CN103901154B - 一种治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法，属于中药技术领域，它包括麦冬的薄层鉴别、五味子的薄层鉴别和甘草的薄层鉴别。本发明提供治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法，对治疗糖尿病的中药制剂质量标准进行了提高、完善，与现行标准相比，增加了麦冬、甘草、五味子的薄层鉴别方法，该方法操作简便、精密度和灵敏度高、稳定性好，为其安全合理用药提供实验依据，确保了产品质量的安全、均一、稳定、有效、可控。

Description

一种治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法。

背景技术

糖尿病（diabetes）是一种常见的内分泌代谢性疾病。糖尿病患者的症状如：多饮、多尿、多食、消瘦等症状，严重者发生酮症酸中毒及昏迷，且糖尿病因长期高血糖等而导致动脉化和微血管病变，较早的发生严重的心、脑、肾、眼、神经、皮肤等器官受损，出现相应脏器的症状和体征。糖尿病常因机体免疫力和防御机能下降，易合并皮肤粘膜及软组织感染性疾病（疖、痈、蜂窝组织炎、坏疽）、呼吸道感染（肺炎、肺结核），真菌等感染而出现相应的症状及体征。糖尿病的确诊标准为：空腹血糖≥7.0mmol/L（126mg/dl），任何时候血糖≥11.1mmol/L（200mg/dl）可确诊为糖尿病。空腹血糖为临界值时，口服葡萄糖耐量实验（OGTT），即服糖后2小时内血糖≥11.1mmol/L（200mg/dl）。

现有治疗糖尿病的药物中，玉泉丸是临床治疗糖尿病的较佳药物。玉泉丸主治养阴生津，止渴除烦，益气和中。用于治疗因胰岛功能减退而引起的物质代谢、碳水化合物代谢紊乱，血糖升高至糖尿病（亦陈消渴症）。玉泉丸处方源于宋代医家杨士瀛《仁斋直指》卷十七（消渴）中的名方“天花散”，后在明代医家龚信编著的“《古今医鉴》卷之十（消渴）中名为“玉泉散”，晚清名医陆士谔编著的《叶天士手集秘方》中亦名为“玉泉散”。方中以粉葛生津止渴，主消渴，为君药；天花粉、地黄滋阴清热，生津止渴，为臣药；麦冬清肺养阴，益胃生津，适用于肺胃气阴不足，舌干口燥，又能清心除烦，为佐药；五味子益气生津，宁心止烦渴，全方等药配合功能养阴生津、止渴除烦、益气和中，适用于消渴病，肺胃阴亏，热病后期。经过几百年的沉淀与积累和发展，它采用地道全天然中药材，经现代化制药工艺精制而成，凝聚了百年祖国医学临床行医用药之经验和心血。

现有市售的玉泉丸由粉葛、天花粉、地黄、麦冬、五味子、甘草组成，在临床应用多年，其疗效不容置疑，但对于玉泉丸的中药制剂的质量控制，现行国家标准仅对葛根素进行了薄层鉴别，显然，对于由6味植物药组成的复方，检测手段过于简单，相对于目前中药产品质量控制的要求有较大的差距。故现有质量控制方法不能有效控制治疗糖尿病的中药制剂的质量，从而影响产品的生产和保证质量。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法，该方法操作简便、精密度和灵敏度高、稳定性好，旨在完善治疗糖尿病的中药制剂的质量标准，为其安全合理用药提供实验依据，确保了治疗糖尿病的中药制剂质量的安全、均一、稳定、有效、可控。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：

本发明的治疗糖尿病的中药制剂玉泉丸是由以下重量份的原料组成：

地黄：17～23份、麦冬：12～18份、五味子：4～6份、粉葛：19～23份、天花粉：15～19份、甘草：5～7份。

玉泉丸的制法为：以上六味药，粉葛、天花粉和甘草粉碎成粗粉；地黄、麦冬和五味子加水煎煮三次，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏，加入上述粗粉，搅匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水制丸，干燥，以药用炭包衣，打光，即得。

观察性状：本品为黑色的包衣浓缩丸，除去包衣后显黄褐色至黑褐色；气微，味苦、甜。

上述治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法，它包括麦冬鉴别、五味子鉴别和甘草鉴别：

（1）麦冬鉴别：取待鉴定的药品4～6g，研细，加乙醚28～32ml，回流55～65min，放冷，滤过，弃去乙醚液，残渣加水25～35ml，盐酸1.8～2.4ml，加热回流55～65min，放冷，滤过，用乙醚提取2～3次，分取乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷0.8～1.2ml使残渣溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材0.6～1.2g，同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各2～6μl，分别点于同一薄层板上，以三氯甲烷-丙酮为展开剂展开，展开后取出晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热薄层板至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（2）五味子鉴别：取待鉴定的药品8～12g，研细，加甲醇28～32ml，加热回流55～65min，滤过，滤液蒸干，残渣用氢氧化钠溶液15～25ml溶解，用乙酸乙酯提取2～3次，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇0.8～1.2ml使残渣溶解，作为供试品溶液；另取五味子对照药材0.8～1.2g，同法制成对照药材溶液；再取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含0.8～1.2mg的溶液作为对照品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液各4～10μl，分别点于同一薄层板上，石油醚-甲酸乙酯-甲醇为展开剂展开，展开后取出、晾干，置254nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（3）甘草鉴别：取待鉴定的药品3～7g，研细，加甲醇28～35ml，加热回流55～65min，滤过，滤液蒸干，残渣加水22～30ml使其溶解，用乙酸乙酯提取2～3次，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇0.8～1.2ml溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材0.8～1.2g，同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各4～10μl，分别点于同一薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂展开，展开后取出、晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热薄层板至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

进一步地，所述三氯甲烷与丙酮的体积比为3～5:1。

进一步地，所述石油醚、甲酸乙酯、甲醇的体积比为13～18:3～7:0.2～0.5。

进一步地，所述乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸、水的体积比为13～18:0.8～1.2:0.8～1.2:1.8～2.2。

进一步地，所述硫酸乙醇的浓度为8～12%。

进一步地，所述甲醇的浓度为65～75%，氢氧化钠的浓度为0.08～0.12mol/L。

进一步地，所述薄层板的加热温度为102～108℃。

进一步地，所述石油醚的沸程为30～60℃。

本发明具有以下优点：本发明提供的治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法，对治疗糖尿病的中药制剂质量标准进行了提高、完善，与现行标准相比，增加了麦冬、甘草、五味子的薄层鉴别方法，该方法操作简便、精密度和灵敏度高、稳定性好，为其安全合理用药提供实验依据，确保了治疗糖尿病的中药制剂质量的安全、均一、稳定、有效、可控。

附图说明

图1为麦冬薄层鉴别图；

图2为不同薄层板的麦冬薄层鉴别图（烟台板、青岛板）；

图3为麦冬高温环境展开示意图（温度：15.0℃，湿度：81%）；

图4为麦冬低温环境展开示意图（温度：9.0℃，湿度：35%）；

图5为不同薄层板的五味子薄层鉴别图（烟台板、青岛板）；

图6为五味子高温环境展开示意图（温度：14.0℃，湿度：81%）；

图7为五味子低温环境展开示意图（温度：9.0℃，湿度：52%）；

图8为五味子薄层鉴别图；

图9为不同薄层板的甘草薄层鉴别图（HSG薄层板、墨克板）；

图10为不同薄层板的甘草薄层鉴别图（HSG薄层板、烟台板）；

图11为甘草高温环境展开示意图（温度：16.0℃，湿度：85%）；

图12为甘草低温环境展开示意图（温度：8.2℃，湿度：54%）；

图13为甘草薄层鉴别图。

具体实施方式

下面结合附图及实施例对本发明做进一步的描述，本发明的保护范围不局限于以下所述：

实施例1：制备玉泉丸

处方：地黄：20份、麦冬：16份、五味子：5份、粉葛：20份、天花粉：17份、甘草：6份。

玉泉丸的制法为：以上六味药，粉葛、天花粉和甘草粉碎成粗粉；地黄、麦冬和五味子加水煎煮三次，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏，加入上述粗粉，搅匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水制丸，干燥，以药用炭包衣，打光，即得。

实施例2：上述治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法，它包括麦冬鉴别、五味子鉴别和甘草鉴别：

（1）麦冬鉴别：取本品4g，研细，加乙醚28ml，回流55min，放冷，滤过，弃去乙醚液，残渣加水25ml，盐酸1.8ml，加热回流55min，放冷，滤过，用乙醚振摇提取2次，每次18ml，分取乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷0.8ml使残渣溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材0.6g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮为展开剂展开，三氯甲烷与丙酮的体积比为3:1，展开后取出晾干，喷以8%硫酸乙醇溶液，在102℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（2）五味子鉴别：取本品8g，研细，加65%甲醇28ml，加热回流55min，滤过，滤液蒸干，残渣用0.08mol/L的氢氧化钠溶液15ml溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次18ml，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇0.8ml使残渣溶解，作为供试品溶液；另取五味子对照药材0.8g，同法制成对照药材溶液；再取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含0.8mg的溶液作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液各4μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚-甲酸乙酯-甲醇为展开剂展开，石油醚的沸程为30～60℃，石油醚、甲酸乙酯、甲醇的体积比为13:3:0.2，展开后取出、晾干，置254nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（3）甘草鉴别：取本品3g，研细，加甲醇28ml，加热回流55min，滤过，滤液蒸干，残渣加水22ml使其溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇0.8ml溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材0.8g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各4μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂展开，乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸、水的体积比为13:0.8:0.8:1.8，展开后取出、晾干，喷以8%硫酸乙醇溶液，在102℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

实施例3：上述治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法，它包括麦冬鉴别、五味子鉴别和甘草鉴别：

（1）麦冬鉴别：取本品6g，研细，加乙醚32ml，回流65min，放冷，滤过，弃去乙醚液，残渣加水35ml，盐酸2.4ml，加热回流65min，放冷，滤过，用乙醚振摇提取3次，每次24ml，分取乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1.2ml使残渣溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材1.2g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮为展开剂展开，三氯甲烷与丙酮的体积比为5:1，展开后取出晾干，喷以12%硫酸乙醇溶液，在108℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（2）五味子鉴别：取本品12g，研细，加75%甲醇32ml，加热回流65min，滤过，滤液蒸干，残渣用0.12mol/L的氢氧化钠溶液25ml溶解，用乙酸乙酯提取3次，每次22ml，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1.2ml使残渣溶解，作为供试品溶液；另取五味子对照药材1.2g，同法制成对照药材溶液；再取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含1.2mg的溶液作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚-甲酸乙酯-甲醇为展开剂展开，石油醚的沸程为30～60℃，石油醚、甲酸乙酯、甲醇的体积比为18:7:0.5，展开后取出、晾干，置254nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（3）甘草鉴别：取本品7g，研细，加甲醇35ml，加热回流65min，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使其溶解，用乙酸乙酯提取3次，每次30ml，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1.2ml溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材1.2g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂展开，乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸、水的体积比为18:1.2:1.2:2.2，展开后取出、晾干，喷以12%硫酸乙醇溶液，在108℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

实施例4：上述治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法，它包括麦冬鉴别、五味子鉴别和甘草鉴别：

（1）麦冬鉴别：取本品5g，研细，加乙醚30ml，回流60min，放冷，滤过，弃去乙醚液，残渣加水30ml，盐酸2ml，加热回流60min，放冷，滤过，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，分取乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使残渣溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材0.8g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮为展开剂展开，三氯甲烷与丙酮的体积比为4:1，展开后取出晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在104℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（2）五味子鉴别：取本品10g，研细，加70%甲醇30ml，加热回流60min，滤过，滤液蒸干，残渣用0.10mol/L的氢氧化钠溶液20ml溶解，用乙酸乙酯提取3次，每次20ml，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使残渣溶解，作为供试品溶液；另取五味子对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液各6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚-甲酸乙酯-甲醇为展开剂展开，石油醚的沸程为30～60℃，石油醚、甲酸乙酯、甲醇的体积比为15:4:0.3，展开后取出、晾干，置254nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（3）甘草鉴别：取本品4g，研细，加甲醇30ml，加热回流60min，滤过，滤液蒸干，残渣加水26ml使其溶解，用乙酸乙酯提取3次，每次25ml，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各6μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂展开，乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸、水的体积比为15:1:1:2，展开后取出、晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在104℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

实施例5：上述治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法，它包括麦冬鉴别、五味子鉴别和甘草鉴别：

（1）麦冬鉴别：取本品6g，研细，加乙醚28ml，回流62min，放冷，滤过，弃去乙醚液，残渣加水33ml，盐酸2.2ml，加热回流62min，放冷，滤过，用乙醚振摇提取3次，每次19ml，分取乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1.1ml使残渣溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材0.8g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮为展开剂展开，三氯甲烷与丙酮的体积比为5:1，展开后取出晾干，喷以12%硫酸乙醇溶液，在106℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（2）五味子鉴别：取本品11g，研细，加65%甲醇30ml，加热回流62min，滤过，滤液蒸干，残渣用0.08mol/L的氢氧化钠溶液25ml溶解，用乙酸乙酯提取3次，每次20ml，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1.1ml使残渣溶解，作为供试品溶液；另取五味子对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含1.2mg的溶液作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液各8μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚-甲酸乙酯-甲醇为展开剂展开，石油醚的沸程为30～60℃，石油醚、甲酸乙酯、甲醇的体积比为16:6:0.5，展开后取出、晾干，置254nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（3）甘草鉴别：取本品6g，研细，加甲醇33ml，加热回流62min，滤过，滤液蒸干，残渣加水28ml使其溶解，用乙酸乙酯提取3次，每次28ml，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材1.2g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各8μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂展开，乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸、水的体积比为17:0.9:0.9:2，展开后取出、晾干，喷以12%硫酸乙醇溶液，在106℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

实施例6：薄层鉴别方法实验

一、样品的来源

玉泉丸由成都九芝堂金鼎药业有限公司提供（批号为：060302、060501、061001、070501、070901、070902、080501、081001、080302、090601、091203、090802、090404，且样品编号分别为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13）

二、样品的鉴别

1.麦冬的鉴别：

1.1供试品溶液的制备：取本品5g，研细，加乙醚30ml，回流60分钟，放冷，滤过，弃取醚液，残渣加水30ml、盐酸2ml，加热回流1小时，放冷，滤过，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，分取醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml，使溶解，作为供试品溶液。

1.2对照药材溶液的制备：取麦冬对照药材1g,同法制成对照药材溶液。

1.3阴性样品溶液制备：按处方配比，取除粉葛以外的其他药味按工艺制得丸剂，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。

1.4薄层条件：照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各2～6μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮(8：2)的溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

1.5实验结果：13批样品均检出麦冬。试验中，对该方法进行了耐用性试验。结果如图1、图2、图3、图4所示。

2.五味子的鉴别：

2.1供试品溶液的制备：取本品10g，研细，,加70%甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣用0.1mol/L的氢氧化钠溶液20ml溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，分取乙酸乙酯液，蒸干，用甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。

2.2对照品溶液制备：取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作为对照品溶液。

2.3对照药材溶液的制备：取五味子对照药材1g,同法制成对照药材溶液。

2.4阴性样品溶液制备：按处方配比，取除五味子以外的其他药味按工艺制得丸剂，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。

2.5薄层条件：照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VIB)试验，，吸取上述三种溶液各2～4μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（30-60oC）-甲酸乙酯-甲醇（15：5：0.3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。

2.6结果：13批样品均检出五味子醇甲、五味子。试验中，对该方法进行了耐用性试验。结果如图5、图6、图7、图8所示。

3.甘草的鉴别：

3.1供试品溶液的制备：取本品5g,研细，加甲醇30m，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，用水25ml溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次25ml，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。

3.2对照药材溶液的制备：取甘草对照药材1g，同法制成对照药材溶液。

3.3阴性样品溶液制备：按处方配比，取除甘草以外的其他药味按工艺制得丸剂，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。

3.4照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2～6μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15：1：1：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。置紫外灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

3.5结果：13批样品均检出甘草。试验中，对该方法进行了耐用性试验。结果如图9、图10、图11、图12、图13所示。

Claims (1)

1.一种治疗糖尿病的中药制剂的薄层鉴别方法，其特征在于，它包括麦冬鉴别、五味子鉴别和甘草鉴别：

（1）麦冬鉴别：取待鉴定的药品4～6g，研细，加乙醚28～32ml，回流55～65min，放冷，滤过，弃去乙醚液，残渣加水25～35ml，盐酸1.8～2.4ml，加热回流55～65min，放冷，滤过，用乙醚提取2～3次，分取乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷0.8～1.2ml使残渣溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材0.6～1.2g，同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各2～6μl，分别点于同一薄层板上，以体积比为3～5:1的三氯甲烷-丙酮为展开剂展开，展开后取出晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热薄层板至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（2）五味子鉴别：取待鉴定的药品8～12g，研细，加65～75%甲醇28～32ml，加热回流55～65min，滤过，滤液蒸干，残渣用氢氧化钠溶液15～25ml溶解，用乙酸乙酯提取2～3次，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇0.8～1.2ml使残渣溶解，作为供试品溶液；另取五味子对照药材0.8～1.2g，同法制成对照药材溶液；再取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含0.8～1.2mg的溶液作为对照品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液各4～10μl，分别点于同一薄层板上，以体积比为13～18:3～7:0.2～0.5的石油醚-甲酸乙酯-甲醇为展开剂展开，石油醚的沸程为30～60℃，展开后取出、晾干，置254nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（3）甘草鉴别：取待鉴定的药品3～7g，研细，加甲醇28～35ml，加热回流55～65min，滤过，滤液蒸干，残渣加水22～30ml使其溶解，用乙酸乙酯提取2～3次，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇0.8～1.2ml溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材0.8～1.2g，同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各4～10μl，分别点于同一薄层板上，以体积比为13～18:0.8～1.2:0.8～1.2:1.8～2.2的乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂展开，展开后取出、晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热薄层板至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

其中，所述硫酸乙醇的浓度为8～12%；氢氧化钠的浓度为0.08～0.12mol/L；所述薄层板的加热温度为102～108℃。