KR20130009577A

KR20130009577A - 야누스 키나아제 3의 피페리딘 억제제

Info

Publication number: KR20130009577A
Application number: KR1020117026990A
Authority: KR
Inventors: 타디메티 에스 라오; 쳉지 장
Original assignee: 오스펙스 파마슈티컬즈 엘엘씨
Priority date: 2009-04-20
Filing date: 2010-04-20
Publication date: 2013-01-23
Also published as: AU2010239396B2; US9856261B2; JP2012524085A; EP3026052A1; AU2016206214B2; US9493469B2; WO2010123919A2; CN102459270B; BRPI1007737A2; CA3025627A1; US8962638B2; AU2016206214A1; CA3025627C; AU2010239396A1; US20150322070A1; JP5932080B2; JP6145534B2; JP5709276B2; CA2759026C; EP3026052A9

Abstract

본 발명은 야누스 키나아제 3 활성의 새로운 피페리딘 억제제, 이의 약학적 조성물 및 이의 사용 방법에 관한 것이다.

Description

야누스 키나아제 3의 피페리딘 억제제{PIPERIDINE INHIBITORS OF JANUS KINASE 3}

본 출원은 그 개시 내용을 그 전체를 본 명세서에 기재한 것처럼 본 명세서에서 참고로 인용하는, 2009년 4월 20일 출원된 미국 가출원 제61/170,858호 및 2010년 2월 3일 출원된 동 제61/300,887호의 우선권 주장을 청구한다.

본 명세서에는 새로운 피페리딘 화합물, 이로부터 제조된 약학적 조성물이 개시되고, 신장 이식 거부, 류마티스성 관절염, 건선, 염증성 장 질환, 건성안 증후군, 천식, 이식 거부, 장기 이식, 이종 이식, 홍반, 다발 경화증, I형 당뇨병, 당뇨병으로부터의 합병증, 암, 아토피 피부염, 자가 면역성 갑상샘염 질환, 궤양 대장염, 크론병, 알츠하이머병 및 백혈병과 같은 질환의 치료를 위한, 피험체에서의 야누스 키나아제 3 활성의 억제 방법도 제공된다.

하기 CP-690550[CAS # 477600-75-2, 타소시티닙(Tasocitinib)], 4-메틸-3-(메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일아미노)-베타-옥소-(3R,4R)-1-피페리딘프로판니트릴은 야누스 키나아제 3 억제제이다. CP-690550은 신장 이식 거부, 류마티스성 관절염, 건선, 염증성 장 질환, 건성안 증후군, 천식 및 이식 거부의 치료를 위해 연구 중에 있다[문헌(Jiang et al., J. Med. Chem. 2008, 51, 8012-8018; US 6,627,754; 및 WO 2003/048162)]. CP-690550은 또한 장기 이식, 이종 이식, 홍반, 다발 경화증, I형 당뇨병, 당뇨병으로부터의 합병증, 암, 아토피 피부염, 자가 면역성 갑상샘염 질환, 궤양 대장염, 크론병, 알츠하이머병 및 백혈병의 치료에서 유망한 것으로 밝혀졌다(US 6,627,754; 및 WO 2003/048162).

6명의 인간 남성 지원자에서의 ¹⁴C 표지 CP-690550로의 시험관내 연구는 총 방사능 피크가 경구 투여 후 ～1 시간에 있는, 인간에서의 CP-690550의 빠른 흡수를 증명하였다[문헌(Prakash et al., AAPS Journal 2008, 10(S2))]. 변화하지 않는 CP-690550 및 총 방사능에 대한 평균 말단 상 반감기는 모두 약 3.2 시간이었고, 총 순환 방사능 중 65% 초과가 변하지 않는 CP-690550에 의한 것이었다[문헌(Prakash et al., AAPS Journal 2008, 10(S2))]. 혈장 내 나머지 방사능은 각각 총 방사능의 < 5%에 대해서는 8 가지 대사물에 원인이 있었다[문헌(Prakash et al., AAPS Journal 2008, 10(S2))]. 주요 1차 대사 경로는 하기를 포함하는 것으로 밝혀졌다: 피롤로피리미딘 고리의 산화, 피페리딘 고리의 산화 및 피페리딘 고리 측쇄의 산화[문헌(Prakash et al., AAPS Journal 2008, 10(S2))]. 약간의 대사 경로는 N-탈메틸화 및 글루콘산과의 컨쥬게이션으로 인한 것이었다[문헌(Prakash et al., AAPS Journal 2008, 10(S2))]. CP-690550의 제거 경로는 변하지 않는 약물의 약 70% 비신장성(nonrenal)이었고(CYP3A4/5 및 CYP2C19에 의한 간 대사를 거침), 30%의 신장 배설이었다[문헌(Krishnaswami et al., AAPS Journal 2009, 11 (S2))].

중수소 동역학 동위원소 효과

치료제와 같은 외부 물질을 제거하기 위해, 동물의 신체는 시토크롬 P₄₅₀ 효소(CYP), 에스테르 분해 효소, 단백 분해 효소, 환원 효소, 탈수소 효소 및 모노아민 산화 효소와 같은 다양한 효소를 발현하여, 이들 외부 물질과 반응하고 이들을 신장 분비를 위한 극성 중간체 또는 대사물로 전환시킨다. 이러한 대사 반응은 종종 탄소-수소(C-H) 결합을 탄소-산소(C-O) 또는 탄소-탄소(C-C) π-결합으로 산화시키는 것을 수반한다. 생성된 대사물은 생리학적 조건에서 안정 또는 불안정할 수 있으며, 실질적으로 모화합물에 비해 상이한 약동학적, 약역학적, 그리고 급성 및 장기간의 독성 프로필을 가질 수 있다. 대부분의 약물에 있어서, 이러한 산화는 일반적으로 빠르며, 최종적으로는 다중 1 일 용량 또는 높은 1 일 용량을 초래한다.

활성화 에너지와 반응 속도 사이의 관계를 아레니우스 식 k = Ae^-Eact/RT에 의해 정량할 수 있다. 아레니우스 식은 소정 온도에서 화학 반응의 속도가 활성화 에너지(E_act)에 지수적으로 의존한다고 기술한다.

반응의 전이 상태는 원래 결합이 이의 한계로 신장된 반응 경로에 따라 짧은 살아 있는 상태에 있는다. 정의로서, 반응에 대한 활성화 에너지 E_act는 반응의 전이 상태에 도달하는 데에 필요한 에너지이다. 전이 에너지에 일단 도달하면, 분자는 원래의 반응물로 되돌아가거나, 또는 반응 생성물을 생성시키는 새로운 결합을 형성시킨다. 촉매는 전이 상태를 초래하는 활성화 에너지를 저하시켜 반응 공정을 촉진한다. 효소는 생물학적 촉매의 예이다.

탄소-수소 결합 강도는 결합의 바닥 상태 진동 에너지의 절대치에 직접 비례한다. 이 진동 에너지는 결합을 형성시키는 원자의 질량에 따라 달라지며, 결합을 만드는 원자 중 하나 또는 양쪽의 질량이 증가하면서 증가한다. 중수소(D)는 프로튬(¹H) 질량의 2배를 가지며, C-D 결합은 상당하는 C-¹H 결합보다 강하다. C-¹H 결합은 화학 반응에서 속도 결정 단계(즉, 전이 상태 에너지가 가장 높은 단계) 동안 깨진 후, 프로튬을 중수소가 대체하면 반응 속도가 감소한다. 이 현상은 중수소 동역학 동위원소 효과(DKIE)로서 공지되어 있다. DKIE의 정도는 C-¹H 결합이 깨지는 소정 반응의 속도와 중수소가 프로튬을 대체하는 동일한 반응의 속도 사이의 비로서 표시할 수 있다. DKIE는 약 1(동위원소 효과 없음) 내지 50 이상과 같은 매우 큰 수의 범위일 수 있다. 수소의 삼중수소로의 대체는 중수소보다 훨씬 강한 결합을 초래하며, 수적으로 큰 동위원소 효과를 제공한다.

중수소(²H 또는 D)는 안정하며, 가장 흔한 수소의 동위원소인 프로튬(¹H)의 질량의 약 2 배인 수소의 비방사성 동위원소이다. 산화중수소(D₂O 또는 "중수")는 물처럼 보이고 물의 맛이 나지만, 물리적 특성이 상이하다.

순수한 D₂O를 설치류에게 제공시, 이는 용이하게 흡수된다. 독성을 유도하는 데에 필요한 중수소의 양은 매우 높다. 체내 물의 약 0-15%가 D₂O로 대체될 때, 동물은 건강하지만 대조(비처리)군처럼 빠르게 체중을 획득하지 못 한다. 체내 물의 약 15-20%가 D₂O로 대체될 때, 동물은 흥분하기 쉬워진다. 체내 물의 약 20-25%가 D₂O로 대체될 때, 동물은 흥분하기 쉬워져서 자극을 받으면 종종 경련을 일으킨다. 피부 병변, 발 및 주둥이의 울혈 및 꼬리의 괴사가 나타난다. 동물은 또한 매우 공격적이 된다. 체내 물의 약 30%가 D₂O로 대체될 때, 동물은 먹기를 거부하고, 혼수 상태가 된다. 이들의 체중은 급격히 떨어지고, 이들의 대사 속도는 정상 훨씬 이하로 떨어지며, 약 30 내지 약 35%가 D₂O로 대체될 때 사망한다. D₂O로 인해 이전 체중의 30%를 초과하여 손실하지 않으면, 효과는 가역적이다. D₂O의 사용은 암 세포의 성장을 지연시키며 특정 항신생물제의 세포 독성을 향상시킬 수 있음도 연구가 밝혀냈다.

약동학(PK), 약역학(PD) 및 독성 프로필을 개선시키기 위한 약제의 중수소화는 몇 가지 부류의 약물을 이용하여 이전에 증명되었다. 예컨대, 아마도 트리플루오로아세틸 클로라이드와 같은 반응성 화학종의 제조를 제한하는 것에 의해 할로세인의 간 독성을 감소시키는 데에 DKIE를 사용하였다. 그러나, 이 방법은 모든 약물 부류에 적용 가능하지 않을 수 있다. 예컨대, 중수소 혼입은 대사 전환(metabolic switching)을 초래할 수 있다. I상 효소에 의해 격리된 이종(xenogen)이 일시적으로 결합하여 화학 반응(예컨대 산화) 전에 다양한 배좌로 재결합할 때 대사 전환이 발생한다. 대사 전환은 다수의 대사 반응의 무차별성 및 다수의 I상 효소 내 비교적 거대한 크기의 결합 주머니에 의해 가능해진다. 대사 전환은 공지된 대사물 뿐 아니라 새로운 대사물의 상이한 비율을 초래할 수 있다. 이러한 새로운 대사 프로필은 다소의 독성을 부여할 수 있다. 이러한 함정은 명백하지 않으며, 임의의 약물 부류에 대해 연역적으로 예상 가능하지 않다.

CP-690550은 야누스 키나아제 3 억제제이다. CP-690550의 탄소-수소 결합은 수소 동위원소, 즉 ¹H 또는 프로튬(약 99.9844%), ²H 또는 중수소(약 0.0156%) 및 ³H 또는 삼중수소(10¹⁸ 프로튬 원자당 약 0.5 내지 67 삼중수소 범위)의 자연 생성 분포를 포함한다. 증가된 수준의 중수소 혼입은 자연 생성 수준의 중수소를 갖는 CP-690550에 비해 CP-690550의 약동학적, 약리적 및/또는 독성 프로필에 영향을 미칠 수 있는 검출 가능한 중수소 동역학 동위원소 효과(DKIE)를 생성시킬 수 있다.

본 발명자의 실험실에서 이루어진 발견을 기초하고 문헌을 고려시, CP-690550은 인간 내에서 N-메틸기, 피페리딘 메틸기, 피페리딘 고리 및 알파-카르보닐 메틸기에서 대사된다. 현재의 접근법은 이들 위치에서의 대사를 방지할 가능성이 있다. 분자 상 다른 위치도 아직 공지되지 않은 약리학/독성학을 갖는 대사물을 초래하는 변환을 거칠 수 있다. 이들 대사물의 생성을 제한하면 이러한 약물의 투여 위험을 감소시킬 가능성이 있으며, 심지어 용량 증가 및/또는 효능 증가를 가능하게 할 수 있다. 이들 변환 모두 환자간 편차를 악화시키는 다형 발현(polymorphically-expressed) 효소를 통해 일어날 수 있다. 또한, 일부 질환은, 피험체가 주야로 또는 연장된 기간 동안 투약받을 때 가장 잘 치료된다. 상기한 이유 모두에 대해, 반감기가 더 긴 의약은 더 큰 효능 및 비용 절감을 초래할 수 있다. 다양한 중수소화 패턴을 (a) 원하지 않는 대사물의 감소 또는 제거, (b) 모약물의 반감기의 증가, (c) 소정 효과를 달성하는 데에 필요한 용량의 수의 감소, (d) 소정 효과를 달성하는 데에 필요한 용량의 양의 감소, (e) 형성되는 경우, 활성 대사물의 형성 증가, (f) 특이 조직에서의 유해 대사물의 생성 감소 및/또는 (g) 다제 투여가 의도적이던 아니던 간에, 다제 투여에 대한 더욱 효과적인 약물 및/또는 더 안전한 약물의 생성에 이용될 수 있다. 중수소화 접근법은 CP-690550의 대사를 늦추고 환자간 편차를 감소시킬 가능성이 크다.

특정의 것이 야누스 키나아제 3 활성을 억제하는 것으로 밝혀진 신규한 화합물 및 약학적 조성물이, 상기 화합물의 합성 방법, 및 본 명세서에 개시된 화합물을 투여하는 것에 의한 환자의 야누스 키나아제 3 매개 질환의 치료 방법을 비롯한 상기 화합물의 이용 방법과 함께 발견되었다.

본 발명의 특정 구체예에서, 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염은 하기 화학식 I을 갖는다:

화학식 I

상기 화학식에서,

R₁-R₂₀은 독립적으로 수소 및 중수소로 구성된 군에서 선택되고;

R₁-R₂₀ 중 1 이상은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂ 중 1 이상은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂는 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁₁-R₁₃ 중 1 이상은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁₁-R₁₃은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₂₀은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₃-R₁₀ 중 6 이상은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₃-R₁₀ 중 7 이상은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₃-R₁₀은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂ 및 R₁₁-R₁₃은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂ 및 R₂₀은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂ 및 R₃-R₁₀ 중 6 이상은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂ 및 R₃-R₁₀은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁₁-R₁₃ 및 R₂₀은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁₁-R₁₃ 및 R₃-R₁₀ 중 6 이상은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁₁-R₁₃ 및 R₃-R₁₀은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₂₀ 및 R₃-R₁₀ 중 6 이상은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₂₀ 및 R₃-R₁₀은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂, R₂₀ 및 R₃-R₁₀ 중 6 이상은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂, R₂₀ 및 R₃-R₁₀은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂, R₁₁-R₁₃ 및 R₃-R₁₀ 중 6 이상은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂, R₁₁-R₁₃ 및 R₃-R₁₀은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂, R₁₁-R₁₃ 및 R₂₀은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂, R₁₁-R₁₃, R₂₀ 및 R₃-R₁₀ 중 6 이상은 중수소이다.

추가의 구체예에서, R₁-R₂, R₁₁-R₁₃, R₂₀ 및 R₃-R₁₀은 중수소이다.

본 명세서에 개시된 특정 화합물은 유용한 야누스 키나아제 3 억제 활성을 가질 수 있으며, 야누스 키나아제 3이 활발한 역할을 하는 질환의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다. 따라서, 특정 구체예는 또한 약학적으로 허용되는 담체와 함께 본 명세서에 개시된 1 이상의 화합물을 포함하는 약학적 조성물 뿐 아니라, 상기 화합물 및 조성물의 제조 및 사용 방법을 제공한다. 특정 구체예는 야누스 키나아제 3 활성의 억제 방법을 제공한다. 다른 구체예는 치료 유효량의 본 발명에 따른 화합물 또는 조성물을 야누스 키나아제 3 매개 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 야누스 키나아제 3 매개 질환의 치료를 필요로 하는 환자에서의 야누스 키나아제 3 매개 질환의 치료 방법을 제공한다. 야누스 키나아제 3 활성을 억제함으로써 개선되는 질환의 예방 또는 치료를 위한 약제의 제조에서 사용하기 위한 본 명세서에 개시된 특정 화합물의 용도도 제공된다.

본 명세서에 개시된 화합물은 또한 탄소에 대해서 ¹³C 또는 ¹⁴C, 황에 대해서 ³³S, ³⁴S, 또는 ³⁶S, 질소에 대해서 ¹⁵N, 그리고 산소에 대해서 ¹⁷O 또는 ¹⁸O를 포함하나 이에 한정되지 않는 다른 원소에 대한 덜 우세한 동위원소를 함유할 수 있다.

특정 구체예에서, 본 명세서에 개시된 화합물은, 본 명세서에 개시된 화합물 내 C-D 결합 모두가 대사되고 D₂O 또는 DHO로 방출된다고 가정시, 최대 약 0.000005% D₂O 또는 약 0.00001% DHO로 환자를 노출시킬 수 있다. 특정 구체예에서, 동물에서 독성을 일으키는 것으로 밝혀진 D₂O의 수준은 본 명세서에 개시된 중수소 농축 화합물의 투여에 의해 초래되는 노출의 최대 한계치보다 훨씬 크다. 따라서, 특정 구체예에서, 본 명세서에 개시된 중수소 농축 화합물은 약물 대사시 D₂O 또는 DHO의 형성으로 인한 추가의 독성을 초래하지 않아야 한다.

특정 구체예에서, 중수소화된 본 명세서에 개시된 화합물은 실질적으로 최대 허용 용량을 증가시키고 독성을 감소시키고 반감기(T_1/2)를 증가시키고 최소 유효 용량(MED)의 최대 혈장 농도(C_max)를 저하시키고 유효 용량을 저하시켜서 비기전 관련 독성을 감소시키고 및/또는 약물-약물 상호 작용의 가능성을 저하시키면서, 상당하는 비동위원소 농축(non-isotopically enriched) 분자의 유리한 측면을 유지한다.

특정 구체예에서, 화합물 또는 이의 염은 하기 화학식 II를 갖는다:

화학식 II

상기 화학식에서,

Z₁은 아미노 보호기이고;

R₃-R₁₆은 독립적으로 수소 및 중수소로 구성된 군에서 선택되며;

R₃-R₁₆ 중 1 이상은 중수소이다.

추가의 구체예에서, Z₁은 벤질이다.

추가의 구체예에서, 화학식 II의 화합물은 하기로 구성된 군에서 선택되는 구조를 갖는다:

특정 구체예에서, 하기 화학식 III(식 중, Z₂는 카르복실 보호기임)의 화합물을 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 수소화나트륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 하기 화학식 IV의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 V의 화합물을 얻는 단계

;

하기 화학식 V의 화합물을 물 또는 산화중수소와 같은 적절한 용매 중에서 염화수소 또는 염화중수소와 같은 적절한 산과 반응시켜 하기 화학식 VI의 화합물을 얻는 단계

; 및

하기 화학식 VI의 화합물을 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 트리아세톡시붕수소화나트륨(sodium triacetoxyborohydride) 또는 트리아세톡시붕중수소화나트륨(sodium triacetoxyborodeuteride)와 같은 적절한 환원제의 존재 하에 하기 화학식 VII의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 VII의 화합물을 얻는 단계

를 포함하는, 하기 화학식 II의 화합물의 제조 방법이 본 명세서에 개시된다:

화학식 II

상기 화학식에서,

Z₁은 수소 및 아미노 보호기로 구성된 군에서 선택되고;

R₃-R₁₆ 중 1 이상은 중수소이다.

특정 구체예에서, 하기 화학식 VIII의 화합물을 메탄올과 같은 적절한 용매 중에서 톨루엔설폰산과 같은 적절한 산의 존재 하에 그리고 오르토포름산트리메틸과 같은 임의의 탈수제의 존재 하에 화학식 X(식 중, Z₃은 C₁-C₂ 알킬임)의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 IX의 화합물을 얻는 단계

;

하기 화학식 IX의 화합물을 물 또는 산화중수소 및 메탄올 또는 d₄-메탄올의 조합과 같은 적절한 용매 중에서 수산화나트륨 또는 d₁-수산화나트륨 또는 염화중수소와 같은 적절한 염기와 반응시켜 화학식 IX의 화합물을 얻는 단계;

하기 화학식 IX의 화합물을 물 또는 산화중수소와 같은 적절한 용매 중에서 염화수소 또는 염화중수소와 같은 적절한 산과 반응시켜 하기 화학식 VIII의 화합물을 얻는 단계

;

하기 화학식 VIII의 화합물을 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 트리아세톡시붕수소화나트륨 또는 트리아세톡시붕중수소화나트륨와 같은 적절한 환원제의 존재 하에 하기 화학식 VII의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 X의 화합물을 얻는 단계

; 및

하기 화학식 X의 화합물을 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 수소화알루미늄리튬 또는 중수소화알루미늄리튬과 같은 적절한 환원제와 반응시켜 하기 화학식 X의 화합물을 얻는 단계

화학식 II

상기 화학식에서,

Z₁은 수소 및 아미노 보호기로 구성된 군에서 선택되고;

R₃-R₁₆ 중 1 이상은 중수소이다.

특정 구체예에서, 하기 화학식 XI의 화합물을 물 및 테트라히드로푸란의 조합과 같은 적절한 용매 중에서 탄산칼륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 하기 화학식 II의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 XII의 화합물을 얻는 단계

; 및

하기 화학식 XII의 화합물을 물 또는 산화중수소 및 메탄올 또는 d₄-메탄올의 조합과 같은 적절한 용매 중에서 수소 또는 중수소 가스와 같은 적절한 환원제 및 탄소상 팔라듐 및 탄소상 수산화팔라듐과 같은 촉매와 반응시켜 하기 화학식 XIII의 화합물을 얻는 단계

를 포함하는, 하기 화학식 XIII의 화합물의 제조 방법이 본 명세서에 개시된다:

화학식 XIII

상기 화학식에서,

Z₁ 및 Z₄는 독립적으로 수소 및 아미노 보호기로 구성된 군에서 선택되고;

R₃-R₁₈ 및 R₂₀은 독립적으로 수소 및 중수소로 구성된 군에서 선택되고;

R₃-R₁₈ 및 R₂₀ 중 1 이상은 중수소이다.

본 명세서에 기재된 모든 공보 및 참조 문헌은 본 명세서에서 그 전체로 명확하게 참고로 인용한다. 그러나, 인용된 공보 또는 참조 문헌 모두에서 발견되는 유사하거나 동일한 용어, 그리고 본 출원에 명확히 기재되거나 정의된 것들에 대해서는, 본 출원에 명확히 기재된 이들 용어의 정의 또는 의미를 모든 면에서 우선한다.

본 명세서에서 사용된 바의 하기 용어는 기재된 의미를 갖는다.

단수형 "a", "an" 및 "the"는 달리 특정하게 기재하지 않는 한 복수 물품을 지칭할 수 있다.

본 명세서에 사용된 바의 용어 "약"은 변경되는 수치를 정량하려고 하며, 이러한 수치는 에러 마진 내에서 변경 가능함을 지칭한다. 데이터의 차트 또는 표에 제공된 평균 값에 대한 표준 편차와 같은 에러의 특정 마진이 없다고 기재되는 경우, 용어 "약"은 중요한 숫자를 고려하여 그 숫자의 위 또는 아래를 반올림하여 포함될 수 있는 기재된 값 또는 범위를 포함할 수 있는 범위를 의미하는 것으로 이해해야 한다.

값의 범위가 개시되고 지칭 "n₁에서 ... n₂까지" 또는 "n₁-n₂"가 사용되는 경우(여기서 n₁ 및 n₂는 수임), 달리 특정하지 않는 한, 이 지칭은 수 자신과 그들 사이의 범위를 포함시키고자 한다. 이 범위는 정수이거나, 또는 끝의 값 사이에서 그리고 끝의 값을 포함하여 연속적 수일 수 있다.

용어 "중수소 농축도(enrichment)"는 수소 대신에 분자 내 소정 위치에서 중수소가 혼입된 %를 지칭한다. 예컨대, 소정 위치에서의 1%의 중수소 포화도는 소정 샘플 내 분자의 1%가 특정 위치에서 중수소를 함유함을 의미한다. 중수소의 자연 발생 분포가 약 0.0156%이기 때문에, 비농축 출발 물질을 이용하여 합성된 화합물 내 임의의 위치에서의 중수소 농축도는 약 0.0156%이다. 중수소 농축도는 질량 분석 및 핵 자기 공명 분광학을 비롯하여 당업자에게 공지된 통상적인 분석 방법을 이용하여 측정할 수 있다.

R₁-R₂₀과 같은 분자 내 소정 위치를 설명하는 데에 사용될 경우 용어 "중수소이다", 또는 분자 구조의 그림 내 소정 위치를 나타내는 데에 사용될 경우 기호 "D"는 특정 위치가 자연 발생 분포 이상의 중수소로 농축됨을 의미한다. 일구체예에서 중수소 농축도는 특정 위치에서 약 1% 이상의 중수소이거나, 다른 구체예에서 약 5% 이상의 중수소이거나, 다른 구체예에서 약 10% 이상의 중수소이거나, 다른 구체예에서 약 20% 이상의 중수소이거나, 다른 구체예에서 약 50% 이상의 중수소이거나, 다른 구체예에서 약 70% 이상의 중수소이거나, 다른 구체예에서 약 80% 이상의 중수소이거나, 다른 구체예에서 약 90% 이상의 중수소이거나, 다른 구체예에서 약 98% 이상의 중수소이다.

용어 "동위원소 농축도"는 원소의 가장 우세한 동위원소 대신에 분자 내 소정 위치에서의 원소의 덜 우세한 동위원소의 혼입 %를 지칭한다.

용어 "비동위원소 농축"은 다양한 동위원소의 %가 자연 발생 %와 실질적으로 동일한 분자를 지칭한다.

본 명세서에 개시된 화합물에는 비대칭 중심이 존재한다. 이 중심을 키랄 탄소 원자 주위의 치환기의 배열에 따라 기호 "R" 또는 "S"로 지칭한다. 본 발명은 부분 입체 이성체, 거울상 이성체 및 에피머 형태 뿐 아니라, D-이성체 및 L-이성체 및 이의 혼합물을 비롯한 모든 입체 화학적 이성체 형태를 포함함을 이해해야 한다. 화합물의 개별 입체 이성체는 키랄 중심을 포함하는 상업적으로 구입 가능한 출발 물질로부터 합성에 의해, 또는 거울상 이성체 생성물의 혼합물의 제조 후 부분 입체 이성체의 혼합물로의 전환과 같은 분리 후 분리 또는 재결정화, 크로마토그래피 기술, 키랄 크로마토그래피 컬럼 상에서의 거울상 이성체의 직접 분리, 또는 당업계에 공지된 임의의 다른 적절한 방법에 의해 제조할 수 있다. 특정 입체 화학의 출발 화합물은 상업적으로 구입 가능하거나, 또는 당업계에 공지된 기술에 의해 제조 및 분할할 수 있다. 추가로, 본 명세서에 개시된 화합물은 기하학적 이성체로서 존재할 수 있다. 본 발명은 모든 시스, 트랜스, syn, anti, entgegen(E) 및 zusammen(Z) 이성체 뿐 아니라 이의 적절한 혼합물을 포함한다. 추가로, 화합물은 호변 이성체로서 존재할 수 있으며; 모든 호변 이성체는 본 발명에 의해 제공된다. 추가로, 본 명세서에 개시된 화합물은 비용매화된 형태 뿐 아니라, 물, 에탄올 등과 같은 약학적으로 허용되는 용매로 용매화된 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 용매화된 형태는 비용매화된 형태와 등가로 고려된다.

"카르복실 보호기"의 정의는 하기를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다: 2-N-(모르폴리노)에틸, 콜린, 메틸, 메톡시에틸, 9-플루오레닐메틸, 메톡시메틸, 메틸티오메틸, 테트라히드로피라닐, 테트라히드로푸라닐, 메톡시에톡시메틸, 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸, 벤질옥시메틸, 피발로일옥시메틸, 페닐아세톡시메틸, 트리이소프로필실릴메틸, 시아노메틸, 아세톨, p-브로모페나실, α-메틸페나실, p-메톡시페나실, 데실, 카르복사미도메틸, p-아조벤젠카르복사미도-메틸, N-프탈이미도메틸, (메톡시에톡시)에틸, 2,2,2-트리클로로에틸, 2-플루오로에틸, 2-클로로에틸, 2-브로모에틸, 2-요오도에틸, 4-클로로부틸, 5-클로로펜틸, 2-(트리메틸실릴)에틸, 2-메틸티오에틸, 1,3-디티아닐-2-메틸, 2-(p-니트로페닐설페닐)에틸, 2-(p-톨루엔설포닐)에틸, 2-(2-피리딜)에틸, 2-(p-메톡시페닐)에틸, 2-(디페닐포스피노)에틸, 1-메틸-1-페닐에틸, 2-(4-아세틸-2-니트로페닐)에틸, 2-시아노에틸, 헵틸, tert-부틸, 3-메틸-3-펜틸, 디시클로프로필메틸, 2,4-디메틸-3-펜틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 알릴, 메탈일, 2-메틸부트-3-엔-2-일, 3-메틸부트-2-(프레닐), 3-부텐-1-일, 4-(트리메틸실릴)-2-부텐-1-일, 신나밀, α-메틸신나밀, 프로파르길, 페닐, 2,6-디메틸페닐, 2,6-디이소프로필페닐, 2,6-디-tert-부틸-4-메틸페닐, 2,6-디-tert-부틸-4-메톡시페닐, p-(메틸티오)페닐, 펜타플루오로페닐, 벤질, 트리페닐메틸, 디페닐메틸, 비스(o-니트로페닐)메틸, 9-안트릴메틸, 2-(9,10-디옥소)안트릴메틸, 5-디벤조수베릴, 1-피레닐메틸, 2-(트리플루오로메틸)-6-크로모닐메틸, 2,4,6-트리메틸벤질, p-브로모벤질, o-니트로벤질, p-니트로벤질, p-메톡시벤질, 2,6-디메톡시벤질, 4-(메틸설피닐)벤질, 4-설포벤질, 4-아지도메톡시벤질, 4-{N-[1-(4,4-디메틸-2,6-디옥소시클로헥실리덴)-3-메틸부틸]아미노}벤질, 피페로닐, 4-피콜일, 트리메틸실릴, 트리에틸실릴, tert-부틸디메틸실릴, 이소프로필디메틸실릴, 페닐디메틸실릴, 디-tert-부틸메틸실릴, 트리이소프로필실릴 등.

"아미노 보호기"의 정의는 하기를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다:

2-메틸티오에틸, 2-메틸설포닐에틸, 2-(p-톨루엔설포닐)에틸, [2-(1,3-디티아닐)]메틸, 4-메틸티오페닐, 2,4-디메틸티오페닐, 2-포스포니오에틸, 1-메틸-1-(트리페닐포스포니오)에틸, 1,1-디메틸-2-시아노에틸, 2-단실에틸, 2-(4-니트로페닐)에틸, 4-페닐아세톡시벤질, 4-아지도벤질, 4-아지도메톡시벤질, m-클로로-p-아실옥시벤질, p-(디히드록시보릴)벤질, 5-벤즈이속사졸일메틸, 2-(트리플루오로메틸)-6-크로모닐메틸, m-니트로페닐, 3,5-디메톡시벤질, 1-메틸-1-(3,5-디메톡시페닐)에틸, o-니트로벤질, α-메틸니트로피페로닐, 3,4-디메톡시-6-니트로벤질, N-벤젠설페닐, N-o-니트로벤젠설페닐, N-2,4-디니트로벤젠설페닐, N-펜타클로로벤젠설페닐, N-2-니트로-4-메톡시벤젠설페닐, N-트리페닐메틸설페닐, N-1-(2,2,2-트리플루오로-1,1-디페닐)에틸설페닐, N-3-니트로-2-피리딘설페닐, N-p-톨루엔설포닐, N-벤젠설포닐, N-2,3,6-트리메틸-4-메톡시벤젠설포닐, N-2,4,6-트리메톡시벤젠-설포닐, N-2,6-디메틸-4-메톡시벤젠설포닐, N-펜타메틸벤젠설포닐, N-2,3,5,6-테트라메틸-4-메톡시벤젠설포닐 등;

-C(O)OR₈₀[여기서, R₈₀은 알킬, 치환된 알킬, 아릴로 구성된 군에서 선택되고, 더욱 상세하게는 R₈₀ = 메틸, 에틸, 9-플루오레닐메틸, 9-(2-설포)플루오레닐메틸, 9-(2,7-디브로모)플루오레닐메틸, 17-테트라벤조[a,c,g,i]플루오레닐메틸, 2-클로로-3-인데닐메틸, 벤즈인덴-3-일메틸, 2,7-디-t-부틸-[9-(10,10-디옥소-10,10,10,10-테트라히드로트록산틸)]메틸, 1,1-디옥소벤조[b]티오펜-2-일메틸, 2,2,2-트리클로로에틸, 2-트리메틸실릴에틸, 2-페닐에틸, 1-(1-아다만틸)-1-메틸에틸, 2-클로로에틸, 1,1-디메틸-2-할로에틸, 1,1-디메틸-2,2-디브로모에틸, 1,1-디메틸-2,2,2-트리클로로에틸, 1-메틸-1-(4-비페닐일)에틸, 1-(3,5-디-tert-부틸페닐)-1-메틸에틸, 2-(2'-피리딜)에틸, 2-(4'-피리딜)에틸, 2,2-비스(4'-니트로페닐)에틸, N-(2-피발로일아미노)-1,1-디메틸에틸, 2-[(2-니트로페닐)디티오]-1-페닐에틸, tert-부틸, 1-아다만틸, 2-아다만틸, 비닐, 알릴, 1-이소프로필알릴, 신나밀, 4-니트로신나밀, 3-(3-피리딜)프로프-2-에닐, 8-퀴놀일, N-히드록시피페리디닐, 알킬디티오, 벤질, p-메톡시벤질, p-니트로벤질, p-브로모벤질, p-클로로벤질, 2,4-디클로로벤질, 4-메틸설피닐벤질, 9-안트릴메틸, 디페닐메틸, tert-아밀, S-벤질 티오카르바메이트, 부티닐, p-시아노벤질, 시클로부틸, 시클로헥실, 시클로펜틸, 시클로프로필메틸, p-데실옥시벤질, 디이소프로필메틸, 2,2-디메톡시카르보닐비닐, o-(N,N'-디메틸카르복사미도)벤질, 1,1-디메틸-3-(N,N'-디메틸카르복사미도)프로필, 1,1-디메틸프로피닐, 디(2-피리딜)메틸, 2-푸라닐메틸, 2-요오도에틸, 이소보라닐, 이소부틸, 이소니코티닐, p-(p'-메톡시페닐아조)벤질, 1-메틸시클로부틸, 1-메틸시클로헥실, 1-메틸-1-시클로프로필메틸, 1-메틸-1-(p-페닐아조페닐)에틸, 1-메틸-1-페닐에틸, 1-메틸-1-4'-피리딜에틸, 페닐, p-(페닐아조)벤질, 2,4,6-트리메틸페닐, 4-(트리메틸암모늄)벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 등].

용어 "결합"은 2개 원자 사이의, 또는 결합에 의해 합해진 원자가 더 큰 하부 구조의 일부로 고려되는 경우 2개 분자 사이의 공유 결합을 지칭한다. 결합은 달리 명시하지 않으면 단일, 이중 또는 삼중 결합일 수 있다. 분자 그림에서 2개 원자 사이의 띠줄은 추가의 결합이 이 위치에 존재하거나 부재일 수 있음을 나타낸다.

본 명세서에 사용된 바의 용어 "질환"은 일반적으로 용어 "질병", "증후군" 및 (의학적 병태에서의) "병태"와 동의어를 의도하며, 이들과 상호 교환적으로 사용되며, 이들 모두는 정상 기능화를 손상시키는 인간 또는 동물의 신체 또는 이의 일부 중 하나의 비정상 상태를 반영하고, 통상적으로 신호 및 증상을 구별하여 나타난다.

용어 "치료하다", "치료하는" 및 "치료"는 질환 또는 질환과 관련된 1 이상의 증상의 경감 또는 제거(abrogating); 또는 질환 자체의 원인의 경감 또는 근절을 포함시키고자 한다. 본 명세서에 사용된 바의 질환의 "치료"에 대한 지칭은 예방을 포함시키고자 한다. 용어 "예방한다", "예방하는" 및 "예방"은 질환 및/또는 이의 부수적인 증상의 발병의 지연 또는 제외, 피험체의 질환 획득으로부터의 방해, 또는 피험체의 질환 획득 위험의 감소 방법을 지칭한다.

용어 "치료 유효량"은 투여시 치료하는 질환의 증상 중 1 이상의 발전을 방지하거나 증상 중 1 이상을 어느 정도 경감하는 화합물의 양을 지칭한다. 용어 "치료 유효량"은 또한 연구가, 수의사, 의학 박사 또는 임상의가 찾는 세포, 조직, 시스템, 동물 또는 인간의 생물학적 또는 의학적 반응을 도출하는 데에 충분한 화합물의 양을 지칭한다.

용어 "피험체"는 영장류(예컨대 인간, 원숭이, 침팬지, 고릴라 등), 설치류(예컨대 래트, 마우스, 게르빌루스 쥐, 햄스터, 흰족제비 등), 토끼목 포유 동물, 돼지(예컨대 돼지, 미니 돼지), 말, 갯과 동물, 고양잇과 동물 등을 포함하나 이에 한정되지 않는 동물을 지칭한다. 용어 "피험체" 및 "환자"는 예컨대 인간 환자와 같은 포유 동물 피험체에 대한 지칭에서 본 명세서에서 상호 교환적으로 사용된다.

용어 "병용 요법"은 본 개시 내용에 기재된 치료 질환을 치료하기 위해 2 이상의 치료제를 투여하는 것을 의미한다. 이러한 투여는 예컨대 고정 비의 활성 성분을 갖는 단일 캡슐로의 또는 각각의 활성 성분에 대한 다중 개별 캡슐로의, 실질적으로 동시적인 방식으로의 이들 치료제의 공동 투여를 포함한다. 또한, 이러한 투여는 순차 방식으로의 각각의 유형의 치료제의 사용도 포함한다. 각각의 경우, 치료 요법은 본 명세서에 기재된 질환의 치료에서 약물 조합의 유리한 효과를 제공할 것이다.

용어 "야누스 키나아제 3"은 단백질 키나아제의 야누스 패밀리의 멤버를 지칭한다. 이 패밀리의 다른 멤버는 실질적으로 모든 조직에 의해 발현되지만, 야누스 키나아제 3 발현은 조혈 세포에 한정된다. 이는 다쇄 수용체에 공통적인 감마쇄와 야누스 키나아제 3의 비공유 결합에 의한 IL-2, IL-4, IL-7, IL-9 및 IL-15에 대한 수용체를 통한 신호화에서의 이의 필수적인 역할과 일치한다. XSCID 환자 개체수는 공통 감마쇄에 대한 유전적 결함을 갖거나 또는 야누스 키나아제 3 단백질의 심하게 감소된 수준을 갖는 것으로 확인되었는데, 이는 면역 억제가 야누스 키나아제 3 경로를 통한 신호화 차단으로부터 생겨야 함을 시시한다. 야누스 키나아제 3은 B 및 T 림프구 성숙에서 중요한 역할을 할 뿐 아니라, 야누스 키나아제 3은 T 세포 작용을 유지하는 데에 구성상 필요함을 동물 연구를 제안하였다. 이 신규한 기전을 통한 면역 활성의 조정은 이식 거부 및 자가 면역 질환과 같은 T 세포 증식성 질환의 치료에 유용한 것으로 밝혀질 수 있다.

용어 "야누스 키나아제 3 매개 질환"은 비정상 야누스 키나아제 3 활성, 또는 조정시에는 정상 야누스 키나아제 3 활성이 다른 비정상 생화학적 과정을 개선하는 것을 특징으로 하는 질환을 지칭한다. 야누스 키나아제 3 매개 질환은 야누스 키나아제 3 활성을 조정하여 완전히 또는 부분적으로 매개될 수 있다. 특히, 야누스 키나아제 3 매개 질환은 야누스 키나아제 3 활성의 억제가 근원적인 질환에 약간의 영향을 미치는 것, 예컨대 야누스 키나아제 3 억제제의 투여가 치료되는 환자의 적어도 일부에서 약간의 효과를 가져오는 것이다.

용어 "야누스 키나아제 3 억제제"는 야누스 키나아제 3의 작용을 변경하는 본 명세서에 개시된 화합물의 능력을 지칭한다. 억제제는, 억제제와 야누스 키나아제 3 사이의 가역적 또는 비가역적 공유 결합을 형성하거나 또는 비공유 결합 착체의 형성을 통해 야누스 키나아제 3의 활성을 차단하거나 감소시킬 수 있다. 이러한 억제는 특정 세포 유형에서만 명백할 수 있거나, 또는 특정 생물학적 사건을 조건으로 할 수 있다. 용어 "야누스 키나아제 3 억제제"는 또한 야누스 키나아제 3과 천연 기질 사이에서 착체가 형성되는 가능성을 감소시켜 야누스 키나아제 3의 기능을 변경하는 것을 지칭한다. 일부 구체예에서, 야누스 키나아제 3 활성의 억제는 문헌(Jiang et al., J. Med. Chem. 2008, 51, 8012-8018; US 6,627,754; 및 WO 2003/048162)에 기재된 방법을 이용하여 평가할 수 있다.

용어 "야누스 키나아제 3 활성을 억제" 또는 "야누스 키나아제 3 활성의 억제"는 야누스 키나아제 3 억제제를 투여하여 야누스 키나아제 3의 기능을 변경하는 것을 지칭한다.

용어 "치료적으로 허용되는"은 과도한 독성, 자극, 알러지 반응, 면역 원성 없이 환자의 조직과 접촉하여 사용하기에 적절하고, 적절한 이익/위험 비를 가지며, 이의 의도하는 용도에 효과적인 화합물(또는 염, 프로드럭, 호변 이성체, 양성 이온 형태 등)을 지칭한다.

용어 "약학적으로 허용되는 담체", "약학적으로 허용되는 부형제", "생리학적으로 허용되는 담체" 또는 "생리학적으로 허용되는 부형제"는 약학적으로 허용되는 재료, 조성물 또는 비히클, 예컨대 액상 또는 고상 충전제, 희석제, 부형제, 용매 또는 캡슐화 재료를 지칭한다. 각각의 성분은 약학적 제제의 다른 성분과 상용성이 있다는 점에서 "약학적으로 허용되어야" 한다. 이는 또한 과도한 독성, 자극, 알러지 반응, 면역 원성 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직 또는 기관과 접촉하여 사용하기에 적절해야 하며, 적절한 이익/위험 비를 가져야 한다. 문헌(Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition; Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, PA, 2005; Handbook of Pharmaceutical Excipients, 5th Edition; Rowe et al., Eds., Pharmaceutical Press and American Pharmaceutical Association: 2005; 및 Handbook of Pharmaceutical Additives, 3rd Edition; Ash and Ash Eds., Gower Publishing Company: 2007; Pharmaceutical Preformulation and formulation, Gibson Ed., CRC Press LLC: Boca Raton, F1,2004) 참조.

용어 "활성 성분", "활성 화합물" 및 "활성 물질"은 질환의 1 이상의 증상을 치료, 예방 또는 개선하기 위해 피험체에게 1 이상의 약학적으로 허용되는 부형제 또는 담체와 함께 또는 단독으로 투여되는 화합물을 지치한다.

용어 "약물", "치료제" 및 "화학 요법제"는 질환의 1 이상의 증상을 치료, 예방 또는 개선하기 위해 피험체에게 투여되는 화합물 또는 이의 약학적 조성물을 지칭한다.

용어 "방출 제어 부형제"는 1차 기능이 종래의 즉시 방출 제형에 비해 제형으로부터의 활성 물질의 방출의 지속 기간 또는 위치를 변경하는 것인 부형제를 지칭한다.

용어 "비방출 제어 부형제"는 1차 기능이 통상적인 즉시 방출 제형에 비해 제형으로부터의 활성 물질의 방출의 지속 기간 또는 위치를 변형하는 것을 포함하지 않는 부형제를 지칭한다.

용어 "프로드럭"은 본 명세서에 개시된 화합물의 화합물 작용성 유도체를 지칭하며, 생체내에서 모화합물로 용이하게 전환된다. 프로드럭은 종종 유용한데, 왜냐하면 일부 상황에서는 이것이 모화합물보다 투여가 용이할 수 있기 때문이다. 이는 예컨대 모화합물이 존재하지 않아도 경구 투여에 의해 생체 이용 가능할 수 있다. 프로드럭은 또한 모화합물에 비해 약학적 조성물에서의 용해도가 향상될 수 있다. 프로드럭은 효소 공정 및 대사 가수분해를 비롯한 다양한 기전에 의해 모약물로 전환될 수 있다. 문헌(Harper, Progress in Drug Research 1962, 4, 221-294; Morozowich et al. in "Design of Biopharmaceutical Properties through Prodrugs and Analog", "Roche Ed., APHA Acad. Pharm. Sci. 1977; "Bioreversible Carriers in Drug in Drug Design, Theory and Applicatio", "Roche Ed., APHA Acad. Pharm. Sci. 1987; "Design of Prodrug", "Bundgaard, Elsevier, 1985; Wang et al., Curr. Pharm. Design 1999, 5, 265-287; Pauletti et al., Adv. Drug. Delivery Rev. 1997, 27, 235-256; Mizen et al., Pharm. Biotech. 1998, 11, 345-365; Gaignault et al., Pract. Med. Chem. 1996, 671-696; Asgharnejad in "Transport Processes in Pharmaceutical System", "Amidon et al., Ed., Marcell Dekker, 185-218, 2000; Balant et al., Eur. J. Drug Metab. Pharmacokinet. 1990, 15, 143-53; Balimane and Sinko, Adv. Drug Delivery Rev. 1999, 39, 183-209; Browne, Clin. Neuropharmacol. 1997, 20, 1-12; Bundgaard, Arch. Pharm. Chem. 1979, 86, 1-39; Bundgaard, Controlled Drug Delivery 1987, 17, 179-96; Bundgaard, Adv. Drug Delivery Rev.1992, 8, 1-38; Fleisher et al., Adv. Drug Delivery Rev. 1996, 19, 115-130; Fleisher et al., Methods Enzymol. 1985, 112, 360-381; Farquhar et al., J. Pharm. Sci. 1983, 72,324-325; Freeman et al., J. Chem. Soc, Chem. Commun. 1991, 875-877; Friis and Bundgaard, Eur. J. Pharm. Sci. 1996, 4, 49-59; Gangwar et al., Des. Biopharm. Prop. Prodrugs Analogs, 1977, 409-421; Nathwani and Wood, Drugs 1993, 45, 866-94; Sinhababu and Thakker, Adv. Drug Delivery Rev. 1996, 19, 241-273; Stella et al., Drugs 1985, 29, 455-73; Tan et al., Adv. Drug Delivery Rev. 1999, 39, 117-151; Taylor, Adv. Drug Delivery Rev. 1996, 19, 131-148; Valentino and Borchardt, Drug Discovery Today 1997, 2, 148-155; Wiebe and Knaus, Adv. Drug Delivery Rev. 1999, 39, 63-80; Waller et al., Br. J. Clin. Pharmac. 1989, 28, 497-507) 참조.

본 명세서에 개시된 화합물은 치료적으로 허용되는 염으로서 존재할 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바의 용어 "약학적으로 허용되는 염"은 본 명세서에 정의된 바의 치료적으로 허용되는 본 명세서에 개시된 화합물의 염 또는 양성 이온을 나타낸다. 염은 화합물의 최종 단리 및 정제 동안 또는 개별적으로 적절한 화합물을 적절한 산 또는 염기와 반응시켜 제조할 수 있다. 치료적으로 허용되는 염은 산 부가염 및 염기 부가염을 포함한다. 염의 제조 및 선택에 대한 더욱 완전한 논의는 문헌["Handbook of Pharmaceutical Salts, Properties, and Us", "Stah and Wermuth, Ed., (Wiley-VCH and VHCA, Zurich, 2002) 및 Berge et al., J. Pharm. ScL 1977, 66, 1-19] 참조.

약학적으로 허용되는 염의 제조에 사용하기에 적절한 산은 아세트산, 2,2-디클로로아세트산, 아실화 아미노산, 아디프산, 알긴산, 아스코르브산, L-아스파르트산, 벤젠설폰산, 벤조산, 4-아세트아미도벤조산, 붕산, (+)-캠퍼산, 캠퍼설폰산, (+)-(1S)-캠퍼-10-설폰산, 카프르산, 카프로산, 카프릴산, 신남산, 시트르산, 시클람산, 시클로헥산설팜산, 도데실황산, 에탄-1,2-디설폰산, 에탄설폰산, 2-히드록시-에탄설폰산, 포름산, 푸마르산, 갈락타르산, 젠티스산(gentisic acid), 글루코헵톤산, D-글루콘산, D-글루쿠론산, L-글루탐산, α-옥소-글루타르산, 글리콜산, 히푸르산, 브롬화수소산, 염산, 요오드화수소산, (+)-L-락트산, (±)-DL-락트산, 락토비온산, 라우르산, 말레산, (-)-L-말산, 말론산, (±)-DL-만델산, 메탄설폰산, 나프탈렌-2-설폰산, 나프탈렌-1,5-디설폰산, 1-히드록시-2-나프토산, 니코틴산, 질산, 올레산, 오르토산, 옥살산, 팔미드산, 팜산, 과염소산, 인산, L-피로글루탐산, 사카린산, 살리실산, 4-아미노-살리실산, 세바크산, 스테아르산, 숙신산, 황산, 탄닌산, (+)-L-타르타르산, 티오시안산, p-톨루엔설폰산, 운데실렌산 및 발레르산을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

약학적으로 허용되는 염의 제조에 사용하기에 적절한 염기는 무기 염기, 예컨대 수산화마그네슘, 수산화칼슘, 수산화칼륨, 수산화아연 또는 수산화나트륨; 및 유기 염기, 예컨대 L-아르기닌, 베네타민, 벤자틴, 콜린, 데놀, 디에탄올아민, 디에틸아민, 디메틸아민, 디프로필아민, 디이소프로필아민, 2-(디에틸아미노)-에탄올, 에탄올아민, 에틸아민, 에틸렌디아민, 이소프로필아민, N-메틸-글루카민, 히드라바민, 1H-이미다졸, L-리신, 모르폴린, 4-(2-히드록시에틸)-모르폴린, 메틸아민, 피페리딘, 피페라진, 프로필아민, 피롤리딘, 1-(2-히드록시에틸)-피롤리딘, 피리딘, 퀴누클리딘, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 2차 아민, 트리에탄올아민, 트리메틸아민, 트리에틸아민, N-메틸-D-글루카민, 2-아미노-2-(히드록시메틸)-1,3-프로판디올 및 트로메탄민을 비롯한 1차, 2차, 3차 및 4차 지방족 및 방향족 아민을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

본 발명의 화합물을 원료로서 투여할 수 있지만, 이를 약학적 조성물로서 제공하는 것도 가능하다. 따라서, 본 명세서에는 본 명세서에 개시된 특정 화합물 중 1 이상 또는 이의 1 이상의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭 또는 용매화물을, 이의 1 이상의 약학적으로 허용되는 담체 및 임의로 1 이상의 다른 치료 성분과 함께 포함하는 약학적 조성물이 제공된다. 적절한 제제는 선택되는 투여 경로에 따라 달라진다. 적절한 바의 그리고 당업계에 이해된 바의 잘 알려진 기술, 담체 및 부형제 중 임의의 것, 예컨대 문헌(Remington's Pharmaceutical Sciences)에 기재된 것을 사용할 수 있다. 본 명세서에 개시된 약학적 조성물은 당업계에 공지된 임의의 방식으로, 예컨대 통상적인 혼합, 용해, 과립화, 당의정 제조, 연화(levigation), 유화, 캡슐화, 포착(entrapment) 또는 압축 공정에 의해 제조할 수 있다. 약학적 조성물은 또한 지연, 연장, 장기, 지속, 박동(pulsatile), 제어, 가속 및 고속, 표적, 프로그램화 방출을 비롯한 변경된 방출 제형 및 위 체류 제형으로서 제제화할 수 있다. 이들 제형은 당업자에게 공지된 통상적인 방법 및 기술에 따라 제조할 수 있다[문헌(Remington: The Science and Practice of Pharmacy, supra; Modified-Release Drug Deliver Technology, Rathbone et al., Eds., Drugs and the Pharmaceutical Science, Marcel Dekker, Inc., New York, NY, 2002, Vol. 126) 참조].

조성물은 경구, 비경구(피하, 피내, 근육내, 정맥내, 동맥내 및 골수내 포함), 복강내, 경점막, 경피, 직장 및 국소(피부, 볼, 설하 및 안구내 포함) 투여에 적절한 것들을 포함하지만, 가장 적절한 경로는 예컨대 수용자의 상태 및 질환에 따라 달라질 수 있다. 조성물은 편리하게는 단위 제형 내에 제공될 수 있으며, 약학 업계에 잘 알려진 방법 중 임의의 것에 의해 제조할 수 있다. 통상적으로, 이들 방법은 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭 또는 용매화물("활성 성분")을 1 이상의 보조 성분을 구성하는 담체와 회합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 조성물은 활성 성분을 액상 담체 또는 미분화된 고상 담체 또는 양쪽과 균일하고 친밀하게 회합시킨 후, 필요에 따라 생성물을 소정 제제로 성형하는 것에 의해 제조한다.

경구 투여에 적절한 본 명세서에 개시된 화합물의 제제는 각각 소정량의 활성 성분을 포함하는 캡슐, 카세 또는 정제와 같은 불연속(discrete) 단위로서; 분말 또는 과립으로서; 수성 액체 또는 비수성 액체 중 용액 또는 현탁액으로서; 또는 수중유 액상 에멀션 또는 유중수 액상 에멀션으로서 제공할 수 있다. 활성 성분은 또한 볼루스, 연질약 또는 페이스트로서 제공할 수 있다.

경구로 사용할 수 있는 약학적 제제는 정제, 젤라틴으로 제조된 푸쉬핏(push-fit) 캡슐 뿐 아니라, 젤라틴 및 글리세롤 또는 소르비톨과 같은 가소제로 제조된 연질 밀봉 캡슐을 포함한다. 정제는 1 이상의 보조 성분과 함께 압축 또는 성형하여 제조할 수 있다. 압착 정제는 적절한 기계에서 결합제, 불활성 희석제 또는 윤활 계면 활성제 또는 분산제와 임의로 혼합된 분말 또는 과립과 같은 비유동 형태의 활성 성분을 압축하여 제조할 수 있다. 성형된 정제는 불활성 액상 희석제로 습윤된 분말화된 화합물의 혼합물을 적절한 기계에서 성형하여 제조할 수 있다. 정제는 임의로 코팅 또는 스코링(scoring)할 수 있고, 그 안에 든 활성 성분의 느린 또는 제어된 방출을 제공하도록 제제화할 수 있다. 경구 투여를 위한 모든 제제는 이러한 투여에 적절한 용량이어야 한다. 푸쉬핏 캡슐은 락토오스와 같은 충전제, 전분과 같은 결합제 및/또는 탈크 또는 스테아르산마그네슘과 같은 윤활제 및 임의로 안정화제와의 혼합물로 활성 성분을 함유할 수 있다. 연질 캡슐에서, 활성 화합물을 지방 오일, 액상 파라핀 또는 액상 폴리에틸렌 글리콜과 같은 적절한 액체에 용해시키거나 또는 현탁시킬 수 있다. 또한, 안정화제를 첨가할 수 있다. 당의정 코어에는 적절한 코팅을 제공한다. 이를 목적으로, 임의로 아라비카검, 탈크, 폴리비닐 피롤리돈, 카르보폴 겔, 폴리에틸렌 글리콜 및/또는 이산화티탄, 락커액 및 적절한 유기 용매 또는 용매 혼합물을 함유할 수 있는 농축 당 용액을 이용할 수 있다. 활성 화합물 용량의 상이한 조합을 확인 또는 특성화하기 위해 염료 또는 안료를 정제 또는 당의정 코팅에 첨가할 수 있다.

화합물은 주사에 의해, 예컨대 볼루스 주사 또는 연속 주입에 의해 비경구 투여를 위해 제제화할 수 있다. 주사용 제제는 단위 제형에, 예컨대 앰풀 또는 다용량 용기에, 보존제를 첨가하여 제공할 수 있다. 조성물은 유성 또는 수성 베히클 중 현탁액, 용액 또는 에멀션과 같은 형태를 취할 수 있으며, 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제와 같은 제제화제(formulatory agent)를 함유할 수 있다. 제제는 단위 용량 또는 다용량 용기, 예컨대 밀봉된 앰플 또는 바이알에 제공할 수 있으며, 사용 직전에 멸균 액상 담체, 예컨대 염수 또는 멸균 무발열수(pyrogen-free water)의 첨가만을 필요로 하는 동결 건조 조건에서 또는 분말 형태로 보관할 수 있다. 이전에 기재한 종류의 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 즉석 주사액 및 현탁액을 제조할 수 있다.

비경구 투여용 제제는 산화 방지제, 완충액, 정균제 및 제제에 의도하는 수용자의 혈액과 등장성을 부여하는 용질을 함유할 수 있는 활성 화합물의 수성 및 비수성(유성) 멸균 주사액; 및 현탁제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 살균 현탁액을 포함한다. 적절한 친지성 용매 또는 베히클은 지방 오일, 예컨대 참기름, 또는 합성 지방산 에스테르, 예컨대 올레산에틸 또는 트리글리세리드 또는 리포솜을 포함한다. 수성 주사 현탁액은 현탁액의 점도를 증가시키는 물질, 예컨대 나트륨 카르복시메틸 셀룰로오스, 소르비톨 또는 덱스트란을 함유할 수 있다. 임의로, 현탁액은 또한 고농축액의 제조를 가능하게 하기 위해 화합물의 용해도를 증가시키는 적절한 안정화제 또는 제제를 함유할 수 있다.

상기 기재한 제제 외에, 화합물은 또한 디포 제제로서 제제화할 수 있다. 이러한 장기 작용 제제는 이식에 의해(예컨대 피하로 또는 피부내로) 또는 근육내 주사에 의해 투여할 수 있다. 따라서, 예컨대 화합물을 적절한 중합체 또는 친수성 재료(예컨대 허용되는 오일 중 에멀션으로서) 또는 이온 교환 수지와 함께, 또는 난용성 유도체로서, 예컨대 난용성 염으로서 제제화할 수 있다.

볼 또는 설하 투여를 위해, 조성물은 통상적인 방식으로 제제화된 정제, 로젠지, 향정 또는 겔의 형태를 취할 수 있다. 이러한 조성물은 수크로오스 및 아카시아 또는 트래거캔스와 같은 향미 베이시스에 활성 성분을 포함할 수 있다.

화합물은 예컨대 코코아 버터, 폴리에틸렌 글리콜 또는 다른 글리세리드와 같은 통상적인 좌제 베이스를 함유하는 좌제 또는 정체 관장제와 같은 직장 조성물로 제제화할 수도 있다.

본 명세서에 개시된 특정 화합물은 비전신 투여인 국소 투여할 수 있다. 이는 본 명세서에 개시된 화합물의 표피 및 협강에의 외부 도포, 및 화합물이 혈류로 유의적으로 진입하지 않도록 하는, 이러한 화합물의 귀, 눈 및 코에의 점적 주입을 포함한다. 반대로, 전신 투여는 경구, 정맥내, 복강내 및 근육내 투여를 지칭한다.

국소 투여에 적절한 제제는 겔, 리니멘트(liniment), 로션, 크림, 연고 또는 페이스트와 같은 염증 부위에의 피부를 통한 침투에 적절한 액상 또는 반액상 제제, 및 눈, 귀 또는 코에의 투여에 적절한 점적 약제를 포함한다.

흡입에 의한 투여를 위해, 화합물을 흡입기, 팩에 가압된 네뷸라이저 또는 에어로졸 스프레이를 전달하는 다른 편리한 수단으로부터 전달할 수 있다. 가압된 팩은 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 다른 적절한 가스와 같은 적절한 추진제를 포함할 수 있다. 가압된 에어로졸의 경우, 계측량을 전달하기 위해 밸브를 제공하여 용량 단위를 결정할 수 있다. 대안적으로, 흡입(inhalation 또는 insufflation)에 의한 투여를 위해, 본 발명에 따른 화합물은 건조 분말 조성물, 예컨대 화합물과 적절한 분말 베이스, 예컨대 락토오스 또는 전분의 분말 믹스의 형태를 취할 수 있다. 분말 조성물은 흡입기(inhalator 또는 insufflator)를 이용하여 분말을 투입할 수 있는 단위 제형에, 예컨대 캡슐, 카트리지, 젤라틴 또는 블리스터(blister) 팩에 제공할 수 있다.

바람직한 단위 용량 제제는 활성 성분의 본 명세서에서 하기에 기재하는 바의 유효 용량을 함유하는 것들 또는 이의 적절한 분획이다.

화합물은 1 일 0.1 내지 500 ㎎/㎏의 용량으로 경구로 또는 주사를 통해 투여할 수 있다. 성인 인간에 대한 용량 범위는 일반적으로 5 ㎎ 내지 2 g/일이다. 정제 또는 비연속 단위에 제공되는 제공물의 다른 형태는 편리하게는 이러한 용량에서 또는 이러한 용량의 배수에서 효과적인 1 이상의 화합물의 양을 함유할 수 있으며, 단위는 예컨대 5 내지 500 ㎎, 일반적으로 약 10 내지 200 ㎎를 함유한다.

단일 제형을 제조하기 위해 담체 재료와 합할 수 있는 활성 성분의 양은 치료되는 숙주 및 특정 투여 모드에 따라 달라질 것이다.

화합물은 다양한 모드로, 예컨대 경구로, 국소로 또는 주사에 의해 투여할 수 있다. 환자에게 투여되는 화합물의 정확한 양은 주치의의 책임 하에 있을 것이다. 임의의 특정 환자에 대한 특정 용량 수준은 사용되는 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 전신 건강 상태, 성별, 식이, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도, 약물 조합, 치료되는 정확한 질환 및 치료되는 질환의 중증도를 비롯한 다양한 인자에 따라 달라질 것이다. 또한, 투여 경로는 질환 및 이의 중증도에 따라 달라질 수 있다.

환자의 병태가 개선되지 않을 경우, 환자의 질환의 증상을 개선하거나 또는 제어 또는 제한하기 위해, 의사의 결정권으로 화합물을 만성적으로, 즉 환자의 인생의 지속 기간 내내를 비롯한 연장된 기간 동안 투여할 수 있다.

환자의 상태가 개선되는 경우, 의사의 결정권으로 화합물의 투여를 계속적으로 제공하거나 또는 특정 시간 길이 동안 이를 일시적으로 정지(즉, "약물 휴일")할 수 있다.

일단 환자의 병태의 개선이 일어나면, 필요에 따라 유지 용량을 투여한다. 이어서, 투여의 용량 또는 빈도 또는 양쪽을 증상의 함수로서 개선된 질환이 유지되는 수준으로 감소시킬 수 있다. 그러나, 환자는 증상의 재발시 장기에 걸쳐 간헐 치료를 요구할 수 있다.

야누스 키나아제 3 매개 질환을 앓거나 앓는 것으로 여겨지는 피험체에게 치료 유효량의 본 명세서에 개시된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 용매화물 또는 프로드럭을 투여하는 것을 포함하는, 야누스 키나아제 3 매개 질환의 치료 방법이 본 명세서에 개시된다.

야누스 키나아제 3 매개 질환은 신장 이식 거부, 류마티스성 관절염, 건선, 염증성 장 질환, 건성안 증후군, 천식, 이식 거부, 장기 이식, 이종 이식, 홍반, 다발 경화증, I형 당뇨병, 당뇨병으로부터의 합병증, 암, 아토피 피부염, 자가 면역성 갑상샘염 질환, 궤양 대장염, 크론병, 알츠하이머병, 백혈병 및/또는 야누스 키나아제 3 억제제의 투여에 의해 감소, 경감 또는 방지될 수 있는 임의의 질환을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

특정 구체예에서, 야누스 키나아제 3 매개 질환의 치료 방법은

(1) 화합물 또는 이의 대사물의 혈장 수준에서의 개인간 편차의 감소; (2) 용량 단위당 화합물의 평균 혈장 수준의 증가 또는 화합물의 1 이상의 대사물의 평균 혈장 수준의 감소; (3) 피험체에서의 1 이상의 시토크롬 P₄₅₀ 또는 모노아민 산화 효소 아이소형의 억제 및/또는 이에 의한 대사의 감소; (4) 피험체에서의 1 이상의 다형 발현 시토크롬 P₄₅₀ 아이소형을 통한 대사의 감소; (5) 질환 제어 및/또는 질환 근절 종말점의 1 이상의 통계적으로 유의적인 개선; (6) 질환의 치료 동안의 임상 효과의 개선; (7) 1차 임상학적 이익으로서의 비정상 소화 또는 간 변수의 저하 또는 출현의 지연 또는 재발의 예방; 또는 (8) 상당하는 비동위원소 농축 화합물에 비한, 임의의 진단적 간담즙성 작용 종말점(diagnostic hepatobiliary function endpoint)에서의 유해한 변화의 감소 또는 제거

에 영향을 미치도록, 피험체에게 치료 유효량의 본 명세서에 개시된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 용매화물 또는 프로드럭을 투여하는 것을 포함한다.

특정 구체예에서, 상당하는 비동위원소 농축 화합물에 비해, 약 5%를 초과하여, 약 10%를 초과하여, 약 20%를 초과하여, 약 30%를 초과하여, 약 40%를 초과하여, 또는 약 50%를 초과하여, 본 명세서에 개시된 화합물 또는 이의 대사물의 혈장 수준에서의 개인간 편차가 감소되거나; 본 명세서에 개시된 화합물의 평균 혈장 수준이 증가되거나; 본 명세서에 개시된 화합물의 대사물의 평균 혈장 수준이 감소되거나; 본 명세서에 개시된 화합물에 의한 시토크롬 P₄₅₀ 또는 모노아민 산화 효소 아이소형의 억제가 감소되거나; 또는 1 이상의 다형 발현 시토크롬 P₄₅₀ 아이소형에 의한 본 명세서에 개시된 화합물의 대사가 감소된다.

본 명세서에 개시된 화합물 또는 이의 대사물의 혈장 수준은 문헌[Li et al. Rapid Communications in Mass Spectrometry 2005, 19, 1943-1950; Paniagua et al., Therapeutic Drug Monitoring 2005, 27(5), 608-616; Lawendy et al., J Clin Pharmacol 2009, 49, 423-429] 및 거기에 기재된 임의의 참고 문헌에 기재된 방법 및 이로부터 만든 임의의 변형을 이용하여 측정할 수 있다.

포유 동물 피험체 내 시토크롬 P₄₅₀ 아이소형의 예는 CYP1A1, CYP1A2, CYP1B1, CYP2A6, CYP2A13, CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C18, CYP2C19, CYP2D6, CYP2E1, CYP2G1, CYP2J2, CYP2R1, CYP2S1, CYP3A4, CYP3A5, CYP3A5P1, CYP3A5P2, CYP3A7, CYP4A11, CYP4B1, CYP4F2, CYP4F3, CYP4F8, CYP4F11, CYP4F12, CYP4X1, CYP4Z1, CYP5A1, CYP7A1, CYP7B1, CYP8A1, CYP8B1, CYP11A1, CYP1lB1, CYP11B2, CYP17, CYP19, CYP21, CYP24, CYP26A1, CYP26B1, CYP27A1, CYP27B1, CYP39, CYP46, 및 CYP51을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

포유 동물 피험체 내 모노아민 산화 효소 아이소형의 예는 MAO_A 및 MAO_B를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

시토크롬 P₄₅₀ 아이소형의 억제는 문헌(Ko et al., British Journal of Clinical Pharmacology 2000, 49, 343-351)의 방법에 의해 측정한다. MAO_A 아이소형의 억제는 문헌(Weyler et al., J. Biol Chem. 1985, 260, 13199-13207)의 방법에 의해 측정한다. MA_0B 아이소형의 억제는 문헌(Uebelhack et al., Pharmacopsychiatry, 1998, 31, 187-192)의 방법에 의해 측정한다.

포유 동물 피험체 내 다형 발현 시토크롬 P₄₅₀ 아이소형의 예는 CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19 및 CYP2D6을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

간 마이크로솜, 시토크롬 P₄₅₀ 아이소형 및 모노아민 산화 효소 아이소형의 대사 활성은 본 명세서에 기재된 방법에 의해 측정한다.

진단적 간담즙성 작용 종말점의 예는 알라닌 아미노 전이 효소("ALT"), 혈청 글루탐산 피루빈산 아미노 전이 효소("SGPT"), 아스파르테이트 아미노 전이 효소("AST" 또는 "SGOT"), ALT/AST 비, 혈청 아돌라아제, 알칼리 인산 분해 효소("ALP"), 암모니아 수준, 빌리루빈, 감마-글루타밀 트랜스펩티다아제("GGTP", "γ-GTP" 또는 "GGT"), 류신 아미노펩티다아제("LAP"), 간 생검, 간 초음파 검사법, 간 핵 스캔, 5'-뉴클레오티드 분해 효소 및 혈액 단백질을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 간담즙 종말점은 문헌(Diagnostic and Laboratory Test Reference", 4^th edition, Mosby, 1999)에 제공된 바의 기재된 정상 수준과 비교한다. 이 분석은 표준 프로토콜에 따라 공인된 연구소에 의뢰하여 실시한다.

인간 치료에 유용한 것 외에, 본 명세서에 개시된 특정 화합물 및 제제는 또한 포유 동물, 설치류 등을 비롯한 반려 동물, 외래 동물 및 동물 농물 등의 수의적 치료에 유용할 수 있다. 추가의 바람직한 동물은 말, 개 및 고양이를 포함한다.

병용 요법

본 명세서에 개시된 화합물은 또한 야누스 키나아제 3 매개 질환의 치료에 유용한 다른 제제와 합하거나 또는 병용할 수 있다. 또는 단지 예로서, 보조제의 투여에 의해 본 명세서에 기재된 화합물 중 하나의 치료 효과를 향상시킬 수 있다(즉, 보조제는 그 자체로는 최소의 치료 이익을 가질 수 있지만, 다른 치료제와 조합시, 환자에 대한 전반적인 치료 이익이 향상됨).

이러한 다른 제제, 보조제 또는 약물은 본 명세서에 개시된 화합물과 동시에 또는 순차적으로, 통상적으로 사용되는 경로 및 양으로 투여할 수 있다. 본 명세서에 개시된 화합물을 1 이상의 다른 약물과 동시에 사용할 경우, 본 명세서에 개시된 화합물 외에 이러한 다른 약물을 함유하는 약학적 조성물을 사용할 수 있지만, 필요하지는 않다.

특정 구체예에서, 본 명세서에 개시된 화합물을 1 이상의 H+, K+ ATPase 억제제, 소화 운동성 조절제(alimentary motility modulator), 비스테로이드 항염증제, 아닐리드 진통제, 항류마티스제(anti-rheumatic agent), 글루코코르티코이드 및 면역 억제제와 조합할 수 있다.

특정 구체예에서, 본 명세서에 개시된 화합물은 에소메프라졸, 란소프라졸, 오메프라졸, 판토프라졸, 라베프라졸 및 테나토프라졸을 포함하나 이에 한정되지 않는 1 이상의 H+, K+ ATPase 억제제와 조합할 수 있다.

특정 구체예에서, 본 명세서에 개시된 화합물은 솔라베그론(solabegron), 테가세로드(tegaserod), 알로세트론(alosetron), 실란세트론(cilansetron), 돔페리돈, 메토클로프라미드, 이토프리드, 시사프리드, 렌자프라이드(renzapride), 자코프라이드(zacopride), 옥트레오티드, 날록손, 에리스토마이신 및 베타네콜을 포함하나 이에 한정되지 않는 1 이상의 소화 운동성 조절제와 조합할 수 있다.

특정 구체예에서, 본 명세서에 개시된 화합물은 아세클로페낙, 아세메타신, 알록시프린, 아스피린, 아자프로파존, 베노릴레이트(benorilate), 브롬페낙(bromfenac), 카프로펜(carprofen), 셀레콕십(celecoxib), 살리실산마그네슘콜린(choline magnesium salicylate), 디클로페낙, 디플루니살, 에토돌락, 에토리콕십, 파이슬라민(faislamine), 펜부텐(fenbuten), 페노프로펜, 플루비프로펜, 이부프로펜, 인도메타신, 케토프로펜, 케토롤락, 로녹시캄(lornoxicam), 록소프로펜, 루미라콕십(lumiracoxib), 멜록시캄, 메클로페남산(meclofenamic acid), 메페남산, 멜록시캄, 메타미졸(metamizole), 살리실산메틸, 살리실산마그네슘, 나부메톤, 나프록센, 니메술리드, 옥시펜부타존, 파레콕십(parecoxib), 페닐부타존, 피록시캄, 살리실 살리실산염(salicyl salicylate), 술린닥, 설핀프라존(sulfinprazone), 수프로펜(suprofen), 테녹시캄, 티아프로펜산 및 톨메틴(tolmetin)을 포함하나 이에 한정되지 않는 1 이상의 비스테로이드 항염증제와 조합할 수 있다.

특정 구체예에서, 본 명세서에 개시된 화합물은 아세트아미노펜 및 페나세틴을 포함하나 이에 한정되지 않는 1 이상의 아닐리드 진통제와 조합할 수 있다.

특정 구체예에서, 본 명세서에 개시된 화합물은 아자티오프린, 시클로스포린 A, D-페니실아민, 금 염, 히드록시클로로퀸, 레플루노미드(leflunomide), 메토트렉세이트, 미노시클린, 설파살라진, 시클로포스파미드, 에타너셉트, 인플릭시맙(infliximab), 아달리무맙, 아나킨라, 리툭시맙 및 아바타셉트를 포함하나 이에 한정되지 않는 질병 완화 항류마티스제와 조합할 수 있다.

특정 구체예에서, 본 명세서에 개시된 화합물은 베클로메타손, 부데소니드, 플루니솔리드(flunisolide), 베타메타손, 플루티카손, 트리암시놀론, 모메타손, 시클레소니드, 히드로코르티손, 코르티손 아세테이트, 프레드니손, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론 및 덱사메타손을 포함하나 이에 한정되지 않는 1 이상의 글루코코르티코이드와 조합할 수 있다.

특정 구체예에서, 본 명세서에 개시된 화합물은 핑골리모드(fingolimod), 시클로스포린 A, 아자티오프린, 덱사메타손, 타크롤리무스, 시롤리무스, 피메크롤리무스, 미코페놀레이트 염, 에버롤리무스(everolimus), 바실릭시맙(basiliximab), 다클리주맙, 흉선세포 항글로불린(anti-thymocyte globulin), 림프구 항글로불린(anti-lymphocyte globulin) 및 CTLA4IgG를 포함하나 이에 한정되지 않는 1 이상의 면역 억제제와 조합할 수 있다.

본 명세서에 개시된 화합물은 또한 노르에피네프린 재흡수 억제제(NRI), 예컨대 아토목세틴; 도파민 재흡수 억제제(DARI), 예컨대 메틸페니데이트; 세로토닌-노르에피네프린 재흡수 억제제(SNRI), 예컨대 밀나시프란; 진정제, 예컨대 디아제팜; 노르에피네프린-도파민 재흡수 억제제(NDRI), 예컨대 부프로피온; 세로토닌-노르에피네프린-도파민 재흡수 억제제(SNDRI), 예컨대 벤라팍신; 모노아민 산화 효소 억제제, 예컨대 셀레길린; 시상 하부 인지질; 엔도텔린 전환 효소(ECE) 억제제, 예컨대 포스포라미돈; 아편 유사제, 예컨대 트라마돌; 트롬복산 수용체 길항 물질, 예컨대 이페트로반; 칼륨 채널 개방제; 트롬빈 억제제, 예컨대 히루딘; 시상 하부 인지질; 성장 인자 억제제, 예컨대 PDGF 활성의 조정제; 혈소판 활성 인자(PAF) 길항 물질; 항혈소판제, 예컨대 GPIIb/IIIa 차단제[예컨대 아브득시맙(abdximab), 엡티피바티드 및 티로피반], P2Y(AC) 길항 물질(예컨대 클로피도그렐, 티클로피딘 및 CS-747) 및 아스피린; 항응고제, 예컨대 와파린; 저분자량 헤파린, 예컨대 에녹사파린; 인자 VIIa 억제제 및 인자 Xa 억제제; 레닌 억제제; 중성 엔도펩티다아제(NEP) 억제제; 바소펩티다아제 억제제(이중 NEP-ACE 억제제), 예컨대 오마파트릴랏 및 게모파트릴랏; HMG CoA 환원 효소 억제제, 예컨대 프라바스타틴, 로바스타틴, 아토바스타틴, 심바스타틴, NK-104[a.k.a. 이타바스타틴, 니스바스타틴(nisvastatin) 또는 니스바스타틴(nisbastatin)] 및 ZD-4522(아타바스타틴 또는 비사스타닌, 또는 로수바스타틴으로도 공지됨); 스쿠알렌 합성 효소 억제제; 피브레이트; 담즙산 격리제, 예컨대 퀘스트란; 니아신; 항죽상경화제, 예컨대 ACAT 억제제; MTP 억제제; 칼슘 채널 차단제, 예컨대 아몰디핀 베실레이트; 칼륨 채널 활성화제; 알파-무스카린 제제; 베타-무스카린제, 예컨대 카베딜올 및 메토프롤올; 항부정맥제; 이뇨제, 예컨대 클로로티아지드, 히드로키오로티아지드, 플루메티아지드, 히드로플루메티아지드, 벤드로플루메티아지드, 메틸클로로티아지드, 트리키오로메티아지드, 폴리티아지드, 벤조티아지드, 에타크린산, 트리크리나펜, 클로르티알리돈, 푸로세닐데(furosenilde), 무솔리민, 부메타니드, 트리암테렌, 아밀로리드 및 스피로노락톤; 혈전 용해제, 예컨대 조직 플라스미노겐 활성화제(tPA), 재조합 tPA, 스트렙토키나아제, 우로키나아제, 프로우로키나아제 및 아니솔화 플라스미노겐 스트렙토키나아제 활성화제 착체(APSAC); 항당뇨제, 예컨대 비구아니드(예컨대 메트포르민), 글루코시다아제 억제제(예컨대 아카보오스), 인슐린, 메글리티니드(예컨대 레파글리니드), 설포닐우레아(예컨대 글리메피리드, 글리부리드 및 글리피지드), 티오졸리딘디온(예컨대 트로글리타존, 로시글리타존 및 피오글리타존) 및 PPAR-감마 작용 물질; 미네랄로코르티코이드 수용체 길항 물질, 예컨대 스피로노락톤 및 에플레레논; 성장 호르몬 분비 촉진제; aP2 억제제; 포스포디에스테르 분해 효소 억제제, 예컨대 PDE III 억제제(예컨대 실로스타졸) 및 PDE V 억제제(예컨대 실데나필, 타달라필, 바데나필); 단백질 티로신 키나아제 억제제; 항염증제; 항증식제, 예컨대 메토트렉세이트, FK506(타크롤리무스, 프로그라프), 미코페놀레이트 모페틸; 화학 요법제; 항암제 및 세포 독성제(예컨대 알킬화제, 예컨대 질소 머스터드, 설폰산알킬, 니트로소우레아, 에틸렌이민 및 트라아젠); 항대사 물질, 예컨대 엽산 길항 물질, 푸린 유사체 및 피리딘 유사체; 항생제, 예컨대 안트라시클린, 블레오마이신, 미토마이신, 닥티노마이신 및 플리카마이신; 효소, 예컨대 L-아스파라기나아제; 파네실-단백질 전이 효소 억제제; 호르몬 제제, 예컨대 에스트로겐/항에스트로겐, 안드로겐/항안드로겐, 프로게스틴 및 황체 형성 호르몬-방출 호르몬 길항 물질 및 옥트레오티드 아세테이트; 미소관 붕괴제, 예컨대 엑테이나시딘(ecteinascidin); 미소관 안정화제, 예컨대 파시탁셀, 도세탁셀 및 에포틸론 A-F; 식물 유래 생성물, 예컨대 빈카 알칼로이드, 에피포도필로톡신 및 탁세인; 국소 이성화 효소 억제제; 프레닐-단백질 전이 효소 억제제; 시클로스포린; 스테로이드, 예컨대 프레드니손 및 덱사메타손; 세포 독성 약물, 예컨대 아자티프린 및 시클로포스파미드; TNF-알파 억제제, 예컨대 테니답; 항 TNF 항체 또는 가용성 TNF 수용체, 예컨대 에타너셉트, 라파마이신 및 레플루니미드; 및 시클로옥시게나아제-2(COX-2) 억제제, 예컨대 셀레콕십 및 로페콕십; 및 다양한 제제, 예컨대 히드록시우레아, 프로카르바진, 미토테인, 헥사메틸멜라민, 금 화합물, 백금 배위 착체, 예컨대 시스플라틴, 사트라플라틴 및 카르보플라틴을 포함하나 이에 한정되지 않는 다른 부류의 화합물과 조합하여 투여할 수 있다.

따라서, 다른 측면에서, 특정 구체예는 피험체에서 야누스 키나아제 3 매개 질환의 감소 또는 예방에 효과적인 본 명세서에 기재된 화합물의 양을, 당업계에 공지된 상기 질환의 치료를 위한 1 이상의 추가의 제제와 함께, 야누스 키나아제 3 매개 질환의 치료를 필요로 하는 인간 또는 동물 피험체에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 피험체에서 야누스 키나아제 3 매개 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 관련 측면에서, 특정 구체예는 1 이상의 본 명세서에 개시된 화합물을 야누스 키나아제 3 매개 질환의 치료를 위한 1 이상의 추가의 제제와 함께 포함하는 치료 조성물을 제공한다.

화합물의 제조를 위한 일반적인 합성 방법

동위원소 수소는 혼입 속도가 미리 결정된 중수소화 시약을 사용하는 합성 기술에 의해 및/또는 혼입 속도가 평형 조건에 의해 결정되는 교환 기술에 의해 본 명세서에 개시된 화합물에 도입할 수 있으며, 이는 반응 조건에 따라 가변성이 매우 클 수 있다. 삼중수소 또는 중수소가 공지된 동위원소 함량의 삼중수소화 또는 중수소화 시약에 의해 직접 그리고 특이적으로 삽입되는 합성 기술로 높은 삼중수소 또는 중수소 존재비를 얻을 수 있지만, 이 기술은 요구되는 화학에 의해 제한될 수 있다. 다른 한편, 교환 기술로는 더 낮은 삼중수소 또는 중수소 삽입비를 얻을 수 있으며, 종종 동위원소가 분자 상의 다수의 위치에 걸쳐 분포된다.

본 명세서에 개시된 화합물은 당업자에게 공지된 방법 및 이의 일상적인 변형, 및/또는 본 명세서의 실시예 부분에 기재된 것과 유사한 하기 절차 및 이의 일상적인 변형, 및/또는 본 명세서에서 그 전체를 참고로 인용하는 문헌(Jiang et al., J. Med. Chem. 2008, 51, 8012-8018; US 6,627,754; WO 2003/048162; WO 2007/012953) 및 여기에 기재된 참고 문헌에 기재된 절차 및 이의 일상적인 변형에 의해 제조할 수 있다. 본 명세서에 개시된 화합물은 또한 하기 반응식 중 임의의 것에 도시된 바와 같이 하여 그리고 이의 일상적인 변형에 의해 제조할 수 있다.

하기 반응식을 본 발명의 실시에 이용할 수 있다. 수소로서 나타낸 임의의 위치는 임의로 중수소로 대체될 수 있다.

반응식 I

화합물 1을 톨루엔과 같은 적절한 용매 중에서 염화벤질과 반응시켜 화합물 2를 얻는다. 화합물 2를 에탄올과 같은 적절한 용매 중에서 붕수소화나트륨과 같은 적절한 환원 시약과 반응시켜 화합물 3을 얻는다. 화합물 3을 에탄올과 같은 절절한 용매 중에서 비스(1,5-시클로옥타디엔)로듐(I) 트리플루오로메탄설포네이트 및 (R)-(-)-1-[(S)-2-(디페닐포스피노)페로세닐]에틸-디-t-부틸포스핀의 조합과 같은 적절한 키랄 로듐 촉매의 존재 하에 수소 가스와 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 4를 얻는다. 화합물 4를 L-디-p-톨루오일 타르타르산과 같은 적절한 키랄 산으로 임의로 결정화시켜 증가된 거울상 이성체 순도를 얻을 수 있다. 화합물 4를 물과 같은 적절한 용매 중에서 탄산칼륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 5와 반응시켜 화합물 6을 얻는다. 화합물 6을 물과 같은 적절한 용매 중에서 탄소상 수산화팔라듐과 같은 적절한 촉매의 존재 하에 수소 가스와 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 7을 얻는다. 화합물 7을 디클로로메탄과 같은 적절한 용매 중에서 트리에틸아민과 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 8과 반응시켜 화학식 I의 화합물 9를 얻는다.

적절한 중수소화 중간체를 사용하여 반응식 I에 도시된 바의 합성 절차에 따라 중수소를 합성에 의해 상이한 위치에 삽입할 수 있다. 예컨대, R₃, R₅, R₉ 및 R₁₁-R₁₃ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 1을 사용할 수 있다. R₄, R₆ 및 R₁₀에 중수소를 도입하기 위해, 붕중수소화나트륨 및 d₅-에탄올을 사용할 수 있다. R₇-R₈ 및 R₁₄-R₁₆ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 중수소 가스를 사용할 수 있다. R₁₇-R₁₈ 및 R₂₀ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 5를 사용할 수 있다. R₁-R₂ 중 1 이상 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 8을 사용할 수 있다.

양성자-중수소 평형 교환을 통해 복소환 N-H와 같은 교환 가능한 양성자를 갖는 다양한 위치에 중수소를 삽입할 수 있다. 예컨대, R₁₉에 중수소를 도입하기 위해, 당업계에 공지된 양성자-중수소 교환 방법을 통해 이 양성자를 중수소로 선택적으로 또는 비선택적으로 대체할 수 있다.

반응식 II

화합물 10을 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 트리아세톡시붕수소화나트륨과 같은 적절한 환원제의 존재 하에 화합물 11과 반응시켜 화합물 12를 얻는다. 화합물 12를 L-디-p-톨루오일타르타르산과 같은 적절한 키랄 산으로 결정화시켜 화합물 4를 얻는다. 화합물 4를 물과 같은 적절한 용매 중에서 탄산칼륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 5와 반응시켜 화합물 6을 얻는다. 화합물 6을 물과 같은 적절한 용매 중에서 탄소상 수산화팔라듐과 같은 적절한 촉매의 존재 하에 수소 가스와 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 7을 얻는다. 화합물 7을 디클로로메탄과 같은 적절한 용매 중에서 트리에틸아민과 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 8과 반응시켜 화학식 I의 화합물 9를 얻는다.

적절한 중수소화 중간체를 사용하여 반응식 II에 도시된 바의 합성 절차에 따라 중수소를 합성에 의해 상이한 위치에 삽입할 수 있다. 예컨대, R₃-R₇ 및 R₉-R₁₃ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 10을 사용할 수 있다. R₈에 중수소를 도입하기 위해, 트리아세톡시붕중수소화나트륨을 사용할 수 있다. R₁₇-R₁₈ 및 R₂₀ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 5를 사용할 수 있다. R₁-R₂ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 8을 사용할 수 있다.

반응식 III

화합물 13을 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 나트륨 헥사메틸디실라지드와 같은 적절한 염기의 존재 하에 탄산디메틸과 같은 적절한 아민 보호 시약과 반응시켜 화합물 1을 얻는다. 화합물 1을 승온에서 톨루엔과 같은 적절한 용매의 존재 하에 브롬화벤질과 반응시켜 화합물 14를 얻는다. 화합물 14를 에탄올과 같은 적절한 용매 중에서 붕수소화나트륨과 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 3을 얻는다. 화합물 3을 메탄올과 같은 적절한 용매 중에서 산화백금과 같은 적절한 촉매의 존재 하에 수소 가스와 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 15를 얻는다. 화합물 15를 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 수소화알루미늄리튬과 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 12를 얻는다.

적절한 중수소화 중간체를 사용하여 반응식 III에 도시된 바의 합성 절차에 따라 중수소를 합성에 의해 상이한 위치에 삽입할 수 있다. 예컨대, R₃, R₆, R₉ 및 R₁₁-R₁₃ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 13을 사용할 수 있다. R₄-R₅ 및 R₁₀에 중수소를 도입하기 위해, 붕중수소화나트륨을 사용할 수 있다. R_7-R₈ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 중수소 가스 및/또는 d₄-메탄올을 사용할 수 있다.

반응식 IV

화합물 16을 승온에서 톨루엔과 같은 적절한 용매 중에서 톨루엔설폰산과 같은 적절한 산의 존재 하에 벤질 알콜과 반응시켜 화합물 17을 얻는다. 화합물 17을 승온에서 톨루엔과 같은 적절한 용매 중에서 나트륨 tert-부톡시드와 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 18(식 중, X는 요오드와 같은 적절한 이탈기임)과 반응시켜 화합물 19를 얻는다. 화합물 19를 메탄올과 같은 적절한 용매 중에서 탄소상 팔라듐과 같은 적절한 촉매의 존재 하에 수소 가스와 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 10을 얻는다. 화합물 10을 나트륨 메톡시드와 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 11과 반응시켜 이민 중간체를 얻고, 이를 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 아세트산과 같은 적절한 산의 존재 하에 트리아세톡시붕수소화나트륨과 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 12를 얻는다.

적절한 중수소화 중간체를 사용하여 반응식 IV에 도시된 바의 합성 절차에 따라 중수소를 합성에 의해 상이한 위치에 삽입할 수 있다. 예컨대, R₃-R₆ 및 R₉-R₁₀ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 16을 사용할 수 있다. R₁₁-R₁₃ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 18을 사용할 수 있다. R₇ 위치에 중수소를 도입하기 위해, 중수소 가스 및/또는 d₄-메탄올을 사용할 수 있다. R₁₄-R₁₆ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 11을 사용할 수 있다. R₈에 중수소를 도입하기 위해, 트리아세톡시붕중수소화나트륨을 사용할 수 있다.

반응식 V

화합물 20을 아세톤과 물의 적절한 혼합물과 같은 적절한 용매 중에서 수산화나트륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 염화톨루엔설포닐과 반응시켜 화합물 21을 얻는다. 화합물 21을 테트라히드로푸란과 물의 적절한 혼합물과 같은 적절한 용매 중에서 탄산칼륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 4와 반응시켜 화합물 22를 얻는다. 화합물 22를 물과 같은 적절한 적절한 용매 중에서 산화마그네슘과 같은 적절한 염기의 존재 하에 탄소상 팔라듐과 같은 적절한 촉매의 존재 하에 수소 가스와 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 23을 얻는다.

적절한 중수소화 중간체를 사용하여 반응식 V에 도시된 바의 합성 절차에 따라 중수소를 합성에 의해 상이한 위치에 삽입할 수 있다. 예컨대, R₁₇-R₁₈ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 20을 사용할 수 있다. R₃-R₁₆ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 4를 사용할 수 있다. R₂₀에 중수소를 도입하기 위해, 중수소 가스 및/또는 산화중수소를 사용할 수 있다.

반응식 VI

화합물 24를 약 16 시간 동안 약 120℃에서 d₄-메탄올 및 d₃-나트륨 메톡시드와 반응시켜 화합물 25를 얻는다. 화합물 24를 약 16 시간 동안 약 160℃에서 d₄-메탄올 및 d₃-나트륨 메톡시드와 반응시켜 화합물 26을 얻는다.

반응식 VII

화합물 5를 아세톤과 물의 적절한 혼합물과 같은 적절한 용매 중에서 수산화나트륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 염화톨루엔설포닐과 반응시켜 화합물 27을 얻는다. 화합물 27을 테트라히드로푸란과 물의 적절한 혼합물과 같은 적절한 용매 중에서 탄산칼륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 12와 반응시켜 화합물 23을 얻는다. 화합물 23을 물과 같은 적절한 용매 중에서 수산화나트륨과 같은 적절한 염기와 반응시켜 화합물 28을 얻는다. 화합물 28을 헥산(0.1% 트리에틸아민 함유)/이소프로판올과 같은 적절한 용리액을 사용하여 Chiralpak IA와 같은 적절한 컬럼을 이용하는 키랄 크로마토그래피를 이용하여 분할시켜 화합물 6을 얻는다. 화합물 6을 이소프로판올과 물의 조합과 같은 적절한 용매 중에서 아세트산과 같은 적절한 산의 존재 하에 탄소상 팔라듐과 같은 적절한 촉매의 존재 하에 수소 가스와 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 7을 얻는다. 화합물 7을 톨루엔과 같은 적절한 용매 중에서 트리에틸아민과 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 29와 반응시켜 화합물 9를 얻는다.

적절한 중수소화 중간체를 사용하여 반응식 VII에 도시된 바의 합성 절차에 따라 중수소를 합성에 의해 상이한 위치에 삽입할 수 있다. 예컨대, R₁₇-R₁₈ 및 R₂₀ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 5를 사용할 수 있다. R₃-R₁₆ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 12를 사용할 수 있다. R₁-R₂에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 29를 사용할 수 있다.

반응식 VIII

화합물 21을 테트라히드로푸란과 물의 적절한 혼합물과 같은 적절한 용매 중에서 탄산칼륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 12와 반응시켜 화합물 30을 얻는다. 화합물 30을 메탄올과 물의 조합과 같은 적절한 용매 중에서 디-tert-부틸 디카르보네이트와 같은 적절한 보호제의 존재 하에 탄소상 수산화팔라듐과 같은 적절한 촉매의 존재 하에 수소 가스와 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 31을 얻는다. 화합물 31을 물과 같은 적절한 용매 중에서 수산화나트륨과 같은 적절한 염기와 반응시켜 화합물 32를 얻는다. 화합물 32을 헥산(0.1% 트리에틸아민 함유)/이소프로판올과 같은 적절한 용리액을 사용하여 Chiralpak IA와 같은 적절한 컬럼을 이용하는 키랄 크로마토그래피를 이용하여 분할시켜 화합물 33을 얻는다. 화합물 33을 1,4-디옥산과 같은 적절한 용매 중에서 염화수소와 같은 적절한 산과 반응시켜 화합물 7을 얻는다.

적절한 중수소화 중간체를 사용하여 반응식 VIII에 도시된 바의 합성 절차에 따라 중수소를 합성에 의해 상이한 위치에 삽입할 수 있다. 예컨대, R₁₇-R₁₈ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 21을 사용할 수 있다. R₃-R₁₆ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 12를 사용할 수 있다. R₂₀에 중수소를 도입하기 위해, 중수소 가스 및/또는 d₄-메탄올을 사용할 수 있다.

반응식 IX

화합물 16을 메탄올과 같은 적절한 용매 중에서 아세트산과 같은 적절한 산의 존재 하에 탄소상 팔라듐과 같은 적절한 촉매 및 수소 가스와 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 34를 얻는다. 화합물 34를 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 탄산칼륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 디-tert-부틸 디카르보네이트와 같은 적절한 보호제와 반응시켜 화합물 35를 얻는다. 화합물 35를 승온에서 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 수소화나트륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 18(식 중, X는 요오드와 같은 적절한 이탈기임)과 반응시켜 화합물 36을 얻는다. 화합물 36을 물과 같은 적절한 용매 중에서 염산과 같은 적절한 산과 반응시켜 화합물 37을 얻는다. 화합물 37을 트리에틸아민과 같은 적절한 염기의 존재 하에 브롬화벤질과 같은 적절한 보호제와 반응시켜 화합물 10을 얻는다.

적절한 중수소화 중간체를 사용하여 반응식 IX에 도시된 바의 합성 절차에 따라 중수소를 합성에 의해 상이한 위치에 삽입할 수 있다. 예컨대, R₃-R₆ 및 R₉-R₁₀ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 16을 사용할 수 있다. R₁₁-R₁₃ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 18을 사용할 수 있다. R₇에 중수소를 도입하기 위해, 염화중수소 및/또는 산화중수소를 사용할 수 있다.

반응식 X

화합물 38을 디이소프로필에틸아민과 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 39와 반응시켜 화합물 40을 얻는다. 화합물 40을 물과 테트라히드로푸란의 조합과 같은 적절한 용매 중에서 탄산칼륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 41과 반응시켜 화합물 42를 얻는다. 화합물 42를 에탄올과 1,4-디옥산의 조합과 같은 적절한 용매 중에서 나트륨 에톡시드와 같은 적절한 염기와 반응시켜 화합물 43을 얻는다. 화합물 43을 승온에서 벤질 알콜과 반응시켜 화합물 44를 얻는다. 화합물 44를 승온에서 아세톤과 같은 적절한 용매 중에서 탄산칼륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 화합물 18(식 중, X는 요오드와 같은 적절한 이탈기임)과 반응시켜 화합물 45를 얻는다. 화합물 45를 아세트산에틸과 같은 적절한 용매 중에서 탄소상 팔라듐과 같은 적절한 촉매 및 수소와 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 46을 얻는다. 화합물 46을 메탄올과 같은 적절한 용매 중에서 톨루엔설폰산과 같은 적절한 산의 존재 하에 오르토포름산트리메틸과 같은 적절한 탈수제와 반응시켜 화합물 47을 얻는다. 화합물 47을 물과 메탄올의 조합과 같은 적절한 용매 중에서 수산화나트륨과 같은 적절한 염기와 반응시켜 화합물 48을 얻는다. 화합물 48을 물과 같은 적절한 용매 중에서 염산과 같은 적절한 산과 반응시켜 화합물 49를 얻는다. 화합물 49를 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 트리아세톡시붕수소화물와 같은 적절한 환원제 및 아세트산과 같은 적절한 산의 존재 하에 화합물 11과 반응시켜 화합물 50을 얻는다. 화합물 50을 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 수소화알루미늄리튬과 같은 적절한 환원제와 반응시켜 화합물 12를 얻는다.

적절한 중수소화 중간체를 사용하여 반응식 X에 도시된 바의 합성 절차에 따라 중수소를 합성에 의해 상이한 위치에 삽입할 수 있다. 예컨대 R₁₁-R₁₃ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 18을 사용할 수 있다. R₅-R₇에 중수소를 도입하기 위해, d₁-수산화나트륨, 산화중수소 및/또는 d₄-메탄올을 사용할 수 있다. R₉-R₁₀에 중수소를 도입하기 위해, 염화중수소 및/또는 산화중수소를 사용할 수 있다. R₈에 중수소를 도입하기 위해, 트리아세톡시붕중수소화나트륨을 사용할 수 있다. R₃-R₄에 중수소를 도입하기 위해, 중수소화리튬알루미늄을 사용할 수 있다. R₁₄-R₁₆ 중 1 이상의 위치에 중수소를 도입하기 위해, 상당하는 중수소 치환을 갖는 화합물 18을 사용할 수 있다.

본 발명을 하기 실시예에 의해 추가로 예시한다. 모든 IUPAC 명칭은 CambridgeSoft사의 ChemDraw 10.0을 이용하여 생성하였다.

실시예 1

3-((3R,4R)-4-메틸-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴 모노 시트레이트 염(CP-690550 시트레이트 염)

단계 1

4-클로로-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘: 약 0℃에서, 수산화나트륨(수중 2 mol/ℓ, 8 ㎖, 1.20 당량)을 아세톤(20 ㎖) 중 4-메틸벤젠-1-설포닐 클로라이드(2.7 g, 13.9 mmol, 1.10 당량) 및 4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(2 g, 12.8 mmol, 1.00 당량)의 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 약 6 시간 동안 약 20℃에서 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 아세톤/물로 세정하여 표제 생성물을 백색 고체로서 얻었다(4.0 g; 수율 = 97%). ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ: 8.78 (s, 1H), 8.11 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.80 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.73 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 2.42 (s, 3H). LC-MS: m/z = 308/310 (M+H)⁺.

단계 2

메틸 4-메틸피리딘-3-일카르바메이트: 약 0℃에서, 칼륨 t-부톡시드(47 g, 420 mmol, 3.00 당량)를 테트라히드로푸란(400 ㎖) 중 4-메틸피리딘-3-아민(15 g, 139 mmol, 1.00 당량)의 용액에 여러 번에 걸쳐 첨가하였다. 약 30 분 동안 용액을 교반한 후, 탄산디메틸(18.8 g, 209 mmol, 1.50 당량)을 첨가하였다. 용액을 약 16 시간 동안 주위 온도에서 교반한 후, 물(100 ㎖)을 첨가하였다. 아세트산에틸(3 x 200 ㎖)로 표준 추출 워크업 처리한 후, 미정제 생성물을 아세트산에틸/석유 에테르(1:1)로부터의 재결정화에 의해 정제하여 표제 생성물을 연황색 고체로서 얻었다(17 g; 수율 = 74%). LC-MS: m/z = 167 (M+H)⁺.

단계 3

1-벤질-3-메톡시카르보닐아미노-4-메틸-피리디늄 브로마이드: 1-(브로모메틸)벤젠(19 g, 111 mmol, 1.10 당량)을 톨루엔(500 ㎖) 중 메틸 4-메틸피리딘-3-일카르바메이트(17 g, 102 mmol, 1.00 당량)의 용액에 첨가하였다. 용액을 약 16 시간 동안 약 110℃에서 교반하였다. 주위 온도로 냉각시킨 후, 고체를 여과에 의해 수집하고, 톨루엔으로 세정하여 표제 화합물을 연갈색 고체로서 얻었다(35 g; 수율 = 97%).

단계 4

메틸 1-벤질-4-메틸-1,2,5,6-테트라히드로피리딘-3-일카르바메이트: 붕수소화나트륨(4.4 g, 116 mmol, 1.20 당량)을 메탄올(300 ㎖) 중 1-벤질-3-메톡시카르보닐아미노-4-메틸-피리디늄 브로마이드(35 g, 104 mmol, 1.00 당량)의 용액에 여러 번에 걸쳐 첨가하였다. 생성된 용액을 약 16 시간 동안 주위 온도에서 교반한 후, 물(200 ㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 진공에서 농축시킨 후, 에테르(3 x 200 ㎖)로 표준 추출 워크업 처리하여 미정제 잔류물을 얻은 후, 이를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(20:1))에 의해 정제하여 표제 생성물을 황색 고체로서 얻었다(18 g; 수율 = 66%). LC-MS: m/z = 261 (M+H)⁺.

단계 5

메틸 1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일-카르바메이트: 산화백금(1.0 g, 4.41 mmol, 0.11 당량)을 메탄올(200 ㎖) 중 메틸 1-벤질-4-메틸-1,2,5,6-테트라히드로피리딘-3-일카르바메이트(10 g, 38.46 mmol, 1.00 당량)의 용액에 첨가하였다. 수소 가스를 도입한 후, 혼합물을 약 16 시간 동안 약 60℃에서 교반한 후, 여과하였다. 생성된 여액을 농축시켜 미정제 잔류물을 얻은 후, 이를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸/석유(1:2))에 의해 정제하여 표제 생성물을 황색 고체로서 얻었다(7 g; 수율 = 66%). LC-MS: m/z = 263 (M+H)⁺.

단계 6

(1-벤질-4-메틸-피페리딘-3-일)-메틸-아민: 약 0℃에서, 수소화알루미늄리튬(3.6 g, 92.8 mmol, 5.00 당량)을 테트라히드로푸란(100 ㎖) 중 메틸 1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일-카르바메이트(5.0 g, 18.1 mmol, 1.00 당량)의 용액에 여러 번에 걸쳐 첨가하였다. 생성된 용액을 약 16 시간 동안 가열 환류시킨 후, 물(10 ㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 여과하고, 생성된 여액을 진공에서 농축시켜 미정제 잔류물을 얻은 후, 이를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(20:1))에 의해 정제하여 표제 생성물을 황색 오일로서 얻었다(3.0g; 수율 = 72%). ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ: 7.20-7.38 (m, 5H), 3.58 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.48 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 2.60-2.82 (m, 2H), 2.46 (br s, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.02-2 (m, 2H), 2.64-2.84 (m, 2H), 1.45-1.58 (m, 2H), 0.97 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: m/z = 219 (M+H)⁺.

단계 7

N-(1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-N-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민: 4-클로로-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(2 g, 6.37 mmo1,2.00 당량) 및 탄산칼륨(2.7 g, 19.4 mmol, 6.00 당량)을 수(30 ㎖) 중 (1-벤질-4-메틸-피페리딘-3-일)-메틸-아민(700 ㎎, 2.89 mmol, 1.00 당량)의 용액에 첨가하였다. 용액을 약 16 시간 동안 약 100℃에서 교반한 후, 주위 온도로 냉각시켰다. 아세트산에틸(3 x 100 ㎖)로의 표준 추출 워크업 처리 후, 미정제 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸/석유(1: 1))에 의해 정제하여 표제 생성물을 밝은 황색 고체로서 얻었다(1.5 g; 수율 = 96%). ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ: 8.36 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.45 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 7.20-7.42 (m, 7H), 6.75 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 5.05-5.20 (m, 1H), 3.40-3.65 (m, 5H), 2.70-2.92 (m, 2H), 2.50-2.70 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.23-2.42 (m, 1H), 2.10-2.23 (m, 1H), 1.55-1.75 (m, 2H), 0.92 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: m/z = 490 (M+H)⁺.

단계 8

N-(1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민: 50% 수산화나트륨(10 ㎖) 및 N-(1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-N-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(400 ㎎, 0.80 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 약 16 시간 동안 약 60℃에서 교반한 후, 주위 온도로 냉각시켰다. 아세트산에틸(4 x 10 ㎖)로의 표준 추출 워크업 처리 후, 미정제 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(10:1))에 의해 정제하여 표제 생성물을 황색 고체로서 얻었다(0.25 g; 수율 = 88%). ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ: 11.35 (br s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.20-7.40 (m, 5H), 7.06 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.20-5.30 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.48-3.65 (m, 2H), 2.85-2.98 (m, 1H), 2.60-2.85 (m, 2H), 2.30-2.45 (m, 1H), 2.12-2.30 (m, 1H), 1.60-1.92 (m, 2H), 0.98 (d, J = 6.0 Hz, 3H). LC-MS: m/z = 336 (M+H)⁺.

단계 9

N-((3R,4R)-1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2.3-d]피리미딘-4-아민: 거울상 이성체 N-((3R,4R)-1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(4.5 g)을 하기 조건을 이용한 키랄 분취용 HPLC를 이용하여 키랄 분할에 의해 단리하였다: 컬럼: Chiralpak IA, 0.46 x 25 ㎝; 이동상: 헥산(0.1% 트리에틸아민 중):이소프로판올(90:10); 검출기: UV 254 ㎚. 소정 거울상 이성체의 체류 시간: 11.72 분, 원하지 않는 거울상 이성체의 체류 시간: 7.88 분. ee% > 99.8%. 표제 생성물을 황색 고체로서 단리하였다(1.8 g; 수율 = 40%). ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ: 11.35 (br s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.20-7.40 (m, 5H), 7.06 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.20-5.30 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.48-3.65 (m, 2H), 2.85-2.98 (m, 1H), 2.60-2.85 (m, 2H), 2.30-2.45 (m, 1H), 2.12-2.30 (m, 1H), 1.60-1.92 (m, 2H), 0.98 (d, J = 6.0 Hz, 3H). LC-MS: m/z = 336 (M+H)⁺.

단계 10

N-메틸-N-((3R,4R)-4-메틸피페리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민: 탄소상 수산화팔라듐(50 ㎎) 및 아세트산(44 ㎎, 0.72 mmol, 1.00 당량)을 이소프로판올/물(10 ㎖/2 ㎖) 중 N-((3R,4R)-1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(250 ㎎, 0.67 mmol, 1.00 당량)의 용액에 첨가하였다. 수소 가스를 도입한 후, 생성된 혼합물을 약 16 시간 동안 약 50℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과한 후, 여액의 pH 값을 수산화나트륨을 첨가하여 8로 조정하였다. 디클로로메탄(3 x 20 ㎖)으로의 표준 추출 워크업 처리로 표제 생성물을 회백색 고체로서 얻었다(140 ㎎; 수율 = 81%) ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ: 10.60 (br s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.07 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.60 (d, 7 = 3.6 Hz, 1H), 4.88-4.98 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.25-3.37 (m, 1H), 2.80-3.10 (m, 3H), 2.45-2.58 (m, 1H), 1.82-2.00 (m, 1H), 1.60-1.80 (m, 2H), 1.11 (d, 7 = 7.2 Hz, 3H). LC-MS: m/z = 246 (M+H)⁺.

단계 11

3-((3R,4R)-4-메틸-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴(CP-690550): 에틸 2-시아노아세테이트(140 ㎎, 1.23 mmol, 6.00 당량) 및 트리에틸아민(40 ㎎, 0.39 mmo1, 2.00 당량)을 톨루엔(10 ㎖) 중 N-메틸-N-((3R,4R)-4-메틸피페리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 12 (50 ㎎, 0.19 mmol, 1.00 당량)의 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 약 16 시간 동안 약 110℃에서 교반한 후, 진공에서 농축시켰다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸/메탄올(50:1))에 의해 정제하여 표제 생성물을 밝은 황색 고체로서 얻었다(33 ㎎; 수율 = 52%). ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ: 8.10 (s, 1H), 7.10 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 5.00-5.10 (m, 1H), 3.80-4.00 (m, 2H), 3.55-3.75 (m, 1H), 3.40-3.55 (m, 1H), 3.30-3.40 (m, 5H), 2.40-2.55 (m, 1H), 1.82-2.00 (m, 1H), 1.60-1.80 (m, 1H), 1.05-1.20 (m, 3H). LC-MS: m/z = 313 (M+H)⁺.

단계 12

3-((3R,4R)-4-메틸-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴 모노 시트레이트 염(CP-690550 시트레이트 염): 시트르산(20 ㎎, 0.10 mmol, 1.00 당량)을 물/메탄올(5/0.5 ㎖) 중 3-((3R,4R)-4-메틸-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴(33 ㎎, 0.10 mmol, 1.00 당량)의 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 약 10 분 동안 약 40℃에서 교반한 후, 주위 온도로 냉각시켰다. 그 다음, 용매를 저온 동결 건조기를 이용하여 제거하여 표제 화합물을 회백색 고체로서 얻었다(40 ㎎; 수율 = 76%). ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ: 8.15 (s, 1H), 7.15 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.95-5.15 (m, 1H), 3.85-4.08 (m, 4H), 3.58-3.80 (m, 1H), 3.40-3.60 (m, 4H), 2.92 (Ab_q, J = 15.6 Hz, 2H), 2.80 (Ab_q, J = 15.6 Hz, 2H), 2.40-2.60 (m, 1H), 1.85-2.05 (m, 1H), 1.68-1.85 (m, 1H), 1.05-1.20 (m, 3H). LC-MS: m/z = 313 (MH-C₆H₈O₇)⁺.

실시예 2

3-((3R,4R)-4-메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴 모노 시트레이트 염(CP-690550-d ₄ 시트레이트 염)

단계 1

4-클로로-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘: 4-메틸벤젠-1-설포닐 클로라이드(3.7 g, 19.32 mmol, 1.20 당량)를 아세톤(20 ㎖) 중 2,4-디클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 1(3 g, 16.1 mmol, 1.00 당량)의 용액에 첨가하였다. 약 0℃에서, 수산화나트륨 수용액(2 mol/ℓ, 12 ㎖)을 용액에 적가하였다. 그 다음, 용액을 약 3 시간 동안 주위 온도에서 교반하였다. 여과에 의해 고체를 수집하고, 아세톤/물로 세정하여 표제 생성물을 백색 고체로서 얻었다(5.2 g; 수율 = 95%). LC-MS: m/z = 342 (M+H)⁺.

단계 2

(1-벤질-4-메틸-피페리딘-3-일)-d ₃ -메틸-아민: 수소화알루미늄리튬을 중수소화리튬알루미늄으로 대체한 것 외에는, 실시예 1, 단계 6의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 황색 오일로서 단리하였다(3.0 g; 수율 = 72%). LC-MS: m/z = 222 (M+H)⁺.

단계 3

N-(1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-2-클로로-N-d ₃ -메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민: 테트라히드로푸란/물(1:1)(60 ㎖) 중 (1-벤질-4-메틸-피페리딘-3-일)-d₃-메틸-아민(700 ㎎, 2.89 mmol, 1.00 당량), 2,4-디클로로-7H-피롤로[2,3-d]-피리미딘(2 g, 5.78 mmo1,2.00 당량) 및 탄산칼륨(2.7 g, 19.4 mmol, 6.00 당량)의 혼합물을 약 16 시간 동안 약 60℃에서 가열한 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 아세트산에틸(3 x 200 ㎖)로의 표준 추출 워크업 처리 후, 미정제 잔류물을 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 생성물을 밝은 황색 고체로서 얻었다(1.5 g; 수율 = 96%). LC-MS: m/z = 527 (M+H)⁺.

단계 4

tert-부틸 4-메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트: 중수소 가스의 분위기 하에서, d₄-메탄올/산화중수소(1:3)(30 ㎖) 중 N-(1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-2-클로로-N-d₃-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(400 ㎎, 0.80 mmol, 1.00 당량), 디-tert-부틸 디카르보네이트(348 ㎎, 1.6 mmol) 및 탄소상 수산화팔라듐(1.00 당량; 3 사이클 동안 산화중수소로 예비 처리함)의 용액을 약 16 시간 동안 약 70℃에서 가열하였다. 아세트산에틸로의 표준 추출 워크업 처리 후, 미정제 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 생성물을 고체로서 얻었다(300 ㎎; 수율 = 78.5%). LC-MS: m/z = 504 (M+H)⁺.

단계 5

4-메틸-3-[d ₃ -메틸-(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-아미노]-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르: 30% d₁-수산화나트륨(60 ㎖) 중 tert-부틸 4-메틸-3-(d₃-메틸(2-(d₁-7-토실-7H-피롤로[2,3

-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(300 ㎎)의 용액을 약 2 시간 동안 약 100℃에서 가열하였다. 아세트산에틸(3 x 200 ㎖)로의 표준 추출 워크업 처리 후, 미정제 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 생성물을 거품이 나는 고체로서 얻었다(190 ㎎; 수율 = 90%). LC-MS: m/z = 350 (M+H)⁺.

단계 6

3-((3R,4R)-4-메틸-3-[d ₃ -메틸-(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-아미노]-피페리딘)-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르: 거울상 이성체 3-((3R,4R)-4-메틸-3-[d₃-메틸-(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-아미노]-피페리딘)-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르를 하기 조건을 이용하는 키랄 분취용 HPLC를 이용하는 키랄 분할에 의해 4-메틸-3-[d₃-메틸-(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-아미노]-피페리딘-1-카르복실산 에스테르(4.5 g)로부터 단리하였다: 컬럼, Chiralpak IA, 0.46 x 15 ㎝; 이동상: (헥산:이소프로필 알콜(90:10)); 검출기: UV 254 ㎚. 소정 거울상 이성체의 체류 시간: 7.19 분, 원하지 않는 거울상 이성체의 체류 시간: 9.11 분. ee% > 99.8%. 표제 생성물을 황색 고체로서 단리하였다(1.5 g; 수율 = 35%). LC-MS: m/z = 527 (M+H)⁺.

단계 7

N-d ₃ -메틸-N-((3R,4R)-4-메틸피페리딘-3-일)-2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 듀테로클로라이드: 5N 염화중수소/디옥산(0.5 ㎖/3 ㎖) 중 3-((3R,4R)-4-메틸-3-[d₃-메틸-(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-아미노]-피페리딘)-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르(190 ㎎)를 약 16 시간 동안 25℃에서 교반하였다. 용액을 진공에서 농축시키고, 생성된 잔류물을 임의의 추가의 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: m/z = 250 (M+H)⁺.

단계 8

3-((3R,4R)-4-메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴(CP-690550): N-메틸-N-((3R,4R)-4-메틸피페리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 N-d₃-메틸-N-((3R,4R)-4-메틸피페리딘-3-일)-2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 듀테로클로라이드로 대체한 것 외에는, 실시예 1, 단계 11의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 밝은 황색 고체로서 단리하였다(33 ㎎; 수율 = 52%). LC-MS: m/z = 317 (M+H)⁺.

단계 9

3-((3R,4R)-4-메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴 모노 시트레이트 염(CP-690550-d ₄ 시트레이트 염): 3-((3R,4R)-4-메틸-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 3-((3R,4R)-4-메틸-3-(d₃-메틸(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴로 대체한 것 외에는, 실시예 1, 단계 12의 절차를 따랐다. 표제 화합물을 백색 고체로서 단리하였다(40 ㎎; 수율 = 76%). ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ: 7.36 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 4.95-5.15 (m, 1H), 3.85-4.08 (m, 4H), 3.48-3.75 (m, 2H), 2.94(Ab_q, J = 15.9 Hz, 2H), 2.81 (Ab_q, J = 15.6 Hz, 2H), 2.48-2.61 (m, 1H), 1.89-2.05 (m, 1H), 1.69-1.88 (m, 1H), 1.14 (d, J = 6.6 Hz, 3H). LC-MS: m/z = 317 (MH-C₆H₈O₇)⁺.

실시예 3

3-((3R,4R)-4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴 모노 시트레이트 염(CP-690550-d ₇ 시트레이트 염)

단계 1

에틸 3-옥소피페리딘-4-카르복실레이트 아세트산 염: 수소 분위기 하에서, 에틸 1-벤질-3-옥소피페리딘-4-카르복실레이트(20 g, 16.1 mmol, 1.00 당량), 10% 탄소상 팔라듐, 아세트산(10 ㎖) 및 메탄올(100 ㎖)의 혼합물을 약 4 시간 동안 약 50℃에서 가열하였다. 혼합물을 여과하고, 여액을 증발시켜 표제 생성물을 아세트산 염으로서 얻었다(16 g; 수율 = 85%). LC-MS: m/z = 172 (M+H)⁺.

단계 2

메틸 4-메틸피리딘-3-일카르바메이트: 디-tert-부틸 디카르보네이트(5.66 g, 26 mmol), 탄산칼륨(12 g, 86.4 mmol) 및 물(10O ㎖)의 용액을 테트라히드로푸란(400 ㎖) 중 에틸 3-옥소피페리딘-4-카르복실레이트 아세트산 염(15 g, 21.6 mmol)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 약 2 시간 동안 주위 온도에서 교반하였다. 용매를 진공에서 제거한 후, 아세트산에틸(3 x 200 ㎖)로 표준 추출 워크업 처리하여 표제 생성물을 연백색 고체로서 얻었다(14 g; 수율 = 80%). LC-MS: m/z = 172/272 (M+H)⁺.

단계 3

1-tert-부틸-4-에틸 4-d ₃ -메틸-3-옥소피페리딘-1,4-디카르복실레이트: 70% 수소화나트륨(3.54 g, 103 mmol)을 테트라히드로푸란(300 ㎖) 중 1-tert-부틸 4-에틸 3-옥소피페리딘-1,4-디카르복실레이트(14 g, 51.6 mmol, 1.00 당량)의 용액에 여러 번에 걸쳐 첨가하였다. 생성된 혼합물을 약 2 시간 동안 약 50℃에서 가열한 후, 주위 온도로 냉각시켰다. 요오도메탄(15 g, 103 mmol)을 첨가한 후, 생성된 현탁액을 약 3 시간 동안 주위 온도에서 교반한 후, 얼음에 부었다, 아세트산에틸(3 x 100 ㎖)로 표준 추출 워크업 처리하여 미정제 잔류물을 얻은 후, 이를 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 생성물을 고체로서 얻었다(7.4 g; 수율 = 50%). LC-MS: m/z = 289 (M+H)⁺.

단계 4

4-d ₃ -메틸피페리딘-3-온 염산염: 37% 염화수소(3O ㎖)를 1-tert-부틸 4-에틸 4-d₃-메틸-3-옥소피페리딘-1,4-디카르복실레이트(7 g, 25.6 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 약 3 시간 동안 가열 환류시킨 후, 용매를 진공에서 증발에 의해 제거하였다. 생성된 잔류물을 추가의 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: m/z = 117/125 (M+H)⁺.

단계 5

1-벤질-4-d ₃ -메틸피페리딘-3-온: (브로모메틸)벤젠(2.23 g, 10.5 mmol)을 테트라히드로푸란(30 ㎖) 중 4-d₃-메틸피페리딘-3-온 염산염(1.2 g, 10.3 mmol, 1.00 당량) 및 트리에틸아민(2.1 g, 20.6 mmol)의 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 약 16 시간 동안 주위 온도에서 교반한 후, 용매를 진공에서 증발시켰다. 아세트산에틸로의 표준 추출 워크업 처리 후, 미정제 잔류물을 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 생성물을 고체로서 얻었다(1.7 g; 수율 = 80%). ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ: 7.21-7.39 (m, 5H), 3.5 (s,2H), 3.23 (d, J= 13.8Hz, 1H), 2.94 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.79 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 2.45 (t, J = 11.4Hz, 1H), 2.29-2.39 (m, 1H), 1.98-2.01 (m, 1H), 1.59-1.71 (m, 341H). LC-MS: m/z = 207/225 (M+H)⁺.

단계 6

(1-벤질-4-d ₃ -메틸-피페리딘-3-일)-d ₃ -메틸-아민: 약 0℃에서, 나트륨 메톡시드(3.2 g, 38.2 mmol)를 d₃-메틸아민 염산염(1.4 g, 19.4 mmol), 1-벤질-4-d₃-메틸피페리딘-3-온(2 g 9.7mmol) 및 테트라히드로푸란(60 ㎖)의 현탁액에 첨가하였다. 혼합물을 약 16 시간 동안 주위 온도에서 교반한 후, 나트륨 트리아세톡시 보로하이드라이드(8.5 g, 40mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 약 5 시간 동안 주위 온도에서 교반한 후, 5% 수산화나트륨(5O ㎖)을 첨가하였다. 아세트산에틸로의 표준 추출 워크업 처리 후, 미정제 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올)에 의해 정제하여 표제 생성물을 얻었다(2.2 g; 수율 = 50%). LC-MS: m/z = 225 (M+H)⁺.

단계 7

N-(1-벤질-4-d ₃ -메틸피페리딘-3-일)-2-클로로-N-d ₃ -메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민: (1-벤질-4-메틸-피페리딘-3-일)-d₃-메틸-아민을 (1-벤질-4-d₃-메틸-피페리딘-3-일)-d₃-메틸-아민으로 대체한 것 외에는, 실시예 2, 단계 3의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 밝은 황색 고체로서 단리하였다(1.4 g; 수율 = 90%). LC-MS: m/z = 530 (M+H)⁺.

단계 8

tert-부틸 4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트: N-(1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-2-클로로-N-(d₃-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 N-(1-벤질-4-d₃-메틸피페리딘-3-일)-2-클로로-N-d₃-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민으로 대체한 것 외에는, 실시예 2, 단계 4의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 고체로서 단리하였다(270 ㎎, 수율 = 70%). LC-MS: m/z = 507 (M+H)⁺.

단계 9

tert-부틸 4-((1-(tert-부톡시카르보닐)-4-d ₃ -메틸피페리딘-3-일)-d ₃ -메틸)아미노)-2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-카르복실레이트: tert-부틸 4-d₃-메틸-3-(d₃-메틸(2-(d₁-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(200 ㎎, 0.4 mmol) 및 30 % d₁-수산화나트륨(60 ㎖)의 혼합물을 약 16 시간 동안 약 100℃에서 가열하였다. 혼합물을 주위 온도로 냉각시킨 후, 디-tert-부틸 디카르보네이트(170 ㎎, 0.8 mmol) 및 테트라히드로푸란(20 ㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 약 16 시간 동안 주위 온도에서 교반한 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 아세트산에틸로의 표준 추출 워크업 처리 후, 생성된 미정제 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸/석유(1:5))에 의해 정제하여 표제 생성물을 백색 고체로서 얻었다. LC-MS: m/z = 453 (M+H)⁺.

단계 10

(3R,4R)-tert-부틸 4-((1-(tert-부톡시카르보닐)-4-d ₃ -메틸피페리딘-3-일)(d ₃ -메틸)아미노)-2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-카르복실레이트: 거울상 이성체 (3R,4R)-tert-부틸 4-((1-(tert-부톡시카르보닐)-4-d₃-메틸피페리딘-3-일)(d₃-메틸)아미노)-2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-카르복실레이트를 하기 조건을 이용하는 키랄 분취용 HPLC를 이용하는 키랄 분할에 의해 tert-부틸 4-((1-(tert-부톡시카르보닐)-4-d₃-메틸피페리딘-3-일)(d₃-메틸)아미노)-2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-카르복실레이트(300 ㎎)로부터 단리하였다: 컬럼: Chiralpak IA(Waters 2767-1), 0.46 x 25 ㎝; 이동상: 헥산/이소프로필 알콜(90:10); 검출기: UV 254 ㎚. 소정 거울상 이성체의 체류 시간: 6.08 분, 원하지 않는 거울상 이성체의 체류 시간: 10.16 분. ee% > 99.8%. 표제 화합물을 백색 고체로서 단리하였다(0.1 g; 수율 = 35%). LC-MS: m/z = 353 (M+H)⁺.

단계 11

N-d ₃ -메틸-N-((3R,4R)-4-d ₃ -메틸피페리딘-3-일)-2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 듀테로클로라이드: 3-((3R,4R)-4-메틸-3-[(d₃-메틸-(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-아미노]-피페리딘)-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르를 (3R,4R)-tert-부틸 4-((1-(tert-부톡시카르보닐)-4-d₃-메틸피페리딘-3-일)(d₃-메틸)아미노)-2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-카르복실레이트로 대체한 것 외에는, 실시예 2, 단계 7의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 미정제 잔류물로서 단리하고, 임의의 추가의 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: m/z = 253 (M+H)⁺.

단계 12

3-((3R,4R)-4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴(CP-690550-d ₇ ): N-메틸-N-((3R,4R)-4-메틸피페리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 N-d₃-메틸-N-((3R,4R)-4-d₃-메틸피페리딘-3-일)-2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 듀테로클로라이드로 대체한 것 외에는, 실시예 1, 단계 11의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 밝은 황색 고체로서 단리하였다(40 ㎎; 수율 = 56 %). LC-MS: m/z = 320 (M+H)⁺.

단계 13

3-((3R,4R)-4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴 모노 시트레이트 염(CP-690550-d ₇ 시트레이트 염): 3-((3R,4R)-4-메틸-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 3-((3R,4R)-4-d₃-메틸-3-(d₃-메틸(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴로 대체한 것 외에는, 실시예 1, 단계 12의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 회백색 고체로서 단리하였다(23 ㎎; 수율 = 41%). ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ: 7.36 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 4.95-5.15 (m, 1H), 3.85-4.08 (m, 4H), 3.48-3.75 (m, 2H), 2.94(Ab_q, J = 15.6 Hz, 2H), 2.81 (Ab_q, J = 15.9 Hz, 2H), 2.48-2.61 (m, 1H), 1.89-2.05 (m, 1H), 1.69-1.88 (m, 1H). LC-MS: m/z = 320 (MH-C₆H₈O₇)⁺.

실시예 4

3-((3R,4R)-4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2',3,4-d ₄ -피페리딘-1-일)-3-옥소-프로판니트릴 모노 시트레이트 염(CP-690550-d ₁₁ 시트레이트 염)

단계 1

1-벤질-4-d ₃ -메틸-(2,2',4-d ₃ )-피페리딘-3-온: 산화중수소(60 ㎖) 중 2N 중염화중수소 중 1-벤질-4-d₃-메틸피페리딘-3-온 6(2.5 g, 12.1 mmol)의 혼합물을 약 16 시간 동안 약 80℃에서 가열하였다. 주위 온도로 혼합물을 냉각시킨 후, 산화중수소(80 ㎖) 중 2N d₁-수산화나트륨을 첨가하였다. 아세트산에틸로 표준 추출 워크업 처리하여 미정제 잔류물을 얻었고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: m/z = 210/228 (M+H)⁺.

단계 2

(1-벤질-4-d ₃ -메틸-2,2',3,4-d ₄ -피페리딘-3-일)-d ₃ -메틸-아민: 1-벤질-4-d₃-메틸-피페리딘-3-온을 1-벤질-4-d₃-메틸-(2,2',4-d₃)-피페리딘-3-온으로 대체한 것 외에는, 실시예 3, 단계 6의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 고체로서 단리하였다(3.9 g; 수율 = 90%). LC-MS: m/z = 229 (M+H)⁺.

단계 3

N-(1-벤질-4-d ₃ -메틸-2,2',3,4-d ₄ -피페리딘-3-일)-2-클로로-N-d ₃ -메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민: (1-벤질-4-메틸-피페리딘-3-일)-d₃-메틸-아민을 (1-벤질-4-d₃-메틸-2,2',3,4-d₄-피페리딘-3-일)-d₃-메틸-아민으로 대체한 것 외에는, 실시예 2, 단계 3의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 밝은 황색 고체로서 단리하였다(1.4 g; 수율 = 90 %). LC-MS: m/z = 534 (M+H)⁺.

단계 4

tert-부틸 4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2',3,4-d ₄ -피페리딘-1-카르복실레이트: N-(1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-2-클로로-N-d₃-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 N-(1-벤질-4-d₃-메틸-2,2',3,4-d₄-피페리딘-3-일)-2-클로로-N-d₃-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민으로 대체한 것 외에는, 실시예 2, 단계 4의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 고체로서 단리하였다(270 ㎎; 수율 = 70%). LC-MS: m/z = 411/511 (M+H)⁺.

단계 5

tert-부틸 4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2',3,4-d ₄ -피페리딘-1-카르복실레이트: tert-부틸 4-메틸-3-(d₃-메틸(2-(d₁-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트를 tert-부틸 4-d₃-메틸-3-(d₃-메틸(2-d₁-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2',3,4-d₄-피페리딘-1-카르복실레이트로 대체한 것 외에는, 실시예 2, 단계 5의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 거품이 나는 고체로서 단리하였다(130 ㎎; 수율 = 90%). ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ: 10.41-10.73 (brs, 1H), 7.07 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.38-3.71 (brs,2H), 1.76-1.91 (m, 1H), 1.58-1.65 (m, 1H), 1.47 (s, 9H). LC-MS: m/z = 257/357 (M+H)⁺.

단계 6

(3R,4R)-tert-부틸-4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2,3,4-d ₄ -피페리딘-1-카르복실레이트: 거울상 이성체 (3R,4R)-tert-부틸-4-d₃-메틸-3-(d₃-메틸(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2,3,4-(d₄-피페리딘-1-카르복실레이트를 하기 조건을 이용하는 키랄 분취용 HPLC를 이용하는 키랄 분할에 의해 tert-부틸 4-d₃-메틸-3-(d₃-메틸(2-d₁-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2',3,4-d₄-피페리딘-1-카르복실레이트로부터 단리하였다: 컬럼: Chiralpak IC2 x 25 ㎝(Waters 2767-1), 5 ㎛ Chiral-P(IC)001IC00CJ-LDO16; 이동상: 헥산/이소프로필 알콜(85:15); 검출기: UV 254 ㎚. 소정 거울상 이성체의 체류 시간: 12.01 분, 원하지 않는 거울상 이성체의 체류 시간: 15.10 분. ee% > 99.8%. 표제 생성물을 황색 고체로서 단리하였다(0.1 g; 수율 = 35%). LC-MS: m/z = 490 (M+H)⁺.

단계 7

N-d ₃ -메틸-N-((3R,4R)-4-d ₃ -메틸-2,2',3,4-d ₄ -피페리딘-3-일)-2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 듀테로클로라이드: 3-((3R,4R)-4-메틸-3-[d₃-메틸-(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-아미노]-피페리딘)-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르를 (3R,4R)-tert-부틸-4-d₃-메틸-3-(d₃-메틸(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2,3,4-(d₄-피페리딘-1-카르복실레이트로 대체한 것 외에는, 실시예 2, 단계 7의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 단리하고, 추가의 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: m/z = 257 (M+H)⁺.

단계 8

3-((3R,4R)-4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2,3,4-d ₄ -피페리딘-1-일)-3-옥소프로판-니트릴(CP-690550-d ₁₁ ): N-메틸-N-((3R,4R)-4-메틸피페리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 N-d₃-메틸-N-((3R,4R)-4-d₃-메틸-2,2',3,4-d₄-피페리딘-3-일)-2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 듀테로클로라이드로 대체한 것 외에는, 실시예 1, 단계 11의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 밝은 황색 고체로서 단리하였다(50 ㎎; 수율 = 63%). LC-MS: m/z = 324 (M+H)⁺.

단계 9

3-((3R,4R)-4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노))-2,2,3,4-d ₄ -피페리딘-1-일)-3-옥소프로판-니트릴 모노 시트레이트 염(CP-690550-d ₁₁ 시트레이트 염): 3-((3R,4R)-4-메틸-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 3-((3R,4R)-4-d₃-메틸-3-(d₃-메틸(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2,3,4-(d₄-피페리딘-1-일)-3-옥소프로판-니트릴로 대체한 것 외에는, 실시예 1, 단계 12의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 회백색 고체로서 단리하였다(50 ㎎; 수율 = 80%). ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ: 7.36 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 3.91-4.08 (m, 2H), 3.48-3.75 (m, 2H), 2.94(Ab_q, J = 15.6 Hz, 2H), 2.81 (Ab_q, J = 15.9 Hz, 2H), 1.89-2.05 (m, 1H), 1.69-1.88 (m, 1H). LC-MS: m/z = 324 (MH-C₆H₈O₇)⁺.

실시예 5

3-((3R,4R)-4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2',3,4,5,5',6,6'-d ₈ -피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴 모노 시트레이트 염(CP-690550-d ₁₅ 시트레이트 염)

단계 1

에틸 2-(벤질아미노)아세테이트: 디이소프로필에틸아민(155 g, 1.2 mol) 및 벤질아민(96 g, 0.9 mol)의 용액을 디옥산(1000 ㎖) 중 에틸 브로모아세테이트(100 g, 0.6 mol)의 용액에 적가하였다. 생성된 현탁액을 약 5 시간 동안 약 90℃에서 가열한 후, 주위 온도로 냉각시켰다. 아세트산에틸로 표준 추출 워크업 처리하여 표제 생성물을 황색 오일로서 얻었다(90 g; 수율 = 80%). LC-MS: m/z = 194 (M+H)⁺.

단계 2

에틸 4-(벤질(2-에톡시-2-옥소에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트: 탄산칼륨(110.4 g, 0.97 mol)을 테트라히드로푸란(500 ㎖) 및 물(200 ㎖) 중 에틸 2-(벤질아미노)아세테이트(78 g, 0.4 mol)의 용액에 일부분씩 첨가하였다. 그 다음, 무수 테트라히드로푸란(200 ㎖) 중 에틸 4-클로로-4-옥소부타노에이트(72.7 g, 0.485 mol)를 1 시간의 기간에 걸쳐 혼합물에 적가하였다. 혼합물을 여과하고, 여액을 아세트산에틸로 세정하였다. 용매를 증발에 의해 제거한 후, 아세트산에틸(100 ㎖)로 표준 추출 워크업 처리하여 표제 생성물을 황색 오일로서 얻었다(110 g; 수율 = 80 %). LC-MS: m/z = 322 (M+H)⁺.

단계 3

에틸 1-벤질-5-히드록시-2-옥소-1,2,3,6-테트라히드로피리딘-4-카르복실레이트: 에탄올(37 g, 0.8 mol) 및 디옥산(200 ㎖) 중 에틸 4-(벤질(2-에톡시-2-옥소에틸)아미노)-4-옥소부타노에이트(123.2 g, 0.4 mol)를 디옥산(500 ㎖) 중 나트륨(18.4 g, 0.8 mol)의 현탁액에 적가하였다. 나트륨 금속이 더 이상 보이지 않을 때까지, 생성된 혼합물을 가열 환류하였다. 혼합물을 주위 온도로 냉각시킨 후, 아세트산(48 g, 0.8 mol)을 첨가하였다. 아세트산에틸로 표준 추출 워크업 처리하여 미정제 생성물을 얻었고, 이를 에테르/아세톤으로부터의 재결정화에 의해 정제하여 표제 생성물을 황색 고체로서 얻었다(40 g; 수율 = 40 %). ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ: 11.81 (s, 1H), 7.19-7.41 (m, 5H), 4.65 (s, 2H), 4.25 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.91(t, J = 3Hz, 2H), 3.27 (t, J = 3Hz, 2H), 1.32 (t, J = 7.2Hz,3H). LC-MS: m/z = 276 (M+H)⁺.

단계 4

벤질 1-벤질-5-히드록시-2-옥소-1,2,3,6-테트라히드로피리딘-4-카르복실레이트: 벤질 알콜(27.5 g, 255 mmol) 중 1-벤질-5-히드록시-2-옥소-1,2,3,6-테트라히드로피리딘-4-카르복실레이트 4(14 g, 50.9 mmol)의 용액을 약 16 시간 동안 약 170℃에서 가열하였다. 용매를 진공에서 제거하고, 생성된 잔류물을 에테르로부터 재결정화하여 표제 생성물을 황색 고체로서 얻었다(14 g; 수율 = 85%). LC-MS: m/z = 338 (M+H)⁺.

단계 5

벤질 1-벤질-4-트리듀테로메틸-2,5-디옥소피페리딘-4-카르복실레이트: 벤질 1-벤질-5-히드록시-2-옥소-1,2,3,6-테트라히드로피리딘-4-카르복실레이트 5(13.5 g, 40 mmol), d₃-요오도메탄(8.7 g, 60 mmol), 탄산칼륨(16.6 g, 120 mmol) 및 아세톤(60 ㎖)의 혼합물을 약 3 시간 동안 가열 환류하였다. 혼합물을 여과하고, 생성된 여액을 진공에서 농축시켰다. 아세트산에틸로 표준 추출 워크업 처리하여 미정제 잔류물을 얻은 후, 이를 에테르/아세톤으로부터의 재결정화에 의해 정제하여 표제 생성물을 밝은 황색 고체로서 얻었다(11.3 g; 수율 = 80%). LC-MS: m/z = 355 (M+H)⁺.

단계 6

1-벤질-4-d ₃ -메틸피페리딘-2,5-디온: 1-벤질-4-d₃-메틸-2,5-디옥소피페리딘-4-카르복실레이트(12.5 g, 35.3 mmol), 10% 탄소상 팔라듐(2 g) 및 아세트산에틸(100 ㎖)의 현탁액에 수소 가스를 도입하였다. 혼합물을 약 16 시간 동안 약 50℃에서 가열하였다. 그 다음, 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여액을 아세트산에틸로 세정하였다. 여액을 약 3 시간 동안 가열 환류한 후, 용매를 진공에서 증발에 의해 제거하였다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 컬럼(석유 에테르/아세트산에틸)에 의해 정제하여 표제 생성물을 얻었다(7g; 수율 = 90%). LC-MS: m/z = 221 (M+H)⁺.

단계 7

1-벤질-5,5-디메톡시-4-d ₃ -메틸피페리딘-2-온: 메탄올(20 ㎖) 중 오르토포름산메틸(10 ㎖) 및 4-메틸벤젠설폰산(0.5 g)의 용액을 메탄올(50 ㎖) 중 1-벤질-4-트리듀테로메틸피페리딘-2,5-디온(7 g, 31.8 mmol)의 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 약 16 시간 동안 가열 환류한 후, 주위 온도로 냉각시켰다. 트리에틸아민(2 ㎖)을 첨가한 후, 아세트산에틸로 표준 추출 워크업 처리하여 미정제 생성물을 얻은 후, 이를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 생성물을 황색 오일로서 얻었다(7.8 g; 수율 = 90%). LC-MS: m/z = 267 (M+H)⁺.

단계 8

1-벤질-5,5-디메톡시-4-d ₃ -메틸-3,3-d ₂ -피페리딘-2-온: 1-벤질-5,5-디메톡시-4-d₃-메틸피페리딘-2-온(4 g, 15 mmol), d₄-메탄올(10 ㎖) 및 30% d₄-수산화나트륨(50 ㎖)의 혼합물을 LC-MS에 의한 측정시 반응 완료시까지 약 50℃에서 가열하였다. 혼합물을 주위 온도로 냉각시킨 후, 산화중수소(25 ㎖)를 첨가하였다. 아세트산에틸로 표준 추출 워크업 처리하여 표제 생성물을 황색 오일로서 얻었다(3.3 g; 수율 = 80%). LC-MS: m/z = 269 (M+H)⁺.

단계 9

1-벤질-4-d ₃ -메틸-3,3',4,6,6'-d ₅ -피페리딘-2,5-디온: 1N 듀테로염산(산화중수소 중)(200 ㎖) 중 1-벤질-5,5-디메톡시-4-d₃-메틸-3,3-d₂-피페리딘-2-온(8 g, 29.8 mmol)의 혼합물을 약 16 시간 동안 약 80℃에서 가열하였다. 혼합물을 주위 온도로 냉각시킨 후, 2N d₁-수산화나트륨(산화중수소 중)(110 ㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 아세트산에틸로 추출하고, 건조시킨 후, 진공에서 증발시켰다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 생성물을 얻었다(4.7 g; 수율 = 60%). LC-MS: m/z = 226/244 (M+H)⁺.

단계 10

1-벤질-4-d ₃ -메틸-5-(d ₃ -메틸아미노)-3,3',4,5,6,6'-d ₆ -피페리딘-2-온: 약 0℃에서, 나트륨 d₃-메톡시드(0.9 g, 16 mmol)를 테트라히드로푸란(10 ㎖) 중 d₅-메틸아민 염화중수소(1.2 g, 16 mmol)의 현탁액에 첨가하였다. 30 분 후, d₄-아세트산(1.1 g, 16 mmol)을 주사기를 이용하여 혼합물에 주입하였다. 그 다음, 생성된 혼합물을 약 30 분 동안 주위 온도에서 교반하였다. 분위기를 질소로 교체한 후, 테트라히드로푸란(20 ㎖) 중 1-벤질-4-d₃-메틸-3,3',4,6,6'-d₅-피페리딘-2,5-디온(3 g, 13.3 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 약 16 시간 동안 교반한 후, 나트륨 트리아세톡시 보로듀테라이드(7.4 g, 32 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 약 5 시간 동안 주위 온도에서 교반한 후, 5% d₁-수산화나트륨(50 ㎖)을 첨가하였다. 아세트산에틸로의 표준 추출 워크업 처리 후, 미정제 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 생성물을 얻었다(1.2 g; 수율 = 37%). LC-MS: m/z = 245 (M+H)⁺.

단계 11

(1-벤질-4-d ₃ -메틸-2,2',3,4,5,5',6,6'-d ₈ -피페리딘-3-일)-d ₃ -메틸-아민: 테트라히드로푸란(5 ㎖) 중 1-벤질-4-d₃-메틸-5-(d₃-메틸아미노)-3,3,4,5,6,6'-d₆-피페리딘-2-온(1.0 g, 4.1 mmol)을 테트라히드로푸란(20 ㎖) 중 중수소화리튬알루미늄(860 ㎎, 20.5 mmol)의 현탁액에 적가하였다. 혼합물을 약 1 시간 동안 주위 온도에서 교반하였다. 혼합물을 약 -10℃로 냉각시킨 후, 혼합물을 10% 수산화나트륨(5 ㎖) 함유 얼음에 부었다. 여과 후, 여액을 진공에서 농축시키고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 염수로 세정한 후, 건조시키고, 진공에서 증발시키고, 표제 생성물을 황색 고체로서 얻었다(1.0 g; 수율 = 85%). LC-MS: m/z = 233 (M+H)⁺.

단계 12

N-(1-벤질-4-d ₃ -메틸-2,2',3,4,5,5',6,6'-d ₈ -피페리딘-3-일)-2-클로로-N-d ₃ -메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민: (1-벤질-4-메틸-피페리딘-3-일)-d₃-메틸-아민을 (1-벤질-4-d₃-메틸-2,2',3,4,5,5',6,6'-d₈-피페리딘-3-일)-d₃-메틸-아민으로 대체한 것 외에는, 실시예 2, 단계 3의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 밝은 황색 고체로서 단리하였다(1.4 g, 수율 = 90%). LC-MS: m/z = 538 (M+H)⁺.

단계 13

tert-부틸 3((2-d ₁ -7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일(d ₃ -메틸)아미노)-4-d ₃ -메틸-2,2',3,4,5,5',6,6'-d ₈ -피페리딘-1-카르복실레이트: N-(1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-2-클로로-N-d₃-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 N-(1-벤질-4-d₃-메틸-2,2',3,4,5,5',6,6'-d₈-피페리딘-3-일)-2-클로로-N-d₃-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민으로 대체한 것 외에는, 실시예 2, 단계 4의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 고체로서 단리하였다. LC-MS: m/z = 515 (M+H)⁺.

단계 14

tert-부틸 4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2',3,4,5,5',6,6'-d ₈ -피페리딘-1-카르복실레이트: tert-부틸 4-메틸-3-(d₃-메틸(2-d₁-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트를 tert-부틸 3-((2-d₁-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)(d₃-메틸)아미노)-4-d₃-메틸-2,2',3,4,5,5',6,6'-d₈-피페리딘-1-카르복실레이트로 대체한 것 외에는, 실시예 2, 단계 5의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 거품이 나는 고체로서 단리하였다(130 ㎎; 수율 = 90%). LC-MS: m/z = 361 (M+H)⁺.

단계 15

(3R,4R)-tertt-부틸 3-((2-d ₁ -7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)(d ₃ -메틸)아미노)-4-d ₃ -메틸-2,2',3,4,5,5',6,6'-d ₈ -피페리딘-1-카르복실레이트: 하기 조건을 이용하는 키랄 분취용 HPLC를 이용하는 키랄 분할에 의해 tert-부틸 4-d₃-메틸-3-((d₃-메틸(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2',3,4,5,5',6,6'-d₈-피페리딘-1-카르복실레이트로부터 거울상 이성체를 단리하였다: 컬럼: Chiralpak IC2 x 25 ㎝(Waters 2767-1), 5 ㎛ Chiral-P(IC)001IC00CJ-LDO16; 이동상: 헥산/이소프로필 알콜(85:15); 검출기: UV 254 ㎚. 소정 거울상 이성체의 체류 시간: 12.13 분, 원하지 않는 거울상 이성체의 체류 시간: 15.15 분. ee% > 99.8%. 표제 생성물을 황색 고체로서 단리하였다(0.1 g; 수율 = 35%). LC-MS: m/z = 361 (M+H)⁺.

단계 16

N-d ₃ -메틸-N-((3R,4R)-4-d ₃ -메틸 2,2',3,4,5,5',6,6'-d ₈ -피페리딘-3-일)-2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 듀테로클로라이드: 3-((3R,4R)-4-메틸-3-[d₃-메틸-(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-아미노]-피페리딘)-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르를 (3R,4R)-tert-부틸 3-((2-d₁-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)(d₃-메틸)아미노)-4-d₃-메틸-2,2',3,4,5,5',6,6'-d₈-피페리딘-1-카르복실레이트로 대체한 것 외에는, 실시예 2, 단계 7의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 미정제 잔류물로서 단리하고, 이를 임의의 추가의 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: m/z = 261 (M+H)⁺.

단계 17

3-((3R,4R)-4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2',3,4,5,5',6,6'-d ₈ -피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴(CP-690550-d ₁₅ ): N-메틸-N-((3R,4R)-4-메틸피페리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 N-d₃-메틸-N-((3R,4R)-4-d₃-메틸-2,2',3,4,5,5',6,6'-d₈-피페리딘-3-일)-2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 듀테로클로라이드로 대체한 것 외에는, 실시예 1, 단계 11의 절차를 따랐다. 표제 생성물을 밝은 황색 고체로서 단리하였다(50 ㎎; 수율 = 63%). LC-MS: m/z = 328 (M+H)⁺.

단계 18

3-((3R,4R)-4-d ₃ -메틸-3-(d ₃ -메틸(2-d ₁ -7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2'3,4,5,5',6,6'-d ₈ -피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴 모노 시트레이트(CP-690550-d ₁₅ 시트레이트 염): 3-((3R,4R)-4-메틸-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 3-((3R,4R)-4-d₃-메틸-3-(d₃-메틸(2-d₁-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2,2',3,4,5,5',6,6'-d₈-피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴로 대체한 것 외에는, 실시예 1, 단계 12의 절차를 따랐다. 표제 화합물을 백색 고체로서 단리하였다(54 ㎎; 수율 = 90%). ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ: 7.35 (s, 1H), 6.89 (d, J = 2.7Hz, 1H), 3.91-4.08 (m, 2H), 2.94(Ab_q, J = 15.6 Hz, 2H), 2.81 (Ab_q, J = 15.9 Hz, 2H). LC-MS: m/z = 328 (MH-C₆H₈O₇)⁺.

하기 화합물은 일반적으로 상기 기재된 방법을 이용하여 제조할 수 있다. 이들 화합물은 제조시 상기 실시예에 기재된 것들과 유사한 활성을 가질 것으로 예상된다.

본 명세서에 개시된 화합물의 이의 비동위원소 풍부 유사체에 비한 대사 특성의 변화는 하기 분석을 이용하여 증명할 수 있다. 아직 제조되지 않았고 및/또는 시험되지 않은 상기 기재된 화합물은 역시 이들 분석 중 1 이상에 의해 증명되는 바의 변화된 대사 특성을 가질 것으로 예상된다.

생물학적 활성 분석

시험관내 인간 마이크로솜 안정성(HLM) 분석

2% 중탄산나트륨 중 NADPH 생성 시스템(8.8 mM NADPH, 102.4 mM 글루코오스 6-포스페이트, 24 단위/㎖의 글루코오스 6-포스페이트 탈수소 효소 및 13.2 mM 염화마그네슘)을 사용하여 4 ㎎/㎖의 간 마이크로솜 단백질로 간 마이크로솜 안정성 분석을 수행하였다. 시험 화합물은 20% 아세토니트릴-물 중 용액으로서 제조하였고, 이를 분석 혼합물(최종 분석 농도 5 ㎍/㎖)에 첨가하고, 37℃에서 항온 처리하였다. 분석물 중 아세토니트릴의 최종 농도는 <1%여야 한다. 분취량(50 ㎕)을 0, 30, 60, 90 및 120 분의 시간에 빼내서, 빙냉 아세토니트릴(200 ㎕)로 희석하여 반응을 중지시켰다. 샘플을 10 분 동안 12,000 RPM에서 원심 분리하여 단백질을 침전시켰다. 상청액을 마이크로 원심분리 관에 옮기고, 시험 화합물의 분해 반감기의 LC/MS/MS 분석을 위해 보관하였다. 이에 따라, 이 분석에서 시험한 본 명세서에 개시된 특정한 동위원소가 풍부한 화합물은 비동위원소 풍부 약물에 비해 분해 반감기가 증가되었음이 밝혀졌다. HLM에 대한 실시예 1-5(CP-690550 및 동위원소 풍부 CP-690550 유사체)의 분해 반감기를 하기 표 1에 나타낸다.

시험관내 HLM 안정성 분석의 결과
	HLM 분해 반감기의 증가(%)
	-50% 내지 0%	0% 내지 50%	50% 내지 100%	> 100%
실시예 1	+
실시예 2			+
실시예 3		+
실시예 4		+
실시예 5		+

인간 시토크롬 P ₄₅₀ 효소를 사용하는 시험관내 대사

바쿨로바이러스 발현계(미국 캘리포니아주 새너제이 소재 BD Biosciences)를 이용하여 상당하는 인간 cDNA로부터 시토크롬 P₄₅₀ 효소를 발현시켰다. 100 mmol의 인산칼륨(pH 7.4) 중 0.8 ㎎/㎖의 단백질, 1.3 mmol의 NADP⁺, 3.3 mmol의 글루코오스-6-포스페이트, 0.4 U/㎖의 글루코오스-6-포스페이트 탈수소 효소, 3.3 mmol의 염화마그네슘 및 0.2 mmol의 본 명세서에 개시된 화합물, 상당하는 비동위원소 농축 화합물 또는 기준물 또는 대조물을 함유하는 0.25 ㎖의 반응 혼합물을 20 분 동안 37℃에서 항온 처리하였다. 항온 처리 후, 적절한 용매(예컨대 아세토니트릴, 20% 트리클로로아세트산, 94% 아세토니트릴/6% 빙초산, 70% 과염소산, 94% 아세토니트릴/6% 빙초산)를 첨가하여 반응을 중지시키고, 3 분 동안 원심분리하였다(10,000 g). 상청액을 HPLC/MS/MS에 의해 분석하였다.

모노아민 산화 효소 A 억제 및 산화 대사 회전(turnover)

본 명세서에서 그 전체를 참고로 인용하는 문헌(Weyler et al., Journal of Biological Chemistry 1985, 260, 13199-13207)에 기재된 방법을 이용하여 절차를 실시하였다. 4-히드록시퀴놀린을 형성시키면서 키누르아민의 산화에 대해 314 ㎚에서의 흡광도 증가를 모니터링하여 모노아민 산화 효소 A 활성을 분광 광도계로 측정하였다. 측정은 총 1 ㎖ 부피의 소정량의 효소 및 0.2% Triton X-100(모노아민 산화 효소 분석 완충액) + 1 mM 키누르아민을 함유하는 50 mM 인산나트륨 완충액, pH 7.2 중에서 30℃에서 실시하였다.

모노아민 산화 효소 B 억제 및 산화 대사 회전

본 명세서에서 그 전체를 참고로 인용하는 문헌[Uebelhack, Pharmacopsychiatry 1998, 31(5), 187-192]에 기재된 바와 같이 절차를 실시하였다.

LC-MS에 의한 CP-690550 및 이의 대사물의 검출

본 명세서에서 그 전체를 참고로 인용하는 문헌(Lawendy et al., J Clin Pharmacol 2009, 49, 423-429)에 기재된 바와 같이 절차를 실시하였다.

LC-MS에 의한 전혈 중 CP-690550의 정량

본 명세서에서 그 전체를 참고로 인용하는 문헌[Paniagua et al., Therapeutic Drug Monitoring 2005, 27(5), 608-616]에 기재된 바와 같이 절차를 실시하였다.

야누스 키나아제 3 효소 분석

본 명세서에서 그 전체를 참고로 인용하는 US 6,627,754에 기재된 바와 같이 절차를 실시하였다.

야누스 키나아제 3 효소 분석

본 명세서에서 그 전체를 참고로 인용하는 WO 2003/048162에 기재된 바와 같이 절차를 실시하였다.

인간 IL-2 의존성 T-세포 모세포 증식의 억제

상기 설명으로부터, 당업자는 본 발명의 필수 특징을 확인할 수 있으며, 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않고, 본 발명을 다양한 용도 및 조건에 적용하기 위해 이를 다양하게 변경 및 변형할 수 있다.

Claims

하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:
화학식 I

상기 화학식에서,
R₁-R₂₀은 독립적으로 수소 및 중수소로 구성된 군에서 선택되고;
단, R₁-R₂, R₁₁-R₁₃ 또는 R₂₀ 중 1 이상은 중수소이거나; 또는
R₃-R₁₀ 중 6 이상은 중수소이다.
제1항에 있어서, R₁-R₂₀ 중 1 이상은 독립적으로 중수소 농축도(enrichment)가 약 10% 이상인 것인 화합물.
제1항에 있어서, R₁-R₂₀ 중 1 이상은 독립적으로 중수소 농축도가 약 50% 이상인 것인 화합물.
제1항에 있어서, R₁-R₂₀ 중 1 이상은 독립적으로 중수소 농축도가 약 90% 이상인 것인 화합물.
제1항에 있어서, R₁-R₂₀ 중 1 이상은 독립적으로 중수소 농축도가 약 98% 이상인 것인 화합물.
제1항에 있어서, 하기로 구성된 군에서 선택되는 화학식을 갖는 것인 화합물:
제6항에 있어서, D로 표시되는 각각의 위치는 중수소 농축도가 약 10% 이상인 것인 화합물.
제6항에 있어서, D로 표시되는 각각의 위치는 중수소 농축도가 약 50% 이상인 것인 화합물.
제6항에 있어서, D로 표시되는 각각의 위치는 중수소 농축도가 약 90% 이상인 것인 화합물.
제6항에 있어서, D로 표시되는 각각의 위치는 중수소 농축도가 약 98% 이상인 것인 화합물.
제6항에 있어서, 하기로 구성된 군에서 선택되는 화학식을 갖는 것인 화합물:
제11항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 것인 화합물:
제11항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 것인 화합물:
제11항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 것인 화합물:
제11항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 것인 화합물:
제11항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 것인 화합물:
제11항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 것인 화합물:
제11항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 것인 화합물:
제1항의 화합물을 약학적으로 허용되는 담체와 함께 포함하는 약학적 조성물.
야누스 키나아제 3 매개 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 치료 유효량의 제1항의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 야누스 키나아제 3 매개 질환의 치료 방법.
제20항에 있어서, 상기 질환은 신장 이식 거부, 류마티스성 관절염, 건선, 염증성 장 질환, 건성안 증후군, 천식 및 이식 거부로 구성된 군에서 선택되는 것인 치료 방법.
제20항에 있어서, 추가의 치료제를 투여하는 것을 더 포함하는 것인 치료 방법.
제22항에 있어서, 상기 추가의 치료제는 H+, K+ ATPase 억제제, 소화 운동성 조절제(alimentary motility modulator), 비스테로이드 항염증제, 아닐리드 진통제, 항류마티스제(anti-rheumatic agent), 글루코코르티코이드 및 면역 억제제로 구성된 군에서 선택되는 것인 치료 방법.
제23항에 있어서, 상기 H+, K+ ATPase 억제제는 에소메프라졸, 란소프라졸, 오메프라졸, 판토프라졸, 라베프라졸 및 테나토프라졸로 구성된 군에서 선택되는 것인 치료 방법.
제23항에 있어서, 상기 소화 운동성 조절제는 솔라베그론(solabegron), 테가세로드(tegaserod), 알로세트론(alosetron), 실란세트론(cilansetron), 돔페리돈, 메토클로프라미드, 이토프리드, 시사프리드, 렌자프라이드(renzapride), 자코프라이드(zacopride), 옥트레오티드, 날록손, 에리스토마이신 및 베타네콜로 구성된 군에서 선택되는 것인 치료 방법.
제23항에 있어서, 상기 비스테로이드 항염증제는 아세클로페낙, 아세메타신, 알록시프린, 아스피린, 아자프로파존, 베노릴레이트(benorilate), 브롬페낙(bromfenac), 카프로펜(carprofen), 셀레콕십(celecoxib), 살리실산마그네슘콜린(choline magnesium salicylate), 디클로페낙, 디플루니살, 에토돌락, 에토리콕십, 파이슬라민(faislamine), 펜부텐(fenbuten), 페노프로펜, 플루비프로펜, 이부프로펜, 인도메타신, 케토프로펜, 케토롤락, 로녹시캄(lornoxicam), 록소프로펜, 루미라콕십(lumiracoxib), 멜록시캄, 메클로페남산(meclofenamic acid), 메페남산, 멜록시캄, 메타미졸(metamizole), 살리실산메틸, 살리실산마그네슘, 나부메톤, 나프록센, 니메술리드, 옥시펜부타존, 파레콕십(parecoxib), 페닐부타존, 피록시캄, 살리실 살리실산염(salicyl salicylate), 술린닥, 설핀프라존(sulfinprazone), 수프로펜(suprofen), 테녹시캄, 티아프로펜산 및 톨메틴(tolmetin)으로 구성된 군에서 선택되는 것인 치료 방법.
제23항에 있어서, 상기 아닐리드 진통제는 아세트아미노펜 및 페나세틴으로 구성된 군에서 선택되는 것인 치료 방법.
제23항에 있어서, 상기 질병 완화 항류마티스제는 아자티오프린, 시클로스포린 A, D-페니실아민, 금 염, 히드록시클로로퀸, 레플루노미드(leflunomide), 메토트렉세이트, 미노시클린, 설파살라진, 시클로포스파미드, 에타너셉트, 인플릭시맙(infliximab), 아달리무맙, 아나킨라, 리툭시맙 및 아바타셉트로 구성된 군에서 선택되는 것인 치료 방법.
제23항에 있어서, 상기 글루코코르티코이드는 베클로메타손, 부데소니드, 플루니솔리드(flunisolide), 베타메타손, 플루티카손, 트리암시놀론, 모메타손, 시클레소니드, 히드로코르티손, 코르티손 아세테이트, 프레드니손, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론 및 덱사메타손으로 구성된 군에서 선택되는 것인 치료 방법.
제23항에 있어서, 상기 면역 억제제는 핑골리모드(fingolimod), 시클로스포린 A, 아자티오프린, 덱사메타손, 타크롤리무스, 시롤리무스, 피메크롤리무스, 미코페놀레이트 염, 에버롤리무스(everolimus), 바실릭시맙(basiliximab), 다클리주맙, 흉선세포 항글로불린(anti-thymocyte globulin), 림프구 항글로불린(anti-lymphocyte globulin) 및 CTLA4IgG로 구성된 군에서 선택되는 것인 치료 방법.
제20항에 있어서, 하기로 구성된 군에서 선택되는 1 이상의 효과를 가져오는 것인 치료 방법:
a. 비동위원소 농축 화합물(non-isotopically enriched compound)에 비한, 상기 화합물 또는 이의 대사물의 혈장 수준에서의 개인간 편차 감소;
b. 비동위원소 농축 화합물에 비한, 상기 화합물의 용량 단위당 상기 화합물의 평균 혈장 수준 증가;
c. 비동위원소 농축 화합물에 비한, 상기 화합물의 용량 단위당 상기 화합물의 1 이상의 대사물의 평균 혈장 수준 감소;
d. 비동위원소 농축 화합물에 비한, 상기 화합물의 용량 단위당 상기 화합물의 1 이상의 대사물의 평균 혈장 수준 증가; 및
e. 비동위원소 농축 화합물에 비한, 상기 피험체의 용량 단위당 상기 피험체에서의 치료 동안의 임상 효과 개선.
제20항에 있어서, 하기로 구성된 군에서 선택되는 2 이상의 효과를 가져오는 것인 치료 방법:
a. 비동위원소 농축 화합물에 비한, 상기 화합물 또는 이의 대사물의 혈장 수준에서의 개인간 편차 감소;
b. 비동위원소 농축 화합물에 비한, 상기 화합물의 용량 단위당 상기 화합물의 평균 혈장 수준 증가;
c. 비동위원소 농축 화합물에 비한, 상기 화합물의 용량 단위당 상기 화합물의 1 이상의 대사물의 평균 혈장 수준 감소;
d. 비동위원소 농축 화합물에 비한, 상기 화합물의 용량 단위당 상기 화합물의 1 이상의 대사물의 평균 혈장 수준 증가; 및
e. 비동위원소 농축 화합물에 비한, 상기 피험체의 용량 단위당 상기 피험체에서의 치료 동안의 임상 효과 개선.
제20항에 있어서, 상당하는 비동위원소 농축 화합물에 비한, 피험체 내 1 이상의 다형 발현 시토크롬(polymorphically-expressed cytochrome) P₄₅₀ 아이소형에 의해 화합물의 용량 단위당 화합물의 대사 감소에 영향을 미치는 것인 치료 방법.
제33항에 있어서, 시토크롬 P₄₅₀ 아이소형은 CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19 및 CYP2D6으로 구성된 군에서 선택되는 것인 치료 방법.
제20항에 있어서, 상기 화합물은 비동위원소 농축 화합물에 비한, 상기 피험체의 용량 단위당 상기 피험체 내 1 이상의 시토크롬 P₄₅₀ 또는 모노아민 산화 효소 아이소형의 억제 감소를 특징으로 하는 것인 치료 방법.
제35항에 있어서, 상기 시토크롬 P₄₅₀ 또는 모노아민 산화 효소 아이소형은 CYP1A1, CYP1A2, CYP1B1, CYP2A6, CYP2A13, CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C18, CYP2C19, CYP2D6, CYP2E1, CYP2G1, CYP2J2, CYP2R1, CYP2S1, CYP3A4, CYP3A5, CYP3A5P1, CYP3A5P2, CYP3A7, CYP4A11, CYP4B1, CYP4F2, CYP4F3, CYP4F8, CYP4F11, CYP4F12, CYP4X1, CYP4Z1, CYP5A1, CYP7A1, CYP7B1, CYP8A1, CYP8B1, CYP11A1, CYP11B1, CYP11B2, CYP17, CYP19, CYP21, CYP24, CYP26A1, CYP26B1, CYP27A1, CYP27B1, CYP39, CYP46, CYP51, MAO_A 및 MA0_B로 구성된 군에서 선택되는 것인 치료 방법.
제20항에 있어서, 상당하는 비동위원소 농축 화합물에 비해, 진단적 간담즙성 작용 종말점(diagnostic hepatobiliary function endpoint)에서의 유해한 변화를 감소시키는 것인 치료 방법.
제37항에 있어서, 진단적 간담즙성 작용 종말점은 알라닌 아미노 전이 효소("ALT"), 혈청 글루탐산 피루빈산 아미노 전이 효소("SGPT"), 아스파르테이트 아미노 전이 효소("AST", "SGOT"), ALT/AST 비, 혈청 아돌라아제, 알칼리 인산 분해 효소("ALP"), 암모니아 수준, 빌리루빈, 감마-글루타밀 트랜스펩티다아제("GGTP", "γ-GTP", "GGT"), 류신 아미노펩티다아제("LAP"), 간 생검, 간 초음파 검사법, 간 핵 스캔(nuclear scan), 5'-뉴클레오티드 분해 효소 및 혈액 단백질로 구성된 군에서 선택되는 것인 치료 방법.
제1항에 있어서, 약제로서 사용하기 위한 것인 화합물.
제1항에 있어서, 야누스 키나아제 3 활성의 억제에 의해 개선되는 질환의 예방 또는 치료를 위한 약제의 제조에서 사용하기 위한 것인 화합물.
하기 화학식 II의 화합물 또는 이의 염:
화학식 II

상기 화학식에서,
Z₁은 아미노 보호기이고;
R₃-R₁₆은 독립적으로 수소 및 중수소로 구성된 군에서 선택되며;
R₃-R₁₆ 중 1 이상은 중수소이다.
제41항에 있어서, Z₁은 벤질인 것인 화합물.
제42항에 있어서, 하기로 구성된 군에서 선택되는 화학식을 갖는 것인 화합물:
하기 화학식 III(식 중, Z₂는 카르복실 보호기임)의 화합물을 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 수소화나트륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 하기 화학식 IV의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 V의 화합물을 얻는 단계

;
하기 화학식 V의 화합물을 물 또는 산화중수소와 같은 적절한 용매 중에서 염화수소 또는 염화중수소와 같은 적절한 산과 반응시켜 하기 화학식 VI의 화합물을 얻는 단계

; 및
하기 화학식 VI의 화합물을 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 트리아세톡시붕수소화나트륨(sodium triacetoxyborohydride) 또는 트리아세톡시붕중수소화나트륨(sodium triacetoxyborodeuteride)와 같은 적절한 환원제의 존재 하에 하기 화학식 VII의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 VII의 화합물을 얻는 단계

를 포함하는, 하기 화학식 II의 화합물의 제조 방법:
화학식 II

상기 화학식에서,
Z₁은 수소 및 아미노 보호기로 구성된 군에서 선택되고;
R₃-R₁₆은 독립적으로 수소 및 중수소로 구성된 군에서 선택되며;
R₃-R₁₆ 중 1 이상은 중수소이다.
하기 화학식 VIII의 화합물을 메탄올과 같은 적절한 용매 중에서 톨루엔설폰산과 같은 적절한 산의 존재 하에 그리고 오르토포름산트리메틸과 같은 임의의 탈수제의 존재 하에 화학식 X(식 중, Z₃은 C₁-C₂ 알킬임)의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 IX의 화합물을 얻는 단계

;
하기 화학식 IX의 화합물을 물 또는 산화중수소와 메탄올 또는 d₄-메탄올의 조합과 같은 적절한 용매 중에서 수산화나트륨 또는 d₁-수산화나트륨 또는 염화중수소와 같은 적절한 염기와 반응시켜 화학식 IX의 화합물을 얻는 단계;
하기 화학식 IX의 화합물을 물 또는 산화중수소와 같은 적절한 용매 중에서 염화수소 또는 염화중수소와 같은 적절한 산과 반응시켜 하기 화학식 VIII의 화합물을 얻는 단계

;
하기 화학식 VIII의 화합물을 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 트리아세톡시붕수소화나트륨 또는 트리아세톡시붕중수소화나트륨와 같은 적절한 환원제의 존재 하에 하기 화학식 VII의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 X의 화합물을 얻는 단계

; 및
하기 화학식 X의 화합물을 테트라히드로푸란과 같은 적절한 용매 중에서 수소화알루미늄리튬 또는 중수소화알루미늄리튬과 같은 적절한 환원제와 반응시켜 하기 화학식 X의 화합물을 얻는 단계

를 포함하는, 하기 화학식 II의 화합물의 제조 방법:
화학식 II

상기 화학식에서,
Z₁은 수소 및 아미노 보호기로 구성된 군에서 선택되고;
R₃-R₁₆은 독립적으로 수소 및 중수소로 구성된 군에서 선택되며;
R₃-R₁₆ 중 1 이상은 중수소이다.
하기 화학식 XI의 화합물을 물과 테트라히드로푸란의 조합과 같은 적절한 용매 중에서 탄산칼륨과 같은 적절한 염기의 존재 하에 하기 화학식 II의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 XII의 화합물을 얻는 단계

; 및
하기 화학식 XII의 화합물을 물 또는 산화중수소와 메탄올 또는 d₄-메탄올의 조합과 같은 적절한 용매 중에서 수소 또는 중수소 가스와 같은 적절한 환원제 및 탄소상 팔라듐 및 탄소상 수산화팔라듐과 같은 촉매와 반응시켜 하기 화학식 XIII의 화합물을 얻는 단계

를 포함하는, 하기 화학식 XIII의 화합물의 제조 방법:
화학식 XIII

상기 화학식에서,
Z₁ 및 Z₄는 독립적으로 수소 및 아미노 보호기로 구성된 군에서 선택되고;
R₃-R₁₈ 및 R₂₀은 독립적으로 수소 및 중수소로 구성된 군에서 선택되고;
R₃-R₁₈ 및 R₂₀ 중 1 이상은 중수소이다.