CN102078374A - 藏药异叶青兰提取物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明为藏药异叶青兰提取物及其应用，主要利用藏药异叶青兰，制备异叶青兰提取物，加入适当的辅料后制成胶囊。该提取物具有明显的镇咳功能，而且毒性较低。本发明药源丰富，制备工艺简单，价格低廉，使用安全方便。
Description
(一)技术领域
本发明为一种藏药异叶青兰药物组合物，主要涉及一种藏药异叶青兰有效部位提取物总黄酮及其在制备镇咳药物中的应用。
(二)背景技术
藏药异叶青兰Dracocephalum heterophyllum Benth.是国家部颁标准藏药收录的品种，藏药名为吉孜青保，为唇形科植物，多年生草本，生于高山和高原地区沙质河滩，砾石质山坡和高山草原等，分布于青海、甘肃、西藏等地，以全草入药，具有清热解毒等功效，用于肝炎，牙龈肿痛，出血，口腔溃疡，淋巴结炎，肺热咳嗽，流行性感冒等疾病。
陆曼，田暄等用水蒸气蒸馏法提取异叶青兰挥发油，并通过GC-MS对其进行分析，鉴定出86种成分[1]；秦波等采用毛细管气相色谱-质谱联用技术对异叶青兰挥发油化学成分进行了研究，经毛细管色谱分离出184多个峰，共确认了其中154种成分[2]；师炜，柴尔峰采用毛细管气相色谱-质谱联用法对异叶青兰低极性化学成分进行了分析研究，共鉴定出12种化学成分[3]；张春江等以GS-MS联用技术分析了异叶青兰挥发油化学成分及相对含量，分析鉴定结果表明，异叶青兰挥发油化学成分46.17％属单菇类，28.82％属倍半菇类[4]。上述几位研究者对异叶青兰所含化学成分进行了初步的功能归类，发现其中具有平喘，镇咳，祛痰，杀菌，抗病毒等功效的药用成分约占总量的50～60％以上。
咳嗽是一种神经性反射，目前最有效的镇咳药就是中枢神经抑制剂或者称为中枢神经阻断剂，包括阿片，可待因，吗啡等，它们虽然止咳效果非常显著，但容易成瘾。因此，毒副作用相对较低的天然药物成为寻找止咳药物的源泉。
中医目前用于治疗咳嗽的常见中药主要有通宣理肺丸，蛇胆陈皮散，牛黄蛇胆川贝散等，这些药物药味多，服用量大，服用不方便，且有的包含有动物药，使得生产成本相对较高，从而提高了市场价格，消费者不易接受。此外，常用的治疗咳嗽的中药常以丸剂，散剂，片剂，胶囊，口服液等剂型为主，其中的固体剂型有不经提取直接以生药粉入药，使药物的有效期短，不易存放；有的口服液存在着药物含量低，服用量大，服用剂量不准确且携带不方便等不足之处。另外，许多常见镇咳中药受传统组方的制约，使得中药制剂内含成分复杂，重金属和有害物质超标，严重阻碍了中药的国际化。
为了克服现有镇咳药物的技术缺陷，本发明提供了一种具有显著镇咳作用的藏药异叶青兰提取物，主要涉及藏药异叶青兰有效部位提取物-总黄酮及其在制备镇咳药物中的应用。实验证明提取物镇咳药效显著，而且制备的药物成分简单、毒性低，质量容易控制，有效成分含量高，药物有效期长，服用量小，制备工艺简单、成本低，可以方便的制成各种剂型。
参考文献
1、陆曼，田暄，异叶青兰挥发油成分分析，药学学报1999，34：925～927
2、秦波等，异叶青兰挥发性化学成分研究，天然产物研究与开发2000，12：4～11
3、师炜，柴尔峰异叶青兰低极性成分分析，甘肃教育学院学报(自然科学版)2000年10月，14(4)
4、张春江藏药抗菌抗病毒作用及机制研究，兰州大学博士学位论文
(三)发明内容
本发明的技术方案包括异叶青兰有效部位提取物-总黄酮的提取以及总黄酮在制备镇咳药物中的应用
本发明的有效部位提取物为总黄酮。提取过程为：粉碎的干燥异叶青兰全草，加入适量水乙醇混合溶剂进行超声循环提取，醇可以是甲醇、乙醇，醇为20％～100％(体积比)。常压或减压浓缩提取液，收集提取液，4℃离心除杂，上清液减压浓缩至相对密度1.1～1.4后冷冻干燥，总黄酮含量不低于20％(重量比)，备用。本发明中提取还可以是回流、浸渍、渗漉、微波提取；干燥也可以是喷雾干燥、微波干燥等，这是本领域技术人员所能理解的。
得到的异叶青兰有效部位提取物-总黄酮与药学上可接受的载体组合，制备成各种药物剂型，如胶囊、滴丸、片剂、颗粒剂、口服液、喷雾剂、气雾剂等传统制剂，以及分散片、泡腾片、微囊等药物新制剂，这些制剂的制备是本领域的技术人员所能理解的，制剂中总黄酮含量不低于10％(重量比)。
本发明的优点在于：与市场上广泛应用的止咳药咳必清比较，镇咳药效显著，而且制备的药物成分简单、质量容易控制，有效成分含量高，药物有效期延长，服用量小，无重金属和有害物质，制备工艺简单、成本低，可以方便的制成各种剂型。
(四)具体实施方式：
实施例一异叶青兰提取物-总黄酮的提取方法
称取经粉碎的干燥异叶青兰全草，加入适量水醇混合溶剂进行超声循环提取，水醇混合溶剂中的醇可以是甲醇、乙醇，醇为20％～100％(体积比)。常压或减压浓缩提取液，收集提取液，4℃离心除杂，上清液减压浓缩至相对密度1.1～1.4后冷冻干燥，总黄酮含量不低于20％(重量比)，备用。本工艺中是以超声循环提取为例，还可以是回流、浸渍、渗漉、微波提取；以减压浓缩和冷冻干燥为例，也可以是喷雾干燥、微波干燥等，这是本领域技术人员所能理解的。
实施例二异叶青兰提取物-总黄酮的定量
本发明的异叶青兰有效部位提取物为总黄酮，总黄酮测定方法采用2005版《中华人民共和国药典》，以芦丁为标样，采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法，显色后在500nm处测定吸光度，得出提取物中总黄酮含量。
实施例三异叶青兰提取物胶囊的制备
异叶青兰总黄酮提取物和辅料混匀，混合比例为20～50∶80～50(重量比)。过筛，喷以65％～90％(体积比)乙醇进行湿法制粒，过筛，70℃烘干，整粒，装胶囊，即得胶囊成品，总黄酮含量不低于10％(重量比)；辅料为淀粉(符合《中华人民共和国药典》2005年版二部780页淀粉项下规定)。本发明以胶囊剂为例，还可以方便地实现异叶青兰提取物与相应载体组合而制备成各种药物剂型，如滴丸、片剂、分散片、颗粒剂、口服液，喷雾剂、外用制剂等，这是本领域的技术人员所能理解的。
实施例四异叶青兰提取物的药效
参考《中药药理研究方法学》(陈奇主编，人民卫生出版社出版，2000年7月第1版第4次印刷，636-637页)的小鼠咳嗽模型来验证本镇咳药的药效。将50只健康昆明种小鼠，体重18～22g，♀♂各半，随机分为阴性对照组，高、中、低剂量给药组，阳性对照组。各组均于末次给药(胶囊重，总黄酮含量)后1h，将小鼠放入密闭容器中，恒压将25％～28％(体积比)氨水喷入容器中，观察和记录小鼠的咳嗽潜伏期并分别倾听并记录1min内小鼠咳嗽的次数，进行组间显著性差异比较(各数值为平均值±标准差)，结果如表1。
表1.异叶青兰提取物的镇咳作用
| 组别 | 用药剂量(g/kg) | 实验例数(只) | 咳嗽潜伏期(s) | 咳嗽次数(次/min) |
| 空白 | - | 10 | 42.625±17.784 | 41.75±3.37 |
| 咳必清 | 0.05 | 10 | 98.000±10.677* | 41.20±4.97 |
| 胶囊内容物 | 0.30(按黄酮计：0.043) | 10 | 76.000±21.340* | 30.12±4.91 |
| 0.60(按黄酮计：0.087) | 10 | 85.778±26.701* | 19.90±4.84 | |
| 1.20(按黄酮计：0.173) | 10 | 90.000±20.040* | 12.55±3.28 |
结果显示，高、中、低剂量受试中药均能明显减少氨水刺激豚鼠引致的咳嗽次数，与阴性对照组比较有显著性差异，表明异叶青兰具有明显的镇咳作用。
实施例五异叶青兰提取物的的毒性
参考中华人民共和国卫生部药政局《中药新药研究指南》。预试验后，取健康昆明种小鼠50只，体重18～22g，雌雄各半。按随机分组原则，将实验动物分成5组，每组10只。试验前禁食(不禁水)12小时，各组均一次灌胃给药0.3ml/10g。观察14天日。
给药后即见小鼠活动减少，并开始有动物死亡，逐日记录各组动物死亡数。死亡动物与其性别无明显相关性。存活动物毛皮光滑，饮食、大小便正常，眼、鼻无分泌物，粘膜无充血。呼吸、心跳正常。死亡小鼠及时尸检，肉眼未见心、肝、脾、肺、肾等脏器的异常改变。各组连续观察14日，计算各组动物死亡总数，按改良寇氏法计算小鼠的LD50及其95％的可信限。
经急性毒性试验结果表明，灌胃给药的LD50为76.037g生药/kg体重，95％可信限为67.547g生药/kg体重～85.673g生药/kg体重。
Claims (5)
1.一种藏药异叶青兰药物提取物，其特征在于：提取物为总黄酮浸膏粉末，可由以下方式获得：取异叶青兰全草，用一定比例的水、醇混合溶剂提取，常压或减压浓缩提取液，得到浓缩液，微波干燥或冻干即得，其中总黄酮含量不低于20％(重量比)。
2.根据权利要求1所述的一种藏药异叶青兰药物提取物，其特征在于：提取总黄酮浸膏粉末所用的水、醇混合溶剂中的醇可以是甲醇、乙醇，醇为20％～100％(体积比)。常压或减压浓缩提取液，得到浓缩液，微波干燥或冻干即得。
3.根据权利要求1所述的一种藏药异叶青兰药物提取物，其特征在于：提取总黄酮浸膏粉末所用的提取方法还可以是煎煮、回流、浸渍，渗漉、微波提取或超声提取。
4.根据权利要求1至3任意一项所述的所述的一种藏药异叶青兰药物提取物，其特征在于：总黄酮浸膏粉末可用在制备具有镇咳作用的药物中应用。
5.根据权利要求1至4任意一项所述的所述的一种藏药异叶青兰药物提取物，其特征在于：异叶青兰总黄酮浸膏粉末可以与相应载体组合而制备成胶囊、滴丸、片剂、分散片、颗粒剂、口服液，喷雾剂、外用制剂等。
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