LT3417B - Blood coagulation factor xi concentrate and process for the preparing same - Google Patents

Blood coagulation factor xi concentrate and process for the preparing same Download PDF

Info

Publication number
LT3417B
LT3417B LTIP265A LTIP265A LT3417B LT 3417 B LT3417 B LT 3417B LT IP265 A LTIP265 A LT IP265A LT IP265 A LTIP265 A LT IP265A LT 3417 B LT3417 B LT 3417B
Authority
LT
Lithuania
Prior art keywords
factor
filter
concentrate
sodium chloride
buffer
Prior art date
Application number
LTIP265A
Other languages
English (en)
Inventor
Miryana Burnouf
Dominique Dernis
Original Assignee
Aetsrn
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Aetsrn filed Critical Aetsrn
Publication of LTIP265A publication Critical patent/LTIP265A/xx
Publication of LT3417B publication Critical patent/LT3417B/lt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
    • C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
    • C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12N9/6443—Coagulation factor XIa (3.4.21.27)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21027—Coagulation factor XIa (3.4.21.27)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Išradimas apima žmogaus plazmos XI faktoriaus koncentrato, turinčio aukštą specifinį aktyvumą ir skirto terapiniam naudojimui, gavimo būdą.
XI faktorius arba plazmos tromboplastino pirmtakas yra glikoproteinas, kuris sudaro kontaktinės fazės dalį hemostazės mechanizme dėl savo aktyvuojančio veikimo į IX faktorių ir, iš kitos pusės, sudaro fibrinolitinės sistemos dalį dėl savo aktyvuojančio veikimo į plazminogeną.
XI faktoriaus nepakankamumas yra paveldimas ir yra perduodamas kaip recesyvinis autosominis požymis. Šis nepakankamumas yra retas, bet jis paplitęs tarp kai kurių Viduriniųjų Rytų gyventojų.
Kaip ir kitiems faktoriams, kurių nepakankamumas yra valyti terapiniai retas (V, preparatai, neesminiai,
XIII, X faktoriai), gauti iš žmogaus plazmos, yra reti ir o vienintelė pakaitalų terapija naudoja visą plazmą arba krioprecipituotos plazmos frakciją, vienok, tai sąlygoja vienalaikį kitų plazmos baltymų nenaudingų kiekių įleidimą, taigi ir įvairių antrinių esminių reakcijų riziką po daugkartinių injekcijų.
XI faktoriaus valymas eksperimentiškai gali būti sunkiai įgyvendinamas ir tik su sąlyga - naudojant stiprius inhibitorius, kas rodo, jog faktoriaus molekulė yra labai labili. Valymas buvo atliekamas jonų mainų bei afininės chromatografi jos 4 arba 5 stadijų pagalba, kaip pradinę medžiagą naudojant plazmą (Bouma ir Griffin, 1977, J. Biol. Chem., 252, 6432-6437) arba trombocitus (Schiffman ir Yeh, 1990, Thromb. Res., 60, 87-97). Taip pat buvo gautas labai išvalytas jaučio XI faktoriaus preparatas iš 20 1 plazmos, naudojant išsodinimo ir chromatografinius metodus; valymo trukmė - 9 dienos (Koide et ai., 1975, Methods in EnzymologyLT 3417 B
Vienintelis terapiniam ai., 1988, buvo gautas pašalinus aktyvumas
Blood clotting enzymes p. 65-73). preparatas, savo kokybe tinkantis naudojimui, buvo aprašytas (Winkelman et Internat. Congress ISBT-BBTS, London) ir adsorbcijos ant heparinosefarozės pagalba,
VIII ir IX faktorius, bet jo specifinis neviršijo 5 V/mg baltymo, ir jis buvo žymiai užterštas liekamuoju AT III. Pareiškėjai nežinojo kito XI faktoriaus paruošimo būdo, kuris leistų mastu gaminti ir aprūpinti dideliais XI kiekiais, savo kokybe tinkamais plačiam naudoj imui.
pramoniniu faktoriaus terapiniam
Tokiu būdu, išradimo tikslas - sukurti naują valymo būdą, tinkamą labai dideliems plazmos tūriams, kuris per nedidelį lengvai įgyvendinamų pramoniniu mastu stadijų skaičių leistų gauti XI faktoriaus koncentratą, tinkamą naudojimui.
Taigi, šis išradimas apima žmogaus XI faktoriaus koncentratą, kurio paruošimas susideda iš dviejų stadijų: pirmoji - filtracijos - adsorbcijos stadija, kuri pakankamai selektyviai užlaiko XI faktorių, po to jis desorbuoj amas ir apdorojamas antroje stadijoje, chromatografuojant ant katijonų mainų dervos.
XI faktoriaus preparatas gali būti papildomai apdorojamas tirpikliu-detergentu, norint inaktyvuoti virusus; inaktyvavimas atliekamas prieš chromatografijos stadiją, kuri leidžia pilnai pašalinti likusius po šio nukenksminimo produktus.
Šis metodas faktorių, jį plazmos per, kurio 8 vai.
Įgalina gauti tinkamą terapijai XI išskiriant iš apytiksliai 100 1 žmogaus palyginti, trumpą laiką (apie 28 vai.), skiriamos virusų inaktyvacij ai .
Pagal šį išradimą valymo būdas taikomas krioprecipituotos plazmos supernatantui, gaunamam įprastais, gerai žinomais būdais, ir gali būti taikomas 1000-1200 1 tūriams.
Pirma valymo stadija susideda iš krioprecipituotos plazmos supernatanto filtravimo baterijoje su 3 filtruojančiais elementais, kurių porų dydis 0,5-2 μ ir kurie pagrindinai užkrauti neigiamai (Zeta plūs™ CF filtrai, tiekiami Cuno, Process Filtration Products, filialas Commercial Intertech Corp., Meriden, Conn., 06450, žemiau vadinami Kūno filtrai), aprašyti JAV patentuose 4,783,262 ir 4,859,340. Šiuos filtrus sudaro perlitai ir valyta celiuliozė, turinti nedidelius teigiamai užkrautos dervos kiekius, kad sulaikyti konkrečias medžiagas; filtrai yra pilnai laisvi nuo asbesto ir stiklo mikrofibri 1ių. Taip pat gali būti naudojamos kitos filtrų sistemos, esančios pardavime.
Filtrai, adsorbuojantys XI faktorių, plaunami citratfosfatiniu buferiniu tirpalu, susidedančiu iš natrio citrato, dinatrio fosfato, kalio fosfato, natrio chlorido ir dinatrio EDTA; pH nustatomas tarp 5.5 ir 6.5, tinkamiausia pH = 6. Ši filtracijos stadija pašalina didelę dalį plazmos baltymų.
XI faktorius, adsorbuotas ant filtro sluoksnių dėl jų neigiamų krūvių, desorbuoj amas nuo jų, padidinant buferio tirpalo joninę jėgą, reguliuojant galutinę natrio chlorido koncentraciją. Į šį paskutinį buferio tirpalą taip pat dedama nedidelis III antitrombino kiekis (AT III) - 0.1-0.2 V/ml, kad apsaugoti XI faktorių nuo proteazių veikimo.
Po to desorbuota, dializuota ir koncentruota frakcija užnešama ant katijonų derva užkrautos kolonėlės (dažniausiai, sefarozės sulfato geliu), nulygsvarintos buferio tirpalu, susidedančiu iš natrio citrato, natrio chlorido, lizino ir arginino, turinčio pH 5.5-6.5, tinkamiausia pH = 6.
Ši kolonėlė praleidžia likusius užteršiančiuosius baltymus ir virusus inaktyvuojančius agentus.
Šiame išradime buvo atrasta, kad sefarozės sulfato gelis, nelauktai, turi labai didelį XI faktoriaus užlaikymo talpumą (nuo 300 iki 450 v/ml gelio) , kas leidžia išvengti sekančios ultrafiltracijos stadijos, mažinančios išeigą. dar daugiau, adsorbcija ant sefarozės sulfato leidžia atlikti eliuciją praktiškai fiziologiniu tirpalu, kai tuo tarpu kitos dervos (aprašytos aukščiau), kurių pagrindą sudaro sulfopropilo grupės, reikalauja griežtesnių eliucijos sąlygų.
Po to, kai kolonėlė yra praplauta citrat-fosfatiniu buferiu, turinčiu natrio citratą, dinatrio fosfatą, kalio fosfatą, natrio chloridą, liziną ir argininą, kurio pH yra 6.1-6.9, tinkamiausia pH = 6.5, XI faktorius yra desorbuoj amas, padidinus buferio pH iki
7-8, tinkamiausia pH = 7.5, ir padidinus natrio chlorido koncentraciją iki 0.15-0.20 M, tinkamiausia iki 0.17 M.
Nuo XI faktoriaus eliuavimo momento, jis stabilizuojamas, pridedant 0.5-3 v/ml gerai valyto AT III ir 0.5-4 v/ml heparino. Po to tirpalas sterilizuojamas filtracijos būdu, išpilstomas į flakonus ir liofilinamas Įprastu būdu.
Gautas šiuo būdu XI faktorius yra išvalytas daugiau kaip 10,000 kartų pradinės plazmos atžvilgiu.
Pagal ši, būdą gauto XI faktoriaus specifinis aktyvumas yra mažiausiai lygus 100 v/mg baltymų.
Gauto XI faktoriaus aukštas išvalymo laipsnis yra patvirtinamas elektroforeze SDS - poliakrilamido gelyje, biocheminiais tyrimais, o jo nekenksmingumas biologiniais testais su gyvuliais.
Taigi, XI faktoriaus koncentratas, gautas šiuo būdu, yra ypač tinkamas terapiniam naudojimui, ypatingai, pakaitalų terapijoje - Įgimto ir įgyto XI faktoriaus nepakankamumo atvejais.
Sekantis pavyzdys iliustruoja šio išradimo įgyvendinimo variantą, neapribojant, vienok, išradimo apimties.
Pavyzdys
Pradinė medžiaga
Kiekviena XI faktoriaus partija yra paruošiama iš apytiksliai 1000 1 standartiniu būdu paruošto žmogaus plazmos krioprecipituoto supernatanto. Krioprecipituotas supernatantas yra paruošiamas iš užšaldytos 60 C temperatūroje šviežios plazmos, ją atsargiai atšildant prie 4 C ir centrifuguojant, kad atsiskirtų krioprecipitatas ir supernatantas.
Pirma valymo stadija
Krįoprecipituotas supernatantas yra praleidžiamas per Kūno filtrų elementus, baterijose išdėstytus po tris. Naudojami arba 0.5-1 μ (50 S tipas), arba 1-2 μ (30 S tipas) filtrai.
Filtruojantys elementai, pašalinus filtratą, turintį daugumą krioprecipituoto supernatanto baltymų, buvo plaunami citratfosfatiniu buferiu, turinčiu 5 mM natrio citrato, 5 mM dinatrio fosfato, 5 mM kalio fosfato, 0.065 M natrio chlorido ir 0.5 mM dinatrio EDTA; citrinų rūgštimi nustatomas pH = 6.
Ant filtro sluoksnių buvo stebima, palyginti, selektyvinė XI faktoriaus adsorbcija.
XI faktorius nuo filtrų buvo desorbuoj amas, padidinus plaunančio buferio joninę jėgą iki 1 M NaCl koncentracijos. Kad apsaugoti XI faktorių nuo liekamųjų plazmos proteazių veikimo, į ji, buvo taip pat pridedama 0.2 v/ml AT III; buferio EDTA taip pat dalyvauja šiame apsauginiame veikime.
Tokiu būdu surinktas XI faktoriaus tirpalas yra 30 kartų koncentruojamas ir dialįzuojamas, norint pašalinti EDTA, naudojant Miliipore™ ultrafiltracijos sistemą, sudarytą iš 10 kasečių su 10 K membranomis.
Dializės buferio sudėtis: 5 mM natrio citrato, 0.14 M natrio chlorido, 5.5 mM L-lizino ir 20 mM L-arginino; pH = 6.
Dializuotas tirpalas yra leidžiamas per DSLK2NLP (PALLm) 0.45 μ filtrą, norint ją nuskaidrinti ir pašalinti bet kokius bakterinius teršalus.
Virusų inaktyvacija
Tirpalas, turintis XI faktorių, yra apdorojamas 11rpikliu-detergentu, žinomu savo efektyvumu prieš virusus su lipidų apvalkalėliais (Horrowitz et ai., 1985, Transfusion 25, 516-522); inkubacija vykdoma 8 vai. 25 C temperatūroje, esant 0,3 % tri-nbutilfosfato (TnBP) ir 1 % Tween1 o 80.
Antra valymo stadija
Naudojama chromatografinė kolonėlė su katijonų mainų derva, dažniausiai, su sefarozės sulfato greitos srovės™ geliu (tiekiama Pharmacia firmos, Uppsala, Sweden).
Kolonėlė yra nulygsvarinama aukščiau aprašytu dializės buferiu.
Baltymų tirpalu užkrovus kolonėlę, jį praplaunama praplovimo buferio 10-15 tūriais, kad pašalinti silpnai adsorbuotus baltymus ir virusus inaktyvuojančius agentus. Šis praplovimo buferis susideda iš 10 mM natrio citrato, 5 mM dinatrio fosfato, 5 mM kalio fosfato, 0.12 M natrio chlorido, 27 mM lizino ir 11.5 mM arginino; pH = 6.5.
Nulygsvarinančio, praplaunančio ir eliucijos buferių srovės linijinis greitis yra 50 cm/val.
XI faktorius iš kolonėlės yra eliuuojamas, padidinus buferio pH iki 7.5 ir NaCl koncentraciją iki 0.17 M.
Nuo XI faktoriaus eliucijos pradžios, į jį pridedama 2 v/ml AT III (t.y., apytiksliai 1.5-2.5 % nuo f XI kiekio) ir 5 v/ml heparino (t.y., 1.5-2.5 % nuo f XI kiekio), kad jį stabilizuoti (abu produktai yra labai švarūs ir kokybe tinkami žmonių injekcijoms).
Taip paruoštas XI faktoriaus tirpalas yra sterilizuojamas filtruojant per DSLK1NFZP(PALL™) 0.22 μ filtrą, fasuojamas (10 ml/flakonui) ir 1iofi 1inamas.
XI faktoriaus koncentrato biocheminiai ir biologiniai tyrimai
Buvo tiriama paeiliui 6 partijos.
IX faktoriaus specifinis aktyvumas yra 130-150 v/mg baltymų (t.y., f XI + AT III) . Prieš pridedant AT III, specifinis aktyvumas yra 210 v/mg.
XI faktorius, kuris prieš liofilinimą buvo nureguliuotas iki apytiksliai 100-120 v/ml, turėjo 90110 v/ml koaguliavimo aktyvumą.
Sekančios 1 ir 2 Lentelės pateikia valyto produkto charakterist i kas.
LENTELĖ
XI faktoriaus išskyrimas ir valymo frakcijų švarumas (6 partijų vidurkis)
Frakci j os Išeiga (%) Speci finis aktyvumas (v/mg) Išvalymo laipsnis (kartai)
Eliuatas po Kūno filtrų 37 12 *800
Po tirpiklio-detergento apdorojimo 98 12
Eliuatas po S-Sefarozės chromatograf i jos 62 210 *14000
LENTELĖ
Liofilizuoto XI faktoriaus charakteristikos (6 partijų vidurkis)
Baltymų kiekis
XI faktorius (v/ml)
Specifinis aktyvumas (v/mg)
Cl-inhibitorius*
Fibronektinas*
Alfa 2-makroglobulinas*
Ig G*
Albuminas
F ibrinogenas
NAPPT (skiedimas 1/10)
NAPPT (skiedimas 1/100)
NAPPT (1/10)**
NAPPT (1/100)**
FCT (20 C)
FCT (37 C)
0.7-1.1
90-110 (po AT III pridėjimo) 130-150
0.34
0.46
0.13
0.18 <0.0006 <0.002 >600
221
166
216 >24h >6h * Išreikšta mg/1000 vf XI ** Skiedimai, nustatyti po heparino neutralizavimo ’ 0
Kaip parodyta 1 Lentelėje, adsorbcija ant filtro sluoksnių Įgalino atskirti XI faktorių nuo daugumos plazmos baltymų, gaunant 12 V XI faktoriaus / mg baltymo. Šis specifinis aktyvumas atitinka maždaug 800 kartų išvalymo laipsni,, lyginant su pradine plazma.
Dalinai valyto XI faktoriaus chromatografavimas ant
S-Sefarozės padidino specifini, aktyvumą iki > 200 v/mg, kas atitinka > 14000 kartų išvalymo laipsni,, lyginant su plazma. Plovimo stadija prieš XI faktoriaus eliuaciją, atliekama padidinus buferio pH, padeda padidinti išvalymą, pašalinant dali, užteršiančių j ų baltymų, daugiausia fibronektiną. Šiomis sąlygomis gelio imlumas XI faktoriaus atžvilgiu buvo apie 300 v/ml, o baltymų atžvilgiu - apie 36 mg/ml.
Šie rezultatai yra palyginami su terapiniais Vtfinkelman 10 ir kt . preparatais (Internat. Congr. ISBT-BBTS-London
1988, Abstract No. P. M. 4.15), kurių specifinis aktyvumas yra apie 5 v/mg baltymo ir turi ekvivalentines AT III dozes.
Mažas užteršiančių baltymų kiekis (išskyrus specialiai pridėtą AT III) yra patvirtintas imunonefelometriškai.
Elektroforezė SDS-poliakr ilamido gelyje rodo vieną didelę juostą prie 160 KDa ir vieną mažą juostą prie
62 KDa, kuri atitinka AT III. Po baltymų redukcijos β-merkaptoetanoliu nedetektuojama jokia juosta 50-30 KDa srityje, kas rodo, kad XI faktoriaus molekulės nebuvo aktyvuojamos valymo proceso eigoje (Bouma ir Griffin, 1986, Blood Coagulation, Ed. Hemker pp 103-128).
Liekamajam užterštumui, sąlygojamam koaguliacijos faktorių ir kinino sistemos komponentų, kruopščiai kontroliuoti buvo naudojami klasikiniai metodai.
Sukūrus liofilintą preparatą, buvo atlikti klasikiniai testai su gyvuliais, nustatant leistinas organizmui dozes:
- trombogeniškūmo testas su triušiais, hipotenzijos testas su žiurkėmis, n
toksiškumo testas su pelėmis.
Testas su triušiais rodo, kad preparatas nėra 5 trombogeniškas, kadangi efektyvi dozė 50 (ED 50) yra didesnė negu 1000 v f XI/kg, tuo tarpu tas pats parametras yra 40-60 v/kg eilės PPSB koncentrato atveju, kuris dėl to yra žymiai daugiau trombogeniškas ir gali efektyviai iššaukti trombozes ir kraujagyslėse paskleisti koaguliaciją, kada žmonės injekuojami didelėmis dozėmis.
Koncentratas neiššaukia hipotenzijos reiškinio, kada žiurkėms intraveniškai Įvedama 50 V f XI/kg dozėmis.
Šis gyvulių modelis yra labai jautrus plazmos komponentų su vazoaktyviomis savybėmis buvimui, kas i,rodo šių komponentų nebuvimą XI faktoriaus koncentrate, gautame pagal aprašytą būdą.
Jo didelių dozių (2500 v f XI/kg) intraveninis Įvedimas pelėms neiššaukia jokio letališkumo ar nukrypimo elgesyje 7 dienų laikotarpyje.

Claims (13)

  1. IŠRADIMO APIBRĖŽTIS
    1 . Žmogaus XI faktoriaus koncentratas terapiniam naudojimui, besiskiriantis tuo, kad turi mažiausiai 100 v/mg baltymo specifinį aktyvumą.
  2. 2. Būdas XI faktoriaus koncentratui, turinčiam mažiausiai 100 v/mg baltymo specifinį aktyvumą, gauti, besiskiriantis tuo, kad jį sudaro:
    a) krioprecipituoto supernatanto kontaktavimas su filtru, galinčiu adsorbuoti XI faktorių, gaunant filtru adsorbuotą XI faktorių;
    b) minėto XI faktoriaus desorbcija nuo minėto filtro, gaunant XI faktoriaus desorbuotą tirpalą;
    c) minėto XI faktoriaus praleidimas per vienos stadijos katijonų mainų dervos chromatografinę kolonėlę, užkraunant minėtą kolonėlę XI faktoriumi; ir
    d) minėto faktoriaus XI faktoriaus koncentratą. eliucija, gaunant minėtą XI 3. Būdas pagal 2 punktą, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad minėtą filtrą sudaro filtro serijos iš celiuliozės ir perlitų elementų, kurių porų dydis
    0.5-2 μ ir kurie pagrindinai užkrauti neigiamai.
  3. 4. Būdas pagal 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad a) stadiją vykdo kontaktuojant minėtam krioprecipituotam supernatantui su minėto filtro elementais.
  4. 5. Būdas pagal 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad toliau po a) stadijos XI faktorių adsorbavusį filtrą plauna buferiu, turinčiu natrio citratą, dinatrio fosfatą, kalio fosfatą, natrio chloridą, etilendiamintetraacto rūgšties dinatrio druską, sukoreguotu iki pH 5.5-6.5.
  5. 6. Būdas pagal 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad b) stadijoje faktorių XI desorbuoja nuo filtro, didinant buferio, kuri, sudaro natrio citratas, dinatrio fosfatas, kalio fosfatas, natrio chloridas, etilendiamintetraacto rūgšties dinatrio druska ir antitrombinas III, joninę jėgą.
  6. 7. Būdas pagal 6 punktą, besiskiriantis tuo, kad joninę jėgą padidina, didinant natrio chlorido koncentraciją iki 0.5-2 M.
  7. 8. Būdas pagal 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad papildomai prideda 0.1-0.2 v/ml antitrombino III į desorbcijos buferi.
  8. 9. Būdas pagal 2 punktą, bes tuo, kad toliau atlieka XI tirpalo dializę, XI koncentravimą ir XI iskiriantis faktoriaus desorbuoto faktoriaus desorbuoto tirpalo desorbuoto tirpalo faktoriaus antivirusini, apdorojimą,
  9. 10. Būdas pagal 2 punktą, tuo, kad c) stadijoje sefarozės sulfatas.
    b e s i s katijonų kiriantis mainų derva yra
  10. 11. Būdas pagal 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad po to chromatografinė kolonėlė nulygsvarinama buferiu, susidedančiu iš natrio citrato, natrio chlorido, lizino ir arginino iki pH 5.5-6.5.
  11. 12. Būdas pagal 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad po c) stadijos užkrautą kolonėlę praplauna buferiu, susidedančiu iš natrio citrato, dinatrio fosfato, kalio fosfato, natrio chlorido, lizino ir arginino, sukoreguotu iki pH 6.1-6.9.
  12. 13. Būdas pagal 2 punktą, besiskiriantis 5 tuo, kad stadija apima XI faktoriaus eliuciją, padidinus buferio pH iki 7-8 ir padidinus natrio chlorido koncentraciją iki 0.15-0.20 M.
  13. 14. Būdas pagal 2 punktą, besiskiriantis 10 tuo, kad po d) stadijos eliuotą XI faktorių stabilizuoja, pridedant 0.5-3 v/ml antitrombino III ir 0.5-4 v/ml heparino 100-ui v XI faktoriaus ir XI faktoriaus koncentratą liofilina.
LTIP265A 1991-05-07 1992-12-29 Blood coagulation factor xi concentrate and process for the preparing same LT3417B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9105572A FR2676231A1 (fr) 1991-05-07 1991-05-07 Concentre de facteur xi de la coagulation sanguine a haute activite specifique, approprie a usage therapeutique et son procede de preparation.

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LTIP265A LTIP265A (en) 1994-10-25
LT3417B true LT3417B (en) 1995-09-25

Family

ID=9412593

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LTIP265A LT3417B (en) 1991-05-07 1992-12-29 Blood coagulation factor xi concentrate and process for the preparing same

Country Status (16)

Country Link
US (1) US5252217A (lt)
EP (1) EP0512883B1 (lt)
AT (1) ATE156360T1 (lt)
AU (1) AU652043B2 (lt)
BR (1) BR9201718A (lt)
CA (1) CA2068069C (lt)
DE (1) DE69221369T2 (lt)
DK (1) DK0512883T3 (lt)
EE (1) EE03017B1 (lt)
ES (1) ES2107511T3 (lt)
FR (1) FR2676231A1 (lt)
GR (1) GR3025134T3 (lt)
IL (1) IL99567A (lt)
LT (1) LT3417B (lt)
RU (1) RU2097047C1 (lt)
UA (1) UA27733C2 (lt)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUP0400976A3 (en) * 2001-07-20 2006-01-30 Novo Nordisk Healthcare Ag Pharmaceutical composition comprising factor vii polypeptides and factor xi polypeptides
US20030040480A1 (en) * 2001-07-20 2003-02-27 Rasmus Rojkjaer Pharmaceutical composition comprising factor VII polypeptides and factor XI polypeptides
US20050181978A1 (en) * 2003-11-20 2005-08-18 Rasmus Rojkjaer Therapeutic use of factor XI
AU2004290869A1 (en) * 2003-11-20 2005-06-02 Novo Nordisk Health Care Ag Therapeutic use of factor XI
WO2006128497A1 (en) * 2005-06-01 2006-12-07 Novo Nordisk A/S Pharmaceutical formulation of factor xi
WO2008031020A2 (en) * 2006-09-08 2008-03-13 Wyeth Arginine wash in protein purification using affinity chromatography
US20100062512A1 (en) * 2007-01-04 2010-03-11 Crucell Holland B.V. Purification of factor xi
NZ603603A (en) * 2008-10-15 2014-06-27 Isis Pharmaceuticals Inc Modulation of factor 11 expression
FR2974366B1 (fr) 2011-04-20 2016-06-24 Lab Francais Du Fractionnement Procede de preparation d'un concentre de facteur xi
FR2974301B1 (fr) * 2011-04-20 2013-08-23 Lab Francais Du Fractionnement Procede de preparation d'un produit plasmatique deplete en un ou plusieurs facteurs thrombogenes
IL212911A0 (en) 2011-05-16 2011-07-31 Omrix Biopharmaceuticals Ltd Immunoglobulin reduced in thrombogenic contaminants and preparation thereof
DE102012022233A1 (de) 2012-11-14 2014-05-15 Instraction Gmbh Verfahren zur Reinigung eines (Blut)plasmaproteins
DE102012022234A1 (de) 2012-11-14 2014-05-15 Instraction Gmbh Einstufiges Verfahren zur Reinigung von (Blut)Plasmaproteinen wie Albumin aus Gemischen
FR3032621A1 (fr) 2015-02-13 2016-08-19 Lab Francais Du Fractionnement Colle biologique et son utilisation comme medicament
KR101941974B1 (ko) * 2016-11-18 2019-01-24 주식회사 녹십자 혈장 단백질 정제시 fxi의 제거방법
JP7438135B2 (ja) 2018-05-09 2024-02-26 アイオーニス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド Ｆｘｉの発現を低下させるための化合物及び方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4783262A (en) 1987-03-30 1988-11-08 Cuno Incorporated Separator for cell type filter element
US4859340A (en) 1976-03-15 1989-08-22 Cuno, Incorporated Filter sheet

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4859340A (en) 1976-03-15 1989-08-22 Cuno, Incorporated Filter sheet
US4783262A (en) 1987-03-30 1988-11-08 Cuno Incorporated Separator for cell type filter element

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
B. HOROWITZ PHD ET AL.: "Inactivation of viruses in labile blood derivatives. I. Disruption of lipid-enveloped viruses by tri(n-butyl)phosphate detergent combinations", TRANSFUSION, 1985, pages 516 - 522, XP002950839, DOI: doi:10.1046/j.1537-2995.1985.25686071422.x
BOUMA BN, GRIFFIN JH: "Human blood coagulation factor XI. Purification, properties, and mechanism of activation by activated factor XII", J BIOL CHEM., 1977, pages 6432 - 6437, XP002627223
KOIDE ET AL.: "Blood clotting enzymes", METHODS IN ENZYMOLOGY, 1975, pages 65 - 73
WINKELMAN ET AL.: "Internat"

Also Published As

Publication number Publication date
ATE156360T1 (de) 1997-08-15
DK0512883T3 (da) 1998-03-16
RU2097047C1 (ru) 1997-11-27
AU652043B2 (en) 1994-08-11
IL99567A0 (en) 1992-08-18
UA27733C2 (uk) 2000-10-16
BR9201718A (pt) 1992-12-29
FR2676231A1 (fr) 1992-11-13
GR3025134T3 (en) 1998-02-27
EP0512883A1 (fr) 1992-11-11
US5252217A (en) 1993-10-12
ES2107511T3 (es) 1997-12-01
CA2068069C (en) 2005-03-15
IL99567A (en) 1996-01-19
EP0512883B1 (fr) 1997-08-06
LTIP265A (en) 1994-10-25
AU1526392A (en) 1992-11-12
CA2068069A1 (en) 1992-11-08
DE69221369D1 (de) 1997-09-11
DE69221369T2 (de) 1998-03-19
EE03017B1 (et) 1997-08-15
FR2676231B1 (lt) 1995-04-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2088590C1 (ru) Способ получения стандартизированного концентрата человеческого фактора виллебранда и концентрат, полученный этим способом
DK173859B1 (da) Fremgangsmåde til fremstilling af et højrenset humant faktor IX koncentrat og andre plasmaproteiner
KR100451266B1 (ko) 새로운크로마토그래피분리조건을이용한α-1프로테이나제억제제의정제방법
RU1837880C (ru) Способ разделени белков крови
US4272523A (en) Fractionating citrate-stabilized plasma
RU2520817C2 (ru) Очистка и применение фактора, способствующего заживлению ран
LT3417B (en) Blood coagulation factor xi concentrate and process for the preparing same
CA2491716C (en) Processes for the preparation of fibrinogen
JPH0580455B2 (lt)
KR100667860B1 (ko) 고순도 사람 혈액응고 제9인자의 정제 방법
RU2649363C2 (ru) СПОСОБЫ СНИЖЕНИЯ И/ИЛИ УДАЛЕНИЯ FXI и FXIa ИЗ РАСТВОРОВ, СОДЕРЖАЩИХ УКАЗАННЫЕ ФАКТОРЫ СВЕРТЫВАНИЯ
PL165402B1 (pl) Sposób wydzielania oczyszczonego roztworu albuminy PL
KR100383063B1 (ko) 사람활성화단백질c제제및이의제조방법
US4361510A (en) Blood coagulation promoting product
US5989593A (en) Method for producing antithrombin-III, method for purifying it, and preparation containing it
CA1341379C (en) Purified antithrombin-iii and methods of producing the same
JP3615595B2 (ja) Ｃ１−エステラーゼ阻害剤濃厚物（ｃ１−ｉｎｈ）の調製法、および治療的使用のための得られた濃厚物
CA1170183A (en) Blood coagulation promoting product
WO1996034947A1 (en) Method for activating prothrombin to thrombin
LV10194B (en) Blood coagulation factor xi concentrate having high specific activity, suitable for therapeutic use, and process for preparing same
KR19980042603A (ko) 안티트롬빈-ⅲ의 제조방법, 이의 정제방법 및 이를 함유하는제제
HUE025551T2 (en) A method of producing virus-inactivated FV concentrate starting from human plasma, which can be increased to industrial sizes
JPH1053534A (ja) α２プラスミンインヒビターの製造方法
MX2008009204A (en) Purification and use of a factor for supporting wound healing

Legal Events

Date Code Title Description
PC9A Transfer of patents

Owner name: THE LABORATOIRE FRANCAIS DU FRACTIONNEMENT ET DES

Effective date: 20090511

TC9A Change of representative

Representative=s name: ZABOLIENE, REDA, LT

MM9A Lapsed patents

Effective date: 20091229