KR20140027985A - 암 치료용 ｐｉ 3-키나제 억제제로서의 크로메논 화합물 - Google Patents

암 치료용 ｐｉ 3-키나제 억제제로서의 크로메논 화합물 Download PDF

Info

Publication number
KR20140027985A
KR20140027985A KR1020137029759A KR20137029759A KR20140027985A KR 20140027985 A KR20140027985 A KR 20140027985A KR 1020137029759 A KR1020137029759 A KR 1020137029759A KR 20137029759 A KR20137029759 A KR 20137029759A KR 20140027985 A KR20140027985 A KR 20140027985A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
chromen
pyrrolidin
morpholino
formula
carbonyl
Prior art date
Application number
KR1020137029759A
Other languages
English (en)
Other versions
KR101854950B1 (ko
Inventor
베르나르 크리스토프 바람
세바스띠엥 루이 데고르스
데어 브렘프트 크리스틴 마리에 파울 람베르트-반
장-자크 마르셀 로만
패트릭 플르
Original Assignee
아스트라제네카 아베
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 아스트라제네카 아베 filed Critical 아스트라제네카 아베
Publication of KR20140027985A publication Critical patent/KR20140027985A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101854950B1 publication Critical patent/KR101854950B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염; 이의 제조 방법, 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 함유하는 약학적 조성물, 및 이의 세포 증식성 장애 치료용 약제의 제조에 있어서의 용도에 관한 것이다:
[화학식 I]
Figure pct00115

(식 중에서, 각각의 R1, R2, R3, R4, R5, n 및 R6은 명세서에서 상기 정의된 임의의 의미를 가짐).

Description

암 치료용 ＰＩ 3-키나제 억제제로서의 크로메논 화합물{CHROMENONE COMPOUNDS AS PI 3-KINASE INHIBITORS FOR THE TREATMENT OF CANCER}
본 발명은 항암 활성을 가지고, 이에 따라 인간 또는 동물 신체의 치료 방법에 유용한, 특정한 신규 크로메논 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다. 본 발명은 또한 상기 크로메논 화합물의 제조 방법, 그 크로메논 화합물을 포함하는 약학 조성물, 및 이의 치료 방법, 예를 들어 암의 예방 또는 치료에서의 용도를 비롯한, 인간과 같은 온혈 동물에서의 암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한 포스포이노시티드(PI) 3-키나제 β의 선택적 억제제이며, 예를 들어 항종양 요법에 유용한 크로메논 화합물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 항종양 요법에서 포스포이노시티드(PI) 3-키나제 β의 선택적 억제제인 본 발명의 크로메논 화합물의 용도에 관한 것이다. PI 3-키나제 β의 억제제는 유전자 PTEN(염색체 10에서 결실된 포스파타제 및 텐신 동종)이 부족한 종양의 치료에서 유효할 수 있으며, 이는 본 발명의 다른 한 특징과 관련되어 있다.
본 발명은 또한 포스포이노시티드(PI) 3-키나제 δ의 선택적 억제제이며, 예를 들어 항종양 요법에 유용한 크로메논 화합물, 및 PI 3-키나제 β 및 PI 3-키나제 δ 모두의 선택적 억제제인 크로메논 화합물에 관한 것이다. 그러한 이원 PI 3-키나제 β/δ 억제제도 또한 종양의 치료에 유용하다.
암 분야에서 최근 수년간, 세포는 DNA의 한 부분이 종양유전자, 즉 활성화 시 악성 종양 세포의 형성을 초래하는 유전자로 변형됨으로써 암에 걸리게 될 수 있는 것으로 밝혀졌다(문헌[Bradshaw, Mutagenesis, 1986, 1, 91]). 이러한 수개의 종양유전자는 성장 인자에 대한 수용체인 펩티드를 생성시킨다. 성장 인자 수용체 착체의 활성화는 차후에 세포 증식의 증가를 초래한다. 예를 들어, 수개의 종양유전자는 티로신 키나제 효소를 암호화하고, 특정 성장 인자 수용체들도 또한 티로신 키나제 효소인 것으로 공지되어 있다(문헌[Yarden et al., Ann. Rev. Biochem., 1988, 57, 443]; 및 [Larsen et al., Ann. Reports in Med. Chem., 1989, Chpt. 13]). 확인하고자 하는 티로신 키나제의 제1군은 그러한 바이러스성 종양유전자, 예를 들어 pp60v-Src 티로신 키나제(또는 v-Src로 공지됨) 및 이에 상응하는 정상 세포에서의 티로신 키나제, 예를 들어 pp60c-Src티로신 키나제(또는 c-Src로 공지됨)로부터 발생된다.
수용체 티로신 키나제는 세포 복제를 개시하는 생화학 신호의 전달에서 중요하다. 이들은, 세포막에 걸쳐 있고 표피 성장 인자(EGF)의 성장 인자에 대해 세포 외 결합 영역을 가지며, 단백질에서 티로신 아미노산을 인산화하여, 세포 증식에 영향을 미치는 키나제로서 작용하는 세포내 부분을 가지는 거대 효소이다. 상이한 수용체 티로신 키나제에 결합되는 성장 인자의 부류를 기초로 한 다양한 계열의 수용체 티로신 키나제가 공지되어 있다(문헌[Wilks, Advances in Cancer Research, 1993, 60, 43-73]). 분류에 의하면, EGF, TGFα, Neu 및 erbB 수용체와 같은 수용체 티로신 키나제의 EGF 패밀리를 포함하는 I 계열 수용체 티로신 키나제를 포함한다.
또한, 특정 티로신 키나제는 세포 내에 위치하며, 종양 세포 운동성, 파종 및 침투성 및 그에 따른 전이성 종양 성장에 영향을 미치는 것과 같은 생화학적 신호의 전달에 관여하는 비-수용체 티로신 키나제의 계열에 속하는 것으로 공지되어 있다. Src, Lyn, Fyn 및 Yes 티로신 키나제와 같은 Src 패밀리를 비롯한 각종 계열의 비-수용체 티로신 키나제가 공지되어 있다.
또한, 특정 키나제는 세포내 또한 티로신 키나제 활성화의 하류에 위치하며, 종양 세포 성장에 영향을 미치는 신호와 같은 생화학적 신호의 전달에 관여하는 세린/트레오닌 키나제의 계열에 속하는 것으로도 공지되어 있다. 이와 같은 세린/트레오닌 신호전달 경로는 Raf-MEK-ERK 캐스케이드 및, PDK-1, AKT 및 mTOR과 같은 PI 3-키나제의 하류에 있는 것을 포함한다(문헌[Blume-Jensen and Hunter, Nature, 2001, 411, 355]).
또한, 특정의 기타 키나제는 세포내에 위치하는, 종양 세포 성장 및 침습성에 영향을 미치는 것과 같은 생화학적 신호의 전달에 관여하는 지질 키나제의 계열에 속하는 것으로 공지되어 있다. 포스파티딜이노시톨-3-키나제 패밀리로서도 공지되어 있는, 전술한 PI 3-키나제 패밀리를 비롯한 각종 계열의 지질 키나제가 공지되어 있다.
종양유전자 및 종양 억제제 유전자의 조절완화는 예를 들어 증가된 세포 증식 또는 증가된 세포 생존에 의하여 악성 종양의 형성에 기여하는 것으로 이해된다. 또한, PI 3-키나제 패밀리에 의하여 매개되는 신호전달 경로는 증식 및 생존을 비롯한 다수의 세포 과정에서 중추적 역할을 하며, 이러한 경로의 조절완화는 다양한 범위의 인간 암 및 기타의 질환의 원인이 되는 인자인 것으로 공지되어 있다(문헌[Katso et al., Annual Rev. Cell Dev. Biol., 2001, 17: 615-617] 및 [Foster et al., J. Cell Science, 2003, 116: 3037-3040]).
지질 키나제의 PI 3-키나제 패밀리는 포스파티딜이노시톨(PI)의 이노시톨 환의 3-위치를 인산화하는 효소의 군이다. 생리학적 기질 특이성에 의하여 분류되는 PI 3-키나제 효소의 3종의 주요한 군이 공지되어 있다(문헌[Vanhaesebroeck et al., Trends in Biol. Sci., 1997, 22, 267]). III 계열 PI 3-키나제 효소는 PI만을 인산화한다. 반대로, II 계열 PI 3-키나제 효소는 PI 및 PI 4-인산염(이하에서 PI(4)P로 약칭함) 모두를 인산화한다. PI(4,5)P2만이 생리학적 세포 기질인 것으로 밝혀지기는 하였으나, I 계열 PI 3-키나제 효소는 PI, PI(4)P 및 PI 4,5-비스인산염(이하에서 PI(4,5)P2로 약칭함)을 인산화한다. PI(4,5)P2의 인산화는 지질 2차 메신저 PI 3,4,5-삼인산염(이하에서 PI(3,4,5)P3으로 약칭함)를 생성한다. 이와 같은 수퍼패밀리의 더욱 원위적으로 관련된 요인은 단백질 기질 내에서 세린/트레오닌 잔기를 인산화하는 IV 계열 키나제, 예컨대 mTOR 및 DNA 의존성 키나제이다. 이들 지질 키나제의 가장 많이 연구되고, 이해되고 있는 것은 I 계열 PI 3-키나제 효소이다.
I 계열 PI 3-키나제는 p110개의 촉매 서브유니트 및 조절 서브유니트로 이루어진 이질이합체이며, 패밀리는 조절 파트너 및 조절 기전에 기초하여 Ia 계열 및 Ib 계열 효소로 더욱 나뉜다. Ia 계열 효소는 PI 3-키나제 β를 포함하며, 5종의 별개의 조절 유니트(p85α, p55α, p50α, p85β 및 p55γ)로 이량체화되는 3종의 별개의 촉매 서브유니트(p110α, p110β 및 p110δ)로 이루어지며, 모든 촉매 서브유니트는 모든 조절 서브유니트와 상호작용하여 각종 이질이합체를 형성할 수 있다. Ia 계열 PI 3-키나제 효소는 일반적으로 IRS-1과 같은 활성화된 수용체 또는 적합기 단백질의 특이성 포스포-티로신 잔기를 가지는 조절 서브유니트 SH2 도메인의 상호작용에 의하여, 수용체 티로신 키나제의 성장 인자-자극에 반응하여 활성화된다. p110α 및 p110β 모두는 모든 세포 유형들에서 구조적으로 발현되는 한편, p110δ 발현은 백혈구 모집단 및 일부 상피 세포로 더욱 제한된다. 반대로, 단일 Ib 계열 효소는 p101 조절 서브유니트와 상호작용하는 p110γ 촉매 서브유니트로 이루어진다. 또한, Ib 계열 효소는 상기 기재된 바와 같은 기전뿐 아니라, G-단백질 결합 수용체(GPCR) 시스템에 반응하여 활성화된다.
이제, PI 3-키나제 β를 포함한 Ia 계열 PI 3-키나제 효소는 다양한 인간 암에서의 종양형성에 직접적으로 또는 간접적으로 기여한다는 것을 나타내는 상당한 증거가 있다(문헌[Vivanco and Sawyers, Nature Reviews Cancer, 2002, 2, 489-501]). 예를 들어, p110α 서브유니트는 난소암[Shayesteh et al., Nature Genetics, 1999, 21: 99-102] 및 자궁경부암[Ma et al., Oncogene, 2000, 19: 2739-2744]과 같은 일부 종양에서 증폭된다. p110α의 촉매 부위 내에서의 활성화 변이는 결장직장 부위 및 유방 및 폐의 종양과 같은 각종 기타 종양과 관련되어 있다(문헌[Samuels et al., Science, 2004, 304, 554]). p85α에서의 종양 관련된 변이는 또한 난소 및 결장의 암과 같은 암에서 확인되었다(문헌[Philp et al., Cancer Research, 2001, 61, 7426-7429]). PI 3 키나제-δ는 B-세포 기능에서 중추적 역할을 하고, 일정 범위의 B-세포 악성종양에서 생존 신호전달의 매개자인 것으로 나타났다. 이에는 만성 림프구 백혈병(CLL), 급성 림프모구성 백혈병(ALL), 여포 림프종, 미만성 거대세포 B-세포 림프종(DLBCL) 및 외투 세포 림프종(문헌[Ikeda et al., Blood, 2010, 116, 1460-1468]; 문헌[Herman et al., Blood, 2010, 116, 2078-2088]; 문헌[Lannutti et al., Blood, 2011, 117, 591-594]; 문헌[Hoellenriegel et al., Blood, 2011, 118, 3603-3612)]이 포함되나, 이들에 국한되지 않는다. 직접적인 효과 이외에, Ia 계열 PI 3-키나제의 활성화는 예를 들어 수용체 티로신 키나제, GPCR 시스템 또는 인테그린의 리간드 의존성 또는 리간드 비의존성 활성화에 의하여 신호전달 경로에서의 상류에 발생하는 종양형성 이벤트에 기여하는 것으로 판단된다(문헌[Vara et al., Cancer Treatment Reviews, 2004, 30, 193-204]). 이러한 상류 신호전달 경로의 예에는 PI 3-키나제-매개 경로의 활성화[Harari et al., Oncogene, 2000, 19, 6102-6114] 및 종양유전자 Ras의 과발현[Kauffmann-Zeh et al., Nature, 1997, 385, 544-548]을 초래하는 각종 종양에서의 수용체 티로신 키나제 Erb2의 과발현이 포함된다. 또한, Ia 계열 PI 3-키나제는 각종 하류 신호전달 경우에 의하여 야기되는 종양형성에 간접적으로 기여할 수 있다. 예를 들어, PI(3,4,5)P3을 다시 PI(4,5)P2로의 전환을 촉매화하는 PTEN 종양 억제제 포스파타제 효과의 상실은 PI(3,4,5)P3의 PI 3-키나제-매개 생성의 조절완화를 통하여 다양한 범위의 종양과 관련되어 있다(문헌[Simpson and Parsons, Exp. Cell Res., 2001, 264, 29-41]). 게다가, 기타 PI 3-키나제-매개 신호전달 이벤트의 효과 증가는 예를 들어 Akt의 활성화에 의하여 각종 암에 기여하는 것으로 밝혀졌다(문헌[Nicholson and Anderson, Cellular Signalling, 2002, 14, 381-395]).
종양 세포에서의 증식성 및 생존 신호절달을 매개하는 데 있어서의 역할뿐 아니라, Ia 계열 PI 3-키나제 효소는 종양 관련 간질 세포에서의 작용을 통하여 종양형성에 기여한다는 우수한 증거가 있다. 예를 들어, PI 3-키나제 신호전달은 VEGF와 같은 전-혈관형성 인자에 반응하는 내피 세포에서의 혈관형성 이벤트를 매개하는 데 있어서 중요한 역할을 하는 것으로 공지되어 있다(문헌[Abid et al., Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 2004, 24, 294-300]). I 계열 PI 3-키나제 효소로는 또한 운동성 및 이동에 관련되어 있으므로[Sawyer, Expert Opinion Investig. Drugs, 2004, 13, 1-19], PI 3-키나제 억제제는 종양 세포 침습 및 전이의 억제를 통하여 치료적 잇점을 제공하게 된다.
또한, I 계열 PI 3-키나제 효소는 염증 세포의 전-종양형성 효과에 기여하는 PI 3-키나제 활성을 가지는 면역 세포의 조절에서 중요한 역할을 한다(문헌[Coussens and Werb, Nature, 2002, 420, 860-867]).
이러한 발견은 I 계열 PI 3-키나제 효소의 약리학적 억제제가 고형 종양, 예컨대 암종 및 육종, 및 백혈병 및 림프구 악성 종양을 포함하는 암의 질환의 다양한 형태의 치료에 있어 치료 가치가 있다는 것을 시사한다. 특히, I 계열 PI 3-키나제 효소의 억제제는 예를 들어 유방암, 직장결장암, 폐암(소세포 폐암, 비-소세포 폐암 및 기관지폐포암 포함) 및 전립선암 및, 담관암, 골암, 방광암, 뇌암, 두경부암, 신장암, 간암, 위장관 조직암, 식도암, 난소암, 췌장암, 피부암, 고환암, 갑상선암, 자궁암, 자궁경부암 및 음문암, 백혈병(ALL, CLL 및 CML[만성 골수성 백혈병(Chronic Myelogenous Leukaemia)] 포함), 다발성 골수종 및 림프종(비호지킨 림프종, 예컨대 미만성 거대세포 B-세포 림프종[DLBCL], 여포 림프종 및 외투 세포 림프종 포함)의 치료에 있어 치료적으로 중요해야 한다.
일반적으로, 연구자들은 전술한 PI 3-키나제 억제제 LY294002 및 워트만닌(wortmannin)을 사용한 PI 3-키나제 효소 패밀리의 생리학적 및 병리학적 역할을 탐색하였다. 이들 화합물의 사용이 세포성 이벤트에서 PI 3-키나제에 대한 역할을 시사할 수 있기는 하나, 이들은 패밀리 구성원의 개개의 역할의 분석을 가능케 하기에 PI 3-키나제 패밀리 내에서 충분히 선택적이지 않다. 이러한 이유로, 더욱 강하고 선택적인 약학적 PI 3-키나제 억제제는 PI 3-키나제 기능의 완전한 이해가 가능하도록, 또한 유용한 치료제를 제공하도록 하는 데 유용할 것이다.
종양형성 이외에, I 계열 PI 3-키나제 효소가 기타의 질환에서 역할을 하는 증거가 있다(문헌[Wymann et al., Trends in Pharmacological Science, 2003, 24, 366-376]). Ia 계열 PI 3-키나제 효소 및 단일 Ib 계열 효소 모두는 면역계의 세포에 중요한 역할을 하고(문헌[Koyasu, Nature Immunology, 2003, 4, 313-319]), 이에 따라 이들은 염증성 및 알러지 징조에 대한 치료적 표적이 된다. PI 3-키나제의 억제는 또한 이미 기재한 바와 같이 항염증성 효과를 통하여 또는 직접적으로 심근 세포에 영향을 미쳐 심혈관 질환을 치료하는 데 유용하다(문헌[Prasad et al., Trends in Cardiovascular Medicine, 2003, 13, 206-212]). PI 3-키나제의 억제는 또한 혈전증의 치료에도 유용하다. WO2004016607은 고 전단 조건하에서 발생하는 혈소판 응집 및 유착을 파열시키는 방법 및, 전단에 의하여 유도되는 혈소판 활성화를 억제하는 방법을 제공하며, 이 방법 모두는 선택성 PI 3-키나제 β 억제제의 투여를 포함한다. WO2004016607은 또한 유효량의 선택성 PI 3-키나제 β 억제제를 투여하는 단계를 포함하는 항혈전 방법을 제공한다. 이러한 방법에 의하면, 혈전증의 특이적 억제는 전단 유도된 혈소판 활성화에 중요한 PI 3-키나제 β를 표적화하여 정상의 지혈에 영향을 미치지 않으면서 수득될 수 있다. 그러므로, 상기 항혈전 방법은 정상적 지혈을 파괴하여 야기되는 부작용, 예컨대 출혈 시간의 연장을 수반하지 않는다. 따라서, PI 3-키나제 β의 억제제를 비롯한 I 계열 PI 3-키나제 효소의 억제제는 암 이외에도 매우 다양한 질환의 예방 및 치료에 있어 중요할 것으로 예상된다.
본 발명의 화합물, 즉 크로메논 화합물은 이제 놀랍게도, 강한 항종양 활성을 가지며, 악성 질환으로부터 야기되는 비조절성 세포 증식을 억제하는 데 있어서 유용한 것으로 밝혀졌다. 본 발명에 개시된 화합물이 단일 생물학적 과정에 대한 효과에 의하여서만 약리학적 활성을 가진다는 것을 의미하고자 하는 것은 아니며, 화합물은 I 계열 PI 3-키나제 효소의 억제, 특히 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 및/또는 Ib 계열 PI 3-키나제 효소의 억제, 보다 특히 PI 3-키나제 β의 억제를 포함한, Ia 계열 PI 3-키나제 효소의 억제에 의하여 항종양 효과를 제공하는 것으로 판단된다.
본 발명의 화합물은 또한 각종 비-악성 질환, 예컨대 염증성 질환(예를 들어, 류마티스 관절염 및 염증성 대장 질환), 섬유성 질환(예를 들어, 간 경변증 및 폐 섬유증), 사구체신염, 다발성 경화증, 건선, 양성 전립선 비대증(BPH), 피부의 과민성 반응, 혈관 질환(예를 들어, 죽상경화증 및 재협착), 알러지성 천식, 인슐린 의존성 당뇨병, 망막병 및 당뇨 신장병으로부터 야기되는 비조절성 세포성 증식을 억제하는 데 있어서 유용하다.
일반적으로, 본 발명의 화합물은 티로신 키나제 효소, 예컨대 수용체 티로신 키나제, 예를 들어 EGF 수용체 티로신 키나제 및/또는 VEGF 수용체 티로신 키나제 또는 비-수용체 티로신 키나제, 예컨대 Src에 대한 덜 강한 억제 활성을 가지면서, PI 3-키나제 β를 비롯한 I 계열 PI 3-키나제 효소, 특히 Ia 계열 PI 3-키나제 효소에 대한 강한 억제 활성을 나타낸다. 또한, 본 발명의 특정한 화합물은 EGF 수용체 티로신 키나제 또는 VEGF 수용체 티로신 키나제 또는 Src 비-수용체 티로신 키나제에 대하여보다는 PI 3-키나제 β를 비롯한 I 계열 PI 3-키나제 효소, 특히 Ia 계열 PI 3-키나제 효소에 대하여 실질적으로 더 양호한 효능을 가진다. 이러한 화합물은 EGF 수용체 티로신 키나제 또는 VEGF 수용체 티로신 키나제 또는 Src 비-수용체 티로신 키나제에 대한 적은 활성을 나타내면서, PI 3-키나제 β를 비롯한 I 계열 PI 3-키나제 효소를 억제하는, 특히 Ia 계열 PI 3-키나제 효소를 억제하는 데 충분량으로 사용될 수 있는, I 계열 PI 3-키나제 효소에 대한 충분한 효능을 가진다.
또한, 본 발명의 특정한 화합물은 티로신 키나제 효소, 예컨대 수용체 티로신 키나제, 예를 들어 EGF 수용체 티로신 키나제 및/또는 VEGF 수용체 티로신 키나제 또는 비-수용체 티로신 키나제, 예컨대 Src에 대한 덜 강한 억제 활성을 가지면서, PI 3-키나제 β 및 PI 3-키나제 δ 모두에 대한 강한 억제 활성을 나타낸다. 또한, 본 발명의 특정한 화합물은 PI 3-키나제 β 및 PI 3-키나제 δ를 억제하는 데 충분량으로 사용될 수 있는, PI 3-키나제 β 및 PI 3-키나제 δ 모두에 대한 충분한 효능을 가져, EGF 수용체 티로신 키나제 또는 VEGF 수용체 티로신 키나제 또는 Src 비-수용체 티로신 키나제에 대하여보다는 PI 3-키나제 β 및 PI 3-키나제 δ 모두에 대하여 실질적으로 더 양호한 효능을 가진다. 그러한 화합물은 EGF 수용체 티로신 키나제 또는 VEGF 수용체 티로신 키나제 또는 Src 비-수용체 티로신 키나제에 대한 적은 활성을 나타낸다.
본 발명의 한 측면에 따라, 하기 화학식 I의 크로메논 유도체; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다:
[화학식 I]
Figure pct00001
(식 중에서,
R 1 는 히드록시로 임의적으로 치환된 (1-4C)알킬이고;
R 2 는 H 또는 (1-4C)알킬이거나; 혹은
R 1 및 R 2 는 함께 산소, 질소 및 황으로부터 선택되는 1 또는 2개의 추가 이종원자를 임의적으로 함유하는 3 내지 8원의 함질소 복소환식 환계(여기서, 환의 황 원자는 임의적으로 산화되어 S-산화물(들)을 형성하고, 상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환됨)를 형성하고;
R 3 및 R 5 는 H, 할로게노, (1-3C)알콕시 및 시아노로부터 독립적으로 선택되며;
R 4 는 H 또는 플루오로이고;
n은 0 또는 1이고, n이 1일 때, R 6 기는 메틸임).
본 명세서에서, 일반적인 용어 "(1-4C)알킬"은 직쇄 및 분지쇄 알킬 기 모두, 예컨대 프로필, 이소프로필 및 tert-부틸, 및 (3-4C)시클로알킬 기, 예컨대 시클로프로필 및 시클로부틸, 및 시클로프로필메틸과 같은 기를 포함한다. 그러나, "프로필"과 같은 개개의 알킬 기라는 표현은 직쇄형에만 특정되고, "이소프로필"과 같은 개개의 분지쇄 알킬 기라는 표현은 분지쇄형에만 특정되며, "시클로프로필"과 같은 개개의 시클로알킬 기라는 표현은 3원 환에만 특정된다.
당업자라면, 본원에 사용되는 용어 "(1-4C)알킬" 및 "(1-3C)알킬"은 1 내지 4개 및 1 내지 3개의 탄소 원자를 각기 가지는 상기 정의된 임의의 알킬기들 중 임의의 것을 지칭한다는 것을 인식할 것이다. 이러한 규정은 본원에 사용된 다른 용어들, 예를 들어 "(1-3C)알콕시", "(1-10C)알콕시카르보닐" 및 "(1-10C)알카노일"에도 적용된다.
상기 정의된 화학식 I의 특정 화합물이 1종 이상의 비대칭 탄소 원자에 의하여 광학적 활성 또는 라세미 형태로 존재할 수 있는 한, 본 발명은 그 정의 내에서 포스포이노시티드(PI) 3-키나제 억제 활성을 가지는 임의의 상기 광학적 활성 또는 라세미 형태를 포함하는 것으로 이해한다. 광학적 활성 형태의 합성은 당업계에 공지된 유기 화학의 표준 기법에 의하여, 예를 들어 광학 활성 출발 물질로부터의 합성에 의하여 또는 라세미 형태의 분해에 의하여 수행될 수 있다. 이와 마찬가지로, 전술한 활성은 표준 실험실 기법을 사용하여 평가할 수 있다.
본원에 기재된 화합물의 특정한 거울상이성질체는 화합물의 다른 거울상이성질체보다 더 활성적일 수 있다. 예를 들어, 실시예 1.03의 표제 화합물의 (+) 거울상이성질체(즉, 실시예 1.03a의 화합물(여기서, (+)는 실시예 1.03a에 기재된 조건 하에서 특정된 광회전을 의미함))는 보다 약한 활성을 가지는 거울상이성질체이다. 혼동을 피하기 위하여, 문제의 키랄 중심은 크로메논 이환식 환에 연결된 중심의 피롤리딘 환의 2-위치에 있는 탄소 원자인 것으로 한다.
따라서, 본 발명의 다른 한 측면에서, 크로메논 이환식 환에 연결된 중심의 피롤리딘 환의 2-위치에 있는 키랄 중심이 (R)-입체화학 구조로 있는, 화학식 I의 크로메논 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다. 본 발명의 다른 한 측면에서, 크로메논 이환식 환에 연결된 중심의 피롤리딘 환의 2-위치에 있는 키랄 중심이 (S)-입체화학 구조로 있는, 화학식 I의 크로메논 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 단일 거울상이성질체가 ≥95, ≥98% 또는 ≥99%의 거울상이성질체 과잉율 (%ee)을 가지는 화학식 I의 크로메논 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다. 본 발명의 상기 측면의 한 실시양태에서, 크로메논 이환식 환에 연결된 중심의 피롤리딘 환의 2-위치에 있는 키랄 중심은 (R)-입체화학 구조로 있다. 본 발명의 상기 측면의 다른 한 실시양태에서, 크로메논 이환식 환에 연결된 중심의 피롤리딘 환의 2-위치에 있는 키랄 중심은 (S)-입체화학 구조로 있다.
본 발명의 다른 한 측면에 따라, ≥95, ≥98% 또는 ≥99%의 거울상이성질체 과잉율(%ee)로 존재하는 단일 거울상이성질체인 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 약학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체와 병용하여 포함하는 약학 조성물이 제공된다. 편의적으로, 단일 거울상이성질체는 ≥99%의 거울상이성질체 과잉율(%ee)로 존재한다. 본 발명의 상기 측면의 한 실시양태에서, 크로메논 이환식 환에 연결된 중심의 피롤리딘 환의 2-위치에 있는 키랄 중심은 (R)-입체화학 구조로 있다. 본 발명의 상기 측면의 다른 한 실시양태에서, 크로메논 이환식 환에 연결된 중심의 피롤리딘 환의 2-위치에 있는 키랄 중심은 (S)-입체화학 구조로 있다.
화학식 I의 일부 화합물은 다형태를 나타낼 수 있다. 본 발명은 임의의 다형태 또는 이의 혼합물을 포함하며, 상기 형태는 포스포이노시티드(PI) 3-키나제 활성의 억제에서 유용한 성질을 가지는 것으로 이해하여야 하며, 이후 기재되는 표준 테스트에 의하여 포스포이노시티드(PI) 3-키나제 활성의 억제를 위한 다형태의 효능을 결정하는 방법은 당업계에 공지되어 있다.
일반적으로, 결정질 물질은 X선 분말 회절(이하, XRPD) 분석, 시차 주사 열량법(이하, DSC), 열 중량 분석(이하, TGA), 확산 반사 적외선 푸리에 변환(DRIFT) 분광학, 근적외선(NIR) 분광학, 용액 및/또는 고체 상태 핵자기 공명 분광학과 같은 통상의 기술을 사용하여 분석할 수 있다. 이러한 결정질 물질의 수분 함유량은 카알 피셔(Karl Fischer) 분석에 의하여 결정할 수 있다.
한 예로서, 실시예 1.03b의 화합물은 다형태를 나타내고, 3개의 결정질 형태 A, B 및 C가 동정되었다. 특정한 결정질 형태는 약학 개발을 위해 특히 적당하도록 하는 유리한 성질, 예컨대 향상된 안정성을 나타낼 수 있다.
따라서, 본 발명의 다른 한 측면은 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 4.8°에 1개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 8.1°에 1개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 4.8° 및 8.1°에 2개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 4.8, 6.4, 8.1, 9.6, 15.8, 19.5, 20.3, 22.7, 23.4, 25.9°에 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 도 1에 도시된 X-선 분말 회절 패턴과 실질적으로 동일한 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 4.8°±0.5° 2-세타에 1개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 8.1°±0.5° 2-세타에 1개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 4.8° 및 8.1° (여기서, 상기 값은 ±0.5° 2-세타일 수 있음)에 2개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 4.8, 6.4, 8.1, 9.6, 15.8, 19.5, 20.3, 22.7, 23.4, 25.9° (여기서, 상기 값은 ±0.5° 2-세타일 수 있음)에 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 2-세타 = 4.8°에 1개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 2-세타 = 8.1°에 1개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 2-세타 = 4.8° 및 8.1°에 2개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 2-세타 = 4.8, 6.4, 8.1, 9.6, 15.8, 19.5, 20.3, 22.7, 23.4, 25.9°에 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 도 1에 도시된 바와 같은 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 A형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 다른 한 측면은 B형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 11.1°에 1개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 B형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 6.9° 및 11.1°에 2개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 B형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 6.9, 9.4, 9.8, 11.1, 12.7, 13.1, 13.7, 17.8, 18.7, 19.7°에 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 B형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 도 2에 도시된 X-선 분말 회절 패턴과 실질적으로 동일한 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 B형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 11.1°±0.5° 2-세타에 1개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 B형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 6.9 및 11.1° (여기서, 상기 값은 ±0.5° 2-세타일 수 있음)에 2개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 B형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 6.9, 9.4, 9.8, 11.1, 12.7, 13.1, 13.7, 17.8, 18.7, 19.7° (여기서, 상기 값은 ±0.5° 2-세타일 수 있음)에 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 B형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 2-세타 = 11.1°에 1개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 B형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 2-세타 = 6.9° 및 11.1°에 2개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 B형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 2-세타 = 6.9, 9.4, 9.8, 11.1, 12.7, 13.1, 13.7, 17.8, 18.7, 19.7°에 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 B형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 도 2에 도시된 바와 같은 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 B형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 다른 한 측면은 C형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 5.9 및 12.2°에 2개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 C형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 5.9, 12.2, 11.8, 13.5, 15.2, 15.4, 17.1°에 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 C형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 도 4에 도시된 X-선 분말 회절 패턴과 실질적으로 동일한 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 C형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 5.9 및 12.2° (여기서, 상기 값은 ±0.5° 2-세타일 수 있음)에 2개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 C형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 약 2-세타 = 5.9, 12.2, 11.8, 13.5, 15.2, 15.4, 17.1° (여기서, 상기 값은 ±0.5° 2-세타일 수 있음)에 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 C형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 2-세타 = 5.9° 및 12.2°에 2개 이상의 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 C형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 2-세타 = 5.9, 12.2, 11.8, 13.5, 15.2, 15.4, 17.1°에 특정 피크가 있는 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 C형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 도 4에 도시된 바와 같은 X-선 분말 회절 패턴을 가지는, 결정질 형태인 C형의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 제공된다.
X선 분말 회절 패턴의 2θ 값은 기기에 따라 또는 샘플에 따라 약간 변동될 수 있으며, 따라서, 인용된 값은 절대적인 것으로 간주되어서는 안됨을 이해한다.
X선 분말 회절 패턴은 측정 조건(예컨대 사용한 기기 또는 기계)에 따른 1종 이상의 측정 오차를 가지는 것을 수득될 수 있는 것으로 공지되어 있다. 특히, X선 분말 회절 패턴에서의 강도는 측정 조건에 따라 변동될 수 있다는 것은 일반적으로 공지되어 있다. 그러므로, 상기 기재된 본 발명의 결정질 형태는 달리 명시되지 않는 한, 도 1, 2 및 4에 도시된 X선 분말 회절 패턴과 동일한 X선 분말 회절 패턴을 제공하는 결정 및 본 발명의 범주내에 포함되는 도 1, 2 및 4에 도시된 바와 실질적으로 동일한 X선 분말 회절 패턴을 제공하는 임의의 결정으로 한정되지 않는 것으로 이해하여야 한다. X선 분말 회절 업계의 당업자는 X선 분말 회절 패턴의 실질적인 실체를 판단할 수 있다.
X선 분말 회절 분야의 당업자는 또한 피크의 강도가 예를 들어 샘플의 분석에 영향을 미칠 수 있는 크기가 30 마이크론보다 크며 비-단일의 종횡비를 가지는 그레인에 의하여 영향을 받을 수 있다는 것을 인지할 것이다. 당업자는 또한 샘플이 회절계내에 위치하는 정확한 높이 및 회절계의 0점 보정에 의하여 영향받을 수 있다는 것을 인지할 것이다. 샘플의 표면 평탄도는 또한 작은 영향을 미칠 수 있다. 따라서, 제시된 회절 패턴 데이터는 절대값으로 간주하지 않아야 한다(문헌[Jenkins, R & Snyder, R.L. 'Introduction to X-Ray Powder Diffractometry' John Wiley & Sons 1996]; [Bunn, C.W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London]; [Klug, H. P. & Alexander, L. E. (1974), X-Ray Diffraction Procedures] 참조).
일반적으로, X선 분말 회절도에서의 회절 각도의 측정 오차는 약 + 또는 - 0.5° 2-세타이며, 이러한 측정 오차 정도는 X선 분말 회절 데이타의 고려시 참조하여야만 한다. 게다가, 강도는 실험 조건 및 샘플 제조(바람직한 배향)에 따라 변동될 수 있는 것으로 이해하여야 한다.
본 발명의 특정의 화합물은 각각의 실시예의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염(들)이며, 이들 각각은 본 발명의 다른 한 독립적 측면을 제공한다.
본 발명의 다른 한 측면에 따라, 본원에 개시된 바와 같은 임의의 실시예에 의해 수득될 수 있는 화학식 I의 크로메논 유도체를 제공한다.
본 발명의 다른 한 특징은 특정의 실시예들, 예컨대 실시예 1.00, 1.01, 1.03, 1.03b, 1.05, 1.06, 1.07, 1.08, 2.00, 3.00, 3.02, 3.03 등이 개별적으로 포기되는 조건 하에서의 본원에 정의되는 임의의 범주이다.
본 발명의 또 다른 특징은 한 특정의 실시예, 예컨대 실시예 1.00, 1.01, 1.03, 1.03b, 1.05, 1.06, 1.07, 1.08, 2.00, 3.00, 3.02, 3.03 등이 개별적으로 포기되는 조건 하에서의 본원에 정의되는 임의의 범주이다.
따라서, 본 발명의 다른 한 측면에서, 하기와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공되고, 단 화학식 I의 화합물은 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온 이외의 것이다:
[화학식 I]
Figure pct00002
(식 중에서,
R 1 는 히드록시로 임의적으로 치환된 (1-4C)알킬이고;
R 2 는 H 또는 (1-4C)알킬이거나; 혹은
R 1 및 R 2 는 함께 산소, 질소 및 황으로부터 선택되는 1 또는 2개의 추가 이종원자를 임의적으로 함유하는 3 내지 8원의 함질소 복소환식 환계(여기서, 환의 황 원자는 임의적으로 산화되어 S-산화물(들)을 형성하고, 상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환됨)를 형성하고;
R 3 및 R 5 는 H, 할로게노, (1-3C)알콕시 및 시아노로부터 독립적으로 선택되며;
R 4 는 H 또는 플루오로이고;
n은 0 또는 1이고, n이 1일 때, R 6 기는 메틸임).
상기 정의된 화학식 I의 특정의 화합물은 호변이성질체 현상을 나타낼 수 있는 것으로 이해하여야 한다. 본 발명은 이의 정의 내에서 포스포이노시티드(PI) 3-키나제 억제 활성을 가지는 임의의 상기 호변이성질체 형태 또는 이의 혼합물을 포함하며, 화학식에서 사용되거나 또는 실시예에서 명명된 임의의 하나의 호변이성질체 형태로 단지 국한되지 않는 것으로 이해하여야 한다. 일반적으로, 임의의 상기 호변이성질체 형태 중 단 하나는 하기의 실시예에 명명되어 있으며, 하기의 임의의 관련 화학식으로 제시된다.
상기 언급된 일반적인 라디칼에 적당한 예는 하기에 제시된 것을 포함한다.
화학식 I의 R1 및 R2 기로 형성된 3원 내지 8원의 함질소 복소환식 환계의 적당한 예는 예를 들어, 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 1개 또는 2개의 추가의 이종원자를 임의로 포함하는 함질소 비방향족 포화 또는 부분 포화 3원 내지 8원의 환이며, 여기서 환의 황 원자는 임의적으로 산화되어 S-산화물(들)을 형성한다. 적당한 예에는 아제파닐, 옥사제파닐, 아지리디닐, 아제티디닐, 피롤리닐, 피롤리디닐, 이미다졸리닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리닐, 피라졸리디닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 테트라히드로-1,4-티아지닐, 1,1-디옥소테트라히드로-1,4-티아지닐, 피페리디닐, 호모피페리디닐, 피페라지닐, 호모피페라지닐, 디히드로피리디닐, 테트라히드로피리디닐, 디히드로피리미디닐 또는 테트라히드로피리미디닐이다. 한 특정한 군의 화합물에서, 복소환식 환의 구체예에는 아제티디닐, 모르폴리닐, 1-옥소테트라히드로-1,4-티아지닐 및 피페리디닐, 특히 아제티딘-1-일, 모르폴린-4-일, 1-옥소테트라히드로-1,4-티아진-4-일, 및 피페리딘-1-일이 포함된다.
임의의 'R' 기(R 1 내지 R 9 )의 적당한 예에는 예를 들어 하기의 것들이 포함된다:
할로게노: 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도;
(1-4C)알킬: 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, tert-부틸, 시클로프로필, 및 시클로부틸;
(1-3C)알콕시: 메톡시, 에톡시, 프로폭시 및 이소프로폭시.
화학식 I의 화합물의 적당한 한 약학적으로 허용가능한 염은 예를 들어 화학식 I의 화합물의 산 부가 염, 예를 들어 무기 또는 유기 산, 예컨대 염산, 브롬화수소산, 황산, 트리플루오로아세트산 또는 시트르산과의 산 부가 염; 또는 예를 들어 충분하게 산성인 화학식 I의 화합물의 염, 예를 들어 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염, 예컨대 칼슘 또는 마그네슘 염 또는 암모늄 염 또는, 유기 염기, 예컨대 메틸아민, 디메틸아민, 트리메틸아민, 피페리딘, 모르폴린 또는 트리스-(2-히드록시에틸)아민과의 염이다. 화학식 I의 화합물의 다른 한 적당한 약학적으로 허용가능한 염은 예를 들어 화학식 I의 화합물의 투여 후에 인간 또는 동물 신체 내에서 형성된 염이 포함된다.
또한, 화학식 I의 화합물의 적당한 약학적으로 허용가능한 용매화물도 또한 본 발명의 한 측면을 이루는 것으로 이해된다. 적당한 약학적으로 허용가능한 용매화물은 예를 들어 수화물, 예컨대 반수화물, 일수화물, 이수화물 또는 삼수화물 또는 이의 대체 분량이다.
또한, 화학식 I의 화합물의 적당한 약학적으로 허용가능한 전구약물도 또한 본 발명의 측면을 형성하는 것으로 이해된다. 따라서, 본 발명의 화합물은 전구약물, 즉 인간 또는 동물 신체 내에서 분해되어 본 발명의 화합물을 배출하는 화합물의 형태로 투여될 수 있다. 전구약물은 본 발명의 화합물의 물리적 성질 및/또는 약물동태학적 성질을 변경시키는 데 사용될 수 있다. 성질 변경 기가 결합될 수 있는 적당한 기 또는 치환기를 본 발명의 화합물이 포함하는 경우 전구약물이 형성될 수 있다. 전구약물의 예에는 화학식 I의 화합물에서의 카르복시 기 또는 히드록시 기에서 형성될 수 있는 생체내 분해가능한 에스테르 유도체 및 화학식 I의 화합물에서 카르복시 기 또는 아미노 기에서 형성될 수 있는 생체내 분해가능한 아미드 유도체가 포함된다.
따라서, 본 발명은 유기 합성에 의하여 이용가능하게 될 때 또한 이의 전구약물의 분해에 의하여 인간 또는 동물 신체 내에서 이용가능하게 될 때 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물을 포함한다. 따라서, 본 발명은 유기 합성 수단에 의하여 생성되는 화학식 I의 화합물 및 또한 전구체 화합물의 대사에 의하여 인간 또는 동물 신체 내에서 생성되는 상기 화합물을 포함하며, 즉 화학식 I의 화합물은 합성에 의하여 생성되는 화합물 또는 대사에 의하여 생성되는 화합물일 수 있다.
화학식 I의 화합물의 적당한 약학적으로 허용가능한 전구약물은 바람직하지 못한 약리학적 활성 없이 또한 과도한 독성 없이 인간 또는 동물 신체에 투여하기에 적당하다는 합리적인 의학적 판단에 기초한 것이다.
다양한 형태의 전구약물은 예를 들어 하기 문헌들에 기재되어 있다:
a) Methods in Enzymology, Vol. 42, p. 309-396, edited by K. Widder, et al. (Academic Press, 1985);
b) Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985);
c) A Textbook of Drug Design and Development, edited by Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, Chapter 5 "Design and Application of Prodrugs", by H. Bundgaard p. 113-191 (1991);
d) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);
e) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988);
f) N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Bull., 32, 692 (1984);
g) T. Higuchi and V. Stella, "Prodrugs as Novel Delivery Systems", A.C.S. Symposium Series, Volume 14; 및
h) E. Roche (editor), "Bioreversible Carriers in Drug Design", Pergamon Press, 1987.
히드록시 기를 가지는 화학식 I의 화합물의 한 적당한 약학적으로 허용가능한 전구약물은 예를 들어 이의 생체내 분해가능한 에스테르 또는 에테르이다. 히드록시 기를 포함하는 화학식 I의 화합물의 생체내 분해가능한 에스테르 또는 에테르는 인간 또는 동물 신체 내에서 분해되어 모 히드록시 화합물을 생성하는 약학적으로 허용가능한 에스테르 또는 에테르이다. 히드록시 기에 적당한 약학적으로 허용가능한 에스테르 형성 기에는 무기 에스테르, 예컨대 인산염 에스테르(포스포르아미드 환형 에스테르 포함)이다. 히드록시 기의 추가의 적당한 약학적으로 허용가능한 에스테르 형성 기에는 (1-10C)알카노일 기, 예컨대 아세틸, 벤조일, 페닐아세틸 및 치환된 벤조일 및 페닐아세틸 기, (1-10C)알콕시카르보닐 기, 예컨대 에톡시카르보닐, N,N-[디-(1-4C)알킬]카르바모일, 2-디알킬아미노아세틸 및 2-카르복시아세틸 기가 포함된다. 페닐아세틸 및 벤조일 기 상의 환 치환기의 예에는 아미노메틸, N-알킬아미노메틸, N,N-디알킬아미노메틸, 모르폴리노메틸, 피페라진-1-일메틸 및 4-(1-4C)알킬피페라진-1-일메틸이 포함된다. 히드록시 기에 적당한 약학적으로 허용가능한 에테르 형성기에는 α-아실옥시알킬 기, 예컨대 아세톡시메틸 및 피발로일옥시메틸 기가 포함된다.
아미노 기를 가지는 화학식 I의 화합물의 한 적당한 약학적으로 허용가능한 전구약물은 예를 들어 이의 생체내 분해가능한 아미드 유도체이다. 아미노 기로부터의 적당한 약학적으로 허용가능한 아미드에는 예를 들어 (1-10C)알카노일 기, 예컨대 아세틸, 벤조일, 페닐아세틸 및 치환된 벤조일 및 페닐아세틸 기로 형성된 아미드가 포함된다. 페닐아세틸 및 벤조일 기 상의 환 치환기의 예에는 아미노메틸, N-알킬아미노메틸, N,N-디알킬아미노메틸, 모르폴리노메틸, 피페라진-1-일메틸 및 4-(1-4C)알킬피페라진-1-일메틸이 포함된다.
화학식 I의 화합물의 생체내 효과는 화학식 I의 화합물의 투여 후에 인간 또는 동물 신체 내에서 형성되는 1종 이상의 대사물에 의하여 부분적으로 나타날 수 있다. 상기 명시한 바와 같이, 화학식 I의 화합물의 생체내 효과는 또한 전구체 화합물(전구약물)의 대사에 의해서도 나타날 수 있다.
혼동을 피하기 위하여, 본 명세서에서 "상기 정의된" 또는 "상기에서 정의된"에 의하여 기를 한정하는 경우, 상기 기는 첫 번째로 나타나며, 또한 광의의 정의뿐 아니라, 상기 기에 대한 특정한 정의들의 각각 및 전부를 포함하는 것으로 이해된다.
본 발명의 특정한 신규 화합물에는 예를 들어 달리 명시되지 않는 한, 각각의 R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 , n 및 R 6 는 상기에서 정의되거나, 이하 (a) 내지 (u) 단락에서의 의미들 중 임의의 의미를 가지는, 화학식 I의 크로메논 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 포함된다:
(a) R 1 은 (1-4C)알킬임;
(b) R 1 은 메틸, 에틸 또는 2-히드록시에틸임;
(c) R 1 은 메틸 또는 에틸임;
(d) R 1 은 메틸임;
(e) R 2 은 (1-4C)알킬임;
(f) R 2 은 메틸 또는 에틸임;
(g) R 2 은 메틸임;
(h) R 1 및 R 2 는 함께 산소, 질소 및 황으로부터 선택되는 1개의 추가 이종원자를 임의적으로 함유하는 4 내지 6원의 함질소 복소환식 환계(여기서, 환의 황 원자는 임의적으로 산화되어 S-산화물(들)을 형성하고, 상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환됨)를 형성함;
(i) R 1 및 R 2 는 함께 아제티디닐, 모르폴리닐, 1-옥소테트라히드로-1,4-티아지닐 및 피페리디닐로부터 선택되는 함질소 복소환식 환계(상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환됨)를 형성함;
(j) R 1 및 R 2 는 함께 아제티딘-1-일, 모르폴린-4-일, 1-옥소테트라히드로-1,4-티아진-4-일, 및 피페리딘-1-일로부터 선택되는 함질소 복소환식 환계(상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환됨)를 형성함;
(k) R 1 및 R 2 는 함께 아제티딘-1-일 또는 모르폴린-4-일로부터 선택되는 함질소 복소환식 환계를 형성함;
(l) R 3 및 R 5 는 H, 플루오로, 메톡시 및 시아노로부터 독립적으로 선택됨;
(m) R 3 및 R 5 은 H 및 플루오로로부터 독립적으로 선택됨;
(n) R 3 및 R 5 은 H임;
(o) R 3 및 R 5 은 플루오로임;
(p) R 4 은 H임;
(q) R 3 및 R 4 은 H이고, R 5 은 플루오로임;
(r) R 3 및 R 5 은 플루오로이고, R 4 은 H임;
(s) n은 0임;
(t) n은 1임;
(u) n은 1이고, R 6 은 모르폴린 환의 2-위치에 위치한 메틸 기임;
(v) R 1 및 R 2 는 함께 모르폴린-4-일인 환인, 함질소 복소환식 환계를 형성함.
특정한 군의 본 발명의 화합물은 하기와 같은 상기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
R 1 는 히드록시로 임의적으로 치환된 (1-4C)알킬이고;
R 2 는 (1-4C)알킬이거나; 혹은
R 1 및 R 2 는 함께 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 1개의 추가의 이종원자를 임의로 포함하는 4원 내지 6원의 함질소 복소환식 환계를 형성하며, 여기서 환의 황 원자는 임의적으로 산화되어 S-산화물(들)을 형성하며, 상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환되며;
R 3 및 R 5 는 H 또는 할로게노로부터 독립적으로 선택되고, R 4 는 H이며;
n은 0 또는 1이고, n이 1일 때, R 6 기는 메틸임).
또 다른 특정한 군의 본 발명의 화합물은 하기와 같은 상기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
R 1 는 히드록시로 임의적으로 치환된 (1-4C)알킬이고;
R 2 은 (1-4C)알킬이거나; 혹은
R 1 및 R 2 는 함께 아제티디닐, 모르폴리닐, 1-옥소테트라히드로-1,4-티아지닐 및 피페리디닐로부터 선택되는 함질소 복소환식 환계(여기서, 상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환됨)를 형성하고;
R 3 및 R 5 는 H 또는 할로게노로부터 독립적으로 선택되고, R 4 은 H이며;
n은 0 또는 1이고, n이 1일 때, R 6 기는 메틸임.
다른 한 특정한 군의 본 발명의 화합물은 하기와 같은 상기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
R 1 은 메틸, 에틸 또는 2-히드록시에틸이고;
R 2 은 메틸 또는 에틸이거나; 혹은
R 1 및 R 2 는 함께 아제티디닐, 모르폴리닐, 1-옥소테트라히드로-1,4-티아지닐 및 피페리디닐로부터 선택되는 함질소 복소환식 환계(여기서, 상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환됨)를 형성하고;
R 3 및 R 5 은 H 또는 할로게노로부터 독립적으로 선택되고, R 4 은 H이며;
n은 0 또는 1이고, n이 1일 때, R 6 기는 메틸임.
또 다른 특정한 군의 본 발명의 화합물은 하기와 같은 상기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
R 1 은 메틸 또는 에틸이고;
R 2 은 메틸 또는 에틸이거나; 혹은
R 1 및 R 2 는 함께 아제티딘-1-일, 모르폴린-4-일, 1-옥소테트라히드로-1,4-티아진-4-일, 및 피페리딘-1-일로부터 선택되는 함질소 복소환식 환계(여기서, 상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환됨)를 형성하고;
R 3 및 R 5 은 H 또는 플루오로로부터 독립적으로 선택되고, R 4 은 H이며;
n은 0 또는 1이고, n이 1일 때, R 6 기는 메틸임.
또 다른 특정한 군의 본 발명의 화합물은 하기와 같은 상기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염(들)이다:
R 1 및 R 2 는 적당히 상기 단락 (a) 내지 (k) 중 임의의 단락, 특히 상기 단락 (d), (g) 또는 (i) 내지 (k)에 정의된 바와 같고; R 3 , R 4 및 R 5 은 적당히 상기 단락 (l) 내지 (r) 중 임의의 단락, 특히 상기 단락 (r) 또는 (s)에 정의된 바와 같으며; n 및 R 6 은 적당히 상기 단락 (s) 내지 (u) 중 임의의 단락에 정의된 바와 같음.
또 다른 특정한 군의 본 발명의 화합물은 하기와 같은 상기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염(들)이다:
R 1 및 R 2 은 적당히 상기 단락 (a) 내지 (k), 또는 상기 (v) 중 임의의 단락, 특히 상기 단락 (d), (g), (v) 또는 (i) 내지 (k), 보다 특히 상기 단락 (v)에 정의된 바와 같고; R 3 , R 4 및 R 5 은 적당히 상기 단락 (l) 내지 (r) 중 임의의 단락, 특히 상기 단락 (r) 또는 (s)에 정의된 바와 같고; n 및 R 6 은 적당히 상기 단락 (s) 내지 (u) 중 임의의 단락에 정의된 바와 같다.
또 다른 특정한 군의 본 발명의 화합물은 하기와 같은 상기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
R 1 은 메틸 또는 2-히드록시에틸이고;
R 2 은 메틸이거나; 혹은
R 1 및 R 2 는 함께 아제티딘-1-일, 모르폴린-4-일, 1-옥소테트라히드로-1,4-티아진-4-일, 피페리딘-1-일 및 4-히드록시피페리딘-1-일로부터 선택되는 함질소 복소환식 환계를 형성하고;
R 3 및 R 5 는 H, 플루오로, 메톡시 및 시아노로부터 독립적으로 선택되며;
R 4 는 H 또는 플루오로이며;
n은 0 또는 1이고, n이 1일 때, R 6 기는 메틸임.
또 다른 특정한 군의 본 발명의 화합물은 하기와 같은 상기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
R 1 은 메틸 또는 2-히드록시에틸이고;
R 2 은 메틸이거나; 혹은
R 1 및 R 2 는 함께 아제티딘-1-일, 모르폴린-4-일, 1-옥소테트라히드로-1,4-티아진-4-일, 피페리딘-1-일 및 4-히드록시피페리딘-1-일로부터 선택되는 함질소 복소환식 환계를 형성하고;
R 3 및 R 5 는 H, 플루오로, 메톡시 및 시아노로부터 독립적으로 선택되며;
R 4 는 H 또는 플루오로이고;
n은 0임.
또 다른 특정한 군의 본 발명의 화합물은 하기와 같은 상기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
R 1 및 R 2 는 함께 아제티딘-1-일, 모르폴린-4-일, 1-옥소테트라히드로-1,4-티아진-4-일, 피페리딘-1-일 및 4-히드록시피페리딘-1-일로부터 선택되는 함질소 복소환식 환계를 형성하고;
R 3 및 R 5 는 H, 플루오로, 메톡시 및 시아노로부터 독립적으로 선택되며;
R 4 는 H 또는 플루오로이고;
n은 0임.
또 다른 특정한 군의 본 발명의 화합물은 하기와 같은 상기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
R 1 은 메틸이고;
R 2 은 메틸이거나; 혹은
R 1 및 R 2 는 함께 모르폴린-4-일 환을 형성하고;
R 3 및 R 5 은 H 및 플루오로로부터 독립적으로 선택되며;
R 4 은 H이고;
n은 1이며, R 6 기는 메틸임.
또 다른 특정한 군의 본 발명의 화합물은 하기와 같은 상기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
R 1 및 R 2 는 함께 모르폴린-4-일 환을 형성하고;
R 3 및 R 5 은 H 및 플루오로로부터 독립적으로 선택되며;
R 4 은 H이고;
n은 1이며, R 6 기는 메틸임.
또 다른 특정한 군의 본 발명의 화합물은 하기와 같은 상기 화학식 I의 크로메논 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
R 1 및 R 2 는 함께 모르폴린-4-일 환을 형성하고;
R 3 및 R 5 는 플루오로이며;
R 4 은 H이고;
n은 0임.
본 발명의 특정한 화합물은, 예를 들어 이후에 기술되는 실시예 내에 개시된 크로메논 화학식 I의 화합물이다. 혼동을 피하기 위하여, 화합물은 IUPAC 지침에 따라 명명되었으나, 특정 실시예에 대해서는 다수의 올바른 명칭들이 있을 수 있다. 예를 들어, 실시예 1.03b의 화합물은 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온 또는 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온으로 명명될 수 있다.
예를 들어, 본 발명의 특정한 화합물은 하기의 것들 중 어느 하나로부터 선택된 화학식 I의 크로메논 유도체; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드;
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드;
8-[(2S)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복사미드;
8-[(2R)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복사미드;
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
8-[(2S)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
8-[(2R)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2S)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2R)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드;
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온;
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온; 및
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 하기의 것들 중 어느 하나로부터 선택된 화학식 I의 크로메논 유도체; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드;
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드;
8-[(2R)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복사미드;
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
8-[(2R)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2R)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드;
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온;
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온; 및
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 하기의 것들 중 어느 하나로부터 선택된 화학식 I의 크로메논 유도체; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드;
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드;
8-[(2S)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복사미드;
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
8-[(2S)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2S)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드;
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온;
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온; 및
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 실시예 1.03의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 실시예 1.05의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 실시예 1.06의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 실시예 1.07의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 실시예 1.03b의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 (-)-8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염(여기서, 화학명 내 (-)-는 실시예 1.03b에 기재된 조건을 이용하여 측정된 광회전을 의미함)이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 (-)-8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(여기서, 화학명 내 (-)-는 실시예 1.03b에 기재된 조건을 이용하여 측정된 광회전을 의미함)이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 (-)-8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(여기서, 화학명 내 (-)-는 실시예 1.03b에 기재된 조건을 이용하여 측정된 광회전을 의미함)의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2R)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온; 또는 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2S)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2S)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2S)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2R)-1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2R)-1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2R)-1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2S)-1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2S)-1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 특정한 화합물은 8-[(2S)-1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 또 다른 측면은 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조 방법을 제공한다. 한 적당한 공정은 하기의 대표적인 공정 변형예(여기서, 달리 명시되지 않는 한, R1, R2, R3, R4, R5, n 및 R6가 상기에서 정의된 의미 중 임의의 것을 가짐)에 의하여 예시된다. 필요한 출발 물질은 유기 화학의 표준 절차에 의하여 수득될 수 있다. 이러한 출발 물질의 제조는 하기의 대표적인 공정 변형예에 의하여 또한 하기의 실시예에서 설명된다. 대안적으로, 필수 출발 물질은 유기 화학자의 통상의 기술 범위 내에 속하는 예시된 절차와 유사한 절차에 의하여 수득될 수 있다.
적당한 공정의 변형예에는, 예를 들어 하기의 것들이 포함된다:
(a) 화학식 II의 화합물의 화학식 III의 아민과의 교차 커플링 반응:
[화학식 II]
Figure pct00003
(식 중에서, R 3 , R 4 , R 5 , n 및 R 6 는 존재하는 임의의 작용기가 필요할 경우 보호되는 것을 제외하고는 상기에서 정의된 임의의 의미를 가짐)
[화학식 III]
Figure pct00004
(식 중에서, R 1 및 R 2 는 임의의 작용기가 필요할 경우 보호되는 것을 제외하고는 상기에서 정의된 임의의 의미를 가짐). 반응은 예를 들어, TSTU(2-(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸이소우로늄 테트라플루오로보레이트) 또는 TBTU(2-(1H-벤조[d][1,2,3]트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸이소우로늄 테트라플루오로보레이트), 또는 1-프로필포스폰산 무수물 환형 삼량체와 같은 적당한 커플링제의 존재 하에서 수행될 수 있고, 그 후, 존재하는 임의의 보호기는 제거된다.
반응은 편의적으로 적당한 염기의 존재 하에서 수행된다. 적당한 염기는 예를 들어 유기 아민 염기, 예를 들어 피리딘, 2,6-루티딘, 콜리딘, 4-디메틸아미노피리딘, 트리에틸아민, N-메틸모르폴린, 디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔, 디이소프로필에틸 아민, 또는 예를 들어 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 탄산염 또는 수산화물, 예를 들어 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산칼슘, 수산화나트륨 또는 수산화칼륨이다.
반응은 편의적으로 적당한 불활성 용매 또는 희석제, 예를 들어 N,N-디메틸포름아미드, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔, 자일렌, 메탄올, 에탄올, 할로겐화 용매, 예컨대 디클로로메탄, 클로로포름 또는 사염화탄소의 존재 하에서, 또한 예를 들어 -50℃ 내지 100℃ 범위 내, 바람직하게는 0℃ 내지 30℃ 범위 내의 온도에서 수행된다.
대안적으로, 화학식 II의 카르복실산 화합물은 활성종(예컨대, 예를 들어 염화옥살릴로의 처리에 의한 산 염화물)로 변환될 수 있고, 이는 이어서 당업계에 공지된 조건 하에서 화학식 III의 화합물과 반응할 수 있다.
화학식 II의 화합물은, 예를 들어 화학식 IIa의 화합물의 비누화 반응에 의해 제조될 수 있다:
[화학식 IIa]
Figure pct00005
(여기서, R3, R4, R5, n 및 R6은 상기 정의된 임의의 의미를 가지고, R7은 (1-6C)알킬, 편의적으로는 메틸 또는 에틸임).
비누화 반응은 예를 들어 적당한 용매, 예를 들어 에탄올과 물의 혼합물 또는 물과 수혼화성 용매, 예를 들어 테트라히드로푸란 또는 디옥산의 혼합물 중에서, 예를 들어 0℃ 내지 100℃ 범위 내, 바람직하게는 20℃ 내지 40℃ 범위 내의 온도에서, 예를 들어 화학식 IIa의 화합물을 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 수산화물, 예컨대 수산화리튬, 수산화칼륨 또는 수산화나트륨과 처리함으로써 수행될 수 있다.
화학식 IIa의 화합물은, 예를 들어 편의적으로 적당한 촉매의 존재 하에서, 화학식 IV의 화합물을 화학식 V의 화합물과 반응시킨 후, 존재하는 임의의 보호기를 제거함으로써 제조될 수 있다:
[화학식 IV]
Figure pct00006
(식 중에서, n 및 R 6 은 상기 정의된 임의의 의미를 가지고, R 7 은 (1-6C)알킬, 편의적으로는 메틸 또는 에틸임)
[화학식 V]
Figure pct00007
(식 중에서, R3, R4 및 R5는 임의의 작용기가 필요할 경우 보호되는 것을 제외하고는 상기에서 정의된 임의의 의미를 가지고, LG는 적당한 이탈 기, 예를 들어, 할로게노 기, 예컨대 클로로, 브로모, 요오도 기(편의적으로 브로모 또는 요오도)임).
반응에 적당한 촉매에는 예를 들어 금속성 촉매, 예컨대 팔라듐(0), 예를 들어 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0); 또는 팔라듐(II) 염, 예를 들어 아세트산팔라듐(II), 염화팔라듐(II), 브롬화팔라듐(II), 염화비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II), 또는 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐, 및 포스핀 리간드, 예를 들어 (9,9-디메틸-9H-잔텐-4,5-디일)비스(디페닐포스핀)으로부터 인-시츄 형성된 촉매가 포함된다.
반응은 편의적으로 적당한 용매, 예컨대 N,N-디메틸포름아미드, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌 중에서, 또한 예를 들어 20℃ 내지 150℃ 범위 내, 바람직하게는 60℃ 내지 120℃ 범위 내의 온도에서 수행된다.
반응은 또한 편의적으로 염기, 예를 들어 탄산세슘, 탄산칼륨 또는 탄산나트륨, 편의적으로는 탄산세슘의 존재 하에서 수행된다.
이러한 유형의 적당한 반응은 문헌[Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions', Second Edition, Edited by Armin Meijere, Francois Diederich, Wiley-VCH, 2004, Volume 1, p 699]에서의 부치왈드(Buchwald) 형 팔라듐 커플링 반응으로서 기재되어 있다.
그러한 반응의 한 예는 실시예 1.00에서 출발 물질 8-(1-(3,5-디플루오로페닐) 피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산의 제조의 단계 4에 기재되어 있다.
대안적으로, 화학식 IIa의 화합물은, 화학식 IV의 화합물을 화학식 Va의 화합물과 반응시키는 찬-람(Chan-Lam) 커플링 유형의 반응에 의해 제조될 수 있다:
[화학식 Va]
Figure pct00008
(식 중에서, R 3 , R 4 및 R 5 은 임의의 작용기를 필요한 경우, 보호하는 것을 제외하고는 상기 정의된 임의의 의미를 가지고, R 8 은 (1-3C)알킬 또는 H임).
그러한 반응은 편의적으로 DCM 중 주석원, 예를 들어 아세트산주석(II)의 존재 하에서 수행되고, 주변 온도에서 대기 산소에 노출시킴으로써 수행된다(문헌[Tetrahedron Letters, 1998, 2933]).
화학식 IV의 화합물은 화학식 VI의 화합물을 수소첨가반응시킨 후, P 1 를 제거함으로써 제조될 수 있다:
[화학식 VI]
Figure pct00009
(식 중에서, n 및 R 6 은 상기 정의된 임의의 의미를 가지고, R 7 은 (1-6C)알킬, 편의적으로는 메틸 또는 에틸이고, P 1 는 보호기, 예를 들어 카르바메이트, 예컨대 tert-부톡시카르보닐임).
반응은 편의적으로 촉매, 예컨대 팔라듐, 로듐, 백금, 바람직하게는 5% 로듐/알루미늄의 존재 하에, 적당한 용매, 예를 들어 알코올, 예컨대 메탄올, N,N-디메틸포름아미드, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌의 존재 하에서; 편의적으로는 메탄올 중에서, 또한 예를 들어 20℃ 내지 100℃의 범위 내, 바람직하게는 50℃ 내지 80℃ 범위 내의 온도에서, 수소압(1 내지 100 atm), 바람직하게는 약 5 atm 하에서 수행된다.
P 1 이 tert-부톡시카르보닐인 경우, P 1 의 제거는 편의적으로 실온에서 용매, 예컨대 DCM 중에서, (예를 들어, 디옥산 중에 용해된) 염화수소와 함께 수행될 수 있다.
대안적으로, 화학식 IV의 화합물은 헥(Heck) 커플링 조건 하에서 화학식 VII의 화합물(여기서, n 및 R 6 은 상기 정의된 임의의 의미를 가지고, R 7 은 (1-6C)알킬, 편의적으로는 메틸 또는 에틸임)을 화학식 VIa의 화합물과 반응시킨 후, P 1 기를 탈보호하고, 이어서 얻어진 이성질체성 디히드로피롤을 환원시킴으로써(혹은 이와 반대), 제조될 수 있다:
[화학식 VIa]
Figure pct00010
(식 중에서, P 1 는 보호기, 바람직하게 알콕시카르보닐 기, 예컨대 tert-부톡시카르보닐임).
헥 커플링 조건의 추가 상세 내용에 대해, 예를 들어 문헌['Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions', Edited by Francois Diederich and P.J. Stang, Wiley-VCH, 1998, p 99)]을 참조한다.
상기 반응에 적당한 촉매에는, 편의적으로 포스핀 리간드, 예를 들어 트리페네일 포스핀의 존재 하에, 예를 들어 금속성 촉매, 예컨대 팔라듐(II), 예를 들어 디클로로비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II); 또는 팔라듐(II) 염, 예를 들어 아세트산팔라듐(II), 염화팔라듐(II), 브롬화팔라듐(II)으로부터 인-시츄 형성된 촉매가 포함된다.
반응은 편의적으로 적당한 용매, 예컨대 N,N-디메틸포름아미드, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌 중에서, 또한 예를 들어 20℃ 내지 150℃의 범위 내, 바람직하게는 60℃ 내지 120℃ 범위 내의 온도에서 수행된다.
반응은 또한 편의적으로 염기, 예를 들어 탄산세슘, 탄산칼륨 또는 탄산나트륨, 편의적으로 탄산칼륨의 존재 하에서 수행된다.
P1이 tert-부톡시카르보닐인 경우, P1의 제거는 편의적으로 실온에서 DCM과 같은 용매 중에서, (예를 들어, 디옥산 중에 용해된) 염화수소과 함께 수행될 수 있다.
얻어진 이성질체성 디히드로피롤의 환원 반응은 편의적으로 촉매, 예컨대 팔라듐, 로듐, 백금, 바람직하게는 5% 팔라듐/차콜의 존재 하에, 적당한 용매, 예를 들어 알코올, 예컨대 메탄올, N,N-디메틸포름아미드, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌 중에서; 편의적으로는 메탄올 중에서, 또한 예를 들어 20℃ 내지 100℃의 범위 내, 바람직하게는 20℃ 내지 60℃ 범위 내의 온도에서, 수소압(1 내지 100 atm), 바람직하게는 약 5 atm 하에서 수행된다.
화학식 VI의 화합물은 예를 들어 스즈키(Suzuki) 커플링 조건 하에서, 화학식 VII의 화합물을 화학식 VIII의 화합물과 반응시킨 후, P 1 를 제거함으로써 제조될 수 있다:
[화학식 VII]
Figure pct00011
(식 중에서, n 및 R 6 은 상기 정의된 임의의 의미를 가지고, R 7 은 (1-6C)알킬, 편의적으로는 메틸 또는 에틸임)
[화학식 VIII]
Figure pct00012
(식 중에서, P 1 는 보호기, 예를 들어 카르바메이트, 예를 들어 tert-부톡시카르보닐이고, R8은 (1-3C)알킬 또는 H임).
스즈키 커플링의 추가 상세 설명에 대해, 예를 들어 문헌['Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions', Edited by Francois Diederich and P.J. Stang, Wiley-VCH, 1998, p 49)]을 참조한다.
반응에 적당한 촉매에는, 편의적으로 포스핀 리간드, 예를 들어 (9,9-디메틸-9H-잔텐-4,5-디일)비스(디페닐포스핀)의 존재 하에서의, 예를 들어 금속성 촉매, 예컨대 팔라듐(0), 예를 들어 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0); 또는 팔라듐(II) 염, 예를 들어 아세트산팔라듐(II), 염화팔라듐(II), 브롬화팔라듐(II), 염화비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II), 또는 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐으로부터 인-시츄 형성된 촉매가 포함된다.
반응은 편의적으로 적당한 용매, 예컨대 N,N-디메틸포름아미드, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌 중에서, 또한 예를 들어 20℃ 내지 150℃의 범위 내, 바람직하게는 60℃ 내지 120℃ 범위 내의 온도에서 수행된다.
반응은 또한 편의적으로 염기, 예를 들어 탄산세슘, 탄산칼륨 또는 탄산나트륨, 편의적으로 탄산나트륨의 수용액의 존재 하에서 수행된다.
화학식 VII의 화합물은 적당한 활성화제, 예를 들어 루이스산, 예컨대 삼불화붕소-디에틸 에테레이트 착체의 존재 하에서 화학식 IX의 화합물을 화학식 X의 화합물과 커플링함으로써 제조될 수 있다:
[화학식 IX]
Figure pct00013
(식 중에서, R 7 은 (1-6C)알킬, 편의적으로는 메틸 또는 에틸임)
[화학식 X]
Figure pct00014
(식 중에서, n 및 R 6 은 상기 정의된 임의의 의미를 가짐).
화학식 IX의 화합물의 화학식 X의 화합물과의 반응은 편의적으로는 적당한 용매, 예를 들어, N,N-디메틸포름아미드, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔, 자일렌 또는 할로겐화 용매, 예컨대 디클로로메탄, 클로로포름 또는 사염화탄소의 존재 하에, 또한 20℃ 내지 150℃의 범위 내, 바람직하게는 60℃ 내지 120℃ 범위 내의 온도에서 수행된다.
화학식 IX의 화합물은 예를 들어 실시예 1.00에서 출발 물질로서 사용되는 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 합성에 나와 있는 바와 같이 제조될 수 있다. 화학식 IX의 화합물은 또한 문헌([Ger. Offen, DE 4318756, 1994] 및 [Aust. J. Chem. 2003, 56, 1099])에 기재되었고, 혹은 이들은 당업계에 공지된 표준 공정에 의해 제조될 수 있다.
특히, 화학식 VII의 화합물은 하기 반응식에 따른 절차에 의해 수득될 수 있다:
Figure pct00015
화학식 VII의 화합물은 대안적으로는 상기 경로를 이용하는 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 방법이 제공되어 있는, 본원의 실시예 1.00에 더욱 상세히 기재된, 하기 반응식에 따른 절차에 의해서도 수득될 수 있다:
Figure pct00016
(식 중에서, Br2은 브롬이고, Pd(OAc)2는 아세트산팔라듐(II)이며, DCM은 디클로로메탄이고, LiHMDS는 리튬 비스(트리메틸 실릴)아미드이며, EtOH는 에탄올이고, Dppf는 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센이며, TEA는 트리에틸아민이고, THF는 테트라히드로푸란이고, Tf2O는 트리플루오로메탄술폰산 무수물임).
화학식 VII의 화합물은 또한 실시예 1.00에 더욱 상세히 설명된, 하기 반응식에 따른 대규모 절차에 의해 수득될 수 있다:
Figure pct00017
화학식 VII의 화합물은 또한 적당한 활성화제, 예를 들어 강염기, 예를 들어 리튬 비스(트리메틸 실릴)아미드의 존재 하에, 화학식 IX의 화합물을 화학식 Xa의 화합물과 반응시켜, 화학식 IXa의 화합물을 제공한 후, 폐환 반응을 수행함으로써, 화학식 VII의 화합물을 형성함으로써 제조될 수도 있다:
[화학식 IX]
Figure pct00018
(식 중에서, R 7 은 (1-6C)알킬, 편의적으로는 메틸 또는 에틸임)
[화학식 Xa]
Figure pct00019
(식 중에서, n 및 R 6 은 상기 정의된 임의의 의미를 가짐)
[화학식 IXa]
Figure pct00020
화학식 IX의 화합물의 화학식 Xa의 화합물과의 반응은 편의적으로 적당한 용매 또는 희석제, 예를 들어 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌의 존재 하에, 또한 예를 들어 -100℃ 내지 주변 온도의 범위 내, 바람직하게는 -80℃ 내지 20℃ 범위 내의 온도에서 수행된다.
화학식 IXa의 화합물을 화학식 VII의 화합물로 전환하기 위한 폐환 반응은 예를 들어, 적당한 용매, 예를 들어 디클로로에탄 중에서, 예를 들어 0℃ 내지 -100℃의 범위 내, 편의적으로는 20 내지 60℃ 범위 내의 온도에서, 탈수제, 예를 들어 트리플루오로메탄술폰산 무수물로 처리함으로써 수행될 수 있다.
(b) 편의적으로 상기 공정 변형예 (a) 중 상기 정의된 바와 같은 적당한 촉매의 존재 하에서의, 화학식 XI의 화합물을 화학식 V의 화합물과 반응시킨 후, 존재하는 임의의 보호기를 제거한다:
[화학식 XI]
Figure pct00021
(식 중에서, R 1 , R 2 , n 및 R 6 는 존재하는 임의의 작용기가 필요할 경우 보호되는 것을 제외하고는 상기에서 정의된 임의의 의미를 가짐)
[화학식 V]
Figure pct00022
(식 중에서, R 3 , R 4 및 R 5 은 상기 정의된 임의의 의미를 가지고, LG는 적당한 이탈 기, 예를 들어 할로게노 기, 예컨대 클로로, 브로모, 요오도 기(편의적으로 브로모 또는 요오도)임).
이러한 유형의 적당한 반응은 문헌['Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions', Second Edition, Edited by Armin Meijere, Francois Diederich, Wiley-VCH, 2004, Volume 1, p699]에서의 팔라듐형 커플링 부치왈드 반응으로서 기재되어 있다.
그러한 반응에 적당한 조건은 상기 공정 변형예 (a)에 기재되었다.
화학식 XI의 화합물은, 예를 들어 적당한 커플링제, 예를 들어 TSTU(2-(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸이소우로늄 테트라플루오로보레이트) 또는 TBTU(2-(1H-벤조[d][1,2,3]트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸이소우로늄 테트라플루오로보레이트)의 존재 하에, 먼저 화학식 XII의 화합물을 화학식 III의 아민으로 비누화한 후, 수득된 산을 편의적으로 적당한 염기 및 커플링제의 존재 하에 화학식 III의 아민을 이용하여 아미드 형성에 적용한 후, 존재하는 P1 및 임의의 다른 보호기를 제조함으로써 제조될 수 있다:
[화학식 XII]
Figure pct00023
(식 중에서, n, R 6 및 P 1 은 상기 정의된 임의의 의미를 가지고, R 7 은 (1-6C)알킬, 편의적으로는 메틸 또는 에틸이며, 존재하는 임의의 작용기를 필요에 따라 제거함)
[화학식 III]
Figure pct00024
(식 중에서, R 1 및 R 2 는 임의의 작용기가 필요할 경우 보호되는 것을 제외하고는 상기에서 정의된 임의의 의미를 가짐).
비누화 반응은 예를 들어 0℃ 내지 -100℃의 범위 내, 바람직하게는 20 내지 40℃ 범위 내의 온도에서, 적당한 용매, 예를 들어 에탄올과 물의 혼합물, 또는 물과 수혼화성 용매, 예를 들어 테트라히드로푸란 또는 디옥산의 혼합물 중에서, 예를 들어 화학식 XII의 화합물을 알칼리 또는 알칼리성 토금속 수산화물, 예컨대 수산화리튬, 수산화칼륨 또는 수산화나트륨으로 처리함으로써 수행될 수 있다.
아미드 커플링 반응은 편의적으로 적당한 염기의 존재 하에 수행된다. 적당한 염기는, 예를 들어 유기 아민 염기, 예를 들어 피리딘, 2,6-루티딘, 콜리딘, 4-디메틸아미노피리딘, 트리에틸아민, N-메틸모르폴린, 디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔, 디이소프로필에틸 아민, 또는 예를 들어 알칼리 또는 알칼리성 토금속 탄산염 또는 수산화물, 예를 들어 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산칼슘, 수산화나트륨 또는 수산화칼륨이다.
반응은 편의적으로 적당한 불활성 용매 또는 희석제, 예를 들어, N,N-디메틸포름아미드, N-메틸피롤리돈, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔, 자일렌, 메탄올 에탄올, 할로겐화 용매, 예컨대 디클로로메탄, 클로로포름 또는 사염화탄소의 존재 하에, 또한 예를 들어 -50℃ 내지 100℃의 범위 내, 바람직하게는 0℃ 내지 30℃ 범위 내의 온도에서 수행된다.
아미드 커플링에 대해 대안적으로는, 카르복실산을 활성종 (예컨대, 적당히 염화옥살릴로 처리함에 의한 산 염화물)로 변환한 후, 이를 편의적으로 유기 염기, 예컨대 트리에틸아민의 존재 하에, 화학식 III의 화합물과 반응시킨다.
P 1 가 tert-부톡시카르보닐인 경우, P 1 의 제거는 편의적으로 실온에서 용매, 예컨대 DCM 중에서 (예를 들어, 디옥산 중에 용해된) 염화수소를 이용하여 수행될 수 있다.
대안적으로, 화학식 XI의 화합물은 스즈키 반응에 의해 화학식 XIII의 화합물을 화학식 VIII의 화합물과 반응시킨 후, 수소첨가반응하고, P1를 탈보호함으로써 수득될 수 있다:
[화학식 XIII]
Figure pct00025
(식 중에서, R 1 , R 2 , n 및 R 6 는 존재하는 임의의 작용기가 필요할 경우 보호되는 것을 제외하고는 상기에서 정의된 임의의 의미를 가짐)
[화학식 VIII]
Figure pct00026
(식 중에서, P 1 는 보호기, 예를 들어 카르바메이트, 예를 들어 tert-부톡시카르보닐이고, R8은 (1-3C)알킬 또는 H임).
스즈키 반응에 대한 적당한 촉매는, 예를 들어 금속성 촉매, 예컨대 팔라듐(0), 예를 들어 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0); 또는 편의적으로 포스핀 리간드, 예를 들어 (9,9-디메틸-9H-잔텐-4,5-디일)비스(디페닐포스핀)의 존재 하에서의, 팔라듐(II) 염, 예를 들어 아세트산팔라듐(II), 염화팔라듐(II), 브롬화팔라듐(II), 염화비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐으로부터 인-시츄 형성된 촉매이다.
반응은 편의적으로 적당한 용매, 예컨대 N,N-디메틸포름아미드, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌 중에서, 또한 예를 들어 20℃ 내지 150℃의 범위 내, 바람직하게는 60℃ 내지 120℃ 범위 내의 온도에서 수행된다.
반응은 또한 편의적으로 염기(전형적으로 탄산세슘, 탄산칼륨 또는 탄산나트륨; 바람직하게는 탄산나트륨)의 수용액의 존재 하에 수행된다.
P 1 가 tert-부톡시카르보닐인 경우, 탈보호는 편의적으로 실온에서 용매, 예컨대 DCM 중에서 (예를 들어, 디옥산 중에 용해된) 염화수소를 이용하여 수행될 수 있다.
수소첨가 반응은 편의적으로 촉매, 예컨대 팔라듐, 로듐 또는 백금, 바람직하게 로듐 5%/알루미나의 존재 하에서, 적당한 용매, 예를 들어 알코올, 예컨대 메탄올; 또는 N,N-디메틸포름아미드, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌; 바람직하게는 메탄올의 존재 하에서, 또한 수소압(1 내지 100 atm), 바람직하게는 약 5 atm 하에서, 예를 들어 20℃ 내지 100℃의 범위 내, 바람직하게는 50℃ 내지 80℃ 범위 내의 온도에서 수행된다.
대안적으로, 화학식 XI의 화합물은 헥 커플링 조건 하에서 화합물 XIII (식 중에서, R 1 , R 2 , n 및 R 6 는 존재하는 임의의 작용기가 필요할 경우 보호되는 것을 제외하고는 상기에서 정의된 임의의 의미를 가짐)을 화학식 VIIIa의 화합물과 반응시킨 후, P1 기를 탈보호한 후, 얻어진 이성질체성 디히드로피롤을 환원함으로써(혹은 그 반대로), 제조될 수 있다:
[화학식 VIIIa]
Figure pct00027
(식 중에서, P 1 는 보호기, 바람직하게는 알콕시카르보닐 기, 예컨대 tert-부톡시카르보닐임).
헥 커플링 조건의 추가 상세 내용에 대해, 예를 들어 문헌['Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions', Edited by Francois Diederich and P.J. Stang, Wiley-VCH, 1998, p 99)]을 참조한다.
반응에 적당한 촉매에는, 예를 들어 금속성 촉매, 예컨대 팔라듐(II), 예를 들어 디클로로비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II); 또는 편의적으로 포스핀 리간드, 예를 들어 트리페네일 포스핀의 존재 하에서 팔라듐(II) 염, 예를 들어 아세트산팔라듐(II), 염화팔라듐(II), 브롬화팔라듐(II)으로부터 인-시츄 형성된 촉매가 포함된다.
반응은 편의적으로 적당한 용매, 예컨대 N,N-디메틸포름아미드, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌 중에서, 또한 예를 들어 20℃ 내지 150℃의 범위 내, 바람직하게는 60℃ 내지 120℃ 범위 내의 온도에서 수행된다.
반응은 또한 편의적으로 염기, 예를 들어 탄산세슘, 탄산칼륨 또는 탄산나트륨, 편의적으로 탄산칼륨의 존재 하에 수행된다.
P 1 가 tert-부톡시카르보닐인 경우, P 1 의 제거는 편의적으로 실온에서 용매, 예컨대 DCM 중에서 (예를 들어, 디옥산 중에 용해된) 염화수소 또는 트리플루오로아세트산으로 수행될 수 있다.
얻어진 이성질체성 디히드로피롤의 환원 반응은 편의적으로 촉매, 예컨대 팔라듐, 로듐, 백금, 예컨대 산화백금(IV), 바람직하게는 5% 팔라듐/차콜의 존재 하에서, 적당한 용매, 예를 들어 알코올, 예컨대 메탄올, N,N-디메틸포름아미드, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌; 바람직하게는 메탄올의 존재 하에서, 또한 수소압(1 내지 100 atm), 편의적으로는 약 5 atm 하에서, 예를 들어 20℃ 내지 100℃의 범위 내, 바람직하게는 20℃ 내지 60℃ 범위 내의 온도에서 수행된다.
화학식 XIII의 화합물, 예를 들어 8-브로모-N,N-디메틸-2-(모르폴린-4-일)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드의 합성에 사용될 수 있는 공정 반응식의 한 예는 이하와 같다:
Figure pct00028
(식 중에서, NaOH는 수산화나트륨이고, Me2NH는 디메틸아민이며, DCM은 디클로로메탄이고, LiHMDS는 리튬 비스(트리메틸 실릴)아미드이며, EtOH는 에탄올이고, DIPEA는 디이소프로필에틸아민이며, THF는 테트라히드로푸란이고, Tf2O는 트리플루오로메탄술폰산 무수물이며, TBTU는 2-(1H-벤조[d][1,2,3]트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸이소우로늄 테트라플루오로보레이트임).
대안적으로, 화학식 XIII의 화합물은 아미드 커플링 반응에서 화학식 III의 화합물을 화학식 XIV의 화합물과 함께 반응시킴으로써 제조될 수 있다:
Figure pct00029
화학식 XIV의 화합물은 하기 반응식에 따른 절차에 의해 수득될 수 있다:
화학식 XIV의 화합물은, 예를 들어 화학식 VII의 화합물의 비누화에 의해 제조될 수 있다:
[화학식 VII]
Figure pct00031
(식 중에서, n 및 R6은 상기 정의된 임의의 의미를 가지고, R7은 (1-6C)알킬, 편의적으로는 메틸 또는 에틸임).
비누화 반응은 예를 들어 0℃ 내지 -100℃의 범위 내, 바람직하게는 20 내지 40℃ 범위 내의 온도에서, 적당한 용매, 예를 들어 에탄올과 물의 혼합물, 또는 물과 수혼화성 용매, 예를 들어 테트라히드로푸란 또는 디옥산의 혼합물 중에서, 예를 들어 화학식 VII의 화합물을 알칼리 또는 알칼리성 토금속 수산화물, 예컨대 수산화리튬, 수산화칼륨 또는 수산화나트륨으로 처리함으로써 수행될 수 있다.
수가지 단계들은 중간체의 단리 또는 정제없이 조합될 수 있음을 이해된다. 예를 들어, 화학식 XIII의 화합물은 화학식 XIV의 화합물이 화학식 VII의 화합물로부터 수득되는 실시예 1.03b (대규모 절차)에 설명된 바와 같이, 화학식 VII의 화합물로부터 직접적으로 수득될 수 있다. 여기서, (단리없이 VII의 비누화로부터 수득되는) 화학식 XIV의 화합물의 카르복실레이트 염은 활성화제(예컨대 2-클로로-4,6-디메톡시-1,3,5-트리아진)와 직접적으로 반응하여, 활성종 ('활성화된 에스테르')을 형성한 후, 화학식 III의 아민과 반응하여, 화학식 XIII의 화합물을 발생시킨다.
상기 기재된 공정 변형예의 공정 단계의 다른 순서도 또한 가능한 것으로 이해된다. 예를 들어, 화학식 I의 화합물은 절차에서의 최종 단계가 모르폴린-(R6)n 기의 도입인 것을 제외하고, 공정 변형예 (a) 내지 (b)에 기재된 절차와 유사한 절차를 사용하여 제조될 수 있다.
상기 기재된 공정들 중 임의의 공정에 의해 수득된 화학식 I의 임의의 화합물은 필요할 경우, 화학식 I의 또 다른 화합물로 전환될 수 있는 것으로 이해된다.
화학식 I의 크로메논 유도체의 약학적으로 허용가능한 염, 예를 들어 산 부가 염이 필요한 경우, 이는 예를 들어 상기 크로메논 유도체를 적당한 산과 반응시켜 수득될 수 있다.
화학식 I의 크로메논 유도체의 약학적으로 허용가능한 전구약물이 필요한 경우, 이는 통상의 절차를 사용하여 수득될 수 있다. 예를 들어, 화학식 I의 크로메논 유도체의 생체내 분해 가능한 에스테르는 예를 들어 카르복시 기를 포함하는 화학식 I의 화합물을 약학적으로 허용가능한 알콜과 반응시키거나 히드록시 기를 포함하는 화학식 I의 화합물을 약학적으로 허용가능한 카르복실산과 반응시켜 얻을 수 있다. 예를 들어, 화학식 I의 크로메논 유도체의 생체내 분해 가능한 아미드는 예를 들어 카르복시 기를 포함하는 화학식 I의 화합물을 약학적으로 허용가능한 아민과 반응시키거나 또는 아미노 기를 포함하는 화학식 I의 화합물을 약학적으로 허용가능한 카르복실산과 반응시켜 얻을 수 있다.
또한, 유기 합성 기술에서의 숙련가라면 본 발명의 화합물 내 특정한 환 치환기가 표준 방향족 치환 반응에 의하여 생성될 수 있거나 또는 상기 언급된 공정 이전에 또는 직후에 통상의 작용기 변형에 의하여 생성될 수 있으며, 그리하여 그것도 본 발명의 공정 측면에 포함된다는 것을 숙지할 것이다. 그러한 반응 및 변형에는 예를 들어 방향족 치환 반응에 의한 치환기의 도입, 치환기의 환원, 치환기의 알킬화, 치환기의 아실화, 치환기의 아미드화 및 치환기의 산화를 들 수 있다. 이러한 절차를 위한 제제 및 반응 조건은 화학업계에 공지되어 있다. 방향족 치환 반응의 특정한 예로는 진한 질산을 사용한 니트로 기의 도입, 예를 들어 프리델 크래프트 조건하에서 할로겐화아실 및 루이스산(예컨대 삼염화알루미늄)을 사용한 아실 기의 도입; 프리델 크래프트 조건하에서 할로겐화알킬 및 루이스산(예컨대 삼염화알루미늄)을 사용한 알킬 기의 도입; 및 할로게노 기의 도입을 들 수 있다. 변형의 구체예로는 예를 들어 니켈 촉매를 사용한 촉매 수소화 또는 가열과 함께 염산의 존재 하에서 철을 사용한 처리에 의하여 니트로 기를 아미노 기로 환원시키는 것; 알킬티오를 알킬술피닐 또는 알킬술포닐로 산화시키는 것이 포함된다.
또한, 상기 언급한 일부 반응에서, 화합물에서의 임의의 민감성 기를 보호하는 것이 요구될 수 있거나 바람직할 수 있는 것임이 인식될 것이다. 보호가 요구되거나 또는 바람직한 경우 또한, 적당한 보호 방법은 당업자에게 공지되어 있다. 통상의 보호기는 표준 실시에 따라 사용될 수 있다(설명에 대해, 문헌[T. W. Green, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, 1991] 참조). 따라서, 반응물이 아미노, 카르복시 또는 히드록시와 같은 기를 포함할 경우, 본원에 언급된 일부 반응에서 기를 보호하는 것이 바람직할 수 있다.
아미노 또는 알킬아미노 기에 적당한 보호기는 예를 들어, 아실 기, 예를 들어 알카노일 기, 예컨대 아세틸, 알콕시카르보닐 기, 예를 들어 메톡시카르보닐, 에톡시카르보닐 또는 t-부톡시카르보닐 기, 아릴메톡시카르보닐 기, 예를 들어 벤질옥시카르보닐 또는 아로일 기, 예를 들어 벤조일이다. 상기 보호기에 대한 탈보호 조건은 필요에 따라 보호기의 선택에 의하여 변경된다. 그리하여, 예를 들어 아실 기, 예컨대 알카노일 또는 알콕시카르보닐 기 또는 아로일 기는 예를 들어 적당한 염기, 예컨대 알칼리 금속 수산화물, 예를 들어 리튬 또는 나트륨 수산화물을 사용한 가수분해에 의하여 제거될 수 있다. 대안적으로, 아실 기, 예컨대 t-부톡시카르보닐 기는 예를 들어 염산, 황산 또는 인산 또는 트리플루오로아세트산과 같은 적당한 산을 사용하여 제거할 수 있으며, 아릴메톡시카르보닐 기, 예컨대 벤질옥시카르보닐 기는 예를 들어 촉매, 예컨대 탄소상 팔라듐상에서의 수소화에 의하여 또는 루이스산, 예를 들어 붕소 트리스(트리플루오로아세테이트)를 사용한 처리에 의하여 제거될 수 있다. 1차 아미노 기에 한 적당한 대안의 보호기는 예를 들어 알킬아민, 예를 들어 디메틸아미노프로필아민 또는 히드라진을 사용한 처리에 의하여 제거될 수 있는 프탈로일 기이다.
히드록시 기에 적당한 보호기의 예로는 아실 기, 예를 들어 알카노일 기, 예컨대 아세틸, 아로일 기, 예를 들면 벤조일, 또는 아릴메틸 기, 예를 들어 벤질이다. 상기 보호기에 대한 탈보호 조건은 보호기의 선택에 따라 반드시 변경될 것이다. 따라서, 예를 들어 아실 기, 예컨대 알카노일 또는 아로일 기는 예를 들어 적당한 염기, 예컨대 알칼리 금속 수산화물, 예를 들어 리튬 또는 나트륨 수산화물을 사용한 가수분해에 의하여 제거될 수 있다. 대안적으로, 아릴메틸 기, 예컨대 벤질 기는 예를 들어 촉매, 예컨대 팔라듐/탄소에서의 수소화에 의하여 제거될 수 있다.
보호기는 화학업계에 공지된 통상의 기법을 사용한 합성에서의 임의의 편리한 단계에서 제거될 수 있다.
본원에 정의된 특정한 중간체(예를 들어, 화학식 II, IIa, IV, VI, VII, IXa, XI, XIII 및 XIV의 화합물)는 신규하며, 이들도 본 발명의 추가의 특징으로서 제공된다. 예를 들어, 화학식 VII(여기서 n 및 R6은 상기에서 정의된 바와 같은 임의의 의미를 가짐)의 화합물은 본 발명의 특정한 화합물의 제조에서 중간체로서 유용할 수 있다:
[화학식 VII]
Figure pct00032
생물학적 검정
하기의 검정은 PI 3 키나제 효소의 억제제로서, MAD-MB-468 세포에서 시험관내 포스포 AKT(ser473)의 억제제로서, 스위스 무흉선 nu/nu 마우스에서 생체내 포스포 AKT(ser473)의 억제제로서 또한 인간 전립선 선암종 세포주, PC3로 이식한 스위스 무흉선 nu/nu 마우스에서의 생체내 종양 성장의 억제제로서 본 발명의 화합물의 효과를 측정하는 데 사용될 수 있다.
(a) 시험관내 효소 억제 검정
PI 3Kβ, PI 3Kα, PI 3Kγ 및 PI 3Kδ의 억제는 인간 재조합 효소를 사용하여 효소 활성 분석에 기초한 키나제 Glo로 평가하였다. 검정은 효소, PIP2 및 ATP와 함께 화합물을 항온배양후의 ATP의 고갈을 측정한다. 반응의 종료 시의 ATP는 키나제 Glo 시약을 첨가하여 검출하고, 여기서 울트라 글로(Ultra Glo)™ 루시퍼라제(프로메가(Promega))는 기질로서 ATP를 사용하여 루시페린의 단일산소화 및 광의 생성을 촉매화한다. 키나제-글로 플러스(Glo Plus) 시약을 사용하여 측정한 발광과 완료된 키나제 반응에서 잔존하는 ATP의 양 사이에는 직접적인 관계가 존재하며, 발광은 키나제 활성에 역비례의 관계에 있다. 12종의 상이한 화합물 농도를 테스트하고, PI 3Kβ, PI 3Kα, PI 3Kγ 및 PI 3Kδ의 억제로부터의 미가공 데이타를 억제제 농도에 대하여 플로팅하였다.
방법의 세부사항:
100% DMSO중의 화합물을 검정 플레이트에 음향 분배에 의하여 첨가하였다. PI 3Kβ를 트리스 완충액(50 mM 트리스 pH 7.4, 0.05% CHAPS, 2.1 mM DTT 및 10 mM MgCl2)에 첨가하고, 화합물과 함께 20 분 동안 예비 항온배양한 후, PIP2 및 ATP를 포함하는 기질 용액을 첨가하였다. 효소 반응은 80 분후 키나제 글로 검출 용액을 첨가하여 중지시켰다. 플레이트를 30 분 동안 실온에서 방치한 후, 최대 웰에서의 이득을 설정하는 페라스타 기기(Pherastar Instrument)(발광 ATP 384 프로그램)상에서 판독하였다. 검정에서의 DMSO, ATP 및 PIP2의 최종 농도는 각각 1%, 8 μM 및 80 μM이었다.
데이터 분석:
IC50 값은 비-선형 회귀 패키지에 대입한 로그 곡선을 사용하여 계산하고, 미가공 데이타를 억제제 농도에 대입하였다. IC50 값은 효소 활성의 50%를 억제하는 테스트 화합물의 농도이다.
(b) MAD-MB-468 세포에서의 포스포 AKT(ser473)의 검출을 위한 프로토콜
MDA-MB-468 세포(인간 유방 선암종 ATCC HTB 132)를 그레이너(Greiner) 384 웰 블랙 평평 바닥 플레이트에 자동화된 세포 배양 로봇(Selec T)에 의하여 파종하였다. 또한, 세포는 수동으로 유지하고, 멀티드롭 또는 웰메이트(Wellmate)를 사용하여 플레이트에 파종하였다. 세포를 1,500개 세포/웰로 10% FCS 및 1% 글루타민을 포함하는 40 ㎕의 DMEN중에 파종하였다. 세포 플레이트를 18 시간 동안 37℃ 배양기 내에서 항온배양하였다.
화합물을 nl 양의 화합물 또는 DMSO를 분배하는 에코(Echo) 음향 분배기를 사용하여 세포에 투여한다. 화합물을 30 μM 최대 투여량으로부터 12점 농도 범위로 투여하고, 28종의 화합물을 하나의 플레이트에 투여한다. 플레이트당 17종의 DMSO 단독의 양성 대조군 웰이 존재하며, 16개 음성 대조군 웰에는 pAKT 신호를 녹아웃시키는 기준 화합물의 농도로 투여하였다
플레이트를 37℃에서 2 시간 동안 항온배양하고, 세포를 웰메이트를 사용한 통기 커보드(fume cupboard)에서 10 ㎕의 3.7% 포름알데히드 용액을 첨가하여 고정시켰다. 30분간 고정한 후, 고정액 및 매질을 제거하고, 플레이트를 통기 커보드내에서 테칸(Tecan) PW384 플레이트 워셔를 사용하여 프로클린(Proclin) PBS/A로 세정하였다. 웰을 차단하고, 웰메이트를 사용하여 0.5% 트윈(Tween) 20 및 1% 마블(marvel)을 포함하는 40 ㎕의 PBS를 첨가하여 투과시키고, 60 분 동안 실온에서 항온배양하였다.
투과성 및 차단 완충액은 테칸 PW384 플레이트 워셔를 사용하여 제거한 후, 웰메이트를 사용하여 20 ㎕의 1차 항체 용액을 첨가하였다. 1차 항체 용액은 1% 마블(건조 분유)을 포함하는 PBS/T 중의 토끼 항-포스포 AKT Ser473(세포 신호전달 기법 카타로그 번호 #3787)의 1:500 희석액이며, 이를 하룻밤 동안 4℃에서 항온배양하였다.
플레이트를 테칸 PW384 플레이트 워셔를 사용하여 인산염 완충 염수+0.05% (v/v) 폴리소르베이트(Polysorbate) 20 및 프로클린(Proclin) 300[수펠코(Supelco)]로 3회 세정하였다. 20 ㎕의 2차 항체 용액을 각각의 웰에 웰메이트를 사용하여 첨가하고, 1 시간 동안 실온에서 항온배양하였다. 2차 항체 용액은 1% 마블을 포함하는 인산염 완충 염수 + 0.05% (v/v) 폴리소르베이트 20에 희석된 알렉사 플루오르(Alexa Fluor) 488 항-토끼[몰레큘라 프로브(Molecular Probes) 카타로그 번호 A11008]의 1:1000 희석액이다. 플레이트를 상기에서와 같이 3회 세정한 후, 20 ㎕의 PBS를 각각의 웰에 첨가하고, 플레이트를 검정색 플레이트 밀봉체로 밀봉시켰다.
플레이트를 가능한 한 빨리 아큐멘(Acumen) 판독기 상에서 판독한다. 이러한 시스템을 사용하여 IC50 값을 생성할 수 있고, 플레이트의 품질을 대조용 웰에 의하여 결정할 수 있다. 기준 화합물을 매번 실시하여, 검정 성능을 모니터링하였다.
(c) 스위스 무흉선 nu/nu 마우스에서의 포스포 AKT(ser473)의 검출을 위한 프로토콜
스위스 무흉선 nu/nu 마우스를 인간 전립선 선암종 세포주 PC3(ATCC CRL1435)로 피하 이식하여 PI 3 키나제 억제제의 항종양 활성을 결정할 수 있다. 0일차에 50% 마트리겔(Matrigel)™(BD 바이오사이언시즈(BD Biosciences) #354234)중의1×106개의 세포를 동물의 왼쪽 옆구리에 피하 주사하였다. 종양 부피가 약 400 내지 600 mm3가 될 때 동물을 무작위로 필요한 군 크기로 (통상적으로 처치군당 5 마리) 나누고, 처치를 개시한다. 종양을 종료시 꺼내고, 액체 질소 중에서 플래쉬 냉동시키고, 분석할 때까지 -80℃에서 보관한다. 1 ㎖의 용해 완충액과 포스파타제 억제제 시그마(Sigma) #P2850, 시그마 #P5726(1:100 희석함) 및 프로테아제 억제제 시그마 #P8340(1:200 희석함)을 각각의 종양에 패스트프렙(Fastprep) 시험관 내에서 첨가하였다. 종양을 1 분 동안 패스트프렙 기기 상에서 균질화시키고, 빙상에서 10분 동안 방치하였다.
샘플을 10 분 동안 13,000 rpm에서 냉각된 원심분리관내에서 회전시킨다. 그후, 맑게 된 용해물을 새로운 시험관에 넣고, 5 ㎕를 단백질 측정 검정에 사용하였다. 4-15% NuPAGE 비스-트리스 겔(인비트로겐)상에서 90 분당 140 볼트에서 레인당 15 ㎍을 실시하도록 모든 종양 샘플을 동일한 농도로 희석한다. 겔 효과가 최소가 되도록 샘플을 무작위로 처리한다. 니트로셀룰로스 막으로 블로팅시킨 후, 이를 1시간 동안 블로팅시키고, 하룻밤 동안 항체 대 총AKT(CST # 9272) 또는 포스포 AKT-ser 473(CST # 9271)의 1:500 희석액으로 항온배양하였다. 블롯을 PBST중에서 3회 세정한 후, 1 시간 동안 실온에서 항-토끼 2차 HRP-결합된 항체(CST # 7074)의 1:2,000 희석액으로 항온배양한다. 블록 및 항체 배양 완충액은 0.05% 폴리소르베이트를 포함하는 PBS중의 5% 건조된 분유이다.
블롯을 3회 PBS/T중에서 세정한 후, 피어스 웨스트 듀라(Pierce West Dura ECL) 키트 및 케미지니어스(ChemiGenius)를 사용하여 가시화한다. 밴드를 정량화하고, 포스포 대 전체 시그날의 비를 각각의 샘플에 대하여 얻었다. 대조군 값의 평균을 구하고, 각각의 처치군 샘플을 대조군 값의 평균값에 대하여 정규화시켰다.
(d) 인간 전립선 선암종 세포주 PC3 이식 스위스 무흉선 nu/nu 마우스에서의 종양 성장 억제의 검출을 위한 프로토콜
스위스 무흉선 nu/nu 마우스에게 인간 전립선선암종 세포주 PC3(ATCC CRL1435)를 피하 이식하여, PI 3 키나제 억제제의 항종양 활성을 결정할 수 있다. 0일차에 50% 마트리겔(BDM)중의 1×106개의 세포를 동물의 왼쪽 옆구리에 피하 주사한다. 종양 부피가 ~200 내지 300 mm3가 될 때 동물을 10 내지 15 마리의 군으로 무작위로 나누고, 처치를 개시한다. 2 내지 4주 동안 경구, 정맥내 또는 복강내 경로에 의하여 적당한 비이클중의 화합물(및 임의로 cyp 억제제, 예컨대 1-아미노벤조트리아졸)을 소정의 용량으로 동물에게 투약하였다. 종양은 일반적으로 1주당 2회로 캘리퍼로 측정하고, 종양 부피를 타원형 포뮬러(pi/6×폭×폭×길이)를 사용하여 계산하였다.
(e) 제코(Jeko) 세포에서의 포스포 AKT(ser473)의 검출을 위한 프로토콜
10 ㎕의 1% (v/v) DMSO 중의 ×10 최종 농도의 화합물을 그라이너(Greiner) V-바닥 96웰 플레이트의 웰에 첨가하였다. 화합물을 1μM 상위 용량 이상의 10-점 농도 범위로 투약하고, 8개의 화합물을 한 플레이트에 투약한다. 비히클 및 항IgM을 투약한 플레이트 당 8개의 DMSO 양성 대조군 웰, 및 비히클 및 검정 완충액을 투약한 8개의 음성 대조군 웰이 존재한다. 최종 비히클 농도는 0.1% DMSO이다. 기준 PI 3Kδ 선택적 화합물이 각 실시에 포함되다. 제코 B 세포(인간 외투 세포 림프종, ATCC CRL-3006)를 화합물을 포함하는 그라이너 96웰 V-바닥 플레이트에 접종한다. 세포를 1% 글루타민을 함유하는 70 ㎕의 RPMI 중 100,000개 세포/웰로 접종한다.
세포 플레이트를 37℃ 배양기에서 1시간 동안 항온배양한다. 이 화합물의 예비 항온배양 시간 후, 항IgM(F(ab')2 단편 염소 항 인간 IgM, 스트라테크(Stratech) 109-006-129)를 20 ㎕의 검정 완충액(1% 글루타민 함유의 RPMI) 내에 ×5 최종 농도로 플레이트에 첨가한다. 최종 항IgM 농도는 0.06 ㎍/ml 또는 동등량의 EC90 용량이다. 플레이트를 10분 동안 37℃에서 항온배양하고, 그 후 플레이트를 즉시 빙상에 두고, 4분 동안 12000 rpm로 원심분리한다. 빙상에서, 상등액을 수동 피펫으로 주의하여 제거하고, 40 ㎕의 용해 완충액을 첨가한다. 플레이트를 5분 동안 빙상에서 항온배양하고, 제조업자의 사용설명서(메조스케일 다이그노스틱스(Mesoscale Diagnostics), K11100D-3)에 따라, 포스포(ser473)/총 Akt 전세포 용해물 키트 중에서 검정될 때까지 -80℃에 보관한다.
화학식 I의 화합물의 약리학적 성질이 예상되는 바와 같이 구조적 변화와 함께 변경되기는 하나, 일반적으로 화학식 I의 화합물이 가지는 활성은 상기 테스트 (a) 및 (b) 중 하나 이상에서 하기의 농도 또는 용량으로 나타날 수 있다:
테스트 (a): PI 3Kβ에 대한 IC50, 예를 들면 1 nM 내지 25 μM 범위 내;
테스트 (a): PI 3Kδ에 대한 IC50, 예를 들면 1 nM 내지 25 μM 범위 내;
테스트 (b): MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50, 예를 들면 1 nM 내지 25 μM 범위 내;
테스트 (e): 제코 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50, 예를 들면 1 nM 내지 25 μM 범위 내.
편의적으로, 본 발명의 특정한 화합물은 상기 테스트 (a) 및 (b) 중 하나 이상에서 하기의 농도 또는 용량에서 활성을 가진다:
테스트 (a): PI 3Kβ에 대한 IC50, 예를 들면 1 nM 내지 10 μM 범위 내;
테스트 (a): PI 3Kδ에 대한 IC50, 예를 들면 1 nM 내지 10 μM 범위 내;
테스트 (b): MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50, 예를 들면 1 nM 내지 20 μM 범위 내;
테스트 (e): 제코 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50, 예를 들면 1 nM 내지 20 μM 범위 내.
편의적으로, 본 발명의 특정한 화합물은 상기 테스트 (a), (b), (c) 및 (d) 중 하나 이상에서 하기의 농도 또는 용량에서 활성을 가진다:
테스트 (a): PI 3Kβ에 대한 IC50, 예를 들면 1 nM 내지 10 μM 범위 내;
테스트 (a): PI 3Kδ에 대한 IC50, 예를 들면 1 nM 내지 10 μM 범위 내;
테스트 (b): MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50, 예를 들면 1 nM 내지 20 μM 범위 내;
테스트 (c): 생체내 포스포 AKT(ser473)의 >50% 억제, 예를 들면 1 내지 200 mg/㎏/일 범위 내;
테스트 (d): 이종이식 활성, 예를 들면 1 내지 200 mg/㎏/일 범위 내.
테스트 (e): 제코 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50, 예를 들면 1 nM 내지 20 μM 범위 내.
예를 들어, 실시예 1.04로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 11 nM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 24 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 5 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 2.00로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 9 nM의 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 12 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 2 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 1.03b로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 7 nM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 9 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 1 nM인 활성을 가지고; 테스트 (e)에서 제코 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 7 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 1.03로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 12 nM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 22 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 2 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 1.03a로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 0.198 μM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 0.282 μM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 27 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 1.05로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 7 nM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 9 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 1 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 1.06으로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 7 nM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 7 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 1 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 1.07로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 6 nM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 5 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 2 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 1.08로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 6 nM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 6 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 2 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 1.10로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 8 nM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 21 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 4 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 1.11로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 9 nM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 15 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 8 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 3.00으로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 11 nM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 18 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 3 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 3.02로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 14 nM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 10 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 3 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예 3.03으로서 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 PI 3Kβ에 대한 IC50이 대략 10 nM인 활성을 가지고; 테스트 (a)에서 PI 3Kδ에 대한 IC50이 대략 7 nM인 활성을 가지며; 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 중에서 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 1 nM인 활성을 가진다.
예를 들어, 실시예에 개시된 크로메논 화합물은 테스트 (a)에서 하기 표 A에 예시된 수준의 활성을 가진다.
표 A
Figure pct00033
* 실시예 3.01에 개시된 화합물은 테스트 (b)에서 MAD-MB-468 세포 내 세포성 포스포 AKT(ser473)에 대한 IC50이 대략 6 nM인 활성을 가졌다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 약학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체와 병용하여 포함하는 약학 조성물이 제공된다.
본 발명의 조성물은 경구용(예를 들어, 정제, 로젠지, 경질 또는 연질 캡슐, 수성 또는 유성 현탁액, 유화액, 분산성 분말 또는 과립, 시럽 또는 엘릭시르), 국소용(예를 들어, 크림, 연고, 겔 또는 수성 또는 유성액 또는 현탁액), 흡입에 의한 투여(예를 들어, 미분 분말 또는 액체 에어로졸), 주입에 의한 투여(예를 들어, 미분 분말), 비경구 투여(예를 들어, 정맥내, 피하, 복강내 또는 근육내 투약용 무균 수용액 또는 유성 용액), 또는 직장 투약용 좌제로서 적절한 형태로 있을 수 있다.
본 발명의 조성물은 당업계에 공지된 통상의 약학적 부형제를 사용하는 통상의 절차에 의하여 얻을 수 있다. 따라서, 경구용 조성물은 예를 들어 1종 이상의 착색제, 감미제, 방향제 및/또는 방부제를 포함할 수 있다.
단일 제형으로 생성하기 위한 1종 이상의 부형제와 결합한 활성 성분의 양은 처치된 숙주 및 투여의 특정한 경로에 따라서 변경되어야만 한다. 예를 들어, 인간에게 경구 투여하기 위한 제제는 일반적으로 총 조성물의 약 5 내지 약 98 중량%일 수 있는 적절하고 편리한 양의 부형제와 예를 들어 1 mg 내지 1 g의 활성제 화합물(보다 적절하게는 1 내지 250 mg, 예컨대 1 내지 100 mg)을 포함할 수 있다.
화학식 I의 화합물의 치료 또는 예방 목적의 용량 규모는 공지된 약제의 원칙에 따라 동물 또는 환자의 질환 상태의 성질 및 경중도, 연령 및 성별에 따라 변경될 수 있다.
치료 또는 예방 목적의 화학식 I의 화합물의 사용함에 있어서, 분할 투여가 요구되는 경우 체중 1 kg 당 1 mg 내지 100 mg 범위 내의 1일 용량이 수용되도록 투여될 수 있다. 일반적으로, 비경구 경로를 사용할 경우에는 더 적은 용량을 투여한다. 따라서, 예를 들어 정맥내 투여의 경우, 예를 들어 체중 1 kg 당 1 mg 내지 25 mg 범위 내의 용량으로 사용되는 것이 일반적이다. 유사하게, 흡입에 의한 투여의 경우 예를 들어 체중 1 kg 당 1 mg 내지 25 mg 범위의 용량이 사용될 것이다. 그러나, 경구 투여가 바람직하고, 특히 정제 제형으로 투여하는 것이 바람직하다. 전형적으로, 단위 제형은 약 10 mg 내지 0.5 g의 본 발명의 화합물을 포함할 것이다.
상기 명시한 바와 같이, PI 3-키나제 효소는 암 및 기타의 세포의 증식을 매개하며, 혈관형성 이벤트를 매개하며, 암 세포의 운동성, 이동성 및 침습성을 매개하는 효과중 1종 이상에 의하여 종양형성에 기여하는 것으로 공지되어 있다. 본 출원인은 본 발명의 크로메논 화합물이 종양 세포의 증식 및 생존 및 전이중인 종양 세포의 침습성 및 이동성을 초래하는 신호 전달 단계에 관여하는 I 계열 PI 3-키나제 효소(예컨대 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 및/또는 Ib 계열 PI 3-키나제 효소) 중 1종 이상의 억제에 의하여 얻을 수 있는 것으로 밝혀진 강한 항종양 활성을 가진다는 것을 밝혀냈다.
따라서, 본 발명의 화합물은 항종양제, 특히 종양 성장 및 생존의 억제 및, 전이성 종양 성장의 억제를 초래하는 포유동물 암 세포의 증식, 생존, 운동성, 퍼짐 및 침습성의 선택적 억제제로서 중요하다. 특히, 본 발명의 크로메논 화합물은 고형 종양 질환의 억제 및/또는 치료에서의 항증식제 및 항침습제로서 중요하다. 특히, 본 발명의 화합물은 종양 세포의 증식 및 생존 및 전이중인 종양 세포의 이동성 및 침습성을 초래하는 신호 전달 단계에 관련된 복수의 PI 3-키나제 효소 중 1종 이상, 예컨대 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 및 Ib 계열 PI 3-키나제 효소의 억제에 민감한 종양의 예방 또는 치료에 유용할 것으로 예상된다. 추가로, 본 발명의 화합물은 PI 3-키나제 효소, 예컨대 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 및 Ib 계열 PI 3-키나제 효소의 억제에 의하여 단독으로 또는 부분적으로 매개되는 종양의 예방 또는 치료에 유용할 것으로 예상되며, 즉 화합물은 해당 치료를 필요로 하는 온혈 동물에서의 PI 3-키나제 효소 억제 효과를 생성하는 데 사용될 수 있다.
전술한 바와 같이, PI 3-키나제 효소의 억제제는 형 종양, 예컨대 암종 및 육종 및 백혈병 및 림프구 악성 종양을 포함하는 각종 형태의 암의 질환들의 치료에 대해 치료적으로 중요해야 한다. 특히, I 계열 PI 3-키나제 효소의 억제제는 예를 들어 유방암, 직장결장암, 폐암(소세포 폐암, 비-소세포 폐암 및 기관지폐포암 포함) 및 전립선암 및, 담관암, 골암, 방광암, 뇌암, 두경부암, 신장암, 간암, 위장관 조직암, 식도암, 난소암, 췌장암, 피부암, 고환암, 갑상선암, 자궁암, 자궁경부암 및 음문암, 백혈병(ALL, CLL 및 CML(만성 골수성 백혈병 포함), 다발성 골수종 및 림프종(비호지킨 림프종, 예컨대 미만성 거대세포 B-세포 림프종[DLBCL], 여포 림프종 및 외투 세포 림프종 포함)의 치료를 대해 치료적으로 중요해야 한다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 온혈 동물, 예컨대 인간에서의 약제로서 사용하기 위한 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 항증식성 효과의 생성에 사용하기 위한 상기 에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 고형 종양 질환의 예방 및/또는 치료에서 항침습제로서 온혈 동물, 예컨대 인간에 사용하기 위한 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 항증식성 효과의 생성을 위한 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 항증식성 효과의 생성에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 고형 종양 질환의 예방 및/또는 치료에서 항침습제로서 온혈 동물, 예컨대 인간에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 유효량의, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 해당 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 예컨대 인간에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 동물에서의 항증식성 효과를 생성하는 방법이 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 유효량의, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 전구약물을 해당 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 예컨대 인간에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 동물에서의 고형 종양 질환의 예방 및/또는 치료에 의하여 항침습성 효과를 생성하는 방법이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 온혈 동물, 예컨대 인간에서의 암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 유효량의, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 해당 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 예컨대 인간에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 동물에서의 암의 예방 또는 치료 방법이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 고형 종양 질환의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도가 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 유효량의, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 해당 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 예컨대 인간에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 동물의 고형 종양 질환의 예방 또는 치료 방법이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 종양 세포의 증식, 생존, 침습성 및 이동성을 초래하는 신호 전달 단계에 관여하게 되는 PI 3-키나제 효소(예컨대 Ia 계열 효소 및/또는 Ib 계열 PI 3-키나제 효소)의 억제에 민감한 종양의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 종양 세포의 증식, 생존, 침습성 및 이동성을 초래하는 신호 전달 단계에 관여하게 되는 PI 3-키나제 효소(예컨대 Ia 계열 효소 및/또는 Ib 계열 PI 3-키나제 효소)의 억제에 민감한 종양의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 유효량의, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 동물에게 투여하는 단계를 포함하는, 종양 세포의 증식, 생존, 침습성 및 이동성을 초래하는 신호 전달 단계에 관여하게 되는 PI 3-키나제 효소(예컨대 Ia 계열 효소 Ib 계열 PI 3-키나제 효소)의 억제에 민감한 상기 종양의 예방 또는 치료 방법이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, PI 3-키나제 효소 억제 효과(예컨대 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 또는 Ib 계열 PI 3-키나제 효소 억제 효과)를 제공하는 데 사용하기 위한 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, PI 3-키나제 효소 억제 효과(예컨대 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 또는 Ib 계열 PI 3-키나제 효소 억제 효과)를 제공하는 데 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 또한 유효량의, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, PI 3-키나제 효소 억제 효과(예컨대 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 또는 Ib 계열 PI 3-키나제 효소 억제 효과)를 제공하는 방법이 제공된다.
상술된 바와 같이, 본 발명의 특정한 화합물은 Ib 계열 PI 3-키나제 효소에 대하여 또는 EGF 수용체 티로신 키나제, VEGF 수용체 티로신 키나제 또는 Src 비-수용체 티로신 키나제 효소에 대하여보다는 Ia 계열 PI 3-키나제 효소에 대하여 실질적으로 더 양호한 효능을 가진다. 이러한 화합물은 Ib 계열 PI 3-키나제 효소 또는 EGF 수용체 티로신 키나제, VEGF 수용체 티로신 키나제 또는 Src 비-수용체 티로신 키나제 효소에 대한 적은 활성을 나타내면서, Ia 계열 PI 3-키나제 효소를 억제하기에 충분한 양으로 사용될 수 있는 Ia 계열 PI 3-키나제 효소에 대한 충분한 효능을 가진다. 이러한 화합물은 Ia 계열 PI 3-키나제 효소의 선택적 억제에 유용할 가능성이 크고, 예를 들어 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 유도 종양의 효과적인 치료에 유용할 가능성이 크다.
본 발명의 이러한 측면에 따라, 선택적 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 억제 효과를 제공하는 데 사용하기 위한 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 선택적 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 억제 효과를 제공하는 데 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 또한 유효량의, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 선택적 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 억제 효과를 제공하는 방법이 제공된다.
"선택적 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 억제 효과"라는 것은 화학식 I의 크로메논 유도체가 기타의 키나제 효소에 비하여 Ia 계열 PI 3-키나제 효소에 대하여 더 효과적이라는 것을 의미한다. 특히, 본 발명에 의한 일부 화합물은 기타의 키나제, 예컨대 수용체 또는 비-수용체 티로신 키나제 또는 세린/트레오닌 키나제에 대하여서보다 Ia 계열 PI 3-키나제 효소에 대하여 더욱 효과적이다. 예를 들어, 본 발명에 의한 선택적 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 억제제는 기타의 키나제에 대하여서보다는 Ia 계열 PI 3-키나제 효소에 대하여 5배 이상, 편의적으로는 10배 이상, 더욱 편의적으로는 100배 이상 더욱 유효하다.
본 발명의 또 다른 특징에 따라, 유방암, 직장결장암, 폐암(소세포 폐암, 비-소세포 폐암 및 기관지폐포암 포함) 및 전립선암의 치료에 사용하기 위한 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 담관암, 골암, 방광암, 두경부암, 신장암, 간암, 위장관 조직암, 식도암, 난소암, 췌장암, 피부암, 고환암, 갑상선암, 자궁암, 자궁경부암 및 음문암, 백혈병(ALL 및 CML 포함), 다발성 골수종 및 림프종의 치료에 사용하기 위한 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 담관암, 골암, 방광암, 두경부암, 신장암, 간암, 위장관 조직암, 식도암, 난소암, 췌장암, 피부암, 고환암, 갑상선암, 자궁암, 자궁경부암 및 음문암, 백혈병(ALL, CLL 및 CML 포함), 다발성 골수종 및 림프종(비호지킨 림프종, 예컨대 미만성 거대세포 B-세포 림프종[DLBCL], 여포 림프종 및 외투 세포 림프종 포함)의 치료에 사용하기 위한 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 유방암, 직장결장암, 폐암(소세포 폐암, 비-소세포 폐암 및 기관지폐포암 포함) 및 전립선암의 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 담관암, 골암, 방광암, 두경부암, 신장암, 간암, 위장관 조직암, 식도암, 난소암, 췌장암, 피부암, 고환암, 갑상선암, 자궁암, 자궁경부암 및 음문암, 백혈병(ALL 및 CML 포함), 다발성 골수종 및 림프종의 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 담관암, 골암, 방광암, 두경부암, 신장암, 간암, 위장관 조직암, 식도암, 난소암, 췌장암, 피부암, 고환암, 갑상선암, 자궁암, 자궁경부암 및 음문암, 백혈병(ALL, CLL 및 CML 포함), 다발성 골수종 및 림프종(비호지킨 림프종, 예컨대 미만성 거대세포 B-세포 림프종[DLBCL], 여포 림프종 및 외투 세포 림프종 포함)의 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 유효량의, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 해당 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 예컨대 인간에서의 유방암, 직장결장암, 폐암(소세포 폐암, 비-소세포 폐암 및 기관지폐포암 포함) 및 전립선암의 치료 방법이 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 유효량의, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 해당 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 예컨대 인간에서의 담관암, 골암, 방광암, 두경부암, 신장암, 간암, 위장관 조직암, 식도암, 난소암, 췌장암, 피부암, 고환암, 갑상선암, 자궁암, 자궁경부암 및 음문암, 백혈병(ALL 및 CML 포함), 다발성 골수종 및 림프종의 치료 방법이 제공된다.
본 발명의 이러한 측면의 또 다른 특징에 따라, 유효량의, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 해당 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 예컨대 인간에서의 담관암, 골암, 방광암, 두경부암, 신장암, 간암, 위장관 조직암, 식도암, 난소암, 췌장암, 피부암, 고환암, 갑상선암, 자궁암, 자궁경부암 및 음문암, 백혈병(ALL, CLL 및 CML 포함), 다발성 골수종 및 림프종(비호지킨 림프종, 예컨대 미만성 거대세포 B-세포 림프종[DLBCL], 여포 림프종 및 외투 세포 림프종 포함)의 치료 방법이 제공된다.
상술된 바와 같이, 화학식 I의 화합물의 생체내 효과는 화학식 I의 화합물의 투여후 인간 또는 동물 신체 내에서 형성되는 1종 이상의 대사물에 의하여 부분적으로 나타날 수 있다.
상술된 바와 같이, 본 발명의 특정한 화합물은 다른 것들보다 계열 PI 3-키나제 효소의 특정한 이소형태에 대해 보다 양호한 효능을 가진다. 예를 들어, 본 발명의 특정한 화합물은 다른 I 계열 PI 3-키나제 이소형태, 예컨대 α 및 γ에 대하여서보다 PI 3-키나제 β 및 PI 3-키나제 δ에 대하여 더 양호한 효능을 가진다.
그러므로, 본 발명은 또한 환자에서의 포스포이노시티드 3-키나제 β를 억제하는 데 유효한 일정량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 환자에서의 포스포이노시티드 3-키나제 β의 억제 방법에 관한 것이다.
따라서, 이와 유사하게, 본 발명은 환자에서의 포스포이노시티드 3-키나제 δ를 억제하는 데 유효한 일정량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 환자에서의 포스포이노시티드 3-키나제 δ의 억제 방법에 관한 것이다.
PI 3-키나제의 억제제인 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 또한 각종 기타의 질환 상태에서 잠재적인 치료 용도를 가진다. 예를 들어, PI 3-키나제는 혈관계, 즉 혈관 평활근 세포[Thyberg, 1998, European Journal of Cell Biology 76(1):33-42] 및 폐(기도 평활근 세포)[Krymskaya, V.P., BioDrugs, 2007. 21(2): 85-95]에서의 평활근 증식을 촉진하는 데 있어서 중요한 역할을 한다. 혈관 평활근 세포의 과도한 증식은 침습성 혈관 시술후 죽상경화판의 형성 및 신생내막 비후의 발생에서 중요한 역할을 한다(문헌[Scwartz et al., 1984, Progress in Cardiovascular Disease 26:355-372]; [Clowes et al., 1978, Laboratory Investigations 39:141-150]). 게다가, 기도 평활근 세포의 과도한 증식은 천식 및 만성 기관지염의 환경에서 COPD의 발생을 초래한다. 그러므로, PI 3-키나제 활성의 억제제는 혈관 재협착, 죽상동맥경화증 및 COPD의 예방에 사용될 수 있다.
PI 3-키나제는 또한 종양 세포의 조절에서 또한 이들 세포가 세포소멸 성장을 겪게 되는 경향에서 중요한 역할을 한다(문헌[Sellers et al., 1999, The Journal of Clinical Investigation 104:1655-1661]). 추가로, 지질 포스파타제 PTEN에 의한 PI 3-키나제 지질 산물 PI(3,4,5)P3 및 PI(3,4)P2의 조절되지 않은 조절은 인간에서의 다수의 악성 종양의 진행에서 중요한 역할을 한다(문헌[Leevers et al., 1999, Current Opinion in Cell Biology 11:219-225]). 포스포이노시티드 3-키나제 β(PI 3Kβ) 이소형태에 대한 특이적 역할은 이러한 유형의 암에 기재되어 있다(문헌[Jia S et al., 2008, Nature 454(7205):776-9]; [Wee et al., 2008, PNAS 105(35):13057-62]). 그러므로, PI 3-키나제의 억제제인 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 인간에서의 신생물을 치료하는 데 사용될 수 있다.
PI 3-키나제는 또한 백혈구 작용([Fuller et al., 1999, The Journal of Immunology 162(11):6337-6340]; [Eder et al., 1998, The Journal of Biological Chemistry 273(43):28025-31]) 및 림프구 작용[Vicente-Manzanares et al., 1999, The Journal of Immunology 163(7):4001-4012]에서 중요한 역할을 한다. 예를 들어, 염증성 내피로의 백혈구 유착은 PI 3-키나제-의존성 신호전달 과정에 의한 내인성 백혈구 인테그린의 활성화를 포함한다. 게다가, 호중구에서의 산화 분출[Nishioka et al., 1998, FEBS Letters 441(1): 63-66] 및 [Condliffe, A.M., et al., Blood, 2005. 106(4):1432-40] 및 세포골격 재구성[Kirsch et al., 1999, Proceedings National Academy of Sciences USA 96(11):6211-6216]은 PI 3-키나제 신호전달을 포함하는 것으로 보인다. 호중구 이동 및 방향성 이동은 또한 PI 3-키나제 활성에 의존한다(문헌[Camps, M., et al., Nat Med, 2005. 11(9): p. 936-43] 및 [Sadhu, C., et al., J Immunol, 2003. 170(5): 2647-54]). 따라서, PI 3-키나제의 억제제는 염증 부위에서의 백혈구 유착 및 활성화를 감소시키는 데 있어서 유용할 수 있으며, 그리하여 급성 및/또는 만성 염증성 장애를 치료하는 데 사용될 수 있다. PI 3-키나제는 또한 림프구 증식 및 활성화에서 중요한 역할을 한다(문헌[Fruman et al., 1999, Science 283 (5400): 393-397]). 자가면역 질환에서의 림프구의 중요한 역할을 고려해볼 때, PI 3-키나제 활성의 억제제는 상기 장애의 치료에 사용될 수 있다.
상기에서 정의된 항암 치료는 단독 요법으로서 적용될 수 있거나, 본 발명의 화합물 이외에, 통상의 수술 또는 방사선요법 또는 화학요법을 포함할 수 있다. 그러한 화학요법은 하기 항종양제 카테고리 중 1종 이상을 포함할 수 있다:
(i) 의학적 종양학에 사용되는 바와 같은 기타의 항증식성/항신생물 약물 및 이의 조합, 예컨대 알킬화제(예를 들면 시스플라틴, 옥살리플라틴, 카르보플라틴, 시클로포스파미드, 질소 머스타드, 멜팔란, 클로람부실, 부설판, 테모졸아미드 및 니트로소우레아); 항대사물질(예를 들어, 겜시타빈 및 항폴린산제, 예컨대 플루오로피리미딘, 예컨대 5-플루오로우라실 및 테가푸르, 랄티트렉세드, 메토트렉세이트, 시토신 아라비노시드 및 히드록시우레아, 및 푸린 유사체, 예컨대 플루다라빈); 항종양 항생제(예를 들어, 안트라사이클린, 예컨대 아드리아마이신, 블레오마이신, 독소루비신, 다우노마이신, 에피루비신, 이다루비신, 미토마이신-C, 닥티로마이신 및 미트라마이신); 항유사분열제(예를 들어, 빈카 알칼로이드, 예컨대 빈크리스틴, 빈블라스틴, 빈데신 및 비노렐빈 및 탁소이드, 예컨대 탁솔 및 탁소테레 및 폴로키나제 억제제); 토포이소머라제 억제제(예를 들어, 에피포도필로톡신, 예컨대 에토포시드 및 테니포시드, 암사크린, 토포테칸 및 캄프토테신);
(ii) 세포 증식 억제제, 예컨대 항에스트로겐(예를 들어, 타목시펜, 풀베스트란트, 토레미펜, 랄록시펜, 드롤록시펜 및 요오독시펜), 항안드로겐제(예를 들어, 비칼루타미드, 플루타미드, 닐루타미드 및 시프로테론 아세테이트), 안드로겐 수용체의 핵 전좌, 및 이의 DNA 또는 공동활성화제 단백질에의 결합을 방지하는 안드로겐 수용체 길항제 MDV3100 또는 ARN-509, CYP17A1의 억제제, 예컨대 아비라테론[지티가(ZYTIGA)™, 및 안드로겐 수용체 작용 및 CYP17A1의 의 혼합 억제제, 예컨대 TOK-001(갈레테론(galeterone)). LHRH 길항제 또는 LHRH 작용제(예를 들어, 고세렐린, 류프로렐린 및 부세렐린), 프로게스토겐(예를 들어, 메게스트롤 아세테이트), 아로마타제 억제제(예를 들어, 아나스트로졸, 레트라졸, 보라졸 및 엑세메스탄), 및 5α-리덕타제 억제제, 예컨대 피나스테리드;
(iii) 항침습제[예를 들어, c-Src 키나제 패밀리 억제제, 예컨대 4-(6-클로로-2,3-메틸렌디옥시아닐리노)-7-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]-5-테트라히드로피란-4-일옥시퀴나졸린(AZD0530; 국제 특허 출원 WO 01/94341), N-(2-클로로-6-메틸페닐)-2-{6-[4-(2-히드록시에틸)피페라진-1-일]-2-메틸피리미딘-4-일아미노}티아졸-5-카르복스아미드(다사티닙, BMS-354825; J. Med. Chem., 2004, 47, 6658-6661) 및 보수티닙(SKI-606) 및 메탈로프로테이나제 억제제, 예컨대 마리마스타트, 우로키나제 플라스미노겐 활성제 수용체 기능의 억제제 또는 헤파라나제에 대한 항체];
(iv) 성장 인자 작용의 억제제: 예를 들어, 상기 억제제는 성장 인자 항체 및 성장 인자 수용체 항체(예를 들어, 항-erbB2 항체 트라스투주맙[Herceptin™], 항-EGFR 항체 파니투무맙, 항-erbB1 항체 세툭시맙[Erbitux, C225] 및 문헌[Stern et al., Critical reviews in oncology/haematology, 2005, Vol. 54, pp11-29]에 의하여 개시된 임의의 성장 인자 또는 성장 인자 수용체 항체를 포함하며; 상기 억제제는 또한 티로신 키나제 억제제, 예를 들어 표피 성장 인자 패밀리의 억제제(예를 들어, EGFR 패밀리 티로신 키나제 억제제, 예컨대 N-(3-클로로-4-플루오로페닐)-7-메톡시-6-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린-4-아민(게피티닙, ZD1839), N-(3-에티닐페닐)-6,7-비스(2-메톡시에톡시)퀴나졸린-4-아민(에를로티닙, OSI-774) 및 6-아크릴아미도-N-(3-클로로-4-플루오로페닐)-7-(3-모르폴리노프로폭시)-퀴나졸린-4-아민(CI 1033), erbB2 티로신 키나제 억제제, 예컨대 라파티닙); 간세포 성장 인자 패밀리의 억제제; 인슐린 성장 인자 패밀리의 억제제; 혈소판-유래 성장 인자 패밀리의 억제제, 예컨대 이마티닙 및/또는 닐로티닙(AMN107); 세린/트레오닌 키나제의 억제제(예를 들어, Ras/Raf 신호전달 억제제, 예컨대 파르네실 트랜스퍼라제 억제제, 예를 들어 소라페닙(BAY 43-9006), 티피파르닙(R115777) 및 로나파르닙(SCH66336)), MEK 및/또는 AKT 키나제를 통한 세포 신호전달의 억제제, c-키트 억제제, abl 키나제 억제제, PI 3 키나제 억제제, Plt3 키나제 억제제, CSF-1R 키나제 억제제, IGF 수용체(인슐린 유사 성장 인자) 키나제 억제제; 오로라 키나제 억제제(예를 들어, AZD1152, PH739358, VX-680, MLN8054, R763, MP235, MP529, VX-528 및 AX39459) 및 사이클린 의존성 키나제 억제제, 예컨대 CDK2 및/또는 CDK4 억제제를 포함하며;
(v) 항혈관형성제, 예컨대 혈관 내피 성장 인자의 효과를 억제하는 것[예를 들어, 항혈관 내피 세포 성장 인자 항체 베바시주맙(아바스틴(Avastin)™) 및 예를 들어 VEGF 수용체 티로신 키나제 억제제, 예컨대 반데타닙(ZD6474), 바탈라닙(PTK787), 수니티닙(SU11248), 악시티닙(AG-013736), 파조파닙(GW 786034) 및 4-(4-플루오로-2-메틸인돌-5-일옥시)-6-메톡시-7-(3-피롤리딘-1-일프로폭시)퀴나졸린(AZD2171; WO 00/47212의 실시예 240), 화합물, 예컨대 국제 특허 출원 WO97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 및 WO 98/13354에 개시된 화합물 및 기타의 기전에 의하여 작용되는 화합물(예를 들어, 리노마이드, 인테그린 αvβ3 작용 및 안지오스타틴의 억제제)];
(vi) 혈관 손상제, 예컨대 콤브레타스타틴 A4 및 국제 특허 출원 WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 및 WO 02/08213에 개시된 화합물;
(vii) 엔도텔린 수용체 길항제, 예를 들어 지보텐탄(ZD4054) 또는 아트라센탄;
(viii) 안티센스 요법, 예를 들어 상기 제시된 표적에 대한 것, 예컨대 ISIS 2503, 항-ras 안티센스;
(ix) 예를 들어 미주 유전자를 대체하는 접근법, 예컨대 미주 p53 또는 미주 BRCA1 또는 BRCA2, DGEPT(유전자 지향된 효소 전구약물 요법) 접근법, 예컨대 시토신 데아미나제, 티미딘 키나제 또는 세균성 니트로리덕타제 효소를 사용한 것 및, 화학요법 또는 방사선요법에 대한 환자 내성을 증가시키기 위한 접근법, 예컨대 다중약물 내성 유전자 요법을 비롯한 유전자 요법 접근법; 및
(x) 예를 들어 환자 종양 세포의 면역원성을 증가시키기 위한 생체외 및 생체내 접근법, 예컨대 시토킨을 사용한 전달감염, 예컨대 인터류킨 2, 인터류킨 4 또는 과립구 대식구 집락 자극 인자, T-세포 무반응을 감소시키기 위한 접근법, 전달감염된 면역 세포, 예컨대 시토킨-전달감염된 수지상 세포를 사용한 접근법, 시토킨-전달감염된 종양 세포주를 사용한 접근법 및 항유전자형 항체를 사용한 접근법을 비롯한 면역요법 접근법, CTLA4 항체 및 CD137, PD-1 또는 B7-H1, 톨(toll)-수용체 길항자에 대한 항체를 포함한 T-세포 증진을 위한 접근법; SGN-40와 같은 CD40에 대한 길항 항체(다세투주맙(Dacetuzumab)) 또는 PDL-192와 같은 트윅(Tweak) 수용체에 대한 길항 항체; FAS에 대한 길항 항체; 종양 관련 항원에 대한 항체 및 포적 세포 유형을 고갈시키는 항체(예를 들어, 비접합 항CD20 항체, 예컨대 리툭시맙(Rituximab), 오파투무맙(ofatumumab), 오비누투주맙(Obinutuzumab), 항CD 19 항체, 예컨대 MEDI-551, 항CD52 항체, 예컨대 알렘투주맙(Alemtuzumab), 항CD37 항체, 예컨대 TRU-016, 항CD22 항체, 예컨대 이노투주맙(Inotuzumab), 방사선표지 항CD20 항체 벡사르(Bexxar) 및 제발린(Zevalin), 및 항CD54 항체 캄파쓰(Campath); 면역독소, 예컨대 목세투무맙 파수도톡스)를 사용한 접근법, 항유전자형 항체를 이용한 접근법, 천연 킬러 세포 작용을 증진시키는 접근법, 및 항체-독소 접합체(예를 들어, 항CD33 항체 마일로타르그(Mylotarg))를 이용하는 접근법. 면역 개질제, 예컨대 레블리미드(Revlimid)(레날리도마이드(Lenalidomide)).
본 발명의 이러한 측면에 따라, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 상기 (i) 내지 (x) 하에 열거된 항종양제들 중 어느 하나를 포함하는, 암의 치료에 사용하는 데 적절한 병용이 제공된다.
그러므로, 본 발명의 또 다른 측면에서, 상기 (i) 내지 (x) 하에 열거된 것으로부터 선택된 항종양제와 병용되는 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에서, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 상기 (i) 하에 열거된 항종양제들 중 어느 하나를 포함하는, 암의 치료에 사용하기에 적당한 병용이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에서, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 탁소이드, 예를 들어 탁솔 또는 탁소테레, 편의적으로는 탁소테레를 포함하는 암의 치료에 사용하기에 적절한 병용이 제공된다.
여기서, 용어 "병용"을 사용할 경우, 이는 동시, 별도의 또는 순차적 투여를 지칭하는 것으로 이해하여야 한다. 본 발명의 한 측면에서, "병용"은 동시 투여를 지칭한다. 본 발명의 또 다른 측면에서, "병용"은 별도의 투여를 지칭한다. 본 발명의 또 다른 측면에서, "병용"은 순차 투여를 지칭한다. 투여가 순차적 또는 별도인 경우, 제2의 성분의 투여에서의 지연은 예컨대 병용의 이로운 효과를 상실하지 않아야만 한다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 상기 (i) 내지 (x) 하에 열거된 것으로부터 선택된 항종양제와 병용하여 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 약학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체와 병용하여 포함하는 약학 조성물이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 암의 치료에 사용하기 위한, 상기 (i) 내지 (x) 하에 열거된 것으로부터 선택된 항종양제와 병용하여 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 약학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체와 병용하여 포함하는 약학 조성물이 제공된다.
본 발명의 또 다른 특징에 따라, 온혈 동물, 예컨대 인간에서 암에 사용하기 위한 약제의 제조에서의 상기 (i) 내지 (x) 하에 열거된 것으로부터 선택된 항종양제와 병용하여 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 제공된다.
그러므로, 본 발명의 한 부가적 특징에서, 상기 (i) 내지 (x) 하에 열거된 것으로부터 선택된 항종양제와 병용하여 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 해당 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 예컨대 인간에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 동물에서의 암의 치료 방법이 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 상기 (i) 내지 (x) 하에 열거된 것으로부터 선택된 항종양제와 병용하여 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 키트가 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라,
a) 제1의 단위 제형에서의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염;
b) 제2의 단위 제형에서의 상기 (i) 내지 (x) 하에 열거된 것으로부터 선택된 항종양제; 및
c) 상기 제1의 및 제2의 제형을 수용하기 위한 용기 수단
을 포함하는 키트가 제공된다.
화학식 I의 화합물이 주로 온혈 동물(인간 포함)에 사용하기 위한 치료제로서 중요하기는 하나, 또한 I 계열 PI 3-키나제 효소, 특히 Ia 계열 PI 3-키나제 효소 및/또는 Ib 계열 PI 3-키나제 효소, 보다 특히 PI 3-키나제 β를 포함하는 Ia 계열 PI 3-키나제 효소의 효능을 억제하는 것이 필요한 임의의 경우에 유용하다. 따라서, 이들은 신규한 생물학적 테스트의 전개에서 또한 신규한 약리학적 제제에 대한 조사에서 사용하기 위한 약리학적 표준으로서 유용하다.
본 명세서에서 하기 도면을 참조한다:
도 1: 실시예 1.03b A형의 X-선 분말 회절 패턴
도 2: 실시예 1.03b B형의 X-선 분말 회절 패턴
도 3: 실시예 1.03b B형의 DSC 온도기록도
도 4: 실시예 1.03b C형의 X-선 분말 회절 패턴
이제, 본 발명은 일반적으로 하기의 실시예에서 예시될 것이다:
(i) 달리 명시되지 않는 한, 조작은 상온, 즉 17℃ 내지 25℃의 범위에서 불활성 기체, 예컨대 질소 분위기 하에서 실시하였다.
(ii) 증발은 진공에서 회전식 증발에 의해서 또는 진공하에서 제네박(Genevac) 기기를 사용하여 실시하며, 워크업 절차는 여과에 의하여 잔류 고체를 제거한 후 실시하였다.
(iii) 플래쉬 크로마토그래피 정제는 자동화된 아르멘 글라이더 플래쉬(Armen Glider Flash): 스폿 II 얼티메이트(Spot II Ultimate)[프랑스 셍 따베에 소재하는 아르멩 인스트루먼트(Armen Instrument)]상에서 독일 다름슈타트에 소재하는 머크로부터 입수한 프리팩트 머크 정상 Si60 실리카 카트리지(입도 측정: 15 내지 40 또는 40 내지 63 μm)를 사용하여 수행하였다.
(iv) 분취용 크로마토그래피는 용리액으로서 물(0.2% 탄산암모늄 함유) 및 아세토니트릴의 극성이 점차로 감소되는 혼합물을 사용하여 ZMD 또는 ZQ ESCi 질량 분광계가 장착된 워터스(Waters) 기기(600/2700 또는 2525) 및 워터스 X-테라(Terra) 또는 워터스 X-Bridge 또는 워터스 썬파이어(SunFire) 역상 컬럼(C-18, 5 마이크론 실리카, 19 ㎜ 직경, 100 ㎜ 길이, 유속 40 ㎖/분)상에서 수행하였다.
(v) 수율이 존재할 경우, 이는 반드시 최대로 얻을 수 있는 것은 아니다.
(vi) 일반적으로, 화학식 I의 최종 생성물의 구조는 핵자기 공명(NMR) 분광학에 의하여 확인하였으며; NMR 화학 이동은 델타 등급으로 측정하였으며[양성자 자기 공명 스펙트럼은 브루커 아반스(Bruker Avance) 500(500 MHz) 기기를 사용하여 측정하며]; 측정은 달리 명시되지 않는 한 상온에서 실시하며; 하기의 약어를 사용하였다: s, 단일선; d, 이중선; t, 삼중선; q, 사중선; m, 다중선; dd, 이중선의 이중선; ddd, 이중선의 이중선의 이중선; dt, 삼중선의 이중선; bs, 넓은 시그날.
(vii) 일반적으로, 화학식 I의 최종 생성물은 또한 액체 크로마토그래피(LCMS)에 이어서 질량 분광학으로 특성화하며; LCMS는 워터스 ZQ ESCi 또는 ZMD ESCi 질량 분광계 및 X 브리지(Bridge) 5 μm C-18 컬럼(2.1×50 ㎜)이 장착된 워터스 얼라이언스(Alliance) HT (2790 & 2795)를 사용하여 2.4 ㎖/분의 유속에서 95% A + 5% C 내지 95% B + 5% C의 용매계를 사용하여 4 분에 걸쳐 수행하였으며, 여기서 A = 물, B = 메탄올, C = 1:1 메탄올:물(0.2% 탄산암모늄 함유)이다.
(viii) 중간체는 일반적으로 완전하게 특성화하지 않았으며, 순도는 박층 크로마토그래피, 질량 스펙트럼, HPLC 및/또는 NMR 분석에 의하여 평가하였다.
(ix) X선 분말 회절 스펙트럼은 브루커 단일 규소 결정(SSC) 웨이퍼 장착물상에서의 결정질 물질의 샘플을 장착하고, 현미경 슬라이드를 사용하여 샘플을 박층으로 펼쳐서 (브루커 D4 분석 기기를 사용하여) 측정한다. 샘플을 분당 30회 회전으로 회전하고(그리하여 계수 통계학을 개선시키고), 40 ㎸ 및 40 ㎃에서 1.5418Å의 파장으로 작동하는 구리의 길고 미세한 촛점 튜브에 의하여 생성되는 X선으로 조사하였다. 조준된 X선 공급원을 V20에서 설정된 자동 변수 발산 슬릿을 통과하고, 반사된 방사선은 5.89 ㎜ 산란방지 슬릿 및 9.55 ㎜ 검출기 슬릿을 통하여 보낸다. 샘플을 0.03 초 동안 2° 내지 40 ° 2θ 범위 내에 걸쳐서 θ-θ 방식으로 0.00570° 2θ 증분당(연속 주사 방식) 노출시켰다. 실시 시간은 3분 및 36초이다. 기기에는 위치 민감성 검출기[링스아이(Lynxeye)]가 장착되어 있다. 조절 및 데이타 수집은 Diffrac+ 소프트웨어로 작동하는 델 옵티플렉스(Dell Optiplex) 686 NT 4.0 워크스테이션에 의하여 실시하였다. X선 분말 회절 분야의 당업자는 피크의 상대적 강도가 예를 들어 샘플의 분석에 영향을 미칠 수 있는 비-단일 종횡비 및 크기가 30 마이크론보다 큰 그레인에 의하여 영향을 받을 수 있다는 것을 숙지할 것이다. 당업자는 또한 반사의 위치가 샘플이 회절계에서 위치하는 정확한 높이 및 회절계의 0점 보정에 의하여 영향받을 수 있다는 것도 숙지할 것이다. 샘플의 표면 평탄도는 또한 작은 영향을 미칠 것이다. 따라서, 제시된 회절 패턴 데이타는 절대값으로 취급하지 않아야 한다.
(x) 시차 주사 열량법은 TA 인스트루먼츠(Instruments) Q1000 DSC 기기를 사용하여 수행하였다. 통상적으로 뚜껑이 장착된 표준 알루미늄 팬에 수용된 5 mg 미만의 물질을 25℃ 내지 300℃의 온도 범위에 걸쳐 분당 10℃의 일정한 가열 속도로 가열하였다. 질소를 사용한 퍼징 기체는 분당 50 ㎖의 유속으로 사용하였다.
(ix) 단일 결정 X-선 회절 분석을 흑연-단색 MoKα 방사선(λ=0.71073 Å)를 가지는 브루커(Bruker) APEX-II CCD 회절계를 이용하여 200 K에서 수집하였다. 구조를 직접적 방법에 의해 해체하고, 모든 반사에 대한 F 2 로 정밀화하였다. 기하학적 구조: 반올림 분수 좌표를 이용하여 결합 거리, 각 등을 계산하였다. (전체) 분산-공분산 행렬의 분산으로부터 모든 수(su)를 평가한다. 셀 esd를 거리, 각 및 비틀림 각의 평가에 고려한다. 정밀화(refinement): 모든 반사에 대한 F2의 정밀화. 칭량된 R-인자 wR 및 피트 S의 적합성은 F2에 기초하고, 통상의 R 인자 R은 F에 기초하며, 이 때 F는 음성 F2에 대해 0으로 설정한다. Rf 인자(gt) 등의 계산에만 사용되고 >2σ(F2)라고 하는 F2의 역치 표현은 정밀화을 위한 반사 선택과 관련되지 않는다. F2에 기초한 R-인자는 통계학적으로 F에 기초한 것에 대략 2배이고, ALL 데이터에 기초한 R-인자는 더욱 더 크다. 컴퓨터 프로그램: 데이터 수집: 브루커 아펙스2(APEX2); 셀 정밀화: 브루커 세인트(SAINT); 데이터 감소: 브루커 세인트; 구조 해석에 사용된 프로그램(들): SHELXS97(쉘드릭(Sheldrick), 2008); 구조 정밀화에 사용된 프로그램(들): SHELXL97(쉘드릭, 2008); 분자 그래픽: ORTEPII(존슨(Johnson), 1976), 플라톤(PLATON)(스펙(Spek), 2007); 공개용 자료 준비에 사용된 소프트웨어: 플라톤(스펙, 2007).
(xi) 하기의 약어를 사용하였다:
aq.: 수성
h: 시간
CDCl3: 중수소-클로로포름
DCM: 디클로로메탄
DIPEA : N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민
DMF: N,N-디메틸포름아미드
DSC: 시차 주사 열량법
DMA: 디메틸아세트아미드
DMSO: 디메틸 술폭시드
Ether: 디에틸 에테르
EtAc: 아세트산에틸
HCl: 염산
HPLC: 고성능 액체 크로마토그래피
MeCN: 아세토니트릴
MeOH: 메탄올
MgSO4: 황산마그네슘
Min: 분
MTBE: 메틸 tert-부틸 에테르
TBME: 메틸 tert-부틸 에테르
NaHCO3: 탄산수소나트륨
NaOH: 수산화나트륨
NH3: 암모니아
NMP: 1-메틸-2-피롤리돈
P2O5: 산화인(V)
r.t.: 실온
THF: 테트라히드로푸란
TEA : 트리에틸 아민
TFA: 트리플루오로아세트산
TBTU: 2-(1H-벤조[d][1,2,3]트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸이소우로늄 테트라플루오로보레이트
TSTU: 2-(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸이소우로늄 테트라플루오로보레이트
HATU: 2-(3H-[1,2,3]트리아졸o[4,5-b]피리딘-3-일)-1,1,3,3-테트라메틸이소우로늄 헥사플루오로포스페이트(V)
실시예 1.00
8-[1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드
Figure pct00034
DIPEA(0.046 mL, 0.26 mmol)을 DMF(1 mL) 중의 8-(1-(3,5-디플루오로페닐) 피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(60 mg, 0.13 mmol)의 현탁액에 첨가한 후, TSTU(43.5 mg, 0.14 mmol)를 질소 하에 실온에서 첨가하고, 하룻밤 동안 교반하였다. 이어서, 디메틸아민(THF 중 2 N)(0.131 mL, 0.26 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 추가 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 분획물을 증발 건조시켰고, 잔류물을 최소량의 DCM 중에 취하고, 석유 에테르로 희석하며, 3 h 동안 교반하고, 여과에 의해 모으고, 건조시켜, 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드(43 mg, 68%)를 백색 고체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 484.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.75-1.88 (m, 1H), 1.97-2.09 (m, 2H), 2.45-2.57 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.92 (s, 3H), 3.33-3.41 (m, 1H), 3.50-3.57 (m, 2H), 3.37-3.64 (m, 2H), 3.71-3.80 (m, 5H), 5.25 (d, 1H), 5.61 (s, 1H), 6.13 (d, 2H), 6.32 (t, 1H), 7.11 (d, 1H), 7.80 (d, 1H)
출발 물질로 사용된 8-(1-(3,5-디플루오로페닐) 피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산을 이하와 같이 제조하였다:
Figure pct00035
단계 1
DME(300 mL) 및 물(30 mL) 중의 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(23 g, 62.47 mmol)의 교반 현탁액에 1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-피롤-2-일붕소산(14.50 g, 68.72 mmol), Na2CO3 (19.87 g, 187.41 mmol) 및 염화비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II)(0.877 g, 1.25 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 아르곤으로 탈기하고, 7 h 동안 80℃로 가열하였다. 반응을 냉각시키고, 농축하였으며, 잔류물을 300 mL의 DCM 및 300 mL의 물에 용해시켰다. 유기 상을 데칸테이션하고, 염수로 세정한 후, MgSO4로 건조시키며. 여과하고, 농축하여, 조질의 화합물을 제공하였고 이를 DCM 중의 80% AcOEt로 용리하여 실리카 상에 정제하였다. 용매를 증발시켜, tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)-1H-피롤-1-카르복실레이트(20 g, 70%)를 백색 분말로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 455.
단계 2
MeOH(175 mL) 중의 tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)-1H-피롤-1-카르복실레이트(17.1 g, 37.63 mmol) 및 5% 로듐/알루미나 (50% 함수율)(3.4 g, 0.80 mmol)를 7 h 동안 5 bar 및 65℃에서 수소 분위기 하에서 교반하였다. 촉매를 셀라이트 패드 상에 여과함으로써 반응물로부터 제거하고, MeOH로 세정하였다. 셀라이트 및 촉매를 DCM 중의 500 mL의 10% MeOH에서 슬러리화하고, 다시 여과하였다. 유기 용액을 조합하고, 증발시켜, tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(14.4 g, 83%)를 옅은 황갈색의 고체로서 수득하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 459.
단계 3
염화수소(디옥산 중 4 M) (2.4 mL, 9.6 mmol)를 실온에서 디옥산(3 mL) 및 DCM(3 mL)에 용해된 tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(440 mg, 0.96 mmol)의 교반 용액에 첨가하였고, 반응 혼합물을 4 h 동안 교반하였다. 용매를 증발시켰고, 잔류물을 MeCN으로 2회 공비하고, 50℃에서 진공 하에 건조시켰다. 이어서, 잔류 고체를 DCM으로 추출하였다. DCM을 MgSO4으로 건조시키고, 농축하여, 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트(286 mg, 83%)를 옅은 베이지색의 고체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 359.
단계 4
팔라듐 착체(33 mg, 0.04 mmol, 이하 참조)를 1,4-디옥산(5 mL)에 용해된 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트(270 mg, 0.75 mmol), 1-브로모-3,5-디플루오로벤젠(0.095 ml, 0.83 mmol) 및 탄산세슘(368 mg, 1.13 mmol)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 아르곤으로 탈기한 후, 23 h 동안 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 여과하며, 농축시켰다. 조질의 생성물을 EtAc 중의 0 내지 6%로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켜, 메틸 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(206 mg, 58%)를 선명한 황색의 발포체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 471.
반응물로 사용된 팔라듐 착체를 이하와 같이 제조하였다:
벤10 mL) 중의 (9,9-디메틸-9H-잔텐-4,5-디일)비스(디페닐포스핀) (256 mg, 0.44 mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(184 mg, 0.20 mmol), 및 1-브로모-3,5-디플루오로벤젠(0.213 mL, 1.85 mmol)의 용액을 96 h 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 진공 농축시켰다. 에테르(10 mL)를 잔류물에 첨가하였고, 4시간 동안 방치하여 황색의 결정질 고체가 형성되도록 하였다. 고체를 여과에 의해 모으고, 에테르로 세정하며, 진공 하에 건조시켜, 목적하는 팔라듐 착체(139 mg, 39%)를 제공하였다.
단계 5
NaOH 2 N(0.622 mL, 1.24 mmol) 수용액을 MeOH(2 mL) 중의 메틸 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(195 mg, 0.41 mmol)에 첨가하였고, 반응 혼합물을 6 h 동안 40℃에서 교반하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, HCl 2 N(0.684 mL, 1.37 mmol) 수용액을 pH ~ 5가 될 때까지 반응 혼합물에 적가하였다. 용액을 부분 농축하였고, 석출물이 나타났다. 물을 슬러리에 첨가하고, DCM으로 추출하였다. 유기 상을 물로 세정하고, MgSO4로 건조시키며, 여과하고, 농축하였다. 발포된 석출물을 에테르로 마쇄하고, 여과하며, 에테르로 세정하고, 50℃에서 진공 하에 건조시켜, 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(67 mg, 35%)을 옅은 베이지색의 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 457.
상기 8-(1-(3,5-디플루오로페닐) 피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산의 제조에 대해 기재된 공정의 단계 1에서 출발 물질로 사용된 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트를 이하와 같이 제조하였다:
Figure pct00036
단계 1
DCM(3 L) 중의 메틸 4-히드록시벤조에이트(180 g, 1183 mmol)의 교반 현탁액에 0℃에서 질소 하에 브롬(64 mL, 1242 mmol)을 적가하였고, 반응 혼합물을 36 h 동안 실온에서 교반되도록 하였다. 이어서, 온도를 약 15℃로 유지하면서 티오황산나트륨의 용액(500 mL의 10% 용액)을 첨가한 후, MeOH(250 mL)를 첨가하였다. 유기 층을 물 및 염수로 차례로 세정하고, MgSO4로 건조시키며, 여과하고, 농축 건조시켜, 메틸 3-브로모-4-히드록시벤조에이트(290 g)를 백색 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M-H]- = 229.
단계 2
DCM(1.5 L) 중의 메틸 3-브로모-4-히드록시벤조에이트(270 g, 1168 mmol)의 교반 현탁액에 피리딘(150 mL)을 첨가하였다. 이어서, 염화아세틸(87 mL, 1227 mmol)을 실온에서 또한 질소 하에 적가하였다. 혼합물을 실온에서 2 h 동안 교반되도록 두었다. 이어서, 물(1 L)을 첨가한 후, pH 1이 될 때까지 HCl 2 N을 첨가하였다. 이어서, 유기 층을 물 및 염수로 세정하고, MgSO4로 세정하며, 여과하고, 증발 건조시켜, 메틸 4-아세톡시-3-브로모벤조에이트(300 g, 94%)를 백색 분말로서 제공하였다.
양성자 NMR 스펙트럼: : (DMSO-d6) 2.34 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 7.47 (d, 1H), 8.01 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H).
단계 3
메틸 4-아세톡시-3-브로모벤조에이트(150 g, 549.3 mmol)에 삼염화알루미늄 (220 g, 1647.9 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 3 h 동안 용매의 부재 하에 140℃에서 가열하였다. 실온으로 냉각 시, 고체를 분쇄하고, 교반 하에 물(1.5 L)에 주의하여 첨가하였다. 이어서, HCl(250 mL의 12 N)을 첨가하고, 30분 동안 교반을 유지시켰다. 수득된 고체를 여과에 의해 모으고, 물(2×2 L)로 세정하며, 하룻밤 동안 건조시켜, 3-아세틸-5-브로모-4-히드록시벤조산(120 g, 84%)을 황색 분말로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M-H]- = 258.
단계 4
MeOH(2 L) 중의 3-아세틸-5-브로모-4-히드록시벤조산(240 g, 926 mmol)의 교반 현탁액에 질소 하에 이염화황 (68 mL, 926.5 mmol)을 적가하였고, 혼합물을 3 h 동안 80℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 농축하며, DCM으로 희석하였다. 유기 층을 염수로 세정하고, MgSO4로 건조시키며, 여과하고, 농축하여, 조질의 화합물을 제공하였고, 이를 석유 에테르 중 70%의 DCM으로 용리하여 실리카 상에 정제하였다. 용매를 증발 건조시켜, 메틸 3-아세틸-5-브로모-4-히드록시벤조에이트(108 g, 42.7%)를 백색 분말로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M-H]- = 229.
단계 5
물(2 L) 중의 모르폴린(201 mL, 2295 mmol)의 교반 용액에 질소 하에 이황화황(0.138 L, 2295.67 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 수산화나트륨(96 g, 1 L의 물 중 용액 내 2410 mmol)을 적가하였다. 얻어진 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반한 후, 빙조로 5℃로 냉각시켰으며, 황산디메틸(217 mL, 2295 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반하였고, 수득된 고체를 여과에 의해 모으고, 물(2×1 L)로 세정하고, 5℃에서 오산화인으로 진공 하에 건조시켜, 메틸 모르폴린-4-카르보디티오에이트(360 g, 88%)를 수득하였다. 양성자 NMR 스펙트럼: (CDCl3): 2.68 (s, 3H), 3.71-3.84 (m, 4H), 4.02 (bs, 2H), 4.30 (bs, 2H).
단계 6
온도를 약 10 내지 15℃로 유지하면서, 염소 기체(455 g, 6417 mmol)를 2시간에 걸쳐 DCM(1.5 L) 중의 메틸 모르폴린-4-카르보디티오에이트(170 g, 959 mmol)의 용액을 통해 버블링하였다. 일단 염소 첨가를 완료하면, 석출이 일어나는 동안 추가 1.5 h 동안 교반을 유지시켰다. 이어서, 질소를 30분 동안 혼합물에 통과시켰다. 고체를 질소 하에 여과에 의해 모으고, DCM으로 세정하며, 냉장기에서 질소 하에 저장하였다. 이에 따라, 4-(디클로로메틸렌)모르폴린-4-윰 클로라이드(180 g, 92%)를 백색 흡습성 고체로서 수득하였다.
단계 7
톨루엔(1L) 중의 메틸 3-아세틸-5-브로모-4-히드록시벤조에이트(106 g, 388 mmol)의 교반 용액에 질소 하에 (디에틸옥소니오)트리플루오로보레이트(0.201 L, 1630 mmol)를 적가하였다. 얻어진 용액을 하룻밤 동안 실온에서 교반하도록 둔 후, 4-(디클로로메틸렌)모르폴린-4-윰 클로라이드(143 g, 698 mmol)를 첨가하였고, 혼합물을 12 h 동안 90℃에서 가열하였다. 실온으로 냉각 시에, 에테르(1.5 L)를 첨가하였고, 고체를 여과에 의해 모았다. 이어서, 이 고체를 MeOH(1 L)에 현탁하고, 혼합물을 2 h 동안 50℃에서 가열하였다. 실온으로 냉각 시에, 고체를 여과에 의해 모은 후, DCM(1 L) 중에 가용화하고, 물 및 포화 탄산나트륨 용액으로 세정하였다. 유기 층을 MgSO4로 건조시키며, 여과하고, 증발 건조시켜, 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(68.0 g, 47.6%)를 회백색 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 368.
메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트를 제조하기 위한 대안적 경로는 이하와 같다:
Figure pct00037
단계 1
디브롬(0.185 L, 3614.92 mmol)을 N2 하에 0℃에서 DCM(4 L) 중의 메틸 4-히드록시벤조에이트(500 g, 3286 mmol)의 교반 현탁액을 적가하였다. 혼합물을 N2 하에 r.t.에서 24 h 동안 교반하도록 두었다. 이어서, 온도를 약 15℃로 유지시키면서 2 L의 물 중 나트륨 메타비술피트(62.5 g, 329 mmol)의 용액을 첨가한 후, 500 mL의 MeOH를 첨가하였다. 유기 층을 물, 염수로 세정하고, MgSO4로 건조시키며, 여과하고, 농축 건조시켜, 메틸 3-브로모-4-히드록시벤조에이트(710 g, 94%)를 백색 고체로서 제공하였다. 양성자 NMR 스펙트럼 (CDCl3): 3.89 (s, 3H), 5.95 (s, 1H), 7.05 (d, 1H), 7.92 (dd, 1H), 8.19 (d, 1H).
단계 2
에탄올(3 L) 중의 메틸 3-브로모-4-히드록시벤조에이트(350 g, 1514.87 mmol)의 탈기 용액에 질소 하에 트리에틸아민(0.528 L, 3787.17 mmol), 1-(비닐옥시)부탄(0.588 L, 4544.60 mmol), 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센 (33.1 g, 60.6mmol) 및 디아세톡시팔라듐(8.50 g, 37.9 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 하룻밤 동안 가열하였다. 반응을 냉각시키고, 여과하였고, 여액을 농축하였다. 얻어진 고체를 DCM(2 L)로 가용화하였고, HCl 4 N(1.14 L, 4544 mmol)를 교반 하에 첨가하였다. 2 h 동안 교반을 계속하였고, 유기 상을 분리하고, MgSO4로 건조시키며, 여과하고, 농축하여, 고체를 제공하였고, 이를 2 h 동안 에테르(5 L) 중에서 교반하였다. 고체를 여과 제거하였고, 여액을 농축 건조시켜, 메틸 3-아세틸-4-히드록시벤조에이트(240 g, 82%)를 베이지색 분말로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M-H]- = 193.
단계 3
DCM(2 L) 중의 메틸 3-아세틸-4-히드록시벤조에이트(240 g, 1236 mmol)의 교반 용액에 피리딘(0.400 L, 4944 mmol)을 첨가한 후, 0℃에서 디브롬(0.070 L, 1360 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 h 동안 교반한 후, 5℃로 냉각시켰고, HCl 4 N(0.927 L, 3708 mmol)을 적가하였다. 유기 상을 분리하고, MgSO4로 건조시키며, 여과하고, 농축하여, 갈색 고체를 제공하였고, 이를 1 시간 동안 에테르/석유 에테르(1:1, 1 L) 중에서 교반하였다. 고체를 여과에 의해 모으고, 건조시켜, 메틸 3-아세틸-5-브로모-4-히드록시벤조에이트(270 g, 80%)를 베이지색 분말로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 273.
단계 4
질소 하에 -65℃의 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(1.41 L, 1406 mmol)의 용액에 THF(1.2 L) 중의 메틸 3-아세틸-5-브로모-4-히드록시벤조에이트(120 g, 439 mmol)를 적가하였다. 용액을 0℃로 가온하고, 이 온도에서 1 h 동안 유지시켰다. 용액을 -65℃로 다시 냉각시키고, 모르폴린-4-카르보닐 클로라이드(0.055 L, 483 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2 h 동안 교반한 후, -30℃로 냉각시키고, DCM(1.5 L) 및 물(1 L)을 첨가한 후, pH 7이 될 때까지 HCl 6 N(500 mL) 및 HCl 2 N(300 mL)을 차례로 적가하였고, 수용액을 DCM(3×)으로 추출하였다. 조합된 추출물을 MgSO4로 건조시키며, 증발시켰다. 조질의 생성물을 MTBE 중에 마쇄하여, 메틸 3-브로모-4-히드록시-5-(3-모르폴리노-3-옥소프로파노일)벤조에이트(153 g, 90%)를 베이지색 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 388.
단계 5
트리플루오로메탄술폰산 무수물(0.755 L, 4487 mmol)을 질소 하에 실온에서 1,2-디클로로에탄(1 L)에 용해된 메틸 3-브로모-4-히드록시-5-(3-모르폴리노-3-옥소프로파노일)벤조에이트(433 g, 1122 mmol, 다수 배치(batch)에서 고인(pooled) 물질)의 교반 용액에 첨가하였다(발열). 얻어진 용액을 하룻밤 동안 50℃에서 교반하였다. 혼합물을 부분적으로 증발시켰고, 잔류물을 0℃에서 MeOH(1.6 L)로 희석하고(발열), 실온에서 1 h 동안 교반하였다. 용매를 다시 증발시키고, 잔류물을 DCM 중에 희석하고, 탄산나트륨의 포화 수용액으로 켄칭하고, DCM으로 추출하였다. 조합된 유기 상을 염수로 세정하고, MgSO4로 건조시키며, 농축하여, 조질의 생성물을 제공하였다. 조질물을 MTBE(2×), EtAc(1×) 및 MTBE(1×) 하에 마쇄하였다. 고체를 건조시켜, 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(208 g, 50%)를 베이지색 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 370.
메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트를 제조하기 위한 동일 경로를 하기와 같이 보다 큰 규모로 수행하였다:
Figure pct00038
단계 1
질소 퍼지(10 L/분) 하의 용기 A에 디클로로메탄(1060 Kg) 및 메틸 4-히드록시벤조에이트(100 Kg)를 충전하였다. 반응물을 -2℃로 냉각시켰다(출발 온도 3.3℃, 최종 온도 -1.7℃, 시간 1시간 45분). 질소압을 이용하고 -2 내지 +2℃로 유지시키면서(출발 온도 -1.7℃, 최종 온도 -0.1℃, 고온 1.2℃, 시간 4 h), 브롬(115 Kg)을 충전하였다. 반응물을 20℃까지 가온하면서(출발 온도 -0.1℃, 최종 온도 18.2℃) 24 h 동안 교반하였다. 탈염수(400 Kg) 중의 나트륨 메타비술피트(12.5 Kg)의 용액을 충전하였다(출발 온도 17.5℃, 최종 온도 11.0℃, 고온 28.2℃, 첨가 시간 3시간 30분). 수득된 현탁액을 대략 동등한 2회로 여과하였다. 하중 1을 여과하였고, 탈염수(200 Kg)로 세정한 후, 헵탄(272 Kg)으로 세정하여, 204 Kg의 하중 1 습윤 케이크를 수득하였다. 하중 2를 여과하고, 탈염수(213 Kg)로 세정하였다. 필터 케이크(162 Kg)를 용기 A에 재충전하고, 헵탄(274 Kg)으로 재슬러리화하였다. 이를 이어서 재여과하여, 132 Kg의 하중 2 습윤 케이크를 수득하였다. 하중 1을 더블 콘 진공 건조기(Double Cone Vacuum Drier)에서 50℃에서 건조시켜, 67.2 Kg의 건조 중량을 수득하였다.
질소 퍼지(10 L/분) 하의 용기 B에 메틸-3-브로모-4-히드록시벤조에이트 하중 2 (132 Kg) 및 물(1200 Kg)을 충전하였다. 반응물을 15 내지 20℃로 가온하고(출발 온도 11.3℃, 최종 온도 15.0℃, 시간 20분), 75분 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 스테인레스강 필터로 여과하였다. 얻어진 습윤 케이크(194 Kg)를 질소 퍼지(10 L/분) 하에 용기 B에 재충전한 후, 물(600 Kg)을 재충전하였다. 반응물을 15 내지 20℃로 가온하고(출발 온도 11.7℃, 최종 온도 15.0℃, 시간 20분), 30분 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 스테인레스강 필터로 여과하였다. 얻어진 습윤 케이크(200 Kg)를 50℃에서 슬리러 팬 건조기(Slurry Pan Drier)에서 건조시켜, 50.2 Kg의 건조 중량을 수득하였다. 총 메틸 3-브로모-4-히드록시벤조에이트(117.4 kg, 77.3%).
반응 조건 및 단리 절차의 차이를 최소로 하여, 상기 절차를 4회 수행하여, 총 429.2 kg의 메틸 3-브로모-4-히드록시벤조에이트(62.3% 내지 77.3% 범위의 수율)를 수득하였다
단계 2
질소 퍼지(10 L/분) 하의 용기 A에 메틸 3-브로모-4-히드록시벤조에이트(200 Kg) 및 에탄올(1250 Kg)을 충전하였다. 용기를 탈기 진공화하고, 질소로 2회 배출하였다. 트리에틸아민(220 Kg)을 충전한 후, 에탄올 린스(15 Kg)를 충전하였다. 비닐부틸 에테르(266 Kg)를 충전한 후, 에탄올 린스 (15 Kg)를 충전하였다. 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센 (18.9 Kg)을 충전한 후, 디아세톡시팔라듐(4.96 Kg)을 충전하였다. 반응물을 70℃로 가열하였다(출발 온도 17.9℃, 최종 온도 70.1℃, 시간 2시간 30분). 반응물을 13 h 동안 교반하였다. 반응물을 50℃로 냉각시켰다(출발 온도 68.7℃, 최종 온도 53.5℃, 시간 40분). 반응물을 입구에 3 카트리지 필터를 이용하여 유리로 라이닝된 마일드 강 필터를 통해 고온 여과한 후, 에탄올 린스 (120 Kg)를 첨가하였다. 이어서, 에탄올 용매를 최대 자켓 온도 50℃에서 증류 제거하였다 (최대 기본 온도 = 50.7℃, 시간 7시간 25분, 증류물 1010 Kg). 20 내지 25℃로 냉각시키면서, 희석된 염산(90 Kg의 36% HCl 및 590 Kg의 물로 이루어진 680 Kg)을 용기 A에 충전하였다(초기 온도 35℃, 최종 온도 24.9℃, 시간 1 시간). 반응물을 2시간 30분 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 2개 하중에서 필터로 여과하였고, 필터 케이크를 탈염수(2500 Kg)로 세정하였다. 용기 A에 메탄올(2150 Kg) 및 습윤 필터 케이크(326 Kg)를 충전하였다. 반응물을 60℃ (출발 온도 10.7℃, 최종 온도 59.3℃, 시간 3 h 45분)로 가열하였다. 반응물을 용기 B로의 입구에 있는 고온 필터 및 3개의 카트리지 필터를 통해 용기 A에서 용기 B로 고온 여과한 후, 메탄올(120 Kg)로 희석하였다. 탈염수(815 Kg)를 용기 B에 충전하였다. 반응물을 20℃로 냉각시키고, 반응물을 8 h 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 필터에서 여과하였고, 필터 케이크를 메탄올(105 Kg) 및 탈염수(60 Kg)의 혼합물로 세정하였다. 습윤 생성물(162 Kg)을 45℃에서 건조시켜, 116.5 Kg의 메틸 3-아세틸-4-히드록시벤조에이트(99.6% HPLC 순도, 수율 69.3%)를 수득하였다.
반응 조건 및 단리 절차의 차이를 최소로 하여, 상기 절차를 3회 수행하여, 총 251.4 kg의 메틸 3-아세틸-4-히드록시벤조에이트(69.3% 내지 71.7% 범위의 수율)를 수득하였다.
단계 3
질소 퍼지(10 L/분) 하의 용기 A에 메틸 3-아세틸-4-히드록시벤조에이트(80 Kg) 및 디클로로메탄(660 Kg)을 충전하였다. 피리딘(98 Kg)을 충전한 후, 디클로로메탄 린스 (13 Kg)를 충전하였다. 반응물을 -2℃로 냉각시켰다(출발 온도 7.6℃, 최종 온도 -4.0℃, 시간 2 h). 온도를 -5℃ 내지 0℃로 유지시키면서 브롬(73.5 Kg)를 충전하였다(출발 온도 -4.0℃, 최종 온도 -2.5℃, 고온 -2.0℃, 시간 5시간 35분). 반응물을 1시간 동안 교반하였다. 온도를 0 내지 5℃로 유지하면서 (출발 온도 -7.2℃, 최종 온도 -4.0℃, 고온 -4.0℃, 첨가 시간 30분), 탈염수(168 Kg) 중의 나트륨 메타비술피트(12.8 Kg)의 용액을 충전하였다. 30분간 교반한 후, 층을 분리하였고, 하부 유기 층을 배출하였다(808 Kg). 디클로로메탄(111 Kg)을 용기 A로 충전하고, 30분간 교반한 후, 층을 분리하였고, 하부 유기 층을 배출하였다(126 Kg). 상부 수성 상을 배출 폐기하였다(301 Kg). 조합된 유기 상(867 Kg)을 용기 A에 배출하였다. 4 M 염산(336 Kg)을 충전하였고, 30분간 교반한 후, 층을 분리하였고, 하부 유기 층을 배출하였다 (856 Kg). 디클로로메탄(111 Kg)을 충전하였고, 30분간 교반한 후, 층을 분리하였고 하부 유기 층을 배출하였다 (106 Kg). 디클로로메탄(111 Kg)을 용기 A에 충전하였고, 30분간 교반한 후, 층을 분리하였고 하부 유기 층을 배출하였다 (113 Kg). 상부 수성 상을 배출 폐기하였다(404 Kg). 3개의 조합된 유기 층(1075 Kg)을 용기 A에 충전하였다. 탈염수(168 Kg)를 충전하였고, 30분간 교반한 후 층을 분리하였고, 하부 유기 층을 배출하였다 (1050 Kg). 상부 수성 상을 배출 폐기하였다(195 Kg). 유기 층을 용기 B에 충전하였고, 용기를 조작하여 증류시켰으며, 용매를 대기압(높은 기본 온도 47.8℃, 증류물 500 Kg) 하에서 증류 제거하였다. 메탄올(531 Kg)을 충전하였고, 용기를 조작하여 증발시켰고, 용매를 65℃의 최대 기본 온도 (높은 기본 온도 65.8℃, 높은 증기 온도 62.9℃, 증류물 685 Kg) 하에 대기압에서 증류 제거시켰다. 반응물을 20 내지 25℃로 냉각시켰다(출발 온도 65.8℃, 최종 온도 23℃, 시간 2 h). 탈염수(504 Kg)를 충전하였고, 얻어진 현탁액을 필터 프레스에서 여과하였고, 필터 케이크를 물:메탄올 2:1 (84 Kg)의 혼합물로 세정하였다. 습윤 생성물(129 Kg)을 45℃에서 건조시켜, 메틸 3-아세틸-5-브로모-4-히드록시벤조에이트(건조 중량: 99.7 Kg, HPLC 순도 98%, 수율 88.6%)를 수득하였다.
반응 조건 및 단리 절차의 차이를 최소로 하여, 상기 절차를 3회 수행하여, 총 313 kg의 메틸 3-아세틸-5-브로모-4-히드록시벤조에이트(87.6% 내지 89.5% 범위의 수율)를 수득하였다.
단계 4
질소 퍼지(10 L/분) 하의 용기 A에 메틸 3-아세틸-5-브로모-4-히드록시벤조에이트(75.3 Kg) 및 테트라히드로푸란 (640 Kg)을 충전하였다. 혼합물을 15분 동안 교반하여, 완전 용액이 되도록 보장하였다. 용액(714.5 Kg)을 테트라히드로푸란 린스 (10 Kg)와 함께 질소 퍼징된 드럼 내로 배출하였다. 질소 퍼지(10 L/분) 하의 용기 A에 THF(726 Kg) 중의 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드 20% 용액 및 THF 린스 (10 Kg)를 충전하였다. 용기 내용물을 -10 내지 -15℃로 냉각시켰다(출발 온도 12.8℃, 최종 온도 -15.6℃, 시간 45분). 온도를 -10 내지 -15℃로 유지하면서(출발 온도 -15.6℃, 최종 온도 -12.9℃, 높은 온도 -11.4℃, 시간 1시간 10분), THF(743 Kg) 중의 메틸 3-아세틸-5-브로모-4-히드록시벤조에이트의 용액을 첨가한 후, 테트라히드로푸란 린스 (10 Kg)를 첨가하였다. 반응물을 -10 내지 -15℃에서(출발 온도 -12.9℃, 최종 온도 -12.1℃) 1시간 30분 동안 교반하였다. -5 내지 -10℃로 유지하면서(출발 온도 -11.7℃, 최종 온도 -5.6℃, 고온 -2.1℃, 시간 30분), 모르폴린-4-카르보닐 클로라이드(45.2 Kg)를 충전한 후, 테트라히드로푸란 린스 (5 Kg)를 충전하였다. 반응물을 9 h 동안 5 내지 10℃에서 교반하였다. 반응물을 추가 2 h 동안 5 내지 10℃에서 교반하였다. 온도를 10℃ 미만으로 유지하면서(출발 온도 7.5℃, 최종 온도 6.4℃, 높은 온도 6.1℃, 시간 34분), 탈염수(375 Kg)를 충전하였다. 온도를 10℃ 미만으로 유지하면서(출발 온도 6.5℃, 최종 온도 10.1℃, 높은 온도 10.1℃, 시간 40분), 디클로로메탄(700 Kg)을 충전하였다. 반응 혼합물을 용기 A에서 용기 B로 옮기고, 디클로로메탄(48 Kg)으로 헹구었다. 4 M 염산 용액(459 Kg)을 첨가하고 표적 pH에 근접한 1 M 염산(32.6 Kg)로 바꿈으로써(출발 pH 12.07, 최종 pH 1.8, 출발 온도 6.1℃, 최종 온도 6.6℃, 고온 10.0℃, 첨가 시간 4 h), pH를 0.5 내지 2로 조정하였다. 층을 분리하였고, 하부 수성 상(983 Kg)을 배출한 후, 용기 R103 내로 충전하여 재추출하였다. 디클로로메탄(124 Kg)을 용기 C로 충전하였고, 15분간 교반한 후, 층을 분리하였다. 하부 유기물(435 Kg)을 배출한 후, 용기 D 내로 충전하였다. 상부 수성상(618 Kg)을 배출 폐기하였다. 온도를 5 내지 10℃로 유지하면서(출발 온도 6.4℃, 최종 온도 5.8℃), 헥산(1105 Kg)을 2 h에 걸쳐 충전하였다. 혼합물을 -8℃로 냉각시키고(출발 온도 5.8℃, 최종 온도 -7.1℃), 씨드를 -3℃에서 충전하였다. 습윤 케이크를 총 냉 헥산(240 Kg)로 세정하면서(하중 1 습윤 케이크 = 120 Kg 및 하중 2 습윤 케이크 = 312 Kg), 2개 하중으로 얻어진 현탁액을 스테인레스강 필터로 여과하였다. 조합된 습윤 케이크(432 Kg)를 9일 동안 50℃에서 슬러리 팬 건조기에서 건조시켜(제1일 및 제2일: 진공 하에서의 건조. 제3일 및 제4일: 열 및 진공을 끄고, 질소 하에 유지. 제5일 내지 제7일: 진공 하에서의 건조. 제7일: 생성물을 분쇄에 의해 파쇄하고 건조기에 재충전함), 메틸 3-브로모-4-히드록시-5-[3-(모르폴린-4-일)-3-옥소프로파노일]벤조에이트(건조 중량 = 79.84 Kg, HPLC 순도 93.4%, 수율 75%)를 수득하였다.
반응 조건 및 단리 절차의 차이를 최소로 하여, 상기 절차를 5회 수행하여, 총 308.2 kg의 메틸 3-브로모-4-히드록시-5-[3-(모르폴린-4-일)-3-옥소프로파노일]벤조에이트(66% 내지 75% 범위의 수율)를 수득하였다.
단계 5
질소 퍼지(10 L/분) 하의 용기 A에 메틸 3-브로모-4-히드록시-5-[3-(모르폴린-4-일)-3-옥소프로파노일]벤조에이트(70 Kg) 및 클로로벤젠(770 Kg)을 충전하였다. 25℃ 미만으로 유지하면서(출발 온도 11.7℃, 최종 온도 19.8℃, 고온 19.8℃, 시간 30분), 트리플루오로메탄술폰산 무수물(205 Kg)을 충전한 후, 클로로벤젠 린스 (6 Kg)를 충전하였다. 반응물을 70℃까지 가열하였다(출발 온도 19.8℃, 최종 온도 71.0℃, 시간 2 h). 반응물을 6 h 동안 70℃에서 교반하였다. 반응물을 5℃로 냉각시켰다(출발 온도 71.0℃, 최종 온도 5℃, 시간 3 h). 온도를 15℃ 미만으로 유지하면서(출발 온도 5℃, 최종 온도 13.9℃, 높은 온도 14.1℃, 시간 2 h 10분), 메탄올(250 Kg)을 충전하였다. 반응물을 20 h 동안 20 내지 25℃에서 교반하였다. 온도를 25℃ 미만으로 유지하면서(출발 pH <1, 최종 pH 7.55, 출발 온도 12.0℃, 최종 온도 19.3℃, 고온 20.6℃, 첨가 시간 2 시간 5분). pH 7.5가 될 때까지 20% 탄산나트륨 용액(403 Kg)을 충전하였다. 디클로로메탄(371 Kg)을 충전하였다. 반응물을 5 h 동안 교반하였다. 탈염수(280 Kg)를 충전하였고, 1시간 동안 교반한 후, 층을 분리하였다. 하부 유기 층(1259 Kg)을 배출하였다. 디클로로메탄(371 Kg)을 용기 A에 충전하였다. 30분 동안 교반한 후, 층을 분리하였다. 하부 유기 층(394 Kg)을 배출하였고, 전 유기물과 조합하였다. 상부 수성 층(1031 Kg)을 배출 폐기하였다. 조합된 유기물(1689 Kg)을 용기 A에 충전한 후, 탈염수(280 Kg)를 충전하였다. 30분간 교반한 후, 층을 분리하였다. 하부 유기 층(1538 Kg)을 배출하였다. 상부 수성 층(390 Kg)을 배출 폐기하였다. 유기물(1538 Kg)을 용기 A에 다시 충전하였고, 용기를 조작하여 증발시켰으며, 반응 혼합물의 DCM 함량이 3.5% 미만일 때까지 100 mbar 이상 및 50℃에서 용매를 증류 제거하였다. 얻어진 슬러리를 0 내지 5℃로 냉각시키고(출발 온도 54.4℃, 최종 온도 5.0℃), 1시간 동안 교반한 후, 스테인레스강 필터에서 여과하였다. 필터 케이크를 아세트산에틸(2×63 Kg)로 세정하고, 습윤 케이크(38.2 Kg)를 50℃에서 진공 오븐에서 건조시켜, 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(건조 중량 = 34.5 Kg, HPLC 순도 98.1%, 수율 51.7%)를 수득하였다.
반응 조건 및 단리 절차의 차이를 최소로 하여, 상기 절차를 수회 수행하여, 총 112.6 kg의 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트를 수득하였다.
실시예 1.01
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N-(2-히드록시에틸)-N-메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드
Figure pct00039
TBTU(102 mg, 0.32 mmol)를 NMP (1.5 mL)에 용해된 8-(1-(3,5-디플루오로페닐) 피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(105 mg, 0.21 mmol), 4-메틸모르폴린(0.070 mL, 0.63 mmol) 및 2-(메틸아미노)에탄올(0.022 mL, 0.28 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 얻어진 용액을 실온에서 16 h 동안 교반한 후, 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 분획을 증발 건조시키고, 디에틸 에테르 중에 마쇄하여, 고체를 제공하였다. 이 물질을 여과에 의해 모으고, 디에틸 에테르로 세정하며, 진공 하에 50℃에서 건조시켜, 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N-(2-히드록시에틸)-N-메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드(77 mg, 71%)를 백색 고체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 514.
양성자 NMR 스펙트럼: : (DMSO-d6) 1.77-1.92 (m, 1H), 1.97-2.09 (m, 2H), 2.51-2.60 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.78 (s, 1.2H), 2.93 (s, 1.8H), 3.00-3.09 (m, 0.8H), 3.13-3.23 (m, 0.8H), 3.33-3.49 (H2O에 의해 부분적으로 가려진 m, 2.4H), 3.50-3.66 (m, 5H), 3.70-3.81 (m, 5H), 4.77 (t, 0.6H), 4.78 (t, 0.4H), 5.25 (d, 1H), 5.62 (s, 1H), 6.06-6.18 (m, 2H), 6.32 (t, 1H), 7.13 (s, 0.4H), 7.23 (s, 0.6H), 7.80 (s, 0.6H), 7.84 (s, 0.4H)
실시예 1.02
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(4-히드록시피페리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온
Figure pct00040
실시예 1.01에 기재된 절차와 유사한 절차를 이용하여, 표제 화합물을 제조하였다. 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(105 mg, 0.21 mmol)을 피페리딘-4-올(22.48 mg, 0.22 mmol)과 반응시켜, 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(4-히드록시피페리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(75 mg, 66%)을 백색 고체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 540.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.02 (bs, 0.5H), 1.19-1.50 (m, 2.5H), 1.74 (bs, 1H), 1.79-1.89 (m, 1H), 1.99-2.13 (m, 2H), 2.52-2.61 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.89 (bs, 1H), 2.94 (bs, 0.5H), 3.26 (bs, 1H), 3.31-3.43 (m partailly hidden by H2O, 1.5H), 3.50-3.66 (m, 4H), 3.67 (bs, 1H), 3.71-3.86 (m, 5.5H), 4.00 (bs, 0.5H), 4.75 (d, 1H), 5.22-5.30 (m, 1H), 5.63 (s, 1H), 6.14 (d, 2H), 6.34 (t, 1H), 4.07 (d, 1H), 7.80 (d, 1H)
실시예 1.03
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온
Figure pct00041
N1-((에틸이미노)메틸렌)-N3,N3-디메틸프로판-1,3-디아민 히드로클로라이드(71.4 mg, 0.37 mmol)를 질소 하에 실온에서 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(85 mg, 0.19 mmol), 2-히드록시피리딘 1-옥시드(41.4 mg, 0.37 mmol) 및 모르폴린(0.033 mL, 0.37 mmol)의 교반 용액에 적가하고, 4 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 물, 염수로 세정하며, MgSO4로 건조시키고, 농축하였다. 반응 혼합물을 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 분획을 증발 건조시켰고, 잔류물을 DCM에 용해시키고, MgSO4로 건조시키며, 농축하였다. 잔류 고체를 디에틸 에테르로 마쇄하고, 여과하며, 디에틸 에테르로 세정하고, 50℃에서 진공 하에 건조시켜, 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(58.0 mg, 59.3%)을 옅은 베이지색의 고체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 526.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.74-1.89 (m, 1H), 1.98-2.09 (m, 2H), 2.50-2.57 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.07 (bs, 3H), 3.24 (bs, 1H), 3.74-3.41 (m, 2H), 3.45 (bs, 2H), 3.49-3.67 (m, 5H), 3.70-3.81 (m, 5H), 5.22-5.29 (m, 1H), 5.62 (s, 1H), 6.13 (d, 2H), 6.34 (t, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.82 (d, 1H)
실시예 1.03a
8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온
Figure pct00042
TSTU(75.0 mg, 0.23 mmol)를 실온에서 8-[(2S)-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(102 mg, 0.21 mmol, >98% 거울상이성질체성 순도, tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트의 키랄 분리로부터의 첫 번째 용리 에스테르 거울상이성질체로부터 제조됨 - 하기 참조) 및 DIPEA(0.041 mL, 0.23 mmol)의 교반 용액에 1회분씩 첨가하였고, 얻어진 혼합물을 실온에서 1.5 h 동안 교반하였다. 이어서, 모르폴린(0.037 mL, 0.42 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하였고, 주말에 걸쳐 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 분획을 증발 건조시켰고, 잔류물을 DCM에 용해시키고, MgSO4로 건조시키며, 농축하였다. 잔류 고체를 디에틸 에테르로 마쇄하고, 여과하며, 디에틸 에테르로 세정하고, 50℃에서 진공 하에 건조시켜, 8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(64 mg, 57%)을 담황색 고체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 526.
광학 회전: [α]D 20°: 3.4° (2 mL의 아세토니트릴 중의 16.7 mg), 거울상이성질체성 순도: 95%
양성자 NMR 스펙트럼 (CDCl3) 1.96-2.17 (m, 3H), 2.45-2.57 (m, 1H), 3.07-3.83 (m, 14H), 3.83-3.95 (m, 4H), 5.07 (d, 1H), 5.58 (s, 1H), 5.92 (dd, 2H), 6.11 (ddt, 1H), 7.24 (d, 1H), 8.15 (s, 1H)
실시예 1.03b
8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온
Figure pct00043
TSTU(106 mg, 0.33 mmol)를 실온에서 8-[(2R)-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(144 mg, 0.30 mmol, >98% 거울상이성질체성 순도, tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트의 키랄 분리로부터의 두 번째 용리 에스테르 거울상이성질체로부터 제조됨 - 하기 참조) 및 DIPEA(0.057 mL, 0.33 mmol)의 교반 용액에 1회분씩 첨가하였고, 얻어진 혼합물을 실온에서 1.5 h 동안 교반하였다. 이어서, 모르폴린(0.052 mL, 0.60 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하였고, 주말에 걸쳐 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 분획을 증발 건조시켰고, 잔류물을 DCM에 용해시키고, MgSO4로 건조시키며, 농축하였다. 잔류 고체를 디에틸 에테르로 마쇄하고, 여과하며, 디에틸 에테르로 세정하고, 50℃에서 진공 하에 건조시켜, 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온(69 mg, 44%)를 담황색 고체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 526.
광학 회전: [α]D 20°: - 4.5° (2 mL의 아세토니트릴 중의 14.8 mg), 거울상이성질체성 순도: 97%
양성자 NMR 스펙트럼 (CDCl3) 1.96-2.17 (m, 3H), 2.45-2.57 (m, 1H), 3.07-3.83 (m, 14H), 3.83-3.95 (m, 4H), 5.07 (d, 1H), 5.58 (s, 1H), 5.92 (dd, 2H), 6.11 (ddt, 1H), 7.24 (d, 1H), 8.15 (s, 1H)
출발 물질로 사용된 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(R) 및 (S)-거울상이성질체를 하기와 같이 제조하였다:
단계 1
Figure pct00044
키랄 분취 HPLC 조건:
Figure pct00045
키랄 HPLC에 의해 5회 주입으로 15 g의 tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(상기 실시예 1.00에 기재된 바대로 제조됨)를 분리하였다. 첫 번째 용리 거울상이성질체: 6.32 g, 강도 = 91%, αD = - 72.7°; 두 번째 용리 거울상이성질체 : 6.94 g, 강도 = 89%, αD = + 69.4°. 각 거울상이성질체에 대한 거울상이성질체성 순도 >98%.
대안적 키랄 분취 HPLC 조건:
Figure pct00046
5회 주입으로 6.1 g의 tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트를 분리하였다. 첫 번째 용리 거울상이성질체: 1.88 g, 두 번째 용리 거울상이성질체 : 1.98 g, 각 거울상이성질체에 대한 거울상이성질체성 순도 >98%.
키랄 HPLC 후에 수득된 tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트의 2개의 거울상이성질체의 절대 화학입체를 하기 절차에 따라 확립하였다.
Figure pct00047
염화수소를 이용한 산성 탈보호에 의해 tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트 거울상이성질체 1로부터 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트 거울상이성질체 1을 수득하였다(유사 절차에 대해 하기 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온(즉, 실시예 1.03b)의 제조의 단계 1 참조). 이어서, 얻어진 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트 거울상이성질체 1을 D-(S,S)-타르타르산(0.5 당량)과 혼합하여, 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트(2S,3S)-2,3-디히드록시숙시네이트 염을 수득하였고, 이를 증기 확산 방법을 이용하여 메탄올/이소프로판올로부터 결정화하였다. 소량의 샘플을 바이얼에서 메탄올에 용해시켰고, 이 바이얼을 작은 체적의 이소프로판올 안티솔벤트를 함유하는 보다 큰 바이얼 내에 두었다. 시간에 걸쳐 메탄올 염 용액 내로의 이소프로판올 안티솔벤트의 확산은 결정화를 유발하였고, 수득된 결정의 절대적 구조를 단일-결정 X-선 회절에 의해 결정하였다. 칸-인골드-프레로그(Cahn-Ingold-Prelog) 서열 법칙에 따라, 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트(2S,3S)-2,3-디히드록시숙시네이트 염의 키랄 탄소 원소는 (S)-구조를 가지는 것으로 결정되었다. 결과적으로, tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트의 거울상이성질체 2는 (R)-구조인 것으로 부여되었다.
하기 절차는 상기 두 번째 용리 에스테르 거울상이성질체(즉,tert-부틸(2R)-2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트)로부터의 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온(즉, 실시예 1.03b)의 제조를 기술한다. 단계 1에서의 상기 첫 번째 용리 에스테르 거울상이성질체(즉, tert-부틸(2S)-2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트)로부터의 8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온(즉, 실시예 1.03a)의 합성에 대해, 유사 절차를 사용하였다.
Figure pct00048
단계 1
염화수소(디옥산 중 4 M) (8.81 mL, 35.22 mmol)를 DCM(15 mL)에 용해된 tert-부틸(2R)-2-(6-(메톡시카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(1.90 g, 3.52 mmol)의 교반 용액에 첨가하였고, 반응 혼합물을 8 h 동안 실온에서 교반하였다. 농축 후, DCM 중의 10% 메탄올성 암모니아(7 N)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 실리카 겔 상에 흡착시킨 후, DCM 중 0 내지 8% 메탄올성 암모니아(7 N)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켜, 디에틸 에테르로 마쇄한 후, 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-[(2R)-피롤리딘-2-일]크로멘-6-카르복실레이트(1.11 g, 88%)를 밝은 오렌지색 결정질 고체를 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 359.
단계 2
디아세톡시팔라듐(0.028 g, 0.13 mmol)을 1,4-디옥산(16 mL)에 용해된 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-[(2R)-피롤리딘-2-일]크로멘-6-카르복실레이트(0.9 g, 2.51 mmol), 1-브로모-3,5-디플루오로벤젠(0.361 ml, 3.14 mmol), (9,9-디메틸-9H-잔텐-4,5-디일)비스(디페닐포스핀)(145 mg, 0.25 mmol) 및 탄산세슘(1.227 g, 3.77 mmol)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 아르곤으로 탈기한 후, 100℃에서 15 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 실리카 겔의 존재 하에 농축하며, EtAc 중 0 내지 10% MeOH로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켜, 메틸 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(0.792 g, 67%)를 황색 발포체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 471.
단계 3
NaOH 2 N(2.55 ml, 5.10 mmol) 수용액을 MeOH(9 mL) 및 DCM(6 mL)의 혼합물 중의 메틸 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(0.79 g, 1.68 mmol)에 첨가하였고, 반응 혼합물을 실온에서 하룻밤 동안 교반하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시켰고, HCl 2 N(2.5 mL, 5.0 mmol) 수용액을 pH ~ 3이 될 때까지 반응 혼합물에 적가하였다. 물(9 mL)로 희석한 후, 반응 혼합물을 체적이 반이 되도록 농축하였다. 수성 상을 DCM으로 추출하였고, 유기 상을 농축 건조시켜, 발포체를 수득하였고, 이를 EtAc 중에 마쇄하고, 여과에 의해 모으며, EtAc, 디에틸 에테르로 세정하고, 50℃에서 진공 하에 건조시켜, 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실산(0.638 g, 83%)을 회백색 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 457.
하기 절차에 따라 실시예 1.03a 및 1.03b도 또한 대규모로 합성하였다.
단계 1
Figure pct00049
KOH(0.419 L, 4889 mmol)를 1시간에 걸쳐 20℃에서 물(5 L) 중 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(900 g, 2444 mmol)에 조금씩 첨가하였다. 비누화가 완료될 때까지 얻어진 현탁액을 4시간 동안 20℃에서 교반하였다. 반응물을 여과하여 불용성 입상물을 제거하고, 물(2 L)을 함유하는 용기(용기 1)로 옮겼다. 모르폴린(0.639 L, 7333 mmol)을 첨가하고, 교반을 계속하였다. 2-클로로-4,6-디메톡시-1,3,5-트리아진(1931 g, 11000 mmol) 및 물(8 L)을 용기 2에 충전하고, 온도를 대략 7℃로 조정하였으며, 4-메틸모르폴린(134 mL, 1222 mmol)을 내용물을 10℃로 유지하는 속도로 충전하였으며, 내용물을 4시간 동안 교반하였다. 용기 2의 내용물을 용기 1로 옮기고, 실온에서 하룻밤 동안 교반하였다. 이어서, DCM(5L)을 첨가하였고, 혼합물을 30 리터의 분리기로 옮겨, 추가분의 DCM으로 추출하였고, 유기 추출물을 조합하고, 건조시키며(Na2SO4), 증발 건조시켰다. 고체를 아세트산에틸 중에 교반하고, 여과하여, 8-브로모-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(520 g, 50.3%)을 약간 회색인 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 425.
단계 2
Figure pct00050
DMF(4 L)를 15분 동안 질소 스트림을 통한 버블링에 의해 탈기하였다. 10 리터 용량의 자켓달린 용기에 1회분의 DMF(600 mL)를 충전한 후, 8-브로모-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(440 g, 1040 mmol), tert-부틸 2,3-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트(246 g, 1455 mmol), 트리페닐포스핀 (27.3 g, 104 mmol) 및 탄산칼륨(431 g, 3119 mmol)을 충전하였다. DMF(3 L)의 나머지를 첨가한 후, 디아세톡시팔라듐(11.67 g, 52 mmol)을 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 질소 하에 교반하고, 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, DCM(4 L)으로 희석하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여액 및 세정물을 물(38 L)에 주입하였고, 추가 DCM을 첨가하였다(2.5 L). 유기 층을 분리하였고, 수성 상을 추가 DCM(2.5L)으로 추출하였다. 유기 상을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여, 갈색 검을 수득하였다. 검을 DCM 및 0 내지 10% MeOH/DCM으로 차례로 용리하는 실리카 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. Ph3P를 함유한 전자를 상당량의 생성물을 함유하였다. 이들을 농축하여, 불순 물질을 제공하였다. 순수 분획으로부터, 442 g의 순수 생성물을 수득하였다. 전자를 상기와 같이 재정제하여(750 g 실리카 카트리지), 추가 24 g의 순수 생성물을 제공하였다. 두 수득물을 조합하여, tert-부틸 2-(6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트(466 g, 88%)를 황색 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 512.
단계 3
Figure pct00051
트리플루오로아세트산(1.6 L)을 DCM(3 L) 중의 tert-부틸 2-(6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트(444 g, 867.92 mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 용액을 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 DCM(2.5 L)으로 희석하고, DCM(1 L) 및 진한 암모니아수(4 L)의 격렬히 교반되는 혼합물에 첨가하였다. 수성물을 추가 DCM(2 L)으로 세정하였다. 조합된 유기 용액을 황산마그네슘을 건조하고, 여과하며, 감압 하에 농축하여, 오렌지색 건조 필름을 제공하였고, 이는 추가 정제 없이 그 다음 단계에 사용되었다.
단계 4
Figure pct00052
MeOH(3500 mL) 중의 8-(2,5-디히드로-1H-피롤-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(353 g, 858 mmol) 및 팔라듐/탄소 5% JM Type87L(70 g, 16 mmol)을 3시간 동안 5 bar 및 45℃에서 수소 분위기 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 구배 용리(1% 메탄올/DCM에서 20% 메탄올/1% 진한 암모니아수 함유의 DCM으로)를 이용하면서 실리카 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 이에 따라, 목적 생성물인 6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-4-온(187 g, 53%)을 무색 건조 필름으로서 단리하였다. 이 반응을 반복함으로써, 추가의 물질을 제조하였다.
단계 5
Figure pct00053
디옥산(3 L)에 현탁된 6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-4-온(296 g, 716 mmol), 1-브로모-3,5-디플루오로벤젠(173 g, 895 mmol) 및 탄산세슘(700 g, 2148 mmol)을 10분 동안 질소로 버블링하였다. 디아세톡시팔라듐(8.04 g, 36 mmol) 및 (9,9-디메틸-9H-잔텐-4,5-디일)비스(디페닐포스핀) (41.4 g, 72 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 2분 동안 질소로 버블링한 후, 2시간 동안 100℃에서 가열하였다. 실온으로 냉각 시에 혼합물을 DCM(500 mL)와 물(250 mL) 간에 구분하였다. 유기 상을 염수로 세정하고, 황산마그네슘을 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하여, 갈색 검을 수득하였다. 검을 구배 용리(0% 메탄올/DCM에서 5% 메탄올/DCM으로)를 이용하면서 실리카 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 이에 따라, 목적 생성물인 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(282 g, 75%)을 담황색 건조 필름으로서 단리하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 526. 이 반응을 반복함으로써, 추가의 물질을 제조하였다.
단계 6
Figure pct00054
각 거울상이성질체를 하기와 같이 분취 HPLC에 의해 단리하였다:
라세미형 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(325 g)의 용액을 에탄올 내 메탄올의 50% v/v 혼합물에 첨가하였다. 12 g의 라세미체를 각기 함유하는, 800 mL 분취량의 상기 혼합물을 프로크롬 HPLC 기기를 이용하여, 프로크롬 200 mm 20μm 키랄팍 AD 칼럼(5 kg CSP)에 순차 주입하였다. 1.2 L/분의 유속 및 25분의 실시 시간에서, 25% 헵탄:37.5% 메탄올:37.5% 에탄올을 함유하는 용리액을 이용하여, 거울상이성질체를 실온에서 용리하였다. 용리하는 첫 번째 거울상이성질체는 6.5분의 체류 시간을 가졌고, 두 번째 거울상이성질체는 10분 후에 용리하기 시작했다. 첫 번째 용리 거울상이성질체(143 g, 272 mmol, 50.7%)가 크림색 고체로서 수득되었고, 두 번째 용리 거울상이성질체(59 g)를 갈색 필름으로서 회수하였다.
키랄 정제 후의 분석 조건:
키랄팍 ID 4.6×250 mm 5 μm 칼럼. 1 ml/분으로 EtOH:MeOH(50:50)로 용리함. 실시 시간은 25℃의 온도에서 30분이었다.
상기 단계 6에서의 분리로부터 첫 번째로 용리한 거울상이성질체에 대한 체류 시간은 17.73분이었다. 이를 상기 기재된 방법에 따라 제조한 실시예 1.03b의 진 샘플과 비교하였고, 이를 실시예 1.03b의 거울상이성질체, 즉 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온으로 확인하였다. 두 번째 용리 거울상이성질체의 체류 시간은 13.52분이었고, 이를 실시예 1.03a의 거울상이성질체, 즉 8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온으로 확인하였다.
키랄 크로마토그래피로 상기 단계 6으로부터의 첫 번째 용리 거울상이성질체(즉, 실시예 1.03b의 거울상이성질체, 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온) 내의 반대 거울상이성질체의 수준을 대략 0.7%로 평가하였고, 이에 99.3%의 거울상이성질체성 순도 및 98.6%의 거울상이성질체 과잉율을 수득하였다.
하기 방법에 따라 실시예 1.03b의 화합물의 결정질 형태(A형)를 또한 생성시켰다:
8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온(9 g)을 72시간 동안 에테르(180 mL) 중에서 슬러리화하였다. 얻어진 회백색의 분말을 여과에 의해 단리하고, 건조시켰다. 이어서, 그것을 XRPD에 의해 분석하여, 결정질인 것으로 나타났으며(도 1), CuKa 방사선을 이용하여 측정 시에 하기 2θ 값을 가졌다.
Figure pct00055
하기 방법에 따라 실시예 1.03b의 화합물의 다른 한 결정질 형태(B형)도 또한 생성시켰다:
8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온(1.77 g)을 12시간 동안 에테르(180 mL) 중에서 슬러리화하였다. 얻어진 회백색의 분말(720 mg)을 여과에 의해 단리하고, 건조시켰다. 그것을 XRPD에 의해 분석하였고(도 2), A형과 상이한 결정질 형태인 것으로 나타났으며, CuKa 방사선을 이용하여 측정 시에 하기 2θ 값을 가졌다:
Figure pct00056
B형의 DSC 분석을 또한 수행하였고(도 3), 이는 180.2℃(개시)의 융점을 나타냈다.
B형을 메탄올 중에 슬러리화함으로써, 실시예 1.03b의 화합물의 다른 한 결정질 형태(C형)를 또한 생성시켰다. 대략 20 mg의 B형 물질을 자기 플리(magnetic flea)가 있는 바이얼에 두었고, 대략 2 ml의 메탄올을 첨가하였다. 이어서, 바이얼을 캡으로 단단히 봉하고, 자기 교반기 플레이트에 교반하도록 두었다. 3일 후, 샘플을 플레이트로부터 제거하였고, 슬러리를 주변 조건 하에 건조시킨 후, XRPD에 의해 분석하였다(도 4). 이 형태(C형)는 XRPD에 의해 결정질인 것으로 결정되었고, 상기 나타난 형태와 상이한 것으로 보이며, CuKa 방사선을 이용하여 측정 시에 하기 2θ 값을 가졌다:
Figure pct00057
실시예 1.04
8-[1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-6-[(1-옥시도티오모르폴린-4-일)카르보닐]-4H-크로멘-4-온
Figure pct00058
TBTU(176 mg, 0.55 mmol)를 실온에서 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(125 mg, 0.27 mmol) 및 DIPEA(0.286 mL, 1.64 mmol)의 교반 용액에 1회분씩 첨가하고, 2.5 h 동안 교반하였다. 티오모르폴린 1-옥시드 히드로클로라이드(85 mg, 0.55 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고, 3 h 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 물, 염수로 세정하며, MgSO4로 건조시키고, 농축하였다. 잔류물을 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 분획을 증발 건조시켰고, 잔류물을 DCM에 용해시키고, MgSO4로 건조시키며, 농축하였다. 잔류 고체를 디에틸 에테르로 마쇄하고, 여과하며, 디에틸 에테르로 세정하고, 50℃에서 진공 하에 건조시켜, 8-[1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-6-(1-옥소-1,4-티아지난-4-카르보닐)크로멘-4-온(87 mg, 57%)을 옅은 베이지색의 고체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 558.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.75-1.86 (m, 1H), 1.98-2.08 (m, 2H), 2.14 (bs, 0.5H), 2.51-2.58 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.64 (bs, 1H), 2.81 (bs, 1.5H), 2.98 (bs, 1H), 3.27 (bs, 1H), 3.40 (bs, 1H), 3.49-3.65 (m, 5H), 3.64-3.83 (m, 6H), 4.21 (bs, 0.5H), 4.34 (bs, 0.5H), 5.25 (d, 1H), 5.62 (s, 1H), 6.13 (d, 2H), 6.34 (t, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.87 (d, 1H)
실시예 1.05
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2R)-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온
Figure pct00059
TBTU(211 mg, 0.66 mmol)을 질소 하에 CHCl3 (2 mL)에 용해된 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실산(150 mg, 0.33 mmol, >98% 거울상이성질체성 순도, 제조의 상세 내용에 대해 실시예 1.03b 참조) 및 DIPEA(0.229 mL, 1.31 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 얻어진 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 아제티딘 히드로클로라이드(61.5 mg, 0.66 mmol)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 50℃에서 2 내지 3 h 동안 교반하였다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 10% 시트르산 수용액으로 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 조합된 유기 상을 탄산수소나트륨의 포화 수용액, 염수로 세정하며, MgSO4로 건조시키며, 농축하였다. 조질의 생성물을 EtAc/DCM(1/1) 중의 0 내지 10% 메탄올로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켰고, 건조 필름을 디에틸 에테르 중에 마쇄하였으며, 석출물을 여과에 의해 모으고, 디에틸 에테르로 세정하며, 일정 중량으로 건조시켜, 6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2R)-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(126 mg, 0.254 mmol, 77%)을 고체로서 수득하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 496.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.74-1.88 (m, 1H), 1.97-2.08 (m, 2H), 2.13-2.24 (m, 2H), 2.43-2.51 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.33-3.39 (H2O에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.49-3.66 (m, 4H), 3.70-3.81 (m, 5H), 3.93-4.09 (m, 4H), 5.25 (d, 1H), 5.62 (s, 1H), 6.15 (d, 2H), 6.33 (t, 1H), 7.30 (d, 1H), 8.04 (d, 1H)
실시예 1.06
8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드
Figure pct00060
TSTU(429 mg, 1.34 mmol)를 질소 하에 실온에서 DCM(5 mL)에 용해된 8-[(2R)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실산(488 mg, 1.11 mmol, >98% 거울상이성질체성 순도), 디메틸아민 히드로클로라이드(127 mg, 1.56 mmol) 및 DIPEA(0.582 mL, 3.34 mmol)의 교반 현탁액에 1회분씩 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고 DCM(1×40 mL)으로 추출하였다. 유기 상을 MgSO4로 건조시키며, 농축하여, 조질의 생성물을 황색 발포체로서 제공하였다. 조질의 생성물을 EtAc 중의 0 내지 10% MeOH로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켰고, 발포체를 디에틸 에테르(10 mL) 중에서 마쇄하였고, 얻어진 고체를 여과하고, 감압 하에 건조시켜, 8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드(276 mg, 53%)를 황색 고체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 466.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.78-1.92 (m, 1H), 1.96-2.09 (m, 2H), 2.46-2.56 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.68 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 3.33-3.42 (H2O에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.50-3.66 (m, 4H), 3.70-3.81 (m, 5H), 5.23 (d, 1H), 5.61 (s, 1H), 6.21-6.29 (m, 2H), 6.36 (ddd, 1H), 7.09 (ddd, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.80 (d, 1H)
출발 물질로 사용된 8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산을 하기와 같이 제조하였다:
단계 1
Figure pct00061
디아세톡시팔라듐(3.3 mg, 0.01 mmol)을 1,4-디옥산(3.3 mL) 중에 현탁된 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-[(2R)-피롤리딘-2-일]크로멘-6-카르복실레이트(121 mg, 0.34 mmol), (9,9-디메틸-9H-잔텐-4,5-디일)비스(디페닐포스핀) (16.61 mg, 0.03 mmol), 1-브로모-3-플루오로벤젠(0.047 mL, 0.42 mmol) 및 탄산세슘(165 mg, 0.51 mmol)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 아르곤으로 탈기한 후, 100℃에서 20 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 조질의 생성물을 DCM 중 0 내지 7% 프로판올로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켜, 메틸 8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(120 mg, 79%)를 황색 오일로서 제공하였고, 이를 방치하여 고화시켰다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 453.
단계 4
Figure pct00062
NaOH 2 N(0.398 mL, 0.80 mmol)을 THF(2.4 mL) 및 MeOH(2.4 mL)의 혼합물 중의 메틸 8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(120 mg, 0.27 mmol)에 첨가하였다. 얻어진 용액을 주말에 걸쳐 25℃에서 교반하였다. pH ~2가 될 때까지 수성 HCl을 첨가하였다. 용매를 진공 하에 제거하였고, 황색 고체를 여과에 의해 모으고, 디에틸 에테르로 세정하여, 8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(100 mg, 86%)을 수득하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 439.
실시예 1.07
8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온
Figure pct00063
TSTU(220 mg, 0.68 mmol)를 질소 하에 실온에서 DCM(5 mL)에 용해된 8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(250 mg, 0.57 mmol, >98% 거울상이성질체성 순도, 제조의 상세 내용에 대해 실시예 1.06 참조), 모르폴린(0.075 mL, 0.86 mmol) 및 DIPEA(0.149 mL, 0.86 mmol)의 교반 현탁액에 1회분씩 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 실온에서 16 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 분획을 증발 건조시켰고, 수득된 발포체를 DCM에 용해시키고 (0.5 mL), 디에틸 에테르(1 mL)를 첨가하였다. 얻어진 결정질 고체를 여과에 의해 모으고, 진공 하에 건조시켜, 8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(126 mg, 44%)을 백색 결정질 고체로서 수득하였다.
[α]D 20°: -15.2° (2 mL의 아세토니트릴 중 19.8 mg).
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 508.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.81-1.93 (m, 1H), 1.97-2.10 (m, 2H), 2.50-2.59 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.19-3.24 (H2O에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.34-3.42 (m, 4H), 3.44 (bs, 4H), 3.50-3.64 (m, 4H), 3.71-3.81 (m, 5H), 5.23 (d, 1H), 5.58 (s, 1H), 6.21-6.28 (m, 2H), 7.36 (ddd, 1H), 7.08 (dd, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.82 (d, 1H)
실시예 1.08
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온
Figure pct00064
HATU(368 mg, 0.97 mmol)을 질소 하에 DCM(1 mL)에 용해된 8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(212 mg, 0.48 mmol>98% 거울상이성질체성 순도, 제조의 상세 내용에 대해 실시예 1.06 참조) 및 DIPEA(0.674 mL, 3.87 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 얻어진 용액을 실온에서 1 h 동안 교반하였다. 아제티딘 히드로클로라이드(271 mg, 2.90 mmol)를 첨가하였고, 혼합물을 실온에서 15 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 분획을 증발 건조시켜, 6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(28 mg, 12%)을 담황색 발포체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 478.
양성자 NMR 스펙트럼 (CDCl3) 1.97-2.14 (m, 3H), 2.18-2.33 (m, 2H), 2.40-2.52 (m, 1H), 3.37-3.46 (m, 1H), 3.48-3.61 (m, 4H), 3.75-3.82 (m, 1H), 3.82-3-92 (m, 4H), 4.02-4.10 (m, 1H), 4.12-4.20 (m, 2H), 4.21-4.30 (m, 1H), 5.08 (d, 1H), 5.57 (s, 1H), 6.14 (ddd, 1H), 6.21 (dd, 1H), 6.37 (ddd, 1H), 7.08 (dd, 1H), 7.64 (d, 1H), 8.26 (d, 1H)
실시예 1.09
8-[(2R)-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온
Figure pct00065
8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실산(제조에 대해 실시예 1.03b 참조, 97 mg, 0.21 mmol), DIPEA(0.185 mL, 1.06 mmol) 및 1-메틸피페라진(0.047 mL, 0.43 mmol)을 DCM(3 mL) 중에서 실온에서 혼합하였다. 이어서, N-프로필포스폰산 무수물, 환형 삼량체(EtAc 중의 50 wt% 용액) (0.633 mL, 1.08 mmol)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 분취 HPLC에 의해 정제하여, 8-[(2R)-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(67 mg, 59%)을 백색 발포체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 539.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6): 1.76-1.89 (m, 2 H), 1.98-2.07 (m, 2 H), 2.11 (s, 3 H), 2.13-2.22 (m, 2 H), 2.36 (br, 2 H), 2.93-3.13 (br, 2 H), 3.35-3.42 (H2O에 의해 부분적으로 가려진 m, 2 H), 3.51 -3.67 (m, 4 H), 3.70-3.78 (m, 6 H), 5.26 (d, 1 H), 5.62 (s, 1 H), 6.14 (d, 2 H), 6.33 (m, 1 H), 7.02 (d, 1 H), 7.78 (d, 1 H)
실시예 1.10
8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온
Figure pct00066
실시예 1.00에 기재된 절차와 유사한 절차를 이용하여, 8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(제조에 대해 실시예 1.06 참조; 100 mg, 0.23 mmol)을 1-메틸피페라진(0.076 ml, 0.68 mmol)과 반응시켜, 8-[(2R)-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(39 mg, 33%)을 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 521.
양성자 NMR 스펙트럼: (CDCl3): 1.97-2.13 (m, 4 H), 2.24 (br s, 3 H), 2.29-2.54 (m, 4 H), 3.00-3.28 (m, 2 H), 3.40-3.47 (m, 1 H), 3.49-3.61 (m, 4 H), 3.69-3.81 (m, 3 H), 3.81-3.94 (m, 4 H), 5.10 (d, 1 H), 5.57 (s, 1 H), 6.12 (d, 1 H), 6.20 (d, 1 H), 6.33-6.41 (m, 1 H), 7.06-7.11 (m, 1 H), 7.26 (클로로포름에 의해 가려진 s, 1 H), 8.12 (d, 1 H)
실시예 1.11
8-[(2R)-(1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온
Figure pct00067
실시예 1.04에 기재된 절차와 유사한 절차를 이용하여, 8-[(2R)-(1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(63 mg, 0.14 mmol)을 모르폴린(0.12 mL, 0.14 mmol)과 반응시켜, 8-[(2R)-(1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일)]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(37 mg, 51%)을 백색 발포체로서 수득하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 520.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d 6) : 1.78-1.91 (m, 1 H), 1.95-2.06 (m, 2 H), 2.50-2.56 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1 H), 2.96-3.26 (m, 4 H), 3.35-3.42 (m, 2 H), 3.50-3.62 (m, 6 H), 3.63 (s, 3 H), 3.71-3.79 (m, 6 H), 5.20 (d, 1 H), 5.61 (s, 1 H), 5.94-5.98 (m, 1 H), 6.01 (dd, 1 H), 6.21 (dd, 1 H), 6.99 (dd, 1 H), 7.12 (d, 1 H), 7.81 (d, 1 H) MMA-04957-98-01-109269
1-브로모-3-플루오로벤젠 대신에 1-브로모-3-메톡시벤젠을 사용하여, 실시예 1.05에 기재된 절차와 유사한 절차를 이용하여, 출발 물질로 사용된 8-(1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산을 제조하였다:
단계 1
Figure pct00068
실시예 1.0에 기재된 절차와 유사한 절차를 이용하여, 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-[(2R)-피롤리딘-2-일]크로멘-6-카르복실레이트(실시예 1.03b에 기재된 제조, 125 mg, 0.35 mmol)를 1-브로모-3-메톡시벤젠(0.049 ml, 0.38 mmol)과 반응시켜, 메틸 8-[(2R)-(1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(90 mg, 56%)를 황색 검으로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 465.
단계 2
Figure pct00069
메틸 8-[(2R)-(1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(90 mg, 0.19 mmol)를 수산화나트륨(38.7 mg, 0.97 mmol)과 반응시켜, 8-[(2R)-(1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(64 mg, 73%)을 베이지색 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 451.
실시예 1.12
8-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온
Figure pct00070
디아세톡시팔라듐(6.79 mg, 0.03 mmol)를 1,4-디옥산(5 mL)에 용해된 6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-4-온(250 mg, 0.60 mmol), 비페닐-2-일디시클로헥실포스핀(21 mg, 0.06 mmol), 1-브로모-4-플루오로벤젠(0.083 ml, 0.76 mmol) 및 탄산세슘(296 mg, 0.91 mmol)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 아르곤으로 탈기한 후, 100℃에서 15 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 목적하는 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 8-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(140 mg, 46%)을 검으로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 508.
양성자 NMR 스펙트럼 (DMSO-d 6): 1.79-1.92 (m, 1 H), 1.95-2.07 (m, 2 H), 2.52-2.57 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1 H), 2.92-3.28 (m, 4 H), 3.39-3.67 (m, 1 H), 3.48-3.67 (m, 6 H), 3.70-3.80 (m, 6 H), 5.17 (d, 1 H), 5.61 (s, 1 H), 6.41 (dd, 2 H), 6.95 (dd, 2 H), 7.13 (d, 1 H), 7.81 (d, 1 H).
상기 라세미형 혼합물을 키랄 HPLC를 통해 정제하였다:
Figure pct00071
샘플 모두는 선명한 박막으로서 수득되었고, 이는 디에틸 에테르로 마쇄할 때, 크림 백색 고체가 수득되었다. 이 물질을 40℃에서 하룻밤 동안 진공 중에 건조시켰다.
첫 번째 용리 거울상이성질체 : 30 mg (99% 거울상이성질체성 순도) 실시예 1.12a
두 번째 용리 거울상이성질체 : 26 mg (99% 거울상이성질체성 순도) 실시예 1.12b
실시예 1.12a
8-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(거울상이성질체 1)
분석 조건:
Figure pct00072
첫 번째 용리 거울상이성질체: 실시예 1.12a 체류 시간 2.92분, 99.7% 순도.
실시예 1.12b
8-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(거울상이성질체 2)
분석 조건:
Figure pct00073
두 번째 용리 거울상이성질체 : 실시예 1.12b 체류 시간 3.56분, 99.6% 순도.
출발 물질로 사용된 6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-4-온을 이하와 같이 제조하였다:
단계 1
Figure pct00074
NaOH 2 N(40.7 mL, 81.48 mmol)을 메탄올(225 mL) 및 DCM(75 mL)의 혼합물 중의 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(10 g, 27.2 mmol)에 첨가하였다. 슬러리를 실온에서 16 h 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 물(150 mL)을 슬러리에 첨가하였으며, 용액을 0℃로 냉각시키고, pH ~ 3.4가 될 때까지 HCl 6 N(15 mL, 89.6 mmol) 용액을 반응 혼합물에 적가하였다. 형성된 고체를 여과에 의해 모으고, 물(3×50 mL) 및 톨루엔(3×50 mL)으로 차례로 세정한 후, 디에틸 에테르(3×50 mL)로 세정하고, P2O5로 진공 하에 55℃에서 건조시켜, 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(9.47 g, 98%)을 베이지색 고체로서 제공하였다. 조질의 생성물을 추가 정제없이 사용하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 354.
단계 2
Figure pct00075
N-프로필포스폰산 무수물, 환형 삼량체(EtAc 중의 50 wt% 용액) (8.57 ml, 14.68 mmol)를 실온에서 DCM(14 mL) 중의 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(2 g, 5.65 mmol), DIPEA(4.9 mL, 28.2 mmol) 및 모르폴린(0.543 mL, 6.2 mmol)의 교반 용액에 1회분 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반한 후, 물(1 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15분 동안 교반하고, DCM으로 추출하였다. 조합된 유기 층을 물로 세정하였고; 유기 층을 염수로 세정하며, 황산마그네슘으로 건조시키고, 농축하여, 8-브로모-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(1.90 g, 79%)을 베이지색 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 423.
단계 3
Figure pct00076
디아세톡시팔라듐(0.095 g, 0.42 mmol)을 질소 하에 DMF(24.88 ml)에 용해된 8-브로모-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(1.79 g, 4.23 mmol), tert-부틸 2,3-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트(1.431 g, 8.46 mmol), 트리페닐포스핀 (0.222 g, 0.85 mmol) 및 아세트산칼륨(1.245 g, 12.69 mmol)의 교반 현탁액에 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 질소 하에 탈기하고, 100℃에서 16 h 동안 교반하였다. 혼합물을 증발시키고, 실리카 겔 상에 흡착하며, DCM 중의 5 내지 8% 메탄올로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켜, tert-부틸 2-(6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 및 tert-부틸 2-(6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)-2,3-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트(2.20 g, 102%)의 혼합물을 오렌지색 오일로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 512.
단계 4
Figure pct00077
에탄올(30 ml) 중의 tert-부틸 2-(6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)-2,3-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 화합물 및 tert-부틸 2-(6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트(1:1)(2.1 g, 2.05 mmol) 및 산화백금(IV) (0.093 g, 0.41 mmol)의 상기 혼합물을 실온에서 4 h 동안 1.2 atm에서 수소첨가하였다. 얻어진 용액을 여과하였고, 여액을 농축 건조시켜, 조질의 tert-부틸 2-(6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(1.60 g, 76%)를 오렌지색 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 514.
단계 5
Figure pct00078
HCl 4 M(9.74 mL, 39 mmol)을 r.t.에서 DCM(15 mL)에 용해된 tert-부틸 2-(6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(2 g, 3.89 mmol)의 교반 용액에 첨가하고, 주말에 걸쳐 교반하였다. 농축 후, DCM(15 mL) 및 MeOH(15 mL)를 첨가한 후, DCM(10 mL) 중의 10% 메탄올성 암모니아(7 N)의 용액을 첨가하였다. 조질의 생성물을 실리카 겔 상에 흡착되고 DCM 중의 0 내지 10% 메탄올로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켜, 고체를 제공하고, 진공 하에 건조시켜, 6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-4-온(1.0 g, 62%)을 베이지색 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 414.
실시예 2.00
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드
Figure pct00079
디아세톡시팔라듐(3.9 mg, 0.02 mmol)을 1,4-디옥산(4 mL)에 용해된 N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복사미드(130 mg, 0.35 mmol), 1-브로모-3-플루오로벤젠(0.049 ml, 0.44 mmol), (9,9-디메틸-9H-잔텐-4,5-디일)비스(디페닐포스핀) (20.25 mg, 0.03 mmol) 및 탄산세슘(171 mg, 0.52 mmol)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 아르곤으로 탈기하고, 100℃에서 16 h 동안 교반한 후, 실온으로 냉각시키고, 여과하고, 농축하였다. 조질의 생성물을 DMA(2 mL)에 용해시키고, 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 목적하는 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드(67 mg, 41%)를 고체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 466.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.78-1.90 (m, 1H), 1.97-2.08 (m, 2H), 2.52-2.60 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.68 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 3.33-3.39 (H2O에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.50-3.57 (m, 2H), 3.57-3.64 (m, 2H), 3.71-3.79 (m, 5H), 5.23 (d, 1H), 5.61 (s, 1H), 6.22-6.29 (m, 2H), 6.37 (ddd, 1H), 7.09 (dd, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.80 (d, 1H).
출발 물질로 사용된 N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복사미드를 이하와 같이 제조하였다:
단계 1
Figure pct00080
수산화나트륨(32.6 mL, 65.19 mmol)을 0℃에서 MeOH(42 mL) 및 THF(21 mL)에 용해된 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(8 g, 21.73 mmol)의 교반 현탁액에 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 실온에서 1 h 동안 교반하였다. 이어서, MeOH(60 mL), THF(10 mL) 및 물(10 mL)을 첨가하여 교반을 도왔다. 완료 시, 반응물을 0℃로 냉각시키고, HCl 2 N을 pH 2이 될 때까지 현탁액에 첨가하였다. 고체를 여과에 의해 모으고, 물, AcOEt, 디에틸 에테르로 세정하고, 50℃에서 진공 하에 P2O5로 건조시켜, 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(7.0 g, 91%)을 수득하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 354.
단계 2
Figure pct00081
TSTU(6.55 g, 21.74 mmol)를 질소 하에 DCM(100 mL)에 용해된 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(7 g, 19.77 mmol) 및 DIPEA(3.79 mL, 21.74 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 실온에서 4 h 동안 교반하였다. 더욱 많은 TSTU(6.55 g, 21.74 mmol) 및 DIPEA(3.79 mL, 21.74 mmol)를 첨가하였고, 추가 16 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 탄산수소나트륨 포화 수용액으로 켄칭하고, DCM 및 적은 양의 MeOH로 추출하였다. 조합된 유기 상을 MgSO4로 건조시키며, 농축하고, DCM 중의 3 내지 5% MeOH로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켜, 8-브로모-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드(7.70 g, 102%)를 베이지색 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 381.
하기 절차에 따라 대규모로 8-브로모-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드를 또한 합성하였다. 수산화칼륨(39.8 mL, 518.37 mmol)을 오버헤드 에어 교반기가 장착된 3 리터 용량의 자켓달린 용기(용기 1)에서 22℃에서 물(572 mL) 중의 30분에 걸쳐 일정 속도로 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(99.3g, 259.18 mmol)에 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 22℃에서 4 h 동안 교반하였다. 물(286 mL)을 1회분씩 첨가하였고, 비누화가 완료될 때까지 혼합물을 22℃에서 2 h 동안 교반하였다. 반응물을 여과하여, 불용성 입상물을 제거하였고, 물(95 mL)을 스크린 필터 워시로서 용기에 충전하였고, 조합된 여액을 3 리터의 자켓달린 용기(용기 1)에 충전하였다. 물(191 mL) 중의 디메틸아민 히드로클로라이드(64.4g, 777.55 mmol)의 용액을 용기 1에 첨가하고, 교반을 계속하였다.
분리된 2 리터 용량의 자켓달린 용기(용기 2)에서, 2-클로로-4,6-디메톡시-1,3,5-트리아진(208 g, 1.17 mol) 및 물(978 mL)을 용기 2에 충전하고, 온도를 대략 8℃로 조정하였다. 4-메틸모르폴린(214 mL, 1.94 mol)을, 용기 2의 내용물을 <12℃로 유지하고 내용물을 12℃에서 2.5 h 동안 교반되도록 유지하는 속도로 충전하였다.
용기 2의 내용물을 3.5 h에 걸쳐 적하 깔대기를 통해 일정 속도로 용기 2에 옮겼고, 22℃에서 6 h 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 하기 온도 사이클링 레짐에 적용하였다.
Figure pct00082
반응 혼합물을 여과하였고, 고체를 물(381 mL)로 세정하였다. 고체를 물(381 mL)로 세정하고, 50℃에서 진공 하에 건조시켜, 8-브로모-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복사미드(78 g, 78%)를 베이지색 고체로서 수득하였다.
질량 스펙트럼:: m/z [M+H] 381.
양성자 NMR 스펙트럼: (400 MHz, DMSO, 30℃) 2.93 (3H, br. s), 2.99 (3H, br. s), 3.57 - 3.60 (4H, m), 3.74 - 3.76 (4H, m), 5.61 (1H, s), 7.87 (1H, d, J=1.9Hz), 7.99 (1H, d, J=1.9Hz);
단계 3
Figure pct00083
비스(트리페닐포스핀) 팔라듐(II) 클로라이드(0.116 g, 0.17 mmol)를 DME(50 mL) 및 물(10 mL) 중의 8-브로모-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드(3.15 g, 8.26 mmol), 1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-피롤-2-일붕소산(2.1 g, 9.92 mmol) 및 탄산나트륨(2.63 g, 24.79 mmol)의 교반 슬러리에 1회분씩 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 80℃에서 8 h 동안 교반하였다. 냉각 후, 물을 반응 혼합물에 첨가하고, DCM으로 추출하였다. 조합된 유기 상을 물 및 염수로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시키며, 농축하였다. 조질의 생성물을 DCM 중의 5% MeOH로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켜, tert-부틸 2-(6-(디메틸카르바모일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)-1H-피롤-1-카르복실레이트(2.40 g, 62%)를 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 468.
단계 4
Figure pct00084
MeOH(10 mL) 중의 tert-부틸 2-(6-(디메틸카르바모일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)-1H-피롤-1-카르복실레이트(0.6 g, 1.28 mmol)의 용액을 연속 리사이클링하면서 3.5 h 동안, 10바, 50℃ 및 1 mL/분의 유속 하에 H-큐브(H-Cube)(탈레스 나노테크놀로지 인코포레이티드(THALES Nanotechnology Inc.) 제의 연속 유동 수소첨가 장치 HC-2.SS, 부다페스트 H-1031; 자호니(Zahony) u.7.; 헝가리아)를 이용하여, 5% Rh/Al2O3(나노탈레스 카트카르트 카트리지(NanoThales CatCart cartrige), 제품 ID THS 02118)에서 수소첨가하였다. 카트리지를 10% Pd/c 카트리지로 교체하고, 60바 및 60℃에서 6 h 동안 수소첨가를 행하였다. 혼합물을 증발 건조시켜, 고체를 수득하였고, 이를 디에틸 에테르 중에 마쇄하고, 여과하며, 50℃에서 진공 하에 건조시켜, 순수 tert-부틸 2-(6-(디메틸카르바모일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(0.30 g, 50%)를 백색 고체로서 제공하였다. 조질의 생성물을 다음 단계에 그대로 사용하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 472.
단계 5
Figure pct00085
HCl(4.50 mL, 18 mmol, 4 M 용액)을 실온에서 DCM(10 mL)에 용해된 tert-부틸 2-(6-(디메틸카르바모일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(850 mg, 1.80 mmol)의 교반 용액에 첨가하고, 8 h 동안 교반하였다. 휘발물을 증발시킨 후, DCM(5mL) 및 MeOH(5 mL)를 첨가하고, 이어서 DCM 중의 10% 메탄올성 암모니아(7 N, 5 mL)를 첨가하였다. 고체를 여과하며, DCM 및 MeOH의 1:1 혼합물로 세정하였다. 용매를 증발 건조시키고, 디에틸 에테르로 마쇄한 후, N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복사미드(675 mg, 101%)를 옅은 베이지색의 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 372.
실시예 2.01
8-(1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드
Figure pct00086
1-브로모-3-플루오로벤젠 대신에 1-브로모-3-메톡시벤젠(0.055 ml, 0.44 mmol)을 사용한 것을 제외하고는 실시예 2.00에 기재된 절차와 유사한 절차를 이용하여 표제 화합물을 제조함으로써, 8-(1-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드(46 mg, 28%)를 고체로서 수득하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 478.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.78-1.90 (m, 1H), 1.94-2.07 (m, 2H), 2.46-2.55 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 3.33-3.39 (H2O에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.49-3.57 (m, 2H), 3.57-3.63 (m, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.69-3.79 (m, 5H), 5.19 (d, 1H), 5.61 (s, 1H), 5.98 (s, 1H), 6.02 (dd, 1H), 6.20 (dd, 1H), 6.98 (dd, 1H), 7.17 (d, 1H), 7.79 (d, 1H)
실시예 2.02
8-(1-(3-시아노-5-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드
Figure pct00087
1-브로모-3-플루오로벤젠 대신에 3-브로모-5-플루오로벤조니트릴(88 mg, 0.44 mmol)을 사용한 것을 제외하고는 실시예 2.00에 기재된 절차와 유사한 절차를 이용하여 표제 화합물을 제조함으로써, 8-(1-(3-시아노-5-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드(90 mg, 52%)를 고체로서 수득하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 491.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.74-1.88 (m, 1H), 1.99-2.10 (m, 2H), 2.45-2.56 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.68 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 3.35-3.43 (H2O에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.49-3.58 (m, 2H), 3.58-3.66 (m, 2H), 3.71-3.77 (m, 4H), 3.77-3.85 (m, 1H), 5.31 (d, 1H), 5.62 (s, 1H), 6.61 (d, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.80 (d, 1H)
실시예 2.03
N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-8-(1-페닐피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복사미드
Figure pct00088
1-브로모-3-플루오로벤젠 대신에 브로모벤젠(0.046 ml, 0.44 mmol)을 사용한 것을 제외하고는 실시예 2.00에 기재된 절차와 유사한 절차를 이용하여 표제 화합물을 제조함으로써, N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-8-(1-페닐피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복사미드(59 mg, 38%)를 고체로서 수득하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 448.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.80-1.93 (m, 1H), 1.95-2.10 (m, 2H), 2.45-2.56 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.89 (s, 3H), 3.33-3.40 (H2O에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.50-3.57 (m, 2H), 3.57-3.65 (m, 2H), 3.70-3.81 (m, 5H), 5.20 (d, 1H), 5.61 (s, 1H), 6.44 (d, 2H), 6.58 (t, 1H), 7.10 (dd, 2H), 7.17 (d, 1H), 7.79 (d, 1H)
실시예 2.04
8-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드
Figure pct00089
1-브로모-3-플루오로벤젠 대신에 브로모벤젠(0.048 ml, 0.44 mmol)을 사용한 것을 제외하고는 실시예 2.00에 기재된 절차와 유사한 절차를 이용하여 표제 화합물을 제조함으로써, 8-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드(31 mg, 19%)를 고체로서 수득하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 466.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.79-1.91 (m, 1H), 1.93-2.07 (m, 2H), 2.45-2.56 (DMSO-d5에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.68 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 3.32-3.42 (H2O에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.49-3.57 (m, 2H), 3.57-3.64 (m, 2H), 3.70-3.80 (m, 5H), 5.16 (d, 1H), 5.61 (s, 1H), 6.42 (dd, 2H), 6.94 (dd, 2H), 7.18 (d, 1H), 7.79 (d, 1H)
라세미형 8-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드(200 mg, 실시예 2.04)를 키랄 HPLC에 의해 분리하여, 실시예 2.04a 및 2.04b를 제공하였다:
Figure pct00090
샘플 모두는 선명한 박막으로서 수득되었고, 이는 디에틸 에테르로 마쇄할 때, 고체가 수득되었다. 이 물질을 40℃에서 진공 하에 하룻밤 동안 건조시켰다.
첫 번째 용리 거울상이성질체 : 63 mg (99.7% 거울상이성질체성 순도) 실시예 2.04a
두 번째 용리 거울상이성질체: 58 mg (99.0% 거울상이성질체성 순도) 실시예 2.04b
실시예 2.04a
8-[(2S)-1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 466.
양성자 NMR 스펙트럼 (CDCl3): 1.95-2.12 (m, 3 H), 2.40-2.52 (m, 1 H), 2.78 (s, 3 H), 3.03 (s, 3 H), 3.30-3.43 (m, 1 H), 3.46-3.60 (m, 4 H), 3.71-3.80 (m, 1 H), 3.81-3.93 (m, 4 H), 5.04 (d, 1 H), 5.57 (s, 1 H), 6.36 (dd, 2 H), 6.86 (dd, 2 H), 7.40 (d, 1 H), 8.11 (d, 1 H).
실시예 2.04b
8-[(2R)-1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 466.
양성자 NMR 스펙트럼 (CDCl3): 1.95-2.12 (m, 3 H), 2.40-2.52 (m, 1 H), 2.78 (s, 3 H), 3.03 (s, 3 H), 3.30-3.43 (m, 1 H), 3.46-3.60 (m, 4 H), 3.71-3.80 (m, 1 H), 3.81-3.93 (m, 4 H), 5.04 (d, 1 H), 5.57 (s, 1 H), 6.36 (dd, 2 H), 6.86 (dd, 2 H), 7.40 (d, 1 H), 8.11 (d, 1 H).
각각의 실시예 2.04a 및 2.04b의 절대 입체화학을 하기 방식에 의해 거울상선택적 합성에 의해 결정하였다. 공지된 절대 화학의 키랄 출발 물질(즉, 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-[(2R)-피롤리딘-2-일]크로멘-6-카르복실레이트, 이의 제조는 실시예 1.03b에 기재되어 있음)을 이용하여, 실시예 2.04b를 제조하였다. 이에 따라, 유사하게도 실시예 2.04a를 (S)-구조로 지정하였다. 실시예 2.04b의 거울상선택적 합성의 상세 내용은 이하와 같다:
Figure pct00091
8-[(2R)-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(56 mg, 0.13 mmol, 제조에 대해 실시예 1.03b 참조)을 실시예 1.04에 기재된 절차와 유사한 절차를 이용하여 디메틸아민 히드로클로라이드(52 mg, 0.64 mmol)와 반응시켜, 8-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드(9 mg, 15%)를 분석하였고, 분석 데이터는 상기와 같다.
1-브로모-3-플루오로벤젠 대신에 1-브로모-4-플루오로벤젠을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1.05에 기재된 절차와 유사한 절차를 이용하여, 출발 물질로 사용된 8-[(2R)-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산을 제조하였다:
단계 1
Figure pct00092
메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-[(2R)-피롤리딘-2-일]크로멘-6-카르복실레이트(130 mg, 0.36 mmol)를 1-브로모-4-플루오로벤젠(0.239 ml, 2.18 mmol)과 반응시켜, 메틸 8-[(2R)-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(거울상이성질체 2, 24 mg, 15%)를 베이지색 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 453.
단계 2
Figure pct00093
메틸 8-[(2R)-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)]-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(2개의 상이한 배치로부터의 119 mg, 0.26 mmol)를 수산화나트륨과 반응시켜, 8-(1-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(거울상이성질체 2, 95 mg, 82%)을 황색 고체로서 수득하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 439.
실시예 3.00
8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온
Figure pct00094
TBTU(154 mg, 0.48 mmol)를 질소 하에 DMA(2 mL)에 용해된 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(90 mg, 0.19 mmol), DIPEA(0.083 mL, 0.48 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 얻어진 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 모르폴린(0.050 mL, 0.57 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 목적하는 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온(68 mg, 66%)을 황색 고체로서 수득하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 540.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.17 (d, 3H), 1.75-1.88 (m, 1H), 1.99-2.08 (m, 2H), 2.45-2.57 (DMSOd6에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.77-2.86 (m, 1H), 3.06 (bs, 2H), 3.09-3.19 (m, 1H), 3.23 (bs, 2H), 3.33-3.41 (H2O에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.44 (bs, 2H), 3.55 (bs, 2H), 3.58-3.71 (m, 2H), 3.73-3.80 (m, 1H), 3.85-4.06 (m, 3H), 5.26 (d, 1H), 5.64 (s, 1H), 6.13 (d, 2H), 6.34 (t, 1H), 7.06 (d, 0.5H), 7.07 (d, 0.5H), 7.82 (d, 1H)
출발 물질로 사용된 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산을 이하와 같이 제조하였다:
단계 1
Figure pct00095
질소 하(표백 트랩이 장착된 플라스크)에 -50℃에서 THF(700 mL) 중의 메틸 3-아세틸-5-브로모-4-히드록시벤조에이트(70 g, 243.52 mmol)의 현탁액에 리튬 비스(트리메틸실릴) 아미드(828 ml, 828 mmol)를 첨가하였다. 짙은 색 용액을 -5℃로 가온하고, 2 h 동안 교반하였다. 이황화탄소(22 mL, 365 mmol)를 -20℃에서 상기 용액에 1회분씩 첨가한 후, 혼합물을 실온에서 하룻밤 동안 교반하였다. 물(700 mL)을 첨가하고, THF 층을 물(2×350 mL)로 세정하였다. 수성 상을 조합하고, 0℃로 냉각시키며, 표백 트랩이 장착된 용기에서 H2SO4(108 ml, 1948 mmol)로 켄칭하여, 형성된 H2S를 중화하였다. 혼합물을 실온에서 3 h 동안 교반하고, DCM(700 mL)를 첨가하였으며, 혼합물을 실온에서 하룻밤 동안 교반하였다. 수성 상을 DCM(2×)으로 추출하였다. 유기 상을 조합하고, 염수로 세정하며, MgSO4로 건조시키고, 여과하며, 증발시켜, 오렌지색 고체를 제공하였다. 이 고체를 디에틸 에테르 중에 마쇄하고, 여과하며, 건조시켜, 메틸 8-브로모-4-히드록시-2-티옥소-2H-크로멘-6-카르복실레이트(48.7 g, 63%)를 황색/오렌지색 고체를 수득하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 317.
단계 2
Figure pct00096
요오도에탄(37.1 mL, 463.51 mmol)를 아세톤 (490 mL) 중의 메틸 8-브로모-4-히드록시-2-티옥소-2H-크로멘-6-카르복실레이트(48.69 g, 154.5 mmol) 및 탄산칼륨(21.35 g, 154.50 mmol)의 교반 현탁액에 1회분씩 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 표백 트랩이 장착된 플라스크에서 질소 하에 1 h 동안 환류 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하였고, 잔류물을 DCM(980 mL)/물(490 mL)로 희석하였다. 상들을 분리하고, 수성 층을 DCM(490 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기 상을 염수로 세정하고, MgSO4로 건조시키며, 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르로 마쇄하고, 여과하며, 진공 하에 건조시켜, 메틸 8-브로모-2-(에틸티오)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(52.9 g, 100%)를 담갈색 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 345
단계 3
Figure pct00097
3-클로로벤조퍼옥소산(76 g, 264.90 mmol)을 빙조로 냉각된 DCM(420 mL) 중의 메틸 8-브로모-2-(에틸티오)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(47.35 g, 132.45 mmol)의 교반 용액에 적가하였다. 이어서, 얻어진 혼합물을 질소 하에 실온에서 2 h 동안 교반하였다. 현탁액을 -15℃로 냉각하고, 여과하였고, 고체를 냉 DCM으로 세정한 후, 여액을 물(290 mL) 중 나트륨 술포티오에이트 오수화물(16.44 g, 66.23 mmol)의 용액으로 세정한 후, NaHCO3(2×300 mL)의 포화 용액으로 세정하였다. 유기 층을 데칸테이션하고, MgSO4로 건조시키며, 증발시켜, 적색 분말을 제공하였고,이를 디에틸 에테르로 마쇄하여, 고체를 수득하였다. 이 고체를 여과에 의해 모으고, 건조시켜, 메틸 8-브로모-2-(에틸술포닐)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(44.6 g, 90%)를 회백색 물질로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 375.
단계 4
Figure pct00098
DIPEA(51.7 mL, 296.91 mmol)를 질소 하에 5℃에서 DCM(430 mL) 중의 메틸 8-브로모-2-(에틸술포닐)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(44.56 g, 118.77 mmol) 및 (R)-2-메틸모르폴린 히드로클로라이드(22.88 g, 166.27 mmol)의 교반 용액에 적가하였다. 얻어진 현탁액을 실온에서 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, HCl 1 M(119 mL, 118.77 mmol) (pH 7)로 천천히 켄칭하였다. 상을 분리하였고, 유기 상을 물, 염수로 세정하고, MgSO4로 건조시키며, 농축하였다. 조질의 생성물을 1 h 동안 EtAc 중에 마쇄하였고, 고체를 여과에 의해 모으고, 건조시켜, 메틸 8-브로모-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(32.6 g, 67%)를 백색 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 384.
단계 5
Figure pct00099
비스(트리페닐포스핀) 염화팔라듐(II)(0.448 g, 0.63 mmol)을 DME(140 mL) 및 물(28 mL) 중의 (R)-메틸 8-브로모-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(10.06 g, 25mmol), 1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-피롤-2-일붕소산(6.46 g, 30.00 mmol) 및 탄산나트륨(7.95 g, 75.00 mmol)의 교반 슬러리에 1회분씩 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 아르곤으로 탈기한 후, 80℃에서 6 h 동안 가열하였다. 용매를 증발시키고, 물을 잔류물에 첨가하였으며, 혼합물을 DCM으로 추출하였다. 조합된 유기 상을 물, 염수로 세정하고, MgSO4로 건조시키며, 농축하여, ~20%의 출발 물질을 함유하는 조질의 (R)-tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-8-일)-1H-피롤-1-카르복실레이트를 수득하였다(13.98 g). 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 469.
단계 6
Figure pct00100
MeOH(50 mL) 중의 (R)-tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-8-일)-1H-피롤-1-카르복실레이트(2 g, 4.27 mmol) 및 5% 로듐/알루미나 (50% 함수율)(0.4 g, 0.09 mmol)를 5 bar 및 65℃에서 2 h 동안 수소 분위기 하에 교반하였다. 더욱 많은 촉매를 첨가하였고, 하룻밤 동안 교반을 계속하였다. 이어서, 2 g의 5% Rh/C를 첨가한 후, 1 h 후에 동일양을 첨가하고, 이어서 다시 2 h 후에 첨가하였다. 촉매를 셀라이트를 통해 여과하고, MeOH/DCM으로 세정하였으며, 용매를 증발시켰다. 조질의 생성물을 EtAc 중의 10 내지 15% MeOH를 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여, tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(1.18 g, 59%)를 백색 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 473.
단계 7
Figure pct00101
HCl 4 N(6.24 mL, 24.97 mmol)을 실온에서 DCM(10 mL) 중의 tert-부틸 2-(6-(메톡시카르보닐)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-8-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(1.18 g, 2.50 mmol)의 교반 용액에 첨가하고, 16 h 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, DCM(5 mL) 및 MeOH(5 mL)를 첨가한 후, 디클로로메탄(5 mL) 중의 10% 메탄올성 암모니아(7 N)를 첨가하였다. 고체를 여과하고, DCM 및 MeOH의 1:1 혼합물로 세정하였다. 용매를 증발 건조시켰고, 조질의 생성물을 DCM 중의 0 내지 10% MeOH로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켰고, 디에틸 에테르로 마쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 모으고, 진공 하에 건조시켜, 메틸 2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트(0.760 g, 82%)를 백색 고체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 373.
단계 8
Figure pct00102
디아세톡시팔라듐(4.58 mg, 0.02 mmol)을 1,4-디옥산(5 mL)에 현탁된 메틸 2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트(190 mg, 0.51 mmol), (9,9-디메틸-9H-잔텐-4,5-디일)비스(디페닐포스핀) (25.09 mg, 0.04 mmol), 1-브로모-3,5-디플루오로벤젠(73.4 ㎕, 0.64 mmol) 및 탄산세슘(249 mg, 0.77 mmol)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 아르곤으로 탈기한 후, 100℃에서 20 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 불용물을 여과에 의해 제거하였고, 여액을 농축하였다. 조질의 생성물을 실리카 겔 상에 흡착되고 EtAc 중의 0 내지 6%로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켜, 메틸 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(150 mg, 61%)를 베이지색 발포체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 485.
단계 9
Figure pct00103
수산화나트륨(물 중 2 N) (0.351 mL, 0.70 mmol)을 MeOH(2 mL)/물(2 mL) 중의 메틸 2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-(1-페닐피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트(136 mg, 0.28 mmol)의 교반 현탁액에 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 실온에서 18 h 동안 교반한 후, 50℃에서 교반하여, 반응을 완료하였다. 반응물을 5℃에서 HCl 2 N(0.379 mL, 0.76 mmol)을 이용하여 pH 2 내지 3으로 산성화하였다. 얻어진 석출물을 여과에 의해 모으고, 물 및 디에틸 에테르로 세정시키고, 일정 중량이 되도록 건조시켜, 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(95 mg, 72%)을 제공하였고, 이를 추가 정제없이 사용하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 471.
상기 단계 4에서 출발 물질로 사용된 (R)-2-메틸모르폴린 히드로클로라이드를 이하와 같이 제조하였다:
단계 1
Figure pct00104
2-(벤질아미노)에탄올(207 ml, 1454.97 mmol) 및 (R)-2-메틸옥시란(153 ml, 2182.46 mmol)을 함께 혼합하고, 유동 화학 시스템에서 150℃에서 가열된 10 mL 루프를 통해 1 mL/분의 유속으로 펌핑하였다. 250 psi의 루프 내의 압력을 달성하기 위해, 후압 조절기를 조정하였다. 과량의 산화프로필렌을 진공 하에 제거하여, (R)-1-(벤질(2-히드록시에틸)아미노)프로판-2-올(300 g, 99%)을 무색 액체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 210.
단계 2
Figure pct00105
질소 하의 디옥산(500 mL) 중의 (R)-1-(벤질(2-히드록시에틸)아미노)프로판-2-올(110 g, 525.60 mmol)의 교반 용액에 수산화칼륨 분말(88 g, 1576.80 mmol) 및 트리스(2-(2-메톡시에톡시)에틸)아민(1.681 mL, 5.26 mmol)을 연속하여 첨가하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 디옥산(500 mL) 중의 4-메틸벤젠-1-술포닐 클로라이드(105 g, 551.88 mmol)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 45분 동안 교반한 후, 실온에서 추가 4 h 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 여액을 증발시켰다. 잔류물을 DCM에 용해시키고, DCM 중의 25%로 용리하여 실리카 상에 정제하였다. 용매를 증발시켜, 오일을 제공하였고, 이를 EtAc(250 mL)로 희석하였다. 이어서, 디옥산(0.066 L, 262.8 mmol) 중의 4 N HCl의 용액을 교반 하에 적가하였다. 30분 후, 형성된 고체를 여과에 의해 모으고, 디에틸 에테르로 세정하며, 건조시켜, (R)-4-벤질-2-메틸모르폴린 히드로클로라이드(40 g, 33%)를 백색 고체로서 제공하였다. 양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6): 1.09 (d, 3H), 2.67-2.77 (m, 1H), 2.93-3.04 (m, 1H), 3.14-3.23 (m, 2H), 3.83-4.00 (m, 3H), 4.29-4.34 (m, 2H), 7.43-7.49 (m, 3H), 7.60-7.68 (m, 2H), 11.62 (bs, 1H).
단계 3
Figure pct00106
에탄올(1 L) 중의 (R)-4-벤질-2-메틸모르폴린 히드로클로라이드(40 g, 175.65 mmol)의 용액을 1 atm의 질소 하에 실온에서 하룻밤 동안 팔라듐 10%/C (3 g, 28.19 mmol)의 존재 하에 수소첨가하였다. 혼합물을 여과하였고, 여액을 농축 건조시켜, (R)-2-메틸모르폴린 히드로클로라이드(23 g, 95%)를 백색 고체로서 제공하였다. 양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6): 1.10 (d, 3H), 2.62 (dd, 1H), 2.85-2.95 (m, 1H), 3.08-3.20 (m, 2H), 3.70-3.77 (m, 1H), 3.78-3.83 (m, 1H), 3.90 (dd, 1H), 9.49 (bs, 2H).
실시예 3.01
2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-8-(1-페닐피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-4-온
Figure pct00107
TBTU(148 mg, 0.46 mmol)를 질소 하에 DMA(2 mL)에 용해된 2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-(1-페닐피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실산(80 mg, 0.18 mmol), DIPEA(0.080 mL, 0.46 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 얻어진 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 모르폴린(0.048 mL, 0.55 mmol)을 혼합물에 첨가하고, 실온에서 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 목적하는 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-8-(1-페닐피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-4-온(60 mg, 65%)을 검질 고체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 504.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.17 (d, 3H), 1.79-1.93 (m, 1H), 1.98-2.09 (m, 2H), 2.47-2.57 (DMSOd6에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.77-2.86 (m, 1H), 3.02 (bs, 2H), 3.09-3.18 (m, 1H), 3.19 (bs, 2H), 3.34-3.40 (m partailly hidden by H2O, 1H), 3.42 (bs, 2H), 3.55 (bs, 2H), 3.58-3.71 (m, 2H), 3.72-3.81 (m, 1H), 3.85-4.07 (m, 3H), 5.22 (d, 1H), 5.64 (s, 1H), 6.44 (d, 2H), 6.53 (t, 1H), 7.10 (t, 2H), 7.12 (d, 1H), 7.81 (d, 1H)
출발 물질로 사용된 2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-(1-페닐피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실산을 이하와 같이 제조하였다:
단계 1
Figure pct00108
디아세톡시팔라듐(4.58 mg, 0.02 mmol)을 1,4-디옥산(5 mL)에 현탁된 메틸 2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트(190 mg, 0.51 mmol), (9,9-디메틸-9H-잔텐-4,5-디일)비스(디페닐포스핀) (25.09 mg, 0.04 mmol), 브로모벤젠(67 ㎕, 0.64 mmol) 및 탄산세슘(249 mg, 0.77 mmol)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 아르곤으로 탈기하고, 100℃에서 20 h 동안 교반하였다. 실온으로 냉각 시에, 불용물을 여과에 의해 제거하였고, 여액을 농축하였다. 조질의 생성물을 실리카 겔 상에 흡착되고 EtAc 중의 0 내지 6%로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켜, 메틸 2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-(1-페닐피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트(112 mg, 49%)를 베이지색 발포체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 449.
단계 2
Figure pct00109
수산화나트륨(물 중 2 N)(0.293 mL, 0.59 mmol)을 실시예 3.00에 기재된 MeOH(2 mL)/물(2 mL)에 용해된 메틸 2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-(1-페닐피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트(105 mg, 0.23 mmol)의 교반 현탁액에 첨가하여, 2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-(1-페닐피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실산(87 mg, 86%)을 제공하였고, 이를 추가 정제없이 사용하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 435.
실시예 3.02
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온
Figure pct00110
TBTU(138 mg, 0.43 mmol)를 질소 하에 DMF(1.5 mL)에 용해된 8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(97 mg, 0.21 mmol), DIPEA(0.075 mL, 0.43 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 얻어진 용액을 실온에서 1.5 h 동안 교반하였다. 모르폴린(0.028 mL, 0.32 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 분취 HPLC에 의해 정제하였다. 분획을 증발 건조시켰고, 잔류물을 DCM에 용해시키고, MgSO4로 건조시키며, 증발 건조시켜, 8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온(63 mg, 56%)을 황색 발포체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 533.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.17 (d, 3H), 1.77-1.90 (m, 1H), 1.98-2.10 (m, 2H), 2.47-2.57 (DMSOd6에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.78-2.86 (m, 1H), 3.04 (bs, 2H), 3.09-3.18 (m, 1H), 3.22 (bs, 2H), 3.34-3.41 (m partailly hidden by H2O, 1H), 3.42 (bs, 2H), 3.54 (bs, 2H), 3.58-3.70 (m, 2H), 3.73-3.80 (m, 1H), 3.85-4.06 (m, 3H), 5.25 (d, 1H), 5.63 (s, 0.5H), 3.64 (s, 0.5H), 6.19-6.29 (m, 2H), 6.38 (ddd, 1H), 7.05-7.13 (m, 2H), 7.81 (d, 1H).
출발 물질로 사용된 8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산을 이하와 같이 제조하였다:
단계 1
Figure pct00111
디아세톡시팔라듐(8.44 mg, 0.04 mmol)을 1,4-디옥산(9 mL)에 현탁된 메틸 2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-(피롤리딘-2-일)-4H-크로멘-6-카르복실레이트(0.35 g, 0.94 mmol), (9,9-디메틸-9H-잔텐-4,5-디일)비스(디페닐포스핀) (0.046 g, 0.08 mmol), 1-브로모-3-플루오로벤젠(0.131 ml, 1.17 mmol) 및 탄산세슘(0.459 g, 1.41 mmol)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 아르곤으로 탈기한 후, 100℃에서 20 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 불용물을 여과에 의해 제거하였고, 여액을 농축하였다. 조질의 생성물을 실리카 겔 상에 흡착시키고, EtAc 중의 0 내지 10% MeOH로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 용매를 증발 건조시켜, 메틸 8-(1-(3-플루오로페닐) 피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(0.279 g, 64%)를 베이지색 발포체로서 제공하였다. 질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 467.
단계 2
Figure pct00112
NaOH 2 N(0.804 ml, 1.61 mmol) 수용액을 MeOH(4 mL)에 현탁된 메틸 8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트(0.25 g, 0.54 mmol)에 첨가하였다. 용액을 40℃에서 하룻밤 동안 교반한 후, 0℃로 냉각시켰고, HCl 2 N(0.670 ml, 1.34 mmol) 수용액을 pH ~ 3이 될 때까지 반응 혼합물에 적가하였다. 얻어진 석출물을 여과에 의해 모으고, 물로 세정하며, 진공 하에 50℃에서 P2O5의 존재 하에 일정 중량이 되도록 건조시켜, 8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(201 mg, 83%)을 베이지색 고체로서 제공하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 453.
실시예 3.03
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드
Figure pct00113
8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실산(102 mg, 0.23 mmol)을 실시예 3.02에 기재된 바와 같은 디메틸아민(THF 중 2 N) (0.169 ml, 0.34 mmol)과 반응시켜, 8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드(51 mg, 47%)를 담황색 발포체로서 수득하였다.
질량 스펙트럼: m/z [M+H]+ = 480.
양성자 NMR 스펙트럼: (DMSO-d6) 1.17 (d, 3H), 1.77-1.90 (m, 1H), 1.98-2.08 (m, 2H), 2.45-2.58 (DMSOd6에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.78-2.86 (m, 1H), 2.90 (s, 3H), 3.09-3.18 (m, 1H), 3.33-3.39 (H2O에 의해 부분적으로 가려진 m, 1H), 3.58-3.70 (m, 2H), 3.72-7.79 (m, 1H), 3.85-4.07 (m, 3H), 6.24 (d, 1H), 5.63 (s, 0.5H), 5.64 (s, 0.5H), 6.21-6.29 (m, 2H), 6.33-6.40 (m, 1H), 7.04 (ddd, 1H), 7.13 (d, 0.5H), 7.14 (d, 0.5H), 7.80 (d, 1H)

Claims (20)

  1. 화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 I]
    Figure pct00114

    식 중에서,
    R 1 는 히드록시로 임의적으로 치환된 (1-4C)알킬이고;
    R 2 는 H 또는 (1-4C)알킬이거나; 혹은
    R 1 및 R 2 는 함께 산소, 질소 및 황으로부터 선택되는 1 또는 2개의 추가 이종원자를 임의적으로 함유하는 3 내지 8원의 함질소 복소환식 환계를 형성하고, 여기서, 환의 황 원자는 임의적으로 산화되어 S-산화물(들)을 형성하고, 상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환되며;
    R 3 및 R 5 는 H, 할로게노, (1-3C)알콕시 및 시아노로부터 독립적으로 선택되며;
    R 4 는 H 또는 플루오로이고;
    n은 0 또는 1이고, n이 1일 때, R 6 기는 메틸이다.
  2. 제1항에 있어서,
    R1는 히드록시로 임의적으로 치환된 (1-4C)알킬이고;
    R2은 (1-4C)알킬이거나; 혹은
    R1 및 R2는 함께 산소, 질소 및 황으로부터 선택되는 1개의 추가 이종원자를 임의적으로 함유하는 4 내지 6원의 함질소 복소환식 환계를 형성하며, 여기서, 환의 황 원자는 임의적으로 산화되어 S-산화물(들)을 형성하고, 상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환되는
    화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, R3 및 R5는 H, 플루오로, 메톡시 및 시아노로부터 독립적으로 선택되는 화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, R4은 H인 화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, n은 0인 화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  6. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, n은 1이고, R6은 메틸인 화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  7. 제1항에 있어서,
    R1는 히드록시로 임의적으로 치환된 (1-4C)알킬이고;
    R2은 (1-4C)알킬이거나; 혹은
    R1 및 R2는 함께 산소, 질소 및 황으로부터 선택되는 1개의 추가 이종원자를 임의적으로 함유하는 4 내지 6원의 함질소 복소환식 환계를 형성하며, 여기서, 환의 황 원자는 임의적으로 산화되어 S-산화물(들)을 형성하고, 상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환되며;
    R3 및 R5은 H 또는 할로게노로부터 독립적으로 선택되고, R4은 H이며;
    n은 0 또는 1이고, n이 1일 때, R6 기는 메틸인
    화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  8. 제1항에 있어서,
    R1은 메틸, 에틸 또는 2-히드록시에틸이고;
    R2은 메틸 또는 에틸이거나; 혹은
    R1 및 R2는 함께 아제티디닐, 모르폴리닐, 1-옥소테트라히드로-1,4-티아지닐 및 피페리디닐로부터 선택되는 함질소 복소환식 환계를 형성하고, 여기서, 상기 환은 히드록시로 임의적으로 치환되고;
    R3 및 R5은 H 또는 할로게노로부터 독립적으로 선택되고, R4은 H이며;
    n은 0 또는 1이고, n이 1일 때, R6 기는 메틸인
    화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  9. 제1항에 있어서,
    R1은 메틸 또는 2-히드록시에틸이고;
    R2은 메틸이거나; 혹은
    R1 및 R2는 함께 아제티딘-1-일, 모르폴린-4-일, 1-옥소테트라히드로-1,4-티아진-4-일, 피페리딘-1-일 및 4-히드록시피페리딘-1-일로부터 선택되는 함질소 복소환식 환계를 형성하고;
    R3 및 R5는 H, 플루오로, 메톡시 및 시아노로부터 독립적으로 선택되고;
    R4는 H 또는 플루오로이고;
    n은 0 또는 1이고, n이 1일 때, R6 기는 메틸인
    화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  10. 제1항에 있어서,
    8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드;
    8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
    8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
    8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
    6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
    6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
    6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
    8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드;
    8-[(2S)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복사미드;
    8-[(2R)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복사미드;
    8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
    8-[(2S)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
    8-[(2R)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
    6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온;
    6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2S)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
    6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-[(2R)-1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-2-모르폴리노-크로멘-4-온;
    8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드;
    8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온;
    8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온; 및
    8-(1-(3-플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-N,N-디메틸-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복사미드
    중 어느 하나로부터 선택된 화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  11. 제1항에 있어서, 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온인 화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  12. 제1항에 있어서, 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온인 화학식 I의 화합물.
  13. 제1항에 있어서, 8-[(2R)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온인 화학식 I의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염.
  14. 제1항에 있어서, 8-[(2S)-1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일]-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-크로멘-4-온인 화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  15. 제1항에 있어서, 8-(1-(3,5-디플루오로페닐)피롤리딘-2-일)-2-((R)-2-메틸모르폴리노)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-4H-크로멘-4-온인 화학식 I의 화합물; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 약학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체와 병용하여 포함하는 약학적 조성물.
  17. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 치료에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  18. PI 3-키나제 효소의 억제에 민감한 종양의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도.
  19. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, PI 3-키나제 효소의 억제에 민감한 종양의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 화학식 I의 크로메논 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  20. PI 3-키나제 효소의 억제에 민감한 종양을 가지는 온혈 동물에게 유효량의. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 동물의 치료 또는 예방 방법.
KR1020137029759A 2011-04-13 2012-04-12 암 치료용 ｐｉ 3-키나제 억제제로서의 크로메논 화합물 KR101854950B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP11290187 2011-04-13
EP11290187.1 2011-04-13
PCT/GB2012/050793 WO2012140419A1 (en) 2011-04-13 2012-04-12 Chromenone compounds as pi 3 -kinase inhibitors for the treatment of cancer

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20140027985A true KR20140027985A (ko) 2014-03-07
KR101854950B1 KR101854950B1 (ko) 2018-05-04

Family

ID=46017999

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020137029759A KR101854950B1 (ko) 2011-04-13 2012-04-12 암 치료용 ｐｉ 3-키나제 억제제로서의 크로메논 화합물

Country Status (15)

Country Link
US (2) US8530470B2 (ko)
EP (1) EP2697220B1 (ko)
JP (1) JP5937674B2 (ko)
KR (1) KR101854950B1 (ko)
CN (1) CN103596948B (ko)
AR (1) AR086100A1 (ko)
AU (1) AU2012241594B2 (ko)
BR (1) BR112013026397A2 (ko)
CA (1) CA2832787A1 (ko)
ES (1) ES2565384T3 (ko)
HK (1) HK1193823A1 (ko)
MX (1) MX340300B (ko)
RU (1) RU2598028C2 (ko)
UY (1) UY34013A (ko)
WO (1) WO2012140419A1 (ko)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA029473B1 (ru) 2011-12-15 2018-03-30 Новартис Аг Применение ингибиторов pi3k для лечения острой и церебральной малярии
EP2653464B1 (en) * 2012-04-20 2017-09-27 Rohm and Haas Company Benzylamine hydrophobe
US9737521B2 (en) 2012-11-08 2017-08-22 Rhizen Pharmaceuticals Sa Pharmaceutical compositions containing a PDE4 inhibitor and a PI3 delta or dual PI3 delta-gamma kinase inhibitor
WO2015146561A1 (ja) * 2014-03-26 2015-10-01 住友精化株式会社 臭化芳香族エステル化合物の製造方法
CN104803921A (zh) * 2015-03-14 2015-07-29 长沙深橙生物科技有限公司 一种苯取代嘧啶衍生物的制备方法
CN104744376A (zh) * 2015-03-14 2015-07-01 长沙深橙生物科技有限公司 一种2-异丙基嘧啶衍生物的制备方法
US10526316B2 (en) * 2015-10-09 2020-01-07 Janssen Pharmaceutica Nv Quinoxaline and pyridopyrazine derivatives as PI3Kβ inhibitors
WO2017090002A2 (en) * 2015-11-27 2017-06-01 Gvk Biosciences Private Limited Inhibitors of pi3 kinases
RU2612875C1 (ru) * 2015-12-14 2017-03-13 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН) Средство для ингибирования фермента тирозил-днк-фосфодиэстеразы 1 человека
TW201813963A (zh) 2016-09-23 2018-04-16 美商基利科學股份有限公司 磷脂醯肌醇3-激酶抑制劑
TW201825465A (zh) 2016-09-23 2018-07-16 美商基利科學股份有限公司 磷脂醯肌醇3-激酶抑制劑
TW201815787A (zh) 2016-09-23 2018-05-01 美商基利科學股份有限公司 磷脂醯肌醇3-激酶抑制劑
RU2764522C1 (ru) * 2021-05-25 2022-01-18 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН) 3,3'[(гексано-1,6-диилбис(азанедиил)]бис-(7-гидрокси-6-метоксикарбонил-2-оксо-2H-хромен), обладающий антибактериальной активностью
CN113717138B (zh) * 2021-10-21 2023-02-24 沈阳药科大学 一类氮芥类色原酮衍生物与应用

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUT58310A (en) 1988-12-21 1992-02-28 Upjohn Co Anti-atherosclerotic and anti-thrombotic 1-benzopyran-4-one- and 2-amino-1,3-benzoxazin-4-one derivatives, process for producing them and pharmaceutical compositions containing them
DE4318756A1 (de) 1993-06-05 1994-12-08 Hoechst Ag Substituierte Benzoylguanidine, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung als Medikament oder Diagnostikum sowie sie enthaltendes Medikament
GB9624482D0 (en) 1995-12-18 1997-01-15 Zeneca Phaema S A Chemical compounds
BR9707495A (pt) 1996-02-13 1999-07-27 Zeneca Ltd Derivado de quinazolina processo para a preparação do mesmo composição farmacêutica e processo para a produç o de um efeito antiangiogênico e/ou de redução de permeabilidade vascular em um animal de sangue quente
KR100489174B1 (ko) 1996-03-05 2005-09-30 제네카-파마 소시에떼아노님 4-아닐리노퀴나졸린유도체
GB9718972D0 (en) 1996-09-25 1997-11-12 Zeneca Ltd Chemical compounds
GB9714249D0 (en) 1997-07-08 1997-09-10 Angiogene Pharm Ltd Vascular damaging agents
GB9900334D0 (en) 1999-01-07 1999-02-24 Angiogene Pharm Ltd Tricylic vascular damaging agents
GB9900752D0 (en) 1999-01-15 1999-03-03 Angiogene Pharm Ltd Benzimidazole vascular damaging agents
PL199802B1 (pl) 1999-02-10 2008-10-31 Astrazeneca Ab Pochodne chinazoliny, sposoby ich wytwarzania, ich kompozycje farmaceutyczne i ich zastosowania
IL152682A0 (en) 2000-05-31 2003-06-24 Astrazeneca Ab Indole derivatives with vascular damaging activity
UA73993C2 (uk) 2000-06-06 2005-10-17 Астразенека Аб Хіназолінові похідні для лікування пухлин та фармацевтична композиція
US20050277627A1 (en) 2000-07-07 2005-12-15 Arnould Jean C Colchinol derivatives as vascular damaging agents
KR20030022264A (ko) 2000-07-07 2003-03-15 앤지오젠 파마슈티칼스 리미티드 신생 혈관 형성 억제제인 콜치놀 유도체
GB0119865D0 (en) * 2001-08-14 2001-10-10 Cancer Res Campaign Tech DNA-PK inhibitors
TWI331034B (en) * 2002-07-08 2010-10-01 Piramal Life Sciences Ltd Inhibitors of cyclin-dependent kinases and their use
JP4646626B2 (ja) 2002-08-16 2011-03-09 アストラゼネカ アクチボラグ ホスホイノシチド３−キナーゼβの阻害
CN100430389C (zh) * 2002-08-16 2008-11-05 阿斯利康(瑞典)有限公司 抑制磷酸肌醇3-激酶β
CA2546920A1 (en) 2003-12-09 2005-06-23 Joel Moss Methods for suppressing an immune response or treating a proliferative disorder
AR054438A1 (es) * 2005-04-15 2007-06-27 Kudos Pharm Ltd Inhibidores de adn -pk
ES2491140T3 (es) * 2006-06-21 2014-09-05 Piramal Enterprises Limited Derivados de flavona enantioméricamente puros para el tratamiento de trastornos proliferativos y procesos para su preparación
WO2008064244A2 (en) 2006-11-20 2008-05-29 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Phosphoinositide modulation for the treatment of neurodegenerative diseases
US8399460B2 (en) 2009-10-27 2013-03-19 Astrazeneca Ab Chromenone derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
MX340300B (es) 2016-07-05
MX2013011931A (es) 2014-03-27
UY34013A (es) 2012-11-30
AU2012241594A1 (en) 2013-10-17
KR101854950B1 (ko) 2018-05-04
JP2014510779A (ja) 2014-05-01
RU2598028C2 (ru) 2016-09-20
US20120264731A1 (en) 2012-10-18
US20140038937A1 (en) 2014-02-06
RU2013147736A (ru) 2015-05-20
CN103596948A (zh) 2014-02-19
US8530470B2 (en) 2013-09-10
HK1193823A1 (zh) 2014-10-03
AU2012241594B2 (en) 2016-03-10
ES2565384T3 (es) 2016-04-04
JP5937674B2 (ja) 2016-06-22
CN103596948B (zh) 2016-04-27
AR086100A1 (es) 2013-11-20
EP2697220B1 (en) 2016-01-13
EP2697220A1 (en) 2014-02-19
WO2012140419A1 (en) 2012-10-18
CA2832787A1 (en) 2012-10-18
BR112013026397A2 (pt) 2017-09-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101854950B1 (ko) 암 치료용 ｐｉ 3-키나제 억제제로서의 크로메논 화합물
JP5872016B2 (ja) 抗腫瘍活性があるクロメノン誘導体
JP2008535780A (ja) 化合物
MX2007000118A (es) Pirimidinas 2,4,6-trisustituidas como inhibidores de fosfotidilinositol (pi) 3-cinasa y su uso en el tratamiento de cancer.
TW201245186A (en) Chromenone compounds

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right