KR20070026422A

KR20070026422A - Ｃ형 간염 치료용 식물성 약제

Info

Publication number: KR20070026422A
Application number: KR1020067019268A
Authority: KR
Inventors: 쇼밍 종; 홍웬 유
Original assignee: 피노바 리미티드
Priority date: 2004-02-19
Filing date: 2005-02-17
Publication date: 2007-03-08
Also published as: GB2411114B; US7422760B2; WO2005079823A1; CA2555235A1; EA014234B1; EA200601523A1; HK1098959A1; DE602005014348D1; MXPA06009232A; BRPI0507747A; AU2005215225A1; CA2555235C; US20070160693A1; ES2327052T3; EP1732578A1; CN1925864A; CN1925864B; JP2007523144A; GB2411114A; ATE430574T1

Abstract

본 발명은 C형 바이러스 감염을 앓고 있는 환자들의 치료에 사용하기 위한 식물성 약제 또는 식이 보충제에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 간염 증상, 특히 만성 C형 간염 증상의 완화 및/또는 병원성 C형 간염 바이러스의 활성의 억제에 사용하기 위한 필수적으로 4개의 식물성 약물로 구성되며, 선택적으로 부형제로 제제화된 식물성 약제에 관한 것이다. 사용된 식물성 원료들, 식물성 약물들 또는 식물성 성분들은 다음 속들의 각각의 종들이다:(a) 엉겅퀴; (b) 황기 또는 넓은묏황기; (c) 샐비어; 및 (d) 스치산드라.

C형 간염 바이러스, 식물성 약제, 식이 보충제

Description

Ｃ형 간염 치료용 식물성 약제{Plant-based medicament for the treatment of hepatitis C}

본 발명은 C형 바이러스 감염을 앓고 있는 환자들의 치료에 사용하기 위한 식물성 약제 또는 식이 보충제에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 간염 증상, 특히 만성 C형 간염 증상의 완화 및/또는 병원성 C형 간염 바이러스의 활성의 억제에 사용하기 위한 필수적으로 4개의 식물성 약물로 구성되며, 선택적으로 부형제로 제제화된 식물성 약제에 관한 것이다.

C형 간염 바이러스(HCV)에 의한 만성 감염은 일반적이며, 영국 인구의 1%까지 영향을 미치고 있다. 만성 HCV 감염은 피로, 상복부 통증 및 소화 불량을 포함하는 매우 다양한 증상들과 관련이 있어서, 삶의 질을 전체적으로 감소시키는 것으로 잘 알려져 있다. 약제들에 의한 통상적인 치료는 증상을 개선하나 단지 40%의 환자들에게만 효과가 있다. 따라서 만성 C형 간염 바이러스(HCV)와 관련된 증상들을 감소시키고 더 많은 HCV 환자들의 삶의 질을 향상시킬 수 있는 효과적인 치료법들에 대한 요구가 있다.

본 명세서에서, 미국 보건복지부, 식약청, 의약품관리연구센터(CDER), 2000년 8월 산업계, 식물성 의약품에 대한 지침에서 발췌한 정의는 다음과 같다:

활성 성분: 의도한 약리학적 활성 또는 치료 효과의 원인이 되는 식물성 원료, 약물 또는 약품의 화학 성분.

식물성 제품; 식물성 약품: 식물 재료(아래 참조), 조류, 거대 곰팡이 또는 이들의 조합을 포함할 수 있는 식물성 물질을 함유하는 완성된 제품. 부분적으로 의도한 용도에 따라, 식물성 제품은 식품, 약물, 의료 장비 또는 화장품일 수 있다.

식물성 약품; 식물성 약제: 식물성 약물로부터 제조된 약품으로 사용하기 위한 식물성 제품. 식물성 약품은 용액(예를 들어, 차), 분말, 정제, 캡슐, 엘릭서제 및 트로피컬(tropicals)과 같은 다양한 제형으로 사용할 수 있다.

식물성 약물: 하나 이상의 식물, 조류 또는 거대 곰팡이로부터 유도된 약물. 식물성 약물은 파쇄, 달임, 짜기, 수용성 추출, 에탄올성 추출 또는 다른 유사 공정의 하나 이상에 의해 식물성 원료로부터 제조된다. 식물성 약물은 분말, 페이스트, 농축액, 주스, 검, 시럽 또는 오일과 같은 다양한 물리적 형태로 사용할 수 있다. 식물성 약물 물질은 하나 이상의 식물성 원료(하나의 약초 및 여러 약초 식물성 약물 물질 또는 제품)로부터 제조될 수 있다. 식물성 약물은 천연 원료로부터 유도된 고정제 되거나 화학적으로 변형된 물질을 포함하지 않는다.

식물성 성분: 식물성 원료로부터 유래된 식물성 약물 또는 제품의 성분.

식물성 원료: 식물의 단일 종들의 미가공되거나 가공(예를 들어, 세척, 응결, 건조 또는 자름)된 부분 또는 미가공되거나 가공된 조류 또는 거대 곰팡이.

크로마토그래피 핑커프린트: 배치(batch)의 동일성과 품질 및 배치로부터 배치의 일치성을 확실하게 하도록 기준 샘플 또는 표준의 크로마토그래피 그래프와 정성적 및 정량적으로 일치하는 식물성 원료 또는 약물의 크로마토그래피 그래프.

식이 보충제: [A] 하나 이상의 다음 식이 성분: (A) 비타민; (B) 미네랄; (C) 약초 또는 다른 식물 약품; (D) 아미노산; (E) 전체 식이 흡수량을 증가시켜 식품을 보충하는데 사용되는 식이 물질; 또는 (F) (A), (B), (C), (D) 또는 (E)에 기술된 임의의 성분의 농축물, 대사물, 조성물, 추출물 또는 조합을 가지거나 함유하는 식품을 보충하는 (담배 이외의) 제품은 (2) (A)[식품의약법]의 411(c)(1)(B)(i) 항에 기술된 형태로 섭취하며; 또는 411(c)(1)(B)(ii)에 따르며; 통상적 음식 또는 식사 또는 식품의 유일한 품목으로서의 용도를 나타내지 않으며; 식이 보충제로 표시된 제품을 의미하며; (3) (A)공중보건법(42 U.S.C 262)의 505 항에서 새로운 약물로 승인되거나 351항에서 생물제제로 허가되고, 통지 및 해석 후에 [FDA]가 제재하여, 상기 식이 보충제로 표시된 용도와 사용량의 조건하에서 식품 보조제로 사용될 때 제품이 402(f)항에 위배하지 않으면, 승인, 인가 또는 허락되기 전에, 식이 보충제 또는 음식으로 판매된 제품을 포함하며, (B) (i) 공중보건법(42 U.S.C 262)의 505항에서 새로운 약물로 인가되고, 507항에서 항생물질로 승인되거나 351항에서 생물제제로 허가된 제품을 포함하지 않거나 (ii) 통지 및 해석 후에 [FDA]가 제재하여, 제품이 이 법(21 U.S.C. 321(ff))에 위배하지 않으면, 승인, 인가 또는 허락되기 전에, 식이 보충제 또는 음식으로 판매된 실질적 임상 조사단이 구성되고 이런 조사단의 존재가 공개된 새로운 약물, 항생제 또는 생물제제에 대한 조사를 위해 인가된 제품을 포함하지 않는다.

제형: 약품 형태, 예를 들어, 일반적으로 약품 성분(물질)을 함유하는 정제, 캡슐, 용액 또는 크림이나, 필수적으로 부형제들과 결합되는 것은 아니다.

약제: (A) 공식 미국 약전, 공식 미국의 유사 공식 약전 또는 국가공인처방 에서 승인된 제품들 또는 이들의 임의의 보충제; 및 (B) 인간 또는 다른 동물들의 질병의 진단, 치료, 완화, 치료 또는 예방에 사용하는 제품들; 및 (C) 인간 또는 다른 동물들의 신체의 구조 또는 임의의 기능에 영향을 주는 (식품 이외의) 제품들; 및 (D) 상기 (A), (B), 또는 (C)에 명시된 임의의 제품들의 구성요소로 사용되는 제품들을 의미한다. [식품의약법]의 403항(r)(1)(B) 및 403항(r)(3) 또는 403항(r)(1)(B) 및 (r)(5)(D)에 종속하는 요구가 403항(r)의 조건에 따라 행해진 음식 또는 식이 보충제는 단지 레이블 또는 레이블링이 이런 요구를 포함하기 때문에 온전히 약품이 아니다. 신뢰할 만하고 오해를 불러일으키지 않는 진술이 403항(r)(6)에 따라 행해진 식품, 식품 성분 또는 식이 보충제는 단지 레이블 또는 레이블링은 이런 진술_(21 U.S.C.321(g)(1)을 포함하기 때문에 조항(C) 하에서 약물이 아니다.

약물: 질병의 진단, 치료, 완화, 약리적 활성 또는 다른 직접적인 효과를 제공하거나 신체의 구조 또는 임의의 기능에 영향을 미치게 하는 활성 성분(21 CFR 314.3(b)).

약품: 판매용으로 최종의 즉시 포장 형태의 제형.

식품: 식품이란 용어는 먹거나 마시는데 사용되는 (1) 물품들, (2) 츄잉검, 및 (3) 이런 물품들의 구성요소로 사용되는 물품들(21 U.S.C. 321(f))을 의미한다.

제제: 제형의 구성요소(또는 성분들) 또는 조성물을 열거한 제법. 멀티-허브 식물성 약질의 구성요소 및 조성물은 전체 제제의 일부이어야 한다.

마커: 특히 활성 성분들이 공지되거나 확인되지 않을 때 동정 및/또는 품질 제어 목적에 사용되는 식물성 원료, 약물 또는 약품.

멀티-허브(식물성 약제) 물질 또는 제품: 하나 이상의 식물성 원료로부터 유도된 식물성 약물 또는 약품, 각각은 식물성 성분으로 생각된다. 멀티-허브 식물성 약물은 둘 이상의 식물성 원료를 함께 가공하거나 이들의 상응하는 원료들로부터 개별적으로 가공된 둘 이상이 단일 허브 식물성 약물을 결합하여 제조될 수 있다. 후자의 경우에, 개별 단일-허브 식물성 약물은 제형의 제조 공정 동안 동시에 또는 다른 단계로 주입될 수 있다.

식물 재료: 삼출물뿐만 아니라 식물 또는 식물 부분(예를 들어, 수피, 나무, 잎, 줄기, 뿌리, 꽃, 열매, 씨, 베리, 또는 이의 부분).

단일-허브(식물성 약제) 물질 또는 제품: 하나의 식물성 원료로부터 유도된 식물성 약물 또는 약품. 따라서, 단일-허브 물질 또는 제품은 일반적으로 단지 하나의 식물성 성분을 함유한다.

또한

필수적으로 구성된다 라는 용어는 식물성 원료들 및 이들의 유도체의 존재를 다시 언급하는 것을 의미하고 예를 들어 제제에 사용되는 부형제들의 존재를 배제한다;

치료는 병원성 요인에 대한 증상 완화 및/또는 활성을 의미한다.

전통 중국 의학(TCM)에서, HCV 감염은 신체에 다음의 생리적 변화를 일으키는 것으로 생각된다.

- 혈액에 독소와 열의 축적;

- 생명 에너지와 체액의 소비;

- 혈액의 침체; 및

- 간 및 신장 기능의 손상.

이런 다른 태양들을 표현하기 위해서, HCV 치료를 위한 현존하는 TCM 식물성 제제는 주로 여러 성분, 통상적으로 10가지 이상의 성분을 함유한다. 실용적 목적을 위해서, 어떠한 방식으로도 치료 효과를 손상시키지 않고 식물성 성분 또는 식물성 약물의 수를 감소시키는 것이 분명히 바람직하고 유리할 것이다.

놀랍게도 본 출원인들은 단지 네 가지 식물 종들의 조합이 C형 간염에 대한 활성을 확실히 나타낸다는 것을 발견하였다.

본 발명의 첫 번째 태양에 따라, 필수적으로 각 속의 종들로부터의 식물성 원료, 식물성 약물 또는 식물성 성분으로 이루어진 C형 간염 환자에의 사용 또는 치료를 위한 식물성 약제 또는 식이 보충제가 제공된다:

(a) 엉겅퀴(Silybum);

(b) 황기(Astragalus) 또는 넓은묏황기(Hedysarum);

(c) 샐비어(Salvia); 및

(d) 오미자(Schisandra).

네 개의 식물성 원료들의 바람직한 종들은 아래에 개시된다:

엉겅퀴 종은 통상적으로 엉겅퀴(Silybum marianum)이다. 바람직하게는 본 발명의 조성물에 사용되는 엉겅퀴 종들의 식물 재료는 열매이다. 엉겅퀴(Silybum marianum)의 열매는 수 페이 지(Sui Fei Ji)로 전통 중국 의학에 알려져 있고 밀크 띠슬(milk thistle) 열매로 서유럽에 알려져 있다.

황기 종들은 통상적으로 몽고 황기(Astragalus membranaceus var mongholicus)이다. 바람직하게는 사용되는 황기 종들의 식물 재료는 뿌리이다. 몽고 황기의 뿌리는 황기(Huang Qi)로 전통 중국 의학에 알려져 있고 황기 뿌리로 서유럽에 알려져 있다. 몽고 황기에 대한 대체물로서, 다른 황기 종들인 황기(A. membrancaceus) 또는 넓은묏황기(Hedysarum) 종들이 사용될 수 있다. 바람직한 넓은묏황기 종들은 황기(Hedysarum polybotyrs)이다. 황기(Hedysarum polybotyrs)의 뿌리는 홍기(Hong Qi)로 전통 중국 의학에 알려져 있다. 이 응용분야에 개시된 황기 또는 넓은묏황기 종들은 전통 중국 의학에서 서로 교환해서 사용될 수 있다.

샐비어 종들은 통상적으로 단삼(Salvia miltiorrhiza)이다. 바람직하게는 본 발명의 조성물에 사용되는 샐비어 종들의 식물 재료는 뿌리이다. 단삼의 뿌리는 단센(Dan Shen)으로 전통 중국 의학에 알려져 있고 중국 샐비어 뿌리로 서유럽에 알려져 있다. 선택적으로 샐비어(Salvia Bowleyana 또는 Salvia przewalskii)가 사용될 수 있다. 유사하게, 본 명세서에 개시된 샐비어 종들은 전통 중국 의학에서 교체해서 사용될 수 있다.

오미자 종들은 통상적으로 오미자(Schisandra chinensis)이다. 바람직하게는 본 발명의 조성물에 사용되는 오미자 종들의 식물 재료는 열매이다. 오미자의 열매는 우 웨이 지(Wu Wei Zi)로 전통 중국 의학에 알려져 있고 오미자 열매로 유럽에 알려져 있다. 선택적으로 오미자(Schisandra sphenanthera)가 사용될 수 있다. 유사하게, 본 출원에 개시된 오미자 종들은 전통 중국 의학에서 서로 교환해서 사용될 수 있다.

바람직한 실시예에서 식물 종들은:

a) 엉겅퀴(Silybum marianum);

b) 몽고 황기(Astragalus membranaceus var mongholicus);

c) 단삼(Salvia miltiorrhiza); 및

d) 오미자(Schisandra chinensis)이다.

다른 실시예들에서 몽고 황기는 황기(Astragalus membranaceus 또는 Hedysarum polybotyrs)로 대체될 수 있다.

본 발명의 특히 바람직한 조성물은 수 페이 지; 단 센; 우 웨이 지; 및 황기를 포함한다.

바람직한 실시예에서 본 발명은 네 개의 식물 종들의 각각의 식물성 약물을 포함하거나 상기 식물성 약물로 필수적으로 구성되는 식물성 약제의 형태를 취하는 반면, 다른 실시예들에서 식물성 약제는 각 종들의 식물성 성분들을 포함하거나 식물성 약물로 필수적으로 구성될 수 있다. 제품이 식이 보충제인 경우 네 개의 식물 종들은 식물성 원료 형태로 첨가될 수 있다.

식물성 약제의 경우에, 식물성 약물 이외에, 약학적으로 허용가능한 부형제들이 존재할 수 있다.

식이 보충제의 경우에, 식물성 원료, 식물성 약물 또는 식물성 성분 이외에, 하나 이상의 식이적으로 허용가능한 부형제들이 존재할 수 있다.

또한 본 발명은 건강한 간 기능을 유지 및/또는 C형 간염 바이러스 감염의 증상을 완화 및/또는 바이러스 수를 감소시키는데 충분한 양으로 본 발명의 조성물을 인간에게 투여하는 것을 포함하는 치료 방법 또는 식이 보충 방법이 제공된다.

식물 재료는 임의의 적절한 형태로 본 발명의 조성물에 사용될 수 있다. 예를 들어, 신선하거나 마른 미가공 식물 원료 또는 신선하거나 마른 식물 원료의 추출물, 즉, 식물성 약물일 수 있다. 추출물은 비록 정해진 부분과 식물성 성분들이 사용될 수 있지만 하나 이상의 화학적 마커를 참조하여 정한 전체 식물 추출물이 바람직하다. 보통 식물성 약물인 추출물은 통상적으로 건조되며 분말 형태, 가장 바람직하게는 동결건조 추출물로 사용된다.

식물성 약물이 사용될 때 분쇄되는 것이 바람직하다. 본 실시예에서 식물성 약물은 건조되며 분말로 분쇄된다. 각 식물성 약물의 얻은 분말은 분말 형태인 본 발명의 식물성 조성물을 형성하기 위해서 편리하게 함께 혼합된다. 이 분말은, 예를 들어, 환자가 마시도록 액체에 분산되어 직접 투여될 수 있다. 선택적으로, 상기 분말은 캡슐, 정제 또는 과립과 같은 임의의 다른 통상적인 제형으로 가공될 수 있다. 바람직한 실시예에서, 본 출원인은 물과 같은 비교적 소량의 차가운 액체에 현탁될 수 있는 현탁 제제를 개발하였다. 일반적으로 현탁 제제는 50ml이하, 보다 일반적으로 25ml이하의 물에 현탁될 수 있다. 바람직하게는 포장된 약은 분배 용기가 제공된다.

예를 들어, 전체 추출물인 식물성 약물은 식물성 재료로부터 성분들을 추출하는 것으로 공지된 임의의 통상적인 기술에 의해 제조될 수 있다. 이런 기술은 이산화탄소와 같은 액화 기체를 사용하는 초임계 유체 추출을 포함하는 용매 추출을 포함한다. 한 실시예에서, 상기 추출물들은 70% 에탄올을 사용하여 얻은 것과 같은 에탄올 추출물들이다. 추출물들은, 예를 들어, 표준화된 전체 추출물인 표준화된 추출물이 가장 바람직하다. 바람직한 표준화된 전체 추출물은 약용 추출물이다.

추출물은 통상적으로 적절한 용매에 분말의 마른 식물 재료인 신선하거나 마른 식물 재료를 침지 또는 분해 또는 환류하고; 고체 잔류물을 용액과 분리하고, 용매를 용액으로부터 제거하고; 최종 농축물을 회수함으로 제조된다.

바람직하다면 액체 추출물은 본 발명의 식물성 약제 또는 식이 보충제로 제제화되기 전에, 예를 들어, 분사 건조 또는 응고 건조(동결건조)에 의해 건조될 수 있다. 이 경우에 본 발명의 조성물의 하나 이상의 성분 식물 종들의 마른 추출물은 환자에게 직접 투여하고 또는 단위 제형 속에 캡슐화 또는 정제화 하기 위한 분말을 형성하기 위해서, 하나 이상의 다른 성분 식물 종들의 분쇄된 마른 식물 재료와 혼합될 수 있다. 선택적으로 추출물은 미리 건조하지 않고 직접 사용할 수 있다.

식물성 원료들 또는 식물성 약물들 또는 식물성 성분들은 이런 타입의 성분들에 적합한 임의의 통상적인 기술을 사용하여 함께 혼합될 수 있다. 식물성 원료들, 약물들 또는 식물성 성분들이 모두 마른 형태일 때, 예를 들어, 손으로 또는 혼합 기계에 의해 편리하게 함께 혼합된다. 식물성 조성물의 구성요소들의 전부가 아닌 일부가 마른 형태일 때 이런 타입의 혼합 방법이 적절할 수 있다.

엉겅퀴는, 예를 들어, 이탈리아 제조사인 인데나로부터 구입할 수 있는 약용 추출물의 형태로 사용되는 것이 바람직하다. 인데나에 의해 제조된 약용 엉겅퀴 추출물은 HPLC에 의해 30중량% 이하의 엉겅퀴 함량으로 규격화되어 있다. 상기 약용 추출물은 광범위한 안정성과 효능 절차를 통과해야 한다. 바람직하게는, 본 발명의 실시에 사용될 때, 엉겅퀴 추출물은 HPLC 분석에 의해 적어도 30%의 최소 엉겅퀴 함량을 가진다.

몽고 황기는 예를 들어, 중국, 베이징 100094, 지베이왕, 하이딩 구에 있는 중국 제조사인 Institute of Medicinal Plant Development로부터 구입할 수 있는 약용 추출물의 형태로 사용되는 것이 바람직하다. 중국에서 제조된 약용 몽고 황기 추출물은 약 0.4 중량%의 아스트라갈로사이드 IV 함량으로 규격화되어 있다. 상기 약용 추출물은 광범위한 안정성과 효능 절차를 통과해야 한다. 바람직하게는, 본 발명의 실시에 사용될 때, 몽고 황기 추출물은 0.1 내지 약 10 중량%의 아스트라갈로사이드 IV 함량을 가진다. 바람직하게는, 본 발명에 사용되는 몽고 황기는 적어도 0.4 중량%의 최소 아스트라갈로사이드 IV 함량을 가진다.

단삼은, 예를 들어, 중국, 베이징 100094, 지베이왕, 하이딩 구에 있는 중국 제조사인 Institute of Medicinal Plant Development로부터 구입할 수 있는 약용 추출물의 형태로 사용되는 것이 바람직하다. 중국에서 제조된 약용 단삼 추출물은 적어도 1.5 중량%의 탄시논(Tanshinone) IIa 함량으로 규격화되어 있다. 상기 약용 추출물은 광범위한 안정성과 효능 절차를 통과해야 한다. 바람직하게는, 본 발명의 실시에 사용될 때, 단삼 추출물은 1.5 내지 약 50 중량%의 탄시논 IIa 함량을 가진다. 바람직하게는, 본 발명에 사용되는 단삼은 적어도 2.0 중량%의 최소 탄시논 IIa 함량을 가진다.

오미자는 예를 들어, 중국, 베이징 100094, 지베이왕, 하이딩 구에 있는 중국 제조사인 Institute of Medicinal Plant Development로부터 구입할 수 있는 약용 추출물의 형태로 사용되는 것이 바람직하다. 중국에서 제조된 약용 오미자 추출물은 적어도 2.0 중량%의 스치산드롤(Schidandrol) A 함량으로 규격화되어 있다. 상기 약용 추출물은 광범위한 안정성과 효능 절차를 통과해야 한다. 바람직하게는, 본 발명의 실시에 사용될 때, 오미자 추출물은 1.0 내지 약 50 중량%의 스치산드롤 A 함량을 가진다. 바람직하게는, 본 발명에 사용되는 오미자는 적어도 2.0 중량%의 최소 스치산드롤 A 함량을 가진다.

본 발명의 종들은 각각 건강한 간 기능을 유지하며 조합해서 간염 바이러스 감염, 특히 C형 간염 바이러스 감염과 관련된 증상들을 감소 또는 완화하는데 사용될 수 있다.

본 발명의 두 번째 태양에 따라 본 발명의 첫 번째 태양에 따른 식물성 약제 또는 식이 보충제를 투여하는 것을 포함하여 간염, 특히 C형 간염의 증상을 감소 또는 완화하거나 건강한 간 기능을 유지하기 위해서 환자를 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명의 세 번째 태양에 따라 간염, 특히 C형 간염의 증상을 감소 또는 완화하거나 건강한 간 기능을 유지하기 위해서 다른 약제와 조합된 본 발명의 첫 번째 태양에 따른 식물성 약제 또는 식이 보충제의 용도를 제공한다.

상기 다른 약제는 인터페론이 바람직하며 본 발명의 조성물은 동시에 또는 순차적으로 인터페론이 제공될 수 있다.

따라서, 본 발명은 본 발명의 식물성 약제의 치료적 유효량을 투여하는 것을 포함하는 환자의 C형 간염 증상의 치료, 감소 또는 완화 방법을 제공한다. 또한 본 발명은 본 발명의 식물성 약제의 치료적 유효량을 투여하는 것을 포함하는 환자의 건강한 간 기능을 유지하는 방법을 제공한다.

약초 조성물은 식이 보충제로 사용될 수 있다. 따라서 본 발명은 건강한 간 기능을 유지하는데 효과적인 양으로 상기한 본 발명의 조성물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 식이 보충 방법이 제공된다.

식물성 약제 또는 식이 보충제는 식물성 원료들 또는 식물성 성분들의 전체 중량에 비례한 다음 양의 각 종들을 함유하는 것이 바람직하다:

(a) 22-48%의 엉겅퀴;

(b) 20-60%의 황기 또는 넓은묏황기;

(c) 13-48%의 샐비어; 및

(d) 2-19%의 오미자 종.

더욱 바람직하게는 각 종들은 다음 양으로 존재한다:

(a) 30-40%의 엉겅퀴;

(b) 20-30%의 황기 또는 넓은묏황기;

(c) 20-30%의 샐비어; 및

(d) 7.5-15%의 오미자.

본 발명의 또 다른 태양에 따라,

식물성 원료들, 식물성 약물들 또는 식물성 성분들의 전체 중량에 비례한:

(a) 22% 만큼 및 더욱 바람직하게는 40% 만큼의 엉겅퀴;

(b) 20% 만큼의 황기 또는 넓은묏황기;

(c) 13% 만큼 및 더욱 바람직하게는 20% 만큼의 샐비어; 및

(d) 2% 만큼 및 더욱 바람직하게는 7.5% 만큼의 오미자의 중량% 양으로

하기 속들의 각 종들로부터의 식물성 원료들, 식물성 약물들 또는 식물성 성분들을 포함하는 C형 간염에 감염된 환자들의 치료 또는 환자에 사용하기 위한 식물성 약제 또는 식이 보충제가 제공된다:

(a) 엉겅퀴;

(b) 황기 또는 넓은묏황기;

(c) 샐비어; 및

(d) 오미자.

본 발명에 따라, 본 발명의 조성물의 치료적 유효량은 해로운 부작용들을 최소화하면서 HCV 감염의 증상들을 감소 또는 완화하는데 충분한 양이다. 한 실시예에서, 치료적 유효량은 해로운 부작용들을 일으키지 않으며 만성 C형 간염의 증상을 감소 또는 완화하는데 충분한 양이다. 다른 실시예에서, 치료적 유효량은 해로운 부작용들을 일으키지 않으며 건강한 간 기능을 정상화 또는 유지하는데 충분한 양이다.

투여되는 양은 변할 것이고 환자의 연령, 체중, 성별 및 상태에 의존할 것이다. (바람직한 종들만을 참조하여 예로 기술된) 식물성 성분들의 각각의 통상적인 하루 투여량은 다음과 같다(중량은 마른 식물성 원료량을 의미한다):

엉겅퀴: 2-15g

몽고 황기: 9-30g

단삼: 9-15g

오미자: 1.5g-6g

투여량은 당업자에 의해 쉽게 결정될 수 있으며 본 발명의 보충적 및 약학적 조성물로 쉽게 제제화될 수 있다.

식물성 원료들, 식물성 약물들 및 식물성 성분들은 통상적인 방법들에 의해 의약, 식품 보충제 또는 건강기능식품으로 제제화될 수 있다.

건강기능식품은 질병의 예방과 치료를 포함하는 의료 혜택 또는 건강 혜택을 제공하는 것으로 생각되는 식품 성분, 식품 보충제 또는 식품이다. 일반적으로 건강기능식품은 소비자에게 특정한 건강 혜택을 제공하는데 특히 적합하다. 건강기능식품은 통상적으로 유사한 보통 식품에서 발견할 수 있는 것보다 많은 양의 비타민, 미네랄, 허브 또는 생리 활성 성분(phytochemical)과 같은 미세영양소를 포함한다. 1회 식사 또는 식이요법의 일부 또는 영양요법의 코스로 섭취될 때 통상적으로 건강기능식품의 의도된 건강 혜택을 최적화하도록 상기 미세영양소의 양이 선택된다.

본 발명의 식물성 약제 또는 식품 보충제는 식이적으로 또는 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제와 혼합하여 의약 또는 식이 보충제로 제제화될 수 있다. 이런 담체 또는 부형제는 용매, 분산매질, 코팅제, 등장액, 또는 흡수 지연제, 감미료 등일 수 있다. 적절한 담체는 희석제, 접합제 및 접착제, 윤활유, 분해제, 착색제, 부피 형성제(bulking agent), 향신료, 감미료 및 특정 제형을 제조하는데 필요할 수 있는 버퍼 및 흡수제와 같은 기타 물질들을 포함하는 넓은 범위의 재료들로 제조될 수 있다. 약학적으로 활성화된 물질들을 위한 상기 매질과 물질들의 용도는 당업계에 주지되어 있다. 임의의 통상적인 매질 또는 물질이 본 발명의 식물성 조성물과 혼용할 수 없는 경우를 제외하고, 본 발명의 조성물에서 이의 용도를 고려한다.

예를 들어, 고체 경구 제형은 활성 성분들과 함께, 락토오스, 덱스트로스, 수크로오스, 셀룰로오스, 옥수수 전분 또는 감자 전분; 실리카, 활석, 스테아르산, 마그네슘 또는 스테아르산 칼슘 및/또는 폴리에틸렌 글리콜과 같은 윤활제들; 전분, 아라비아 검, 젤라틴, 메틸셀룰로오스, 카복시메틸셀룰로오스 또는 폴리바이닐 파이롤리딘과 같은 접합제; 전분, 알긴산, 알긴산염 또는 나트륨 전분 글리콜산염과 같은 분해제; 염료, 감미료; 레시틴, 폴리소르베이트산, 황산 라우릴 및 마크로골(폴리에틸렌 글리콜)과 같은 습윤제들을 함유할 수 있다. 이런 제제들은, 예를 들어, 혼합, 과립화, 정제화, 설탕 코팅 또는 막 코팅 공정과 같은 공지된 방식으로 제조될 수 있다.

구강 투여용 분산액은 수용액, 팅크제, 시럽, 유탁액 및 현탁액을 포함할 수 있다. 시럽은 담체로서, 예를 들어, 수크로오스 또는 수크로오스와 글리세롤 및/또는 만니톨 및/또는 소르비톨을 함유할 수 있다. 특히, 당뇨 환자들을 위한 시럽은 담체로서 예를 들어, 글루코스로 신진대사 되지 않거나 매우 소량으로 글루코스로 신진대사 되는 소르비톨. 유탁액과 현탁액은 담체로서, 예를 들어, 천연 검, 한천, 알긴산 나트륨, 펙틴, 메틸셀룰로오스, 카복시메틸셀룰로오스 또는 폴리바이닐 알콜을 함유할 수 있다.

본 발명의 식물성 약제 또는 식이 보충제는 과립 또는 분말로 적절하게 제제화된다. 이 형태로 환자가 마시는 차 또는 소프트 드링크와 같이 물 또는 다른 액체 속에 쉽게 분산될 수 있다. 생리학적으로 허용가능한 부형제로 단위 제형으로 캡슐화, 정제화 또는 제제화될 수 있다. 단위 제형은 1회 일일 투여를 위한 추출물의 치료적 유효량을 포함할 수 있거나 하루에 수 회의 투여량을 제공하기 위한 더 작은 양으로 제제화될 수 있다. 따라서, 조성물은, 예를 들어, 정제, 캡슐, 시럽, 엘릭서제, 내장 제제 또는 임의의 다른 경구 투여 제형으로 제제화될 수 있다. 생리적으로 허용가능한 담체들의 예는 물, 오일, 유탁액, 알콜 또는 임의의 다른 적절한 재료를 포함한다.

본 발명은 다음 제제 및 데이타만을 참조하여 실시예를 통해서 더 상세하게 기술될 것이다.

도 1은 몽고 황기의 BDS의 TCL 사진이다;

도 2는 단삼의 BDS의 TCL 사진이다;

도 3은 오미자의 BDS의 TCL 사진이다;

도 4는 황기의 BDS의 HPLC 크로마토그램이다;

도 5는 아스트라갈로사이드(몽고 황기의 마커)의 HPLC 크로마토그램이다.

도 6은 단삼의 BDS의 HPLC 크로마토그램이다;

도 7은 탄시논-IIA(단삼의 마커)의 HPLC 크로마토그램이다;

도 8은 오미자의 BDS의 HPLC 크로마토그램이다;

도 9는 스치산드린(오미자의 마커)의 HPLC 크로마토그램이다;

도 10은 엉겅퀴 종으로부터 식물성 약물을 생산하기 위한 제조 방법을 나타내는 흐름도이다;

도 11은 황기 종으로부터 식물성 약물을 생산하기 위한 제조 방법을 나타내는 흐름도이다;

도 12는 샐비어 종으로부터 식물성 약물을 생산하기 위한 제조 방법을 나타내는 흐름도이다;

도 13은 오미자 종으로부터 식물성 약물을 생산하기 위한 제조 방법을 나타내는 흐름도이다.

실시예 1:

식물성 약물들로부터 식물성 약제의 제조

추출물들의 원하는 치료 효능을 얻기 위해서 엉겅퀴(열매), 단삼(뿌리), 오미자(열매) 및 몽고 황기(뿌리)의 표준 추출물을 각 약초에 대해 특별하게 설계된 추출법들을 사용하여 분리시켰다. 추출물을 건조하였고 얻은 마른 분쇄된 추출물을 아래의 비율(중량은 추출물들과 마른 식물성 원료의 동일한 중량에 대해 주어짐)로 혼합하였다.

(a) 엉겅퀴; 0.200g 내지 0.250g(식물성 원료의 12g 내지 15g과 동일)

(b) 몽고 황기; 0.585g 내지 1.95g(식물성 원료의 9g 내지 30g과 동일)

(c) 샐비어; 0.225g 내지 0.375g(식물성 원료의 9g 내지 15g과 동일)

(d) 오미자; 0.150g 내지 0.600g(식물성 원료의 1.5g 내지 6g과 동일).

실시예 2:

현탁액 혼합물로의 제제

실시예 1의 스프레이-건조 식물성 약물은 스프레이-건조 식물성 약물들과

a) 100중량%의 입자들이 60 메시 체를 통과하고, 95중량%의 입자들이 80 메시 체를 통과하고 70중량%의 입자들이 200 메시 체를 통과하는 입자 크기 분포를 가진 적어도 하나의 잔텀 검(xanthum gum)을 포함하는 하나 이상의 젤란트(gellant) 또는 점증제,

b) 하나 이상의 충전제들; 및

c) 하나 이상의 습윤제들 및/또는 계면활성제들을 혼합하여 현탁액 제형으로 제제화하였다.

PYN17 현탁액 분말 혼합물로 불리는 최종 제제는 다음을 함유한다:

조성물: 향주머니 당

활성 성분들:

밀크 띠슬 열매 건조 추출물 : 0,220g

중국 샐비어 뿌리 건조 추출물 : 0,225g

오미자 열매 건조 추출물 : 0,400g

황기 뿌리 건조 추출물 : 0,585g

부형제들:

마크로골 6000 분말 : 0,600g

페르와겔(Ferwogel) 30.385

(분자량 3.5-4.0 x 10⁶) : 0,070g

만니톨 EZ : 0,160g

에어로실 200 : 0,050g

아스파르타미 : 0,050g

카라멜 분말 : 0,100g

페파민트 분말 향 : 0,060g

실시예 3 :

PYN17 현탁액 분말 혼합물의 활성

현탁액 분말의 향주머니를 2.5ml 물에 재현탁시키고 1/7로 더 희석하였다. 불완전하게 용해된 현탁액을 여과하고 가용 부분을 시험하였다.

10㎕의 용액을 1/70의 농도로 세포들의 100㎕ 배지에서 시험하였다. 1/350과 1/1750의 농도를 독성을 결정하는데 사용하였다.

독성을 시험하기 위해서 세포들을 72시간 동안 복제 세포들로 배양하였고 삼중수소 타이미딘(tritiated thymidine)을 수거하기 전에 18시간 첨가하였다.

결과:

삼중수소 타이미딘 혼합.

희석제 PYN-17	웰 1 cpm	웰 2 cpm	웰 3 cpm	웰 4 cpm	웰 5 cpm	평균 cpm
1/70	18	24	65	51	77
1/350	41010	32432	34719	30311	32371	34169
1/1750	36210	28315	32424	38230	39815	34999
0	31609	35373	36199	36281	36210	35134

레닐라 루시페라제의 발현에 의해 측정된 복제의 억제.

1/70 희석제는 세포들에게 유독성이 있었다(현미경하에서 세포들은 죽었다).

이 희석제는 복제 측정법에서 사용되지 않으며 추가로 더 낮은 희석제가 사용되었다.

희석제 PYN17	웰 1 루시페라제 활성	웰 2	웰 3	웰 4	웰 5	평균 루시페라제 활성	+/- SD
1/350	531292	234958	614669	479425	725350	517139	183108
1/1750	594920	972891	889324	595922	-	763264	196789
1/8750	880338	1005370	608077	644105	806756	788929	165228
0	1139829	870757	820645	724027	-	888815	178079

결론

1/350 희석으로 C형 간염 바이러스에 대해 나타나는 활성은 41.8%의 억제율이었다.

결과는 하나의 매우 낮은 결과(웰 2)에 의해 약간 빗나갈 수 있다.

대조표준(현탁액 분말 아님)은 하나의 높은 결과(웰 1)에 의해 빗나갈 수 있다.

1/350에서 낮은 결과가 없는 평균은 587684이었다.

높은 결과(웰 1)가 없는 대조표준은 805143이었다.

하나의 높고 낮은 결과들을 제외하면 억제율 %은 27%이었다.

실시예 4-7

이 실시예는 본 발명의 식물성 약제에 사용된 식물성 약물의 제조에 사용된 추출 방법을 기술한다.

실시예 4

엉겅퀴 종으로부터 식물성 약물의 제조

도 10을 참조하면, 도 10은 엉겅퀴 종의 식물성 약물을 생산하기 위한 방법을 기술한다. 추출을 위해 열매를 준비하여, 추출하며, 얻은 용액을 여과하고 농축한다. 농축된 정제 추출물을 정제된 생성물이 침전되고, 여과되고 포장을 위해 여과물을 건조하고 파쇄되는 다른 세정 공정을 수행한다. 이런 제품은 인데나 SpA로부터 얻을 수 있다.

실시예 5

황기로부터 식물성 약물의 제조

(넓은묏황기로부터 식물성 약물의 제조와 동일)

도 11을 참조하면, 황기 종 뿌리 재료를 3시간 동안 60℃에서 오븐에서 건조시키고 거친 분말로 분쇄하고, 체(10 메시)를 통과시키고 흐름도에 따라 추출한다. 추출 방법은 에탄올 추출이다. 얻은 농축물은 에탄올에 재용해하고, 임의의 침전물을 제거하고 제품을 농축하고 건조시킨다. 이 방법은 0.4% 이상의 아스트라갈로사이드 함량을 가진 10% 이상의 고체 함량을 생산한다.

실시예 6

단삼 종으로부터 식물성 약물의 제조

도 12를 참조하면, 단삼 뿌리 재료를 3시간 동안 60℃에서 오븐에서 건조시키고 거친 분말로 분쇄하고, 체(10 메시)를 통과시키고 흐름도에 따라 추출한다. 추출 방법은 에탄올 추출이다. 얻은 농축물을 에탄올에 재용해하고, 임의의 침전물을 제거하고 제품을 농축하고 건조시킨다. 이 방법은 1.5% 이상의 탄시논 IIA 함량을 가진 4% 이상의 고체 함량을 생산한다.

실시예 7

오미자 종으로부터 식물성 약물의 제조

도 13을 참조하면, 단삼 종 열매를 물에서 불리고 여과한다. 여과 잔류물을 건조하고, 분쇄하여 에탄올 추출하였고 얻은 농축물을 건조하였다. 이 방법은 2% 이상의 스치산드롤 A 함량을 가진 4% 이상의 고체 함량을 생산한다.

실시예 8-11

동일한 원료들로부터 기술된 방법에 의해 얻은 식물성 약물을 분석하고 결과를 아래에 나타내었다:

실시예 8

분석에 의해 엉겅퀴 종으로부터의 식물성 약물은 다음 특징들을 가진다는 것을 나타내었다

측정	결과	상세내용	U.M
DAB10에 따라 실리빈으로 계산된 실리마린의 분광측광 함량	70.9	>=65.0	%
HPLC 함량 실리빈과 아이소실리빈의 합	38.8	>=30.0	%
특성 황갈색 분말	요구에 따름	요구에 따름
펜테인에 가용성 물질들	0.25	<=0.5	%
HPLC:건조 감량 확인 (T=80℃, 진공 t=3h)	요구에 따름 0.0	요구에 따름 <=5.0	%
유황회분 Ph. Eur.에 따름	0.33	<=1.0	%
중금속 Ph. Eur. 방법 A에 따름	요구에 따름	<=100	ppm
잔류 유기 용매들 에탄올 에틸 아세트산 헥세인	0.4 <0.008 요구에 따름	<=1.0 <=0.01 <=0.01	% % %
미생물학적 대조표준 Ph. Eur.에 따름
박테리아 최대 허용 한계: 5 x 1000 cfu/g TM/0113	<1000.0	<=1000.0	cfu/g
곰팡이 최대 허용 한계: 5 x 1000 cfu/g TM/0118	<100.0	<=100.0	cfu/g
장내 세균 TM/0015 및 TM/0075	<100.0	<=100.0	cfu/g
황색포도상구균 살모넬라	없음	없음
TM/008, TM/0017 및 TM/0075
대장균, 녹농균 TM/0010, TM0011, TM0016 및 TM/0075	없음	없음

실시예 9

분석에 의해 황기로부터의 식물성 약물은 다음 특징들을 가진다는 것을 나타내었다:

A) 분석 증명서

제품명: 황기 뿌리 추출물(몽고 황기)

배치 넘버: AMR-200201PE

시험 상세내용 결과

외관 연노랑색 통과

건조 감량: <5%(CP) 2.65% 입자 크기: 80메시 통과 전체 회분 <5.0% 0.14% 중금속:납 <5ppm 0.55 수은 <1ppm 0.84 비소 <1ppm 0.61 카드뮴 <0.5ppm 0.21 산 불용성 회분 <2.0% 0.026% 미생물 전체 생리 호기성 세균 숫자 <10³ cfu/g 80 곰팡이 & 효모: <10² cfu/g 10 대장균: 10g에 없음 없음 살모넬라: 10g에 없음 없음 함량 분석: 아스트라갈로사이드 IV>0.4% 0.44%

B) 화학적 분석

제품명: 황기 뿌리 추출물(몽고 황기)

배치 넘버: AMR-200201PE

화학적 분석:

i) TLC 핑거프린트 : 몽고 황기의 BDS의 TLC 사진인 도 1을 참조. 왼쪽은 BDS 샘플이고 오른쪽은 표준 참조 화학적 아스트라갈로사이드 IV이다.

시험 용액의 제조:

40ml의 메탄올을 1g의 분말 추출물에 첨가하고, 잘 흔들고 여과한다. 여과물 을 제조한 천연 산화 알루미늄 컬럼에 공급하고, 중국 백과사전(영어판, 2000), 페이지 161, 확인(2),

기준 용액: 1mg/1ml 기준 용액을 생산하기 위해서 메탄올에 화학적 기준 표준(CRS) 아스트라갈로사이드 IV를 용해시킨다.

적재: 2㎕의 시험 용액과 2㎕의 기준 용액을 각각 박막을 입힌 실리카겔 F₂₅₄ 판(머크)에 첨가한다.

현상 용매 시스템: 클로로포름:메탄올:물(13:7:2)(하부층)

현상: 혼합된 현상액을 TLC 탱크에 첨가하고 평형상태를 위해 15분 동안 방치한다. TLC 판을 넣고 7.5cm로 현상한다.

탐지:

에탄올 속의 10% 황산으로 분사하고 105℃로 가열할 때 기준 용액의 점과 위치와 색이 일치하는 시험 용액의 TLC 크로마토그램의 TLC에서 갈색 점을 얻었다. UV365_nm 광 하에서 현상된 TLC 판을 관찰하고, 기준 화학 아스트라갈로사이드 IV와 시험 용액은 Rf 0.49에서 노랑색(orange yellow)을 나타내었다.

ii) HPLC 분석

장비: 물 HPLC 시스템, LC 600 펌프 및 UV 검출기(모델 486).

컬럼 : 스페리소브 S100Dsl, 25cm x 4.6mm

컬럼 온도: 25℃

유속: 1.0ml/min

검출 파장: UV200_nm

이동상 : 아세토나이트릴:물(1:2)

CRS 용액의 제조: 10ml 플라스크 속의 이동상 용액에 2mg의 아스트라갈로사이드 IV를 용해한다.

시험 용액들의 제조:

1.0g의 분말 추출물을 계량하고, 메탄올에 50ml의 2% KOH를 첨가하고, 1시간 동안 수조에서 가열하고 환류하고 여과한다. 이 과정을 3회 반복한다. 여과물들을 혼합하고 용매를 회수한다. 잔류물을 용해사기 위해 25ml의 물을 첨가하고, 50ml의 에터로 세척한다. 수용액에, 25ml의 n-부탄올(물에서 포화)로 3회 추출한다. 부탄올 용액을 혼합하고 25ml의 물로 2회 각각 세척하고, 그런 후에 25ml의 인산이수소 칼륨으로 세척하고, 용매를 회수한다. 정확하게 10ml의 이동상 용액을 잔류물에 첨가하고 웰을 흔들고, 시험 용액으로 미세구멍(0.45㎛)을 통과시켜 여과한다.

주입량: 20㎕의 CRS 용액과 20㎕의 시험 용액을 각각 주입한다.

결과: 도 4와 5의 크로마토그램을 참조. 도 4(BDS)는 적어도 약 20분의 잔류 시간에서 아스트라갈로사이드 IV를 포함하는 적어도 10개의 명확하게 확인할 수 있는 피크들을 보여준다. 그래프 아래 영역은 적어도 0.4 중량%의 아스트라갈로사이드 IV의 비율을 나타낸다. 도 5 크로마토그램은 마커만을 가진 대조표준이다.

아스트라갈로사이드IV 함량에 대한 상세내용(% w/w)	결과(% w/w)
>0.4	0.44

실시예 10

분석에 의해 샐비어 종으로부터의 식물성 약물은 다음 특징들을 가지는 것으로 나타났다:

A) 분석 증명서

제품명: 단삼 뿌리 추출물(salvia miltiorrhiza)

배치 번호: SMR-200201PE

시험 상세내용 결과

외관 암적색 통과

건조 감량: <5%(CP) 3.24% 입자 크기: 80메시 통과 전체 회분 <5.0% 0.38% 산 불용성 회분 <2.0% 0.04% 중금속:납 <5ppm 0.65 수은 <1ppm 0.14 비소 <1ppm 0.62 카드뮴 <0.5ppm 0.38 미생물 전체 생리 호기성 세균 숫자 <10³ cfu/g 100 곰팡이 & 효모: <10² cfu/g 20 대장균: 10g에 없음 없음 살모넬라: 10g에 없음 없음 함량 측정: 탄시논 IIA>1.5% 1.98%

B) 화학적 분석

제품명: 단삼 뿌리 추출물(salvia miltiorrhiza)

배치 넘버: SMR-200201PE

화학적 분석:

i) TLC 핑거프린트 : 단삼의 BDS의 TLC 사진인 도 2을 참조. 왼쪽은 BDS 샘플 이고 오른쪽은 표준 참조 화학적 탄시논 IIA이다.

시험 용액의 제조:

1ml의 에틸 아세트산을 100mg의 분말 추출물에 첨가한다.

기준 용액: 2mg/1ml 기준 용액을 생산하기 위해서 에틸 아세트산에 화학적 기준 표준(CRS) 탄시논 IIA를 용해시킨다.

적재: 5㎕의 시험 용액과 5㎕의 기준 용액을 각각 박막을 입힌 실리카겔 판(머크)에 첨가한다.

현상 용매 시스템: 벤젠:에틸 아세트산(19:1)

탐지:

공기에서 현상판을 건조시키면, 시험 용액의 TLC 크로마토그램에서 얻은 암적색 점은 Rf 0.46에서 기준 용액의 점의 위치 및 색과 상응한다.

ii) HPLC 분석

장비: 물 HPLC 시스템, LC 600 펌프 및 UV 검출기(모델 486).

컬럼 : 스페리소브 S100Dsl, 25cm x 4.6mm

컬럼 온도: 25℃

유속: 1.0ml/min

검출 파장: UV270_nm

이동상 : 메탄올:물(15:5)

CRS 용액의 제조: 50ml 갈색 플라스크에 10mg의 탄시논 IIA를 정확하게 계량한다. 25ml 갈색 플라스크에 정확하게 2ml를 측정하고 메탄올을 첨가한다.

시험 용액들의 제조:

25ml 플라스크에 30mg의 분말 추출물을 정확하게 계량하고, 18ml의 메탄올을 첨가하고 5분 동안 초음파하에서 처리하고, 그런 후에 메탄올을 첨가한다.

주입량: 5㎕의 CRS 용액과 5㎕의 시험 용액을 각각 주입한다.

결과: 도 6와 7의 크로마토그램을 참조. 도 6(BDS)는 적어도 약 28/29분의 잔류 시간에서 탄시논 IIA를 포함하는 적어도 6개의 확인할 수 있는 피크들을 보여준다. 그래프 아래 영역은 적어도 1.5 중량%의 탄시논 IIA의 비율을 나타낸다. 도 7 크로마토그래피는 마커만을 가진 대조표준이다.

탄신논 IIA 함량에 대한 상세내용(% w/w)	결과(% w/w)
>1.5	1.98

실시예 11

분석에 의해 오미자 종으로부터의 식물성 약물은 다음 특징들을 가지는 것으로 나타났다:

A) 분석 증명서

제품명: 오미자 열매 추출물(Schisandra chinensis )

배치 번호: SCF-200201PE

시험 상세내용 결과

외관 암적색 통과

건조 감량: <5%(CP) 4.5% 입자 크기: 80메시 통과 전체 회분 <5.0% 0.25% 산 불용성 회분 <2.0% 0.06% 중금속:납 <5ppm 0.45 수은 <1ppm 0.47 비소 <1ppm 0.74 카드뮴 <0.5ppm 0.36 미생물 전체 생리 호기성 세균 숫자 <10³ cfu/g 90 곰팡이 & 효모: <10² cfu/g 10 대장균: 10g에 없음 없음 살모넬라: 10g에 없음 없음 함량 측정: 스치산드롤 A>2.0% 2.4%

B) 화학적 분석

제품명: 오미자 열매 추출물(Schisandra chinensis)

배치 넘버: SCF-200201PE

화학적 분석:

i) TLC 핑거프린트 : 오미자의 BDS의 TLC 사진인 도 3을 참조. 왼쪽은 BDS 샘플이고 오른쪽은 표준 참조 화학적 스치산드린 A이다.

시험 용액의 제조:

20ml의 클로로포름을 0.5g의 분말 추출물에 첨가하고, 10분 동안 초음파하에서 처리하고 여과한다. 여과물을 증발시켜 건조하고 시험 용액으로 1ml의 클로로포름에 잔류물을 용해시킨다.

기준 용액: 1mg/1ml 기준 용액을 생산하기 위해서 클로로포름에 화학적 기준 표준(CRS) 스치산드롤 A를 용해시킨다.

현상 용매 시스템: 페트롤륨 에터(30-60℃): 에틸 포름산염: 포름산(15:5:1)(상부층)

탐지:

공기에서 현상판을 건조시키고, UV 254nm하에서 판을 관찰하면, 시험 용액의 TLC 크로마토그램에서 얻은 암적색 점은 Rf 0.14에서 기준 용액의 점의 위치 및 색과 상응한다.

ii) HPLC 분석

장비: 물 HPLC 시스템, LC 600 펌프 및 UV 검출기(모델 486).

컬럼 : 스페리소브 S100Dsl, 25cm x 4.6mm

컬럼 온도: 25℃

유속: 1.0ml/min

검출 파장: UV250_nm

이동상 : 메탄올:물(13:7)

CRS 용액의 제조: 50ml 갈색 플라스크에 15mg의 스치산드롤 A를 정확하게 계량하고 ml 당 0.3mg 스치산드롤 A를 가진 용액을 제조하기 위해 메탄올로 용해한다.

시험 용액들의 제조:

플라스크에 0.25g의 원료 분말(No.3 체 통과)을 놓고, 8ml의 메탄올을 첨가하고 20분 동안 초음파하에서 처리(전원 250w, 주파수 20kHz)한다. 메탄올을 첨가하고, 잘 혼합하고 여과한다.

주입량: 10㎕의 CRS 용액과 10㎕의 시험 용액을 각각 주입한다.

결과: 도 8와 9의 크로마토그램을 참조. 도 8(BDS)는 적어도 약 14/15분의 잔류 시간에서 스치산드롤 A를 포함하는 적어도 6개의 확인할 수 있는 피크들을 보여준다. 그래프 아래 영역은 적어도 2 중량%의 스치산드롤 A의 비율을 나타낸다. 도 9 크로마토그래피는 마커만을 가진 대조표준이다.

스치산드롤 A 함량에 대한 상세내용(% w/w)	결과(% w/w)
>2.0	2.4

본 발명의 내용 중에 있음

Claims

(a) 엉겅퀴(Silybum marianum)의 열매;

(b) 몽고 황기(Astragalus membranaceus var mongholicus) 또는 넓은묏황기(Hedysarum polybotrys)의 뿌리;

(c) 샐비어(Salvia miltiorrhiza, Salvia bowleyana 또는 Salvia przewalskii)의 뿌리; 및

(d) 오미자(Schisandra chinensis 또는 Schisandra sphenanthera)의 열매로부터의 식물성 원료들, 식물성 약물들 또는 식물성 성분들로 필수적으로 이루어진 C형 간염 환자의 치료 또는 C형 간염 환자에 사용하기 위한 식물성 약제 또는 식이 보충제.
제 1 항에 있어서,

각 종들은 식물성 원료들 또는 식물성 성분들의 전체 중량에 비례한 다음 양으로 존재하는 식물성 약제 또는 식이 보충제:

(a) 22-48%의 엉겅퀴;

(b) 20-60%의 황기 또는 넓은묏황기;

(c) 13-48%의 샐비어; 및

(d) 2-19%의 오미자 종.
제 2 항에 있어서,

각 종들은 다음 양으로 존재하는 식물성 약제 또는 식이 보충제:

(a) 30-40%의 엉겅퀴;

(b) 20-30%의 황기 또는 넓은묏황기;

(c) 20-30%의 샐비어; 및

(d) 7.5-15%의 오미자.
제 2 항 또는 제 3 항에 있어서,

각 종들은 다음 양으로 존재하는 식물성 약제 또는 식이 보충제:

(a) 35.3% 이상 또는 10% 이하의 엉겅퀴;

(b) 26.5% 이상 또는 10% 이하의 황기 또는 넓은묏황기;

(c) 26.5% 이상 또는 10% 이하의 샐비어; 및

(d) 11.7% 이상 또는 10% 이하의 오미자.
제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,

식물성 약물들로 필수적으로 이루어진 식물성 약제.
제 5 항에 있어서,

부형제들을 더 포함하는 식물성 약제.
제 5 항에 있어서,

식물성 약물들은 각각의 식물성 원료들로부터 유도된 전체 추출물들을 포함하는 식물성 약제.
제 5 항에 있어서,

식물성 약물들은 각각의 식물성 원료들로부터 유도된 하나 이상의 정의된 추출물 부분을 포함하는 식물성 약제.
제 5 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서,

식물성 약물들은 표준 추출물들인 식물성 약제.
제 9 항에 있어서,

엉겅퀴로부터의 식물성 약물은 실리빈(silybin)의 마커에 대해 표준화된 식물성 약제.
제 9 항에 있어서,

엉겅퀴로부터의 식물성 약물은 HPLC 방법으로 계산했을 때 적어도 30중량%의 실리빈과 아이소실리빈을 포함하는 식물성 약제.
제 9 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,

엉겅퀴의 표준 추출물은

(i) HPLC에 의해 30% 만큼의 실리빈;

(ii) 펜테인에 용해되는 불과 0.5%;

(iii) 불과 1%의 황산회분 함량;

(iv) 불과 100ppm의 중금속 함량;

(v) 불과 1% 에탄올, 불과 0.01% 에틸 아세트산 및 불과 0.01% 헥세인의 잔류 유기 용매 함량;

(vi) 불과 1000 cfu/g의 박테리아 함량; 및

(vii) 불과 1000 cfu/g의 곰팡이 함량을 가진 황갈색 분말인 식물성 약제.
제 9 항에 있어서,

황기로부터의 식물성 약물은 아스트라갈로사이드 IV의 마커에 대해 표준화된 식물성 약제.
제 13 항에 있어서,

황기로부터의 식물성 약물은 HPLC 방법으로 계산했을 때 적어도 0.4 중량% 아스트라갈로사이드 IV를 포함하는 식물성 약제.
제 13 항 또는 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서,

황기로부터의 식물성 약물은 도 1에 실질적으로 도시된 것과 같은 TLC 크로 마토그래프 핑거프린트 또는 도 4에 실질적으로 도시된 것과 같은 HPLC 핑거프린트를 갖는 식물성 약제.
제 13 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,

황기의 표준 추출물은

(i) 0.4% 만큼의 아스트라갈로사이드 IV;

(ii) 불과 5%의 전체 회분 함량;

(iii) 불과 2%의 산 불용성 회분 함량; 및

(iv) 불과 1000 cfu/g의 미생물 전체 생리 호기성 세균의 수를 가진 식물성 약제.
제 9 항에 있어서,

샐비어로부터의 식물성 약물은 탄시논 IIA의 마커에 대해 표준화된 식물성 약제.
제 17 항에 있어서,

샐비어로부터의 식물성 약물은 HPLC 방법에 의해 계산된대로 탄시논 IIA의 적어도 1.5중량%를 포함하는 식물성 약제.
제 17 항 또는 제 18 항에 있어서,

샐비어로부터의 식물성 약물은 도 2에 실질적으로 도시된 것과 같은 TLC 크로마토그래프 핑거프린트 또는 도 6에 실질적으로 도시된 것과 같은 HPLC 핑거프린트를 갖는 식물성 약제.
제 17 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항에 있어서,

샐비어의 표준 추출물은

(i) HPLC에 의해 1.5% 만큼의 탄시논 IIA;

(ii) 불과 5%의 전체 회분 함량;

(iii) 불과 2%의 산 불용성 회분 함량; 및

(iv) 불과 100 cfu/g의 미생물 전체 생리 호기성 세균의 수를 가진 암적색 분말인 식물성 약제.
제 9 항에 있어서,

오미자로부터의 식물성 약물은 스치산드롤 A의 마커에 대해 표준화된 식물성 약제.
제 21 항에 있어서,

오미자로부터의 식물성 약물은 HPLC 방법에 의해 적어도 2.0 중량5 스치산드롤 A를 포함하는 식물성 약제.
제 21 항 또는 제 22 항에 있어서,

오미자로부터의 식물성 약물은 도 3에 실질적으로 도시된 것과 같은 TLC 크로마토그래프 핑거프린트 또는 도 8에 실질적으로 도시된 것과 같은 HPLC 핑거프린트를 갖는 식물성 약제.
제 22 항 또는 제 23 항에 있어서,

오미자의 표준 추출물은

(i) 2.0% 만큼의 스치산드롤 A;

(ii) 불과 5%의 전체 회분 함량;

(iii) 불과 2%의 산 불용성 회분 함량; 및

(iv) 불과 1000 cfu/g의 미생물 전체 생리 호기성 세균의 수를 가진 암적색 분말인 식물성 약제.
제 9 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 있어서,

각각의 표준 추출물은 마른 에탄올 추출물인 식물성 약제.
제 9 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항에 있어서,

엉겅퀴는 도 10에 실질적으로 도시된 방법에 따라 추출된 식물성 약제.
제 9 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항에 있어서,

황기는 도 11에 실질적으로 도시된 방법에 따라 추출된 식물성 약제.
제 9 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항에 있어서,

샐비어는 도 12에 실질적으로 도시된 방법에 따라 추출된 식물성 약제.
제 9 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항에 있어서,

오미자는 도 13에 실질적으로 도시된 방법에 따라 추출된 식물성 약제.
제 9 항 내지 제 29 항 중 어느 한 항에 있어서,

단위 제형으로 제공되는 식물성 약제.
제 30 항에 있어서,

현탁액 분말 혼합물인 식물성 약제.
제 31 항에 있어서,

부형제로서:

a) 100 중량% 입자들이 60 메시 체를 통과하고, 95 중량% 입자들이 80 메시 체를 통과하고 70 중량% 입자들이 200 메시 체를 통과하는 입자 크기 분포를 가진 적어도 하나의 잔탄 검을 포함하는 하나 이상의 젤란트 또는 점증제,

b) 하나 이상의 충전제; 및

c) 하나 이상의 습윤제 및/또는 계면활성제를 더 포함하는 식물성 약제.
제 32 항에 있어서,

잔탄 검은 3.5 내지 4.0 x 10⁶의 분자량을 갖는 식물성 약제.
제 32 항에 있어서,

습윤제는 폴리에틸렌 글리콜 또는 마크로골인 식물성 약제.
제 30 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,

하나 이상의 분해제, 윤활제, 스위트닝제, 향산료 및 점성화제를 더 포함하는 식물성 약제.
제 30 내지 제 35 항 중 어느 한 항에 있어서,

향주머니에 포장되는 식물성 약제.
제 30 항 내지 제 36 항 중 어느 한 항에 있어서,

분배 용기로 포장되는 식물성 약제.
제 37 항에 있어서,

분산 용기는 밀폐형 뚜껑을 가진 식물성 약제.
제 9 항 내지 제 38 항 중 어느 한 항에 있어서,

i) 엉겅퀴로부터의 식물성 약물의 0.200g 내지 0.250g(식물성 원료의 12g 내지 15g과 동일)

ii) 몽고 황기로부터의 식물성 약물의 0.585g 내지 1.95g(식물성 원료의 9g 내지 30g과 동일)

iii) 샐비어로부터의 식물성 약물의 0.225g 내지 0.375g(식물성 원료의 9g 내지 15g과 동일)

iv) 오미자로부터의 식물성 약제의 0.150g 내지 0.600g(식물성 원료의 1.5g 내지 6g과 동일)의 단위 복용량 포함하는 식물성 약제.
제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 따른 식물성 약제 또는 식이 보충제 또는 제 5 항 내지 제 39 항 중 어느 한 항에 따른 식물성 약제를 환자에게 투여하는 것을 포함하여 간염, 특히 C형 간염의 증상을 감소 또는 완화하거나 건강한 간 기능을 유지하기 위해 환자를 치료하는 방법.
간염, 특히 C형 간염의 증상을 감소 또는 완화하거나 건강한 간 기능을 유지하기 위해 다른 약제를 혼합되는 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 따른 식물성 약제 또는 식이 보충제 또는 제 5 항 내지 제 39 항 중 어느 한 항에 따른 식물성 약제의 용도.
제 41 항에 있어서,

다른 약제는 인터페론인 용도.
식물성 원료들, 식물성 약물들 또는 식물성 성분들의 전체 중량에 비례한:

(a) 22% 만큼의 엉겅퀴;

(b) 20% 만큼의 황기 또는 넓은묏황기;

(c) 13% 만큼의 샐비어; 및

(d) 2% 만큼의 오미자의 중량% 양으로

(a) 엉겅퀴(Silybum marianum)의 열매;

(b) 몽고 황기(Astragalus membranaceus var mongholicus) 또는 넓은묏황기(Hedysarum polybotrys)의 뿌리;

(c) 샐비어(Salvia miltiorrhiza, Salvia bowleyana 또는 Salvia przewalskii)의 뿌리; 및

(d) 오미자(Schisandra chinensis 또는 Schisandra sphenanthera)의 열매로부터의 식물성 원료들, 식물성 약물들 또는 식물성 성분들을 포함하는 C형 간염 환자의 치료 또는 C형 간염 환자에 사용하기 위한 식물성 약제 또는 식이 보충제
제 43 항에 있어서,

각 종들은 식물성 원료들, 식물성 약물들 또는 식물성 성분들의 전체 중량에 비례하는

a) 22% 만큼의 엉겅퀴;

(b) 20% 만큼의 황기 또는 넓은묏황기;

(c) 13% 만큼의 샐비어; 및

(d) 2% 만큼의 오미자의 중량% 양으로 존재하는 식물성 약제 또는 식이 보충제.