KR100562077B1 - 피부보호, 피부 트러블 방지, 피부 유해균 성장억제, 여드름 예방 및 항균특성을 가지는 석류피 추출물의 제조방법 및 그 제조방법으로부터 제조된 석류피 추출물을 함유하는 피부외용 항균조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 항균특성을 가지는 석류피 추출물의 제조방법 및 그 제조방법으로부터 제조된 석류피 추출물을 함유하는 피부외용 항균조성물에 관한 것이다.

본 발명에서 사용한 석류피 추출물은 피부에 수렴효과와 미용효과를 가짐과 동시에 피부유해균인 황색 포도상구균(Staphylococcus aureus), 슈도모나스 에피더미스(Pseudomonas epidermis), 여드름 원인균인 프로피오니 박테리움 아크네균(Propionibacterium acnes), 대장균(E. coli) 등에 항균작용이 우수하여 피부트러블을 방지하고 피부에 유용한 미용효과를 제공한다.

석류피, 추출물, 피부외용, 항균조성물

Description

피부보호, 피부 트러블 방지, 피부 유해균 성장억제, 여드름 예방 및 항균특성을 가지는 석류피 추출물의 제조방법 및 그 제조방법으로부터 제조된 석류피 추출물을 함유하는 피부외용 항균조성물{Method for manufacturing Punica granatum L. extract having antibacterial property and antibacterial compositions for dermatologically external preparation containing Punica granatum L. extract manufactured by the above method}

도 1은 석류피 추출물의 균주 저지환 사진이고,

도 2는 석류피 추출물의 수렴효과(%)를 나타낸 것이다.

본 발명은 피부보호, 피부트러블 방지, 피부 유해균 성장억제, 여드름 예방 및 항균특성을 가지는 석류피 추출물의 제조방법 및 그 제조방법으로부터 제조된 석류피 추출물을 함유하는 피부외용 항균조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 석류피의 80% 에탄올 추출물이 피부유해균에 항균작용을 통하여 피부트러블을 개선하고, 또한 피부에 우수한 수렴효과를 가짐으로써 피부트러블 방지, 피부보호 및 여드름에 유효한 효과를 갖는 피부외용 항균 조성물에 관한 것이다.

현재 의약품 등에는 항균성분으로 여러가지 항생제(마이신류) 및 항균제(트 리클로산 등)가 사용되고 있으나, 피부독성이 강하고 피부부작용이 있어 의사가 처방하거나 일부 국소적으로 사용하는 제품에 주로 처방되어져 왔으며, 얼굴전체나 피부의 넓은 부위에 적용하는 피부외용제품에는 의약품용 항균제의 사용에 어려움이 있었다.

따라서, 얼굴이나 넓은 피부에 사용하는 제품에는 피부안전성이 중요하기 때문에 보다 순한 천연물을 이용한 항균제 조성물의 개발 및 이를 활용한 연구가 지속되어 왔다.

그 예로는 대한민국 특허공개 제 2003-0011393호에서는 계지, 하수오 등의 한약재 추출물을 함유한 항균제 처방을 개발하였고, 대한민국 특허공개 제 2003-0011743호에서는 감초, 오배자 등의 항균성분을 개발 항균활성을 갖는 비누를 개발하였다. 또한 대한민국 특허공개 제 2003-0034280호에서는 항균효과를 갖는 마치현 추출물을 이용한 여성용 생리대를 개발하였고, 대한민국 특허공개 제 1999-0053760호에서는 고삼 추출물의 항균효과를 이용한 여드름용 제품을 개발한 바 있었다. 따라서 이러한 시도는 피부에 독성이 없으며 피부에 안전한 항균활성을 갖는 항균조성물의 개발에 유용한 기술로 이용된다.

일반적으로 이러한 피부상재균에 항균활성을 평가하는 타겟 균주로는 P. aeruginosa, P. epidermis, S. aureus, P. ovale, 및 P. acnes 등이 대상 균주로 선택되고 있으며, 이는 이들 균주가 많은 문헌에서 주로 피부에 각종 트러블 및 체취 발생, 여드름을 발생시켜 피부에 문제를 일으키는 원인균으로 알려져 있기 때문이다. 따라서 본 발명에서도 이들 균주에 대한 항균활성이 평가되어졌으며, 상기 선행기술의 예에서도 본 내용의 확인이 가능하다.

본 발명자들은 피부트러블 원인균의 제거에 유효하며, 장기간 사용해도 피부에 안전성이 높은 천연추출물을 개발하기 위하여 여러 천연물을 대상으로 여러 식물들에 대한 항균활성을 시험하였다. 이의 평가를 위하여 최소억제농도(Minimum Inhibition Concentration, 이하 "MIC"라 약칭함)를 측정하고, 시험균주의 저지환을 확인 측정하였다. 이러한 결과로 한방에서 사용되고 있는 몇몇 식물추출물들이 피부상재균 및 여드름균에 대해 낮은 농도에서도 항균 효과가 있음을 알아내었고, 이들을 외용제형에 처방이 용이하고 피부에 자극이 없으며, 부가적으로 피부미용효과를 제공할 수 있는 성분임을 알아내어 본 발명을 완성하게 된 것이다.

본 발명은 상기와 같은 종래의 여러가지 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 그 목적은, 피부에 수렴효과와 미용효과를 가짐과 동시에 피부트러블 원인균의 제거에 유효하고 장기간 사용해도 피부에 안전성이 높으며 각종 피부유해균 등에 대한 항균작용이 우수하여 피부트러블을 방지할 수 있는 항균특성을 갖는 석류피 추출물의 제조방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은, 상기 항균특성을 갖는 석류피 추출물의 제조방법에 따라 제조된 석류피 추출물을 함유하는 피부외용 항균 조성물을 제공하는 것이다.

상기한 목적을 달성하기 위한 본 발명의 항균특성을 갖는 석류피 추출물의 제조방법은, 수확, 건조하여 세절한 석류피에 5~10배량의 메탄올, 에탄올 혹은 아세톤 등의 극성 용매를 가하여 10∼14일간 실온에서 침적하여 추출 여과하거나, 50∼60℃의 온도를 가하여 1∼5시간 가온하여 추출 여과하는 단계와; 상기 여과액을 감압 증발하여 농축물을 얻어내는 단계를 포함하는 것에 특징이 있다.

바람직하기로는, 상기 석류피 알코올 추출물은 이소펠레트린, 퓨니칼린 및 퓨니카라진으로 구성된 군으로부터 선택되며, 그 사용량은 전체 중량의 0.01~5%인 것이 특징이다.

또한, 상기 석류피 추출물 이외에도, 유분, 계면활성제, 보습제, 점증제, 방부제, 산화방지제, 향료 및 색소들이 더 포함될 수 있다.

이하 본 발명의 상기 항균특성을 갖는 석류피 추출물의 제조방법과, 그 제조방법에 따라 제조된 석류피 추출물을 함유하는 피부외용 항균 조성물을 좀 더 구체적으로 설명하면 다음과 같다.

본 발명에서 사용되는 석류피는 동의보감에서는 수삽약으로 사용되어 설사와 이질을 치료하고 살충 및 항균효과와 지혈효과가 있는 것으로 알려져 있으며, 주요한 유효성분은 알칼로이드인 이소펠레트린(isopelletierine)이며, 그외 탄닌인 퓨니칼린(punicalin), 퓨니카라진(punicalagin) 등이 알려져 있다.

따라서, 본 발명에 따른 피부외용 항균조성물은 석류피의 알코올 추출물을 소정량 함유한다. 이때 상기 석류피의 알코올 추출물은 이소펠레트린, 퓨니칼린 및 퓨니카라진으로 구성된 군으로부터 선택되며, 전체 중량의 0.01∼5％인 것이 바람직하다.

본 발명에 따른 항균 조성물의 주요 성분의 추출에 사용되는 추출용매는 메탄올, 에탄올, 아세톤 등의 극성 용매로서, 추출 방법으로 예를 들면 건조된 식물에 5~10배량의 메탄올, 에탄올 혹은 아세톤 등의 극성 용매를 가하여 약 10~14일간 실온에서 침적 추출하거나, 또는 약 1~5시간 동안 50~60℃의 온도에서 추출하여 식물 추출물을 얻는다. 본 발명에 있어서, 피부 외용제 중의 식물 추출물의 배합량은 전체중량의 0.01~5%, 특히 0.05~1%로 하는 것이 좋다. 본 발명의 피부외용 항균 조성물은 상기한 식물추출물 외에도, 본 발명의 효과를 저하시키지 않는 범위 내에서 피부 외용제에 일반적으로 사용하는 각종 성분, 예를 들면 유분, 계면활성제, 보습제, 점증제, 방부제, 산화방지제, 향료, 색소 등을 배합하는 것이 가능하다. 본 발명의 피부 외용제의 제형은 임의로 선택할 수 있어서 크림, 로션, 스킨로션, 팩, 메이크업베이스, 파운데이션 등 화장품인 기초 및 색조제품뿐만이 아니라 비누, 외용세정제, 주방용 세정제 등 여러 가지 형태로 제조할 수 있는 데, 통상의 피부 외용제의 제조 방법에 따라서 제조할 수 있다. 본 발명에서 사용하는 식물은 오래 전부터 한방에서 사용해오던 재료로서 체내 섭취에서도 인체에 대한 안전한 성분으로 알려졌으며, 본 발명에서는 사람을 이용한 피부자극시험결과로 피부에 안전함을 확인하였다.

본 발명의 추출물 제조 실시예 및 시험예를 구체적으로 설명하면 다음과 같다.

추출물 제조 실시 예 1

석류피(건조물 또는 수확물)를 잘게 썰은 것 100g에 에탄올 1리터를 가하여 실온에서 10일간 침적하여 추출 여과한 후, 그 여과액을 감압 증발하여 7.5g의 농축물을 얻었다.

시험 예 1: 항균 활성의 측정

시험관 희석법에 의해 항균력을 측정하였다. 즉 상기 방법에 의해 제조한 석류피 추출물을 시료로 하여 가열 멸균한 뮬러 힌톤 액체배지 (Muller Hinton Broth)에 각종 농도로 희석한 다음 시험을 실시한다.

시험관에 피부상재 시험균을 넣어 37℃에서 혐기 배양을 실시한다.

48~72시간 배양한 후, 균의 증식(배지의 혼탁유무)를 확인하여 시료의 최소량을 최소억제농도(Minimum Inhibition Concentration : MIC)로 하여 시료의 항균력을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 1과 같다.

표 1. 석류피 추출물의 균성장 최소억제농도 (MIC, ppm)

시험균주	최소억제농도
E. coli	300
P. epidermis	200
S. aeurus	90
P. ovale	100
P. acnes	180

시험예 2: 항균활성 균성장 저지환(Clear zone) 측정

페이퍼 디스크법에 의하여 항균활성을 측정하였다. 측정법은 상기의 준비된 배지로 아래의 시험균이 배양된 샤레를 준비하였다. 준비된 샤레에 시료액을 적신 페이퍼 디스크(paper disc)를 올려 놓는다. 이때 항균활성이 있는 시료는 시료가 배지위로 확산되면서 배양된 시험균에 대한 항균활성이 있으면 시험균이 사멸된 투명한 지역이 나타나게 된다. 이 시험균이 사멸된 지역(Clear zone)을 자로 재어서 이를 저지환으로 나타내게 되며, 이 환이 크면 클수록 항균활성이 높음을 나타내며, 항균활성이 없으면 저지환이 생성되지 않는다.

표 2. 석류피추출물의 균성장 저지환(clear zone, cm)

미생물	저지환	벤조일 퍼옥사이드(대조군)
E. coli	1.2	0.8
P. epidermis	0.9	0.7
S. aeurus	1.0	0.5
P. ovale	1.5	1.8
P. acnes	1.0	1.5

별첨: 도 1 참조

상기의 결과에서와 같이 석류피 추출물은 피부상재균에 우수한 항균활성이 있음을 확인할 수 있었다.

시험 예 3: 수렴효과 측정

일반적으로 수렴효과는 헤모글로빈을 이용하여 헤모글로빈의 약물에 의한 수렴현상을 이용하여 그 정도를 측정한다. 시험법은 헤모글로빈 1mg/ml 용액과 석류피추출물을 1:1의 비율로 혼합한 후 1분간 강하게 섞어준다. 3000rpm으로 10분간 원심분리한 후 상층액을 96well plate에 200 ul씩 넣고 407 nm에서 흡광도를 측정 하여 무처리군에 비하여 수렴효과를 %로 나타내었다.

도 2는 그 농도에 따른 석류피추출물의 수렴효과(%)를 나타낸 것이다.

도 2에서 나타낸 바와 같이, 석류피 추출물은 기존에 수렴효과가 좋다고 알려진 탄닌산과 비교하여 우수한 수렴효과가 있음을 나타내어 피부에 유용한 미용효과를 줄 수 있다.

이하, 본 발명의 또 다른 실시예를 설명하면 다음과 같다.

실시 예 2: 유연 화장수

(단위: 중량%)

글리세린 5.0

1,3-부틸렌글리콜 3.0

올레일알코올 0.1

모노라우린산 폴리옥시에틸렌소르비탄(20E.O) 1.5

폴리옥시에틸렌 라우릴에테르 0.5

에탄올 8.0

향료 0.05

방부제 적량

석류피추출물 0.02

정제수 나머지

100

실시 예 3: 수렴 화장수

(단위: 중량%)

구연산 0.1

소르비톨 2.0

글리세린 3.0

폴리옥시에틸렌올레일에테르 1.0

에탄올 12.0

향료 0.1

방부제 적량

석류피추출물 0.03

정제수 나머지

100

실시 예 4: 크림

(단위: 중량%)

스쿠알란 5.0

스테아린산 8.0

바셀린 2.0

모노스테아린산 폴리옥시에틸렌소르비탄(20E.O) 1.5

자기유화형 모노스테아린산 글리세린 2.5

프로필렌글리콜 4.0

글리세린 5.0

향료 0.25

방부제 적량

산화방지제 적량

석류피추출물 0.05

정제수 나머지

100

실시 예 5: 로션

(단위: 중량%)

스테아린산 1.0

에탄올 1.5

바셀린 2.0

스쿠알란 3.0

유동파라핀 5.0

모노올레인산 폴리옥시에틸렌소르비탄(6E.O) 2.0

프로필렌글리콜 4.0

글리세린 3.0

트리에탄올 아민 1.0

향료 0.3

방부제 적량

산화방지제 적량

석류피추출물 0.03

정제수 나머지

100

실시 예 6: 유액상 파운데이션

(단위: 중량%)

스테아린산 2.0

스테아릴 알코올 0.5

액상라놀린 2.0

유동파라핀 3.0

미리스틴산 이소프로필 5.0

카르복실에틸셀룰로오스나트륨 0.2

벤토나이트 0.5

글리세린 3.0

이산화티탄 8.0

탈크 4.0

착색안료 적량

향료 0.2

방부제 적량

산화방지제 적량

석류피추출물 0.02

정제수 나머지

100

실시 예 7: 투웨이케이크

(단위: 중량%)

마그네슘미리스테이트 2.0

카올린 5.0

산화아연 2.0

나이론분말 5.0

산화철색소 3.0

이산화티탄 5.0

실리콘오일 4.0

석류피추출물 0.02

방부제 적량

향 적량

실리카코팅분체 나머지

100

실시 예 8: 비누

(단위: 중량%)

야자유 지방산 1.0

이산화티탄 0.3

에틸렌디아민 테트라초산디나트륨 0.1

향료 적량

색소 적량

석류피추출물 0.03

비누칩 베이스 나머지

100

실시 예 9: 여성용 질세정제

(단위: 중량%)

젖산 0.5

비누분 30.0

메틸파라벤 0.2

글리세린 3.0

구연산 1.0

향료 적량

석류피추출물 0.01

정제수 나머지

100

실시 예 10: 주방용세제

(단위: 중량%)

폴리소르베이트 5.0

에탄올 7.0

소금 1.5

탄산수소나트륨 0.5

구연산 0.3

메칠파라벤 0.15

향료 적량

석류피추출물 0.02

정제수 나머지

100

실시 예 11: 애완견 항균탈취제

(단위: 중량%)

향(캡슐) 적량

폴리소르베이트 2.0

에탄올 50.0

석류피 추출물 0.01

트리크로산 0.5

프로필렌글리콜 10.0

방부제 적량

정제수 나머지

100

시험 예 4: 상기 처방의 피부첩포 시험결과

의대 피부과에서 30명의 인원에 대해 시행한 피부첩포 시험결과(primary irritation) 아래의 표에서와 같이 시험처방에서 자극지수(Irritation score)가 1.0 이하의 무자극의 결과를 보였으며, 이는 항균활성이 있으면서 피부에 안전한 처방임을 나타낸다.

실시 예	피부첩포 시험결과(자극지수)
실시 예 1	무자극(0.0)
실시 예 2	무자극(0.0)
실시 예 3	무지극(0.0)
실시 예 4	무자극(0.0)
실시 예 5	무자극(0.0)
실시 예 6	무자극(0.2)
실시 예 7	무자극(0.5)
실시 예 8	무자극(0.6)
실시 예 9	무자극(0.0)
실시 예 10	무자극(0.5)
실시 예 11	무자극(0.5)

이상의 설명에서 알 수 있듯이, 본 발명의 석류피 추출물을 함유하는 피부외용 항균 조성물에 의하면, 석류피의 80% 에탄올 추출물이 피부유해균에 항균작용을 통하여 피부트러블을 개선할 뿐만 아니라, 피부에 우수한 수렴효과를 가짐으로써 피부트러블 방지, 피부보호 및 여드름에 유효한 효과를 가질 수 있다.

Claims (4)

1. 수확, 건조하여 세절한 석류피에 5∼10배량의 메탄올, 에탄올 혹은 아세톤 등의 극성 용매를 가하여 10∼14일간 실온에서 침적하여 추출 여과하거나, 50∼60℃의 온도를 가하여 1∼5시간 가온하여 추출 여과하는 단계와;

   상기 여과액을 감압 증발하여 농축물을 얻어내는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 피티로스포룸 오발레균(Pityrosporum ovale) 및 피로피오니 박테리움 아크네균(Propionibacterium acnes)에 대하여 항균활성을 나타내는 석류피 추출물의 제조방법.
2. 제 1항의 제조방법에 따라 제조된 석류피 추출물이 피부외용제의 전체중량 0.01∼5％를 함유된 것을 특징으로 하는 석류피 추출물을 함유하는 피티로스포룸 오발레균(Pityrosporum ovale) 및 피로피오니 박테리움 아크네균(Propionibacterium acnes)에 대하여 항균활성을 나타내는 피부외용 항균조성물.
3. 삭제
4. 제 2항에 있어서, 상기 석류피 추출물 이외에도, 유분, 계면활성제, 보습제, 점증제, 방부제, 산화방지제, 향료 및 색소들이 더 포함됨을 특징으로 하는 석류피 추출물을 함유하는 피티로스포룸 오발레균(Pityrosporum ovale) 및 피로피오니 박테리움 아크네균(Propionibacterium acnes)에 대하여 항균활성을 나타내는 피부외용 항균조성물.

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