KR20060099192A - 항산화물질을 함유하는 식물체분말 또는 추출물을 포함하는가축사료첨가제조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 항산화물질을 함유하는 식물체분말 또는 추출물을 포함하는 가축사료첨가제조성물에 관한 것으로, 항산화물질을 함유하는 식물체분말 또는 추출물을 가축사료에 일정량 혼합처리한 후 가축의 혈액순환 및 간기능을 개선시키고, 항균 및 항염증 효과를 가짐을 확인함으로써 가축의 혈액순환, 간기능 개선, 항균, 항염증 효과가 있는 사료첨가제조성물을 제공할 수 있는 매우 뛰어난 효과가 있다.
항산화, 가축사료, 사료첨가제, 분뇨냄새, 혈액순환 개선, 간기능 개선

Description

항산화물질을 함유하는 식물체분말 또는 추출물을 포함하는 가축사료첨가제조성물{A composition for feed additive comprising plant powder or extracts containing antioxidant materials}
본 발명은 항산화물질을 함유하는 식물체분말 또는 추출물을 포함하는 가축사료첨가제에 관한 것으로 더욱 상세하게는, 항생제 과다 남용에 따른 여러 가지 폐해를 줄이기 위해 항산화물질을 포함하는 식물체 추출물이나 분말을 첨가한 가축사료첨가제 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
현재 가축 생산과정에서 발생하는 악취, 항생제 과다 사용에 의한 질병저항성 저하 및 빈번한 설사병 발생 등이 크게 문제가 되고 있다.
또한 웰빙 유행에 따라 소비자 욕구가 너무 많은 지방질이 포함된 고기를 기피하는 경향이 증가할 것으로 예상되어, 약간 저지방 고급육 생산기술이 요구될 것으로 예상된다.
본 발명자들은 오랫동안 동물 및 사람에게 있어서 지질대사 개선, 지방간형성 억제, 심장병 예방, 당뇨병 예방 등에 효능이 있는 식물체 분말 및 추출물에 관해 연구해 왔다.
이들은 주로 식물체에 포함된 바이오후라보노이드 물질 및 폴리페놀계 물질 등에 의한 것이다. 바이오후라보노이드 물질들과 폴리페놀 물질은 일반적으로 강한 항산화제로 작용하여 동물이나 사람의 몸속에서 대사 과정 중에 발생하는 유해한 활성산소를 중화시키는 작용을 하는 것으로 알려져 있다. 이들의 섭취가 이에 따라 항균작용, 항암작용, 항바이러스작용, 항염증작용, 심장병예방, 혈액순환개선, 간기능개선, 당뇨병예방에 도움이 된다고 알려져 있다(①Pier-Giorgio pietta. "Flavonoids as Antioxidants." J. Nat. Prod. 2000, 63, 1035~1042; ②Hertog, M. G. L.; Katan, M. B. " In Flavonoids in health and Disease.": Rice-Evans, C.A., Packer, L., Eds.; Marcel dekker: New Yourk, 1998, 447~467; ③Koo Hui Miean, Suhaila Mohamed. "Flavonoid (myricetin, quercetin, Kaempferol, Luteolin, and Apigenin) Content of Edible Tropical Plants." J. Agric. Food Chem. 2001, 49, 3106~3112; ④Yoshida, M.; Sakai, T.; Hosokawa, N.; Marui, N.; Matsumoto, K.; Akihiro, F.; Nishino H.; Aoije, A. "The effect of quercetin on cell cycle progression and growth of human gastric cancer cells." FEBS Lett. 1990, 10~13; ⑤Hollman, P. C. H.; Van Trijp, J. M. P.; Buysman, M. N. C. P.; Gaag, M. S. v.d.; Mengelers, M. J. B.; De vries, J. H. M.; Katan, M. B. "Relative bioavailability of the antioxidant flavonoid quercetin from various foods in man." FEBS Lett. 1997,418,152~156; ⑥Larson, R. L. "The antioxidants of higher plants." phytochemistry 1988, 4, 969~978).
따라서, 이들 바이오후라보노이드나 폴리페놀계 물질을 섭취하면 가축에게 있어서 병원균의 생육 억제, 질병 유발 바이러스 억제, 항염증작용(면역성증가), 혈액순환개선, 심장 및 간기능 개선에 효과가 있을 것이다.
본 발명자들은 감귤류유래 바이오후라보노이드를 이용하여 쥐와 사람에게 투여한 결과 고지혈증예방, 동맥경화예방, 간기능개선, 그리고 당대사 개선(당뇨병예방)을 확인하여 동물이나 사람의 심장과 간기능이 개선됨을 확인하였다.
본 발명자들은 오랫동안 항비만 및 고지혈증 예방용 식물 추출물 및 식물분말에 관해 연구해왔다. 또한 감귤류 과피속의 바이오후라보노이드류를 추출하여 동물이나사람에게 먹일 경우 고지혈증, 동맥경화증등을 예방하고 혈중 지방의 산화를 억제함을 확인하였다(①복성해, 현병화, 정태숙, 이철호, 최양규, 권용국, 이은숙, 이새봄, 박용배, 김효수, 최성준, 최명숙, 박용복, 1998, 감귤류 유래 바이오프라보노이드를 이용한 신규 항고지혈증 및 항동맥경화증 제제 개발. J. Kor. Soc. Arteriosclerosis & Vascular Biol. 1:5-33; ②최성준, 김효수, 정태숙, 복성해, 박영배. 1998, 고콜레스테롤혈증 토끼에서의 지질강하효과와 독립적인 Naringin의 항동맥경화 효과, Korean Circulation J 1998:28(11):1873-1881; ③Tae-Sook Jeong, Myung-Sook Choi, Young-Bae Park, and Song-Hae Bok. 2000, Cholesterol-Lowering or Antiatherogenic Effects of Citrus Bioflavonoids and Their Mechanisms. Food Industry and Nutrition. Vol.5, No.2 : 21-26; ④Park, Y. B., Jeong, T. S., Lee, S. H., Bok, S. H., Kwon, Y. K., Bae, K. H., Lee, M. K. and Choi, M. S. 2000, Hesperidin Lowers Activities of 3-Hydroxy-3-methylglutaryl-CoA Reductase and Acyl-CoA: Cholesterol Acyltransferase in Rats Fed High- Cholesterol Diet. J. Food Sci. Nutr. 5(2) : 109-113; ⑤Kyung-Min Do, Yong Bok Park, Song-Hae Bok, Mi-Kyung Lee, Tae-Sook Jeong and Myung-Sook Choi, 2001, Alteration of Lipid Metabolism by Ginseng Supplements with Different Levels of Vitamin E in High Cholesterol-Fed Rats. J. of Food Sci. and Nutr. 6(1):66-72; ⑥Myung-Sook Choi and Song-Hae Bok. 2001, Comparison of Jujube Extract with Tangerine Peel Extract in Lowering Plasma Lipids and Activities of Cholesterol Regulating Enzymes in Cholesterol-Fed Rats. J. of Food Sci. and Nutr. 6(2):122-129).
감귤류 과피추출물 및 감귤류 유래 바이오후라보노이드는 그 외에 항암, 항바이러스, 항산화, 혈압강하 효과 등이 있는 것으로 알려졌다{Saija, A., et., Free Radical Biol. Med., 19, 481-486(1995); Matsubara, Y., et al., 상기 문헌; Galati E. M., et al., 상기 문헌 ; Felicia V., et al., Nutr. Cancer, 26, 167-181(1996); EP 0352147 A2(1990.1.24); and Kaul, T.N., et al., J. Med Virol., 15, 71-79(1985)}. 또한, 감귤류의 과피와 씨 속에는 리모노이드계 물질이 존재하는데 이들이 항암활성을 갖고 있다는 사실도 밝혀져 있다{(Lam, L. K. T., et al., Inhibiton of chemically induced carcinogen esis by citrus limonoids. In Food Phytochemicals for Cancer Prevention, Vol. I, ACS Symposuim series No. 546, Huang, M. T., O. Osawa. C. T. Ho, R. Rosen(ed), 1993}.
또한 인삼뿌리에서 분리한 성분이 콜레스테릴 에스터 단백질의 활성을 억제하고 ACAT 효소활성을 억제하여 지질대사 개선에 효과가 있을 수 있음을 확인하였 다(①Kwon B. M., J. Y. Nam, S. H. Lee, T. S. Jeong, Y. K. Kim, S. H. Bok. 1996, Isolation of cholesteryl ester transfer protein inhibitors from Panax ginseng Roots. Chem. Pharm. Bull. 44:444-445; ②Kwon B. M., S. H. Ro, M. K. Kim, J. Y. Nam, H. J. Jung, I. R. Lee, Y. K. Kim, S. H. Bok. 1997, Polyacetylene analogs, isolated from hairy roots of Panax ginseng inhibit acyl CoA-cholesterol acyltransferase. Planta Medica 63:552-553).
본 발명자들은 양파, 마늘, 생강, 대추 추출물등이 포함된 양념조성물을 동물에게 먹였을 경우 혈중콜레스테롤의 양이 감소하고, HDL 콜레스테롤이 증가하여 심장순환기질환(동맥경화증, 고지혈증, 고혈압, 중풍)등의 예방효과가 있을 것으로 추측할 수 있었다(대한민국 특허등록 제10-0428936호).
양파, 마늘, 생강의 지질대사 개선효과는 널리 알려진 바 있다. 예컨대 마늘은 특히 심장순환기질환 예방, 혈액순환 촉진, 면역강화 및 항암작용이 탁월한 것으로 알려져 있고(L. D. Lawson, Bioactive organosulfur compounds of garlic and garlic products: role in reducing blood lipids, in Human Medicinal Agents, 306~330, D. Kinghorn and M. F. Balaandrin Eds., ACS symposium Series 534, 1993), 양파도 혈중 콜레스테롤 강하, 혈중 고밀도 지단백질(HDL)증가, 혈소판 응집 억제 등 심장순환기 질환 예방에 유익한 것으로 알려져 있다{J. Carper, Food Pharmacy, Batam Books(1989)}. 또한, 생강은 혈액순환에 유익한 콜레스테롤 에스테르 전이 단백질(cholesterol ester transfer protein, CETP) 저해제인 디하이드로진거리돈(dehydrogingeridone)을 포함하고 있다(대한민국 특허출원 제97-34195 호). 대추에는 혈압강하 및 콜레스테롤 강하 활성성분인 CETP 저해제가 포함되어 있다고 밝혀진바 있다(대한민국 특허출원 제97-59425호 및 제 97-59426호). 또한, 감귤류 과피추출물 및 그로부터 분리된 헤스페리딘 또는 나린진은 동맥경화 예방효과가 탁월하다는 사실도 밝혀졌다(대한민국 특허출원 제97-55578호, 제97-55579호 및 제97-55580호).
감귤류 유래 주요 바이오후라보노이드인 헤스페리딘, 나린진 등은 콜레스테롤 합성효소인 3-hydroxy-3 methyl-glutaryl coA reductase 및 acylcoA: cholesterol transferase 효소활성을 낮추어 동물의 몸속에서 고지혈증을 예방하는 것으로 밝혀졌으며 다른 바이오후라보노이드로 비슷한 작용을 할 것이다{①Bok, S. H., Lee, S. H., Park, Y. B., K. H., Son, K. H., Jeong, T. S. and Choi, M. S. 1999, Plasma and Hepatic Cholesterol and Hepatic Activities of 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA Reductase and Acyl CoA: Cholesterol Transferase are Lower in Rats fed Citrus Peel Extract or a Mixture of Citrus Bioflavonoids, J. of Nutrition. Vol 129(6): 1182-1185; ② Shin, Y. W., Bok, S. H., Jeong, T. S., Bae, K. H., Jeoung, N. H., Choi, M. S., and Park, Y. B. 1999, Hypocholesterolemic Effect of Naringin Associated with Hepatic Cholesterol Regulating Enzyme Changes in Rats. International Journal of Vitamin and Nutrition, Vol 69(5):341-347; ③ Bok, S. H., Shin, Y. W., Bae, K. H., Jeoug, T. S., Kwon, Y. K., Park, Y. B. and Choi, M. S. 2000, Effects of naringin and lovastatin on plasma and hepatic lipids in high-fat and high-cholesterol fed rats. Nutrition Research. Vol.20, No 7 : 1007-1015}.
그 외 본 발명자들은 나린진 투여가 토끼의 동맥벽에 콜레스테롤이 침착되는 것을 억제하고, 항산화 작용이 있음을 확인하였다{①Hyo Soo Kim, Tae Sook Jeong, Song Hae Bok, Song Jun Choi, 2001, Naringin has an Anti-atherogenic Effect with the inhibition of Intercellular Adhesion Molecule-1 in hypercholesterolemic rabbits. , J. of Cardiovascular Pharmacology 38(6): 947-955; ②Seon-Min Jeon, Song-Hae Bok, Moon-Kyoo Jang, Mi-Kyung Lee, Kyung-Tak Nam, Yong-Bok Park, Soon-Jae Rhee, Myung-Sook Choi. 2001, Antioxidative Activity of Naringin and Lovastatin in High Cholesterol-Fed Rabbits. Life Science(SCI). 69: 2855-2866}.
그 외 루틴, 케세르틴, 신남산 유도체들이 고지혈증 예방효과가 있음을 확인하였다{①Bok, S. H., S. Y. Park, Y. B. Park, M. K. Lee, S. M. Jeon, T. S. Jeong, and M. S. Choi, 2002 Quercetin dihydrate and gallate supplements lower plasma and hepatic lipids and change activities of hepatic antioxidant enzymes in high cholesterol-fed rats. Submitted Int. J. Vitam. Nur. Res(SCI), 72(3):161-169; ②Myung-Sook Choi, Sun-Young Park, Seon-Min Jeon, Yong Bok Park, Soon-Jae Lee, Tae-Sook Jeong, Song-Hae Bok, 2002 "Effect of Rutin and Tannic Acid Supplements on Cholesterol Metabolism in Rats", J. Nutrition Research(SCI), 22:283-295; ③Jeong-Sun Lee, Song-Hae Bok, Tae-Sook Jeong, Surk-Sik Moon, Yong Bok Park, Myung-Sook Choi, 2003 "4-Hydroxycinnamate lowers plasma and hepatic lipids without changing antioxidant enzyme activities" Annals of Nutrition Metabolism 2003;47:144-151; ④Sangku Lee, Chul-Ho Lee, Jung-Hoon Oh, Eun Eai Kim, Yang-Kyu Choi, Eun-Hee Kim, Woo Song Lee, Song-Hae Bok and Tae-Sook Jeong, 2003 "Anti-Atherogenic Effects of 3,4-Dihydroxy Hydrocinnamides" Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 13(2003)2681-2682}.
본 발명자들은 또한 감귤류 과피추출물, 생강추출물, 대추추물물, 인삼, 헤스페리딘, 나린진, 디오스민, 네오헤스페리딘 디하이드로칼콘 등이 고지혈증, 고혈압 등 예방에 유효함을 발견하였다(대한민국 특허등록 제213895호, 제240199호, 제254528호, 제254527호, 제296250호, 제291141호, 제291142호, 제304430호, 제258582호, 제258583호).
본 발명자들은 국외특허로서 또한, 귤피추출물 유래 바이오후라보노이드류, 나린진, 헤스페리딘 투여가 동물이나 사람에게서 심장병 예방효과가 있을 수 있음을 확인하였고(U.S patent 5,763,414: 1998.6.9, U.S patent 5,877,208: 1999.3.2, U.S patent 5,792,461: 1998.8.11) 바이오후라보노이드가 고밀도 지단백질(HDL)을 증가시키고 (U.S patent 6,133,241: 2000.10.17), 혈소판 응집을 억제하며 (U.S patent 6,221,357: 2001.4.24), 혈당강하효과가 있고 (U.S paent 696,364: 2000.8.1), 커피콩에 풍부한 신남산류가 고지혈증 예방에 효과가 있고 (U.S patent 6,313,171) 탄닌(tannin), 엘라그라산, 콜릭산(gallate) 및 녹차의 주성분 카테킨류 같은 페놀릭 성분이 고지혈증 예방에 유익함을 확인하였다(U.S patent 6,133,311).
최근에 본 발명자들은 감잎, 메밀잎, 구기자잎, 인삼 분말등이 동물 및 사람에게서 항비만 효과가 있음을 확인하였고, 또한 이들의 열수추출물이나, 에타놀추출물등이 동일한 효과가 있음을 입증하였다(대한민국 특허출원 제2001-79485호, 제2002-37063호, 제2002-48037호, 제2002-64919호, 제2002-64920호, 제2003-26979호, 제2003-26981호).
본 발명자들은 상기와 같은 점을 감안하여 항산화물질을 함유하는 식물체분말 또는 추출물을 포함하는 가축사료첨가제조성물을 제조한 뒤 이들 조성물이 가축의 혈액순환, 간기능 개선, 항균, 항염증에 효과가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 항산화물질을 함유하는 식물체분말 또는 추출물을 포함하는 가축사료첨가제조성물을 제공함에 있다.
본 발명의 상기 목적은 항산화물질을 함유하는 식물체분말 또는 추출물을 포함하는 가축사료첨가제조성물을 제조한 뒤 이들 조성물이 가축의 혈액순환, 간기능 개선, 항균, 항염증에 효과가 있음을 확인함으로써 달성하였다.
이하 본 발명의 구성을 설명한다.
본 발명은 식물체 분말의 가축분뇨 냄새 저감 효과를 조사하는 단계; 식물체 추출물의 가축분뇨냄새 저감 효과를 조사하는 단계; 식물체분말을 이용한 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효과가 있는 사료첨가제를 제조하는 단계; 식물체추출물을 이용한 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효능이 있는 사료첨가제를 제조하는 단계 및 상기 사료첨가제의 혈액순환 및 간기능 개선, 항균, 항염증 효과를 조사하는 단계로 구성된다.
본 발명에서 폴리페놀 및 바이오후라보노이드계 물질이 다량 함유되어있어 가축의 질병예방, 심장 및 간기능 개선에 유용한 식물체는 감귤류(오렌지, 자몽, 유자, 감귤, 탱자, 레몬) 과피(진피, 청피 포함), 포도껍질과 씨, 사과껍질, 인삼, 인삼잎, 양파껍질, 양파, 양파잎, 마늘, 마늘잎, 파, 생강, 대추, 감(미숙한 감 포함), 감잎, 구기자, 구기자잎, 메밀, 메밀잎, 메밀꽃, 녹차잎, 커피콩찌꺼기, 커피콩열매껍질, 콩, 두부비지, 미나리, 부추, 양배추잎, 들깨잎, 고구마잎, 고추잎, 호박잎, 동부잎, 콩잎, 보리잎, 밀잎, 귀리잎, 뽕잎, 쑥, 함초, 치커리, 셀러리, 파슬리, 배추잎, 무잎, 홍당무잎, 당근잎, 시금치잎, 부러컬리잎, 콜리훌라워잎, 신선초잎, 케일잎, 미나리잎, 부추, 쑥갓, 솔잎, 상치, 알로에, 토마토 등이다.
상기 식물체를 동물이 섭취할 경우 동물의 건강상태가 좋아지고 사료이용 효율도 증가할 수 있다. 또한 이들 잎의 분말이나 추출물에는 엽록소 물질, 식이섬유소 등이 풍부하여 가축의 장내에서 유해미생물을 억제하고, 설사병 등을 경감시키며, 가축분뇨냄새를 경감시킬 수 있다.
본 발명의 바이오후라보노이드류 및 폴리페놀류들은 아피제닌, 디하이드로 켐페롤, 에리오딕티에, 헤스페리딘, 헤스페레틴, 이소람네틴, 이소사쿠라네틴, 켐페롤, 나린진, 나린제닌, 크리소에리올, 디오스민, 에리오시트린, 리모시트린, 리 모시트롤, 루테올린, 오라네틴, 노빌레틴, 루틴, 시네세틴, 탄제레틴, 비텍신, 아스트라가린, 미리스티린, 탄닌, 안토시아닌, 리코펜, 갈릭산, 케르세틴, 베테인, 카테친류, 신남산류 등을 포함한다.
상기 식물체들의 분말을 만들기 위해서는 통상의 건조방법(동결건조, 열풍건조, 실온의 그늘에서 자연건조, 야외건조 등)을 사용할 수 있으며 건조후 미세하게 분말화 할 수 있다.
상기 식물체들의 열수추출물을 만들기 위해서는 시료를 1 : 10 ~ 4 : 10의 비율로 물과 섞은 후 100℃에서 30분 ~ 3시간 정도 추출한 후 농축하여 사용하거나, 농축 후 건조한다.
상기 식물체들의 에탄올 추출물을 만들기 위해서는 통상적으로 60~95% 에탄올 속에 이들 시료를 1 : 10 ~ 4 : 10 정도 넣고, 60℃~80℃에서 1시간 ~ 3시간 동안 추출할 수 있다.
상기 식물체건조분말, 열수추출물 또는 에탄올추출물은 각각 독자적으로, 혹은 골고루 포함시켜서, 동물사료 전체 100중량부에 대하여 0.01~5.0중량부 포함시키는 것이 바람직하다. 만일 상기 범위보다 적은 양을 첨가하면 건강상태 향상, 사료이용 효율 증가, 장내 유해미생물 억제, 설사병 등 질병 경감 및 가축분뇨냄새 경감 등의 효과를 얻지 못하며 상기 범위보다 많이 첨가하더라도 더 이상 효과의 향상이 없으므로 더 첨가할 필요가 없다.
상기 폴리페놀이나 바이오후라보노이드 물질들은 동물에게 하루에 1㎎~100㎎/㎏ 동물의 몸무게 정도 투여하면 건강상태 향상, 사료이용 효율 증가, 장내 유해 미생물 억제, 설사병 등 질병 경감 및 가축분뇨냄새 경감 등의 효과를 볼 수 있다.
실시예 1: 식물체 분말 및 추출물의 제조
1. 분말 제조
감잎, 감귤류과피, 솔잎, 쑥, 함초, 녹차잎, 보리잎, 파슬리잎, 무잎, 당근잎, 케일잎, 쑥갓잎, 알로에잎을 물로 깨끗이 씻은 후 그늘 상태의 상온에서 건조한 후, 100 내지 300 메쉬로 분쇄하여 분말화하여 식물체분말을 얻었다.
2. 열수추출물 제조
감잎, 감귤류과피, 솔잎, 쑥, 함초, 녹차잎, 보리잎, 파슬리잎, 무잎, 당근잎, 케일잎, 쑥갓잎, 알로에잎을 1 : 10의 비율로 물과 섞은 후 100℃에서 2시간 동안 끓여 열수추출물을 제조하였다.
3. 에탄올추출물 제조
감잎, 감귤류과피, 솔잎, 쑥, 함초, 녹차잎, 보리잎, 파슬리잎, 무잎, 당근잎, 케일잎, 쑥갓잎, 알로에잎을 1 : 10의 비율로 90% 에탄올과 섞은 후 70℃에서 2시간 동안 추출하여 에탄올추출물을 제조하였다.
실시예 2: 식물체분말을 이용한 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효과가 있는 사료 첨가제 제조
감잎분말 0.5중량부, 감귤과피분말 0.5중량부, 뽕잎분말 0.5중량부, 솔잎분말 0.5중량부, 보리잎분말 0.5중량부, 파슬리잎분말 0.5중량부를 혼합하여 혈액순 환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효과가 있는 사료첨가제 조성물 3.0중량부를 제조하였다.
사료 전체 100중량부에 상기에서 제조한 사료첨가제 조성물 3.0중량부를 섞어서 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효과가 있는 동물사료를 제조하였다.
실시예 3: 식물체추출물을 이용한 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효능이 있는 사료 첨가제 제조
감잎열수추출물 0.1중량부, 감귤과피열수추출물 0.1중량부, 뽕잎열수추출물 0.1중량부, 솔잎열수추출물 0.1중량부, 보리잎열수추출물 0.1중량부, 파슬리잎열수추출물 0.1중량부를 혼합하여 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효과가 있는 사료첨가제 조성물 0.6중량부를 제조하였다.
사료 전체 100중량부에 상기에서 제조한 사료첨가제 조성물 0.6중량부를 섞어서 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효과가 있는 동물사료를 제조하였다.
실시예 4: 식물체분말을 이용한 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효과가 있는 사료 첨가제 제조
감잎분말 0.05중량부, 감귤과피분말 0.05중량부, 뽕잎분말 0.05중량부, 솔잎분말 0.05중량부, 쑥분말 0.05중량부, 함초분말 0.05중량부, 녹차잎분말 0.05중량 부, 보리잎분말 0.05중량부, 파슬리잎분말 0.05중량부, 무잎분말 0.05중량부, 당근잎분말 0.05중량부, 케일잎분말 0.05중량부를 혼합하여 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효과가 있는 사료첨가제 조성물 0.6중량부를 제조하였다.
사료 전체 100중량부에 상기에서 제조한 사료첨가제 조성물 0.6중량부를 섞어서 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효과가 있는 동물사료를 제조하였다.
실험예 1: 식물체 분말의 가축분뇨 냄새 저감 효과 조사
감잎분말, 감귤류과피분말(혹은 진피, 청피분말), 솔잎분말, 쑥분말, 함초분말, 녹차잎분말, 보리잎분말, 파슬리잎분말, 무잎, 당근잎, 케일잎, 쑥갓잎, 알로에잎분말 각 10g을 돼지분 100g에 각각 잘 섞어서 실온에 방치한 후 냄새를 측정하였다. 냄새가 경감되는 정도를 강함, 보통, 약함, 없음으로 하기 표 1에 표시하였다.
시　 료 냄새경감정도
강함 보통 약함
감잎분말 ● 　 　
감귤류과피 분말 ● 　 　
뽕잎분말 ● 　 　
솔잎분말 ● 　 　
쑥분말 　 ● 　
함초분말 　 ● 　
녹차잎분말 　 ● 　
보리잎분말 ● 　 　
파슬리분말 ● 　 　
무잎분말 　 ● 　
당근잎분말 　 ● 　
케일잎분말 　 ● 　
쑥갓분말 　 ● 　
알로에 　 ● 　
상기 표 1에서 보면 감잎, 감귤피, 솔잎, 쑥, 함초, 녹차잎, 보리잎, 파슬리, 무잎분말, 당근, 케일, 쑥갓, 알로에 등 식물의 잎이 정도의 차이는 있지만 냄새 경감효과가 있음을 확인할 수 있었다.
실험예 2: 식물체 추출물의 가축분뇨냄새 저감 효과 조사
상기 실험예 1에서 예시한 식물들의 열수추출물(100℃에서 3시간 끓인후 얻은 것) 1g을 돼지분뇨 100g과 섞은 후, 한 시간 후 시료들의 냄새를 측정하였다.
실험예 1에서와 동일한 경향으로 냄새가 경감되는 것을 확인하였다.
실험예 3: 각 식물체 분말 및 본 발명 가축사료 첨가제의 젖소혈액내 콜레스테롤 저하효과
실시예 1에서 제조한 각 식물체 분말 및 실시예 2, 3 및 4의 본 발명 가축사료 첨가제를 사료 100중량부에 각각 0.6중량부 첨가하여 각 군마다 3마리씩 총 54두의 젖소에 7일간 급여하고 혈액내 HDL과 LDL의 함량을 측정하고 대조구와 비교하였다. 대조구는 각 식물체 분말 또는 본 발명 가축사료 첨가제를 첨가하지 않은 실험군이다. 실험결과를 표 2에 나타내었다. 표 2를 통해 알 수 있는 바와 같이 각 식물체 분말 또는 본 발명 가축사료 첨가제를 첨가한 군에서 혈액내 HDL-콜레스테롤의 함량은 유의적으로 증가한 반면 LDL-콜레스테롤의 함량은 유의적으로 감소하였으며 특히 실시예 2 및 실시예 3의 배합비를 가진 가축사료 첨가제의 경우 그 증가 폭이 월등히 컸다.
구분 HDL-콜레스테롤(mg/dL) LDL-콜레스테롤(mg/dL)
대조구 112 143
감잎분말 124 125
감귤과피분말 123 123
뽕잎분말 125 130
솔잎분말 120 127
쑥분말 114 136
함초분말 116 134
녹차잎분말 115 139
보리잎분말 127 121
파슬리분말 130 123
무잎분말 115 134
당근잎분말 116 138
케일잎분말 118 134
쑥갓분말 114 139
알로에잎분말 119 131
실시예 2 143 105
실시예 3 139 118
실시예 4 132 118
실험예 4: 각 식물체 분말 및 본 발명 가축사료 첨가제의 간기능 개선 효과
간기능을 평가하기 위하여 각 군마다 3마리씩 총 54두의 한우에 6개월간 급여하고 GOT와 γ-GT 및 지방간 지수를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
간 기능 지수의 변화(mean±SD, n=4)
구분 GOT(IU/ℓ) γ-GT(IU/ℓ) F liver
처음 6개월후 처음 6개월후 처음 6개월후
대조구 73±15 88±28 20.8±2.9 22.0±1.0 5.7±1.1 2.2±1.9
감잎분말 74±12 92±19 20.8±2.4 20.3±2.3 6.1±0.9 1.7±0.4
감귤과피분말 74±16 93±11 21.0±3.0 20.8±3.3 6.2±1.1 1.8±0.5
뽕잎분말 72±10 94±15 21.1±2.4 19.9±2.8 6.4±1.0 1.6±0.8
솔잎분말 74±13 96±19 21.5±3.0 20.7±2.8 6.1±1.0 1.7±0.3
쑥분말 75±12 91±11 21.4±3.4 20.4±3.0 6.3±1.2 1.8±0.3
함초분말 71±14 94±10 21.2±3.0 20.7±2.5 6.4±1.7 1.4±0.1
녹차잎분말 73±12 93±19 21.2±3.4 20.9±2.4 6.5±1.1 1.7±0.1
보리잎분말 74±11 95±18 20.8±3.1 19.9±3.3 6.1±1.5 1.8±0.8
파슬리분말 77±15 94±15 20.9±2.4 19.7±2.5 6.1±1.1 1.4±0.1
무잎분말 73±18 93±19 20.8±2.9 20.3±1.3 6.3±1.0 1.6±0.3
당근잎분말 75±16 95±12 21.1±3.0 19.7±2.6 6.1±0.8 1.5±0.6
케일잎분말 74±14 96±11 21.5±3.3 20.5±3.3 6.2±1.1 1.4±0.3
쑥갓분말 74±16 94±15 21.2±3.0 20.2±3.1 6.3±0.9 1.9±0.3
알로에잎분말 76±10 93±19 21.5±2.1 19.8±3.5 6.1±1.3 1.8±0.2
실시예 2 74±14 105±25 21.8±2.1 18.8±3.1 6.4±1.2 1.0±0.4
실시예 3 74±10 103±24 21.7±2.8 19.1±2.9 6.3±1.0 1.2±0.2
실시예 4 73±14 98±19 21.5±3.0 20.3±3.0 6.6±1.1 1.5±0.4
실험예 5: 각 식물체 분말 및 본 발명 가축사료 첨가제의 항균효과
실시예 1에서 제조한 각 식물체 분말 및 실시예 2, 3 및 4의 본 발명 가축사료 첨가제의 항균효과는 페이퍼 디스크(paper disc;filter paper 8mm, Watman) 방법으로 측정하였다. 멸균된 배지를 준비하여 약 35℃로 식힌 후 브로쓰(broth) 상태의 균 1mL씩 첨가하여 거품이 생기지 않도록 고루 혼합한 후 페트리 디쉬(petri dish)에 약 20mL 씩 분주하였다. 배지가 굳으면 멸균 페이퍼 디스크(paper disc;8mm)를 시험액에 일정농도로 적셔 핀셋을 이용하여 올려 놓은 후 37℃ 배양기(incubator)에서 24시간 배양하여 페이퍼 디스크(paper disc) 주위의 저해환의 크기로 활성의 강도를 측정하였다. 대조구(Con)는 pH 5.0의 0.1M 아세테이트 버퍼(Acetate buffer) 를 사용하여 항균효과를 비교하였다. 시험균은 한국식품개발연구원에서 이.콜라이 0157(E. coli 0157), 살모넬라 타이피무리움(Salmonella typimurium), 리스테리아 모노사이토게네스(Listeria monocytogenes)을 분양받아 사용하였으며 배지는 이.콜라이 0157(E. coli O157)은 영양 브로쓰(Nutrient broth) + Agar 0.7%, 살모넬라 타이피무리움(Salmonella typimurium)은 영양 브로쓰(Nutrient broth) + Agar 0.7%, 리스테리아 모노사이토게네스(Listeria monocytogenes)는 브레인 헐트 인퓨전(Brain heart infusion) + 한천(Agar) 0.7%를 각각 사용하였다.
실험결과, 이.콜라이 0157(E. coli 0157), 살모넬라 타이피무리움(Salmonella typimurium), 리스테리아 모노사이토게네스(Listeria monocytogenes)에 대해 대조구에서는 저해환이 전혀 나타나지 않았으나, 각 식물추출물의 경우 약하게 저해환이 나타났으며, 실시예 2, 3 및 4의 경우 저해환이 뚜렷하게 나타남을 확인할 수 있었다.
실험예 6: 각 식물체 분말 및 본 발명 가축사료 첨가제의 항염증 효과
NO는 대식세포에서 만들어지는 수퍼옥사이드 음이온과 결합하여 강력한 페록시니트리트와 히드록시페록사이드를 생성하여 조직을 손상시켜 염증반응에 관여한다. 따라서, 실시예 1에서 제조한 각 식물체 분말 및 실시예 2, 3 및 4의 본 발명 가축사료 첨가제의 항염증 효과를 조사하기 위하여 상기 각 식물체 분말 및 가축사료 첨가제가 NO 생성능에 미치는 영향을 하기와 같이 알아보았다.
NO(Nitric oixde) 생성 정도는 그린 등의 방법(Green LC. et al., Anal Biochem., 126 , pp131-138, 1982)으로 아질산염(nitrite)의 생성량을 측정하였다. 즉, 24 웰에 8×10 5 개의 RAW264.7 세포를 주입한 후 세포를 웰에 부착시켰다. 각 식물체분말과 가축사료 첨가제를 각각 25, 50, 100, 150 ㎍/㎖ 농도별로 처리하여 37 ℃, 5 % CO 2 에서 2시간 배양한 후 웰 당 2 ㎍의 LPS 주입하여 20시간 배양하였다. 세포배양 상등액 100㎕와 그리스 시약(Griess reagent, 5% phosphoric acid에 1 % 함유되어 있는 sulfanilamide와 0.1% naphthylethylenediamine dihydrochloride 혼합액) 100 ㎕를 실온에서 10분간 반응시킨 후 550 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준곡선은 NaNO2를 농도별로 조제하여 사용하였다.
실험 결과, LPS로 자극시킨 RAW264.7 세포에서 각 식물체분말 및 가축사료 첨가제는 농도의존적으로 NO의 생성을 억제하는 것으로 나타났으며 특히 실시예 2 및 3의 가축사료 첨가제의 NO 생성 억제능력이 각 식물체분말 단독과 실시예 4의 가축사료첨가제보다 월등히 뛰어났다.
이상, 상기 실시예를 통하여 설명한 바와 같이 본 발명의 항산화물질을 함유하는 식물체분말 또는 추출물을 포함하는 가축사료첨가제조성물은 가축의 혈액순환, 간기능 개선, 항균, 항염증에 매우 뛰어난 효과가 있으므로 가축사료산업 및 축산업상 유용한 발명인 것이다.

Claims (5)

  1. 감귤류 과피, 감귤류 진피, 감귤류 청피, 포도껍질과 씨, 사과껍질, 인삼, 인삼잎, 양파껍질, 양파, 양파잎, 마늘, 마늘잎, 파, 생강, 대추, 감, 감잎, 구기자, 구기자잎, 메밀, 메밀잎, 메밀꽃, 녹차잎, 커피콩찌꺼기, 커피콩열매껍질, 콩, 두부비지, 미나리, 부추, 양배추잎, 들깨잎, 고구마잎, 고추잎, 호박잎, 동부잎, 콩잎, 보리잎, 밀잎, 귀리잎, 뽕잎, 쑥, 함초, 치커리, 셀러리, 파슬리, 배추잎, 무잎, 홍당무잎, 당근잎, 시금치잎, 부러컬리잎, 콜리훌라워잎, 신선초잎, 케일잎, 미나리잎, 부추, 쑥갓, 솔잎, 상치, 알로에, 토마토로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 폴리페놀 및 바이오후라보노이드계 물질이 다량 함유되어 있는 식물체의 건조분말, 열수추출물 또는 에탄올 추출물이 첨가된 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효능이 있는 사료첨가제조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 폴리페놀 및 바이오후라보노이드계 물질은 아피제닌, 디하이드로 켐페롤, 에리오딕티에, 헤스페리딘, 헤스페레틴, 이소람네틴, 이소사쿠라네틴, 켐페롤, 나린진, 나린제닌, 크리소에리올, 디오스민, 에리오시트린, 리모시트린, 리모시트롤, 루테올린, 오라네틴, 노빌레틴, 루틴, 시네세틴, 탄제레틴, 비텍신, 아스트라가린, 미리스티린, 탄닌, 안토시아닌, 리코펜, 갈릭산, 케르세틴, 베테인, 카테친류, 신남산류로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나임을 특징으로 하는 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효능이 있는 사료첨 가제조성물.
  3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 사료첨가제조성물은 전체 사료 100중량부에 대하여 0.01~5.0중량부 첨가됨을 특징으로 하는 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효능이 있는 사료첨가제조성물.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 사료첨가제조성물은 감잎분말 0.5중량부, 감귤과피분말 0.5중량부, 뽕잎분말 0.5중량부, 솔잎분말 0.5중량부, 보리잎분말 0.5중량부, 파슬리잎분말 0.5중량부로 구성됨을 특징으로 하는 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효능이 있는 사료첨가제조성물.
  5. 제 1항에 있어서, 상기 사료첨가제조성물은 감잎열수추출물 0.1중량부, 감귤과피열수추출물 0.1중량부, 뽕잎열수추출물 0.1중량부, 솔잎열수추출물 0.1중량부, 보리잎열수추출물 0.1중량부, 파슬리잎열수추출물 0.1중량부로 구성됨을 특징으로 하는 혈액순환 및 간기능 개선에 유용하고 항균, 항염증 효능이 있는 사료첨가제조성물.
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