprinosa PEG (20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid ima koeficijent ekstinckije na 280 nm jednak 0, 5, u rastvoru od 1mg/mL) absorbanciji na 280 nm, koristeći za koeficijent ekstinckije 2, u rastvoru od 1 mg/mL PEG-ilovanog IFN-β-1a. Uzmu se uzorci sakupljenog eluata radi analize, a ostatak se razblaži na 30 µL/mL sa puferom za formulisanje koji sadrži HSA, i podeli u alikvote od 0, 25 mL/fiola, i čuva na -70°C.
2. U V spektar prečišćenog
20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-/F1a UV spektar (24O-340 nm) 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-β-1a dobije se korišćenjem uzorka mase koji je prethodno formulisan sa HSA. PEG-ilovani uzorak pokazuje maksimum absorpcije na 278-279 nm, a minimum absorpcije na 249-250 nm, što je saglasno sa istim za masu nemodifikovanog intenmedijara IFN-β-1a. Koncentracija proteina u PEG-ilovanom proizvodu je ocenjivana iz spektra, koristeći za koeficijent ekstinkcije vrednost S28o0,1% = 2,0. Koncentracija proteina PEG-ilovane mase je 0,10 mg/mL. Nije opaženo zamućenje u uzorku, jer nedostaje absorbancija na 320 nm.
3. Karakterizacija 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-β-1a pomoću SDS-PAGE
Podvrgne se 2,5 µg 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-β-1a analizi SDS-PAGE, pod redukcionim uslovima, sa 1O-20% gradijentom gela. Gel je obojen sa Coomassie-vim brilijant plavim R-250 i prikazan je na Slici 4 (red A: 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-β-1a; Red B: nemodifikovani IFN-β-1a; Red C: markeri molekulske težine (odozdo na gore: 100 kDA, 68 kDa, 45 kDa, 27 kDa i 18 kDa, respektivno). SDS-PAGE analiza 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-β-1a je otkrila jednu glavnu traku, prividne mase 55 kDa, što je saglasno sa modifikacijom sa jednim PEG. Nisu detektovati viši oblici, koji bi proistekli iz prisustva dodatnih PEG grupa. U prečišćenom PEG-ilovanom proizvodu otkriven je nemodifikovani IFN-β-1a; međutim, količina je ispod granice kvantitativnog određivanja. Sadržaj nemodifikovanog IFN-β-1a u preparatu je procenjen da iznosi samo oko 1% od ukupnog proteina.
4. Karakterizacija 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog !FN-fE1a pomoću hromatografije sa isključivanjem po veličini (SEC)
Podvrgne se 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-β-1a SEC na analitičkoj koloni Superose 6 HR 10/30 FPLC sizing, koristeći PBS, pH 7,2, kao mobilnu fazu. Kolona se ispire sa 20 mL/h, a eluat se prati preko absorbancije na 280 nm, kao što pokazuje Slika 5: Slika 5A: standardi molekulske težine (670 kDa tiroglobulin; 158 kDa gamaglobulin; 44 kDa ovalbumin; 17 kDa mioglobin; 1,3 kDa vitamin B12); Slika 5B: 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-β-1a . PEG-ilovani IFN-β-1a se eluira kao jedan oštar pik, prividne molarne mase od 200 kDa, što je saglasno sa velikom hidrodinamičkom zapreminom PEG. Nema dokaza o prisustvu agregata. Otkriven je nemodifikovani IFN-β-1a u preparatu, ali je bio ispod ganice kvantitativnog određivanja. Na osnovu veličine pika, nemodifikovani IFN-β-1a iznosi 1% proizvoda ili manje, što je saglasno sa opažanjem koje je koristilo SDS-PAGE.
5. Analiza 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-β-1a pomoću mape peptida.
Specifičnost reakcije PEG-ilovanja je ocenjivana preko mape peptida. Lizuju se nemodifikovani i 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-β-1a sa endoproteinazom Lys-C iz Achnomobacter-a (Wako Bioproducts), a prozvodi cepanja se frakcionišu pomoću HPLC sa reversnom fazom, na koloni Vydac C18, koristeći 30 min gradijent od 0 do 70% acetonitrila u 0, 1% TFA. Eluat iz kolone je praćen preko absorbancije na 214 nm.
Svi predviđeni peptidi iz lizata IFN-β-1a pomoću endoproteinaze Lys-C, identifikovani su ranije pomoću sekvencioniranja N-kraja i masenom spektrometrijom (Pepinsky et al., J. Pharmacology and Experimental Therapeutics, 2001, 297. 1059), a od ovih, samo je peptid koji sadrži N-kraj IFN-p-1a promenjem modifikovanjem sa 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehidom; što je vidljivo preko njegovog nestanka iz mape peptida. Prema tome, podaci iz mape pokazuju da je PEG ostatak specifično spojen sa ovim peptidom. Ovi podaci još pokazuju da PEG modifikacija cilja na N-kraj proteina, zato što samo modifikacija N-kraja dovodi do specifičnog gubitka ovog peptida.
6. Stabilnost 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-β-1a Da bi se testirala stabilnost 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-β-1a, uzorci se razblaže na 0,1 µL/mL sa 100 mM puferom Tris-HCI, pH 7,4, pa se inkubiraju do 7 dana na 37°C. Uzorak od 20 µL (2 µL) se uzima u dane 0, 2, 5 i 7, pa se analizira pomoću SDS-PAGE pod redukcionim uslovima, kao što pokazuje Slika 6. Red A: markeri molekulske težine (odozgo na dole: 100 kDa, 68 kDa, 45 kDa, 27 kDa, 18 kDa i 15 kDa, respektivno); Redovi B, C, D i E: mPEG-O-p-fenilacetaldehid modifikovani IFN-β-1a, uzet 0, 2, 5 i 7. dana, respektivno. Nema dokaza o agregaciji ili razgradnji PEG-ilovanog IFN-β-1a, u opažanju čak posle 7 dana, na 37°C.
Primer 3
Specifična aktivnost PEG-ilovanog humanog IFN-B-1a u anti-virusnom testu in vitro
Specifična anti-virusna aktivnost uzoraka PEG-ilovanog IFN-β-1 a testirana je na karcinomu humanih ćelija pluća (ćelije A549), koje su bile izložene virusu encefalomiokarditisa (EMC), korišćenjem metaboličke boje 2,3-bis[2-metoksi-4-nitro-5-sulfo-fenil]-2H-tetrazolijum-5-karboksianilida (MTT; M-5655, Sigma, St. Louis, MO) kao mere metabolički aktivnih ćelija zaostalih posle izlaganja ovom virusu. Ukratko, ćelije A549 se prethodno tretiraju 24 h sa ili nemodifikovanim ili sa PEG-ilovanim IFN-β-1 a (polazi se od 66,7 µL/mL, pa se serijski razblažuje 1,5 puta, do 0,8 µL/mL), pre zaražavanja virusom. Ove ćelije se zatim 2 dana inkubiraju sa EMC virusom, pri razblaženju koje za rezultat daje potpunu smrt ćelije u odsustvu IFN. Ploče se zatim razvijaju sa MTT. Početni rastvor MTT se priprema sa 6 mg/ml_ u PBS, sterilno filtrira, pa se 50 µL ovog rastvora razblažuje u ćelijske kulture (100 µL po bazenčiću). Posle 3O-60 min inkubacije na sobnoj temperaturi, rastvor MTT/medijum se odbaci, ćelije operu sa 100 µL PBS i konačno se rastvori metabolizovana boja sa 100 µL 1,2 M HCI u izopropanolu. Vitalne ćelije (što se određuje prisustvom boje) se kvantitativno određuju preko absorbancije na 450 nm. Podaci se analiziraju nanošenjem absorbancije prema koncentraciji IFN-β-1 a, a aktivnost IFN-β-1 a se defniše koncentracijom pri kojoj je 50% ćelija usmrćeno, tj. sa 50% citopatičkim efektom (EC5O) ili pri 50% od maksimalne OD450. Ovaj test je obavljen osam puta za nemodifkovani iFN-p-1 a, a tri do četiri puta za razne uzorke PEG-ilovanog IFN-β-1a U svakom testu su duplirani podaci za svaku tačku, za svaku koncentraciju proteina. Reprezentativni dijagrami vitalnosti ćelija u odnosu na koncentraciju nemodifikovanog ili PEG-ilovanog IFN-β-1 a prikazani su na Slikama 7A i 7B. Na slici 7A simboli su kao što sledi: nemodifikovani IFN-β-1 a (o), 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1 a (□), 20 kDa mPEG-O-p-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1 a (trouglovi) i 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1 a (rombovi). Na Slici 7B simboli su kao što sledi: nemodfikovani IFN-β-1 a (o), 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-β-1 a (□), 20 kDa mPEG-O-p-fenilpropion-aldehid-modifikovani IFN-β-1a (trouglovi) i 20 kDa mPEG-O-m-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-β-1a (rombovi).
Vrednosti EC50 (koncentracija pri polovini maksimalne zaštite virusa) za IFN-β-1 a modifikovan sa 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehidom, 20 kDa mPEG-O-p-metilfenil-O-2-metilpropionaldehidom, 20 kDa mPEG-O-/77-metilfenil-O-2-metilpropionaldehidom, 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehidom, 20 kDa mPEG-O-p-fenilpropionaldehidom i 20 kDa mPEG-O-m-fenilacetaldehidom, prikazane su na Slici 4. Svi PEG-ilovani IFN-β-1 a su modifikovani i prečišćeni do homogenosti, kao što je suštinski objašnjeno za 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1 a, 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani iFN-p-1a i 20 kDA mPEG-iO-p-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-β-1 a, i opisano gore.
PEG-ilovanih IFN-B-1a, kod pacova
Ženke pacova soja LEVVIS sa kanilom, injektirane su intravenozno ili sa 80 µL/kg nemodifikovanog IFN-β-1a, ili sa 24 µL/kg sledećih PEG-ilovanih IFN-β-1a: 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1 a, 20 kDa mPEG-O-p-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1 a, 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-β-1 a, 20 kDa mPEG-O-p-fenilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1 a, 20 kDa mPEG-O-m-fenilacetaldehid-modifikovani IFN-β-1a i 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1a. I nemodifikovani i PEG-ilovani proteini su formulisani u prisustvu 14-15 mg/mL EISA, kao nosača. Za nemodifiovani protein, krv (0,2 ml_) se dobija kroz kanilu u različitim vremenskim tačkama: neposredno pred ordiniranje, i 0,083, 0,25, 0,5, 1,25, 3 i 5 h posle ordiniranja. Za PEG-ilovane proteine krv (0,2 mL) se dobija kroz kanilu neposredno pred ordiniranje, i 0,083, 0,25, 0,5, 1,25, 3, 24, 48 i 72 h posle ordiniranja. Celokupna krv se sakupi u epruvete za separaciju seruma (Beckton Dickinson No. 365956), pa se inkubiraju 60 min na sobnoj temperaturi da se omogući koagulacija. Koagulisana krv se centrifugira 10 min na 4°C, odvoji serum, i čuva na -70°C do vremena testiranja.
Uzorci seruma se zatim otkrave i testiraju u antivirusnim testovima. Uzorci seruma se razblaže 1:50 u medijumu koji sadrži serum (Dulbecco-ov modifikovani Eagles medijum, koji sadrži 10 vol% seruma goveđeg fetusa, po 100 jed. penicilina i streptomicina i 2 mM L-glutamin), pa se testiraju u anti-Ovirusnim testovima. Uzorci se titrišu u označenim bezenčićima ploče za kultivisanje tkiva sa 96 bazenčića, koji sadrže ćelije karcinoma humanih pluća (A549, CCL-185, ATCC, Rockville, MD). Razblaženja standarda (66,7, 44,4, 29,6, 19,8, 13,2, 8,8, 5,9, 3,9, 2,6, 1,7, 1,2 i 0,8 µL/mL istog oblika IFN-β-1 a, ordiniranih pacovu) i tri uzorka seruma, se testiraju na svakoj ploči. Ćelije A549 se prethodno tretiraju sa razblažeim uzorcima seruma, 24 h pre zaražavanja sa virusom encefalomijelokarditisa (EMC). Posle 2 dana inkubacije virusom, vitalne ćelije se 1 h boje rastvorom MTT (sa 5 mg/mL u fosfatnom puferu), operu fosfatnim puferom i solubilizuju sa 1,2 M HCI u izopropanolu. Bazenčići se zatim očitavaju na 450 nm. Načine se standardne krive nemodifikovanog ili PEG-ilovanog IFN-β-1-a za svaku ploču, pa se koriste za određivanje količine nemodifikovanog ili PEG-ilovanog IFN-β-1-a u savkom uzorku. Farmakokinetički parametri se zatim izračunavaju korišćenjem ne-kompartmentalne analize, sa softverskom verzijom WinNonLin 3,0 ili 3.3.
Slika 8A pokazuje krive koncentracija-vreme za nemodifikovani IFN-β-1a (Gornji dijagram) i za IFN-β-1a modifikovan sa 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehida (donji dijagram), a Slika 8B pokazuje krive koncentracija-vreme sa IFN-β-1a modifikovan sa 20 kDa mPEG-O-p-metilfenil-O-2-metilpropionaldehidom (gornji dijagram) i sa 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehidom (donji dijagram). Tačke podataka su prosečne vrednosti merenja na 3 pacova.
Tabela 5 poazuje farmakokinetičke parametre Cmax (maksimalna opažena koncentracija), Ua (poluvreme eliminisanja) AUC (površna ispod krive), Vss (distribuciona zapremina stacionarnog stanja), brzina čišćenja i MRT (srednje vreme zadržavanja) za nemodifikovani IFN-β-1a i ove oblike PEG-ilovanog IFN-p-1a. Podaci, koji su prikazani na Slikama 8A i 8B i u Tabeli 5 su dobijeni u istom ispitivanju.
Slika 9A pokazuje krive koncentracija-vreme za nemodifikovani IFN-β-1a (gornji dijagram) i IFN-β-1a modifikovan sa 20 kDa mPEG-O-p-fenilproionaldehidom (donji dijagram). Podaci za tačke su srednje vrednosti meranja na 2 pacova. Slika 9B pokazuje krive koncentracija-vreme sa IFN-β-1a modifikovanim sa 20 kDa mPEG-O-m-fenilacetaldehida (gornji dijagram) i sa 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehida (donji dijagram). Podaci za tačke su srednje vrednosti merenja na 3 pacova.
Tabela 6 pokazuje farmakokinetičke parametre za nemodifikovani IFN-β-1a i ove oblike PEG-ilovanog IFN-β-1 a. Podaci prikazani ns Slikama 9A i 9B i u Tabeli 6 dobijeni su u istom ispitivanju, nezavisno od podataka prikazanih na Slikama 8A i 8B i u Tabeli 5.
Kao što je jasno iz podataka prikazanih na Slikama 8A, 8B, 9A i 9B, i u Tabelama 5 i 6, PEG-ilovanje IFN-β-1 a sa molekulima PEG iz ovog pronalaska poboljšava farmakokinetička svojstva IFN-β-1 a. U svim slučajevima PEG-ilovani proteini čiste se iz tela manje brzo, nego nemodifiovani IFN-β-1 a, što se odražava na brzine čišćenja od 3,9-8,3 mL/h/kg, u poređenju sa 16O-170 ml_/h/kg za nemodifikovani protein. Kao posledica umanjenih brzina čišćenja, srednje vreme zadržavanja (MRT) je poraslo od približnoo 1 h za nemodifikovani protein, na 4,8-7,6 h za PEG-ilovane proteine. Slično, poluvreme eliminacije (U 12) je poraslo sa približno 1 h za nemodifikovani protein, na 5,2-13 h za PEG-ilovane proteine. Vrednosti površine ispod krive (AUC) takođe su značajno porasle posle PEG-ilovanja IFN-β-1 a. Za nemodifikovani IFN-β-1 a, AUC je približno 0,5 µLh/mL, dok se za PEG-ilovane proteine vrednosti AUC kreću od približno 3 do 6 µLh/mL, uprkos činjenici da su PEG-ilovani proteini dozirani sa 3,3-puta manjim sadržajem, nego nemodifikovani protein. Maksimalne opažene koncentracije (Cmax) obično su više za nemodifikovani IFN-β-1 a, nego za PEG-ilovane proteine, što reflektuje ordiniranje nižih doza modifikovanih proteina. Za zapeminu distribucije u stacionarnom stanju (Vss), vrenosti za sve PEG-ilovane proteine bile su niže nego za nemodifikovane IFN-β-1 a, što ukazuje na restrikciju njihovog svojstva da uđu u krvotok.
Tabela 5. Farmakokinetićki parametri nemodifikovanog IFN-β-1a, 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a. 20 kDa mPEG-O-p-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a i 20 kDa mPEG-O-p-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-β-1a. posle intravenoznog ordinirania
pacovimaa
3 Prikazani farmakokinetićki podaci za nemodifikovani i PEG-ilovane IFN-β-1 a su dobijeni u istom ispitivanju.
Tabela 6. Farmakokinetićki parametri nemodifikovanog IFN-(3-1a, 20 kDa mPEG-O-p-fenilpropionaldehid-modifikovanog IFN-B-1a. 20 kDa mPEG-O-m-fenilacetaldehid-modifikovanog IFN-B-1a i 20 kDa mPEG-O-m-metilfenil-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-B-1a, posle intravenoznog ordinirania
pacovima3
3 Prikazani farmakokinetićki podaci za nemodifikovani i PEG-ilovane IFN-β-1a su dobijeni u istom ispitivanju.
Komparativna farmakokinetika i farmakodinamika nemodifikovanog i PEG-ilovanog humanog IFN-B-1a kod ne-humanih primata Komparativna ispitivanja sa jednom i ponovljenim dozama su obavljena sa nemodifikovanim i PEG-ilovanim IFN-β-1 a, da bi se odredila njihova relativna stabilnost i aktivnost kod ne-humanih primata. U ovim ispitivanjima poredi se farmakokinetika i farmakodinamika konjugata PEG-ilovanog IFN-β-1 a sa nemodifikovanim IFN-β-1 a, s obzirom na interferencije koje se mogu proširiti na humana bića.
Životnie i postupci 1. isptivanje (ponovljena doza)
Ovo je paralelna grupa ispitivanja ponovljene doze da se oceni uporedna farmakokinetika i farmakodinamika nemodifikovanog IFN-β-1 a i PEG-ilovanog IFN-β-1 a. U ovom ispitivanju se koriste zdravi primati (npr. rezus majmuni). Pre doziranja sve životinje laboratorijski veterinar procenjuje u pogledu znakova bolesti u dva navrata unutar 14 dana, pre ordiniranja testiranog agensa; jedno ocenjivanje mora biti unutar 24 h pre prvog ordiniranja testiranog agensa. Samo zdrave životinje dobijaju testirani agens. Ocenjivanje obuhvata opšte fizičko ispitivanje i isptivanje krvi pre doziranja, za polazni podatak o kliničkoj patologiji i polazni podatak o sadržaju antitela na IFN-β-1 a. Svim životinjama je izmerena masa i telesna temperatura i registrovana 24 h pre ordiniranja testiranog agensa. Uključeno je dvanaest subjekata i podeljeno u grupe od po tri, pa su primili 1 *106 jed/kg nemodifikovanog ili PEG-ilovanog IFN-β-1 a, ali inače identičnog IFN-β-1 a. Ordiniranje je ili potkožnim (sc) ili intravenoznim (iv) putem. Šest mužjaka životinja dobija testirani agens iv puten (3 po tretmanu), a drugih 6 mužjaka životinja dobije testirani agens sc putem (3 po tretmanu). Sve životinje moraju biti bezazlene na tretman sa IFN-β. Svaka životinja se dozira u dva navrata, a doze su razdvojene četiri nedelje. Zapremina doze je 1,0 mL/kg. Za farmakokinetička ispitivanja krv se uzima 0, 0,083, 0,25, 0,5, 1, 1,5, 2, 4, 6, 8, 12, 24, 48, 72 i 96 h nakon svake injekcije. Uzorci krvi za merenje markera biološkog odgovora
izazvanog sa IFN, serumskog neopterina, uzimaju se 0, 24, 48, 72, 96, 168, 336 i 504 h nakon ordiniranja ispitivanog leka. Ocenjivanja tokom perioda ispitivanja obuhvataju klinička posmatranja, obavljena 30 min i 1 h posle doze, u pogledu znakova toksičnosti. Obavljaju se svakodnevna posmatranja u kavezu, a opšti izgled, znakovi toksičnosti, nelagodnosti i promene u ponašanju se registruju. Telesna masa i telesna temperatura se registruju u pravilnim intervalima tokom 21 dan posle doze.
2. ispitivanje (jedna doza)
Ovo je paralelna grupa ispitivanja sa jednom dozom, da se oceni komparativna farmakokinetika i farmakodinamika nemodifikovanog i PEG-ilovanog IFN-β-1a. U ovom ispitivanju se koriste zdravi primati (npr. rezus majmuni). Pre doziranja sve životinje laboratorijski veterinar procenjuje u pogledu znakova bolesti u dva navrata unutar 14 dana, pre ordiniranja testiranog agensa; jedno ocenjivanje mora biti unutar 24 h pre prvog ordiniranja testiranog agensa. Samo zdrave životinje dobijaju testirani agens. Ocenjivanje obuhvata opšte fizičko ispitivanje i isptivanje krvi pre doziranja, za polazni podatak o kliničkoj patologiji i polazni podatak o sadržaju antitela na IFN-β-1a. Svim životinjama je izmerena masa i telesna temperatura i registrovana 24 h pre ordiniranja testiranog agensa. Uključeno je dvadeset subjekata i podeljeno u pet grupa po četiri životinje (2 ženke i 2 mužjaka po grupi), pa su primili 1*106 jed/kg nemodifikovanog ili PEG-ilovanog IFN-β-1a intramuskulamo (im), ili 2*105 jed/kg, 1><106 jed/kg ili 5*106 jed/kg PEG-ilovanog IFN-β-1a intravenozno (iv). Sve životinje moraju biti bezazlene na tretman sa IFN-β. Svaka životinja se dozira u dva navrata, a doze su razdvojene za četiri nedelje. Zapremina doze obično je 1,0 mL/kg. Za farmakokinetička ispitivanja krv se uzima 0, 0,5, 1,2, 4, 6, 8, 12, 24, 36, 48 i 96 h nakon ordiniranja ispitivanog leka. Uzorci krvi za merenje markera biološkog odgovora izazvanog sa IFN, 2’,5’-oligoadenilat sintaze (2’,5’-OAS), uzimaju se 0, 12, 24, 48, 72 i 96 h i 7, 14, 21 i 18 dana nakon ordiiranja ispitivanog leka. Ocenjivanja tokom perioda ispitivanja obuhvataju klinička posmatranja, obavljena 30 min i 1 h posle doze, u pogledu znakova toksičnosti. Obavljaju se
svakodnevna posmatranja u kavezu, a registruju se opšti izgled, znakovi toksičnosti, nelagodnosti i promene u ponašanju. Telesna masa i telesna temperatura se registruju u pravilnim intervalima tokom 28 dana posle doze.
Metode testiranja
Sadržaji IFN-β-1a u serumu se kvantitativno određuju korišćenjem biotesta citopatičkog efekta (CPE). Test CPE meri nivoe anti-virusne aktivnosti posredovane sa IFN. Nivo anti-virusne aktivnosti u uzorku reflektuje broj molekula aktivnog IFN koji se sadrži u tom uzorku u vreme kada se uzima krv. Ovaj pristup je standardna metoda za ocenjivanje farmakokinetike IFN-β. Test CPE detektuje sposobnost IFN-β za zaštiti ćelije karcinoma humanih pluća (A549, #CCL-185, ATCC, Rockville, MD) od citotoksičnosti virusa
encefalomijokarditisa (EMC). Ove ćelije se prethodno inkubiraju 15-20 h sa uzorcima seruma, kako bi se omogućila indukcija i sinteza proteina koji se mogu indukovati sa IFN, koji su odgovorni za antivirusni odgovor. Zatim se doda EMC virus, pa se inkubira još 30 h, pre nego što se obavi ocenjivanje citotoksičnosti korišćenjem bojenja sa kristalvioletom. Interni standard za IFN-β, kao i interni standard za PEG-ilovani IFN-β-1a testiraju se paralelno sa uzorcima u svakoj ploči za testiranje. Ovaj standard se kalibriše prema referentnom standardu prirodnog humanog fibroplasta IFN WHO Second International Standard for Interferon, Human Fibroplast, Gb-23-902-53). Svaka ploča za testiranje sadrži takođe kontrolne bazenčiće za rast ćelija, koji ne sadrže ni IFN-β bilo koje vrste, niti EMC, i kontrolne bazenčiće za virus, koji sadrže ćelije i EMC, ali ne i IFN-β. Kontrolne ploče, koje sadrže standard i uzorke, takođe se pripreme za određivanje efekta, ukoliko ga ima, ovih izoraka na rast ćelija. Ove ploče se boje bez dodavanja virusa. Uzorci i standardi se testiraju u duplikatu na svakoj od dva duplikata ploča za testiranje, dajući četiri tačke za podatak po uzorku. Saopštava se srednja geometrijska koncentracija za ova četiri replikata. Granica detekcije u ovom ispitivanju je 10 jed/ml_. Koncentracije neopterina u serumu se određuju u kliničkim farmakološkim jedinicama, koristeći komercijalno dostupne testove.
Koncentracije u serumu 2’,5’-OAS određivane su u uslužnoj laboratoriji, korišćenjem valjanog, komercijalno-dostupnog testa.
Famnakokinetičke i statističke metode
Softver Rstrip™ (MicroMath, Ine., Salt Lake City, UT) se koristi za fitovanje podataka u farmakokinetičkim modelima. Dobije se kriva srednja geometrijska koncentracija-vreme za svaku grupu. Pošto se rezultati testa iskazuju kao razblaženja, smatra se da geometrijske srednje vrednosti bolje odgovaraju, nego aritmetičke srednje vrednosti. Sadržaji IFN u serumu se podešavaju prema vrednostima sa osnovne linije, a koncentracije seruma koje se nemogu detektovati su na 5 jed/mL, što predstavlja polovinu od donje granice detekcije. Za podatke iv infuzije, fituje se dvodelni iv infuzioni model za koncentracije seruma koje se mogu detektovati u svakom subjektu, pa se SC podaci fituju u dvodelni model za injekcije.
Izračunavaju se sledeći fanmakokinetički parametri:
(i) opažena koncentracija pika , Cmax Ged/mL);
(ii) površina pod krivom od 0 do 48 h, AUC (jedxh/mL) koristeći pravilo trapeza;
(iii) poluvreme eliminacije (h); i iz podataka za iv infuziju (ako se iv koristi);
(iv) poluvreme raspodele (h);
(v) čišćenje (rmL/h/kg)
(vi) prividna zapremina raspodele, Vd (ml/kg).
Za izračunavanje poluvremena eliminacije posle iv i sc injekcije, koristi se softver VVinNonlin (verzija 1,0, Scientific Consulting Ine., Apex, NC). Za neopterin i 2’,5’-OAS, aritmetičke sredine u vremenu se daju za svaku grupu. Izračunava se Emax, maksimalna promena u odnosu na osnovnu liniju. Cmax, AUC i Emax se podvrgavaju jednosmernoj analizi varijancije, da bi se uporedile grupe za doziranje. Cmax i AUC se logaritamski transfonmišu pre analize; iskazuju se geometrijske srednje vrednosti.
Anti-angiogeni efekti PEG-ilovanog humanog IFN-B-1a; svojstvo PEG-ilovanog IFN-β-1a da inhibira in vitro proliferaciiu ćelija endoteliiuma Humane ćelije venskog endotelijuma (Cell Systemsm Cat. 2VO-P75) i humane ćelije dermalnog mikrovaskulamog endotelijuma (Cell Systems, Cat. # 2M1-C25) drže se u kulturi sa kompletom CS-Cmedijuma (Cell Systems, Cat. #4ZO-50O). Ćelije se 24 h pre eksperimenta tripsinizuju, pa resuspenduju u medijumu za testiranje, 90% M199 i 10% serumu goveđeg fetusa (FBS), pa se podese na željenu gustinu ćelija. Ćelije se zatim zaseju na ploče, sa 96 bazenčića obloženih želatinom, i to ili sa 12.500 ćelija/bazenčić ili sa 2.000 ćelija/bazenčić, respektivno. Posle inkubacije preko noći, medijum za testiranje se zameni svežim medijumom, koji sadrži 20 ng/mL humanog rekombinantnog baznog faktora rasta fibroplasta (bFGF) (Becton Dickinson, Cat. # 4006O), pa se dodaju razne koncentracije nemodifikovanog ili PEG-ilovanog IFN-β-1a iz ovog pronalaska, ili pozitivna kontrola (kao pozitivna kontrola može se koristiti endostatin, kao što može i antitelo umesto bFGF). Krajnja zapremina se podesi na 0,5 ml_ na ploči sa 24 bazenčića, ili na 0,2 na ploči sa 96 bazenčića. Posle 72 h ćelije se tripsinizuju, za brojanje na Coultier-u, smrznu za očitavanje fluorescencije na uređaju CyQuant, ili se obeleže sa [3H]-timidinom. U ovom in vitro testu, proveravaju se molekuli PEG-ilovanog humanog IFN-β-1a iz ovog pronalaska u pogledu efekta na proliferaciju ćelija endotelijuma, što može biti indikacija anti-angiogenih efekata in vivo. Videti 0’Reilly et al., Cell, 1997, 88, 277-285.
Primer 7
Modeli in vivo za testiranje anti-angiogenih i neovaskularizacionih efekata PEG-ilovanog humanog IFN-B-1a i PEG-ilovanog glodarskog IFN-B Nemodifikovani IFN-β-1a i 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovani IFN-β-1a su testirani u pogledu njihove sposobnosti da inhibiraju stvaranje radijalno orijentisanih krvnih sudova koji ulaze u periferiju SK-MEL-1 humanih malignih tumora melanoma, kod atimičnih golih homozigotnih miševa (nu/nu).
Ćelije SK-MEL-1 rastu u kulturi do 80% konfluencije, a zatim se inokulira 2*106 ćelija intradermalno (zapremina 0,1 ml_, nultog dana) u slabinu ispod sredine pazuha, tri nedelje starih atimičkih golih homozigotnih (nu/nu) NCR miševa (Taconic, Germantovvn, NY). Posle 24 h (1. dan) svaka od tri grupe miševa primi sledeće potkožne doze: kontrolnog tečnog nosača, nemodifikovanog IFN-βia ili 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog INF-p-1a:
Grupa A: 0,1 ml_ 45,6 mg/mL seruma humanog albumina (kontrolni tečni nosač), samo jedanput 1. dana
Grupa B: 0,1 ml_ 45,6 mg/mL seruma humanog albumina koji sadrži 1 MU (5 µL) nemodifikovanog IFN-β-1a, svakodnevno u dane 1-9, zaključno
Grupa C: 0,1 mL 45,6 mg/mL seruma humanog albumina koji sadrži 1 MU jedinica (10 µL) 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a, jednaput, samo 1. dana
Grupa D: 0,1 mL 45,6 mg/mL seruma humanog albumina (kontrolni tečni nosač) svakodnevno u dane 1-9, zaključno.
Miševi se žrtvuju 10. dana (Avertin, 0,5 mL intraperitonealno), pa se ocenjuje mesto inokulacije tumora u pogledu neovaskularizacije, koje meri nezavisni posmatrač grupe koja se tretira. Boje se krvni sudovi pod fiksiranim uveličanjem, mikroskopa za seciranje. Svaki radijano orijentisan krvni sud, koji ulazi u penferiju tumora broji se kao jedan krvni sud. Svaku grupu čine tri miša.
Kao što pokazuje Slika 10, jedno ordiniranje 1 MU 20 kDa mPEG-O-2-metilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a (grupa C) bilo je efikasno u pogledu smanjenja broja novih krvnih sudova, kao i svakodnevno ordiniranje 1MU nemodifikovanog IFN-β-1a (grupa B). Međutim, efekat 20 kDa mPEG-O-2-petilpropionaldehid-modifikovanog IFN-β-1a je izraženiji ako se uzme u obzir da je svakodnevno ordiniranje samog tečnog nosača imalo neki inhibitorski efekat (uporediti grupu A, kada je tečni nosač dat jedanput, sa grupom D, gde je tečni niosač davan svakodnevno).
Razvijeni su razni drugi modeli, koji se mogu koristiti za testiranje anti-angiogenih i anti-neovaskularizacionih efekata PEG-ilovanih molekula iz ovog proalaska. Neki od ovih modela su opisani u United States Paten-ima 5,733,876 (31. mart 1998: ”Method of inhibiting angiogenesis”) i 5,135,919 (4. avgust 1992: "Method and a pharmaceutical composition for inhibiting of angiogenesis”). Drugi testovi su test horiolantoinske membrane bez ljuske (CAM) koji su predložili Taylor i Folkman, Nature, 1982, 297-307, i Crum et al., Science, 1985, 230. 1375; model anti-angiogeneze je metoda metoda leđne vazdušne kese miša Folkman-a et al., J. Exp. Med. 1971, 133, 275, i test mikrodžepa rožnjače kod pacova Gimbrone-a et al. J. Natl. Cancer Inst. 1974, 52, 413, gde se izaziva vaskularizacija rožnjače kod odraslih mužjaka pacova soja Sprague-Dawley (Charles River, Japan) implantacijom u svaku rožnjaču 500 ng bFGF (goveđi, R&D Systems, Ine.) impregniranog u pelete kopolimera etilen-vinilacetata. Pored toga, postoji model u kome se angiogeneza izaziva u miševima NIH-Swiss ili atimičnim golim (nu/nu) miševima, posle implantacije ćelija MCF-7 karcinoma dojke, ili NIFI-OVCAR-3 karcinoma jajnika, kao što su opisali Lindner i Borden, Int. J. Cancer 1997, 71, 456. Za izazivanje angiogeneze, kao što je opisana gore, mogu se takođe koristiti i drugi sojevi ćelija tumora, kao što su (ali bez ograničavanja) SK-MEL-1 humane ćelije malignog melanoma. Različite doze, sa različitim učestanostima doziranja i u raznom trajanju mogu da se testiraju i za nemodifikovane i PEG-ilovane IFN-β-1a proteine iz ovog pronalaska.
Druge metode testiranja PEG-ilovanog mišjeg i pacovskog IFN-β na anti-angiogene efekte na animalnom modelu su (ali bez ograničavanja) protokoli za odabir novih potencijalnih anti-kancer agenasa, kao što je opisano u originalu u Cancer Chemotherapy Reports, Deo 3, Vol. 3, No. 2, septembar 1972, i u dodatku ”ln Vivo Cancer Models”, 1976-1982, NIH Publication No. 84-2635, februara 1984. Zbog specifičnosti vrste interferona Tip I, da bi se ocenila anti-angiogena aktivnost PEG-ilovanog IFN-β na modelima glodara, generišu se preparati PEG-ilovanih glodarskih IFN-β (npr. miševa i pacova). Ovakve metode odabira su date za primer preko protokola za testiranje ani-angiogenih efekata
PEG-ilovanog mišjeg IFN-β, na potkožno implantiranom Lewis-ovom karcinomu pluća.
Poreklo tumora
Ovaj soj tumora se spontano pojavio 1951, kao karcinom pluća kod miševa C57BL/6.
Pregled procedure testa
Fragment tumora se implantira potkožno u oblast ispod pazuha miša B6D2F1. Agens za testiranje (tj. PEG-ilovani interferon iz ovog pronalaska), ordinira se različitim dozama, potkožno (sc) ili intraperitonealno (ip) tokom više dana posle implantacije tumora. Parametar koji se meri je medijana vremena preživljavanja. Rezultati se iskazuju kao procent vremena preživljavanja prema kontroli.
Životinje
Propagacija:
Testiranje:
Masa:
Pol.
Izvor
C57B/6 miševi B6D2F1 miševi
Miševi su unutar 3 g mase, sa minimalnom težinom d 18 g za mužjake, a 17 g za ženke.
Koristi se jedan pol za sve testirane i kontrolne životinje u jednom eksperimentu.
Isti izvor, ukoliko je moguće, za sve životinje u jednom eksperimentu.
Veličina eksperimenta Deset životinja u testiranoj grupi.
Prenos tumora Propagacija:
Fragment: Prepariše se fragment od 2-4 mm sc donora tumora.
Vreme: 13-15 dana.
Implantira se fragment sc u oblast ispod pazuha, sa punkturom u oblasti prepone.
Mesto:
Testiranje:
Fragment: Prepariše se fragment od 2-4 mm sc donora tumora.
Vreme: 13-15 dana.
Mesto: Implantira se fragment sc u oblast ispod pazuha, sa punkturom u
oblasti prepone.
Procedura testiranja:
Dan 0: Implantira se tumor. Traže se bakterijske kulture. Testira se
jedinjenje pozitivne kontrole u svakom neparno obeleženom eskperimentu. Pripreme se materijali. Svakodnevno se registruju smrti.
Dan 1: Provere se kulture. Ukoliko je zaražena, eksperiment se odbaci.
Nasumice se rasporede životinje. Tretman prema instrukcijama (1. dana i u dane koji slede).
Dan 2: Ponovo se provere kulture. Ukoliko je zaražena, eksperiment se
odbaci.
Dan 5: Izmeri se masa 2. dana i na dan početka testa ocenjivanje
toksičnosti testa.
Dan 14: Kontroliše se dan preprane smrti.
Dan 48: Kontroliše se dan kada se ne uzima.
Dan 60: Završava se i ocenjuje eksperiment. Ispituje se tumor u plućima.
Kontrola kvaliteta
Isplanira se jedinjenje pozitivne kontrole (NSC 26271; Cytoxan sa dozom od 100 mg/kg/injekcija) u svakom neparno-obeleženom eksperimentu, režimi koji su intraperitonealni samo 1. dana. Donja granica testiranja/kontrole za pozitivnu kontrolu je 140%. Prihvatljiva medijana vremena preživljavanja za netretiranu kontrolu je 19-35,6 dana.
Ocenjivanje
Parametar koji se meri je medijana vremena preživljavanja. Izračuna se srednja masa tela životinje 1. dana i 5. dana, izračuna se odnos test/kontrola za sve testirane grupe. Izračunaju se srednja masa tela životinje početnog dana i na dan konačnog ocenjivanja. Izračuna se odnos test/kontrola za sve testirane grupe sa više od 65% preživelih u 5 danu. Vrednost odnosa test/kontrola <86% ukazuje na toksičnost. Povećana razlika u promeni mase tela (testirani minus kontrolni) može se takođe koristiti za ocenjivanje toksičnosti.
Kriterijumi aktivnosti
Početni odnos test/kontrola veći ili jednak 140% smatra se neophodnim za pokazivanje umerene aktivnosti. Reproduktibilan odnos test/kontrola sa vrednošću većom ili jednakom 150% smatra se značajnom aktivnošću.
Primer 8
Modeli in vivo za testiranje anti-proliferativnih i anti-tumorskih efekata PEG-ilovanog humanog IFN-B-1a i PEG-ilovanog glodarskog IFN-B Dostupni su razni modeli in vivo za testiranje anti-proliferativnih i anti-tumorskih efekata nemodifikovanog i PEG-ilovanog humanog IFN-β-1a iz ovog pronalaska. U modelu, koji su opisali Bailon et al., Bioconjugate Chemistry, 2001, 12, 195, atimički goli miševi (Harlan) se potkožno implantiraju sa 2*106 ćelija humanog renalog A498, humanog renalnog ACHN ili humanog renalnog G402, u zadnju slabinu, pa se ostave 3-6 nedelja da se tumor razvije. Zatim se ordinira nemodifikovani ili PEG-ilovani IFN-β-1a sa raznim dozama, sa raznim učestanostima doziranja i raznim trajanjem, pa se meri zapremina tumora i poredi između tretmana. U drugom modelu, koji su opisali Lindner i Borden, u J. Intefenon Cytokine Res. 1997, 17, 681, implantiraju se atimične, gole (nu/nu), sa oofohisterektomijom ženke miševa (BALB), sa 2*1 o6 MCF-7 (plus estradiol), MDA-MB-231, MDA-MB-468 ili BT-20 ćelija humanog karcinoma dojke, ćelija NIH-OVCAR-3 humanog karcinoma jajnika, ćelija HT-29 humanog karcinoma debelog creva ili SK-MEL-1 ili FEMX ćelija humanog malignog melanoma, u kožu koja prekriva mlečne žlezde najbliže pazuhu, pa se ocenjuje veličina tumora u funkciji vremena. Zatim se ordinira nemodifikovani i PEG-iiovani humani IFN-β-1a sa raznim dozama, sa raznim učestanostima doziranja i u raznom trajanju, pa se meri zapremina tumora i poredi između tretmana. Drugi modeli testiranja anti-proliferativnih i anti-tumorskih efekata PEG-ilovanog humanog IFN-β-1a su (ali bez ograničavanja) modeli lokalnog i metastaziranog kancera pluća, koje su opisali Quin et al, u Molecular Therapy, 2001, 4, 356, i modeli ksenografta humanog kolorektanog kancera sa mestatazama na jetri kod golih miševa, koje su opisali Tada et al., u J. Clinical Investigation 2001, 108, 83.
Druge metode testiranja PEG-ilovanog mišjeg i pacovskog IFN-b na anti-proliferativne i anti-tumorske efekte na modelima životinja su (ali bez ograničavanja) mišji model malignog mezotlioma, koji su opisali Odaka et al., u Cancer Res. 2001, 61, 6201, modeli lokalnog i metastaziranog kancera pluća, opisan od Quin et al, u Molecular Therapy, 2001, 4, 356, i modeli kolorektalnog kancera sa metastazom na jetri kod izogenih miševa, koje su opisali Tada et al., u J. Clinical Investigation 2001, 108. 83.
Primer 9
Modeli in vivo za testiranje anti-virusnih efekata PE-ilovanoh mišjeg IFN-B i PEG-ilovanog humanog IFN-b-1a
Dostupan jemišji in vivo model za testiranje efekta nemodifiovanog i PEG-ilovanog mišjeg IFN-β na nivoe virusa humanog hepatitisa B (HBV) kod HBV-transgenih SCID miševa. Larkin et al., Nature Medicine, 1999, 5, 907. U ovom modelu, transgeni SCID miševi, koji nose dimer glava-rep humanog FIBV genoma, imaju detektabilne nivoe replikativnih oblika FIBV i pre-genomske RNK u jetri, i virus FIBV u serumu. Flepatociti iz ovih transgenih miševa su takođe pozitivni na FlbsAg, PlbcAg i PlbxAg proteine, što je indikativno za replikaciju virusa. Primer protokola za poređenje nemodifikovanog i PEG-ilovanog sa mišjim IFN-β u ovom odelu, dat je niže:
30 miševa (5 grupa sa 5 i esktra 5), sa uporedivim titrom virusa, titrišu se u dve nezavisne vremenske tačke (razdvojene najmanje 1 nedelju dana), da se utvrdi osnovna linija titra i da se obezbedi da njihovi titri ostaju konstantni pre doziranja sa mišjim IFN-β. Grupe od 5 miševa se doziraju 3 puta nedeljno (ponedeljak, sreda i petak), potkožno sa sledećim uzorcima, koji su dati u Tabeli 7.
Titri virusa se određuju nedeljno tokom doziranja i nedejno do dvonedeljno tokom 6 meseci nakon doziranja. Konstruišu se krive titar virusa-vreme radi poređenja tretmana životinja sa tečnim nosačem i sa IFN-β, u pogledu čišćenja i ponovnog uspostavljanja titra virusa. Zatim se obavi drugo ispitivanje, sa odgovarajućim dozama nemodifikovanog i PEG-ilovanog mišjeg IFNp, sa 1O-20 miševa u grupi, na ukupno 3O-60 miševa (1O-20 za kontrolu, 1O-20 za nemodifikovani mišji IFN-β i 1O-20 za PEG-ilovani mišji IFN-β). Testiraju se titri virusa kao gore i posle žrtvovanja, analizira se serum na titar virusa, kao i na HbsAg, pomoću SDS-PAGE i VVestem bloting metoda. Uklone se takođe jetre, smrznu i fiksiraju kao što je neophodno, pa se boje na prisustvo HbsAg, HbcAg i HbxAg. Na uzorcima seruma i tkiva mogu se obaviti i drugi odgovarajući histološki, histohemijski ili biohemijski testovi, koji su poznati onima koji su verzirani u stanje tehnike.
Mišji in vivo model je takođe dostupan za testiranje efekta nemodifikovanog i PEG-ilovanog humanog IFN-β-1a na nivoe virusa humanog hepatitisa C (HVC) kod miševa koji nose himerične humane jetre. Mercer et al., Nature Medicine,
2001, 7, 927. U ovom modelu graftuju se normalni humani hepatociti u SCID miševe koji nose plazminogen aktivator transgena (Alb-uPa), pa se ovi miševi inokuliaju serumom iz humanih bića inficiranih raznim genotipovima HCV. Ćelije graftovane humane jetre postaju inficirane ovim virusom i virus se replicira. Nivoi HCV RNK u serumu se kvantitativno odrede pomoću PCR, kao i nivoi pozitivne i negativne (replikativni oblici) RNK u ćelijama jetre. Sledi se odgovarajući protokol ispitivanja, koji je sličan (ali bez ograničavanja) onome koji je opisan gore za nemodifikovani i PEG-ilovani mišji IFN-(3 kod transgenih HBV SCID miševa, da se oceni efikasnost nemodifikovanog i PEG-ilovanog humanog IFN-β-1a u ovom modelu, tj. da se odredi efekat tretmana titra na HCV, histologija jetre, nivoi ALT u serumu, i prisustvo replikativnih oblika HCV u tkivu graftovane humane jetre. Na uzorcima seruma i tkiva mogu se obaviti i drugi odgovarajući histološki, histohemijski ili biohemijski testovi, koji su poznati onima koji su verzirani u stanje tehnike.
Claims (337)
1. Aktivirani polimer polialkilenglikola, koji ima strukturu u skladu sa Formulom I: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; X i Y su, nezavisno, O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; Q je zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, i gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, sulfamoil, sulfonat, silil, etar i alkiltio; R’, Z i Z’ svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, a gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, sulfamoil, sulfonat, silil, etar i alkiltio; R je ostatak pogodan za stvaranje veze između jedinjenja Formule I i biološki aktivnog jedinjenja, ili njegovog prekursora; m je 0 ili 1; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1, 2 ili 3.
2. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 1, naznačen time, što se R bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vmilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
3. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 1, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja vodonik ili C1-C20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca, i a je ceo broj do 4 do 10. 000.
4. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 1, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja ostatak koji je u stanju da formira vezu između jedinjenja Formule I i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10. 000.
5. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 4, naznačen time, što E predstavlja metil.
6. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 4, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
7. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 4, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom III: gde su Q, X, Y, Z, m, i n, svaki nezavisno, već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
8. Aktivirani polimer polialkilenglikota prema Zahtevu 4, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom IV: gde su X, Z i n, svaki nezavisno, već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
9. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 7, naznačen time, što se R” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
10. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 8, naznačen time, što se R’” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
11. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 4, naznačen time, što E predstavlja obeležje koje se može detektovati.
12. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 11, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine radioaktivni izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
13. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 1, naznačen time, što Q predstavlja supstituisani ili nesupstituisani alkaril.
14. Aktivirani polimer polialkilenglikola, koji ima strukturu u skladu sa Formulom la: naznačen time, što su P polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS, SO, SO2, CONR’, SO2NR’ ili NR’; Q je C3-C8 zasićeni ili nezasićeni ciklični alkil ili ciklični heteroalkil (uključujući pripojene biciklične i premošćene biciklične prstenaste strukture), supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, sulfamoil, sulfonat, silil, etar i alkiltio; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sutfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule I i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; m je 0 ili 1; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
15. Aktivirani polimer poiialkilenglikola prema Zahtevu 14, naznačen time, što se R bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
16. Aktivirani polimer poiialkilenglikola prema Zahtevu 14, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja vodonik ili C1-C20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca, i a je ceo broj od 4 do 10. 000.
17. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 14, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja ostatak koji je u stanju da formira vezu između jedinjenja Formule I i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovg prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10. 000.
18. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 17, naznačen time, što E predstavlja metil.
19. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 17, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
20. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 17, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom III: gde su Q, X, Y, Z, m, i n, svaki nezavisno, već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
21. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 17, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom IV: gde su X, Z i n, svaki nezavisno, već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
22. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 20, naznačen time, što se R” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
23. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 17, naznačen time, što se R’” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
24. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 17, naznačen time, što E predstavlja obeležje koje se može detektovati.
25. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 24, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine radioaktivni izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
26. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 14, naznačen time, što Q predstavlja supstituisani ili nesupstituisani alkaril.
27. Aktivirani polimer polialkilenglikola koji ima strukturu u skladu sa Formulom V: Formula V naznačen time, što su P polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS, SO, S02, CONR’, SO2NR’ ili NR’; T1 i T2 svaki nezavisno, odsutni ili zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, fonmil, acil, tiokartonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule V i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio; m je 0 ili 1; d je 0 ili ceo broj od 1 do 4, i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
28. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 27, naznačen time, što se R bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
29. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 27, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja vodonik ili C1-C20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
30. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 29, naznačen time, što E predstavlja metil.
31. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 27, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule V i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
32. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 31, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
33. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 31, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom III: gde su Q zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sutfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; X, Y, Z, m i n, su već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
34. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 31, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom IV: gde su X, Z i n već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
35. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 33, naznačen time, što se R” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
36. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 34, naznačen time, što se R’” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
37. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 31, naznačen time, što E predstavlja obeležje koje se može detektovati.
38. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 37, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine radioaktivni izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
39. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 27, naznačen time, što X i Y, ako su prisutni, predstavljaju kiseonik.
40. Aktivirani polimer polialkilenglikola koji ima strukturu u skladu sa Formulom VI: Formula VI naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; TiiT2svaki nezavisno, odsutni ili zasićena ili nezasićena Ci-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena Ci-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkaril grupa, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio; m je 0 ili 1; d je 0 ili ceo broj od 1 do 4; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
41. Aktivirani polimer polialkilenglikola u skladu sa Zahtevom 40, naznačen time, što ima strukturu u skladu sa Formulom VII: gđe su P polimer polialkilenglikola; Z je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
42. Aktivirani polimer polialkilenglikola u skladu sa Zahtevom 41, naznačen time, što ima strukturu u skladu sa Formulom VIII: gde su: P je polimer polialkilenglikola; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
43. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 42, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja vodonik, C1-C20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca, obelezje koje se može detektovati, ili ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule VIII i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
44. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 42, naznačen time, što se supstituenti na prstenu nalaze u meta ili para položaju.
45. Aktivirani polimer polialkilenglikola koji ima strukturu u skladu sa Zahtevom 40, i koji ima strukturu u skladu sa Formulom IX: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; n i u svaki nezavisno, je nula ili ceo broj od jedan do pet; i Z je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca.
46. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 45, naznačen time, što se supstituenti na prstenu nalaze u meta ili para položaju.
47. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 45, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja vodonik, C1-C20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca, obeležje koje se može detektovati, ili ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IX i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
48. Aktivirani polimer polialkilenglikola, koji ima strukturu u skladu sa Formulom X: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; X je O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR'; R’ je vodonik, zasićena ili nezasićena C-i-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; Z i Z’ pojedinačno su vodonik, zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC^ alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tiofonmijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio, pod uslovom da bar jedan od Z i Z’ nije vodonik; R je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule X i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1, 2 ili 3.
49. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 48, naznačen time, što se R bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
50. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 48, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja vodonik, C-1-C20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca ili obeležje koje se može detektovati, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
51. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 50, naznačen time, što E predstavlja metil.
52. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 48, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule X i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
53. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 52, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
54. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 52, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom III: gde su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR', S02NR’ ili NR’; Q zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfmat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R’ i Z svaki nezavisno su opisani gore; m je 0 ili 1; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
55. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 52, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom IV: gde su X, Z i n, svaki nezavisno, već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
56. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 54, naznačen time, što se R” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
57. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 55, naznačen time, što se R’” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
58. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 50, naznačen time, što E predstavlja obeležje koje se može detektovati.
59. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 57, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine radioaktivni izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
60. Aktivirani polimer polialkilenglikola koji ima strukturu u skladu sa Formulom Xa: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; X je 0, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; R’ je vodonik, zasićena ili nezasićena Ci-C2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkaril grupa, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tiofomnijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio; Z je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićeni ili nezasićeni C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisani ili nesupstituisani alkaril, gde alkil predstavlja zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupa, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar ili alkiltio; R je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule X i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
61. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 60, naznačen time, što se R bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
62. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 60, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu u skladu sa Formulom II: gde E predstavlja vodonik, C1-C20 alkil grupa ravnog Ili račvastog lanca ili obeležje koje se može detektovati, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
63. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 62, naznačen time, što E predstavlja metil.
64. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 60, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule X i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
65. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 64, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
66. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 60, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom III: gde su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su 0, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; Q zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril gmpa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R’ i Z svaki nezavisno, su opisani gore; m je 0 ili 1; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
67. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 64, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom IV: gde su X, Z i n, svaki nezavisno, već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
68. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 66, naznačen time, što se R” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
69. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 67, naznačen time, što se R’” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
70. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 62, naznačen time, što E predstavlja obeležje koje se može detektovati.
71. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 69, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine radioaktivni izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
72. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 60, naznačen time, što ima strukturu u skladu sa Formulom XI: gde su P je polimer polialkilenglikola; i n i Z su već definisani.
73. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 62, naznačen time, što ima strukturu u skladu sa Formulom XII: gde su n, a i Z već definisani.
74. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 73, naznačen time, što Z predstavlja metil.
75. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 73, naznačen time, što je n jednako jedan.
76. Aktivirani polimer polialkilenglikola koji ima strukturu u skladu sa Formulom XIII: naznačen time, što je a ceo broj od 4 do 10.000.
77. Sastav, naznačen time, što sadrži polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 1 i biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
78. Sastav prema Zahtevu 77, naznačen time, što se biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor bira iz grupe koju čine peptid, analog peptida, protein, enzim, mali molekul, boja, lipid, nukleozid, oligonukleotid, analog oligonukleotida, šećer, oligosaharid, ćelija, virus, lipozom, mikročestica, površina i micela.
79. Sastav, naznačen time, što sadrži polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 48 i biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
80. Sastav prema Zahtevu 79, naznačen time, što se biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor bira iz grupe koju čine peptid, analog peptida, protein, enzim, mali molekul, boja, lipid, nukleozid, oligonukleotid, analog oligonukleotida, šećer, oligosaharid, ćelija, virus, lipozom, mikročestica, površina i micela.
81. Sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XIV: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; Q je zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R’, Z i Z’ svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena Ci-C2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor; m je 0 ili 1; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1, 2 ili 3.
82. Sastav prema Zahtevu 81, naznačen time, što se R* formira reakcijom između ostatka koji se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal, i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
83. Sastav prema Zahtevu 81, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu u skladu sa Formulom II: gde E predstavlja vodonik, C1-C20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca ili obeležje koje se može detektovati, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
84. Sastav prema Zahtevu 62, naznačen time, što E predstavlja metil.
85. Sastav prema Zahtevu 60, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule XIV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
86. Sastav prema Zahtevu 85, naznačen time, što E formira vezu sa drugim biološki aktivnim jedinjenjem B.
87. Sastav prema Zahtevu 85, naznačen time, što E formira vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem različitim od B.
88. Sastav prema Zahtevu 85, naznačen time, što E formira dodatnu vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem B.
89. Sastav prema Zahtevu 85, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
90. Sastav prema Zahtevu 85, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom III: gde su Q, X, Y, Z, m i n, svaki nezavisno, već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
91. Sastav prema Zahtevu 85, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom IV: gde su X, Z i n, svaki nezavisno, već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
92. Sastav prema Zahtevu 90, naznačen time, što se R” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
93. Sastav prema Zahtevu 91, naznačen time, što se R’” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
94. Sastav prema Zahtevu 83, naznačen time, što E predstavlja obeležje koje se može detektovati.
95. Sastav prema Zahtevu 94, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine radioaktivni izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
96. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 81, naznačen time, što Q predstavlja supstituisani ili nesupstituisani alkaril.
97. Sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XIVa: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; Q je zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tiofonmijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena CrCaD alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor; m je 0 ili 1; i n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
98. Sastav prema Zahtevu 97, naznačen time, što se R* formira reakcijom između ostatka koji se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal, i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
99. Sastav prema Zahtevu 97, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu u skladu sa Formulom II: gde E predstavlja vodonik, C1-C20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca ili obeležje koje se može detektovati, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
100. Sastav prema Zahtevu 99, naznačen time, što E predstavlja metil.
101. Sastav prema Zahtevu 97, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima struktura u skladu sa Formulom II E - (0-CH2CH2)a - gde E predstavlja ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule XIV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
102. Sastav prema Zahtevu 101, naznačen time, što E formira vezu sa drugim biološki aktivnim jedinjenjem B.
103. Sastav prema Zahtevu 101, naznačen time, što E formira vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem različitim od B.
104. Sastav prema Zahtevu 101, naznačen time, što E formira dodatnu vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem B.
105. Sastav prema Zahtevu 101, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
106. Sastav prema Zahtevu 101, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom III: gde su Q, X, Y, Z, m i n, svaki nezavisno, već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
107. Sastav prema Zahtevu 101, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom IV: gde su X, Z i n, svaki nezavisno, već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
108. Sastav prema Zahtevu 106, naznačen time, što se R” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
109. Sastav prema Zahtevu 106, naznačen time, što se R’” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
110. Sastav prema Zahtevu 99, naznačen time, što E predstavlja obeležje koje se može detektovati.
111. Sastav prema Zahtevu 110, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine radioaktivni izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
112. Aktivirani polimer polialkilenglikola prema Zahtevu 97, naznačen time, što Q predstavlja supstituisani ili nesupstituisani alkaril.
113. Sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XV: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; T-i i T2 nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena CrC20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC^ alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, fornnil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena CrC20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tiofomnijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor; m je 0 ili 1; i d je 0 ili ceo broj od 1 do 4; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
114. Sastav prema Zahtevu 113, naznačen time, što se R* formira reakcijom između ostatka koji se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal, i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
115. Sastav prema Zahtevu 113, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu u skladu sa Formulom II: gde E predstavlja vodonik, C1-C20 aikil grupa ravnog ili račvastog lanca ili obeležje koje se može detektovati, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
116. Sastav prema Zahtevu 115, naznačen time, što E predstavlja metil.
117. Sastav prema Zahtevu 113, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule XV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
118. Sastav prema Zahtevu 117, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
119. Sastav prema Zahtevu 117, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa: gde su Q je zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfmat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; X, Y, Z, m i n, svaki nezavisno, već su definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
120. Sastav prema Zahtevu 117, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom IV: gde su X, z i n, svaki nezavisno, vec detinisam; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
121. Sastav prema Zahtevu 119, naznačen time, što se R” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
122. Sastav prema Zahtevu 120, naznačen time, što se R’” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
123. Sastav prema Zahtevu 115, naznačen time, što E predstavlja obeležje koje se može detektovati.
124. Sastav prema Zahtevu 123, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine radioaktivni izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
125. Sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XVI: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena Ci-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfmat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivan molekul; m je 0 ili 1; d je 0 ili ceo broj od 1 do 4; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
126. Sastav prema Zahtevu 125, naznačen time, što R* predstavlja metilenska grupa, a B je biološki aktivan molekul koji sadrži amino grupu, tako da metilenska grupa formira vezu sa amino grupom na B.
127. Sastav prema Zahtevu 126, naznačen time, što se amin bira iz grupe koju čine amino kraj peptida, amin aminokiseline u bočnom lancu peptida i amin supstituenta za glikozilovanje u glikozilovanom peptidu.
128. Sastav prema Zahtevu 127, naznačen time, što amin predstavlja amino kraj peptida.
129. Sastav prema Zahtevu 128, naznačen time, što peptid predstavlja interferon.
130. Sastav prema Zahtevu 129, naznačen time, što interferon predstavlja interferon-beta.
131. Sastav prema Zahtevu 130, naznačen time, što interferon-beta predstavlja interferon-beta-1a.
132. Sastav prema Zahtevu 125, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XVII: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; Z je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivan molekul; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
133. Sastav prema Zahtevu 132, naznačen time, što R* predstavlja metilen, a B je biološki aktivan molekul vezan peko amina.
134. Sastav prema Zahtevu 133, naznačen time, što amin predstavlja amino kraj peptida.
135. Sastav prema Zahtevu 134, naznačen time, što peptid predstavlja interferon.
136. Sastav prema Zahtevu 135, naznačen time, što interferon predstavlja interferon-beta.
137. Sastav prema Zahtevu 136, naznačen time, što interferon-beta predstavlja interferon-beta-1a.
138. Sastav prema Zahtevu 125, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XVIII: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivan molekul; i
139. Sastav prema Zahtevu 138, naznačen time, što R* predstavlja metilen, a B je biološki aktivan molekul vezan peko amina.
140. Sastav prema Zahtevu 139, naznačen time, što amin predstavlja amino kraj peptida.
141. Sastav prema Zahtevu 140, naznačen time, što peptid predstavlja interferon.
142. Sastav prema Zahtevu 141, naznačen time, što interferon-beta predstavlja interferon-beta-1a.
143. Sastav prema Zahtevu 125, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu u skladu sa Formulom II: gde E predstavlja vodonik, C1-C20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca ili obeležje koje se može detektovati, ili ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule XVI i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
144. Sastav prema Zahtevu 143, naznačen time, što E predstavlja metil.
145. Sastav prema Zahtevu 125, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XIX: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; n i u svaki nezavisno, su nula ili ceo broj od jedan do pet; Z je vodonik ili zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; R* je ostatak za povezivanje; i B je biološki aktivan molekul.
146. Sastav prema Zahtevu 145, naznačen time, što R* predstavlja metilen, a B je biološki aktivan molekul vezan peko amina.
147. Sastav prema Zahtevu 146, naznačen time, što amin predstavlja amino kraj peptida.
148. Sastav prema Zahtevu 147, naznačen time, što peptid predstavlja interferon.
149. Sastav prema Zahtevu 148, naznačen time, što interferon-beta predstavlja interferon-beta-1a.
150. Sastav prema Zahtevu 143, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
151. Sastav prema Zahtevu 143, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom III: Formula III gde su Q je zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfmat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; X, Y, Z, m i n, svaki nezavisno, već su definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
152. Sastav prema Zahtevu 143, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom IV: gde su X, Z i n već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
153. Sastav prema Zahtevu 151, naznačen time, što se R” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
154. Sastav prema Zahtevu 152, naznačen time, što se R’” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
155. Sastav prema Zahtevu 143, naznačen time, što E predstavlja obeležje koje se može detektovati.
156. Sastav prema Zahtevu 155, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine radioaktivni izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
157. Sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XX: Formula XX naznačen time, što su X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR' ili NR’; Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; Q je zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; R*i R** su nezavisno, ostaci za povezivanje; B i B’ su nezavisno, biološki aktivni molekuli; m je 0 ili 1; d je 0 ili ceo broj od 1 do 4; a je ceo broj od 4 do 10.000; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
158. Sastav prema Zahtevu 157, naznačen time, što B i B’ predstavljaju isti biološki aktivan molekul.
159. Sastav prema Zahtevu 157, naznačen time, što B i B’ predstavljaju različite biološki aktivne molekule.
160. Sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXI: naznačen time, što su X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena Ci-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; R*i R** su nezavisno, ostatak za povezivanje; B i B’ su nezavisno, biološki aktivan molekul; m je 0 ili 1; d je 0 ili ceo broj od 1 do 4; a je ceo broj od 4 do 10.000; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
161. Sastav prema Zahtevu 160, naznačen time, što B i B’ predstavljaju isti biološki aktivan molekul.
162. Sastav prema Zahtevu 160, naznačen time, što B i B’ predstavljaju različite biološki aktivne molekule.
163. Sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXII: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; X je O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR' ili NR’; R’ je vodonik, zasićena ili nezasićena C-i-C^ alkilili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tiofomnijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; Z i Z’ svaki nezavisno, je vodonik, zasićena ili nezasićena C-i-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio, pod uslovom da bar jedan od Z i Z’ nije vodonik; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivan molekul; n svaki je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1, 2 ili 3.
164. Sastav prema Zahtevu 163, naznačen time, što se R* formira reakcijom između ostatka koji se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal, i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
165. Sastav prema Zahtevu 163, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu u skladu sa Formulom II: gde E predstavlja vodonik, C1-C20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca ili obeležje koje se može detektovati, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
166. Sastav prema Zahtevu 165, naznačen time, što E predstavlja metil.
167. Sastav prema Zahtevu 163, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule II i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
168. Sastav prema Zahtevu 167, naznačen time, što E vezuje biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, koji su različiti od B.
169. Sastav prema Zahtevu 167, naznačen time, što E formira dodatnu vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem B.
170. Sastav prema Zahtevu 167, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
171. Sastav prema Zahtevu 167, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom III: gde su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su 0, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR' ili NR’; Q je zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkari!, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R’ i Z svakinezavisno, već su opisani gore; m je 0 ili 1; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; i W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil.
172. Sastav prema Zahtevu 167, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom IV: gde su X, Z i n, svaki nezavisno, već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
173. Sastav prema Zahtevu 171, naznačen time, što se R” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
174. Sastav prema Zahtevu 172, naznačen time, što se R’” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
175. Sastav prema Zahtevu 165, naznačen time, što E predstavlja obeležje koje se može detektovati.
176. Sastav prema Zahtevu 175, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine radioaktivni izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
177. Sastav prema Zahtevu 145, naznačen time, što R* predstavlja metilen, a B je biološki aktivan molekul vezan peko amina.
178. Sastav prema Zahtevu 177, naznačen time, što amin predstavlja amino kraj peptida.
179. Sastav prema Zahtevu 178, naznačen time, što peptid predstavlja interferon.
180. Sastav prema Zahtevu 179, naznačen time, što interferon predstavlja interferon-beta.
181. Sastav prema Zahtevu 179, naznačen time, što interferon-beta predstavlja interferon-beta-1a.
182. Sastav koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXIla: naznačen time, što su P je polimer polialkilenglikola; X je 0, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; R’ je vodonik, zasićena ili nezasićena Ci-Cy20y alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etari alkiltio; Z je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivan molekul; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
183. Sastav prema Zahtevu 182, naznačen time, što se R* formira reakcijom između ostatka koji se bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, aknlat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopindin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal, i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
184. Sastav prema Zahtevu 182, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu u skladu sa Formulom II: gde E predstavlja vodonik, C1-C20 alkil grupa ravnog ili račvastog lanca ili obeležje koje se može detektovati, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
185. Sastav prema Zahtevu 184, naznačen time, što E predstavlja metil.
186. Sastav prema Zahtevu 182, naznačen time, što P predstavlja polietilenglikol koji ima strukturu Formule II: gde E predstavlja ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule II i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora, i a je ceo broj od 4 do 10.000.
187. Sastav prema Zahtevu 186, naznačen time, što E vezuje biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor, koji su različiti od B.
188. Sastav prema Zahtevu 186, naznačen time, što E formira dodatnu vezu sa biološki aktivnim jedinjenjem B.
189. Sastav prema Zahtevu 186, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sutfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
190. Sastav prema Zahtevu 186, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom III: gde su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su 0, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; Q je zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R’ i Z svaki nezavisno, već su opisani gore; m je 0 ili 1; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; R” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule III i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora; i W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil.
191. Sastav prema Zahtevu 186, naznačen time, što E ima strukturu u skladu sa Formulom IV: gde su X, Z i n, svaki nezavisno, već definisani; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; i R’” je ostatak pogodan za formiranje veze između jedinjenja Formule IV i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
192. Sastav prema Zahtevu 190, naznačen time, što se R” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
193. Sastav prema Zahtevu 191, naznačen time, što se R’” bira iz grupe koju čine karboksilna kiselina, estar, aldehid, aldehidhidrat, acetal, hidroksi, zaštićeni hidroksi, karbonat, alkenil, akrilat, metakrilat, akrilamid, supstituisani ili nesupstituisani tiol, halogen, supstituisani ili nesupstituisani amin, zaštićeni amin, hidrazid, zaštićeni hidrazid, suksinimidil, izocijanat, izotiocijanat, ditiopiridin, vinilpiridin, jodoacetamid, epoksid, hidroksisukcinimidil, azol, maleimid, sulfon, alil, vinilsulfon, trezil, sulfo-N-sukcinimidil, dion, mezil, tozil ili glioksal.
194. Sastav prema Zahtevu 184, naznačen time, što E predstavlja obeležje koje se može detektovati.
195. Sastav prema Zahtevu 194, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine radioaktivni izotopi, fluorescentni ostaci, fosforescentni ostaci, hemiluminiscentni ostaci i kvantne tačke.
196. Sastav prema Zahtevu 182, naznačen time, što R* predstavlja metilen, a B je biološki aktivan molekul vezan peko amina.
197. Sastav prema Zahtevu 196, naznačen time, što amin predstavlja amino kraj peptida.
198. Sastav prema Zahtevu 197, naznačen time, što peptid predstavlja interferon.
199. Sastav prema Zahtevu 198, naznačen time, što interferon predstavlja interferon-beta.
200. Sastav prema Zahtevu 199, naznačen time, što interferon-beta predstavlja interferon-beta-1a.
201. Sastav prema Zahtevu 182, naznačen time, što ima strukturu u skladu sa Formulom XXIII: gde su n, a, R*, B i Z već definisani.
202. Sastav prema Zahtevu 201, naznačen time, što Z predstavlja metil, a n je jednako jedan.
203. Sastav u skladu sa Formulom XXIV: naznačen time, što su X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02l CONR’, S02NR’ ili NR’; R’ i Z svaki nezavisno, je vodonik, zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; Q je zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tiofonmijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfmat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; R* i R** svaki nezavisno, su ostaci za povezivanje; B i B’ svaki nezavisno, su biološki aktivni molekuli; m je 0 ili 1; a je ce broj od 4 do 10.000; i n svaki je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
204. Sastav prema Zahtevu 203, naznačen time, što B i B’ predstavljaju isti biološki aktivan molekul.
205. Sastav prema Zahtevu 203, naznačen time, što B i B’ predstavljaju različite biološki aktivne molekule.
206. Sastav u skladu sa Formulom XXV: naznačen time, što su X je 0, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; R’ i Z svaki nezavisno, je vodonik, zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil gmpa ravnog ili račvastog lanca; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; R* i R** svaki nezavisno, je ostatak za povezivanje; B i B’ svaki nezavisno, je biološki aktivan molekul; a je ce broj od 4 do 10.000; i n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
207. Sastav prema Zahtevu 206, naznačen time, što B i B’ predstavljaju isti biološki aktivan molekul.
208. Sastav prema Zahtevu 208, naznačen time, što B i B’ predstavljaju različite biološki aktivne molekule.
209. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži sastav prema Zahtevu 77 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
210. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži sastav prema Zahtevu 79 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
211. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži sastav prema Zahtevu 81 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
212. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži sastav prema Zahtevu 113 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
213. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži sastav prema Zahtevu 125 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
214. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži sastav prema Zahtevu 132 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
215. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži sastav prema Zahtevu 157 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
216. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži sastav prema Zahtevu 160 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
217. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži sastav prema Zahtevu 163 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
218. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži sastav prema Zahtevu 201 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
219. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži sastav prema Zahtevu 203 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
220. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži sastav prema Zahtevu 206 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
221. Farmaceutski preparat prema bilo kome od Zahteva 209 do 220, naznačen time, što sadrži dodatno i biološki aktivan agens.
222. Farmaceutski preparat prema Zahtevu 221, naznačen time, što se biološki aktivan agens bira iz grupe koju čine peptid, analog peptida, protein, enzim, mali molekul, boja, lipid, nukleozid, oligonukleotid, analog oligonukleotida, šećer, oligosaharid, ćelija, virus, lipozom, mikročestica, površina i micela.
223. Farmaceutski preparat prema Zahtevu 222, naznačen time, što biološki aktivan agens predstavlja antivirusni agens.
224. Sastav, naznačen time, što predstavlja proizvod reakcije jedinjenja prema Zahtevu 1 i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
225. Sastav prema Zahtevu 222 koji ima strukturu u skladu sa Formulom XIV: gde su sve varijable već definisane, naznačen time, što su R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
226. Sastav, naznačen time, što sadrži proizvod reakcije jedinjenja prema Zahtevu 27 i biološki aktivnog jedinjenja ili njegovog prekursora.
227. Sastav prema Zahtevu 226, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XV: gde su sve varijable već definisane, naznačen time, što su R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
228. Sastav prema Zahtevu 226, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XX: gde su sve varijable već definisane, naznačen time, što su W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju B ili njegovom prekursoru; R** je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R” sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju B’ ili njegovom prekursoru; i B i B’ nezavisno, je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
229. Sastav prema Zahtevu 226, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXI: gde su sve varijable već definisane, naznačen time, što su W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju B ili njegovom prekursoru; R** je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R” sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju B’ ili njegovom prekursoru; B i B’ nezavisno, je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
230. Sastav, naznačen time, što se sastoji od proizvoda reakcije jedinjenja prema Zahtevu 40 sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom.
231. Sastav prema Zahtevu 230, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XVI: gde su sve varijable već definisane, naznačen time, što su R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
232. Sastav, naznačen time, što se sastoji od proizvoda reakcije jedinjenja prema Zahtevu 41 sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom.
233. Sastav prema Zahtevu 232, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XVII: gde su sve varijable već definisane, naznačen time, što su R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
234. Sastav, naznačen time, što se sastoji od proizvoda reakcije jedinjenja prema Zahtevu 42 sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom.
235. Sastav prema Zahtevu 234, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XVIII: gde su sve varijable već definisane, naznačen time, što su R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
236. Sastav, naznačen time, što se sastoji od proizvoda reakcije jedinjenja prema Zahtevu 45 sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom.
237. Sastav prema Zahtevu 236, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XIX: gde su sve varijable već definisane, naznačen time, što su R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
238. Sastav, naznačen time, što se sastoji od proizvoda reakcije jedinjenja prema Zahtevu 48 sa biološki aktivnim jedinjenjem ili njegovim prekursorom.
239. Sastav prema Zahtevu 238, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXII: gde su sve varijable već definisane, naznačen time, što su R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju ili njegovom prekursoru; i B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
240. Sastav prema Zahtevu 238, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXIV: Formula XXIV gde su sve varijable već definisane, naznačen time, što su W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju B ili njegovom prekursoru; R** je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R” sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju B’ ili njegovom prekursoru; i B i B’ nezavisno, su biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
241. Sastav prema Zahtevu 238, koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXV: gde su sve varijable već definisane, naznačen time, što su W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; R* je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju B ili njegovom prekursoru; R** je ostatak za povezivanje koji se formira reakcijom R” sa reaktivnim ostatkom na biološki aktivnom jedinjenju B’ ili njegovom prekursoru; B i B’ nezavisno, je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor.
242. Postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, naznačen time, što se tom pacijentu ordinira efikasna količina sastava koji ima strukturu u skladu sa Formulom XIV: Formula XIV gde su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; Q je zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R’, Z i Z’ svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena Ci-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor; m je 0 ili 1; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1, 2 ili 3.
243. Postupak prema Zahtevu 242, naznačen time, što B predstavlja biološki aktivan peptid.
244. Postupak prema Zahtevu 243, naznačen time, što B predstavlja interferon.
245. Postupak prema Zahtevu 244, naznačen time, što B predstavlja interferon- beta-1-a.
246. Postupak prema Zahtevu 242, naznačen time, što preparat sadrži još i biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens.
247. Postupak prema Zahtevu 246, naznačen time, što se antivirusni agens bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS 14803.
248. Postupak prema Zahtevu 242, naznačen time, što virusnu infekciju predstavlja hronični hepatitis C.
249. Postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, naznačen time, što se tom pacijentu ordinira efikasna količina sastava koji ima strukturu u skladu sa Formulom XIVa: gde su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su 0, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; Q je zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor; m je 0 ili 1; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
250. Postupak prema Zahtevu 249, naznačen time, što B predstavlja biološki aktivan peptid.
251. Postupak prema Zahtevu 250, naznačen time, što B predstavlja interferon.
252. Postupak prema Zahtevu 251, naznačen time, što B predstavlja interferon-beta-1-a.
253. Postupak prema Zahtevu 249, naznačen time, što preparat sadrži još i biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens.
254. Postupak prema Zahtevu 253, naznačen time, što se antivirusni agens bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS 14803.
255. Postupak prema Zahtevu 249, naznačen time, što virusnu infekciju predstavlja hronični hepatitis C.
256. Postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, naznačen time, što se tom pacijentu ordinira efikasna količina sastava koji ima strukturu u skladu sa Formulom XV: gde su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR', S02NR’ ili NR’; Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-Cs ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfmat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril gmpu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfmat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, suifhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, suifhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor; m je 0 ili 1; d je 0 ili ceo broj od 1 do 4; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
257. Postupak prema Zahtevu 256, naznačen time, što B predstavlja biološki aktivan peptid.
258. Postupak prema Zahtevu 257, naznačen time, što B predstavlja interferon.
259. Postupak prema Zahtevu 258, naznačen time, što B predstavlja interferon- beta-1-a.
260. Postupak prema Zahtevu 256, naznačen time, što preparat sadrži još i biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens.
261. Postupak prema Zahtevu 260, naznačen time, što se antivirusni agens bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS 14803.
262. Postupak prema Zahtevu 256, naznačen time, što virusnu infekciju predstavlja hronični hepatitis C.
263. Postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, naznačen time, što se tom pacijentu ordinira efikasna količina sastava koji ima strukturu u skladu sa Formulom XVI: gde su P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena Ci-C2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C-i-Cm alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena Ci-C2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivan molekul; m je 0 ili 1; d je 0 ili ceo broj od 1 do 4; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
264. Postupak prema Zahtevu 263, naznačen time, što B predstavlja biološki aktivan peptid.
265. Postupak prema Zahtevu 264, naznačen time, što B predstavlja interferon.
266. Postupak prema Zahtevu 265, naznačen time, što B predstavlja interferon-beta-1-a.
267. Postupak prema Zahtevu 263, naznačen time, što preparat sadrži još i biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens.
268. Postupak prema Zahtevu 267, naznačen time, što se antivirusni agens bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS 14803.
269. Postupak prema Zahtevu 263, naznačen time, što virusnu infekciju predstavlja hronični hepatitis C.
270. Postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, naznačen time, što se tom pacijentu ordinira efikasna količina sastava koji ima strukturu u skladu sa Formulom XX: gde su X i Y nezavisno, su 0, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena CrC20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; Q je zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* i R** svaki nezavisno, je ostatak za povezivanje; B i B’ svaki nezavisno, su biološki aktivan molekuli; m je 0 ili 1; d je 0 ili ceo broj od 1 do 4; a je ceo broj od 4 do 10.000; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
271. Postupak prema Zahtevu 270, naznačen time, što B predstavlja biološki aktivan peptid.
272. Postupak prema Zahtevu 271, naznačen time, što B predstavlja interferon.
273. Postupak prema Zahtevu 272, naznačen time, što B predstavlja interferon-beta-1-a.
274. Postupak prema Zahtevu 270, naznačen time, što preparat sadrži još i biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens.
275. Postupak prema Zahtevu 274, naznačen time, što se antivirusni agens bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS 14803.
276. Postupak prema Zahtevu 270, naznačen time, što virusnu infekciju predstavlja hronični hepatitis C.
277. Postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, naznačen time, što se tom pacijentu ordinira efikasna količina sastava koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXI: gde su X i Y nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS, SO, SO2, CONR’, S02NR’ ili NR’; Ti i T2 nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfmat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* i R** svaki nezavisno, je ostatak za povezivanje; B i B’ svaki nezavisno, je biološki aktivan molekul; m je 0 ili 1; d je 0 ili ceo broj od 1 do 4; a je ceo broj od 4 do 10.000; i n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
278. Postupak prema Zahtevu 277, naznačen time, što B predstavlja biološki aktivan peptid.
279. Postupak prema Zahtevu 278, naznačen time, što B predstavlja interferon.
280. Postupak prema Zahtevu 279, naznačen time, što B predstavlja interferon-beta-1-a.
281. Postupak prema Zahtevu 277, naznačen time, što preparat sadrži još i biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens.
282. Postupak prema Zahtevu 281, naznačen time, što se antivirusni agens bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS 14803.
283. Postupak prema Zahtevu 277, naznačen time, što virusnu infekciju predstavlja hronični hepatitis C.
284. Postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, naznačen time, što se tom pacijentu ordinira efikasna količina sastava koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXII: gde su P je polimer polialkilenglikola; X je O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; R’ je vodonik, zasićena ili nezasićena C-i-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; Z i Z’ svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-Cs ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio, pod uslovom da bar jedan od Z ili Z’ nije vodonik; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivan molekuli; m je 0 ili 1; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1,2 ili 3.
285. Postupak prema Zahtevu 284, naznačen time, što B predstavlja biološki aktivan peptid.
286. Postupak prema Zahtevu 285, naznačen time, što B predstavlja interferon.
287. Postupak prema Zahtevu 286, naznačen time, što B predstavlja interferon-beta-1-a.
288. Postupak prema Zahtevu 284, naznačen time, što preparat sadrži još i biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens.
289. Postupak prema Zahtevu 288, naznačen time, što se antivirusni agens bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS 14803.
290. Postupak prema Zahtevu 284, naznačen time, što virusnu infekciju predstavlja hronični hepatitis C.
291. Postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, naznačen time, što se tom pacijentu ordinira efikasna količina sastava koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXIla: gde su P je polimer polialkilenglikola; X je O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR', S02NR’ ili NR’; R’ je vodonik, zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfmat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; Z je zasićena ili nezasićena CrC^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio, R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivan molekuli; m je 0 ili 1; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
292. Postupak prema Zahtevu 291, naznačen time, što B predstavlja biološki aktivan peptid.
293. Postupak prema Zahtevu 292, naznačen time, što B predstavlja interferon.
294. Postupak prema Zahtevu 293, naznačen time, što B predstavlja interferon-beta-1-a.
295. Postupak prema Zahtevu 291, naznačen time, što preparat sadrži još i biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens.
296. Postupak prema Zahtevu 295, naznačen time, što se antivirusni agens bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS 14803.
297. Postupak prema Zahtevu 291, naznačen time, što virusnu infekciju predstavlja hronični hepatitis C.
298. Postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, naznačen time, što se tom pacijentu ordinira efikasna količina sastava koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXIV: Formula XXIV gde su X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR' ili NR’; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena Ci-C^ alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; Q je zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* i R** svaki nezavisno, su ostaci za povezivanje; B i B’ svaki nezavisno, je biološki aktivni molekuli; m je 0 ili 1; a je ceo broj od 4 do 10.000; i n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
299. Postupak prema Zahtevu 298, naznačen time, što B predstavlja biološki aktivan peptid.
300. Postupak prema Zahtevu 299, naznačen time, što B predstavlja interferon.
301. Postupak prema Zahtevu 300, naznačen time, što B predstavlja interferon-beta-1-a.
302. Postupak prema Zahtevu 298, naznačen time, što preparat sadrži još i biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens.
303. Postupak prema Zahtevu 302, naznačen time, što se antivirusni agens bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS 14803.
304. Postupak prema Zahtevu 298, naznačen time, što virusnu infekciju predstavlja hronični hepatitis C.
305. Postupak za tretiranje pacijenta podložnog virusnoj infekciji, naznačen time, što se tom pacijentu ordinira efikasna količina sastava koji ima strukturu u skladu sa Formulom XXV: gde su X je O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR' ili NR’; Z svaki nezavisno, je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; R* i R** svaki nezavisno, su ostatak za povezivanje; B i B’ svaki nezavisno, su biološki aktivan molekul; W svaki nezavisno, je vodonik ili C1-C7 alkil; a je ceo broj od 4 do 10.000; i n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
306. Postupak prema Zahtevu 305, naznačen time, što B predstavlja biološki aktivan peptid.
307. Postupak prema Zahtevu 306, naznačen time, što B predstavlja interferon.
308. Postupak prema Zahtevu 307, naznačen time, što B predstavlja interferon-beta-1-a.
309. Postupak prema Zahtevu 305, naznačen time, što preparat sadrži još i biološki aktivan agens koji se bira iz grupe koju čine antivirusni mali molekul, antivirusna nukleinska kiselina i peptidni antivirusni agens.
310. Postupak prema Zahtevu 309, naznačen time, što se antivirusni agens bira iz grupe koju čine ribavirin, levovirin, 3TC, FTC, MB686, zidovudine, acyclovir, gancyclovir, viramide, VX-497, VX-950 i ISIS 14803.
311. Postupak prema Zahtevu 305, naznačen time, što virusnu infekciju predstavlja hronični hepatitis C.
312. Postupak za tretiranje pacijenta pod sumnjom da ima infekciju hepatitisom C, naznačen time, što se tom pacijentu ordinira kombinacija preparata iz bilo kog od Zahteva 209 do 220, i antivirusni agens.
313. Postupak prema Zahtevu 312, naznačen time, što se preparat i antivirusni agens ordiniraju simultano.
314.
315. Postupak prema Zahtevu 312, naznačen time, što se preparat i antivirusni agens ordiniraju naizmenično.
316. Postupak prema Zahtevu 312, naznačen time, što antivirusni agens predstavlja ribavirin.
317. Sastav prema zahtevu 202, naznačen time, što R* je metilen i B je biološki aktivan molekul vezan preko amina.
318. Sastav prema zahtevu 317, naznačen time, što je amin aminski kraj interferon-beta-1a.
319. Upotreba jedinjenja formule XIV u proizvodnji leka za lečenje multiple skleroze, gde je formula XIV predstavljena sa gde P je polimer polialkilengiikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, CO2, COS, SO. S02, CONR’, S02NR' ili NR'; supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R', Z i Z’ svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor; m je 0 ili 1; n svaki nezavisno, je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1,2 ili 3.
320. Upotreba prema zahtevu 319, gde je B interferon-beta.
321. Upotreba jedinjenja formule XV u proizvodnji leka za lečenje multiple skleroze, gde je formula XV predstavljena sa: P je polimer polialkilenglikola; X i Y nezavisno, su O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR', S02NR’ ili NR’; T-i i T2 nezavisno, su odsutni ili zasićena ili nezasićena CrC20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R’ i Z svaki nezavisno, su vodonik, zasićena ili nezasićena CrC20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; L svaki nezavisno, je zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu Ci-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivno jedinjenje ili njegov prekursor; m je 0 ili 1; d je 0 ili ceo broj od 1 do 4; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
322. Upotreba prema zahtevu 321, gde B je interferon-beta.
323. Upotreba jedinjenja prema formuli XVII u proizvodnju leka za lečenje multiple skleroze, gde je formula XVII predstavljena sa
324. gde P je polimer polialkilenglikola; Z je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivan molekul; i n je 0 ili ceo broj od 1 do 5.
325. Upotreba prema zahtevu 324, gde amin je amino kraj peptida i peptid je interferon.
326. Upotreba prema zahtevu 325, gde je preptid interferon-beta-1a.
327. Upotreba jedinjenja formule XIX u proizvodnju leka za lečenje multiple skleroze, gde je formula XIX prikazana kao gde P je polimer polialkilenglikola; n i u svaki nezavisno, su nula ili ceo broj od jedan do pet; Z je vodonik ili zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca; R* je ostatak za povezivanje; i B je biološki aktivan molekul.
328. Upotreba prema zahtevu 327, gde R* je metilen i B je biloški akitivan molekul vezan preko amina.
329.
330. Upotreba prema zahtevu 329, gde je peptid interferon-beta-1a.
331. Upotreba jedinjenja formule XXII u proizvodnju leka za lečenje multiple skleroze, gde je formula XXII prikazana sa gde P je polimer polialkilenglikola; X je O, S, CO, C02, COS, SO, S02, CONR’, S02NR’ ili NR’; R’ je vodonik, zasićena ili nezasićena CrC2o alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, supstituisana ili nesupstituisana aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu CrC2o alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silii, etar i alkiltio; Z i Z’ svaki nezavisno, je vodonik, zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-Cs ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio, pod uslovom da bar jedan od Z i Z’ nije vodonik; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivan molekul; m je 0 ili 1; n svaki je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i p je 1,2 ili 3.
332. Upotreba prema zahtevu 331, gde je B interferon-beta.
333. Upotreba jedinjenja prema formuli XXII u proizvodnju leka za lečenje multiple skleroze, gde je formule XXII prikazana sa gde Z je zasićena ili nezasićena C1-C20 alkil ili heteroalkil grupa ravnog ili račvastog lanca, zasićen ili nezasićen C3-C8 ciklični alkil ili ciklični heteroalkil, zasićena ili nezasićena aril ili heteroaril grupa, ili supstituisan ili nesupstituisan alkaril, gde alkil predstavlja zasićenu ili nezasićenu C1-C20 alkil ili heteroalkaril grupu, gde se supstituenti biraju iz grupe koju čine halogen, hidroksil, karbonil, karboksilat, estar, formil, acil, tiokarbonil, tioestar, tioacetat, tioformijat, alkoksil, fosforil, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, aromatični ostatak, heteroaromatični ostatak, imino, silil, etar i alkiltio; R* je ostatak za povezivanje; B je biološki aktivno jedinjenje; n je 0 ili ceo broj od 1 do 5; i a je ceo broj od 4 do 10 000.
334. Upotreba prema zahtevu 333, gde n je 1 i Z je metil.
335. Upotreba prema zahtevu 333 ili 334, gde R* je metilen i B je biološki aktivan molekul vezan preko amina.
336. Upotreba prema zahtevu 335, gde je amin aminski kraj peptida i peptid je interferon.
337. Upotreba prema zahtevu 336, gde je peptid interferon-beta-1a.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US34991702P | 2002-01-18 | 2002-01-18 | |
| PCT/US2003/001559 WO2003061577A2 (en) | 2002-01-18 | 2003-01-17 | Polyalkylene glycol with moiety for conjugating biologically active compound |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ME00239B true ME00239B (me) | 2011-05-10 |
Family
ID=27613339
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| MEP-356/08A MEP35608A (hr) | 2002-01-18 | 2003-01-17 | Polimerna jedinjenja polialkilena i njihova upotreba |
| MEP-2008-356A ME00239B (me) | 2002-01-18 | 2003-01-17 | Polimerna jedinjenja polialkilena i njihova upotreba |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| MEP-356/08A MEP35608A (hr) | 2002-01-18 | 2003-01-17 | Polimerna jedinjenja polialkilena i njihova upotreba |
Country Status (35)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8017733B2 (me) |
| EP (3) | EP1476181B1 (me) |
| JP (5) | JP2005526151A (me) |
| KR (1) | KR100964411B1 (me) |
| CN (2) | CN1630530A (me) |
| AU (1) | AU2003210564B2 (me) |
| BE (1) | BE2016C040I2 (me) |
| BG (1) | BG66525B1 (me) |
| BR (1) | BRPI0306993B8 (me) |
| CA (4) | CA2473526C (me) |
| CY (2) | CY2016027I2 (me) |
| CZ (1) | CZ2004877A3 (me) |
| DK (2) | DK1476181T3 (me) |
| EA (2) | EA009783B1 (me) |
| EE (1) | EE05509B1 (me) |
| ES (2) | ES2774801T3 (me) |
| FR (1) | FR16C0034I2 (me) |
| GE (2) | GEP20064024B (me) |
| HU (4) | HU230473B1 (me) |
| IL (1) | IL163006A (me) |
| IS (1) | IS2989B (me) |
| LU (1) | LU93162I2 (me) |
| ME (2) | MEP35608A (me) |
| MX (1) | MXPA04006855A (me) |
| NL (1) | NL300826I2 (me) |
| NO (3) | NO339857B1 (me) |
| NZ (1) | NZ534708A (me) |
| PL (2) | PL397261A1 (me) |
| PT (1) | PT3025726T (me) |
| RS (1) | RS55578B1 (me) |
| SI (2) | SI1476181T1 (me) |
| SK (1) | SK3102004A3 (me) |
| UA (1) | UA82184C2 (me) |
| WO (1) | WO2003061577A2 (me) |
| ZA (1) | ZA200406555B (me) |
Families Citing this family (37)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20150246097A9 (en) * | 2002-01-18 | 2015-09-03 | Biogen Idec Ma Inc. | Polyalkylene Polymer Compounds and Uses Thereof |
| CA2473526C (en) * | 2002-01-18 | 2013-10-22 | Biogen Idec Ma Inc. | Polyalkylene polymer compounds and uses thereof |
| AP2005003246A0 (en) | 2002-09-09 | 2005-03-31 | Nektar Therapeutics Al Corp | Water-soluble polymer alkanals |
| US8129330B2 (en) | 2002-09-30 | 2012-03-06 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Polymer conjugates with decreased antigenicity, methods of preparation and uses thereof |
| EP1667708B9 (en) | 2002-12-26 | 2012-10-31 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | POLYETHYLENE GLYCOL CONJUGATES OF INTERFERON-BETA-1b WITH ENHANCED IN VITRO BIOLOGICAL POTENCY |
| US20040136952A1 (en) * | 2002-12-26 | 2004-07-15 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Polymer conjugates of cytokines, chemokines, growth factors, polypeptide hormones and antagonists thereof with preserved receptor-binding activity |
| KR101025143B1 (ko) | 2002-12-31 | 2011-04-01 | 넥타르 테라퓨틱스 | 가수분해상으로 안정한 말레이미드－종결 중합체 |
| US7432331B2 (en) | 2002-12-31 | 2008-10-07 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Hydrolytically stable maleimide-terminated polymers |
| EP2044959A1 (en) | 2003-06-26 | 2009-04-08 | pSivida Inc | In-situ gelling drug delivery system |
| TWI367103B (en) | 2003-06-26 | 2012-07-01 | Psivida Inc | Bioerodible sustained release drug delivery systems |
| EP1758583A2 (en) * | 2004-05-31 | 2007-03-07 | Ranbaxy Laboratories Limited | Arylpiperazine derivatives useful as adrenergic receptor antagonists |
| US7851565B2 (en) | 2004-12-21 | 2010-12-14 | Nektar Therapeutics | Stabilized polymeric thiol reagents |
| WO2006130553A2 (en) * | 2005-06-02 | 2006-12-07 | Schering Corporation | Hcv protease inhibitors |
| SG196786A1 (en) * | 2005-07-08 | 2014-02-13 | Elan Pharm Inc | Preparation of polymer conjugates of therapeutic, agricultural, and food additive compounds |
| EP2019690A2 (en) * | 2006-05-22 | 2009-02-04 | Elan Pharmaceuticals Inc. | Preparation of polymer conjugates of vla-4 antagonists via a mitsunobu's reaction |
| US20100222546A1 (en) * | 2006-11-28 | 2010-09-02 | David Crich | Methods for the preparation of functionalized peptides, proteins and carbohydrates and their conjugates |
| US20090016985A1 (en) * | 2007-07-11 | 2009-01-15 | Enzon Pharmaceuticals, Inc. | Polymeric drug delivery system containing a multi-substituted aromatic moiety |
| CA2693645A1 (en) * | 2007-07-11 | 2009-01-15 | Enzon Pharmaceuticals, Inc. | Polymeric drug delivery systems containing an aromatic allylic acid |
| CL2008002399A1 (es) * | 2007-08-16 | 2009-01-02 | Pharmaessentia Corp | Conjugado sustancialmente puro que posee una porcion polimerica, una porcion proteica (interferon alfa 2b) y un ligante alifatico de 1 a 10 atomos de carbono, util en el tratamiento de las hepatitis b o c. |
| AU2009255994B2 (en) * | 2008-06-05 | 2014-07-17 | Bristol-Myers Squibb Company | Use of pegylated Type III Interferons for the treatment of hepatitis C |
| MX2011001167A (es) * | 2008-07-31 | 2011-04-12 | Pharmaessentia Corp | Conjugados peptido-polimero. |
| GB0823309D0 (en) * | 2008-12-19 | 2009-01-28 | Univ Bath | Functionalising reagents and their uses |
| US20120072207A1 (en) | 2009-06-02 | 2012-03-22 | Panasonic Corporation | Down-mixing device, encoder, and method therefor |
| UA109646C2 (uk) * | 2009-12-10 | 2015-09-25 | Терапевтичне застосування кон'югатів білка з полімером | |
| US20130225789A1 (en) * | 2012-02-29 | 2013-08-29 | Yi Sun | Polyethylene Glycol Having Hetero Multiple Functional Groups |
| US8993614B2 (en) | 2012-03-15 | 2015-03-31 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Substituted pyrrolidine-2-carboxamides |
| KR101475630B1 (ko) * | 2013-05-31 | 2014-12-22 | 동국대학교 산학협력단 | 포도근 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 c형 간염의 예방 또는 치료용 조성물 |
| WO2016013911A1 (ko) * | 2014-07-24 | 2016-01-28 | 에이비온 주식회사 | 페길화된 인터페론 -베타 변이체 |
| RS61128B1 (sr) * | 2014-08-19 | 2020-12-31 | Biogen Ma Inc | Postupak pegilacije |
| GB201419108D0 (en) | 2014-10-27 | 2014-12-10 | Glythera Ltd | Materials and methods relating to linkers for use in antibody drug conjugates |
| JP6820841B2 (ja) | 2014-11-06 | 2021-01-27 | ファーマエッセンティア コーポレイション | ペグ化インターフェロンのための投薬計画 |
| EP3421442B1 (en) * | 2017-06-28 | 2020-08-05 | Construction Research & Technology GmbH | Dispersant for inorganic particles |
| US11472894B2 (en) | 2018-07-23 | 2022-10-18 | Carnegie Mellon University | Enzyme-assisted ATRP procedures |
| WO2020028715A1 (en) | 2018-08-01 | 2020-02-06 | Russell Alan J | Amino-reactive positively charged atrp initiators that maintain their positive charge during synthesis of biomacro-initiators |
| CN109232898A (zh) * | 2018-08-02 | 2019-01-18 | 张玲 | 一种具有抗凝血功能的聚酰亚胺新材料的制备方法 |
| CN111534458B (zh) * | 2020-04-13 | 2022-01-14 | 浙江工业大学 | 无色杆菌tbc-1及其在降解1,3,6,8-四溴咔唑中的应用 |
| CN113716982B (zh) * | 2021-08-24 | 2022-05-06 | 重庆云瑞肥业有限公司 | 一种食品垃圾回收用发酵制肥装置 |
Family Cites Families (81)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3710795A (en) | 1970-09-29 | 1973-01-16 | Alza Corp | Drug-delivery device with stretched, rate-controlling membrane |
| US4179337A (en) | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
| US4002531A (en) | 1976-01-22 | 1977-01-11 | Pierce Chemical Company | Modifying enzymes with polyethylene glycol and product produced thereby |
| DE3262575D1 (en) | 1981-12-23 | 1985-04-18 | Schering Corp | Stabilised interferon formulations and their preparation |
| WO1985003934A1 (fr) * | 1984-03-06 | 1985-09-12 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Proteine modifiee chimiquement et son procede de preparation |
| GB8334102D0 (en) | 1983-12-21 | 1984-02-01 | Searle & Co | Interferons with cysteine pattern |
| DE3572982D1 (en) | 1984-03-06 | 1989-10-19 | Takeda Chemical Industries Ltd | Chemically modified lymphokine and production thereof |
| EP0206448B1 (en) | 1985-06-19 | 1990-11-14 | Ajinomoto Co., Inc. | Hemoglobin combined with a poly(alkylene oxide) |
| US4766106A (en) | 1985-06-26 | 1988-08-23 | Cetus Corporation | Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
| WO1987000056A1 (en) | 1985-06-26 | 1987-01-15 | Cetus Corporation | Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
| US4917888A (en) | 1985-06-26 | 1990-04-17 | Cetus Corporation | Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
| JP2514950B2 (ja) | 1986-03-10 | 1996-07-10 | エフ・ホフマン―ラ ロシユ アーゲー | 化学修飾蛋白質，その製造法および中間体 |
| US4894226A (en) | 1986-11-14 | 1990-01-16 | Cetus Corporation | Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polyproline conjugation |
| US5080891A (en) | 1987-08-03 | 1992-01-14 | Ddi Pharmaceuticals, Inc. | Conjugates of superoxide dismutase coupled to high molecular weight polyalkylene glycols |
| US5135919A (en) | 1988-01-19 | 1992-08-04 | Children's Medical Center Corporation | Method and a pharmaceutical composition for the inhibition of angiogenesis |
| US5116964A (en) | 1989-02-23 | 1992-05-26 | Genentech, Inc. | Hybrid immunoglobulins |
| US5286637A (en) * | 1989-08-07 | 1994-02-15 | Debiopharm, S.A. | Biologically active drug polymer derivatives and method for preparing same |
| US5252714A (en) * | 1990-11-28 | 1993-10-12 | The University Of Alabama In Huntsville | Preparation and use of polyethylene glycol propionaldehyde |
| US5595732A (en) | 1991-03-25 | 1997-01-21 | Hoffmann-La Roche Inc. | Polyethylene-protein conjugates |
| US5281698A (en) | 1991-07-23 | 1994-01-25 | Cetus Oncology Corporation | Preparation of an activated polymer ester for protein conjugation |
| AU3423293A (en) | 1991-12-19 | 1993-07-19 | Baylor College Of Medicine | Pva or peg conjugates of peptides for epitope-specific immunosuppression |
| ZA933926B (en) | 1992-06-17 | 1994-01-03 | Amgen Inc | Polyoxymethylene-oxyethylene copolymers in conjuction with blomolecules |
| US5382657A (en) * | 1992-08-26 | 1995-01-17 | Hoffmann-La Roche Inc. | Peg-interferon conjugates |
| US5262564A (en) | 1992-10-30 | 1993-11-16 | Octamer, Inc. | Sulfinic acid adducts of organo nitroso compounds useful as retroviral inactivating agents anti-retroviral agents and anti-tumor agents |
| US5298410A (en) | 1993-02-25 | 1994-03-29 | Sterling Winthrop Inc. | Lyophilized formulation of polyethylene oxide modified proteins with increased shelf-life |
| US5681811A (en) | 1993-05-10 | 1997-10-28 | Protein Delivery, Inc. | Conjugation-stabilized therapeutic agent compositions, delivery and diagnostic formulations comprising same, and method of making and using the same |
| US5359030A (en) | 1993-05-10 | 1994-10-25 | Protein Delivery, Inc. | Conjugation-stabilized polypeptide compositions, therapeutic delivery and diagnostic formulations comprising same, and method of making and using the same |
| US5874075A (en) | 1993-10-06 | 1999-02-23 | Amgen Inc. | Stable protein: phospholipid compositions and methods |
| US5951974A (en) | 1993-11-10 | 1999-09-14 | Enzon, Inc. | Interferon polymer conjugates |
| PT730470E (pt) | 1993-11-10 | 2002-08-30 | Enzon Inc | Conjugados melhorados de interferao-polimero |
| US5446090A (en) | 1993-11-12 | 1995-08-29 | Shearwater Polymers, Inc. | Isolatable, water soluble, and hydrolytically stable active sulfones of poly(ethylene glycol) and related polymers for modification of surfaces and molecules |
| US5639725A (en) | 1994-04-26 | 1997-06-17 | Children's Hospital Medical Center Corp. | Angiostatin protein |
| US5730990A (en) | 1994-06-24 | 1998-03-24 | Enzon, Inc. | Non-antigenic amine derived polymers and polymer conjugates |
| US5650234A (en) | 1994-09-09 | 1997-07-22 | Surface Engineering Technologies, Division Of Innerdyne, Inc. | Electrophilic polyethylene oxides for the modification of polysaccharides, polypeptides (proteins) and surfaces |
| US5824784A (en) | 1994-10-12 | 1998-10-20 | Amgen Inc. | N-terminally chemically modified protein compositions and methods |
| US5738846A (en) | 1994-11-10 | 1998-04-14 | Enzon, Inc. | Interferon polymer conjugates and process for preparing the same |
| JPH10510516A (ja) | 1994-12-07 | 1998-10-13 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | アレルゲン性を減らしたポリペプチド |
| US5932462A (en) | 1995-01-10 | 1999-08-03 | Shearwater Polymers, Inc. | Multiarmed, monofunctional, polymer for coupling to molecules and surfaces |
| US5672662A (en) | 1995-07-07 | 1997-09-30 | Shearwater Polymers, Inc. | Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications |
| SE9503380D0 (sv) * | 1995-09-29 | 1995-09-29 | Pharmacia Ab | Protein derivatives |
| WO1997014740A1 (en) * | 1995-10-19 | 1997-04-24 | Receptagen Corporation | Discrete-length polyethylene glycols |
| US5702717A (en) | 1995-10-25 | 1997-12-30 | Macromed, Inc. | Thermosensitive biodegradable polymers based on poly(ether-ester)block copolymers |
| US5908621A (en) * | 1995-11-02 | 1999-06-01 | Schering Corporation | Polyethylene glycol modified interferon therapy |
| US5747639A (en) | 1996-03-06 | 1998-05-05 | Amgen Boulder Inc. | Use of hydrophobic interaction chromatography to purify polyethylene glycols |
| AU5773798A (en) | 1997-01-29 | 1998-08-18 | Polymasc Pharmaceuticals Plc | Pegylation process |
| PL335721A1 (en) | 1997-03-05 | 2000-05-08 | Ribogene | Novel methods of screening serving the purpose of identifying the factors of selective hepatitis c virus replication inhibition |
| US5990237A (en) * | 1997-05-21 | 1999-11-23 | Shearwater Polymers, Inc. | Poly(ethylene glycol) aldehyde hydrates and related polymers and applications in modifying amines |
| US7642323B2 (en) | 1997-11-06 | 2010-01-05 | Nektar Therapeutics | Heterobifunctional poly(ethylene glycol) derivatives and methods for their preparation |
| US6448369B1 (en) | 1997-11-06 | 2002-09-10 | Shearwater Corporation | Heterobifunctional poly(ethylene glycol) derivatives and methods for their preparation |
| US6180095B1 (en) | 1997-12-17 | 2001-01-30 | Enzon, Inc. | Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents |
| EP1037649B1 (en) * | 1997-12-17 | 2009-09-30 | Enzon, Inc. | Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents |
| US5985263A (en) | 1997-12-19 | 1999-11-16 | Enzon, Inc. | Substantially pure histidine-linked protein polymer conjugates |
| US5981709A (en) | 1997-12-19 | 1999-11-09 | Enzon, Inc. | α-interferon-polymer-conjugates having enhanced biological activity and methods of preparing the same |
| US5965119A (en) | 1997-12-30 | 1999-10-12 | Enzon, Inc. | Trialkyl-lock-facilitated polymeric prodrugs of amino-containing bioactive agents |
| ATE268609T1 (de) * | 1998-03-12 | 2004-06-15 | Nektar Therapeutics Al Corp | Polyethylenglycolderivate mit benachbarten reaktiven gruppen |
| CN100335503C (zh) | 1998-04-28 | 2007-09-05 | 应用研究系统Ars股份公司 | 多元醇干扰素β偶联物 |
| US6703381B1 (en) | 1998-08-14 | 2004-03-09 | Nobex Corporation | Methods for delivery therapeutic compounds across the blood-brain barrier |
| EA004789B9 (ru) * | 1998-10-16 | 2017-05-31 | Байоджен, Инк. | Полимерные конъюгаты бета-1а-интерферона и их использование |
| CA2376714A1 (en) * | 1999-06-11 | 2001-01-04 | Shearwater Corporation | Hydrogels derived from chitosan and poly(ethylene glycol) or related polymers |
| US6531122B1 (en) | 1999-08-27 | 2003-03-11 | Maxygen Aps | Interferon-β variants and conjugates |
| IL147581A0 (en) | 1999-08-27 | 2002-08-14 | Maxygen Aps | New interferon beta-like molecules |
| US7144574B2 (en) | 1999-08-27 | 2006-12-05 | Maxygen Aps | Interferon β variants and conjugates |
| CA2394980C (en) | 1999-12-22 | 2008-05-13 | Shearwater Corporation | Sterically hindered derivatives of water soluble polymers |
| US6413507B1 (en) * | 1999-12-23 | 2002-07-02 | Shearwater Corporation | Hydrolytically degradable carbamate derivatives of poly (ethylene glycol) |
| ES2367891T3 (es) * | 2000-09-29 | 2011-11-10 | Schering Corporation | Interleucina-10 pegilada. |
| US7053150B2 (en) | 2000-12-18 | 2006-05-30 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Segmented polymers and their conjugates |
| TW593427B (en) | 2000-12-18 | 2004-06-21 | Nektar Therapeutics Al Corp | Synthesis of high molecular weight non-peptidic polymer derivatives |
| EA009771B1 (ru) * | 2001-02-01 | 2008-04-28 | Байоджен Айдек Ма, Инк. | Полипептид нейбластина, способы его получения и применения |
| WO2002074806A2 (en) | 2001-02-27 | 2002-09-26 | Maxygen Aps | New interferon beta-like molecules |
| US7009033B2 (en) | 2001-07-02 | 2006-03-07 | Polymer Source Inc. | Heterofunctional polyethylene glycol and polyethylene oxide, process for their manufacture |
| SI1436012T1 (en) * | 2001-10-18 | 2018-03-30 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of opioid antagonists |
| MXPA04004809A (es) * | 2001-11-20 | 2004-08-11 | Pharmacia Corp | Conjugados de hormona de crecimiento humana modificada quimicamente. |
| US6956135B2 (en) | 2001-12-11 | 2005-10-18 | Sun Bio, Inc. | Monofunctional polyethylene glycol aldehydes |
| KR100488351B1 (ko) | 2001-12-11 | 2005-05-11 | 선바이오(주) | 신규한 폴리에틸렌글리콜-프로피온알데히드 유도체 |
| US6916962B2 (en) | 2001-12-11 | 2005-07-12 | Sun Bio, Inc. | Monofunctional polyethylene glycol aldehydes |
| US7041855B2 (en) | 2001-12-11 | 2006-05-09 | Sun Bio, Inc. | Monofunctional polyethylene glycol aldehydes |
| AU2002357806A1 (en) * | 2001-12-11 | 2003-06-23 | Sun Bio, Inc. | Novel monofunctional polyethylene glycol aldehydes |
| CA2473526C (en) * | 2002-01-18 | 2013-10-22 | Biogen Idec Ma Inc. | Polyalkylene polymer compounds and uses thereof |
| AP2005003246A0 (en) | 2002-09-09 | 2005-03-31 | Nektar Therapeutics Al Corp | Water-soluble polymer alkanals |
| EP1667708B9 (en) | 2002-12-26 | 2012-10-31 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | POLYETHYLENE GLYCOL CONJUGATES OF INTERFERON-BETA-1b WITH ENHANCED IN VITRO BIOLOGICAL POTENCY |
| US20110165122A1 (en) * | 2009-11-10 | 2011-07-07 | The Regents Of The University Of California | Method for targeted and sustained antiviral therapy |
-
2003
- 2003-01-17 CA CA2473526A patent/CA2473526C/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 DK DK03731987.8T patent/DK1476181T3/en active
- 2003-01-17 UA UA20040706173A patent/UA82184C2/uk unknown
- 2003-01-17 HU HU0500457A patent/HU230473B1/hu unknown
- 2003-01-17 CA CA2840490A patent/CA2840490C/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 PL PL397261A patent/PL397261A1/pl unknown
- 2003-01-17 EP EP03731987.8A patent/EP1476181B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 CA CA2952488A patent/CA2952488C/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 CZ CZ2004877A patent/CZ2004877A3/cs unknown
- 2003-01-17 MX MXPA04006855A patent/MXPA04006855A/es active IP Right Grant
- 2003-01-17 EP EP15203017.7A patent/EP3025726B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 EA EA200400962A patent/EA009783B1/ru active Protection Beyond IP Right Term
- 2003-01-17 WO PCT/US2003/001559 patent/WO2003061577A2/en not_active Ceased
- 2003-01-17 HU HUE15203017A patent/HUE047557T2/hu unknown
- 2003-01-17 GE GEAP8365A patent/GEP20064024B/en unknown
- 2003-01-17 ES ES15203017T patent/ES2774801T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 BR BRPI0306993A patent/BRPI0306993B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2003-01-17 EA EA200701386A patent/EA011829B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2003-01-17 RS YU63504A patent/RS55578B1/sr unknown
- 2003-01-17 CA CA2753899A patent/CA2753899C/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 EP EP19203313.2A patent/EP3669887A1/en not_active Withdrawn
- 2003-01-17 HU HUE03731987A patent/HUE028163T2/en unknown
- 2003-01-17 JP JP2003561523A patent/JP2005526151A/ja active Pending
- 2003-01-17 KR KR1020047011171A patent/KR100964411B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 PT PT152030177T patent/PT3025726T/pt unknown
- 2003-01-17 AU AU2003210564A patent/AU2003210564B2/en active Active
- 2003-01-17 CN CNA038057972A patent/CN1630530A/zh active Pending
- 2003-01-17 SK SK310-2004A patent/SK3102004A3/sk not_active Application Discontinuation
- 2003-01-17 ME MEP-356/08A patent/MEP35608A/xx unknown
- 2003-01-17 ES ES03731987.8T patent/ES2566797T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 CN CN2009102081892A patent/CN101700401B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 PL PL372728A patent/PL213322B1/pl unknown
- 2003-01-17 ME MEP-2008-356A patent/ME00239B/me unknown
- 2003-01-17 DK DK15203017T patent/DK3025726T3/da active
- 2003-01-17 EE EEP200400105A patent/EE05509B1/xx unknown
- 2003-01-17 GE GEAP20038365A patent/GEP20074024B/en unknown
- 2003-01-17 SI SI200332472A patent/SI1476181T1/sl unknown
- 2003-01-17 NZ NZ534708A patent/NZ534708A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-01-17 SI SI200332604T patent/SI3025726T1/sl unknown
-
2004
- 2004-07-14 IL IL163006A patent/IL163006A/en active Protection Beyond IP Right Term
- 2004-07-15 IS IS7353A patent/IS2989B/is unknown
- 2004-07-16 US US10/892,830 patent/US8017733B2/en active Active
- 2004-08-10 BG BG108839A patent/BG66525B1/bg unknown
- 2004-08-17 NO NO20043422A patent/NO339857B1/no not_active IP Right Cessation
- 2004-08-17 ZA ZA2004/06555A patent/ZA200406555B/en unknown
-
2009
- 2009-04-30 JP JP2009110274A patent/JP5275125B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2011
- 2011-09-12 US US13/230,080 patent/US8524660B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2012
- 2012-07-05 JP JP2012151745A patent/JP2012255156A/ja active Pending
-
2013
- 2013-01-21 JP JP2013008426A patent/JP2013136756A/ja not_active Abandoned
-
2015
- 2015-07-02 JP JP2015133310A patent/JP6030717B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2015-08-26 NO NO20151082A patent/NO344612B1/no not_active IP Right Cessation
-
2016
- 2016-08-03 LU LU93162C patent/LU93162I2/fr unknown
- 2016-08-04 BE BE2016C040C patent/BE2016C040I2/fr unknown
- 2016-08-05 CY CY2016027C patent/CY2016027I2/el unknown
- 2016-08-11 NL NL300826C patent/NL300826I2/nl unknown
- 2016-08-12 FR FR16C0034C patent/FR16C0034I2/fr active Active
- 2016-08-18 HU HUS1600035C patent/HUS1600035I1/hu unknown
-
2017
- 2017-04-10 NO NO2017013C patent/NO2017013I2/no unknown
-
2020
- 2020-02-06 CY CY20201100115T patent/CY1122841T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ME00239B (me) | Polimerna jedinjenja polialkilena i njihova upotreba | |
| JP2005526151A5 (me) | ||
| AU2003210564A1 (en) | Polyalkylene glycol with moiety for conjugating biologically active compound | |
| US20170049904A1 (en) | Polyalkylene polymer compounds and uses thereof | |
| HK1224185B (en) | Polyalkylene polymer compounds and uses thereof | |
| HK1072721B (en) | Polyalkylene polymer compounds and uses thereof |