KR20130034024A - Ｃｇｒｐ 항체 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 조작된 인간 칼시토닌 유전자 관련 펩티드 (CGRP) 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 또한, 본 발명은 조작된 인간 칼시토닌 유전자 관련 펩티드 (CGRP) 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 골관절염 통증의 치료를 위한 용도를 제공한다.

Description

ＣＧＲＰ 항체{CGRP ANTIBODIES}
본 발명은 의약 분야, 특히 칼시토닌 유전자-관련 펩티드 (CGRP)에 대한 항체 분야에 속한다. 더욱 구체적으로, 본 발명은 CGRP 항체, 및 CGRP 항체의 골관절염 통증 또는 편두통의 치료법을 위한 용도에 관한 것이다.
칼시토닌 유전자 관련 펩티드 (CGRP)는 중추 및 말초 신경계의 신경이 분비하는 아미노산 37개의 신경펩티드이다. CGRP는 말초 및 중추 신경계 양쪽 모두에서 감각 신경 내에 널리 분포되고, 다수의 상이한 생물학적 활성을 나타낸다. CGRP는 역할을 하는 것으로 보고된다. 삼차신경 및 기타 신경 섬유로부터 방출되었을 때, CGRP는 특이적 세포 표면 수용체에 결합함으로써 자신의 생물학적 응답을 매개하는 것으로 생각된다.
감각 신경의 자극 시에 CGRP가 방출되고 강력한 혈관확장 활성이 있기 때문에 CGRP는 편두통에서 역할을 하는 것으로 보고되었다. CGRP의 방출은 삼차 신경 섬유가 분포된 조직에서 이러한 섬유의 자극 시 혈관 투과성을 증가시키고, 이어서 혈장 단백질 누출 (혈장 단백질 혈관외유출)을 증가시킨다. 또한, 편두통을 앓는 환자에서의 CGRP 주입이 편두통-유사 증상을 초래하였음이 연구에서 보고되었다.
CGRP는 골관절염 (OA)에서 역할을 하는 것으로 또한 보고되었다. OA는 세계적으로 큰 백분율의 사람들에게 영향을 미치는 만성 병태이다. 관절염에서의 통증은 통각과민 (일반적으로는 유해성이 아닌 자극에 대해 과도하게 민감함) 및 자발통 (휴지 시의 통증)을 특징으로 한다. 관절 염증은 말초 및 중추 감작화를 야기한다. 말초 감작화에서, 일반적으로는 역치가 높은 CGRP-함유 통각수용기가 일반적인 관절 운동과 관련된 가벼운 압력에 응답하기 시작한다. CGRP가 염증 프로세스의 국소적인 촉진물로서 작용한다. 계속되는 이러한 프로세스는 결국 척수에서의 중추 감작화에 이르러, 뉴런이 염증 조직뿐만 아니라 비-염증 조직의 자극에 응답성이게 된다. 래트에서의 OA 통증의 전임상 모델에서, 통증의 양과 명백하게 상관되어 CGRP 양성 신경 섬유의 개수 증가가 관찰되었다.
OA 통증에 대한 현재의 진료 표준은 비-스테로이드성 항염증 약물 (NSAID) 및 선택적 Cox-2 억제제로 이루어진다. 시간이 지남에 따라, 다수의 환자가 이러한 치료에 무감각해질 것이거나, 또는 효과적인 통증 완화에 필요한 높은 용량을 허용할 수 없다. 후속 치료는 관절내 주사 (히알루로난) 또는 아편제로 이루어진다. 최종 치료는 수술에 의한 전체 관절 대치이다. 이러한 치료들 중 다수는 위장 (NSAID)에서 심혈관 (Cox-2 억제제)까지의 범위에 이르는 음성 부작용이 있거나, 성가시고/성가시거나 매우 효과적이지 않거나 (관절내 주사), 남용 위험이 있거나 (아편제), 또는 오직 1개의 관절에 제한된다 (관절내 주사, 수술).
편두통 치료 및 염증 통증 치료를 위한 CGRP 항체가 개시되었지만 (편두통 - WO 2007/076336 및 WO 2007/054809; OA - WO2009/109908A1의 항체 G1 참조), 대안이 여전히 요구된다. 바람직하게는, 이러한 치료 대안은 안전하고 효과적이다. 더욱 바람직하게는, OA에 대한 이러한 치료 대안은 의존성 및/또는 남용의 위험 없이 환자에게 허용가능한 다중 관절에 걸친 오래 지속되는 통증 완화를 제공할 것이다.
본 발명은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (LCVR) 및 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (HCVR)을 포함하고, 인간 CGRP에 결합하는, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다:
a) LCDR1은 RASQDIDNYLN (서열 3)이고, LCDR2는 YTSEYHS (서열 4)이고, LCDR3은 QQGDALPPT (서열 5)이고, HCDR1은 GYTFGNYWMQ (서열 12)이고, HCDR2는 AIYEGTGDTRYIQKFAG (서열 13)이며, HCDR3은 LSDYVSGFSY (서열 14)임;
b) LCDR1은 RASQDIDNYLN (서열 3)이고, LCDR2는 YTSEYHS (서열 4)이고, LCDR3은 QQGDALPPT (서열 5)이고, HCDR1은 GYTFGNYWMQ (서열 12)이고, HCDR2는 AIYEGTGKTVYIQKFAG (서열 15)이며, HCDR3은 LSDYVSGFSY (서열 14)임;
c) LCDR1은 RASKDISKYLN (서열 6)이고, LCDR2는 YTSGYHS (서열 7)이고, LCDR3은 QQGDALPPT (서열 5)이고, HCDR1은 GYTFGNYWMQ (서열 12)이고, HCDR2는 AIYEGTGKTVYIQKFAD (서열 16)이며, HCDR3은 LSDYVSGFGY (서열 39)임;
d) LCDR1은 RASRPIDKYLN (서열 8)이고, LCDR2는 YTSEYHS (서열 4)이고, LCDR3은 QQGDALPPT (서열 5)이고, HCDR1은 GYTFGNYWMQ (서열 12)이고, HCDR2는 AIYEGTGKTVYIQKFAG (서열 15)이며, HCDR3은 LSDYVSGFGY (서열 39)임; 및
e) LCDR1은 RASQDIDKYLN (서열 9)이고, LCDR2는 YTSGYHS (서열 7)이고, LCDR3은 QQGDALPPT (서열 5)이고, HCDR1은 GYTFGNYWMQ (서열 12)이고, HCDR2는 AIYEGTGKTVYIQKFAG (서열 15)이며, HCDR3은 LSDYVSGFGY (서열 39)임.
본 발명은 LCDR1은 서열 3이고, LCDR2는 서열 4이고, LCDR3은 서열 5이고, HCDR1은 서열 12이고, HCDR2는 서열 13이며, HCDR3은 서열 14인 LCVR 및 HCVR을 포함하고, 인간 CGRP에 결합하는, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다. 본 발명은 LCDR1은 서열 3이고, LCDR2는 서열 4이고, LCDR3은 서열 5이고, HCDR1은 서열 12이고, HCDR2는 서열 15이며, HCDR3은 서열 14인 LCVR 및 HCVR을 포함하고, 인간 CGRP에 결합하는, 조작된 인간 CGRP 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 본 발명은 LCDR1은 서열 6이고, LCDR2는 서열 7이고, LCDR3은 서열 5이고, HCDR1은 서열 12이고, HCDR2는 서열 16이며, HCDR3은 서열 39인 LCVR 및 HCVR을 포함하고, 인간 CGRP에 결합하는, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다. 본 발명은 LCDR1은 서열 8이고, LCDR2는 서열 4이고, LCDR3은 서열 5이고, HCDR1은 서열 12이고, HCDR2는 서열 15이며, HCDR3은 서열 39인 LCVR 및 HCVR을 포함하고, 인간 CGRP에 결합하는, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다. 본 발명은 LCDR1은 서열 9이고, LCDR2는 서열 7이고, LCDR3은 서열 5이고, HCDR1은 서열 12이고, HCDR2는 서열 15이며, HCDR3은 서열 39인 LCVR 및 HCVR을 포함하고, 인간 CGRP에 결합하는, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다.
본 발명은 LCDR1은 RASX1X2IX3X4YLN (서열 10)이고, LCDR2는 YTSX5YHS (서열 11)이고, LCDR3은 QQGDALPPT (서열 5)이고, HCDR1은 GYTFGNYWMQ (서열 12)이고, HCDR2는 AIYEGTGX6TX7YIQKFAX8 (서열 37)이며, HCDR3은 LSDYVSGFX9Y (서열 38)이고, 식중 X1은 Q, R, 또는 K이고, X2는 D 또는 P이고, X3은 D 또는 S이고, X4는 N 또는 K이고, X5는 G 또는 E이고, X6은 K 또는 D이고, X7은 V 또는 R이고, X8은 D 또는 G이며, X9는 G 또는 S인 LCVR 및 HCVR을 포함하고, 인간 CGRP에 결합하는, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASX1X2IX3X4YLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSX5YHSGVPSRFSGSGSGTDFTX6TISSLQPEDX7ATYYCQQGDALPPTFGX8GTKX9EIK [식중, X1은 Q, K, 또는 R이고, X2는 D 또는 P이고, X3은 D 또는 S이고, X4는 K 또는 N이고, X5는 E 또는 G이고, X6은 F 또는 L이고, X7은 I 또는 F이고, X8은 Q 또는 G이며, X9는 L 또는 V이다] (서열 42)를 포함하는 경쇄 가변 영역 (LCVR) 및 QVQLVQSGAEVKKPGX1SVKVSCKASGYTFGNYWMQWVRQAPGQGLEWMGAIYEGTGX2TX3YIQKFAX4RVTX5TX6DX7STSTX8YMELSSLRSEDTAVYYCARLSDYVSGFX9YWGQGTX10VTVSS [식중, X1 = A 또는 S이고, X2 = K 또는 D이고, X3 = V 또는 R이고, X4 = G 또는 D이고, X5 = M 또는 I이고, X6 = R 또는 A이고, X7 = T 또는 K이고, X8 = V 또는 A이고, X9 = G 또는 S이며, X10 = L 또는 T이다] (서열 43)을 포함하는 중쇄 가변 영역 (HCVR)을 포함하고, 인간 CGRP에 결합하는, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열인 경쇄 가변 영역 (LCVR) 및 중쇄 가변 영역 (HCVR)을 포함하는 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다:
a. LCVR은 서열 17이고 HCVR은 서열 22임;
b. LCVR은 서열 18이고 HCVR은 서열 23임;
c. LCVR은 서열 19이고 HCVR은 서열 24임;
d. LCVR은 서열 20이고 HCVR은 서열 25임; 및
e. LCVR은 서열 21이고 HCVR은 서열 26임.
본 발명은 서열 17의 LCVR 및 서열 22의 HCVR을 포함하는 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 서열 18의 LCVR 및 서열 23의 HCVR을 포함하는 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다. 본 발명은 서열 19의 LCVR 및 서열 24의 HCVR을 포함하는 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다. 본 발명은 서열 20의 LCVR 및 서열 25의 HCVR을 포함하는 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다. 본 발명은 서열 21의 LCVR 및 서열 26의 HCVR을 포함하는 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다.
본 발명은 경쇄 (LC) 및 중쇄 (HC) 아미노산 서열이 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 LC 및 HC를 포함하는 조작된 인간 CGRP 항체를 또한 제공한다:
a) LC는 서열 27이고 HC는 서열 32임;
b) LC는 서열 28이고 HC는 서열 33임;
c) LC는 서열 29이고 HC는 서열 34임;
d) LC는 서열 30이고 HC는 서열 35임; 및
e) LC는 서열 31이고 HC는 서열 36임.
한 실시양태에서, 조작된 인간 CGRP 항체는 서열 27의 LC 및 서열 32의 HC를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 조작된 인간 CGRP 항체는 서열 28의 LC 및 서열 33의 HC를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 조작된 인간 CGRP 항체는 서열 29의 LC 및 서열 34의 HC를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 조작된 인간 CGRP 항체는 서열 30의 LC 및 서열 35의 HC를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 조작된 인간 CGRP 항체는 서열 31의 LC 및 서열 36의 HC를 포함한다. 한 실시양태에서, 조작된 인간 CGRP 항체는 2개의 경쇄 및 2개의 중쇄를 포함하고, 여기서 각각의 LC 아미노산 서열은 서열 27이고 각각의 HC 아미노산 서열은 서열 32이다. 한 실시양태에서, 조작된 인간 CGRP 항체는 2개의 경쇄 및 2개의 중쇄를 포함하고, 여기서 각각의 LC 아미노산 서열은 서열 28이고 각각의 HC 아미노산 서열은 서열 33이다. 한 실시양태에서, 조작된 인간 CGRP 항체는 2개의 경쇄 및 2개의 중쇄를 포함하고, 여기서 각각의 LC 아미노산 서열은 서열 29이고 각각의 HC 아미노산 서열은 서열 34이다. 한 실시양태에서, 조작된 인간 CGRP 항체는 2개의 경쇄 및 2개의 중쇄를 포함하고, 여기서 각각의 LC 아미노산 서열은 서열 30이고 각각의 HC 아미노산 서열은 서열 35이다. 한 실시양태에서, 조작된 인간 CGRP 항체는 2개의 경쇄 및 2개의 중쇄를 포함하고, 여기서 각각의 LC 아미노산 서열은 서열 31이고 각각의 HC 아미노산 서열은 서열 36이다. 본 발명은 본원에 기술된 항체들의 항원-결합 단편을 또한 제공한다.
본 발명은 본질적으로 실시예 4에 기술된 바와 같은 검정법에서 IC50이 1.0 nM 미만인 조작된 인간 CGRP 항체를 또한 제공한다. 한 실시양태에서, 본 발명은 LCDR1은 서열 6이고, LCDR2는 서열 7이고, LCDR3은 서열 5이고, HCDR1은 서열 12이고, HCDR2는 서열 16이며, HCDR3은 서열 39인 LCVR 및 HCVR을 포함하고, 인간 CGRP에 결합하고 또한 본질적으로 실시예 4에 기술된 바와 같은 검정법에서 IC50이 1.0 nM 미만인, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다. 한 실시양태에서, 본 발명은 서열 19의 LCVR 아미노산 서열 및 서열 24의 HCVR 아미노산 서열을 포함하고, 본질적으로 실시예 4에 기술된 바와 같은 검정법에서 IC50이 1.0 nM 미만인, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다. 한 실시양태에서, 본 발명은 서열 29의 LC 아미노산 서열 및 서열 34의 HC 아미노산 서열을 포함하고, 본질적으로 실시예 4에 기술된 바와 같은 검정법에서 IC50이 1.0 nM 미만인, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다.
본 발명은 본질적으로 실시예 4에 기술된 바와 같은 검정법에서 IC50이 0.5 nM 미만인 조작된 인간 CGRP 항체를 또한 제공한다. 한 실시양태에서, 본 발명은 LCDR1은 서열 6이고, LCDR2는 서열 7이고, LCDR3은 서열 5이고, HCDR1은 서열 12이고, HCDR2는 서열 16이며, HCDR3은 서열 39인 LCVR 및 HCVR을 포함하고, 인간 CGRP에 결합하고 또한 본질적으로 실시예 4에 기술된 바와 같은 검정법에서 IC50이 0.5 nM 미만인, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다. 한 실시양태에서, 본 발명은 서열 19의 LCVR 아미노산 서열 및 서열 24의 HCVR 아미노산 서열을 포함하고, 본질적으로 실시예 4에 기술된 바와 같은 검정법에서 IC50이 0.5 nM 미만인, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다. 한 실시양태에서, 본 발명은 서열 29의 LC 아미노산 서열 및 서열 34의 HC 아미노산 서열을 포함하고, 본질적으로 실시예 4에 기술된 바와 같은 검정법에서 IC50이 0.5 nM 미만인, 조작된 인간 CGRP 항체를 제공한다.
본 발명은 본 발명의 조작된 인간 CGRP 항체 또는 그의 항원-결합 단편 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 또한 제공한다. 본 발명은 본 발명의 CGRP 항체를 제약상 허용되는 담체와 함께 포함하고 임의적으로 기타 치료 성분을 포함하는 제약 조성물을 추가로 제공한다.
추가적인 측면에서, 본 발명은 골관절염 통증의 치료를 필요로 하는 환자에게 본 발명의 조작된 인간 CGRP 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 골관절염 통증의 치료 방법을 제공한다. 또 다른 측면에서, 본 발명은 편두통의 치료를 필요로 하는 환자에게 본 발명의 조작된 인간 CGRP 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 편두통의 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 요법에서 사용하기 위한 본 발명의 조작된 인간 CGRP 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 또한 제공한다. 또 다른 측면에서, 본 발명은 골관절염 통증의 치료를 위한 본 발명의 조작된 인간 CGRP 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 추가적인 측면에서, 본 발명은 편두통의 치료를 위한 본 발명의 조작된 인간 CGRP 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 발명은 본 발명의 조작된 인간 CGRP 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 골관절염 통증 치료에서 사용하기 위한 용도를 또한 제공한다. 또 다른 측면에서, 본 발명은 본 발명의 조작된 인간 CGRP 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 편두통 치료에서 사용하기 위한 용도를 또한 제공한다. 본 발명은 조작된 인간 CGRP 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 골관절염 치료를 위한 의약의 제조에서의 용도를 또한 제공한다. 본 발명은 조작된 인간 CGRP 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 편두통의 치료를 위한 의약의 제조에서의 용도를 또한 제공한다.
천연적으로 존재하는 바와 같은 전장 항체는 디술피드 결합에 의해 서로 연결된 2개의 중쇄 (H) 및 2개의 경쇄 (L)를 포함하는 이뮤노글로불린 분자이다. 각각의 사슬의 아미노 말단 부분은 내부에 함유된 상보성 결정 영역 (CDR)들을 통해 항원 인식을 주로 담당하는 아미노산 약 100-110개 이상의 가변 영역을 포함한다. 각각의 사슬의 카르복시-말단 부분은 이펙터 기능을 주로 담당하는 불변 영역을 규정한다.
CDR들에는 프레임워크 영역 (FR)으로 칭해지는 더욱 보존된 영역들이 산재된다. 각각의 경쇄 가변 영역 (LCVR) 및 중쇄 가변 영역 (HCVR)은 아미노 말단에서 카르복시 말단으로 FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4의 순서로 정렬된 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성된다. 경쇄의 3개의 CDR은 "LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3"으로 지칭되고, 중쇄의 3개의 CDR은 "HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3"으로 지칭된다. CDR들은 항원과의 특이적 상호작용을 형성하는 잔기 대부분을 함유한다. LCVR 및 HCVR 영역 내의 CDR 아미노산 잔기들의 번호매김 및 배치는 주지된 카바트(Kabat) 번호매김 관행에 따른다.
경쇄는 카파 또는 람다로 분류되고, 당업계에 공지된 바와 같은 특정 불변 영역을 특징으로 한다. 중쇄는 감마, 뮤, 알파, 델타 또는 엡실론으로 분류되고, 항체의 아이소타입(isotype)을 각각 IgG, IgM, IgA, IgD, 또는 IgE로 규정한다. IgG 항체는 서브클래스, 예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4로 추가로 분류될 수 있다. 각각의 중쇄 유형은 당업계에 주지된 서열의 특정한 불변 영역을 특징으로 한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "모노클로날 항체" (Mab)는 임의의 진핵생물, 원핵생물 또는 파지 클론이 예를 들어 포함되는 단일 카피 또는 클론으로부터 유래된 항체를 지칭하고, 이러한 항체가 생산되는 방법을 지칭하지 않는다. 바람직하게는, 본 발명의 Mab는 균질한 또는 실질적으로 균질한 집단 내에 존재한다. 완전한 Mab는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 함유한다. 이같은 모노클로날 항체의 "항원-결합 단편"에는, 예를 들어, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, 및 단일쇄 Fv 단편이 포함된다. 본 발명의 모노클로날 항체 또는 그의 항원-결합 단편은, 예를 들어, 재조합 기술, 파지 디스플레이 기술, 합성 기술, 예를 들어, CDR-그래프팅(grafting), 또는 이같은 기술들의 조합, 또는 당업계에 공지된 기타 기술에 의해 생산될 수 있다. 예를 들어, 마우스를 인간 CGRP 또는 그의 단편으로 면역화시킬 수 있고, 생성된 항체들을 회수 및 정제할 수 있으며, 이들이 본원에 개시된 항체 화합물과 유사하거나 동일한 결합 및 기능성 성질을 보유하는지 여부의 결정을 하기 실시예에 개시된 방법에 의해 평가할 수 있다. 항원-결합 단편을 통상적인 방법에 의해 또한 제조할 수 있다. 항체 및 항원-결합 단편의 생산 및 정제를 위한 방법들이 당업계에 주지되어 있고, 예를 들어, 문헌 [Harlow and Lane (1988) Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, chapters 5-8 and 15, ISBN 0-87969-314-2]에서 확인할 수 있다.
"조작된 인간 CGRP 항체"라는 구절은 본 발명에 따른 결합 및 기능성 성질을 갖고, 인간 CGRP에 결합하며, 비-인간 항체로부터 유래된 CDR을 둘러싸는 실질적으로 인간의 것이거나 완전히 인간의 것인 프레임워크 영역이 있도록 생성 및/또는 조작된 모노클로날 항체를 지칭한다. 이같은 조작된 인간 항체의 "항원-결합 단편"에는, 예를 들어, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, 및 단일쇄 Fv 단편이 포함된다. "프레임워크 영역" 또는 "프레임워크 서열"은 프레임워크 영역 1 내지 4 중 임의의 하나를 지칭한다. 본 발명에 포함되는 조작된 인간 항체 및 그의 항원-결합 단편에는 프레임워크 영역 1 내지 4 중 임의의 하나 이상이 실질적으로 또는 완전히 인간의 것인, 즉 개별적인 실질적으로 또는 완전히 인간의 것인 프레임워크 영역 1 내지 4의 가능한 조합 중 임의의 것이 존재하는 분자가 포함된다. 예를 들어, 여기에는 프레임워크 영역 1 및 프레임워크 영역 2, 프레임워크 영역 1 및 프레임워크 영역 3, 프레임워크 영역 1, 2 및 3 등이 실질적으로 또는 완전히 인간의 것인 분자가 포함된다. 실질적으로 인간의 것인 프레임워크는 공지된 인간 배선 프레임워크 서열에 대한 서열 동일성이 적어도 약 80％인 것이다. 바람직하게는, 실질적으로 인간의 것인 프레임워크는 공지된 인간 배선 프레임워크 서열에 대한 서열 동일성이 적어도 약 85％, 약 90％, 약 95％ 또는 약 99％이다.
완전히 인간의 것인 프레임워크는 공지된 인간 배선 프레임워크 서열과 동일한 것이다. 인간 프레임워크 배선 서열은 이뮤노제네틱스(ImMunoGeneTics) (IMGT)로부터 그의 웹사이트 http://imgt.cines.fr을 통해, 또는 문헌 [The Immunoglobulin FactsBook by Marie-Paule Lefranc and Gerard Lefranc, Academic Press, 2001, ISBN 012441351]로부터 수득할 수 있다. 예를 들어, 배선 경쇄 프레임워크가 A11, A17, A18, A19, A20, A27, A30, L1, L11, L12, L2, L5, L15, L6, L8, O12, O2, 및 O8로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고, 배선 중쇄 프레임워크 영역이 VH2-5, VH2-26, VH2-70, VH3-20, VH3-72, VHI-46, VH3-9, VH3-66, VH3-74, VH4-31, VHI-18, VHI-69, VI-13-7, VH3-11, VH3-15, VH3-21, VH3-23, VH3-30, VH3-48, VH4-39, VH4-59, 및 VH5-51로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
본원에 개시된 것들에 더하여, 본 발명에 따른 유사한 기능적 성질을 나타내는 조작된 인간 항체가 여러 상이한 방법을 사용하여 생성될 수 있다. 본원에 개시된 특정 항체 화합물이 추가적인 항체 화합물을 제조하기 위한 주형 또는 모(parent) 항체 화합물로서 사용될 수 있다. 한 접근법에서, 모 항체 화합물의 CDR들이 모 항체 화합물 프레임워크와의 서열 동일성이 높은 인간 프레임워크 내로 그래프팅된다. 새로운 프레임워크의 서열 동일성은 모 항체 화합물 내의 상응하는 프레임워크의 서열에 대해 일반적으로 적어도 약 80％, 적어도 약 85％, 적어도 약 90％, 적어도 약 95％, 또는 적어도 약 99％ 동일할 것이다. 이러한 그래프팅은 모 항체의 것과 비교하여 결합 친화도에서의 감소를 초래할 수 있다. 그러한 경우, 프레임워크가 문헌 [Queen et al. (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:2869]에 개시된 특정 규범을 기초로 특정 위치에서 모 프레임워크로 역-돌연변이될 수 있다. 마우스 항체를 인간화시키는데 유용한 방법이 기술되어 있는 추가적인 참고문헌에는 미국 특허 번호 4,816,397; 5,225,539, 및 5,693,761; 문헌 [Levitt (1983) J. Mol. Biol. 168:595-620]에 기술되어 있는 바와 같은 컴퓨터 프로그램 ABMOD 및 ENCAD; 및 윈터(Winter) 및 공동 작업자들의 방법 (문헌 [Jones et al. (1986) Nature 321:522-525]; [Riechmann et al. (1988) Nature 332:323-327]; 및 [Verhoeyen et al. (1988) Science 239:1534-1536])이 포함된다.
역-돌연변이에 고려되는 잔기의 확인을 하기와 같이 수행할 수 있다:
아미노산이 하기의 카테고리에 포함되는 경우, 사용될 인간 배선 서열 ("어셉터(acceptor) 프레임워크")의 프레임워크 아미노산이 모 항체 화합물의 프레임워크 ("도너 프레임워크")로부터의 프레임워크 아미노산으로 교체된다:
(a) 어셉터 프레임워크의 인간 프레임워크 영역 내의 아미노산은 이러한 위치에서 인간 프레임워크에 대해 일상적이지 않은 한편, 도너 이뮤노글로불린 내의 상응하는 아미노산은 이러한 위치에서 인간 프레임워크에 대해 전형적임;
(b) 아미노산의 위치가 CDR들 중 하나에 바로 인접함; 또는
(c) 프레임워크 아미노산의 임의의 측쇄 원자가 3차원 이뮤노글로불린 모델에서 CDR 아미노산의 임의의 원자로부터 약 5-6 옹스트롬 (중심 대 중심) 이내에 있음.
어셉터 프레임워크의 인간 프레임워크 영역 내의 각각의 아미노산 및 도너 프레임워크 내의 상응하는 아미노산이 이러한 위치에서 인간 프레임워크에 대해 일반적으로 일상적이지 않은 경우, 이같은 아미노산이 이러한 위치에서 인간 프레임워크에 대해 전형적인 아미노산으로 교체될 수 있다. 이러한 역-돌연변이 규범은 모 항체 화합물의 활성을 회복할 수 있게 한다.
본원에 개시된 항체 화합물과 유사한 기능적 성질을 나타내는 조작된 인간 항체를 생성시키는 또다른 접근법은 그래프팅된 CDR 내의 아미노산을 프레임워크를 변화시키지 않으면서 무작위로 돌연변이시키는 단계, 및 생성된 분자를 모 항체 화합물의 것만큼 양호하거나 또는 이보다 더 양호한 결합 친화도 및 기타 기능적 성질에 대해 스크리닝하는 단계를 수반한다. 또한 각각의 CDR 내의 각각의 아미노산 위치에 단일 돌연변이가 도입된 후, 결합 친화도 및 기타 기능적 성질에 대한 이같은 돌연변이의 효과를 평가할 수 있다. 성질 개선을 일으키는 단일 돌연변이들을 조합하여, 서로 조합되었을 때의 이들의 효과를 평가할 수 있다.
추가로, 상기 접근법들 양쪽 모두의 조합이 가능하다. CDR 그래프팅 후, CDR 내에 아미노산 변화를 도입하는 것에 더하여 특정 프레임워크 영역을 역-돌연변이시킬 수 있다. 이러한 방법론이 문헌 [Wu et al. (1999) J. Mol. Biol. 294:151-162]에 기술되어 있다.
본 발명의 교시내용을 적용할 때, 당업자는 본원에서 개시된 CDR 및 프레임워크 서열 내의 아미노산을 치환하고, 이에 의해 모 서열로부터 유래된 추가적인 가변 영역 아미노산 서열을 생성시키기 위해 통상적인 기술, 예를 들어, 부위-지정 돌연변이유발을 사용할 수 있다. 모든 대안적인 천연 발생 아미노산이 특정 치환 부위에서 도입될 수 있다. 이어서, 지시된 생체내 기능이 있는 서열을 확인하기 위해 이러한 추가적인 가변 영역 아미노산 서열들을 스크리닝하는데 본원에 개시된 방법이 사용될 수 있다. 이러한 방식으로, 본 발명에 따른 조작된 인간 항체 및 그의 항원-결합 부분을 제조하는데 적절한 추가적인 서열을 확인할 수 있다. 바람직하게는, 프레임워크 내에서의 아미노산 치환이 본원에 개시된 4개의 경쇄 및/또는 중쇄 프레임워크 영역 중 임의의 하나 이상 내의 1개, 2개 또는 3개의 위치에 제한된다. 바람직하게는, CDR 내에서의 아미노산 치환이 3개의 경쇄 및/또는 중쇄 CDR 중 임의의 하나 이상 내의 1개, 2개 또는 3개의 위치에 제한된다. 상기 기술된 이러한 프레임워크 영역 및 CDR 내에서의 다양한 변화들의 조합이 또한 가능하다.
용어 "치료하기" (또는 "치료하다" 또는 "치료")는 증상, 장애, 병태 또는 질환의 진행 또는 중증도를 느리게 하거나, 중단시키거나, 저지하거나, 제어하거나, 정지시키거나, 감소시키거나 또는 역전시키는 것을 수반하는 프로세스를 지칭하지만, CGRP 활성과 연관된 모든 질환-관련 증상, 병태 또는 장애의 완전한 제거를 반드시 수반하지는 않는다.
본원에서 사용된 바와 같이 용어 "편두통"은 국제 두통 학회(International Headache Society)의 두통 분류 위원회(Headache Classification Committee) (문헌 [International Headache Society, 2004])에 따른 "전조가 없는 편두통" (기존의 "일반 편두통") 및 "전조가 있는 편두통" (기존의 "고전적 편두통")을 지칭한다. 예를 들어, "전조가 없는 편두통"은, 전형적으로, 박동 속성, 중등도 또는 중증 강도를 갖는 것을 특징으로 할 수 있고, 일상적인 신체 활동에 의해 악화되며, 편층성으로 위치하고, 구역, 및 광선공포증 및 소리공포증과 연관된다. "전조가 있는 편두통"은 시야 교란, 기타 감각 교란, 편측성 약화를 포함할 수 있고, 일부 경우에는 언어 장애를 포함할 수 있다.
본 발명의 조작된 인간 항체는 다양한 경로로 투여되는 인간 의학에서의 약제로서 사용될 수 있다. 가장 바람직하게는, 이같은 조성물은 비경구 투여용이다. 이같은 제약 조성물은 당업계에 주지된 방법에 의해 제조될 수 있고 (예를 들어, 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th ed. (1995), A. Gennaro et al., Mack Publishing Co.] 참조), 본원에 개시된 바와 같은 조작된 인간 항체 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함한다.
하기 검정법들의 결과는 예시된 본 발명의 모노클로날 항체 및 그의 항원-결합 단편이 골관절염 통증을 치료하기 위해 사용될 수 있음을 실연한다.
실시예 1 - 항체 생산
항체 I-V를 하기와 같이 제조 및 정제할 수 있다. 적합한 숙주 세포, 예컨대 HEK 293 EBNA 또는 CHO를 최적의 미리 정해진 HC:LC 벡터 비, 또는 LC, 예컨대 서열 27, 서열 28, 서열 29, 서열 30 또는 서열 31, 및 HC, 예컨대 서열 32, 서열 33, 서열 34, 서열 35 또는 서열 36 양쪽 모두를 코딩하는 단일 벡터 시스템을 사용하여 항체 분비를 위한 발현 시스템으로 일시적으로 또는 안정적으로 형질감염시켰다. 항체가 분비된 정화 배지를 다수의 통상적으로 사용되는 기술 중 임의의 것을 사용하여 정제하였다. 예를 들어, 편리하게 배지를 혼화성 완충제, 예컨대 포스페이트 완충 염수 (pH 7.4)로 평형화된 단백질 A 또는 G 세파로스 FF 칼럼에 적용할 수 있었다. 칼럼을 세정하여 비-특이적 결합 성분을 제거하였다. 결합된 항체를, 예를 들어, pH 구배 (예컨대 0.1 M 인산나트륨 완충제 pH 6.8 → 0.1 M 시트르산나트륨 완충제 pH 3.0)에 의해, 용리시켰다. 항체 분획을, 예컨대 SDS-PAGE에 의해, 검출한 후, 풀링(pooling)하였다. 의도되는 용도에 따라, 추가적인 정제가 선택적이었다. 통상적인 기술을 사용하여 항체를 농축 및/또는 멸균 여과할 수 있었다. 크기 배제, 소수성 상호작용, 이온 교환 또는 히드록시아파타이트 크로마토그래피가 포함되는 통상적인 기술에 의해 가용성 응집물 및 다량체를 효과적으로 제거할 수 있었다. 이러한 크로마토그래피 단계들 후의 항체의 순도는 99％를 초과하였다. 생성물을 즉각적으로 -70℃에서 동결시키거나 또는 동결건조시킬 수 있었다. 이러한 예시된 항체들에 대한 아미노산 서열이 하기에서 제공된다.
Figure pct00001
실시예 2: 조작된 인간 CGRP 항체에 대한 친화도 ( Kd ) 측정
예시된 항체들의 CGRP에 대한 결합 친화도를 HBS-EP+ (지이 헬스케어(GE Healthcare), 10 mM Hepes pH 7.4 + 150 mM NaCl + 3 mM EDTA + 0.05％ 계면활성제 P20) 러닝(running) 완충제로 프라이밍(priming)된 비아코어(Biacore) T100 기기 상에서의 표면 플라즈몬 공명 검정법 및 37℃로 설정된 분석 온도를 사용하여 결정하였다. 모든 4개의 유동 셀(flow cell) (Fc) 상의 고정된 단백질 A를 함유하는 CM5 칩 (표준 NHS-EDC 아민 커플링을 사용하여 생성됨)이 포획 방법을 이용하는데 사용되었다. 항체 샘플을 러닝 완충제 내로의 희석에 의해 2 ㎍/㎖로 제조하였다. 인간 CGRP 샘플을 러닝 완충제 내로의 희석에 의해 5.0, 2.5, 1.3, 0.63, 0.31, 및 0 (공백) nM의 최종 농도로 제조하였다. 신선한 1회용 분취량의 CGRP를 각각의 사본 실험에 사용하여 다중 동결-해동 사이클을 방지하였다. 각각의 분석 사이클은 (1) 개개의 유동 셀 (Fc2, Fc3, 및 Fc4) 상에서 항체 샘플을 포획함, (2) 100 ㎕/분으로 모든 Fc에 350 ㎕ (210초)의 CGRP를 주입함, (3) 10분 동안 완충제 유동으로 복귀하여 해리 단계를 모니터링함, (4) 5 ㎕ (15초)의 글리신, pH 1.5의 주입으로 칩 표면을 재생시킴, (5) 5 ㎕ (15초)의 HBS-EP+의 주입으로 칩 표면을 평형화시킴으로 이루어졌다. 각각의 CGRP 농도를 이중으로 주입하였다. 데이터를 표준 더블-레퍼런싱(double-referencing)을 사용하여 프로세싱하고, 비아코어 T100 평가 소프트웨어, 버전 2.0.1을 사용하여 1:1 결합 모델에 맞춰서, 회합 속도 (k온( on ), M-1s-1 단위), 해리 속도 (k오프 ( off ), s-1 단위), 및 R최대(max) (RU 단위)를 결정하였다. 평형 해리 상수 (KD)를 관계식 KD = k오프/k온으로부터 계산하였고, 이는 몰 단위이다. 표 2에서 제공되는 값은 n회의 실험의 평균이다. 표 2는 예시된 본 발명의 항체들이 < 200 pM의 친화도로 CGRP에 결합한다는 것을 나타낸다.
Figure pct00002
실시예 3 - MIA 모델에서의 통증 감소
모노아이오도아세트산 (MIA)을 래트의 무릎 관절 내로 주사하면 급성 염증성 상해를 일으키고, 그 후 이는 주사 관절에서 관절 조직의 만성 퇴행으로 발달된다. 이러한 관절 손상으로부터 초래되는 통증을 인커패시턴스(incapacitance) 시험기를 사용하여 뒷다리의 차별적인 중량 부하를 통해 측정할 수 있다. MIA 모델은 문헌에 잘 기술되어 있고, 다양한 메커니즘 및 화합물에 대해 통증에 대한 효능을 실연하도록 사용되었다. 중량 분포를 부분적으로 정상화하는 화합물의 능력에 의해 효능이 일상적으로 측정된다.
통증을 감소시키는 예시된 본 발명의 항체들의 능력을 결정하기 위해, MIA 주사 시점에 약 8주령인 수컷 루이스(Lewis) 래트 (할란(Harlan), 인디애나주 인디애나폴리스)를 사용하였다. 래트를 우리 당 2마리 또는 3마리의 군으로 거주시키고, 일정한 온도 및 12시간 밝음/12시간 어두움의 주기에서 유지시켰다. 데이터 수집 동안을 제외하고는 항상 동물이 음식 및 물에 자유롭게 접근하였다. 모든 실험을 일라이 릴리(Eli Lilly)의 동물 실험 윤리 위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)가 허가한 프로토콜에 따라 수행하였다.
제0일에 각각의 래트의 오른쪽 무릎에는 50 ㎕의 염수 내의 0.3 ㎎ MIA을, 왼쪽 무릎에는 50 ㎕의 염수를 주사하였다. MIA 후의 설정된 날에, PBS 내의 인간 IgG4 대조군 또는 시험 CGRP 항체를 피하 주사하였다 (n= 군 당 6마리). 시험 CGRP 항체를 투약한 지 3일 후에, MIA로 처리된 무릎과 염수가 주사된 무릎 사이의 뒷발 중량 부하에서의 차이를 측정하는 인커패시턴스 시험을 사용하여 통증을 측정하였다. 각각의 측정치는 각각 1초에 걸쳐 측정된 3회의 별도의 측정치의 평균이다.
CGRP 항체로 처리된 군의 평균을 대조군 항체 군의 평균으로 나누고, 1에서 이러한 값을 빼고, 이렇게 생성된 값에 100을 곱함으로써 계산된 통증의 백분율 억제로서 데이터가 제시된다. CGRP로 처리된 군을 평균의 일원 분석 및 던넷(Dunnett) 검정 (JMP (버전 5.1 및 6) 통계 분석 프로그램 (SAS 인스티튜트 인크.(SAS Institute Inc.), 노스캐롤라이나주 캐리)을 사용함)에 의해 비히클 군에 대해 또한 비교하였다. P 값이 0.05 미만이면 차이를 유의한 것으로 간주하였다. 표 3에 나타난 바와 같이, 데이터는 예시된 본 발명의 CGRP 항체들이 통증을 유의하게 감소시킨다는 것을 나타낸다.
Figure pct00003
실시예 4 - SK -N- MC 세포에서의 CGRP 에 의해 유도된 cAMP 형성의 억제
본 발명의 항체의 능력을 항체 G1 (LCVR - 서열 40 및 HCVR - 서열 41)과 비교하기 위해, SK-N-MC에서의 CGRP에 의해 유도된 cAMP 형성의 억제를 결정하였다. CGRP가 그의 수용체에 결합하면 cAMP 생산의 자극이 초래된다. CGRP 수용체는 칼시토닌 수용체-유사 수용체 (CLR, G-단백질이 커플링된 수용체) 및 수용체 활성 변형 단백질 (RAMP)-1이 세포질에서 수용체 성분 단백질 (RCP)에 커플링되어 이루어지는 이종삼량체성 복합체이다. 인간 신경상피종 세포주 SK-N-MC는 이러한 3가지 분자를 천연적으로 발현하고, 따라서 신호 전달 이벤트에 대한 CGRP의 효과를 평가하는데 사용될 수 있다. cAMP 생산은 G-단백질이 커플링된 수용체의 활성화에 대한 표준 척도이다.
SK-N-MC 세포를 10％ FBS, 1× MEM 비-필수 아미노산, 1× 100 mM MEM 피루브산나트륨, 1× 페니실린/스트렙토마이신, 및 2 mM L-글루타민을 함유하는 MEM에서 배양하였다. 수확 후, 세포를 1회 세정하고, 검정법 완충제 (최종 농도 0.5 mM의 IBMX를 함유하는 둘베코(Dulbecco) PBS로 1:2 희석된 자극 완충제 (HBSS + Mg 및 Ca, 5 mM HEPES, 0.1 ％ BSA, 100 uM 아스코르브산))에 재현탁시키고, 96웰 플레이트에 웰 당 15,000개의 세포로 플레이팅하였다. 시험 항체 또는 대조군 인간 IgG4 항체를 세포에 첨가하고 (검정법 완충제에서의 일련의 4배 희석, 10가지 농도), 이어서 고정된 양의 인간 α-CGRP (2 nM; 바켐(Bachem) H1470)를 첨가하였다. 플레이트를 1시간 동안 실온에서 인큐베이션하였다. cAMP 수준을 균일 시간 분해 형광 (HTRF) 검정법 시스템 (시스바이오(Cisbio))에 의해 측정하였다.
다양한 농도의 항체의 존재 하에 2 nM 인간 CGRP에 의해 유도된 cAMP의 양을 CGRP 단독에 비교된 백분율 억제로서 계산하였다. 그 후, cAMP 생산의 50％ 억제를 일으킨 항체 농도 (IC50)을 4-파라미터 곡선 맞춤 모델로부터 계산하였다. 본원에 기술된 바와 같은 절차에 따라, 항체 III (0.41 nM의 IC50)이 CGRP에 의해 유도된 cAMP의 양을 항체 G1 (5.36 nM의 IC50)보다 훨씬 더 큰 정도로 억제하였고, 이는 아마도 항체 III의 더 빠른 K온 속도 (비아코어에 의해 측정된 바와 같은 K온 속도)때문일 것이다.
실시예 5 - 래트 경막 혈장 단백질 혈관외유출 ( PPE ) 모델
래트 PPE 모델은 편두통 치료에 대한 항-CGRP 항체의 효능을 평가하는데 사용될 수 있는 잘 확립되어 있는 전임상 모델이다.
항-CGRP 항체 (Ab)의 2 ㎎/㎖ 용액을 염수 용액에서 제조하였다. 모든 후속 희석물을 염수로 제조하였다. 모노클로날 아이소타입 대조군 항체 (IgG)의 2 ㎎/㎖ 용액을 염수에서 또한 제조하였다.
할란 래버러토리즈(Harlan Laboratories)로부터의 수컷 스프라그-돌리(Sprague-Dawley) 래트 (250 내지 350 g)를 넴부탈(Nembutal) (60 ㎎/㎏, 복막내)로 마취하고, 정위(stereotaxic) 프레임 (데이비드 코프 인스트루먼츠(David Kopf Instruments)) 내에 놓았고, 여기서 앞니 바(incisor bar)를 -2.5 ㎜로 설정하였다. 중간선 시상 두피 절개 후, 2쌍의 양측성 구멍을 두개골을 관통하여 천공하였다 (후방으로 3.2 ㎜, 측면으로 1.8 및 3.8 ㎜, 모든 좌표는 정수리점을 기준으로 함). 스테인레스 스틸 자극 전극쌍 (로데스 메디컬 시스템즈 인크(Rhodes Medical Systems Inc)) (끝부분을 제외하고는 절연됨)을 양쪽 뇌반구 내의 구멍을 통해 경막 아래로 9.2 ㎜의 깊이로 내렸다. 시험 항체 또는 염수 비히클을 대퇴 정맥을 통해 정맥 내로 투여하였다 (1 ㎖/㎏). 8분 후, 플루오레세인 이소티오시아네이트 (FITC) 염료로 표지된 소 혈청 알부민 (BSA) (FITC-BSA, 시그마(Sigma) A9771)의 용액 (20 ㎎/㎏, 정맥내)을 대퇴 정맥 내로 주사하여, 단백질 혈관외유출에 대한 마커로 기능하게 하였다. 시험 항체 또는 비히클을 투약하고 나서 10분 후, 왼쪽 삼차 신경절을 그래스 인스트루먼트(Grass Instrument)의 S48 모델 자극기로 1.0 mA (5 Hz, 5 ms 기간)의 전류 강도로 5분 동안 자극하였다. 자극하고 나서 5분 후, 래트를 40 ㎖의 염수로의 실혈에 의해 사망시켰다. 이러한 실혈은 또한 잔류 FITC/BSA를 혈관 밖으로 헹궈냈다. 두개골 상부를 제거하여 경막을 수집하였다. 막 샘플을 양쪽 뇌반구로부터 제거하고, 물로 헹구고, 현미경 슬라이드 상에 편평하게 폈다. 슬라이드를 15분 동안 슬라이드 가온기 상에서 건조시키고, 70％ 글리세롤/물 용액과 함께 커버-슬립을 덮었다.
격자형 모노크로메이터(monochromator) 및 분광광도계가 장착된 형광 현미경 (짜이스(Zeiss))을 사용하여 각각의 경막 샘플 내의 FITC-BSA 염료의 양을 정량하였다. 퍼스널 컴퓨터에 인터페이스로 연결된 전동 스테이지가 현미경에 장착되었다. 이는 스테이지를 컴퓨터로 제어하여 움직이는 것을 용이하게 하고, 여기서 각각의 경막 샘플 상에서 25개의 포인트 (500 ㎛ 간격)에서 형광이 측정되었다. 삼차 신경절의 전기 자극에 의해 유도된 혈관외유출은 동측성 효과이다 (즉, 삼차 신경절이 자극된 경막 측에서만 일어난다). 이는 경막의 다른 쪽 (자극되지 않은) 절반이 대조군으로서 사용될 수 있게 하였다. 혈관외유출 비 (즉, 자극되지 않은 측에 비교된 자극된 측으로부터의 경막 내의 혈관외유출의 양의 비)를 계산하였다.
서열
Figure pct00004
[식중,
X1은 Q, R 또는 K이고;
X2는 D 또는 P이고;
X3은 D 또는 S이고;
X4는 N 또는 K이며;
X5는 G 또는 E이다]
Figure pct00005
[식중,
X6은 K 또는 D이고;
X7은 V 또는 R이고;
X8은 D 또는 G이며;
X9는 G 또는 S이다]
Figure pct00006
Figure pct00007
Figure pct00008
Figure pct00009
[식중,
X1 = Q, K, 또는 R이고;
X2 = D 또는 P이고;
X3 = D 또는 S이고;
X4 = K 또는 N이고;
X5 = E 또는 G이고;
X6 = F 또는 L이고;
X7 = I 또는 F이고;
X8 = Q 또는 G이며;
X9 = L 또는 V이다] (서열 42)
Figure pct00010
[식중,
X1 = A 또는 S이고;
X2 = K 또는 D이고;
X3 = V 또는 R이고;
X4 = G 또는 D이고;
X5 = M 또는 I이고;
X6 = R 또는 A이고;
X7 = T 또는 K이고;
X8 = V 또는 A이고;
X9 = G 또는 S이며;
X10 = L 또는 T이다] (서열 43)
SEQUENCE LISTING <110> Eli Lilly and Company <120> CGRP ANTIBODIES <130> X-18827 <150> 61/353323 <151> 2010-06-10 <160> 43 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 37 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 1 Ala Cys Asp Thr Ala Thr Cys Val Thr His Arg Leu Ala Gly Leu Leu 1 5 10 15 Ser Arg Ser Gly Gly Val Val Lys Asn Asn Phe Val Pro Thr Asn Val 20 25 30 Gly Ser Lys Ala Phe 35 <210> 2 <211> 37 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 2 Ala Cys Asn Thr Ala Thr Cys Val Thr His Arg Leu Ala Gly Leu Leu 1 5 10 15 Ser Arg Ser Gly Gly Met Val Lys Ser Asn Phe Val Pro Thr Asn Val 20 25 30 Gly Ser Lys Ala Phe 35 <210> 3 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 3 Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asn Tyr Leu Asn 1 5 10 <210> 4 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 4 Tyr Thr Ser Glu Tyr His Ser 1 5 <210> 5 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence 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Claims (31)

  1. 경쇄 가변 영역 (LCVR) 및 중쇄 가변 영역 (HCVR)을 포함하고, 인간 CGRP에 결합하며, 여기서 LCVR이 LCDR1, LCDR2, LCDR3 아미노산 서열을 포함하고, HCVR이 HCDR1, HCDR2, HCDR3 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 LCDR1이 서열 10이고, LCDR2가 서열 11이고, LCDR3이 서열 5이고, HCDR1이 서열 12이고, HCDR2가 서열 37이고, HCDR3이 서열 38인, 조작된 인간 CGRP 항체.
  2. 제1항에 있어서, LCDR1이 RASQDIDNYLN (서열 3)이고, LCDR2가 YTSEYHS (서열 4)이고, LCDR3이 QQGDALPPT (서열 5)이고, HCDR1이 GYTFGNYWMQ (서열 12)이고, HCDR2가 AIYEGTGDTRYIQKFAG (서열 13)이며, HCDR3이 LSDYVSGFSY (서열 14)인 조작된 인간 CGRP 항체.
  3. 제1항에 있어서, LCDR1이 RASQDIDNYLN (서열 3)이고, LCDR2가 YTSEYHS (서열 4)이고, LCDR3이 QQGDALPPT (서열 5)이고, HCDR1이 GYTFGNYWMQ (서열 12)이고, HCDR2가 AIYEGTGKTVYIQKFAG (서열 15)이며, HCDR3이 LSDYVSGFSY (서열 14)인 조작된 인간 CGRP 항체.
  4. 제1항에 있어서, LCDR1이 RASKDISKYLN (서열 6)이고, LCDR2가 YTSGYHS (서열 7)이고, LCDR3이 QQGDALPPT (서열 5)이고, HCDR1이 GYTFGNYWMQ (서열 12)이고, HCDR2가 AIYEGTGKTVYIQKFAD (서열 16)이며, HCDR3이 LSDYVSGFGY (서열 39)인 조작된 인간 CGRP 항체.
  5. 제1항에 있어서, LCDR1이 RASRPIDKYLN (서열 8)이고, LCDR2가 YTSEYHS (서열 4)이고, LCDR3이 QQGDALPPT (서열 5)이고, HCDR1이 GYTFGNYWMQ (서열 12)이고, HCDR2가 AIYEGTGKTVYIQKFAG (서열 15)이며, HCDR3이 LSDYVSGFGY (서열 39)인 조작된 인간 CGRP 항체.
  6. 제1항에 있어서, LCDR1이 RASQDIDKYLN (서열 9)이고, LCDR2가 YTSGYHS (서열 7)이고, LCDR3이 QQGDALPPT (서열 5)이고, HCDR1이 GYTFGNYWMQ (서열 12)이고, HCDR2가 AIYEGTGKTVYIQKFAG (서열 15)이며, HCDR3이 LSDYVSGFGY (서열 39)인 조작된 인간 CGRP 항체.
  7. 제1항에 있어서, LCVR 아미노산 서열이 서열 42이고, HCVR 아미노산 서열이 서열 43인 조작된 인간 CGRP 항체.
  8. 제2항에 있어서, 상기 LCVR 아미노산 서열이 서열 17이고, 상기 HCVR 아미노산 서열이 서열 22인 조작된 인간 CGRP 항체.
  9. 제3항에 있어서, 상기 LCVR 아미노산 서열이 서열 18이고, 상기 HCVR 아미노산 서열이 서열 23인 조작된 인간 CGRP 항체.
  10. 제4항에 있어서, 상기 LCVR 아미노산 서열이 서열 19이고, 상기 HCVR 아미노산 서열이 서열 24인 조작된 인간 CGRP 항체.
  11. 제5항에 있어서, 상기 LCVR 아미노산 서열이 서열 20이고, 상기 HCVR 아미노산 서열이 서열 25인 조작된 인간 CGRP 항체.
  12. 제6항에 있어서, 상기 LCVR 아미노산 서열이 서열 21이고, 상기 HCVR 아미노산 서열이 서열 26인 조작된 인간 CGRP 항체.
  13. 제8항에 있어서, 경쇄 및 중쇄를 포함하고, 여기서 경쇄 아미노산 서열이 서열 27이고, 중쇄 아미노산 서열이 서열 32인 조작된 인간 CGRP 항체.
  14. 제9항에 있어서, 경쇄 및 중쇄를 포함하고, 여기서 경쇄 아미노산 서열이 서열 28이고, 중쇄 아미노산 서열이 서열 33인 조작된 인간 CGRP 항체.
  15. 제10항에 있어서, 경쇄 및 중쇄를 포함하고, 여기서 경쇄 아미노산 서열이 서열 29이고, 중쇄 아미노산 서열이 서열 34인 조작된 인간 CGRP 항체.
  16. 제11항에 있어서, 경쇄 및 중쇄를 포함하고, 여기서 경쇄 아미노산 서열이 서열 30이고, 중쇄 아미노산 서열이 서열 35인 조작된 인간 CGRP 항체.
  17. 제12항에 있어서, 경쇄 및 중쇄를 포함하고, 여기서 경쇄 아미노산 서열이 서열 31이고, 중쇄 아미노산 서열이 서열 36인 조작된 인간 CGRP 항체.
  18. 제13항에 있어서, 2개의 경쇄 및 2개의 중쇄를 포함하고, 여기서 각각의 경쇄 아미노산 서열이 서열 27이고, 각각의 중쇄 아미노산 서열이 서열 32인 조작된 인간 CGRP 항체.
  19. 제14항에 있어서, 2개의 경쇄 및 2개의 중쇄를 포함하고, 여기서 각각의 경쇄 아미노산 서열이 서열 28이고, 각각의 중쇄 아미노산 서열이 서열 33인 조작된 인간 CGRP 항체.
  20. 제15항에 있어서, 2개의 경쇄 및 2개의 중쇄를 포함하고, 여기서 각각의 경쇄 아미노산 서열이 서열 29이고, 각각의 중쇄 아미노산 서열이 서열 34인 조작된 인간 CGRP 항체.
  21. 제16항에 있어서, 2개의 경쇄 및 2개의 중쇄를 포함하고, 여기서 각각의 경쇄 아미노산 서열이 서열 30이고, 각각의 중쇄 아미노산 서열이 서열 35인 조작된 인간 CGRP 항체.
  22. 제17항에 있어서, 2개의 경쇄 및 2개의 중쇄를 포함하고, 여기서 각각의 경쇄 아미노산 서열이 서열 31이고, 각각의 중쇄 아미노산 서열이 서열 36인 조작된 인간 CGRP 항체.
  23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항의 조작된 인간 CGRP 항체 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
  24. 골관절염 통증의 치료를 필요로 하는 인간 환자에게 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항의 조작된 인간 CGRP 항체를 투여하는 것을 포함하는, 골관절염 통증의 치료 방법.
  25. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 요법에서 사용하기 위한 조작된 인간 CGRP 항체.
  26. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 골관절염 통증의 치료에서 사용하기 위한 조작된 인간 CGRP 항체.
  27. 골관절염 통증의 치료를 위한 의약의 제조에서 사용하기 위한 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항의 조작된 인간 CGRP 항체의 용도.
  28. 편두통의 치료를 필요로 하는 인간 환자에게 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항의 조작된 인간 CGRP 항체를 투여하는 것을 포함하는, 편두통의 치료 방법.
  29. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 편두통의 치료에서 사용하기 위한 조작된 인간 CGRP 항체.
  30. 편두통의 치료를 위한 의약의 제조에서 사용하기 위한 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항의 조작된 인간 CGRP 항체의 용도.
  31. 제1항 내지 제22항 및 제25항 내지 제28항 중 어느 한 항의 조작된 인간 CGRP 항체의 항원-결합 단편.
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Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA015526B1 (ru) 2005-11-14 2011-08-30 Ринат Ньюросайенс Корп. Антагонистические антитела против пептида, связанного с геном кальцитонина, и способы их применения
KR101304150B1 (ko) 2008-03-04 2013-09-05 라브리스 바이올로직스 인코포레이티드 만성 통증의 치료 방법
CN107441487B (zh) 2009-08-28 2021-09-14 泰华制药国际有限公司 通过施用针对降钙素基因相关肽的拮抗性抗体来治疗内脏痛的方法
JO3330B1 (ar) * 2010-06-10 2019-03-13 Lilly Co Eli الأجسام المضادة cgrp
CN108359008B (zh) 2011-05-20 2022-03-29 H.伦德贝克公司 抗cgrp或抗cgrp-r抗体或抗体片段用于治疗或预防慢性和急性形式的腹泻的用途
MX356269B (es) 2011-05-20 2018-05-21 Alderbio Holdings Llc Uso de anticuerpos anti-cgrp y fragmentos de anticuerpo para prevenir o inhibir la fotofobia o aversion a la luz en sujetos en necesidad de los mismos, especialmente pacientes con migraña.
BR112013029932A2 (pt) 2011-05-20 2017-01-31 Alderbio Holdings Llc composições anti-cgrp e usos das mesmas
DK2888283T3 (en) 2012-08-24 2018-11-19 Univ California ANTIBODIES AND VACCINES FOR TREATING ROR1 CANCER AND INHIBITIVE METASTASE
KR102274964B1 (ko) 2014-03-21 2021-07-09 테바 파마슈티컬스 인터내셔널 게엠베하 칼시토닌 유전자-관련 펩티드에 대한 길항제 항체 및 그의 사용 방법
US10556945B2 (en) 2014-03-21 2020-02-11 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Antagonist antibodies directed against calcitonin gene-related peptide and methods using same
EA201790914A1 (ru) 2014-10-24 2017-08-31 Мерк Шарп И Доум Корп. Коагонисты рецепторов глюкагона и glp-1
TWI595006B (zh) * 2014-12-09 2017-08-11 禮納特神經系統科學公司 抗ｐｄ－１抗體類和使用彼等之方法
JOP20200116A1 (ar) 2015-04-24 2017-06-16 Amgen Inc طرق لعلاج أو الوقاية من الصداع النصفي
AR104847A1 (es) * 2015-06-17 2017-08-16 Lilly Co Eli Formulación de anticuerpo anti-cgrp
MX2018005135A (es) * 2015-10-30 2018-06-06 Lilly Co Eli Anticuerpos biespecificos anti-cgrp/anti-il-23 y usos de los mismos.
CN105483091A (zh) * 2015-12-29 2016-04-13 天津三箭生物技术股份有限公司 小鼠抗人Calcitonin单克隆抗体及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株
CA3007018A1 (en) * 2016-01-28 2017-08-03 Eli Lilly And Company Cgrp antibodies and uses thereof
US11492386B2 (en) 2016-02-01 2022-11-08 Eli Lilly And Company Parathyroid hormone-anti-RANKL antibody fusion compounds
TWI767915B (zh) 2016-06-27 2022-06-21 加州大學董事會 Ror-1與btk拮抗劑的組合
SG10201913032TA (en) 2016-09-23 2020-02-27 Teva Pharmaceuticals Int Gmbh Treating refractory migraine
EA201990548A1 (ru) 2016-09-23 2019-09-30 Тева Фармасьютикалз Интернэшнл Гмбх Лечение кластерной головной боли
JP7195262B2 (ja) 2017-03-02 2022-12-23 ベス イスラエル デアコネス メディカル センター インコーポレイティッド カルシトニン遺伝子関連ペプチドを指向する抗体に応答性の頭痛患者の選択方法
TW201902926A (zh) 2017-05-03 2019-01-16 美商美國禮來大藥廠 抗cgrp／抗il-23雙特異性抗體及其用途
US11426706B2 (en) 2017-06-21 2022-08-30 Cephalon, Inc. Cation exchange chromatography wash buffer
TWI754772B (zh) * 2017-09-06 2022-02-11 美商美國禮來大藥廠 用於治療偏頭痛之拉米迪坦(lasmiditan)與cgrp拮抗劑之組合療法
BR112020013621A2 (pt) 2018-01-12 2020-12-01 Amgen Inc. anticorpos contra pac1 e usos dos mesmos
WO2019231800A1 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Eli Lilly And Company Anti-cgrp antibodies for treating menstrual-related migraines
EP3840836A1 (en) 2018-08-22 2021-06-30 Eli Lilly and Company Anti-cgrp antibodies for treatment-resistant patients
CA3123237A1 (en) 2019-01-08 2020-07-16 H. Lundbeck A/S Acute treatment and rapid treatment of headache using anti-cgrp antibodies
EP3744400A1 (en) * 2019-05-28 2020-12-02 Etablissement Français du Sang Car-t cells targeting il-1rap and their use in acute myeloid leukemia (aml)
WO2020239014A1 (zh) * 2019-05-30 2020-12-03 山东博安生物技术有限公司 抗cgrp抗体及其应用
CA3154522A1 (en) 2019-10-15 2021-04-22 Christopher Carl Frye Recombinantly engineered, lipase/esterase-deficient mammalian cell lines
CA3212151A1 (en) 2021-03-02 2022-09-09 Cgrp Diagnostics Gmbh Treatment and/or reduction of occurrence of migraine
WO2023161528A1 (en) 2022-02-28 2023-08-31 Tridem Bioscience Gmbh & Co Kg A CONJUGATE COMPRISING AT LEAST A ß-GLUCAN
CN117586390A (zh) * 2022-08-11 2024-02-23 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗cgrp抗体及用途

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
KR100249937B1 (ko) * 1991-04-25 2000-04-01 나가야마 오사무 인간 인터루킨-6 수용체에 대한 재구성 인간 항체
EP0940468A1 (en) * 1991-06-14 1999-09-08 Genentech, Inc. Humanized antibody variable domain
AU2003271174A1 (en) 2003-10-10 2005-04-27 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Double specific antibodies substituting for functional protein
CA2603940A1 (en) * 2005-04-08 2006-10-19 Nancy Ulbrandt Antibodies against mammalian metapneumovirus
EA015526B1 (ru) * 2005-11-14 2011-08-30 Ринат Ньюросайенс Корп. Антагонистические антитела против пептида, связанного с геном кальцитонина, и способы их применения
WO2007076336A1 (en) * 2005-12-22 2007-07-05 Eli Lilly And Company Treatment of migraine with anti-cgrp antibodies
CN106110321A (zh) * 2008-03-04 2016-11-16 莱布瑞斯生物公司 治疗炎性疼痛的方法
KR101304150B1 (ko) * 2008-03-04 2013-09-05 라브리스 바이올로직스 인코포레이티드 만성 통증의 치료 방법
JO3330B1 (ar) * 2010-06-10 2019-03-13 Lilly Co Eli الأجسام المضادة cgrp

Also Published As

Publication number Publication date
MX363209B (es) 2019-03-14
RS56638B1 (sr) 2018-03-30
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US20170073403A1 (en) 2017-03-16
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