KR900016261A - 독사독 폴리펩티드 및 유전적 발현 - Google Patents

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Abstract

내용 없음.

Description

독사독 폴리펩티드 및 유전적 발현
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 재조합-leu 28-에키스태틴(Echistatin)의 뉴클레오티드 및 아미노산 서열을 나타낸 것이다.
제2도는 발현 벡터 pJC 264의 구조를 도시한 것이다.
제3도는 제조합-leu 28-에키스태틴 융합 단백질의 세균에 의한 생성을 SDS PAGE로 분석한 결과를 나타낸 것이다.

Claims (24)

  1. 하기의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드
    상기식에서, X는 H 또는 하나 이상의 아미노산이고, Y는 OH 또는 하나 이상의 아미노산이며, R은 각각 같거나 상이하며, 아미노산이다.
  2. 제1항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드.
    상기식에서, Ch는 하나 이상의 아미노산이고, Cx은 하나 이상의 아미노산이며 R은 각각 같거나 상이하며, 아미노산을 나타낸다.
  3. 제1항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 갖는 “에키스태틴”이라 불리우는 실질적으로 순수한 폴리펩티드.
  4. 제1항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 갖는 “아그키스트로스태틴”이라 불리우는 실질적으로 순수한 폴리펩티드.
    상기식에서, Y 및 R은 제1항에서와 동일한 의미를 가진다.
  5. 제1항에 있어서, 하기의 서열을 갖는 “비티스태틴 1”이라 불리우는 실질적으로 순수한 폴리펩티드.
  6. 제1항에 있어서, 하기의 서열을 갖는 “비티스태틴 2”라 불리우는 실질적으로 순수한 폴리펩티드.
  7. 제1항에 있어서, 하기의 서열을 갖는 “비티스태틴 3”이라 불리우는 실질적으로 순수한 폴리펩티드.
  8. 제1항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 갖는 “에리스토스태틴”이라 불리우는 실질적으로 순수한 폴리펩티드.
  9. 제1항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드.
  10. 제1항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드.
  11. 제1항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드.
  12. 제1항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드.
  13. 제1항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드.
  14. 제1항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드.
  15. 제1항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드.
  16. 제1항에 따른 폴리펩티드와 함께 포유 동물의 혈소판을 배양함을 특징으로 하여, 포유 동물의 혈소판 또는 포유 동물 혈소판의 피브리노겐-유도성 응집물에 피브리노겐이 결합하는 것을 억제하는 방법.
  17. 혈류 중의 혈소판 응집 발생을 억제하기 위해, 제1항에 따른 폴리펩티드를 포유 동물에 투여함을 특징으로 하여, 포유 동물의 혈소판 응집을 억제하는 방법.
  18. a) 동결 건조된 에키스 카리나투스 독을 약간 염기성인 용액 중에 용해시키고, b) 이 용액을 원심 분리하여 상청액을 수득한 후, c)J 이 상청액을 칼럼에 가하고, d) 혈소판 응집 억제 활성을 가진 분획물을 검출해 낸 후 진공하에서 농축시킴을 특징으로 하여, 하기 서열을 가진 폴리펩티드를 정제하는 방법.
  19. 하기 아미노산 서열을 가지며, 혈소판 응집을 억제하는 폴리펩티드를 암호화하는 재조합 DNA 분자를 함유하는 유전자.
    상기식에서, Ch는 하나 이상의 아미노산이고, Cx는 하나 이상의 아미노산이며, R는 각각 같거나 상이하며 아미노산 하나를 나타낸다.
  20. 제19항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 암호화하는 유전자.
  21. 미생물 중에서 이종(異種) 단백질을 발현시킬 수 있는 프로모터-오퍼레이터 서열 뒤에 하기 아미노산 서열을 갖는 혈소판 응집 억제제를 암호화하는 DNA가 존재하고 이 DNA가 형질전환 미생물 내에서 상기 프로모터-오퍼레이터의 제어하에서 전사됨을 특징으로 하는 복제성 미생물 발현 벡터.
    상기식에서, Ch는 하나 이상의 아미노산이고, Cx는 하나 이상의 아미노산이며, R는 각각 같거나 상이하며, 하나의 아미노산을 나타낸다.
  22. 제21항에 있어서, 하기의 아미노산 서열을 갖는 발현 벡터.
  23. 제22항의 발현 벡터로 형질 전환된 세포를 함유하는 생세포 배양물.
  24. (a) 서열 중의 C-말단의 첫번째 아미노산을 고체상의 가교결합된 폴리스티렌 수지에 결합시켜 아미노아실 중합체를 생성시키고, C-말단의 첫번째 아미노산 블록킹 그룹을 아미노 아실 중합체로부터 제거한 후, 그 다음의 두번째 아미노산을 C-말단 아미노산 잔기에 커플링시키고, 그 다음의 아미노산들을 단계적인 방식으로 커플링시켜 폴리펩티드 서열을 생성시킨 후, N-말단 아미노산을 보호하고 있는 N-말단의 Boc 그룹을 제거하고, (b) 폴리펩티드 서열을 HF 및 한가지 이상의 티오 함유 스캐빈저로 처리한 후, (c) 처리된 서열을 세척하고 칼럼으로 부터 큰 용적의 묽은 아세트산에 옮겨 넣어 불필요한 가교 결합을 극소화한 후, (d)(c) 단계에서 얻은 용액을 교반하면서 pH가 약 8.0되게 조절함을 특징으로 하여, 하기의 서열을 갖는, 시스테인이 풍부한 폴리펩티드를 제조하는 방법.
    상기식에서, Ch는 하나 이상의 아미노산이고, Cx는 하나 이상의 아미노산이며 R은 각각 같거나 상이하며 하나의 아미노산을 나타낸다.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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