KR20100091994A

KR20100091994A - 내장 또는 벽측 결손 치료용 재생 생기능성 콜라겐 생매트릭스의 용도

Info

Publication number: KR20100091994A
Application number: KR1020107011738A
Authority: KR
Inventors: 요한 오다르; 갈로 레이몬드 니스토르; 라우라 칼리아리
Original assignee: 백스터 인터내셔널 인코포레이티드; 박스터 헬쓰케어 에스.에이.
Priority date: 2007-10-30
Filing date: 2008-10-29
Publication date: 2010-08-19
Also published as: AU2008317874B2; CN101842122B; TW200924803A; CN101842122A; ES2662647T3; EP2214734B1; WO2009056298A3; AU2008317874A1; CL2008003219A1; TWI461227B; MX2010004838A; JP2011500237A; WO2009056298A2; JP5833717B2; US8790698B2; EP2214734A2; CA2703103A1; US20090142396A1; AR069109A1; CA2703103C

Abstract

콜라겐 생매트릭스를 결손에 적용하여 예컨대 조직 결손으로 고통받는 또는 내장 또는 벽측 외과적 치료를 받는 환자 내의 내장 또는 벽측 멤브레인을 회복 및 재생시키는 것을 포함하는 내장 또는 벽측 멤브레인 및 조직 결손의 치료 기술. 이와 같은 해결책은 지속적인 조직 누출 및 유체 누출 및 공기 누출과 같은 그들의 결과를 회피한다. 임의로 섬유소 시일제, 항-유착제 또는 둘 다와 결합한 콜라겐 생매트릭스의 사용은 조직 결손으로 고통받는 다친 환자 또는 내장 또는 벽측 절제와 같은 외과 수술 및 다른 수술을 받는 대상의 조직 누출 또는 유체 누출을 최소화할 수 있다.

Description

내장 또는 벽측 결손 치료용 재생 생기능성 콜라겐 생매트릭스의 용도{Use of a Regenerative Biofunctional Collagen Biomatrix for Treating Visceral or Parietal Defects}

<관련된 출원의 상호 참조>

본 출원은 모든 목적에 대해서 여기에 참조로 도입된 2007년 10월 30일 출원된 미국 가특허 출원 제60/983,776호의 정규 출원이며, 우선권을 주장한다.

본 발명의 실시예들은 섬유소 시일제, 폴리에틸렌 글리콜 또는 다른 물질들과 결합된 또는 결합되지 않은 생기능성 재생 재구성된 콜라겐 생매트릭스의 내장 또는 벽측 멤브레인의 결손 치료용, 예컨대 외과 수술 후 조직 누출 및 공기 누출 방지용 용도를 포함한다.

수술 후 장기간의 조직 누출 및 공기 누출은 허파 절제 및 다른 유형의 내장 또는 벽측 멤브레인 외과 수술 이후 이병률의 주요 원인이며 통증 및 움직일 수 없게 되는 것을 수반하는 장기간의 배액 시간을 불러온다. 이러한 합병증은 환자의 감염 출혈, 유착, 기흉 및 기관지 흉각루의 발생 위험성을 증가시키고 따라서, 입원을 장기화시키며, 이는 건강관리 비용을 증가시킨다. 이러한 문제를 해결하기 위한 외과적 기술들은 불충분하다고 밝혀진 그리고 허파 외과 수술 중 조직 누출 또는 공기 누출을 제거하는데 실패한, 외과적 시일제의 공동 사용을 수반하는 또는 수반하지 않는 봉합사 또는 스테이플(staple) 장치의 사용을 포함한다.

허파 절제 중 조직 누출 또는 공기 누출을 극복하기 위해 다양한 상보적인 자연 및 합성 물질들이 혼합된 결과물로 시도되었다. 이들 물질들은 섬유소 시일제 및 합성 풀을 포함한다. 일부 경우에, 시일제들은 봉합사 또는 스테이플 선을 보강하기 위해 사용되었다. 그러나, 그들은 제한적으로 성공했고 정확하고 정밀한 외과 기술을 대체할 수 없다. 또한, 내장 또는 벽측 멤브레인 외과 수술 이후 내부 반흔, 섬유증 및 유착이 이와 같은 외과 수술의 주지된 그리고 바람직하지 않은 부작용이다.

따라서, 외과 수술 후 또는 외상 후 조직 누출, 유체 누출(예컨대, 혈액, 장액, 담즙) 또는 폐 조직 내에서 공기 누출을 치료 또는 방지하기 위한, 그리고 외과적 및 외상성 손상 이후 조직 치유 및 재생 과정을 촉진하기 위한 규제 및 조절된 조직 재생을 위한 개선된 시스템 및 기술에 대한 강한 요구가 존재한다. 또한 혈액을 흡수하지 않고, 리모델링(remodelling), 재생 및 상처 치유 과정을 원조하며, 세포 성장 및 내성장을 규제하는 매트릭스에 대한 요구가 존재한다. 추가로, 절단된 내장, 예컨대 폐를 덮는 흉막의 대체 및 재생을 포함하는 기술에 대한 요구가 존재한다.

본 발명의 실시예들은 이와 같은 요구들의 해결책을 제공한다. 본 발명의 태양들은 임의로 섬유소 시일제를 구비한, 절제 후 내장 또는 벽측 멤브레인 및 조직 결손의 외과적 치료용 그리고 폐 절제 외과 수술 후 허파 조직 결손 또는 내장 멤브레인, 예컨대 장측 흉막의 결손 치료용 생기능성 콜라겐 생매트릭스의 용도를 포함한다. 이와 같은 기술의 유효성은 내장 결손의 회복 및 재생을 위해 콜라겐 생매트릭스를 사용한 동물 실험의 결과로 증명될 수 있다. 이 콜라겐 생매트릭스는 특수한 층 구조를 구비한 매트릭스를 제공하며 말 기원의 순수 자연적으로 가교된 콜라겐을 포함한다. 생매트릭스는 절단된 내장 또는 내장 멤브레인용 대체물로, 그리고 나중에, 치유 과정 중 세포의 내성장 및 예컨대 내장 신-흉막 형성을 위한 재생 생매트릭스로 기능할 수 있다. 생매트릭스는 또한 유체 누출에 대한 효과적인 시일로 기능할 수 있으며, 이는 내장 멤브레인 내의 유체 누출이 없을 시 폐 또는 장기 기능이 크기 개선되므로 특히 바람직하다. 관련하여, 실시예들은 허파 절제 또는 다른 폐 외과 수술에서의 외과 수술 후 유체 누출의 방지를 위한 또는 흉막 멤브레인과 같은 내장 멤브레인 결손 치료를 위한 콜라겐 생매트릭스의 용도를 포함한다.

본 발명의 실시예들은 임의로 섬유소 시일제와 결합된 신규의 생기능성 콜라겐 생매트릭스 및 지속적인 조직 누출, 공기 누출, 유체 누출 등을 회피 또는 억제하는 동시에 내장 또는 벽측 멤브레인을 회복하기 위한, 예컨대 폐 외과 수술을 받는 환자의 흉막 회복 및 조직 재생을 위한 그것의 용도를 포함한다. 외과 시일제를 단독으로 또는 스테이플 또는 봉합사 선용 지지체로서 사용하는 것은 일반적으로 AAL(허파포 공기 누출) 및 PAAL(지속적인 허파포 공기 누출)의 발생빈도를 줄이는데 효과적이지 못했다. 반면, 본 발명의 실시예들은 동시의 즉각적인 및 장기간에 걸친 공기정체(aerostasis) 및 임의로 지혈을 실현할 목적으로 임의로 섬유소 시일제와 함께 조직 결손 위에, 예컨대 흡입된 손상된 폐 위에 적용되는 콜라겐 포일의 용도를 포함한다. 이 목적으로 사용되는 콜라겐 생매트릭스의 포일 제제는 호흡 중 폐 기능을 개선할 수 있다. 콜라겐 생매트릭스의 콜라겐 원섬유는 대체 및 재생을 위한 지지체 매트릭스를 제공할 수 있고 섬유모세포 및 회복 세포의 이동을 촉진한다. 일부 경우에, 콜라겐 생매트릭스는 예컨대 폐 박피 후의 폐 내장 멤브레인 결손을 치료하는데 있어서 내장 및 벽측 멤브레인 재생을 위한 규제된 세포 내성장 및 세포외 매트릭스의 새로운 형성을 제공한다.

실시예들은 조직이 손상, 종양, 외과 수술 등의 결과로 훼손되었을 시, 포유 동물의 내장 또는 벽측 조직, 예컨대 흉막 조직을 회복 및 재생하기 위해 실질적으로 비다공성인 콜라겐 포일을 사용하는 방법을 포함한다. 비다공성 콜라겐 포일은 탄성, 액-밀 및 기-밀인 대체 멤브레인 조성물을 제공하고, 높은 인장 강도를 갖는 콜라겐 원섬유를 포함한다. 비다공성 콜라겐 포일은 추가로 재흡수가능하며, 몇 주 만에 자가조직 흉막과 같은 자가조직 멤브레인과 구별할 수 없게 되는 신-내장 또는 신-벽측 멤브레인, 예컨대 신-흉막이 신속하게 형성되는 생매트릭스를 제공한다. 콜라겐 포일을 제조하기 위한 공정은 병 전달의 가능성을 감소시킬 수 있다.

실시예들은 흉막과 같은 조직의 표면 위 또는 상처 표면과 인접한 해부학적 구조 사이, 예컨대 폐 표면과 흉벽 사이의 외과 수술 후 또는 외상 후 세포 유착을 치료 또는 방지하기 위한 방법을 포함한다. 방법은 조직을 다층상 생활성 및 생기능성 콜라겐 생매트릭스 포일로 덮고, 세포 성장 및 조직 회복을 규제하는 것을 포함할 수 있다. 방법은 또한 조직을 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스로 덮음으로써 포유 동물의 장애를 치료하는 것을 포함할 수 있다. 방법은 규제된 세포 내성장 및 조절된 조직 재생용 생기능성 매트릭스를 제공함으로써 유착 및 반흔 조직 형성을 억제 또는 방지하는데 유용하다. 실시예들은 추가로 AAL(허파포 공기 누출) 또는 PAAL(지속적인 허파포 공기 누출)을 치료 또는 억제하는 방법을 포함한다.

일 태양에서, 본 발명의 실시예들은 내장 또는 벽측 멤브레인 결손으로 특징되는 환자의 장애를 치료하는 방법을 포함한다. 방법은 결손에 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 틈새 내에서 세포 성장을 규제하는 생기능성 비다공성 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 투여하는 것을 포함할 수 있다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 내장 또는 벽측 결손과 인접한 조직 사이에 실질적으로 액밀 및 기밀인 층을 형성한다. 일부 경우에, 투여 단계는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 내장 또는 벽측 결손에 섬유소 시일제로 부착, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 내장 또는 벽측 결손에 외과용 시일제로 부착, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 내장 또는 벽측 결손에 외과용 봉합사로 부착, 압입 기술 이용 또는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스와 내장 또는 벽측 결손 사이의 자연 유착 이용을 포함한다. 임의로, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 섬유소 시일제를 사용하여 환자의 내장 또는 벽측 결손에 부착된다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질과 결합 또는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질로 코팅된다. 일부 경우에, 생매트릭스는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 틈새 내의 세포 성장 이후 인접한 조직과의 유착을 촉진하지 않는다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 외측 표면 위의 세포 성장을 규제할 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 항생제, 보존제, 성장 인자 또는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 연성 및 탄성에 도움이 되는 첨가제와 같은 부형제를 포함할 수 있다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 소 공급원, 돼지 공급원, 말 공급원, 양 공급원, 영장류 공급원, 설치류 공급원 또는 인간 공급원과 같은 공급원으로부터 유도된 콜라겐을 포함한다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 힘줄 조직으로부터 유도된 콜라겐을 포함할 수 있다.

또 다른 태양에서, 본 발명의 실시예들은 포유동물에서 내장 또는 벽측 멤브레인 재생을 위한 방법을 포함한다. 방법은 내장 또는 벽측 멤브레인의 결손을 콜라겐 포일과 접촉시키는 것을 포함할 수 있다. 포일은 화학물질 또는 방사선으로 가교되지 않은 콜라겐 원섬유의 다중 층의 비-자연 발생 생매트릭스를 포함할 수 있다. 생매트릭스는 실질적으로 비다공성일 수 있다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 내장 또는 벽측 멤브레인과 인접한 조직 사이에 실질적으로 액밀 및 기밀인 층을 형성한다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 섬유소 시일제를 사용하여 환자의 내장 또는 벽측 결손에 부착될 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질과 결합되거나 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질로 코팅될 수 있다. 일부 경우에, 생매트릭스는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 틈새 내의 세포 성장 이후 인접한 조직과의 유착을 촉진하지 않는다.

또 다른 태양에서, 본 발명의 실시예들은 포유동물의 조직 표면 위에 외과 수술 후 또는 외상 후 유착 및 섬유증 형성을 방지하기 위한 내장 또는 벽측 멤브레인의 규제된 세포 내성장 및 조절된 조직 재생을 위한 방법을 포함한다. 방법은 조직을 비다공성 미시적 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스와 접촉시키는 것을 포함할 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 내장 또는 벽측 멤브레인 결손과 인접한 조직 사이에 실질적으로 액밀 및 기밀인 층을 형성할 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 섬유소 시일제를 사용하여 환자의 내장 또는 벽측 멤브레인 결손과, 또는 결손에 부착될 수 있다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 폴리에틸렌 글리콜과 같은 물질과 결합된다. 일부 경우에, 생매트릭스는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 틈새 내의 세포 성장 이후 인접한 조직과의 유착을 촉진하지 않는다.

또 다른 태양에서, 본 발명의 실시예들은 포유동물의 내장 또는 벽측 결손의 회복을 위한 약제 제조에서의 조성물의 용도를 포함한다. 조성물은 생매트릭스의 콜라겐층들 사이의 틈새 내의 세포 성장을 규제하는 미시적 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 포함할 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 장기 표면과 인접한 공동 또는 조직 사이에 실질적으로 액밀 및 기밀인 층을 형성할 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 섬유소 시일제를 사용하여 환자의 내장 또는 벽측 결손에 부착될 수 있다. 임의로, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질과 결합될 수 있다. 일부 경우에, 생매트릭스는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 틈새 내의 세포 성장 이후 인접한 조직과의 유착을 촉진하지 않는다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 매끄러우며 실질적으로 비다공성일 수 있다. 임의로, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 매끄러우며 비다공성일 수 있다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 자연 조직으로 재흡수 및 리모델링된다. 조성물은 키트 형태로 제공 또는 이용가능할 수 있다.

또 다른 태양에서, 본 발명의 실시예들은 내장 또는 벽측 조직에서의 수술 후 누출 억제에 사용하기 위한 콜라겐 생매트릭스를 포함한다. 콜라겐 생매트릭스는 내장 또는 벽측 조직의 절제 후 후-수술적으로 적용되어 조직 누출 또는 공기 누출을 방지 또는 억제할 수 있다. 콜라겐 생매트릭스는 섬유모세포 및 다른 조직 재생 세포를 모을 수 있다. 일부 경우에, 콜라겐 생매트릭스는 콜라겐 층들 사이에 틈새가 있어 층들 중간에서 세포 성장을 허용하는 콜라겐 생매트릭스를 포함한다. 콜라겐 생매트릭스는 섬유소 시일제와 결합되어 적용될 수 있다. 섬유소 시일제와 결합된 콜라겐 생매트릭스는 폐 외과 수술 이후 28일까지 공기 누출을 방지 또는 억제할 수 있다. 섬유소 시일제는 섬유소 시일제 위에 또는 섬유소 시일제와 결합되어 적용된 콜라겐 생매트릭스와 함께 결손에 적용될 수 있다. 일부 경우에, 콜라겐 생매트릭스로 덮인 폐 조직의 영역은 섬유소 시일제로 덮인 폐 조직의 영역보다 더 빠르게 재생된다.

일 태양에서, 본 발명의 실시예들은 장측 흉막 결손으로 특징되는 환자의 장애를 치료하는 방법을 포함한다. 방법은 결손에 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 틈새 내에서 세포 성장을 규제하는 생기능성 비다공성 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 외측 폐 표면과 흉막강 사이에 실질적으로 액밀 및 기밀인 층을 형성할 수 있다. 투여 단계는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 장측 흉막에 섬유소 시일제로 부착, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 장측 흉막에 외과용 시일제로 부착, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 장측 흉막에 외과용 봉합사로 부착, 압입 기술 이용 또는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스와 장측 흉막 사이의 자연 유착 이용을 포함할 수 있다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 섬유소 시일제를 사용하여 환자의 장측 흉막에 부착된다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질과 결합된다. 일부 경우에, 생매트릭스는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 틈새 내의 세포 성장 이후 벽측 흉막과의 유착을 촉진하지 않는다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 외측 표면 위의 세포 성장을 규제할 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 보존제, 성장인자 또는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 연성 및 탄성에 도움이 되는 첨가제와 같은 부형제를 포함할 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 소 공급원, 돼지 공급원, 말 공급원, 양 공급원, 영장류 공급원, 설치류 공급원 또는 인간 공급원과 같은 공급원으로부터 유도된 콜라겐을 포함할 수 있다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 힘줄 조직으로부터 유도된 콜라겐을 포함한다.

또 다른 태양에서, 본 발명의 실시예들은 포유동물에서 장측 흉막 재생을 위한 방법을 포함한다. 방법은 장측 흉막을 화학물질 또는 방사선으로 가교되지 않은 콜라겐 원섬유의 다중 층의 비-자연 발생 생매트릭스를 갖는 콜라겐 포일과 접촉시키는 것을 포함한다. 생매트릭스는 실질적으로 비다공성일 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 외측 폐 표면과 흉막강 사이에 실질적으로 액밀 및 기밀인 층을 형성할 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 섬유소 시일제를 사용하여 환자의 장측 흉막에 부착될 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 폴리에틸렌 글리콜과 같은 항-유착 물질과 결합될 수 있다. 일부 경우에, 생매트릭스는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 틈새 내의 세포 성장 이후 벽측 흉막과의 유착을 촉진하지 않는다.

또 다른 태양에서, 본 발명의 실시예들은 포유동물의 폐 조직 표면 위에 외과 수술 후 또는 외상 후 유착 및 섬유증 형성을 방지 또는 억제하기 위한 규제된 세포 내성장 및 조절된 조직 재생을 위한 방법을 포함한다. 방법은 폐 조직을 비다공성 미시적 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스와 접촉시키는 것을 포함할 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 외측 폐 표면과 흉막강 사이에 실질적으로 액밀 및 기밀인 층을 형성할 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 섬유소 시일제를 사용하여 환자의 장측 흉막에 부착될 수 있다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질과 결합되거나 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질로 코팅된다. 일부 경우에, 생매트릭스는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 틈새 내의 세포 성장 이후 벽측 흉막과의 유착을 촉진하지 않는다.

또 다른 태양에서, 본 발명의 실시예들은 포유동물의 장측 흉막 결손의 회복을 위한 약제 제조에서의 조성물의 용도를 포함한다. 조성물은 미시적 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 포함할 수 있다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 생매트릭스의 콜라겐 층들 사이의 틈새 내의 세포 성장을 규제할 수 있다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 외측 폐 표면과 흉막강 사이에 실질적으로 액밀 및 기밀인 층을 형성한다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 섬유소 시일제를 사용하여 환자의 장측 흉막에 부착될 수 있다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질과 결합된다. 임의로, 생매트릭스는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 틈새 내의 세포 성장 이후 벽측 흉막과의 유착을 촉진하지 않을 수 있다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 매끄러우며 실질적으로 비다공성이다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 매끄러우며 비다공성이다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 자연 조직으로 재흡수 및 리모델링될 수 있다. 일부 경우에, 조성물은 키트 형태로 이용가능하다.

일부 태양에서, 본 발명의 실시예들은 폐에서의 수술 후 공기 누출 억제에 사용하기 위한 콜라겐 생매트릭스를 포함한다. 콜라겐 생매트릭스는 허파 절제 또는 다른 폐 외과 수술 후 후-수술적으로 적용되어 공기 누출을 방지할 수 있다. 일부 경우에, 콜라겐 생매트릭스는 섬유모세포 및 다른 조직 재생 세포를 모은다. 일부 경우에, 콜라겐 생매트릭스는 콜라겐 층들 사이에 틈새가 있어 층들 중간에서 세포 성장을 허용하는 콜라겐 생매트릭스를 포함한다. 임의로, 콜라겐 생매트릭스는 섬유소 시일제와 결합되어 적용될 수 있다. 일부 경우에, 섬유소 시일제와 결합된 콜라겐 생매트릭스는 외과 수술 이후 28일까지 공기 누출을 방지한다. 일부 경우에, 섬유소 시일제는 섬유소 시일제 위에 또는 섬유소 시일제와 결합되어 적용된 콜라겐 생매트릭스와 함께 결손에 적용된다. 일부 경우에, 콜라겐 생매트릭스로 덮인 폐 조직의 영역은 섬유소 시일제로 덮인 폐 조직의 영역보다 더 빠르게 재생된다.

본 발명의 성질 및 장점의 더 완전한 이해를 위해, 수반되는 도면관 결합된 뒤따르는 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용을 참조해야 한다.

도 1은 환자의 흉부 해부학적 구조의 선택된 면을 도시한다.
도 2는 환자의 흉부 해부학적 구조와 내장 멤브레인 및 조직 결손의 선택된 면을 도시한다.
도 2a는 환자의 흉부 해부학적 구조와 내장 멤브레인 및 조직 결손의 선택된 면을 도시한다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른, 장측 흉막 멤브레인 및 폐 조직 결손용 치료 기술의 태양을 도시한다.
도 4는 본 발명의 실시예에 따른, 장측 흉막 멤브레인 및 폐 조직 결손용 치료 기술의 태양을 도시한다.
도 5는 본 발명의 실시예에 따른, 장측 흉막 멤브레인 및 폐 조직 결손용 치료 기술의 태양을 도시한다.
도 6은 본 발명의 실시예에 따른, 장측 흉막 멤브레인 및 폐 조직 결손용 치료 기술의 태양을 도시한다.
도 6a는 본 발명의 실시예에 따른, 흉막 결손용 치료 기술의 태양을 도시한다.
도 6b는 본 발명의 실시예에 따른, 내장 멤브레인 결손 치료용 콜라겐 생매트릭스의 면을 도시한다.
도 7은 본 발명의 실시예에 따른 생기능성 콜라겐 포일 생매트릭스의 주로 세공이 없는 또는 비다공성인 유체- 및 기-밀 표면을 도시하는 SEM(주사 전자 현미경) 사진이다.
도 8a 및 8b는 본 발명의 실시예예 따른 생기능성 콜라겐 포일 생매트릭스의 측면에서 본, 상부 표면을 도시하는, 약간 습한 대기 중의 근 자연 조건을 의미하는 ESEM(환경 주사 전자 현미경) 조건 하에서 촬영된 사진이다.
도 9a 및 9b는 본 발명의 실시예예 따른 생기능성 콜라겐 포일 생매트릭스의 하부 표면을 도시하는, ESEM 조건 하에서 촬영된 사진이다.
도 10은 본 발명의 실시예에 따른 수화된 생기능성 콜라겐 포일 생매트릭스의 표면을 도시하는 SEM 사진이다.
도 11a, 11b 및 11c는 본 발명의 실시예예 따른 생기능성 콜라겐 포일 생매트릭스의 단면을 도시하는, ESEM 조건(습한 대기) 하에서 촬영된 사진들이다.
도 12a 및 12c는 본 발명의 실시예예 따른 건조 생기능성 콜라겐 포일 생매트릭스의 단면을 도시하는 SEM 사진이다.
도 13은 장측 흉막 멤브레인의 절제 이후 조직 결손 또는 누출 및 공기 누출을 가진 폐 조직을 도시한다.
도 14는 본 발명의 실시예에 따른, 상처 표면 위에 콜라겐 포일의 적용을 도시한다.
도 15는 본 발명의 실시예에 따른, 폐의 물 하에서의(수압식 시험) 적용 후 조직 누출 또는 공기 누출 평가를 도시한다.
도 16은 본 발명의 실시예에 따른, 조직의 세포충실성을 보호하는 동시에 폐 조직을 덮고 액-밀 및 기-밀 봉합을 제공하는 콜라겐 포일을 도시한다.
도 17은 본 발명의 실시예에 따른, 섬유소 시일제로 고정된 콜라겐 포일 생매트릭스로 밀봉된 폐 조직 결손의 조직학적 슬라이드를 도시한다.
도 18은 본 발명의 실시예에 따른, 높은 세포 친화력을 보이는 섬유소 시일제로 밀봉된 폐 조직의 조직학적 슬라이드를 도시한다.
도 19는 본 발명의 실시예에 따른 조직 결손을 밀봉하는 콜라겐 생매트릭스의 조직학적 슬라이드(슬라이드의 아래 부분)를 도시한다.
도 20은 본 발명의 실시예에 따른, 콜라겐 생매트릭스의 틈새 내에 모이고 성장한 섬유모세포를 도시한다.
도 21은 폐 조직의 표면 위의 장측 흉막 멤브레인의 정상적인 조직학적 면을 나타낸다.
도 22는 본 발명의 실시예에 따른, 이식 4주 후 리모델링된 콜라겐 생매트릭스 및 재생된 내장 멤브레인을 도시한다.

인체의 다양한 장기들과 관련된 장 멤브레인은 통상적으로 내장층 및 벽측층을 포함한다. 장강은 심장을 둘러싸는 심낭강, 폐를 둘러싸는 흉막강 및 많은 복부 장기를 둘러싸는 복막강을 포함한다. 본 발명의 실시예는 폐와 같은 장기에서 발견될 수 있는 것과 같은, 조직 및 내장 또는 벽측 멤브레인 결손 또는 누출의 치료용 콜라겐 생매트릭스의 용도를 포함한다. 폐는 얇은 섬세한 장 조직인 장측 흉막 멤브레인으로 둘러싸인다. 예컨대 상이한 정도로의 절제(폐 절제 외과 수술)와 결합된, 장측 흉막 멤브레인 및 폐 조직의 훼손은 환자에게 생명을 위협하는 합병증을 줄 수 있다. 수술 후 조직 누출 및 공기 누출은 폐암 또는 섬유증 및 기종과 같은 폐 조직의 다른 병리를 위한 허파 절제 이후 빈번한 합병증이다. 공기 누출은 농흉과 같은 심각한 합병증을 야기하거나 가슴 튜브의 필요성 및 입원기간을 연장시킨다. 공기의 누출(예컨대 폐 절제의 봉합된 또는 스테이플된 표면으로부터)은 폐 외과 수술 이후 이병률 및 사망률에 악영향을 준다고 알려져 있다.

예시적인 내장 멤브레인은 장측 복막, 장측 흉막 및 장측 심낭막 또는 심외막을 포함한다. 상기 제시한 바와 같이, 내장 멤브레인은 장기, 예컨대 심장, 폐, 간, 비자, 담낭 등을 둘러쌀 수 있다. 예시적인 벽측 멤브레인은 벽측 복막, 벽측 흉막 및 벽측 심낭막을 포함한다. 이러한 내장 또는 벽측 멤브레인의 결손은 바람직하지 않은 유체 누출을 야기할 수 있다. 폐, 간, 신장, 비장 및 흉부 및 복부 강의 내장 또는 벽측 멤브레인은 지혈, 섬유소 형성, 상처 치유 및 회복 세포를 위한 가이드 레일로서 손상된 조직의 섬유소 및 콜라겐, 섬유모세포 및 회복 세포의 침윤, 세포외 매트릭스/콜라겐 구조의 재건 및 혈관화를 포함하는 손상, 절제, 훼손 등과 동일한 또는 유사한 상처 치유 반응 체계를 갖는다. 여기에 개시된 섬유모세포 및 회복 세포와 생기능성 콜라겐 생매트릭스의 반응은 예컨대, 섬유모세포 및 회복 세포의 규제된 내성장 및 조향에 의한 것과 같이 생매트릭스의 성질을 특정 방식으로 이용하는 것에 의해 많은 내장 또는 벽측 멤브레인 결손에 대해 동일 또는 유사한 원리에 기초할 수 있다. 본 발명의 실시예는 폐의 벽측 및 내장 멤브레인 결손 또는 누출 치료용 기술을 포함한, 내장 또는 벽측 멤브레인 또는 조직 결손 치료용 기술을 포함한다. 통상적으로, 조직 또는 장기의 일부로서 내장 멤브레인은 상피성/중피성 세포층 및 다른 층을 갖고 인체에서 발견되는 다른 유형의 조직과 현저하게 상이하다. 본 발명의 일부 실시예에 따르면, 다층상, 생활성 콜라겐성 생매트릭스는 내장 멤브레인 재생 및 회복에서 세포 내성장의 조향 및 세포외 매트릭스의 새로운 형성, 예컨대 장측 흉막 멤브레인 재생에 사용될 수 있다.

환자에 콜라겐 생매트릭스의 적용

이제 도면을 보면, 도 1은 환자의 흉부 해부학적 구조의 관련된 면을 도시한다. 환자 (100)의 폐 (110)은 장측 흉막 멤브레인 (120)과 인접하며 장측 흉막 (120)으로 덮여진다. 이 장측 흉막 멤브레인은 폐에 직접 부착되고, 흉벽 (150)과 인접하며 흉강의 내부를 형성하는 외측 벽측 흉막 멤브레인 (140)으로 둘러싸인다. 여기에 도시되어 있듯이, 흉벽 (150)은 늑골 (152) 및 늑간근 (154)을 포함한다.

내장 멤브레인 (120) 및 벽측 멤브레인 (140)은 함께 중피를 이룬다. 종종 늑막 또는 벽간 공간으로 지칭되는 흉막강 (130)은 장측 흉막 멤브레인 (120) 및 벽측 흉막 멤브레인 (140) 사이에 배치되는 공동 또는 공간이다. 벽측층 (140)은 흉막강 (130) 내로 흉막 유체를 분비하고, 흉막 유체는 내장 층 (120)에 의해 재흡수된다.

장측 흉막 멤브레인 (120) 및 벽측 흉막 멤브레인 (140)은 폐의 연신된 탄성 조건 때문에 계속해서 서로에 대해 떨어지려는 경향이 있으며, 허파 환기를 위해 흉막강 (130) 내에서 흉막간 압력의 유지가 중요하다. 예컨대, 흡기 중 흉막강 (130) 내에 음압이 있으며, 호기 중 흉막강 (130) 내에 양압이 있다. 흉막이 손상된 경우, 공기는 흉막강 (130) 내로 빨려들어갈 수 있고, 이는 두 흉막층을 분리하고 폐 허탈을 야기할 수 있다. 따라서, 장측 흉막 멤브레인 (120) 및 벽측 흉막 멤브레인 (140)은 호흡에 있어 중요한 역할을 하며, 공기 누출 또는 멤브레인 및 폐 조직의 결손은 환자에게 중대한 위험을 줄 수 있다.

관련하여, 흉막강 (130) 내에 흉막 유체의 유지 또한 환자의 호흡 기능을 위해 중요하다. 유체는 편평한 흉막 멤브레인 표면에 윤활제를 칠하며, 예컨대 정상적인 숨쉬기 중 폐가 팽창 및 수축함에 따른 폐와 흉벽 내부 표면 사이의 마찰을 감소시킴으로써 폐가 흉벽에 대해 쉽게 움직이도록 돕는다. 장측 흉막 멤브레인 (120) 또는 벽측 흉막 멤브레인 (140)이 훼손되고 유체 경계부가 파열된 경우, 기흉이 발생할 수 있다.

특정 허파 외과 수술 기술 또는 손상은 환자의 폐에서 조직-, 공기- 또는 유체-유체 누출을 야기할 수 있다. 예컨대, 장측 흉막 멤브레인 (120)은 손상될 수 있다. 상기와 같이, 흉막의 완전성은 숨쉬기 역학에서 중요한 인자의 역할을 한다. 여기에 개시된 다층상 평면 구조로 세포 내성장을 조장 또는 조향하는 콜라겐 생매트릭스 실시예는 이러한 누출 또는 폐의 결손을 방지 또는 치료하는데 및 폐의 평면 유체 및 기밀 표면을 유지 또는 복구하는데 매우 적합하다. 콜라겐 생매트릭스의 탄성에 의해, 그것은 환자가 숨을 쉼에 따른 폐 조직의 움직임을 쉽게 도울 수 있다.

도 2는 환자의 흉강의 또 다른 단면도를 제공한다. 여기에 도시되어 있듯이, 폐 조직 (210)은 장측 흉막 (220)으로 둘러싸이며 상기 장측 흉막은 이번에는 벽측 흉막 (240)으로 둘러싸인다. 장측 흉막 멤브레인은 몇몇의 조직학적 층을 함유한다. 제1 층은 중피 세포의 단일 층을 포함하고, 제2 층은 소성 결합 조직의 부중피층을 포함하며, 제3 층은 외부 탄성 판의 탄성층이며, 제4 층은 림프, 큰 모세혈관 및 콜라겐을 함유하는 간질성 또는 소성 결합 조직 층이고, 제5 층은 내부 탄성판의 탄성 섬유 및 폐와 접촉하는 섬유성 조직을 포함한다. 내장 멤브레인은 폐 유조직 또는 조직 및 엽간열을 덮는다. 흉벽 (250)은 늑골 (252) 및 근육 (254)를 포함한다. 도 2는 또한 폐포 또는 폐 조직 (210)이 노출되어 그에 따라 허파 공기 누출 (202)를 제공하는 폐 절제 영역 또는 결손 (201)을 나타낸다. 이와 같은 결손은 폐 외과 수술 중, 예컨대 외과 의사의 외과용 메스에 의해, 또는 손상의 결과로 생성될 수 있다. 장측 흉막 멤브레인 (220)이 제거 또는 손상됨으로 인해, 폐 조직 (210)과 흉막강 (230) 사이의 유체 소통이 형성된다. 장측 흉막 멤브레인의 제거는 폐포가 찢어지거나 또는 흉막강에 노출됨으로 인해 누출을 야기할 수 있다. 일부 경우에, 훼손된 세기관지 또한 흉막강에 노출될 수 있다. 본 발명의 실시예들은 이와 같은 유체 소통을 밀봉 또는 감소시키기 위한 기술을 포함한다. 예컨대, 유체 누출 (202)는 콜라겐 생매트릭스를 사용하여 폐쇄 또는 덮어질 수 있다.

도 2a는 환자의 흉강의 또 다른 단면도를 제공한다. 여기에 도시되어 있듯이, 폐 조직 (210a)는 장측 흉막 (220a)으로 둘러싸이며 상기 장측 흉막은 이번에는 벽측 흉막 (240a)으로 둘러싸인다. 장측 흉막은 몇몇의 조직학적 층을 함유한다. 제1 층은 중피 세포의 단일 층을 포함하고, 제2 층은 소성 결합 조직의 부중피층을 포함하며, 제3 층은 외부 탄성 판의 탄성층이며, 제4 층은 림프, 큰 모세혈관 및 콜라겐을 함유하는 간질성 또는 소성 결합 조직 층이고, 제5 층은 내부 탄성판의 탄성 섬유 및 폐와 접촉하는 섬유성 조직을 포함한다. 장측 흉막은 폐 유조직 또는 조직 및 엽간열을 덮는다. 흉벽 (250a)은 늑골 (252a) 및 근육 (254a)를 포함한다. 도 2a는 또한 폐포 또는 폐 조직 (210a)가 노출되어 그에 따라 허파 공기 누출 (202a)를 제공하는 폐 절제 영역 또는 결손 (201a)를 나타낸다. 이와 같은 결손은 폐 외과 수술 중, 예컨대 외과 의사의 외과용 메스에 의해, 또는 손상의 결과로 생성될 수 있다. 장측 흉막 (220a)가 제거 또는 손상됨으로 인해, 폐 조직 (210a)과 흉막강 (230a) 사이의 유체 소통이 형성된다. 장측 흉막의 제거는 폐포가 찢어지거나 또는 흉막강에 노출됨으로 인해 누출을 야기할 수 있다. 일부 경우에, 훼손된 세기관지 또한 흉막강에 노출될 수 있다. 본 발명의 실시예들은 이와 같은 유체 소통을 밀봉 또는 감소시키기 위한 기술을 포함한다. 예컨대, 유체 누출 (202a)는 콜라겐 생매트릭스를 사용하여 폐쇄 또는 덮어질 수 있다.

도 3은 내장 멤브레인 (320) 내의 결손 (305)을 도시한다. 폐 조직 (310)은 흉막강 (330) 및 벽측 흉막 멤브레인 (340)에 노출된다. 여기에 도시되듯이, 흉벽 (350)은 늑골 (352) 및 근육 (354)를 포함한다. 폐 조직 (310)과 흉막강 (330) 사이에 유체 누출 (302)가 존재한다. 예컨대, 노출된 또는 훼손된 폐포 또는 세기관지와 흉막강 사이에 유체 소통이 있을 수 있다. 본 발명의 실시예들은 이와 같은 유체 소통을 밀봉 또는 감소시키기 위한 기술을 포함한다. 예컨대, 유체 또는 공기 누출 (302)는 콜라겐 생매트릭스로 폐쇄 또는 덮어질 수 있다.

도 4에 나타내지듯이, 콜라겐 포일 생매트릭스 (460)은 환자의 장측 흉막 멤브레인 (420), 표면 폐 조직 (410) 또는 둘 다에 부착될 수 있다. 콜라겐 생매트릭스는 부착되는 환자의 내장 멤브레인 내의 개구에 약간 중첩된다. 생매트릭스 (460)은 폐 표면 (410)과 흉막강 (430) 또는 흉벽 (450)에 인접한 벽측 멤브레인 (440) 사이에 장벽을 제공한다. 일부 경우에, 콜라겐 포일 생매트릭스를 내장 멤브레인 또는 폐 표면 조직에 임의의 시일제, 풀, 봉합사 또는 압입기술의 사용 없이 부착시키는데 콜라겐 포일 생매트릭스와 내장 멤브레인 또는 폐 표면 조직 사이의 자연 인력이 사용될 수 있다. 일부 경우에, 수화된 후, 콜라겐 포일이 환자의 내장 멤브레인 내의 외과적 개구보다 약간 더 크게 절단될 수 있도록, 생매트릭스는 미리-수화된다. 그렇게 함으로써 콜라겐 포일은 부착되는 환자의 내장 멤브레인 내의 개구를 약간 중첩할 수 있다. 일 실시예에서, 수화된 콜라겐 포일은 내장 멤브레인과 대략 0.5 cm 내지 약 1 cm 중첩을 갖는 크기이다. 중첩의 양은 외과 의사의 선호 및 솜씨에 따라 변할 수 있다.

도 5에 나타나듯이, 콜라겐 포일 또는 생매트릭스 (560)은 환자의 내장 멤브레인 (520), 표면 폐 조직 (510) 또는 둘 다에 섬유소 시일제 (570)을 사용하여 부착될 수 있다. 외과적 용도에 승인된 섬유소 시일제의 예는 TISSUCOL™ 및 TISSEEL™ 섬유소 시일제(오스트리아 비엔나 박스터 AG(Baxter AG, Vienna, Austria))를 포함한다. 대안으로서, 외과적 용도에 승인된 외과용 시일제 또한 이용될 수 있다. 섬유소 시일제 또는 외과용 시일제는 액-밀 및 기-밀 시일을 형성하기 위해 내장 멤브레인을 중첩하는 콜라겐 포일의 부분 주위에 연속적인 선으로 적용될 수 있다. 콜라겐 포일 생매트릭스는 부착되는 환자의 내장 멤브레인 내의 개구를 약간 중첩할 수 있다. 임의로 섬유소 시일제 (570)과 결합되는 생매트릭스 (560)은 폐 표면 (510)과 흉막강 (530) 또는 흉벽 (550)에 인접한 벽측 멤브레인 (540) 사이에 장벽을 제공한다. 여기에 나타내지듯이, 생 매트릭스는 폐 조직의 표면에 또는 근처에 위치되며, 시일제는 폐 조직 내에 더 깊이 배치된다. 시일제는 예컨대 폐포 또는 세기관지와 흉막강 사이의 장벽에 기여함으로써 결손을 폐쇄하는 것을 도울 수 있다.

일부 경우에, 콜라겐 포일 생매트릭스는 다른 제품과 결합되어 사용될 수 있다. 예컨대, 콜라겐 포일 생매트릭스를 조직에 적용하고 여기서 기술된 수단 중 임의의 것으로 고정한 후, 항-유착 제품을 콜라겐 포일 생매트릭스의 상부 또는 하부 표면에, 또는 인접한 조직에 적용할 수 있다. 도 6은 내장 멤브레인 (620) 내의 결손 (605)를 콜라겐 포일 또는 생매트릭스 (660)으로 치료하는 회복 기술을 도시한다. 임의로 콜라겐 생매트릭스 (660)은 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)과 같은 항-유착 물질 (680)로 처리 또는 조합될 수 있다. 예컨대, PEG는 생매트릭스의 표면에 적용, 도입, 결합 또는 코팅될 수 있으며, 생매트릭스 (660)과 주위 조직 사이의 분리 층으로 기능할 수 있다. 생매트릭스가 환자에게 적용될 시, PEG를 갖는 표면은 흉벽 (650)을 향해 위치될 수 있다. 폐 표면으로부터 오는 섬유모세포는 생매트릭스 내로 이동할 수 있고, PEG는 폐 표면과 벽측 흉막 (640) 또는 흉벽 사이의 유착 형성을 방지 또는 억제할 수 있다. 따라서, PEG계 제품은 콜라겐 포일 생매트릭스의 상부 또는 하부 표면 또는 둘 다 또는 인접한 조직에 적용될 수 있다. 일부 경우에, PEG로 미리코팅된 콜라겐 생매트릭스가 사용될 수 있다. 콜라겐 포일 생매트릭스가 "미끄러운" 표면을 생성함으로써라기 보다는 조직 재생을 규제함으로써 유착을 방지하므로, 그것의 작용은 세포가 유착되지 않을 "미끄러운" 표면을 일시적으로 생성하는 제품을 이용함으로써 보충될 수 있다. 또 다른 실시예에서 이미 하나 또는 양쪽 표면 위에 PEG-계 제품으로 코팅된 즉시 사용 가능한 콜라겐 포일 생매트릭스가 사용될 수 있다. 임의로 생매트릭스 (660)는 환자의 장측 흉막 (620), 표면 폐 조직 (610) 또는 둘 다에 섬유소 시일제 (670)을 사용하여 부착될 수 있다. 임의로 섬유소 시일제 (670)과 결합된 생매트릭스 (660)은 폐 표면 (610)과 흉막강 (630) 또는 흉벽 (650)에 인접한 벽측 흉막 멤브레인 (640) 사이에 장벽을 제공한다. PEG 층은 벽측 멤브레인을 향하는 분리 층을 제공할 수 있고, 벽측 멤브레인의 운동을 허용하는 미끄러운 표면을 제공할 수 있다. PEG 층은 또한 빠르게 용해 및 재흡수될 수 있다. 콜라겐 생매트릭스는 세포 내성장을 규제하고 판상 내장 멤브레인의 재생을 증강시키는 다층상 생활성 재생 물질을 제공할 수 있다. 임의로 피브리노겐 및 트롬빈을 포함하는 시일제는 고정을 허용할 수 있고, 작은 간격을 채우며 수일 또는 수주 정도 상처 치유와 세포 부착 및 내성장을 원조한다. 여기에 도시되듯이, 시일제는 손상된 조직을 향한다.

일부 경우에, 항-유착 제품은 콜라겐 포일 생매트릭스의 상부 및 하부 표면 둘 다에 적용될 수 있다. 도 6a는 장측 흉막 (620a) 내의 결손 (605a)를 이와 같은 콜라겐 포일 또는 생매트릭스 (660a)로 치료하기 위한 회복 기술을 도시한다. 흉벽 (650a)는 늑골 (652a) 및 근육 (654a)를 포함한다. 여기에 나타나듯이, 콜라겐 생매트릭스 (660a)는 생매트릭스의 일 면 위에 폴리에틸렌 글리콜(PEG)과 같은 항-유착 물질 (680a)로 처리 또는 조합되며, 생매트릭스의 다른 면 위에 폴리에틸렌 글리콜(PEG)과 같은 항-유착 물질 (680b)로 또한 처리 또는 조합된다. 항-유착 물질 (680a, 680b)는 생매트릭스 (660a)와 주위 조직 사이에 분리층을 제공할 수 있다. 생매트릭스가 환자에게 적용될시, PEG를 갖는 일 표면은 벽측 멤브레인 (640a) 또는 흉벽 (650a)를 향하도록 위치될 수 있고, PEG를 갖는 다른 표면은 폐 조직 (610a)를 향하도록 위치될 수 있다. 일부 실시예에서, 미끄러운 외측 PEG 코팅 (680a)는 숨쉬기 중 장측 흉막 및 벽측의 방해받지 않은 운동을 강화할 수 있고, 또한 손상의 일시적인 폐쇄 및 비스코스(viscose) 분리층의 제공을 도울 수 있다. 콜라겐 생매트릭스 (660a)는 온전한, 정상적인 조직의 규제된 세포 내성장 및 강화된 재생 및 재건, 예컨대 원래로의 복구를 제공할 수 있다. 내부 PEG 코팅 (680a')는 공기 누출을 갖는 폐 조직을 향해 위치될 수 있다. 내부 PEG 코팅 (680a')는 폐 조직 (610a) 내의 작은 간격을 채울 수 있고, 예컨대 한 시간 내에 빠르게 수화 및 재흡수될 수 있으며, 예컨대 수일 및 수주 내의 방해받지 않은 생리학적인 상처 치유를 허용한다. 생매트릭스는 겉을 위로하여 또는 거꾸로 적용될 수 있기 때문에 이와 같은 양면의 PEG 코팅된 생매트릭스는 단순한 취급을 제공할 수 있다. 도 6b는 생매트릭스의 강화된 안정성 및 봉합성을 제공할 수 있는 외과용 메쉬 (661b)를 가진 예시적인 다층상 콜라겐 생매트릭스 (660b)를 도시한다. 외과용 메쉬 (661b)는 임의의 다양한 외과용 직물 또는 펠트를 포함할 수 있고 폴리프로필렌, 폴리에스테르, 폴리테트라플루오로에틸렌 등과 같은 물질을 포함할 수 있다.

사용 전, 건조 콜라겐 포일은 예컨대 생리식염수 내에서 수화될 수 있다. 일 실시예에서, 생리식염수는 0.9 % 염화나트륨 용액을 포함한다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일은 부형제 또는 약물-함유 용액 내에서 수화된다. 콜라겐 포일은 수화시키는데 필수적인 시간의 길이는 포일의 두께에 관계될 수 있다. 콜라겐 포일은 그것이 전체 넓이에 걸쳐 두께가 일정할 때까지 수화될 수 있다. 콜라겐 포일 생매트릭스는 물 또는 생리식염수 용액 내에서 붕해에 저항성일 수 있다. 일 실시예에서 콜라겐 포일은 생리식염수 내에서 약 1 초 내지 약 1 시간 동안 수화된다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일은 생리식염수 내에서 약 1 초 내지 약 30 분 동안 수화된다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일은 생리식염수 내에서 약 1 초 내지 약 20 분 동안 수화된다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일은 생리식염수 내에서 약 1 초 내지 약 10 분 동안 수화된다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일은 생리식염수 내에서 약 1 분 내지 약 6 분 동안 수화된다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일은 생리식염수 내로 담궈지고 즉시 꺼내진다. 이와 같은 반-수화는 조직에의 강화된 부착을 불러올 수 있다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일은 생리식염수 내에서 약 5 분 동안 수화된다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일은 이식 전 수화되지 않고, 이는 조직에 적용시 즉각적인 부착 및 현장 수화를 제공할 수 있다.

본 발명의 실시예는 그 내용이 여기에 참조로 도입된 WO 2004/108179 또는 WO 2007/137839에 개시된 것과 같은 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 용도, 제조 또는 적용을 포함한다. 상기한 바와 같이, 생매트릭스는 섬유소 시일제와 결합되어 사용될 수 있다. 일부 경우에, 섬유소 시일제는 생매트릭스의 적용 전 치료 부위 또는 장소에 적용될 수 있다. 일부 경우에, 섬유소 시일제 및 생매트릭스는 함께 적용될 수 있다. 섬유소 시일제는 통상적으로 두 주요 활성 성분을 포함한다: 피브리노겐 및 트롬빈. 트롬빈은 피브리노겐이 가교되어 허파 조직과 같은 손상된 조직 및 콜라겐 생매트릭스의 원 콜라겐 원섬유에 결합될 수 있는 섬유소 매트릭스를 형성할 수 있는 섬유소 단량체로 전환되는 것을 돕는다. 섬유소 풀은 환자 자신의 혈청으로부터 유도된 자가조직 섬유소 시일제를 포함할 수 있다. 일부 경우에, 콜라겐 생매트릭스는 피브리노겐과 결합되어 적용될 수 있고, 그 후 트롬빈이 적용된다. 일부 경우에, 피브리노겐이 적용되고, 그 후 트롬빈과 결합된 콜라겐 생매트릭스가 적용된다. 일부 경우에, 콜라겐 생매트릭스는 피브리노겐 및 트롬빈과 결합되어 적용된다. 섬유소 시일제는 생매트릭스의 표면에, 예컨대 나중에 생매트릭스를 환자에 적용 시 폐 표면을 향하는 생매트릭스의 일 면에 적용될 수 있다. 섬유소 시일제는 생매트릭스를 환자의 폐 조직에 고정 또는 부착하는 것을 도울 수 있다. 일부 경우에, 섬유소 시일제는 폐 조직의 거친 표면과 생매트릭스 사이의 간격을 적어도 부분적으로 채울 수 있다. 따라서, 시일제는 생매트릭스와 폐 표면 사이의 긴밀한 접촉을 용이하게 할 수 있으며 세포 부착 및 세포 성장을 원조한다. 섬유소 시일제는 얇은 층으로 콜라겐 생매트릭스에 적용될 수 있다. 섬유소 시일제는 또한 예컨대 유체 및 기체에 대해 차단성을 제공할 수 있다.

임의로, 콜라겐 생매트릭스 또는 PEG 층 또는 섬유소 시일제 층과 같은 생매트릭스와 관련된 요소는 착색제로 처리 또는 착색제를 포함하여, 개인이 생매트릭스의 일 면을 다른 면과 분간하는 것을 허용할 수 있다. 예컨대, 고정을 위해 섬유소 시일제를 포함하는 생매트릭스의 일 면은 메틸렌 블루와 같은 착색제 또는 염료를 가질 수 있다. 이와 같은 시각적 표지는 생매트릭스를 환자에게 어떻게 적용할 것인지를 결정함에 있어 외과 의사를 보조할 수 있다. 상기한 예에서, 외과 의사는 파란색 면이 폐 표면을 향하도록 생매트릭스를 적용할 수 있다.

외과적 과정의 일부로서, 외과 의사 또는 다른 건강 관리 전문가는 생매트릭스에 헹굼제를 적용할 수 있다. 예컨대, 외과 의사는 생매트릭스를 환자 조직에 적용하기 전에 생매트릭스를 식염수 용액으로 수화할 수 있다. 환자에 적용시, 폐와 흉벽 사이의 자연적 유체 또한 생매트릭스에 수화를 제공할 수 있다. 일부 경우에, 외과 의사는 생매트릭스를 환자에게 적용할 수 있고, 필요시 생매트릭스를 떼어내고 재위치시킬 수 있다. 이와 같은 기술은 적절하게 수화된 생매트릭스로 용이해질 수 있다. 생매트릭스가 이미 현장에 있는 경우, 수화는 용액으로 수행될 수도 있다.

또 다른 실시예에서, 섬유소 시일제 또는 외과용 시일제의 연속적인 선으로 또는 선 없이 자가조직 장측 흉막 또는 폐 표면에 부착될 시, 콜라겐 포일은 액밀 및 기밀 밀봉을 생성한다. 또 다른 실시예에서, 장측 흉막 또는 폐 표면을 중첩하는 콜라겐 포일은 장측 흉막 또는 폐 표면에 이를 부착시키는 섬유소 시일제 또는 외과용 시일제가 점재될 수 있다. 액밀 밀봉 고정은 그것이 인접한 조직과 출혈의 접촉에 관련된 합병증, 예컨대 조절되지 않은 출혈 및 섬유소 삼출에 의한 유착 형성의 유도를 막기 때문에 바람직할 수 있다. 또 다른 실시예에서 콜라겐 포일 생매트릭스는 섬유소 시일제 또는 외과용 시일제의 연속적인 선으로 조직에 부착시 액밀 및 기밀 밀봉을 생성한다. 추가의 실시예에서, 조직을 중첩하는 콜라겐 포일 생매트릭스는 이를 조직에 부착시키는 섬유소 시일제 또는 외과용 시일제가 점재될 수 있다. 또 다른 실시예에서 콜라겐 포일 생매트릭스는 그것이 바람직한 접촉 부위에 위치된 뒤 그것을 조직에 외과적으로 봉합함으로써 부착된다. 콜라겐 포일 생매트릭스가 봉합될 시, 포일을 파열시키는 것을 방지하기 위해 무장력 봉합 기술이 사용될 수 있다. 봉합사 선을 예컨대, 섬유소 시일제로 밀봉하는 것이 바람직할 수 있다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일 생매트릭스는 공지된 압입 기술에 따라 위치되고 이식된다. 일부 기술에서, 콜라겐 포일 생매트릭스는 바람직한 이식 부위에 위치되고 주위 조직으로 제 위치에 고정된다. 따라서, 이식편은 외과용 봉합사, 섬유소 시일제 또는 외과용 시일제 풀의 사용 없이 제 위치에 유지된다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일 생매트릭스는 임의의 시일제, 풀, 봉합사 또는 압입 기술의 사용 없이 위치되고 이식된다. 이 기술에서, 콜라겐 포일 생매트릭스는 콜라겐 포일 생매트릭스와 포유류의 조직 사이에 발생하는 자연 인력 또는 접착으로 바람직한 이식 부위에 위치되고 제 위치에 고정된다. 또 다른 실시예에서, 생매트릭스의 반-수화는 손상된 축축한 조직에의 접착을 강화할 수 있다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일 생매트릭스는 여기에 기술된 방법 중 임의의 것으로 조직에 적용되고 부착될 수 있으며, 그 후 또 다른 콜라겐 포일 생매트릭스가 인접한 조직에, 여기에 기술된 방법 중 임의의 것으로 적용될 수 있고, 이에 따라 콜라겐 포일 생매트릭스의 인접한 시트들을 생성시킨다.

또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일은 그것이 바람직한 이식 부위에 위치된 후 그것을 손상된 조직, 예컨대 장측 흉막에 외과적으로 봉합함으로써 부착된다. 이 실시예는 콜라겐 포일을 환자의 자가조직 장측 흉막 멤브레인에 부착시키는데 이용될 수 있다. 콜라겐 포일이 봉합될 시, 포일을 파열시키는 것을 방지하기 위해 장력 없는 봉합 기술이 사용될 수 있다. 봉합선은 예컨대 섬유소 시일제로 밀봉될 수 있다.

또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일은 압입 기술에 따라 위치되고 이식된다. 이 기술에서, 콜라겐 포일은 각각의 해부학적 구조에 존재하는 자연 내부 압력에 의해 바람직한 이식 부위에 위치되고 제 위치에 고정된다. 따라서, 이식편은 외과용 봉합사, 섬유소 시일제 또는 조직 풀의 사용 없이 제 위치에 유지될 수 있다.

또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일은 임의의 시일제, 풀, 봉합사 또는 압입기술의 사용 없이 위치되고 이식된다. 이 기술에서, 콜라겐 포일은 콜라겐 포일과 손상된 조직, 예컨대 유조직 사이에 발생하는 자연 인력 또는 유착으로 바람직한 이식 부위에 위치되고 제 위치에 고정된다.

콜라겐 포일은 선천성 상태, 태생적 결손, 병, 손상, 종양 제거 또는 환자의 내장 멤브레인을 파열 또는 관통하는 다른 외과적 수술, 또는 내장 멤브레인, 예컨대 장측 흉막의 회복으로 이익을 얻을 수 있는 임의의 다른 상태에 의한 인간 내장 조직, 예컨대 장측 흉막 조직을 회복하기 위해 일시적인 대체 내장 멤브레인 이식편으로 이용될 수 있다. 콜라겐 포일은 또한 양, 원숭이, 말, 쥐, 생쥐, 인간, 실험 동물, 또는 다른 포유 동물을 포함하지만, 그러나 여기에 제한되지 않는 임의의 다양한 포유 동물의 내장 멤브레인 조직을 회복하는데 이용될 수 있다. 본 발명의 실시예들은 추가로 콜라겐 포일을 갖는 키트 및 그것의 제조와 대체 내장 멤브레인으로서의 용도에 대한 설명에 관한 것이다.

조직을 다층상 생기능성 콜라겐 포일 생매트릭스로 덮는 방법은 내장 멤브레인의 임의의 손상 또는 결손의 치료 중 실행될 수 있다. 일부 경우에, 매트릭스를 환자에게 적용하는 단계는 폐 외과 수술 중 또는 폐 외과 수술의 일부로 수행될 수 있다. 일부 경우에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 회복 세포 또는 재생 세포와 같은 세포들을 유인할 수 있고, 다중 생활성 층을 따른 및 포일 생매트릭스를 관통하는 그리고 포일 생매트릭스 위의 그들의 내-성장을 규제한다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 세포의 내-성장에 의해 자연 조직으로 재흡수 및 리모델링될 수 있다. 층 구조의 콜라겐 포일 생매트릭스는 생체 내 세포 내-성장을 위한 생활성 및 생기능성 스캐폴드로 기능할 수 있으며 재생 및 회복 도중 층 구조의 자가조직 콜라겐을 갖는 포유류 조직으로 대체된다. 콜라겐 포일 생매트릭스는 그것이 이식된 포유동물에 의해 재흡수 가능할 수 있다. 이 성질은 가교된 원 콜라겐 섬유의 생기능성 및 예컨대 도 11a-c 및 12a-b에 도시된 바와 같은 콜라겐 포일 생매트릭스의 다층상 구조에 의해 강화될 수 있다.

일부 실시예에 따르면, 구 "조직을 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스로 덮다"는 일반적으로 조직을 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스와 물리적으로 접촉하게 한다는 것을 의미한다. 일부 실시예에서, 조직과 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 접촉은 포일의 이식을 불러온다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 위치 설정의 예가 도 3-6 및 14에 도시된다. 일부 실시예에 따르면, 콜라겐 생매트릭스는 결손 위에 적용된다(씌움). 일부 실시예에 따르면, 콜라겐 생매트릭스는 결손 아래에 적용된다(아래에 깜).

콜라겐 생매트릭스 생성물은 많은 유용한 성질을 제공한다. 그들이 결합하는 화학주성 상호작용은 내피 세포 및 섬유모세포의 빠른 침윤을 용이하게 하며, 이는 다시 층 내에 새로운 콜라겐 자가조직 섬유를 생산 및 침착시키고; 수반되는 주위 구조 내의 제한된 림프성 염증성 반응은 콜라겐 생매트릭스의 흡수를 촉진한다. 콜라겐은 또한 치료적 용도에 사용되는 지혈성을 지닌다. 혈소판은 콜라겐 구조체 위에 그들 자신을 침착시키고, 분해되며 그 도중에 혈장 인자와 함께 섬유소 형성을 촉진하는 응고 인자를 방출한다.

콜라겐 생매트릭스

일부 실시예에 따르면, 구 "다층상 콜라겐 포일 생매트릭스" 또는 "콜라겐 생매트릭스" 또는 "콜라겐 포일"은 비-콜라겐성 성분을 제거하도록 및 미시적 수준의 다층상 판상 구조를 갖는 콜라겐 원섬유의 시트를 형성하도록 처리된 원 콜라겐 원섬유의 생매트릭스(예컨대, 생체적합성 및 생기능성 물질의 매트릭스)를 의미한다. 다층상 콜라겐 포일은 비-콜라겐성 성분을 제거하도록 및 동일한 물리적 특성을 가진 콜라겐 원섬유의 시트를 형성하도록 처리된 소, 양, 돼지, 말 또는 인간 기원과 같은 임의의 공급원에 기인할 수 있다. 일부 실시예에 따른 콜라겐 포일 생매트릭스는 주사 전자 현미경에 의해 측정될 수 있듯이, 실질적으로 비다공성이다.

일부 실시예에 따르면, 여기서 생기능성 다층상 포일 생매트릭스의 내용 중에 사용된 바와 같은 용어 "생기능성"은 생매트릭스가 동물 내의 원 콜라겐 원섬유와 유사한 방식으로 동물의 세포에 의해 인식되고 이용되는 원 콜라겐 원섬유로 구성됨을 의미한다. 예컨대, 발명을 제한함이 없이, 이와 같은 기능은 생기능성 콜라겐 원섬유 및 다-층 구조를 따른 회복 및 재생 세포의 이동, 그리고 생기능성 콜라겐 원섬유를 포함하는, 또는 대체하는 세포에 의한 새로운 세포외 매트릭스의 침착을 포함할 수 있다.

일부 실시예에 따르면, 여기서 사용된 바와 같은 구 "비-자연 발생 생매트릭스"는 (i) 자연 물질 내에 함유된 콜라겐 원섬유가 자연 물질의 콜라겐 구조 내의 그들의 자연-발생 배열에서 움직여지거나 재위치되는 방식으로 처리 또는 가공된 자연에 존재하는 물질(즉, 자연 물질); 또는 (ii) 콜라겐 원섬유의 배열을 조작하도록 처리 또는 가공된 자연에 존재하지 않는 물질(즉, 비-자연, 인공 물질, 예컨대 재조합 물질)로 형성된 원 콜라겐 원섬유를 갖는 제조된 매트릭스 또는 골격을 의미한다. 예컨대, 비-자연 발생 생매트릭스는 기계적으로 또는 화학적으로 가공된(예컨대, 갈아진 또는 썰어진 등) 콜라겐을 포함하는 출발 물질로부터 형성될 수 있다. 자연 발생 콜라겐 골격의 구조를 보존하는 방식의 출발 물질의 처리 또는 가공으로 형성되는 콜라겐 생매트릭스는 비-자연 발생 생매트릭스가 아니다(예컨대, 자연 발생 콜라겐 구조를 보존하면서 세포 성분을 제거하도록 처리된 표피 조직).

일부 실시예에서, 콜라겐 포일 생매트릭스는 콜라겐 원섬유를 갖는 결합 조직 단백질을 포함한다. 예컨대, 콜라겐 포일 생매트릭스는 유형 I 콜라겐 원섬유를 갖는 결합 조직 단백질을 포함할 수 있다. 콜라겐 원섬유를 갖는 것 외에, 콜라겐 포일 생매트릭스는 또한 부형제, 보존제, 성장 인자, 또는 최종 생성물의 연성 및 탄성에 도움이 되는 첨가제를 포함할 수 있다. 콜라겐 원섬유의 각각의 층은 실질적으로 비다공성일 수 있다. 일부 실시예에 따르면, 구 "실질적으로 비다공성"은 콜라겐 시트를 형성하기 위한 콜라겐 원섬유의 응결의 결과로 콜라겐 포일 생매트릭스 내에 존재하는 임의의 세공들이 주로 서로 격리되며, 세공들이 콜라겐 포일의 두께를 가로지르는 방식으로 상호 연결되지 않는다는 것을 의미한다. 콜라겐 포일 생매트릭스 내에 구멍을 생성하는 기계적 천공은 세공이 아니다. 일부 경우에, 물질은 1500× 배율에서 주사 전자 현미경을 사용할 시 보이게 되는 세공이 실질적으로 없는 것으로 보인다. 도 7, 8a-b, 9a-b 및 10에서와 같이 주사 전자 현미경 사진은 콜라겐 포일 생매트릭스의 비다공성을 도시한다.

일부 실시예에 따르면, 콜라겐 포일은 그것이 이식된 포유 동물에 의해 재흡수가능하다. 임의의 특정 이론에 얽매이지 않고, 이 성질은 콜라겐 포일의 구조에 의해 강화될 수 있다고 생각된다. 말 콜라겐 포일을 생산하기 위해 이용되는 공정은 콜라겐 원섬유의 적층된 층을 형성한다. 각각의 층 사이는 그 안으로 환자의 세포 및 맥관구조가 이동되고 내장 또는 벽측 멤브레인 조직, 예컨대 신-흉막 조직을 형성할 수 있는 틈새이다. 콜라겐 원섬유의 각각의 층은 실질적으로 비다공성일 수 있다. 존재할 수 있는 소수의 세공들은 통상적으로 서로 격리되며 콜라겐 원섬유의 다중 층을 통해 상호 연결되지 않는다. 본 발명의 다중 층 구조는 콜라겐 포일의 액밀 및 기밀 특성을 강화한다.

콜라겐 포일 생매트릭스 실시예는 무수한 다-방향의 서로 얽힌 콜라겐 원섬유의 층을 갖는 비-자연 발생 다중-층상 콜라겐 멤브레인을 포함할 수 있다. 따라서, 콜라겐 원섬유는 평면 내에 다-방향의 방식으로 배열될 수 있고, 이들 평면들은 다중-층상 구조를 생성하는 시트들을 형성한다. 건조 콜라겐 포일 생매트릭스의 도시는 콜라겐 원섬유가 매립된 콜라겐 포일 생매트릭스의 표면을 도시하는 도 7의 현미경사진(SEM)에서 보여질 수 있다. 콜라겐 원섬유는 약간 습한 대기가 근 자연 조건을 제공하는 ESEM(환경 주사 전자 현미경) 조건 하에서 콜라겐 포일 생매트릭스의 상부 표면 사진 위의 표면에서 보인다. 도 8a-b에 도시되듯이, 표면은 매끄럽고 실질적으로 비다공성으로 보인다. 콜라겐 포일 생매트릭스 하부 표면의 사진(ESEM)은 도 9a-b에 나타내진 바와 같이 콜라겐 포일 생매트릭스의 실질적 비-다공성을 도시한다. 콜라겐 원섬유는 명백하게 나타난다.

다중 층 내에서 원 콜라겐 원섬유의 2-차원 방향의 독특한 배향은, 예컨대 높은 정력학 압력 하에서도, 주로 액밀성 및 기밀성의 원인이 되며, 높은 탄성과 큰 강도를 제공한다. 콜라겐 포일 생매트릭스의 무수한 평행-배향된 얇은 콜라겐 원섬유 층 때문에, 이 물질은 덮기 후 결손을 폐쇄하는데에 있어 인체 자신의 내장 또는 벽측 멤브레인을 일시적으로 대체하는데 적절하며 새로운 조직 및 콜라겐 구조체를 형성하기 위한 세포 내-성장을 위한 생기능성 생매트릭스 스캐폴드를 제공한다. 다중 층 구조는 콜라겐 포일 생매트릭스의 액밀 및 기밀 특성을 강화할 수 있다.

포유 동물의 내장 멤브레인 조직을 회복하는데 콜라겐 포일을 사용하기 전에, 건조 콜라겐 포일 물질은 수화될 수 있다. 도 10은 콜라겐 원섬유가 뚜렷하게 도시된 수화된 콜라겐 포일의 표면을 도시하는 SEM 사진이다. 표면의 실질적 비-다공성은 사진에서 명백하게 나타난다.

일부 실시예에 따르면, 콜라겐 포일 생매트릭스는 실질적으로 비다공성이며, 콜라겐 원섬유의 층들 사이에는 틈새가 존재한다. 콜라겐 포일 생매트릭스는 각각의 페이지가 실질적으로 매끄럽고 비다공성이며, 각각의 페이지 사이에 공간이 있는 페이지들의 적층체와 비슷할 수 있다. 건조 형태일 시 틈새는 더 뚜렷할 수 있다. 콜라겐 포일 생매트릭스가 약간 습한 대기 중 근 자연 조건 하에서 관찰될 시 틈새가 감소된다. 콜라겐 포일 생매트릭스의 틈새의 감소 및 층상 특성은 도 11a-C의 습한 대기 중 콜라겐 포일 생매트릭스 단면의 사진에서 도시된다. 습한 ESEM 조건은 자연 조건에 근접할 수 있다. 물질은 매우 긴밀하게 함께 묶어진 시트의 적층체 같은 구조를 보인다. 콜라겐 층들 사이의 틈새는 명백하게 나타난다. 대조로서, 도 12a-b는 건조 콜라겐 포일을 도시하는 ESEM 사진이다. 콜라겐의 다중 층 및 콜라겐 층들 사이의 틈새가 명백하게 나타난다. 액밀 및 기밀성을 촉진시키는 것 외에, 콜라겐 포일 생매트릭스의 무수한 평행-배향된 얇은 콜라겐 원섬유층들은 동시에 인체 자신의 조직의 새로운 구성을 위한 세포 내-성장용 생물동가의 생기능성 스캐폴드로 작용한다.

일부 경우에, 수화시 콜라겐 포일 생매트릭스 부피의 변화는 적거나 무시가능하다. 콜라겐 포일 생매트릭스는 수화될 시 실질적으로 그것의 크기 및 모양을 유지하며, 수화 후에도 우수한 모양 안정성을 갖고 조직과 접촉에 뒤따르는 팽윤 또는 수축의 문제도 일으키지 않는다. 일단 수화되고 이식되면, 콜라겐 포일 생매트릭스 실시예는 외과용 봉합사를 파열하거나 섬유소 또는 콜라겐 포일 생매트릭스를 환자의 조직에 고정하는 다른 생체적합성 풀 밀봉을 파손시킬 정도로 면적이나 두께에 있어서 현저하게 팽창 또는 수축하지 않을 수 있다.

일부 경우에, 완전히 수화시 건조 콜라겐 포일 생매트릭스 면적의 수축 또는 팽윤은 약 -5 % 내지 약 20 %로 변할 수 있다. 일부 경우에, 완전히 수화시 건조 콜라겐 포일 생매트릭스의 면적은 약 -5 % 내지 약 10 %로 변할 수 있다. 임의로, 완전히 수화시 건조 콜라겐 포일 생매트릭스의 면적은 약 -5 % 내지 약 5 %로 변할 수 있다. 예컨대, 완전히 수화시 건조 콜라겐 포일 생매트릭스의 면적은 약 4 % 이하로 증가할 수 있다.

일부 경우에, 완전히 수화시 콜라겐 포일 생매트릭스는 그것의 건조 두께의 약 6 배까지 증가한다. 일부 경우에, 완전히 수화시 콜라겐 포일 생매트릭스는 그것의 건조 두께의 약 3 배까지 증가한다. 일부 경우에, 완전히 수화시 콜라겐 포일 생매트릭스는 그것의 건조 두께의 약 2 배로 증가한다.

콜라겐 포일 생매트릭스의 두께는 특정 적용에 따라 변할 수 있다. 특정 크기의 콜라겐 포일 생매트릭스를 제조하기 위해 이용된 출발 물질양의 변화는 콜라겐 포일 생매트릭스의 두께를 조절할 수 있다. 일부 경우에, 건조 형태일 시, 콜라겐 포일 생매트릭스는 약 0.01 mm 내지 약 3.0 mm의 두께를 갖는다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일 생매트릭스는 약 0.02 mm 내지 약 2.0 mm의 두께를 갖는다. 추가의 실시예에서, 콜라겐 포일 생매트릭스는 약 0.03 mm 내지 약 1.5 mm의 두께를 갖는다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일 생매트릭스는 약 0.05 mm 내지 약 1 mm의 두께를 갖는다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일 생매트릭스는 약 1.0 mm 이하의 두께를 갖는다.

콜라겐 포일 생매트릭스의 건조 중량은 그것의 바람직한 두께에 의존할 수 있다. 일 실시예에서, 콜라겐 포일 생매트릭스의 건조 중량은 약 1 mg/cm² 내지 약 50 mg/cm²이다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일 생매트릭스의 건조 중량은 약 1.5 mg/cm² 내지 약 30 mg/cm²이다. 또 다른 실시예에서, 콜라겐 포일 생매트릭스의 건조 중량은 약 2 mg/cm² 내지 약 20 mg/cm²이다. 추가의 실시예에서, 콜라겐 포일 생매트릭스의 건조 중량은 약 2.5 mg/cm² 내지 약 15 mg/cm²이다. 예컨대, 콜라겐 포일 생매트릭스의 건조 중량은 약 3 mg/cm² 내지 약 10 mg/cm²일 수 있다.

일부 실시예에서, 수화시 콜라겐 포일 생매트릭스의 질량은 그것의 건조 질량의 약 15 배까지 증가한다. 또 다른 실시예에서, 수화시 콜라겐 포일 생매트릭스의 질량은 그것의 건조 질량의 약 10 배까지 증가한다. 또 다른 실시예에서, 수화시 콜라겐 포일 생매트릭스의 질량은 그것의 건조 질량의 약 7 배까지 증가한다. 또 다른 실시예에서, 수화시 콜라겐 포일 생매트릭스의 질량은 그것의 건조 상태로부터 약 5 배까지 증가한다.

일부 실시예에 따르면, 콜라겐 포일 생매트릭스는 바람직하게, 예컨대 그것의 외과적 적용 중, 콜라겐 포일 생매트릭스의 취급을 개선하고 원조하며, 예컨대 그것의 이식 후 증가된 기계적 안정성을 제공하는 높은 인장 강도를 가진다. 추가로, 콜라겐 포일 생매트릭스의 두께를 증가시키는 것은 인장 강도를 상당히 증가시킬 수 있다.

적용된 압력 하에서 파열되려는 콜라겐 포일 생매트릭스 물질의 경향은 여기서 이하 "극한 인장력"으로 지칭되는 그것의 "극한 인장 하중" 또는 "극한 인장력"으로 측정될 수 있다. 콜라겐 포일 생매트릭스의 극한 인장력은 규정된 폭을 갖는 콜라겐 포일 생매트릭스의 스트립에 압력을 가하고 콜라겐 포일 생매트릭스의 파손(예컨대, 파열 또는 찢어짐)을 야기하는 적용된 압력의 양을 측정함으로써 결정될 수 있다. 극한 인장력은 아래의 식을 사용해 정량화될 수 있다: "극한 인장력" = 적용된 힘/콜라겐 포일 생매트릭스 스트립의 폭 = 뉴턴/cm-스트립.

일부 경우에, 콜라겐 포일 생매트릭스는 약 1 및 약 30 뉴턴/cm-스트립 사이의 극한 인장력을 갖는다. 일부 경우에, 콜라겐 포일 생매트릭스는 약 1.5 및 약 15 뉴턴/cm-스트립 사이의 극한 인장력을 갖는다. 일부 경우에, 콜라겐 포일 생매트릭스는 약 2 및 약 10 뉴턴/cm-스트립 사이의 극한 인장력을 갖는다. 일부 경우에, 콜라겐 포일 생매트릭스는 약 3 및 약 6 뉴턴/cm-스트립 사이의 극한 인장력을 갖는다. 일부 경우에, 예컨대 도 6b에 도시된 유형의, 일체식 외과적 메쉬를 갖는 콜라겐 포일 생매트릭스는 30 뉴턴/cm-스트립 이상의 극한 인장력을 가질 수 있다.

콜라겐 포일 생매트릭스 실시예는 수화시 탄성 및 유연하게 유지되면서도 높은 인장 강도를 가질 수 있다. 이러한 특징은 콜라겐 포일 생매트릭스가 접촉 부위에 존재하는 해부학적 조건(예컨대, 굴곡)에 최적으로 맞춰질 수 있게 한다.

수화된 상태에서, 콜라겐 포일 생매트릭스는 쉽게 돌아다닐 수 있다. 예컨대, 생매트릭스는 외과적 부위 내에서 돌아다닐 수 있으며 예컨대 그것이 이식될 경우, 내장 또는 벽측 멤브레인 손실의 모양 및 위치에 최적으로 설계되고 맞춰질 수 있다. 일단 이식되면, 콜라겐 포일 생매트릭스 이식편은 매끄럽게 유지되며 필요하거나 바람직할시 재위치될 수 있다. 시간이 지남에 따라, 세포 및 맥관구조가 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 다중 층의 도처를 향해 이동하며, 결국 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 새 조직 및 자가조직 콜라겐 구조로 대체한다. 콜라겐 포일 생매트릭스의 층 내에 맥관구조가 형성되고 세포가 이동함에 따라, 조직은 규제된 방식으로 콜라겐 포일 생매트릭스의 형태를 취한다. 새롭게 형성된 결합 조직으로 콜라겐 포일 생매트릭스의 세포적 유기화 후, 인접 조직, 예컨대 벽측 흉막 또는 흉벽에의 유착 형성이 최소화될 수 있다.

콜라겐 포일 생매트릭스 생산에 사용하기 위한 콜라겐은 임의의 적절한 공급원으로부터 얻어질 수 있다. 예컨대, 발명을 제한함이 없이, 콜라겐은 소, 양, 돼지, 말 또는 인간 기원의 것일 수 있다. 콜라겐은 자연 발생 조직, 예컨대 힘줄, 진피 또는 다른 콜라겐이 많은 조직으로부터 수확될 수 있고 또는 재조합 유전자 수단으로 제조될 수 있다. 아래에 기술되듯이, 발명의 예시적인 일 실시예는 아킬레스 힘줄에서 유도된 말 콜라겐을 이용한다.

일부 실시예에 따르면, 콜라겐 생매트릭스는 정제된 잘게 썰어진 말 아킬레스 힘줄로부터 침전된 말 원 콜라겐 원섬유(주로 유형 I 콜라겐)를 포함한다. 유연한 형태안정성 및 탄성 생매트릭스는 비다공성 액밀 및 기밀 다층 구조를 가질 수 있다. 건조 상태에서, 생매트릭스 두께는 약 0.1 mm일 수 있고, 습윤 상태에서 멤브레인 두께는 약 0.3 mm일 수 있다.

본 발명의 실시예에 따른 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 콜라겐 원섬유를 포함하는 실질적으로 비다공성인 포일의 다중 층을 갖는 콜라겐성 원 가교된 미시적 다층상 생매트릭스를 포함할 수 있다. 이와 같은 비-자연 발생 생매트릭스의 실시예는 그 개시 내용이 여기에 전체로서 참조로 도입된 국제 특허 출원 제WO 04/108179호 및 제WO 07/137839호에 기술된다. 본 발명의 실시예에 따라 사용될 수 있는 콜라겐 포일은 통상적으로 생기능성, 생활성, 기계적으로 안정, 탄성, 비다공성, 액밀 및 기밀, 특히 혈액 및 세포밀봉성이며 혈액, 피브리노겐, 괴사성 물질 및 훼손된 조직의 조절되지 않은 분산에 대해 일시적인 장벽을 제공할 수 있다. 따라서 내장 조직 및 인접한 해부학적 구조 사이에 형성된 생활성 분리 층은 처음에 치료된 조직을 차폐한다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 지혈제로 기능할 수 있으며 내장 멤브레인 옆에 또는 가까이 위치된 해부학적 영역, 예컨대 폐 표면에서 섬유증 및 유착 형성의 주요 원인 중 하나인 조절되지 않은 섬유소 밴드 형성 및 분산과 혈종을 억제할 수 있다.

기계적으로 안정, 탄성, 비다공성 및 주요 액밀 및 기밀 콜라겐성 생매트릭스는 내장 멤브레인 결손에 적용될 수 있다. 콜라겐 생매트릭스는 인공 상피/중피로 기능할 수 있으며 내장 또는 벽측 표면을 덮고 보호한다. 이는 장기 표면에서의 유체 및 공기 누출의 밀봉의 일차적인 봉합을 야기한다. 바람직하게, 콜라겐 생매트릭스의 적용은 유체 또는 공기에 대한 장벽으로 기능하는 즉각적인 기계적 시일제를 제공할 수 있다. 생매트릭스의 층상 구조에 의해, 섬유모세포 또는 상처 치유 세포, 예컨대 림프구 또는 대식세포는 생매트릭스 도처에 이동하도록 규제되거나 허용될 수 있으며, 이는 내생 콜라겐의 생성을 불러온다. 따라서, 환자 자신의 내장 또는 벽측 멤브레인은, 예컨대 상처 치유 세포가 결국 정상적인 내장 멤브레인으로 대체되면서, 재생되거나 강화될 수 있다. 이 방식으로, 생매트릭스는 인체 자신의 내장 멤브레인으로 리모델링될 수 있다. 이는 특히 내장 조직과 인접한 영역, 예컨대 폐 표면과 흉벽 사이에서, 유착 또는 결합이 전혀 또는 거의 없이 달성될 수 있다.

일부 실시예에 따르면, 콜라겐 생매트릭스로의 내장 멤브레인 재생은 특정 표준 외과적 기술을 대체 또는 증대시킬 수 있다. 예컨대, 폐 밀봉, 응고 기술, 봉합 기술 및 다른 "생물질"의 이식 대신 흉막 재생이 수행될 수 있다. 생기능성 콜라겐성 생매트릭스는 세포 내성장의 조향 및 내장 멤브레인의 재생 과정을 위한 세포외 매트릭스의 강화된 새로운 형성에 사용될 수 있다. 콜라겐 생매트릭스는 처음에 접착력을 통해 상처 표면에 부착될 수 있다. 생매트릭스의 원 콜라겐 원섬유는 누출의 폐쇄 및 콜라겐 멤브레인의 접착을 추가로 원조하는 응고 및 섬유소의 국소적 형성을 활성화할 수 있다. 생활성 콜라겐은 회복 세포, 특히 섬유모세포를 유인할 수 있다. 이는 섬유소(예컨대 생리학적 섬유소 시일제)의 국소적 존재에 의해 추가로 지지될 수 있다.

조직화된 다층 생매트릭스 내의 평행한 층들은 층을 따라 섬유모세포 및 회복 세포의 내성장을 규제할 수 있다. 콜라겐 매트릭스의 평행한 층들을 따른 내성장은 통상적으로 층을 통과하는 것보다 빠르다. 내생 콜라겐으로의 세포외 매트릭스의 새로운 형성은 또한 세포(섬유모세포)주를 통해 유도된다. 이 과정은 생매트릭스의 살아있는 조직으로의 리모델링을 조향하며, 예컨대 외상성 찢어짐, 외과적 절개, 절제 또는 박피 이후 내장 결손을 폐쇄한다. 박피 과정 중, 폐의 표면 층 멤브레인이 제거된다.

이 방법으로, 본 발명의 실시예는 콜라겐 포일의 콜라겐 구조에서 얻어지는 다층상 세포외 매트릭스의 형성을 위한 기술을 포함한다. 조향 콜라겐 생매트릭스는 내장 및 벽측 멤브레인의 재생을 위한 규제된 세포 내성장을 제공한다. 이와 같은 조직의 조향된 재생은 흉막 조직 내의 누출, 예컨대 장기간의 외과 수술 후 허파 공기 누출을 폐쇄 또는 감소시키는데 매우 적합하다. 실제로, 동물 연구는 허파 외과 수술에서 장기간의 수술 후 공기 누출의 방지 및 규제된 세포 내성장을 통한 내장 멤브레인의 조향된 재생에 있어서 콜라겐 생매트릭스의 유효성을 입증하였다.

일부 실시예에 따르면, 밀봉 및 콜라겐과 혈소판 응집을 결정하는 혈액 세포 사이의 접촉의 목적을 위해 본 발명의 콜라겐 생매트릭스는 불투과성 물질이다. 콜라겐 생매트릭스와의 이 상호작용은 응고 인자의 방출 및 섬유소의 형성을 유도한다. 콜라겐 생매트릭스는 필요에 따라 절단되어 내장 결손에 맞춰질 수 있다. 본 발명의 콜라겐 생매트릭스 실시예는 이식편 도입의 육안적인 면, 인접한 조직 구조에의 유해한 반응 없이(염증, 유착, 섬유증, 괴사) 수술 후 대상의 초기 또는 후기 공기 누출의 방지에 있어서 및 도입 과정 및 결합 조직 유기화의 조직학적 평가에 있어서 성공적인 것으로 밝혀졌다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 실시예는 회복 세포 및 재생 세포와 같은 세포를 유인할 수 있다. 생매트릭스 물질은 생매트릭스의 표면 위로 세포 성장을 규제할 수 있으며, 회복 및 재생 세포의 내-성장을 제공한다. 생매트릭스 물질은 내-성장 이후 자연 조직으로 리모델링될 수 있으며 재흡수될 수 있다.

표준 콜라겐계 조성물은 통상적으로 숙주에 의해 이물질로 인식되며 종종 피막화된다. 따라서, 재세포화 및 각각의 해부학적 조직으로의 리모델링은 일어나지 않거나 불가능하며, 규제된 세포 내-성장이 없고 재생 과정의 조절이 없으며 콜라겐은 "생체적합성" 삽입물로 용인될 뿐이다. 반면에, 본 발명의 일 실시예에 따른 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 내 및 콜라겐 포일 생매트릭스의 표면 위에서 세포 성장을 규제하는 생활성 임시 층으로 기능하는 멤브레인(예컨대, 장측 흉막 멤브레인)으로 작용한다. 대부분의 항-유착 조성물이 그런 것처럼 단지 세포 성장에 대한 장벽으로만 기능하는 대신, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 극히 생활성일 수 있으며 조직의 리모델링을 지지한다. 예컨대, 이식 후 수주 내에, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 내장 멤브레인 조직의 회복된 해부학적 구조 내로 잘 통합될 수 있다. 추가로, 외과 수술 중 및 후, 콜라겐 멤브레인의 비다공성, 유체-밀봉성(예컨대, 혈액, 액체, 공기, 기체, 담즙 등) 다층상 구조는(다공성 조성물과 달리) 외과 수술 후 초기 시간 기간에 유착 형성의 지지 조건의 원인이 될 수 있는 흉막 상처 부위로부터 혈액(예컨대, 피브리노겐/섬유소) 및 괴사성 물질의 조절되지 않은 분산을 방지할 수 있다. 콜라겐 생매트릭스는 또한 반흔 형성 및 섬유증의 주요 영역인 내장 표면과 인접한 조직, 예컨대 폐 표면 및 벽측 흉막 또는 흉벽 사이의 직접적인 접촉을 방지할 수 있다. 이것은 또한 조절되지 않은 유착 및 반흔 형성과 흉막 섬유증의 방지 및 최소화를 동반하는 해부학적 구조의 조절된 리모델링에 기여한다. 이와 같은 기술은 인간, 개, 고양이, 생쥐, 쥐 등을 포함하지만, 그러나 여기에 제한되지 않는 임의의 포유 동물에 사용될 수 있다.

액밀 및 기ㄴ밀성을 촉진시키는 것 외에, 콜라겐 포일의 무수한 평행-배향된 얇은 콜라겐 원섬유층들은 동시에 인체 자신의 내장 멤브레인의 새로운 구성을 위한 세포 내성장용 생매트릭스 스캐폴드로 작용한다. 놀랍게도 콜라겐 포일의 비다공성, 층상 구조가 콜라겐 포일을 가로질러 그리고 그것의 다중 층들 사이에 존재하는 틈새 내에서 세포, 맥관구조의 내성장 및 새로운 콜라겐 구조의 형성을 촉진시키며, 이식 수주 내에 자연 흉막의 통상적인 층 구조를 갖는 신-흉막을 형성한다는 것이 밝혀졌다. 여기의 다른 부분에서 기술된 바와 같이, 세포, 맥관구조 및 새로운 콜라겐 구조의 내성장은 매우 광범위해 수술 후 수주 내에 신-흉막은 환자의 기존에 존재하는 장측 흉막 조직과 구분하기 어려워진다. 따라서, 결국 이식편 내성장이 완전히 확립될 수 있다.

본 발명의 일부 실시예에 따르면, 콜라겐 포일을 사용하는 것의 현저한 이익은 그것이 이식되는 환자에게 병을 옮길 상당히 낮은 위험성이다. 콜라겐 원섬유가 산(예컨대, 염산, 아세트산 등) 및 수산화 나트륨과 같은 염기로 처리되어 콜라겐 포일을 생산하는 제조 과정은 존재할 수 있는 박테리아, 바이러스 및 프라이온의 감염 수준을 감소시키거나 불활성화시키도록 바람직하게 기능 한다. 생물질의 염산, 수산화나트륨, 에틸렌 옥시드(ETO) 등으로의 처리는 프라이온 및 바이러스를 불활성화시키는 약물 및 생물질 규제 범위 내의 승인된 방법으로 정부 기관에 의해 공식적으로 인정되었다. 이와 같은 처리는 일부 규제 하에, 콜라겐 포일을 배치-배치 체제로 시험하기 위한 규정 요건들을 감소시킬 수 있다. 따라서, 제조 과정 중 콜라겐 원섬유의 처리는 제품 안전성을 강화하고 환자에게 병 전달의 위험성을 감소시킨다.

여기서 기술된 제조 과정을 거친 콜라겐 물질은 환자에게 임의의 병원체를 전달한다고 알려져 있지 않다. 따라서, 제조 과정 외에, 말 콜라겐의 이용은 추가로 기존에 인간 사체 대체물과 관련되었던 스폰지 형태의 뇌염을 전달할 위험성을 회피한다. 말 아킬레스 힘줄로부터 유도된 콜라겐과 같은 말 기원으로부터 유도된 콜라겐의 이용은 광우병(BSE) 또는 스크래피로도 알려진 전염성 스폰지 형태 뇌병증(TSE) 전달의 위험을 회피한다. 이 병의 전달은 반추동물 공급원으로부터 수득된 생물학적 물질(예컨대, 축우, 염소, 양 등으로부터의 생물학적 물질)의 사용과 관련이 있었다.

수화시 콜라겐 포일 부피의 변화는 작거나 무시가능하다. 다공성 대체 제품에 반해, 콜라겐 포일은 수화될 시 실질적으로 그것의 크기 및 모양을 유지하며 우수한 모양 안정성을 갖고, 수화 후에도 생안정성으로 유지되며 이식 후 인체 내에서 팽윤 또는 수축 문제를 일으키지 않는다. 일단 수화되고 이식되면, 콜라겐 포일은 외과용 봉합사를 파열하거나 콜라겐 포일을 환자의 조직에 고정하는 섬유소 풀을 파손시킬 정도로 면적이나 두께에 있어서 현저하게 팽창 또는 수축하지 않는다.

콜라겐 포일의 두께는 특정 크기의 콜라겐 포일을 생산하기 위해 이용되는 출발 물질의 양을 변화시킴으로써 조절될 수 있다. 콜라겐 포일은 에틸렌 옥시드(ETO) 또는 유사한 멸균 가스로 기체-소독되거나 방사선 조사로 소독될 수 있다.

콜라겐 생매트릭스의 제조

일부 실시예에 따르면, 콜라겐 포일은 세포 성분을 제거하도록 및 콜라겐 원섬유의 시트를 형성하도록 처리된 콜라겐 원섬유의 생매트릭스이다. 제조 과정 중, 예컨대 WO 04/108179 또는 WO 07/137839에 기술된 바와 같이, 콜라겐 원섬유는 용액으로부터 침전된 원섬유와 같이 자연적으로 가교되어 콜라겐 포일을 형성한다. 화학물질 또는 방사선(예컨대 전리 또는 자외선)으로 콜라겐 원섬유를 가교시키는 것과 달리, 콜라겐 원섬유의 자연 가교를 허용하는 것은 그들의 생기능성을 보장할 수 있고, 가속된 재생을 촉진하며, 콜라겐 포일 생매트릭스가 조직과 접촉하게 된 후 재흡수 시간을 감소시킨다. 콜라겐 원섬유를 화학물질 또는 방사선으로 가교시키는 것은 증가된 재흡수 시간 또는 심지어는 비-재흡수, 피막화 및 반흔 형성을 야기할 수 있다. 일부 실시예에서 이용된 콜라겐 포일 생매트릭스 내의 원섬유의 자연 가교는 자연적, 생리학적-유사 수단으로 일어난다. 이 자연 가교는 주로 비-공유 상호작용(예컨대, 반데르 발스 또는 쌍극자-쌍극자 상호작용)을 통하거나 또는 콜라겐 분자의 아미노산 측쇄 사이에 쉽게 분리될 수 있는 쉬프(schiff)-염기 결합의 형성에 의한다. 콜라겐의 분자간 가교는 물리적 및 화학적 안정성의 원인이 된다. 콜라겐 가교 형성의 주요 단계는 리신 또는 히드록시리신 잔기의 효소적 전환에 의존하며 알데히드, 알리신 및 히드록시알리신이 생기게 한다. 이들 알데히드기는 자발적으로 반응성 아미노기와 반응하여 불안정한 알디민 결합(예컨대 -CH=N-와 같은)을 갖는 불안정한 알돌축합성 생성물을 함유하는 쉬프-염기 성분의 형성을 야기한다. 따라서, 생성물의 원 섬유는 예컨대, 약산으로의 처리에 의해 해리될 수 있다. 화학적 가교제의 사용에 의해 생긴 가교는 안정한 공유적으로 가교된 가교 잔기의 존재로부터 검출될 수 있다. 일반적으로, 이는 쉬프-염기 시약(예컨대, 글루타르알데히드)을 사용하여 쉬프-염기 반응 산물을 형성하고 그 후 결합을 아마도리(amadori)-재배열 또는 환원 조건을 통해 안정화함으로써 달성된다. 추가로 콜라겐은 다양한 이관능성 카르보디이미드 시약에 의해 가교될 수 있다. 방사선의 사용에 의해 생긴 가교는 방사선 조사 도중 생성된 자유 라디칼 잔기의 반응에 의해 야기된 콜라겐 원섬유 사이의 안정한 공유 결합의 존재로부터 검출될 수 있다. 생매트릭스 생성물 내의 원섬유는 한편, 임의의 안정한 공유 결합으로 실질적으로 가교되며 화학적 또는 방사선 조사 방식으로 처리되지 않았다. 따라서, 생매트릭스 생성물 내의 원섬유 사이의 임의의 회합은 실질적으로 비-공유이거나 쉽게 원상태로 돌아갈 수 있으며 안정하게 가교되지 않는다. 시아나미드, 글루타르알데히드, 포름알데히드, 아크릴아미드, 카르보디이미데디온, 디이미데이트, 비스아크릴아미드 등과 같은 화학물질이 과거에 콜라겐 원섬유를 화학적으로 가교시키는데 이용되었다. 그러나, 이와 같은 화학물질의 사용은 내장 조직을 콜라겐 포일 생매트릭스 내의 잔류 화학물질과 의도하지 않게 접촉시킴과 관련된 독성 위험성을 야기할 수 있다. 그 때문에 응결 과정은 콜라겐 원섬유를 화학물질 또는 방사선으로 가교시킴과 관련된 가교 화학물질의 독성 위험성 및 더 긴 재흡수 시간을 회피한다.

일부 경우에, 결과로 얻은 건조한, 응결된, 콜라겐 조성물은 2-차원적으로 다-방향인 자연적으로 뒤얽힌 콜라겐 원섬유의 무수한 층을 포함하는 고-분자량 다중-층상 콜라겐 멤브레인을 갖는 콜라겐 포일 생매트릭스를 형성한다. 콜라겐 포일 생매트릭스는 주로 간질성의 유형 I 콜라겐을 함유할 수 있다. 콜라겐 포일 생매트릭스는 실질적으로 세공을 갖지 않을 수 있으며 주로 액밀 및 기밀일 수 있다. 이물 단백질의 부재를 보장하기 위해 생성물 위에서 면역 확산 시험이 수행될 수 있다. 콜라겐 포일 생매트릭스는 에틸렌 옥시드(ETO) 또는 유사한 멸균 가스로 기체-소독되거나 방사선 조사로 소독될 수 있다.

콜라겐 포일 생매트릭스를 사용하는 것의 현저한 이익은 상기 포일과 접촉되는 환자에게 병을 옮길 상당히 낮은 위험성이다. 콜라겐 원섬유가 산(예컨대, 염산, 아세트산 등) 및 수산화 나트륨과 같은 염기로 처리되어 콜라겐 포일을 생산하는 제조 과정은 존재할 수 있는 박테리아, 바이러스 및 프라이온의 감염 수준을 감소시키거나 불활성화시키도록 바람직하게 기능 한다. 생물질의 염산, 수산화나트륨, 에틸렌 옥시드(ETO) 등으로의 처리는 프라이온 및 바이러스를 불활성화시키는 약물 및 생물질 규제 범위 내의 승인된 방법으로 공식적으로 인정되었다. 이와 같은 처리는 일부 규제 하에, 콜라겐 포일을 배치-배치 체제로 시험하기 위한 규정 요건들을 감소시킬 수 있다. 따라서, 제조 과정 중 콜라겐 원섬유의 처리는 생성물 안전성을 강화하고 환자에게 병 전달의 위험성을 감소시킨다.

추가로, 실시예들은 예컨대 손상, 외과 수술 또는 병원체에 기초한 장애와 같은 포유 동물 내의 내장 멤브레인 또는 주위 조직의 결손으로 특징 되는 장애를 치료하기 위한 의약, 즉 의학적으로 허용가능한 물질의 제조에 다층 콜라겐 포일 생매트릭스의 사용을 포함한다.

일부 실시예에 따르면, 콜라겐 포일은 고 분자량 콜라겐 원섬유의 현탁액으로부터 조절된 건조 과정을 통해 생성될 수 있다. 콜라겐 원섬유 현탁액의 단계적인 응결은 물의 증발과 동시적인 pH 상승으로부터 야기된다. 조절된 건조 과정은 외과 의사에 의해 이식될 수 있는 콜라겐 포일의 다중-층상 구조물을 낳는다. 다중-층상 콜라겐 포일 구조물은 흉막 대체물에 및 살아있는 흉막 조직의 재생을 위한 생매트릭스로서 바람직한 많은 성질을 제공한다.

일 실시예에서, 콜라겐 포일을 생산하는 과정은 주로 무세포 성분을 포함하는 콜라겐 원섬유의 콜라겐 포일을 생산하는 모든 세포 성분을 제거한다.

콜라겐 화학에서 확립된 공정을 이용할 시, 콜라겐-함유 조직이 콜라겐 포일의 제조를 위한 출발 물질로서 사용될 수 있다. 일 실시예에서, 아킬레스 힘줄과 같은 힘줄이 출발 물질로서 사용된다. 추가의 실시예에서 말 아킬레스 힘줄이 출발 물질로서 사용된다. 일부 실시예에 따르면, 콜라겐은 제한 없이 양, 원숭이, 소, 말, 쥐, 생쥐, 사람 또는 실험 동물을 포함한 임의의 다양한 동물로부터 얻어질 수 있다. 따라서, 콜라겐은 예컨대 소 공급원, 돼지 공급원, 말 공급원, 양 공급원, 영장류 공급원, 설치류 공급원 또는 인간 공급원으로부터 유도될 수 있다.

일 실시예에서, 출발 물질, 예컨대 말 아킬레스 힘줄을 먼저 갈고 1 N 수산화나트륨으로 1 시간 이상 처리하며 염산으로 중화한다. 콜라겐 출발 물질을 pH 2의 산성 조건에서 처리한다. 사용된 산은 염산, 아세트산 등일 수 있다. 이어서, 출발 물질 내에 존재하는 분자간 가교 결합 및 비-콜라겐성 단백직을 펩신과 효소적으로 분해하여 콜라겐의 현탁액을 형성한다. 그 후 현탁액을 중화한다. 일 실시예에서, 현탁액은 약 pH 6.5 내지 약 pH 8.0으로 중화된다. 다른 실시예에서, 현탁액은 약 pH 6.9 내지 약 pH 7.5로 중화된다. 또 다른 실시예에서, 현탁액은 약 pH 7로 중화된다. 콜라겐 현탁액을 원심분리하고, 상청액을 제거하며 침전물을 약 pH 2~4.5의 아세트산 내에 재현탁시킨다. 그렇게 함으로써 비-콜라겐성 단백질이 콜라겐의 현탁액으로부터 성공적으로 제거된다. 상기한 단계의 반복은 침전물 내에 존재하는 잔류 비-콜라겐성 단백질을 제거하기 위해 필요한 만큼 수행될 수 있다.

말 콜라겐 포일의 제조 과정의 놀라운 결과는 아세트산 내의 콜라겐 현탁액의 조절된 pH 상승이 긴 기간의 시간, 예컨대 24 시간에 걸친 증발에 의한 물의 규정된 제거에 의해 달성될 수 있다는 것이다. pH의 규정된 상승은 말 콜라겐 포일의 다중-층상 구조물을 형성하는 2-차원 방향의 층들로의 다-방향의 뒤얽힌 콜라겐 원섬유의 응결을 야기한다. 일 실시예에서, 과정은 약 20 ℃ 내지 약 55 ℃ 온도의 건조 오븐 내에서, 수증기를 제거하는 장치 및 동시의 아세트산의 수증기 중화와 함께 수행된다. 다른 실시예에서, 과정은 약 30 ℃ 내지 약 45 ℃ 온도의 건조 오븐 내에서 수행된다.

물의 추가적인 손실이 검출되지 않거나 무시 가능할 때, 제조 과정에서 얻은 말 콜라겐 포일은 그것의 건조 형태로 있다고 여겨질 수 있다. 말 콜라겐 포일의 "건조 형태"의 물 함량은 통상적으로 약 2 중량% 내지 약 18 중량% 사이이다. 말 콜라겐 포일의 "건조 형태" 내에 존재하는 상대적으로 높은 잔류 물 함량은 말 콜라겐 포일을 포함하는 콜라겐 분자의 변성을 방지하거나 억누른다.

상기한 과정은, 낮은 용해도를 갖는 성분이 낮은 pH 상승에서 과정 개시시에 침전되기 때문에, 현탁액으로부터 콜라겐 원섬유의 응결의 원인이 된다. 이 기술은 물 증발 및 동시적인 pH 상승 중 콜라겐 원섬유의 응결을 야기한다.

콜라겐 포일 생매트릭스를 생산하기 위해 사용된 과정은 콜라겐 원섬유의 적층된 층을 형성할 수 있다. 콜라겐 원섬유의 각각의 층 사이는 그 안으로 환자의 세포 및 맥관구조가 이동되고 새로운 콜라겐 구조체 및 원-배자 조직을 형성할 수 있는 틈새이다. 콜라겐 포일 생매트릭스의 생기능성 원 콜라겐 섬유 및 비다공성, 층상 구조가 콜라겐 포일 생매트릭스를 가로지른 그리고 그것의 다중 층들 사이에 존재하는 틈새 내의 세포, 맥관구조의 내-성장 및 새로운 콜라겐 구조의 형성을 촉진한다는 것이 일부 실시예의 바람직한 성질이다. 상처 또는 결손에서의 무질서한, 유도되지 않은, 비-조절된 세포 내-성장과 비교해, 방법 실시예에 따른 규제된 내-성장 및 재생은 유착 및 섬유증의 형성을 억제 또는 방지할 수 있다. 따라서, 유착 및 섬유증과 관련된 통증 및 합병증이 회피될 수 있다.

일부 실시예에 따르면, 힘줄 출발 물질의 1 시간 이상의 수산화나트륨 용액 처리로 말 콜라겐 포일 생산을 위한 정제 과정을 시작하고, 그 후 염산 내에서 중화한다. 그 후 힘줄을 분해하기 위해 펩신이 사용된다. 이리하여 생산된 콜로이드성 콜라겐은 원섬유로 응결된다. 그 후 건조 및 기체 멸균이 제곱 센티미터당 5.6 mg의 원 콜라겐 원섬유를 갖는 말 콜라겐 포일을 생산한다. 그 밖의 것은 첨가되지 않고 가교를 위한 인공적인(즉, 화학물질 또는 방사선을 포함하는) 방법은 수행되지 않는다. 면역 확산 시험이 이물 단백질이 존재하지 않음을 보장한다. 말 콜라겐 포일은 말 원 콜라겐 원섬유(주로 간질성 유형 I 콜라겐)로 제조될 수 있다. 물질 1 제곱 센티미터는 세포 성분을 갖지 않는 콜라겐 원섬유 5.6 밀리그람을 함유할 수 있다. 티수콜™ 두오 에스(Tissucol™ Duo S, 박스터)와 같은 섬유소 풀이 이식편을 내장 멤브레인 또는 외측 상처 표면에 부착시키는데 사용될 수 있다. 이 생물학적 이중-성분 풀 키트는 인간 혈장 단백질, 피브리노겐, 응고 인자 XIII, 혈장 피브로넥틴 및 아프로티닌을 함유한 미리-충전된 주사기 및 트롬빈 및 염화칼슘을 함유하는 또 다른 미리-충전된 주사기를 포함한다.

실험 동물

아래의 실시예는 장측 흉막 결손을 회복하기 위해 사용된 장측 흉막 대체물로서 및 장측 흉막 재생을 위한 생매트릭스로서의 적합성에 대해 콜라겐 포일을 평가하기 위한 돼지에서의 실험 결과를 나타낸다. 실험을 위해, 중량 35 kg 정도의 랜드레이스 돼지 다섯 마리가 사용되었다. 동물 실험은 이탈리아 카톨릭 대학(Catholic University)의 윤리 위원회의 책임자에 의한 공식적 승인 이후 수행되었다. 이 종 및 이 중량의 선택은 돼지 허파 유조직과 사람의 것의 유사성 때문이다. 동물의 크기는 보통 인간에게 사용되는 외과적 수단의 사용을 허용하고 인간 대상을 위한 이상적인 동물 모델로 기능 한다. 외과 수술 전, 동물은 "홀리 허트 대학(Holy Heart University, 로마)의 실험 동물 시설"에서 5일의 기간 동안 준비되었다. 중재 날 동물은 아래의 절차를 통해 전신 마취되었다:

마취 :

아트로핀(Atropin) 0.02 mg/kg + 케타민(Ketamine) 15 mg/kg + 디아제판(Diazepan) 0.1 mg/kg의 근육 내 주입을 통한 예비 마취; O₂ 및 이소플루란 2 %의 증기로 마스크로 마취 유도; 기관 내 삽관 및 O₂ 및 이소플루란 1.5 %의 증기로 유지; 브롬화 판큐로니움(0,1 mg/kg e.v.)으로 근이완

외과적 절차:

마취 유도후, 동물을 측와위로 유지시켰고 네 번째 늑간 공간에 측면 개흉을 수행하였다. 도 13에 나타난 바와 같이, 출혈 및 공기 누출을 얻도록 장측 흉막을 훼손시켰다. 그 후 도 14에 나타낸 바와 같이, 콜라겐 생매트릭스 조각(3.5 x 2.5 cm로 측정)을 특정 크기로 절단하여 멸균 0.9 % 식염수 내에 5 분 동안 침지시켰고 훼손된 장측 흉막에 적용했다. 결손을 폐쇄하기 위해, 이식편을 흉막 전체 경계 아래에 전체적으로 밀어 넣었으며 섬유소 시일제로 밀봉하여 제 위치에 고정하고, 수밀 또는 유체-밀봉 봉합을 확실히 하였다. 콜라겐 생매트릭스는 잘게 썰어진 말 아킬레스 힘줄로부터 정제된 말 원 콜라겐 원섬유(5.6 mg/cm²)를 포함하며, 섬유소 시일제는 티수콜™ 두오 에스(박스터)를 포함한다.

임의의 적용 후 공기 누출을 검출하기 위해, 도 15에 도시된 바와 같이, 콜라겐 생매트릭스의 기체 정역학력을 유체압식 시험을 통해 평가하였다. 폐를 식염수 용액으로 덮었고 마취과 의사가 폐를 흡입시켰다. 공기 누출 없이, 동물이 소생되기 전 물-배액을 제거하였다. 공기 유출이 있는 경우, 물-배액은 공기 누출 측정 시스템에 연결되었다. 도 16에 나타낸 바와 같이, 콜라겐 포일은 폐 조직을 덮으며 조직의 세포충실성을 보호하면서 수밀 또는 기밀 봉합을 제공한다.

개흉을 흡수성 실로 층 내에 봉합하였고 피부를 생사로 봉합하였다. 동물을 소생시켰고 실험 동물 시설에서 가능한 공기 누출의 실재를 평가한 7, 15, 21 및 28일 동안 관찰하였다.

수술 후 진통제(근육 내로 케토프로펜(Ketoprophene), 핀돌 10 %, 0,3 ml/10kg/다이) 및 항생제(엔로플록사신(enrofloxacin) 2,5 mg/kg/다이 i. m.) 요법을 7일 동안 수행했다. 배액이 생리학적 기능을 방해하지 않으므로 동물에게 통상적인 혼합 사료를 제공했다. 매일 동물의 건강을 관찰했다. VIII, XVI, XXII 및 XXIX일에, 기관지 삽관을 통해 동물을 다시 전신 마취에 들게 했고, 늑간 공간을 따른 피부 절개를 통해 다섯 번째 늑간 공간에 재개흉을 수행했다. 늑간 근육의 절개 후, 늑골 리트렉터(피노시에토(Finocchietto)) 및 자율고정식 복부 리트렉터를 부위에 위치시켰다. 흉막 공간의 개방 후, 미리 콜라겐 생매트릭스로 처리된 엽 또는 전체 폐를 꺼내었다. 개흉을 바이크릴(Vicryl) 2로 봉합하였고 피부를 생사 1으로 봉합하였다. 절차의 마지막에, 아직 전신 마취 상태인 동물을 타낙스(Tanax) E. V.(3 ml/10 kg)으로 안락사시켰다.

결과:

마취, 외과 수술 및 수술 후 뒤따르는 기간은 둘을 제외한 모든 동물에게서 아무런 문제가 없었다. 동물 중 어떤 것도 염증 또는 악화된 상처 치유의 징후를 보이지 않았다. 자료에 증명되어 있듯이, 외과 수술 후 단기간 또는 오랜 후에도 지속적인 공기 누출은 관찰되지 않았다. 생매트릭스는 임상학적으로 관련있는 유착 또는 섬유증의 징후 없이 매끄럽고 편평한 흉막-같은 내장 멤브레인으로 리모델링되었다.

조직학적 슬라이드: 2주

도 17은 본 발명의 실시예에 따른 섬유소 시일제와 결합된 콜라겐 포일 생매트릭스로 밀봉된 폐 조직의 조직학적 슬라이드를 도시한다. 도 18은 본 발명의 실시예에 따른 높은 세포 친화력을 보이는 섬유소 시일제로 밀봉된 폐 조직의 조직학적 슬라이드를 도시한다. 도 19는 폐 조직을 밀봉하는 콜라겐 생매트릭스의 조직학적 슬라이드(슬라이드의 하부)를 도시하며 콜라겐 생매트릭스 내에 세포가 콜로니화되어 조직 성장을 촉진한다. 도 20은 도 19의 확대도를 제공하며, 콜라겐 생매트릭스의 틈새 내에 모아지고 성장하는 섬유모세포를 도시한다.

조직학적 슬라이드: 4주

도 21은 이식 4주 후 리모델링된 콜라겐 생매트릭스를 도시한다. 콜라겐 생매트릭스의 원 판상 구조는 판상 자가 조직으로 리모델링된다. 내생 콜라겐 합성은 정상적인 장측 흉막과 동일한 평행, 판상 구조를 보이는 신-흉막을 생성한다. 콜라겐 생매트릭스의 평행 구조의 결과로, 내생 합성된 콜라겐층 또한 평행, 판상 구조를 보인다. 리모델링된 생매트릭스/신-흉막과 폐 조직 사이의 경계선에서 어떤 염증 반응도 분명히 나타나지 않는다. A 부분은 폐포 구조를 도시하고, B 부분은 회복 세포(주로 섬유모세포) 및 혈관을 포함하는 판상 콜라겐 구조를 갖는 리모델링된 생매트릭스/신-흉막을 도시한다.

도 22는 폐 표면 위 장측 흉막의 정상적인 조직학적 면을 나타낸다. A 부분은 폐포 구조를 도시하고, B 부분은 세포 섬유모세포 및 혈관을 포함하는 판상 콜라겐 구조를 갖는 장측 흉막을 도시한다.

이들 실시예에 도시된 바와 같이, 세포 내-성장을 규제하고 조직 재생을 조절하기 위해 생기능성 콜라겐 포일 생매트릭스는 장측 흉막 내의 외과적으로 야기된 결손의 연부 위 및 외측 폐 표면의 최상단 위에 위치될 수 있고 그에 따라 재생되는 상처 조직의 벽측 흉막 및 흉벽에의 유착을 방지한다. 생기능성 콜라겐 포일 생매트릭스의 연부는 결손 근처의 장측 흉막의 부분에 고정될 수 있다. 생매트릭스 표면의 구조는 비다공성일 수 있으며 외부 폐 표면과 흉막강 사이에 기계적으로 안정한 일시적인 유체- 및 기밀 장벽을 형성한다. 흉막 섬유모세포는 생매트릭스를 내습하고, 평행한 다중-층상 구조를 따른 규제된 종방향의 내-성장으로 퍼질 수 있으며, 다중-층 구조에 의해 규제되면서, 콜라겐 포일 생매트릭스 내로 성장한다. 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스는 완전히 통합될 수 있다. 흉막 조직 회복 세포는 콜라겐 생매트릭스의 다층상 구조를 침윤할 수 있다.

본 개시 내용에 대해 논의된 모든 특허, 특허 공개, 특허 출원, 신문 기사, 책, 기술적 참고 문헌 등은 여기에 모든 목적에 대해 전체로서 참조로 도입된다.

예시의 방법 및 이해의 명료성을 위해 예시적인 실시예가 어느 정도 상세히 기술되었지만, 당업자는 다양한 수정, 개작 및 변형이 채용될 수 있다는 것을 인식할 것이다. 따라서, 본 발명의 범위는 청구범위에 의해서만 제한되어야 한다.

Claims

결손에 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 틈새 내에서 세포 성장을 규제하는 생기능성 비다공성 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 투여하는 단계를 포함하는 내장 또는 벽측 멤브레인 결손으로 특징되는 환자의 장애 치료 방법.
제1항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 내장 또는 벽측 결손과 인접한 조직 사이에 실질적으로 액밀 및 기밀인 층을 형성하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 투여하는 단계가 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 내장 또는 벽측 결손에 섬유소 시일제로 부착, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 내장 또는 벽측 결손에 외과용 시일제로 부착, 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 내장 또는 벽측 결손에 외과용 봉합사로 부착, 압입 기술 이용 및 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스와 내장 또는 벽측 결손 사이의 자연 유착 이용으로 구성되는 군에서 선택된 1 이상의 방법을 포함하는 방법.
제3항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 섬유소 시일제를 사용하여 환자의 내장 또는 벽측 결손에 부착되는 방법.
제1항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질과 결합되는 방법.
제1항에 있어서, 상기 생매트릭스가 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 틈새 내의 세포 성장 이후 인접한 조직과의 유착을 촉진하지 않는 방법.
제1항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 외측 표면 위의 세포 성장을 규제하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 항생제, 보존제, 성장인자 및 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 연성 및 탄성에 도움이 되는 첨가제로 구성되는 군에서 선택된 부형제를 포함하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 소 공급원, 돼지 공급원, 말 공급원, 양 공급원, 영장류 공급원, 설치류 공급원 및 인간 공급원으로 구성되는 군에서 선택된 공급원으로부터 유도된 콜라겐을 포함하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 힘줄 조직으로부터 유도된 콜라겐을 포함하는 방법.
내장 또는 벽측 멤브레인 내의 결손을 화학물질 또는 방사선으로 가교되지 않은 콜라겐 원섬유의 다중 층의 비-자연 발생 생매트릭스(실질적으로 비다공성)를 포함하는 콜라겐 포일과 접촉시키는 것을 포함하는 포유동물의 내장 또는 벽측 멤브레인의 재생 방법.
제11항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 내장 또는 벽측 멤브레인과 인접한 조직 사이에 실질적으로 액밀 및 기밀인 층을 형성하는 방법.
제11항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 섬유소 시일제를 사용하여 환자의 내장 또는 벽측 결손에 부착되는 방법.
제11항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질과 결합되는 방법.
제11항에 있어서, 상기 생매트릭스가 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스의 틈새 내의 세포 성장 이후 인접한 조직과의 유착을 촉진하지 않는 방법.
조직을 비다공성 미시적 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스와 접촉시키는 것을 포함하는, 포유동물의 조직 표면 위에 외과 수술 후 또는 외상 후 유착 및 섬유증 형성을 방지하기 위한 내장 또는 벽측 멤브레인의 규제된 세포 내성장 및 조절된 조직 재생을 위한 방법.
제16항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 내장 또는 벽측 멤브레인 결손과 인접한 조직 사이에 실질적으로 액밀 및 기밀인 층을 형성하는 방법.
제16항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 섬유소 시일제를 사용하여 환자의 내장 또는 벽측 멤브레인 결손에 부착되는 방법.
제16항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질과 결합되는 방법.
제16항에 있어서, 상기 생매트릭스가 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 틈새 내의 세포 성장 이후 인접한 조직과의 유착을 촉진하지 않는 방법.
조성물이 미시적 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스를 포함하고 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 생매트릭스의 콜라겐 층들 사이의 틈새 내의 세포 성장을 규제하는, 포유동물의 내장 또는 벽측 결손의 회복을 위한 약제 제조에서의 조성물의 용도.
제21항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 장기 표면과 인접한 공동 또는 조직 사이에 실질적으로 액밀 및 기밀인 층을 형성하는 용도.
제21항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 섬유소 시일제를 사용하여 환자의 내장 또는 벽측 멤브레인에 부착되는 용도.
제21항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 물질과 결합되는 용도.
제21항에 있어서, 상기 생매트릭스가 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스 틈새 내의 세포 성장 이후 인접한 조직과의 유착을 촉진하지 않는 용도.
제21항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 매끄러우며 실질적으로 비다공성인 용도.
제21항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 매끄러우며 비다공성인 용도.
제21항에 있어서, 상기 다층상 콜라겐 포일 생매트릭스가 자연 조직으로 재흡수 및 리모델링되는 용도.
제21항에 있어서, 상기 조성물이 키트 형태로 이용가능한 용도.
내장 또는 벽측 조직의 절제 후 후-수술적으로 적용되어 조직 누출 또는 공기 누출을 방지하는, 내장 또는 벽측 조직에서의 수술 후 누출 억제에 사용하기 위한 콜라겐 생매트릭스.
제30항에 있어서, 상기 콜라겐 생매트릭스가 섬유모세포 및 다른 조직 재생 세포를 모으는 콜라겐 생매트릭스.
제30항에 있어서, 상기 콜라겐 생매트릭스가 콜라겐 층들 사이에 틈새가 있어 층들 중간에서 세포 성장을 허용하는 콜라겐 생매트릭스를 포함하는 콜라겐 생매트릭스.
제30항에 있어서, 상기 콜라겐 생매트릭스가 섬유소 시일제와 결합되어 적용되는 콜라겐 생매트릭스.
제33항에 있어서, 상기 섬유소 시일제와 결합된 콜라겐 생매트릭스가 폐 외과 수술 이후 28일까지 공기 누출을 방지하는 콜라겐 생매트릭스.
제33항에 있어서, 상기 섬유소 시일제가 섬유소 시일제 위에 또는 섬유소 시일제와 결합되어 적용된 콜라겐 생매트릭스와 함께 결손에 적용되는 콜라겐 생매트릭스.
제33항에 있어서, 상기 콜라겐 생매트릭스로 덮인 조직의 영역이 섬유소 시일제로 덮인 조직의 영역보다 더 빠르게 재생되는 콜라겐 생매트릭스.