JP2003510101A

JP2003510101A - 硬膜又は髄膜組織成長促進用コラーゲン含有製品

Info

Publication number: JP2003510101A
Application number: JP2000511519A
Authority: JP
Inventors: ナロタム，プラディープ・ケイ; ヴァン・デレン，ジェームズ; オフィー，ロバート・ピー; マッキニー，ジョージ・ダブリュー，ザ・サード; アーチボールド，サイモン・ジェイ; オグラディー，ジュディス
Original assignee: インテグラ・ライフサイエンスィーズ・コーポレーション
Priority date: 1997-09-16
Filing date: 1998-09-09
Publication date: 2003-03-18
Also published as: AU9228598A; EP1017415A1; ES2251782T3; DE69831964T2; CA2303317C; EP1017415B1; ATE306935T1; WO1999013902A1; CA2303317A1; DE69831964D1; AU743039B2

Abstract

(57)【要約】生理的適合性があり活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まないように処理及び／又は調製されたコラーゲンを含む代用硬膜を提供する。代用硬膜の適切な形態は、スポンジ、フィルム、不織マトリックス、フェルト又は前述の形態の少なくとも２種類の組合せを含む。代用硬膜の製造法及び髄膜組織成長促進法も提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】発明の属する技術分野本発明は損傷組織の修復に関し、更に詳しくは損傷硬膜組織を治癒するための
非感染性コラーゲンの使用に関する。発明の背景ヒトの脳及び脊髄は髄膜で被われているが、髄膜の完全性は中枢神経系の働き
に不可欠である。ヒトの髄膜の完全性が故意又は偶然に傷つけられた場合、髄膜
を修復できなければ重大な結果を招くことになりかねない。

【０００２】髄膜は、三つの重なり合う組織層を含む。すなわち、外側から内側の順に、硬
膜、くも膜及び軟膜である。損傷髄膜の修復は、主に、損傷硬膜上に移植して損
傷組織を置換及び／又は再生するように設計された移植可能及び／又は吸収可能
な構造体（代用硬膜として知られる）に向けられてきた。研究者らは、代用硬膜
として各種の物質について実験を重ねているが、安全、有効、且つ大量流通可能
な代用硬膜を見出していない。

【０００３】体の別の部分から取った組織の自己移植片、例えば大腿筋膜及び心膜は代用硬
膜として有効であり得る。しかしながら、自己組織は得るのが比較的困難である
上、患者にとっては第二の手術のための追加の費用とリスクを要求されることに
なる。自明のことながら、このような組織が大量流通されることはあり得ない。

【０００４】死体硬膜も代用硬膜として使用されている。自己組織と同様に死体組織も入手
が困難であるため、大量流通され得ない。一人のドナーからは、わずか４〜５個
の移植可能単位が用意できるだけである上、文化的偏見からドナーを容易に得る
ことも難しい。

【０００５】さらに重要なことには、死体の代用硬膜は、プリオン感染の伝播に関与してき
た。そのような代用硬膜に関する米国食品医薬品局（ＦＤＡ）の１９９７年１０
月６日の会議の結果、より厳しい処理規制が要求され、また、クロイツフェルト
・ヤコブ病（ＣＪＤ）のような感染伝播を予防するための適切な事前の安全対策
が採用されなければ、そのような代用硬膜は使用を禁止する旨の警告がなされた
。他の国の規制当局、例えば日本の厚生省は、脳の手術における死体硬膜の使用
を禁じることにより、さらに進んだ規制を実施している。さらに、世界保健機関
（ＷＨＯ）は、ＣＪＤ伝播の危険性のために、脳手術における死体硬膜の使用の
禁止を奨励している。

【０００６】金、銀、白金、ニッケル、スチール又はゼラチンを含む代用硬膜が研究されて
きたが、これらは様々な理由により受容できないことがわかった。当該理由には
、高剛性、取込み不良、線維形成、感染に対する低抵抗、過度の異物反応、又は
再生過程などが含まれる。例えば、添付の文献目録に収載の文献参照。

【０００７】多くの研究で、代用硬膜としてヒト以外の組織を用いる異種移植片の安全性と
有効性についての評価がなされてきた。ヒト以外の組織は、ヒト組織よりも獲得
が容易で大量流通されるが、ヒトの代用硬膜のように理想的には働かない。

【０００８】無傷のウシ心膜組織の移植片は、現在米国におけるおそらく最も一般的な代用
硬膜であるが、狂牛病（ウシ海綿状脳症、ＢＳＥ）を伝播し得る。無傷組織は過
度の線維形成及び被包形成を起こすことがあり、硬膜下血腫の形成のような出血
性合併症や死をも発生させる可能性がある。ブタの生体膜を用いた異種移植は、
動物実験で感染が発生した場合、重度の癒着を起こすことがわかっており、ある
種のコラーゲンラミネート又はコラーゲンフィルムを用いた異種移植は、線維形
成、新膜形成及び髄膜脳癒着を含む重度の炎症性反応を起こすことがわかってい
る。Ｂａｎｇ−Ｚｏｎｇら、“硬膜欠陥修復用ブタ生体膜の研究及び臨床応用(S
tudy and clinical application of a porcine biomembrane for the repair of
dural defects)”、６９Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．７０７（１９８８）；Ｋ
ｌｉｎｅ、“吸収可能コラーゲンを用いた硬膜置換(Dural replacement with re
sorbable collagen)”、９１Ａｒｃｈ．Ｓｕｒｇ．９２４（１９６５）；Ｊａ
ｎｎｅｔｔａら、“代用硬膜としてのホルムアルデヒド処理した再生コラーゲン
フィルム及びフィルムラミネート(Formaldehyde-treated, regenerated collage
n film and film-laminate as a substitute for dura mater) ”、１６Ｓｕ
ｒｇ．Ｆｏｒｕｍ４３５（１９６５）；及び、Ｌｅｅら、“代用硬膜としての
シリコーン被覆ダクロン及びコラーゲンファブリック−フィルムラミネートの実
験的評価(Experimental evaluation of silicone-coated Dacron and collagen
fabric-film laminate as dural substitutes)”、２７Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．
５５８（１９６７）参照。

【０００９】癒着を生じない生理的適合性のある代用硬膜は、反復した外科的処置が必要な
場合、特に重要である。例えば、脳がんの処置において、がんは再発する可能性
があり、再発がんに到達するために硬膜の開閉を繰り返す、及び／又は硬膜のが
ん部分の除去を繰り返すことさえも要求される。患者の転帰は、損傷硬膜組織を
、致命的な癒着を生じない生理的適合性のある代用硬膜で修復することによって
改善され得る。さらに、医師は、癒着発生の可能性が削減されたかどうかが示さ
れれば、外科的介入を積極的に行うであろう。

【００１０】コラーゲンの異種移植片に関するこれまでに報告された問題にもかかわらず、
本発明者らは、代用硬膜としてコラーゲンを対象とした研究を続けてきた。１９
９３年及び１９９５年に、Ｎａｒｏｔａｍら（本発明者の一部を含むグループ）
は、コラーゲンスポンジが代用硬膜として有望であることがわかったと報告した
。Ｎａｒｏｔａｍら、“硬膜移植片としてのコラーゲンスポンジの実験的評価(E
xperimental evaluation of collagen sponge as a dural graft)”、７Ｂｒ
ｉｔｉｓｈＪ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．６３５（１９９３）、及び、Ｎａｒｏｔ
ａｍら、“神経外科における硬膜移植片としてのコラーゲンスポンジの臨床病理
研究(A clinicopathological study of collagen sponge as a dural graft in
neurosurgery)”、８２Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．４０６（１９９５）参照。
これらの文献に開示されたコラーゲンスポンジは代用硬膜として効果的に機能し
たようであるが、なお認識及び解決すべき重要な安全性の問題があった。

【００１１】使用されたコラーゲンスポンジ［すなわちＢｉｃｏｌ（登録商標）］は、ウシ
由来のもので、開創器下の脳表面を一時的に保護する材料としてこれまで使用さ
れていたにもかかわらず、該コラーゲンは、永久的に移植した場合に外因性の感
染を引き起こす可能性を排除するほど十分に汚染除去されていなかった。前記１
９９５年の文献４１０ページ右欄の知見及び教えとは反対に、Ｎａｒｏｔａｍら
の論文に開示されたコラーゲンスポンジは、製造工程で生き残った感染因子（例
えばプリオン及びウイルス）の可能性のために健康への危険有害性があるという
ことは知られていない。重要な化学処理が欠如すると、ウイルス又はプリオンな
どの汚染物質の不活化のための適切な安全域が提供されないため、代用硬膜レシ
ピエントの感染を適切に予防、又は感染の可能性を削減できない。

【００１２】従って、生理的適合性（すなわち、非炎症性、非癒着誘発性など）、代用硬膜
レシピエントへのウイルス及びプリオン伝播を防止する十分な非感染性（すなわ
ち汚染除去など）、柔軟性、各種サイズの入手性、高引張強度、不活性、場合に
より防水シールの形成性、及び場合により縫合性のある、大量流通可能なコラー
ゲンベースの代用硬膜に対する需要がある。

【００１３】本明細書中に引用した先行特許出願を含むすべての参考文献は、参照により全
内容を本発明に取り込まれる。発明の要約本発明は、活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラー
ゲンを調製し、それを用いて多孔性の髄膜組織成長マトリックスを形成すること
を含む方法によって製造される髄膜組織成長マトリックスを提供することにおい
て、少なくとも前述の先行技術の欠陥に取り組んでいる。

【００１４】本発明は、髄膜組織の成長を促進するための方法も提供し、前記方法は、活性
ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラーゲンを調製し、前
記コラーゲンを用いてマトリックスを形成し、前記マトリックスと損傷髄膜組織
とを接触させて髄膜組織の成長を促進することを含む。

【００１５】本発明は、さらに、髄膜組織成長マトリックスの製造法も提供し、前記方法は
、活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラーゲンを調製
し、前記コラーゲンを含むある体積の液状媒体を提供し、前記液状媒体を蒸発さ
せて髄膜組織成長マトリックスを提供することを含む。好適な実施態様の詳細な記述本発明者らは、米国特許第５，０１９，０８７号に従ってアルカリ性／塩処理
を用いて処理したコラーゲンは、患者自身の機能性硬膜の再生をもたらす非常に
効果的な代用硬膜製品であることを見出した。好適なアルカリ性／塩処理は、水
酸化ナトリウム及び硫酸ナトリウムを含む。米国特許第５，０１９，０８７号の
方法は、制御された予測可能な孔径を提供する。

【００１６】さらに、本発明の製品を製造するための方法は、ウイルス及びプリオン汚染の
不活化に最も効果的と認められるステップを利用する。これによって製品には非
常に高水準の安全性が付与されると同時に、炎症性反応も除去される。すなわち
、本発明の製品の製造法は、生理的非適合となることなくウイルス及びプリオン
を実質的に含まない製品を提供する。“ウイルス及びプリオンを実質的に含まな
い”という語句は、製品が感染有効量のウイルス及びプリオンを含まないことを
意味する。更に詳しくは、本発明は、好ましくは、少なくとも９５％の統計的信
頼係数を用いた測定で、ウイルスの少なくとも４対数クリアランス、更に好まし
くはウイルスの少なくとも６対数クリアランス、また更に好ましくはウイルスの
少なくとも８対数クリアランスを達成するのに十分な方法によって処理されたコ
ラーゲンの使用を含む。例えば、処理前のウイルス濃度が１０⁷で、処理後が１
０¹であれば、ウイルスの６対数クリアランスがあったということである。

【００１７】本発明の代用硬膜の製造において、まずコラーゲン分散物を当該技術分野で周
知の方法で調製する。そのような調製法の一つが米国特許第３，１５７，５２４
号中に教示されている。別の適切なコラーゲン調製法は、米国特許第３，５２０
，４０２号中に教示されている。

【００１８】特に、本発明のコラーゲン分散物は、以下の方法によって調製できる。皮膚、腱、靱帯又は骨などの天然Ｉ型コラーゲン源を、まず、機械的に又は手
で、脂肪、筋膜及びその他の外来物質を清掃し、洗浄する。次に、清掃及び洗浄
したコラーゲン含有材料を、一般的にスライス又は細砕（グラインド）によって
粉砕する。

【００１９】次に、材料を断続的に攪拌しながら、フィシン、ペプシンなどのタンパク分解
酵素で酵素処理し、抗原活性の原因となり得る非コラーゲン性不純物を除去し、
またエラスチンを除去することによってコラーゲンを膨潤させる。コラーゲン材
料に添加する酵素の量、及び酵素消化が行われる条件は、使用する特定の酵素に
よって異なる。一般的に、最もよく使用されるフィシンを用いる場合、ｐＨを６
．０〜６．３に調整し、コラーゲン材料各１５０部につき１部のフィシンを用い
て、コラーゲン材料を約３６．５℃〜３７．５℃で約１〜２時間消化する。必要
な時間経過後、酵素は当該技術分野で周知の適切な手段、例えば酸化剤の溶液の
添加などによって不活化される。酵素がフィシンの場合、酸化剤は亜塩素酸ナト
リウムである。

【００２０】次に、酵素処理したコラーゲン含有材料を洗浄し、過剰の酵素及び非コラーゲ
ンタンパク質の不純物を除去する。好ましくは、洗浄は、限外ろ過及び脱イオン
した水を用いて実施し、場合により希過酸化水素水でさらに洗浄する。

【００２１】本発明の好適な実施の態様において、酵素消化されたコラーゲン含有材料は、
次に、約２５℃〜３０℃の温度で約３５〜４８時間、好ましくは約４０時間、ｐ
Ｈ約１３〜１４でさらにアルカリ処理される。アルカリ処理は、５％水酸化ナト
リウム及び２０％硫酸ナトリウムの水溶液中で実施するのが適切である。このア
ルカリ処理により、混入糖タンパク及び脂質が除去される。次に該溶液を硫酸水
溶液などの適切な酸で中和し、徹底的に洗浄する。

【００２２】次に、コラーゲン材料を適切な酸溶液でさらに膨潤させるが、この酸はコラー
ゲンの架橋を何ら起こさない酸である。このような酸は当業者には周知であり、
酢酸、塩酸、乳酸などを含む。どの酸を使用するかにかかわらず、酸コラーゲン
分散物のｐＨは、約２〜３の範囲である。

【００２３】次に、分散コラーゲン混合物をブレンダー又はホモジナイザーのような任意の
従来手段によって均質化し、線維をさらに解離させる。次に、非膨潤、非コラー
ゲン性材料を、当該技術分野で周知の手段、例えば分散物を１００メッシュのス
テンレススチールスクリーンに通すことによってろ過除去する。得られたろ過コ
ラーゲン分散物は、次に本発明の代用硬膜製品の製造に使用できる。

【００２４】あるいは、活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラー
ゲンは、ヒトコラーゲンを容易に獲得可能な形態で合成する目的で繁殖されたト
ランスジェニック動物から得ることもできる。例えば、Ｂｅｒｇによる米国特許
第５，６６７，８３９号参照。トランスジェニック動物は制御された環境中で繁
殖及び維持できるので、不活化しなければならない感染を運ぶのが防止されるた
め、トランスジェニック動物から得られたコラーゲンは生理的に適合性があり、
更なる処理をしなくても活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない（ただし
、追加の安全対策のために更なる処理を実施することもできる）。

【００２５】本発明の製品は、好ましくはコラーゲンスポンジの形態で提供されるマトリッ
クスである。本製品は、不織マトリックス、フェルト又はフィルムの形態でも提
供できる。さらに、本製品は、前述のいずれか２つ以上の形態の複合体の形態、
例えばフィルム／スポンジ又はフィルム／スポンジ／フィルムの形態で提供する
こともできる。

【００２６】本発明によるコラーゲンスポンジは、米国特許第５，０１９，０８７号に開示
されたコラーゲンスポンジの形成法を適用することによって提供できる。スポン
ジは、好ましくは０．１〜１０％の固形分（ｗ：ｗ）、更に好ましくは少なくと
も０．７５％の固形分を有する、該特許に従って調製されたコラーゲン分散物の
凍結乾燥によって製造できる。ある体積の分散物を、適切な（好ましくは非粘着
性）トレイに注入し、適切な形状のスポンジを得る。好ましくは、スポンジは約
２．５ｍｍ〜約５ｍｍ、更に好ましくは３ｍｍの厚さを有する。分散物は、次い
で凍結され、約１〜約４８時間凍結乾燥される。最も好適なサイクルは、米国特
許第５，０１９，０８７号に記載されたものである。

【００２７】分散物の密度と凍結乾燥サイクルによって、スポンジの密度と孔径が決まる。
スポンジ密度は、好ましくは約０．０００１ｍｇ／ｍｍ³〜約０．１２ｍｇ／ｍ
ｍ³、更に好ましくは約０．００９ｍｇ／ｍｍ³である。

【００２８】本発明のスポンジは、好ましくは、成長する髄膜組織をスポンジの中に浸潤さ
せるのに足る大きさと量の孔を有する。孔径は、好ましくは約１０μｍ〜約５０
０μｍ、更に好ましくは約５０μｍ〜約１５０μｍの範囲で、表面の孔は断面（
内部）の孔より小さい。特に好適な実施の態様において、表面の孔は直径が約３
０μｍ〜約１５０μｍの範囲で約７０μｍが最も好適であり、断面の孔は直径が
約５０μｍ〜約３００μｍの範囲で約１５０μｍが最も好適である。

【００２９】本発明によるフィルムは、コラーゲン濃度約０．１〜約１０％固形分（ｗ：ｖ
）を有するコラーゲン分散物と、場合により約０．００５〜０．５％（ｗ：ｗ、
コラーゲン固形分上）の適切な生体適合性可塑剤（例えばグリセリン）をキャス
ティングすることによって提供できる。好ましくは、可塑剤濃度は約０．1％、
コラーゲン濃度は約１％、更に好ましくは０．７５％である。ある体積の分散物
を適切な非粘着性容器に注入し、蒸発させて、約０．０５〜約２．０ｍｍ、好ま
しくは約０．５ｍｍの厚さを有するフィルムを得る。フィルムは、熱又は適切な
化学架橋剤で架橋できる。例えば、タンパク質の複合と架橋の化学(Chemistry o
f Protein Conjugation and Crosslinking)、（Ｗｏｎｇ編、ＣＲＣＰｒｅｓ
ｓ、１９９３年）参照。

【００３０】本発明のスポンジ、フェルト及び不織布の態様と同様、本発明のフィルムも、
好ましくは、成長する髄膜組織をフィルム内に浸潤させるのに足る大きさと量の
孔を有する。

【００３１】本発明による不織マトリックスは、前述のように調製されたコラーゲン分散物
から誘導されたコラーゲン線維のランダムな分布である。コラーゲンベースの不
織マトリックスは、例えば米国特許第４，５７８，０６７号及び第４，０１６，
８７７号に開示されている。

【００３２】コラーゲンベースのフェルトは、例えば米国特許第４，０６６，０８３号に開
示されている。

【００３３】製品は、前述の形態のいずれか二つ以上の組合せの形態でも提供できる。その
ような態様においては、最低一つの十分に多孔性の形態が成長する組織に接近で
きる限り、すべての形態がそれを通り抜ける組織の成長を促進するのに足る多孔
性である必要はない。

【００３４】本発明の製品は、コラーゲンスポンジとコラーゲンフィルムのラミネートの形
態で提供するのが特に好適である。このラミネートは、例えば、生体適合性のあ
る接着剤又はポリマー（コラーゲンを含む）を用いてコラーゲンスポンジをコラ
ーゲンフィルムにラミネートすることによって、スポンジをフィルム上に形成す
ることによって、又はスポンジ上にフィルムを形成することによって形成できる
が、フィルムの高い水不透過性及び縫合性と、スポンジの高多孔性を有しており
、これゆえにそれを通り抜ける硬膜組織の成長が促進される。同様に、サンドイ
ッチ型のラミネートも、対向するコラーゲンフィルムのシートの間にコラーゲン
スポンジを挟むことによって提供できる。

【００３５】ある実施の態様において、フィルムは、それが接合する下のスポンジ面を完全
に正確に模倣した形状を有することができる。別の実施の態様においては、スポ
ンジの接合面は、形状及び／又は大きさが、フィルムの接合面と全く同一に一致
するわけではない。例えば、フィルムを二つの対向するスポンジの間に挟むこと
ができるが、スポンジがフィルムの端に張り出していない場合や（従ってフィル
ムの縁は被覆されないままでいる）、スポンジがフィルムの端に張り出して中間
のフィルムに接合するほか、スポンジ同士も接合する場合もある（従ってフィル
ムはスポンジの中に完全に内包される）。

【００３６】フィルムとスポンジのラミネートは、頭蓋底用の代用硬膜としての使用に特に
適している。それは、頭蓋底領域の欠陥硬膜が受ける高い水圧に耐えるのによく
適応するからである。

【００３７】スポンジ／フィルムラミネートは、コラーゲンフィルムのキャスティング；フ
ィルムの乾燥；乾燥フィルム上へのコラーゲンスラリーのキャスティング；スラ
リー／フィルム組合せの凍結乾燥；及び凍結乾燥したラミネート生成物をホルム
アルデヒド水溶液（好ましくは９．６％のホルムアルデヒド濃度を有する）の蒸
気に約２５℃で約９０分間暴露、次いで約１時間の強制空気換気による架橋；に
よって製造するのが特に好適である。

【００３８】コラーゲンフィルムとスラリーは、乳酸誘導コラーゲン線維からキャスティン
グするのが好ましい。このような線維は、ウイルス及びプリオンを含まないコラ
ーゲン源（例えばアルカリ処理したウシ腱切片）を乳酸水溶液（好ましくは約８
５％）中に分散し、分散物を均質化し、均質化した乳酸分散物をろ過し、ｐＨを
約４．６〜４．９に調整するのに十分な水酸化アンモニウム水溶液（好ましくは
０．３５％）を添加することにより、均質化した乳酸分散物からコラーゲン線維
を析出させる、ことを含む方法によって製造される。

【００３９】乳酸誘導／水酸化アンモニウム析出コラーゲン線維は、原料のウシ腱を機械的
／化学的に分断して製造する線維よりかなり長い。水酸化アンモニウムによる析
出中、コラーゲン線維が巻き直すために長くなるのである。線維が長ければ、最
終製品の強度がより大きくなる。この、特に好適な方法によって製造された本発
明の製品の強度の高さは、架橋を必要とせずとも防水性及び縫合性を有するほど
十分強いと思われるので、所望の生体吸収速度に基づいて架橋度を選択すること
が可能となる。

【００４０】当該製品は、コラーゲンが最も好適ではあるが、コラーゲン以外にも生体適合
性及び／又は生体吸収性材料を含むことができる。例えば、ある実施の態様にお
いては、コラーゲンマトリックスを、約７５，０００、更に好ましくは約１００
，０００の分子量を有する５０：５０のｄｌラクチド：グリコリドコポリマーの
ような非コラーゲンフィルムにラミネートするのが好都合である。追加の適切な
ポリマーは、例えば生体適合性及び／又は生体吸収性のラクチド類、グリコリド
類、それらのコポリマー類、ポリカプロラクトン類、ポリエチレンカーボネート
、チロシンポリカーボネート類、チロシンポリ酸類、及びポリ無水物類などであ
る。ポリマーの分子量は好ましくは約５０００〜約５００，０００である。

【００４１】製品には、好ましくは有効量の髄膜組織成長因子及び／又は生物活性ペプチド
が含まれる。それらは、例えば、ＲＧＤ含有ペプチド類、デコリン(decorin)、
ラミニン(laminin)、メロシン(merosin)、コンドロイチン硫酸、デルマチン硫酸
、ヘパラン硫酸、ケラチン硫酸、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）、フィ
ブロネクチン(fibronectin)及びその他のインテグリンリガンド(integrin ligan
ds)、エンタクチン(entactin)及びテネイシン(tenascin)である。ある実施の態
様において、このような添加剤の有効量は約１μｇ／ｍｇコラーゲンである。

【００４２】当該製品は、非感染性及び生理的適合性であることのほかに、好ましくは非抗
原性である。

【００４３】当該製品は、手術時のような髄膜組織の意図的損傷、及び頭部外傷事故の結果
として発生しうる髄膜組織の間接的損傷の修復に適切である。

【００４４】脳手術後、本発明の製品は、手術による除去の結果残された空間を塞ぐために
挿入される。特に硬膜切開を伴う開頭術又は椎弓切除術後の髄膜修復に関し、本
発明の製品は、手術によって生じた脳硬膜又は脊髄硬膜の欠陥部分と接触させて
移植するだけでよい。損傷髄膜組織及び隣接する未損傷組織を当該製品と単に接
触させるのが好適であり得るが（特に製品が代用脳硬膜として使用される場合）
、製品を損傷組織及び隣接の未損傷組織に機械的に結合（例えば縫合）及び／又
は化学的に結合（例えばフィブリン膠剤）することも可能である。

【００４５】当該製品は、損傷髄膜組織に隣接する未損傷部分の髄膜組織の一部までを覆う
ことによって、好ましくはこれらの未損傷組織を接続する。損傷組織は、例えば
引き裂き、切開、切除又は断裂されたものであり得、例えばヒトの脊髄硬膜又は
ヒトの脳硬膜に存在しうる。製品が患者に移植された状態にある間に、製品内で
再生髄膜組織が成長する。すなわち、製品は、修復組織成長のような組織成長の
ためのマトリックス又は足場として働く。

【００４６】当該製品は、移植後約３ヶ月以内に実質的に吸収される。本発明の製品は、硬膜の修復に特に適しているが、他の状況における組織成長
及び／又は創傷治癒の促進にも適する。例えば、当該製品は、縫合を補助する生
体吸収性外科用綿撒糸、縫合可能な止血デバイス、ヘルニアパッチ、心膜パッチ
などとしての使用に適する。

【００４７】当該製品において、コラーゲンは、少なくとも純度が約８０％で、すべてのプ
リオン及びウイルス汚染が実質的になく、０．０３ｅｕ／ｇｍ未満のエンドトキ
シンと、５％以下の脂肪含有量と、少なくとも１０％のヒドロキシプロリン含有
量と、５％以下の灰含有量とを有する。現時点ではウシ真皮又はウシ腱のコラー
ゲンから製品を誘導するのが好適であるが、コラーゲンは、他の組織及びトラン
スジェニック動物を含む他の動物などの別源から得ることも可能である。

【００４８】本発明を以下の実施例についてより詳細に説明するが、本発明がそれらに制限
されるものではないことは言うまでもない。実施例１：防水シールを提供できる縫合可能な硬膜再生マトリックスの製造アルカリ処理したウシ腱切片を、前述及び米国特許第５，０１９，０８７号の
方法に従って製造した。次に、０．７５ｗｔ％のアルカリ処理したウシ腱切片を
含む１２５０ｍｌの水性分散物を調製した。７．５ｍｌの８５％（ＡＲ級、ｖ／
ｖ）乳酸を、連続攪拌しながら該分散物にゆっくり添加した。

【００４９】次に、該分散物を室温で１時間放置した。この間、スチール棒で２０秒ずつ３
回、すなわち１５分後、３０分後及び４５分後に攪拌した。

【００５０】次に、該分散物を、全速運転のＳｉｌｖｅｒｓｏｎＭｏｄｅｌＬ４Ｒ（Ｔ
ｈｏｍａｓＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＵＳＡ）を用いて、９．５ｍｍの円（砕解
ヘッド）を用いて３０秒間、２．２５ｍｍの円（高剪断ヘッド）で３０秒間、及
び１．５ｍｍの円（乳化ヘッド）で２０秒間均質化した。

【００５１】次に、分散物を、順に１００メッシュのステンレススチールフィルタ、次いで
２００メッシュのステンレススチールフィルタに通して真空ろ過した。目に見え
る気泡がなくなるまで（約３０分間）ろ液を脱気し、乳酸分散物を得た。

【００５２】最終ｐＨが約４．６〜４．９になるまで、０．３５％（ＡＲ級、ｖ／ｖ）の水
酸化アンモニウムを分散物に０．５〜１ｍｌの量ゆっくり添加することにより、
乳酸分散物からコラーゲン線維を析出させた。

【００５３】次に、６００ｇの分散物（０．７６％）を２０ｃｍ×１０ｃｍのスチール製ト
レイに流し込み、室温で５日間空気乾燥した。２５ｍｇ／ｃｍ³の密度を有する
０．２５ｍｍ厚のフィルムが得られた。再水和後、この不透明の柔軟性フィルム
は、架橋されていないにもかかわらず、４００ｇを超える引っ張り強さに対し、
４１０クロニックガット(chronic gut)の縫合材を持ちこたえることができた。実施例２：防水シールを提供できる縫合可能な硬膜再生マトリックスの製造５０：５０のｄｌラクチド：グリコリドコポリマー、ＭＷ＝７５，０００（Ｓ
ｉｇｍａ）の酢酸エチル中１０％溶液（ｗ／ｗ）を製造した。まず、９０ｇ（±
０．５ｇ）の乾燥酢酸エチル（Ａｌｄｒｉｃｈ）を、磁気攪拌棒を備えた適切な
ガラスビーカーに量り取った。次に、ビーカーを磁気攪拌器／ホットプレートの
上に載せて緩やかに攪拌した。温度を約３０〜３５℃に上げた。次に１０ｇ（±
０．１ｇ）のラクチド：グリコリドポリマーを該酢酸エチルにゆっくり添加して
ポリマー溶液を得た。次に該溶液を室温に冷却させた。

【００５４】室温に冷却後、５０ｇのポリマー溶液を３．５”×３．５”テフロン被覆トレ
イに注入した。溶媒をフラッシュ蒸発させ、得られたフィルムを室温で一晩乾燥
させた。残りのポリマー溶液は次のステップに使用するためにカバーをして保存
した。

【００５５】フィルムを室温で一晩乾燥させた後、トレイから取り出して大きな平面状テフ
ロン被覆トレイの上においた。キャストフィルムの空気側の面に、粘着面を作る
のに十分な量のポリマー溶液を塗布した。ポリマー溶液の塗布は、ペンキ用刷毛
を用いるとうまくいく。次に、本発明による３．５”×３．５”スポンジを用意
し、直ちにポリマーフィルムの粘着面に置いた。緩やかな圧をかけて、コラーゲ
ンスポンジとコポリマーフィルム間の完全な結合を確実にした。

【００５６】約５分後、積層構造体を真空チェンバに入れ、少なくとも５０μｍの真空に２
４時間置き、最後の微量溶媒をすべて除去した。

【００５７】得られた積層構造体は、柔らかくしなやかな材料で、標準外科技術を用いて縫
合可能である。実施例３：縫合可能な二元密度(dual density)の硬膜再生テンプレートの製造ｐＨを６．５〜７．５に調整し、前処理して本質的にすべてのウイルス及びプ
リオン汚染を除去又は不活化した脱イオン水中３％コラーゲン分散物１０ｇを３
．５”×３．５”ポリカーボネートトレイに注入し、貯蔵温度≦３５℃の凍結乾
燥器中で凍結固体にした。コラーゲンを凍結固体にした後、２０ｇの第二のコラ
ーゲン分散物（０．８％、ｐＨ６．５〜７．５）を第一の分散物上に注ぎ、すぐ
に凍結乾燥器に戻した。コラーゲン分散物のトレイを−３５℃で４時間凍結した
後、真空のスイッチを入れて該材料を凍結乾燥した。得られたスポンジを、１１
０℃で４８時間、少なくとも５０ミクロンの全真空で脱水熱的に架橋した。架橋
スポンジは優れた物理的性質を有し、縫合可能であったため、当該スポンジは優
れた硬膜移植片の候補となった。実施例４：二元密度の積層硬膜移植片の製造実施例２の二元密度のマトリックスを、実施例１に記載のようにラクチド：グ
リコリドフィルムにラミネートした。得られたマトリックスは、優れた物理的性
質を有し、標準外科技術を用いて縫合可能で、防水性のバリアを提供した。実施例５：防水シールを提供する縫合可能な硬膜再生マトリックスの製造プリオン及びウイルスを不活化したコラーゲンフィルムを、可塑剤として０．
１〜０．２％のグリセリンを含有する水性分散物（０．８５％固形分）からキャ
スティングした。３０ｇの該分散物を３．５”×３．５”のトレイに注入し、水
分を蒸発させた。得られたフィルムを、１００℃で４８時間、少なくとも５０ミ
クロンの真空下で架橋させた。架橋フィルムをキャスティング用トレイに戻し、
脱イオン水をトレイに加えてフィルムを水に浸した。約１分後、過剰の水を流し
、次いで３０ｇの同じプリオン及びウイルス不活化コラーゲン分散物をフィルム
の上に注いだ。次にこの複合体を凍結し、凍結乾燥させた。得られたスポンジ／
フィルム複合体を、次にホルムアルデヒドで架橋させた。当該複合体は縫合可能
であり、移植の際に防水シールを提供する。実施例６：防水シールを提供するサンドイッチ型の硬膜再生マトリックスの製造フィルムを前述のように調製する。ただし、この場合、１５ｇのスラリーをま
ず３．５”×３．５”キャスティング用トレイに注入し、凍結した。次に、フィ
ルムを前述のように水に浸し、凍結コラーゲン分散物上に置いた。最後に、１５
ｇのコラーゲン分散物をフィルムの上に注ぎ、この新規のサンドイッチ型複合体
を凍結乾燥し、ホルムアルデヒドで架橋させた。

【００５８】実施例４及び５では、コラーゲンフィルムは、複合体を作成する前に熱で架橋
させた。架橋していないフィルムを使用し、調製の最後に最終のホルムアルデヒ
ド処理を利用して複合体全体を架橋することが可能である。

【００５９】さらに、前述のすべての複合体（又はラミネート）の実施例では、フィルムの
長さと幅は、スポンジの長さと幅に正確に合致する。フィルムがスポンジより大
きい複合体を作成することも可能である。両面にスポンジを有するフィルムの場
合、対向するスポンジが出会ってスポンジを取り囲む縁を形成することができる
。これにより、島型の複合体が提供される。実施例７：脳がん処置における硬膜修復診断画像によれば、以前乳がん手術を受けた４０歳女性の小脳左半球の後頭蓋
窩に増大した病変と、ほかに左前頭葉に２個の小沈着物が認められた。さらに、
後頭蓋窩の病変は水腫を生じ始めており、第四脳室を塞いで水頭及び頭蓋内圧の
上昇を起こしている可能性があった。

【００６０】脳転移の切除のため、全身麻酔下で後頭蓋窩の頭蓋骨切除術を行った。正中切
開を実施し、次いで後首筋を切開して後頭下の骨領域を露出した。切開はＣ２ま
で実施し、Ｃ１弓と遠位後頭蓋窩を確認した。左後頭下領域に穿頭孔を作った。
この後、頭蓋骨切除術を扁桃洞領域まで実施した。次に硬膜を開き、転移沈着物
を露出して切除した。切除腔は腫瘍の取り残しがないか点検の後、止血のために
過酸化水素スポンジを詰めた。次に、切除腔をＳｕｒｇｉｃｅｌで裏打ちした。
次に、硬膜の縁の止血が必要なところは凝固し、硬膜の修復を促進するために、
本発明によるスポンジで硬膜の創傷を覆った。Ｈｅｍｏｖａｃドレーンを挿入し
、筋肉及び皮膚をステープルで閉じ、Ｂａｃｉｔｒａｃｉｎ軟膏とＭｅｐｏｒｅ
包帯を創に適用した。患者は、安定な状態で回復室に移された。実施例８：動脈瘤の処置における硬膜修復前交通動脈瘤破裂による動脈瘤性くも膜下出血を起こした患者をプテリオン開
頭術によって処置した。側頭筋を頭皮弁と共に下方に反転させ、ドリルを用いて
プテリオンの上に遊離の骨弁を作った。この後、蝶形骨隆起の高さを下げてさら
に到達しやすくした。骨減圧の実施後、硬膜を切開した。動脈瘤を癒着から切り
離し、その後クリッピングに成功した。次に、この一時的クリップを除去し、止
血を達成した。大脳基底槽を徹底的に洗浄した。パパベリン(Papaverine)を染み
込ませたゲルフォームを一時的に血管に貼付し、次いで除去した。止血が達成さ
れた後、損傷硬膜と隣接する未損傷硬膜を本発明のスポンジで覆うことにより硬
膜を再建した。この後、ナイロンタイを用いて骨弁を旧位に固定した。Ｈｅｍｏ
ｖａｃドレーンを帽状腱膜下に挿入し、頭皮を二層に閉鎖してクリップで固定し
た。

【００６１】この後、患者は安定な状態で集中治療室に移された。本発明を詳細に、且つ特定の実施例に関して記述してきたが、本発明の精神及
び範囲内で多様な変形が可能であることは当業者には明白であろう。文献目録（一部）１．Ａｄｅｇｂｉｔｅ，Ａ．Ｂ．；Ｐａｉｎｅ，Ｋ．Ｗ．；Ｒｏｚｄｉｌｓｋｙ
，Ｂ．シラスティック代用硬膜周辺の血腫形成における新膜の役割(The role of
neomembranes in formation of hematoma around Silastic dura substitute)
。症例報告。ＪＮｅｕｒｏｓｕｒｇ．１９８３年２月；５８（２）：２９５−
７。２．著者不詳。死体硬膜移植片を受けた患者に発生したクロイツフェルト・ヤコ
ブ病−スペイン、１９８５−１９９２(Creutzfeldt-Jakob disease in patients
who received a cadaveric dura mater graft)。ＭＭＷＲＭｏｒｂＭｏｒ
ｔａｌＷｋｌｙＲｅｐ．１９９３年７月２３日；４２（２８）：５６０−３
。３．著者不詳。ＭＭＷＲからの誘導。最新版：死体硬膜移植片を受けた患者に発
生したクロイツフェルト・ヤコブ病(Creutzfeldt-Jakob disease in a patient
receiving a cadaveric dura mater graft)。ＪＡＭＡ．１９８７年７月１７日
；２５８（３）：３０９−１０。４．著者不詳。ＭＭＷＲからの誘導。死体硬膜移植片を受けた第二の患者に発生
したクロイツフェルト・ヤコブ病(Creutzfeldt-Jakob disease in a second pat
ient who received a cadaveric dura mater graft)。ＪＡＭＡ．１９８９年２
月２４日；２６１（８）：１１１８。５．著者不詳。最新版：死体硬膜移植片を受けた患者に発生したクロイツフェル
ト・ヤコブ病(Creutzfeldt-Jakob disease in a patient receiving a cadaveri
c dura mater graft)。ＭＭＷＲＭｏｒｂＭｏｒｔａｌＷｋｌｙＲｅｐ
．１９８７年６月５日；３６（２１）：３２４−５。６．著者不詳。最新版：死体硬膜移植片を受けた第二の患者に発生したクロイツ
フェルト・ヤコブ病(Creutzfeldt-Jakob disease in a second patient who rec
eived a cadaveric dura mater graft)。ＭＭＷＲＭｏｒｂＭｏｒｔａｌ
ＷｋｌｙＲｅｐ．１９８９年１月２７日；３８（３）：３７−８，４３。７．Ａｎｔｏｉｎｅ，Ｊ．Ｃ．；Ｍｉｃｈｅｌ，Ｄ．；Ｂｅｒｔｈｏｌｏｎ，Ｐ
．；Ｍｏｓｎｉｅｒ，Ｊ．Ｆ．；Ｌａｐｌａｎｃｈｅ，Ｊ．Ｌ．；Ｂｅａｕｄｒ
ｙ，Ｐ．；Ｈａｕｗ，Ｊ．Ｊ．；Ｖｅｙｒｅｔ，Ｃ．鼻咽頭血管線維腫のための
頭蓋外硬膜塞栓形成後のクロイツフェルト・ヤコブ病(Creutzfeldt-Jakob disea
se after extracranial dura mater embolization for a nasopharyngeal angio
fibroma)。Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ．１９９７年５月；４８（５）：１４５１−３。８．Ａｗｗａｄ，Ｅ．Ｅ．；Ｓｍｉｔｈ，Ｋ．Ｒ．Ｊｒ；Ｍａｒｔｉｎ，Ｄ．Ｓ
．；Ｍａｎｅｐａｌｌｉ，Ａ．合成代用硬膜使用に伴う異常出血：ＭＲ所見(Unu
sual hemorrhage with use of synthetic dural substitute: MR findings)。Ｊ
ＣｏｍｐｕｔＡｓｓｉｓｔＴｏｍｏｇｒ．１９９１年７月；１５（４）：
６１８−２０。９．Ｂａｎｅｒｊｅｅ，Ｔ．；Ｍｅａｇｈｅｒ，Ｊ．Ｎ．；Ｈｕｎｔ，Ｗ．Ｅ．
シラスティック代用硬膜使用に伴う異常合併症(Unusual complications with us
e of silastic dural substitute)。ＡｍＳｕｒｇ．１９７４年７月；４０（
７）：４３４−７。１０．Ｂｅｒｒｉｎｇｔｏｎ，Ｎ．Ｒ．シラスティック代用硬膜に伴う急性硬膜
外血腫：症例報告(Acute extradural hematoma associated with silastic dura
l substitute: case report)。ＳｕｒｇＮｅｕｒｏｌ．１９９２年１２月；３
８（６）：４６９−７０。１１．Ｂｒｏｗｎ，Ｐ．；Ｃｅｒｖｅｎａｋｏｖａ，Ｌ．；Ｇｏｌｄｆａｒｂ，
Ｌ．Ｇ．；ＭｃＣｏｍｂｉｅ，Ｗ．Ｒ．；Ｒｕｂｅｎｓｔｅｉｎ，Ｒ．；Ｗｉｌ
ｌ，Ｒ．Ｇ．；Ｐｏｃｃｈｉａｒｉ，Ｍ；Ｍａｒｔｉｎｅｚ−Ｌａｇｅ，Ｊ．Ｆ
．；Ｓｃａｌｉｃｉ，Ｃ．；Ｍａｓｕｌｌｏ，Ｃ．；ら医原性クロイツフェル
ト・ヤコブ病：古代遺伝子と現代医学との間の相互作用の一例(Iatrogenic Creu
tzfeldt-Jakob disease: an example of the interplay between ancient genes
and modern medicine)。Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ．１９９４年２月；４４（２）：
２９１−３。１２．Ｃｌａｖｅｌ，Ｍ．；Ｃｌａｖｅｌ，Ｐ．硬膜移植片によって伝染したク
ロイツフェルト・ヤコブ病(Creutzfeldt-Jakob disease transmitted by dura m
ater graft)。［レビュー］［１０文献］。ＥｕｒＮｅｕｒｏｌ．１９９６年
；３６（４）：２３９−４０。１３．Ｃｏｈｅｎ，Ａ．Ｒ．；Ａｌｅｋｓｉｃ，Ｓ．；Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，Ｊ
．合成代用硬膜に対する炎症性反応(Inflammatory reaction to synthetic dura
l substitute)。症例報告［see comments. Comment in: Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒ
ｇ１９８９年１０月；７１（４）：６２９］Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ１９８
９年４月；７０（４）：６３３−５。１４．Ｄｅｆｅｂｖｒｅ，Ｌ．；Ｄｅｓｔｅｅ，Ａ．；Ｃａｒｏｎ，Ｊ．；Ｒｕ
ｃｈｏｕｘ，Ｍ．Ｍ．；Ｗｕｒｔｚ，Ａ．；Ｒｅｍｙ，Ｊ．プリオン因子の全身
伝播を示唆する死体硬膜を用いた肋間動脈塞栓形成後のクロイツフェルト・ヤコ
ブ病(Creutzfeldt-Jakob disease after an embolization of intercostal arte
ries with cadaveric dura mater suggesting a systemic transmission of the
prion agent)。Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ．１９９７年５月；４８（５）：１４７０
−１。１５．Ｅｓｍｏｎｄｅ，Ｔ．；Ｌｕｅｃｋ，Ｃ．Ｊ．；Ｓｙｍｏｎ，Ｌ．；Ｄｕ
ｃｈｅｎ，Ｌ．Ｗ．；Ｗｉｌｌ，Ｒ．Ｇ．クロイツフェルト・ヤコブ病と凍結乾
燥硬膜移植片：２症例の報告(Creutzfeldt-Jakob disease and lyophilised dur
a mater grafts: report of two cases)。［レビュー］［８文献］。ＪＮｅｕ
ｒｏｌＮｅｕｒｏｓｕｒｇＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ．１９９３年９月；５６（
９）：９９９−１０００。１６．Ｆｉｓｈｅｒ，Ｗ．Ｓ．３ｄ；Ｓｉｘ，Ｅ．Ｇ．代用硬膜由来の頚髄症(C
ervical myelopathy from dural substitute)。Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ．１
９８３年１２月；１３（６）：７１５−７。１７．Ｆｏｎｔａｎａ，Ｒ．；Ｔａｌａｍｏｎｔｉ，Ｇ．；Ｄ’Ａｎｇｅｌｏ，
Ｖ．；Ａｒｅｎａ，Ｏ．；Ｍｏｎｔｅ，Ｖ．；Ｃｏｌｌｉｃｅ，Ｍ．シラスティ
ック代用硬膜の異常合併症としての特発性血腫(Spontaneous haematoma as unus
ual complication of silastic dural substitute)。２症例の報告。Ａｃｔａ
Ｎｅｕｒｏｃｈｉｒ．１１５（１−２（ウィーン）１９９２年）：６４−６。１８．ＧａｒｃｉａＳａｎｔｏｓ，Ｊ．Ｍ．；ＬｏｐｅｚＣｏｒｂａｌａｎ
，Ｊ．Ａ．；Ｍａｒｔｉｎｅｚ−Ｌａｇｅ，Ｊ．Ｆ．；ＳｉｃｉｌｉａＧｕｉ
ｌｌｅｎ，Ｊ．医原性及び散発性クロイツフェルト・ヤコブ病におけるＣＴ及び
ＭＲＩ：画像から読み取れる範囲(CT and MRI in iatrogenic and sporadic Cre
utzfeldt-Jakob disease: as far as imaging perceives)。Ｎｅｕｒｏｒａｄｉ
ｏｌｏｇｙ．１９９６年４月；３８（３）：２２６−３１。１９．Ｇｏｎｄｏ，Ｇ．；Ｎａｋａｙａｍａ，Ｓ．；Ｍｏｃｈｉｍａｔｓｕ，Ｙ
．；Ｎａｋａｊｉｍａ，Ｆ．；Ｈａｓｅｇａｗａ，Ａ．シラスティック代用硬膜
使用１１年後の後頭蓋窩出血：症例報告(Posterior fossa hemorrhage 11 years
after the use of silastic dural substitute: case report)。［レビュー］
［８文献］［日本語］。脳神経外科１９９１年１月；１９（１）：５９−６２。２０．Ｇｕｄｍｕｎｄｓｓｏｎ，Ｇ．；Ｓｏｇａａｒｄ，Ｉ．ビクリル−コラー
ゲン代用硬膜使用に対する合併症(Complications to the use of vicryl-collag
en dural substitute)。ＡｃｔａＮｅｕｒｏｃｈｉｒ．１３２（１−３（ウィ
ーン）１９９５年）：１４５−７。２１．Ｈａｉｎｆｅｌｌｎｅｒ，Ｊ．Ａ．；Ｊｅｌｌｉｎｇｅｒ，Ｋ．；Ｄｉｒ
ｉｎｇｅｒ，Ｈ．；Ｇｕｅｎｔｃｈｅｖ，Ｍ．；Ｋｌｅｉｎｅｒｔ，Ｒ．；Ｐｉ
ｌｚ，Ｐ．；Ｍａｉｅｒ，Ｈ．；Ｂｕｄｋａ，Ｈ．オーストリアにおけるクロイ
ツフェルト・ヤコブ病(Creutzfeldt-Jakob disease in Austria)。［独語］。Ｗ
ｉｅｎＫｌｉｎＷｏｃｈｅｎｓｃｈｒ．１９９６年１２月１３日；１０８（
２３）：７５９−６３。２２．Ｈａｒｖｅｙ，Ｉ．；Ｃｏｙｌｅ，Ｅ．非市販硬膜移植後のクロイツフェ
ルト・ヤコブ病(Creutzfeldt-Jakob disease after non-commercial dura mater
graft)［letter; comment. Comment on: Ｌａｎｃｅｔ１９９２年７月４日；
３４０（８８１０）：２４−７］。Ｌａｎｃｅｔ１９９２年９月５日；３４０
（８８１９）：６１５。２３．Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｍ．Ｈ．；Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｅ．Ｊ．凍結乾燥死体硬
膜移植片がもたらす宿主における有害な免疫応答刺激の可能性(Freeze-dried ca
daveric dural grafts can stimulate a damaging immune response in the hos
t)。ＥｕｒＮｅｕｒｏｌ．１９８１年；２０（６）：４４５−７。２４．Ｌａｎｅ，Ｋ．Ｌ．；Ｂｒｏｗｎ，Ｐ．；Ｈｏｗｅｌｌ，Ｄ．Ｎ．；Ｃｒ
ａｉｎ，Ｂ．Ｊ．；Ｈｕｌｅｔｔｅ，Ｃ．Ｍ．；Ｂｕｒｇｅｒ，Ｐ．Ｃ．；Ｄｅ
Ａｒｍｏｎｄ，Ｓ．Ｊ．移植硬膜片を有する妊婦に発生したクロイツフェルト・
ヤコブ病(Creutzfeldt-Jakob disease in a pregnant woman with an implanted
dura mater graft)。Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｙ．１９９４年４月；３４（４）：
７３７−９；考察７３９−４０。２５．Ｍａｒｔｉｎｅｚ−Ｌａｇｅ，Ｊ．Ｆ．；Ｓｏｌａ，Ｊ．；Ｐｏｚａ，Ｍ
．；Ｅｓｔｅｂａｎ，Ｊ．Ａ．小児クロイツフェルト・ヤコブ病：硬膜移植片に
よる伝播の可能性(Pediatric Creutzfeldt-Jakob disease: probable transmiss
ion by a dural graft)。［レビュー］［２２文献］。ＣｈｉｌｄＮｅｒｖ
Ｓｙｓｔ．１９９３年７月；９（４）：２３９−４２。２６．Ｍａｒｘ，Ｒ．Ｅ．；Ｃａｒｌｓｏｎ，Ｅ．Ｒ．同種硬膜由来のクロイツ
フェルト・ヤコブ病：リスクと安全性の検討(Creutzfeldt-Jakob disease from
allogeneic dura:a review of risks and safety)。［レビュー］［１１文献］
。ＪＯｒａｌＭａｘｉｌｌｏｆａｃＳｕｒｇ．１９９１年３月；４９（３
）：２７２−４；考察２７４−５。２７．Ｍｉｓｒａ，Ｂ．Ｋ．；Ｓｈａｗ，Ｊ．Ｆ．代用硬膜に付随する脳外血腫
(Extracerebral hematoma in association with dural substitute)。Ｎｅｕｒ
ｏｓｕｒｇｅｒｙ．１９８７年９月；２１（３）：３９９−４００。２８．Ｍｉｙａｍｏｔｏ，Ｓ．；Ｋｕｄｏ，Ｔ．；Ｓｕｚｕｋｉ，Ｓ．；Ｉｗａ
ｂｕｃｈｉ，Ｔ．シラスティック代用硬膜直下の術後血腫の形成(Formation of
postoperative hematoma directly under a silastic dural substitute)。［日
本語］。脳神経外科１９８３年９月；１１（９）：９８９−９４。２９．Ｎｅｗｃｏｍｂｅ，Ｒ．Ｌ．クロイツフェルト・ヤコブ病の神経外科及び
医原性伝播(Neurosurgery and iatrogenic transmission of Creutzfeldt-Jakob
disease)。ＭｅｄＪＡｕｓｔ．１９９６年５月２０日；１６４（１０）：
６０３−４。３０．Ｎｇ，Ｔ．Ｈ．；Ｃｈａｎ，Ｋ．Ｈ．；Ｌｅｕｎｇ，Ｓ．Ｙ．；Ｍａｎｎ
，Ｋ．Ｓ．シラスティック代用硬膜の異常合併症：症例報告(An unusual compli
cation of silastic dural substitute: case report)。［レビュー］［１２文
献］。Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ．１９９０年９月；２７（３）：４９１−３。３１．Ｏｈｂａｙａｓｈｉ，Ｎ．；Ｉｎａｇａｗａ，Ｔ．；Ｋａｔｏｈ，Ｙ．；
Ｋｕｍａｎｏ，Ｋ．；Ｎａｇａｓａｋｏ，Ｒ．；Ｈａｄａ，Ｈ．硬膜形成２０年
後のシラスティック代用硬膜の合併症(Complication of silastic dural substi
tute 20 years after dural plasty)。［レビュー］［１３文献］。Ｓｕｒｇ
Ｎｅｕｒｏｌ．１９９４年４月；４１（４）：３３８−４１。３２．Ｏｎｇｋｉｋｏ，Ｃ．Ｍ．Ｊｒ；Ｋｅｌｌｅｒ，Ｊ．Ｔ．；Ｍａｙｆｉｅ
ｌｄ，Ｆ．Ｈ．；Ｄｕｎｓｋｅｒ，Ｓ．Ｂ．代用硬膜としての硬膜フィルムの異
常合併症(An unusual complication of Dura Film as a dural substitute)。２
症例の報告。ＪＮｅｕｒｏｓｕｒｇ．１９８４年５月；６０（５）：１０７６
−９。３３．Ｐｏｃｃｈｉａｒｉ，Ｍ．；Ｍａｓｕｌｌｏ，Ｃ．；Ｓａｌｖａｔｏｒｅ
，Ｍ；Ｇｅｎｕａｒｄｉ，Ｍ．；Ｇａｌｇａｎｉ，Ｓ．非市販硬膜移植後のクロ
イツフェルト・ヤコブ病(Creutzfeldt-Jakob disease after non-commercial du
ra mater graft)［letter; comment. Comment on: Ｌａｎｃｅｔ１９９２年７
月４日；３４０（８８１０）：２４−７］。Ｌａｎｃｅｔ１９９２年９月５日
；３４０（８８１９）：６１４−５。３４．Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ，Ｓ．Ｃ．；Ｍｅｎｅｚｅｓ，Ａ．Ｈ．シラスティッ
ク代用硬膜に付随する出血性合併症：小児及び成人の症例報告及び文献検討(Hem
orrhagic complications in association with silastic dural substitute: pe
diatric and adult case reports with a review of the literature)。［レビ
ュー］［２８文献］。Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ．１９９７年１月；４０（１）
：２０１−５；考察２０５−６。３５．Ｓｉｃｃａｒｄｉ，Ｄ．；Ｖｅｎｔｉｍｉｇｌｉａ，Ａ．合成代用硬膜に
対する線維性−出血性反応(Fibrotic-haemorrhagic reaction to synthetic dur
al substitute)。ＡｃｔａＮｅｕｒｏｃｈｉｒ．１３２（１−３（ウィーン）
１９９５年）：１４８−９。３６．Ｓｉｍｐｓｏｎ，Ｄ．；Ｒｏｂｓｏｎ，Ａ．代用硬膜に付随する反復性く
も膜下出血(Recurrent subarachnoid bleeding in association with dural sub
stitute)。３症例の報告。ＪＮｅｕｒｏｓｕｒｇ．１９８４年２月；６０（２
）：４０８−９。３７．Ｓｐａｚｉａｎｔｅ，Ｒ．；Ｃａｐｐａｂｉａｎｃａ，Ｐ．；ＤｅｌＢ
ａｓｓｏＤｅＣａｒｏ，Ｍ．Ｌ．；ｄｅＤｉｖｉｔｉｉｓ，Ｅ．凍結乾燥
硬膜移植片使用に伴う異常合併症(Unusual complication with use of lyophyli
zed dural graft)。Ｎｅｕｒｏｃｈｉｒｕｒｇｉａ．３１（１（Ｓｔｕｔｔｇ）
１９８８年１月）：３２−４。３８．Ｔａｙｌｏｒ，Ｄ．Ｍ．；ＭｃＣｏｎｎｅｌｌ，Ｉ．硬膜における非従来
的伝播因子：医原性クロイツフェルト・ヤコブ病の意義［レター］(Unconventio
nal transmissible agents in dura mater: significance for iatrogenic Creu
tzfeldt-Jakob disease[letter])。ＮｅｕｒｏｐａｔｈｏｌＡｐｐｌＮｅｕ
ｒｏｂｉｏｌ．１９９６年６月；２２（３）：２５９−６０。３９．Ｔｈａｄａｎｉ，Ｖ．；Ｐｅｎａｒ，Ｐ．Ｌ．；Ｐａｒｔｉｎｇｔｏｎ，
Ｊ．；Ｋａｌｂ，Ｒ．；Ｊａｎｓｓｅｎ，Ｒ．；Ｓｃｈｏｎｂｅｒｇｅｒ，Ｌ．
Ｂ．；Ｒａｂｋｉｎ，Ｃ．Ｓ．；Ｐｒｉｃｈａｒｄ，Ｊ．Ｗ．おそらく死体硬膜
移植片から獲得したクロイツフェルト・ヤコブ病(Creutzfeldt-Jakob disease p
robably acquired from a cadaveric dura mater graft)。症例報告［see comme
nts. Comment in: Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ１９８９年１２月；７１（６）：
９５４−５］。Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．１９８８年１１月；６９（５）：７６
６−９。４０．Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｄ．；Ｔａｙｌｏｒ，Ｗ．；Ｈａｙｗａｒｄ，Ｒ．シ
ラスティック代用硬膜に付随する出血(Haemorrhage associated with silastic
dural substitute)。［レビュー］［１１文献］。ＪＮｅｕｒｏｌＮｅｕｒ
ｏｓｕｒｇＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ．１９９４年５月；５７（５）：６４６−８
。４１．Ｗｅｂｅｒ，Ｔ．；Ｔｕｍａｎｉ，Ｈ．；Ｈｏｌｄｏｒｆｆ，Ｂ．；Ｃｏ
ｌｌｉｎｇｅ，Ｊ．；Ｐａｌｍｅｒ，Ｍ．；Ｋｒｅｔｚｓｃｈｍａｒ，Ｈ．Ａ．
；Ｆｅｌｇｅｎｈａｕｅｒ，Ｋ．硬膜取り扱いによるクロイツフェルト・ヤコブ
病の伝播［レター］(Transmission of Creutzfeldt-Jakob disease by handling
of dura mater[letter])［see comments. Comment in: Ｌａｎｃｅｔ１９９
３年３月６日；３４１（８８４５）：６４１−２］。Ｌａｎｃｅｔ．１９９３
年１月９日；３４１（８８３７）：１２３−４。４２．Ｙａｍａｄａ，Ｓ．；Ａｉｂａ，Ｔ．；Ｅｎｄｏ，Ｙ．；Ｈａｒａ，Ｍ．
；Ｋｉｔａｍｏｔｏ，Ｔ．；Ｔａｔｅｉｓｈｉ，Ｊ．死体硬膜移植片によって伝
播されたクロイツフェルト・ヤコブ病(Creutzfeldt-Jakob disease transmitted
by a cadaveric dura mater graft)。［レビュー］Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｙ．
１９９４年４月；３４（４）：７４０−３；考察７４３−４。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (31)優先権主張番号０９／０７０，６５９ (32)優先日平成10年４月30日(1998．4．30) (33)優先権主張国米国（ＵＳ） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者オフィー，ロバート・ピーアメリカ合衆国ペンシルバニア州19380，ウエスト・チェスター，クローバー・リッジ・ドライブ 700 (72)発明者マッキニー，ジョージ・ダブリュー，ザ・サードアメリカ合衆国マサチューセッツ州02167，チェスナット・ヒル，オールド・オーチャード・ロード 33 (72)発明者アーチボールド，サイモン・ジェイアメリカ合衆国ニュージャージー州08534，ペニングトン，メイプル・レイン 21 (72)発明者オグラディー，ジュディスアメリカ合衆国ニュージャージー州07746，マールボロ，サンドルウッド・ドライブ 51 Ｆターム(参考） 4C081 AB11 AB18 BA12 CC05 CD052 CD062 CD072 CD112 CD131 CD141 CD172 CD27 DA02 DA05 DA06 DB06 DC12 EA02 4C084 AA02 AA03 BA44 CA20 CA25 MA34 MA67 NA06 NA07 NA14 ZA021 ZC752 4C086 AA01 AA02 EA24 MA02 MA04 MA10 MA34 MA67 NA06 NA07 NA14 ZA02 ZC75

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】髄膜組織の成長を促進させるための方法であって、前記方法
は、活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラーゲンを調製
し；前記コラーゲンを用いてマトリックスを形成し、そして前記マトリックスと損傷髄膜組織とを接触させて髄膜組織の成長を促進させる
ことを含む方法。
【請求項２】前記マトリックスが、成長する髄膜組織を前記マトリックス
に浸潤させるのに足る大きさと量の孔を有する平面物体である、請求項１に記載
の方法。
【請求項３】前記孔が、約５０〜約１５０μｍの平均直径を有する、請求
項２に記載の方法。
【請求項４】前記マトリックス表面に隣接した前記孔が直径範囲約３０μ
ｍ〜約１５０μｍの最外部の孔で、前記孔の残りが直径範囲約５０μｍ〜約３０
０μｍの最内部の孔である、請求項２に記載の方法。
【請求項５】前記最外部の孔が直径約７０μｍで、前記最内部の孔が直径
約１５０μｍである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】前記マトリックスがスポンジである、請求項２に記載の方法
。
【請求項７】前記マトリックスがフィルムである、請求項２に記載の方法
。
【請求項８】前記マトリックスが不織布又はフェルトである、請求項２に
記載の方法。
【請求項９】前記マトリックスが架橋している、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】前記コラーゲンがウシを供給源として誘導される、請求項
１に記載の方法。
【請求項１１】前記コラーゲンがウシの真皮から誘導される、請求項１０
に記載の方法。
【請求項１２】前記コラーゲンがウシの腱から誘導される、請求項１０に
記載の方法。
【請求項１３】前記コラーゲンが、前記コラーゲン含有材料をｐＨ約１３
〜約１４にアルカリ化し、混入糖タンパク及び脂質を実質的に除去することを含
む方法によって得られる、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】前記コラーゲンが、天然Ｉ型コラーゲン源から外来物質を清掃し；前記清掃コラーゲン含有材料を洗浄し；前記洗浄コラーゲン含有材料を粉砕し；前記粉砕コラーゲン含有材料を、タンパク分解酵素で消化して、エラスチン及
び抗原活性の原因となり得る非コラーゲン性不純物を実質的に除去し、前記コラ
ーゲンを膨潤させ；前記タンパク分解酵素を不活化し；前記酵素的に消化されたコラーゲン含有材料を洗浄して、過剰の酵素と非コラ
ーゲンタンパク質不純物を実質的に除去し；前記コラーゲン含有材料を、約２５℃〜約３０℃の温度で約３５〜約４８時間
、ｐＨ約１３〜約１４にアルカリ化して混入糖タンパク及び脂質を実質的に除去
し；前記アルカリ化コラーゲン含有材料を酸で中和し；前記中和コラーゲン含有材料を洗浄し；前記洗浄及び中和コラーゲン含有材料を、ｐＨ約２〜約３に酸性化して前記材
料をさらに膨潤させ（前記酸性化には、コラーゲンの実質的架橋を生じさせる酸
を使用しない）；前記酸性化コラーゲン含有材料を均質化し；前記均質化コラーゲン含有材料をろ過して、非膨潤、非コラーゲン材料からコ
ラーゲン線維を分離し；そして前記ろ過コラーゲン線維を前記マトリックスに使用するために回収する；ことを含む方法によって得られる、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】前記タンパク分解酵素がフィシン又はペプシンである、請
求項１４に記載の方法。
【請求項１６】前記消化のステップが、前記コラーゲン含有材料１５０部
当たり約１部のタンパク分解酵素を加え、前記コラーゲン含有材料のｐＨを約６
．０〜約６．３に調整し、前記コラーゲン含有材料を約３６．５℃〜約３７．５
℃で約１〜約２時間消化することを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】前記タンパク分解酵素がフィシンである、請求項１６に記
載の方法。
【請求項１８】前記酵素が、前記酵素的に消化されたコラーゲン含有材料
に酸化剤を加えることによって不活化される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】前記酸化剤が亜塩素酸ナトリウムである、請求項１８に記
載の方法。
【請求項２０】前記方法が、さらに、前記洗浄及び酵素不活化コラーゲン
含有材料を、希過酸化水素水でさらに洗浄することを含む、請求項１４に記載の
方法。
【請求項２１】前記アルカリ化が、約５％の水酸化ナトリウム及び約２０
％の硫酸ナトリウムの水溶液を使用する、請求項１４に記載の方法。
【請求項２２】前記酸性化ステップが、酢酸、塩酸又は乳酸を用いて前記
ｐＨを調整する、請求項１４に記載の方法。
【請求項２３】前記酸性化ステップが乳酸水溶液を用いて前記ｐＨを調整
し、前記方法は、さらに：前記ろ過コラーゲン線維の水性分散物を形成し；水酸化アンモニウムの添加により前記水性分散物からコラーゲン線維を析出さ
せ；そして前記析出コラーゲン線維の分散物をキャスティングして前記マトリックスを形
成する；ことを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項２４】前記コラーゲンが非抗原性である、請求項２に記載の方法
。
【請求項２５】前記マトリックスが、前記損傷髄膜組織に隣接する非損傷
部分の髄膜組織を接続する、請求項２に記載の方法。
【請求項２６】前記損傷髄膜組織がヒトの脊髄硬膜である、請求項２に記
載の方法。
【請求項２７】前記損傷髄膜組織がヒトの脳硬膜である、請求項２に記載
の方法。
【請求項２８】前記マトリックスと接する前記損傷髄膜組織が、外科的に
切除されたがん組織の区画を包囲する推定上の良性組織の縁を規定する、請求項
２に記載の方法。
【請求項２９】前記マトリックスが前記損傷髄膜組織に縫合される、請求
項２に記載の方法。
【請求項３０】前記マトリックスが前記損傷髄膜組織に縫合されない、請
求項２に記載の方法。
【請求項３１】前記マトリックスが患者の体内に移植された状態にある間
に、髄膜組織が前記マトリックス内で成長する、請求項２に記載の方法。
【請求項３２】請求項１の方法で使用する髄膜組織成長マトリックスであ
って、前記髄膜組織成長マトリックスが、活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラーゲンを調製
し；そして前記髄膜組織成長マトリックスを提供するために前記コラーゲンを平面物体に
形成する；ことを含む方法によって製造される、髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３３】有効量の髄膜組織成長因子をさらに含む、請求項３２に記
載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３４】前記髄膜組織成長因子が、ＲＧＤ含有ペプチド、デコリン
、ラミニン、メロシン、コンドロイチン硫酸、デルマチン硫酸、ヘパラン硫酸、
ケラチン硫酸、塩基性線維芽細胞成長因子、フィブロネクチン及びその他のイン
テグリンリガンド、エンタクチン及びテネイシンからなる群から選ばれる、請求
項３３に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３５】前記マトリックスが、成長する髄膜組織を前記マトリック
スに浸潤させるのに足る大きさと量の孔を有する、請求項３３に記載の髄膜組織
成長マトリックス。
【請求項３６】前記孔が、約５０〜約１５０μｍの平均直径を有する、請
求項３５に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３７】前記マトリックス表面に隣接した前記孔が直径範囲約３０
μｍ〜約１５０μｍの最外部の孔で、前記孔の残りが直径範囲約５０μｍ〜約３
００μｍの最内部の孔である、請求項３５に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３８】前記最外部の孔が直径約７０μｍで、前記最内部の孔が直
径約１５０μｍである、請求項３７に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３９】前記処理コラーゲンが、天然Ｉ型コラーゲン源から外来物質を清掃し；前記清掃コラーゲン含有材料を洗浄し；前記洗浄コラーゲン含有材料を粉砕し；前記粉砕コラーゲン含有材料を、タンパク分解酵素で消化して、エラスチン及
び抗原活性の原因となり得る非コラーゲン性不純物を実質的に除去し、前記コラ
ーゲンを膨潤させ；前記タンパク分解酵素を不活化し；前記酵素的に消化されたコラーゲン含有材料を洗浄して、過剰の酵素と非コラ
ーゲンタンパク質不純物を実質的に除去し；前記コラーゲン含有材料を、約２５℃〜約３０℃の温度で約３５〜約４８時間
、ｐＨ約１３〜約１４にアルカリ化して混入糖タンパク及び脂質を実質的に除去
し；前記アルカリ化コラーゲン含有材料を酸で中和し；前記中和コラーゲン含有材料を洗浄し；前記洗浄及び中和コラーゲン含有材料を、ｐＨ約２〜約３に酸性化して前記材
料をさらに膨潤させ（前記酸性化には、コラーゲンの実質的架橋を生じさせる酸
を使用しない）；前記酸性化コラーゲン含有材料を均質化し；前記均質化コラーゲン含有材料をろ過して、非膨潤、非コラーゲン材料からコ
ラーゲン線維を分離し；そして前記ろ過コラーゲン線維を前記マトリックスに使用するために回収する；ことを含む方法によって得られる、請求項３２に記載の髄膜組織成長マトリック
ス。
【請求項４０】前記酸性化ステップが乳酸水溶液を用いて前記ｐＨを調整
し、前記方法は、さらに：前記ろ過コラーゲン線維の水性分散物を形成し；水酸化アンモニウムの添加により前記水性分散物からコラーゲン線維を析出さ
せ；そして前記析出コラーゲン線維の分散物をキャスティングして前記マトリックスを形
成する；ことを含む、請求項３９に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項４１】前記マトリックスがスポンジ、フィルム、不織布又はフェ
ルトである、請求項３２に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項４２】前記マトリックスが架橋している、請求項３２に記載の髄
膜組織成長マトリックス。
【請求項４３】前記コラーゲンがウシを供給源として誘導される、請求項
３２に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項４４】前記コラーゲンがウシの真皮又は腱から誘導される、請求
項４３に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項４５】前記コラーゲンが、ヒトでないトランスジェニック動物に
よって発現されたヒトコラーゲンである、請求項３２に記載の髄膜組織成長マト
リックス。
【請求項４６】請求項１の方法で用いる髄膜組織成長マトリックスであっ
て、前記髄膜組織成長マトリックスは、活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラーゲンを調製
し；前記コラーゲンを移植に適切な多孔性の形態に成形し；そして前記多孔性の形態に、有効量の髄膜組織成長因子を配合して前記髄膜組織成長
マトリックスを提供する；ことを含む方法によって製造される、髄膜組織成長マトリックス。
【請求項４７】前記髄膜組織成長因子が、ＲＧＤ含有ペプチド、デコリン
、ラミニン、メロシン、コンドロイチン硫酸、デルマチン硫酸、ヘパラン硫酸、
ケラチン硫酸、塩基性線維芽細胞成長因子、フィブロネクチン及びその他のイン
テグリンリガンド、エンタクチン及びテネイシンからなる群から選ばれる、請求
項４６に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項４８】前記マトリックスが、成長する髄膜組織を前記マトリック
スに浸潤させるのに足る大きさと量の孔を有する、請求項４６に記載の髄膜組織
成長マトリックス。
【請求項４９】前記孔が、約５０〜約１５０μｍの平均直径を有する、請
求項４６に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項５０】前記マトリックス表面に隣接した前記孔が直径範囲約３０
μｍ〜約１５０μｍの最外部の孔で、前記孔の残りが直径範囲約５０μｍ〜約３
００μｍの最内部の孔である、請求項４６に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項５１】前記最外部の孔が直径約７０μｍで、前記最内部の孔が直
径約１５０μｍである、請求項５０に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項５２】前記マトリックスが平面である、請求項４６に記載の髄膜
組織成長マトリックス。
【請求項５３】前記処理コラーゲンが、天然Ｉ型コラーゲン源から外来物質を清掃し；前記清掃コラーゲン含有材料を洗浄し；前記洗浄コラーゲン含有材料を粉砕し；前記粉砕コラーゲン含有材料を、タンパク分解酵素で消化して、エラスチン及
び抗原活性の原因となり得る非コラーゲン性不純物を実質的に除去し、前記コラ
ーゲンを膨潤させ；前記タンパク分解酵素を不活化し；前記酵素的に消化されたコラーゲン含有材料を洗浄して、過剰の酵素と非コラ
ーゲンタンパク質不純物を実質的に除去し；前記コラーゲン含有材料を、約２５℃〜約３０℃の温度で約３５〜約４８時間
、ｐＨ約１３〜約１４にアルカリ化して混入糖タンパク及び脂質を実質的に除去
し；前記アルカリ化コラーゲン含有材料を酸で中和し；前記中和コラーゲン含有材料を洗浄し；前記洗浄及び中和コラーゲン含有材料を、ｐＨ約２〜約３に酸性化して前記材
料をさらに膨潤させ（前記酸性化には、コラーゲンの実質的架橋を生じさせる酸
を使用しない）；前記酸性化コラーゲン含有材料を均質化し；前記均質化コラーゲン含有材料をろ過して、非膨潤、非コラーゲン材料からコ
ラーゲン線維を分離し；そして前記ろ過コラーゲン線維を前記マトリックスに使用するために回収する；ことを含む方法によって得られる、請求項４６に記載の髄膜組織成長マトリック
ス。
【請求項５４】前記酸性化ステップが乳酸水溶液を用いて前記ｐＨを調整
し、前記方法は、さらに：前記ろ過コラーゲン線維の水性分散物を形成し；水酸化アンモニウムの添加により前記水性分散物からコラーゲン線維を析出さ
せ；そして前記析出コラーゲン線維の分散物をキャスティングして前記マトリックスを形
成する；ことを含む、請求項５３に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項５５】前記マトリックスがスポンジ、フィルム、不織布又はフェ
ルトである、請求項４６に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項５６】前記マトリックスが架橋している、請求項４６に記載の髄
膜組織成長マトリックス。
【請求項５７】前記コラーゲンがウシを供給源として誘導される、請求項
４６に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項５８】前記コラーゲンがウシの真皮又は腱から誘導される、請求
項５７に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項５９】前記コラーゲンが、ヒトでないトランスジェニック動物に
よって発現されたヒトコラーゲンである、請求項４６に記載の髄膜組織成長マト
リックス。
【請求項６０】請求項１の方法で用いる髄膜組織成長マトリックスであっ
て、前記髄膜組織成長マトリックスは、活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラーゲンを調製
し；前記コラーゲンを、フィルム、スポンジ、不織布及びフェルトからなる群の少
なくとも二つの異なる部材に形成し；そして前記少なくとも二つの異なる部材を一緒に結合して前記髄膜組織成長マトリッ
クスを提供する；ことを含む方法によって製造される、髄膜組織成長マトリックス。
【請求項６１】前記少なくとも二つの異なる部材がフィルム及びスポンジ
である、請求項６０に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項６２】前記少なくとも二つの異なる部材が、スポンジと２枚のフ
ィルムであり、前記スポンジは前記２枚のフィルムの間にラミネートされる、請
求項６０に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項６３】有効量の髄膜組織成長因子をさらに含む、請求項６０に記
載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項６４】前記髄膜組織成長因子が、ＲＧＤ含有ペプチド、デコリン
、ラミニン、メロシン、コンドロイチン硫酸、デルマチン硫酸、ヘパラン硫酸、
ケラチン硫酸、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）、フィブロネクチン及び
その他のインテグリンリガンド、エンタクチン及びテネイシンからなる群から選
ばれる、請求項６３に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項６５】前記少なくとも二つの異なる部材のうちの少なくとも一つ
の多孔性部材が、成長する髄膜組織を多孔性部材に浸潤させるのに足る大きさと
量の孔を有し、前記少なくとも二つの異なる部材のうちの少なくとも一つの縫合
可能な部材が、縫合を保持するのに足る耐久性のある、請求項６０に記載の髄膜
組織成長マトリックス。
【請求項６６】前記孔が、約５０〜約１５０μｍの平均直径を有する、請
求項６５に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項６７】前記多孔性部材の表面に隣接した前記孔が直径範囲約３０
μｍ〜約１５０μｍの最外部の孔で、前記孔の残りが直径範囲約５０μｍ〜約３
００μｍの最内部の孔である、請求項６５に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項６８】前記最外部の孔が直径約７０μｍで、前記最内部の孔が直
径約１５０μｍである、請求項６７に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項６９】前記マトリックスが平面である、請求項６０に記載の髄膜
組織成長マトリックス。
【請求項７０】前記処理コラーゲンが、天然Ｉ型コラーゲン源から外来物質を清掃し；前記清掃コラーゲン含有材料を洗浄し；前記洗浄コラーゲン含有材料を粉砕し；前記粉砕コラーゲン含有材料を、タンパク分解酵素で消化して、エラスチン及
び抗原活性の原因となり得る非コラーゲン性不純物を実質的に除去し、前記コラ
ーゲンを膨潤させ；前記タンパク分解酵素を不活化し；前記酵素的に消化されたコラーゲン含有材料を洗浄して、過剰の酵素と非コラ
ーゲンタンパク質不純物を実質的に除去し；前記コラーゲン含有材料を、約２５℃〜約３０℃の温度で約３５〜約４８時間
、ｐＨ約１３〜約１４にアルカリ化して混入糖タンパク及び脂質を実質的に除去
し；前記アルカリ化コラーゲン含有材料を酸で中和し；前記中和コラーゲン含有材料を洗浄し；前記洗浄及び中和コラーゲン含有材料を、ｐＨ約２〜約３に酸性化して前記材
料をさらに膨潤させ（前記酸性化には、コラーゲンの実質的架橋を生じさせる酸
を使用しない）；前記酸性化コラーゲン含有材料を均質化し；前記均質化コラーゲン含有材料をろ過して、非膨潤、非コラーゲン材料からコ
ラーゲン線維を分離し；そして前記ろ過コラーゲン線維を前記マトリックスに使用するために回収する；ことを含む方法によって得られる、請求項６０に記載の髄膜組織成長マトリック
ス。
【請求項７１】前記酸性化ステップが乳酸水溶液を用いて前記ｐＨを調整
し、前記方法は、さらに：前記ろ過コラーゲン線維の水性分散物を形成し；水酸化アンモニウムの添加により前記水性分散物からコラーゲン線維を析出さ
せ；そして前記析出コラーゲン線維の分散物をキャスティングして前記マトリックスを形
成する；ことを含む、請求項７０に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項７２】前記マトリックスが架橋している、請求項６０に記載の髄
膜組織成長マトリックス。
【請求項７３】前記コラーゲンがウシを供給源として誘導される、請求項
６０に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項７４】前記コラーゲンがウシの真皮又は腱から誘導される、請求
項７３に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項７５】前記コラーゲンが、ヒトでないトランスジェニック動物に
よって発現されたヒトコラーゲンである、請求項６０に記載の髄膜組織成長マト
リックス。
【請求項７６】請求項３２の髄膜組織成長マトリックスの製造方法であっ
て、前記方法は、活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラーゲンを調製
し；前記コラーゲンを含有するある体積の液状媒体を用意し；そして前記液状媒体を蒸発させて前記髄膜組織成長マトリックスを提供する；ことを含む製造方法。
【請求項７７】前記処理コラーゲンが、天然Ｉ型コラーゲン源から外来物質を清掃し；前記清掃コラーゲン含有材料を洗浄し；前記洗浄コラーゲン含有材料を粉砕し；前記粉砕コラーゲン含有材料を、タンパク分解酵素で消化して、エラスチン及
び抗原活性の原因となり得る非コラーゲン性不純物を実質的に除去し、前記コラ
ーゲンを膨潤させ；前記タンパク分解酵素を不活化し；前記酵素的に消化されたコラーゲン含有材料を洗浄して、過剰の酵素と非コラ
ーゲンタンパク質不純物を実質的に除去し；前記コラーゲン含有材料を、約２５℃〜約３０℃の温度で約３５〜約４８時間
、ｐＨ約１３〜約１４にアルカリ化して混入糖タンパク及び脂質を実質的に除去
し；前記アルカリ化コラーゲン含有材料を酸で中和し；前記中和コラーゲン含有材料を洗浄し；前記洗浄及び中和コラーゲン含有材料を、ｐＨ約２〜約３に酸性化して前記材
料をさらに膨潤させ（前記酸性化には、コラーゲンの実質的架橋を生じさせる酸
を使用しない）；前記酸性化コラーゲン含有材料を均質化し；前記均質化コラーゲン含有材料をろ過して、非膨潤、非コラーゲン材料からコ
ラーゲン線維を分離し；そして前記ろ過コラーゲン線維を前記マトリックスに使用するために回収する；ことを含む方法によって得られる、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】前記タンパク分解酵素がフィシン又はペプシンである、請
求項７７に記載の方法。
【請求項７９】前記消化のステップが、前記コラーゲン含有材料１５０部
当たり約１部のタンパク分解酵素を加え、前記コラーゲン含有材料のｐＨを約６
．０〜約６．３に調整し、前記コラーゲン含有材料を約３６．５℃〜約３７．５
℃で約１〜約２時間消化することを含む、請求項７７に記載の方法。
【請求項８０】前記タンパク分解酵素がフィシンである、請求項７９に記
載の方法。
【請求項８１】前記酵素が、前記酵素的に消化されたコラーゲン含有材料
に酸化剤を加えることによって不活化される、請求項７７に記載の方法。
【請求項８２】前記酸化剤が亜塩素酸ナトリウムである、請求項８１に記
載の方法。
【請求項８３】前記方法が、さらに、前記洗浄及び酵素不活化コラーゲン
含有材料を、希過酸化水素水でさらに洗浄することを含む、請求項７７に記載の
方法。
【請求項８４】前記アルカリ化が、約５％の水酸化ナトリウム及び約２０
％の硫酸ナトリウムの水溶液を使用する、請求項７７に記載の方法。
【請求項８５】前記酸性化ステップが、酢酸、塩酸又は乳酸を用いて前記
ｐＨを調整する、請求項７７に記載の方法。
【請求項８６】前記コラーゲンがウシを供給源として誘導される、請求項
７６に記載の方法。
【請求項８７】前記コラーゲンがウシの真皮又は腱から誘導される、請求
項８６に記載の方法。
【請求項８８】前記酸性化ステップが乳酸水溶液を用いて前記ｐＨを調整
し、前記方法は、さらに：前記ろ過コラーゲン線維の水性分散物を形成し；水酸化アンモニウムの添加により前記水性分散物からコラーゲン線維を析出さ
せ；そして前記析出コラーゲン線維の分散物をキャスティングして前記マトリックスを形
成する；ことを含む、請求項７７に記載の方法。
【請求項８９】前記コラーゲンが、ヒトでないトランスジェニック動物に
よって発現されたヒトコラーゲンである、請求項７６に記載の方法。
【請求項９０】前記マトリックスが、スポンジ、フィルム、不織布又はフ
ェルトの形態で提供される、請求項７６に記載の方法。
【請求項９１】前記マトリックスが架橋している、請求項９０に記載の方
法。
【請求項９２】前記マトリックスが、高多孔度の層と低多孔度の層を含む
複数の層で提供され、前記高多孔度層は前記低多孔度層より多孔性である、請求
項７６に記載の方法。
【請求項９３】前記高多孔度層がコラーゲンスポンジで、前記低多孔度層
が前記コラーゲンスポンジに結合した実質的に不透水性の縫合可能フィルムであ
る、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】請求項４６の髄膜組織成長マトリックスの製造方法であっ
て、前記方法は、活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラーゲンを調製
し；前記コラーゲンを含有するある体積の液状媒体を用意し；前記液状媒体を蒸発させて移植に適した多孔性の形態を提供し；そして前記多孔性の形態に、有効量の髄膜組織成長因子を配合して前記髄膜組織成長
マトリックスを提供する；ことを含む方法。
【請求項９５】請求項６０の髄膜組織成長マトリックスの製造方法であっ
て、前記方法は、活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラーゲンを調製
し；前記コラーゲンを含有する少なくとも二つの異なる体積の液状媒体を用意し；前記液状媒体を前記異なる体積のそれぞれから蒸発させて、フィルム、スポン
ジ、不織布及びフェルトからなる群の少なくとも二つの異なる部材を提供し；そ
して前記少なくとも二つの異なる部材を一緒に結合して前記髄膜組織成長マトリッ
クスを提供する；ことを含む方法。
【請求項９６】髄膜組織の成長を促進するための方法であって、前記方法
は、請求項７６の方法によって髄膜組織成長促進マトリックスを調製し、そして前記マトリックスと損傷髄膜組織とを接触させて髄膜組織の成長を促進する、
ことを含む方法。
【請求項９７】髄膜組織の成長を促進するための方法であって、前記方法
は、請求項９４の方法によって髄膜組織成長促進マトリックスを調製し、そして前記マトリックスと損傷髄膜組織とを接触させて髄膜組織の成長を促進する、
ことを含む方法。
【請求項９８】髄膜組織の成長を促進するための方法であって、前記方法
は、請求項９５の方法によって髄膜組織成長促進マトリックスを調製し、そして前記マトリックスと損傷髄膜組織とを接触させて髄膜組織の成長を促進する、
ことを含む方法。