KR960023056A - 푸자리움 옥시스포룸으로부터의 페니실린 v 아미도하이드롤라아제 유전자 - Google Patents

푸자리움 옥시스포룸으로부터의 페니실린 v 아미도하이드롤라아제 유전자 Download PDF

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Abstract

본 발명은 푸자리움 옥시스포룸(Fusarium oxysporum)으로부터의 페니실린 V 아미도하이드롤라이제(PVA) 유전자를 코딩하는 핵산에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 PVA를 제조하기 위한 발현 벡터, 숙주 세포 및 제조 방법에 관한 것이다.

Description

푸자리움 옥시스포룸으로부터의 페니실린 V 아미도하이드롤라아제 유전자
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 무상 PVA 효소의 6개의 펩티드 단편의 아미노산 서열,
제4도는 2585-FL의 개략도,
제5도는 게놈 PVA 유전자 클로닝의 개략도,
제6도는 PVA cDNA(서열 확인 번호 18) 및 대응하는 아미노산 서열(서열 확인 번호 19),
제8도는 pWB19N 작제의 개략도.

Claims (71)

  1. 서열 확인 번호 19 또는 22의 아미노산 서열을 코딩하는 서열을 갖는 단리된 핵산 분자.
  2. 서열 확인 번호 19 또는 22의 아미노산 서열을 코딩하는 핵산 서열에 대하여 상보적인 서열을 갖는 단리된 핵산 분자.
  3. 서열 확인 번호 19 또는 22의 아미노산 서열을 코딩하는 핵산 서열에 대하여 상보적인 서열을 갖는 핵산과 혼성화할 수 있는 서열을 갖는 단리된 핵산 분자.
  4. 제1항에 있어서, DNA 분자인 핵산 분자.
  5. 제2항에 있어서, DNA 분자인 핵산 분자.
  6. 제3항에 있어서, DNA 분자인 핵산 분자.
  7. 서열 확인 번호 19의 아미노산 서열을 코딩하는 서열을 갖는 단리된 DNA 분자.
  8. 서열 확인 번호 19의 아미노산 서열을 코딩하는 핵산 서열에 대하여 상보적인 서열을 갖는 핵산과 혼성화 할 수 있는 서열을 갖는 단리된 DNA 분자.
  9. 서열 확인 번호 22의 아미노선 서열을 코딩하는 서열을 갖는 단리된 DNA 분자.
  10. 서열 확인 번호 22의 아미노산 서열을 코딩하는 핵산 서열에 대하여 상보적인 서열을 갖는 핵산과 혼성화 할 수 있는 서열을 갖는 단리된 DNA 분자.
  11. 서열 확인 번호 18의 뉴클레오티드 서열을 갖는 단리된 DNA 분자.
  12. 서열 확인 번호 21의 뉴클레오티드 서열을 갖는 단리된 DNA 분자.
  13. 서열 확인 번호 11의 뉴클레오티드 서열을 갖는 단리된 DNA 분자.
  14. 서열 확인 번호 23의 뉴클레오티드 서열을 갖는 단리된 DNA 분자.
  15. 서열 확인 번호 14, 15, 16 또는 17의 뉴클레오티드 서열을 갖는 단리된 DNA 분자.
  16. 서열 확인 번호 9 또는 10의 뉴클레오티드 서열을 갖는 단리된 DNA 분자.
  17. 서열 확인 번호 26 또는 30의 뉴클레오티드 서열을 갖는 단리된 DNA 분자.
  18. 서열 확인 번호 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8 또는 12의 아미노산 서열을 갖는 단리된 폴리펩티드.
  19. 제18항에 있어서, 서열 확인 번호 1 또는 12의 아이노산 서열을 갖는 폴리펩티드.
  20. 서열 확인 번호 19 또는 22의 아미노산 서열의 일부를 코딩하는 핵산 서열을 포함하는 발현 벡터.
  21. 제20항에 있어서, 서열 확인 번호 19의 아미노산 서열을 코딩하는 DNA 서열을 포함하는 발현 벡터.
  22. 제20항에 있어서, 서열 확인 번호 22의 아미노산 서열을 코딩하는 DNA 서열을 포함하는 발현 벡터.
  23. 제20항에 있어서, 추가로 복제원, 프로모터 및 전사 종결 서열을 포함하는 발현 벡터.
  24. 제23항에 있어서, 추가로 선택가능한 마커 서열을 포함하는 발현 벡터.
  25. 제24항에 있어서, 선택가능한 마커는 플레오마이신(phleomycin) 내성인 발현 벡터.
  26. 제23항에 있어서, 균류 염색체 내로 삽입될 수 있는 발현 벡터.
  27. 제20항에 있어서, 서열 확인 번호 18 또는 21의 DNA 서열을 갖는 발현 벡터.
  28. 제20항에 있어서, 플라스미드인 발현 벡터.
  29. 서열 확인 번호 23의 DNA 서열을 갖는 프로모터를 포함하는 발현 벡터.
  30. 제29항에 있어서, 추가로 복제된, 구조 단백질을 코딩하는 DNA 및 전사 종결 서열을 포함하는 발현 벡터.
  31. 제30항에 있어서, 구조 단백질을 코딩하는 DNA는 PVA를 코딩하는 것인 발현 벡터.
  32. 제30항에 있어서, 추가로 선택가능한 마커 서열을 포함하는 발현 벡터.
  33. 제22항에 있어서, 선택가능한 마커는 플레오마이신 내성인 발현 벡터.
  34. 제30항에 있어서, 균류 염색체 내로 삽입가능한 발현 벡터.
  35. pBMFXPVA6로 표시되는 발현 벡터.
  36. pBMFXPVA7로 표시되는 발현 벡터.
  37. pBMPVA-P로 표시되는 발현 벡터.
  38. pBMPVA-M으로 표시되는 발현 벡터.
  39. 제20항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  40. 제23항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  41. 제25항의 발현 벡터을 함유하는 숙주 세포.
  42. 제26항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  43. 제27항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  44. 제28항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  45. 제29항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  46. 제30항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  47. 제31항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  48. 제32항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  49. 제33항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  50. 제34항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  51. 제35항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  52. 제36항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  53. 제37항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  54. 제38항의 발현 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  55. 제39항에 있어서, 진핵 세포인 숙주 세포.
  56. 제45항에 있어서, 진핵 세포인 숙주 세포.
  57. 제39항에 있어서, 푸자리움(Fusarium) 종인 숙주 세포.
  58. 제45항에 있어서, 푸자리움종인 숙주 세포.
  59. 제39항에 있어시, 푸자리움 옥시스포룸(Fusarium oxysporum) 인 숙주 세포.
  60. 제45항에 있어서, 푸자리움 옥시스포룸인 숙주 세포.
  61. 제51항에 있어서, 푸자리움 옥시스포룸인 숙주 세포.
  62. 제52항에 있어서. 푸자리움 옥시스포룸인 숙주 세포.
  63. 제53항에 있어서, 푸자리움 옥시스포룸인 숙주 세포.
  64. 제54항에 있어서, 푸자리움 옥시스포룸인 숙주 세포.
  65. 생물학적으로 순수한 에쉐리키아 콜리(Escherichia coli) ATCC 69720 배양물.
  66. 생물학적으로 순수한 에쉐리키아 콜리 ATCC 69721 배양물.
  67. 생물학적으로 순수한 에쉐리키아 콜리 ATCC 69721의 배지.
  68. 폴리펩티드를 발현시키는 조건 하에서 제39항의 숙주 세포를 배양하는 것으로 이루어진 서열 확인 번호 19 또는 22의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드의 제조 방법.
  69. 제68항에 있어서, 페녹시아세테이트의 존재 하에서 배양함으로써 발현을 유도하는 방법.
  70. 폴리펩티드를 발현시키는 조건 하에서 제45항의 숙주 세포를 배양하는 것으로 이루어진 폴리펩티드의 제조 방법.
  71. 제70항에 있어서, 페녹시아세테이트의 존재 하에서 배양함으로써 발현을 유도하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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