KR20060084263A - 항균 활성을 가지는 루버스 속 식물의 뿌리 추출물 및이를 포함하는 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 항균 활성을 가지는 루버스 속(Rubus sp.) 식물의 뿌리 추출물 및 이를 포함하는 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 항균 활성을 가지는 루버스 속 식물의 뿌리 추출물과 상기 추출물을 포함하는 항균용 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 따른 루버스 속 식물의 뿌리 추출물은 피부질환, 화농성 질환, 수술창상 감염, 요로감염 유발균과 식중독균, 탄저균, 페스트균, 충치균, 여드름균,메티실린 내성 포도상구균, 이질균 및 무좀균에 대한 항균 활성을 가지고 있으므로 병원성 세균에 의한 피부감염증, 화농, 중이염, 방광염, 복막염과 같은 화농성 질환, 요로감염, 식중독, 탄저병, 페스트, 충치, 여드름, 메티실린 내성 포도상구균 감염증,세균성 이질 및 병원성 곰팡이에 의한 무좀의 예방 또는 치료에 매우 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 루버스 속 식물의 뿌리 추출물은 화장품, 소독제, 살균 세정제 및 식품 보존제의 형태로 제조될 수 있다.

루버스 속 식물, 뿌리, 항균 활성

Description

항균 활성을 가지는 루버스 속 식물의 뿌리 추출물 및 이를 포함하는 조성물{Extract of root of Rubus sp. having antimicrobial activity and composition comprising thereof}

도 1a 내지 도 1c는 본 발명에 따른 복분자 딸기(Rubus coreanus MIQ) 뿌리의 에탄올 추출물의 병원성 세균에 대한 항균 활성을 나타낸 사진이다.

도 2a 내지 도 2c는 본 발명에 따른 산딸기(Rubus crataegifolius)뿌리의 에탄올 추출물의 병원성 세균 및 곰팡이에 대한 항균 활성을 나타낸 사진이다.

본 발명은 항균 활성이 있는 루버스 속(Rubus sp.) 식물의 뿌리 추출물 및 이를 포함하는 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 항균 활성을 가지는 루버스 속 식물 뿌리의 추출물과 상기 추출물을 포함하는 항균용 조성물에 관한 것이다.

루버스 속(Rubus sp.) 식물은 장미과(Rosaceae)에 속하는 낙엽활목으로서 종의 분화가 다양하여 학자에 따라서는 200 내지 300종으로 분류하고 있다. 이들 중에서 약용으로 사용되는 것으로는 복분자 딸기(R. coreanus MIQ), 산딸기(R. crataegifolius) 및 멍석딸기(R. parvifolius Linne var. tiphyllus) 등이 있다. 상기 루버스 속 식물은 과실, 뿌리 및 잎이 약용으로 사용되어 왔으며 특히, 루버스 속 식물의 과실인 복분자(Rubi fructus)는 민간에서 강정, 청량, 지갈, 강장제 및 당뇨병 치료에 사용되어 왔다. 또한, 잎은 천식에 효과가 있으며 그 뿌리는 지혈, 조혈, 불임증, 월경 불순 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 따라서, 상기 루버스 속 식물은 그 부위에 따라 다른 약리 작용을 가지고 있기 때문에 부위별로 다른 성분이 존재할 것으로 예측되고 있다. 한편, 루버스 속 식물 뿌리의 약리작용과 관련해서는 문헌에 산딸기(R. crataegifolius) 뿌리의 알코올 추출물이 항염증 효과가 있음이 보고 된 바 있으며(Cao Y. et al., Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 21(11):687-8, 1996), 산딸기 뿌리의 조추출물(crude extract)이 항암효과가 있음이 보고 된 바 있다(Lee JH et al., Arch Pharm Res., 23(4):338-43, 2000). 그러나, 지금까지 루버스 속 식물 뿌리의 항균 효과에 대해서는 보고 된 바 없다.

현재 사용되고 있는 대부분의 항균제는 화학합성을 통해 제조된 것으로서 고비용이 소요되며 부작용을 유발하는 등의 많은 한계를 가지고 있다. 따라서, 최근에는 천연물로부터 새로운 항균물질을 분리하고자 하는 연구가 활발하게 이루어지고 있다. 천연물로부터 새로운 항균물질을 분리하기 위해서는 항균 스펙트럼이 광 범위하고 장기간 투여하여도 부작용이 없이 안전하여야 한다는 점 등을 고려해야 한다.

이에 본 발명자들은 천연물로부터 새로운 항균물질을 분리하고자 다년간 연구하던 중 루버스 속 식물의 뿌리 추출물이 다양한 병원성 세균 및 곰팡이에 대해 항균 활성을 가지고 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 항균 활성을 가지는 루버스 속 식물의 뿌리 추출물을 제공하는 것이다.

또한, 본 발명의 다른 목적은 상기 추출물을 포함하는 항균용 조성물을 제공하는 것이다.

또한, 본 발명의 다른 목적은 상기 추출물을 포함하는 항균용 제제를 제공하는 것이다.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 항균 활성을 가지는 루버스 속 식물의 뿌리 추출물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 추출물을 포함하는 항균용 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 추출물을 포함하는 항균용 제제를 제공한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명하기로 한다.

본 발명에 따른 루버스 속(Rubus sp.) 식물의 뿌리 추출물은 다양한 병원성 세균 및 곰팡이에 대해 항균 활성을 가지고 있는 것을 특징으로 한다.

바람직하게는, 상기 본 발명의 루버스 속 식물의 뿌리 추출물은 스타필로코커스 속(Staphylococcus sp.), 스트렙토코커스 속(Streptococcus sp.), 바실러스 속(Bacillus sp.), 예르시니아 속(Yersinia sp.), 프로피오니박테리움 속 (Propionibacterium sp.), 쉬겔라 속(Shigella sp.) 세균 및 트리코파이톤(Trichophyton sp.)에 대해 항균 활성을 가지고 있다. 보다 바람직하게는, 본 발명의 추출물은 메티실린 내성 포도상구균 (Methicillin Resistant Staphylococcus aureus: MRSA)을 포함하는 스타필로코커스 아우레우스(S. aureus), 스타필로코커스 에피더미디스(S. epidermidis), 스타필로코커스 인터메디우스(S. intermedius) 및 스타필로코커스 사프로피티쿠스(S. saprophyticus)와 같은 스타필로코커스 속 세균, 스트렙토코커스 뮤탄스 (Streptococcus mutans)와 같은 스트렙토코커스 속 세균, 바실러스 안트라시스 (B. anthracis)와 같은 바실러스 속 세균, 예르시니아 페스티스(Y. pestis)와 같은 예르시니아 속 세균, 프로피오니박테리움 아크네스(P. acnes) 및 프로피오니박테리움 에시도프로피오니시(P. acidipropionici)와 같은 프로피오니박테리움 속 세균, 쉬겔라 프렉스네리(Shigella flexneri)와 같은 쉬겔라 속 세균 및 트리코파이톤 멘타그로파이테스(Trichophyton mentagrophytes)와 같은 트리코파이톤속 곰팡이에 대한 항균 활성을 가지고 있다.

상기 스타필로코커스 아우레우스는 자연계에 널리 분포되어 있는 세균의 하나로서 피부, 호흡기 및 비뇨생식기 등에 침입하여 식중독 뿐 만 아니라 피부의 화농, 중이염, 방광염과 같은 화농성 질환을 일으키는 대표적인 원인균 중 하나이다. 특히, 상기 세균은 수술환자, 만성기관지염, 감기환자와 같은 면역력이 약한 사람에게 감염되는 경우가 많다. 특히, 메티실린 내성 스타필로코커스 아우레우스는 메티실린에 대해 감수성을 상실하여 내성 또는 매우 높은 수준의 저항성을 가지는 균주이다. 또한, 상기 균주는 메티실린 외에도 옥사실린 등의 페니실린계 항생제, β-락탐(β-lactam) 계열의 항생제, 아미노글리코사이드(aminoglycoside) 및 마크로리데스(macrolides)와 같은 여러 종류의 항생제에도 광범위하게 내성을 나타내는 것으로 알려져 있으며 원내감염의 가장 주요한 원인이 되고 있다.

상기 스타필로코커스 에피더미디스는 피부나 콧속 등에 흔히 존재하는 비병원성 세균이다. 그러나, 정맥을 통해 수액을 공급하는 경우, 혈액을 채취하는 경우, 수술환자의 경우에 사용하는 도관(catheter)에 기생하면서 수술창상 부위의 감염, 피부조직 감염 및 복막염을 일으킨다.

상기 스타필로코커스 인터메디우스는 동물 특히 개의 피부 또는 요로에 감염되어 방광염이나 화농성 피부염을 일으킨다.

상기 스타필로코커스 사프로피티쿠스는 사람의 몸에 존재하는 정상 세균이나 여성에게 있어서 요로감염의 주원인균으로 알려져 있다.

상기 스트렙토코커스 뮤탄스는 충치의 주요 원인균으로 구강에서 서식하면서 당분을 분해하여 젖산으로 전환시킴으로써 석회질이 주성분인 치아의 부식을 일으 킨다.

상기 바실러스 안트라시스는 인수공통전염병인 탄저병을 일으키는 원인균이다. 상기 탄저균은 대부분의 척추동물에 감염되는데 소나 염소의 발병률이 높은 것으로 알려져 있다. 사람의 경우, 대부분이 감염된 동물이나 그 동물의 부산물에 노출되었을 때 감염된다. 탄저균에 감염되면, 감염 후 초기 24-48시간 내에 항생제가 투여되지 않으면 95% 이상이 치사하게 된다.

상기 예르시니아 페스티스는 간균 또는 구간균으로서 급성 열성 전염병인 페스트를 유발하는 원인균이다. 페스트의 치사율은 매우 높으며 사람의 경우 보통 쥐벼룩, 감염된 야생동물 및 페스트 환자와의 접촉에 의해 전염되는 것으로 알려져 있다. 상기 세균이 감염되면 림프절에 퍼져가면서 임파선이 매우 크게 팽대하게 되고 허파에 감염되면 치명적인 폐부종을 일으킨다.

상기 프로피오니박테리움 아크네스와 프로피오니박테리움 에시도프로피오니시는 피지선과 모공에 상주하는 혐기성 세균으로 피지를 유리지방산으로 분해하여 여드름을 일으킨다.

상기 쉬겔라 프렉스네리는 운동성이 없는 그람음성의 작은 간균으로 감염력이 강하여 주로 후진국에서 고열과 구역질, 경련성 복통, 배변 후 불편감을 주 증상으로 하는 세균성 이질을 일으킨다.

상기 트리코파이톤 멘타그로파이테스는 피부사상균으로 무좀과 같은 피부진균감염증을 유발하는 원인균으로 알려져 있다.

본 발명에서 루버스 속 식물의 뿌리로는 약용 및 식용되고 있는 것으로서 예를 들면, 복분자 딸기(R. coreanus MIQ), 산딸기(R. crataegifolius) 및 멍석딸기(R. parvifolius Linne var. tiphyllus), 청복분자딸기(R. coreanus for. concolor T. Lee), 곰딸기(R. phoenicolasius Maximowicz), 장딸기(R. hirsutus Thunberg), 수리딸기(R. corchorifoius L Fil), 섬딸기(R. ribesioideus Maisumira), 겨울딸기(R. buergeri Miquel) 및 줄딸기(R. oldhamil Maximowicz)의 뿌리가 포함된다. 본 발명의 실시예에서는 복분자 딸기(R. coreanus MIQ)와 산딸기(R. crataegifolius) 뿌리가 예시되어 있다.

상기 루버스 속 식물의 뿌리는 자연에서 채취하거나 또는 상업적으로 한약재상 등에서 구입하여 사용할 수 있다. 본 발명의 추출물의 제조에 사용되는 루버스 속 식물의 뿌리는 그 건체를 사용하는 것이 바람직하며, 추출 효율을 증대시키기 위해 분쇄기로 분쇄한 것을 사용할 수 있다. 상기 루버스 속 식물 뿌리의 건조방법으로는 양건, 음건, 열풍건조, 동결건조 및 자연건조 방법을 모두 사용할 수 있다. 바람직하게는 열풍건조 및 동결건조 방법을 사용할 수 있다.

또한, 본 발명의 루버스 속 식물의 뿌리 추출물은 당 업계에 공지된 방법을 사용하여 제조할 수 있다. 즉, 본 발명의 추출물은 원료를 일정 크기로 절단하고 추출용매로 추출, 여과, 농축하는 단계를 거쳐 제조하거나 또는 추출용매를 첨가하여 2시간 이상 가온한 다음 여과 및 농축시켜 제조할 수 있다. 상기에서 추출용매 로는 물 또는 C₁∼C₅의 알코올이 사용될 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 추출물을 제조하기 위한 추출용매로는 에탄올을 사용할 수 있다. 상기와 같은 방법으로 제조된 추출물은 진공 건조하여 분말 형태로 제조할 수도 있다.

가장 바람직하게는, 에탄올 50∼10,000㎖에 루버스 속 식물의 뿌리 50∼5,000g을 혼합한 후 22∼25℃에서 12∼72시간 동안 방치하여 추출한 다음 여과한 후 농축기를 사용하여 농축함으로써 에탄올을 제거하여 에탄올 추출물을 제조하거나 또는 증류수 50∼10,000㎖에 루버스 속 식물의 뿌리 50∼5,000g을 혼합한 후 22∼25℃에서 12∼72시간 동안 방치하여 추출한 다음 여과한 후 농축함으로써 수추출물을 제조할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에서는 80% 에탄올에 복분자 딸기 뿌리 100g을 첨가하고 24℃에서 24시간 방치하여 추출한 후 여과지로 여과한 다음 농축기로 4배 농축하여 복분자 딸기 뿌리의 에탄올 추출물을 제조하였다(실시예 1 참조).

또한, 본 발명의 다른 실시예에서는 증류수 1000㎖에 복분자 딸기 뿌리 100g을 첨가하고 24℃에서 방치하여 추출한 후 여과지로 여과한 다음 95℃의 온도에서 4배 농축하여 산딸기 뿌리의 수추출물을 제조하였다(실시예 2 참조).

또한, 본 발명의 다른 실시예에서는 80% 에탄올에 산딸기 뿌리 100g을 첨가하고 24℃에서 24시간 방치하여 추출한 후 여과지로 여과한 다음 농축기로 4배 농축하여 산딸기 뿌리의 에탄올 추출물을 제조하였다(실시예 3 참조).

상기와 같은 방법으로 제조된 본 발명에 따른 복분자 딸기 뿌리의 에탄올 추출물, 수추출물 및 산딸기 뿌리의 에탄올 추출물의 항균 활성을 조사하기 위하여 본 발명의 일 실험예에서는 스타필로코커스 속 세균, 스트렙토코커스 속 세균, 바실러스 속 세균, 예르시니아 속 세균, 프로피오니박테리움 속, 쉬겔라 속 세균과 같은 병원성 세균 및 트리코파이톤 속과 같은 병원성 곰팡이에 대한 루버스 속 식물의 뿌리 추출물의 항균 활성을 조사하였다(실험예 1 및 2 참조). 그 결과, 본 발명에 따른 추출물이 스타필로코커스 아우레우스, 메티실린 내성 스타필로코커스 아우레우스, 스타필로코커스 에피더미디스, 스타필로코커스 인터메디우스, 스타필로코커스 사프로피티쿠스, 스트렙토코커스 뮤탄스, 바실러스 안티라시스, 예르시니아 페스티스, 프로피오니박테리움 아크네스, 프로피오니박테리움 에시도프로피오니시, 쉬겔라 프렉스네리 및 트리코파이톤 멘타그로파이테스에 대한 항균 활성을 가지고 있음을 확인할 수 있었다(표 1, 표 2, 도 1a 내지 도 2c 참조).

따라서, 본 발명은 상기 루버스 속 식물의 뿌리 추출물을 포함하는 항균용 조성물을 제공할 수 있다. 보다 구체적으로 상기 항균용 조성물은 병원성 세균 및 곰팡이의 생육을 억제하거나 사멸시키기 위해 사용될 수 있다. 바람직하게는, 병원성 세균에 의한 피부감염증, 화농, 중이염, 방광염, 복막염과 같은 화농성 질환, 요로감염, 식중독, 탄저병, 페스트, 충치, 여드름, 메티실린 내성 포도상구균 감염증, 세균성 이질 및 병원성 곰팡이에 의한 무좀의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다.

상기 조성물은 루버스 속 식물의 뿌리 추출물을 단독으로 포함하거나 하나 이상의 약리학적으로 허용되는 담체, 부형제 및 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 상기에서 '약리학적으로 허용되는'이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 조성물을 말한다.

상기 본 발명에 따른 항균용 조성물은 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 슬러리제, 현탁액 및 주사제 등으로 당업계에 공지된 방법을 이용하여 제형화될 수 있다.

나아가, 본 발명에 따른 상기 루버스 속 식물의 뿌리 추출물은 다양한 형태로 제제화할 수 있다. 따라서, 본 발명은 상기 루버스 속 식물의 뿌리 추출물을 포함하는 항균용 제제를 제공한다. 상기 제제로는 예를 들면, 이에 한정되지는 않으나 화장품, 소독제, 살균 세정제 및 식품 보존제가 포함된다.

상기에서 화장품은 본 발명의 루버스 속 식물의 뿌리 추출물과 함께 화장료 조성물의 제조 분야에서 일반적으로 사용되는 하나 이상의 부형제 및 첨가제를 포함하여 당 분야의 공지의 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 화장품은 화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼 및 클렌징 워터와 같은 세안제, 팩, 바디오일 등과 같은 기초 화장품, 화운데이션, 립스틱, 마스카라 및 메이크업 베이스 등과 같은 색조 화장품, 샴푸, 린스, 헤어컨디셔너 및 헤어젤 등과 같 은 두발제품 및 비누 등이 포함된다. 바람직하게는, 본 발명의 루버스 속 식물의 뿌리 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 여드름을 치료 또는 예방하는데 사용될 수 있다. 따라서, 본 발명의 화장료 조성물에는 여드름의 치료 효과를 향상시킬 수 있는 파파인(Papain), 브로멜레인(Bromelain) 등 식물 유래의 단백질 분해효소와 미생물 유래의 단백질분해효소 등의 피부각질 제거제를 추가로 첨가할 수 있다. 특히, 살리실산이나 트리클로산 등의 물질을 추가로 첨가할 수 있다.

상기 소독제는 본 발명의 루버스 속 식물의 뿌리 추출물을 그대로 사용하거나 적합한 농도가 되도록 피부학적 및 약리학적으로 허용되는 희석제 또는 용매로 희석하여 제조할 수 있다. 상기 소독제는 생물체의 표면 바람직하게는, 포유동물의 피부 가장 바람직하게는 인간의 피부에 사용될 수 있다. 또한, 상기 소독제는 무생물체의 표면 예를 들면, 나무, 금속, 유리, 세라믹, 플라스틱, 종이 및 천의 표면에 사용될 수 있다. 상기 소독제는 침지, 면봉, 분무 및 브러싱을 포함하는 방법을 사용하여 상기 생물체 또는 무생물체의 표면에 처리할 수 있다. 바람직하게는, 상기 소독제는 상처표면, 수술 전 피부소독, 수술기구의 소독, 도관 소독 등의 용도로 병원과 일반 가정에서 사용할 수 있다.

상기 살균 세정제의 경우에는 본 발명에 따른 루버스 속 식물의 뿌리 추출물 외에 세정제의 제조 분야에서 일반적으로 사용되는 하나 이상의 부형제 및 첨가제를 포함하여 당 분야의 공지의 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있다. 상기 살균 세정제는 주방용 또는 식품용으로 사용될 수 있으며, 주방용 살균 세정제에는 루버스 속 식물의 뿌리 추출물 외에 음이온계 계면활성제, 비이온계 계면활성제, 양쪽성 계면활성제 등을 추가로 포함할 수 있다. 음이온계 계면활제의 예로는 알킬벤젠설포네이트, 알파올레핀설페이트, 소듐 또는 암모늄라우릴에테르설페이트 등이 있으며, 비온온계 계면활성제의 예로는 지방산 아미드, 알킬폴리글루코시드, 에톡시화 지방알콜계, 에톡시화 노닐 페놀계 등이 있다. 양쪽성 계면활성제의 예로는 베타인계 계면활성제, 아민 옥사이드 등이 있다. 상기 계면활성제 외에 향, 색소 및 물과 같은 희석제를 선택적으로 첨가할 수 있다.

식품용 살균 세정제의 경우에는 본 발명에 따른 루버스 속 식물의 뿌리 추출물에 식품학적으로 허용되는 용매 또는 희석제를 추가로 첨가하여 적절한 농도로 희석함으로써 제조할 수 있다. 상기 식품용 살균 세정제는 예를 들어, 과일류, 어류 및 육류 등의 살균 및 세척에 사용될 수 있다.

식품 보존제는 식품류의 보존성을 증강시키기기 위한 목적으로 본 발명의 따른 루버스 속 식물의 뿌리 추출물에 식품학적으로 허용되는 용매 또는 희석제를 추가로 첨가하여 제조할 수 있다. 본 발명의 식품 보존제는 식품의 제조 공정시 원료와 함께 배합하거나 별도의 수용성 현탁액으로 제조하여 첨가할 수도 있다. 또한, 상기 본 발명에 따른 식품 보존제를 사용하여 대상 식품을 침지시키거나 본 발명의 식품 보존제를 대상 식품에 분무할 수 있다.

이하, 본 발명의 구체적인 방법을 실시예를 들어 상세히 설명하고자 하지만 본 발명의 권리범위는 이들 실시예에만 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1>

복분자 딸기( Rubus coreanus ) 뿌리의 에탄올 추출물 제조

80% 에탄올 1000㎖에 건조한 후 약재의 형태로 세절된 복분자 딸기 뿌리(경동시장 약재상가) 100g을 혼합한 후 24℃에서 24시간 동안 방치하여 추출하였다. 그 다음 상기 추출물을 여과지(Whatman filter paper)를 사용하여 슬러지와 용액으로 분리하였다. 분리된 용액에서 에탄올을 제거하기 위해 농축기(Evaporator, Heidolph vv 2000)를 사용하여 38℃에서 4배 농축하였다.

<실시예 2>

복분자 딸기( Rubus coreanus ) 뿌리의 수추출물 제조

1차 증류수 1000㎖에 복분자 딸기 뿌리 100g을 혼합한 후 24℃에서 24시간 동안 방치하여 추출하였다. 그 다음 상기 추출물을 여과지(Whatman filter paper)를 사용하여 슬러지와 용액으로 분리하였다. 분리한 용액을 95℃의 온도에서 중탕하여 4배 농축하였다.

<실험예 1>

본 발명에 따른 복분자 딸기 ( Rubus coreanus ) 뿌리 추출물의 항균활성 측정

상기 실시예 1 및 실시예 2에서 제조한 복분자 딸기 뿌리 추출물의 항균활성을 측정하였다. 사용 균주로는 공지의 기탁기관으로부터 분양받은 스타필로코커스 속 세균, 스트렙토코커스 속 세균, 바실러스 속 세균, 예르시니아 속 세균, 프로피오니박테리움 속 세균 및 쉬겔라 속과 같은 다양한 병원성 세균들을 사용하였다(표 1).

상기 각각의 시험 균주의 단일 콜로니를 10㎖의 영양배지(Nutrient broth)가 들어 있는 200㎖ 플라스크에 접종하여 37℃에서 교반하면서 12시간 배양하였다. 상기 배양액을 10㎖의 영양배지가 들어 있는 200㎖ 플라스크에 초기 O.D. 0.1로 접종하여 7시간 동안 계대배양하였다. 상기와 같은 방법으로 활성화된 각각의 시험 균주 배양액을 플레이트당 균수가 2ㅧ 10⁸이 되도록 조절한 다음 60℃의 굳지 않은 영양한천배지 13㎖와 함께 1000mm 페트리디쉬에 부은 후 잘 굳혔다. 그 다음 56℃ 배양기에서 24시간 동안 건조시켜 완전히 습기를 제거한 10mm 페이퍼 디스크(Toyo Roshi Kaisha, Ltd, Japan)를 상기 플레이트 위에 올려놓은 다음 각각의 디스크에 상기 실시예 1의 복분자 딸기 뿌리의 에탄올 추출물 또는 실시예 2의 복분자 딸기 뿌리의 수추출물 100㎕씩을 주입하였다. 상기 플레이트를 37℃ 배양기에서 12시간 동안 배양한 다음 생성된 세균의 생육저지대 즉, 투명환(Clear zone)을 확인하고 베니어 캘리퍼스(Vernier calipers)를 사용하여 직경을 측정하였다.

실험 결과, 복분자 딸기 뿌리의 에탄올 추출물의 경우 모든 시험 균주에 있어서 항균 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 특히, 복분자 딸기 뿌리의 에탄올 추출물의 항균 효과는 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대해 가장 높은 것으로 나타났으며, 그 다음으로는 페스트균인 예르시니아 페스티스(Yersinia pestis)에 대한 항균 활성이 높게 나타났다. 또한, 본 발명의 복분자 딸기 뿌리의 에탄올 추출물의 항균 활성은 충치균인 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans), 탄저균인 바실러스 안트라시스(Bacillus anthracis) 및 이질균인 쉬겔라 프렉스네리(Shigella flexneri)에 대해 높게 나타났다. 특히, 상기 본 발명에 따른 복분자 딸기 뿌리의 에탄올 추출물은 4종의 탄저균주에 대해모두 항균 활성이 있는 것으로 나타났다. 또한, 상기 복분자 딸기 뿌리의 에탄올 추출물은 화농성 질환, 요로감염, 피부질환, 식중독의 원인균인 스타필로코커스 속 세균과 메티실린 내성균주들에 대해서도 항균 활성이 있는 것으로 나타났다. 한편, 복분자 딸기 뿌리의 수추출물의 경우에는 스타필로코커스 속 세균과 탄저균에 대해 항균 활성이 있는 것으로 나타났다(표 1 및 도 1a 내지 도 1c).

다양한 병원성 세균에 대한 복분자 딸기 뿌리 추출물의 항균 활성

	시험 미생물	그람염색	균주번호	입수처	투명환 직경(mm)
					에탄올 추출물	수추출물
1	스타필로코커스 아우레우스	+	KCTC 1621	한국 KCTC	16	-
2	스타필로코커스 아우레우스 피부 분리주	+	CAU-HY90	중앙대 의대	28	-
3	스타필로코커스 아우레우스 메티실린 내성주	+	ChDC Sa1	조선대 치대	17	-
4	스타필로코커스 아우레우스 메티실린 내성주	+	ChDC Sa2	조선대 치대	18	-
5	스타필로코커스 아우레우스 메티실린 내성주	+	ChDC Sa3	조선대 치대	13	-
6	스타필로코커스 에피더미디스	+	KCTC 1917	한국 KCTC	16	11.5
7	스타필로코커스 에피더미디스 피부 분리주	+	CAU-HY19	한국 KCTC	20	-
8	스타필로코커스 인터메디우스	+	KCTC 3344	한국 KCTC	17	11.5
9	스타필로코커스 사프로피티쿠스	+	KCTC 3345	한국 KCTC	18	-
10	스트렙토코커스 뮤탄스	+	ATCC 25175	미국 ATCC	30	-
11	바실러스 안트라시스	+	ATCC 14578	미국 ATCC	21	-
12	바실러스 안트라시스	+	ATCC 14185	미국 ATCC	24	11.5
13	바실러스 안트라시스	+	ATCC 14186	미국 ATCC	24	12
14	바실러스 안트라시스	+	Pasteur No.2 Army	미국 육군 의학연구소	21	-
15	예르시니아 페스티스	+	NCTC 5923	영국 NCTC	39	-
16	프로피오니박테리움 아크네스	+	B715	조선대 치대	40	-
17	쉬겔라 프렉스네리	-	KCTC 2008	한국 KCTC	19

<실시예 3>

산딸기( Rubus crataeifolius ) 뿌리의 에탄올 추출물 제조

80% 에탄올 1000㎖에 건조해서 약재의 형태로 세절한 산딸기 뿌리(입수처:강원도 홍천군 야산) 100g을 혼합한 후 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 산딸기 뿌리의 에탄올 추출물을 제조하였다.

<실험예 2>

본 발명에 따른 산딸기( Rubus crataeifolius ) 뿌리 추출물의 항균활성 측정

상기 실시예 3에서 제조한 산딸기 뿌리의 에탄올 추출물의 항균활성을 측정하였다. 사용 균주로는 공지의 기탁기관으로부터 분양받은 스타필로코커스 속 세균, 스트렙토코커스 속 세균, 바실러스 속 세균, 예르시니아 속 세균, 프로피오니박테리움 속 및 쉬겔라 속 세균과 같은 다양한 병원성 세균과 트리코파이톤 속과 같은 곰팡이를 사용하였으며(표 2), 실험예 1과 동일한 방법으로 항균활성을 측정하였다.

실험 결과, 산딸기 뿌리의 에탄올 추출물은 상기 실시예 1에서 제조한 복분자 딸기 뿌리의 에탄올 추출물과 동일하게 모든 시험 균주에 있어서 항균 효과가 있음을 확인할 수 있으며 무좀균인 트리코파이톤 멘타그로파이테스에 대해서도 항균 활성이 있는 것으로 나타났다(표 2 및 도 2a 내지 도 2c).

다양한 병원성 세균 및 곰팡이에 대한 산딸기 뿌리 추출물의 항균 활성

	시험 미생물	그람염색	균주번호	입수처	투명환 직경(mm)
					에탄올추출물
1	스타필로코커스 아우레우스	+	KCTC 1621	한국 KCTC	23
2	스타필로코커스 아우레우스 피부 분리주	+	CAU-HY90	중앙대 의대	19.5
3	스타필로코커스 아우레우스 메티실린 내성주	+	ChDC Sa1	조선대 치대	24
4	스타필로코커스 아우레우스 메티실린 내성주	+	ChDC Sa2	조선대 치대	16
5	스타필로코커스 아우레우스 메티실린 내성주	+	ChDC Sa3	조선대 치대	23
6	스타필로코커스 에피더미디스	+	KCTC1917	한국 KCTC	23
7	스타필로코커스 에피더미디스 피부 분리주	+	CAU-HY19	한국 KCTC	25
8	스타필로코커스 인터메디우스	+	KCTC 3344	한국 KCTC	25
9	스타필로코커스 사프로피티쿠스	+	KCTC 3345	한국 KCTC	24
10	스트렙토코커스 뮤탄스	+	ATCC 25175	미국 ATCC	32
11	바실러스 안트라시스	+	ATCC 14578	미국 ATCC	20
12	바실러스 안트라시스	+	ATCC 14185	미국 ATCC	22
13	바실러스 안트라시스	+	ATCC 14186	미국 ATCC	23
14	바실러스 안트라시스	+	Pasteur No.2 Army	미국 육군 의학연구소	25
15	예르시니아 페스티스	+	NCTC 5923	영국 NCTC	34
16	프로피오니박테리움 아크네스	+	B715	조선대 치대	42
17	프로피오니박테리움 아크네스	+	KCTC 3314	한국 KCTC	37
18	프로피오니박테리움 에시도프로피오니시	+	KCTC 5020	한국 KCTC	39
19	쉬겔라 프렉스네리	-	KCTC 2008	한국 KCTC	19
20	트리코파이톤 멘타그로파이테스	+	KCTC 6077	한국 KCTC	24

<제조예 1>

본 발명에 따른 복분자 딸기 또는 산딸기의 뿌리 추출물을 포함하는 피부 세안제의 제조

글리세린 6g, 모노알킬포스페이트 2.0g, 수산화나트륨수용액 0.5g, 미리스틴산 1.5g, 향료 미량이 포함된 세안제 베이스 12g에 상기 실시예 1 내지 실시예 3에서 제조한 복분자 딸기의 뿌리 추출물 또는 산딸기의 뿌리 추출물 0.5중량%를 혼합 하여 호모 믹서(homo mixer)에서 교반한 후 60℃에서 3분간 가열한 다음 탈기하고 37℃로 냉각하여 세안제 조성물을 제조하였다.

<제조예 2>

본 발명에 따른 복분자 딸기 또는 산딸기의 뿌리 추출물을 포함하는 비누의 제조

비누 베이스 99.5중량%(수분 포함)와 상기 실시예 1에서 제조한 실시예 1 내지 실시예 3에서 제조한 복분자 딸기의 뿌리 추출물 또는 산딸기의 뿌리 추출물 0.5중량%를 혼합기로 잘 혼합한 후 비누 제조기에서 압출, 절단 및 형타하여 고형 비누 조성물을 제조하였다.

<제조예 3>

본 발명에 따른 복분자 딸기 또는 산딸기의 뿌리 추출물을 포함하는 주방용 세정제의 제조

알킬에테르술폰산염(alkylethersulfonate) 20중량%, 알킬폴리글루코시드(alkylpolyglucoside) 4중량%, 라우릴디메틸아민옥사이드(lauryldimethylamine oxide) 4중량%, 코카미도 프로필베타인(Cocamidopropyl Betaine) 7중량%, 에톡시화라우릴알콜 5중량%, EDTA 0.3중량%, 색소 소량, 향 0.5중량%, 실시예 1 내지 실시 예 3에서 제조한 복분자 딸기의 뿌리 추출물 또는 산딸기의 뿌리 추출물 및 잔여량의 정제수를 첨가하여 혼합함으로써 세정제를 제조하였다.

<제조예 4>

본 발명에 따른 복분자 딸기 또는 산딸기의 뿌리 추출물을 포함하는 정제의 제조

실시예 1 내지 실시예 3에서 제조한 복분자 딸기의 뿌리 추출물 또는 산딸기의 뿌리 추출물 250mg을 부형제 직타용 락토즈 260mg과 아비셀(미결정 셀룰로오스) 35mg, 붕해 보조제인 나트륨 전분 글리코네이트 15mg, 결합제인 직타용 L-HPC(Low- hydroxyprophylcellulose) 80mg과 함께 U형 혼합기에 넣고 20분간 혼합하였다. 혼합이 완료된 후 활탁제로서 마그네슘 스테아레이트 10mg을 추가로 첨가하고 3분간 혼합하였다. 정량시험과 항습도 시험을 거쳐 타정하고 필름 코팅하여 정제를 제조하였다.

<제조예 5>

본 발명에 따른 복분자 딸기 또는 산딸기의 뿌리 추출물을 포함하는 시럽제의 제조

일정량의 물에 적당량의 백당을 용해시키고 여기에 보존제로서 파라옥시메틸 벤조에이트 80mg 및 파라옥시프로필벤조에이트 16mg을 가하고 실시예 1 내지 실시예 3에서 제조한 복분자 딸기의 뿌리 추출물 또는 산딸기의 뿌리 추출물을 각각 4.5g씩 넣고 60℃로 유지시키면서 완전히 용해한 후 냉각시키고 증류수를 가해 150ml로 만들어 3% 시럽제를 제조하였다.

<제조예 6>

본 발명에 따른 복분자 딸기 또는 산딸기의 뿌리 추출물을 포함하는 캅셀제의 제조

실시예 1 내지 실시예 3에서 제조한 복분자 딸기의 뿌리 추출물 또는 산딸기의 뿌리 추출물 450mg을 락토즈 50mg과 혼합시켜 경질 젤라틴 캅셀에 충진함으로써 캅셀제를 제조하였다.

본 발명에 따른 루버스 속 식물의 뿌리 추출물은 피부질환, 화농성 질환, 수술창상 감염, 요로감염 유발균과 식중독균, 탄저균, 이질균, 페스트균, 충치균, 여드름균, 메티실린 내성 포도상구균 및 무좀균에 대한 항균 활성을 가지고 있으므로 병원성 세균에 의한 피부감염증, 화농, 중이염, 방광염, 복막염과 같은 화농성 질환, 요로감염, 식중독, 탄저병, 페스트, 충치, 여드름, 메티실린 내성 포도상구균 감염증. 세균성 이질 및 병원성 곰팡이에 의한 무좀의 예방 또는 치료에 매우 유용 하게 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 루버스 속 식물의 뿌리 추출물은 화장품, 소독제, 살균 세정제 및 식품 보존제의 형태로 제조될 수 있다.

Claims (12)

1. 물 또는 C₁∼C₅의 알코올로 추출한 항균 활성을 가지는 루버스 속(Rubus sp.) 식물의 뿌리 추출물.
2. 제1항에 있어서, 상기 루버스 속 식물이 복분자 딸기(R. coreanus MIQ), 산딸기(R. crataegifolius) 및 멍석딸기(R. parvifolius Linne var. tiphyllus), 청복분자딸기(R. coreanus for. concolor T. Lee), 곰딸기(R. phoenicolasius Maximowicz), 장딸기(R. hirsutus Thunberg), 수리딸기(R. corchorifoius L Fil), 섬딸기(R. ribesioideus Maisumira), 겨울딸기(R. buergeri Miquel) 및 줄딸기(R. oldhamil Maximowicz)로 이루어진 그룹 중에서 선택된 어느 하나로부터 유래된 것임을 특징으로 하는 추출물.
3. 제1항에 있어서, 상기 항균 활성이 스타필로코커스 속(Staphylococcus sp.), 스트렙토코커스 속(Streptococcus sp.), 바실러스 속(Bacillus sp.), 예르시니아 속(Yersinia sp.), 프로피오니박테리움 속 (Propionibacterium sp.) 및 쉬겔라 속 (Shigella sp.)으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 세균 또는 트리코파이톤 속 곰팡 이에 대한 것임을 특징으로 하는 추출물.
4. 제3항에 있어서, 상기 스타필로코커스 속 세균이 스타필로코커스 아우레우스(S. aureus), 스타필로코커스 에피더미디스(S. epidermidis), 스타필로코커스 인터메디우스(S. intermedius) 및 스타필로코커스 사프로피티쿠스(S. saprophyticus)로 이루어진 그룹 중에서 선택된 것임을 특징으로 하는 추출물.
5. 제3항에 있어서, 상기 스트렙토코커스 속 세균이 스트렙토코커스 뮤탄스 (Streptococcus mutans)임을 특징으로 하는 추출물.
6. 제3항에 있어서, 상기 바실러스 속 세균이 바실러스 안트라시스(B. anthracis)임을 특징으로 하는 추출물.
7. 제3항에 있어서, 상기 예르시니아 속 세균이 예르시니아 페스티스(Yersinia pestis)임을 특징으로 하는 추출물.
8. 제3항에 있어서, 상기 프로피오니박테리움 속 세균이 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 또는 프로피오니박테리움 에시도프로피오니시(P. acidipropionici)임을 특징으로 하는 추출물.
9. 제3항에 있어서, 상기 쉬겔라 속 세균이 쉬겔라 프렉스네리(Shigella flexneri)임을 특징으로 하는 추출물.
10. 제3항에 있어서, 상기 트리코파이톤 속 곰팡이가 트리코파이톤 멘타그로파이테스(Trichophyton mentagrophytes)임을 특징으로 하는 추출물.
11. 제1항의 루버스 속 식물의 뿌리 추출물을 포함하는 항균용 조성물.
12. 제1항의 루버스 속 식물의 뿌리 추출물을 포함하는 항균용 제제.

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