KR930021783A - 진균 프로테아제 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 세린 프로테아제를 암호화하는 DNA 서열, 서브틸리신 타입의 이러한 아스퍼질러스 세린 프로테아제 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명은 또한 이종 단백질의 발현에 유용한, 서브틸리신 타입의 세린 프로테아제가 결손된 아스퍼질러스 돌연변이체 균주, 및 이러한 돌연변이체 균주의 제조방법에 관한 것이다.

Description

진균 프로테아제
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (24)

  1. 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거(Aspergillus niger) 세린 프로테아제 - 암호화 DNA 서열을 포함하는 분리된 DNA 분자.
  2. 제1항에 있어서, 서열동정번호 2 및 7에 각각 나타낸 아미노산 서열을 갖는 세린 프로테아제로 이루어진 그룹중에서 선택된 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제-암호화 DNA 서열을 포함하는 DNA 분자.
  3. 제2항에 있어서, 서열동정번호 1에 나타낸 pepC 암호화 영역 및 서열동정번호 6에 나타낸 영역 pepD 암호화 영역으로 이루어진 그룹중에서 선택된 DNA 서열을 포함하는 DNA 분자.
  4. 제1항에 따른 DNA 분자를 포함하는 하이브리드 벡터.
  5. 제4항에 있어서, 서브틸리신 타입의 아스펄러스 니거세린 프로테아제-암호화 DNA 서열이 이를 적합한 숙주 세포내에서 발현시키기에 적합한 조절 성분과 기능적으로 결합되어 있는 하이브리드 벡터.
  6. 제5항에 있어서, 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제-암호화 DNA 서열이 이를 아스퍼질러스 균주내에서 발현시키기에 적합한 조절 성분과 기능적으로 결합되어 있는 하이브리드 벡터.
  7. 제6항에 있어서, 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제-암호와 목적 DNA 서열과 동종인 프로모터를 포함하는 하이브리드 벡터.
  8. 제5항에 있어서, 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제-암호와 목적 DNA 서열과 이종인 프로모터를 포함하는 하이브리드 벡터.
  9. 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제-암호화 DNA 분자로 형질전화시킨 숙주세포를 배양하고, 숙주 세포내로부터 상기 DNA 분자를 분리해냄을 특징으로 하는, 제1항에 따른 DNA분자의 제조방법.
  10. 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제에 대한 유전자에 결함이 있는 아스퍼질러스 니거 균주.
  11. 제10항에 있어서, 서열동정번호 1의 서열의 pepC 유전자에 결함이 있는 아스퍼질러스 니거, 서열동정번호6의 서열의 pepD 유전자에 결함이 있는 아스퍼질러스 니거, 및 서열동정번호 1 및 6의 각각의 서열의 pepC 및 pepD 유전자에 결함이 있는 아스퍼질러스 니거로 이루어진 그룹중에서 선택된 아스퍼질러스 니거 균주.
  12. 서브틸리신 타입의 세린 프로테아제에 대한 내생성, 염색체성 아스퍼질러스 니거 유전자를 돌연변이시킴을 특징으로 하는, 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제에 대한 유전자에 결함이 있는 아스퍼질러스 니거 균주의 제조방법.
  13. 제12항에 있어서, 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제에 대한 유전자를 시험관내 돌연변이시키고, 서브틸리신 타입의 세린 프로테아제에 대한 내생성, 염색체성 유전자를 함유하는 아스퍼질러스 니거 숙주를 시험관내 돌연변이시킨 유전자로 형질전환시키며, 내생성 유전자가 시험관내 돌연변이시킨 유전자로 형질전환시키며, 내생성 유전자가 시험관내 돌연변이시킨 유전자로 치환된 돌연변이체를 분리해냄을 특징으로 하는, 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제에 대한 유전자에 결함이 있는 아스퍼질러스 니거 균주의 제조방법.
  14. 제13항에 있어서, 내생성 유전자가 서열동정번호 1의 서열의 아스퍼질러스 니거 pepC 유전자 또는 서열동정번호 6의 서열의 아스퍼질러스 니거 pepD 유전자이거나 이들 pepC 및 pepD 유전자 모두인 방법.
  15. 제10항에 따른 아스퍼질러스 니거 균주를 목적하는 폴리펩타이드에 발현에 적합한 발현 카세트를 함유하는 발현 벡터로 형질전환시키고, 형질전환된 아스퍼질러스 니거 균주를 목적하는 폴리펩타이드의 발현에 적합한 조건하에서 배양한 다음, 목적하는 폴리펩타이드를 분리해냄을 특징으로 하는, 목적 폴리펩타이드의 제조방법.
  16. 서브탈리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제.
  17. 제16항에 있어서, 서열동정번호 2에 나타난 PEPC 및 서열동정번호 7에 나타낸 PEPD로 이루어진 그룹중에서 선택된 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제.
  18. 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제-암호화 DNA 서열이 이를 적합한 숙주내에서 발현시키기에 적합한 조절 성분과 기능적으로 결합된 형태로 포함되어 있는 하이브리드 발현 벡터로 형질전환시킨 적합한 숙주를 배양함을 특징으로 하는, 서브틸리신-타입의 아스퍼질러스 니거세린 프로테아제의 제조방법.
  19. 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제-암호화 DNA 서열의 숙주내에서 이를 발현시키기에 적합한 조절 성분과 기능적으로 결합된 형태로 포함되어 있는 하이브리드 발현 벡터로 형질전화된 숙주.
  20. 제19항에 있어서, 아스퍼질러스 니거 균주인 형질전환된 숙주.
  21. 제20항에 있어서, 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제-암호화 DNA 서열과 동종인 프로모터를 포함하는 하이브리드 발현 벡터로 형질전환된 아스퍼질러스 니거 균주인 형질전화된 숙주.
  22. 제20항에 있어서, 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제-암호화 DNA 서열과 이종인 프로모터를 포함하는 하이브리드 발현 벡터로 형질전환된 아스퍼질러스 니거 균주인 형질전환된 균주.
  23. 적합한 숙주를 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 니거 세린 프로테아제-암호화 DNA 서열이 이를 적합한 숙주내에서 발현시키기에 적합한 조절 성분과 기능적으로 결합된 형태로 포함되어 있는 하이브리드 발현벡터로 형질전환시킴을 특징으로 하는, 제19항에 따른 형질전화된 숙주의 제조방법.
  24. ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개되는 것임.
KR1019930006178A 1992-04-15 1993-04-14 서브틸리신 타입의 아스퍼질러스 세린 프로테아제,이를 암호화 하는 dna 서열 및 이들의 제조방법 KR100270644B1 (ko)

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Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5821350A (en) * 1995-11-01 1998-10-13 Nexia Biotechnologies, Inc. Aspergillus niger beta-galactosidase gene
EP0866872A1 (en) * 1995-12-15 1998-09-30 Novo Nordisk A/S A FUNGUNS WHEREIN THE areA, pepC AND/OR pepE GENES HAVE BEEN INACTIVATED
WO1997035956A1 (en) * 1996-03-27 1997-10-02 Novo Nordisk A/S Alkaline protease deficient filamentous fungi
WO1997046689A1 (en) * 1996-06-05 1997-12-11 Gist-Brocades B.V. Fungal metallo protease genes
JPH1016992A (ja) * 1996-07-04 1998-01-20 Toagosei Co Ltd 接着剤用容器
US6806062B1 (en) 1998-10-05 2004-10-19 Novozymes A/S Fungal transcriptional activator useful in methods for producing polypeptides
AU2001242299A1 (en) 2000-03-14 2001-09-24 Novozymes A/S Fungal transcriptional activator useful in methods for producing polypeptides
CN101292024B (zh) * 2005-10-17 2012-04-18 诺维信公司 用于表达抗体的真菌突变体的用途
EP2220110A1 (en) 2007-12-06 2010-08-25 Novozymes A/S Fungal pepc inhibitor
BR122019011255B1 (pt) 2009-12-18 2020-12-01 Novozymes, Inc mutante de uma cepa de trichoderma reesei parental isolada, e, métodos para produzir um polipeptídeo e para obter um mutante de uma cepa de trichoderma reesei parental
MD4186C1 (ro) * 2012-02-20 2013-06-30 Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы Tulpină de fungi Fusarium gibbosum - producătoare de proteaze acide şi neutre, xilanaze şi b-glucozidaze
JP2016523552A (ja) 2013-07-10 2016-08-12 ノバルティス アーゲー 多重プロテアーゼ欠損糸状菌細胞及びその使用方法
WO2015025055A1 (en) * 2013-08-23 2015-02-26 Novozymes A/S Regulated pepc expression
WO2016012468A1 (en) 2014-07-21 2016-01-28 Novartis Ag Production of glycoproteins with mammalian-like n-glycans in filamentous fungi

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1333777C (en) * 1988-07-01 1995-01-03 Randy M. Berka Aspartic proteinase deficient filamentous fungi

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