KR960701899A - 인자 viii:c활성을 갖는 단백질 복합체 및 그의 제조 - Google Patents

인자 viii:c활성을 갖는 단백질 복합체 및 그의 제조

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Abstract

인간인자 Ⅷ:C A도메인에 실질적으로 상동인 첫번째 폴리펩티드, 인간인자 Ⅷ:C C도메인에 실질적으로 상동인 두번째 폴리펩티드를 코딩하는 첫번째와 두번째 발현카세트로 숙주세포를 형질변환시켜 진핵숙주 세포내에서 인자 Ⅷ:C활성을 갖는 재조합 단백질 복합체를 발현시킨다. 본 발명에서, 첫번째 폴리펩티드는 C-말단에 인간인가 Ⅷ:C B도메인 N-말단펩티드, 3-40 아미노산의 폴리펩티드 스페이서, 인간인자 Ⅷ:C B도 메인 C말단펩티드를 갖도록 연장될 수 있다. 두번째 폴리펩티드의 발현은 α1-항트립신 신호서열을 사용하여 개선시킨다.

Description

인자 Ⅷ:C활성을 갖는 단백질 복합체 및 그의 제조
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (19)

  1. 인간인자 Ⅷ:C활성을 갖는 단백질 복합체를 코딩하는 DNA구조체에 있어서, 상기 복합체는 인간인자 Ⅷ:C A도메인에 상동적인 첫번째 폴리펩티드가 인간인자 Ⅷ:C의 전체길이의 B도메인이 아닌 다른 폴리펩티드 스페이서에 의하여 인간인자 W:C의 C도메인에 상동적인 두번째 폴리펩티드에 연결된 것으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 DNA 구조체.
  2. 제1항에 있어서, 상기 폴리펩티드 스페이서는 인간 Ig중사슬 힌지부위에 상동적인 펩티드를 함유하는 것을 특징으로 하는 DNA 구조체.
  3. 제2항에 있어서, 폴리펩티드 스페이서의 아미노산 서열은 Pro-Pro-Thr-Pro-Pro-Thr을 함유하는 것을 특징으로 하는 DNA 구조체.
  4. 제2항에 있어서, 상기의 첫번째 폴리펩티드는 인간인자 Ⅷ:C 아미노산 1-740의 아미노산 서열의 적어도 약 90%를 함유하고 상기의 두번째 폴리펩티드는 인간인자 Ⅷ:C 아미노산 1649-2332의 아미노산 서열의 적어도 약 90%를 함유하는 것을 특징으로 하는 DNA 구조체.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기의 DNA 구조체가 진핵숙주세포내에 존재할 때 상기 단백질 복합체의 발현을 일으킬 수 있는 조절서열을 추가로 함유하는 것을 특징으로 하는 DNA 구조체.
  6. 제5항의 DNA 구조체를 포함하는 진핵숙주세포.
  7. 제6항에 있어서, 상기의 숙주세포가 포유동물의 세포인 것을 특징으로 하는 진핵숙주세포.
  8. 인간인자 Ⅷ:C 활성을 갗는 재조합 단백질 복합체의 제조방법에 있어서, 상기 방법은 상기 DNA 구조체에 의해 코딩되는 단백질 복합체가 발현되는 조건하에서 제6항 또는 제7항의 숙주세포를 배양하는 것으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법.
  9. 제8항에 있어서, 상기의 첫번째 및 두번째 폴리펩티드의 아미노산의 단지 약 5%만이 각각 인자 Ⅷ:CA 및 C도메인의 자연상태로 존재하는 아미노산 서열과 다른 것을 특징으로 하는 방법.
  10. 제8항에 있어서, 두번째 폴리펩티드의 아미노산 서열은 인간인자 Ⅷ:C의 아미노산 1649-2322의 아미노산 서열과 동일한 것을 특징으로 하는 방법.
  11. 제8항에 있어서, 첫번째 폴리펩티드의 아미노산 서열은 인간인자 Ⅷ:C의 아이노산 1-740의 아미노산서열과 동일한 것을 특징으로 하는 방법.
  12. 제8항에 있어서, 상기의 폴리펩티드 스페이서는 인간 Ig중사슬 힌지부위에 상동적인 펩티드를 함유하는 것을 특징으로 하는 방법.
  13. 인간인자 Ⅷ:C활성을 갖는 단백질 복합체에 있어서, 인간인자 Ⅷ:C의 A도메인에 상동적인 첫번째 폴리펩티드가 인간인자 Ⅷ:C의 전체길이의 B도메인이 아닌 다른 폴리펩티드 스페이서에 의하여 인간인자 Ⅷ:C의 C도메인에 상동적인 두번째 폴리펩티드에 연결된 것으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 단백질 복합체.
  14. 제13항에 있어서, 상기의 폴리펩티드 스페이서는 인간 Ig중사슬 힌지부위에 상동적인 펩티드를 함유하는 것을 특징으로 하는 단백질 복합체.
  15. 제14항에 있어서, 폴리펩티드 스페이서의 아미노산 서열은 Pro-Pro-Thr-Pro-Pro-Thr을 함유하는 것을 특징으로 하는 단백질 복합체.
  16. 제13항에 있어서, 상기의 첫번째 폴리펩티드의 아미노산 서열의 아미노산의 단지 약 5%만이 인자 Ⅷ:C A도메인의 자연상태로 존재하는 아미노산 서열과 다른 것을 특징으로 단백질 복합체.
  17. 제13항에 있어서, 첫번째 폴리펩티드의 아미노산 서열은 인간인자 Ⅷ:C의 아미노산 1-740의 아미노산 서열과 동일한 것을 특징으로 단백질 복합체.
  18. 인간인자 Ⅷ:C활성을 갖지만 제37항의 방법에 의해 제조한 인간인자 Ⅷ:C의 B도메인의 진부 또는 일부가 결핍된 단백질 복합체.
  19. 인간인자 Ⅷ:C활성을 갖지만 제8항 내지 제12항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조한 인간인자 Ⅷ:C의 B도메인의 전부 또는 일부가 결핍된 단백질 복합체.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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