JP4163001B2 - Rnaポリメラーゼから誘導されたポリペプチド及びそれらの使用 - Google Patents
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Description
−インビトロ翻訳、
−RNA成熟の研究、
−遺伝子発現へのアンチセンスRNAの効果、
−RNA−たんぱく質相互作用、
−小細胞RNAs(tRNA,rRNA)相同物の合成、
−リボザイムの生産。
・グルタミン酸のよる222位のリジン(K)の置換;このように変異されたRNAポリメラーゼは、この変異により変更したプロモーター認識特性を有し、そして米国特許5,385,834に記述されている。
・フェニルアラニン(F)による639位のチロシン(Y)の置換;このように変異されたRNAポリメラーゼは、リボヌクレオチドの代わりにデオキシリボヌクレオチドを取り込む特性を有す、それゆえRNAの代わりにDNAを合成し、そして米国特許6,107,037に記述されている。
・セリン(S)による810位のイソロイシン(I)の置換;このように変異されたRNAポリメラーゼは、野生型RNAポリメラーゼより遅い特性を有し、そしてBonner等、The Journal of Biochemical Chemistry, 269, pp. 25120-25128 (1994)に記述されている。
本発明は、野生型RNAポリメラーゼが、対象の該RNAをコードしているヌクレオチド配列のITSに過敏である時、野生型RNAポリメラーゼを使用する方法より多い収量で対象のRNAを生産する新しい方法を提供することをまた目的とする。
*野生型T7RNAポリメラーゼから誘導され、次の変異の少なくとも1つを含むもの:
−バリン(V)による117位のイソロイシン(I)の置換、
−バリン(V)による119位のイソロイシン(I)の置換、
−アラニン(A)による134位のバリン(V)の置換、
−アスパラギン(N)による147位のアスパラギン酸(D)の置換、
−アルギニン(R)による230位のヒスチジン(H)の置換、
−ロイシン(L)による266位のプロリン(P)の置換、
−システイン(C)による291位のアルギニン(R)の置換、
*野生型T3RNAポリメラーゼから誘導され、次の変異の少なくとも1つを含むもの:
−アスパラギン(N)による148位のアスパラギン酸(D)の置換、
−ロイシン(L)による267位のプロリン(P)の置換、
−システイン(C)による292位のアルギニン(R)の置換、
*野生型K11RNAポリメラーゼから誘導され、次の変異の少なくとも1つを含むもの:
−アスパラギン(N)による167位のアスパラギン酸(D)の置換、
−ロイシン(L)による289位のプロリン(P)の置換、
−システイン(C)による314位のアルギニン(R)の置換、
*野生型SP6RNAポリメラーゼから誘導され、次の変異の少なくとも1つを含むもの:
−アスパラギン(N)による117位のアスパラギン酸(D)の置換、
−ロイシン(L)による239位のプロリン(P)の置換。
−プロリンに代えて266位のロイシンを含む配列番号2で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−イソロイシンに代えて117位のバリン、及びバリンに代えて134位のアラニンを含む配列番号4で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−イソロイシンに代えて119位のバリン、及びアスパラギン酸に代えて147位のアスパラギンを含む配列番号6で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−ヒスチジンに代えて230位のアルギニン、及びアルギニンに代えて291位のシステインを含む配列番号8で表される変異型T7RNAポリメラーゼ
−プロリンに代えて266位のロイシン、及びチロシンに代えて639位のフェニルアラニンを含む配列番号10で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−イソロイシンに代えて810位のアスパラギンを含む配列番号12で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−プロリンに代えて266位のロイシン、及びイソロイシンに代えて810位のアスパラギンを含む配列番号14で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−イソロイシンに代えて119位のバリン、アスパラギン酸に代えて147位のアスパラギン、及びイソロイシンに代えて810位のアスパラギンを含む配列番号16で表される変異型T7RNAポリメラーゼ。
* 117、119、134、147、230、266又は291位で上記の変異の少なくとも1つ、及び任意で次の追加変異の少なくとも一つを含む野生型T7RNAポリメラーゼから誘導される変異型RNAポリメラーゼ:
−フェニルアラニン(F)による639位のチロシン(Y)の置換、
−アスパラギン(N)による810位のイソロイシン(I)の置換、
* 148、267、又は292位で上記の変異の少なくとも1つ、及び任意で次の追加変異の少なくとも一つを含む野生型T3RNAポリメラーゼから誘導される変異型RNAポリメラーゼ:
−フェニルアラニン(F)による640位のチロシン(Y)の置換、
−アスパラギン(N)による811位のイソロイシン(I)の置換、
* 167、289、又は314位で上記の変異の少なくとも1つ、及び任意で次の追加変異の少なくとも一つを含む野生型K11RNAポリメラーゼから誘導される変異型RNAポリメラーゼ:
−フェニルアラニン(F)による662位のチロシン(Y)の置換、
−アスパラギン(N)による833位のイソロイシン(I)の置換、
* 117、又は239位で上記変異の少なくとも1つ、及び任意で次の追加変異の少なくとも一つを含む野生型SP6RNAポリメラーゼから誘導される変異型RNAポリメラーゼ:
−フェニルアラニン(F)による631位のチロシン(Y)の置換、
−アスパラギン(N)による804位のイソロイシン(I)の置換。
− 該野生型RNAポリメラーゼをコードする遺伝子の少なくとも1つのコドンの置換又は欠失又は付加によるファージ起源の野生型RNAポリメラーゼのペプチド鎖の改変の工程、そして上記の改変遺伝子を含むベクターでの大腸菌のような適当な細胞の形質転換の工程、
−大腸菌のような適当な細胞内、特に前述の細胞内での特定のマーカーの生産収量が同じ条件下で野生型RNAポリメラーゼの使用で得られるこの同じマーカーの生産収量より多い上述の変異型RNAポリメラーゼを生産する細胞を検出する工程であって、特定のマーカーが、上記のRNAポリメラーゼで認識されるプロモーターの下流に挿入されるヌクレオチド配列によりコードされる色原性マーカー又は抗生物質耐性マーカーのようなマーカーであり、このマーカーをコードする配列及びプロモーターは野生型RNAポリメラーゼの活性に影響を及ぼすことで知られる最初のおおよそ6から12ヌクレオチドの性質によるITSにより分離されている工程、
−前工程で検出された細胞からの上記の変異型RNAポリメラーゼの精製工程、
を含む方法。
・グルタミン酸による222位のリジン(K)の置換。
*野生型T7RNAポリメラーゼから誘導され、少なくとも1つの次の変異を含むもの:
−バリン(V)による117位のイソロイシン(I)の置換、
−バリン(V)による119位のイソロイシン(I)の置換、
−アラニン(A)による134位のバリン(V)の置換、
−アスパラギン(N)による147位のアスパラギン酸(D)の置換、
−アルギニン(R)による230位のヒスチジン(H)の置換、
−ロイシン(L)による266位のプロリン(P)の置換、
−システイン(C)による291位のアルギニン(R)の置換、
任意で次の付加的変異の少なくとも1つを含む該変異型RNAポリメラーゼ:
−フェニルアラニン(F)による639位のチロシン(Y)の置換、
−アスパラギン(N)による810位のイソロイシン(I)の置換、
*野生型T3RNAポリメラーゼから誘導され、少なくとも1つの次の変異を含むもの:
−アスパラギン(N)による148位のアスパラギン酸(D)の置換、
−ロイシン(L)による267位のプロリン(P)の置換、
−システイン(C)による292位のアルギニン(R)の置換、
任意で次の付加的変異の少なくとも1つを含む該変異型RNAポリメラーゼ:
−フェニルアラニン(F)による640位のチロシン(Y)の置換、
−アスパラギン(N)による811位のイソロイシン(I)の置換、
*野生型K11RNAポリメラーゼから誘導され、少なくとも1つの次の変異を含むもの:
−アスパラギン(N)による167位のアスパラギン酸(D)の置換、
−ロイシン(L)による289位のプロリン(P)の置換、
−システイン(C)による314位のアルギニン(R)の置換、
任意で次の付加的変異の少なくとも1つを含む該変異型RNAポリメラーゼ:
−フェニルアラニン(F)による662位のチロシン(Y)の置換、
−アスパラギン(N)による833位のイソロイシン(I)の置換、
*野生型SP6RNAポリメラーゼから誘導され、少なくとも1つの次の変異を含むもの:
−アスパラギン(N)による117位のアスパラギン酸(D)の置換、
−ロイシン(L)による239位のプロリン(P)の置換、
任意で次の付加的変異の少なくとも1つを含む該変異型RNAポリメラーゼ:
−フェニルアラニン(F)による631位のチロシン(Y)の置換、
−アスパラギン(N)による804位のイソロイシン(I)の置換。
−プロリンに代えて266位のロイシンを含む配列番号2で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−イソロイシンに代えて117位のバリン、及びバリンに代えて134位のアラニンを含む配列番号4で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−イソロイシンに代えて119位のバリン、及びアスパラギン酸に代えて147位のアスパラギンを含む配列番号6で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−ヒスチジンに代えて230位のアルギニン、及びアルギニンに代えて291位のシステインを含む配列番号8で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−プロリンに代えて266位のロイシン、及びチロシンに代えて639位のフェニルアラニンを含む配列番号10で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−イソロイシンに代えて810位のアスパラギンを含む配列番号12で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−プロリンに代えて266位のロイシン、及びイソロイシンに代えて810位のアスパラギンを含む配列番号14で表される変異型T7RNAポリメラーゼ、
−イソロイシンに代えて119位のバリン、アスパラギン酸に代えて147位のアスパラギン、及びイソロイシンに代えて810位のアスパラギンを含む配列番号16で表される変異型T7RNAポリメラーゼ。
NH2(CH2)3NH(CH2)10NH(CH2)3NH2
NH2(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)10NH(CH2)3NH(CH2)3NH2
a)調整、精製及び保存
得られた点変異配列番号2は、T7ポリメラーゼ配列のプロリン266のロイシン(P266L)への変換に対応している。この変異型T7ポリメラーゼの遺伝子は、誘導プロモーター(pLac UV5)の制御下でpAR1219プラスミドに含まれる。このたんぱく質(ポリメラーゼ)は、大腸菌BL21(ompF−)で過剰発現される。抽出、精製及び精製たんぱく質の保存のプロトコールは、野生型ポリメラーゼのそれらと同一である。精製を促進するために、ポリメラーゼは、pBH161プラスミド(He et al., 1977)中の同等のコード配列に代えて変異領域を移すことにより6個のN末端ヒスチジンで標識される。この標識は決してポリメラーゼの触媒活性特性を改変しない。その後>90%の純粋たんぱく質を得るためにはニッケルアフィニティーカラムに細菌上清を通すことだけで十分である。−20℃での長期間(2年)の保存は、酵素特性を変えない。
野生型ポリメラーゼで使用される標準条件下でこの変異体は供給される全てのrNTPsをRNAにまた転換できる。しかしながら、この取り込みが実行される率は変異体でおおよそ3倍低い、すなわち完全転写には長時間を必要とする(たとえば、2時間に代わりに6時間)。
Claims (13)
- ファージ起源の変異型RNAポリメラーゼは、野生型T7RNAポリメラーゼの266位のプロリンがロイシンに置換された変異型T7RNAポリメラーゼ、または、野生型RNAポリメラーゼの相同位置に位置するプロリンが置換された変異型RNAポリメラーゼであって、野生型T3RNAポリメラーゼの267位のプロリンがロイシンに置換された変異型T3RNAポリメラーゼ、野生型のK11RNAポリメラーゼの289位のプロリンがロイシンに置換された変異型K11RNAポリメラーゼおよび野生型SP6RNAポリメラーゼの239位のプロリンがロイシンに置換された変異型SP6RNAポリメラーゼからなる群から選択された変異型RNAポリメラーゼ、から選択され、対象のRNA又はこのRNAにコードされるたんぱく質の生産の方法の実施のために、対象の該RNAをコードするDNA配列を含む所定のヌクレオチド配列から始まり、この転写は、上記野生型RNAポリメラーゼ及び変異型RNAポリメラーゼにより認識されるプロモーター制御下にあり、該方法は、対象の該RNAをコードするDNA配列に含まれるものと同じ非共通のITS存在下で野生型RNAポリメラーゼの使用場合に得られる収量より多い該RNA生産収量を有する、ファージ起源の変異型RNAポリメラーゼの使用。
- 対象のRNAの収量が、野生型RNAポリメラーゼを使用した場合に得られる収量のおおよそ10倍まで多い、対象のRNAの生産方法の実施のための請求項1記載の使用。
- プロリンに代えて266位のロイシンを含む配列番号2で表される変異型T7RNAポリメラーゼの請求項1または2記載の使用。
- 請求項1〜3のいずれか1項に記載のファージ起源の変異型RNAポリメラーゼを調製するための方法であって、
該方法は:
−該野生型RNAポリメラーゼをコードする遺伝子の少なくとも1つのコドンの置換によるファージ起源の野生型RNAポリメラーゼのペプチド鎖の改変、及び、上記の改変遺伝子を含むベクターによる大腸菌のような適当な細胞の形質転換、及び、上記RNAポリメラーゼにより認識されるプロモーターの下流に挿入されかつマーカーをコードするヌクレオチド配列、ここで該マーカーは抗生物質への耐性のマーカーであるか、または色原性マーカーであり、該プロモーターとマーカーをコードする配列はITSにより分離されている、を含む工程、
−大腸菌のような適当な細胞内、特に前述の細胞内での特定のマーカーの生産収量が同じ条件下で野生型RNAポリメラーゼの使用で得られるこの同じマーカーの生産収量より多い上述の変異型RNAポリメラーゼを生産する細胞を検出する工程、
−前工程で検出された細胞からの上記の変異型RNAポリメラーゼの精製工程、
を含む方法。 - 野生型T7RNAポリメラーゼの266位のプロリンがロイシンに置換された変異型T7RNAポリメラーゼ、または、野生型RNAポリメラーゼの相同位置に位置するプロリンが置換された変異型RNAポリメラーゼであって、野生型T3RNAポリメラーゼの267位のプロリンがロイシンに置換された変異型T3RNAポリメラーゼ、野生型のK11RNAポリメラーゼの289位のプロリンがロイシンに置換された変異型K11RNAポリメラーゼおよび野生型SP6RNAポリメラーゼの239位のプロリンがロイシンに置換された変異型SP6RNAポリメラーゼからなる群から選択された変異型RNAポリメラーゼ、から選択された、請求項4記載の方法によって得られた変異型RNAポリメラーゼ。
- プロリンに代えて266位のロイシンを含む配列番号2で表される、請求項5記載の変異型T7RNAポリメラーゼ。
- 請求項4記載の方法によって得られた変異型RNAポリメラーゼまたは請求項5または6記載の変異型RNAポリメラーゼをコードする核酸分子であって、
配列番号2のたんぱく質配列をコードする配列番号1のヌクレオチド配列、又は遺伝コードの縮重により上記のヌクレオチド配列から誘導され、上記のたんぱく質をコードする特性を保持する全てのヌクレオチド配列から選択される核酸分子。 - 請求項7記載のヌクレオチド配列を含むベクター。
- 請求項8記載のベクターにより形質転換された細胞。
- 対象のRNAをインビトロ調製するための方法であって、適当な培地中で、請求項4記載の方法によって得られた少なくとも一つの変異型RNAポリメラーゼまたは請求項5または6記載の少なくとも一つの変異型RNAポリメラーゼと対象の該RNAをコードするDNA配列を含む所定のヌクレオチド配列を結合し、転写を上記の野生型RNAポリメラーゼ及び変異型RNAポリメラーゼで認識されるプロモーターの制御下に行うことを含む方法。
- 対象のRNAをインビボ調製するための方法であって、ゲノムが対象の該RNAをコードするDNA配列を含む所定のヌクレオチド配列を含むように改変され、転写が上記の野生型RNAポリメラーゼ及び変異型RNAポリメラーゼで認識されるプロモーターの制御下で行われる、請求項4記載の方法によって得られた少なくとも1つの変異型RNAポリメラーゼまたは請求項5または6記載の少なくとも1つの変異型RNAポリメラーゼを生産する請求項9記載の細胞の培養を含む方法。
- 対象のたんぱく質をインビボ調製するための方法であって、ゲノムが対象の該たんぱく質をコードするDNA配列を含む所定のヌクレオチド配列を含むように改変され、転写が上記の野生型RNAポリメラーゼ及び変異型RNAポリメラーゼで認識されるプロモーターの制御下行われる、請求項4記載の方法によって得られた少なくとも1つの変異型RNAポリメラーゼまたは請求項5または6記載の少なくとも1つの変異型RNAポリメラーゼを生産する請求項9記載の細胞の培養を含む方法。
- 請求項10から12のいずれか1項記載の対象のRNA又はたんぱく質をインビトロ又はインビボで調製するための方法であって、合成ポリアミンの添加の工程も含む方法。
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AU2012318752B2 (en) | 2011-10-03 | 2017-08-31 | Modernatx, Inc. | Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof |
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US9045740B2 (en) * | 2012-02-24 | 2015-06-02 | University Of Massachusetts | Modified T7-related RNA polymerases and methods of use thereof |
AU2013243951A1 (en) | 2012-04-02 | 2014-10-30 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of secreted proteins |
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