EA029473B1 - Применение ингибиторов pi3k для лечения острой и церебральной малярии - Google Patents

Применение ингибиторов pi3k для лечения острой и церебральной малярии Download PDF

Info

Publication number
EA029473B1
EA029473B1 EA201491182A EA201491182A EA029473B1 EA 029473 B1 EA029473 B1 EA 029473B1 EA 201491182 A EA201491182 A EA 201491182A EA 201491182 A EA201491182 A EA 201491182A EA 029473 B1 EA029473 B1 EA 029473B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
tetrahydropyrido
pyrrolidin
methoxy
yloxy
methanone
Prior art date
Application number
EA201491182A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201491182A1 (ru
Inventor
Найджел Грэхэм Кук
Пауло Антонио Фернандес Гомес Душ Сантуш
Паскаль Фюре
Кристина Хебах
Клеменс Хегенауэр
Грегори Холлингворт
Кристоф Калис
Иан Левис
Александр Бакстер Смит
Николя Солдерманн
Фредерик Штауффер
Росс Стренг
Франк Штовассер
Никола Туфилли
Анетте Фон Матт
Ромайн Вольф
Фредерик Зекри
Original Assignee
Новартис Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Новартис Аг filed Critical Новартис Аг
Publication of EA201491182A1 publication Critical patent/EA201491182A1/ru
Publication of EA029473B1 publication Critical patent/EA029473B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/541—Non-condensed thiazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/10—Anthelmintics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C07D239/74—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached to ring carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/08—Bridged systems
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Abstract

Изобретение относится к новым вариантам применения ингибиторов PI3K формулы (I) и/или их таутомеров и/или N-оксидов и/или фармацевтически приемлемых солейгде Y, R, Rи m такие, как указано в формуле изобретения, где указанные ингибиторы обладают ингибиторной активностью в отношении изоформы PI3K дельта, для лечения иммунопатологии у индивидуума, страдающего заболеванием или нарушением, выбранным из малярии, лейшманиоза, трипаносомоза, токсоплазмоза и/или нейроцистицеркоза, посредством функционального ингибирования TLR9 инфицированного индивидуума.

Description

Изобретение относится к новым вариантам применения ингибиторов ΡΙ3Κ формулы (I) и/или их таутомеров и/или Ν-оксидов и/или фармацевтически приемлемых солей
где Υ, К1, К2 и т такие, как указано в формуле изобретения, где указанные ингибиторы обладают ингибиторной активностью в отношении изоформы ΡΙ3Κ дельта, для лечения иммунопатологии у индивидуума, страдающего заболеванием или нарушением, выбранным из малярии, лейшманиоза, трипаносомоза, токсоплазмоза и/или нейроцистицеркоза, посредством функционального ингибирования ТБК9 инфицированного индивидуума.
029473
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к новому применению ингибиторов активности или функции семейства фосфоинозитид 3' ОН киназы (здесь и далее ингибиторы ΡΙ3Κ), где указанные ингибиторы обладают ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, и/или их фармацевтически приемлемых солей. Изобретение, кроме того, относится к новому применению производных тетрагидропиридопиримидина в качестве кандидатных лекарственных средств в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли, обладающей ценными лекарственными свойствами, такими как, например, метаболическая стабильность и подходящими фармакокинетическими свойствами, в форме для модуляции, главным образом, ингибирования ΡΙ3Κ, при которой ингибируется активность или функция изоформы дельта ΡΙ3Κ.
Уровень техники
Паразитарные инфекции по-прежнему являются одной из наиболее важных причин заболеваемости и смертности во всем мире. Среди паразитов, которые вызывают патологию у людей и животных, тип Арюошр1еха включает группу трансмиссивных паразитов, которые отвечают за большое число тяжелых заболеваний, включая, но ими не ограничиваясь, малярию, лейшманиоз и трипаносомоз. Только малярией инфицировано 5-10% населения, и она вызывает смерть около двух миллионов человек в год. [8сйойе1б е! а1, 'Тшшцпо1одюа1 ргосеккек ίη ша1апа раШодепекщ", ΝαΙ Кеу 1тт 2005], [§сйой1еб Ь, "Ιηйауакси1аг 1иГН1га1ек апб отдап-кресШс шйашшайоп ίη ша1апа ра!Ьодепекщ], [МщЬта е! а1, "ТЬКк ίη ΟΝδ ГагаЧОс 1иГес11оик", Сигг Тор Мюто Шип 2009], [ВоШеаи е! а1, "ТЬегару оГ уесЮг-Ьогпе рго1о/оаи шГесОопк ίη попепбетю кейтдк", Ехрег! Кеу. Апй шГесй ТЬег., 2011].
То11-подобные рецепторы (ТЬК), кодируемые зародышевой линией, представляют собой филогенетически древние молекулы, которые распознают эволюционные консервативные структуры соответствующих молекул (известных как патоген-ассоциированные молекулярные структуры (РАМР)) микробных патогенов. Различные типы клеток, включая клетки иммунной системы, экспрессируют ТЬК и, тем самым, способны обнаруживать присутствие РАМР. До настоящего времени у человека было описано 10 функциональных членов семейства ТЬК (ТЙК1-10), каждый из которых распознают специфические молекулы РАМР. После распознавания этих специфических РАМР ТЬК индуцируют и контролируют иммунный ответ хозяина против инфекций, вызываемых бактериями, вирусами, грибами и паразитами. [Небауа! е! а1, "Татдейпд оГ ТЬКк: а бесабе оГ ргодгекк ίη сошЬайпд шГесйоик бщеаке", геу1ете, Ьапсе! Шесйоик б1кеаке 2011], |Κπ4ί е! а1, "ТЬКк апб 1йе1г сгокк!а1к χνίΗ о!Ьег 1ппа!е гесерЮгк ίη шГесйоп апб 1шшипйу", геу1ете, Iтшишίу Мау-2011].
Иммунная система инфицированного хозяина отвечает на инфекцию ТЬС-индуцированной продукцией провоспалительных цитокинов, в основном Т-хелперов 1 типа (ТЬ1). В то время как адекватное количество этих цитокинов проявляет целебные свойства и необходимо для уничтожения инфекции, сверхпродукция медиаторов вредна для хозяина и связана с иммунно-опосредованной патологией, включая невропатологию и повреждение тканей с тяжелыми и зачастую фатальными последствиями. Одним из известных и наиболее важных примеров такой иммунно-опосредованной патологии является острая и церебральная малярия (СМ), которая вызывает тяжелые клинические симптомы и нередко приводит к смерти. ЩсНоГ1е1б е! а1, 'Тшшипо1одюа1 ргосеккек ίη ша1апа ра!Ьодепекщ", №! Кеу Iтш 2005], ЩсНоГНеб Ь, "Ш!гауакси1аг НГИга!ек апб огдап-кресШс шйашшайоп ίη ша1апа ра!Ьодепекщ], [МщЬта е! а1, "ТЬКк ίη ΟΝδ Гагакаю 1пГес11опк", Сигг Тор Мюто Шип 2009], [Вобтеаи е! а1, "ТЬегару оГ уесЮг-Ьогпе рго1о/оап шГесйопк ίη попепбетю кейтдк", Ехрег! Кеу. Апй шГес!. ТЬег., 2011] [Небауа! е! а1, "Татдейпд оГ ТЬКк: а бесабе оГ ргодгекк ίη сошЬайпд шГесОопк бщеаке", геу1ете, Ьапсе! ШГесОопк бщеаке 2011]. Несмотря на прогресс, достигнутый в лечении и искоренении малярии, смертность, связанная с тяжелой формой малярии, в том числе с СМ, остается недопустимо высокой. Поэтому подходы, направленные исключительно на уничтожение паразита в организме хозяине, не могут быть достаточными для предотвращения неврологических осложнений и смерти во всех случаях СМ. Следовательно, создание новых инновационных дополнительных терапевтических подходов для эффективного снижения смертности и заболеваемости, связанной с СМ, которые обусловлены, в частности, патологией иммунной системы хозяина, остается срочной медицинской необходимостью [Шддшк е! а1, 'Тшшипора!Ьодепекщ оГ ГаЮрашт ша1апа: ОпрОсаОопк Гог абщпсОуе !Ьегару ίη Не шападешеп! оГ кеуете апб сегеЬга1 ша1апа", Ехрег! Кеу. Апй Шеей ТЬег. 2011].
Недавно было обнаружено еще одно свидетельство того, что ТЬК9 играет основную роль в распознавании и ответе на присутствие паразитов, в том числе, но ими не ограничиваясь, Ρ1акшоб^иш, ЬещЬшаша, Тгурапокоша и Тохор1акша [Со^ба е! а1, "ТЬе ШсШокоте щ !Ье ТЬЮ-кресйтс 01тшпок0ти1а!огу сотропеп! оГ р1акшобшш ГаЮрагит 1Ьа! асйуа!ек ЭСк", ΡΕυδ ΟΝΕ, .Типе 2011], [Ρе^xо!о-Каηде1 е! а1, "Сапб|ба!е депе апа1укщ оГ оси1аг !охор1акшокщ ίη Вга/П: еу1бепсе Гог а го1е Гог ТЬК9", Меш 0щ! Ок\\и1бо С’ги/ 2009], ^Недит е! а1, "ТЬе го1е оГ ТЬКк апб аборОуе 1шшит!у ίη Не беуе1ортеп! оГ рго!есйуе ог ра!Ьо1одщ са1 1шшипе гекропке Оаддегеб Ьу Не Тгурапокоша сги/ί ргоЮ/оап", Ри!иге МютоЬю1 2011], и что воздействие на активацию ТЬК, включая ТЬК9, является многообещающим подходом для предотвращения вредных воспалительных реакции при тяжелой и церебральной малярии [РтапкЬп е! а1, "ТЬетареийса1!агдеОпд оГ пис1ею ашб-кепкшд ТЬКк ргеуеп!к ехрепшеп!а1 сегеЬга1 ша1апа", ΡNАδ 2011].
Малярия является инфекционным заболеванием, вызываемым четырьмя простейшими паразитами:
- 1 029473
Р1а§тойшт ГаЮрагит; Р1а§тойшт \ауах; Р1а§тойшт оуа1е; и Р1а§тойшт та1апа. Эти четыре паразита, как правило, передаются через укус зараженной женской особи малярийного комара. Малярия является проблемой во многих частях света и в течение последних нескольких десятилетий расходы, связанные с малярией неуклонно растут. По некоторым оценкам ежегодно от малярии умирают 1-3 миллиона человек, в основном дети в возрасте до 5 лет. Такой рост смертности от малярии связан отчасти с тем, что Р1а§тойшт £а1с1рагит, самый смертоносный малярийный паразит, приобрел устойчивость почти ко всем имеющимся противомалярийным препаратам, за исключением производных артемизинина.
Лейшманиоз вызывается одним или более 20 видами простейших паразитов, которые принадлежат роду БеЫипаша и передаются через укус женских особей москитов. Лейшманиоз является эндемическим заболеванием приблизительно в 88 странах, в том числе во многих тропических и субтропических областях. Существуют четыре основные формы лейшманиоза. Висцеральный лейшманиоз, также называемый кала-азар, является наиболее тяжелой формой и вызывается паразитом БеЫипаша йоиоуаш. Пациенты, у которых развивается висцеральный лейшманиоз, в отсутствии лечения могут умереть в течение нескольких месяцев. При висцеральном лейшманиозе используют два основных терапевтических средства производные сурьмы - натрий стибоглюконат (РеШоЖпп®) и меглумин антимониат (О1исаийт®). Натрий стибоглюконат применяют в течение приблизительно 70 лет, и растущей проблемой является возникновение резистентности к этому препарату. Кроме того, лечение является относительно долгим и болезненным, и может вызвать нежелательные побочные эффекты.
Африканский трипаносомоз человека, известный также как сонная болезнь, представляет собой трансмиссивное паразитарное заболевание. Соответствующими паразитами являются простейшие, принадлежащие роду Тгурапокота. Они передаются человеку через укусы мухи цеце (род О1о88ша), которые заразились от людей или животных, являющихся носителями этих патогенных паразитов.
Болезнь Чагаса (также называемая американским трипаносомозом) является еще одним паразитарным заболеванием человека, которая является эндемичной среди бедных слоев населения на американском континенте. Заболевание вызывает простейший паразит Тгураиокота сги/ί, который передается человеку через кровососущих насекомых. Болезнь у человека протекает в два этапа: острая стадия, которая происходит вскоре после инфицирования, и хроническая стадия, которая может развиваться в течение многих лет. Хронические инфекции приводят к различным неврологическим расстройствам, в том числе к деменции, повреждению сердечной мышцы, а иногда к растяжению пищеварительного тракта, а также к потере веса. В отсутствие лечения хроническое заболевание нередко приводит к смерти. Препаратами, предназначенными в настоящее время для лечения болезни Чагаса, являются нифуртимокс и бензнидазол. Однако проблемами, связанными с имеющейся терапией, являются разнообразные побочные эффекты, длительность лечения и необходимость медицинского наблюдения в процессе лечения. Кроме того, лечение действительно эффективно только в том случае, если оно начинается во время острой стадии заболевания. Резистентность к двум препаратам первого ряда уже существует. В качестве препарата второго ряда было предложено противогрибковое средство амфотерицин В, но этот препарат является дорогостоящим и относительно токсичным.
Токсоплазмоз является эндемическим заболеванием практически во всем мире, и им может заразиться большая популяция взрослого населения. Тем не менее, его распространенность отличается в различных странах. По некоторым оценкам в северных странах с умеренным климатом заражено не менее 10%, а в странах средиземного моря и в тропических странах - более половины взрослого населения. Тохор1а§та доийи является повсеместно распространенным облигатным внутриклеточным простейшими и считается наиболее распространенной причиной инфекционного ретинита у человека, который зависит от множества факторов, в том числе климата, гигиены и пищевых привычек. Течение болезни у иммунокомпетентных взрослых людей обычно протекает бессимптомно и самоизлечивается. После инфицирования паразит образует латентные кисты в сетчатке и в других органах тела, которые могут повторно активизироваться через годы после первичного инфицирования, приводя к острому ретинохороидиту и к формированию новых ретинохороидальных поражений. [Агеуа1о е( а1, "Оси1аг Тохор1а8то818 ίη (Не йеуе1оршд таг1й", 1йета1. ОрЙЬа1. С1т 2010].
Нейроцистицеркоз является наиболее распространенным паразитарным заболеванием ЦНС (частота встречаемости во всем мире ~2,5 миллиона), вызываемым личинками Таеша 8о1шт. У людей заболевание имеет долгую бессимптомную фазу, характеризующуюся отсутствием выявляемого воспалительного ответа вокруг паразита. Общий иммунный ответ в бессимптомной фазе представляет собой фенотип ТН2. Однако уничтожение личинок при терапевтическом лечении или при обычном истощении паразита вызывает сильный воспалительный ответ, часто состоящий из хронической гранулематозной реакции и проявления типичных симптомов заболевания. Иммунный ответ в ЦНС пациентов с проявлением симптомов состоит из явного фенотипа ТН1 или смешанного ответа ТН1, ТН2 и ТН3, в зависимости от отсутствия или присутствия гранулемы. Гипервоспалительный ответ, преобладающий во время стадии с проявлением симптомов в ЦНС, отвечает за тяжелую невропатологию и смертность, связанную с нейроцистицеркозом [М18Йта е( а1, "ΊΈΚδ ίη СЫ§ РагамОс шТесйопк", Сшт Тор Мюго 1тт 2009].
В связи с вышеуказанным существует значительная потребность в разработке новых эффективных вариантов лечения для контроля над паразитическими заболеваниями, включая заболевания, указанные
- 2 029473
выше, особенно направленных в отношении связанной с ними иммунопатологии.
Сущность изобретения
Изобретение относится к способу лечения иммунопатологии у индивидуума, страдающего заболеванием или нарушением, выбранным из малярии; особенно, острой и церебральной малярии, посредством ингибирования функции ТРК9 у инфицированного индивидуума, включающему введение терапевтически эффективного количества ингибитора ΡΙ3Κ формулы (I), где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, и/или его фармацевтически приемлемых солей, индивидууму, например, человеку, при необходимости такого введения.
Изобретение дополнительно относится к применению ингибитора ΡΙ3Κ формулы (I), где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, и/или его фармацевтически приемлемых солей, для лечения иммунопатологии у индивидуума, страдающего заболеванием или нарушением, выбранным из малярии; особенно, острой и церебральной малярии, посредством ингибирования функции ТРК9 у инфицированного индивидуума.
Изобретение дополнительно относится к применению фармацевтической композиции, содержащей ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, и/или его фармацевтически приемлемые соли, для лечения иммунопатологии у индивидуума, страдающего заболеванием или нарушением, выбранным из малярии; особенно, острой и церебральной малярии, посредством ингибирования функции ТРК9 у инфицированного индивидуума.
Описание фигур
На фиг. 1 описана порошковая рентгенограмма соли лимонной кислоты соединения примера 1
На фиг. 2 описана порошковая рентгенограмма соли фумаровой кислоты примера 1
На фиг. 3 описана порошковая рентгенограмма нападизилата соединения примера 1
На фиг. 4 описана порошковая рентгенограмма фосфатной соли соединения примера 67
На фиг. 5 описана порошковая рентгенограмма соли НС1 соединения примера 67
На фиг. 6 описана порошковая рентгенограмма гиппурата соединения примера 67
На фиг. 7 описана порошковая рентгенограмма безводной формы соединения примера 1
На фиг. 8 описана порошковая рентгенограмма тригидрата соединения примера 1
На фиг. 9 описана порошковая рентгенограмма безводной формы соединения примера 67.
Подробное описание изобретения
Ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение тетрагидропиридопиримидина формулы (Ι) и/или
где Υ выбран из О или ΝΚ3;
К1 выбран из фенила, пиридила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, 1,2,3-триазинила, 1,2,4триазинила, 1,3,5-триазинила, или -С(О)-К4, где
К4 выбран из С1-С8-алкила, галоген-С1-С8-алкила, гидрокси-С1-С8-алкила, С1-С8-алкокси-С1-С8алкила, С1-С8-алкилсульфонил-С1-С8-алкила, гетероциклила, гетероциклилокси, гетероциклил-С1-С8алкила, С3-С12-циклоалкила, С3-С12-циклоалкил-С1-С8-алкила, гетероарила, гетероарилокси, гетероарилС1-С8-алкила, гидрокси, С1-С8-алкокси, амино, №СгС8-алкиламино или Ν,Ν-ди-СгС^алкиламино,
где "С1-С8-алкил" в №СгС8-алкил-амино и Ν,Ν-ди-С^С^алкиламино может быть не замещен или замещен галогеном, гидрокси или С1-С4-алкокси;
где "С3-С12-циклоалкил" в С3-С12-циклоалкиле и С3-С12-циклоалкил-С1-С8-алкиле может быть не замещен или замещен 1-5 заместителями, независимо выбранными из оксо, галогена, С1-С8-алкила, галоген-С1-С8-алкила, гидрокси-С1-С8-алкила, гидроксила, С1-С8-алкокси, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, амино, №СгС8алкиламино, Ν,Ν-ди-СгС^алкиламино, С1-С8-алкилкарбонила,
галоген-С1-С8-алкилкарбонила, гидрокси-С1-С8-алкилкарбонила или С1-С8-алкокси-С1-С8алкилкарбонила;
где "гетероциклил" выбран из оксиранила, азиридинила, оксетанила, тиетанила, ацетитинила, пирролидинила, тетрагидрофуранила, тетрагидротиофенила, 2,3-дигидрофуранила, 2,5-дигидрофуранила, 2,3-дигидротиофенила, 1-пирролинила, 2-пирролинила, 3-пирролинила, тетрагидропиранила, пиперидинила, тетрагидротиопиранила, морфолинила, тиоморфолинила, пиперазинила, азепанила, тиепанила или оксепанила; каждый из которых может быть не замещен или замещен 1-5 заместителями, независимо выбранными из оксо, галогена, С1-С8-алкила, галоген-С1-С8-алкила, гидрокси-С1-С8-алкила, гидроксила, С1-С8-алкокси, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, амино, №СгС8-алкиламино, Ν,Ν-ди-СгС^алкиламино, С1С8-алкилкарбонила, галоген-С1-С8-алкилкарбонила, гидрокси-С1-С8-алкилкарбонила или С1-С8-алкокси- 3 029473
Οι -С8-алкилкарбонила;
где "гетероциклил" может быть присоединен на гетероатоме или атоме углерода, и где гетероатомы N и/или δ также могут быть необязательно окислены до различных степеней окисления;
где "гетероарил" выбран из фуранила, тиофенила, пирролила, имидазолила, пиразолила, тиазолила, изотиазолила, оксазолила, изоксазолила, 1,2,5-оксадиазолила, 1,2,4-оксадиазолила, 1,2,3-оксадиазолила, 1,3,4-оксадиазолила, 1,2,5-тиадиазолила, 1,2,4-тиадиазолила, 1, 2, 3-тиадиазолила, 1, 3, 4-тиадиазолила, 1,2,3-триазолила, 1,2,4-триазолила, 1,2,5-триазолила, пиридила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, 1,2,3-триазинила, 1,2,4-триазинила или 1,3,5-триазинила; каждый из которых замещен или не замещен 1-5 заместителями, независимо выбранными из галогена, С^Сд-алкила, галоген-С^Сд-алкила, гидрокси-С1-С8-алкила, гидроксила, С1-С8-алкокси, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, амино, Ν-Οι-Ο8алкиламино, К^ди-С’гС'к-алкиламино. С1-С8-алкилкарбонила, галоген-С1-С8-алкилкарбонила, гидроксиС1-С8-алкилкарбонила или С1-С8-алкокси-С1-С8-алкилкарбонила; где "гетероарил" может быть присоединен на гетероатоме или атоме углерода, и где гетероатомы N и/или δ также могут быть необязательно окислены до различных степеней окисления;
К2 выбран из фенила, нафтила, пиридила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, хинолинила или изохинолинила, каждый из которых замещен или не замещен 1-5 заместителями, независимо выбранными из галогена, циано, нитро, С1-С8-алкила, галоген-С1-С8-алкила, гидрокси-С1-С8-алкила, гидроксила, С1-С8-алкокси, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, амино, ^С1-С8-алкиламино, Ν,Ν·ήη-Οι-Ο8алкиламино, С1-С8-алкилкарбонила, галоген-С1-С8-алкилкарбонила, гидрокси-С1-С8-алкилкарбонила или С1 -С8-алкокси-С1 -С8-алкилкарбонила;
К3 выбран из Н, С1-С4-алкила или галоген-С1-С4-алкила; и т выбран из 0 или 1.
В рамках изобретения термины, используемые в контексте настоящего изобретения, особенно в формуле изобретения, следует истолковывать как включающие единственное и множественное число, если в настоящем документе не указано иначе или явно не следует из контекста.
Все способы, описываемые в настоящем документе, можно проводить в любом подходящем порядке, если в настоящем документе не указано иначе или явно не следует из контекста. Использование всех без исключения примеров, или слов/словосочетаний для приведения примеров, например, "такой как", приведенных в настоящем документе, предназначены только для лучшего описания изобретения и не предназначены для ограничения объема изобретения, кроме того, который определен в формуле изобретения.
Изобретение может быть лучше понято со ссылкой на нижеприведенное описание, включающее нижеприведенный словарь терминов и примеры в конце описания. В рамках изобретения термины "включающий" и "содержащий" используют в настоящем документе в их открытом неограниченном смысле. При упоминании соединений формулы (I) такое упоминание также включает таутомеры и Νоксиды соединений формулы (I).
Таутомеры, такие как таутомеры кето- и енольной формы, лактам- и лактимной формы, амидной формы и формами имидной кислоты или енаминовой формы и иминовой формы, могут присутствовать, например, в части К1 или К2 соединений формулы (I). Атомы азота тетрагидропиридо-пиримидинового центра соединений формулы (I), а также азот-содержащие остатки гетероциклила и гетероарила, могут образовывать Ν-оксиды.
Если соединения, соли и тому подобное используют во множественном числе, то следует понимать, что такое использование включает также единственное соединение, соль или тому подобное.
Общие термины, которые использованы в настоящем документе выше и далее, в контектсе настоящего описания, предпочтительно, имеют следующие значения, если не указано иначе.
В рамках изобретения термин "алкил" относится к полностью насыщенной разветвленной, включая единичное или множественное разветвление, или неразветвленной углеводородной группе, имеющей вплоть до 20 атомов углерода. Если не указано иного, то алкил относится к углеводородным молекулам, имеющим от 1 до 16 атомов углерода, от 1 до 10 атомов углерода, от 1 до 7 атомов углерода или от 1 до 4 атомов углерода. Характерные примеры алкила в качестве неограничивающих примеров включают метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, втор-бутил, изо-бутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, неопентил, н-гексил, 3-метилгексил, 2,2-диметилпентил, 2, 3-диметилпентил, н-гептил, н-октил, н-нонил, ндецил и тому подобное. Как правило, алкильная группы имеет 1-7, более предпочтительно, 1-4 углеродов.
В рамках изобретения термин "галогеналкил" относится к алкилу, как определено в настоящем документе, который замещен одним или несколькими группами галогена, как определено в настоящем документе. Галогеналкил может быть моногалогеналкилом, дигалогеналкилом или полигалогеналкилом, в том числе пергалогеналкилом. Моногалогеналкил может иметь один йод, бром, хлор или фтор в пределах алкильной группы. Дигалогеналкильная и полигалогеналкильная группы могут иметь два или более одинаковых атомов галогена или комбинацию различных атомов галогена в пределах алкила. Как правило, полигалогеналкил содержит вплоть до 12, или 10, или 8, или 6, или 4, или 3, или 2 групп галогена. Неограничивающие примеры галоген-алкила включают фторметил, дифторметил, трифторметил, хлор- 4 029473
метил, дихлорметил, трихлорметил, пентафторэтил, гептафторпропил, дифторхлорметил, дихлорфторметил, дифторэтил, дифторпропил, дихлорэтил и дихлорпропил. Пергалогеналкил относится к алкилу, у которого все атомы водорода замещены атомами галогена.
В рамках изобретения, в контексте соединений формулы (I), термин "гетероциклил" или "гетероциклический" относится к 3-7-членной моноциклической или 7-10-членныой насыщенной или частично насыщенной кольцевой или циклической системе, которая содержит по меньшей мере один гетероатом, выбранный из Ν, О и 8, где N и δ могут также необязательно быть окислены до различных степеней окисления. "Гетероциклил" может быть присоединен на гетероатоме или атоме углерода. "Гетероциклил" может включать конденсированные кольца или кольца с мостиком, а также спироциклические кольца. Примеры гетероциклов включают оксиранил, азиридинил, оксетанил, тиетанил, ацетитинил, пирролидинил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил, 2,3-дигидрофуранил, 2,5-дигидрофуранил, 2,3дигидротиофенил, 1-пирролинил, 2-пирролинил, 3-пирролинил, тетрагидропиранил, пиперидинил, тетрагидротиопиранил, морфолинил тиоморфолинил, пиперазинил, азепанил, тиепанил и оксепанил.
В рамках изобретения, в контексте соединений формулы (I), термин "гетероарил" относится к 4-, 5-, 6- или 7-членной моноциклической, 7-, 8-, 9-, 10-, 11- или 12-членной бициклической или 10-, 11-, 12-, 13-, 14- или 15-членной трициклической ненасыщенной кольцевой или циклической системе, несущей максимально возможное число конъюгированных двойных связей в кольце(ах), которая содержит по меньшей мере один гетероатом, выбранный из Ν, О и δ, где N и δ могут также быть окислены до различных степеней окисления. "Гетероарил" может быть присоединен на гетероатоме или атоме углерода. "Гетероарил" может включать конденсированные кольца или кольца с мостиком, а также спироциклические кольца. Примеры гетероарила включают фуранил, тиофенил, пирролил, имидазолил, пиразолил, тиазолил, изотиазолил, оксазолил, изоксазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,3-оксадиазолил,1,3,4-оксадиазолил, 1,2,5-тиадиазолил, 1,2,4-тиадиазолил, 1,2,3-тиадиазолил,1,3,4-тиадиазолил, 1,2,3триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,2,5-триазолил, пиридил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, 1,2,3триазинил, 1,2,4-триазинил и 1,3,5-триазинил.
В рамках изобретения термин "циклоалкил" относится к насыщенным или частично ненасыщенным моноциклическим, бициклическим или трициклическим углеводородным группам из 3-12 атомов углерода. Если не указано иного, циклоалкил относится к циклической углеводородной группе, имеющей от 3 до 10 атома углерода кольца или от 3 до 7 атомов углерода кольца. Характерные бициклические углеводородные группы включают октагидроиндил, декагидронафтил. Характерный трициклический углеводород включает бицикло[2.1.1]гексил, бицикло[2.2.1]гептил, бицикло[2.2.1]гептенил, 6,6-диметилбицикло [3.1.1] гептил, 2,6,6-триметилбицикло[3.1.1]гептил, бицикло [2.2.2]октил. Характерные тетрациклические углеводородные группы включают адамантил.
В рамках изобретения термин "окси" относится к -О-связанной группе.
В рамках изобретения термин "карбокси" или "карбоксил" представляет собой -СООН.
В рамках изобретения все заместители указаны таким образом, чтобы показать порядок функциональных(ой) групп(ы), из которых они состоят. Функциональные группы определены в настоящем документе выше.
"Лечение" включает профилактическое (превентивное) и терапевтическое лечение, а также замедляет прогрессирование заболевания или нарушения.
В настоящем документе описаны различные варианты осуществления изобретения. Следует учитывать, что признаки, определенные в каждом варианте осуществления, могут быть объединены с другими определенными признаками, с получением дополнительных вариантов осуществления.
В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемую соль, выбранное из соединения формулы (1а)
где К1, К2 и Υ такие, как определено выше.
В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемую соль, выбранное из соединения формулы (1а')
- 5 029473
где К1, К2 и Υ такие, как определено выше.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемую соль, выбранное из соединения формулы (1Ь)
где К1 и К2 такие, как определено выше.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формулы (Ι) и/или его фармацевтически приемлемую соль, выбранное из соединения формулы (1Ь')
где К1 и К2 такие, как определено выше.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формулы (Ι) и/или его фармацевтически приемлемую соль, выбранное из соединения формулы (1с)
где К1 и К2 такие, как определено выше.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формулы (Ι) и/или его фармацевтически приемлемую соль, выбранное из соединения формулы (1с')
где К1 и К2 такие, как определено выше.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формулы (Ι) и/или его фармацевтически приемлемую соль, выбранное из соединения формулы (Ιά)
где К4 и К2 такие, как определено выше.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формулы (Ι) и/или его фармацевтически приемлемую соль, выбран из соединение формулы (Ιά')
- 6 029473
где К4 и К2 такие, как определено выше.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемую соль, выбранное из соединения формулы (1е)
где К4 и К2 такие, как определено выше.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формулы (Ι) и/или его фармацевтически приемлемую соль, выбранное из соединения формулы (1е')
где К4 и К2 такие, как определено выше.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (I), (1а), (1а')/ (1Ь), (1Ь') (1с), (1с'), (Ιά), (Ιά')/ (1е) или (1е') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К2 выбран из нафтила, пиридила или пиримидинила; каждый из которых замещен или не замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из галогена, циано, нитро, С1-С8-алкила, галоген-С1-С8-алкила, гидрокси-С1-С8-алкила, гидроксила, С1-С8-алкокси, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, амино, Ν-С^С^алкиламино, Ν,Ν-ди-С^С^алкиламино, С1-С8-алкилкарбонила, галоген-С1-С8-алкилкарбонила, гидрокси-С1-С8-алкилкарбонила или С1-С8-алкокси-С1-С8-алкилкарбонила.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (Ι), (Ια), (Ια'), (Ш), (№') ^с), (Ι^), (Ιά), (Ιά'), ^е) или ^е') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К2 выбран из 3-пиридила или 5-пиримидинила; каждый из которых замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, циано, нитро, С1-С8-алкила, галоген-С1-С8-алкила, гидрокси-С1-С8-алкила, гидроксила, С1-С8-алкокси, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, амино, Ν-С^С^алкиламино, Ν,Ν-ди-С^С^алкиламино, С1-С8-алкилкарбонила, галоген-С1-С8-алкилкарбонила, гидрокси-С1С8-алкилкарбонила или С1-С8-алкокси-С1-С8-алкилкарбонила, где один из заместителей расположен в пара-положении относительно места присоединения К2 в центре соединения.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (Ι), (Ια), (Ια'), (Ш), (№') ^с), (Ι^), (Ιά), (Ιά'), ^е) или ^е') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К2 выбран из 3-пиридил или 5-пиримидинил; каждый из которых замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, циано, С1-С4-алкила, галоген-С1-С4-алкила, С1-С4алкокси или амино, где один из заместителей расположен в пара-положении относительно места присоединения К2 в центре соединения.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (Ι), (Ια), (Ια'), (Ш), (№') ^с), (Ι^), (Ιά), (Ιά'), ^е) или ^е') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К2 выбран из 3-пиридила или 5-пиримидинила; каждый из которых замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из фтора, хлора, циано, метила, трифторметила, метокси или амино, где один из заместителей расположен в пара-положении относительно места присоединения К2 в центре соединения.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (Ι), (Ια) или (Ια') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К3 представляет со- 7 029473
бой Н.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (I), (1а), (1а'), (1Ь), (1Ь'), (1с) или (1с') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К1 выбран из фенила, пиридила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, 1,2,3-триазинила, 1,2,4триазинила или 1,3,5-триазинила.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (I), (1а), (1а'), (1Ь), (1Ь'), (1с) или (1с') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К1 выбран из пиридила или пиримидинила.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (I), (1а), (1а'), (1Ь), (1Ь'), (1с) или (1с') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К1 представляет собой -С(О)-К4, где К4 такой, как определено выше.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (Ι), Ца), Ца'), (Ш), (Ш'), Цс) или Цс') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К1 представляет собой -С(О)-К4, где К4 такой, как определено выше.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (Ι), Ца), Ца'), (Ш), (!Ь'), Цс) или Цс'), где К1 представляет собой -С(О)-К4; или соединение формул (И), (И'), (Ιο) или (Ιο') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К4 выбран из С1-С8алкила, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, гетероциклила, гетероциклил-С1-С8-алкила, С3-С12-циклоалкила, гетероарила, С1-С8-алкокси или Ν,Ν-ди-У-С^алкиламино,
где "С1-С8-алкил" в Ν,Ν-ди-У-С^алкил-амино может быть не замещен или замещен галогеном, гидрокси или С1-С4-алкокси;
где "С3-С12-циклоалкил" в С3-С12-циклоалкиле может быть не замещен или замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из оксо, галогена, С1-С8-алкила, гидроксила, С1-С8-алкокси, С1-С8-алкилкарбонила;
где "гетероциклил" выбран из пирролидинила, тетрагидропиранила, пиперидинила, тетрагидротиопиранила, морфолинила или пиперазинила; каждый из которых замещен или не замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из оксо, галогена, С1-С8-алкила, гидроксила, С1-С8-алкокси, С1-С8-алкилкарбонила;
где "гетероциклил" может быть присоединен на гетероатоме или атоме углерода, и где гетероатомы N и/или δ также могут быть необязательно окислены до различных степеней окисления;
где "гетероарил" выбран из фуранила, имидазолила, пиразолила, тиазолила, оксазолила, изоксазолила, 1,3,4-оксадиазолила, пиридила, пиразинила; каждый из которых замещен или не замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из галогена, С1-С8-алкила, гидроксила, С1-С8-алкокси, С1-С8алкил-карбонила;
где "гетероарил" может быть присоединен на гетероатоме или атоме углерода, и где гетероатомы Ν и/или δ также могут быть необязательно окислены до различных степеней окисления.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (Ι), Ца), Ца'), (Ш), (!Ь'), Цс) или Цс'), где К1 -С(О)-К4; или соединение формул (М), (И'), (Ιο) или (Ιο') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К4 выбран из гетероциклила, С4-С8циклоалкила или гетероарила;
где "С3-С12-циклоалкил" может быть не замещен или замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из фтора, С1-С4-алкила, гидроксила, С1-С4-алкокси;
где "гетероциклил" выбран из пирролидинила, тетрагидропиранила, пиперидинила, тетрагидротиопиранила, морфолинила или пиперазинила; каждый из которых замещен или не замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из оксо, галогена, С1-С4-алкила, гидроксила, С1-С4-алкил-карбонила;
где "гетероциклил" может быть присоединен на гетероатоме или атоме углерода, и где гетероатомы N и/или δ также могут быть необязательно окислены до различных степеней окисления;
где "гетероарил" выбран из фуранила, имидазолила, пиразолила, тиазолила, оксазолила, изоксазолила, 1,3,4-оксадиазолила, пиридила, пиразинила; каждый из которых замещен или не замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из С1-С4-алкила, гидроксила;
где "гетероарил" может быть присоединен на гетероатоме или атоме углерода, и где гетероатомы Ν и/или δ также могут быть необязательно окислены до различных степеней окисления.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (Ι), Ца), Ца'), (!Ь), (Ш'), Цс) или Цс'), где К1-С(О)-К4; или соединение формул (М), (И'), (Ιο) или (Ιο') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К4 выбран из гетероциклила;
- 8 029473
где "гетероциклил" выбран из пирролидинила, тетрагидропиранила, пиперидинила, тетрагидротиопиранила, морфолинила или пиперазинила; каждый из которых замещен или не замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из оксо, галогена, С1-С4-алкила, гидроксила, С1-С4-алкилкарбонила;
где "гетероциклил" может быть присоединен на гетероатоме или атоме углерода, и где гетероатомы N и/или 8 также могут быть необязательно окислены до различных степеней окисления.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (I), (1а), (1а'), (1Ь), ЦЬ'). (1с) или (1с'), где К? представляет собой -С(О)-К4; или соединение формул (И), (И'), (1е) или (1е') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К4 выбран из С1-С8алкила, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, С1-С8-алкокси или Ν,Ν-диЮ-С^алкиламино, где "С1-С8-алкил" в Ν,Ν-диЮ-С^алкиламино может быть не замещен или замещен галогеном, гидрокси или С1-С4-алкокси.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (I), (1а), (1а'), (1Ь), ЦЬ'). (1с) или (1с'), где К1 представляет собой -С(О)-К4; или соединение формул (И), (И'), (1е) или (1е') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К4 выбран из С1-С8алкила.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (Ι), Да), Да'), (Ш), (ИЬ'), Цс) или Цс'), где К1 представляет собой -С(О)-К4; или соединение формул (И), (И'), Це) или Це') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К2 выбран из 3пиридила или 5-пиримидинила; каждый из которых замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из фтора, хлора, циано, метила, трифторметила, метокси или амино, где один из заместителей расположен в пара-положении относительно места присоединения К2 в центре соединения и К4 выбран из гетероциклила;
где "гетероциклил" выбран из пирролидинила, тетрагидропиранила, пиперидинила, тетрагидротиопиранила, морфолинила или пиперазинила; каждый из которых замещен или не замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из оксо, галогена, С1-С4-алкила, гидроксила, С1-С4-алкилкарбонила;
где "гетероциклил" может быть присоединен на гетероатоме или атоме углерода, и где гетероатомы N и/или 8 также могут быть необязательно окислены до различных степеней окисления.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формул (Ι), Ца), Ца'), ЦЬ), ЦЬ'), Цс) или Цс'), где К1 представляет собой -С(О)-К4; или соединение формул (И), (И'), Це) или Це') и/или его фармацевтически приемлемую соль, где К2 выбран из 3пиридила или 5-пиримидинила; каждый из которых замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из фтора, хлора, циано, метила, трифторметила, метокси или амино, где один из заместителей расположен в параположении относительно места присоединения К2 в центре соединения и К4 выбран из С1С8-алкила, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, С1-С8-алкокси или Ν,Ν-ди-Ц-Ц-алкиламино, где "С1-С8-алкил" в Ν,Ν-ди-Ц-Ц-алкиламино может быть не замещен или замещен галогеном, гидрокси или С1-С4-алкокси.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение, перечисленное в разделе "Примеры" ниже.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, представляет собой соединение формулы (Ι), выбранное из
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]
пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
{(8)-3-[6-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]
пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
{3-[6-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
2-метокси-5-{4-[(8)-1-(тетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3-ά] пиримидин-6-ил } никотинонитрил;
2-метокси-5-{4-[1 -(тетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-илокси] -7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3ά] пиримидин-6 -ил } никотинонитрил;
1-{(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -ил }-пропан-1-он;
1-{3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}пропан-1-он;
{(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
- 9 029473
{3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
2-амино-5-{4-[(8)-1-(тетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3-6] пиримидин-6-ил } никотинонитрил;
2-амино-5-{4-[1-(тетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3-6]
пиримидин-6-ил}никотинонитрил;
(8)-(3-(6-(5-фтор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси) пирролидин-1-ил) (тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
(3-(6-(5-фтор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
(8)-2-метокси-5-(4-(1-(2-метоксиацетил)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидропиридо [4,3-6] пиримидин-6(5Н)-ил)никотинонитрил;
2-метокси-5-(4-( 1-(2-метоксиацетил)пирролидин-3 -илокси)-7,8-дигидропиридо [4,3-6]пиримидин6(5Н)-ил)никотинонитрил;
(8)-5-(4-( 1 -(циклопентанкарбонил)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидропиридо [4,3-6]пиримидин6(5Н)-ил)-2-метоксиникотинонитрил;
5-(4-(1-(циклопентанкарбонил)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидропиридо[4,3-6]пиримидин-6(5Н)ил)-2-метоксиникотинонитрил;
(2,4-диметилоксазол-5-ил)-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3 -6] пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -ил }метанона;
(2,4-диметилоксазол-5-ил)-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]
пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
фуран-3-ил-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин4-илокси]пирролидин-1 -ил}метанона;
фуран-3-ил-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
фуран-3-ил-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин4-илокси]пирролидин-1 -ил}метанона;
фуран-3-ил-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]
пирролидин-1-ил}-(3-метил-3Н-имидазол-4-ил)метанона;
{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил}-(3-метил-3Н-имидазол-4-ил)метанона;
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]
пирролидин-1-ил}-(2-метилоксазол-4-ил)метанона;
{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2-метилоксазол-4-ил)метанона;
(3-метоксициклобутил)-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6] пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
(3 -метоксициклобутил)-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6] пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
({(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -ил}-оксазол-4-илметанона;
({3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил}-оксазол-4-илметанона;
1-(4-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-карбонил}пиперидин-1-ил)-этанон;
1-(4-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -карбонил}пиперидин-1 -ил)-этанон;
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -ил}-(4-метилоксазол-5 -ил)метанона;
{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил }-(4-метилоксазол-5 -ил)метанона;
5-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -карбонил}-1Н-пиридин-2-он;
5-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -карбонил}-1Н-пиридин-2-он;
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]
пирролидин-1 -ил}-(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанона;
{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил}-(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанона;
- 10 029473
{(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил}-оксазол-4-илметанона;
{3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил}-оксазол-4-илметанона;
{(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил }-оксазол-5-илметанона;
{3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-оксазол-5 -илметанона;
{(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2-метилоксазол-4-ил)метанона;
{3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2-метилоксазол-4-ил)метанона;
{(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2,2-диметилтетрагидропиран-4-ил)метанона;
{3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2,2-диметилтетрагидропиран-4-ил)метанона;
{(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2,4-диметилоксазол-5-ил)метанона;
{3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2,4-диметилоксазол-5-ил)метанона;
(4,4-дифторциклогексил)-{(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]
пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
(4,4-дифтор-циклогексил)-{3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
2-метокси-5-{4-[(§)-1-(2-тетрагидропиран-4-ил-ацетил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Нпиридо [4,3-ά] пиримидин-6 -ил } никотинонитрил;
2-метокси-5-{4-[1-(2-тетрагидропиран-4-ил-ацетил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Нпиридо [4,3-ά] пиримидин-6 -ил } никотинонитрил;
5-{4-[(§)-1-(2,4-диметилоксазол-5-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3^]
пиримидин-6-ил}-2-метоксиникотинонитрил;
5-{4-[1-(2,4-диметилоксазол-5-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3^]пиримидин-6-ил}-2-метоксиникотинонитрил;
5-{4-[(§)-1-(2,2-диметилтетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Нпиридо[4,3^]пиримидин-6-ил}-2-метоксиникотинонитрил;
5-{4-[1-(2,2-диметилтетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3-ά] пиримидин-6-ил }-2-метоксиникотинонитрил;
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3^]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -ил}-(5-метилоксазол-4-ил)метанона;
{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил }-(5-метилоксазол-4-ил)метанона;
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -ил}-(5-метилизоксазол-4-ил)метанона;
{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(5-метилизоксазол-4-ил)метанона;
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4-илокси]
пирролидин-1-ил}-(3-метилизоксазол-4-ил)метанона;
{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил}-(3-метилизоксазол-4-ил)метанона;
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -ил}-(3-метилизоксазол-4-ил)метанона;
{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил}-(3-метилизоксазол-4-ил)метанона;
изоксазол-3 -ил-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3 -ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо |4.3Л|пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
изоксазол-3-ил-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин4-илокси]пирролидин-1 -ил}метанона;
изоксазол-5-ил-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил}метанона;
изоксазол-5-ил-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин4-илокси]пирролидин-1 -ил}метанона;
2-метокси-5-{4-[(§)-1-(тиазол-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3^]пиримидин-6 -ил } никотинонитрил;
- 11 029473
2-метокси-5-{4-[1-(тиазол-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3-й]пиримидин-6 -ил } никотинонитрил;
2-метокси-5-{4-[(3)-1-(1-метил-1Н-пиразол-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Нпиридо [4,3-ά] пиримидин-6 -ил } никотинонитрил;
2-метокси-5-{4-[1 -(1-метил-1Н-пиразол-4-карбонил)пирролидин-3 -илокси]-7,8-дигидро-5Нпиридо [4,3-ά] пиримидин-6 -ил } никотинонитрил;
2-метокси-5-{4-[(3)-1-(1-метил-1Н-пиразол-3-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Нпиридо [4,3-ά] пиримидин-6 -ил } никотинонитрил;
2-метокси-5-{4-[1 -(1-метил-1Н-пиразол-3 -карбонил)пирролидин-3 -илокси]-7,8-дигидро-5Нпиридо [4,3-ά] пиримидин-6 -ил } никотинонитрил;
(2,2-диметилтетрагидропиран-4-ил)-{(3)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-ά] пиримидин-4 -илокси] пирролидин-1-ил } метанона;
(2,2-диметилтетрагидропиран-4-ил)-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-ά] пиримидин-4 -илокси] пирролидин-1-ил } метанона;
(1,1 -диоксогексагидро-1 -лямбда*6*-тиопиран-4-ил)-{(3)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин3- ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3Д]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
(1,1-диоксогексагидро-1-лямбда*6*-тиопиран-4-ил)-{3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
(3)-(2,4-диметилоксазол-5-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3Д]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил)метанона;
(2,4-диметилоксазол-5-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил)метанона;
(3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(тиазол-5-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(тиазол-5-ил)метанона;
(3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(1-метил-1Н-пиразол-5-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(1-метил-1Н-пиразол-5-ил)метанона;
4-((3)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин4- илокси)пирролидин-1-карбонил)пирролидин-2-он;
4- (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-карбонил)пирролидин-2-он;
(3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(пиридин-3 -ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(пиридин-3 -ил)метанона;
(3)-(1Н-имидазол-4-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо
[4,3Д]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил)метанона;
(1Н-имидазол-4-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3ά]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1 -ил)метанона;
5- ((3)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин4-илокси)пирролидин-1-карбонил)пирролидин-2-он;
5-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-карбонил)пирролидин-2-он;
(3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(пиридин-4-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(пиридин-4-ил)метанона;
(3)-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3 -ά] пиримидин-4-илокси)пирролидин-1 -ил)метанона;
(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3 -ά] пиримидин-4-илокси)пирролидин-1 -ил)метанона;
(3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(1Н-пиразол-4-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(1Н-пиразол-4-ил)метанона;
(3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Д]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)метанона;
- 12 029473
(8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(пиразин-2-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(пиразин-2-ил)метанона;
(8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанона;
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(1 -метил-1Н-пиразол-4-ил)метанона;
{3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(1 -метил-1Н-пиразол-4-ил)метанона;
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-тиазол-4-илметанона;
{3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-тиазол-4-илметанона;
{(8)-3-[6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]
пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
{3-[6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
(8)-(3-(6-(6-амино-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
(3-(6-(6-амино-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил) (тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)азетидин-1-ил) (тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
{(8)-3-[6-(2-метокси-пиримидин-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
{3-[6-(2-метокси-пиримидин-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
[(8)-3-(6-хинолин-3-ил-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил](тетрагидропиран-4-ил)метанона;
[3 -(6-хинолин-3-ил-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил](тетрагидропиран-4-ил)метанона;
(8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
(8)-1-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин4-илокси)пирролидин-1 -ил)-3,3-диметилбутан-1 -он;
1-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)-3,3-диметилбутан-1-он;
1-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}пропан-1-он;
1- {3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}пропан-1-он;
2- метокси-5-[4-((8)-1-пропионилпирролидин-3-илокси)-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3-6]пиримидин-6ил]никотинонитрил;
2-метокси-5-[4-(1-пропионилпирролидин-3-илокси)-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3-6]пиримидин-6ил] никотинонитрил;
(8)-6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-4-(1 -(пиридин-2-ил)пирролидин-3 -илокси)5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6] пиримидин;
6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-4-(1-(пиридин-2-ил)пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3 -6] пиримидин;
(8)-6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-4-(1 -(пиримидин-2-ил)пирролидин-3-илокси)5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6] пиримидин;
6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-4-(1-(пиримидин-2-ил)пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3 -6] пиримидин;
(8)-1-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин4-иламино)пирролидин-1-ил)пропан-1-он;
1-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)пропан-1-он;
- 13 029473
(8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил) (тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
(8)-2-метокси-5-(4-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-4-карбонил)пирролидин-3-иламино)-7,8-дигидропиридо[4,3-й]пиримидин-6(5Н)-ил)никотинонитрил;
2-метокси-5-(4-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-4-карбонил)пирролидин-3-иламино)-7,8-дигидропиридо
[4,3-й]пиримидин-6(5Н)-ил)никотинонитрил;
(8)-1-(4-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1 -карбонил)пиперидин-1 -ил)этанон;
1-(4-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин4-иламино)пирролидин-1 -карбонил)пиперидин-1 -ил)этанон;
(2,2-диметилтетрагидро-2Н-пиран-4-ил)((8)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-й] пиримидин-4-иламино)пирролидин-1 -ил)метанона;
(2,2-диметилтетрагидро-2Н-пиран-4-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3-й] пиримидин-4-иламино )пирролидин-1-ил)метанона;
(8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4иламино)пирролидин-1 -ил) (оксазол-5-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(оксазол-5-ил)метанона;
((8)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил) ((18,4К)-4-метоксициклогексил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4иламино)пирролидин-1 -ил)((18,4К)-4-метоксициклогексил)метанона;
((8)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил) ((1К,48)-4-метоксициклогексил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)((1К,48)-4-метоксициклогексил)метанона;
((18,4К)-4-гидроксициклогексил)((8)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3 -й] пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанона;
((18,4К)-4-гидроксициклогексил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3-й] пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанона;
((1К,48)-4-гидроксициклогексил)((8)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3 -й] пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанона;
((1К,48)-4-гидроксициклогексил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3 -й] пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанона;
(8)-(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино)
пирролидин-1-ил)(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино)
пирролидин-1-ил)(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанона;
(8)-(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино) пирролидин-1 -ил)(оксазол-5-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино) пирролидин-1 -ил)(оксазол-5-ил)метанона;
(8)-(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино)
пирролидин-1-ил)(оксазол-4-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино)
пирролидин-1-ил)(оксазол-4-ил)метанона;
(2,2-диметилтетрагидро-2Н-пиран-4-ил)((8)-3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3 -й] пиримидин-4-иламино)пирролидин-1 -ил)метанона;
(2,2-диметилтетрагидро-2Н-пиран-4-ил)(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3 -й] пиримидин-4-иламино)пирролидин-1 -ил)метанона;
(8)-1-(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)пропан-1-он;
1-(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино)
пирролидин-1-ил)пропан-1-он;
(8)-(3-(6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
(3-(6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
(8)-(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино)
пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
- 14 029473
(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-иламино)
пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
(тетрагидропиран-4-ил)-{(8)-3-{6-(5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]
пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил}метанона;
(тетрагидропиран-4-ил)-{3-{6-(5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил}метанона;
(8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(4-метилпиперазин-1-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(4-метилпиперазин-1-ил)метанона;
(8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(морфолино)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(морфолино)метанона;
(8)-(4-гидроксипиперидин-1-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6] пиримидин-4-илокси)пирролидин-1 -ил)метанона;
4-гидроксипиперидин-1-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил)метанона;
(8)-Ы-(2-гидроксиэтил)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси)-Ы-метилпирролидин-1-карбоксамид;
Ы-(2-гидроксиэтил)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,36]пиримидин-4-илокси)-Ы-метилпирролидин-1-карбоксамид;
(8)-1-(4-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6] пиримидин-4-илокси)пирролидин-1 -карбонил)пиперазин-1 -ил)этанон;
1- (4-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин4-илокси)пирролидин-1-карбонил)пиперазин-1-ил)этанон;
(8)-2-метокси-5-(4-(1-(морфолин-4-карбонил)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидропиридо[4,3-6]пиримидин-6(5Н)-ил)никотинонитрил;
2- метокси-5-(4-(1-(морфолин-4-карбонил)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидропиридо[4,3-6]пиримидин-6(5Н)-ил)никотинонитрил;
(8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(оксазол-4-ил)метанона;
(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(оксазол-4-ил)метанона;
1-(4-{(§)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбонил}-пиперидин-1-ил)этанон;
1-(4-{3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-карбонил}пиперидин-1-ил)этанон;
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(3 -метил-3Н-имидазол-4-ил)метанона;
{3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(3-метил-3Н-имидазол-4-ил)метанона;
{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-оксазол-5 -илметанона;
{3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-оксазол-5 -илметанона;
{(8)-3-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона; или
{3-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона.
В виду близкой связи соединений формулы (I) в свободной форме и соединений в форме их солей, включая такие соли, которые можно использовать в качестве промежуточных соединений, например, при очистке или идентификации новых соединений, любая ссылка на соединения или соединение формулы (I) здесь и далее в настоящем документе следует понимать как относящуюся к соединениям в свободной форме и/или также к одной или нескольким их солям, при необходимости и в соответствующем случае.
Соединения формулы (I) или их соли получают в соответствии со способами, известными рег ке, но ранее не описанными для получения соединений формулы (I).
В рамках изобретения термин "фармацевтически приемлемые соли" относится к солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства ингибиторов И3К, где указанные ингибиторы имеют ингибиторную активность в отношении изоформы дельта И3К, и, которые, как правило, не являются нежелательными биологически или иначе. Во многих случаях, ингибиторы И3К, где указанные ингибиторы имеют ингибиторную активность в отношении изоформы дельта Р!3К. используемые в настоящем
- 15 029473
изобретении способны образовывать соли кислот и/или оснований в силу присутствия амино и/или карбоксильных групп или групп, аналогичным им.
Фармацевтически приемлемые соли добавления кислот могут образоваться с неорганическими кислотами и органическими кислотами, например, соли ацетат, аспартат, бензоат, безилат, бромид/гидробромид, бикарбонат/карбонат, бисульфат/сульфат, камфорсульфонат, хлорид/гидрохлорид, хлортеофиллонат, цитрат, этандисульфонат, фумарат, глюцептат, глюконат, глюкуронат, гиппурат, йодогидрат/йодид, изетионат, лактат, лактобионат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, манделат, мезилат, метилсульфат, нафтоат, напсилат, никотинат, нитрат, октадеканоат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, фосфат/водород фосфат/гидрофосфат, полигалактуронат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфосалицилат, тартрат, тозилат и трифторацетат.
Неорганические кислоты из которых могут быть получены соли включают, например, хлористоводородную кислоту, бромисто-водородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, фосфорную кислоту и тому подобное.
Органические кислоты, из которых могут быть получены соли, включают, например, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, гликолевую кислоту, щавелевую кислоту, малеиновую кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, фумаровую кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, бензойную кислоту, миндальную кислоту, метансульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, толуолсульфоновую кислоту, сульфосалициловую кислоту и тому подобное. Фармацевтически приемлемые соли добавления оснований могут быть получены с неорганическими и органическими основаниями.
Неорганические основания, из которых могут быть получены соли, включают, например, соли аммония и соли металлов из 1-12 колонок периодической таблицы. В определенных вариантах осуществления соли получены из натрия, калия, аммония, кальция, магния, железа, серебра, цинка и меди; особенно подходящие соли включают соли аммония, калия, натрия, кальция и магния.
Органические основания, из которых могут быть получены соли, включают, например, первичные, вторичные и третичные амины, замещенные амины, включая природные замещенные амины, циклические амины, основные ионообменные смолы и тому подобное. Некоторые органические амины включают изопропиламин, бензатин, холинат, диэтаноламин, диэтиламин, лизин, меглумин, пиперазин и трометамин.
Фармацевтически приемлемые соли по настоящему изобретению могут быть синтезированы из родительских соединений, основных или кислых молекул, общепринятыми химическими способами. Обычно, такие соли могут быть получены путем взаимодействия этих соединений в форме свободных кислот со стехиометрическим количеством подходящего основания (например, гидроксида, карбоната, бикарбоната или тому подобное Ыа, Са, Мд или К), или путем взаимодействия этих соединений в форме свободных оснований со стехиометрическим количеством подходящей кислоты. Такие реакции, как правило, осуществляют в воде или в органическом растворителе, или в их смеси. Обычно желательно использовать неводную среду, такую как простой эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил, если это возможно. Перечень других подходящих солей можно найти, например, в "ВеттдЮп'х Рйагтасеийса1 Зшепсез", 204Ь ей., Маск РиЪНкЫпд Сотрапу, ЕаЧоп. Па., (1985); и ΐη "НапйЪоок οί Рйагтасеийса1 8аЙ5: Ргорегйез, 8е1есйоп, апй Изе" Ъу 5>1ак1 и АегтШк (Айеу-УСН, Аеткетт Сегтапу, 2002).
Для целей выделения или очистки также возможно использовать фармацевтически неприемлемые соли, например, пикраты или перхлораты. Для терапевтического применения используют только фармацевтически приемлемые соли или свободные соединения.
В рамках изобретения термин "индивидуум" относится к животному. Как правило, животным является млекопитающее. К индивидууму также относятся, например, приматы (например, люди), коровы, овца, козы, лошади, собаки, кошки, кролики, крысы, мыши, рыба, птицы и тому подобное. В определенных вариантах осуществления индивидуумом является примат. В других вариантах осуществления индивидуумом является человек.
В рамках изобретения, термин "ингибирует", "ингибирование" или "ингибирующий" относится к уменьшению или подавлению указанного состояния, симптома или нарушения, или заболевания, или значимое снижение основных показателей биологической активности или процесса.
В рамках изобретения, термин "лечить", "лечащий" или "лечение" любого заболевания или нарушения относится в одном из вариантов осуществления к улучшению состояния заболевания или нарушения (т.е., замедлению или прекращению или снижению развития заболевания или по меньшей мере одного из его клиническим симптомов). В другом варианте осуществления "лечить", "лечащий" или "лечение" относится к облегчению или улучшению состояния в отношении по меньшей мере одного физического параметра, включая параметры, которые могут быть заметны для пациента. В еще одном варианте осуществления "лечить", "лечащий" или "лечение" относится к модулированию заболевания или нарушения, либо физически, (например, стабилизация заметного симптома), физиологически, (например, стабилизация физического параметра), либо одновременно и физически, и физиологически. В еще одном варианте осуществления "лечить", "лечащий" или "лечение" относится к профилактике или задержке развития заболевания или нарушения.
В рамках изобретения индивидуум "нуждается" в лечении, если такое лечение будет биологически
- 16 029473
эффективно, эффективно с медицинской точки зрения или улучшит качество жизни.
Термин "вводимые" или "введение" данного соединения обозначает предоставление ингибитора ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, индивидууму, нуждающемуся в лечении. Введение "в комбинации с" одним или несколькими дополнительными терапевтическими средствами включает одномоментное (конкурентное) и последовательное введение в любом порядке и любым путем введения.
Изобретение также относится к применению фармацевтических композиций, содержащих ингибитор ΡΙ3Κ, где указанные ингибиторы обладают ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ.
Изобретение, таким образом, относится к применению
фармацевтической композиции, содержащей ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, и один или несколько носителей/эксципиентов;
фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество ингибитора ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, и один или несколько фармацевтически приемлемых носителей/эксципиентов.
В рамках изобретения термин "фармацевтически приемлемый носитель" включает какие бы то ни были растворители, диспергирующую среду, агенты покрытия, поверхностно-активные вещества, антиоксиданты, консерванты (например, антибактериальные средства, противогрибковые средства), средства для придания изотоничности, средства, замедляющие абсорбцию, соли, консерванты, лекарственные средства, стабилизаторы лекарственных средств, связывающие средства, эксципиенты, дезинтегрирующие средства, смазывающие средства, подсластители, ароматизаторы, красители и тому подобное, и их сочетания, которые известны специалистам в данной области (см., например, РспипдЮп'х Ρ1ι;·ιπη;·^ιιΐΚ;·ι1 8с1еисе8, 18* Еб. Маек Ρτίηΐίη§ Сотрапу, 1990, рр. 1289-1329). Предполагается, что любой общепринятый носитель может быть использован в терапевтических или фармацевтических композициях, за исключением случаев, когда он несовместим с активным ингредиентом.
Настоящее изобретение относится к применению фармацевтической композиции, содержащей ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтическая композиция можно быть получена для конкретных путей введения, таких как пероральный путь введения, парентеральный путь введения и ректальный путь введения, и тому подобное. Кроме того, фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть получены в твердой форме (включая, но ими не ограничиваясь, капсулы, таблетки, пилюли, гранулы, порошки или суппозитории), или в жидкой форме (включая, но ими не ограничиваясь, растворы, суспензии или эмульсии). Фармацевтические композиции могут подвергаться общепринятым фармацевтическим процедурам, таким как стерилизация и/или могут содержать общепринятые инертные разбавители, смазки или буферные средства, а также адъюванты, такие как консерванты, стабилизаторы, средства для смачивания, эмульгаторы и буферы, и тому подобное.
Как правило, фармацевтические композиции представляют собой таблетки или желатиновые капсулы, содержащие активный ингредиент вместе с:
a) разбавителями, например лактозой, декстрозой, сахарозой, маннитом, сорбитом, целлюлозой и/или глицином;
b) смазывающими средствами, например диоксидом кремния, тальком, стеариновой кислотой, ее солями магния или кальция и/или полиэтиленгликолем;
для таблеток также
c) связывающие средства, например, алюмосиликат магния, паста из крахмала, желатин, трагакант, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза натрия и/или поливинилпирролидон; при желании
б) дезинтегранты, например крахмалы, агар, альгиновая кислота или ее соль натрия, или шипучие смеси; и/или
е) абсорбенты, красители, вкусовые добавки и подсластители.
Таблетки могут быть либо покрыты пленкой, либо энтеросолюбильным покрытием в соответствии со способами, известными в данной области.
Подходящие композиции для перорального введение включают эффективное количество ингибитора ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы дельта ΡΙ3Κ, в форме таблеток, таблеток-леденцы, водных или масляных суспензий, диспергируемых порошков или гранул, эмульсий, твердых или мягких капсул, или сиропов или эликсиров. Композиции, предназначенные для перорального применения, получают в соответствии с любым известным в данной области способом для получения фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать один или несколько средств, выбранных из группы, состоящей из подсластителей, ароматизаторов, красителей и консервантов для получения фармацевтически удобных и приятных на вкус препаратов. Таблетки могут содержать активный ингредиент в смеси с нетоксическими фармацевтически приемлемыми эксципиентами, которые подходят для получения таблеток. Эти эксципиенты представляют собой, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция или фос- 17 029473
фат натрия; гранулирующие и дезинтегрирующие средства, например, кукурузный крахмал, или альгиновая кислота; связывающие средства, например, крахмал, желатин или гуммиарабик; и смазывающие средства, например, стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Таблетки не покрывают или покрывают известными способами для замедления дезинтеграции и абсорбции в желудочно-кишечном тракте и, следовательно, обеспечивая длительное действие в течение большего периода времени. Например, можно использовать замедляющее вещество, такое как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат. Составы для перорального применения могут присутствовать в виде твердых желатиновых капсул, где активный ингредиент смешивают вместе с инертным твердым разбавителем, например, карбонат кальция, фосфат кальция или каолин, или в виде мягких желатиновых капсул, где активный ингредиент смешивают с водной или масляной средой, например, арахисовым маслом, парафиновым маслом или оливковым маслом.
Некоторые композиции для инъекций являются водными изотоничными растворами или суспензиями, а суппозитории получают преимущественно из жирных эмульсий или суспензий. Указанные композиции могут быть стерилизованы и/или содержать адъюванты, такие как консерванты, стабилизаторы, смачивающие или эмульгирующие средства, раствор промоторов, соли для регуляции осмотического давления и/или буферы. Кроме того, также они могут содержать другие терапевтически значимые вещества. Указанные композиции получают в соответствии с общепринятыми способами смешивания, гранулирования или покрытия, соответственно, и они содержат приблизительно 0,1-75%, или приблизительно 1-50%, активного ингредиента.
Подходящие композиции для трансдермального применения включают эффективное количество ингибитора ΡΚΚ, где указанный ингибитор оказывает ингибиторное действие на изоформу ΡΒΚ дельта, и подходящий носитель. Носители, подходящие для трансдермальной доставки включают абсорбируемые фармакологически приемлемые растворители, способствующие проникновению через кожу индивида. Например, трансдермальные устройства находятся в форме бандажа, содержащего опорный элемент, резервуар, содержащий ингибитор ΡΒΚ, где указанный ингибитор оказывает ингибиторное действие на изоформу ΡΒΚ дельта, необязательно, вместе с носителями, необязательно, вместе с контролирующим скорость барьером для доставки ингибитора ΡΒΚ, где указанный ингибитор оказывает ингибиторное действие на изоформу ΡΒΚ дельта кожи, в кожу индивида с контролируемой и предварительно определенной скоростью в течение длительного периода времени, и средства для присоединения устройства к коже.
Подходящие композиции для местного применения, например, нанесения на кожу и в глаза, включают водные растворы, суспензии, мази, кремы, гели или распыляемые составы, например, для доставки аэрозоля или тому подобное. Такие местные системы доставки, в частности, подходят для применения на коже, например, для лечения рака кожи, например, для профилактического применения в солнцезащитных кремах, лосьонах, спреях и тому подобное. Таким образом, они, в частности, подходят для использования в местных, в том числе косметических, составах, хорошо известных в данной области. Такие составы могут содержать солюбилизаторы, стабилизаторы, агенты, усиливающие тоничность, буферы и консерванты.
Используемый в настоящем описании местное применение может также относиться к ингаляции или интраназальному применению. Они могут быть легко доставлены в виде сухого порошка, либо по отдельности, в виде смеси, например, сухой смеси с лактозой, либо в виде смеси частиц компонентов, например, с фосфолипидами, из сухого порошкового ингалятора или аэрозольного спрея из контейнера под давлением, с насосом, спреем, пульверизатором или небулайзером, с использованием или без использования подходящего пропеллента.
Настоящее изобретение также относится к применению безводных фармацевтических композиций и лекарственных форм, содержащих ингибиторы ΡΒΚ, где указанные ингибиторы оказывают ингибиторное действие на изоформы ΡΒΚ дельты в качестве активных ингредиентов, поскольку вода может способствовать деградации некоторых соединений.
Безводные фармацевтические композиции и лекарственные формы по изобретению могут быть получены с использованием безводных ингредиентов или ингредиентов с низкой влажностью или в условиях низкой влажности. Безводная фармацевтическая композиция может могут быть получена и храниться таким образом, чтобы сохранялась его безводная природа. Соответственно, безводные композиции упакованы с использованием материалов, известных как препятствующие контакту с водой, так что они могут быть включены в соответствующие рецепторные наборы. Примеры подходящих упаковывающих материалов включают, но ими не ограничиваются, герметически запечатанные пленки, пластик, контейнеры для единичных доз, например, флаконы, блистерные упаковки и контурные упаковки.
Кроме того, изобретение относится к применению фармацевтических композиций и лекарственных форм, которые содержат один или несколько агентов, снижающих скорость, с которой ингибитор ΡΒΚ в качестве активного ингредиента будет разлагаться, где указанный ингибитор оказывает ингибиторное действие на изоформу ΡΒΚ дельта. Такие агенты, которые указаны в настоящем описании как "стабилизаторы", включают, но ими не ограничиваются, антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота, рН буферы или солевые буферы и тому подобное.
- 18 029473
Примеры физиологически приемлемых носителей включают
буферы, такие как фосфат, цитрат и другие органические кислоты; антиоксиданты, включающие аскорбиновую кислоту;
низкомолекулярные (менее приблизительно 10 остатков) полипептиды;
белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины; хелатирующие агенты, такие как ЭДТА;
сахарные спирты, такие как маннит или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие как ΤνΕΕΝ®, полиэтиленгликоль (ΡΕΟ) и
ΡΕυΡΟΝΙΌδ®.
Подходящие эксципиенты/носители могут быть любым твердым, жидким, полутвердым или, в случае аэрозольной композиции, газообразным эксципиентом, который обычно доступен специалисту в данной области.
Твердые фармацевтические эксципиенты включают крахмал, целлюлозу, тальк, глюкозу, лактозу, сахарозу, желатин, солод, рис, муку, мел, силикагель, стеарат магния, стеарат натрия, моностеарат глицерина, хлорид натрия, сухое обезжиренное молоко и тому подобное.
Жидкие и полутвердые эксципиенты могут быть выбраны из глицерина, пропиленгликоля, воды, этанола и различных масел, включая керосин, масла животного, растительного или синтетического происхождения, например, арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло и тому подобное. Предпочтительные жидкие носители, особенно для инъецируемых растворов, включают воду, физиологический раствор, водную декстрозу и гликоли.
Сжиженные газы могут использоваться для диспергирования соединения в виде аэрозоля. Инертные газы, подходящие для этой цели, представляет собой азот, диоксид углерода и тому подобное. Другие подходящие фармацевтические эксципиенты и их композиции описаны в КепипдЮп в ΡЬα^тасеиί^са1 8с1еисе8, под редакцией Ε.ν. Μαιΐίη (Μаск ΡιιΝίδΙιίηβ Сοтραηу, 18'1' еб., 1990).
Доза активного ингредиента зависит от заболевания, на которое направлено лечение, и от вида, возраста, веса и индивидуального состояния, индивидуальных фармакокинетических данных и пути введения. Количество активного ингредиента в композиции может изменяться в пределах полного диапазона, используемого специалистами в данной области.
Фармацевтические композиции, содержащие ингибитор ΡΙ3Κ, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы ΡΙ3Κ дельта в комбинации по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем (например, эксципиентом и/или разбавителем) могут быть получены обычным способом, например, обычными способами смешения, грануляции, нанесения покрытия, растворения или лиофилизации.
Структура активных агентов, определенных кодовыми номерами, родовые или торговые названия могут быть взяты из современного издания стандартного руководства "Тке Мегск Iибеx" или из баз данных, например, международные патенты, например, ΙΜδ νοιίά ΡιιΝΕαΙίοηδ. Вышеуказанные соединения, которые могут быть использованы в комбинации с 8, где указанный ингибитор оказывает ингибиторное действие на изоформу ΡΙ3Κ дельта, могут быть получены и введены, как описано в уровне техники, например, в документах, указанных выше.
Ингибиторы ΡΙ3Κ, где указанные ингибиторы оказывают ингибиторное действие на изоформу ΡΙ3Κ дельта, также могут быть эффективно использованы в комбинации с известными терапевтическими методами.
Подобное описание экспериментов
Поскольку получение исходных веществ подробно не описано, то соединения являются известными или могут быть получены аналогично способам, известным в данной области, или как описано ниже.
Следующие примеры иллюстрируют изобретение, но ими не ограничиваются.
Аббревиатуры
Аг- арил
АсОН - уксусная кислота водн. - водный Аг- арил
ВОС - трет-бутилкарбонат гексафторфосфат бензотриазол-1-илокситрис
ВОР - (диметиламино)фосфония
ушир. с - уширенный синглет
БСА - бычий сывороточный альбумин
СГОСЕ, - хлороформ-ά
ΕΌΙ - 1,1'-карбонилдиимидазол
СН2С12 - дихлорметан
СН3СЫ - ацетонитрил
- 19 029473
С82СОз - карбонат цезия
д- дублет
дд - двойной дублет
ΌΙΡΕΑ - Ν-этилдизопропиламин
ΌΜΕ - 1,4-диметоксиэтан
ДМФ - Ν,Ν-диметилформамид
ΌΒυ - 1,8-диаза-7-бицикло[5.4.0]ундецен
ДМСО - диметилсульфоксид
дт - дублет триплетов
ЕЭС - гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида
экв. - эквивалент
ЕЮАс - этилацетат
РСС - колоночная флэш-хроматография
ч - час
ΗΒΤυ - гексафторфосфат (2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония
НС1 - соляная кислота
НОВТ - бензтриазол-1-ол
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография
ВЭ - высокоэффективная
Н2О - вода
Нуйо - клеточноая среда Нуйо δηροΓ
ΙΡΝ - интерферон (например, ШЫ-а=интерферон-а)
ГЬ интерлейкин (например, ГР-б^нтерлейкин-б)
РоИНс® δСX-2 - полимер с подложкой из макропористого полистерола с сульфоновой кислотой Κ- кельвин
1<2СО3 - карбонат калия
ЬС - жидкостная хроматография
М - моль
ΜеСN - ацетонитрил
МсОЭ - метанол-б4
МеОН - метанол
2-Ме-ТГФ - 2-метилтетрагидрофуран
М^О4 - сульфат магния
МГц - мега Герц
Μδ - масс-спектроскопия
м - мультиплет
мБар - милли Бар
мл - миллилитр
мм - миллиметр
мМ - миллимоль
мин. - минута
микроволн. п. - микроволновая печь
№ЮН - гидроксид натрия
№-1+О.-| - сульфат натрия
№-1НСО3 - гидрокарбонат натрия
№ЮВи - натрий трет-бутоксид
ΝΕΐ3 - триэтиламин
ΝΗ3 - аммиак
ΝΗ.-ΟΗ - концентрированный раствор аммиака в воде с удельной плотностью 0,88
ΝΜΡ - Ν-метилпирролидинон
ЯМР - ядерно-магнитный резонанс
ОВЭ - оптимальная плотность слоя
Ρά^ΑοΕ - ацетат палладия
Ρά^Η^/Ο - гидроксид палладия на угле
Ρά2(άЬа)3 - трис(дибензилиденацетон)дипалладий
Ρά2(άЬа)3·СΗС13 - комплекс трис(дибензилиденацетон)дипалладий · хлороформ
ΡΕ-ΗίΌ, МР - полимер с подложкой из макропористого гидрокарбонатного полистирола Ρ^-δО3Η ΜΡ - полимер с подложкой из макропористого полистерола с сульфоновой кислотой комн.темп. - комнатная температура
К1 - время удержания
с - синглет
- 20 029473
8СХ-2 -полимер с подложкой из макропористого полистирола с сульфоновой кислотой т- триплет
ТВМЕ - трет-бутилметиловый эфир
ГВиОК - калий трет-бутоксид трет-ВнОШ - натрий трет-бутоксид ТФУ - трифторуксусная кислота ТГФ - тетрагидрофуран
СЭЖХ - сверхэффективная жидкостная хроматография
Х-РЬо8 - дициклогексил(2',4',6'-триизопропилбифенил-2-ил)фосфин.
Были использованы микроволновые устройства ВюГаде [ηίΙίαΙΟΓ®.
Все соединения были обозначены с использованием ΛιιΙοΝοιη.
Использованные способы ЖХМС:
ЬС способ 1 (КГ'1'1): время удержания (КГ) получали на системе ВЭЖХ ЛдПепГ с колонкой ΑδсепГ18®Ехрге88 С18 30x2,1 мм, 2,7 мкм (§ире1со), используя градиент (Н2О+0,05% муравьиная кислота +3,75 мМ ацетат аммония)/(СН3С^0,04% муравьиная кислота) от 90/10 до 5/95 в течение 3,7 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя, а затем 5/95 в течение 0,7 мин с 1,4 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С. Способ определения УФ 220-400 нм - Μδ.
ЬС способ 2 (КГ(2)): время удержания (КГ) получали на системе ВЭЖХ ЛдПеШ с колонкой ΑδсепГ18®Ехрге88 С18 30x2,1 мм, 2,7 мкм ^ире1со), используя градиент (Н2О+0,05% муравьиная кислота+3,75 мМ ацетат аммония)/(СН3С№0,04% муравьиная кислота) от 95/5 до 5/95 в течение 3,7 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя, а затем 5/95 в течение 0,7 мин с 1,4 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С. Способ определения УФ 220-400 нм - Μδ.
ЬС способ 3 (КГ3'): время удержания (КГ) получали на системе ВЭЖХ АдПепГ с колонкой ΑδсеηГ^δ®Еxр^еδδ С18 30x2,1 мм, 2,7 мкм ^ире1со), используя градиент (Н2О+0,05% муравьиная кислота+3,75 мМ ацетат аммония)/(СН3СN+0,04% муравьиная кислота) 99/1 в течение 0,5 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя, затем от 99/1 до 5/95 в течение 1,7 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя, а затем 5/95 в течение 0,7 мин с 1,4 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С. Способ определения УФ 220-400 нм - Μδ.
ЬС способ 4 (КГ(4)): время удержания (КГ) получали на системе ВЭЖХ АдПепГ с колонкой ΑδсеηГ^δ®Еxр^еδδ С18 30x2,1 мм, 2,7 мкм ^ире1со), используя градиент (Н2О+0,05% муравьиная кислота+3,75 мМ ацетат аммония)/(СН3С№0,04% муравьиная кислота) от 90/10 до 5/95 в течение 1,7 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя, а затем 5/95 в течение 0,7 мин с 1,4 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С. Способ определения УФ 220-400 нм - Μδ.
ЬС способ 5 (КГ(5)): время удержания (КГ) получали на системе ВЭЖХ АдПепГ с колонкой ΑδсеηГ^δ®Еxр^еδδ С18 30x2,1 мм, 2,7 мкм ^ире1со), используя градиент (Н2О+0,05% ТФУ) / (СН3С№0,04% ТФУ) от 95/5 до 5/95 в течение 3,7 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя, а затем 5/95 в течение 0,7 мин с 1,4 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С. Способ определения УФ 220-400 нм - Μδ.
ЬС способ 6 (КГ(6)): Время удержания (КГ) получали на системе ВЭЖХ ЛдПеШ с колонкой ΑδсеηГ^δ®Еxр^еδδ С18 30x2,1 мм, 2,7 мкм ^ире1со), используя градиент (Н2О+ТФУ)/(СН3С№0,04% ТФУ) 99/1 в течение 0,5 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя, затем от 99/1 до 5/95 в течение 1,7 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя, а затем 5/95 в течение 0,7 мин с 1,4 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С. Способ определения УФ 220-400 нм - Μδ.
ЬС способ 7 (КГ(7)): время удержания (КГ) получали на системе ВЭЖХ АаГеге ΑβίΚηΙ с колонкой ΑδсеηГ^δ®Еxр^еδδ С18 30x2,1 мм, 2,7 мкм ^ире1со), используя градиент (Н2О+0,05% ТФУ) / (СН3С№0,04% ТФУ) от 90/10 до 5/95 в течение 1,7 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя, а затем 5/95 в течение 0,7 мин с 1,4 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С. Способ определения УФ 220-400 нм - Μδ.
ЬС способ 8 (КГ(8)): время удержания (КГ) получали на системе ВЭЖХ АаГеге а1капсе-НТ с колонкой ХТегга Μδ С18, 50x4,6 мм, 5 мкм, обратная фаза, используя градиент (Н2О+0,1% ТФУ) / (СН3С№0,1% ТФУ) от 95/5 до 0/100 в течение 8,0 мин и 2,0 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 45°С. Способ определения УФ 220-400 нм - Μδ.
ЬС способ 1' (КГ'1'): время удержания (КГ) получали на системе ВЭЖХ АаГеге а1капсе-НТ с колонкой ХВгШде Μδ С18 30/3,0 2,5м, используя градиент Н2О (+0,1% муравьиная кислота)/СН3СN (+0,1% муравьиная кислота) от 90/10 до 5/95 в течение 1,7 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С.
ЬС способ 2' (КГ(2)): время удержания (КГ) получали на системе ВЭЖХ АаГеге а1капсе-НТ с колонкой ХВпсТде Μδ С18 30/3,0 2,5 м, используя градиент Н2О (+0,1% ТФУ)/СН3СN (+0,1% ТФУ) от 90/10 до 5/95 в течении 1,7 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С.
- 21 029473
РС метод 3' (Κΐ(3)): время удержания (Κΐ) получали на системе ВЭЖХ ΥΧΙοίβ аШапее-НТ с колонкой ХВпОде М3 С18 30/3,0 2,5 м, используя градиент Н2О (+0,1% ТФУ)/СН3СЪГ (+0,1% ТФУ) от 95/5 до 5/95 в течение 3,7 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С.
ЬС метод 4' (Κΐ(4')): время удержания (Κΐ) получали на системе ВЭЖХ \\'а1е1У аШапее-НТ с колонкой 3ипРие С18 20x4,6 мм, используя градиент Н2О (+0,1% ТФУ)/СН3СХ (+0,1% ТФУ) от 95/5 до 0/100 в течение 4 мин и 1 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 45°С.
РС способ 5' (Κΐ(5)): время удержания (Κΐ) получали на системе СЭЖХ-МЗ АРИегз с колонкой для СЭЖХ Аецш1у ВЕН С18 50x2,1 мм, 1,7 мкм, используя градиент Н2О (+0,1% муравьиная кислотаР"С1 РС\ (+0,1% муравьиная кислота) от 95/5 до 10/90 в течение 4 мин и 0,7 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 30°С.
РС способ 6' (Κΐ(6)): время удержания (Κΐ) получали на системе СЭЖХ-МЗ ΥΧΙοίβ с колонкой для
СЭЖХ Аецш1у ВЕН С18 50x2,1 мм, 1,7 мкм, используя градиент Н2О (+0,1% муравьиная кислотаР"С1 РС\ (+0,1% муравьиная кислота) от 80/20 до 5/95 в течение 4,2 мин и 0,7 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 30°С.
РС метод 7' (Κΐ(7)): время удержания (Κΐ) получали на системе ВЭЖХ \\'а1е1У аШапее-НТ с колонкой ХВпОде М3 С18 30/3,0 2,5 м, используя градиент Н2О (+0,1% муравьиная кислотаРС1РСХ (+0,1% муравьиная кислота) от 95/5 до 5/95 в течение 3,7 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С.
РС метод 8' (Κΐ(8')): время удержания (Κΐ) получали на системе ВЭЖХ \\'а1е1У аШапее-НТ с колонкой ХВпОде М3 С18 30/3,0 2,5 м, используя градиент Н2О (+0,1% муравьиная кислотаРС1РСХ (+0,1% муравьиная кислота) от 99/1 до 5/95 в течение 2,2 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С.
РС метод 9' (Κΐ(9)): время удержания (Κΐ) получали на системе ВЭЖХ \\'а1е1У аШапее-НТ с колонкой ХВпОде М3 С18 30/3,0 2,5 м, используя градиент Н2О (+0,1% ТФУ)/СНзСХ (+0,1% ТФУ) от 99/1 до 5/95 в течение 2,2 мин и 1,2 мл/мин в качестве потока растворителя и при температуре печи, равной 40°С.
ЬС метод 10' (Κΐ(10)): ΡΙΑ-МЗ (М3) получали на устройстве ВЭЖХ-МЗ \Ха1егх Способ очистки
Препаративная ВЭЖХ с обратной фазой СП§оп
Способ А. Препаративная колонка 3ипРие С18 ΘΒΌ 5 мкм, 30x100 мм от ΥΡΥΓΡΚ3, с Н2О+0,1% ТФУ и ацетонитрил+0, 1% ТФУ в качестве подвижной фазы. Способ определения УФ 220-400 нм.
Способ В. Препаративная колонка АРапйз Т3 ΘΒΌ 5 мкм, 30x150 мм от ΥΡΥΓΡΚ3, с Н2О+0,1% ТФУ и ацетонитрил+0, 1% ТФУ в качестве подвижной фазы. Способ определения УФ 220-400 нм.
Способ С. Препаративная колонка ХТегга ΚΡ18 ΘΒΌ 5 мкм, 19x50 мм от ΥΡΥΓΡΚ3, с Н2О+0,1% ТФУ и ацетонитрил+0, 1% ТФУ в качестве подвижной фазы. Способ определения УФ 220-400 нм.
Рентгеноструктурная порошковая дифракция
Приборы:
Способ XI
Аппарат Вгикег АХ5, Ώ8 Абчапсе
Облучение СиКа (30 кВ, 40 мА)
Детектор детектор Ρ5Ώ (Уапбес)
Угол сканирования 2°-40° (2 тета)
Способ Х2
Аппарат Вгикег ϋδ ΟΑϋϋΒ 01зсочег
Облучение СиКа (40 кВ, 40 мА)
Детектор детектор ΗΙ-5ΤΑΗ Агеа
Угол сканирования б°-40° (2 тета)
Получение промежуточных соединений I
СР /ГР
Промежуточное соединение 1. 5-Бром-2-метокси-3-трифторметилпиридин.
К 2-метокси-3-(трифторметил)пиридину (20,0 г, 113,0 ммоль) и 1,3-дибром-5,5-диметилимидазолидин-2,4-диону (43,6 г, 152,0 ммоль) добавляли ТФУ (80 мл), и полученную смесь перемешивали при комн.темп. в течение 18 ч в атмосфере аргона. ТФУ удаляли в вакууме (50 мБар, 45°С), и остаток суспендировали в трет-бутилметиловом эфире (200 мл). Полученное бесцветное твердое вещество удаляли
- 22 029473
путем фильтрации и промывали трет-бутилметиловым эфиром (50 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме и суспендировали в ЕЮАс (50 мл). Нерастворимое бесцветное твердое вещество удаляли путем фильтрации и промывали ЕЮАс (50 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме, разбавляли гептан/третбутилметиловым эфиром (5/1, 20 мл), и нерастворимое бесцветное твердое вещество удаляли путем фильтрации. Фильтрат очищали колоночной хроматографией на силикагеле, гептан/ЕЮАс, от 100/0 до 90/10. Неочищенный продукт фильтровали через подушку из №НСО3 (20 г), и фильтрат упаривали в вакууме с получением золотого масла (27,9 г). Масло растворяли в гептане (20 мл) и очищали путем фильтрации через подушку из силикагеля (80 г), элюируя гептаном с получением 5-бром-2-метокси-3(трифторметил)пиридина в виде бесцветного масла (22,5 г, выход 74%). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6, 298 К): δ м.д. 4,03 (с, 3Н) 7,95 (д, 1Н) 8,4 (д, 1Н).
Промежуточное соединение 2. 1-((8)-3-Гидроксипирролидин-1-ил)пропан-1-он.
(8)-пирролидин-3-ол (10,0 г, 81,0 ммоль), триэтиламин (23,6 мл, 170,0 ммоль) и СН2С12 (150 мл)
объединяли в грушевидной колбе с получением бежевой суспензии. Смесь охлаждали до -10°С и по каплям добавляли пропионилхлорид (7,06 мл, 81,0 ммоль) в течение 15 мин, поддерживая температуру от 10 до 0°С. Полученную бежевую суспензию перемешивали в течение 2 ч при 0°С. Добавляли МеОН (9,8 мл), и смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры, затем перемешивали в течение 1 ч с получением коричневого раствора. Смесь упаривали в вакууме с получением бежевого остатка, который перемешивали в диэтиловом эфире (200 мл) и фильтровали. Фильтрат упаривали в вакууме с получением 1-((8)-3-гидрокси-пирролидин-1-ил)-пропан-1-она в виде желтого масла (11,23 г, выход 95%). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6, 298 К): δ м.д. 0,92-1,02 м, 3Н) 1,67-1,97 (м, 2Н) 2,13-2,28 (м, 2Н) 3,18-3,52 (м, 4Н) 4,17-4,32 (м, 1Н) 4,85-4,97 (м, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=144,0
Промежуточное соединение 3. ((8)-3-Гидроксипирролидин-1-ил)-(тетрагидропиран-4-ил)метанон. Гидрохлорид (8)пирролидин-3-ола (3,69 г, 29,9 ммоль) и триэтиламина (6,65 г, 9,16 мл, 65,7 ммоль)
помещали в СН2С12 (15 мл). Суспензию охлаждали при ~3°С. К этой смеси медленно добавляли раствор тетрагидропиран-4-карбонил хлорида (4,67 г, 29,9 ммоль) в СН2С12 (15 мл). Затем полученную реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч при 3-10°С. Реакционную смесь затем концентрировали с получением порошка. К этому порошку добавляли ЕЮАс (100 мл). Твердое вещество фильтровали и промывали ЕЮАс. Восстановленный фильтрат затем концентрировали с получением ((8)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-(тетрагидропиран-4-ил) метанона в виде порошка (6,77 г, выход 98%). 1Н-ЯМР (400 МГц, Метанол-б4, 298 К): δ м.д. 1,59-2,15 (м, 6Н) 2,69-2,86 (м, 1Н) 3,43-3,75 (м, 6Н) 3,94-4,00 (м, 2Н) 4,37-4,48 (м, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=199,9, К1(6) = 0,86 мин
о
Промежуточное соединение 4. трет-Бутиловый эфир [(8)-1-(тетрагидропиран-4-карбонил) пирролидин-3-ил]карбаминовой кислоты.
К энергично перемешиваемому раствору тетрагидро-2Н-пиран-4-карбонил хлорида (0,455 г, 3,06 ммоль) в СН2С12 (10 мл) одновременно по частям добавляли насыщ. №НСО3 (водн.) (10 мл) и раствор трет-бутилового эфира (8)пирролидин-3-ил]карбаминовой кислоты (570 мг, 3,06 ммоль) при комн.темп. Полученную двухфазную смесь энергично перемешивали при комн.темп. в течение 3 ч. Органический слой отделяли путем фильтрации через пробирку для разделения фаз, концентрировали в вакууме и очищали флэш-хроматографией на силикагеле с СН2С12/МеОН с получением трет-бутилового эфира [(8)1-(тетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-ил]карбаминовой кислоты в виде бесцветной смолы (0,623 г, выход 68%) ЖХМС: [М+Н]+=299,6, К1(7) = 0,73 мин.
- 23 029473
Промежуточное соединение 5. (8)-3-Аминопирролидин-1-ил-(тетрагидропиран-4-ил)метанон.
К трет-бутиловому эфиру (8)-1-(тетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-ил]карбаминовой кислоты (Промежуточное соединение 4) (0,623 г, 2,09 ммоль) в СН2С12 (2,0 мл) добавляли ТФУ (2,0 мл), и полученную смесь оставляли при комн.темп, в течение 8 ч. Упаривали в вакууме и элюировали через картридж 1§о1и1е® 8СХ-2, элюируя метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме с получением [(8)-3-аминопирролидин-1-ил-(тетрагидропиран-4-ил)метанона в виде бесцветного твердого вещества (0,34 г, выход 82%). ЖХМС: [М+Н]+=199, 0, К1(3) = 0,1 мин.
Промежуточное соединение 6. Йодид 3-(4-ацетилпиперазин-1-карбонил)-1-метил-3Н-имидазол-3ия.
1-(Пиперазин-1-ил) этанон (143 мг, 1,12 ммоль) и С ΟΙ (199 мг, 1,23 ммоль) кипятили с обратным холодильником в ТГФ (10 мл) в атмосфере аргона в течение ночи. Охлаждали до комнатной температуры, разбавляли СН2С12 (20 мл) и водой (5 мл), и органический слой фильтровали через пробирку для разделения фаз и концентрировали в вакууме. Растворяли в ацетонитриле (5 мл) в стеклянном флаконе и добавляли метил йодид (0,279 мл, 4,46 ммоль). Флакон закрывали и оставляли при комнатной температуре в течение 24 ч. Растворитель упаривали в вакууме, и остаток растирали с гептаном/ЕЮАс, 10/1 (10 мл) с получением йодида 3-(4-ацетилпиперазин-1-карбонил)-1-метил-3Н-имидазол-3-ия в виде бесцвет-
Промежуточное соединение 7. Трет-бутиловый эфир (8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты.
Р0(ОН)2/С (1,2 г, 1,71 ммоль) продували аргоном, добавляли трет-бутиловый эфир (8)-3-(6-бензил5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (10,95 г, 26,7 ммоль), растворенный в метаноле (25 мл), затем добавляли аммоний формиат (1,68 г, 26,7 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 часа, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через подушку из целита и концентрировали в вакууме. Очистка флэшхроматографией на силикагеле (СН2С12, затем ТВМЕ, затем ТВМЕ/МеОН от 100/0 до 90/10, затем ТВМЕ/МеОН/ЫН4ОН 85/15/5) дала трет-бутиловый эфир (8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (7,39 г, выход 87%) в виде желтого липкого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-04, 298К) δ м.д. 1,46-1,46 (м, 9Н) 2,10-2,30 (м, 2Н) 2,78-2,83 (м, 2Н) 3,11-3,14 (м, 2Н) 3,41-3,60 (м, 3Н) 3,65-3,72 (м, 1Н) 3,78 (с, 2Н) 5,68 (м, 1Н) 8,52 (с, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=321,2, К1(2) = 0,87 мин.
Альтернативный синтез промежуточного соединения 7.
Р0(ОН)2/С (1,54 г, 2,2 ммоль) продували азотом, добавляли трет-бутиловый эфир (8)-3-(6-бензил5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (8,5 г, 20,67 ммоль), растворенный в метаноле (50 мл), затем добавляли формиат триэтиламмония (7,9 г, 53,7 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через подушку из целита, и фильтрат разделяли между 2-Ме-ТГФ (50 мл) и водой (20 мл). Верхнюю органическую фазу собирали, а нижнюю водную фаза повторно экстрагировали 2-МеТГФ (10 мл). Все органические слои объединяли и концентрировали в вакууме с получением третбутилового эфира (8) -3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (6,2 г, выход 94%) в виде желтой смолы.
Трет-бутиловый эфир (8)-3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси)пирро- 24 029473
лидин-1-карбоновой кислоты.
К раствору трет-бутилового эфира (5)-3-гидроксипирролидин-1-карбоновой кислоты (0,94 г, 5,01 ммоль) в ТГФ (20 мл) в атмосфере аргона добавляли ЫаН (0,23 г, 5,78 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 25 мин, затем добавляли 6-бензил-4-хлор-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин (1 г, 3,85 ммоль) и перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь гасили Н2О, экстрагировали СН2С12. Органический слой фильтровали и упаривали досуха. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (гептан/этилацетат, 1/1) давала трет-бутиловый эфир (5)-3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (1,35 г, выход 85%) в виде желтой смолы. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6, 298К) δ м.д. 1,39 (с, 9Н) 2,00-2,20 (м, 2Н) 2,35-2,81 (м, 4Н) 3,36-3,63 (м, 6Н) 3,70 (шир. с, 2н) 5,50-5,59 (м, 1Н) 7,25-7,37 (м, 5н) 8,56 (с, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=411,6, Κί(7) = 1,00 мин.
Альтернативный синтез трет-бутилового эфира (5)-3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б] пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты.
К раствору трет-бутилового эфира (5)-3-гидроксипирролидин-1-карбоновой кислоты (6,21 г, 33,16 ммоль) и 6-бензил-4-хлор-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидина (9 г, 34,65 ммоль) в 2-Ме-ТГФ (100 мл) в атмосфере азота добавляли ©иОК (8,17 г, 72,95 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 25 мин. Смесь гасили Н2О. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Полученный органический раствор концентрировали в вакууме с получением третбутилового эфира (5)-3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1карбоновой кислоты (12,6 г, выход 89%) в виде желтой смолы.
Промежуточное соединение 8. 6-(2,4-Диметоксипиримидин-5-ил)-4-((5)пирролидин-3-илокси)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин.
5-Бром-2,4-диметоксипиримидин (89 мг, 0,41 ммоль), Χ-ΡΗοδ (46 мг, 0,09 ммоль), бис(дибензилиденацетон)палладий (0) (29 мг, 0,03 ммоль), карбонат цезия (203 мг, 0,62 ммоль) объединяли и промывали 10 мин аргоном. К этой смеси добавляли трет-бутиловый эфир (5)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 7) (100 мг, 0,31 ммоль) в диоксане (4 мл), флакон закрывали крышкой, и реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение 4,5 ч. Смесь оставляли охлаждаться до комн.темп. и фильтровали через подушку из целита. Фильтрат разбавляли ЕЮАс (20 мл) и промывали насыщ. ЫаНСО3 (водн.) (10 мл), насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили (Ыа25О4) и концентрировали в вакууме. Растворяли в диоксане (4 мл) и добавляли в стеклянный флакон, содержащий 5-бром-2,4-диметоксипиримидин (89 мг, 0,41 ммоль), Χ-ΡΗοδ (46 мг, 0,09 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (29 мг, 0,03 ммоль), карбонат цезия (203 мг, 0,62 ммоль). Флакон закрывали крышкой, и реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение 4,5 ч. Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и фильтровали через подушку из целита. Фильтрат разбавляли ЕЮАс(20 мл) и промывали насыщ. ЫаНСО3 (водн.) (10 мл), затем насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили (Ыа25О4) и концентрировали в вакууме с получением третбутилового эфира
(5)-3-(6-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты, который использовали без дополнительной очистке. Трет-бутиловый эфир (5)-3-(6-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты растворяли в СН2С12 (2,0 мл) и добавляли ТФУ (1 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали в вакууме. Очистка препаративной ВЭЖХ с обратной фазой Οίίδοπ и последующая нейтрализация объединенных фракций на картридже РЬ-НСО3 и лиофилизация давали 6-(2,4-диметоксипиримидин-5ил)-4-((5)пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин в виде желтого порошка (11 мг, выход 10% за 2 стадии). ЖХМС: [М+Н]+=359,1, Κΐ(2) = 0,79 мин
Промежуточное соединение 9. 2-Амино-5-[4-((5)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3б]пиримидин-6-ил]никотинонитрил.
Трет-бутиловый эфир (5)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1карбоновой кислоты (промежуточное соединение 7) (84 мг, 0,263 ммоль), имидодиугольную кислоту, 2[5-бром-3-(циано)-2-пиридинил]-, 1,3-бис(1,1-диметилэтил)сложный эфир (115 мг, 0,289 ммоль), Χ-ΡΗοδ
- 25 029473
(376 мг, 0,079 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (24 мг, 0,026 ммоль), карбонат цезия (171 мг, 0,526 ммоль) объединяли в стеклянном флаконе и промывали 10 мин аргоном. К этой смеси добавляли диоксан (4,0 мл), флакон закрывали крышкой и реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение 1,5 ч. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комн.темп. и фильтровали через подушку из целита. Фильтрат разбавляли ЕЮЛс (20 мл) и промывали насыщ. ХаНСО3 (водн.) (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили (Να2δΟ4) и концентрировали в вакууме с получением (З)-трет-бутил 3-(6-(6-(бис(трет-бутоксикарбонил)амино)-5-(циано)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоксилата, который использовали без дополнительной очистки. (δ)Трет-бутил 3-(6-(6-(бис(трет-бутоксикарбонил)амино)-5-(циано)пиридин-3-ил)-5, 6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоксилат растворяли в СН2С12 (2,0 мл) и добавляли ТФУ (1 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали в вакууме. Очистка препаративной ВЭЖХ с обратной фазой Θΐίδοη и последующая нейтрализация объединенными фракциями с помощью картриджа Ρ^-НСО3 и лиофилизация давали 2-амино-5-[4-(^)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3-б]пиримидин-6-ил]никотинонитрил в виде желтого порошка (17 мг, выход 19% за 2 стадии). ЖХМС: [М+Н]+=338,3, К1(3) = 1,16 мин.
Имидодиугольная кислота, 2-[5-бром-3-(циано)-2-пиридинил]-, 1,3-бис(1,1-диметилэтил)сложный
эфир.
К 2-амино-5-бромникотинонитрилу (0,785 г, 3,96 ммоль), триэтиламину (0,553 мл, 3,96 ммоль) и 4диметиламиноуридину (20 мг, 0,164 ммоль) в СН2С12 (25 мл) добавляли ди-трет-бутил-дикарбонат (2,16 г, 9,91 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Упаривали досуха в вакууме и растирали с гептаном (25 мл) в течение 72 ч. Полученный осадок фильтровали и промывали гептаном (10 мл) с получением имидодиугольной кислоты, 2-[5-бром-3-(циано)-2пиридинил]-, 1,3-бис(1,1-диметилэтил)сложного эфира в виде бежевого твердого вещества (1,1 г, выход 70%). ‘Н ЯМР (400 МГц, С1)СГ. 298Κ) 1,51 (с, 18Н) 8,16 (д, 1Н) 8,77 (д, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=398/400,1, К1(4) = ‘,43 мин.
Промежуточное соединение 10. трет-Утиловый эфир ^)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты.
В стеклянный флакон добавляли трет-бутиловый эфир ^)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (промежуточное соединение 7) (1,00 г, 3,12 ммоль), 5-бром-2,3-диметоксипиридин (0,82 г, 3,75 ммоль), натрий трет-бутоксид (0,46 г, 4,68 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0) (0,11 г, 0,13 ммоль), 2-ди-трет-бутилфосфино-2'-(Н^диметиламино) бифенил (0,06 г, 0,18 ммоль) и безводный толуол (10 мл). Флакон продували потоком аргона в течение 15 секунд и закрывали крышкой. Смесь нагревали при перемешивании в течение 18 ч при 80°С. Оставляли охлаждаться и фильтровали через подушку из целита. Фильтрат разбавляли ЕЮЛс (50 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (20 мл). Органический слой отделяли, сушили (Να2δΟ4) и концентрировали в вакууме. Очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле с ЕЮЛс/МеОН, от 98/2 до 92/18 с получением трет-бутилового эфира ^)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты в виде светло-желтой пены (1,05 г, выход 74%). ЖХМС: [М+Н]+=458,‘, К(<4) = ‘,02 мин.
Промежуточное соединение 11. трет-Бутиловый эфир ^)-3-[6-(5-циано-6-метоксипиридин-3-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты.
В стеклянный флакон добавляли трет-бутиловый эфир ^)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 7) (630 мг, 1,97 ммоль), 5-бром-2-метоксиникотинонитрил (419 мг, 1,97 ммоль), карбонат цезия (1281,0 мг, 3,93 ммоль),
- 26 029473
трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (180 мг, 0,20 ммоль), Χ-ΡΗοδ (319 мг, 0,67 ммоль) и безводный диоксан (10,0 мл). Флакон продували потоком аргона в течение 15 с и закрывали крышкой. Смесь нагревали при перемешивании в течение 1 часа при 110°С, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Разбавляли СН2С12 (100 мл) и водой (30 мл) и фильтровали через подушку из целита. Органическую фазу разделяли путем фильтрации через пробирку для разделения фаз и концентрировали в вакууме. Очищали флэш-хроматографией на силикагеле с гептаном/ЕЮЛс, 80/20 до 0/100 с получением трет-бутилового эфира (8)-3-[6-(5-циано-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-4]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты в виде коричневой смолы (350 мг, выход 39%).
Промежуточное соединение 12. трет-Бутиловый эфир (8)-3-[6-(5-фтор-6-метоксипиридин-3-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-4] пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -карбоновой кислоты.
В стеклянный флакон добавляли трет-бутиловый эфир (8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-4]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 7) (150 мг, 0,47 ммоль), 5-бром-3-фтор-2-метоксипиридин (96 мг, 0,47 ммоль), карбонат цезия (305 мг, 0,94 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (43 мг, 0,05 ммоль), Χ-ΡΗοδ (76 мг, 0,16 ммоль) и безводный диоксан (2,0 мл). Флакон продували потоком аргона в течение 15 с и закрывали крышкой. Смесь нагревали при перемешивании в течение 1,5 ч при 110°С, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Разбавляли СН2С12 (25 мл), фильтровали через подушку из целита и концентрировали в вакууме. Очищали ВЭЖХ с обратной фазой Θΐίδοπ (способ А) с получением трифторацетата трет-бутилового эфира (δ)3-[6-(5-фтор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-4]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-карбоновой кислоты в виде коричневой смолы (45 мг, выход 17%). ЖХМС: [М+Н]+=446,4, К1(4) = 1,41 мин.
Промежуточное соединение 13. трет-Бутиловый эфир (8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-4]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты.
В стеклянный флакон добавляли трет-бутиловый эфир (8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-4]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 7) (150 мг, 0,47 ммоль) 5-бром-2-метокси-3-(трифторметил)пиридин (Промежуточное соединение 1) (120 мг, 0,47 ммоль), карбонат цезия (305 мг, 0,94 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0) (43 мг, 0,05 ммоль), Χ-ΡΗοδ (76 мг, 0,16 ммоль) и безводный диоксан (2,0 мл). Флакон продували потоком аргона в течение 15 с и закрывали крышкой. Смесь нагревали при перемешивании в течение 1 ч при 110°С, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Разбавляли СН2С12 (10 мл) и водой (2 мл), фильтровали через подушку из целита. Органическую фазу разделяли путем фильтрации через пробирку для разделения фаз и концентрировали в вакууме. Очищали ВЭЖХ с обратной фазой Θΐίδοη (Способ А) с получением трифторацетата трет-бутилового эфира (8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-4]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты в виде коричневой смолы (90 мг, выход 32%). ЖХМС: [М+Н]+=496,5, К!'1 = 1,43 мин.
Промежуточное соединение 14. 4-Метокси-6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-4] пиримидин.
В стеклянный флакон добавляли 4-метокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-4]пиримидин (ΨΟ 2008/ 130481, стр.47) (0,570 г, 3,45 ммоль), 5-бром-2-метокси-3-метилпиридин (0,697 г, 3,45 ммоль), карбонат цезия (2,25 г, 6,90 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0) (0,316 г, 0,345 ммоль), Χ-ΡΗοδ (0,493 г, 1,04 ммоль) и безводный диоксан (5 мл). Флакон продували потоком аргона в течение 15 с и закрывали крышкой. Смесь нагревали при перемешивании в течение 1 ч 45 мин при 110°С, затем оставляли охлаждаться до комнатной температуры и перемешивали при при комнатной температуре в течение 3 суток. Реакционную смесь фильтровали через подушку из целита и концентрировали в вакууме. Очищали флэш-хроматографией на силикагеле гептан/ЕЮЛс, от 100/0 до 0/100, затем ЕЮАс/МеОН, 90/10, с получением 4-метокси-6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-4]пиримидина в виде коричневой смолы (0,36 г, выход 36%). ЖХМС: [М+Н]+=287,0, К1(7) = 0,80 мин.
- 27 029473
Промежуточное соединение 15. 6-(5-Хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-4-метокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6] пиримидин.
В стеклянный флакон добавляли 4-метокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин (\ΥΌ 2008/130481, стр.47) (0,273 г, 1,65 ммоль), 5-бром-3-хлор-2-метоксипиридин (0,368 г, 1,65 ммоль), натрий трет-бутоксид (318 мг, 3,31 ммоль), диацетоксипалладий (0,037 г, 0,17 ммоль), Х-Рйоз (0,079 г, 0,17 ммоль) и безводный толуол/трет-бутанол, 5/1 (6 мл). Флакон продували потоком аргона в течение 15 секунд и закрывали крышкой. Смесь нагревали при перемешивании в течение 2 ч при 110°С, затем оставляли охлаждаться до комнатной температуры и перемешивали при комн.темп. в течение 5 суток. Разбавляли СН2С12 (10 мл) и водой (2 мл), фильтровали через подушку из целита. Органическую фазу разделяли путем фильтрации через пробирку для разделения фаз и концентрировали в вакууме. Очищали флэшхроматографией на силикагеле гептан/ЕЮЛе, от 100/0 до 0/100, с получением 6-(5-хлор-6метоксипиридин-3-ил)-4-метокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидина в виде желтого твердого вещества (95 мг, выход 19%). ЖХМС: [М+Н]+=307,0/308,9, К1(3) = 1,62 мин.
Промежуточное соединение 16. 4-Метокси-6-(5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин.
В стеклянный флакон добавляли 4-метокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин (0,273 г, 1,65 ммоль), 3-бром-5-(трифторметил)пиридин (0,373 г, 1,65 ммоль), карбонат цезия (1,08 г, 3,31 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0,076 г, 0,083 ммоль), Х-Рйоз (0,079 г, 0,165 ммоль) и безводный диоксан (5 мл). Флакон продували потоком аргона в течение 15 секунд и закрывали крышкой. Смесь нагревали при перемешивании в течение 1,5 ч при 110°С. Фильтровали через подушку из целита, концентрировали в вакууме и очищали флэш-хроматографией на силикагеле гептан/ЕЮЛе, от 100/0 до 0/100, с получением 4-метокси-6-(5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидина в виде оранжевой смолы (195 мг, выход 34%). 1Н ЯМР (ДМСО-66, 298К) 2,95 (т, 2Н) 3,77 (т, 2Н) 4,02 (с, 3Н) 4,37 (с, 2Н) 7,67-7,71 (м, 1Н) 8,30-8,34 (м, 1Н) 8,63 (с, 1Н) 8,67-8,71 (1Н, м) ЖХМС: [М+Н]+=311,2, К1(4) = 0,94 мин.
Промежуточное соединение 17. 6-(6-Метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,36]пиримидин-4-ол.
К 4-метокси-6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидину (Промежуточное соединение 14) (360 мг, 1,26 ммоль) в МеОН (2,0 мл) в стеклянном флаконе добавляли 2М ХаОН (водн.) (2,0 мл). Флакон закрывали крышкой и нагревали при 90°С в течение 24 ч. Подкисляли ледяной АсОН до рН 6, упаривали в вакууме, и остаток экстрагировали СН2С12 (2x30 мл). При каждой экстракции слой СН2С12 декантировали от твердого остатка. Слои СН2С12 объединяли и элюировали через картридж 1зо1и1е® 8СХ-2, элюировали метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме с получением 6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-ола в виде коричневой смолы (260 мг, выход 76%). ЖХМС: [М+Н]+=273,1, К1(3) = 1 ,33 мин.
Промежуточное соединение 18. 6-(5-Хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,36]пиримидин-4-ол.
К 6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-4-метокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидину (Промежуточное соединение 15) (95 мг, 0,31 ммоль) в МеОН (5,0 мл) в стеклянном флаконе добавляли 2М ХаОН (водн.) (3,0 мл). Флакон закрывали крышкой и нагревали при 90°С в течение 24 ч. Подкисляли ледяной АсОН до рН 6, упаривали в вакууме, и остаток экстрагировали СН2С12 (1x50 мл при перемешивании). При каждой экстракции слой СН2С12 декантировали от твердого остатка. Слои СН2С12 объединяли. Твердый остаток затем промывали водой (10 мл) и фильтровали. Это отфильтрованное твердое веще- 28 029473
ство объединяли со слоями СН2С12 и упаривали в вакууме с получением 6-(5-хлор-6-метоксипиридин-Зил) -5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-ола в виде желтого твердого вещества (90 мг, выход 107%). ЖХМС: [М+Н]+=293,0/294,8, К1(3) = 1,38 мин.
Промежуточное соединение 19. 6-(5-Трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3б]пиримидин-4-ол.
К 4-метокси-6-(5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидину (Промежуточное соединение 16) (190 мг, 0,612 ммоль) в МеОН (2,0 мл) в стеклянном флаконе добавляли 2М №ОН (водн.) (2,0 мл). Флакон закрывали крышкой и нагревали при 90°С в течение 24 ч. Подкисляли ледяной АсОН до рН 6, упаривали в вакууме, и остаток экстрагировали СН2С12 (2x30 мл при разрушении ультразвуком). При каждом экстрагировании слой СН2С12 декантировали от твердого остатка. Слои СН2С12 объединяли и элюировали через картридж ЬоЫе® 8СХ-2, элюировали метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме с получением 6-(5(трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-ола в виде желтого твердого вещества (167 мг). ЖХМС: [М+Н]+=297,2, К1(4) = 0,69 мин.
Промежуточное соединение 20. трет-Бутиловый эфир (8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-карбоновой кислоты.
К 6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-олу (Промежуточное соединение 17) (178 мг, 0,654 ммоль) в ацетонитриле (2,0 мл) добавляли ВОР (376 мг, 0,854 ммоль) и ΌΒϋ (0,197 мл, 1,31 ммоль). Полученный раствор оставляли при комнатной температуре в течение 2 мин, затем добавляли (8)-трет-бутил 3-аминопирролидин-1-карбоксилат (365 мг, 1,96 ммоль) в ацетонитриле (2,0 мл), и нагревали смесь при 75°С в течение 72 ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме и очищали ВЭЖХ с обратной фазой Οΐ1δοη (Способ А) с получением трифторацетата третбутилового эфира (8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин4-иламино)пирролидин-1-карбоновой кислоты (60 мг, выход 17%) в виде коричневой смолы. ЖХМС: [М+Н]+=441,2, К1(3) = 1,50 мин
Промежуточное соединение 21. трет-Бутиловый эфир (8)-3-[6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1-карбоновой кислоты.
К 6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-олу (Промежуточное соединение 18) (90 мг, 0,31 ммоль) в ацетонитриле (3,0 мл) добавляли ВОР (177 мг, 0,40 ммоль) и ΌΒϋ (0,15 мл, 0,99 ммоль). Полученный раствор оставляли при комн.темп, в течение 2 мин, затем добавляли (8)-трет-бутил 3-аминопирролидин-1-карбоксилат (0,17, 0,93 ммоль) и нагревали смесь при 70°С в течение 96 ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме и очищали ВЭЖХ с обратной фазой Οΐ1δοη (Способ А) с получением трифторацетата трет-бутилового эфира (8)-3-[6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1-карбоновой кислоты (50 мг, выход 35%) в виде коричневой смолы. ЖХМС: [М+Н]+=461,1/463,0, К(4) = 0,93 мин.
Промежуточное соединение 22. трет-Бутиловый эфир (8)-3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3б]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1 -карбоновой кислоты.
6-Бензил-4-хлор-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин (5,0 г, 19,06 ммоль), (8)-трет-бутил 3аминопирролидин-1-карбоксилат (4,11 г, 20,96 г) и триэтиламин (3,98 мл, 28,6 ммоль) нагревали в герметически закрытом флаконе при 120°С в течение 42 ч. Смесь оставляли охлаждаться, разбавляли третбутилметиловым эфиром (100 мл) и полученную суспензию перемешивали в течение 10 мин. Смесь раз- 29 029473
бавляли водой (50 мл), и органический слой отделяли. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили (Ыа28О4) и упаривали в вакууме с получением коричневой смолы. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле ЕЮАс/МеОН, от 98/2 до 82/18, с получением трет-бутилового эфира (8)-3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино) пирролидин-1-карбоновой кислоты в виде светло-желтой пены (7,36 г, выход 93%). 1Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13, 298 К): δ м.д. 1,48 (с, 9Н) 2,10-2,31 (м, 2Н) 2,80-2,96 (м, 4Н) 3,15-3,87 (м, 8Н) 4,44-4,77 (м, 1Н) 5,62-5,73 (м, 1Н) 7,29-7,45 (м, 5Н) 8,50 (с, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=410,0, К1(6) = 1,39 мин.
Альтернативный синтез промежуточного соединения 22.
(8)-трет-Бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилат (50 г, 192,5 ммоль) добавляли к раствору 6бензил-4-хлор-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидина (39,440 г, 211,8 ммоль) в ЫМР (200 мл), затем добавляли К2СО3 (39,9 г, 288,8 ммоль). Смесь нагревали до 120°С в течение 20 ч. Смесь оставляли охлаждаться, разделяли между водой (300 мл) и этилацетатом (500 мл). Нижнюю водную фазу удаляли, и верхнюю органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (150 мл) и концентрировали в вакууме с получением сырого трет-бутилового эфира (8)-3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3й]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-карбоновой кислоты в виде светло-желтой пены (76,44 г, выход 97%).
Промежуточное соединение 23. трет-Бутиловый эфир (8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-карбоновой кислоты.
К раствору трет-бутилового эфира (8)-3-(6-бензил-5, 6, 7, 8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 22) (30,1 г, 73,5 ммоль) в МеОН (100 мл) добавляли 20% гидроксид палладия на угле (3,3 г), затем формиат аммония (4,63 г, 73,5 ммоль), и смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 1 ч. Добавляли формиат аммония (0,38 г, 6,02 ммоль) и продолжали нагревать при кипячении с обратным холодильником в течение 30 мин. Реакционную смесь оставляли охлаждаться и фильтровали через подушку из целита, промывали МеОН (50 мл), затем СН2С12 (50 мл). Фильтрат упаривали в вакууме с получением коричневого масла. Растворяли в СН2С12 (100 мл), добавляли твердый ЫаНСО3 (10 г) и фильтровали через подушку из целита. Фильтрат упаривали в вакууме с получением коричневого масла. Растворяли в ЕЮАс (50 мл) и твердое вещество осаждалось, его фильтровали, с получением трет-бутилового эфира (8)-3-(5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-карбоновой кислоты в виде бежевого твердого вещества (15,55 г, выход 66%). Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-йв, 298 К): δ м.д. 1,40 (с, 9Н) 1,81-1,98 (м, 1Н) 2,05-2,17 (м, 1Н) 2,92 (т, 2Н) 3,10-3,46 (м, 5Н) 3,49-3,63 (м, 3Н) 4,47-4,63 (м, 1Н) 6,46 (д, 1Н, Ν-Н) 8,25 (с, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=320,0, К1(6) = 1,29 мин.
Альтернативный синтез промежуточного соединения 23.
Рй(ОН)2/С (6,60 г, 5,3 ммоль) продували азотом, добавляли трет-бутиловый эфир (8)-3-(6-бензил5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 22), растворенный в метаноле (164 мл), затем добавляли формиат триэтиламмония (28,4 г, 188,0 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через подушку из целита, и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток перекристаллизовывали метил трет-бутиловым эфиром (200 мл) и гептаном (50 мл) с получением трет-бутилового эфира (8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-карбоновой кислоты в виде бежевого твердого вещества (25,7 г, выход 85%).
Промежуточное соединение 24. трет-Бутиловый эфир (8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино]-пирролидин-1-карбоновой кислоты.
В стеклянный флакон добавляли трет-бутиловый эфир (8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 23) (3,5 г, 10,96 ммоль), 5-бром-2-метокси-3-(трифторметил)пиридин (Промежуточное соединение 1) (3,09 г, 12,05
- 30 029473
ммоль), натрий трет-бутоксид (1,58 г, 1б,44 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0,502 г, 0,548 ммоль), 2-ди-трет-бутилфосфино-2'-(Н^диметиламино)бифенил (0,225 г, 0,б57 ммоль) и безводный трет-бутанол (б мл). Флакон продували потоком аргона в течение 15 с и закрывали крышкой. Смесь нагревали при перемешивании в течение 5 часов при 100°С. Оставляли охлаждаться и разделяли между ЕЮАс (100 мл) и водой (20 мл), и двухфазную смесь фильтровали через подушку из целита. Органический слой отделяли, сушили (Мд£О4) и концентрировали в вакууме. Очищали колоночной флэшхроматографией через аминосиликагель Вкладе®® элюируя гептаном/ЕЮАс, от 100/0 до 0/100, затем ЕЮАс/МеОН (90/10) с получением трет-бутилового эфира ^)-3-[б-(б-метокси-5-трифторметилпиридин3-ил)-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1-карбоновой кислоты в виде желтой пены (4,00 г, 74% выход). ЖХМС: [М+Н]+=495,2, К1(3) = 1,59 мин.
Альтернативный синтез промежуточного соединения 24.
В стеклянную колбу добавляли трет-бутиловый эфир ^)-3-(5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3б]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 23) (б,331 г, 15,8б ммоль), 5-бром-2-метокси-3-(трифторметил) пиридин (Промежуточное соединение 1) (4,4б5 г, 17,442 ммоль), трет-бутоксид натрия (2,29 г, 23,78 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0) (0,72б г, 0,793 ммоль), ди-трет-бутил(2'-метилбифенил-2-ил)фосфин (0,297 г, 0,951 ммоль) и безводный трет-бутанол (30 мл). Колбу продували потоком азота в течение 15 с и закрывали крышкой. Смесь нагревали при перемешивании в течение 4 ч при кипячении с обратным холодильником. Смесь оставляли охлаждаться до комн.темп. и разделяли между ЕЮАс (100 мл) и водой (20 мл). Двухфазную смесь фильтровали через подушку из целита. Органический слой разделяли и концентрировали в вакууме с получением сырого трет-бутилового эфира ^)-3-[б-(б-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,б,7,8тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1-карбоновой кислоты в виде желтой пены (7,4б г, 95% выход).
Промежуточное соединение 25. трет-Бутиловый эфир ^)-3-[б-(5-циано-б-метоксипиридин-3-ил)5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1-карбоновой кислоты.
В стеклянный флакон добавляли трет-бутиловый эфир ^)-3-(5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 23) (5бб мг, 1,77 ммоль), 5-бром-2-метоксиникотинонитрил (453 мг, 2,13 ммоль), карбонат цезия (1155 мг, 3,54 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (1б2 мг, 0,18 ммоль), Χ-ΡΗοδ (287 мг, 0,б0 ммоль) и безводный трет-бутанол (5 мл). Флакон продували потоком аргона в течение 15 с и закрывали крышкой. Смесь нагревали при перемешивании в течение 18 ч при 110°С. Оставляли охлаждаться и разделяли между СН2С12 (20 мл) и водой (10 мл) и двухфазную смесь фильтровали через подушку из целита. Органический слой отделяли путем фильтрации через пробирку для разделения фаз и концентрировали в вакууме. Очистка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле с гептаном/ЕЮАс, от 100/0 до 0/100, затем ЕЮАс/МеОН (90/10) с получением трет-бутилового эфира ^)-3-[б-(5-циано-б-метоксипиридин-3-ил)5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1-карбоновой кислоты в виде коричневой смолы (234 мг, выход 29%). ЖХМС: [М+Н]+=452,1, К1(4) = 0,90 мин.
Промежуточное соединение 1'. 5-Бром-2-метокси-3-трифторметилпиридин
2-Метокси-3-трифторметилпиридин (2,7 г, 14,79 ммоль) и 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (5,28 г, 18,48 ммоль) помещали в круглодонную колбу. К этой смеси медленно добавляли 40 мл ТФУ. Смесь перемешивали в течение ночи при температуре окружающей среды (1б ч). После завершения реакции растворитель ТФУ упаривали в вакууме, и полученный остаток нейтрализовали до рН б-7 путем добавления насыщенного №11СО3. Водный слой экстрагировали ЭСМ два раза, и объединенные экстракты промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме с получением смеси масла и белого твердого вещества. Остаток еще раз растворяли в 20% этилацетат/гептан (50 мл), и нерастворимое белое твердое вещество отфильтровали. Фильтрат концентрировали, а затем очищали флэш-хроматографией на силикагеле (ЕЮАс/гептан 5/95) с получением 5-бром-2метокси-3-трифторметилпиридина в виде бесцветной жидкости (2,08 г, 52% выход). Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Щ, 298 Κ): δ м.д. 4,03 (с, 3Н) 7,95 (д, 1Н) 8,4 (д, 1Н).
2-Метокси-3 -трифторметилпиридин
- 31 029473
2-Хлор-3-трифторметилпиридин (3 г, 16,53 ммоль) растворяли в 30 мл раствора метоксида натрия (5,4М) в метаноле. Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 суток. После этого периода времени реакционную смесь помещали на лед и экстрагировали три раза ЭСМ. Объединенный экстракт промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме с получением 2-метокси-3-трифторметилпиридина в виде светлой жидкости (2,7 г, выход 89%). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСОФб, 298 Κ): δ м.д. 3,98 (с, 3Н) 7,2 (дд, 1Н) 8,11 (д, 1Н) 8,45 (д, 1Н). М8: 178,1 [М+1]+, К1(1) = 1,29 мин.
Промежуточное соединение 2'. 5-Бром-2-этокси-3-трифторметилпиридин
Промежуточное соединение 2' получали в соответствии с методикой, описанной для промежуточного соединения 1', используя раствор этоксида натрия в этаноле вместо раствора метоксида натрия. 1НЯМР (400 МГц, ДМСО-66, 298 Κ): δ м.д. 1,33 (т, 4Н) 4,45 (кв., 3Н) 8,31 (с, 1Н) 8,58 (с, 1Н).
Промежуточное соединение 3'. 1-[4-(5-Бром-2-метилбензоил)пиперазин-1-ил]этанон
К смеси 5-бром-2-метилбензойной кислоты (2,0 г, 9,30 ммоль) в ЭСМ (25 мл) добавляли ΌΙΡΕΑ (3,25 мл, 18,60 ммоль) и НВТи (4,23 г, 11,16 ммоль) при комн.темп. Реакционную смесь перемешивали при комн.темп, в течение 20 мин. К смеси затем добавляли 1-(пиперазин-1-ил)этанон (1,311 г, 10,23 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн.темп. в течение 1 часа. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором ΝαΙ 1СХО и экстрагировали ЭСМ. Органический слой дважды промывали насыщенным солевым раствором, сушили, пропуская через картридж, разделяющий фазы, и упаривали. Очистка флэш-хроматографией, используя систему Вк)кще Ιδο^τα (диоксид кремния с функциональными аминогруппами ΚΡ-Ν! элюировали циклогексаном/ЕЮАс, от 0 до 100%) давала указанное в заголовке соединение (2,475 г, 82% выход) в виде белой пены. М8: 325,4 [М+1]+, К1(2) = 0,94 мин.
Промежуточное соединение 4'. 1-[4-(3-Бром-5-трифторметилбензоил)пиперазин-1-ил] этанон
Промежуточное соединение 4' получали в соответствии с методикой, описанной для промежуточного соединения 3', используя 3-бром-5-трифторметилбензойную кислоту вместо 5-бром-2-метилбензойной кислоты. М8: 379,3-381,3 [М+Н]+, К1(2) = 1,129 мин.
Промежуточное соединение 5'. 1-[4-(3-бром-5-метоксибензоил)пиперазин-1-ил]этанон
Промежуточное соединение 5' получали в соответствии с методикой, описанной для промежуточного соединения 3', используя З-бром-5-метоксибензойную кислоту (Промежуточное соединение 17) вместо 5-бром-2-метилбензойной кислоты. М8: 343,2 [М+Н]+, К1(2) = 1,02 мин.
Промежуточное соединение 6'. 1-[4-(3-Бром-5-метилбензоил)пиперазин-1-ил] этанон
о
Вг О
Промежуточное соединение 6' получали в соответствии с методикой, описанной для промежуточного соединения 3', используя 3-бром-5-метоксибензойную кислоту (Промежуточное соединение 17)
- 32 029473
вместо 5-бром-2-метилбензойной кислоты. М8: 325,2-327,1 [М+Н]+, Κΐ(2) = 0,98 мин.
Промежуточное соединение 1'. 1-[4-(3-бром-5-хлорбензоил)пиперазин-1-ил]этанон
Промежуточное соединение 7' получали в соответствии с методикой, описанной для промежуточного соединения 3', используя З-бром-5-метоксибензойную кислоту (Промежуточное соединение 17) вместо 5-бром-2-метилбензойной кислоты. М8: 345,2-347,1-349,0 [М+Н]+, Κΐ(2) = 1,02 мин.
К смеси 2-амино-5-бромбензотрифторида (1,0 г, 4,17 ммоль) в ЭСМ (10 мл) при 0-5°С добавляли ΝΕΐ3 (1,16 мл, 8,33 ммоль), затем по каплям метансульфонилхлорид (0,389 мл, 5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 суток. Через 2 дня добавляли еще ΝΕΐ3 (1,16 мл, 8,33 ммоль). В отсутствии развития реакции через 3 дня добавляли еще ΝΕ(3 (0,580 мл, 4,17 ммоль) и хлорид метансульфонила (0,324 мл, 4,17 ммоль). Реакция не заканчивалась, поэтому реакционную смесь затем нагревали в микроволновой печи при 110°С в течение 20 мин. Реакция не развивалась, поэтому ее останавливали. Реакционную смесь разбавляли водой и ЭСМ. Слои разделяли. Органический слой промывали водой, сушили над Мд8О4 и упаривали. Очистка флэш-хроматографией, используя систему СотЫИазН Сотрапюп 18СО (колонка КеШзер с 40 г диоксида кремния, элюировали циклогексаном/ЕЮАс, от 100:0 до 70:30) не давала чистое соединение. Очистка препаративной ВЭЖХ, используя систему ОПзоп (колонка 8ипЕ1ге С18, элюировали Н2О+0,1% ТФУ/СН3С№, от 20% до 85%) давала указанное в заголовке соединение (404 мг, выход 31%) в виде белого твердого вещества. Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-06, 298 К): δ м.д. 3,12 (с, 3Н) 7,55 (д, 1Н) 7,91 (д, 1Н) 7,92 (с, 1Н) 9,56 (с, 1Н). М8(10): 316,3-318,2 [М-1]-.
Промежуточное соединение 9'. ^(3-бром-5-(трифторметил)фенил)метан сульфонамид
К смеси 3-амино-5-бромбензотрифторида (1,0 г, 4,17 ммоль) в пиридине (10 мл) при 0-5°С по каплям добавляли метансульфонилхлорид (0,389 мл, 5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 суток. Так как реакция не заканчивалась, то реакционную смесь затем нагревали в микроволновой печи при 150°С в течение 15 мин. Реакция не развивалась, поэтому ее останавливали. Реакционную смесь концентрировали досуха, и остаток упаривали вместе с толуолом. Остаток затем разбавляли насыщенным водным раствором №НСО3 и экстрагировали ЭСМ. Органический слой сушили над Мд8О4 и упаривали. Очистка флэш-хроматографией, используя систему СотЫИазН Сотрапюп 18СО (колонка КеШзер с диоксидом кремния 12 г, элюировали циклогексаном/ЕЮАс, от 100:0 до 70:30) давала указанное в заголовке соединение (1,05 г, выход 79%) в виде белого твердого вещества. ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Щ, 298 К): δ м.д. 3,14 (с, 3Н) 7,48 (с, 1Н) 7,64 (с, 1Н) 7,68 (с, 1Н) 10,42 (с, 1Н). М8(10): 316,3-318,2 [М-1]’.
Промежуточное соединение 10'. 2-Дифторметокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил) пиридин
В герметически закрытую пробирку добавляли 2-гидрокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин (300 мг, 1,357 ммоль), хлордифторацетат натрия (320 мг, 2,036 ммоль) в ацетонитриле (5 мл). Эту суспензию нагревали до 80°С и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комн.темп., разбавляли ЕЮАс, промывали водным раствором №НСО3 и насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали. Очистка флэшхроматографией на силикагеле (СН2С12/МеОН, 95/5) давала указанное в заголовке соединение (197 мг, выход 53%). М8: 272,8 [М+Н]+, Κΐ(6)=3,12 мин.
Промежуточное соединение 11'. 6,6-Дифтор-[1,4]диазепан
- 33 029473
Соединение получали, следуя методике, описанной в литературе: Ше11пег, Е.; 8апбт, Н.; 8уп1йез1з; 2002; 2; 223-226. Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ, 298 К): δ м.д. 3,47 (с, 4Н) 3,89 (т, 4Н).
Борные кислоты или эфиры борной кислоты, описанные в настоящем документе, получают в соответствии с общей методикой, описанной ниже.
а) Бис (пинаколато) дибор, РбС12(бррГ)-СН2С12, КОАс, диоксан, 80°С, 16 ч.
Промежуточное соединение 12'. 2-Метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)никотинонитрил
Раствор А. РбС12(бррГ)-СН2С12 (0,958 г, 1,174 ммоль), КОАс (6,91 г, 70,4 ммоль) и бис(пинаколато)дибор (7,15 г, 28,2 ммоль) помещали в 250 мл-овую колбу и дегазировали.
Раствор В. В отдельном флаконе 5-бром-2-метокси никотинитрил (5 г, 23,47 ммоль) растворяли в 100 мл безводного диоксана. Раствор В добавляли к раствору А, и реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 16 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс, и оставшийся твердый продукт отфильтровали. Фильтрат упаривали в вакууме с выходом черного масла. Очистка флэшхроматографией на силикагеле (СН2С12/МеОН, 95/5) давала указанное в заголовке соединение (5,7 г, 89% выход) в виде бежевого порошка. Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6, 298 К): δ м.д. 1,31 (с, 12Н) 4,03 (с, 3Н) 8,31 (с, 1Н) 8,62 (с, 1Н). М8: 261,5 [М+1]+, Κί(2) = 1,47 мин.
Промежуточные соединения 13'-22' получали, используя методики, аналогичные методики, которые использовали для получения промежуточного соединения 12', используя соответствующий арилбромид в качестве исходных веществ.
- 34 029473
Промежуточное соединение Структура Коми.т емп. (мин) М3 (ЕЗ) : [М+Н]+
Промежуточное соединение 13' .В. о О О 1,10 С) 373,2
Промежуточное соединение 14' А 1,36 С) 263, 1
Промежуточное соединение 15' ху 1,53 С) 254,1
Промежуточное соединение 16' >Г'С=Е,г°н Р он 0,64 Я’ 191,9
Промежуточное соединение 17' ХА ° Л 1,58 С) 250, 1
Промежуточное соединение 18' УУГ О о о 1,29 С) 427,3
Промежуточное соединение 19' Р Р%ХР Η2Ν-γΑ ·4χ 1,57 С) нет данных
Промежуточное соединение 20' Чу о о о 1,17 (1) 389, 3
Промежуточное соединение 21' А о р С о 1,30 С) 393,3
Промежуточное соединение 22' Чу χΒχ О о о 1,22 ί1’ 373,3
(1) ЕС способ 1, (2) ЬС метод способ 2.
Промежуточное соединение 23'. 3-Бром-5-метоксибензойная кислота
К энергично перемешиваемой смеси 1-бром-3-метокси-5-метилбензола (1 г, 4,97 ммоль), пиридина (3,22 мл, 39,8 ммоль) и воды (8 мл) добавляли маленькими порциями КМпО4 (3,14 г, 19,89 ммоль) при 105°С. Смесь, которая становись черной суспензией, перемешивали 24 ч при 105°С, затем охлаждали до комнатной температуры и отфильтровывали через Ну Йо. Черный остаток промывали несколько раз
- 35 029473
ЕЮЛс. Фильтрат затем разводили в Е1АОс и промывали 2М раствором НС1. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (281 мг, 24% выход) в виде белого твердого вещества. Μδ: 229,1 [М+Н]+, Κί(1) = 1,18 мин.
Примеры получения
а) Трет-бутиловый эфир ^)-3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты ΙΙΙ сначала получали путем взаимодействия 6-бензил-4-хлор-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-б] пиримидина с трет-бутиловым эфиром ^)-3-гидроксипирролидин-1-карбоновой кислоты в присутствии подходящего основания, такого как гидрид натрия (ΝαΙ I ), и полярного органического растворителя, такого как ТГФ или диоксан, в атмосфере инертного газа при комнатной температуре. Ь) Ν-Дебензилирование проводят в условиях трансферного гидрирования, используя, кроме прочего, палладиевые катализаторы, предпочтительно, гидроксид палладия на угле Ρб(ΟН)2/С и, кроме прочего, соль формиата, предпочтительно, формиат аммония, и органический растворитель, такой как, предпочтительно, метанол. Реакцию предпочтительно осуществляют в условиях кипячения с обратным холодильником. с) Реакцию связывания Бухвальда-Хартвига между трет-бутиловым эфиром (δ)-3-(5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты Ιν и арилбромидом общей формулы К2-Х, где Х=бром или йод, проводят в обычных условиях реакции Бухвальда-Хартвига, используя такой лиганд, так Х-ΡΗοδ или 2-ди-трет-бутилфосфино-2'-(^^диметиламино)бифенил, с палладиевым катализатором, таким как Ρ62(6^)3 или Ρб2(бЬа)3·СНС13 или Ρб(ΟΑс)2, предпочтительно, Ρ62(6^)3 с Х-ΡΗοδ, основанием, таким как, предпочтительно, Сδ2СΟ3, или, предпочтительно, третВиОУг и органическим растворителем, таким как, предпочтительно, диоксан или, предпочтительно, ТГФ. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно 80-120°С, предпочтительно, 120°С. Реакцию можно, предпочтительно, проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. б) Снятие защиты Ν-ВОС проводят в обычных условиях снятия защиты ВОС, используя, в качестве возможной кислоты, предпочтительно, трифторуксусную кислоту или НС1, и подходящий органический растворитель, такой как СН2С12 или простой диэтиловый эфир. Реакцию предпочтительно проводят при комнатной температуре, е) Реакция соединений общей формулы νΙ с хлорангидридом формулы К4С(О)С1 или карбоновой кислотой формулы К4С(О)ОН. Специалистам в данной области будет понятно, что существует большое число способов получения амидов. Например, см. Мап1а1ЬеШ, ΟΆ.Ο.Ν и Ра1цие, V., Ат1бе Ьоиб Гогтайои аиб рерйбе соирНид, ТейаЬебгои, 2005, 61(46), рр10827-10852, и цитированные в настоящем документе ссылки. Примеры, приведенные в настоящем документе, таким образом, не следует считать лимитирующими, они являются всего лишь иллюстративными.
Использовались следующие общие способы ΐ-ν.
ΐ. К энергично перемешиваемому раствору хлорангидрида (1,3 экв.) в СН2С12 одновременно порциями добавляли избыток насыщ. ΝηΙ 1СО3 (водн.) и раствор амина общей формулы V (1,0 экв.) в СН2С12 при комн.темп. Полученную двухфазную смесь интенсивно перемешивали при комн.темп. в течение 2 часов. Органический слой разделяли, сушили (ΜβδΟ4), концентрировали в вакууме и очищали либо хроматографией с обращенной фазой, либо хроматографией с нормальной фазой, либо кристаллизацией.
ΐΐ. К амину общей формулы V (1,0 экв.) в СН2С12 добавляли хлорангидрид (1,1 экв.) и триэтиламин (3,0 экв.) при комн.темп. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и затем разделяли между водой и подходящим органическим растворителем и очищали либо хроматографией с обращенной фазой, либо хроматографией с нормальной фазой, либо кристаллизацией.
ΐΐΐ. К карбоновой кислоте (1,0 экв.) и НВТи (1,2 экв.) в ДМФ добавляли триэтиламин (4,0 экв.). Смесь перемешивали в течение 20 мин, а затем добавляли амин общей формулы V (1,0 экв.) в ДМФ.
- 36 029473
Смесь оставляли перемешиваться в течение ночи при комнатной температуре, а затем разделяли между водой и подходящим органическим растворителем. Органическую фазу разделяли, сушили (Мд8О4), концентрировали в вакууме и очищали либо хроматографией с обращенной фазой, либо хроматографией с нормальной фазой, либо кристаллизацией.
ΐν. К карбоновой кислоте (1,0 экв.) и амину общей формулы VI (1,0 экв.) в ДМФ добавляли ОСС (1,2 экв.) в ДМФ. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 18 ч и концентрировали в вакууме и очищали либо хроматографией с обращенной фазой, либо хроматографией с нормальной фазой, либо кристаллизацией.
ν. К карбоновой кислоте (1,1 экв.) и амину общей формулы VI (1,0 экв.) в СН2С12 добавляли бензтриазол-1-ол (1,1 экв.) и Е1)С (1,6 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комн.темп. в течение 18 ч, а затем разделяли между водой и подходящим органическим растворителем. Органическую фазу разделяли, сушили (Мд8О4), концентрировали в вакууме и очищали либо хроматографией с обращенной фазой, либо хроматографией с нормальной фазой, либо кристаллизацией.
а) снятие защиты Ν-ВОС проводят в обычных условиях снятия защиты ВОС, используя, среди прочих возможных, кислот, предпочтительно, трифторуксусную кислоту, и органический растворитель, предпочтительно, СН2С12. Реакцию, предпочтительно, проводили при комнатной температуре. Ь) Реакцию соединения общей формулы IX с хлорангидридом формулы К4С(О)С1 или карбоновой кислотой формулы К4С(О)ОН, используя общие способы ΐ-ν, как показано на схеме 1 стадия е. Специалистам в данной области будет понятно, что существует множество путей получения амидов. Например, см. Мап1а1Ье№, С.А.О^ ап4 Ра1цие, V., Аш14е Ьοη4 Γοπηαΐίοη ап4 рерй4е тирНпу, Те1таЬе4гоп, 2005, 61(46), рр.10827-10852, а также приведенные в них ссылки. Примеры, приведенные в настоящем документе, таким образом, не следует рассматривать как исключительные, а лишь как иллюстративные.
с) Удаление защитной группа бензила проводят, используя стандартную методику, как описано в "ГЮсс^е μΐΌΐψδ ίη Ограню δуηΐЬеδ^δ" Т.^. Огеепе ап4 Ρ. \Υ'ιι1/, 3г4 е4йюп, 1999, .Ιοίιη \\а1еу и δοηδ. Обычные условия включают 1,0 экв. соединения общей формулы Χ (8,0 экв. формиата аммония и 20% (масс./масс.) гидроксида палладия Ρ4(ΟН)2/С (катализатор), нагревали с обратным холодильником в метаноле. 4) Реакцию связывания Бухвальда-Хартвига между соединением общей формулы XI и соединениями общей формулы К2-Х, где Х=бром или йод, проводят в обычных условиях реакции БухвальдаХартвига, используя такой лиганд, так Χ-ΡΙιοδ или 2-ди-трет-бутилфосфино-2'-(Н^диметиламино) бифенил, с палладиевым катализатором, таким как Г42(4Ьа)3 или Г42(4Ьа)3-СНС13 или Г4(ОАс)2, предпочтительно, Г42(4Ьа)3 с Χ-ΡΗοδ, основанием, таким как, предпочтительно, Сδ2СΟ3, или, предпочтительно, трет-ВиОЖ, и органическим растворителем, таким как, предпочтительно, диоксан или, предпочтительно, ТГФ. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно 80120°С, предпочтительно, 120°С. Реакцию можно, предпочтительно, проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон.
- 37 029473
Соединения общей формулы XVII могут быть получены методами, аналогичными методам, описанным для стадий а-е схемы 1, начиная с б-бензил-4-хлор-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидина (I) и трет-бутил 3-гидроксиазетидин-1-карбоксилата (XII).
а) Трет-бутиловый эфир (8)-3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты XIX сначала получали путем взаимодействия 6-бензил-4-хлор-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидина с трет-бутиловым эфиром (8)-3-аминопирролидин-1-карбоновой кислоты в присутствии подходящего основания, такого как триэтиламин или Ν,Ν-диизопропилэтиламин, при повышенной температуре (например, 120°С) в течение 24-48 ч. Обычные условия включают 1,0 экв. 6-бензил-4-хлор-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидина, 1,0 экв. трет-бутилового эфира (8)-3аминопирролидин-1-карбоновой кислоты и 1,5 экв. триэтиламина при 120°С в течение 48 ч. Ь) Удаление защитной группа бензила проводят, используя стандартную методику, как описано в "РгоГеейуе дгоирз ΐη Огдаше 8уЩйе515" Т.^. Сгеепе апй Р. Аи1/, 3гй еййюп, 1999, .Ιοίιιι АПеу и 8οηδ. Обычные условия включают 1,0 экв. трет-бутилового эфира (8)-3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты XIX, 1,1-8,0 экв. формиата аммония и 20% (мас./мас.) палладия гидроксида Рй(ОН)2/С (катализатор), нагревали с обратным холодильником в метаноле. с) Третбутиловый эфир (8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты XX взаимодействовал с галогенидом К2^ (где К2 определен выше и X представляет собой галоген и, предпочтительно, бром или йод), в присутствии подходящего основания, такого как, натрий третбутоксид или карбонат цезия, и подходящей системы катализаторов, такой как Рй2(йЬа)3 с 2-ди-третбутилфосфино-2'-^^-диметиламино)бифенилом или Рй2(йЬа)3 с X-Рйοδ, в подходящем растворителе, таком как безводный трет-бутанол или безводный диоксан, нагревали при повышенной температуре (например, 100°С). Реакцию можно, предпочтительно, проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. Обычные условия включают 1 экв. трет-бутилового эфира (8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты XX, 1-1,5 экв. КЗ^, 1,5-2,0 экв. натрий трет-бутоксида, 5-10 моль% Рй2(йЬа)3 и 5-10 мол.% 2-ди-трет-бутилфосфино-2'-^^диметиламино)бифенила в безводном трет-бутаноле при 100°С в течение 5-24 ч в атмосфере аргона, й) Снятие защиты Ν-ВОС проводят в обычных условиях снятия защиты ВОС с подходящей кислотой, такой как трифторуксусная кислота в подходящем органическом растворителе, таком как СН2С12 при комнатной температуре. Обычные условия включают 1 экв. соединения общей формулы XII в избыточном количестве трифторуксусной кислоты в СН2С12 при комнатной температуре в течение 1-3 ч. е) Реакция
- 38 029473
соединений общей формулы XXII с хлорангидридом формулы К4С(О)С1 или карбоновой кислотой формулы К4С(О)ОН, используя общие способы ί-ν, как описано на схеме 1 стадия е. Специалистам в данной области будет понятно, что существует большое число способов получения амидов. Например, см. Мап1а1ЬеШ, С.А.О-.Ν и Ра^ие, V., Аш10е Ьоп0 ГогтаПоп апс) рерй^е соирРпд, ТеП'аНесРоп, 2005, 61(46), рр10827-10852, и цитированные в настоящем документе ссылки. Примеры, приведенные в настоящем документе, таким образом, не следует считать лимитирующими, они являются всего лишь иллюстративными.
а) 4-Метокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-Р]пиримидин (АО 2008/130481, р47) взаимодействовал с галогенидом К2-Х (где К2 такой, как описано выше и X представляет собой галоген и, предпочтительно, бром или йод), в присутствии подходящего основания, такого как карбонат цезия или натрий третбутоксид, и подходящей системы катализаторов, такой как РР2(РЪа)3, с Х-РЬоз или РР(ОАС)2 с Х-РЬоз, в подходящем растворителе, таком как диоксан или ТГФ, нагревали при повышенной температуре (например, 110°С). Реакцию можно, предпочтительно, проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. Обычные условия включают 1 экв. 4-метокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-Р]пиримидина, 1-1,5 экв. К2-Х, 1,5-2,0 экв. карбоната цезия, 5-10 моль% РР2(РЪа)3 и 5-10 моль% Х-РЬоз в диоксане при 110°С в течение 5-24 ч в атмосфере аргона. Ь) Соединения общей формулы XXV взаимодействовали с водным гидроксидом натрия в подходящем растворителе, таком как метанол или диоксан, при повышенной температуре (например, 100°С) в течение 18-24 ч. Обычные условия включают 1 экв. соединений общей формулы XXV в избыточном количестве 2н гидроксида натрия (водн.) в метаноле при 100°С в течение 18 ч. с) Соединения общей формулы ХХ1 могут быть получены, используя реакцию связывания фосфония, запускаемую основанием, таким образом, соединения общей формулы XXVI в подходящем растворителе, таком как ацетонитрил, взаимодействовало с солью фосфония, такой как гексафторфосфат бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфония (ВОР) в присутствии основания, такого как 1,8-диаза-7-бицикло[5.4.0]ундецен (ΌΒϋ), а затем добавляли (8)-трет-бутил 3-аминопирролидин-1карбоксилат. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре от 20 до 90°С в течение 18-72 ч. Реакцию можно, предпочтительно, проводить в атмосфере инертного газа, например, азота или аргона. Обычные условия включают 1 эквивалент соединений общей формулы XXVI, 1,0-1,5 экв. ВОР, 2,0 -4,0 экв. ΌΒϋ и 2,0-3,0 экв. (8)-трет-бутил 3-аминопирролидин-1-карбоксилата в ацетонитриле при 65°С в течение 72 ч в атмосфере аргона. Стадии ά) и е) можно проводить аналогичным методом, описанным для стадий ά) и е) схемы 1. Стадию ί) можно проводить, используя реакцию связывания фосфония, запускаемую основанием, аналогичным методике, описанной для стадии с) схемы 5. Обычные условия включают 1 экв. соединений общей формулы XXVI, 1,0-1,5 экв. ВОР, 2,0-4,0 экв. ΌΒϋ и 2,0-3,0 экв. амина общей формулы XVII в ацетонитриле при 90°С в течение 24 ч в атмосфере аргона.
- 39 029473
а) Спирт общей формулы ХХУШ взаимодействовал с б-бензил-4-хлор-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-б] пиримидином в обычных условиях путем депротонирования вторичного спирта, используя гидрид натрия (ЫаН) и органический растворитель ТГФ в атмосфере инертного газа при комнатной температуре. Ь) Ν-дебензилирование проводят в обычных условиях трансферного гидрирования, используя, среди прочего возможного, палладиевые катализаторы, предпочтительно, гидроксид палладия Ρά(ΟΗ)2 и, среди прочих возможных, формиат, предпочтительно, аммоний формиат, и органический растворитель, такой как, предпочтительно, метанол. Реакцию, предпочтительно, проводили в условиях кипячения с обратным холодильником. с) Реакцию связывания Бухвальда-Хартвига между соединением общей формулы ΧΙ и соединениями общей формулы К2-Х, проводили в обычных условиях реакции Бухвальда-Хартвига, используя такой лиганд, так Х-ГИок или 2-ди-трет-бутилфосфино-2'-(Ы,Ы-диметиламино)бифенил, с палладиевым катализатором, таким как Ρά2(άЬа)3 или Ρά2(άЬа)3·СΗС13 или Ρά(ΟАс)2, предпочтительно, Ρά2(άЬа)3 с Х-ННок, основанием, таким как, предпочтительно, Ск2СО3, или, предпочтительно, третВиОЫа, и органическим растворителем, таким как, предпочтительно, диоксан или, предпочтительно, ТГФ. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно 80-120°С, предпочтительно, 120°С. Реакцию можно, предпочтительно, проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон.
а) Соединения общей формулы νΙ взаимодействовали с фосгеном в подходящем растворителе, таком как СН2С12, в присутствии подходящего основания, такого как триэтиламин или Ν,Νдиизопропилэтиламин, при температуре от 0 до 25°С в течение 1-2 ч. Реакцию можно, предпочтительно,
- 40 029473
проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. Обычные условия включают 1,0 экв. соединения общей формулы VI, 1,0-5,0 экв. фосгена, 3,0-4,0 экв. триэтиламина в СН2С12 в атмосфере аргона в течение 1 ч. Ъ) Соединение общей формулы XXIX взаимодействовало с амином К5К6ЫН в присутствии подходящего основания, такого как триэтиламин или Ν,Ν-диизопропилэтиламин в подходящем растворителе, таком как СН2С12 или Ν,Ν-диметилформамид, при температуре от 10 до 30°С в течение 118 ч. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. Обычные условия включают 1,0 экв. соединения общей формулы XXIX, 1,0-1,2 экв. ΚΊΤ'ΝΙ I, 3,0-4,0 экв. триэтиламина в СН2С12 в атмосфере аргона в течение 2 ч. с) Соединения общей формулы VI взаимодействовали с карбамоилхлоридом КК^СОО в присутствии подходящего основания, такого как триэтиламин или Ν,Ν-диизопропилэтиламин, в подходящем растворителе, таком как СН2С12 или Ν,Νдиметилформамид, при температуре от 0 до 25 °С в течение 1-18 ч. Реакцию можно, предпочтительно, проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. Обычные условия включают 1,0 экв. соединения общей формулы VI, 1,0-1,2 экв. КД^СОО, 3,0-4,0 экв. триэтиламина в СН2С12 в атмосфере аргона в течение 18 ч. й) Соединения общей формулы VI взаимодействовали с соединением общей формулы XXXI в присутствии подходящего основания, такого как триэтиламин или Ν,Ν-диизопропилэтиламин, в подходящем растворителе, таком как СН2С12 или Ν,Ν-диметилформамид при температуре от 0 до 25°С в течение 1-18 ч. Реакцию можно, предпочтительно, проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. Обычные условия включают 1,0 экв. соединения общей формулы VI, 1,0-1,2 экв. соединения общей формулы XXXI, 1,0-2,0 экв. триэтиламина в СН2С12 в атмосфере аргона в течение 18 ч. е) Соединения общей формулы VI взаимодействовали с соединением формулы К7ОСОС1 в присутствии подходящего основания, такого как триэтиламин или Ν,Ν-диизопропилэтиламин, в подходящем растворителе, таком как СН2С12 или Ν,Ν-диметилформамид, при температуре от 0 до 25°С в течение 1-18 ч. Реакцию можно, предпочтительно, проводить в атмосфере инертного газа, таком как азот или аргон. Обычные условия включают 1,0 экв. соединения общей формулы VI, 1,0-1,2 экв. соединений общей формулы К7ОСОС1, 3,0-4,0 экв. триэтиламина в СН2С12 в атмосфере аргона в течение 18 ч.
Схема 8
XXVIII
а) Кватернизация третичного амина общей формулы XXXIII (где К8=алкил, например, бензил) с соединением общей формулы К9^ (где К9=алкил, например, метил, и Х=бром или йод) в обычных условиях, используя, в частности, ацетон в качестве органического растворителя. Ъ) Алкилирование амина общей формулы К2-№Н2 с четвертичным амином XXXIV проводили, используя основание, такое как, в частности, К2СО3, и органический растворитель, такой как, в частности, 2/1 смеси этанола и воды и нагревая реакционную смесь при 80-100°С, в частности, 80°С. с) Соединение общей формулы XXXV взаимодействовало с основанием, таким как, в частности, \а11, и соединением общей формулы (К10О)2СО (где К10=алкил, например, диметиловый эфир угольной кислоты). Реакционную смесь перемешивали при высокой температуре (90°С). й) Образование пиримидинового кольца проводили реакцией соединения общей формулы XXXVI с формамидин ацетатом с основанием, таким как метоксид натрия, и органическим растворителем, таким как метанол, при повышенной температуре, такой как 90°С, в течение 2-18 ч. е) Соединение общей формулы XXVI взаимодействовало с фосфорилом хлоридом в присутствии основания, такого как триэтиламин, в органическом растворителе, таком как толуол, пои повышенной температуре, такой как 100°С, в течение 12-18 часов, ί) Спирт общей формулы XXVIII взаимодействовал с соединением общей формулы XXXVII в обычных условиях депротонирования вторичного спирта, используя гидрид натрия (ΝπΙ I) и органический растворитель ТГФ в атмосфере инертного газа при комнатной температуре.
В том случае, если указано, что соединения получали способом, описанным ранее в примере, то специалисту будет понятно, что время реакции, количество эквивалентов реагентов и температура реакций может быть изменена для каждой конкретной реакции, и что может быть при этом необходимо или желательно использовать другие условия обработки или очистки.
- 41 029473
Пример 1. {(8)-3-[6-(6-Метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-д]пиримидин4-илокси]пирролидин-1-ил}(тетрагидропиран-4-ил)метанон.
Синтез примера 1. Способ 1а (в соответствие со схемой 8).
Гидрид натрия (60% в дисперсионном масле, 17,88 мг, 0,447 ммоль) добавляли в атмосфере аргона к раствору промежуточного соединения 3 (75 мг, 0,378 ммоль) в 2 мл сухого ТГФ. Суспензию перемешивали в атмосфере аргона при температуре окружающей среды в течение 15 мин. Добавляли 4-хлор-6(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-д]пиримидин (100 мг, 0,344 ммоль) и перемешивали при комн.темп. еще 3 дополнительных часа. Реакционную смесь гасили Н2О, экстрагировали СН2С12. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Ыа25О4, фильтровали и упаривали досуха. Очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле (СН2С12/МеОН 95/5) с получением {(5)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-д]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона в виде светло-желтой камеди (115 мг, 74% выход). 1Н-ЯМР (400 МГц, метанол-Щ, 298К) δ м.д. 1,59-1,87 (м, 4Н) 2,20 (с, 3Н) 2,27-2,43 (м, 2Н) 2,74-2,91 (м, 1Н) 2,97-3,03 (м, 2Н) 3,42-4,14 (м, 15Н) 5,75-5,86 (м, 1Н) 7,39-7,43 (м, 1н) 7,63-7,68 (м, 1Н) 8,57-8,61 (м, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=454,2, Κί(3) = 1,46 мин.
4-Хлор-6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-д]пиримидин.
Смесь 6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-д]пиримидин-4-ола (650
мг, 2,387 ммоль), фосфор оксихлорида (0,334 мл, 3,58 ммоль), триэтиламина (0,665 мл, 4,77 ммоль) и толуола (12 мл) нагревали при 100°С в течение 16 ч. Смесь нейтрализовали добавлением твердого бикарбоната натрия, фильтровали, и раствор концентрировали в вакууме. Оставшийся черный осадок помещали в СН2С12 и воду, слои разделяли, и органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением темно-коричневого твердого вещества. Твердое вещество растирали в этилацетате, фильтровали и сушили в высоком вакууме с выходом 4-хлор-6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-д]пиримидина (630 мг, 91% выход) в виде рыжевато-коричневого твердого вещества. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6, 298К) δ м.д. 2,15 (с, 3Н) 3,03 (т, 2Н) 3,53 (т, 2Н) 3,82 (с, 3Н) 4,26 (с, 2Н) 7,49 (дд, 1Н) 7,74 (д, 1Н) 8,85 (с, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=291,1, Κί(4) = 0,97 мин.
6-(6-Метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-д]пиримидин-4-ола.
Смесь 6'-метокси-5'-метил-4-оксо-3,4,5,6-тетрагидро-2Н-[1,3']бипиридинил-3-метилового эфира
карбоновой кислоты (900 мг, 3,23 ммоль), ацетата формамидина (521 мг, 4,85 ммоль), метоксида натрия (5,4 Молярная масса) в метаноле (2,395 мл, 12,94 ммоль) и метанола (4 мл) нагревали до 90°С в течение 3 ч. Смесь оставляли остывать до комнатной температуры, разводили в СН2С12, нейтрализовали уксусной кислотой (0,741 мл, 12,94 ммоль) и гасили Н2О. Слои разделяли, и водный слой дважды промывали СН2С12, органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением желтого твердого вещества. Твердое вещество растирали в этилацетате с выходом 6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3д]пиримидин-4-ола (669 мг, выход 76%) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6, 298К) δ м.д. 2,14 (с, 3Н) 2,72 (т, 2Н) 3,39 (т, 2Н) 3,81 (с, 3Н) 3,90 (с, 2Н) 7,42 (д, 1Н) 7,67 (д, 1Н) 8,07 (с, 1Н) 12,46 (ушир.с, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=273,1, Κί(3) = 1,30 мин.
6'-Метокси-5'-метил-4-оксо-3,4,5,6-тетрагидро-2Н-[1,3']бипиридинил-3-метиловый эфир карбоновой кислоты.
- 42 029473
К перемешиваемой суспензии гидрида натрия (60%, 153 мг, 6,36 ммоль) в диметилкарбонате (3,82 мл, 45,4 ммоль) при комнатной температуре медленно добавляли 6'-метокси-5'-метил-2,3,5,6-тетрагидро[1,3']бипиридинил-4-он (1 г, 4,54 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником (90°С) в течение 1 ч, а затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь разделяли между СН2С12 и водой и осторожно добавляли раствор 1н. НС1. Водный слой разделяли и промывали, добавляя порциями СН2С12. Объединенные органические экстракты промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением сырого продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле (гептан/этилацетат 3/1) с получением 6'-метокси-5'-метил-4оксо-3,4,5,6-тетрагидро-2Н-[1,3']бипиридинил-3-метилового эфира карбоновой кислоты (975 мг, выход 77%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО, 298Κ) (наблюдали смесь кето и енольных таутомеров) δ м.д. 2,12 (с, 6Н) 2,36-2,69 (м, 4Н) 3,26-3,96 (м, 20Н) 7,34-7,77 (м, 4Н) 11,84 (с, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=279,1, К1(3) = 1,51 мин (таутомер 1) и 1,70 мин (таутомер 2).
6'-Метокси-5'-метил-2,3,5,6-тетрагидро-[1,3']бипиридинил-4-он.
Суспензию соли йодида 1-бензил-1-метил-4-оксо-пиперидиния (Ке£: ΤθΓίο1αηΐ, К.; Огд. Вей., Уо1. 1, Νο 8, 1999) (3,61 г, 10,86 ммоль) в воде (10 мл) медленно добавляли к нагреваемому с обратным холодильником раствору 2-метокси-5-амино-3-пиколина (1 г, 7,24 ммоль) и карбоната калия (0,140 г, 1,013 ммоль) в этаноле (20 мл). Реакционную смесь нагревали до кипения с обратным холодильником в течение дополнительных 3-х часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между СН2С12 и водой. Органический слой отделяли и промывали, добавляя порциями СН2С12. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением сырого продукта, который очищали при помощи флэшхроматографии на силикагеле (гептан/этилацетат 1/1) с получением 6'-метокси-5'-метил-2,3,5,6тетрагидро-[1,3']бипиридинил-4-она (1,15 г, выход 72%) в виде светло-желтой камеди. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО, 298Κ) δ м.д. 2,12 (с, 3Н) 2,42 (т, 4Н) 3,46 (т, 4Н) 3,80 (с, 3Н) 7,40 (д, 1Н) 7,71 (д, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=221,1, К1(3) = 1,41 мин.
Синтез примера 1. Способ 1Ь (в соответствие со схемой 1).
Стадия 3.
К смеси 6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-4-((8)пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-ά] пиримидина (639 мг, 1,87 ммоль) в СН2С12 (5 мл) добавляли кислотный тетрагидрохлорид-2Нпиран-4-карбонилхлорида (306 мг, 2,06 ммоль) и триэтиламин (0,522 мл, 3,74 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Реакционную смесь концентрировали в вакууме. Очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой системы Οΐ1δοη, а затем нейтрализовали объединенные фракции при помощи экстракции СН2С12/ 1н. ΝαΟΙ В отделением органической фазы через пробирку для разделения фаз и упариванием с получением {(δ)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-ά]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона (432 мг, 51% выход) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66, 298Κ) δ м.д. 1,50-1,65 (м, 4Н) 2,10-2,32 (м, 5Н) 2,62-2,78 (м, 1Н) 2,85-2,95 (м, 2Н) 3,30-3,95 (м, 13Н) 4,0-4,20 (м, 2Н) 5,61-5,72 (м, 1Н) 7,42 (шир., 1Н) 7,68 (м, 1Н) 8,60-8,61 (м, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=454,2, К1(1) = 1,42 мин.
6-(6-Метокси-5-метилпиридин-3-ил)-4-((δ)пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-ά]
пиримидин.
Стадия 2. Трет-бутиловый эфир (8)-3-[6-(6-Метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты (2,05 г, 4,63 ммоль) растворяли в ТФУ/СН2С12 (1/2) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, остаток разбавляли СН2С12, органический слой промывали 1н. ΝαΟΙ I, затем насыщенным солевым раствором, сушили над Να2δΟ4, фильтровали и упаривали с получением 6-(6метокси-5-метилпиридин-3-ил)-4-((δ)пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-ά]пиримидина. 1Н ЯМР (400 МГц, СЭСТ, 298Κ) δ м.д. 2,20-2,30 (м, 2Н), 2,22 (с, 3Н),3,00-3,06 (т, 2Н), 3,09-3,18 (м, 1Н), 3,22-3,37 (м, 3Н), 3,45-3,50 (т, 2Н), 3,95 (с, 3Н), 4,10 (с, 2Н), 4,20-4,65 (шир. с, 1Н), 5,63-5,69 (м, 1Н), 7,21-7,252 (м, 1Н), 7,70-7,74 (м, 1Н), 8,60 (с, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=341,9, К1(7) = 0,61 мин.
- 43 029473
Трет-бутиловый эфир (8)-3-[6-(6-Метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6] пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты.
Стадия 1.
Х-РНоз (0,96 г, 2,01 ммоль, 0,3 экв.), Р62(6Ьа)3 (0,615 г, 0,672 ммоль, 0,1 экв.), Сз2СО3 (4,38 г, 13,44 ммоль, 2 экв.) объединяли и продували в течение 10 мин аргоном. К этой смеси добавляли раствор третбутилового эфира (8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 7) (2,15 г, 6,72 ммоль) в диоксане (6 мл) и 5-бром-2-метокси-3метилпиридина (1,76 г, 8,73 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, реакционную смесь фильтровали через Нуйо, добавляли ЛсОЕ1, и органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Ха28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в диоксане (6 мл) и добавляли в стеклянный флакон, содержащий 5-бром-2-метокси-3-метилпиридин (1,76 г, 8,73 ммоль), Х-РНоз (0,96 г, 2,01 ммоль), Р62(6Ьа)3 (0,615 г, 0,672 ммоль), Сз2СО3 (4,38 г, 13,44 ммоль). Пробирку закрывали, и реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, реакционную смесь фильтровали через Нуйо, добавляли ЛсОЕ1, и органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Ха28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле (СН2С12 затем ТВМЕ, затем ТВМЕ/МеОН 99/1 до 90/10) с получением трет-бутилового эфира (8)-3-[6-(6-метокси-5метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты в виде желтой пены (2,05 г, 69% выход). 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66, 298К) δ м.д. 1,35-1,44 (ушир.с, 9Н) 2,07-2,23 (м, 2Н), 2,14 (с, 3Н), 2,87-2,93 (м, 2Н), 3,39-3,68 (м, 6Н), 3,81 (с, 3Н), 4,03-4,08 (м, 2Н), 5,56-5,63 (м, 1Н), 7,41-7,46 (м, 1Н), 7,67-7,73 (м, 1Н), 8,60 (с, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=342,2, Κί(2) = 0,94 мин.
Кристаллизация примера 1 при помощи нагревания и охлаждения в ацетонитриле
1 Часть соединения примера 1 (например, 100 мг) смешивали с 5 частями ацетонитрила (0,5 мл на каждые 100 мг соединения) при перемешивании. Раствор получали нагреванием до 40-60°С. Затем смесь оставляли медленно остывать до комнатной температуры. После дальнейшего охлаждения в течение ночи (5°С) наблюдали выпадения осадка. В случае, если осадка не наблюдалось, объем этанола уменьшали, используя поток азота и повторяя в течение ночи стадию охлаждения. Для удаления этанола смесь центрифугировали. Твердое вещество сушили в вакууме при 25°С и давлении 70 мБар. Получали пример 1 в виде безводной кристаллической формы с точкой плавления 131°С. Эту кристаллическую форму также наблюдали при использовании других способов и/или растворителей, таких, как нагревание и охлаждение в этаноле, ацетоне, этилацетате, изопропаноле, при получении суспензии в гептане, или при добавлении антирастворителя в ТГФ или 3-метил-1-бутаноле, используя гептан в качестве антирастворителя. Эти результаты показали воспроизводимость и масштабируемость кристаллической формы, а также позволяли предположить, что такую же форму можно получать при других экспериментальных условиях, чем те, что описаны выше.
Список наиболее значимых пиков на порошковой рентгеновской дифрактограмме примера 1 в виде ангидридной формы (способ Х2):
- 44 029473
Кристаллизация из тригидратной формы примера 1 путем получения взвеси в воде
Взвесь примера 1 в воде, например, 1 часть примера 1 в 10 частях воды, при комнатной температуре давала тригидратную форму примера 1. Кристаллы разделяли посредством центрифугирования и сушили в условиях окружающей среды.
Список наиболее значимых пиков порошковой рентгеновской дифрактограммы тригидратной формы примера 1 (способ Х2):
- 45 029473
Получение соли лимонной кислоты примера 1
0,5 г примера 1 (анализ 91,8%) растворяли в 5 мл метилэтилкетона и 0,25 мл воды и нагревали при 60°С. Добавляли 213 мг лимонной кислоты при 50°С, и смесь оставляли остывать до комнатной температуры в течение 30 мин. Кристаллизация происходила при 45°С. Смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Кристаллы собирали путем фильтрации. Осадок на фильтре трижды промывали 1 мл метилэтилкетона и после этого сушили в течение 16 час при 50°С и прибл. 10 мБар вакуум. Элементарный анализ цитратной соли показал 1:1 (моногидратную) форму.
Список наиболее значимых пиков порошковой рентгеновской дифрактограммы соли лимонной кислоты примера 1 (способ Х1):
Получение соли фумаровой кислоты примера 1
0,5 г примера 1 (анализ 91,8%) растворяли в 15 мл ацетонитрила и 0,2 мл воды и нагревали при 76°С. Добавляли 129 мг фумаровой кислоты при 60°С. Раствор оставляли остывать до комнатной температуры в течение 30 мин. Соль осаждали, и суспензию перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Кристаллы собирали путем фильтрации. Осадок на фильтре трижды промывали 1 мл ацетонитрила и после этого сушили в течение 16 ч при 50°С и прибл. 10 мБар вакуум. Элементарный анализ фумаратной соли фумаровой кислоты показал 1:1 (моногидратную) форму.
Список наиболее значимых пиков порошковой рентгеновской дифрактограммы соли фумаровой кислоты примера 1 (способ Х1):
- 46 029473
Получение нападизилата примера 1
0,5 г Примера 1 (анализ 91,8%) растворяли в 5 мл абсолютного этанола и 0,25 мл воды при 60°С. Добавляли 250 мг нафталендисульфоновой кислоты при 50°С, и смесь оставляли остывать до комнатной температуры в течение 30 мин. Кристаллизация происходила при 40°С. Смесь перемешивали в течение 16 час при комнатной температуре. Кристаллы собирали путем фильтрации. Осадок на фильтре трижды промывали 1 мл этанола и после этого сушили в течение 16 час при 50°С и прибл. 10 мБар вакум. Элементарный анализ нападизилата показал 2:1 (моногидратную) форму.
Список наиболее значимых пиков порошковой рентгеновской дифрактограммы нападизилата примера 1 (способ Х1):
Примеры 2-9 получали, используя методики, аналогичные методикам, описанным в примере 1 (способ 1Ь), с использованием соответствующих исходных веществ.
Пример 2 οχ Яс 0 Кб(1> (мин.) 471,3 М3 : [М+Н] + 1,21
Название: { (5)-3- [ 6- (2, 4-диметоксипиримидин-5-ил) 5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой С Получали, используя процесс стадии 3 способа 1Ь, из промежуточного соединения 8 и хлорида тетрагидропиран-4карбонила
ТН ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ, 298К) δ м.д. 1,50-1, 86 (м, 4Н) 2,20-2,45 (м, 2Н) 2,70-2,87 (м, 1Н) 2,96-2,99 (м, 2Н) 3,35-4,14 (м, 18Н) 5, 69-5, 85 (м, 1Н) 7,96 (м, 1Н) 8,58 (м, 1Н)
- 47 029473
Название: 2-Метокси-5-{4-[(5)-1-(тетрагидропиран-4
карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3— ά]пиримидин-б-ил}никотинонитрил
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали, используя процесс стадий 2-3 способа 1Ь, из промежуточного соединения 11 и хлорида тетрагидропиран-4карбонила
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 1,50-1, 64 (м, 4Н)
2,10-2,31 (м, 2Н) 2,62-2,77 (м, 1Н) 2,87-2,95 (м, 2Н) 3,293,96 (м, 13Н) 4,08-4,21 (м, 2Н) 5, 58-5,73 (м, 1Н) 8,06-8,09 (м, 1Н) 8,23-8,27 (м, 1Н) 8,60-8,64 (м, 1Н)
Пример 4 Ή -·ΰ НОГ) (мин.) 1,27 М3 : [М+Н] + 414,2
Название: 1-{ (5) -3-[6-(5,6-диметоксипиридин-З-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-ил}пропан-1-он
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А Получали, используя процесс стадий 2-3 способа 1Ь, из промежуточного соединения 10 и пропионилхлорида
Ή ЯМР (400 МГц, СОС1з-4, 298К) δ м.д. 1,10-1,20 (м, ЗН) 2,19-2,49 (м, 4Н) 3, 02-3, 08 (м, 2Н) 3,45-3,52 (м, 2Н) 3,563,68 (м, 2Н) 3,72-3, 90 (м, 2Н) 3,91 (с, ЗН) 3,99 (с, ЗН) 4,07-4,12 (м, 2Н) 5, 75-5, 78 (м, 1Н) 6,89-7,01 (м, 1Н) 7,447,46 (м, 1Н) 8, 60-8, 62 (м, 1Н) °из° ! нг(1> М3: Пример 5 °γΝ\ (мин.) [М+Н] + 1,25 470,2 ОМ Название: {(5)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-З-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}(тетрагидропиран-4-ил)метанон Способ очистки: Метод с обращенной фазой А Получали, используя процесс стадий 2-3 способа 1Ь, из промежуточного соединения 10 и тетрагидропиран-4-карбонил хлорида
Ή ЯМР (400 МГц, СОС1з-4, 298К) δ м.д. 1,56-1,68 (м, 2Н) 1, 88-2,00 (м, 2Н) 2,20-2,38 (м, 2Н) 2,53-2,70 (м, 1Н) 3,053,10 (м, 2Н) 3,39-3,54 (м, 4Н) 3,59-3,82 (м, 4Н) 3,91 (с, ЗН) 3,99 (с, ЗН) 4,01-4,10 (м, 4Н) 5, 62-5, 78 (м, 1Н) 6,89-6,90 (м, 1Н) 7,40-7,43 (м, 1Н) 8,60-8,65 (м, 1Н)
- 48 029473
Название: 2-Амино-5-{4-[(5)-1-(тетрагидропиран-4карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3ά]пиримидин-б-ил}никотинонитрил
Получали, используя процесс стадии 3 способа 1Ь, из промежуточного соединения 9 и тетрагидропиран-4-карбонил хлорида
Способ очистки: 1- Хроматография с нормальной фазой СН2С1г/МеОН в качестве растворителя
2- Метод с обращенной фазой А
Щ ЯМР (400 МГц, СОС13-с1, 298К) δ м.д. 1,45-1,75 (м, 2Н)
1,86-2,02 (м, 2Н) 2,20-2,40 (м, 2Н) 2,50-2,75 (м, 1Н) 3,023,09 (м, 2Н) 3,38-4,20 (м, 12Н) 4,96 (с, 1Н) 5, 70-5, 78 (м, 1Н) 7,39 (м, 1Н) 8,13-8,14 (м, 1Н) 8,62-8,64 (м, 1Н)
Пример
7
МЗ : [М+Н] + 458,1
Название: { (5)-3-[б-(5-Фтор-б-метоксипиридин-3-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанон
Способ очистки: 11 г КР-ΝΗ картридж В1обаде, элюировали гептан/ЕГОАс от 100/0 до 0/100
Получали, используя процесс стадий 2-3 способа 1Ь, из промежуточного соединения 12 и тетрагидропиран-4-карбонил хлорида
Ш ЯМР (400 МГц, СОС1з, 298К) δ м.д. 1,56-1,74 (м, 2Н)
1, 87-2,02 (м, 2Н) 2,19-2,42 (м, 2Н) 2,51-2,74 (м, 1Н) 3,013,09 (м, 2Н) 3,39-4,20 (м, 15Н) 5, 70-5, 79 (м, 1Н) 7,13-7,20
(м, 1Н) 7, 63-7, 69 (м, 1Н) 8,59-8, 66 (м, 1Н)
Пример
К®1’
(мин.)
1,35
МЗ :
[М+Н] + 425, 1
Название: 2-Метокси-5-{4-[(5)-1-(2-метоксиацетил) пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3ά]пиримидин-б-ил}никотинонитрил
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали, используя процесс стадий 2-3 способа 1Ь, из
промежуточного соединения 11 и метоксиацетилхлорида
Щ ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 2,11-2,32 (м, 2Н)
2,88-2,95 (м, 2Н) 3,26-3,32 (м, ЗН) 3,46-3, 84 (м, 6Н) 3,913,95 (м, ЗН) 3, 98-4, 08 (м, 2Н) 4,13-4,19 (м, 2Н) 5,59-5,71 (м, 1Н) 8,07-8,10 (м, 1Н) 8,25-8,28 (м, 1Н) 8,61-8,62 (м, 1Н)
- 49 029473
Пример 10. (2,4-Диметилоксазол-5-ил)-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанон.
Стадия 1.
Смесь 2,4-диметилоксазол-5-карбоновая кислота (36,4 мг, 0,258 ммоль), НТВИ (98 мг, 0,258 ммоль), ΌΙΡΕΑ (86 мкл, 0,49 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. Затем добавляли раствор 6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-4-((8)пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидина (полученный в примере 1, способ 1Ь, стадия 2) (80 мг, 0,23 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (86 мкл, 0,49 ммоль) в ДМФ (0,4 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Οίίδοπ, а затем нейтрализовали объединенные фракции над РЕ-НСО3 МР с получением (2,4-диметилоксазол-5-ил)-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона (91 мг, 84% выход) в виде белого лиофилизированного порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, метанол-64, 298К) δ м.д. 2,17 (с, 3Н) 2,27-2,52 (м, 8Н) 2,953,03 (м, 2Н) 3,44-3,55 (м, 2Н) 3,70-4,26 (м, 9Н) 5,76-5,92 (м, 1Н) 7,40 (шир. с, 1Н) 7,64 (шир. с, 1Н) 8,558,62 (м, 1Н), ЖХМС: [М+Н]+=465,2, К1(1) = 1,51 мин.
Примеры 11-49 и 51-53 получали с использованием методик, аналогичным методикам, которые использовали в примере 10, стадия 1, с использованием соответствующих исходных веществ.
- 50 029473
Название: { (5)-3-[6-(6-Метокси-5-метилпиридин-3-ил) 5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-ил}-оксазол-5-илметанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием оксазол-5-карбоновой кислоты
ТН ЯМР (400 МГц, метанол-04, 298К) δ м.д. 2,17 (с, ЗН)
2,30-2,39 (м, 1Н) 2,41-2,50 (м, 1Н) 2, 95-3, 03 (м, 2Н) 3,453,52 (м, 2Н) 3, 76-4,32 (м, 9Н) 5,79-5, 94 (м, 1Н) 7,40 (шир.
с, 1Н) 7, 62-7, 66 (м, 1Н) 7,75-7,82 (м, 1Н) 8,34-8,40 (м, 1Н)
8,56-8,61 (м, 1Н)
Название: { (5)-3-[б-(б-Метокси-5-метилпиридин-З-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-ил}-(З-метил-ЗН-имидазол-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием З-метил-ЗН-имидазол-4карбоновой кислоты
гН ЯМР (400 МГц, метанол-64, 298К) δ м.д. 2,17 (с, ЗН)
2,30-2,45 (м, 2Н) 2,93-3, 05 (м, 2Н) 3,43-3,55 (м, 2Н) 3,744,24 (м, 12Н) 5,82 (шир. с, 1Н) 7,35-7,56 (м, 2Н) 7,66 (м, 1Н) 7,76 (шир. с, 1Н) 8,55-8,60 (м, 1Н)
Название: { ( 5) -3- [ 6-(6-Метокси-5-метилпиридин-3-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-ил}-(2-метилоксазол-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием 2-метилоксазол-4-карбоновая
кислота
Щ ЯМР (400 МГц, метанол-64, 298К) δ м.д. 2,17 (с, ЗН)
2,27-2,43 (м, 2Н) 2,43-2,50 (м, ЗН) 2,95-3,02 (м, 2Н) 3,453,53 (м, 2Н) 3,72-4,33 (м, 9Н) 5, 78-5, 89 (м, 1Н) 7,37-7,43 (м, 1Н) 7,61-7,67 (м, 1Н) 8,25-8,31 (м, 1Н) 8,57-8, 60 (м, 1Н)
- 51 029473
Пример 15 1 ΓΝ> ЕРЯ) (мин.) 1,53 М3: [М+Н] + 454,2
Название: (3-Метоксициклобутил) -{ ( 5)-3-[6-(6-метокси-5метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин4-илокси]пирролидин-1-ил[метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием 3-метоксициклобутанкарбоновой
кислоты
2Н ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ, 298К) δ м.д. 1,99-2,55 (м, 9Н) 2,78-2, 95 (м, 1Н) , 2,95-3, 02 (м, 2Н) 3,20-3,23 (м, ЗН) 3,47-3,52 (м, 2Н) 3,52-4,10 (м, ЮН) 5,73-5,81 (м, 1Н) 7,387,42 (м, 1) 7, 63-7, 67 (м, 1Н) 8,57 (с, 1Н)
О
1 ЕРЯ)
Λ? М3: [М+Н]+
Пример 16 Τ Ίί ? (мин.)
ЭЕ I 437,2
О 1,41
Ή
Название: ({ (5) -3-[6-(6-Метокси-5-метилпиридин-3-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-ил}-оксазол-4-илметанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием оксазол-4-карбоновой кислоты
гН ЯМР (400 МГц, метанол-64, 298К) δ м.д. 2,17 (с, ЗН)
2,29-2,37 (м, 1Н) 2,37-2,44 (м, 1Н) 2, 94-3, 03 (м, 2Н) 3,453,53 (м, 2Н) 3,75-4,38 (м, 9Н) 5, 79-5, 89 (м, 1Н) 7,38-7,42 (м, 1Н) 7, 62-7, 66 (м, 1Н) 8,19-8,26 (м, 1Н) 8,44-8,48 (м, 1Н)
8,56-8,61 (м, 1Н)
О.
Пример
17
N
г-Ν
..о
ЕрЯ)
(мин.) 1,35
М3 :
[М+Н] + 495, 2
Название: 1- (4- { (5) -3-[б-(6-Метокси-5-метилпиридин-3ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-карбонил[пиперидин-1-ил)-этанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием 1-ацетилпиперидин-4-карбоновой
кислоты
ТН ЯМР ( (400 МГц, метанол-64, 298К) δ м.д 4Н) 2,06-2,13 (м, ЗН) 2,18 (с, ЗН) 2,23-2,43 2,93 (м, 2Н) 2,95-3, 04 (м,
(м, 2Н) 3,55-4,12 (м, ЮН)
2Н) 3,15-3,25
4,46-4,59 (м,
(м,
1Н)
1,49-1, 89 (м,
(м, 2Н) 2,611Н) 3,42-3,53
5, 74-5, 86 (м,
1Н) 7,38-7,45 (м, 1Н) 7,62-7,67 (м, 1Н) 8,56-8,61 (м, 1Н)
- 52 029473
Пример
18
КПП)
(мин.) 1,47
М3 :
[М+Н] + 451,2
Название: { (5)-3-[б-(б-Метокси-5-метилпиридин-З-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-ил}-(4-метилоксазол-5-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали, используя, 4-метилоксазол-5-карбоновой кислоты
Ή ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ, 298К) δ м.д. 2,17 (с, ЗН) 2,29-2,47 (м, 5Н) 2,95-3,3,03 (м, 2Н) 3,45-3,52 (м, 2Н) 3,734,30 (м, 9Н) 5,79-5,90 (м, 1Н) 7,41 (м, 1Н) 7,65 (ушир.с, 1Н) 8,19-8,24 (м, 1Н) 8,55-8,61 (м, 1Н)
Пример
19
Название: 5-{(5)-3-[б-(б-Метокси-5-метилпиридин-З-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-карбонил}-1Н-пиридин-2-он
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием б-оксо-1,6-дигидропиридин-Зкарбоновой кислоты
Ή ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ, 298К) δ м.д. 2,19 (с, ЗН)
2,30-2,40 (м, 2Н) 2,95-3,05 (м, 2Н) 3,45-3,55 (м, 2Н) 3,744,22 (м, 9Н) 5, 73-5, 85 (м, 1Н) 6, 50-6, 56 (м, 1Н) 7,39-7,45 (м, 1Н) 7,60-7,70 (м, 1Н) 7,78-7,90 (м, 2Н) 8,50-8,60 (м, 1Н)
Пример
20
Название: { (5)-3-[ б-(б-Метокси-5-метилпиридин-З-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-ил}-(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием 1-метил-1Н-имидазол-4карбоновой кислоты
Ή ЯМР (400 МГц, метанол-04, 298К) δ м.д. 2,17 (с, ЗН)
2,28-2,41 (м, 2Н) 2,94-3,02 (м, 2Н) 3,45-3,52 (м, 2Н) 3,734,35 (м, 12Н) 5,80-5,85 (м, 1Н) 7,38-7,43 (м, 1Н) 7,60-7,69 (м, ЗН) 8,55-8,61 (м, 1Н)
- 53 029473
Пример 21 0 /С 1 гм> °у% 0'"^ су ЕДА) (мин.) 1,23 М3 : [М+Н] + 453, 1
Название : {(5)-3-[б-(5, б-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[ 4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}оксазол-4-илметанон
Способ очистки: Хроматография с нормальной фазой с ЕДОАс/МеОН в качестве растворителя Получали с использованием промежуточного соединения 10 и способа 1Ь, стадии процесса 2, примера 1, затем процесс стадии 1 примера 10 с использованием оксазол-4-карбоновой кислоты
Щ ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 2,10-2,37 (м, 2Н) 2,81-2,99 (м, 2Н) 3,46-4,27 (м, 14 Н) 5,58-5,77 (м, 1Н) 7,087,20 (м, 1Н) 7,30-7,42 (м, 1Н) 8,43-8,54 (м, 1Н) 8,55-8,69 (м, 2Н)
Пример 22 1 ΓΝ °ум о-"% ου ЕДА) (мин.) 1,18 М3: [М+Н]+ 453, 1
Название: { (5) -3- [6-(5,6-диметоксипиридин-З-ил)-5,6, 7,8тетрагидропиридо [ 4,3 — с1 ] пиримидин-4-илокси] пирролидин-1-ил} оксазол-5-илметанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А Получали, используя Промежуточное соединение 10 и процесс стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем процесс стадии 1 примера 10 с использованием оксазол-5-карбоновой кислоты
Щ ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 373К) δ м.д. 2,22-2,42 (м, 2Н) 2,80-3,00 (м, 2Н) 3,50-4,30 (м, 14 Н) 5,63-5,83 (м, 1Н) 7,067,09 (м, 1Н) 7,38-7,40 (м, 1Н) 7,69 (с, 1Н) 8,40 (с, 1Н) 8,57 (с, 1Н)
Пример 2 3 1 ΓΝ си ЕДА) (мин.) 1,3 М3: [М+Н] + 467,2
Название: {(5)-3-[6-(5,б-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}(2-метилоксазол-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А Получали с использованием промежуточного соединения 10 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем процесса стадии 1 примера 10 с использованием 2-метилоксазол-4карбоновой кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-Дб, 298К) δ м.д. 2,11-2,36 (м, 2Н) 2,40-2,44 (м, ЗН) 2,81-2,97 (м, 2Н) 3,40-4,28 (м, 14 Н) 5,625,78 (м, 1Н) 7,11-7,21 (м, 1Н) 7,29-7,41 (м, 1Н) 8,42-8,52 (м, 1Н) 8,59-8,67 (м, 1Н)
- 54 029473
°И1 1 гм> ЕД(1) М3:
Пример (мин.) [М+Н] +
24 Ον 1,38 498,3
Название : { (5)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-З-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}(2,2-диметилтетрагидропиран-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 10 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем процесса стадии 1 примера 10 с использованием 2,2-диметилтетрагидропиран-4карбоновой кислоты
Щ ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 0, 97-1,24 (м, 6Н)
1,28-1,58 (м, 4Н) 2,08-2,34 (м, 2Н) 2,72-2,97 (м, ЗН) 3,434,12 (м, 16 Н) 5,55-5,76 (м, 1Н) 7,14-7,20 (м, 1Н) 7,31-7,37 (м, 1Н) 8,59-8,64 (м, 1Н)
Пример 25 1 ονΝ. у Гр о- ЕДЯ) (мин.) М3 : [М+Н] +
1,32 481,2
Название: {(5)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-З-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}(2,4-диметилоксазол-5-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 10 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем процесса стадии 1 примера 10 с использованием 2,2-диметилтетрагидропиран-4карбоновой кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 2,11-2,48 (м, 8Н) 2,83-2,98 (м, 2Н) 3,43-4,18 (м, 14 Н) 5,56-5,89 (м, 1Н) 7,127,20 (м, 1Н) 7,32-7,40 (м, 1Н) 8,57-8,67 (м, 1Н)
- 55 029473
Пример
27
НЕ1’ (мин.) 1,46
М3 :
[М+Н] + 479,2
Название: 2-Метокси-5-{4-[(Я) -1-(2-тетрагидропиран-4-илацетил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3— б]пиримидин-6-ил}никотинонитрил
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А Получали с использованием промежуточного соединения 11 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем процесса стадии 1 примера 10 с использованием (тетрагидропиран-4-ил)-уксусной
кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 1,11-1,28 (м, 2Н) 1,49-1,64 (м, 2Н) 1,87-1,99 (м, 1Н) 2,07-2,29 (м, 4Н) 2,862,95 (м, 2Н) 3,19-3,30 (м, 2Н) 3,42-3, 88 (м, 8Н) 3,90-3,96 (м, ЗН) 4,09-4,19 (м, 2Н) 5, 57-5, 70 (м, 1Н) 8,07-8,11 (м, 1Н) 8,22-8,28 (м, 1Н) 8,58-8,65 (м, 1Н)
Пример
28
КМ
(мин.) 1,51
М3 :
[М+Н] + 476, 2
Название: 5-{4- [ (3)-1-(2,4-диметилоксазол-5карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3б]пиримидин-6-ил}-2-метоксиникотинонитрил
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 11 и
процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем процесса стадии 1 примера 10 с использованием 2,4-диметилоксазол-5-карбоновой
кислоты
У ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 2,16-2,46 (м, 5Н)
2,30 (с, ЗН) 2,85-2,96 (м, 2Н) 3,50-4,20 (м, 8Н) 3,92 (с, ЗН)
5, 64-5, 80 (м, 1Н) 8,04-8,12 (м, 1Н) 8,22-8,30 (м, 1Н) 8,62
(с, 1Н)
Пример
29
ИДЯ)
(мин.) 1,58
М3: [М+Н] + 493,2
Название: 5-{4-[(5)-1-(2,2-диметилтетрагидропиран-4·
карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3б]пиримидин-6-ил}-2-метоксиникотинонитрил
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 11 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем процесса стадии 1 примера 10 с использованием 2,2-диметилтетрагидропиран-4карбоновой кислоты
У ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 1,00-1,24 (м, 6Н) 1,28-1,73 (м, 4Н) 2,10-2,34 (м, 2Н) 2, 62-2,97 (м, ЗН) 3,433,84 (м, 8Н) 3,94 (с, ЗН) 4,09-4,20 (м, 2Н) 5,58-5,75 (м, 1Н) 8,05-8,11 (м, 1Н) 8,20-8,29 (м, 1Н) 8,59-8, 65 (м, 1Н)
- 56 029473
Пример
30
..ОУ
НДС)
(мин.) 1,55
М3 :
[М+Н] + 451,1
Название: { (5)-3-[б-(б-Метокси-5-метилпиридин-З-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-ил}-(5-метилоксазол-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием 5-метилоксазол-4-карбоновой
кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 2,10-2,32 (м, 2Н)
2,13 (с, ЗН) 2,52-2,54 (м, ЗН) 2,85-2,93 (м, 2Н) 3,42-3,50
(м, 2Н) 3,61-4,22 (м, 6Н) 3,81(с, ЗН) 5,64-5,72 (м, 1Н) 7,417,45 (м, 1Н) 7,67-7,71 (м, 1Н) 8,27-8,33 (м, 1Н) 8,59-8,64
(м, 1Н)
О,
Пример
31
,о
кип
(мин.)
1,53
М3 :
[М+Н] + 451,1
Название: {(5)-3-[6-(б-Метокси-5-метилпиридин-З-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}(5-метилизоксазол-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием 5-метилизоксазол-4-карбоновой
кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 2,10-2,31(м, 2Н) 2,14
(с, ЗН) 2,54-2,59 (м, ЗН) 2,83-2,97 (м, 2Н) 3,41-3,53 (м, 2Н)
3,59-4,15 (м, 6Н) 3,81 (с, ЗН) 5, 65-5, 73 (м, 1Н) 7,40-7,48
(м, 1Н) 7,67-7,74 (м, 1Н) 8,56-8,66 (м, 1Н) 8,83-8,95 (м, 1Н)
Пример 32
I—N
ν·Ο
N
νό
НДС)
(мин.) 1,53
М3 :
[М+Н] + 451,1
Название: { (5)-3-[б-(б-Метокси-5-метилпиридин-З-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин1-ил}-(З-метилизоксазол-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием З-метилизоксазол-4-карбоновой
кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 2,08-2,37 (м, 8Н)
2,82-2,95 (м, 2Н) 3,40-3, 53 (м, 2Н) 3,55-4,16 (м, 9Н) 5,655,75 (м, 1Н) 7,41-7,48 (м, 1Н) 7, 68-7,73 (м, 1Н) 8,57-8,65 (м, 1Н) 9,28-9,40 (м, 1Н)
- 57 029473
3
Пример 33
π
ΙΊ
,ο
КПП)
(мин.)
1,59
М3: [Μ+Η]437,2
Название: изоксазол-3-ил-{(5)-3-[б- (б-Метокси-5метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин4-илокси]пирролидин-1-ил}метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием изоксазол-3-карбоновой кислоты
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 2,13 (м, ЗН) 2,212,31 (м, 2Н) 2,86-2,94 (м, 2Н) 3,43-3,50 (м, 2Н) 3,66-4,15
(м, 9Н) 5, 67-5, 73 (м, 1Н) 6,84-6,91 (м, 1Н) 7,42-7, 46 (м, 1Н)
7,67-7,74 (м, 1Н) 8,57-8,64 (м, 1Н) 9,05-9,13 (м, 1Н)
Пример
34
О Ο-Ν
,.о
КПП)
(мин.) 1,5
М3 :
[М+Н] + 437,2
Название: изоксазол-5-ил-{(5)-3-[б-(б-Метокси-5метилпиридин-3-ил)-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин4-илокси]пирролидин-1-ил}метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием изоксазол-5-карбоновой кислоты
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 2,08-2,16 (м, ЗН)
2,19-2,36 (м, 2Н) 2,85-2,95 (м, 2Н) 3,42-3,49 (м, 2Н) 3,664,23 (м, 9Н) 5, 66-5, 78 (м, 1Н) 7,06-7,13 (м, 1Н) 7,41-7,46 (м, 1Н) 7,68-7,74 (м, 1Н) 8,59-8,64 (м, 1Н) 8,73-8,79 (м, 1Н)
Пример
35
КПП) (мин.) 1,5
М3 : [М+Н] + 464,1
Название: 2-Метокси-5-{4-[(5)-1-(тиазол-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,З-ά]пиримидин-6ил}никотинонитрил
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 11 и
процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием тиазол-4карбоновой кислоты
Ή ЯМР (400 МГц, СОС1з-б, 298К) δ м.д. 2,30-2,37 (м, 2Н)
3,07-3,12 (м, 2Н) 3,46-3,53 (м, 2Н) 3,81-4,43 (м, 9Н) 5,805,85 (м, 1Н) 7,55-7,59 (м, 1Н) 8,09-8,13 (м, 1Н) 8,18-8,23 (м, 1Н) 8, 63-8, 69 (м, 1Н) 8,75-8,85 (м, 1Н)
- 58 029473
Пример 36 Λ УСк о-О ίΛ (мин.) 1,35 М3 : [М+Н]+ 461,2
к
Название : 2-Метокси-5-{4-[(5)-1-(1-метил-1Н-пиразол-4карбонил)-пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3ά]пиримидин-6-ил}никотинонитрил
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 11 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием 1-метил-1Нимидазол-4-карбоновой кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ΟϋΟ13-ά, 298К) δ м.д. 2,24-2,47 (м, 2Н)
3,03-3,17 (м, 2Н) 3,45-3,58 (м, 2Н) 3,87-4,20 (м, 12Н) 5,755,85 (м, 1Н) 7,54-7, 60 (м, 1Н) 7,73-7,90 (м, 2Н) 8,09-8,14 (м, 1Н) 8,61-8,68 (м, 1Н)
Пример 37 !Τνιι 0 I К+ У НК1) (мин.) М3 : [М+Н] +
1,47 461,2
к Л/
Название: 2-Метокси-5-{4 - [ (5)-1-(1-метил-1Н-пиразол-3карбонил)-пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3— ά]пиримидин-6-ил}никотинонитрил
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 11 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием 1-метил-1Нпиразол-3-карбоновой кислоты
Щ ЯМР (400 МГц, СОС1з-б, 298К) δ м.д. 2,24-2,41 (м, 2Н)
3,07-3,14 (м, 2Н) 3,44-3,58 (м, 2Н) 3,74-4,44 (м, 12Н) 5,775,86 (м, 1Н) 6, 78-6, 84 (м, 1Н) 7,33-7,39 (м, 1Н) 7,54-7,59 (м, 1Н) 8,08-8,14 (м, 1Н) 8,63-8,70 (м, 1Н)
Пример
38
I—N
,·Ο
(мин.) 1,58
М3 :
[М+Н] + 482,3
Название: (2,2-диметилтетрагидропиран-4-ил) - { (57)-3-(6(б-Метокси-5-метилпиридин-З-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А Получали с использованием 2,2-диметилтетрагидропиран-4
карбоновой кислоты
Щ ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 1,02-1,21 (м, 6Н)
1,27-1,71 (м, 4Н) 2,08-2,32 (м, 5Н) 2, 67-2,94 (м, ЗН) 3,414,08 (м, 13Н) 5, 60-5, 73 (м, 1Н) 7,41-7,46 (м, 1Н) 7,65-7,72 (м, 1Н) 8,58-8,65 (м, 1Н)
- 59 029473
Пример 39 о /—ч/° ι ι—Ν си НДС) (мин.) 1, 60 М3 : [М+Н] + 556, 1
Название: (1,1-Диоксогексагидро-1 лямбда*б*-тиопиран-4ил) - { (5) -3-[б-(б-метокси-5-трифторметилпиридин-З-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1ил}метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием 1,1диоксогексагидро-1 лямбда*6*-тиопиран-4-карбоновой кислоты
Щ ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 1,90-2,37 (м, 6Н)
2,72-3,27 (м, 7Н) 3,43-3,81 (м, 6Н) 3, 89-3, 97 (м, ЗН) 4,134,20 (м, 2Н) 5,61-5,75 (м, 1 Н) 7, 80-7, 86 (м, 1Н) 8,15-8,22 (м, 1Н) 8, 60-8, 65 (м, 1Н)
Название: (2,4-диметилоксазол-5-ил)-{ (5)-3-[6- ( 6метокси-5-трифторметилпиридин-З-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1ил}метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием 2,4диметилоксазол-5-карбоновой кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 2,13-2,45 (м, 8Н)
2,89-2,96 (м, 2Н) 3,54-4,21 (м, 11Н) 5,64-5,79 (м, 1Н) 7,817,85 (м, 1Н) 8,218-8,22 (м, 1Н) 8,61-8,65 (м, 1Н)
- 60 029473
Название: { (5)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3ил)-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-тиазол-5-илметанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием тиазол-5карбоновой кислоты
Щ ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 2,15-2,42 (м, 2Н)
2,88-2, 97 (м, 2Н) 3,53-3,61 (м, 2Н) 3,67-4,11 (м, 7Н) 4,154,24 (м, 2Н) 5, 67-5, 79 (м, 1Н) 7,81-7,88 (м, 1Н) 8,18-8,23 (м, 1Н) 8,35-8,45 (м, 1Н) 8,60-8,66 (м, 1Н) 9,22-9,29 (м, 1Н)
Кб'1’ М3:
(мин.) [М+Н]4
1,74 504,2
Название: { ( 5) - 3-[ 6-( 6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(2-метил-2Н-пиразол-3-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием 2-метил-2Нпиразол-3-карбоновой кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 2,15-2,35 (м, 2Н)
2,88-2,97 (м, 2Н) 3,51-4,13 (м, 12Н) 4,13-4,25 (м, 2Н) 5,635,74 (м, 1Н) 6, 63-6, 74 (м, 1Н) 7,43-7,52 (м, 1Н) 7,81-7,89 (м, 1Н) 8,17-8,25 (м, 1Н) 8,57-8,67 (м, 1Н)
Название: 4-{ (5)-3-[ 6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-карбонил}пирролидин-2-он
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием 5-оксопирролидин-3-карбоновой кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 2,10-2,43 (м, 4Н)
2,89-2,96 (м, 2Н) 3,35-3,79 (м, 9Н) 3, 90-3, 94 (м, ЗН) 4,154,20 (м, 2Н) 5, 60-5, 73 (м, 1Н) 7,53-7, 62 (м, 1Н) 7,81-7,87 (м, 1Н) 8,17-8,22 (м, 1Н) 8,60-8,64 (м, 1Н)
- 61 029473
Название: { (5)-3-[б-(б-Метокси-5-трифторметилпиридин-Зил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}пиридин-3-илметанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием никотиновой
кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 2,11-2,37 (м, 2Н)
2,87-2,99 (м, 2Н) 3,51-4,13 (м, 9Н) 4,13-4,29 (м, 2Н) 5,605,75 (м, 1Н) 7,43-7,53 (м, 1Н) 7,81-8,04 (м, 2Н) 8,17-8,28 (м, 1Н) 8,53-8,82 (м, ЗН)
Название: (1Н-Имидазол-4-ил)-{(5)-3-[6-(б-метокси-5трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3ά] пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил[метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием 1Н-имидазол-4карбоновой кислоты
Щ ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 2,12-2,35 (м, 2Н)
2,87-2,95 (м, 2Н) 3,60-4,31 (м, 11Н) 5,63-5,76 (м, 1Н) 7,577,65 (м, 1Н) 7,70-7,78 (м, 1Н) 7, 80-7,85 (м, 1Н) 8,16-8,21 (м, 1Н) 8,61-8,65 (м, 1Н)
Название:5-{ (5)-3-[б-(б-Метокси-5-трифторметилпиридин-Зил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-карбонил}пирролидин-2-он
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием 5-оксопирролидин-2-карбоновой кислоты
- 62 029473
2Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άδ, 298К) δ м.д. 1,78-2,40 (м, 6Н)
2,89-2,97 (м, 2Н) 3, 43-3, 86 (м, 6Н) 3, 90-3, 94 (м, ЗН) 4,154,20 (м, 2Н) 4,30-4,45 (м, 1Н) 5, 60-5, 75 (м, 1Н) 7,70-7,89
(м, 2Н) 8,16-8,22 (м, 1Н) 8,61-8,63 (м, 1Н)
Название: (1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)-{ (5)-3-[6-(6метокси-5-трифторметилпиридин-З-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1ил}метанон
Название:{(5)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}пиридин-4-илметанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием изоникотиновой
кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-άδ, 298К) δ м.д. 2,12-2,36 (м, 2Н)
2,86-2,99 (м, 2Н) 3,46-3,81 (м, 5Н) 3,84-4,13 (м, 4Н) 4,144,28 (м, 2Н) 5, 59-5, 74 (м, 1Н) 7, 44-7,56 (м, 2Н) 7,82-7,91 (м, 1Н) 8,18-8,27 (м, 1Н) 8,52-8,72 (м, ЗН)
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием 1,3,-диметил1Н-пиразол-4-карбоновой кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-άδ, 298К) δ м.д. 2,13-2,35 (м, 5Н)
2,89-2,97 (м, 2Н) 3,53-4,06 (м, 12Н) 4,14-4,22 (м, 2Н) 5,645,72 (м, 1Н) 7, 80-7, 88 (м, 1Н) 7,99-8,11 (м, 1Н) 8,16-8,22 (м, 1Н) 8,58-8,66 (м, 1Н)
- 63 029473
Название: { (5)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(1Н-пиразол-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием 1Н-пиразол-4карбоновой кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 2,12-2,39 (м, 2Н)
2,87-2,97 (м, 2Н) 3,43-4,11 (м, 9Н) 4,12-4,22 (м, 2Н) 5,635,79 (м, 1Н) 7,78-7,94 (м, 2Н) 8,10-8,25 (м, ЗН) 8,59-8,68 (м, 1Н)
Название: { (5)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-Д]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(5-метил-[1,3,4]оксадиазол-2ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием 5-метил[1,3,4]оксадиазол-2-карбоновой кислоты
Название: {(5)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}пиразин-2-илметанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи процесса стадии 1 примера 10 с использованием пиразин-2карбоновой кислоты
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-Де, 298К) δ м.д. 2,15-2,36 (м, 2Н)
2,87-2,97 (м, 2Н) 3,52-3, 64 (м, 2Н) 3,66-4,11 (м, 7Н) 4,124,24 (м, 2Н) 5, 67-5, 75 (м, 1Н) 7,81-7,87 (м, 1Н) 8,17-8,25 (м, 1Н) 8,56-8, 80 (м, ЗН) 8,97-9, 02 (м, 1Н)
- 64 029473
Пример
53
Название: { (5) -3-[6- ( 6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием промежуточного соединения 13 и процесса стадии 2 способа 1Ь примера 1, затем при помощи
процесса стадии 1 примера 10 с использованием 1-метил-1Нимидазол-4-карбоновой кислоты
:Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) бПм.д. 2,07-2,36 (м, 2Н)
2,82-3, 05 (м, 2Н) 3,20-4,43 (м, 14 Н) 5,60-5,74 (м, 1Н) 7,597,72 (м, 2Н) 7,78-7, 87 (м, 1Н) 8,14-8,21 (м, 1Н) 8,59-8,66
(м, 1Н) ' ·
Пример 54. {^)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]
пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)метанон.
К смеси 6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-4-(^)-пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидина (получали с использованием стадии 1, примера 91 из промежуточного соединения 13) (44 мг, 0,11 ммоль), 1-метил-1Н-пиразол-4-карбоновой кислоты (15 мг, 0,12 ммоль), бензотриазол-1-ола (19 мг, 0,12 ммоль) в СН2С12 (1,0 мл) добавляли ЕБС (34 мг, 0,18 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Разделяли между СН2С12 (10 мл) и насыщ. №НСО3 (водн.) (2,0 мл), и органический слой отделяли при помощи фильтрования, через пробирку для разделения фаз. Концентрировали в вакууме и очищали при помощи флэш-хроматографии через ВЫаде®, аминосиликагель элюировали смесью циклогексан/ЕЮАс, от 100/0 до 0/100 с получением {^)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)метанона в виде белого лиофилизированного порошка (44 мг, 75% выход). ‘Н ЯМР (400 МГц, С1.>(.+-+ 298Κ) δ м.д. 2,26-2,45 (м, 2Н) 3,04-3,10 (м, 2Н) 3,49-3,57 (м, 2Н) 3,89-4,00 (м, 7Н) 4,01 (с, 3Н) 4,10-4,18 (м, 2Н) 5,78-5,83 (м, 1Н) 7,60-7,62 (м, 1Н) 7,767,89 (м, 2Н) 8,04-8,07 (м, 1Н) 8,61-8,66 (м, 1Н) Μδ: [М+Н]+=504,2, К((3) = 1,59 мин.
Пример 55 получали, используя методики, аналогичные методикам, используемым в примере 54, используя соответствующие исходные вещества.
Пример 55 Структура . ' УА 1 г> Ν °тЭ °”м ОУ Кб'1) (мин.) 1,77 М5: [М+Н]+ 507, 2
Название: { (5)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-тиазол-4-илметанон
Способ очистки: Флэш-хроматография на В1обаде аминосиликагеле, элюировали смесью циклогексан/ЕбОАс, от 100/0 до 0/100 Получали, используя тиазол-4-карбоновую кислоту
ХН ЯМР (400 МГц, С0С1з-с1, 298К) δ м.д. 2,29-2, 40 (м, 2Н) 3,05-3,12 (м, 2Н) 3,49-3,56 (м, 2Н) 3, 80-4,45 (м, 9Н) 5,805,86 (м, 1Н) 7,60-7,62 (м, 1Н) 8,04-8,18 (м, 1Н) 8,21-8,25 (м, 1Н) 8, 64-8, 68 (м, 1Н) 8,79-8, 84 (м, 1Н)
- 65 029473
Пример 56. {(8)-3-[6-(5-Хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанон.
К 6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-4-((8)-пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0] пиримидину (97 мг, 0,196 ммоль) в СН2С12 (5 мл) добавляли хлорангидрид тетрагидро-2Н-пиран-4карбонилхлорида (36,7 мг, 0,235 ммоль) и триэтиламин (0,035 мл, 0,254 ммоль) при температуре между 0-10°С. Реакционную смесь перемешивали при ~3°С в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрировали в вакууме. Очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Θΐ1δοη, а затем нейтрализовали объединенные фракции над РЬ-НСО3 МР с получением {(8)-3-[6-(5-хлор-6метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанон (38 мг, 41% выход) в виде белого лиофилизированного порошка. 2Н ЯМР (400 МГц, СПС13-й, 298 К) δ м.д. 1,56-1,68 (м, 2Н) 1,86-2,04 (м, 2Н) 2,20-2,40 (м, 2Н) 2,50-2,72 (м, 1Н) 3,053,13 (м, 2Н) 3,38-4,16 (м, 16Н) 5,70-5,78 (м, 1Н) 7,42-7,45 (м, 1Н) 7,78-7,81 (м, 1Н) 8,61-8,66 (м, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=474,2, Κΐ(2) = 1,52 мин.
6-(5-Хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-4-((8)-пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]
пиримидин.
Трет-бутиловый эфир (8)-3-[ 6-(5-Хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0] пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты (766,2 мг, 1,66 ммоль) растворяли в смеси ТФУ/СН2С12 (1/2) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, остаток разбавляли СН2С12, органический слой промывали 1н. №О11, затем насыщенным солевым раствором, сушили над Ка28О4, фильтровали и упаривали с получением 6-(5-хлор-6-
Трет-бутиловый эфир (8)-3-[6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты.
Χ-ΡΗοδ (0,073 г, 0,154 ммоль), Рй2(йЪа)3 (0,100 г, 0,110 ммоль), КаО1Ви (0,395 г, 4,11 ммоль) и 5бром-3-хлор-2-метоксипиридин (0,732 г, 3,2 9 ммоль) объединяли и продували в потоке аргона в течение 10 мин. К этой смеси, добавляли раствор трет-бутилового эфира (8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,30]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 7) (2,15 г, 6,72 ммоль) в ТГФ (6 мл) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли ЕЮАс, смесь фильтровали через слой целита и концентрировали в вакууме. Очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле (СН2С12 /МеОН, от 99/1 до 95/5) с получением трет-бутилового эфира (8)-3-[6-(5-хлор-6метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты в виде желтой пены (0,766 г, 60% выход). ЖХМС: [М+Н]+=462,1, Κΐ(3) = 1,84 мин
Пример 57. {(8)-3-[6-(6-Амино-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанон.
К раствору (8)-трет-бутил 3-(6-(6-(бис(трет-бутоксикарбонил)амино)-5-(трифторметил)пиридин-3ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1 (120 мг, 0,18 ммоль) в СН2С12 (2,0 мл) добавляли ТФУ (2,0 мл), и смесь оставляли при комнатной температуре в течение 1 ч. Концен- 66 029473
трировали в вакууме и элюировали через 3СХ-2 картридж ΙδοΚιΙοΧ, элюировали метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме с получением 5-[4-((3)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3-0]пиримидин-6-ил]-3-(трифторметил)пиридин-2-ил) амина (61 мг, 90% выход). 5-[4-((3)-пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3-0]пиримидин-6ил]-3-(трифторметил)пиридин-2-ил)амин (30 мг, 0,079 ммоль) растворяли в СН2С12 (2,0 мл) и добавляли порциями, одновременно с насыщ. ^НСОз (водн.) (2,0 мл) к интенсивно перемешиваемому раствору хлорида тетрагидро-2Н-пиран-4-карбонила (15 мг, 0,10 ммоль) в СН2С12 (2,0 мл) при комнатной температуре. Полученную двухфазную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Разбавляли СН2С12 (10 мл), и органический слой разделяли при помощи фильтрования через пробирку для разделения фаз и концентрировали в вакууме. Очищали при помощи ВЭЖХ с обратной фазой системы Ойδοη (Способ А), а затем нейтрализовали объединенные фракции элюированием через 3СХ-2 картридж Ьо1Ые®, элюировали метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме с получением {(3)-3-[6-(6-амино-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3й]пиримидии-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропираи-4-ил)метаиона в виде бледно-желтого порошка (19 мг, 50% выход) Ή ЯМР (400 МГц, СОС13, 298Κ) δ м.д. 1,56-1,72 (м, 2Н) 1,87-2,03 (м, 2Н) 2,232,74 (м, 3Н) 3,04-3,14 (м, 2Н) 3,48-4,13 (м, 12Н) 5,15-5,43 (м, 2Н, Αγ-Ν^) 5,73-5,79 (м, 1Н) 7,55-7,64 (м, 1Н) 7,93-8,02 (м, 1Н) 8,61-8,67 (м, 1Н) ЖХМС: [М+Н]+=397,1, Κΐ(3) = 1,32 мин.
(3)-трет-Бутил 3-(6-(6-(бис(трет-бутоксикарбоиил)амиио)-5-(трифторметил)пиридии-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-ά]пиримидии-4-илокси)пирролидии-1-карбоксилат.
В стеклянный флакон добавляли трет-бутиловый эфир (3)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидии-4-илокси)пирролидии-1-карбоиовой кислоты (Промежуточное соединение 7) (100 мг, 0,312 ммоль), имидодикарбоновую кислоту, 2-[5-бром-3-(трифторметил)-2-пиридииил]-, 1,3-бис(1,1-диметилэтил)эфир (138 мг, 0,312 ммоль), карбонат цезия (203 мг, 0,62 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (29 мг, 0,03 ммоль), Χ-ΡΗοδ (51 мг, 0,11 ммоль) и безводный диоксан (2 мл). Флакон продували струей аргона в течение 15 с и закрывали. Смесь нагревали с перемешиванием в течение 1 ч при 110°С, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Давали остыть и разделяли между СН2С12 (10 мл) и водой (2 мл), и фильтровали двухфазную смесь через слой целита. Органический слой разделяли при помощи фильтрования через пробирку для разделения фаз и концентрировали в вакууме. Очищали при помощи ВЭЖХ с обратной фазой, системы Θί1δοπ (Способ А) с получением (3)-трет-бутил 3-(6-(6-(бис(трет-бутоксикарбоиил)амиио)-5-(трифторметил)пиридии-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-ά]пиримидии-4-илокси)пирролидии-1-карбоксилат трифторацетат (в виде желтой камеди (120 мг, 4 8% выход). ЖХМС: [М+Н]+=681,5, Κΐ(4)= 1,49 мин.
Имидодикарбоновая кислота, 2-[5-бром-3-(трифторметил)-2-пиридииил]-, 1,3-бис(1,1-диметилэтил)
эфир.
К 5-бром-3-(трифторметил)пиридии-2-амииу (1,72 г, 7,14 ммоль), триэтиламину (0,995 мл, 7,14 ммоль) и 4-диметиламиноиридину (20 мг, 0,164 ммоль) в СН2С12 (50 мл) добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (3,89 г, 17,84 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Упаривали досуха в вакууме и растирали в гептане (25 мл) в течение 72 ч. Полученный осадок фильтровали и промывали гептаном (10 мл) с получением имидодикарбоновой кислоты, 2-[5-бром-3(трифторметил)-2-пиридииил]-, 1,3-бис(1,1-диметилэтил)эфира в виде бежевого твердого вещества (2,23 г, 71% выход). Ή ЯМР (400 МГц, СОС13, 298Κ) 1,35 (с, 18Н) 8,15 (д, 1Н) 8,76 (д, 1Н) ЖХМС: [М+Н]+=441/443,1, Κΐ(4)= 1,46 мин.
Пример 58. {3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридии-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-ά]пиримидии-4-илокси]-азетидии-1-ил }-(тетрагидропираи-4-ил)метаиои.
- 67 029473
Трет-бутиловый эфир 3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3б]пиримидин-4-илокси]азетидин-1-карбоновой кислоты (186 мг, 0,312 ммоль) в СН2С12 (2,0 мл) добавляли в ТФУ (1,0 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Упаривали в вакууме с получением дитрифторацетата 4-(азетидин-3-илокси)-(6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидина в виде коричневой камеди (110 мг). К интенсивно перемешиваемому раствору тетрагидро-2Н-пиран-4-карбонилхлорида (19 мг, 0,128 ммоль) в СН2С12, одновременно добавляли порциями насыщ. ЫаНСО3 (водн.) (2,0 мл) и раствор дитрифторацетат 4-(азетидин-3илокси)-(6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидина (60 мг, 0,099 ммоль) в СН2С12 (2,0 мл) при комнатной температуре. Полученную двухфазную смесь интенсивно перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Разбавляли СН2С12 (10 мл), и органический слой разделяли, сушили (М^О4), концентрировали в вакууме и очищали при помощи ВЭЖХ с обратной фазой системы СПкоп (Способ А), а затем нейтрализовали объединенные фракции, элюируя через δСX-2 картридж ЬоЫе®, элюировали метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме с получением {3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-б]пиримидин-4-илокси]-азетидин-1 -ил }-(тетрагидропиран-4-ил)метанона в виде желтого твердого вещества (3,0 мг, 5% выход, вторая стадия) 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6, 298Κ) δ м.д. 1,421,67 (м, 4Н) 2,90-2,98 (м, 2Н) 3,55-3,62 (м, 2Н) 3,78-4,32 (м, 13Н) 4,61-4,69 (м, 1Н) 5,42-5,49 (м,1Н) 7,867,90 (м, 1Н) 8,22-8,26 (м, 1Н) 8,58-8,62 (с, 1Н) ЖХМС: [М+Н]+=494,6, К((7)= 0,98 мин.
Трет-бутиловый эфир 3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо
[4,3-б]пиримидин-4-илокси]азетидин-1-карбоновой кислоты.
В стеклянный флакон добавляли трет-бутиловый эфир 3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)азетидин-1-карбоновой кислоты (110 мг, 0,359 ммоль), 5-бром-2-метокси-3-(трифторметил)пиридин (92 мг, 0,359 ммоль), карбонат цезия (234 мг, 0,718 ммоль), трис(дибензилиденацетон) дипалладий(0) (33 мг, 0,036 ммоль), Х-БЬок (58 мг, 0,122 ммоль) и безводный диоксан (2,0 мл). Флакон продували струей аргона в течение 15 сек и закрывали. Смесь нагревали с перемешиванием в течение 1,5 ч при 110°С, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Разбавляли СН2С12 (50 мл), фильтровали через слой целита и концентрировали в вакууме. Очищали, при помощи ВЭЖХ с обратной фазой системы СПкоп (Способ А), с получением трифторацетата трет-бутилового эфира 3-[6-(6метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]азетидин-1карбоновой кислоты в виде коричневой камеди (186 мг, 87% выход) ЖХМС: [М+Н]+=482,3, К1(7) = 1,56 мин.
Трет-бутиловый эфир 3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)-азетидин-1-карбоновой кислоты.
К раствору трет-бутилового эфира 3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)азетидин-1-карбоновой кислоты (425 мг, 1,07 ммоль) в МеОН (20 мл) добавляли 20% гидроксид палладия на угле (90 мг), затем формиат аммония (473 мг, 7,51 ммоль), и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч. Реакционной смеси давали остыть и фильтровали через слой целита, промывали МеОН (20 мл), затем СН2С12 (20 мл). Фильтрат выпаривали в вакууме и очищали при помощи флэшхроматографии на силикагеле с СН2С12/МеОН/0,88 ИН4ОН, от 100/0/0 до 90/10/1 с получением третбутилового эфира 3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)азетидин-1-карбоновой кислоты в виде желтой камеди (220 мг, 67% выход) ЖХМС: [М+Н]+=307,3, К1(4)= 0,81 мин.
Трет-бутиловый эфир 3- (6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)азетидин1-карбоновой кислоты.
Трет-бутиловый эфир 3-гидрокси-азетидин-1-карбоновой кислоты (217 мг, 1,25 ммоль) растворяли
- 68 029473
в ТГФ (10 мл) в атмосфере аргона и добавляли \а11 (58 мг, 1,44 ммоль). Полученную суспензию перемешивали в атмосфере аргона при комнатной температуре в течение 15 мин с добавлением раствора ббензил-4-хлор-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3й]пиримидина (250 мг, 0,9б3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч, гасили водой (20 мл) и разбавляли СН2С12. Органический слой фильтровали через пробирку для разделения фаз и концентрировали в вакууме. Очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле с гептан/СН2С12, от 50/50 до 0/100, затем ЕЮАс, с получением трет-бутилового эфира 3-(б-бензил-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4илокси)-азетидин-1-карбоновой кислоты в виде желтой камеди (425 мг, 111% выход) ЖХМС: [М+Н]+=397,4, К1(4)= 0,98 мин.
Пример 59 получали в соответствии с общей методикой, описанной в схеме 2.
Пример 59. {^)-3-[б-(2-Метоксипиримидин-5-ил)-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил }-(тетрагидропиран-4-ил)метанон.
Стадия 4.
Смесь 5-бром-2-метоксипиримидина (0,218 ммоль), Χ-ΡΗο§ (28,4 мг, 0,0б0 ммоль), Ρά2(άЬа)3 (18,2 мг, 0,020 ммоль) и С§2СО3 (129 мг, 0,397 ммоль) перед тем, как добавить раствор (тетрагидропиран-4ил)-[^)-3-(5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил]метанон в диоксане (2 мл), продували аргоном. Реакционную смесь нагревали при 120°С в течение 1 ч в герметично закрытом флаконе, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через Нуйо. Восстановленную органическую фазу промывали №1ЮО3 и насыщенным солевым раствором, сушили над №^О4, фильтровали и концентрировали. Очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Ойзои и нейтрализовали объединенные фракций пропусканием через картридж δСX-2 (картридж промывали ацетонитрилом, СН2С12 и МеОН, затем раствор ΝΙ13 в МеОН 3,5 н использовали для реализации целевого продукта) с получением {^)-3-[б-(2-метоксипиримидин-5-ил)-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}(тетрагидропиран-4-ил)метанона (18,7 мг, 21% выход) 1Н ЯМР (400 МГц, СПС1з-й, 298Κ) δ м.д. 1,б2-1,70 (м, 2Н) 1,87-2,01 (м, 2Н) 2,20-2,41 (м, 2Н) 2,49-2,71 (м, 1Н) 3,07-3,19 (м, 2Н) 3,37-4,19 (м, 1бН) 5,7б (м, 1Н) 8,32 (с, 2Н) 8,б5-8,б7 (м, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=441,2, К1(1) = 1,12 мин.
(Тетрагидропиран-4-ил)-[^)-3-(5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1ил]метанон.
Стадия 3.
Раствор [(δ )-3 -(б-бензил-5,б,7,8-тетрагидропиридо [4,3-й]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1 -ил] (тетрагидропиран-4-ил)метанона (10,9 г, 25,8 ммоль) растворяли в метаноле (300 мл) и Ρά((.')11)2 на угле (2 г, 14,24 ммоль), и добавляли формиат аммония (3,35 г, 51,б ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, реакционную смесь фильтровали и упаривали в высоком вакууме в течение 2 ч с выходом (тетрагидропиран4-ил)-[^)-3-(5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил]метанона (8,45 г, 95% выход) в виде светло-желтой пены. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-йб, 298Κ) δ м.д. 1,44-1,б7 (м, 4Н) 2,082,32 (м, 2Н) 2,55-2,83 (м, 3Н) 2,9б (т, 2Н) 3,22-3,9б (м, 11Н) 5,53-5,б8 (м, 1Н) 8,49-8,59 (м, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=333,5, КГ" 1,24 мин.
[^)-3-(б-Бензил-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил] (тетрагидропиран-4-ил)метанон.
Стадия 2.
К раствору б-бензил-4-(^)-пирролидин-3-илокси)-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидина (420 мг, 1,35 ммоль) в 4 мл СН2С12 добавляли тетрагидропиран-4-карбонил хлорид (0,210 мл, 1,б37 ммоль) и
- б9 029473
Ε13Ν (0,380 мл, 2,73 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем гасили Н2О, экстрагировали СН2С12, фильтровали и упаривали в вакууме. Очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле (СН2С12/МеОН 95/5) с получением [(8)-3-(6-бензил-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил] (тетрагидропиран-4-ил)метанона (420
мг, 73% выход) в виде желтой пены. 2Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66, 298К) δ м.д. 1,37-1,64 (м, 4Н) 1,95-2,29 (м, 2Н) 2,56-2,83 (м, 4Н) 3,28-3,91 (м, 13Н) 5,54-5,68 (м, 1Н) 7,24-7,36 (м, 5Н) 8,54-8,59 (м, 1Н). ЖХМС:
[М+Н]+=423,6, К1(7)= 0,68.
6-Бензил-4-((8)-пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин.
Стадия 1.
К раствору трет-бутилового эфира (8)-3-(6-бензил-5, 6, 7, 8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-карбоновой кислоты (560 мг, 1,3 64 ммоль) в 2 мл СН2С12 добавляли ТФУ (1,576 мл, 20,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, концентрировали, а затем элюировали через картридж 8СХ-2 Го!и1е (10 г), удаляя избыток ТФУ (ΐ) МеОН (ίί) ХН3/МеОН, и основную фракцию упаривали в вакууме с получением 6-бензил-4-((8)-пирролидин-3илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидина (420 мг, количественный выход) в виде желтой камеди. ЖХМС: [М+Н]+=311,2, К1(3)= 0,11.
Примеры 60-62 получали, применяя методики, аналогичные методикам, используемым в примере 59, с использованием соответствующих исходных веществ
Название: [(3)-3-(6-Хинолин-3-ил-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,З-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1ил] (тетрагидропиран-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием 3-бром-хинолина
У ЯМР (400 МГц, СОС1з-б, 298К) δ м.д. 1,60-1,72 (м, ЗН) 1, 89-2,04 (м, 2Н) 2,24-2,46 (м, 2Н) 2,53-2,73 (м, 1Н) 3,083,21 (м, 2Н) 3,39-3,52 (м, 2Н) 3,67-4,11 (м, 8Н) 4,20-4,40 (м, 2Н) 5,73-5,83 (м, 1Н) 7,47-7,62 (м, ЗН) 7,73-7,80 (м, 1Н) 8,02-8,14 (м, 1Н) 8, 62-8, 68 (м, 1Н) 8,86-8,91 (м, 1Н) .
Название: { (3)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-б]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А Получали, используя промежуточное соединение 1 % ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 1,50-1, 66 (м, 4Н)
2,07-2,46 (м, 2Н) 2, 60-2,80 (м, 1Н) 2,88-2,97 (м, 2Н) 3,303,95 (м, 13Н) 4, 08-4,23 (м, 2Н) 5, 59-5, 74 (м, 1Н) 7,79-7,85 (м, 1Н) 8,16-8,23 (м, 1Н) 8,60-8,65 (м, 1Н)
- 70 029473
Название: 1-{ (3)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин·
3-ил)-5,6, 7, 8-тетрагидропиридо[4, З-ά]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-3,З-диметилбутан-1-он
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием стадии 2 примера 59 и 3,3диметилбутирил хлорида с последующими стадиями 3-4 примера 59 с использованием промежуточного соединения 1
Щ ЯМР (400 МГц, СОС1з, 298К) δ м.д. 1,00-1,12 (м, 9Н)
2,13-2,35 (м, 4Н) 3,08-3,15 (м, 2Н) 3, 45-3, 93 (м, 6Н) 4,02
(с, ЗН) 4,03-4,15 (м, 2Н) 5,72-5,79 (м, 1Н) 7,57-7,62 (м, 1Н)
8,03-8,07 (м, 1Н) 8,64-8,69 (м, 1Н)
Пример 63. 1-((8)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-ά] пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил }пропан-1-он.
Стадия 3.
1-[(8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил]пропан-1-он (47,8 мг, 0,173 ммоль), Х-Рйо§ (28 мг, 0,059 ммоль) и Рс12(с1Ьа)уСНСГ (17,90 мг, 0,017 ммоль) объединяли и продували аргоном в течение нескольких минут, затем добавляли дегазированный диоксан. Затем к реакционной смеси добавляли 5-бром-2-метокси-3-трифторметилпиридин (Промежуточное соединение 1) (54,5 мг, 0,213 ммоль) и С§2СО3 (113 мг, 0,346 ммоль), и полученную смесь продували аргоном и нагревали при 150°С в течение 30 мин в герметично закрытой пробирке. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуре, фильтровали через Нуйо и упаривали. Очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Οΐίδοη, а затем нейтрализовали объединенные фракции над ΡΙ.НСО3 МР с получением 1-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3^]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}пропан-1-она (26 мг, 33% выход) 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ, 298Κ) δ м.д. 0,94-1,00 (м, 3Н) 2,05-2,17 (м, 4Н) 2,95-3,0 (м, 2Н) 3,45-3,97 (м, 9Н) 4,07-4,11(м, 2Н) 5,58-5,72 (м,1Н) 7,81-7,86 (м, 1Н) 8,18-8,23 (м, 1Н) 8,62 (с, 1Н). М8: [М+Н]+=452,2, К((1)= 1,74 мин.
1-[(8)-3-(5,6,7,8-Тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил]пропан-1-он.
Стадия 2.
Ρά(ΟΗ)2 (150 мг, 1,07 ммоль) помещали в круглодонную колбу и продували в атмосфере аргона в течение 5 мин. Добавляли раствор 1-[(8)-3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил]пропан-1-она (560 мг, 1,528 ммоль) в 22 мл МеОН, затем добавляли аммоний формиат (482 мг, 7,64 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником (70°С) в течение 2 ч. Смесь фильтровали через слой целита и сушили в высоком вакууме с получением 1-[(8)-3-(5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил]пропан-1-она. Дополнительно не очищали (т=420 мг, количественный выход). М8: [М+Н]+=277,5 К1(6)= 0,71 мин.
- 71 029473
1-[^)-3-(6-Бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-4]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил]пропан-1он.
Стадия 1.
К раствору 1-(^)-3-гидроксипирролидин-1-ил)пропан-1-она (Промежуточное соединение 2) (358 мг, 2,503 ммоль) в 5 мл ТГФ, добавляли \а11 (108 мг, 2,70 ммоль) в атмосфере Αγ. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин, затем добавляли 6-бензил-4-хлор-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-4]пиримидин (500 мг, 1,925 ммоль) и 5 мл ТГФ и перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Реакцию гасили Н2О и экстрагировали этилацетатом, органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Μ§δΟ4, фильтровали и упаривали досуха. Остаток очищали при помощи флэш-хроматографии с использованием системы Бсо Сотрашоп (12 г δΐΟ2) СН2С12/МеОН (95/5). Собранные фракции объединяли, упаривали и сушили над высоким вакуумом с получением 1-[^)-3-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-Т]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил] пропан-1-она. (т=560 мг, выход 78%) Μδ: [М+Н]+=367,6, КГ(7)= 0,64 мин.
Пример 64 получали, используя методики, аналогичные методикам, используемым в примере 63, с использованием соответствующих исходных веществ.
Название: 2-Метокси-5-[4-( (5)-1-пропионилпирролидин-З
илокси)-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,З-ά]пиримидин-6-ил]никотинонитрил
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали, используя стадию 3 примера 59 и 5-бром-2метоксиникотинонитрил
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-άδ, 298К) δ м.д. 0, 95-1,02 (м, ЗН)
2,10-2,35 (м, 5Н) 2, 89-2,98 (м, 2Н) 3,40-3, 90 (м, 5Н) 3,93 (с, ЗН) 4,16 (с, 2Н) 5,58-5,71 (м, 1Н) 8,08-8,10 (м, 1Н) 8,24-8,28 (м, 1Н) 8,61 (м, 1Н).
Пример 65. 6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-4-(^)-1-пиридин-2-илпирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетр агидропиридо [4,3-Т] пиримидин.
В стеклянный флакон добавляли дигидрохлорид 6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-4-(^)пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-Т]пиримидина (получали с использованием стадии 1 примера 91 из промежуточного соединения 13) (75 мг, 0,16 ммоль), 2-бромпиридин (1 мл, 10,25 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,14 мл, 0,80 ммоль). Флакон закрывали, и смесь нагревали в микроволновой печи при 160°С в течение 20 мин. Очищали при помощи ВЭЖХ с обратной фазой, системы О1Боп (Способ А), а затем нейтрализовали объединенные фракции над РБ-НСО3 МР с получением 6-(6-метокси-5трифторметилпиридин-3-ил)-4-(^)-1-пиридин-2-ил-пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,34]пиримидина в виде светло-коричневого твердого вещества (19 мг, 25% выход). 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06, 298К) δ м.д. 2,24-2,44 (м, 2Н) 2,92 (т, 2Н) 3,47-3,69 (м, 5Н) 3,77-3,85 (м, 1Н) 3,88-3,93 (м, 3Н) 4,12-17 (м, 2Н) 5,73-5,81 (м, 1Н) 6,40-6,52 (д, 1Н) 6,56-6,58 (м, 1Н) 7,43-7,54 (м, 1Н) 7,77-7,84 (м, 1Н) 8,028,09 (м, 1Н) 8,13-8,20 (м, 1Н) 8,61-8,66 (м, 1Н) ЖХМС: [М+Н]+=473,0, КГ(4)= 0,85 мин.
- 72 029473
Пример 66. 6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-4-((8)-1 -пиримидин-2-ил-пирролидин-3илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин.
В стеклянный флакон добавляли дигидрохлорид 6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-4-((8)пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидина (получали с использованием стадии 1 примера 91 из промежуточного соединения 13) (75 мг, 0,16 ммоль), 2-бромпиримидин (55 мг, 0,342 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,15 мл, 0,85 ммоль). Флакон закрывали, и смесь нагревали в микроволновой печи при 160°С в течение 20 мин. Очищали при помощи ВЭЖХ с обратной фазой, системы Θΐίδοη (Способ А), а затем нейтрализовали объединенные фракции над РЬ-НСО3 МР с получением 6-(6метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-4-((8)-1-пиримидин-2-ил-пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидина в виде коричневого твердого вещества (17 мг, 21% выход) 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6, 298К) δ м.д. 2,23-2,43 (м, 2Н) 2,85-2,99 (т, 2Н) 3,22-3,94 (м, 9Н) 4,08-4,27 (м, 2Н) 5,705,80 (м, 1Н) 6,56-6,66 (т, 1Н) 7,76-7,87 (м, 1Н) 8,12-8,27 (м, 1Н) 8,28-8,42 (м, 2Н) 8,59-8,68 (м, 1Н) ЖХМС:
[М+Н]+=474,2, К1(1) = 1,91 мин.
Пример 67 получали в соответствии с общей методикой, описанной в схеме 4
Пример 67. 1-{(8)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й] пиримидин-4-иламино]пирролидин-1 -ил} пропан-1 -он.
К раствору трет-бутилового эфира (8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 24) (13,4 г, 27,1 ммоль) в СН2С12 (100 мл) добавляли ТФУ (41,8 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Концентрировали в вакууме и разделяли между 2М №О11 (водн.) (300 мл) и СН2С12 (200 мл). Органическую фазу разделяли и водную фазу экстрагировали СН2С12 (2x200 мл). Органические фазы объединяли, сушили (Мд8О4) и упаривали в вакууме с получением коричневой пены. Пену растворяли в СН2С12 (50 мл) и одновременно с насыщ. №11СО3 (водн.) (50 мл) добавляли порциями к интенсивно перемешиваемому раствору пропионилхлорида (2,63 г, 28,5 ммоль) в СН2С12 (50 мл) при комнатной температуре. Полученную двухфазную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли еще пропионилхлорид (0,566 г, 6,12 ммоль) и продолжали интенсивно перемешивать в течение 20 мин. Органический слой разделяли, и водный слой экстрагировали с СН2С12 (100 мл). Органические слои объединяли, сушили (Мд8О4) и концентрировали в вакууме с получением коричневой камеди. Камедь перемешивали в ЕЮАс (100 мл), и полученное твердое вещество фильтровали (9,4 г). Маточные растворы концентрировали в вакууме и очищали при помощи колоночной хроматографии через аминосиликагель Вю1а§е, элюировали ЕЮАс/МеОН, от 100/0 до 90/10 с получением желтой пены, которую затем перемешивали в ЕЮАс (20 мл), и полученное твердое вещество фильтровали (870 мг). Обе порции твердых веществ объединяли и перемешивали в кипящем ЕЮАс (50 мл) в течение 1 ч. Фильтровали с получением 1-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1-ил}пропан-1-она в виде бесцветного твердого вещества (9,42 г, 76% выход). 'И ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6, 298К) δ м.д. 0,95-1,05 (м, 3Н) 1,87-2,32 (м, 4Н) 2,77-2,86 (м, 2Н) 3,25-3,88 (м, 6Н) 3,93 (с, 3Н) 3,98 (с, 2Н) 4,55-4,80 (м, 1Н) 6,70-6,80 (м, 1Н, Ν-Н) 7,867,92 (м, 1Н) 8,27-8,33 (м, 1Н) 8,33-8,37 (м, 1Н) ЖХМС: [М+Н]+=451,0, К1(6) = 1,49 мин.
Альтернативный синтез для примера 67.
Раствор трет-бутилового эфира (8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 24) (29,04 г, 58,73 ммоль) в 2-Ме-ТГФ (100 мл) по каплям добавляли в водный раствор НС1 (150 мл, 31%) в течение 15 мин. Реакционную смесь разделяли между водой (300 мл) и изопропилацетатом (100 мл), и верхнюю органическую фазу удаляли. Водную фазу разделяли между 25% №О11 (водн.) (200 г) и 2-Ме-ТГФ (200 мл), и органическую фазу собирали и сушили. В органическую фазу добавляли триэтиламин (16,32 мл, 117,48 ммоль), затем по каплям добавляли пропионилхлорид (6,0 г, 64,6 ммоль) при 0°С. Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Реакционную смесь промывали водой (110 мл) и полученную органическую фазу концентрировали в вакууме, с получением коричневой камеди. Остаток перекристаллизовывали изопропанолом и метил-трет-бутиловым эфиром с получением 1-{(8)-3[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино] пирролидин-1-ил}пропан-1-она в виде бесцветного твердого вещества (17,2 г, 65% выход).
- 73 029473
Кристаллизация примера 67 нагреванием в ацетонитриле/воде 2,0 г примера 67 (4,440 моль) растворяли в 10 мл ацетонитрила и 0,5 мл воды при 75°С. Раствору давали остыть до комнатной температуры в течение 30 мин, в результате чего получали суспензию. Смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Кристаллы собирали фильтрованием. Осадок на фильтре дважды промывали 1 мл ацетонитрила и впоследствии сушили в течение 16 ч при 24°С и прибл. 10 мбар вакуум. Элементный анализ материала показал безводную форм.
Список наиболее значимых пиков на порошковой рентгеновской дифрактограмме примера 67 в виде ангидрида Способ Х1:
Получение фосфатной соли примера 67.
2,0 г примера 67 (4,440 моль) растворяли в 10 мл ацетонитрила и 0,5 мл воды при 75°С. Добавляли 512 мг орто-фосфорной кислоты 85% (4,440 моль) при 70°С. При 70°С возникала быстрая кристаллизация. Суспензии давали остыть до комнатной температуры в течение 30 мин. Суспензию разбавляли 10 мл ацетонитрила и перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Кристаллы собирали фильтрованием. Осадок на фильтре трижды промывали 1 мл ацетонитрила и впоследствии сушили в течение 16 ч при 24°С и прибл. 10 мбар вакуум. Элементный анализ фосфатной соли показал 1:1 (безводная) форму.
Список наиболее значимых пиков, на порошковой рентгеновской дифрактограмме фосфатной соли примера 67 (Способ Х1):
- 74 029473
Получение гидрохлоридной соли примера 67.
2,0 г Примера 67 (4,440 моль) растворяли в 20 мл ацетонитрила и 1,0 мл воды при 70°С. Добавляли 459 мг соляной кислоты 37% (4,440 моль) при 70°С. При 70°С возникала быстрая кристаллизация. Суспензии давали остыть до комнатной температуры в течение 30 мин и перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Кристаллы собирали фильтрованием. Осадок на фильтре промывали трижды 1 мл ацетонитрила и впоследствии сушили в течение 16 ч при 24°С и прибл. 10 мбар вакуум. Элементный анализ соли НС1 показал 1:1 (безводная) форму.
Список наиболее значимых пиков на порошковой рентгеновской дифрактограмме гидрохлоридной соли примера 67 (способ Х1):
Получение гиппуратовой соли примера 67.
0,4 г Примера 67 (0,888 ммоль) растворяли в 8 мл ацетонитрила и 0,2 мл воды при 70°С. Добавляли 167 мг гиппуровой кислоты (0,888 ммоль) при 70°С. Раствору давали остыть до комнатной температуры в течение 30 мин. Кристаллизация происходила при 40°С. Суспензию перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Кристаллы собирали фильтрованием. Осадок на фильтре промывали трижды 1 мл ацетонитрила и впоследствии сушили в течение 16 ч при 50°С и прибл. 10 мбар вакуум.
Список наиболее значимых пиков на порошковой рентгеновской дифрактограмме гиппуратовой соли примера 67 (Способ Х1):
- 75 029473
Примеры 68-69 получали, используя методики, аналогичные методикам, используемым в примере 67, с использованием соответствующих исходных веществ.
Пример 70. 1-(4-{(8)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3й]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1 -карбонил} пиперидин-1 -ил)этанон.
Трет-бутиловый эфир (8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-й]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 24) (160 мг, 0,32 ммоль) растворяли в СН2С12 (2,0 мл) и добавляли ТФУ (1,0 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, затем упаривали в вакууме с получением [6-(6-метокси5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-ил]-(8)-пирролидин-3-иламин дитрифторацетата в виде коричневой камеди (160 мг), которую использовали без дальнейшей очистки. К [6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-ил](8)-пирролидин-3-ил-амин дитрифторацетату (40 мг, 0,06 ммоль) добавляли 1-ацетилпиперидин-4карбоновую кислоту (12 мг, 0,07 ммоль)), Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,05 мл, 0,26 ммоль), СН2С12 (3,0 мл), а затем НВТи (29 мг, 0,08 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 18 ч, а затем разделяли между СН2С12 (10 мл) и водой (5 мл). Органическую фазу фильтровали через пробирку для разделения фаз и упаривали в вакууме. Очищали при помощи ВЭЖХ с обратной фазой, системы Сйзоп (Способ А), а затем нейтрализовали объединенные фракции элюированием через 8СК-2 картридж Ьо^е®, элюировали метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме с получением 1-(4-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)- 76 029473
5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1 -карбонил }пиперидин-1 -ил)этанона в виде бледно-желтого твердого вещества (19 мг, 50% выход для второй стадии) 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ, 298К) δ м.д. 1,20-1,70 (м, 4Н) 1,79-2,35 (м, 5Н) 2,53-2,85 (м, 4Н) 3,04-3,14 (м, 1Н) 3,354,79 (м, 14Н) 6,80-6,87 (м, 1Н, Ν-Н) 7,87-7,91 (м, 1Н) 8,26-8,31 (м, 1Н) 8,35-8,41 (м, 1Н) ЖХМС: [М+Н]+=548,2, К£(1)= 1,22 мин.
Примеры 71-80 получали, используя методики, аналогичные методикам, используемым в примере 70, с использованием соответствующих исходных веществ.
Название: (2,2-диметилтетрагидропиран-4-ил)-{(5)-3-[βί б-метокси-5-трифторметилпиридин-З-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1ил[метанон
Способ очистки: ВЭЖХ с обращенной фазой Способ А
Получали, используя 2,2-диметилтетрагидропиран-4карбоновую кислоу
Щ ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 1,05-1,20 (м, 6Н)
1,30-1,58 (м, 4Н) 1, 86-2,35 (м, 2Н) 2,70-2,90 (м, ЗН) 3,344,03 (м, 13Н) 4,55-4, 80 (м, 1Н) б, 67-6, 76 (м, ΙΗ, Ν-Η) 7,867,89 (м, 1Н) 8,26-8,31 (м, 1Н) 8,32-8,37 (м, 1Н)
Название: { (5)-3-[б-(б-Метокси-5-трифторметилпиридин-Зил)-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4иламино]пирролидин-1-ил}-оксазол-5-илметанон
Способ очистки: ВЭЖХ с обращенной фазой Способ А
Получали с использованием оксазол-5-карбоновой кислоты
Щ ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 1, 89-2,39 (м, 2Н)
2,78-2,86 (м, 2Н) 3,50-4,20 (м, 11Н) 4,65-4,84 (м, 1Н) 6,756,83 (м, ΙΗ, Ν-Η) 7,75-7,83 (м, 1Н) 7, 86-7,92 (м, 1Н) 8,268,32 (м, 1Н) 8,35-8,38 (м, 1Н) 8,55-8,60 (м, 1Н)
Пример
73
Пример
74
КД С) (мин.) 1,38
(Изомер 1) 1,48
(Изомер 2) Цис/транс неопределен
М3: [М+Н]+
535, 2 (Изомер 1) 535, 2 (Изомер 2)
Название: ((5)-3-(б-(б-метокси-5-(трифторметил)пиридин3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)((1К,4К)-4-метоксициклогексил)метанон
- 77 029473
((5)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)((1А,45)-4-метоксициклогексил)метанон Способ очистки: ВЭЖХ с обращенной фазой Способ А Получали с использованием 4-метоксициклогексанкарбоновой
кислоты (смесь из цис/транс)
ТН ЯМР (Изомер 1 Цис/транс неопределен) (400 МГц, ДМСО66, 298К) δ м.д. 1, 04-1, 47 (м, 4Н) 1, 64-2,45 (м, 7Н) 2,77-2,86
(м, 2Н) 3, 00-3,77 (м, ЮН) 3, 87-4,03 (м, 5Н) 4,53-4,80 (м,
1Н) 6, 67-6, 78 (м, ΙΗ, Ν-Η) 7,85-7,91 (м, 1Н) 8,26-8,32 (м,
1Н) 8,33-8,38 (м, 1Н)
ТН ЯМР (Изомер 2 Цис/транс неопределен) (400 МГц, ДМСО66, 298К) δ м.д. 1,32-1,48 (м, 4Н) 1,55-2,50 (м, 7Н) 2,78-2,84
(м, 2Н) 3,01-3,77 (м, ЮН) 3, 87-4,03 (м, 5Н) 4,53-4,80 (м,
1Н) 6, 67-6, 78 (м, ΙΗ, Ν-Η) 7,85-7,91 (м, 1Н) 8,26-8,32 (м,
1Н) 8,33-8,38 (м, 1Н)
Пример
75
Пример
76
Р
1,18
(Изомер 1) 1,29
(Изомер 2)
Цис/ транс неопределен
М3: [М+Н]+
521,2 (Изомер 1)
521,2
(Изомер
2)
Название: ((15, 4Н)-4-гидроксициклогексил) ((5)-3-(6-(6метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1ил)метанон
((1К,45)-4-гидроксициклогексил) ((5)-3-(6-(6-метокси-5(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3—
6]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанон
Способ очистки: ВЭЖХ с обращенной фазой Способ А Получали с использованием 4гидроксициклогексанкарбоновой кислоты (смесь из цис/транс)
ТН ЯМР (Изомер 1 цис/транс неопределен) (400 МГц, ДМСО66, 298К) δ м.д. 1, 06-1,44 (м, 4Н) 1,57-2,86 (м, 9Н) 3,01-3,76
(м, 7Н) 3,88-4,03 (м, 5Н) 4,50-4,78 (м, 2Н) 6,68-6,78 (м, 1Н,
Ν-Η) 7,86-7,91 (м, 1Н) 8,26-8,32 (м, 1Н) 8,33-8,39 (м, 1Н)
ТН ЯМР (Изомер 1 Цис/транс неопределен) (400 МГц, ДМСО66, 298К) δ м.д. 1,28-1,52 (м, 4Н) 1,59-2,85 (м, 9Н) 3,03-3,83
(м, 8Н) 3, 88-4,03 (м, 5Н) 4,55-4,79 (м, 1Н) 6, 68-6, 77 (м, 1Н,
Ν-Η) 7,85-7,91 (м, 1Н) 8,26-8,32 (м, 1Н) 8,33-8,39 (м, 1Н)
- 78 029473
Название { (5)-3-[б-(б-Метокси-5-метилпиридин-З-ил)
5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4иламино]пирролидин-1-ил}-(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанон
Способ очистки: ВЭЖХ с обращенной фазой Способ А Получали с использованием промежуточного соединения 20 и
1-метил-1Н-имидазол-4-карбоновой кислоты
Р ЯМР (400 МГц, МеОН-а4, 298К) δ м.д. 2,07-2,44 (м, 5Н)
2,86-2,95 (м, 2Н) 3,44-4,43 (м, 14Н) 4,77-4,87 (м, 1Н) 7,447,48 (м, 1Н) 7,60-7,70 (м, 2Н) 7,72-7,79 м, 1Н) 8,32-8,41 (м, 1Н)
°И?м , ЕД А) м3: Пример 1м 5 (мин.) [М+Н] + 78 II 1 ι 0, 99 436,2
Название: { (5)-3-[б-(б-Метокси-5-метилпиридин-З-ил)
5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4иламино]пирролидин-1-ил}-оксазол-5-илметанон
Способ очистки: ВЭЖХ с обращенной фазой Способ А
Получали с использованием промежуточного соединения 20 и оксазол-5-карбоновой кислоты
Р ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 1,95-2,35 (м, 5Н)
2,74-2,83 (м, 2Н) 3,35-4,20 (м, 11Н) 4,62-4,83 (м, 1Н) 6,736,81 (м, 1Н) 7,44-7,49 (м, 1Н) 7,75-7,85 (м, 2Н) 8,33-8,38 (м, 1Н) 8,54-8,59 (м, 1Н)
Пример 1 О Нро г-Ν „.А ЕДА) (мин. ) М3: [Μ+ΗΡ
79 1 436, 2
1, 01
Ад
Ν
Название: { (5) -3-[б-(б-Метокси-5-метилпиридин-З-ил)
5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4иламино]пирролидин-1-ил}-оксазол-4-илметанон
Способ очистки: ВЭЖХ с обращенной фазой Способ А
Получали с использованием промежуточного соединения 20 и оксазол-4-карбоновой кислоты
Р ЯМР (400 МГц, ДМСО-άδ, 298К) δ м.д. 1,93-2,35 (м, 5Н)
2,75-2,82 (м, 2Н) 3,38-4,27 (м, 11Н) 4,61-4,78 (м, 1Н) 6,746,80 (м, 1Н) 7,45-7,49 (м, 1Н) 7,78-7, 84 (м, 1Н) 8,32-8,37 (м, 1Н) 8,47-8,53 (м, 1Н) 8,61-8,66 (м, 1Н)
- 79 029473
Пример 81. 1-{(δ)-3-[6-(6-Метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-ά]пиримидин-4-иламино] пирролидин-1 -ил} пропан-1 -он.
К раствору трет-бутилового эфира трифторацетат (8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,
7,8-тетрагидропиридо[4,3-ά]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1-карбоновой кислоты (Промежуточное соединение 20) (60 мг, 0,11 ммоль) в СН2С12 (2,0 мл), добавляли ТФУ (2,0 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Концентрировали в вакууме с получением [6-(6-метокси-5метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-ά]пиримидин-4-ил)]-(δ)-пирролидин-3-ил)амин дитрифторацетат (60 мг). [6-(6-Метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-ά]пиримидин4-ил]-(8)-пирролидин-3-ил)амин дитрифторацетата (30 мг, 0,053 ммоль) растворяли в СН2С12 (2,0 мл) и одновременно добавляли порциями с насыщ. NаНСΟ3 (водн.) (2,0 мл) к интенсивно перемешиваемому раствору пропионилхлорида (7 мг, 0,07 ммоль) в СН2С12 (2,0 мл) при комнатной температуре. Полученную двухфазную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 45 мин. Разбавляли СН2С12 (10 мл) и насыщ. ΝαΙΚΌ3 (водн.) (2,0 мл). Органический слой разделяли при помощи фильтрования через пробирку для разделения фаз и концентрировали в вакууме. Очищали при помощи ВЭЖХ с обратной фазой системы Θΐίδοη (Способ А), а затем нейтрализовали объединенные фракции элюированием через 8СХ-2 картридж ΙδοΦΐ^®, элюировали метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме с получением 1-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-ά]пиримидин-4-иламино]пирролидин-1-ил}пропан-1-она в виде бесцветного порошка (7 мг, 21% выход) 1Н ЯМР (400 МГц, ΜеΟН-ά4, 298Κ) δ м.д. 1,20-1,28 (м, 3Н) 2,04-2,44 (м, 7Н) 2,88-2,94 (м, 2Н) 3,48-4,04 (м, 11Н) 4,73-4,88 (м, 1Н) 7,44-7,48 (м, 1Н) 7,73-7,77 (м, 1Н) 8,34-8,38 (м, 1Н) ЖХМС: [М+Н]+=397,1, К((3) = 1,32 мин.
Примеры 82-83 получали, используя методики, аналогичные методикам, используемым в примере 81, с использованием соответствующих исходных веществ
- 80 029473
Х> У» .0 Кб'1)
Пример МЗ: [М+Н]+
82 Υ1 х Оу (мин.) 1, 13 473,2
Название: { (5)-3-[6-(5-Хлор-6-метоксипиридин-З-ил) 5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-Д]пиримидин-4-иламино]пирролидин1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанон
Способ очистки: ВЭЖХ с обращенной фазой Способ А
Получали с использованием промежуточного соединения 21 и тетрагидропиран-4-карбонил хлорида
ХН ЯМР (400 МГц, МеОН-сЦ, 298К) δ м.д. 1,58-1, 87 (м, 4Н)
2,04-2,45 (м, 2Н) 2,73-2,96 (м, ЗН) 3,39-4,14 (м, 15Н) 4,714,90 (м, 1Н) 7,67-7,74 (м, 1Н) 7,88-7,93 (м, 1Н) 8,34-8,39 (м,
1Н)
Название: {(5)-3-[6-(6-Метокси-5-метилпиридин-3-ил)
5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4иламино]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанон
Способ очистки: ВЭЖХ с обращенной фазой Способ А, затем Способ С
Получали с использованием промежуточного соединения 20 и тетрагидропиран-4-карбонил хлорида
Щ ЯМР (400 МГц, МеСЮ-Дб, 298К) δ м.д. 1,57-1,88 (м, 4Н)
2,04-2,45 (м, 5Н) 2,73-2,96 (м, ЗН) 3,37-4,12 (м, 15Н) 4,734,88 (м, 1Н) 7,45-7, 48 (м, 1Н) 7,73-7,77 (м, 1Н) 8,36-8,39 (м, 1Н)
Пример 84. (Тетрагидропиран-4-ил)-{(8)-3-{6-(5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-й]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1 -ил } метанон.
К 6-(5-(трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-олу (Промежуточное соединение 19) (59 мг) в ацетонитриле (1,0 мл) добавляли ВОР (114 мг, 0,2 58 ммоль) и ΌΒϋ (0,060 мл, 0,398 ммоль). Полученный раствор оставляли при комнатной температуре в течение 1 мин затем добавляли [(8)-3-аминопирролидин-1-ил-(тетрагидропиран-4-ил)метанон (Промежуточное соединение 5) (79 мг, 0,398 ммоль) в ацетонитриле (1,0 мл), и нагревали смесь до 85°С в течение 25 ч. Реакционную смесь выпаривали в вакууме и очищали при помощи ВЭЖХ с обратной фазой системы Οΐίδοη, а затем нейтрализовали объединенные фракции при помощи элюирования через ЗСХ-2 картридж 1§о1и1е®, элюировали метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме, с получением сырого указанного в заголовке соединения, которое впоследствии очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле с ЕЮАс/МеОН от 100/0 до 80/20 с получением (Тетрагидропиран-4ил)-{(8)-3-{6-(5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-иламино) пирролидин-1-ил}метанона (19 мг, 6% выход) в виде бесцветного твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6, 298К) δ м.д. 1,47-1,69 (м, 4Н) 1,83-2,37 (м, 2Н) 2,58-2,89 (м, 3Н) 3,23-4,20 (м, 12Н) 4,56-4,82 (м, 1Н) 6,75-6,89 (м, 1Н, Ν-Η) 7,68-7,79 (м, 1Н) 8,28-8,42 (м, 2Н) 8,74-8,83 (м, 1Н). ЖХМС: [М+Н]+=477,6, Κΐ(7)= 0,84 мин.
- 81 029473
Пример 85. {(8)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]
пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(4-метилпиперазин-1-ил)метанон.
К раствору 6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-4-((8)-пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидина (получали с использованием стадии 1, примера 91 из промежуточного соединения 13) (23,0 мг, 0,058 ммоль) и триэтиламина (0,016 мл, 0,116 ммоль) в СН2С12 (2 мл) добавляли гидрохлорид 4-метилпиперазин-1-карбонилхлорида (11,6 мг, 0,058 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Разбавляли СН2С12 (10 мл) и промывали насыщ. №НСО3 (водн.) (2 мл). Органический слой фильтровали через пробирку для разделения фаз и упаривали в вакууме. Очистку проводили при помощи ВЭЖХ с обратной фазой системы Οίίδοπ (Способ А), а затем нейтрализовали объединенные фракции элюированием через 8СХ-2 картридж 1§о1и1е®, элюировали метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме с получением {(8)-3-[6-(6метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(4-метилпиперазин-1-ил)метанон (25 мг, 58% выход) в виде желтого порошка. 1Н ЯМР (400 МГц, СОСЬ, 298К) δ м.д. 2,17-2,27 (м, 2Н) 2,55 (с, 3Н) 2,65-2,78 (м, 4Н) 3,07 (т, 2Н) 3,45-3,73 (м, 9Н) 3,86-3,95 (м, 1Н) 4,02 (с, 3Н) 4,13 (с, 2Н) 5,66-5,73 (м, 1Н) 7,62 (д, 1Н) 8,06 (д, 1Н) 8,64 (с, 1Н) ЖХМС: [М+Н]+=522,3, К1(1) = 1,21 мин.
Пример 86 получали, используя методики, аналогичные методикам, используемым в примере 85, с использованием соответствующих исходных веществ.
Пример 87. (4-Гидроксипиперидин-1-ил)-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,
7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанон.
К СН2С12 (5 мл) в круглодонной колбе добавляли фосген (20% раствор в толуоле, 0,20 мл, 0,379 ммоль), и полученный раствор охлаждали до 5°С в атмосфере аргона. Добавляли раствор 6-(6-метокси-5трифторметилпиридин-3-ил)-4-((8)-пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидина (получали с использованием стадии 1 примера 91 из промежуточного соединения 13) (50,0 мг, 0,126 ммоль) и триэтиламина (0,053 мл, 0,380 ммоль) в СН2С12 (1,0 мл), и смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры, перемешивая в атмосфере аргона в течение 1 ч. Упаривали досуха барботированием в потоке аргона в смеси с получением коричневой камеди. Растворяли в СН2С12 (3 мл), с получением (8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1-карбонил хлорида в виде раствора в СН2С12. ЖХМС: 458,4 [М+1]+, К1(7)= 1,38 мин. Этот раствор использовали без дальнейшей очистки. 1,5 мл этого раствора добавляли к раствору пиперидин-4- 82 029473
ола (6,4 мг, 0,063 ммоль) и триэтиламина (0,053 мл, 0,380 ммоль) в СН2С12, и смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере аргона, в течение 1 ч. Добавляли Ν,Ν-диметилформамид (0,5 мл) и продолжали перемешивать в течение 2 ч. Разбавляли СН2С12 (2 мл) и промывали насыщ. №11СО3 (водн.) (2 мл). Органический слой фильтровали через пробирку для разделения фаз и упаривали в вакууме. Очищали при помощи ВЭЖХ с обратной фазой, системы Θΐ1δοη (Способ А), а затем нейтрализовали объединенные фракции элюированием через 8СХ-2 картридж Ьо1и1е®, элюировали метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме, с получением (4-гидроксипиперидин-1-ил)-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б] пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанон в виде бледно-желтого порошка (22 мг, 64% выход). 'Н ЯМР (400 МГц, МеОН-б4, 298К) δ м.д. 1,35-1,57 (м, 2Н) 1,80-1,94(м, 2Н) 2,20-2,31 (м, 2Н) 2,94-3,09 (м, 4Н) 3,45-3,87 (м, 10Н) 3,98 (с, 3Н) 4,17 (с, 2Н) 5,70-5,76 (м, 1Н) 7,78 (д, 1Н) 8,13 (д, 1Н) 8,58 (с, 1н) ЖХМС: [М+Н]+=523,2, Κΐ(1) = 1,58 мин.
Пример 88 получали, используя методики, аналогичные методикам, используемым в примере 87, с использованием соответствующих исходных веществ
Пример 89. 1-(4-{(8)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбонил}пиперазин-1-ил)этанон.
К раствору 6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-4-((8)-пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидина (получали с использованием стадии 1 примера 91 из промежуточного соединения 13) (25 мг, 0,063 ммоль) и триэтиламина (0,013 мл, 0,095 ммоль) в СН2С12 (2 мл) добавляли йодид 3-(4-ацетилпиперазин-1-карбонил)-1-метил-3Н-имидазол-3-ия (Промежуточное соединение 6) (15 мг, 0,063 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение 18 ч. Разделяли между СН2С12 (10 мл) и насыщ. №11СО3 (водн.) (2 мл), и органический слой фильтровали через пробирку для разделения фаз и упаривали в вакууме. Очищали при помощи ВЭЖХ с обратной фазой системы Θΐ1δοη (Способ А), а затем нейтрализовали объединенные фракции элюированием через 8СХ-2 картридж Ιδο1υΐ£®, элюировали метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме, с получением 1-(4-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбонил }пиперазин-1 -ил)этанона в виде бледно-желтого порошка (9 мг, 2 5% выход). 2Н ЯМР (400 МГц, МеОН-б4, 298К) δ м.д. 2,14 (с, 3Н) 2,242,33 (м, 2Н) 3,04 (т, 2Н) 3,25-3,91 (м, 13Н) 3,99 (с, 3Н) 4,18 (с, 2Н) 5,74-5,78 (м, 1Н) 7,79 (д, 1Н) 8,14 (д, 1Н) 8,60 (с, 1Н) ЖХМС: [М+Н]+=550,2, Κΐ(1)= 1,58 мин.
- 83 029473
Пример 90. Метиловый эфир (8)-3-[6-(5-циано-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты.
К раствору 2-метокси-5-[4-((8)-пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3-й]пиримидин-6ил]никотинонитрила (получали с использованием промежуточного соединения 11 и способа 1Ь, стадия процесса 2 примера 1) (25,0 мг, 0,071 ммоль) и триэтиламина (0,04 мл, 0,2 9 ммоль) в СН2С12 (2 мл) добавляли метилхлорформиат (0,006 мл, 0,078 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Разбавляли СН2С12 (2 мл) и промывали насыщ. №11СО3 (водн.) (1 мл). Органический слой фильтровали через пробирку для разделения фаз и упаривали в вакууме. Очистку проводили при помощи ВЭЖХ с обратной фазой системы ОП§оп (Способ А), а затем нейтрализовали объединенные фракции элюированием через 8СХ-2 картридж 1§о1и1е®, элюировали метанолом, затем 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции концентрировали в вакууме с получением метилового эфира (8)-3-[6-(5-циано-6метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты (10 мг, 35% выход) в виде желтого порошка. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6, 298К) δ м.д. 2,09-2,31 (м, 2Н) 2,91 (т, 2Н) 3,45-3,75 (м, 9Н) 3,93 (с, 3Н) 4,17 (с, 2Н) 5,58-5,65 (м, 1Н) 8,09 (д, 1Н) 8,27 (д, 1Н) 8,61 (с, 1Н) ЖХМС: [М+Н]+=411,1, Ю(1)= 1,58 мин.
Пример 91. {(8)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}оксазол-4-илметанон.
Стадия 2.
К оксазол-4-карбоновой кислоте (27 мг, 0,24 ммоль)) и НВТи (89 мг, 0,24 ммоль) в ОМБ (1 мл) добавляли Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,08 мл, 0,45 ммоль). Смесь перемешивали в течение 20 мин, а затем добавляли дигидрохлорид 6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-4-((8)-пирролидин-3-илокси)5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидина (100 мг, 0,214 ммоль) и дополнительную порцию Ν,Νдиизопропилэтиламина (0,08 мл, 0,45 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 30 мин. Очищали при помощи ВЭЖХ с обратной фазой системы ОП§оп (Способ А), а затем нейтрализовали объединенные фракции над РЬ-НСО3 МР с получением {(8)-3-[6-(6-метокси-5трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-0]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}оксазол-4-илметанона в виде желтого твердого вещества (38 мг, 36% выход) 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО06, 298К) δ м.д. 2,11-2,39 (м, 2Н) 2,80-3,01 (м, 2Н) 3,22-4,29 (м, 11 Н) 5,59-5,80 (м, 1Н) 7,72-7,94 (м, 1Н) 8,10-8,29 (м, 1Н) 8,41-8,55 (м, 1Н) 8,57-8,77 (м, 2Н) ЖХМС: [М+Н]+=491,1, К1(|) = 1,69 мин.
Дигидрохлорид 6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-4-((8)-пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин.
Стадия 1.
Трет-бутиловый эфир (8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбоновой кислоты (1,0 г, 1,69 ммоль) в СН2С12 (5 мл) добавляли в 2М безводный НС1 в диэтиловом эфире (25,3 мл, 50,5 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Полученный осадок фильтровали и промывали диэтиловым эфиром с получением дигидрохлорида 6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-4-((8)-пирролидин-3-илокси)-5,6,
7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидина в виде желтого твердого вещества (1,01 г, 128% выход). [М+Н]+=396,0, Κΐ(4) = 0,71 мин. Свободное основание может быть получено разделением соли дигидрохлорида между дихлорметаном и 1н. раствором гидроксида натрия (воды.), разделяя органическую фазу и упаривая в вакууме. [М+Н]+=396,0, Κΐ(4) = 0,71 мин.
Пример 92 получали, используя методики, аналогичные методикам, используемым в примере 91, с использованием соответствующих исходных веществ.
- 84 029473
Название: 1-(4-( (5)-3 -[6-(6-Метокси-5трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбонил}пиперидин-1ил)этанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием 1-ацетилпиперидин-4 карбоновой
кислоты
% ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 1,21-1,77 (м, 4Н)
1,92-2,02 (м, ЗН) 2,08-2,36 (м, 2Н) 2,42-2, 80 (м, 2Н) 2,882,98 (м, 2Н) 3,00-3,18 (м, 1Н) 3,39-4,24 (м, 13Н) 5,60-5,74
(м, 1Н) 7,80-7,87 (м, 1Н) 8,15-8,22 (м, 1Н) 8,59-8,65 (м, 1Н)
Пример 93 1 О. АА \ О Ν—, УЧ г-Ν оУ А НДС) (мин.) 1,37 М3: [М+Н]+ 504,1
р А V
Название: { (5)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3
ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-б]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(З-метил-ЗН-имидазол-4-ил)метанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А
Получали с использованием З-метил-ЗН-имидазол-4 карбоновой кислоты
У ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 2,14-2,38 (м, 2Н)
2,78-3,08 (м, 2Н) 3,44-4,04 (м, 12Н) 4,08-4,27 (м, 2Н) 5,665,73 (м, 1Н) 7,32-7,57 (м, 1Н) 7,70-7, 97 (м, 2Н) 8,13-8,28 (м, 1Н) 8,56-8, 69 (м, 1Н)
Пример 94 А Ср о- НДС) (мин.) М3 : [М+Н] +
Αν 0, 95 490, 9
ί %
N
Название: {(5)-3-[6-(6-Метокси-5-трифторметилпиридин-3
ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,З-б]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-оксазол-5-илметанон
Способ очистки: Метод с обращенной фазой А Получали с использованием оксазол-5-карбоновой кислоты % ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе, 298К) δ м.д. 2,28-2,43 (м, 2Н)
2,86-3, 00 (м, 2Н) 3,39-4,27 (м, 11 Н) 5, 60-5, 85 (м, ΙΗ) Ί,Ί2.7,91 (м, 2Н) 8,15-8,30 (м, 1Н) 8,53-8, 68 (м, 2Н)
Пример 95 получали, используя методики, аналогичные методикам, используемым в примере 1 способ 1а, используя соответствующие исходные вещества в соответствии со схемой 8.
- 85 029473
Пример
95
Название : {(5)-3-[б-(б-Метоксипиридин-З-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,З-ά]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1ил}(тетрагидропиран-4-ил)метанон
Способ очистки: флэш-хроматография на силикагеле с
СН2С12/МеОН
Получали с использованием йодида 1-бензил-1-метил-4оксо-пиперидиния (ссыл.: Тогбо1ап1, К.; Огд. Ъебб., νοί. 1, 8
Νο 1999) и 2-метоксипиридина
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298К) δ м.д. 1,48-1,65 (м, 4Н)
2,05-2,30 (м, 2Н) 2,59-2,78 (м, 1Н) 2,85-2,93 (м, 2Н) 3,254,11 (м, 15Н) 5, 59-5, 73 (м, 1Н) 6, 73-6, 79 (м, 1Н) 7,53-7,59 (м, 1Н) 7,86-7,89 (м, 1Н) 8,58-8,64 (м, 1Н).
Фармацевтическая композиция или композиция по настоящему изобретению может быть представлена в единичной дозе, равной приблизительно 1-2000 мг активного ингредиента(ов) для индивидуума весом приблизительно 50-70 кг, или приблизительно 1-500 мг, или приблизительно 1-250 мг, или приблизительно 1-150 мг, или приблизительно 0,5-100 мг, или приблизительно 1-50 мг активного ингредиента(ов). Терапевтически эффективная доза соединения, фармацевтической композиции или их сочетания зависит от вида индивидуума, массы тела, возраста и состояния индивида, нарушение или заболевание или его тяжести, в отношении которого проводится лечение. Врач или ветеринар сможет без труда определить эффективное количество каждого активного ингредиента, необходимого для предотвращения, лечения или ингибирования прогрессирования нарушения или заболевания.
Вышеуказанные свойства доз продемонстрированы в тестах ίπ νΐίΐΌ и ίπ у1уо с использованием предпочтительных млекопитающих, например, мыши, крысы, собаки, обезьяны, или их выделенных органов, тканей и препаратов. Ингибитор РВК, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы РВК дельта, может использоваться ίπ νίίΐΌ в форме растворов, например, водных растворов, и ίπ νί\·Ό либо энтерально, либо парентерально, предпочтительно, внутривенно, например, в виде суспензии или в виде водного раствора. Доза ίπ νίίΐΌ может изменяться приблизительно от 10-3 молярной до 10-9 молярной концентрации. Терапевтически эффективное количество ίπ νί\·Ό может изменяться в зависимости от пути введения, приблизительно от 0,1 до 500 мг/кг, или приблизительно от 1 до 100 мг/кг.
Схема 2'
- 86 029473
а) Хлорирование 6-бром-3Н-хиназолин-4-она проводят в обычных условиях оксихлорида фосфора, нагревая при кипячении с обратным холодильником или при 130°С в разведенном (например, в СН2С12) или в чистом оксихлориде фосфора. Ь) Реакцию перекрестного взаимодействия Сузуки между 6-бром-4хлор-хиназолином и 3-(этоксикарбонил)фенилборной кислоты или 3-(этоксикарбонил)фенилборонатом проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, дихлордифенилфосфин палладия (ΡάΟ2(ΡΡΗ3)2), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от 100 до 120°С в, предпочтительно, микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. с) Омыление карбонового эфира проводили при обычных условиях омыления, используя в качестве примера, предпочтительно, водные основания гидроксида лития и органический растворитель, такой как, предпочтительно, диоксан. Реакцию можно предпочтительно проводить при комнатной температуре. ά) Конденсация карбоновой кислоты с аминами формулы Κ'"ΝΠΚ", предпочтительно, происходит при обычных условиях конденсации. Реакция может быть проведена путем растворения карбоновой кислоты и амина формулы Κ'''ΝΠΚ" в подходящем растворителе, например, галогенированном углеводороде, таком как метиленхлорид, Ν,Ν-диметилформамид, Ν,Ν-диметилацетамид, Ν-2-метилпирролидон, метиленхлорид или смеси двух или более таких растворителей, и путем добавления подходящего основания, например, триэтиламина, диизопропилэтиламина (ΌΙΡΕΑ) или Ν-метилморфолина, и подходящег связывающего агента, который образует реакционноспособное производное карбоновой кислоты ίη δίΐη, например, и, предпочтительно, гексафторфосфат (2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония (НВТИ). Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивают при температуре приблизительно от -20 до 50°С, особенно, от -5°С до 30°С, например, при от 0°С до комнатной температуры. Реакция может быть предпочтительно проведена в атмосфере инертного газа, например, азота или аргона. е) Реакцию перекрестного взаимодействия Сузуки между арилбромидом и борной кислотой или производными борной кислоты, такими как боронат формулы Κ-Β(ΟΚ')2, проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, палладий тетракис(трифенилфосфин)палладия (Ρά(ΡΡΗ3)4), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от 100 до 120°С в, предпочтительно, микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон.
Конечные соединения, описанные в настоящем документе, получали в соответствии с общей методикой, описанной на схеме 2'.
Пример 1'. 5- {4-[3-(4-Ацетилпиперазин-1-карбонил)фенил]хиназолин-6-ил}-2-метоксиникотинонитрил
К смеси 1-{4-[3-(6-бромхиназолин-4-ил)бензоил]пиперазин-1-ил}этанона (100 мг, 0,228 ммоль), 2метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)никотинонитрила (89 мг, 0,273 ммоль) и Ρά(ΡΡΗ3)4 (13,14 мг, 0,011 ммоль) добавляли 3 мл ЭМЕ. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор №2СО3 (0,455 мл, 0,455 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 140°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ΕΐΟΑο, фильтровали через слой целита и разделяли между Н2О/ЕЮАс. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд3О4, фильтровали и упаривали. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Οί1δοη, а затем нейтрализация объединенных фракций через Ρ^-НСО3 МР давали указанное в заголовке соединение (47 мг, 41% выход) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМС(.)-с1,„ 298 Κ): δ м.д. 1,98 (шир. с, 3Н) 3,37-3,70 (м, 8Н) 4,07 (с, 3Н) 7,71 (дт, 1Н) 7,75 (т, 1Н) 7,91 (шир. с, 1Н) 8,04 (дт, 1Н) 8,25 (д, 1Н) 8,35 (шир. с, 1Н) 8,43 (дд, 1Н) 8,80 (шир. с, 1Н) 8,92 (шир. с, 1Н) 9,41 (с, 1Н). М3: 493,2 [М+1]+, Κΐ(1')=1,14 мин.
1-{4-[3-(6-Бромхиназолин-4-ил)бензоил]пиперазин-1-ил} этанон
К раствору 3-(6-бромхиназолин-4-ил)бензойной кислоты (2 г, 6,08 ммоль) в 60 мл СН2С12 добавляли НВТИ (2,53 г, 6,68 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (2,122 мл, 12,15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, добавляли 1-пиперазин-1-ил-этанон (0,935 г, 7,29 ммоль) при ком- 87 029473
натной температуре, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 2-х ч. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором №11СО3, экстрагировали СН2С12. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали в вакууме. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (СН2С12/МеОН, 95/5) давала указанное в заголовке соединение (3,03 мг, 91% чистота (ВЭЖХ), количественный выход). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6, 298 К): δ м.д. 2,03 (шир. с, 3Н) 3,52 (шир. с, 8Н) 7,69-7,76 (м, 2Н) 7,84 (с, 1Н) 7,91 (д, 1Н) 8,09 (д, 1Н) 8,19-8,22 (м, 2Н) 9,43 (с, 1Н). М8: 439,6-441,8 [М+1]+, К(2'Ч,02 мин.
3-(6-Бромхиназолин-4-ил)бензойная кислота
К раствору этилового эфир 3-(6-бромхиназолин-4-ил)бензойной кислоты (1,41 г, 4,11 ммоль) в диоксане (45 мл) добавляли при комнатной температуре 1М водный раствор ЬЮН-Н2О (8,22 мл, 8,22 ммоль), и реакционную смесь перемешивали 3 часа при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили 1М водным раствором НС1 (5 мл), полученный осадок фильтровали и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (880 мг, 65% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. Фильтрат экстрагировали ЕЮАс, органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (555 мг, 35% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. Два выделенных твердых вещества объединяли с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (880+550 мг=1,43 г, количественный выход). М8: 331,0 [М+1]+, Κΐ(1)=1,14 мин.
Этиловый эфир 3-(6-бромхиназолин-4-ил)бензойной кислоты
К смеси 6-бром-4-хлорхиназолина (2 г, 8,21 ммоль), 3-(этоксикарбонил)фенилбороновой кислоты (1,673 г, 8,62 ммоль), Рй(РРН3)2С12 (0,288 г, 0,411 ммоль) и К3РО4 (2,62 г, 12,32 ммоль) добавляли 16 мл ацетонитрила. Реакционную смесь продували аргоном, добавляли 2 мл воды, пробирку закрывали, нагревали до 100°С в течение 15 мин, используя микроволновую печь, а затем охлаждали до комнатной температуры. Полученное желтое твердое вещество фильтровали, промывали эфиром и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (1,54 г) в виде желтого твердого вещества. Фильтрат разбавляли ЕЮАс, органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали. Полученный остаток растирали в МеОН с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (580 мг). Два твердых вещества объединяли с получением 2,12 г указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества. 1Н-ЯМР (400 МГц, МеОЭ, 298 К): δ м.д. 1,42 (т, 3Н) 4,43 (кв., 2Н) 7,77 (т, 1Н) 7,97-8,07 (м, 2Н) 8,16 (дд, 1Н) 8,22 (д, 1Н) 8,29 (д, 1Н) 8,41 (с, 1Н) 9,34 (с, 1Н). М8: 357,0-359,0 [М+1]+, Кг'- 1,52 мин.
6-Бром-4-хлорхиназолин
6-Бром-3Н-хиназолин-4-он (20 г, 89 ммоль) суспендировали в 140 мл РОС13 и перемешивали 3 ч при 140°С. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, остаток растворяли в 500 мл сухого СН2С12 и нейтрализовали 200 г твердого вещества №НСО3. Смесь фильтровали, и фильтрат упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (21 г, 95% выход) в виде бежевого твердого вещества. ‘Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13, 298 К): δ м.д. 7,98 (д, 1Н) 8,09 (д, 1Н) 8,5 (с, 1Н) 9,1 (с, 1Н). М8: 243,0-244,9 [М+1]+, К(Г)=1,24 мин.
Пример 2'. {3-[7-(2-Метоксипиримидин-5-ил)нафтален-1-ил]фенил}(4-метилпиперазин-1 -ил)метанон
- 88 029473
К смеси [3-(6-бромхиназолин-4-ил)фенил]-(4-метилпиперазин-1-ил)метанона (50 мг, 0,122 ммоль), 2-метоксипиримидин-5-борной кислоты (22 мг, 0,146 ммоль) и Ρ4(ΡΡΗ3)4 (7 мг, 0,006 ммоль) добавляли 2 мл БМЕ. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор №2СО3 (0,243 мл, 0,243 ммоль) и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 140°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли СН2С12, фильтровали через слой целита и разделяли между Н2О/СН2С12. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Οι1δοη, а затем нейтрализация объединенных фракций через ГБ-НСО3 МР давали указанное в заголовке соединение (38 мг, 71% выход). 1Н-ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-46, 298 Κ): δ м.д. 2,15 (с, 3Н) 2,20-2,38 (м, 4Н) 3,37-3,70 (м, 4Н) 3,99 (с, 3Н) 7,65 (д, 1Н) 7,73 (т, 1н) 7,86 (с, 1Н) 8,02 (д, 1Н) 8,24 (д, 1Н) 8,33 (с, 1Н) 8,43 (д, 1Н) 9,05 (с, 2Н) 9,41 (с, 1Н) М8: 441,1 [М+1]+, К1 (2')= 0,75 мин.
[3 -(6-Бромхиназолин-4-ил)фенил] (4-метилпиперазин-1-ил)метанон
К смеси 3-(6-бромхиназолин-4-ил)бензойной кислоты (2 г, 6,16 ммоль) и НВТИ (2,57 г, 6,78 ммоль) добавляли Г)М1; (15 мл) и БШЕА (2,26 мл, 12,95 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, добавляли 1-метилпиперазин (1,23 г, 12,33 ммоль) при комнатной температуре, а затем Б№ЕА (2,26 мл, 12,95 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 5 мин. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором №НСО3, экстрагировали АсОЕ1. Органический слой промывали №НСО3, насыщенным солевым раствором, сушили над №28О.1, фильтровали и упаривали в вакууме. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (СН2С12/МеОН, 99/1 до 90/10) давала указанное в заголовке соединение (2,26 г, 90% чистота (ВЭЖХ), 80% выход). 1Н-ЯМР (400 МГц, МеОБ-ф, 298 Κ): δ м.д. 2,21 (с, 3Н) 2,25-2,44 (м, 4Н) 3,37-3,70 (м, 4Н) 7,62-7,81 (м, 3Н) 7,86-7,96 (м, 1Н) 8,08 (д, 1Н) 8,17-8,24 (м, 2Н) 9,41 (с, 1Н). М8: 411,4 [М+1]+, Κΐ(3'4,38 мин.
Примеры 3'-29' получали или могут быть получены, используя методики, аналогичные методике, описанной в примере 1', с использованием соответствующих исходных веществ.
Примеры 20', 21' и 22' не подвергали нейтрализации после очистки и получали как соль ТФУ.
Пример Структура/Название Кб(мин.) М3 (ЕЗ) : [М+Н] + -Н-ЯМР
3' о 1 °γ\ МГ ΟγΟ. ° ио ММ N 1 —(4 — { 3 —[б-(5-Фтор-6-метоксипиридин-3ил)хиназолин-4-ил]бензоил}пиперазин-Тил) -этанон Т,Т4 мм 486, 2 Щ-ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-бб, 2 98 К) : δ м.д. Т,9Т-2,0б (шир. с, ЗН) 3,38-3,73 (м, 8Н) 4,ОТ (с, ЗН) 7,69 (дт, ТН) 7,75 (τ, ТН) 7,93 (шир. с, ТН) 8,02 (дт, ТН) 8,22 (д, 2Н) 8,29 (д, ТН) 8,42 (дд, ТН) 8,45 (д, ТН) 9,40 (с, ТН)
4' о 1 пУр ЧА/уА ° мм мм м>м Т- (4 —{3 —[б-(2-Метоксипиримидин-5ил)хиназолин-4-ил]бензоил}пиперазин-Тил) -этанон 3,34 мм 469, 5 Щ-ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-бб, 2 98 К) : δ м.д. 2,Т5 (с, ЗН) 3,36-3,89 (м, 8Н) 4,09 (с, ЗН) 7,63-7,75 (м, 2Н) 7,90 (дд, ТН) 7,92 (с, ТН) 8,33 (дд, ТН) 8,39 (д, ТН) 8,29 (д, ТН) 8,79 (с, 2Н) 9,44 (с, ТН)
- 89 029473
- 90 029473
- 91 029473
- 92 029473
- 93 029473
(1') ЬС метод 1', (2') ЬС метод 2', (3') ЬС метод 3', (4') ЬС метод 4', (5') ЬС метод 5'.
Пример 34'. 2-Метокси-5-{4-[3-((К)-3-метилпиперазин-1-карбонил)фенил]хиназолин-б-ил}никотинонитрил
К смеси трет-бутилового эфира (К)-4-[3-(б-бромхиназолин-4-ил)бензоил]-2-метилпиперазин-1карбоновой кислоты (100 мг, 0,19б ммоль), 2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил [1,3,2] диоксаборолан-2-ил)- 94 029473
никотинонитрила (76 мг, 0,235 ммоль, 80% чистота) и Ρά(ΡΡΗ3)4 (11,30 мг, 0,009 ммоль) добавляли 3 мл ЭМЕ. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор Να^Ο3 (0,391 мл, 0,391 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 140°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс, фильтровали через слой целита и разделяли между Н2О/ЕЮАс. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Μд8Ο4, фильтровали и упаривали. Остаток растворяли в 2 мл СН2С12 и добавляли ТФУ (0,301 мл, 3,91 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После этого периода времени смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы ΟΠδοη, а затем нейтрализация объединенных фракций через Ρ^-НСО3 МР давали указанное в заголовке соединение (36 мг, 39% выход) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66, 298 Κ): δ м.д. 0,74-1,05 (шир. с, 3Н), 2,35-3,10 (м, 5Н) 3,47-3,65 (м, 1Н) 4,06 (с, 3Н) 4,33 (шир. с, 1Н) 7,64 (дт, 1Н) 7,73 (т, 1Н) 7,84 (т, 1Н) 8,00 (дт, 1Н) 8,23 (д, 1Н) 8,33 (д, 1Н) 8,43 (дд, 1Н) 8,78 (шир. с, 1Н) 8,90 (д, 1Н) 9,40 (с, 1Н). М8: 464,6 [М+1]+, К1(г)= 0,98 мин.
трет-Бутиловый эфир (К)-4-[3-(6-бромхиназолин-4-ил)бензоил]-2-метилпиперазин-1-карбоновой кислоты
К раствору 3-(6-бромхиназолин-4-ил)бензойной кислоты (0,5 г, 1,519 ммоль) в 15 мл СН2С12 добавляли НВТи (0,634 г, 1,671 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (0,796 мл, 4,56 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 0 минут, добавляли трет-бутиловый эфир (К)-2-метилпиперазин1-карбоновой кислоты (0,365 г, 1,823 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение еще 2-х часов. Реакционную смесь гасили Н2О и экстрагировали СН2С12. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Μд8Ο4, фильтровали и упаривали в вакууме. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (СН2С12/МеОН, 95/5) давала указанное в заголовке соединение (1 г, 89% чистота, количественный выход). М8: 511,2-513,1 [М+1]+, К1(1) = 1,51 мин.
Примеры 35' получали, используя методики, аналогичные методикам, используемым в примере 34', с использованием соответствующих исходных веществ
Пример Структура/Название Кб (мин.) МЗ (ЕЗ) : [М+Н] + 2Н-ЯМР
о Щ-ЯМР (400 МГц, ДМСО-сЕ, 2 98
.ν ·ΆΗ К) : δ м.д. 2,57-2,78 (м, 4Н)
"Г! 3,35-3,62 (м, 4Н) 4,07 (с, ЗН)
7,65 (д, 1Н) 7,73 (τ, 1Н) 7,85
35' И I ι 0,98 <2'> 451, 6
N (шир. с, 1Н) 8,00 (д, 1Н) 8,23
2-Метокси-5- {4-[3-(пиперазин-1- (д, 1Н) 8,34 (д, 1Н) 8,43 (дд,
карбонил)фенил]хиназолин-6- 1Н) 8,79 (д, 1Н) 8,91 (д, 1Н)
ил}никотинонитрил 9,41 (с, 1Н)
(2') ЬС метод 2'.
Пример 36'. 1-(4-{ 3- [6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил] бензоил }-2,2-диметилпиперазин-1ил)этанон
К (3,3 -диметилпиперазин-1-ил)- {3-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил] фенил } метанону (117,7 мг, 0,213 ммоль) добавляли 4 мл ТГФ. Добавляли триэтиламин (0,188 мл, 0,851 ммоль), а затем ацетилхлорид (0,023 мл, 0,319 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляли ΕίΟΑ^ Органический слой промывали насыщ. NаНСΟ3 и насыщенным солевым раствором, сушили над Να28Ο4, фильтровали и упаривали в вакууме. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы ΟΠδοη, а затем нейтрализация объединенных фракций через Ρ^-НСО3 МР давали указанное в заголовке соединение (82,7 мг, 78% выход) в виде белого порошка. ‘Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ, 298 Κ): δ м.д. 1,16-1,53 (м, 6Н) 1,86-2,05 (м, 3Н) 3,46-3,75
- 95 029473
(м, 6Н) 3,90 (с, 3Н) 6,88-7,00 (м, 1Н) 7,60-7,80 (м, 2Н) 7,82-8,05 (м, 2Н) 8,11 (дд, 1Н) 8,18-8,27 (м, 2Н) 8,38 (д, 1Н) 8,58 (д, 1Н) 9,38 (с, 1Н). М8: 496,5 [М+1]+, Κΐ(3')= 1,70 мин.
(3,3-Диметилпиперазин-1 -ил)-{ 3- [6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил] фенил } метанон
К смеси [3-(6-бромхиназолин-4-ил)фенил]-(3,3-диметилпиперазин-1-ил)метанона (111,9 мг, 0,263 ммоль), 6-метоксипиридин-3-илбороновой кислоты (42,4 мг, 0,263 ммоль) и Рй(РРй3)4 (30,4 мг, 0,026 ммоль) добавляли 2,5 мл ацетонитрила. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор №2СО3 (0,789 мл, 0,789 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 130°С в течение 20 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс, фильтровали через слой целита и разделяли между водн. ЖНСО3 насыщ./ЕЮАс. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над №28О4, фильтровали и упаривали с получением сырого соединения (117,7 мг, 81% выход). М8: 454,5 [М+1]+, К1(3)= 1,40 мин.
[3-(6-Бромхиназолин-4-ил)фенил]-(3,3-диметилпиперазин-1-ил)метанон
К раствору 3-(6-бромхиназолин-4-ил)бензойной кислоты (428,1 мг, 1,301 ммоль) в 8 мл ЭМЕ добавляли НВТи (543 мг, 1,431 ммоль) и ОШЕА (0,477 мл, 2,73 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 0 мин, добавляли 2,2-диметилпиперазин (163 мг, 1,431 ммоль) и О№ЕА (0,477 мл, 2,7 3 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором Νη,Ι 1СО3, экстрагировали ЕЮАс. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Ж28О4, фильтровали и упаривали в вакууме. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (СН2С12/МеОН, 99/1 до 90/10) давала указанное в заголовке соединение (234,9 мг, >99% чистота, 42,5% выход). М8: 427,1 [М+1]+, КС' 1,17 мин.
Примеры 37' получали, используя методики, аналогичные методикам, используемым в примере 36', с использованием соответствующих исходных веществ.
Пример Структура/Название НП (мин.) М3 (ЕЗ) : [М+Н]+ Щ-ЯМР
о Щ-ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298
1 К) : δ м.д. 1, 14-1,53 (м, 6Н)
II 0 1,81-2,05 (м, ЗН) 3,43-3,81 (м,
ν к л 6Н) 4,06 (с, ЗН) 7,60-7,79 (м,
37' 1,782 73 521, 6
2Н) 7,81-7,96 (м, 1Н) 8,03 (д,
5-{4-[3- (4-Ацетил-3,3- 1Н) 8,23 (д, 1Н) 8,28-8,34 (м,
диметилпиперазин-1- 1Н) 8,41 (д, 1Н) 8,77 (д, 1Н)
карбонил)фенил]хиназолин-б-ил}-2- 8,88 (д, 1Н) 9,40 (с, 1Н)
метоксиникотинонитрил
(3') ГС метод 3'.
Пример 38'. (2,5-Диазабицикло[2.2.1]гепт-2-ил)- {3-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]фенил} метанон
К смеси [3-(7-бромнафтален-1-ил)фенил](2,5-диазабицикло[2.2.1]гепт-2-ил)метанона (56,8 мг, 0,139 ммоль), 6-метоксипиридин-3-илбороновой кислоты (23,35 мг, 0,153 ммоль) и Рй(РРй3)4 (16,04 мг, 0,014 ммоль) добавляли 1,5 мл ацетонитрила. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор Ж2СО3 (0,416 мл, 0,416 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 130°С в
- 96 029473
течение 20 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры. После фильтрации смесь непосредственно очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Οίίδοπ, а затем нейтрализовали объединенные фракции через РЬ-НСО3 МР с получением указанного в заголовке соединения (26,7 мг, 44% выход) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66, 298 К) : δ м.д. 1,50-1,85 (м, 2Н) 2,73-3,05 (м, 2Н) 3,35-3,75 (м, 3Н) 3,91 (с, 3Н) 4,35-4,70 (д, 1Н) 6,95 (д, 1Н) 7,697,78 (м, 2Н) 7,91-8,01 (м, 2Н) 8,10 (т, 1Н) 8,19-8,24 (м, 2Н) 8,39 (д, 1Н) 8,59 (д, 1Н) 9,38 (с, 1Н). М8: 438,2 [М+1]+, К1(3')= 1,35 мин.
К трет-бутил-5-(3-(6-бромхиназолин-4-ил)бензоил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилату (400,4 мг, 0,786 ммоль), разбавленному в 10 мл СН2С12, добавляли ТФУ (4 мл, 51,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Летучие компоненты выпаривали и добавляли ЕЮАс. Органический слой промывали водным раствором ЫаНСО3 и насыщенным солевым раствором, сушили над Ыа28О4, фильтровали и упаривали с получением сырого вещества (158 мг, >99% чистота, 49,1% выход). М8: 409,0-410,9 [М+1]+, Κί(3')= 1,22 мин.
Трет-бутил 5-(3-(6-бромхиназолин-4-ил)бензоил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилат
К раствору 3-(6-бромхиназолин-4-ил)бензойной кислоты (310 мг, 0,942 ммоль) в 8 мл БМТ добавляли НВТи (429 мг, 1,130 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (0,3455 мл, 1,98 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. Трет-бутил 2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилат (373 мг, 1,884 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (0,3455 мл, 1,98 ммоль) добавляли при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором ЫаНСО3, экстрагировали ΕίΟΑ^ Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Ыа28О4, фильтровали и упаривали в вакууме. Очистка флэшхроматографией на силикагеле (гептан/ΕίΟΑс, 8 0/2 0 до 0/100) давала указанное в заголовке соединение (400,4 мг, >99% чистота, 83% выход). М8: 511,3 [М+1]+, Κί(3)=2,19 мин.
Примеры 39' получали с использованием методик, аналогичных методикам, использованным, например, в примере 38', с использованием соответствующих исходных веществ.
(3') ЬС метод 3'.
Пример 40'. {3 -[6-(5-Метил-6-метиламинопиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]фенил}-(4-метилпиперазин-1-ил)метанон
- 97 029473
К смеси [3-(6-бромхиназолин-4-ил)фенил]-(4-метилпиперазин-1-ил)метанона (100 мг, 0,243 ммоль), трет-бутилового эфира метил-[3-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил]карбаминовой кислоты (102 мг, 0,292 ммоль) и Ρά(ΡΡΓ3)4 (14,05 мг, 0,012 ммоль) добавляли 3 мл ΌΜΕ. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор №2СО3 (0,486 мл, 0,486 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 140°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮЛс, фильтровали через слой целита и разделяли между Н2О/ЕЮЛс. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали. Остаток растворяли в 3 мл СН2С12 и добавляли ТФУ (0,562 мл, 7,29 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 16 час. Реакционную смесь затем концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Οΐ1δοη, а затем нейтрализовали объединенные фракции через Ρ^-НСО3 МР с получением указанного в заголовке соединения (70 мг, 64% выход) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6, 298 Κ): δ м.д. 2,12 (с, 3Н) 2,15 (с, 3Н) 2,17-2,40 (м, 4Н) 2,90 (д, 3Н) 3,39-3,70 (м, 4Н) 6,28 (кв., 1Н) 7,65 (шир. с, 2Н) 7,74 (т, 1Н) 7,82 (с, 1Н) 7,98 (д, 1Н) 8,13 (д, 2Н) 8,33 (д, 2Н) 9,32 (с, 1Н). М8: 453,3 [М+1]+, К1(8 )= 1,25 мин.
Примеры 41' получали с использованием методик, аналогичных методикам, использованным, например, в примере 40', с использованием соответствующих исходных веществ.
Пример Структура/Название КД (мин.) М3 (ЕЗ) : [М+Н]+ Щ-ЯМР
Щ-ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-Мб,
298 К) : δ м.д. 2,16 (с,
и ЗН) 2,25 (шир. с, 2Н) 2,36
1 π Ω нм\ум\ Су1 (шир 3,43 . с, 2Н) 2,82 (д, (шир. с, 2Н) ЗН) 3, 64
41' Хлэ N 1,21<8' ) 439, 3 (шир . с, 2Н) б,56 (д, 1Н)
6, 82 (кв., 1Н) 7,65 (ДТ,
{3-[б-(б-Метиламинопиридин-3- 1Н) 7,73 (τ, 1Н) 7,80 (дд,
ил)хиназолин-4-ил]фенил}—(4— 1Н) 7,82 (шир. с, 1Н) 7,97
метилпиперазин-1-ил)метанон (дт, 1Н) 8,12 (д, 1Н) 8,14
(д, 1Н) 8,33 (дд, 1Н) 8,42
(д, 1Н) 9,32 (с, 1Н)
(8') ГС метод 8'.
Схема 3'
- 98 029473
а) Хлорирование 6-бром-3Н-хиназолин-4-она проводят в обычных условиях оксихлорида фосфора, нагревая при кипячении с обратным холодильником или при 130°С в разведенном (например, в СН2С12) или в чистом оксихлориде фосфора. Ь) Реакцию перекрестного взаимодействия Сузуки между 6-бром-4хлорхиназолином и 3-(этоксикарбонил)фенилборной кислоты или 3-(этоксикарбонил)фенилборонатом проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, дихлордифенилфосфин палладия (РбС12(РРН3)2), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от 100 до 120°С в, предпочтительно, микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. с) Омыление карбонового эфира проводили при обычных условиях омыления, используя в качестве примера, предпочтительно, водные основания гидроксида лития и органический растворитель, такой как, предпочтительно, диоксан. Реакцию можно предпочтительно проводить при комнатной температуре. ά) Конденсация карбоновой кислоты с аминами формулы К’’’ЫНК’’, предпочтительно, происходит при обычных условиях конденсации. Реакция может быть проведена путем растворения карбоновой кислоты и амина формулы К’’’ЫНК’’ в подходящем растворителе, например, галогенированном углеводороде, таком как метиленхлорид, Ν,Ν-диметилформамид, Ν,Ν-диметилацетамид, Ν-2-метилпирролидон, метиленхлорид или смеси двух или более таких растворителей, и путем добавления подходящего основания, например, триэтиламина, диизопропилэтиламина (ΌΙΡΕΆ) или Ν-метилморфолина, и подходящего связывающего агента, который образует реакционноспособное производное карбоновой кислоты ίη зйи, например, и, предпочтительно, (2-(1Н-бензотриазол-1-ил)- 1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат (НВТИ). Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивают при температуре приблизительно от -20 до 50°С, особенно, от -5°С до 30°С, например, при от 0°С до комнатной температуры. Реакция может быть предпочтительно проведена в атмосфере инертного газа, например, азота или аргона. е) Получение борного эфира проводили с использованием палладиевого катализатора, такого как, предпочтительно, 1,1- бис (дифенилфосфино) ферроцен] дихлорпалладий ^С12^рр£)-СН2С12), водного основания, такого как, предпочтительно, ацетат калия, органического растворителя, такого как, предпочтительно, диоксан и бис(пинаколато)дибор. Реакционную смесь предпочтительно перемешивали приблизительно при 80°С в течение нескольких часов. ί) Реакцию перекрестного взаимодействия Сузуки между арилбромидом (К-Вг) и боронатом проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, палладий тетракис(трифенилфосфин)палладия (Ρά(ΡΡΗ3)4), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от 100 до 120°С в, предпочтительно, микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон.
Конечные соединения, описываемые в настоящем документе, получали в соответствии с общей методикой, описанной в схеме 3'.
Пример 42'. { 3 - [6-(6-Этокси-5 -трифторметилпиридин-3-ил)хиназолин-4-ил] фенил }(4-метилпиперазин-1 -ил)метанон
К смеси (4-метилпиперазин-1-ил)-{3-[6-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)хиназолин-4ил] фенил} метанона (100 мг, 0,218 ммоль), 5-бром-2-этокси-3-(трифторметил)пиридина (70,7 мг, 0,262 ммоль) и Ρά(ΡΡΗ3)4 (12,61 мг, 0,011 ммоль) добавляли 2 мл ЭМЕ. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор №2С(О (0,43 6 мл, 0,436 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 140°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс, фильтровали через слой целита и разделяли между Н2О/ЕЮЛс. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Οίίδοη, а затем нейтрализация объединенных фракций через Ρ^-НСО3 МР давали указанное в заголовке соединение (70 мг, 61% выход) в виде белого порошка. Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф;, 298 Κ): δ м.д. 1,37 (т, 3Н) 2,13 (с, 3Н) 2,17 (шир. с, 2Н) 2,34 (шир. с, 2Н) 3,43 (шир. с, 2Н) 3,62 (шир. с, 2Н) 4,53 (кв., 2Н) 7,65 (дт, 1Н) 7,74 (т, 1Н) 7,85 (т, 1Н) 8,02 (дт, 1Н) 8,23 (д, 1Н) 8,32 (д, 1Н) 8,44-8,47 (м, 2Н) 8,84 (д, 1Н) 9,41 (с, 1Н). М8(2): 522,6 [М+1]+, К1(2')=
1,16 мин.
(4-Метилпиперазин-1-ил)-{3-[6-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)хиназолин-4-ил]фенил} метанон
- 99 029473
Бис-(пинаколато)дибор (463 мг, 1,824 ммоль), аддукт РдС12(дрр1)-СН2С12 (99 мг, 0,122 ммоль) и КΟΑс (477 мг, 4,86 ммоль) помещали во флакон и дегазировали потоком аргона в течение 2 мин. В отдельном флаконе растворяли [3-(6-бромхиназолин-4-ил)фенил]-(4-метилпиперазин-1-ил)метанон (500 мг, 1,216 ммоль) в 10 мл безводного диоксана. Диоксановый раствор [3-(6-бромхиназолин-4-ил)фенил]-(4метилпиперазин-1-ил)метанона добавляли во флакон "катализатор", а затем нагревали при 80°С в течение 2 ч. После охлаждения до комн. темп., добавляли 30 мл этилацетат, и смесь фильтровали через пад из Целита. Темный фильтрат концентрировали, а затем разбавляли в 30 мл гептана. Образовывался темный осадок, и смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали, а затем сушили в высоком вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества (710 мг, 50% чистота, 55% выход). Ή-ЯМР (400 МГц, СОСЦ 298 К): δ м.д. 1,37 (с, 12Н) 2,35 (с, 3Н) 2,45 (шир. с, 2Н) 2,53 (шир. с, 2Н) 3,62 (шир. с, 2Н) 3,85 (шир. с, 2Н) 7,69 (д, 2Н) 7,84 (шир. с, 1Н) 7,87 (м, 1Н) 8,12 (д, 1Н) 8,32 (дд, 1Н) 8,52 (шир. с, 1Н) 9,41 (с, 1Н). Μδ: 459,3 [Μ+1]+, КГ(1')= 1,0 мин.
Примеры 43'-48', получали с использованием методик, аналогичным методикам, использованным, например, в примере 42', с использованием соответствующих исходных веществ._
Пример Структура Нб (мин.) М3 (ЕЗ) : [М+Н]+ ^-ЯМР
43' о Αχ) {3-[6-(З-Метансульфонил-4метилфенил)хиназолин-4-ил]фенил} - (4метилпиперазин-1-ил)метанон 0,89 ПУ 501,5 2Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-άδ, 298 К) : δ м.д. 2, 13 (с, ЗН) 2,18 (м, 2Н) 2,32 (м, 2Н) 2,70 (с, ЗН) 3,29 (с, ЗН) 3,42 (м, 2Н) 3,60 (м, 2Н) 7,62 (д, 1Н) 7,66 (дт, 1Н) 7,73 (т, 1Н) 7,83 (шир. с, 1Н) 7,97-8,04 (м, 2Н) 8,18 (д, 1Н) 8,22-8,29 (м, 2Н) 8,42 (дд, 1Н) 9,41 (с, 1Н)
44' 45' 46' о рПр ν ии 2-Метокси-5-{4-[3-(4-метилпиперазин-1карбонил)фенил]хиназолин-6ил}никотинонитрил О 1 ΎΠ т ии 2-Метокси-5-{4-[3-(4-метилпиперазин-1карбонил)фенил]хиназолин-6ил}бензонитрил о Нг"4 ОЕ ф N N 4-{4-[3-(4-Метилпиперазин-1карбонил)фенил]хиназолин-6-ил}-2трифторметилбензолсульфонамид 0,94 ПУ 0,88 ПУ 1,49 ПУ 465, 1 464,3 556, 2 Щ-ЯМР (400 МГц, ДМСО-άδ, 298 К) : б м.д. 2, 15 (с, ЗН) 2,22 (шир. с, 2Н) 2,35 (шир. с, 2Н) 3,46 (шир. с, 2Н) 3,62 (шир. с, 2Н) 4,07 (с, ЗН) 7,65 (дт, 1Н) 7,74 (т, 1Н) 7,83 (шир. с, 1Н) 8,01 (дт, 1Н) 8,23 (д, 1Н) 8,34 (д, 1Н) 8,43 (дд, 1Н) 8,79 (д, 1Н) 8,90 (д, 1Н) 9,41 (с, 1Н) Щ-ЯМР (400 МГц, ДМСО-άδ, 298 К) : δ м.д. 2, 14 (с, ЗН) 2, 19 (шир. с, 2Н) 2,34 (шир. с, 2Н) 3,44 (шир. с, 2Н) 3,62 (шир. с, 2Н) 3,98 (с, ЗН) 7,39 (д, 1Н) 7,65 (д, 1Н) 7,74 (т, 1Н) 7,82 (шир. с, 1Н) 8,01 (д, 1Н) 8,08 (дд, 1Н) 8,20 (д, 1Н) 8,23 (д, 1Н) 8,26 (д, 1Н) 8,40 (дд, 1Н) 9,39 (с, 1Н) Щ-ЯМР (400 МГц, ДМСО-άδ, 298 К) : δ м.д. 2,09-2,41 (м, 7Н) 3,35-3,70 (м, 4Н) 7,68 (д, 1Н) 7,75 (т, 1Н) 7,85 (м, 2Н) 8,03 (д, 1Н) 8,21-8,30 (м, 4Н) 8,40 (с, 1Н) 8,50 (д, 1Н) 9,41 (с, 1Н)
(1') ЬС метод 1', (2') ЬС метод 2'.
- 100 029473
47' 0 ук М ^»4 " ТАД Ν- (3-{4-[3-(4-Метилпиперазин-1карбонил)фенил]хиназолин-6-ил}-5трифторметилфенил)метансульфонамид 1,01 <!') 570,3 Щ-ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298 К) : δ м. д. 2,12 (м, 5Н) 2,32 (м, 2Н) 3,13 (с, ЗН) 3,35-3,68 (м, 4Н) 7,56 (с, 1Н) 7,66 (д, 1Н) 7,72-7,76 (м, 2Н) 7,83 (с, ЗН) 8,01 (д, 1Н) 8,26 (д, 2Н) 8,40 (д, 1Н) 9,43 (с, 1Н)
48' О и ϊ ι 1 ί хъд Ν- (4-{4-[3-(4-Метилпиперазин-1карбонил)фенил]хиназолин-6-ил}-2трифторметилфенил)метансульфонамид 0,92 <!'> 570,3 Ш-ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб, 298 К) : δ м. д. 2,12 (с, ЗН) 2,13 (шир. с, 2Н) 2,35 (шир. с, 2Н) 3,13 (с, ЗН) 3,39 (шир. с, 2Н) 3,61 (шир. с, 2Н) 7,5 6 (шир. с, 1Н) 7,66 (дт, 1Н) 7,73 (д, 1Н) 7,76 (шир. с, 1Н) 7,83 (д, 2Н) 8,01 (дт, 1Н) 8,26 (д, 1Н) 8,27 (с, 1Н) 8,40 (дд, 1Н) 9,43 (с, 1Н)
Пример 49'. 2-Метокси-^^диметил-5-{4-[3-(4-метилпиперазин-1-карбонил)фенил]хиназолин-6ил} бензамид
К раствору 2-метокси-5-{4-[3-(4-метилпиперазин-1-карбонил)фенил]хиназолин-6-ил}бензойной кислоты (50 мг, 0,084 ммоль) в 2 мл СН2С12 добавляли НВТИ (38,1 мг, 0,101 ммоль) и Э^ЕА (0,044 мл, 0,251 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, добавляли раствор диметиламина в ТГФ (2М) (0,210 мл, 0,419 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 30 мин. Реакционную смесь гасили Н2О, экстрагировали СН2С12. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Μ§δΟ4, фильтровали и упаривали в вакууме. Очищали при помощи ВЭЖХ с обратной фазой системы ОПзои, а затем нейтрализовали объединенные фракции через ГЬ-НСОз МР с получением указанного в заголовке соединения (25 мг, 58% выход) в виде белого порошка. ‘Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6, 298 Κ): δ м.д. 2,15 (с, 3Н) 2,22 (шир. с, 2Н) 2,36 (шир. с, 2Н) 2,79 (с, 3Н), 2,99 (с, 3Н) 3,41 (шир. с, 2Н) 3,62 (шир. с, 2Н) 3,86 (с, 3Н) 7,22 (д, 1Н) 7,56 (д, 1Н) 7,65 (дт, 1Н) 7,73 (т, 1Н) 7,79 (дд, 1Н) 7,82 (т, 1Н) 7,98 (дт, 1Н)
8,17 (д, 1Н) 8,19 (с, 1Н) 8,38 (дд, 1Н) 9,37 (с, 1Н). Μδ: 510,6 [М+1]+, К1(2')= 0,85 мин.
2-Метокси-5-{4-[3-(4-метилпиперазин-1-карбонил)фенил]хиназолин-6-ил}бензойная кислота
К смеси (4-метилпиперазин-1 -ил)- {3-[6-(4,4,5,5 -тетраметил-[ 1,3,2] диоксаборолан-2-ил)хиназолин-4ил] фенил }метанона (300 мг, 0,655 ммоль), 5-бром-2-метоксибензойной кислоты (181 мг, 0,785 ммоль) и Ρ6(ΡΡΠ3)4 (37,8 мг, 0,033 ммоль) добавляли 4 мл ЭМЕ. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор №2С()3 (1,309 мл, 1,309 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 140°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс, фильтровали через слой целита и концентрировали. Очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы ОПзои и объединенные фракции давали указанное в заголовке соединение (60 мг, 15% выход) в виде белого порошка. ‘Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6, 298 Κ): δ м.д. 2,79 (с, 3Н) 3,03-3,82 (м, 8Н) 3,89 (с, 3Н) 7,28 (д, 1Н) 7,72 (дт, 1Н) 7,77 (т, 1Н) 7,92 (дд, 2Н) 7,98 (д, 1Н) 8,05 (дт, 1Н) 8,20-8,22 (м, 2Н) 8,41 (дд, 1Н) 9,39 (с, 1Н). Μδ: 483,4 [М+1]+, Ю(Г)= 0,75 мин.
- 101 029473
Схема 4'
а) Хлорирование б-бром-3Н-хиназолин-4-она проводят в обычных условиях оксихлорида фосфора, нагревая при кипячении с обратным холодильником или при 130°С в разведенном (например, в СН2С12) или в чистом оксихлориде фосфора. Ь) Реакцию перекрестного взаимодействия Сузуки между б-бром-4хлорхиназолином и 3-(этоксикарбонил)пиридилборной кислоты или 3-(этоксикарбонил)пиридилборонатом проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, дихлордифенилфосфин палладия (ΡάΟ2(ΡΡΗ3)2), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от 100 до 120°С, предпочтительно, в микроволоновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. с) Омыление карбонового эфира проводили при обычных условиях омыления, используя в качестве примера, предпочтительно, водные основания гидроксида лития и органический растворитель, такой как, предпочтительно, диоксан. Реакцию можно предпочтительно проводить при комнатной температуре. ά) Конденсация карбоновой кислоты с аминами формулы К'^НК'', предпочтительно, происходит при обычных условиях конденсации. Реакция может быть проведена путем растворения карбоновой кислоты и амина формулы К'^НК'' в подходящем растворителе, например, галогенированном углеводороде, таком как метиленхлорид, Ν,Ν-диметилформамид, Ν,Ν-диметилацетамид, Ν-2-метилпирролидон, метиленхлорид или смеси двух или более таких растворителей, и путем добавления подходящего основания, например, триэтиламина, диизопропилэтиламина (Э^ЕА) или Ν-метилморфолина, и подходящего связывающего агента, который образует реакционноспособное производное карбоновой кислоты ΐπ бИи, например, и, предпочтительно, (2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат (НВТи). Реакционную смесь предпочтительно перемешивали при температуре приблизительно от -20 до 50°С, особенно, от -5 до 30°С, например, при от 0°С до комнатной температуры. Реакцию можно предпочтительно проводить в условиях инертного газа, например, азота или аргона, е) Реакцию перекрестного связывания Сузуки между арилбромидом и борной кислотой или производными борной кислоты, такими как боронат формулы К(ОК')2, проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, палладий тетракис(трифенилфосфин)палладия (Ρά(ΡΡΗ3)4), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от 100 до 120°С, предпочтительно, в микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон.
Конечные соединения, описанные в настоящем документе, получали в соответствии с общей методикой, описанной в схеме 4'.
Пример 50'. 1-(4-{5-[б-(5-Трифторметилпиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]пиридин-3-карбонил} пиперазин-1 -ил)этанон
К смеси 1-{4-[5-(б-бромхиназолин-4-ил)пиридин-3-карбонил]пиперазин-1-ил}этанона (100 мг, 0,204 ммоль, 90% чистота(СЭЖХ)), борной кислоты 3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-5трифторметилпиридина (80 мг, 0,204 ммоль, 70% чистота) и Ρά(ΡΡΗ3)4 (11,81 мг, 0,010 ммоль) добавляли 2 мл ЭМЕ. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор №2СО3 (0,409 мл,
- 102 029473
0,409 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс, фильтровали через слой целита и разделяли между Н2О/ЕЮАс. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы ОПзоп, а затем нейтрализация объединенных фракций через РЬ-НСО3 МР давали указанное в заголовке соединение (55 мг, 53% выход) в виде белого порошка. *Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-46, 298
К): δ м.д. 1,96-2,1 (шир. с, 3Н) 3,41-3,70 (м, 8Н) 8,31 (д, 1Н) 8,40 (с, 1Н) 8,50 (с, 1Н) 8,56 (д, 1Н) 8,69
(шир. с, 1Н) 8,90 (с, 1Н) 9,04 (с, 1Н) 9,20 (з., 1Н) 9,35 (шир. с, 1Н) 9,49 (с, 1Н). М8: 507,6 [М+1]+, Κί'1
0,93 мин.
1-{4-[5-(6-Бромхиназолин-4-ил)пиридин-3-карбонил]пиперазин-1-ил}этанон
К раствору 5-(6-бромхиназолин-4-ил)никотиновой кислоты (1 г, 3,03 ммоль) в 10 мл СН2С12 добавляли НВТи (1,38 г, 3,63 ммоль) и Э1РЕА (1,06 мл, 6,06 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, добавляли 1-пиперазин-1-илэтанон (0,466 г, 3,63 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 3 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором №НСО3, экстрагировали СН2С12. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали в вакууме. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (СН2С12/МеОН, 95/5) давала указанное в заголовке соединение (1,13 г, 90% чистота, 76% выход). *Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-46, 298 К): δ м.д. 2,04 (шир. с, 3Н) 3,41-3,70 (м, 8Н) 8,12 (д, 1Н) 8,24 (шир. с, 2Н) 8,31 (шир. с, 1Н) 8,89 (с, 1Н) 9,07 (с, 1Н) 9,47 (с, 1Н). М8: 440,4-442,4 [М+1]+, К1(9) 1,48 мин.
5-(6-Бромхиназолин-4-ил)никотиновая кислота
К раствору этилового эфира 5-(6-бромхиназолин-4-ил)никотиновой кислоты (1,34 г, 3,74 ммоль) в диоксане (45 мл) добавляли при комнатной температуре 1М водный раствор ЫОН-Н2О (7,48 мл, 7,48 ммоль), и реакционную смесь перемешивали 1,5 час при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили 1М водным раствором НС1 (5 мл), полученный осадок фильтровали и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества. Фильтрат экстрагировали ЕЮАс, органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества. Два выделенных твердых вещества объединяли с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (1,1 г, 81% выход). М8: 330,5-332,5 [М+1]+, К1(2)= 0,97 мин.
Этиловый эфир 5-(6-бромхиназолин-4-ил)никотиновой кислоты
К смеси 6-бром-4-хлорхиназолина (6 г, 23,41 ммоль), этилового эфира 5-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2] диоксаборолан-2-ил)никотиновой кислоты (6,81 г, 24,58 ммоль), РП(РРй3)2С12 (0,822 г, 1,17 ммоль) и К3РО4 (7,45 г, 35,1 ммоль) добавляли 96 мл ацетонитрила. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 12 мл воды, и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 12 мин с использованием микроволновой печи, а затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь гасили водой, экстрагировали дихлорметан. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали через слой целита и упаривали. Полученный остаток растирали в МеОН с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-оранжевого твердого вещества (5,3 г, 95% чистота, 60% выход). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО )-4,,,, 298 К): δ м.д. 1,38 (т, 3Н) 4,41 (кв., 2Н) 8,1 (д, 1Н) 8,25 (д, 2Н) 8,65 (с, 1Н) 9,22 (с, 1Н) 9,32 (с, 1Н) 9,48 (с, 1Н). М8: 358,1-360,1 [М+1]+, К1(Г)= 1,28 мин.
Примеры 51'-74', получали с использованием методик, аналогичным методикам, использованным, например, в примере 50', с использованием соответствующих исходных веществ.
- 103 029473
- 104 029473
- 105 029473
- 106 029473
(1') ЬС метод 1', (2') ЬС метод 2', (3') ЬС метод 3'.
Пример 75'. {5-[6-(5-Метил-6-метиламинопиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]пиридин-3-ил}-(4-метилпиперазин-1 -ил)метанон
- 107 029473
К смеси [5-(6-бромхиназолин-4-ил)-пиридин-3-ил]-(4-метилпиперазин-1-ил)метанона (100 мг, 0,243 ммоль), трет-бутилметил(3 -метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил) (107 мг, 0,291 ммоль) и Р6(РРй3)4 (14,01 мг, 0,012 ммоль) добавляли 2 мл ΌΜΕ. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор №2СО3 (0,485 мл, 0,485 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс, фильтровали через слой целита и разделяли между Н2О/ЕЮЛс. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над М§8О4, фильтровали и упаривали. Остаток растворяли в 2 мл СН2С12 и добавляли ТФУ (0,374 мл, 4,85 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. После этого периода времени смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Сй§оп, а затем нейтрализация объединенных фракций через РЬ-НСО3 МР давали указанное в заголовке соединение (32 мг, 29% выход) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66, 298 К): δ м.д. 2,12 (с, 3Н) 2,16 (с, 3Н) 2,25 (шир. с, 2Н) 2,37 (шир. с, 2Н) 2,89 (д, 3Н) 3,49 (шир. с, 2Н) 3,66 (шир. с, 2Н) 6,29 (кв., 1Н) 7,69 (д, 1Н) 8,12 (д, 1Н) 8,16 (д, 1Н) 8,30 (т, 1Н) 8,36-8,38 (м, 2Н) 8,84 (д, 1Н) 9,12 (д, 1Н) 9,36 (с, 1Н). М8: 454,2 [М+1]+, И1(9) 1,21 мин.
Схема 5'
а) Хлорирование 6-бром-3Н-хиназолин-4-она проводят в обычных условиях оксихлорида фосфора, нагревая при кипячении с обратным холодильником или при 130°С в разведенном (например, в СН2С12) или в чистом оксихлориде фосфора. Ь) Реакцию перекрестного связывания Сузуки между 6-бром-4хлорхиназолином и 3-(этоксикарбонил)пиридилборной кислотой или 3-(этоксикарбонил)пиридилборонатом проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, дихлордифенилфосфин палладия (Р6С12(РРй3)2), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно 100-120°С, предпочтительно, в микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. с) Реакцию перекрестного связывания Сузуки между арилбромидом и борной кислотой или производными борной кислоты, такими как боронат формулы К-В(ОК')2, проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, палладий тетракис(трифенилфосфин) палладия (Р6(РРй3)4), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно 100120°С, предпочтительно, в микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. 6) Омыление карбонового эфира проводили при обычных условиях омыления, используя в качестве примера, предпочтительно, водные основания гидроксида лития и органический растворитель, такой как, предпочтительно, диоксан. Реакцию можно предпочтительно проводить при комнатной температуре. е) Конденсацию карбоновой кислоты с аминами формулы Κ^ΝΉΕ", предпочтительно, проводили в обычных условиях конденсации. Реакция может быть проведена путем растворения карбоновой кислоты и амина формулы Κ^ΝΉΕ" в подходящем растворителе, например, галогенированном углеводороде, таком как метиленхлорид, Ν,Ν-диметилформамид, Ν,Ν- 108 029473
диметилацетамид, Ν-2-метилпирролидон, метиленхлорид или смеси двух или более таких растворителей, и путем добавления подходящего основания, например, триэтиламина, диизопропилэтиламина (Э№ЕА) или Ν-метилморфолина, и подходящег связывающего агента, который образует реакционноспособное производное карбоновой кислоты т §йи, например, и, предпочтительно, (2-(1Н-бензотриазол-1-ил)1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат (НВТИ). Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от -20 до 50°С, особенно от -5 до 30°С, например, при от 0°С до комнатной температуры. Реакцию предпочтительно можно проводить в атмосфере инертного газа, например, азота или аргона.
Конечные соединения, описанные в настоящем документе, получали в соответствии с общей методикой, описанной в схеме 5'.
Пример 76'. {5-[6-(6-Метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил] пиридин-3-ил }-(4-метил-[1,4] -диазепан1-ил)метанон
К раствору 5-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]-никотиновой кислоты (100 мг, 0,279 ммоль) в 2 мл СН2С12 добавляли ГИРЕА (0,097 мл, 0,558 ммоль) и пропилфосфного ангидрида (раствор ЭМР, 50%) (0,244 мл, 0,419 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, добавляли 1-метил-[1,4]-диазепан (65,7 мг, 0,557 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение еще 2 ч. Добавляли еще 1-метил-[1,4]-диазепан (49,27 мг, 0,418 ммоль) и ОГРЕА (0,097 мл, 0,558 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили водой и экстрагировали СН2С12. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали в вакууме. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы СПзоп, а затем нейтрализация объединенных фракций через РЬ-НСО3 МР давали указанное в заголовке соединение (54 мг, 43% выход) в виде белого порошка. ‘Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6, 298 К): δ м.д. 1,77 (м, 1Н) 1,86 (м, 1Н) 2,17-2,28 (д, 3Н) 2,44-2,56 (м, 3Н) 2,66 (м, 1Н) 3,50-3,59 (м, 2Н) 3,63-3,72 (м, 2Н) 3,92 (с, 3Н) 6,96 (д, 1Н) 8,14-8,18 (м, 1Н) 8,22-8,24 (дд, 2Н) 8,33 (дт, 1Н) 8,43 (дд, 1Н), 8,63 (т, 1Н) 8,84 (дд, 1Н) 9,12 (дд, 1Н) 9,42 (с, 1Н). М8: 455,2 [М+1]+, Кк(2')= 0,79 мин.
5-[6-(6-Метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]никотиновая кислота
К раствору этилового эфира 5-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]-никотиновой кислоты (0,91 г, 2,19 ммоль, 93% чистота (ВЭЖХ)) в диоксане (30 мл) при комнатной температуре добавляли 1М водный раствор ЬЮН-Н2О (4,38 мл, 4,38 ммоль), и реакционную смесь перемешивали 3 ч при температуре окружающей среды. Реакционную смесь гасили 1 М водным раствором НС1, полученный осадок фильтровали и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (570 мг, 72% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. Фильтрат экстрагировали ЕЮАс, органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (205 мг, 27% выход) в виде желтого твердого вещества. Два выделенных твердых веществ объединяли с получением указанного в заголовке соединения (570+205 мг=775 мг, 99% выход). М8: 359,2 [М+1]+, Κΐ(1')= 0,96 мин.
Этиловый эфир 5-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]никотиновой кислоты
К смеси этилового эфира [5-(6-бромхиназолин-4-ил)никотиновой кислоты (1 г, 2,79 ммоль), 2метокси-5-пиридин бороновая кислота (0,448 г, 2,93 ммоль) и Рй(РРН3)4 (0,161 мг, 0,140 ммоль) добавляли 15 мл ЭМЕ. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор №2СО3 (5,58 мл, 5,58 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 20 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс, фильтровали через слой целита и разделяли между Н2О/ЕЮАс. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали. Остаток давал указанное в заголовке соедине- 109 029473
ние (910 мг, 93% чистота, 78% выход). ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-А., 298 К): δ м.д. 1,37 (т, 3Н) 3,91 (с, 3Н) 4,42 (кв., 2Н) 6,96 (д, 1Н) 8,14 (дд, 1Н) 8,23-8,25 (м, 2Н) 8,43 (дд, 1Н) 8,62 (д, 1Н) 8,72 (т, 1Н) 9,31 (дд, 2Н) 9,43 (с, 1Н). М8: 387,1 [М+1]+, К1(2')= 1,24 мин.
Примеры 77'-83', получали с использованием методик, аналогичным методикам, использованным, например, в примере 76', с использованием соответствующих исходных веществ.
(1') БС метод 1', (2') БС метод 2'.
- 110 029473
82' о π ι 1 /°у\ > ЕЖ {5-[б-(4-Метокси-3трифторметилфенил)хиназолин-4ил]пиридин-3-ил}морфолин-4илметанон 1,19 I1') 495, 2 Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6, 298 К) : δ м.д. 3,43-3,73 (м, 8Н) 3,95 (с, ЗН) 7,41 (д, 1Н) 8,00 (шир. с, 1Н) 8,07 (д, 1Н) 8,218,25 (м, 2Н) 8,36 (τ, 1Н) 8,44 (дд, 1Н) 8,87 (д, 1Н) 9,15 (д, 1Н) 9,42 (с, 1Н)
83' О % ии (6,6-дифтор-[1,4]диазепан-1-ил)-{5[б-(4-метокси-Зтрифторметилфенил)хиназолин-4ил]пиридин-3-ил}метанон 1,01 И'1 544,2 Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Де, 298 К): δ м.д. 2,81 (шир. с, 1Н) 2,95-3,23 (м, ЗН) 3,49 (шир. с, 1Н) 3,72-3, 96 (м, 5Н) 4,16 (м, 1Н) 7,41 (д, 1Н) 7,97 (м, 1Н) 8,06 (м, 1Н) 8,18-8,24 (м, 2Н) 8,40 (шир. с, 1Н) 8,45 (м, 1Н) 8,88 (м, 1Н) 9,15 (шир. с, 1Н) 9,43 (с, 1Н)
Пример 84'. {5-[6-(4-Метокси-3-трифторметилфенил)хиназолин-4-ил]пиридин-3-ил}-((8)-2-метилпиперазин-1 -ил)метанон
К раствору 5-[6-(4-метокси-3-трифторметилфенил)хиназолин-4-ил)-никотиновой кислоты (70 мг, 0,165 ммоль) в 3 мл СН2С12 добавляли НВТи (68,7 мг, 0,181 ммоль) и Э^ЕЛ (0,057 мл, 0,329 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин, добавляли третбутиловый эфир (8)-3-метилпиперазин-1-карбоновой кислоты (49,4 мг, 0,247 ммоль) и Э^ЕЛ (0,057 мл, 0,329 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение еще одного часа. Реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в 2 мл СН2С12 и добавляли ТФУ (0,120 мл, 1,646 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. После этого периода времени смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы ОПзоп, а затем нейтрализация объединенных фракций через РЬ-НСО3 МР давали указанное в заголовке соединение (60 мг, 68% выход) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66, 298 К): δ м.д. 1,24 (шир. с, 3Н) 2,53-2,89 (м, 7Н) 3,96 (с, 3Н) 7,41 (д, 1Н) 7,99 (д, 1Н) 8,07 (дд, 1Н) 8,21-8,23 (дд, 2Н) 8,30 (т, 1Н), 8,44 (дд, 1Н) 8,82 (д, 1Н) 9,13 (д, 1Н) 9,43 (с, 1Н). М8: 508,3 [М+1]+, Κί(Γ)= 0,99 мин.
Примеры 85' получали с использованием методик, аналогичным методикам, использованным, например, в примере 84', с использованием соответствующих исходных веществ.
Пример Структура/Название ЕД (мин.) М3 (ЕЗ) : [М+Н]+ Ή-ЯМР
О Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб,
298 К): δ м.д. 1,48-1,83 (м,
2Н) 2,62-3,07 (м, 2Н) 3,47-
3,71 (м, ЗН) 3,96 (с, ЗН)
1 4,39-4,71 (д, 1Н) 7,39-7,44
85' Р 0,97 ОС 506,2
(м, 1Н) 7,99 (д, 1Н) 8,8 (м,
(13,43)-2,5-Диазабицикло[2.2.1]гепт-2- 1Н) 8,19-8,28 (м, 2Н) 8,33-
ил-[5-[6-(4-метокси-3- 8,43 (дт, 1Н) 8,45 (д, 1Н)
трифторметилфенил)хиназолин-4- 8,93 (дд, 1Н) 9,16 (дд, 1Н)
ил]пиридин-3-ил}метанон 9,43 (с, 1Н)
(1') ЬС метод 1'
- 111 029473
Схема 6'
а) Хлорирование 6-бром-3Н-хиназолин-4-она проводят в обычных условиях оксихлорида фосфора, нагревая при кипячении с обратным холодильником или при 130°С в разведенном (например, в СН2С12) или в чистом оксихлориде фосфора. Ь) Реакцию перекрестного взаимодействия Сузуки между 6-бром-4хлор-хиназолином и 3-(этоксикарбонил)фенилборной кислоты или 3-(этоксикарбонил)фенилборонатом проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, дихлордифенилфосфин палладия (ΡάС12(ΡΡЬ3)2), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от 100 до 120°С в, предпочтительно, микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. с) Реакцию перекрестного взаимодействия Сузуки между арилбромидом и борной кислотой или производными борной кислоты, такими как боронат формулы К-В(ОК')2, проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, палладий тетракис(трифенилфосфин) палладия (Ρό^ΡΡ^)^, водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от 100 до 120°С в, предпочтительно, микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. б) Омыление карбонового эфира проводили при обычных условиях омыления, используя в качестве примера, предпочтительно, водные основания гидроксида лития и органический растворитель, такой как, предпочтительно, диоксан. Реакцию можно предпочтительно проводить при комнатной температуре. е) Конденсация карбоновой кислоты с аминами формулы КПГ№НК'', предпочтительно, происходит при обычных условиях конденсации. Реакция может быть проведена путем растворения карбоновой кислоты и амина формулы К'''КНК'' в подходящем растворителе, например, галогенированном углеводороде, таком как метиленхлорид, Ν,Ν-диметилформамид, Ν,Νдиметилацетамид, Ν-2-метилпирролидон, метиленхлорид или смеси двух или более таких растворителей, и путем добавления подходящего основания, например, триэтиламина, диизопропилэтиламина (ЭШЕА) или Ν-метилморфолина, и подходящег связывающего агента, который образует реакционноспособное производное карбоновой кислоты ίη кки, например, и, предпочтительно, (2-(1Н-бензотриазол-1-ил)1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат (НВТи). Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от -20 до 50°С, особенно от -5 до 30°С, например, при от 0°С до комнатной температуры. Реакцию можно предпочтительно проводить в условиях инертного газа, например, азота или аргона.
Конечные соединения, описанные в настоящем документе, получали в соответствии с общей методикой, описанной в схеме 6'.
Пример 86'. (4-Этилпиперазин-1-ил)-{3-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]фенил}метанон
К перемешиваемому раствору 3-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]бензойной кислоты (100 мг, 0,280 ммоль) в 2 мл СН2С12, добавляли НВТи (127 мг, 0,336 ммоль) и ЭШЕА (0,147 мл, 0,839 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, добавляли 1этилпиперазин (38 мг, 0,336 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение еще 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили Н2О, и экстрагировали СН2С12. Органиче- 112 029473
ский слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над М§8О4, фильтровали и упаривали над вакуумом. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Οίίδοη, а затем нейтрализация объединенных фракций через РЬ-НСО3 МР давали указанное в заголовке соединение (40 мг, 35% выход) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-06, 298 К): δ м.д. 0,97 (т, 3Н) 2,18-2,50 (м, 6Н) 3,37-3,71 (м, 4Н) 3,91 (с, 3Н) 6,97 (д, 1Н) 7,66 (д, 1Н) 7,74 (дд, 1Н) 7,83 (с, 1Н) 7,99 (д, 1Н) 8,12 (д, 1Н)
8,23 (шир. с, 2Н) 8,38 (д, 1Н) 8,60 (с, 1Н) 9,39 (с, 1Н). Μδ: 454,2 [М+1]+, Κΐ(2,)= 0,89 мин.
3- [6-(6-Метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил] бензойная кислота
К суспензии этилового эфира 3-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]бензойной кислоты (800 мг, 1,91 ммоль) в диоксане (20 мл) добавляли при комнатной температуре 1М водный раствор ЫОН-Н2О (9,55 мл, 9,55 ммоль), и реакционную смесь перемешивали 4 часа при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили 1М водный раствор НС1 (5 мл), полученный осадок фильтровали и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (700 мг, 90% чистота, 92% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. Соединение использовали в следующей стадии без дальнейшей очистки. Μδ: 358,1 [М+1]+, Κΐ(2,)= 1,11 мин.
Этиловый эфир 3-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил] бензойной кислоты
К смеси этилого эфира 3-(6-бромхиназолин-4-ил)-бензойной кислоты (845 мг, 2,176 ммоль), 2метокси-5-пиридинборной кислоты (399 мг, 2,61 ммоль) и Р0(РРй3)4 (12 6 мг, 0,109 ммоль) добавляли 20 мл ΏΜΕ. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор №2СХО (4,35 мл, 4,35 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 15 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли СН2С12, фильтровали через слой целита и разделяли между насыщенным солевым раствором/ СН2С12. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над М§8О4, фильтровали и упаривали. Очистка флэшхроматографией на силикагеле (СН2С12/МеОН, 95/5) давала указанное в заголовке соединение (800 мг, 92% чистота, 88% выход). Μδ: 386,5 [М+1]+, Κΐ(2)= 1,45 мин.
Примеры 87'-96', получали с использованием методик, аналогичным методикам, использованным,
например, в примере 86', с использованием соответствующих . исходных веществ.
- 113 029473
- 114 029473
8,20-8,23 (м, 2Н) 8,40 1Н) 8,60 (с, 1Н) 9,38 (с, (д, 1Н)
Щ-ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-бе, 298
II 1 К): δ м.д. 1,06 (шир. с, ЗН)
1,18 (шир. с, ЗН) 3,37(м, 6Н) 3,91 (с, ЗН) 6,95 3,73 (д,
95' 1,22 12'1 455, 7 1Н) 7,67 (шир. с, 1Н) (т, 1Н) 7,87 (шир. с, 7,74 1Н)
(2,2-диметилморфолин-4-ил) - { 3-[б-(бметоксипиридин-3-ил)хиназолин-4ил]фенил}метанон 8,00 (д, 1Н) 8,12 (дд, 8,21 (д, 1Н) 8,24 (д, 8.39 (дд, 1Н) 8,59 (д, 9.39 (с, 1Н) 1Н) 1Н) 1Н)
О Щ-ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-Дб, 298
К) : δ м. д. 0,98 (т, ЗН) 2 , 17-
Μ 2,40 (м, 2Н) 3,35-3,72 (м,
96' 1,09 (2,> 507, 6 8Н) 4,07 (с, ЗН) 7,70 (д, 7,75 (т, 1Н) 7,90 (шир. 1Н) с,
2-Метокси-5-{4-[3-(4-пропионилпиперазин-1-карбонил)фенил]хиназолин-бил}никотинонитрил 1Н) 8,02 (д, 1Н) 8,23 (д, 1Н) 8,35 (д, 1Н) 8,43 (дд, 1Н) 8,80 (шир. с, 1Н) 8,91 (шир. с, 1Н) 9,41 (с, 1Н)
ЬС метод 1, (2) ЬС метод 2.
Пример 97'. {3-[6-(6-Метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]фенил}-((К)-2-метилпиперазин-1-ил)
метанон
К перемешанному раствору 3-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил] бензойной кислоты (100 мг, 0,254 ммоль) в 2 мл ΌΜΤ, добавляли НБТИ (144 мг, 0,381 ммоль) и ΌΙΡΕΆ (0,177 мл, 1,016 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, добавляли третбутиловый эфир (К)-3-метилпиперазин-1-карбоновой кислоты (76 мг, 0,381 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение еще 2-х часов при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили Н2О, и экстрагировали СН2С12. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Μ§δϋ4, фильтровали и упаривали в вакууме. Остаток растворяли в 3 мл СН2С12 и добавляли ТФУ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч. После этого периода времени смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы ОПзоп, а затем нейтрализовали объединенные фракции через РЬ-НСО3 МР с получением указанного в заголовке соединения (29 мг, 2 6% выход) в виде белого порошка. !Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО^6, 298 К): δ м.д. 1,23 (д, 3Н) 2,55-3,2 (м, 7Н) 3,91 (с, 3Н) 6,95 (д, 1Н) 7,62 (д, 1Н) 7,72 (т, 1Н) 7,81 (с, 1Н) 7,98 (д, 1Н) 8,11 (д, 1Н) 8,22 (д, 2Н) 8,38 (д, 1Н) 8,59 (с, 1Н) 9,38 (с, 1Н). Μ3: 440,1 [Μ+1]+, Кг'1 0,89 мин.
Пример 98'. {3-[6-(6-Метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]фенил}-((3)-2-метилпиперазин-1-ил)метанон
К перемешанному раствору 3-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил] бензойной кислоты (110 мг, 0,308 ммоль) в 2,5 мл ΌΜΓ, добавляли НВТи (175 мг, 0,462 ммоль) и ΌΙΡΕΆ (0,108 мл, 0,616 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин добавляли третбутиловый эфир (8)-З-метилпиперазин-1-карбоновой кислоты (123 мг, 0,616 ммоль) и ΌΙΡΕΆ (0,108 мл, 0,616 ммоль), и полученную реакционную смесь перемешивали в течение еще 2-х часов при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили Н2О и экстрагировали СН2С12. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Μ§δϋ4, фильтровали и упаривали в вакууме. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (гептан/этилацетат, 1/1) давала Промежуточное соединение (170 мг, 91% чистота(СЭЖХ), 93% выход), Μ3: 540,3 [М+1]+. Этот остаток (170 мг, 0,287 ммоль) растворяли в 2 мл СН2С12 и добавляли ТФУ (0,331 мл, 4,30 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 часов. После этого периода времени смесь гасили раствором №ОН
- 115 029473
(1М) и экстрагировали СН2С12. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали в вакууме. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Οίίδοπ, а затем нейтрализация объединенных фракций через ΡΌ-НСОз МР давали указанное в заголовке соединение (58 мг, 31% выход) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66, 298 К): δ м.д. 1,23 (д, 3Н) 2,55-3,15 (м, 7Н) 3,91 (с, 3Н) 6,95 (д, 1Н) 7,62 (д, 1Н) 7,72 (т, 1Н) 7,81 (с, 1Н) 7,98 (дт, 1Н) 8,12 (дд, 1Н) 8,21 (д, 1Н) 8,22 (с, 1Н) 8,38 (дд, 1Н) 8,59 (д, 1Н) 9,38 (с, 1Н). М8: 440,3 [М+1]+, К1(Г) = 0,85 мин.
Пример 99'. ((8)-2,4-диметилпиперазин-1-ил)-{3-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]фенил}метанон
К раствору {3-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]фенил}-((8)-2-метилпиперазин-1-ил)метанона (50 мг, 0,091 ммоль) в 1 мл МеОН добавляли 37% раствор формальдегид (0,008 мл, 0,109 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем добавляли КаВН3СЫ (6,86 мг, 0,109 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение еще 2-х часов при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили раствором насыщ. ЫаНСО3 и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Мд8О4, фильтровали и упаривали в вакууме. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы Οί1δοη, а затем нейтрализация объединенных фракций через ΡΕ-4^3 МР давали указанное в заголовке соединение (20 мг, 48% выход) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-66, 298 К) : δ м.д. 1,25 (д, 3Н) 1,82 (м, 1Н) 1,99 (м, 1Н) 2,11 (с, 3Н) 2,53-2,74 (м, 3Н) 3,12-3,27 (м, 2Н) 3,91 (с, 3Н) 6,96 (д, 1Н) 7,63 (дт, 1Н) 7,74 (т, 1Н) 7,81 (шир. с, 1Н) 7,99 (дт, 1Н) 8,11 (дд, 1Н) 8,21 (д, 1Н) 8,22 (с, 1Н) 8,39 (дд, 1Н) 8,59 (д, 1Н) 9,39 (с, 1Н). М8: 454,3 [М+1]+, Κΐ(Γ) = 0,85 мин.
Схема 7'
К1 о
а) Конденсирование карбоновой кислоты с аминами формулы К3ЫНК4, предпочтительно, проводили в обычных условиях конденсирования. Реакция может быть проведена путем растворения карбоновой кислоты и амина формулы К3ЫНК4 в подходящем растворителе, например, галогенированном углеводороде, таком как метиленхлорид, Ν,Ν-диметилформамид, Ν,Ν-диметилацетамид, Ν-2-метилпирролидон, метиленхлорид или смесь двух или более таких растворителей, и добавляя подходящее основание, например, триэтиламин, диизопропилэтиламин (ΌΙΡΕΑ) или Ν-метилморфолин, и подходящий связывающий агент, который образует реакционноспособное производное карбоновой кислоты ίη δίΐπ, например, и, предпочтительно, (2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат (НВТИ). Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от -20 до 50°С, особенно от -5°С до 30°С, например, при от 0°С до комнатной температуры. Реакцию можно предпочтительно проводить в условиях инертного газа, например, азота или аргона. Ь) Образование борного эфира проводили с использованием палладиевого катализатора, такого как, предпочтительно, 1,1бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий ^бС^^рр^-СН^У, водного основания, такого как, предпочтительно, ацетат калия, органический растворитель, такой как, предпочтительно, диоксан и бис(пинаколато)дибор. Реакционную смесь предпочтительно перемешивали при приблизительно 80°С в течение нескольких часов. с) Реакцию перекрестного связывания Сузуки между 6-бром-4-хлорхиназолином и боронатом проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя Дихлордифенилфосфин палладий (ΡάΟ2(ΡΡΗ3)2), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно
- 116 029473
100-120°С, предпочтительно, в микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. ά) Реакцию перекрестного связывания Сузуки между арилбромидом и борной кислотой или производными борной кислоты, такими как боронат формулы К5В(ОК')2 проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, палладий тетракис(трифенилфосфин)палладия (Р0(РРН3)4), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно 100-120°С, предпочтительно, в микроволновой печи. Реакционную смесь можно, предпочтительно, проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон.
Конечные соединения, описанные в настоящем документе, получали в соответствии с общей методикой, описанной в схеме 7'.
Пример 100'. 1 -(4- {5-[6-(6-Метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]-2-метилбензоил}пиперазин-1ил)этанон
Смесь 1-{4-[5-(6-бромхиназолин-4-ил)-2-метилбензоил]пиперазин-1-ил}этанона (150 мг, 0,331 ммоль), 6-метоксипиридин-3-илборной кислоты (50,6 мг, 0,331 ммоль), К3РО4 (105 мг, 0,496 ммоль) и Р0С12(РРН3)2 (11,61 мг, 0,017 ммоль) продували аргоном в течение нескольких минут. К смеси затем добавили 4 мл ацетонитрила, а затем 0,4 мл воды. Флакон закрывали, и реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли СН2С12 и фильтровали через слой целита. Органический слой промывали насыщ. раствором бикарбоната, сушили, пропуская через фазоразделительный картридж и упаривали. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы ОПзоп, а затем нейтрализация объединенных фракций через картридж 8СХ-2 давала указанное в заголовке соединение (100 мг, 60% выход) в виде порошка. 1НЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,90-2,10 (м, 3Н) 2,37 (с, 3Н) 3,20-3,80 (шир. м, 8Н) 3,91 (с, 3Н), 6,96 (дд, 1Н) 7,57 (дд, 1Н) 7,73 (д, 1Н) 7,87 (дд, 1Н), 8,12 (д, 1Н) 8,18 (с, 1Н) 8,20 (с, 1Н) 8,23 (шир. с, 1Н) 8,38 (дд, 1Н) 8,60 (шир. с, 1Н) 9,36 (с, 1Н). М8: 482,3 [М+1]+, Κΐ(Γ)= 1,01 мин.
1 -{4-[5-(6-Бромхиназолин-4-ил)-2-метилбензоил]пиперазин-1-ил} этанон
Смесь 6-бром-4-хлорхиназолина (1,8 г, 7,39 ммоль) (коммерческий источник), 1-{4-[2-метил-5(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензоил]пиперазин-1-ил}этанона (4,23 г, 7,39 ммоль, 65% чистота(СЭЖХ)), К3РО4 (2,354 г, 11,09 ммоль) и Р0С12(РРН3)2 (0,259 г, 0,370 ммоль) продували аргоном в течение нескольких минут. К смеси затем добавляли 15 мл ацетонитрила, а затем 1,5 мл воды. Флакон закрывали, и реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 10 мин с использованием микроволновая печь. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли СН2С12 и фильтровали через слой целита. Органический слой промывали насыщ. Раствором бикарбоната, сушили, пропуская через фазаразделительный картридж и упаривали. Очистка флэш-хроматографией с использованием системы Вю(аде 1§о1ега (диоксид кремния КР-ΝΙ I с функциональными аминогруппами, элюировали циклогексаном/ Е(ОАс от 0 до 100%) давала указанное в заголовке соединение (1,65 г, 49% выход) в виде желтого порошка. М8: 453,2-455,1 [М+1]+, Ш(Г) = 0,99 мин.
Пример 101'. 1-(4-{3-[6-(6-Метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]-5-трифторметилбензоил} пиперазин-1 -ил)этанон
К смеси 1-{4-[3-(6-бромхиназолин-4-ил)-5-трифторметилбензоил]пиперазин-1-ил}этанона (120 мг, 0,19 ммоль, 80% чистота(ВЭЖХ)), 2-метокси-5-пиридинборной кислоты (34,9 мг, 0,228 ммоль) и Р0(РРН3)4 (10,98 мг, 0,009 ммоль) добавляли 2 мл ацетонитрила. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор №2СО3 (0,38 0 мл, 0,380 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную
- 117 029473
смесь нагревали до 120°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ΕΐΟΑ^ фильтровали через слой целита и промывали ΕΐΟΑ^ Фильтрат концентрировали. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы ΟΠδοη, а затем нейтрализация объединенных фракций через Ρ^-3Ο3Н МР давали указанные в заголовке соединения (48 мг, 47% выход) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-П6, 298 Κ): δ м.д. 1,91-2,03 (шир. с, 3Н) 3,36-3,70 (м, 8Н) 3,91 (с, 3Н) 6,98 (д, 1Н) 8,06 (шир. с, 1Н) 8,14 (д, 1Н) 8,25 (д, 3Н) 8,30 (шир. с, 1Н) 8,44 (д, 1Н) 8,63 (шир. с, 1Н) 9,42 (с, 1Н). М3: 536,6 [М+1]+, Κΐ(2')= 1,18 мин.
Примеры 102'-109', получали с использованием методик, аналогичным методикам, использованным, например, в примере 101', с использованием соответствующих исходных веществ._
Пример Структура/Название Кб (мин.) М3 (ЕЗ) : [М+Н]+ Ш-ЯМР
102' 1 0 (зР 1-(4-{5-[6-(2-Метоксипиримидин-5ил)хиназолин-4-ил]-2метилбензоил}пиперазин-1-ил)-этанон 0,89 пп 483,3 Щ-ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-бб, 298 К) : δ м.д. 1,90-2,06 (м, ЗН) 2,37 (с, ЗН) 3,203,80 (шир. м, 8Н) 3,98 (с, ЗН) 7,57 (д, 1Н) 7,75 (с, 1Н) 7,88 (д, 1Н) 8,21 (д, 1Н) 8,32 (с, 1Н) 8,41 (д, 1Н) 9,04 (д, 2Н) 9,37 (с, 1Н)
103' 1= о Ν 5-{4-[3-(4-Ацетилпиперазин-1-карбонил)5-трифторметилфенил]хиназолин-6-ил} -2метоксиникотинонитрил 1,22 И'1 561,3 Ш-ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-бб, 298 К) : δ м.д. 1,87-2,07 (шир. с, ЗН) 3,34-3,74 (м, 8Н) 4,06 (с, ЗН) 8,07 (шир. с, 1Н) 8,21 (шир. с, 1Н) 8,23 (д, 1Н) 8,30 (шир. с, 1Н) 8,35 (д, 1Н) 8,46 (д, 1Н) 8,79 (шир. с, 1Н) 8,92 (шир. с, 1Н) 9,43 (с, 1Н)
104' Р 0 ΥΊ Υ* θΥ /Ох. 0 Ν Я+ЯЯ 1- (4 —{3 —[6-(2-Метоксипиримидин-5ил)хиназолин-4-ил]-5трифторметилбензоил}пиперазин-1ил)этанон 1,06 (2'> 537, 6 Щ-ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-бб, 298 К) : δ м.д. 1,94-2,06 (шир. с, ЗН) 3,35-3,71 (м, 8Н) 3,99 (с, ЗН) 8,06 (шир. с, 1Н) 8,23 (шир. с, 1Н) 8,27 (д, 1Н) 8,30 (шир. с, 1Н) 8,35 (шир. с, 1Н) 8,49 (дд, 1Н) 9,08 (шир. с, 2Н) 9,45 (с, 1Н)
105' 1 тЯр ЯЯ^·^ 5-{4-[3-(4-Ацетилпиперазин-1-карбонил)5-метокси-фенил]хиназолин-6-ил}-2метоксиникотинонитрил 1,13 пп 523,3 Ш-ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-бб, 298 К) : δ м.д. 1,91-2,02 (м, ЗН) 3,39-3, 64 (м, 8Н) 3,90 (с, ЗН) 4,06 (с, ЗН) 7,23 (с, 1Н) 7,42 (с, 1Н) 7,50 (с, 1Н) 8,22 (д, 1Н) 8,36 (д, 1Н) 8,43 (д, 1Н) 8,79 (шир. с, 1Н) 8,90 (с, 1Н) 9,40 (с, 1Н)
- 118 029473
Схема 8'
а) Хлорирование 6-бром-3Н-хиназолин-4-она проводят в обычных условиях оксихлорида фосфора, нагревая при кипячении с обратным холодильником или при 130°С в разведенном (например, в СН2С12) или в чистом оксихлориде фосфора. Ъ) Реакцию перекрестного взаимодействия Сузуки между 6-бром-4хлор-хиназолином и 3-(этоксикарбонил)фенилборной кислотой или 3-(этоксикарбонил)фенилборонатом, проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, дихлордифенилфосфин палладия (Р0С12(РРН3)2), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от 100 до 120°С, предпочтительно, в микроволновой печи. Реакцию
- 119 029473
можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. с) Омыление карбонового эфира проводили при обычных условиях омыления, используя в качестве примера, предпочтительно, водные основания гидроксида лития и органический растворитель, такой как, предпочтительно, диоксан. Реакцию можно предпочтительно проводить при комнатной температуре. ά) Конденсирование карбоновой кислоты с аминами формулы К3NΗК4 предпочтительно проводили в обычных условиях конденсирования. Реакция может быть проведена путем растворения карбоновой кислоты и амина формулы К3NΗК4 в подходящем растворителе, например, галогенированном углеводороде, таком как метиленхлорид, Ν,Ν-диметилформамид, Ν,Ν-диметилацетамид, Ν-2-метилпирролидон, метиленхлорид или смесь двух или более таких растворителей, и добавляя подходящее основание, например, триэтиламин, диизопропилэтиламин (В1РЕА) или Ν-метилморфолин, и подходящий связывающий агент, который образует реакционно-способное производное карбоновой кислоты т бИи, например, и, предпочтительно, гексафторфосфат (2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония (НВТИ). Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от -20 до 50°С, особенно от -5°С до 30°С, например, при от 0°С до комнатной температуры. Реакцию можно предпочтительно проводить в условиях инертного газа, например, азота или аргона. е) Реакцию перекрестного связывания Сузуки между арилбромидом и борной кислотой или производными борной кислоты, такими как боронат формулы К5-В(ОК')2 проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, палладий тетракис(трифенилфосфин)палладия (Ρά(ΡΡΗ3)4), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно 100-120°С, предпочтительно, в микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон.
Конечные соединения, описанные в настоящем документе, получали в соответствии с общей методикой, описанной в схеме 8'.
Пример 110'. 1-(4-{3-Фтор-5-[б-(б-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]бензоил}пиперазин-1-ил) этанон
Смесь 1-{4-[3-(б-бромхиназолин-4-ил)-5-фторбензоил]пиперазин-1-ил}этанона (150 мг, 0,328
ммоль), б-метоксипиридин-3-илбороновой кислоты (50,2 мг, 0,328 ммоль), Κ3ΡΘ4 (104 мг, 0,492 ммоль) и ΡάΟ2(ΡΡΗ3)2 (11,51 мг, 0,01б ммоль) продували аргоном в течение нескольких минут. К смеси затем добавляли 3 мл ацетонитрила, а затем 0,3 мл воды. Флакон закрывали, и реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли СН2С12 и фильтровали через слой целита. Органический слой промывали насыщ. раствором бикарбоната, сушили, пропуская через фазаразделительный картридж, и упаривали. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы ОПбоп, а затем нейтрализация объединенных фракций через картридж δСX-2 давала указанное в заголовке соединение (б8 мг, 41% выход) в виде порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-с!,,. 298 Κ): δ м.д. 1,88-2,0б (м, 3Н) 3,34-3,б9 (м, 8Н) 3,91 (с, 3Н) б,97 (д, 1Н) 7,58 (д, 1Н) 7,73 (с, 1Н) 7,85 (дд, 1Н) 8,15 (д, 1Н) 8,19-8,2б (м, 2Н) 8,42 (дд, 1Н) 8,б2 (д, 1Н) 9,39 (с, 1Н). Μδ: 485,0 [М+1]+, К1(Г)= 1,04 мин.
1-{4-[3-(б-Бромхиназолин-4-ил)-5-фторбензоил]пиперазин-1-ил}этанон
К смеси 3-(б-бромхиназолин-4-ил)-5-фторбензойной кислоты (1,3б г, 3,72 ммоль) в СН2С12 (15 мл) добавляли Б^ЕА (1,30 мл, 7,44 ммоль) и НВТИ (1,б94 г, 4,47 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. К смеси затем добавляли 1(пиперазин-1-ил)этанон (0,572 г, 4,47 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором №НСО3 и экстрагировали СН2С12. Органический слой дважды промывали насыщенным солевым раствором, сушили, пропуская через фазаразделительный картридж, и упаривали. Очистка флэш-хроматографией с использованием системы Вкладе 1зо1ега (диоксид кремния ΚΡ-ΝΙΙ с функциональными аминогруппами, элюировали циклогексаном/ЕЮАс от 0 до 100%) давала указанное в заголовке соединение (1,20 г, б8% выход) в виде бежевой пены. Μδ: 457,4-459,3 [М+1]+, К1(2')= 1,03 мин.
- 120 029473
3-(6-Бромхиназолин-4-ил)-5-фторбензойная кислота
К раствору этилового эфира 3-(6-бромхиназолин-4-ил)-5-фторбензойной кислоты (1,417 г, 3,78 ммоль) в диоксане (15 мл) добавляли при комнатной температуре 2М водный раствор ЫОН-Н2О (7,55 мл, 7,55 ммоль), и реакционную смесь перемешивали 2 часа при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили 2М водным раствором НС1 (5 мл), полученный осадок фильтровали и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (1,36 г, 99% выход) в виде твердого белого вещества. М8: 349,0 [М+1]+, К1(Г)= 1,17 мин.
Этиловый эфир 3- (6-бромхиназолин-4-ил)-5-фторбензойной кислоты
Смесь 6-бром-4-хлорхиназолина (1,5 г, 6,16 ммоль), 3-(этоксикарбонил)-5-фторфенилбороновой кислоты (1,306 г, 6,16 ммоль), К3РО4 (1,961 г, 9,24 ммоль) и Р6С12(РРЬ3)2 (216 мг, 0,308 ммоль) продували аргоном в течение нескольких минут. К смеси затем добавляли 24 мл ацетонитрила, а затем 2,4 мл воды. Флакон закрывали, и реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли СН2С12 и фильтровали через слой целита. Органический слой промывали насыщ. раствором бикарбоната, сушили, пропуская через фазаразделительный картридж, и упаривали. Очистка флэш-хроматографией с использованием системы ВЫаде 1зо1ега (диоксид кремния КР-ΝΠ с функциональными аминогруппами, элюировали циклогексаном/ЕЮАс от 0 до 30%) давала указанное в заголовке соединение (1,417 г, 61% выход) в виде твердого вещества. М8: 375,1-377,1 [М+1]+, Κΐ(1)= 1,54 мин.
Соединение примера 111' получали с использованием методик, аналогичным методикам, использованным, например, в примере 110', с использованием соответствующих исходных веществ.
Пример Структура/Название НН (мин.) М3 (ЕЗ) : [М+Н]+ Щ-ЯМР
111' о ΎΊ 1-(4-{3-Фтор-5-[6-(2-метоксипиримидин5-ил)хиназолин-4-ил]бензоил}пиперазин1-ил)-этанон 0,91 (1И 487,3 Ч-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Мб, 298 К) : δ м.д. 2,00 (д, ЗН) 3,35-3,74 (м, 8Н) 3,99 (с, ЗН) 7,58 (д, 1Н) 7,74 (с, 1Н) 7,85 (д, 1Н) 8,24 (д, 1Н) 8,35 (с, 1Н) 8,46 (д, 1Н) 9,07 (с, 2Н) 9,41 (с, 1Н)
(1') ЬС метод 1'.
Пример 112'. зин-1-ил)этанон
1-(4-{4-[6-(2-Метоксипиримидин-5-ил)хиназолин-4-ил]пиридин-2-карбонил}пипера-
К смеси 2-метоксипиримидин-5-ил борной кислоты (36,9 мг, 0,24 0 ммоль) и Р6(РРЬ3)4 (11,56 мг, 0,010 ммоль) добавляли раствор 1-{4-[4-(6-бромхиназолин-4-ил)пиридин-2-карбонил]пиперазин-1-ил} этанона (88 мг, 0,200 ммоль) в 2 мл ацетонитрила. Реакционную смесь продували аргоном и добавляли 1М водный раствор Ха2СО3 (0,400 мл, 0,400 ммоль), и флакон закрывали. Реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 10 мин, используя микроволновую печь, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс, фильтровали через слой целита и концентрировали. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, системы ОПзоп, а затем нейтрализация объединенных фракций через РЬНСО3 МР, давали указанное в заголовке соединение (40 мг, 43% выход) в виде белого порошка. 1Н-ЯМР
- 121 029473
(400 МГц, ДМСО-ά^ 298 Κ): δ м.д. 2,01-2,06 (д, 3Н) 3,48 (шир. с, 3Н) 3,58 (шир. с, 3Н) 3,65 (шир. с, 1Н) 3,73 (шир. с, 1Н) 3,99 (с, 3Н) 8,01 (дд, 1Н) 8,06 (шир. с, 1Н) 8,28 (д, 1Н) 8,34 (д, 1Н) 8,49 (дд, 1Н) 8,87 (д, 1Н) 9,09 (с, 2Н) 9,47 (с, 1Н). М8: 470,6 [М+1]+, Кг"' 0,78 мин.
Соединения примеров 113' и 114' получали с использованием методик, аналогичным методикам,
использованным, например, в примере 112', с использованием соответствующих исходных веществ.
Пример Структура/Название Кб (мин.) М3 (ЕЗ) : [М+Н]+ 2Н-ЯМР
О 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб,
-Ν ОС ι г< 1 II 1 1 1 °γ\ ι 298 (шир К) : . с δ м.д. 2,00-2,05 ЗН) 3,44-3,75 (м,
8Н) 4,07 (с, ЗН) 8,01 (д,
0,97 <2,>
113' 1 7 ι 494, 6 1Н) 8,06 (шир. с, 1Н) 8,27
5-{4- [2- ( 4-Ацетилпиперазин-1- (д, 1Н) 8,35 (д, 1Н) 8,46-
8,51 (м 1Н) 8,82 (шир. с,
карбонил)пиридин-4-ил]хиназолин-б-ил}-2-
1Н) 8, 88 (д, 1Н) 8,95
метоксиникотинонитрил (шир . с 1Н) 9,47 (с, 1Н)
О /ч 1 ί ] о 2Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб,
298 К) : δ м.д. 1,96-2,08
(д, ЗН) 3,44-3,75 (м, 8Н)
114' и ци N 1,13 <2,> 537, 6 4,06 (с ЗН) 8,02 (дд, 1Н)
8,08 (шир. с, 1Н) 8,26 (д,
1-(4 —{4 —[6-(6-Метокси-5-
1Н) 8,34 (д, 1Н) 8,50-8,53
трифторметилпиридин-3-ил)хиназолин-4- (дд, 2Н 8,87 (д, 1Н) 8,90
ил]пиридин-2-карбонил}пиперазин-1-ил)- (д, 1Н) 9,47 (с, 1Н)
этанон
(2') ЬС метод 2'
Схема 9'
а) Образование борного эфира проводили с использованием палладиевого катализатора, такого как, предпочтительно, 1,1-бис (дифенилфосфино) ферроцен] дихлорпалладий (ΡάΓΓΟρρΟ-ίΊ 12С12), водного основания, такого как, предпочтительно, ацетат калия органического растворителя, такого как, предпочтительно, диоксан и бис(пинаколато)дибор. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при приблизительно 80°С в течение нескольких часов. Ь) Реакцию перекрестного связывания Сузуки между 6-бром-4-хлорхиназолином и боронатом проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя дихлордифенилфосфин палладий (ΡάΟ12(ΡΡΠ3)2), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно 100-120°С, предпочтительно, в микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. ά) Реакцию перекрестного связывания Сузуки между арилбромидом и борной кислотой или производными борной кислоты, такими как боронат формулы К5-В(ОК')2 проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, дихлордифенилфосфин палладий (ΡάΟ12(ΡΡΠ3)2), водное основание и органический растворитель, такой как, предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно 100-120°С, предпочтительно, в микроволновой печи. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. с) Реакцию перекрестного связывания Сузуки между арилбромидом и борной кислотой или производными борной кислоты, такими как боронат формулы К5-В(ОК')2 проводят в обычных условиях реакции Сузуки, используя палладиевый катализатор, такой как, предпочтительно, палладий тетракис(трифенилфосфин)палладия (Ρά(ΡΡΗ3)4), водное основание и органический растворитель, такой как,
- 122 029473
предпочтительно, ацетонитрил. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно 100-120°С. Реакцию можно предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, такого как азот или аргон. б) Конденсирование карбоновой кислоты с аминами формулы К3КНК4 предпочтительно проводили в обычных условиях конденсирования. Реакция может быть проведена путем растворения карбоновой кислоты и амина формулы К3КНК4 в подходящем растворителе, например, галогенированном углеводороде, таком как метиленхлорид, Ν,Ν-диметилформамид, Ν,Ν-диметилацетамид, Ν-2-метилпирролидон, метиленхлорид или смесь двух или более таких растворителей, и добавляя подходящее основание, например, триэтиламин, диизопропилэтиламин (ОГТЕА) или Ν-метилморфолин, и подходящий связывающий агент, который образует реакционноспособное производное карбоновой кислоты ίη кЕи, например, гексафторфосфат (2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония (НВТИ) и, предпочтительно, ангидрид пропилфосфония. Реакционную смесь, предпочтительно, перемешивали при температуре приблизительно от -20 до 50°С, особенно от -5°С до 30°С, например при от 0°С до комнатной температуры. Реакцию можно предпочтительно проводить в условиях инертного газа, например, азота или аргона.
Конечные соединения, описанные в настоящем документе, получали в соответствии с общей методикой, описанной в схеме 9'.
Пример 115'. {5-[6-(6-Метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]-2-метилфенил}-(4-метилпиперазин-1ил)метанон
К смеси 5-[6-(6-метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]-2-метилбензойной кислоты (55 мг, 0,148 ммоль) в СН2С12 (2 мл) добавляли ОГТЕА (0,039 мл, 0,222 ммоль) и раствор ангидрида пропилфосфония 50% в ОМЕ (0,065 мл, 0,222 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К смеси затем добавляли 1-метилпиперазин (0,016 мл, 0,148 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором №11СО3 и экстрагировали СН2С12. Органическ слой затем сушили, пропуская через фазаразделительный картридж и упаривали. Очистка препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, а затем нейтрализация объединенных фракций через картридж 3СХ-2 давала указанное в заголовке соединение (32 мг, 46% выход) в виде желтого порошка. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6, 298 Κ): δ м.д. 2,13 (с, 3Н) 2,17 (шир. с, 2Н) 2,34 (д, 2Н) 2,36 (с, 3Н) 3,26 (т, 2Н) 3,65 (шир. с, 2Н) 3,92 (с, 3Н) 6,96 (д, 1Н) 7,56 (д, 1Н) 7,64 (д, 1Н) 7,87 (дд, 1Н) 8,12 (дд, 1Н) 8,19 (д, 1Н) 8,23 (д, 1Н) 8,38 (дд, 1Н) 8,59 (д, 1Н) 9,36 (с, 1Н). М3: 454,3 [М+1]+, К!(Г)= 0,87 мин.
5- [6-(6-Метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил]-2-метилбензойная кислота
Смесь 5-(6-бромхиназолин-4-ил)-2-метилбензойной кислоты (318 мг, 0,741 ммоль), 6-метоксипиридин-3-илборной кислоты (113 мг, 0,741 ммоль), Κ3ΡΟ4 (236 мг, 1,112 ммоль) и ΡбС12(ΡΡЬ3)2 (26,0 мг, 0,037 ммоль) продували аргоном в течение нескольких минут. К смеси затем добавляли 6 мл ацетонитрила, а затем 0,8 мл воды. Флакон закрывали, и реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 5 мин, используя микроволновую печь. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс и фильтровали через слой целита. Органический слой промывали раствором 2М НС1. Так как часть соединения оставалась в водной фазе, то рН подщелачивали до приблизительно 8, и соединение экстрагировали снова ЕЮАс. Объединенные органические слои сушили над №23О4, фильтровали и упаривали. Осаждение в ЕЮАс/циклогексане давало указанное в заголовке соединение (168 мг, 61% выход) в виде желтого порошка. М3: 372,2 [М+1]+. К!(Г)= 1,22 мин.
5-(6-Бромхиназолин-4-ил)-2-метилбензойная кислота
Смесь 6-бром-4-хлорхиназолина (300 мг, 1,232 ммоль), 2-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2] диоксаборолан-2-ил)-бензойной кислоты (497 мг, 1,232 ммоль, чистота 65% по СЭЖХ), Κ3ΡΟ4 (3 92 мг, 1,848 ммоль) и ΡбС12(ΡΡЬ3)2 (43,2 мг, 0,062 ммоль) продували аргоном в течение нескольких минут. К смеси затем добавляли 8 мл ацетонитрила, а затем 0,8 мл воды. Флакон закрывали, и реакционную смесь нагре- 123 029473
вали до 120°С в течение 5 мин, используя микроволновую печь. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс и фильтровали через слой целита. Органический слой промывали 2М раствором НС1, сушили над №28О4, фильтровали и упаривали. Осаждение в ЕЮАс/циклогексане давало указанное в заголовке соединение (318 мг, 80% чистота, 60% выход) в виде бежевого порошка. М8: 345,0 [М+1]+, К1(Г)= 1,23 мин.
Примеры 116'-117', получали с использованием методик, аналогичным методикам, использованным, например, в примере 115', с использованием соответствующих исходных веществ._
Пример Структура/Название ИД (мин.) М3(ЕЗ): [М+Н]+ Ш-ЯМР
Щ-ЯМР (400 МГц , ДМСО-бб,
2 98 К) : δ м.д. 0,89 (д,
6Н) 2,28 (τ, 2Н ) 2,35 (с,
1 ДЛо ζΧ^Τ ι ЗН) 2,42-2,48 3,25 (д, 2Н) (м, 2Н) 3,47-3,76
(м, 2Н) 3,91 (с , ЗН) 6,95
116' 1 0,92 П') 482, 4
N (д, 1Н) 7,56 (д , 1Н) 7,62
(4-изопропилпиперазин-1-ил)-{5-[б- (6- (Л, 1Н) 7,85 (Д, 1Н)
метоксипиридин-3-ил)хиназолин-4-ил -2- 8,08-8,15 (м, 1Н) 8,17-
метилфенил[метанон 8,24 (м, 2Н) 8,34-8,41
(м, 1Н) 8,59 (д , 1Н) 9,36
(с, 1Н)
Щ-ЯМР (400 МГц ДМСО-бб,
298 К): δ м.д. 1,65-1,88
(м, 2Н) 2,21-2,27 (м, ЗН)
1 ίίηΧ^ ϊΌϊ 2,36-2,40 (м, ЗН) 2,53-
3,23 (м, 4Н) 3,40-3,55
117' Χ/+χΑ/ΧΝ (м, 2Н) 3,90-3, ЭЗ (м, ЗН)
0,88 И'> 466, 3 6, 93-7, 00 (м, 1Н) 7,52-
7,61 (м, 1Н) 7,67-7,73
(2,5-Диазабицикло[2.2.1]гепт-2-ил)-{ 5- [6- (м,1Н) 7,82-7,9 0 (м, 1Н)
( 6-метоксипиридин-З-ил)хиназолин-4-и л] -2- 8,08-8,15 (м, 1Н) 8,17-
метилфенил[метанон 8,24 (м, 1Н) 8,33-8,41
(м, 1Н) 8,56-8, 51 (м, 1Н)
9, 34-9, 38 (м, 1Н)
(1') ЕС/М8 метод 1'.
Биологическая оценка
Активность ингибитора Р13К, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы Р13К дельта, может быть оценена следующими способами т νΐίΐΌ & т νινί).
Биологические анализы
1. Определение ферментативного ингибирования изоформы Р13К альфа и Р13К дельта.
1.1. Тест на активность липидкиназы.
Эффективность ингибиторов Р13К, где указанный ингибитор оказывает ингибиторное действие на изоформу Р13К дельта, может быть продемонстрирована следующим образом.
Киназную реакцию проводили в конечном объеме 50 мкл на лунку половины площади Соз1аг в 96луночном планшете. Конечные концентрации АТФ и фосфатидилинозола в анализе составляют 5 мкМ и 6 мкг/мл, соответственно. Реакцию инициировали добавлением киназы Р13, например, киназы Р13 δ.
р 110δ. Компоненты анализа добавляли в лунку следующим образом:
10 мкл тестируемого соединения в 5% ДМСО на лунку в колонках 2-1.
Общую активность определи путем добавления 10 мкл 5% об./об. ДМСО в первых 4 лунках колонки 1 и в 4 последних лунках колонки 12.
Фон определяли путем добавления 10 мкМ котрольного соединения в последние 4 лунки колонки 1 и в 4 первые лунки колонки 12.
2 мл "Аналитической смеси" получали в расчете на планшет:
1,912 мл аналитического буфера НЕРЕ8;
8,33 мкл 3 мМ исходного раствора АТФ, получая конечные концентрации в 5 мкМ на лунку;
1 мкл [33Р]АТФ на данные активности, получая 0,05 мкКю на лунку;
30 мкл 1 мг/мл исходного раствора Р1, получая конечную концентрацию 6 мкг/мл на лунку;
5 мкл 1М исходного раствора МдС12, получая конечную концентрацию 1 мМ на лунку; в лунку добавляли 20 мкл аналитической смеси;
- 124 029473
2 мл "ферментативной смеси" получали в расчете на лунку (х мкл киназы ΡΙ3 р110δ в 2 мл из киназного буфера). "Ферментативную смесь" сохраняли на льду при добавлении в аналитический планшет;
в лунку добавляли 20 мкл "ферментативной смеси" для инициации реакции; затем планшет инкубировали при комнатной температуре в течение 90 мин;
реакцию останавливали, добавляя в лунку 50 мкл суспензии бус ХУОА-8РА (бусы для сцинтилляционного анализа сближения, покрытые агглютинином зародышей пшеницы);
аналитический планшет герметизировали, используя Τορδеа1-8 (термосварка для полистироловых микропланшетов, Регк1иЕ1тег ЬА8 [Пеи1зсЫапй] ОшЪН, Ροάβηυ. Германия) и инкубировали при комнатной температуре в течение по меньшей мере 60 мин;
аналитический планшет затем центрифугировали при 1500 об./мин. в течение 2 минут с помощью настольной центрифуги 1οιι;·ιη (1οιι;·ιη 1пс., Nаηΐеδ, Ргапсе);
аналитический планшет количественно анализировали, используя Раскагб ΤορΟουηΐ, каждую лунку количественно анализировали в течение 20 с;
объем фермента зависит от ферментативной активности этой партии в использовании;
В более предпочтительном анализ киназную реакцию проводят в конечном объеме 10 мкл на лунку малообъемных несвязывающих Соттд в 384-луночном черном планшете (номер в каталоге #3676). Конечная концентрация АТФ и фосфатидилинозитола (Р1) в анализе составляет 1 мкМ и 10 мкг/мл, соответственно. Реакцию начинают путем добавления АТФ.
Компоненты анализа добавляют в каждую лунку следующим образом:
50 нл тестируемого соединения в 90% ДМСО на лунку, в колонках 1-20, 8 концентраций (1/3 и 1/3,33 серийное разведение) в одном.
Низкий контроль: 50 нл 90% ДМСО в половине лунки колонок 23-24 (0,45% в финале).
Высокий контроль: 50 нл ссылочного соединения (например, соединения примера 7
\УО2006/122806) в другой половине колонок 23-24 (2,5 мкМ в конце).
Стандарт: 50 нл ссылочного соединения как только что указано, разбавляли в качестве тестируемых соединений в колонках 21-22.
В анализе получали 20 мл "буфера":
200 мкл 1М Трис НС1 рН 7,5 (конечная концентрация 10 мМ);
60 мкл 1М МдС12 (конечная концентрация 3 мМ);
500 мкл 2М Ν;·ιΟ (конечная концентрация 50 мМ);
100 мкл 10% СНАР8 (конечная концентрация 0,05%);
200 мкл 100 мМ ΌΤΤ (конечная концентрация 1 мМ в финале);
18,94 мл наночистая вода;
10 мл 'Р1' получали в расчете на анализ:
200 мкл 1 мг/мл Ь-альфа-фофсфатидилинозитол (печень крупного рогатого скота, Ауаий Ρο1а^ Ырίάδ номер в каталоге 840042С М^=909,12), полученного в 3%-октилглюкозиде (конечная концентрация 10 мкг/мл);
9,8 мл "буфера";
10 мл "АТФ" получали в расчете на анализ:
6,7 мкл 3 мМ исходного раствора АТФ, получая конечнную концентрацию 1 мкМ на лунку 10 мл " буфера";
2,5 мл каждой конструкции Р13К получали в расчете на анализ в "Р1" со следующей конечной концентрацией:
10 нМ Р13К альфа ЕМУ В1075
25 нМ бета ЕМУ ВУ949
10 нМ дельта ЕМУ ВУ1060
150 нМ гамма ЕМУ ВУ950
5 мкл "Р1/Р13К" добавляли в лунку.
5 мкл "АТФ" добавляли в каждую лунку для инициации реакции.
Планшеты затем инкубировали при комнатной температуре в течение 60 мин (альфа, бета, дельта) или 120 мин (гамма);
реакцию останавливали, добавляя 10 мкл киназы-ОШ (номер в каталоге #6714);
аналитические планшеты считывали через 10 минут в ридере 8уиегду 2 (ВюТек, УегиюгИ И8А) с
временем интеграции 100 миллисекунд и чувствительностью, установленной до 191;
выход: верхний контроль составляет около 60000 отсчетов и нижний контроль 30000 или ниже; этот анализ люминисценции давал полезное соотношение Ζ' от 0,4 до 0,7;
значение Ζ' является универсальным измерением надежности анализа;
Ζ' от 0,5 до 1,0 считается отличным показателем в анализе.
Для этого анализа указанные конструкции Р13К получали следующим образом:
1.2. Получение генных конструкций.
Две различных конструкции ВУ 1052 и ВУ 1075 использовали для получения белков киназы Р13 а
- 125 029473
для скрининга соединений.
ΡΙ3Κα ВУ-1052 р85(18Н2)-С1у линкер-р110а(Б20аа)-С-конец метка Ηϊχ
Продукты ПЦР для внутреннего домена 8Н2 (т8Н2) субъединицы р85 и р110-а субъединицы (с разведением первых 20 аминокислот) получали и сливали путем перекрывающейся ПЦР.
Продукт ПЦР 1§Н2 получали из первой цепи кДНК, используя первичные праймеры
§^С130-р01 (5'-ССАСААТАТСАТАСАТТАТАТСААСААТ-3') (δΕΟ ΙΌ Ш:1) и §™С130-р02 (5'ТССТТТААТССТСТТСАТАССТТТСТСААТ-3') (δΕΟ ΙΌ Ш:2). Затем во второй реакции ПЦР Са1е^ау ОпуЦгодеп АС, Ва§е1, δ^ίΙζ^ΓίαηΗ) добавляли последовательности сайтов рекомбинации А11.В1 и линкерные последовательности к 5'концу и 3'концу фрагмента р85 ίδΜ, соответственно, используя праймеры
§^С130-р03 (5'-СССАСААСТТТСТАСААААААССАСССТАССААССАСАТАТАСАТАТСССА СААТАТСАТАСАТТАТАТСААСААТ-3') (δΕΟ ΙΌ ^: 3) и §^С152-р04 (5'-ТАССАТААТТССАССА ССАССАССССАААТ ТСССССТССТТТ-ААТССТСТТСАТАССТТТСТСААТ-3') (δΕΟ ΙΌ ^:4).
Р110-а фрагмент также получали из первых цепей кДНК, используя вначале праймеры детС152-р01 (5'-СТАСТССААТСТТТАСТАССАААТСС-3') (δΕΟ ΙΌ ^:5) и
§^С152-р02 (5'-СТТСААТССАТССТСТТТААТТСТСТ-3') (δΕΟ ΙΌ ^: 6).
В последующей реакции ПЦР добавляли последовательность линкера и гистидиновую метку к 5'концу и 3'концу р110-а фрагмента, соответственно, используя праймеры
§№ 152-р03 (5'-СССССААТТТССССТССТССТССТССААТТАТССТАСТАСТССААТСТТТАСТ АСС-АААТССА-3') (δΕΟ ΙΌ ^:7) и
§^С152-р06 (5'-АССТСССТСАТССТСАТССТСАТСТССТСССТТСААТССАТССТСТТТААТТ СТСТ-3') (δΕΟ ΙΌ Ш:8).
Р85^Н2/р110-а слитый белок собирали в третьей реакции ПЦР путем перекрытия линкеров 3'конца фрагмента ίδΜ и 5'конца р110-а фрагмента, используя вышеуказанный праймер детС130-р03 и праймер, содержащий перекрывающуюся гистидиновую метку и последовательности рекомбинации АйВ2 (5'-СССАССАСТТТСТАСААСАААССТСССТТТААССТСССТСАТССТСАТССТСАТСТССТС С-3') (δΕΟ ΙΌ Ш:9).
Этот конечный продукт рекомбинировали в реакции ОК ОпуЦгодеп) в донорный вектор ρ^ОNК201 с получением начального клона ОКР318. Этот клон проверяли секвенированием и использовали в реакции Са1е\уау ЬК для переноса вставки в Са1е\уау-адаптированый вектор рВ1иеВас4.5 Опуйгодеп) с получением экспрессирующего вектора ЬК410 бакуловируса.
ΡΙ3Κα ВУ-1075 ρ85(ΐ8Η2)-12 ХС1у линкер-р110а(Б20аа)-С-конец метка Ηϊχ
Конструкция для ВУ-1075 бакуловируса, полученная лигированием трех частей, состояла из фрагмента р85 и р110-а фрагмента, клонированного в вектор рВ1иеВас4.5. Фрагмент р85 получали из плазмиды р1661-2, расщепленной ШеАре. Р110-а фрагмент получали из ЬК410 (см. выше), как фрагмент δρеI/Η^ηάIII. Клонирующий вектор рВ1иеВас4.5 Опуйгодеп) расщепляли Ше/НйШП. Все это давало конструкцию РИО 153.8.
Компонент р85 (ίδΜ) получали ПЦР, используя ОКЕ 318 (описано выше) в качестве матрицы и один прямой праймер
КАС1028 (5'-ССТАССАТСССАСААТАТСАТАСАТТАТАТСААСААТАТАСС) (δΕΟ ΙΌ ^: 10) и два обратных праймера,
КАС1029 (5'-СССТССАССАССТСССССТССТТТААТССТСТТСАТАССТТТСТС) (δΕΟ ΙΌ ^:11) и
КАС1039 (5'-ТАСТАСТСССССТССАССАССТСССССТССАССАССТССССС) (δΕΟ ΙΌ ^:12).
Два обратных праймера перекрещивались и 12х С1у линкер и Ν-концевая последовательность гена р110а встраивали в сайт δρеI. В конструкции ВУ1052 линкер 12х С1у заменял линкер. Фрагмент ПЦР клонировали в рСК2.1 ТОРО Опуйгодеп). Из полученных клонов было определено, что р1661-2 является правильным. Эту плазмиду расщепляли Ше и δρеI и полученный фрагмент выделяли на геле или очищали для субклонирования.
Клонированный фрагмент р110-а получали путем ферментативного расщепления клона ЬК410 (см. выше) с помощью δρеI и НшбШ. Сайт δρеI находится в кодирующей области гена р110а. Полученный фрагмент выделяли на геле или очищали для субклонирования.
Клонирующий вектор рВ1иеВас4.5 Опуйгодеп) получали ферментативным расщеплением с помощью Ше и НшбШ. Разрезанный вектор очищали на колонке Ц1адеп (Цшадеп Ν.ν, Уеп1о, №1йег1апб8), а затем дефосфорилировали щелочной фосфатазой из телячьего кишечника (СЕР) (Ν^ Ипд1апб ВюЬаЪк, ТрбгекЬ, МА). После завершения реакции СГР разрезанный вектор снова очищали на колонке с получением конечного вектора. Лигирование трех частей проводили, используя лигазу Косйе КарМ лигаза, и инструкцию производителя.
ΡΙ3Κβ ВУ-949 р85(18Н2)-С1у линкер-р110Ъ(полноразмерный)-С-конец метка Ηϊχ
Продукты ПЦР начального домена δΜ (ίδΜ) субъединицы р85 и полноразмерной субъединицы р110-Ъ получали и сливали с помощью перекрещивающейся ПЦР.
Продукт ίδΜ ПЦР получали из первой цепи кДНК, используя сначала праймеры
- 126 029473
д^С130-р01 (5'-ССАСААТАТСАТАСАТТАТАТСААСААТ-3') (8ЕС) ΙΌ ЫО:1) и дтеО130-р02 (5'ТССТТТААТССТСТТСАТАССТТТСТСААТ-3') (8ЕЕ) ГО ЫО:2). Затем во вторичной реакции ПЦР Са1е\\цу (1пуйгодеп) добавляли последовательности сайтов рекомбинации АйВ1 и последовательности линкера к 5' концу и 3'концу фрагмента р85 18Н2, соответственно, используя праймеры
д^С130-р03 (5'-СССАСААСТТТСТАСААААААССАСССТАССААССАСАТАТАСАТАТСССА СААТАТСАТАСАТТАТАТСААСААТ-3') (8ЕЕ) ГО ЫО: 3) и д^С130-р05 (5'-АСТСААССАТССТССТ ССТССТССТССТССТТТААТССТСТТСАТАССТТТСТС-3') (8ЕЕ) ГО ЫО: 13).
Фрагмент 0110-Ь также получали из первой цепи кДНК, используя вначале праймер детС130-р04 (5'-АТТАААССАССАССАССАССАССАССАТССТТСАСТТТСАТААТСССТССТССТ-3') (8 ЕЕ) ГО ЫО:4), который содержат последовательности линкера и 5'конец р110-Ь и праймер диС130-р06 (5'АССТСССТСАТССТСАТССТСАТСТССТССАСАТСТСТАСТСТТТСССААСТСТСТС-3') (8 ЕЕ) ГО
ΝΌ: 14), который содержит последовательности 3'конца р110-Ь, слитые с гистидиновой меткой.
Слитый белок р85-18Н2/р110-Ь собирали в реакции ПЦР путем перекрытия линкеров 3'конца фрагмента 18Н2 и 5'конца р110-Ь фрагмента, используя указанный выше праймер детС130-р03 и праймер, содержащий перекрывающуюся гистидиновую метку и последовательности рекомбинации А11В2 (51СССАССАСТТТСТАСААСАААССТСССТТТААССТСССТСАТССТСАТССТСАТСТССТСС-3')
(8ЕЕ) ГО ЫО: 15).
Этот конечный продукт рекомбинировали в реакции ОК Са1е\\цу (1пуйгодеп) в донорный вектор рООЫР201 с получением начального клона ОКР253. Этот клон проверяли секвенированием и использовали в реакции Са1е\уау ЬК для переноса вставки в Са1е\уау-адаптированый вектор рВ1иеВас4.5 (ΙηνίΐΓοдеп) с получением вектора экспрессии ЬК280 бакуловируса.
ΡΙ3Κδ ВУ-1060 р85(18Н2)-С1у линкер-р110й (полноразмерный)-С-конец метка Ηϊχ
Продукты ПЦР для внутреннего домена 8Н2 домена (18Н2) субъединицы р85 и для полноразмерной субъединицы р110-й получали и сливали путем перекрывающейся ПЦР.
Продукт ПЦР 18Н2 получали из первой цепи кДНК, используя первичные праймеры д^С130-р01 (5'-ССАСААТАТСАТАСАТТАТАТСААСААТ-3') (8ЕЕ) ГО ЫО:1) и дтеС130-р02 (5'ТССТТТ-ААТССТСТТСАТАССТТТСТСААТ-3') (8ЕЕ) ГО ЫО:2). Затем во второй реакции ПЦР Е.а1е\\а\ Оп\'йгодеп) добавляли сайты рекомбинации АйВ1 и линкерные последовательности к 5'концу и 3'концу фрамента р85 18Н2, соответственно, используя праймеры д\уС130-р03 (5'-СССАСААСТТТСТАС ААААААССАСССТАССААССАСАТАТАСАТАТСССАСААТАТСАТАСАТТАТАТСААСААТ-3') (8ЕЕ) ГО ЫО:3) и д^С154-р04 (5'-ТССТССТССТССТССТССТССТТТААТССТСТТСАТАССТТТСТС-3') (8ЕЕ) ГО ЫО:16).
Ρ110-а фрагмент также получали из первых цепей кДНК, используя вначале праймеры д\\С154-р01 (5'-АТССССССТССССТССАСТСССССАТ-3') (8ЕЕ) ГО ЫО:17) и д^С154-рО2 (5'-СТАСТСССТСТТС ТСТТТССАСАССТ-3') (8ЕЕ) ГО ЫО:18).
В последующей реакции ПЦР добавляли последовательность линкера и гистидиновую метку к 5'концу и 3'концу фрагмента р 110-й. соответственно, используя праймеры д\у154-р03 (5'-АТТАААССА ССАССАССАССАССАССАСССССТССССТССАС-ТСССССАТССА-3') (8ЕЕ) ГО ЫО:19) и д^С154р06 (5'-АССТСССТСАТССТСАТССТСАТСТССТСССТСССТСТТСТСТТТССАСАССТТСТ-3') (8ЕЕ) ГО ЫО:20).
Слитый белок р85-18Н2/р110-й собирали в третьей реакции ПЦР путем перекрытия линкеров 3'конца фрагмента 18Н2 и 5'конца р 110-й фрагмента, используя вышеуказанный праймер д\уС130-р03 и праймер, содержащий перекрывающуюся гистидиновую метку и последовательности рекомбинации АйВ2 Е,а1е\\а\ (Пригоден) (5'-СССАССАСТТТСТА-СААСАААССТСССТТТААССТСССТСАТС СТСАТССТСАТСТССТСС-3') (8ЕЕ) ГО ЫО:21).
Этот конечный продукт рекомбинировали в реакции ОК Са1е\уау (Ип'йгодеп) в донорный вектор рООЫК201 с получением начального клона ОКР319. Этот клон проверяли секвенированием и использовали в реакции Са1е\уау ЬК для переноса вставки в Са1е\уау-адаптированый вектор рВ1иеВас4.5 (ΙηνίΐΐΌдеп) с получением экспрессирующего вектора ЬК415 бакуловируса.
ΡΙ3Κγ ВУ-950 р110д (Б144аа)-С-конец метка Ηϊχ
Эта конструкция была получена из Кодег АПП;ит ЬаЬ., МКС ЬаЬога1огу оГ Мо1еси1аг Вю1оду, СатЬпйде, υΚ (NονетЬе^, 2003). Описание конструкции дано в: Еасо1йМ. Е. е! а1. (2000) Се11 103, 931-943.
1.3. Экспрессия и очистка белка.
Способы получения рекомбинантого бакуловируса и белка изоформы ΡΙ3Κ.
Плазмиды рВ1ие-Вас4.5 (для изоформ а, Ь и й) или рУЪ1393 (для изоформы д), содержащие различные гены киназы ΡΙ3 котрасфицировали с геномной ДНК Васи1оОо1й АТ (ВО Β^οδс^еηсеδ, РгапкПп Ει-Π^δ, N1, и8А), используя способы, рекомендованные производителем. Затем рекомбинантный бакуловирус, полученный при трансфекции, очищали методом бляшек на клетках насекомых 8Г9 с получением нескольких изолятов, экспрессирующих рекомбинантный белок. Положительные клоны отбирали с помощью вестерн-блотинга с антителами против Ш8 или против изоформы. Для изоформ ΡΙ3Κ альфа- и дельта- проводили второй раз очищение методом бляшек на первом клонированном вирусном материале
- 127 029473
РЕ3К. Амплификацию всех изолятов бакуловируса проводили при низкой множественности заражения (то1) с получением исходного раствора с высоким титром и низким пассажем для получения белка. Бакуловирусы обозначены как Βν1052 (а) и Βν1075 (α), Βν949 (β), Βν1060 (δ) и Βν950 (γ).
Получение белка предусматривает инфицирование (пассаж 3 или менее) суспендированных клеток Тп5 (ТпсНоркыа Νί) или ТшРго (эксперссионные системы, ЬЬС, \Уоой1апй. СА, И8А) в безбелковой среде при то1 2-10 в течение 39-48 ч в 2-х л стеклянной колбе Эрленмейера (110 об. в мин) или волновые биореакторы (22-25 мин). Сначала 10-и л рабочий объем волновых биореакторов высевают клетками с плотностью 3е5 клеток /мл на половину объема (5 л). Реактор качают при 15 об. в мин в течение фазы роста клеток в течение 72 ч, добавляют 5% кислорода, смешанного с воздухом (0,2 л в минуту). Непосредственно перед инфицированием культуры из волнового реактора анализируются на плотность, жизнеспособность и разбавляют приблизительно до 1,5е6 клеток/мл. Добавляют 100-500 мл вируса с высоким титром и низким пассажем через 2-4 ч дополнительного культивирования. Кислород увеличивается до 35% в течение 39-48 ч инфицирования и скорость платформы увеличивают до 25. Во время инфицирования клетки контролируют на анализаторе жизнеспособности клеток ν^11 (Бесктап Соикег, Шс, Ри11епоп, СА, И8А) на жизнеспособность, диаметр и плотность. Считывают различные параметры и данные о метаболитах (рН, насыщение О2, глюкоза и тому подобное) с помощью йота Β^οаηа1уζе^ (йота ЕютейЮ-й Согр., Аа11кат, МА, И8А) каждые 12-18 часов перед сбором клеток. Клетки волнового биореактора собирали в пределах 40 часов после инфицирования. Клетки собирали путем центрифугирования (4°С при 1500 оборотах в минуту), а затем поддерживали на льду во время объединения осадка для лизиса и очистки. Объединенный осадок находился в небольшом количестве холодной среды Грейс без добавок (ингибиторы протеазы \у/о).
Методика очистки ΡΙ3Κ альфа для ИТ8 (ВУ1052)
РОК альфа очищают в три хроматографические стадии: аффинной хроматографией с иммобилизованным на металле полимере Νί 8ерЬато5е (СЕ НеаПЬсате, принадлежащая Сепега1 Е1ес1г1с Сотрапу, Еаийе1й, СТ, И8А), используя гель-фильтрацию на колонке 8ирегйех 200 26/60 (СЕ НеаНЬсате) и конечной стадией катионного обмена на колонке 8Р-КЬ (СЕ НеаПЬсате). Все буферы охлаждали до 4°С, и лизис проводили, охлаждая на льду. Колоночное фракционирование проводили быстро при комнатной температуре.
Как правило, замороженные клетки насекомых лизируют в гипертоническом буфере для лизиса и наносят на приготовленную колонку ГМАС. Полимер промывали 3-5-ю объемами колонки буфером для лизиса, а затем 3-5-ю объемами колонки буфера для промывки, содержащего 45 мМ имидазол, и мишеневый белок затем элюировали буфером, содержащим 250 мМ имидазола. Фракции анализировали на геле 8Э8-РАСЕ с окраской Соота881е, и фракции, содержащие мишеневый белок, объединяли и наносили на заранее приготовленную колонку ОРС. Фракции колонки ОРС анализировали на геле 8Э8-РАСЕ с окраской Соота881е, и фракции, содержащие мишеневый белок, объединяли. Объединенную смесь колонки СРС разбавляли в низкосолевом буфере и наносили на заранее полученную колонку 8Р-КЬ. Колонку промывали низкосолевым буфером до достижения стабильной основной линии оптичекой плотности А280, и элюировали, используя 20 объем колонки с градиентом от 0 мМ №С1 до 500 мМ №С1. Опять фракции колонки 8Р-КЬ анализировали на геле 8Э8-РАСЕ с окраской Соота881е, и фракции, содержащие мишеневый белок, объединяли. Конечные объединенные фракции диализировали в буфере для хранения, содержащем 50% глицерина, и хранили при -20°С. Конечные объединенные фракции анализировали на активность в анализе фосфоинозитолкиназы.
Методика очистки ΡΙ3Κ бета для ИТ8 (ВУ949)
РОК бета очищают в две хроматографические стадии: аффинной хроматографией с иммобилизованным на металле полимере Νί 8ерЬато5е (СЕ НеаПЬсате) и гель-фильтрацией (СРС) на колонке 8ирегйех 200 26/60 (СЕ НеаПЬсате). Все буферы охлаждали до 4°С, и лизис проводили, охлаждая на льду. Колоночное фракционирование проводили быстро при комнатной температуре.
Как правило, замороженные клетки насекомых лизируют в гипертоническом буфере для лизиса и наносят на заранее подготовленную колонку ЕМАС. Полимер промывали 3-5-ю объемами колонки буфером для лизиса, а затем 3-5-ью объемами колонки буфера для промывки, содержащего 45 мМ имидазол, и мишеневый белок затем элюировали буфером, содержащим 250 мМ имидазола. Фракции анализировали на геле 8Э8-РАСЕ с окраской Соота881е, и фракции, содержащие мишеневый белок, объединяли и наносили на заранее приготовленную колонку СРС. Фракции колонки СРС анализировали на геле 808РАСЕ с окраской Соота881е, и фракции, содержащие мишеневый белок, объединяли. Объединенную смесь диализировали в буфере для хранения, содержащем 50% глицерина, и хранили при -20°С. Конечные объединенные фракции анализировали на активность в анализе фосфоинозитолкиназы.
Методика очистки ΡΙ3Κ гамма для ИТ8 (ВУ950)
РОК гамма очищают в две хроматографические стадии: аффинной хроматографией с иммобилизованным на металле полимере Νί 8ерЬато5е (СЕ НеаПЬсате) и гель-фильтрацией (СРС) на колонке 8ирегйех 200 26/60 (СЕ НеаПЬсате). Все буферы охлаждали до 4°С, и лизис проводили, охлаждая на льду. Колоночное фракционирование проводили быстро при комнатной температуре. Как правило, замороженные клетки насекомых лизируют в гипертоническом буфере для лизиса и наносят на заранее подготов- 128 029473
ленную колонку ГМАС. Полимер промывали 3-5-ю объемами колонки буфером для лизиса, а затем 3-5ью объемами колонки буфера для промывки, содержащего 45 мМ имидазол, и мишеневый белок затем элюировали буфером, содержащим 250 мМ имидазола. Фракции анализировали на геле δΟδ-ΡΛΟΗ с окраской Сοοтаδδ^е, и фракции, содержащие мишеневый белок, объединяли и наносили на заранее приготовленную колонку ОРС. Фракции колонки ОРС анализировали на геле δ^δ-ΡАОЕ с окраской ί','οο1Щ^1е. и фракции, содержащие мишеневый белок, объединяли. Объединенную смесь диализировали в буфере для хранения, содержащем 50% глицерина, и хранили при -20°С. Конечные объединенные фракции анализировали на активность в анализе фосфоинозитолкиназы.
Методика очистки ΡΙ3Κ дельта для ИТ8 (ВУ1060)
ΡΡΚ дельта очищают в три хроматографические стадии: аффинной хроматографией с иммобилизованным на металле полимере Νί 8ерНагс^е (ОЕ НеаНЕсаге), гель-фильтрацией, используя колонку 8ирег4ех 200 26/60 (ОЕ НеаИЪсаге) и, наконец, стадией анионного обмена на колонке О-НГ (ОЕ НеаНЬсаге). Все буферы охлаждали до 4°С, и лизис проводили, охлаждая на льду. Колоночное фракционирование проводили быстро при комнатной температуре. Как правило, замороженные клетки насекомых лизируют в гипертоническом буфере для лизиса и наносят на заранее подготовленную колонку 4МАС. Полимер промывали 3-5-ю объемами колонки буфером для лизиса, а затем 3-5-ю объемами колонки буфера для промывки, содержащего 45 мМ имидазол, и мишеневый белок затем элюировали буфером, содержащим 250 мМ имидазола. Фракции анализировали на геле δ^δ-ΡАОЕ с окраской Сοοтаδδ^е, и фракции, содержащие мишеневый белок, объединяли и наносили на заранее приготовленную колонку ОРС. Фракции колонки ОРС анализировали на геле δ^δ-ΡАОЕ с окраской Сοοтаδδ^е, и фракции, содержащие мишеневый белок, объединяли. Объединенную смесь колонки ОРС разбавляли в низкосолевом буфере и наносили на заранее полученную колонку Ц-ОТ. Колонку промывали низкосолевым буфером до достижения стабильной основной линии оптической плотности А280, и элюировали, используя 20 объем колонки с градиентом от 0 мМ №С1 до 500 мМ №С1. Опять фракции колонки Ц-Н? анализировали на геле δΌδБАОЕ с окраской Сοοтаδδ^е, и фракции, содержащие мишеневый белок, объединяли. Конечные объединенные фракции диализировали в буфере для хранения, содержащем 50% глицерина, и хранили при 20°С. Конечные объединенные фракции анализировали на активность в анализе фосфоинозитолкиназы.
Юзо определяли по кривой с четырьмя параметрами с процедурой подгона кривой, которую проходят вместе с "ехсе1 подгоном". Логистическое уравнение с четырьмя параметрами использовали для вычисления значений Κ.'50 (ГОВ8 ΧΕίΐΐ) процентного ингибирования каждого соединения в 8 концентрациях (как правило, 10, 3,0, 1,0, 0,3, 0,1, 0,030, 0,010 и 0,003 мкМ). Альтернативно, значения Ю50 рассчитывали, используя ίά^ΧΕίϊΐ модель 204, которая представляет собой логистическую модель с 4-мя параметрами.
Альтернативно, для анализа увеличения АТФ ингибиторы ΡΡΚ, где указанные ингибиторы обладают ингибиторной активностью в отношении изоформы ΡΡΚ дельта, для проведения теста растворяли в ДМСО и непосредственно распределяли на белом 384-луночном планшете в количестве 0,5 мкл на лунку. Для инициации реакции в каждую лунку добаляли 10 мкл 10 нМ киназы ΡΚ и 5 мкг/мл 1-альфафосфатидилинозитола (Ρ^, а затем 10 мкл 2 мкМ АТФ. Взаимодействие проводили приблизительно до 50% увеличения АТФ, а затем останавливали, добавляя 20 мкл раствора киназа-ОН (Гготеда Εορτ, Ма4ίδοη, И8А). Остановленную реакцию инкубируют в течение 5 минут, и оставшееся АТФ затем определяют люминесценцией. Затем определяют значения ТС50.
Некоторые соединения примеров 1-49 и 51-95 показывают определенный уровень селективности в отношении различных паралогов ΡΡΚ α, β, γ и δ.
Соответственно, некоторые соединения примеров 1-49 и 51-95 показывают определенный уровень селективности в отношении различных паралогов ΡΡΚ α и β.
Некоторые соединения примеров 1'-117' показывают определенный уровень селективности в отношении различных паралогов ΡΡΚ α, β, γ и δ.
Соответственно, некоторые соединения примеров 1'-117' показывают определенный уровень селективности в отношении изформы ΡΡΚ δ, как указано в тестах ίη νίΐτο и ίη νίνο, с селективностью, по меньшей мере 10-и кратной и, более предпочтительно, 30-и кратной в отношении различных паралогов
ΡΡΚ α и β.
Уровень активности, выраженный как Ю50, в этих анализах предпочтительно равен от 1 нМ до 5000 нМ, более предпочтительно, от 1 нМ до приблизительно 1000 нМ.
2. Клеточные анализы.
2.1. Определение ингибирования ΡΡΚ альфа, ΡΡΚ бета и ΡΡΚ дельта в клетках Ка11.
Эффективность соединений в блокировании активности пути ΡΟΚ/ΆΕΐ была показана в клеточных
анализах, используя гомогенный сэндвич фосфо-ЕЬША по методике Ά^ΡНА Ρе^к^η Е1тег для количественного анализа соединения, опосредующего ингибирование фосфорилирование Ак1 8ег473 в клетках Ка11, стабильно трансфицированных активированными вариантами изоформы ΡI3-киназы альфа, бета или дельта.
2.1.1. Условия для клетки и культур клеток.
Клеточные линии Ка11, стабильно экспрессирующие туг-НА-меченный, конститутивно активную
- 129 029473
субъединицу каталитического РЕ3К класса I изоформы р110 α, β или δ человека (добавление сигнала миристилирования на Ν-конец изоформы р110, как было показано, приводит к конститутивной активации РЕ3К и соответствующему распространению сигнала по сигнальному пути, например, фосфорилирования Лк1 на 8ег473) культивировали в среде Игла, модифицированной Дульбекко (ИМЕМ с высоким содержанием глюкозы, ОШСО, номер в каталоге 41956-039), дополненной 10% инактивированной нагреванием фетальной телячьей сывороткой (АШМЕИ, номер в каталоге 2-01^6-^, 1% Ь-глутамина Цпуйгодеп, номер в каталоге 25030-02), 1% пенициллин-стрептомицин (ОЛсо, номер в каталоге 15140-11) и 10 мкг/мл пуромицина (81дта, номе в катологе Р9620).
2.1.2. Обработка клеток соединением и подготовка образцов.
Клетки Ка11-туг-НА-р110 альфа, бета и дельта трипсинизировали и подсчитывали с помощью клеточного счетчика СА8У ТТ (8скагГе 8у81ет ОтЬН, КеиШпдеп Оегтапу). Клетки крыс, экспрессирующие каталитическую субъединицу фосфоинозитид-3-киназа (РЕ3К) туг-НА-р110 альфа, бета и дельта человека, высевали в 384-луночные планшеты с плотностью 7500 (РЕ3К альфа), 6200 (И3К бета) или 4000 (РЕ3К дельта) клеток в 40 мкл полной среды для выращивания (среда игла, модифицированная Дульбекко (ИМЕМ с высоким содержанием глюкозы), дополненная 10% (об./об.) эмбриональной телячьей сывороткой, 1% (об./об.) МЕМ аминокислотами, не являющимися незаменимыми, 10 мМ НЕРЕ8, 2 мМ Ьглутамином, 10 мкг/мл пуромицином и 1% (об./об.) пенициллин/стрептомицин), и инкубировали при влажности 37%С/5%СО2/95% в течение 48-72 часов перед обработкой их тестируемыми соединениями.
Соединения получали в виде 10 мМ исходных растворов в 90% ДМСО (Мегск, #8.02912.2500) в 384-луночных планшетах (Огешег РР-т1сгор1а1е, #781201) с 3-кратными серийными разведениями в 90% ДМСО (Мегск, #8.02912.2500) в 8-и концентрациях, начиная с 10 мМ. Соединения разбавляли в 384луночных планшетах с получением 8-кратных серийных разведений для 40 тестируемых, а также для 4 ссылочных соединений плюс 16 высоких контролей и 16 низких (инибированных) контролей. Планшеты с заранее проведенным разведением получали путем распределения 250 нл каждого раствора соединения в 384-луночных полипропиленовых планшетах, используя нанолитровый дозатор НитттдетеИ. Соединения затем разводили путем добавления 49,75 мкл полной среды для выращивания. 10 мкл заранее разведенного раствора соединения переносили в планшет с клетками, используя 384-луночную пипетку, полученного с конечным объемом 50 мкл и концентрацией ДМСО, равной 0,11%, в том числе для контрольных клеток (высокий и низкий контроль). Разведение соединения давало 8 конечных концентрации, указанных выше, 10, 3,333, 1,111, 0,370, 0,123, 0,041, 0,014 и 0,005 мкМ.
2.1.3. Ак1 1/2 (8473) фосфорилирование, опосредованное фосфоинозитид-3 киназой (ТЮК), в клетках крыс-1.
Для детекции р-Ак1(8ег473) использовали аналитический набор 8игеРне® р-Ак1 1/2 (8ег473) (РегкЕ пЕ1тег, И.8.А). Необработанные клетки использовали в качестве низких контролей, клетки, стимулированные в отсутствии соединений, использовали в качестве высших контролей. После инкубирования в течение 1 часа соединениями при влажности 37%С/5%СО2/95% клетки лизировали добавлением 20 мкл буфера для лизиса для детекции А1рЬа8сгееп® 8игеРне®, насыщенным 0,72% В8А. Лизаты клеток либо использовали незамедлительно, либо хранили замороженными (в герметичных планшетах) при -20°С перед использованием.
Пять мкл лизата клеток переносили в 384-луночные планшеты с малым объемом Ргох1р1а1е8 для детекции, используя 384-луночную пипетку. В соответствии с протоколом производителя добавляли реагенты А1рка8сгееп® 8игеРне®. Сначала добавляли 5 мкл смеси реакционного буфера плюс буфер для активации, содержащей акцепторные бусы А1рка8сгееп®, планшет герметизировали и инкубировали на шейкере для плашек в течение 2 ч при комнатной температуре. Во-вторых, добавляли 2 мкл разведенного буфера, содержащего донорные бусы А1рка8сгееп®, и планшет инкубировали на шейкере для плашек, как указано выше, в течение еще 2 ч в темноте при комнатной температуре. Затем испускание света измеряли, используя ридер Епуыоп Кеайег (Регкш Е1тег). Разницу между высоким и низким контролями принимали за 100%, а эффекты соединений выражали как процент ингибирования. Значения Кб, определяли по кривым "доза-ответ" путем графической экстраполяции.
2.2. Определение ТЬК9-индуцированного ЕЬ-6 в спленоцитах мыши.
2.2.1. Получение суспензии единичных клеток из селезенки мыши.
Селезенки иссекали у мышей С57ВЬ/6 сразу после эвтаназии. Избыток жира в селезенке отрезали перед пропусканием селезенки через клеточный фильтр размером 0,4 мкМ, используя поршень от 5 млового шприца. Получали суспензию единичных клеток и объем доводили до 15 мл в 50 мл пробирки Ра1соп, используя холодный РВ8. Клетки центрифугировали при 1500 об. в мин в течение 5 мин при 4°С градусов перед удалением супернатанта и повторным суспендированием в 5 мл буфера для лизиса эритроцитов в расчете на селезенку и инкубированием в течение 5 мин при комнатной температуре. К клеткам добавляли ледяной раствор РВ8 (30 мл) перед центрифугированием при 1500 об. в минуту в течение 5 мин при 4°С. Супернатант удаляли, и клетки промывали дважды 40 мл культуральной средой для селезенки мыши (М8СМ). М8СМ состояла из КРМI с добавлением 100 единиц/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина, 1хнесущественных аминокислот, 1 мМ пирувата натрия, 0,05 мМ β-меркаптоэтанола и
- 130 029473
10% инактивированной нагреванием фетальной бычьей сыворотки (РВ8). Клетки ресуспендировали в 1020 мл М8СМ и подсчитывали, используя счетчик для клеток Сοиηΐеδδ. Из одной селезенки мыши С57ВЬ/6 получали приблизительно 60х106 спленоцитов.
2.2.2. Стимулирование спленоцитов мыши С57ВЬ/6 и обработка конкретным ингибитором.
Спленоциты высевали при конечной плотности 2х105 клетки/лунка в объеме 100 мкл в 96-луночных
планшетах с плоским дном и инкубировали во влажной атмосфере инкубатора при 37°С в течение 2-4 часов. После этого соединения для тестирования распределяли, используя автоматизированный аппарат для жидкой обработки, используя предварительно приготовленные исходные планшеты с соединением. Исходные планшеты с соединением состояли из соединений (в 90%/10% ДМСО/66Н2О), выстроенных из 9 точек, используя 3-кратные разведения. С помощью аппарата для жидкой обработки распределяли 1 мкл каждого разведения из ранее полученной планшеты с исходным соединением в соответствующую заранее определенную точку 96-луночного планшета. Окончательная конечная концентрация соединений в культуре клеток составляла 10 мкМ. Конечная концентрация ДМСО в культурах клеток составляла 0,5%. Клетки инкубировали с соединениями в течение 1 ч, а затем добавляли лиганд ТЕК лиганд. Затем добавляли 10х ЕС8о концентрацию СрО1826 в объеме 20 мкл (с конечным объемом культуры 200 мкл), после чего культуры инкубировали в течение ночи во влажной атмосфере инкубатора при 37°С.
2.2.3. Определение интерлейкина-6 с помощью ΕΕΙ8Α.
После культивирования в течение ночи клетки переносили в 96-луночные планшеты с У-образным дном и центрифугировали при 2000 об./мин в течение 5 мин при комнатной температуре. Затем 150 мкл каждой культуры супернатанта переносили в 96-луночные плоскодоннные планшеты и уровни ΙΕ-6 измеряли, используя коммерчески доступный набор для ΙΕ-6 сэндвич-Ε^I8Α (системы Κ&Ό). Коротко, планшеты покрывали в течение ночи с помощью захватывающих антител перед блокированием в течение 1 ч с помощью ΡВ8/0,1% В8Α. Образцы и стандарты добавляли в объеме 50 мкл, и планшет инкубировали в течение 2 ч при комнатной температуре. После удаления стандартов/образцов планшет промывали с помощью ΡВ 8/0,05% Т\уееп перед добавлением 50 мкл биотинилированного антитела для обнаружения, после чего планшеты инкубировали в течение 2 ч при комнатной температуре, перемешивая. Планшеты промывали еще раз, используя ΡВ8/0,05% Т\уееп. перед добавлением 50 мкл стрептавидинпероксидазы хрена на лунку в течение 20 мин. После дополнительной промывки планшеты в каждую лунку добавляли 50 мкл субстрата ТМВ, и планшеты инкубировали в течение 20 мин перед добавлением 25 мкл/лунка останавливающего раствора. Уровни ΙΕ-6 измеряли, используя планшет-ридер 8рес1гаМах 190 (450 нм) и анализировали с помощью програмного обеспечения 8ОРТтах Ργο и Огар№а6 Ρπδΐη.
2.3. Определение ТЬК9-индуцированного ΙΡΝ-альфа в спленоцитах мыши.
2.3.1. Получение суспензии единичных клеток из селезенки мыши.
Селезенки иссекали у мышей 129/8ν сразу после эвтаназии. Избыток жира в селезенке отрезали перед пропусканием селезенки через клеточный фильтр размером 0,4 мкМ, используя поршень от 5 млового шприца. Получали суспензию единичных клеток и объем доводили до 15 мл в 50 мл пробирки Ра1топ, используя холодный ΡВ8. Клетки центрифугировали при 1500 об. в мин в течение 5 мин при 4°С градусах перед удалением супернатанта и повторным суспендированием в 5 мл буфера для лизиса эритроцитов в расчете на селезенку и инкубированием в течение 5 мин при комнатной температуре. К клеткам добавляли ледяной раствор ΡВ8 (30 мл) перед центрифугированием при 1500 об. в минуту в течение 5 мин при 4°С. Супернатант удаляли, и клетки промывали дважды 40 мл культуральной средой для селезенки мыши (М8СМ). М8СМ состояла из КΡМI с добавлением 100 единиц/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина, 1хнесущественных аминокислот, 1 мМ пирувата натрия, 0,05 мМ β-меркаптоэтанола и 10% инактивированной нагреванием фетальной бычьей сыворотки (РВ8). Клетки ресуспендировали в 1020 мл М8СМ и подсчитывали, используя счетчик для клеток С^иПев®. Из одной селезенки мыши С57ВЬ/6 получали приблизительно 60х106 спленоцитов.
2.3.2. Стимулирование спленоцитов мыши 129/8ν и обработка конкретным ингибитором.
Спленоциты высевали при конечной плотности 2х105 клетки/лунка в объеме 100 мкл в 96-луночных
планшетах с плоским днем и инкубировали во влажной атмосфере инкубатора при 37°С в течение 2-4 ч. После этого соединения для тестирования распределяли, используя автоматизированный аппарат для жидкой обработки, используя предварительно приготовленные исходные планшеты с соединением. Исходные планшеты с соединением состояли из соединений (в 90%/10% ДМСО/66Н2О), выстроенных из 9 точек, используя 3-кратные разведения. С помощью аппарата для жидкой обработки распределяли 1 мкл каждого разведения из ранее полученной планшеты с исходным соединением в соответствующую заранее определенную точку 96-луночного планшета. Окончательная конечная концентрация соединений в культуре клеток составляла 10 мкМ. Конечная концентрация ДМСО в культурах клеток составляла 0,5%. Клетки инкубировали с соединениями в течение 1 ч, а затем добавляли лиганд ТЕК лиганд. Затем добавляли 10х ЕС80 концентрацию СрО1585 в объеме 20 мкл (с конечным объемом культуры 200 мкл), после чего культуры инкубировали в течение ночи во влажной атмосфере инкубатора при 37°С.
2.3.3. Определение ΙΡΝ-альфа с помощью ΕΜ8Α.
После культивирования в течение ночи клетки переносили в 96-луночные планшеты с У-образным
- 131 029473
дном и центрифугировали при 2000 об./мин в течение 5 мин при комнатной температуре. Затем 150 мкл каждой культуры супернатанта переносили в 96-луночные плоскодоннные планшеты и уровни ГБ-6 измеряли, используя коммерчески доступный набор для ΙΡΝ-альфа сэндвич-ЕЫ8А (РВЬ 1п1егГегоп 8оигсе). Коротко, заранее покрытые планшеты инкубировали 1 час с 100 мкл стандартов/образцов и 50 мкл раствора антитела для определения при аккуратном встряхивании перед инкубированием в течение 24 часов при 4°С без встряхивания. Планшеты затем промывали с помощью РВ8/0,05% Тетееп перед добавлением 100 мкл стрептавидин-пероксидазы хрена на лунку в течение 2 ч при комнатной температуры при аккуратном встряхивании. После новой стадии промывки в каждую лунку добавляли 100 мкл субстрата ТМВ, и планшеты инкубировали в течение 15 мин (в темноте без встряхивания) перед добавлением 100 мкл/лунка останавливающего раствора. Уровни ΙΡΝ-альфа измеряли в течение 5 мин, используя планшет-ридер 8рес1гаМах 190 (450 нм) и анализировали с помощью програмного обеспечения 8ОРТтах Рго и ОгарНРай Рпхт.
2.4. Определение ТЬК9-индуцированных ΙΡΝ альфа в мононуклеарных клетках периферической крови (РВМС) человека и выделение плазмацитоидных дендритных клеток (рЭС) 2.4.1 Получение РВМС из свежей крови человека Кровь человека (около 75 мл) собирали в 10 пробирок 8-Мопоуейе, содержащих гепарин (8-Мопоуе((е 7,5 мл ΝΉ гепарин 16 Ιυ/мл крови; 8(аг5(ей(). Пробирки Ьеисокер™ (30 мл, #227290; Огешег Вю-опе) получали путем добавления 15 мл среды для выделения лимфоцитов Ь8М1077™ на пробирку (# П5-004; РАА ЬаЬогаЮпек) и центрифугировали в течение 30 с при 1000 об/мин. Около 25 мл крови переносили в пробирки Ьеисокер™, а затем разбавляли равными частями РВ8 (без Са2+/Мд2+; #14190-094). Образцы центрифугировали при 800 об/мин в течение 20 мин при 22°С с использованием центрифуги ЕррепйогГ 5810К без торможения. Слой РВМС осторожно удаляли с поверхности среды для разделения плазмы и переносили в 50 мл-овую чистую пробирку. Клетки промывали один раз, добавляя РВ8 (до 45 мл) и центрифугировали (1400 об./мин, 10 мин при 22°С) при торможении (устанавливали на скорости 9), используя ЕррепйогГ 5810К. Осажденные клетки осторожно ресуспендировали в среде (КРМ1 1640+О1и1аМаХ-1, 0,05 мМ 2-меркаптоэтанола, 10 мМ НЕРЕ8 и 5% об/об РС8), и образцы объединяли. Компоненты среды 2-меркаптоэтанол (# 31350-010, 50 мМ), НЕРЕ8 (# 15630-056, 1М) и КРМ1 1640 (1х)+О1йаМаХ-1 (# 61870-010) получали от СнЬсо. РС8 (# 2-01Ρ36-1) получали от АМ1МЕЭ. РВМС подсчитывали с помощью счетчика для клеток СоипЮ88®ЛиЮтаЮй (образец заранее разводили 1:10 в среде перед добавлением равного объема (10 мкл) трипанового синего). Клетки разводили до 4х106 клеток/мл и высевали в 384-луночные планшеты (# 353962; Вес(оп Эюкшзоп АО) с получением конечного объема 25 мкл (т.е. 1х105 клеток/лунка).
2.4.2. Выделение свежих рЭС человека из Вийу СоаН/РВМС.
РВМС человека получали, используя Внйу Соа(5 в качестве исходного материала от здоровых доноров (около 50 мл, полученные от В1и(5репйе/еп(шт 8КК Ва§е1) и обрабатывали, как указано выше. Свежие РВМС ресуспендировали и разводили в буфере КоЬо8ер™ (РВ8, содержащий 2% об/об РВ8, 1 мМ ЭДТА (ОЮсо #15575-038) с получением конечной концентрации 50х106 РВМС/мл. рЭС человека (негативный отбор) выделяли, используя набор для обогащения плазмацитоидных ОС (8(етСе11, # 19062), используя автоматизированную станцию КоЬ8ер™, как описано в соответствии с протоколами производителя. Как правило, выход рЭС составлял приблизительно 0,1% общего количества РВМС и его чистота составляла >90%. Выделенные рЭС разводили до 4х105 клеток/мл и высевали в 384-луночные планшеты (#353962; ВесЮп Эюкшзоп АО) с получением конечного объема 25 мкл (т.е. 1х104 клеток/лунка). Для стимуляции использовали малярийный ядерный экстракт (см. ниже). рЭС высевали при конечной концентрации 5х104 клеток/лунка.
2.4.3. Получение ядерного экстракта из тропического плазмодия.
Получение ядерного экстракта малярийного плазмодия проводили в соответствии с Оо\\йа е( а1. [Оо^йа е( а1. "ТНе ЖОеоюте (НПопе-ОЯА Сотр1ех) Ιδ (Не ТЬК9-8рес1йс 1ттипо8Йти1аЮгу Сотропеп( оГ Р1а8тойшт ГаЮрагит ТНа( АсНуаЮх ЭСх", РЬо8 ΘΝΞ 2011]. Коротко, паразиты малярийного плазмодия 3Ό7 культивировали в эритроцитах человека с гематокритом 2%. Когда паразит был в конце стадии трофозоита и стадии шизонта, зараженные эритроциты (ШВС) собирали центрифугированием, и осадок ресуспендировали в 20 объемах 0,1% сапонина (мл/об) в РВ8, рН 7,2. После повторного суспендирования смесь инкубировали на льду в течение 10 мин и центрифугировали при 2500 д при 4°С в течение 15 мин. Осадок ресуспендировали в указанном выше растворе, инкубировали на льду в течение 10 мин и центрифугировали при 2500 об. /мин при 4°С в течение 15 мин. Полученный таким образом осадок паразита промывали 3 раза холодным РВ8, рН 7,2, путем центрифугирования. Каждый раз использовали 35 мл холодного РВ8. Осадок, полученный после последнего центрифугирования, суспендировали в 10 объемах буфера для лизиса (20 мМ НЕРЕ8, рН 7,5, 10 мМ КС1, 1 мМ БЭТА, 1 мМ дитиотреитола, 1 мМ фенилметилсульфонилфторида (РМ8Р) и 1% Тгйоп Х-100) и инкубировали на льду в течение 5 мин. Суспензию центрифугировали при 5000 об./мин при 4°С в течение 10 мин и ядерный материал промывали три раза буфером для лизиса для удаления компонентов мембраны. Ядерный материал ресуспендировали в РВ8, рН 7,2. Нерастворившееся вещество затем солюбилизировали, используя водяную баню с ультразвуком.
- 132 029473
2.4.4. Стимулирование РВМС или рИС и обработка специфическим ингибитором.
Соединения предварительно разводили в 100% об/об ДМСО (# 41б40-100 мл; δ^дта-Α1ά^^сЬ), а затем переносили в среду (с достижением конечной концентрации ДМСО, равной 0,25%). Клетки обрабатывали соответствующим образом разведенным соединением (5 мкл) или контролем с носителем (5 мкл) и инкубировали в течение 30 мин при 37°С во влажной атмосфере инкубатора в воздухе с 5% (об/об) СО2. Клетки стимулировали СрС221б (0,3 мкМ; #Йг1-ЬоДпа; 1пукодеп), экстрактом ядер малярии (2,5 мкг/мл; см. выше получение) или контрольным носителем (10 мкл/лунку) и инкубировали в течение 20 часов. Планшеты быстро центрифугировали (200хд в течение 2 мин при 22°С) и образцы супернатанта (30 мкл) удаляли для количественного определения уровней ΙΡΝα.
2.4.5. Количественная оценка ΙΡΝα с использованием методики А1рЬаЫ8а.
Для количественного определения ΙΡΝ альфа использовли набор для интерферона человека А1рЬаЬКА (# АЬ2б4Р) от Ρе^к^ηΕ1те^. Смесь антител, содержащую анти-ΙΡΝα акцепторные бусы (конечная концентрация 5 мкг/мл) и биотинилированного антитела против ΙΡΝα (конечная концентрация 0,5 нМ конечная), была свежеприготовлена и распределена (5 мкл) в 384-луночном Орикк-иех'1™ (# б007299; Ρе^к^ηΕ1те^). Делали разбавления известных стандартов ΙΡΝα (ΙΡΝα В (2Ь) человека) и добавляли вместе с клеточными супернатантами (5 мкл) в планшеты выше. Планшеты центрифугировали (импульсно при 200 об./мин), покрывали липкой герметизирующей пленкой, перемешивали на Уог1е\ и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре в темноте. Получали покрытые стрептавидином бусы-доноры (конечная концентрация 20 мкг/мл) и в каждую лунку добавляли (5 мкл) в темноте (светочувствительная смесь). Планшеты инкубировали 30 мин при комнатной температуре (планшеты не должны центрифугироваться или покрываться). После инкубирования планшеты считывали на мультипланшетном ридере Епу181оп™, оснащенном опцией АРГНА. используя собственные "А1р1кШсгееп стандартные настройки" приборы (например, общее время измерения: 550 мс, время возбуждения лазера б80 нм: 180 мс, зеркало: Эб40 в качестве эмиссионного фильтра: М570те, центральная длина волны 570 нм, ширина полосы 100 нм, коэффициент пропускания 75%). Данные собирали для анализа и количественной оценки уровней ΙΡΝα.
2.4.6. Оценка и анализ данных.
Данные анализировали с помощью Е\се1 ХЬ 4.0 (Мщгокой) с надстройкой ХЬй! (I^Βδ; версия 4.3.2). Определяли конкретные концентрации ΙΡΝα, а затем экстраполировали на стандартные кривые, используя ΙΡΝα В человека (2Ь). Индивидуальные значения КУ, соединений определяли с помощью нелинейной регрессии после подгонки кривых в отношении экспериментальных данных.
- 133 029473
Биологические данные
Ферментный анализ
Пример ΡΙ3Κ альфа (мкМ) ΡΙ3Κ дельта (мкМ)
1 2,0378 0, 015
2 3,391 0, 009
3 2,386 0, 015
4 1,764 0, 033
5 0,749 0, 020
6 0, 987 0, 044
7 1,973 0, 013
8 2,494 0, 027
9 2,906 0, 009
10 0, 668 0, 009
11 1,199 0, 011
12 0, 952 0, 012
13 1,802 0, 013
14 1,832 0, 013
15 1, 631 0, 014
16 1, 684 0, 016
17 7, 678 0, 017
18 0, 871 0, 033
19 3, 056 0, 033
20 1,839 0, 048
21 0,320 0, 008
22 0,580 0, 008
23 0, 129 0, 010
24 0,374 0, 009
25 0, 820 0, 026
26 0,368 0, 021
27 3,410 0, 040
28 1,214 0, 004
29 2,585 0, 011
30 2,831 0, 040
31 3, 024 0, 021
32 2,036 0, 023
33 1,967 0, 018
34 1, 648 0, 014
35 4,232 0, 049
36 4,103 0, 025
37 7,021 0, 031
38 3,306 0, 016
39 0,434 0, 009
40 0,260 0, 006
- 134 029473
41 0,515 0, 014
42 0,863 0, 013
43 0,728 0, 016
44 1,189 0, 016
45 0,860 0, 018
46 0,803 0, 027
47 0, 656 0, 025
48 0,518 0, 029
49 0,388 0, 034
51 0,912 0, 044
52 1,024 0, 046
53 0,504 0, 006
54 0,384 0, 005
55 0, 661 0, 005
56 0,860 0, 013
57 0,590 0, 025
58 3,060 0, 030
59 9, 100 0, 028
60 3,333 0, 045
61 0,589 0, 012
62 0,489 0, 023
63 0,791 0, 051
64 2,331 0, 032
65 0,738 0, 023
66 1,280 0, 014
67 0,262 0, 023
68 0,043 0, 007
69 0,056 0, 003
70 0, 121 0, 006
71 0,057 0, 003
72 0,093 0, 004
73 0,054 0, 004
74 0, 113 0, 004
75 0,118 0, 004
76 0, 106 0, 007
77 1,290 0, 044
78 0,384 0, 012
79 0,781 0, 017
80 0,430 0, 016
81 0, 651 0, 02
82 0, 066 0, 003
83 0,432 0, 017
84 0, 058 0, 009
85 0,569 0, 021
86 1,330 0, 020
87 0,452 0, 012
88 1,336 0, 034
89 1,189 0, 029
90 1,991 0, 038
91 0, 924 0, 011
92 2,545 0, 009
93 0, 872 0, 024
94 1,714 0, 021
95 0,757 0, 053
- 135 029473
Пример ΡΙ3Κ альфа (мкМ) ΡΙ3Κ дельта (мкМ)
1' 0,294 0,0072
2' 0, 779 0,0095
3' 0, 062 < 0,003
4' 1,1585 0,009
5' 1,3215 0,0085
6' 0, 589 0,008625
7' 0, 712 0,006
8' 0,268 0,0095
9' 1,398 0,01004
10' >9,1 0,027
11' 1,0735 0,028
12' 0,4175 0,02025
13' 1,328 0,034
14' 15' 16' 17' 18' 19' 20' 21' 22' 23' 24' 25' 26' 27' 28' 29' 30' 31' 32' 33' 34' 35' 36' 37' 38' 39' 40' 41' 42' 43' 0,0785 1,2315 0, 695 0,3525 1,2855 0, 678 2,483 2,2676667 0,7895 0, 931 0,4 0,1835 0,6136 0,4035 0,418 0, 075 0,3866667 0, 631 0, 174 0, 639 0,488 0,262 0,21725 0,426 0,3725 0,77 0,2695 0,7075 0, 152 0,3745 < 0,003 0, 017 0,0125 0,006375 0,0421429 0,0115 0, 024 0,0145 0,0115 0,0125 0, 015 0, 007 0,01775 0,0185 0, 009 0, 003 0,0066667 0, 006 0, 007 0, 012 0,0225 0, 007 0,0045 0, 004 0, 007 0,0115 0, 003 0,0205 0, 006 0, 011
44' 0,2825 <0,003
45' 1,1975 0,0365
46' 5,295 0,0235
47' >9, 1 0, 027
48' 3,7995 0,0475
- 136 029473
49' 8,9455 0,0355
50' 0,319 0,0105
51' 0,1175 0,0035
52' 0, 189 0,0075
53' 0,472 0, 007
54' 0, 069 0, 003
55' 0,19275 0,00925
56' 0,5425 0, 011
57' 0,4615 0,02175
58' 0,6455 0,0055
59' 1,7095 0,0315
60' 0, 657 0,0195
61' 0,39 0, 003
62' 1,151 0, 007
63' 0,505 0, 006
64' 0,583 0, 011
65' 0, 64 0, 01
66' 0,763 0,0095
61' 0,306 0, 007
68' 0, 097 0, 003
69' 0, 88 0, 008
10' 1,026 0, 03
11' 0,5505 0, 008
12' 0,0695 0, 003
13' 0,0605 <0,003
74' 0,1496667 0, 005
75' 0,3195 0, 012
16' 0,5775 0,0235
11’ 0,573 0, 014
18' 0, 123 0,0045
19' 0,3595 0, 01
80’ 0,717 0,0105
81' 0,401 0,003625
82' 1,334 0,0215
83' 0, 904 0, 021
- 137 029473
84' 0,5585 0,0095
85' 0,793 0, 007
86' 0,3805 0,0155
87' 0, 126 <0,003
88' 0, 1 0,002675
89' 0, 099 0, 004
90' 0, 181 0,00575
91' 0,1465 <0,003
92' 0,1955 0,00375
93' 0, 12 <0,003
94' 0, 174 0, 006
95' 0,281 0, 009
96' 0,316 0, 006
97' 0,463 0, 023
98' 0,1015 0,0035
99' 0,237 0,0045
100' 0, 188 0, 005
101' 1,271 0, 016
102' 0,77 0, 011
103' 2,121 0, 008
104' 3,293 0, 038
105' 0,72 0, 007
106' 0,44 0, 005
107' 0,716 0, 005
108' 0, 158 0, 007
109' 0,435 0, 014
110' 0,366 0, 008
111' 1,357 0, 01
112' 2,316 0, 049
113' 0, 979 0, 018
114' 0, 071 0, 003
115' 0, 888 0,0425
116' 0,306 0, 014
117' 0,238 0, 009
Клеточные анализы
Ингибирование Р13К дельта в клетках КаН-шуг-НА-рП 0 дельта
Пример Клетка Р13К6/1С50 [мкмоль 1-1]
1 0, 153
5 0, 455
20 0,254
28 0,268
65 0, 191
67 0, 047
68 0, 053
71 0, 035
81 0,246
82 0, 116
Ингибирование ТЬК9-индуцированной продукции цитокина в спленоцитах мыши
Пример ТЬК9-лиганд индуцированные 1Ь-б в спленоцитах мыши ТЪК9-лиганд индуцированные ΙΕΝα в спленоцитах мыши
1Сьо [микроМ] 1С5о [микроМ]
1 0,327 (п=2) н. о.
67 0,096 (п=2) >2,220 (п=2)
- 138 029473
Ингибирование ТЬК9-индуцированной продукции цитокина в
Пример Клетка Р13К0/1С50 [мкмоль 1-1]
1' 0,02735
2' 0,0275
7' 0, 083
12' 0,0535
44' 0, 037
75' 0, 014
81' 0,0195
91' 0,0323333
110' 0, 103
117' 0, 043
РВМС и р!)С человека
Пример ТЪЕ9-лиганд индуцированные ΙΓΝα в РВМС человека ТЬК9-лиганд индуцированные ΙΓΝα в рОС человека
1С5о [мкмоль 1-1] 1С5о [мкмоль 1-1]
1 0,211 (п=3) 0,050 (п=4)
67 0,109 (п=3) 0,033 (п=4)
Ингибирование продукции цитокинов, индуцированной ядерным экстрактом Р.ГаЮрагит,
в о!)С человека
Пример Условия (выделенные рРС человека) Уровень ΙΓΝα [пг/мл] % инг. ΙΓΝα ядерным экстрактом
носитель контроля 336
только ядерный экстракт 5301
67 1 мкМ 1483 77
67 0, 1 мкМ 2110 64
67 0,01 мкМ 4084 25
- 139 029473
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> ΝοναΓ+ίδ АО
<120> ПРИМЕНЕНИЕ ИНГИБИТОРОВ АКТИВНОСТИ ИЛИ ФУНКЦИИ ΡΙ3Κ
<130> РАТ054921Р1
<160> 21
<170> РаЕепЕТп νθΓΞίοη 3.3
<210> 1
<211> 28
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 1
сдадааЕаЕд аЕадаЕЕаЕа ЕдаадааЕ 28
<210> 2
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 2
ЕддЕЕЕааЕд сЕдЕЕсаЕас дЕЕЕдЕсааЕ 30
<210> 3
<211> 76
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 3
дддасаадЕЕ ЕдЕасааааа адсаддсЕас дааддадаЕа ЕасаЕаЕдсд адааЕаЕдаЕ 60
адаЕЕаЕаЕд аадааЕ 76
<210> 4
<211> 66
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 4
ЕассаЕааЕЕ ссассассас сассддаааЕ ЕсссссЕддЕ ЕЕааЕдсЕдЕ ЕсаЕасдЕЕЕ 60
дЕсааЕ
66
- 140 029473
<210> 5
<211> 26
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 5
с!ад!ддаа! д!!!ас!асс ааа!дд 26
<210> 6
<211> 26
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 6
д!!саа!дса !дс!д!!!аа !!д!д! 26
<210> 7
<211> 63
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 7
дддддаа!!! ссдд+дд+дд ЁддЬддаа!! а!дд!ас!ад !ддаа!д!!! ас+ассааа! 60
дда 63
<210> 8
<211> 56
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 8
адс+ссд+да !дд!да!дд! да!д!дс!сс д!!саа!дса !дс!д!!!аа !!д!д! 56
<210> 9
<211> 61
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 9
дддассас!! Ьд+асаадаа адс+ддд!!! аадс+ссд+д а!дд!да!дд !да!д!дс!с 60
- 141 029473
61
<210> 10
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 10
дсЕадсаЕдс дадааЕаЕда ЕадаЕЕаЕаЕ даадааЕаЕа сс 42
<210> 11
<211> 45
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 11
дссЕссасса ссЕссдссЕд дЕЕЕааЕдсЕ дЕЕсаЕасдЕ ЕЕдЕс 45
<210> 12
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 12
ЕасЕадЕссд ссЕссассас сЕссдссЕсс ассассЕссд сс 42
<210> 13
<211> 54
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 13
асЕдаадсаЕ ссЕссЕссЕс сЕссЕссЕдд ЕЕЕааЕдсЕд ЕЕсаЕасдЕЕ ЕдЕс 54
<210> 14
<211> 57
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 14
адсЕссдЕда ЕддЕдаЕддЕ даЕдЕдсЕсс адаЕсЕдЕад ЕсЕЕЕссдаа сЕдЕдЕд 57
- 142 029473
<210> 15
<211> 61
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 15
дддассасЪЪ ЪдЪасаадаа с адс5ддд555 аадсЬссдЬд а5дд5да5дд 5да5д5дс5с 60 61
<210> 16
<211> 45
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 16
5сс5сс5сс5 сс5сс5сс5д д555аа5дс5 д55са5асд5 55д5с 45
<210> 17
<211> 26
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 17
аЬдсссссЬд ддд+ддасЬд ссссаЬ 26
<210> 18
<211> 26
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 18
с5ас5дсс5д 55д5с555дд асасдЬ 26
<210> 19
<211> 53
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 19
аЬЬааассад даддаддадд аддаддассс сс5дддд5дд асЬдссссаЬ дда 53
<210> 20
- 143 029473
<211> 56
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 20
адсПссдПда ПддПдаПддП даПдПдсПсс сПдссПдППд ПсПППддаса сдППдП 56
<210> 21
<211> 61
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Праймер
<400> 21
дддассасПП ПдПасаадаа адсПдддППП аадсПссдПд аПддПдаПдд ПдаПдПдсПс 60
с 61

Claims (11)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Применение ингибитора РЕК, где указанный ингибитор обладает ингибиторной активностью в отношении изоформы РЕК дельта, для лечения иммунопатологии у индивидуума, страдающего заболеванием или нарушением, выбранным из острой и церебральной малярии, посредством функционального ингибирования ТЬК9 инфицированного индивидуума, где ингибитор РВК выбран из тетрагидропиридопиримидинового соединения формулы (I), и/или его таутомеров, и/или Ν-оксидов, и/или фармацевтически приемлемых солей:
    где Υ выбран из О или ΝΚ3;
    Κ1 выбран из фенила, пиридила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, 1,2,3-триазинила, 1,2,4триазинила, 1,3,5-триазинила или -С(О)-К4, где К4 выбран из Сх-С8-алкила, галоген-Сх-С8-алкила, гидрокси-С1-С8-алкила, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, С1-С8-алкилсульфонил-С1-С8-алкила, гетероциклила, гетероциклилокси, гетероциклил-Сх-С8-алкила, С3-Сх2-циклоалкила, С3-Сх2-циклоалкил-С1-С8-алкила, гетероарила, гетероарилокси, гетероарил-СгС8-алкила, гидрокси, СГС8-алкокси, амино, №СгС8-алкиламино или ^№ди-С3-С8-алкиламино,
    где "С1-С8-алкил" в №С3-С8-алкиламино и Ν,Ν-ди-СгС^алкиламино может быть не замещен или замещен галогеном, гидрокси или С3-С4-алкокси;
    "С3-С12-циклоалкил" в С3-С32-циклоалкиле и С3-С32-циклоалкил-С1-С8-алкиле может быть не замещен или замещен 1-5 заместителями, независимо выбранными из оксо, галогена, С3-С8-алкила, галогенСгС8-алкила, гидрокси-СгС8-алкила, гидроксила, СгС8-алкокси, С1-С8-алкокси-СгС8-алкила, амино, ΝСх-С8-алкиламино, Ν,Ν-ди-Сх-С^алкиламино, Сх-С8-алкилкарбонила, галоген-Сх-С8-алкилкарбонила, гидрокси-С3-С8-алкилкарбонила или С3-С8-алкокси-С1-С8-алкилкарбонила;
    " гетероциклил" выбран из оксиранила, азиридинила, оксетанила, тиетанила, ацетитинила, пирролидинила, тетрагидрофуранила, тетрагидротиофенила, 2,3-дигидрофуранила, 2,5-дигидрофуранила, 2,3дигидротиофенила, 1-пирролинила, 2-пирролинила, 3-пирролинила, тетрагидропиранила, пиперидинила, тетрагидротиопиранила, морфолинила, тиоморфолинила, пиперазинила, азепанила, тиепанила или оксепанила; каждый из которых может быть не замещен или замещен 1-5 заместителями, независимо выбранными из оксо, галогена, СгС8-алкила, галоген-СгС8-алкила, гидрокси-СгС8-алкила, гидроксила, Сг С8-алкокси, С3-С8-алкокси-С1-С8-алкила, амино, №С3-С8-алкиламино, ^№ди-С3-С8-алкиламино, С3-С8алкилкарбонила, галоген-С3-С8-алкилкарбонила, гидрокси-С3-С8-алкилкарбонила или С3-С8-алкокси-С1- 144 029473
    С8-алкилкарбонила;
    "гетероциклил" может быть присоединен к гетероатому или атому углерода и гетероатомы N и/или 8 также могут быть необязательно окислены до различных степеней окисления;
    "гетероарил" выбран из фуранила, тиофенила, пирролила, имидазолила, пиразолила, тиазолила, изотиазолила, оксазолила, изоксазолила, 1,2,5-оксадиазолила, 1,2,4-оксадиазолила, 1,2,3-оксадиазолила, 1,3,4-оксадиазолила, 1,2,5-тиадиазолила, 1,2,4-тиадиазолила, 1,2,3-тиадиазолила, 1,3,4-тиадиазолила, 1,2,3-триазолила, 1,2,4-триазолила, 1,2,5-триазолила, пиридила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, 1,2,3-триазинила, 1,2,4-триазинила или 1,3,5-триазинила; каждый из которых замещен или не замещен 1-5 заместителями, независимо выбранными из галогена, С1-С8-алкила, галоген-С1-С8-алкила, гидрокси-С1-С8-алкила, гидроксила, С1-С8-алкокси, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, амино, Ν-Ο1-Ο8алкиламино, Ν,Ν-ди-С^С^алкиламино, С1-С8-алкилкарбонила, галоген-С1-С8-алкилкарбонила, гидроксиС1-С8-алкилкарбонила или С1-С8-алкокси-С1-С8-алкилкарбонила;
    "гетероарил" может быть присоединен к гетероатому или атому углерода и гетероатомы N и/или 8 также могут быть необязательно окислены до различных степеней окисления;
    К2 выбран из фенила, нафтила, пиридила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, хинолинила или изохинолинила, каждый из которых замещен или не замещен 1-5 заместителями, независимо выбранными из галогена, циано, нитро, С1-С8-алкила, галоген-С1-С8-алкила, гидрокси-С1-С8-алкила, гидроксила, С1-С8-алкокси, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, амино, №СгС8-алкиламино, Ν,Ν-ди-СрС^алкиламино, С1-С8-алкилкарбонила, галоген-С1-С8-алкилкарбонила, гидрокси-С1-С8-алкилкарбонила или С1-С8-алкокси-С1-С8-алкилкарбонила;
    К3 выбран из Н, С1-С4-алкила или галоген-С1-С4-алкила; т выбран из 0 или 1.
  2. 2. Применение по п.1, где ингибитор Ρ
  3. Ι3Κ выбран из соединений формулы (Ιά')
    и/или их таутомеров, и/или Ν-оксидов, и/или фармацевтически приемлемых солей.
    и/или их таутомеров, и/или Ν-оксидов, и/или их фармацевтически приемлемых солей.
  4. 4. Применение по пп.1-3, где в формуле (I) К2 выбран из нафтила, пиридила или пиримидинила; каждый из которых не замещен или замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из галогена, циано, нитро, С1-С8-алкила, галоген-С1-С8-алкила, гидрокси-С1-С8-алкила, гидроксила, С1-С8-алкокси, С1-С8алкокси-С1-С8-алкила, амино, №С^С8-алкиламино, Ν,Ν-ди-С^С^алкиламино, С1-С8-алкилкарбонила, галоген-С1-С8-алкилкарбонила, гидрокси-С1-С8-алкилкарбонила или С1-С8-алкокси-С1-С8-алкилкарбонила.
  5. 5. Применение по пп.1-4, где в формуле (Ι)
    К1 представляет собой -С(О)-К4,
    где К4 выбран из гетероциклила, С4-С8-циклоалкила или гетероарила;
    "С3-С12-циклоалкил" может быть не замещен или замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из фтора, С1-С4-алкила, гидроксила, С1-С4-алкокси;
    где "гетероциклил" выбран из пирролидинила, тетрагидропиранила, пиперидинила, тетрагидротиопиранила, морфолинила или пиперазинила, каждый из которых не замещен или замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из оксо, галогена, С1-С4-алкила, гидроксила, С1-С4-алкилкарбонила;
    "гетероциклил" может быть присоединен к гетероатому или атому углерода и гетероатомы Ν и/или 8 также могут быть необязательно окислены до различных степеней окисления;
    "гетероарил" выбран из фуранила, имидазолила, пиразолила, тиазолила, оксазолила, изоксазолила, 1,3,4-оксадиазолила, пиридила, пиразинила; каждый из которых не замещен или замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из С1-С4-алкила, гидроксила;
    "гетероарил" может быть присоединен к гетероатому или атому углерода и гетероатомы Ν и/или 8 также могут быть необязательно окислены до различных степеней окисления.
  6. 6. Применение по пп.1-4, где в формуле (I)
    К1 представляет собой -С(О)-К4,
    К4 выбран из С1-С8-алкила, С1-С8-алкокси-С1-С8-алкила, С1-С8-алкокси или Ν,Ν-ди-С^С^алкиламино, где "С1-С8-алкил" в Ν,Ν-ди-С^С^алкиламино может быть не замещен или замещен галогеном,
    - 145 029473
    гидрокси или С‘-С4-алкокси.
  7. 7. Применение по п.1, где ингибитор ΡΙ3Κ выбран из группы, состоящей из {^)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]
    пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
    {3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
    {^)-3-[6-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]
    пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
    {3-[6-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
    2-метокси-5-{4-[^)-1-(тетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3-б] пиримидин-6-ил } никотинонитрила;
    2-метокси-5-{4-[1 -(тетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-илокси] -7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3б]пиримидин-6-ил}никотинонитрила;
    1-{^)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]
    пирролидин-1-ил}пропан-1-она;
    1- {3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}пропан-1-она;
    {^)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
    {3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
    2- амино-5-{4-[^)-1-(тетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3-б] пиримидин-6-ил } никотинонитрила;
    2-амино-5-{4-[1-(тетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3-б]
    пиримидин-6-ил}никотинонитрила;
    ^)-(3-(6-(5-фтор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)
    пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    (3-(6-(5-фтор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    ^)-2-метокси-5-(4-(1-(2-метоксиацетил)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидропиридо [4,3-б]пиримидин-6(5Н)-ил)никотинонитрила;
    2-метокси-5-(4-( 1-(2-метоксиацетил)пирролидин-3 -илокси)-7,8-дигидропиридо [4,3-б]пиримидин6(5Н)-ил)никотинонитрила;
    (δ)-5-(4-( 1 -(циклопентанкарбонил)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидропиридо [4,3-б]пиримидин6(5Н)-ил)-2-метоксиникотинонитрила;
    5-(4-( 1 -(циклопентанкарбонил)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидропиридо [4,3-б]пиримидин-6(5Н)ил)-2-метоксиникотинонитрила;
    (2,4-диметилоксазол-5-ил)-{^)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо
    [4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    (2,4-диметилоксазол-5-ил)-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]
    пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    фуран-3-ил-{^)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин4-илокси]пирролидин-1 -ил}метанона;
    фуран-3-ил-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    фуран-3-ил-{^)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин4-илокси]пирролидин-1 -ил}метанона;
    фуран-3-ил-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    {^)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]
    пирролидин-1-ил}-(3-метил-3Н-имидазол-4-ил)метанона;
    {3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил}-(3-метил-3Н-имидазол-4-ил)метанона;
    {^)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]
    пирролидин-1-ил}-(2-метилоксазол-4-ил)метанона;
    {3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2-метилоксазол-4-ил)метанона;
    (3-метоксициклобутил)-{^)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-б] пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    (3 -метоксициклобутил)-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    - 146 029473
    {(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]
    пирролидин-1-ил}оксазол-4-илметанона;
    {3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил}оксазол-4-илметанона;
    1-(4-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-карбонил}пиперидин-1-ил)этанона;
    1- (4-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1-карбонил}пиперидин-1-ил)этанона;
    {(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -ил }-(4-метилоксазол-5 -ил)метанона;
    {3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил }-(4-метилоксазол-5 -ил)метанона;
    5-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]
    пирролидин-1-карбонил}-1Н-пиридин-2-она;
    5-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]
    пирролидин-1-карбонил}-1Н-пиридин-2-она;
    {(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]
    пирролидин-1-ил}-(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанона;
    {3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанона;
    {(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}оксазол-4-илметанона;
    {3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}оксазол-4-илметанона;
    {(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}оксазол-5 -илметанона;
    {3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}оксазол-5 -илметанона;
    {(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2-метилоксазол-4-ил)метанона;
    {3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2-метилоксазол-4-ил)метанона;
    {(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2,2-диметилтетрагидропиран-4-ил)метанона;
    {3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2,2-диметилтетрагидропиран-4-ил)метанона;
    {(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2,4-диметилоксазол-5-ил)метанона;
    {3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(2,4-диметилоксазол-5-ил)метанона;
    (4,4-дифторциклогексил)-{(8)-3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]
    пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    (4,4-дифторциклогексил)-{3-[6-(5,6-диметоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    2- метокси-5-{4-[(8)-1-(2-тетрагидропиран-4-илацетил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3 -й] пиримидин-6 -ил } никотинонитрила;
    2-метокси-5-{4-[1-(2-тетрагидропиран-4-илацетил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3-й] пиримидин-6-ил } никотинонитрила;
    5-{4-[(8)-1-(2,4-диметилоксазол-5-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3-й]
    пиримидин-6-ил}-2-метоксиникотинонитрила;
    5-{4-[1-(2,4-диметилоксазол-5-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3-й]пиримидин-6-ил}-2-метоксиникотинонитрила;
    5-{4-[(8)-1-(2,2-диметилтетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Нпиридо[4,3-й]пиримидин-6-ил}-2-метоксиникотинонитрила;
    5-{4-[1-(2,2-диметилтетрагидропиран-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Нпиридо[4,3-й]пиримидин-6-ил}-2-метоксиникотинонитрила;
    {(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -ил }-(5-метилоксазол-4-ил)метанона;
    {3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -ил }-(5-метилоксазол-4-ил)метанона;
    {(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -ил}-(5-метилизоксазол-4-ил)метанона;
    - 147 029473
    {3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-й]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(5-метилизоксазол-4-ил)метанона;
    {(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-4]ииримидин-4-илокси]
    пирролидин-1-ил}-(3-метилизоксазол-4-ил)метанона;
    {3-[6-(6-метокси-5-метилηиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидроηиридо[4,3-ά]ηиримидин-4-илокси]ηирролидин-1 -ил}-(3-метилизоксазол-4-ил)метанона;
    {(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилηиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидроηиридо[4,3-ά]ηиримидин-4-илокси] пирролидин-1 -ил}-(3-метилизоксазол-4-ил)метанона;
    {3-[6-(6-метокси-5-метилηиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидроηиридо[4,3-ά]ηиримидин-4-илокси]ηирролидин-1 -ил}-(3-метилизоксазол-4-ил)метанона;
    изоксазол-3 -ил-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3 -ил)-5,6,7,8-тетрагидроииридо [4,3-ά] пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    изоксазол-3-ил-{3-[6-(6-метокси-5-метилηиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидроηиридо[4,3-ά]ηиримидин4-илокси]пирролидин-1 -ил}метанона;
    изоксазол-5-ил-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилηиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидроηиридо[4,3-ά]ηиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    изоксазол-5-ил-{3-[6-(6-метокси-5-метилηиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидроηиридо[4,3-ά]ηиримидин4-илокси]пирролидин-1 -ил}метанона;
    2-метокси-5-{4-[(8)-1-(тиазол-4-карбонил)ηирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-ηиридо[4,3-ά]ηиримидин-6-ил}никотинонитрила;
    2-метокси-5-{4-[1 -(тиазол-4-карбонил)пирролидин-3 -илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3-ά] пиримидин-6-ил}никотинонитрила;
    2-метокси-5-{4-[(8)-1-(1-метил-1Н-пиразол-4-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3 -ά] пиримидин-6 -ил } никотинонитрила;
    2-метокси-5-{4-[1-(1-метил-1Н-пиразол-4-карбонил)пирролидин-3 -илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3 -ά] пиримидин-6 -ил } никотинонитрила;
    2-метокси-5-{4-[(8)-1-(1-метил-1Н-пиразол-3-карбонил)пирролидин-3-илокси]-7,8-дигидро-5Нпиридо [4,3-ά] пиримидин-6 -ил } никотинонитрила;
    2-метокси-5-{4-[1 -(1-метил-1Н-пиразол-3 -карбонил)пирролидин-3 -илокси]-7,8-дигидро-5Н-пиридо [4,3 -ά] пиримидин-6 -ил } никотинонитрила;
    (2,2-диметилтетрагидропиран-4-ил)-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо[4,3Ш]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    (2,2-диметилтетрагидропиран-4-ил)-{3-[6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3Ш]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    (1,1 -диоксогексагидро-1 -лямбда*6*-тиопиран-4-ил)-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин3- ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Ш]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    (1,1 -диоксогексагидро-1 -лямбда*6*-тиопиран-4-ил)-{3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Ш]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}метанона;
    (8)-(2,4-диметилоксазол-5-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3Ш]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1 -ил)метанона;
    (2,4-диметилоксазол-5-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Ш]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил)метанона;
    (8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Ш]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(тиазол-5-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Ш]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(тиазол-5-ил)метанона;
    (8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Ш]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(1-метил-1Н-пиразол-5-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Ш]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(1-метил-1Н-пиразол-5-ил)метанона;
    4-((8)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Ш]пиримидин4- илокси)пирролидин-1-карбонил)пирролидин-2-она;
    4-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Ш]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-карбонил)пирролидин-2-она;
    (8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Ш]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(пиридин-3 -ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3Ш]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(пиридин-3 -ил)метанона;
    (8)-(1Н-имидазол-4-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо
    [4,3Ш]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил)метанона;
    (1Н-имидазол-4-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3ά]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1 -ил)метанона;
    - 148 029473
    5-((3)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин4-илокси)пирролидин-1 -карбонил)пирролидин-2-она;
    5-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-карбонил)пирролидин-2-она;
    (3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(пиридин-4-ил)метаиона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(пиридин-4-ил)метанона;
    (3)-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3 -6] пиримидин-4-илокси)пирролидин-1 - ил) метанона;
    (1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)(3 -(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6] пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил)метаиона;
    (3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(1Н-пиразол-4-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(1Н-пиразол-4-ил)метанона;
    (3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)метаиона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)метаиона;
    (3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(пиразин-2-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(пиразин-2-ил)метанона;
    (3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанона;
    {(3)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)метанона;
    {3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)метанона;
    {(3)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}тиазол-4-илметанона;
    {3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}тиазол-4-илметанона;
    {(3)-3-[6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]
    пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
    {3-[6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
    (3)-(3-(6-(6-амино-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    (3-(6-(6-амино-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)азетидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    {(3)-3-[6-(2-метоксипиримидин-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
    {3-[6-(2-метоксипиримидин-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
    [(3)-3-(6-хинолин-3-ил-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил](тетрагидропиран-4-ил)метанона;
    [3 -(6-хинолин-3 -ил-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-6]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-ил]-(тетрагидропиран-4-ил)метанона;
    (3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    (3)-1-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин4-илокси)пирролидин-1 -ил)-3,3-диметилбутан-1 -она;
    1-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-6]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)-3,3-диметилбутан-1-она;
    - 149 029473
    1-{(8)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}пропан-1-она;
    1- {3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-ά] пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}пропан-1-она;
    2- метокси-5-[4-((8)-1-пропионилпирролидин-3-илокси)-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3-б]пиримидин-6ил]никотинонитрила;
    2-метокси-5-[4-(1-пропионилпирролидин-3-илокси)-7,8-дигидро-5Н-пиридо[4,3-б]пиримидин-6-ил]
    никотинонитрила;
    (8)-6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-4-(1 -(пиридин-2-ил)пирролидин-3 -илокси)5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-ά] пиримидина;
    6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-4-(1-(пиридин-2-ил)пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3 -ά] пиримидина;
    (8)-6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-4-(1 -(пиримидин-2-ил)пирролидин-3-илокси)5.6.7.8- тетрагидропиридо [4,3-ά] пиримидина;
    6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-4-(1-(пиримидин-2-ил)пирролидин-3-илокси)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3 -ά] пиримидина;
    (8)-1-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин4-иламино)пирролидин-1-ил)пропан-1-она;
    1- (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)пропан-1-она;
    (8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    (8)-2-метокси-5-(4-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-4-карбонил)пирролидин-3-иламино)-7,8-дигидропиридо[4,3^]пиримидин-6(5Н)-ил)никотинонитрила;
    2- метокси-5-(4-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-4-карбонил)пирролидин-3-иламино)-7,8-дигидропиридо [4,3^]пиримидин-6(5Н)-ил)никотинонитрила;
    (8)-1-(4-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-ά] пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-карбонил)пиперидин-1-ил)этанона;
    1-(4-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин4-иламино)пирролидин-1-карбонил)пиперидин-1-ил)этанона;
    (2,2-диметилтетрагидро-2Н-пиран-4-ил)((8)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)5.6.7.8- тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанона; (2,2-диметилтетрагидро-2Н-пиран-4-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3Щпиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанона;
    (8)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(оксазол-5-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(оксазол-5-ил)метанона;
    ((8)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4иламино)пирролидин-1 -ил)((18,4К)-4-метоксициклогексил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)((18,4К)-4-метоксициклогексил)метанона;
    ((8)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)((1г,48)-4-метоксициклогексил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)((1г,48)-4-метоксициклогексил)метанона;
    ((18,4К)-4-гидроксициклогексил)((8)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3 -ά] пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанона;
    ((18,4К)-4-гидроксициклогексил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3-ά] пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанона;
    ((1г,48)-4-гидроксициклогексил)((8)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3^]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанона;
    ((1г,48)-4-гидроксициклогексил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3-ά] пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанона;
    (8)-(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3^]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)метанона;
    (8)-(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3^]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(оксазол-5-ил)метанона;
    - 150 029473
    (3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(оксазол-5-ил)метанона;
    (3)-(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(оксазол-4-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)(оксазол-4-ил)метанона;
    (2,2-диметилтетрагидро-2Н-пиран-4-ил)((3)-3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3-б]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанона;
    (2,2-диметилтетрагидро-2Н-пиран-4-ил)(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8тетрагидропиридо [4,3-б]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)метанона;
    (3)-1-(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4иламино)пирролидин-1-ил)пропан-1-она;
    1-(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино)
    пирролидин-1-ил)пропан-1-она;
    (3)-(3-(6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино)
    пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    (3-(6-(5-хлор-6-метоксипиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    (3)-(3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино)
    пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-метилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанона;
    (тетрагидропиран-4-ил)-{(3)-3-(6-(5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]
    пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил}метанона;
    (тетрагидропиран -4-ил)-{3-(6-(5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-иламино)пирролидин-1-ил}метанона;
    (3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(4-метилпиперазин-1-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(4-метилпиперазин-1-ил)метанона;
    (3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(морфолино)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(морфолино)метанона;
    (3)-(4-гидроксипиперидин-1-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3 -б] пиримидин-4-илокси)пирролидин-1 -ил)метанона;
    (4-гидроксипиперидин-1-ил)(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1 -ил)метанона;
    (3)-Н-(2-гидроксиэтил)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо
    [4,3-б]пиримидин-4-илокси)-Ы-метилпирролидин-1-карбоксамида;
    Ш(2-гидроксиэтил)-3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3б]пиримидин-4-илокси)-Ы-метилпирролидин-1-карбоксамида;
    (3)-1-(4-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо [4,3-б]пиримидин-4-илокси)пирролидин-1-карбонил)пиперазин-1-ил)этанона;
    1- (4-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин4-илокси)пирролидин-1-карбонил)пиперазин-1-ил)этанона;
    (3)-2-метокси-5-(4-(1-(морфолин-4-карбонил)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-6(5Н)-ил)никотинонитрила;
    2- метокси-5-(4-(1-(морфолин-4-карбонил)пирролидин-3-илокси)-7,8-дигидропиридо[4,3-б]пиримидин-6(5Н)-ил)никотинонитрила;
    (3)-(3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(оксазол-4-ил)метанона;
    (3-(6-(6-метокси-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4илокси)пирролидин-1-ил)(оксазол-4-ил)метанона;
    1-(4-{(3)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1 -карбонил}пиперидин-1 -ил)этанона;
    1-(4-{3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-карбонил}пиперидин-1-ил)этанона;
    {(3)-3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-(3 -метил-3Н-имидазол-4-ил)метанона;
    {3-[6-(6-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-б]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(3 -метил-3Н-имидазол-4-ил)метанона;
    - 151 029473
    {(8)-3-[б-(б-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-д]пиримидин-4илокси]пирролидин-1-ил}-оксазол-5-илметанона;
    {3-[б-(б-метокси-5-трифторметилпиридин-3-ил)-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-д]пиримидин-4илокси] пирролидин-1-ил }-оксазол-5 - илметанона;
    {(8)-3-[б-(б-метоксипиридин-3-ил)-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-д]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1-ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона или
    {3-[б-(б-метоксипиридин-3-ил)-5,б,7,8-тетрагидропиридо[4,3-д]пиримидин-4-илокси]пирролидин-1ил}-(тетрагидропиран-4-ил)метанона.
  8. 8. Применение по пп.1-7, где ингибитор ΡΙ3Κ находится в форме соли, выбранной из:
    a) цитрата, фумарата или нападизилата или
    b) фосфата, гидрохлорида или гиппурата.
  9. 9. Способ лечения иммунопатологии у индивидуума, страдающего заболеванием или нарушением, выбранным из острой и церебральной малярии, посредством функционального ингибирования ТЬК9 инфицированного индивидуума, включающий введение терапевтически эффективного количества ингибитора ΡΙ3Κ, обладающего ингибиторной активностью в отношении изоформы ΡΙ3Κ дельта и соответствующего формуле (Ι), как определено в любом из пп.1-8, или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата индивидууму при необходимости такого лечения.
  10. 10. Способ по п.9, где указанным индивидуумом является человек.
  11. 11. Применение фармацевтической композиции, содержащей ингибитор ΡΙ3Κ, обладающий ингибиторной активностью в отношении изоформы ΡΙ3Κ дельта и соответствующий формуле (Ι), как определено в любом из пп.1-8, или его фармацевтически приемлемые соли или сольваты для лечения иммунопатологии у индивидуума, страдающего заболеванием или нарушением, выбранным из острой и церебральной малярии, посредством функционального ингибирования ТЬК9 инфицированного индивидуума.
    - 152 029473
EA201491182A 2011-12-15 2012-12-14 Применение ингибиторов pi3k для лечения острой и церебральной малярии EA029473B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161576194P 2011-12-15 2011-12-15
PCT/IB2012/057332 WO2013088404A1 (en) 2011-12-15 2012-12-14 Use of inhibitors of the activity or function of PI3K

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201491182A1 EA201491182A1 (ru) 2016-01-29
EA029473B1 true EA029473B1 (ru) 2018-03-30

Family

ID=47603895

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201491182A EA029473B1 (ru) 2011-12-15 2012-12-14 Применение ингибиторов pi3k для лечения острой и церебральной малярии

Country Status (24)

Country Link
US (1) US9949979B2 (ru)
EP (1) EP2790705B1 (ru)
JP (1) JP6117235B2 (ru)
KR (1) KR102038462B1 (ru)
CN (1) CN103998042B (ru)
AP (1) AP3849A (ru)
AU (1) AU2012354094C1 (ru)
BR (1) BR112014014327A2 (ru)
CA (1) CA2857302C (ru)
DK (1) DK2790705T3 (ru)
EA (1) EA029473B1 (ru)
ES (1) ES2661510T3 (ru)
GT (1) GT201400114A (ru)
HU (1) HUE036052T2 (ru)
MA (1) MA35857B1 (ru)
MX (1) MX351530B (ru)
NI (1) NI201400056A (ru)
NO (1) NO2896266T3 (ru)
PH (1) PH12014501348A1 (ru)
PL (1) PL2790705T3 (ru)
PT (1) PT2790705T (ru)
SI (1) SI2790705T1 (ru)
TN (1) TN2014000230A1 (ru)
WO (1) WO2013088404A1 (ru)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
UA112517C2 (uk) 2010-07-06 2016-09-26 Новартіс Аг Тетрагідропіридопіримідинові похідні
CN103998042B (zh) 2011-12-15 2016-12-28 诺华股份有限公司 Pi3k的活性或功能的抑制剂的应用
US9676765B2 (en) 2012-11-07 2017-06-13 Karus Therapeutics Limited Histone deacetylase inhibitors and their use in therapy
BR112015028215A2 (pt) 2013-05-10 2017-07-25 Karus Therapeutics Ltd novos inibidores de histona deacetilase
US20150105383A1 (en) * 2013-10-10 2015-04-16 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. HDAC Inhibitors, Alone Or In Combination With PI3K Inhibitors, For Treating Non-Hodgkin's Lymphoma
JP6878004B2 (ja) 2013-12-13 2021-05-26 ダナ−ファーバー キャンサー インスティテュート， インコーポレイテッド リンパ形質細胞性リンパ腫を処置する方法
US9856223B2 (en) 2013-12-13 2018-01-02 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods to treat lymphoplasmacytic lymphoma
WO2015162584A1 (en) 2014-04-24 2015-10-29 Novartis Ag Crystalline forms of the sulfate salt of n-[5-(3-imidazol-1-yl-4-methanesulfonyl-phenyl)-4-methyl-thiazol-2-yl]-acetamide
CA2965178C (en) 2014-10-22 2023-09-26 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Thiazolyl-containing compounds for treating proliferative diseases
GB201419228D0 (en) 2014-10-29 2014-12-10 Karus Therapeutics Ltd Compounds
GB201419264D0 (en) 2014-10-29 2014-12-10 Karus Therapeutics Ltd Compounds
MA54133B1 (fr) 2018-03-08 2022-01-31 Incyte Corp Composés d'aminopyrazine diol utilisés comme inhibiteurs de pi3k-y
EP3810598A1 (en) * 2018-06-19 2021-04-28 Novartis AG Cyanotriazole compounds and uses thereof
JPWO2020017569A1 (ja) 2018-07-17 2021-12-02 日本ケミファ株式会社 Ｔ型カルシウムチャネル阻害剤
US20220226299A1 (en) 2019-03-29 2022-07-21 Nippon Chemiphar Co., Ltd. Use of t-type calcium channel blocker for treating pruritus
WO2023170680A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Equashield Medical Ltd Fluid transfer station in a robotic pharmaceutical preparation system
CN114957676B (zh) * 2022-06-22 2023-05-16 安徽工程大学 一种利用反溶剂沉积快速调控水分活度制备美拉德反应产物的方法

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005086814A2 (en) * 2004-03-09 2005-09-22 The Uab Research Foundation Methods and compositions related to regulation of cytokine production by glycogen synthase kinase 3 (gsk-3)
WO2008012326A1 (en) * 2006-07-28 2008-01-31 Novartis Ag 2,4-substituted quinazolines as lipid kinase inhibitors
WO2008157191A2 (en) * 2007-06-14 2008-12-24 Smithkline Beecham Corporation Quinazoline derivatives as pi3 kinase inhibitors
WO2009058361A1 (en) * 2007-10-31 2009-05-07 Dynavax Technologies Corp. Inhibition of type i ifn production
WO2010036908A1 (en) * 2008-09-26 2010-04-01 Eisai R & D Management Co., Ltd. Use of benzoxazole compounds in the treatment of malaria
WO2010120991A1 (en) * 2009-04-17 2010-10-21 Wyeth Llc 5, 6, 7, 8-tetrahydropyrido[4,3-d]pyrimidine compounds, their use as mtor, pi3, and hsmg-1 kinase inhibitors, and their syntheses
WO2010129816A2 (en) * 2009-05-07 2010-11-11 Intellikine, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
WO2012004299A1 (en) * 2010-07-06 2012-01-12 Novartis Ag Tetrahydro-pyrido-pyrimidine derivatives

Family Cites Families (109)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5300645A (en) 1993-04-14 1994-04-05 Eli Lilly And Company Tetrahydro-pyrido-indole
US5858753A (en) 1996-11-25 1999-01-12 Icos Corporation Lipid kinase
US5939421A (en) 1997-07-01 1999-08-17 Signal Pharmaceuticals, Inc. Quinazoline analogs and related compounds and methods for treating inflammatory conditions
US6667300B2 (en) 2000-04-25 2003-12-23 Icos Corporation Inhibitors of human phosphatidylinositol 3-kinase delta
WO2001085986A2 (en) 2000-05-10 2001-11-15 Icos Corporation Phosphatidyl inositol 3-kinase delta binding partner
DE10043667A1 (de) 2000-09-05 2002-03-14 Merck Patent Gmbh 2-Guanidino-4-aryl-chinazoline
KR20080014934A (ko) 2000-11-07 2008-02-14 노파르티스 아게 단백질 키나제 ｃ 억제제로서의 인돌릴말레이미드 유도체
KR100833371B1 (ko) 2001-04-27 2008-05-28 젠야쿠코교가부시키가이샤 헤테로시클릭 화합물 및 이를 유효 성분으로 하는 항종양제
TWI324064B (en) 2002-04-03 2010-05-01 Novartis Ag Indolylmaleimide derivatives
CA2506432A1 (en) 2002-12-09 2004-06-24 Robert A. Kirken Methods for selectively inhibiting janus tyrosine kinase 3 (jak3)
AU2003292436B2 (en) 2002-12-27 2009-07-30 Msd Italia S.R.L. Tetrahydro-4H-pyrido[1,2-A]pyrimidines and related compounds useful as HIV integrase inhibitors
WO2005016349A1 (en) 2003-08-14 2005-02-24 Icos Corporation Methods of inhibiting leukocyte accumulation
WO2005016348A1 (en) 2003-08-14 2005-02-24 Icos Corporation Method of inhibiting immune responses stimulated by an endogenous factor
GB2424882B (en) 2004-01-12 2008-08-06 Cytopia Res Pty Ltd Selective kinase inhibitors
JP2007524673A (ja) 2004-01-23 2007-08-30 アムジエン・インコーポレーテツド バニロイド受容体リガンドと治療におけるその使用
CA2730540A1 (en) 2004-05-13 2005-12-01 Vanderbilt University Phosphoinositide 3-kinase delta selective inhibitors for inhibiting angiogenesis
EP1761540B1 (en) 2004-05-13 2016-09-28 Icos Corporation Quinazolinones as inhibitors of human phosphatidylinositol 3-kinase delta
DK1761528T3 (da) 2004-06-11 2008-05-05 Japan Tobacco Inc 5-Amino-2,4,7-trioxo-3,4,7,8-tetrahydro-2H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-derivater og beslægtede forbindelser til behandling af cancer
GB0423653D0 (en) 2004-10-25 2004-11-24 Piramed Ltd Pharmaceutical compounds
US20060128710A1 (en) 2004-12-09 2006-06-15 Chih-Hung Lee Antagonists to the vanilloid receptor subtype 1 (VR1) and uses thereof
EP1844023A1 (en) 2004-12-31 2007-10-17 Sk Chemicals Co., Ltd. Quinazoline derivatives for the treatment and prevention of diabetes and obesity
MX2007013595A (es) 2005-05-04 2008-01-24 Renovis Inc Compuestos heterociclicos fusionados y composiciones y usos de estos.
GB0510390D0 (en) 2005-05-20 2005-06-29 Novartis Ag Organic compounds
MX2008002723A (es) 2005-08-26 2008-03-26 Serono Lab Derivados de pirazina y uso como inhibidores de p13k.
GB0520657D0 (en) 2005-10-11 2005-11-16 Ludwig Inst Cancer Res Pharmaceutical compounds
EP1968968A1 (en) 2005-12-21 2008-09-17 PainCeptor Pharma Corp. Compositions and methods for modulating gated ion channels
GB0612630D0 (en) 2006-06-26 2006-08-02 Novartis Ag Organic compounds
US8673929B2 (en) 2006-07-20 2014-03-18 Gilead Sciences, Inc. 4,6-di- and 2,4,6-trisubstituted quinazoline derivatives and pharmaceutical compositions useful for treating viral infections
EP1891958A1 (en) 2006-08-03 2008-02-27 Universite Pierre Et Marie Curie (Paris Vi) Rho/Rock/PI3/Akt kinase inhibitors for the treatment of diseases associated with protozoan parasites.
US20100216820A1 (en) 2006-11-13 2010-08-26 White Stephen L Thienopyrimidiones for treatment of inflammatory disorders and cancers
EA017389B1 (ru) 2007-03-23 2012-12-28 Амген Инк. Гетероциклические соединения и их применение
EP2139882B1 (en) 2007-03-23 2013-12-25 Amgen Inc. 3- substituted quinoline or quinoxaline derivatives and their use as phosphatidylinositol 3-kinase (pi3k) inhibitors
AU2008231384B2 (en) 2007-03-23 2011-09-15 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their use
JP5396379B2 (ja) 2007-04-02 2014-01-22 エボテック・アーゲー ピリド−２−イル縮合複素環式化合物ならびにその組成物および使用
GB0707087D0 (en) 2007-04-12 2007-05-23 Piramed Ltd Pharmaceutical compounds
WO2008125833A1 (en) 2007-04-12 2008-10-23 Piramed Limited Pharmaceutical compounds
MX2009010886A (es) 2007-04-12 2009-12-14 Hoffmann La Roche Derivados de pirimidina como inhibidores de fosfatidilinositol-3-c inasa.
WO2008130481A1 (en) 2007-04-17 2008-10-30 Renovis, Inc. 2-cyanophenyl fused heterocyclic compounds, and compositions and uses thereof
PE20090717A1 (es) 2007-05-18 2009-07-18 Smithkline Beecham Corp Derivados de quinolina como inhibidores de la pi3 quinasa
US20100179143A1 (en) 2007-05-29 2010-07-15 Smithkline Beecham Corporation Naphthyridine, derivatives as p13 kinase inhibitors
JP5539190B2 (ja) 2007-06-12 2014-07-02 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー チアゾロピリミジン類及びホスファチジルイノシトール−３キナーゼのインヒビターとしてのそれらの使用
WO2008152387A1 (en) 2007-06-12 2008-12-18 F.Hoffmann-La Roche Ag Quinazoline derivatives as pi3 kinase inhibitors
WO2008152394A1 (en) 2007-06-12 2008-12-18 F.Hoffmann-La Roche Ag Pharmaceutical compounds
RU2341527C1 (ru) 2007-07-17 2008-12-20 Общество С Ограниченной Ответственностью "Исследовательский Институт Химического Разнообразия" Аннелированные азагетероциклы, включающие пиримидиновый фрагмент, способ их получения и ингибиторы pi3k киназ
TW200908984A (en) 2007-08-07 2009-03-01 Piramal Life Sciences Ltd Pyridyl derivatives, their preparation and use
WO2009036768A2 (en) 2007-09-19 2009-03-26 H. Lundbeck A/S Diagnosing potential weight gain in a subject
GB2467670B (en) 2007-10-04 2012-08-01 Intellikine Inc Chemical entities and therapeutic uses thereof
US20100298289A1 (en) 2007-10-09 2010-11-25 Ucb Pharma, S.A. Heterobicyclic compounds as histamine h4-receptor antagonists
WO2009064802A2 (en) 2007-11-13 2009-05-22 Eli Lilly & Co. Inhibitors of human phosphatidyl-inositol 3-kinase delta
SG187425A1 (en) 2008-01-04 2013-02-28 Intellikine Llc Certain chemical entities, compositions and methods
US8193182B2 (en) 2008-01-04 2012-06-05 Intellikine, Inc. Substituted isoquinolin-1(2H)-ones, and methods of use thereof
WO2009120094A2 (en) 2008-03-27 2009-10-01 Auckland Uniservices Limited Substituted pyrimidines and triazines and their use in cancer therapy
US8436005B2 (en) 2008-04-03 2013-05-07 Abbott Laboratories Macrocyclic pyrimidine derivatives
ES2526966T3 (es) 2008-06-05 2015-01-19 Glaxo Group Limited Compuestos novedosos
JP5508400B2 (ja) 2008-06-05 2014-05-28 グラクソ グループ リミテッド Ｐｉ３キナーゼの阻害剤としてのベンズピラゾール誘導体
ES2383246T3 (es) 2008-06-05 2012-06-19 Glaxo Group Limited 4-amino-indazoles
ES2491522T3 (es) 2008-06-19 2014-09-08 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Derivados de tiofeno o tiazol y su uso como inhibidores de PI3K
WO2010005558A2 (en) 2008-07-07 2010-01-14 Xcovery, Inc. Pi3k isoform selective inhibitors
CA2730106A1 (en) 2008-07-08 2010-01-14 Intellikine, Inc. Kinase inhibitors and methods of use
WO2010036380A1 (en) 2008-09-26 2010-04-01 Intellikine, Inc. Heterocyclic kinase inhibitors
NZ592880A (en) 2008-11-13 2013-06-28 Gilead Calistoga Llc Combinations of purine derivatives and proteasome inhibitors such as bortezomib for the treatment of hematological malignancy
WO2010059593A1 (en) 2008-11-18 2010-05-27 Intellikine, Inc. Methods and compositions for treatment of ophthalmic conditions
WO2010065923A2 (en) 2008-12-04 2010-06-10 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Phosphatidylinositol-3-kinase p110 delta-targeted drugs in the treatment of cns disorders
JP5656880B2 (ja) 2009-03-09 2015-01-21 グラクソ グループ リミテッドＧｌａｘｏ Ｇｒｏｕｐ Ｌｉｍｉｔｅｄ Ｐｉ３キナーゼの阻害剤としての４−オキサジアゾール−２−イル−インダゾール
US8293783B2 (en) 2009-03-24 2012-10-23 National University Of Singapore Use of artemisinin derivatives for the treatment of asthma and chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
US8440677B2 (en) 2009-03-24 2013-05-14 Gilead Calistoga Llc Atropisomers of 2-purinyl-3-tolyl-quinazolinone derivatives and methods of use
EP2421536B1 (en) 2009-04-20 2015-08-26 Gilead Calistoga LLC Methods of treatment for solid tumors
JO3025B1 (ar) 2009-04-30 2016-09-05 Glaxo Group Ltd الأندازولات المستبدلة بالأوكسازول كمثبطات كيناز pi3
SG182247A1 (en) 2009-05-27 2012-08-30 Hoffmann La Roche Bicyclic indole-pyrimidine pi3k inhibitor compounds selective for p110 delta, and methods of use
CN102459272B (zh) 2009-05-27 2014-08-06 健泰科生物技术公司 对P110δ具有选择性的为PI3K抑制剂的二环嘧啶化合物和使用方法
WO2010151735A2 (en) 2009-06-25 2010-12-29 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their uses
MX2011013667A (es) 2009-06-25 2012-03-06 Amgen Inc Compuestos heterociclicos y sus usos.
EA201270051A1 (ru) 2009-06-25 2012-05-30 Амген Инк. Гетероциклические соединения и их применения
US20100331306A1 (en) 2009-06-25 2010-12-30 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their uses
SG177384A1 (en) 2009-06-29 2012-02-28 Incyte Corp Pyrimidinones as pi3k inhibitors
BRPI1015943A8 (pt) 2009-07-02 2018-01-09 Sanofi Sa derivados de 1,2,3,4-tetra - hidro - pirimido {1,2-a} pirimidin-6-ona, o respectivo preparo e a respectiva utilização farmacêutica.
EP2448939B1 (fr) 2009-07-02 2017-03-01 Sanofi Derives de 2,3-dihydro-1h-imidazo {1,2-a} pyrimidin-5-one, leur preparation et leur utilisation pharmaceutique
CN102647987A (zh) 2009-07-21 2012-08-22 吉里德卡利斯托加公司 使用pi3k抑制剂治疗肝脏障碍
US9200007B2 (en) 2009-08-20 2015-12-01 Karus Therapeutics Limited Tricyclic heterocyclic compounds as phosphoinositide 3-kinase inhibitors
CA2775942A1 (en) 2009-09-29 2011-04-07 Xcovery Holding Company Llc Pi3k (delta) selective inhibitors
GB0918249D0 (en) 2009-10-19 2009-12-02 Respivert Ltd Compounds
KR101821768B1 (ko) 2009-11-05 2018-01-24 리젠 파마슈티컬스 소시에떼 아노님 신규한 벤조피란 키나제 조절제
CA2779951A1 (en) 2009-11-06 2011-05-12 Piramal Life Sciences Limited Imidazopyridine derivatives
WO2011058149A1 (en) 2009-11-13 2011-05-19 Merck Serono S.A. Tricyclic pyrazol amine derivatives
WO2011067364A1 (en) 2009-12-03 2011-06-09 Glaxo Group Limited Novel compounds
US20120245171A1 (en) 2009-12-03 2012-09-27 Glaxo Group Limited Benzpyrazole derivatives as inhibitors of pi3 kinases
US20120238571A1 (en) 2009-12-03 2012-09-20 Glaxo Group Limited Indazole derivatives as pi 3-kinase
TW201130842A (en) 2009-12-18 2011-09-16 Incyte Corp Substituted fused aryl and heteroaryl derivatives as PI3K inhibitors
WO2011075628A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their uses
WO2011075643A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Incyte Corporation Substituted heteroaryl fused derivatives as pi3k inhibitors
CN102762565A (zh) 2010-02-22 2012-10-31 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 吡啶并[3,2-d]嘧啶PI3δ抑制剂化合物及使用方法
UY33304A (es) 2010-04-02 2011-10-31 Amgen Inc Compuestos heterocíclicos y sus usos
EP2558463A1 (en) 2010-04-14 2013-02-20 Incyte Corporation Fused derivatives as i3 inhibitors
GB201007347D0 (en) 2010-04-30 2010-06-16 Karus Therapeutics Ltd Compounds
CN103002738A (zh) 2010-05-21 2013-03-27 英特利凯恩有限责任公司 用于激酶调节的化学化合物、组合物和方法
US9062055B2 (en) 2010-06-21 2015-06-23 Incyte Corporation Fused pyrrole derivatives as PI3K inhibitors
KR101531117B1 (ko) 2010-07-14 2015-06-23 에프. 호프만-라 로슈 아게 Pi3k p110 델타에 대해 선택적인 퓨린 화합물, 및 사용 방법
AR082985A1 (es) 2010-09-14 2013-01-23 Exelixis Inc INHIBIDORES DE PI3K-d Y METODOS DE SU USO Y PREPARACION
WO2012037226A1 (en) 2010-09-14 2012-03-22 Exelixis, Inc. Inhibitors of pi3k-delta and methods of their use and manufacture
PE20141303A1 (es) 2011-01-10 2014-10-01 Infinity Pharmaceuticals Inc Procedimiento para preparar isoquinolinonas y formas solidas de isoquinolinonas
US9108984B2 (en) 2011-03-14 2015-08-18 Incyte Corporation Substituted diamino-pyrimidine and diamino-pyridine derivatives as PI3K inhibitors
EP2688891B1 (en) 2011-03-21 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG Benzoxazepin compounds selective for pi3k p110 delta and methods of use
US9126948B2 (en) 2011-03-25 2015-09-08 Incyte Holdings Corporation Pyrimidine-4,6-diamine derivatives as PI3K inhibitors
JP2014509648A (ja) 2011-03-28 2014-04-21 メイ プハルマ，インコーポレーテッド （α−置換シクロアルキルアミノ及びヘテロシクリルアミノ）ピリミジニル及び１，３，５−トリアジニルベンズイミダゾール、その医薬組成物、並びに増殖性疾患の治療におけるそれらの使用
UY34013A (es) 2011-04-13 2012-11-30 Astrazeneca Ab ?compuestos de cromenona con actividad anti-tumoral?.
EP2518071A1 (en) 2011-04-29 2012-10-31 Almirall, S.A. Imidazopyridine derivatives as PI3K inhibitors
EP2518070A1 (en) 2011-04-29 2012-10-31 Almirall, S.A. Pyrrolotriazinone derivatives as PI3K inhibitors
US20140249139A1 (en) 2011-10-21 2014-09-04 Novartis Ag Quinazoline Derivatives
CN103998042B (zh) 2011-12-15 2016-12-28 诺华股份有限公司 Pi3k的活性或功能的抑制剂的应用

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005086814A2 (en) * 2004-03-09 2005-09-22 The Uab Research Foundation Methods and compositions related to regulation of cytokine production by glycogen synthase kinase 3 (gsk-3)
WO2008012326A1 (en) * 2006-07-28 2008-01-31 Novartis Ag 2,4-substituted quinazolines as lipid kinase inhibitors
WO2008157191A2 (en) * 2007-06-14 2008-12-24 Smithkline Beecham Corporation Quinazoline derivatives as pi3 kinase inhibitors
WO2009058361A1 (en) * 2007-10-31 2009-05-07 Dynavax Technologies Corp. Inhibition of type i ifn production
WO2010036908A1 (en) * 2008-09-26 2010-04-01 Eisai R & D Management Co., Ltd. Use of benzoxazole compounds in the treatment of malaria
WO2010120991A1 (en) * 2009-04-17 2010-10-21 Wyeth Llc 5, 6, 7, 8-tetrahydropyrido[4,3-d]pyrimidine compounds, their use as mtor, pi3, and hsmg-1 kinase inhibitors, and their syntheses
WO2010129816A2 (en) * 2009-05-07 2010-11-11 Intellikine, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
WO2012004299A1 (en) * 2010-07-06 2012-01-12 Novartis Ag Tetrahydro-pyrido-pyrimidine derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
EA201491182A1 (ru) 2016-01-29
AP2014007679A0 (en) 2014-06-30
AU2012354094B2 (en) 2014-11-20
NI201400056A (es) 2014-12-22
KR20140107421A (ko) 2014-09-04
MX2014007164A (es) 2015-03-09
GT201400114A (es) 2015-02-19
US20150342951A1 (en) 2015-12-03
TN2014000230A1 (en) 2015-09-30
EP2790705B1 (en) 2017-12-06
PH12014501348A1 (en) 2014-09-15
MX351530B (es) 2017-10-18
AP3849A (en) 2016-09-30
PT2790705T (pt) 2018-01-24
AU2012354094A1 (en) 2014-07-03
NO2896266T3 (ru) 2018-04-28
EP2790705A1 (en) 2014-10-22
CA2857302A1 (en) 2013-06-20
PL2790705T3 (pl) 2018-06-29
DK2790705T3 (en) 2018-03-12
CN103998042A (zh) 2014-08-20
CN103998042B (zh) 2016-12-28
WO2013088404A1 (en) 2013-06-20
JP6117235B2 (ja) 2017-04-19
JP2015500332A (ja) 2015-01-05
SI2790705T1 (en) 2018-03-30
BR112014014327A2 (pt) 2017-06-13
ES2661510T3 (es) 2018-04-02
CA2857302C (en) 2020-08-25
AU2012354094C1 (en) 2015-10-15
US9949979B2 (en) 2018-04-24
HUE036052T2 (hu) 2018-06-28
MA35857B1 (fr) 2014-12-01
KR102038462B1 (ko) 2019-10-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA029473B1 (ru) Применение ингибиторов pi3k для лечения острой и церебральной малярии
US11648243B2 (en) Substituted pyrazolo[1,5-A]pyridine compounds as RET kinase inhibitors
US9855269B2 (en) Aminoquinazoline and pyridopyrimidine derivatives
CN107011348B (zh) 作为btk活性的抑制剂的杂芳基吡啶酮和氮杂-吡啶酮化合物
KR102181915B1 (ko) Trka 키나아제 억제제로서 n-피롤리디닐, n&#39;-피라졸릴-우레아, 티오우레아, 구아니딘 및 시아노구아니딘 화합물
RU2425826C2 (ru) СОЕДИНЕНИЯ И КОМПОЗИЦИИ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ITPKb
EA024123B1 (ru) Тетрагидропиридопиримидиновые производные
TW202108141A (zh) Fgfr抑制劑及其使用方法
US9708316B2 (en) TGFβR antagonists
US10336761B2 (en) TGFβ receptor antagonist
US10179777B2 (en) 3-(1H-benzimidazol-2-yl)-1H-pyridin-2-one derivatives
TW201922735A (zh) 嘧啶ＴＢＫ／ＩＫＫε抑制劑化合物及其用途
KR20200060269A (ko) Irak4 저해제로서 신규의 삼중고리 화합물
WO2023201185A1 (en) Pyrido[3,2-d]pyrimidines as hpk1 inhibitors
JP2020537661A (ja) ピリミジンＴＢＫ／ＩＫＫεインヒビター化合物およびそれらの使用

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM