KR101864409B1 - 한방 추출물 및 미생물 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 항균, 살균 또는 항진균용 조성물 - Google Patents

한방 추출물 및 미생물 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 항균, 살균 또는 항진균용 조성물 Download PDF

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이태권
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이엠생활환경 주식회사
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Abstract

본 발명은 한방 추출물 및 미생물 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 항균, 살균 또는 항진균용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로, 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 발효추출물을 혼합한 혼합물이 항균 효과, 항진균 효과, 살균 효과 및 항산화 효과가 우수하므로, 본 발명의 한방 추출물 및 미생물 발효추출물을 항균, 살균 또는 항진균용 조성물, 및 화장품을 포함한 다목적 용도로 유용하게 이용할 수 있다.

Description

한방 추출물 및 미생물 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 항균, 살균 또는 항진균용 조성물{Antibacterial or antifungal composition comprising oriental medicine extract and microbial ferment extract as an active ingredient}
한방 추출물 및 미생물 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 항균, 살균 또는 항진균용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 항균, 살균 또는 항진균용 조성물에 관한 것이다.
우리 주변에는 많은 미생물이 존재한다. 특히, 우리가 일상생활에서 쉽게 접할 수 있는 전화기, 핸드폰, 바닥재, 냉장고, 에어콘, 가습기, 장난감, 벽지 등은 각종 세균류 및 곰팡이 등이 번식하기 쉬워 악취를 발생하기도 하며, 심지어는 인체에 유해한 세균이 번식하여 각종 질병을 유발한다. 따라서 이를 방지하기 위한 고기능성 항균물질이 요구되며, 현재까지 이러한 항균물질들에 대한 많은 연구가 진행되고 있다.
병원성 미생물에 의한 직접 혹은 간접적인 피해는 경제, 환경, 의학적으로 많은 문제를 야기하고 있다. 식품산업에서의 식품 유통 과정 중의 부패로 인한 손실, 농산업에서의 농작물에 대한 과량의 화학 살충제의 사용으로 인한 인체의 유해성 및 환경오염, 항생제의 오남용으로 인한 항생제 내성 세균의 출현 등 사회 전반에서 많은 문제들을 야기하고 있다.
특히, 메티실린 내성 황색 포도상구균(MRSA: methicillin-resistant Staphylococcus aureus)은 여러 가지 항생제에 대해 내성이 있는 세균으로 사람에게 감염되어 여러 가지 난치병을 일으키는 세균이다. 다제내성 황색포도상구균 또는 '옥사실린 내성 황색포도상구균'이라고도 한다. 정의에 따라 페니실린과 세팔로스포린을 포함한 β-락탐계 항생물질에 내성을 획득한 황색포도상구균은 MRSA가 된다. MRSA는 특히 병원이나 요양원에서 문제가 될 수 있는데, 열린 상처가 있거나, 외과적 장비를 사용하고, 면역 체계가 약해진 환자들은 일반 대중보다 감염의 위험이 높으며, 치사율 또한 높은 것으로 알려져 있다.
또한, 건강과 환경을 중시하는 웰빙열풍을 타고 천연 재료를 사용한 천연화장품이나 방부제를 사용하지 않았다는 소위 무방부제 화장품이 유행하면서, 화장품의 미생물 오염 문제가 대두되고 있다. 실제로 천연화장품 사용 중에 곰팡이가 피었다는 피해 사례가 늘어나고 있다. 이러한 화장품의 미생물 오염 문제는 제품 자체의 변질로 인한 상품 가치의 저하뿐만 아니라, 피부자극반응, 알레르기 반응, 광독성, 광알레르기 등 다양한 피부 트러블을 초래할 수 있기 때문에 그 중요성에 대한 인식이 높아지고 있다. 시중에 판매되는 화장품의 경우에도 천연물에서 유래된 영양성분과 미생물에 의해 분해되기 쉬운 원료가 많이 사용되고 있는 관계로 유통과정에서 또는 소비자가 사용 중에 곰팡이, 효모, 세균 등의 미생물에 의해 오염되기 쉬우므로, 이와 같은 미생물 성장을 억제하기 위하여 방부제를 첨가하며, 최소량으로 최대의 항균력을 나타내도록 하여야 한다. 따라서 화장품 제품 중의 영양성분의 배합, pH, 유화형태, 방부제의 혼합사용 및 그 안정성을 고려하여야 함은 물론이고 제품 중의 모든 원료 성분에 대한 항균 활성능 및 피부자극 여부를 사전에 미리 파악하여 각 제품별로 적절한 방부체계를 선택하는 것이 중요시되고 있다.
그러나 화장품에 사용되는 방부제(살균·보존료)는 대부분이 합성 방부제로 세포독성 및 피부 알레르기 등의 원인이 되는 것으로 알려져 있다. 미국 피부과학회(North American Contact Dermatitis Group)의 연구에 따르면 방부제는 화장품 중에서 피부 알레르기 및 자극반응을 일으키는 2번째로 가장 일반적인 원인이라고 보고하였다. 따라서 다양한 부작용을 나타내는 합성 방부제를 대체할 수 있는 천연 방부제의 개발이 화장품업계에서는 주요 관심사로 대두되고 있다.
이에, 본 발명자들은 피부자극이 없고 항균 활성을 갖는 화장품 방부제를 개발하기 위해 노력한 결과, 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 발효추출물 각각을 혼합한 혼합물이 항균 및 항진균 효과, 살균 효과 및 항산화 효과가 우수하고, 안점막자극 및 피부자극이 없음을 확인함으로써, 상기 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 항균, 살균 또는 항진균용 조성물의 유효성분으로 이용할 수 있고, 화장품을 포함한 다목적 용도로 이용할 수 있음을 밝힘으로써, 본 발명을 완성하였다.
대한민국 등록특허 제10-1473925호
본 발명의 목적은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 발효추출물을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 의약외품을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 발효추출물을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 의약외품을 제공한다.
아울러, 본 발명은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 발효추출물을 혼합한 혼합물이 항균 및 항진균 효과, 살균 효과, 및 항산화 효과가 우수하므로, 본 발명의 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 항균, 살균 또는 항진균용 조성물의 유효성분으로 이용할 수 있고, 화장품은 물론 다목적 세정제(피부 세정제, 모발 세정제, 질 세정제, 구강 세정제, 욕실용 세정제, 주방용 세정제 등), 보존제(화장품 보존제, 식품 보존제, 의약품 보존제), 첨가제(식품 첨가제, 화장품 첨가제), 살균제의 유효성분으로 유용하게 이용할 수 있다.
도 1 내지 도 4는 본 발명의 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 발효추출물을 포함하는 혼합물을 토끼의 우안에 투여하고 1일 또는 7일째에 안점막자극을 관찰한 도로서, 도 1은 비세척군의 투여 후 1일째 안점막자극을 관찰한 도이고, 도 2는 비세척군의 투여 후 7일째 안점막자극을 관찰한 도이며, 도 3은 세척군의 투여 후 1일째 안점막자극을 관찰한 도이고, 도 4는 세척군의 투여 후 7일째 안점막자극을 관찰한 도이다.
도 5 및 도 6은 본 발명의 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 포함하는 혼합물을 토끼의 피부에 첩보하고 24시간 후(도 5) 또는 72시간 후(도 6) 피부자극을 관찰한 도이다.
이하 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 발효추출물을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 조성물을 제공한다.
본 발명의 유효성분인 단삼 추출물, 고추냉이 추출물 및 황금 추출물은 하기의 단계들을 포함하는 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다:
1) 단삼, 고추냉이 또는 황금에 추출용매를 가하여 추출하는 단계; 및
2) 단계 1)의 추출물을 여과하는 단계.
본 발명의 제조방법에 있어서, 상기 단계 1)의 단삼, 고추냉이 또는 황금은 재배한 것 또는 시판되는 것을 제한 없이 사용할 수 있다.
본 발명의 제조방법에 있어서, 상기 단계 1)의 추출용매는 물, 알코올 또는 이의 혼합물을 사용하는 것이 바람직하다. 상기 알코올로는 C1 내지 C4의 저급 알코올 이용하는 것이 바람직하고, 저급 알코올로는 에탄올 또는 메탄올을 이용하는 것이 바람직하다. 추출방법으로는 초음파추출, 진탕추출, Soxhelt 추출 또는 환류 추출을 이용하는 것이 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 상기 추출용매를 세척하고 잘 건조된 단삼, 고추냉이 또는 황금 분량의 1 내지 15배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 추출 온도는 20 내지 110℃인 것이 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 또한, 추출시간은 10분 내지 72시간이 바람직하며, 20분 내지 48시간이 더욱 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 아울러 추출 횟수는 1 내지 5회인 것이 바람직하나, 이에 한정하지 않는다.
본 발명의 제조방법에 있어서, 상기 단계 2)를 거친 후 하기의 단계들을 추가적으로 포함할 수 있다:
3) 단계 2)의 여과물을 감압 농축하는 단계; 및
4) 단계 3)의 농축물을 건조하는 단계.
본 발명의 제조방법에 있어서, 단계 3)의 감압농축은 진공 감압 농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
또한, 본 발명의 유효성분인 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물은 하기의 단계들을 포함하는 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
a) 락토바실러스 플란타룸 또는 바실러스 서브틸리스를 액체배지로 배양하여 배양액을 획득하는 단계; 및
b) 단계 a)에서 획득한 배양액을 여과하는 단계.
본 발명의 제조방법에 있어서, 상기 단계 a)에서 락토바실러스 플란타룸을 MRS 배지로 25 내지 35℃에서 24 내지 72시간 동안 배양하여 배양액을 획득하는 것이 바람직하고, 바실러스 서브틸리스을 NB 배지로 30 내지 40℃에서 24 내지 72시간 동안 배양하여 배양액을 획득하는 것이 바람직하나, 이에 한정하지 않는다.
본 발명에서, 상기 조성물은 단삼 추출물 : 고추냉이 추출물 : 황금 추출물 : 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 : 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 1 : 0.5 내지 2.0 : 0.5 내지 2.0 : 0.5 내지 2.0 : 0.5 내지 2.0의 중량비로 함유하는 것이 바람직하나, 이에 한정하지 않는다.
또한, 상기 조성물은 단삼 추출물을 0.5 내지 3.5 중량부, 고추냉이 추출물을 0.5 내지 3.5 중량부, 황금 추출물을 0.5 내지 3.5 중량부, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물을 0.5 내지 3.5 중량부, 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 0.5 내지 3.5 중량부로 함유하는 것이 바람직하나, 이에 한정하지 않는다.
본 발명에서, 상기 "항균용 조성물", "살균용 조성물" 또는 "항진균용 조성물"은 항미생물제를 총칭하는 의미인 항생제와 같은 의미일 수 있고, 항균제, 항진균제, 살균제, 방부제, 보존제 또는 제균제와 같은 의미일 수 있으며, 일예로 식중독을 일으키거나 화농성 감염증의 원인이 되는 세균, 수술, 화상 등 생체의 저항력이 저하되어 있는 경우 감염으로 인해 질환을 악화시킬 수 있는 세균, 구강 질환이나 질염의 원인이 되는 세균을 포함하는, 병원성 미생물의 발육과 생활 기능을 저지, 억제 또는 사멸할 수 있는 물질을 의미한다.
이에, 본 발명에서, 상기 조성물은 세균에 대해 항균 활성 또는 살균 활성, 또는 진균에 대한 항진균 활성을 갖는 것이 바람직하고, 상기 세균으로 대장균(Escherichia coli), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 페렴간균(Klebsiella pneumoniae), MRSA균(Staphylococcus aureus subsp . aureus), 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus), 쥐티투스균(Salmonella typhimurium) 또는 시겔라 플렉스네리(Shigella flexneri)일 수 있고, 상기 진균으로 칸디다 알비칸스(Candida albicans)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서, 상기 조성물은 항산화 활성을 갖는 것이 바람직하다.
본 발명에서, 상기 조성물은 항균, 살균 또는 항진균 활성이 요구되는 다양한 목적 및 용도로 사용될 수 있으며, 구체적으로는 화장품, 피부 세정제, 모발 세정제, 질 세정제, 구강 세정제, 욕실용 세정제, 주방용 세정제, 화장품 보존제, 화장품 방부제, 식품 보존제, 식품 방부제, 식품첨가제, 사료첨가제, 소독제 또는 가습기 살균제 소재로 사용될 수 있다.
본 발명의 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 제조하고, 이들을 1 : 1 : 1 : 1 : 1의 중량비로 혼합한 후 증류수를 이용해 10%로 희석한 혼합물을 제조하였다.
또한, 본 발명자들은 상기 혼합물을 이용하여 항균 실험, 항산화 실험 및 살균 실험을 수행한 결과, 혼합물에 포함된 추출물 단독 시료, 1종의 추출물 및 2종의 발효추출물 조합 시료, 및 2종의 추출물 및 2종의 발효추출물 조합 시료보다 현저히 우수한 항균 활성, 항진균 활성, 항산화 활성을 나타내고, 살균 효과도 우수함을 확인하였다(표 1 내지 표 4 참조).
아울러, 본 발명자들은 상기 혼합물을 이용하여 동물 모델에서 안점막자극 시험 및 피부자극 시험을 수행한 결과, 혼합물을 처리한 경우 안점막자극 및 피부자극이 관찰되지 않으므로, 안전성이 우수함을 확인하였다(표 5 내지 표 10, 도 1 내지 도 6 참조).
따라서, 본 발명의 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 포함하는 혼합물이 우수한 항균, 항진균, 항산화 및 살균 효과를 나타내므로, 본 발명의 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 항균, 살균 또는 항진균용 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용할 수 있다.
본 발명의 항균, 살균 또는 항진균용 조성물이 세정제 소재로 사용되는 경우, 적용될 수 있는 물품에 있어서 특별히 한정되지 않으며, 구체적으로는 핸드워시, 바디워시, 샴푸, 린스, 클렌징폼, 클렌징젤, 비누, 가글, 치약, 욕실용 세정제, 주방용 세정제 등을 예시할 수 있다. 본 발명의 항균, 살균 또는 항진균용 조성물은 세정제 총 중량에 대하여 0.00001 내지 50 중량%로 포함될 수 있고, 1 μg/ml 내지 10000 μg/ml의 농도로 포함될 수 있다. 또한, 상기 세정제는 본 발명의 항균, 살균 또는 항진균용 조성물 이외에, 항균 활성을 가지는 다른 공지 항균 물질을 더 포함할 수 있다.
본 발명의 항균, 살균 또는 항진균용 조성물이 보존제 또는 방부제 소재로 사용되는 경우, 적용될 수 있는 물품에 있어서 특별히 한정되지 않으며, 구체적으로는 화장품, 식품, 의약품 등을 예시할 수 있다. 본 발명의 항균, 살균 또는 항진균용 조성물은 보존제 또는 방부제 총 중량에 대하여 0.00001 내지 50 중량%로 포함될 수 있고, 1 μg/ml 내지 10000 μg/ml의 농도로 포함될 수 있다. 또한, 상기 보존제 또는 방부제는 본 발명의 항균, 살균 또는 항진균용 조성물 이외에, 항균 활성 또는 방부 활성을 가지는 다른 공지 물질을 더 포함할 수 있다.
본 발명의 항균, 살균 또는 항진균용 조성물이 첨가제 소재로 사용되는 경우, 적용될 수 있는 물품에 있어서 특별히 한정되지 않으며, 구체적으로는 식품 및 동물사료 등을 예시할 수 있다. 본 발명의 항균, 살균 또는 항진균용 조성물은 첨가제 총 중량에 대하여 0.00001 내지 50 중량%로 포함될 수 있고, 1 μg/ml 내지 10000 μg/ml의 농도로 포함될 수 있다. 또한, 상기 첨가제는 본 발명의 항균, 살균 또는 항진균용 조성물 이외에, 항균 활성을 가지는 다른 공지 항균 물질이나 기타 기능성을 부여할 수 있는 물질을 더 포함할 수 있다.
본 발명의 항균, 살균 또는 항진균용 조성물이 살균제 소재로 사용되는 경우, 적용될 수 있는 물품에 있어서 특별히 한정되지 않으며, 구체적으로는 소독제 및 가습기 살균제 등을 예시할 수 있다. 본 발명의 항균, 살균 또는 항진균용 조성물은 첨가제 총 중량에 대하여 0.00001 내지 50 중량%로 포함될 수 있고, 1 μg/ml 내지 10000 μg/ml의 농도로 포함될 수 있다. 또한, 상기 첨가제는 본 발명의 항균, 살균 또는 항진균용 조성물 이외에, 항균 활성을 가지는 다른 공지 항균 물질이나 기타 기능성을 부여할 수 있는 물질을 더 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 약학 조성물을 제공한다.
상기 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물, 이들의 함량, 항균 및 항진균에 대해서는 상기 항균, 살균 또는 항진균용 조성물에 대한 설명과 동일한 바, 구체적인 설명은 상기 내용을 원용하고, 이하에서는 약학 조성물에 특유한 구성에 대해서만 설명하도록 한다.
한편, 본 발명의 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 포함하는 혼합물이 우수한 항균, 항진균, 항산화 및 살균 효과를 나타내므로, 본 발명의 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 항균, 살균 또는 항진균용 약학 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구 투여(예를 들어, 도포 또는 정맥 내, 피하, 복강 내 주사)할 수 있으나 경구 투여가 바람직하다. 비경구 투여를 위한 제제로는 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 멸균된 수용액, 액제, 비수성용제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 좌제, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사제제의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플 라스마제의 피부 외용 약학적 조성물을 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다. 국소 투여의 조성물은 임상적 처방에 따라 무수형 또는 수성형일 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 경구 투여를 위한 고형제제에는 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 연질캅셀제, 환 등이 포함된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 에어로졸 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
상기 약학 조성물은 투여를 위해서 유효성분으로 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 제조할 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형 등으로 제제화할 수 있다.
본 발명에 따른 약제학적으로 허용가능한 첨가제는 상기 약학 조성물에 대해 0.1~90 중량부 포함되는 것이 바람직하다.
본 발명의 약학 조성물의 바람직한 투여량은 체내에서 활성성분의 흡수도, 환자의 연령, 성별 및 비만의 정도에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 경구 투여제의 경우 일반적으로 성인에게 1일에 체중 1당 본 발명의 조성물을 1일 0.0001 내지 100 mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 100 mg/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
또한, 본 발명은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 의약외품 조성물을 제공한다.
상기 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물, 이들의 함량, 항균 및 항진균에 대해서는 상기 항균, 살균 또는 항진균용 조성물에 대한 설명과 동일한 바, 구체적인 설명은 상기 내용을 원용한다.
본 발명의 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 포함하는 혼합물이 우수한 항균, 항진균, 항산화 및 살균 효과를 나타내므로, 본 발명의 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 항균, 살균 또는 항진균용 의약외품 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용할 수 있다.
본 발명에서 상기 의약외품 조성물은 소독청결제, 치약, 가그린 물티슈, 가습기 충진제, 또는 필터충진제일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 따른 의약외품 조성물은 유효성분으로 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 항균, 살균 또는 항진균용 화장료 조성물을 제공한다.
상기 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물, 이들의 함량 및 항균에 대해서는 상기 항균, 살균 또는 항진균용 조성물에 대한 설명과 동일한 바, 구체적인 설명은 상기 내용을 원용하고, 이하에서는 약학 조성물에 특유한 구성에 대해서만 설명하도록 한다.
본 발명에서, 상기 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 에센스, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤, 피부 점착타입의 화장료, 립스틱, 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 샴푸, 린스, 바디클렌저, 비누 또는 연고 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.
본 발명의 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 포함하는 혼합물이 우수한 항균, 항진균, 항산화 및 살균 효과를 나타내고, 안점막자극 및 피부자극이 없으므로, 본 발명의 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 항균, 살균 또는 항진균용 화장료 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에는, 화장료의 제형 또는 사용목적 등에 맞게 임의로 선정한 물질을 첨가할 수 있다. 예를 들어, 정제수, 유분, 계면활성제, 보습제, 고급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 지방산, 왁스, pH 조절제, 향료 등이 첨가될 수 있다.
상기 유분으로는 미네랄오일, 사이클로메치콘, 스쿠알란, 옥틸도데실 미리스테이트, 올리브오일, 마카다미아 너트오일, 글리세릴옥타노에이트, 캐스터오일, 에칠헥실 이소노나노에이트, 디메치콘, 사이크로펜타실록산, 선플라워씨드오일 등이 사용될 수 있다.
상기 계면활성제로는 소르비탄세스퀴놀리에이트, 폴리솔베이트 60, 글리세릴 스테아레이트, 친유형 글리세릴스테아레이트, 소르비탄 올리에이트, 소르비탄 스테아레이트, 디이에이-세틸포스페이트, 소르비탄스테아레이트/슈크로스코코에이트, 글리세릴스테아레이트/폴리에틸렌글라이콜-100 스테아레이트, 세테아레스-6 올리베이트, 아라키딜알코올/베헤닐알코올/아라키딜 글루코사이드, 폴리프로필렌글라이콜-26-부테스-26/폴리에틸렌글라이콜-40 하이드로제네이티드 캐스터오일 등이 사용될 수 있다.
상기 보습제로는 글리세린, 솔비톨, 프로필렌 글라이콜, 부틸렌 글라이콜, 헥실렌 글라이콜, 디글리세린, 베타인, 글리세레스-26, 메칠글루세스-20 등이 사용될 수 있다.
상기 고급 알코올로는 세틸알코올, 스테아릴 알코올, 옥틸도데칸올, 이소스테아릴 알코올 등이 사용될 수 있다.
상기 증점제로는 산탄검, 카보머, 마그네슘알루미늄실리케이트, 셀룰로오스검, 덱스트린 팔미테이트 등이 사용될 수 있다.
상기 킬레이트제로는 디소듐이디티에이, 테트라소듐이디티에이 등이 사용될 수 있다.
상기 색소로는 청색1호, 적색40호, 황색4호, 황색5호 등이 사용될 수 있다.
상기 지방산으로는 스테아릭애씨드, 미리스틱애씨드, 팔미틱애씨드, 이소스테아릭애씨드, 라우릭애씨드 등이 사용될 수 있다.
상기 왁스로는 카나우바왁스, 칸데닐라왁스, 밀납, 경납 등이 사용될 수 있다.
상기 pH 조절제로는 트리에탄올아민, 씨트릭애씨드 등이 사용될 수 있다.
상기 향료로는 천연향료, 조합향료 등이 사용될 수 있다
이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의하여 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의하여 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 1> 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 을 포함하는 혼합물의 제조
<1-1> 단삼 추출물의 제조
단삼(Salvia miltiorrhiza Bunge) 분말 30 g에 100% 에탄올 100 ㎖를 가한 후 상온에서 48시간 동안 추출 및 여과하여 단삼 에탄올 추출물을 제조하였다.
<1-2> 고추냉이 추출물의 제조
고추냉이(Wasabia koreana NAKAI) 65 g을 세정하고, 증류수 100 ㎖를 가한 후 상온에서 24시간 동안 추출 및 여과하여 고추냉이 수추출물을 제조하였다.
<1-3> 황금 추출물의 제조
황금(Scutellaria baicalensis Georgi) 분말 35 g에 70% 에탄올 100 ㎖를 가한 후 상온에서 24시간 동안 추출 및 여과하여 황금 에탄올 추출물을 제조하였다.
<1-4> 락토바실러스 플란타룸 ( Lactobacillus plantarum ) 발효추출물 의 제조
액체배지로 MRS broth에 0.1 × 107 CFU/㎖ 균체 수의 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum ATCC 14917)을 접종하고 37℃에서 48시간 동안 정치배양한 후 0.2 ㎛의 여과지를 이용하여 여과함으로써, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물을 제조하였다.
<1-5> 바실러스 서브틸리스 ( Bacillus subtilis ) 발효추출물 의 제조
액체배지로 Nutrient broth에 0.1 × 107 CFU/㎖ 균체 수의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ATCC 6633)을 접종하고 30℃에서 48시간 동안 정치배양한 후 0.2 ㎛의 여과지를 이용하여 여과함으로써, 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 제조하였다.
<1-6> 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 을 포함하는 혼합물의 제조
3종의 한방 추출물로 단삼 추출물, 고추냉이 추출물 및 황금 추출물을 포함하고, 2종의 미생물 발효추출물로 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 포함하는 혼합물을 하기의 방법으로 제조하였다.
구체적으로, 상기 실시예 <1-1>에서 제조한 단삼 에탄올 추출물 : 상기 실시예 <1-2>에서 제조한 고추냉이 수추출물 : 상기 실시예 <1-3>에서 제조한 황금 에탄올 추출물 : 상기 실시예 <1-4>에서 제조한 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 : 상기 실시예 <1-5>에서 제조한 바실러스 서브틸리스 발효추출물을 1 : 1 : 1 : 1 : 1의 중량비로 혼합하여 혼합물을 제조한 후 증류수를 이용해 10%로 희석하여 전체 혼합물 중량% 기준 단삼 에탄올 추출물 2 중량%, 고추냉이 수추출물 2 중량%, 황금 에탄올 추출물 2 중량%, 락토바실러스 플란타룸 발효추출물 2 중량% 및 바실러스 서브틸리스 발효추출물 2 중량%를 포함하는 혼합물을 제조하였다.
< 실험예 1> 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 을 포함하는 혼합물의 항균 및 항진균 효과 확인
본 발명의 혼합물의 항균 효과를 확인하기 위하여, 하기의 방법으로 항균 및 항진균 실험을 수행하였다.
구체적으로, 항균 활성을 알아보기 위하여 지표세균으로 대장균(Escherichia coli ATCC 25922)을 액체배지에서 배양하여 1.1 × 104 CFU/㎖의 균체 수로 준비하였고, 녹농균(Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442)를 액체배지에서 배양하여 1.2 × 104 CFU/㎖의 균체 수로 준비하였으며, 황색포도상구균(Staphylococcus aureus ATCC 4352)을 액체배지에서 배양하여 3.6 × 104 CFU/㎖의 균체 수로 준비하였고, 페렴간균(Klebsiella pneumoniae ATCC 4352)을 액체배지에서 배양하여 2.1 × 104 CFU/㎖의 균체 수로 준비하였으며, MRSA균(Staphylococcus aureus subsp . aureus ATCC 33591)을 액체배지에서 배양하여 1.0 × 104 CFU/㎖의 균체 수로 준비하였다. 또한, 항진균 활성을 알아보기 위하여 지표진균으로 칸디다 알비칸스(Candida albicans ATCC 10231)를 액체배지에서 배양하여 3.8 × 104 CFU/㎖의 균체 수로 준비하였다. 상기 준비한 지표세균 및 지표진균 각각을 에탄올 5% 희석 시료(시료 1), 단삼 추출물 5% 희석 시료(시료 2), 2종의 미생물 발효추출물 10% 희석 시료(시료 3), 단삼 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 10% 희석 시료(시료 4), 황금 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 10% 희석 시료(시료 5), 단삼 추출물, 고추냉이 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 10% 희석 시료(시료 6), 단삼 추출물, 황금 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 10% 희석 시료(시료 7), 고추냉이 추출물, 황금 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 10% 희석 시료(시료 8), 및 상기 실시예 <1-6>에서 제조한 혼합물(시료 9)이 담긴 플라스크에 처리하고 37℃에서 24시간 동안 배양한 후 분광광도계(spectrophotometer)로 흡광도를 측정하고, 하기 [수학식 1]과 같이 계산하여 지표세균의 감소율(%)을 확인하였다. 또한, 대조군의 경우 상기 준비한 지표세균 및 지표진균 각각을 PBS 버퍼가 담긴 플라스크에 처리하고 상기 기재된 방법과 동일한 방법으로 배양한 후 흡광도를 측정하였다.
Figure 112017126281248-pat00001
상기 시료 2는 상기 실시예 <1-1>에서 제조한 단삼 추출물을 증류수를 이용해 5%로 희석하여 제조하였다. 시료 3은 상기 실시예 <1-4> 및 <1-5>에서 제조한 2종의 미생물 발효추출물 각각을 1 : 1의 중량비로 혼합한 후 증류수를 이용해 10%로 희석하여 제조하였다. 시료 4는 상기 실시예 <1-1>에서 제조한 단삼 추출물 및 상기 실시예 <1-4> 및 <1-5>에서 제조한 2종의 미생물 발효추출물 각각을 1 : 1 : 1의 중량비로 혼합한 후 증류수를 이용해 10%로 희석하여 제조하였다. 시료 5는 실시예 <1-3>에서 제조한 황금 추출물 및 상기 실시예 <1-4> 및 <1-5>에서 제조한 2종의 미생물 발효추출물 각각을 1 : 1 : 1의 중량비로 혼합한 후 증류수를 이용해 10%로 희석하여 제조하였다. 시료 6은 상기 실시예 <1-1> 및 <1-2>에서 제조한 단삼 추출물 및 고추냉이 추출물, 및 실시예 <1-4> 및 <1-5>에서 제조한 2종의 미생물 발효추출물 각각을 1 : 1 : 1 : 1의 중량비로 혼합한 후 증류수를 이용해 10%로 희석하여 제조하였다. 시료 7은 상기 실시예 <1-1> 및 <1-3>에서 제조한 단삼 추출물 및 황금 추출물, 및 실시예 <1-4> 및 <1-5>에서 제조한 2종의 미생물 발효추출물 각각을 1 : 1 : 1 : 1의 중량비로 혼합한 후 증류수를 이용해 10%로 희석하여 제조하였다. 시료 8은 상기 실시예 <1-2> 및 <1-3>에서 제조한 고추냉이 추출물 및 황금 추출물, 및 실시예 <1-4> 및 <1-5>에서 제조한 2종의 미생물 발효추출물 각각을 1 : 1 : 1 : 1의 중량비로 혼합한 후 증류수를 이용해 10%로 희석하여 제조하였다. 상기 제조한 시료 각각의 조성은 하기 [표 1]에 나타내었다.
조성(중량%) 시료 1 시료 2 시료 3 시료 4 시료 5 시료 6 시료 7 시료 8 시료 9
에탄올 5 - - - - - - - -
실시예 <1-1>의
단삼 추출물		 - 5 - 3.3 - 2.5 2.5 - 2.0
실시예 <1-2>의
고추냉이 추출물		 - - - - - 2.5 - 2.5 2.0
실시예 <1-3>의
황금 추출물		 - - - - 3.3 - 2.5 2.5 2.0
실시예 <1-4>의
락토바실러스 플란타룸 발효추출물		 - - 5 3.3 3.3 2.5 2.5 2.5 2.0
실시예 <1-5>의
바실러스 서브틸리스
발효추출물		 - - 5 3.3 3.3 2.5 2.5 2.5 2.0
증류수 95 95 90 90.1 90.1 90 90 90 90
전체 100 100 100 100 100 100 100 100 100
그 결과, 하기 표 2에 나타낸 바와 같이, 1종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 포함하는 시료인 시료 3 및 시료 4, 그리고 2종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 포함하는 시료인 시료 5 내지 7에 비해 본 발명의 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 포함하는 혼합물(시료 9)의 경우 지표세균 및 지표진균 모두에 대해 항균 및 항진균 효과가 나타나고, 지표세균 및 지표진균의 감소율 또한 보다 우수하게 나타나므로, 본 발명의 혼합물이 가장 우수한 항균 및 항진균 효과를 가짐을 확인하였다.
대장균 녹농균 황색포도상구균 칸디다 알비칸스균 페렴간균 MRSA균
시료 1 - - - - - -
시료 2 - - + - - -
시료 3 - + - - -
시료 4 + + + - - -
시료 5 - + + + - -
시료 6 + + + - - -
시료 7 + + + ++ + -
시료 8 ++ + + + + -
시료 9 +++ +++ +++ +++ +++ +++
* +++ : >99.9%; ++ : < 95% 및 > 90%; + : < 90% 및 > 80%; 및 - : <10%.
< 실험예 2> 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 을 포함하는 혼합물의 항산화 효과 확인
본 발명의 혼합물의 항산화 효과를 확인하기 위하여, 자유 라디칼 소거능을 측정하였다.
구체적으로 자유 라디칼 소거능은 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl) 분석법을 이용하여 수행하였다. 상기 <실험예 1>에서 제조한 시료 1 내지 시료 8, 및 상기 실시예 <1-6>에서 제조한 혼합물(시료 9) 100 ㎕ 각각에 0.2 mM DPPH 용액 100 ㎕를 혼합하고 상온에서 20분 동안 방치한 후 517 nm에서 흡광도를 측정하고, 하기 [수학식 2]를 이용하여 전자공여능(%)을 확인하였다. 또한, 양성 대조군으로는 아스코르브산(Ascorbic acid)를 사용하였고, 음성 대조군으로는 증류수를 사용하였다.
Figure 112017126281248-pat00002
A: DPPH 혼합 후 측정한 시료의 흡광도;
B: 시료 자체의 흡광도;
C: DPPH 혼합 후 측정한 음성 대조군의 흡광도; 및
D: 음성 대조군 자체의 흡광도.
상기 DPPH는 그 자체가 매우 안정한 라디칼로서 517 nm에서 광흡수를 나타내는 화합물로, 항산화 기작 중에서 단백질-라디칼 소거제(proton-radical scavenger)에 의해 탈색되기 때문에 흡광도를 측정하고 전자공여능을 계산하여 항산화 활성을 확인할 수 있다.
그 결과, 하기 표 3에 나타낸 바와 같이, 1종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 포함하는 시료인 시료 3 및 시료 4, 그리고 2종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 포함하는 시료인 시료 5 내지 7에 비해 본 발명의 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물을 포함하는 혼합물(시료 9)에서 항산화 활성이 현저히 우수하게 나타나므로, 본 발명의 혼합물이 가장 우수한 항산화 효과를 가짐을 확인하였다.
시료 전자공여능(%)
시료 1 0.76±0.63
시료 2 89.24±0.96
시료 3 36.66±0.85
시료 4 81.27±3.51
시료 5 79.34±0.69
시료 6 73.57±4.24
시료 7 84.15±0.72
시료 8 80.26±0.36
시료 9 92.74±0.70
< 실험예 3> 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 을 포함하는 혼합물의 살균 효과 확인
본 발명의 혼합물의 살균 효과를 확인하기 위하여, 하기의 방법으로 살균 실험을 수행하였다.
구체적으로, 살균 효과를 알아보기 위하여 지표세균으로 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ATCC 6633)을 액체배지에 배양하여 1.0 × 105 CFU/㎖의 균체 수로 준비하였고, 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus ATCC 33844)을 액체배지에 배양하여 1.0 × 105 CFU/㎖의 균체 수로 준비하였으며, 쥐티투스균(Salmonella typhimurium ATCC 13311)을 액체배지에 배양하여 1.0 × 105 CFU/㎖의 균체 수로 준비하였고, 시겔라 플렉스네리(Shigella flexneri ATCC 12022)를 액체배지에서 배양하여 1.0 × 105 CFU/㎖의 균체 수로 준비하였다. 그 다음, 상기 준비한 지표세균을 상기 실시예 <1-6>에서 제조한 혼합물이 담긴 플라스크에 처리하고 1시간 동안 배양한 후 상기 <실험예 1>에 기재된 방법과 동일한 방법으로 지표세균의 감소율(%)을 확인하였다.
그 결과, 하기 표 4에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 혼합물이 바실러스 서브틸리스 및 장염비브리오균에 대해서는 99.9%의 살균 효과를 나타내고, 쥐티푸스균 및 시겔라 플렉스네리에 대해서도 살균 효과를 나타냄을 확인하였다.
세균 바실러스 서브틸리스 장염비브리오균 쥐티투스균 시겔라 플렉스네리
감소율(%) 99.9 99.9 38.1 54.6
< 실험예 4> 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 을 포함하는 혼합물의 안전성 확인
<4-1> 안점막자극 시험을 통한 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 을 포함하는 혼합물의 안전성 확인
본 발명의 혼합물의 안전성을 확인하기 위하여, 하기의 방법으로 안점막자극 시험을 수행하였다.
구체적으로, 3개월령 수컷 Yac:NZW 토끼 10마리를 천안연암대학에서 제공받아, 온도 21.8±0.5℃, 상대습도 62±1.5%, 12시간 명/암 주기 조건으로 (재)한국화학융합시험연구원에서 음수 및 사료를 자유 섭취시켜 사육하였다.
그 다음, 상기 토끼를 비세척군(T1) 6마리, 세척군(T2) 3 마리로 나누고, 시험물질 투여 24시간 전에 양안의 각막, 홍채 및 결막 등의 이상유무를 휴대용 슬릿램프(HEINE OPTOTECHNIK GmbH & Co. KG, 독일)를 이용하여 확인하였다. 24시간 후 토끼의 우안에 시험물질로 상기 실시예 <1-6>에서 제조한 혼합물 0.1 ㎖를 투여하고, 좌안은 대조부위로 설정하였다. 투여 후 시험물질의 누출 방지를 위해 상하안검을 잡아 약 1초간 폐안시켰다. 세척군은 시험물질 투여 20~30초 후 멸균생리식염수를 사용하여 양안을 충분히 세척하였고, 비세척군은 양안을 세척하지 않았다. 투여 후 1일 1회씩 시험물질 투여 후 7일까지 하기 [표 5]에 따라 안점막반응을 관찰하고, 개체별 안점막자극지수(I.I.O.I., The Individual Index of Ocular Irritation), 평균안점막자극지수(M.I.O.I., Mean Index of Ocular Irritation), 급성안점막자극지수(I.A.O.I., The Index of Acute Ocular Irritation)를 산출하였다. 시험물질의 안점막자극 정도는 아래의 기준에 따라 3 단계로 판정하였다.
① 1 단계 판정
시험물질 투여 후 3 일내에 나타나는 I.A.O.I.값을 확인한 결과, I.A.O.I. ± 5 점 범위에 포함되는 관찰값을 보이는 개체가 전체 동물의 40 % 이상이 됨을 확인하였다.
② 2 단계 판정
1 단계 판정에 따라 선정한 I.A.O.I.값을 바탕으로 하기 [표 6]에 따라 1 차 안점막자극 등급을 정하였다.
③ 3 단계 판정 (최종판정)
1 차 안점막자극 등급을 바탕으로 하기 [표 7]에 따라 최종 안점막자극 등급을 판정하였다.
Figure 112017126281248-pat00003
Figure 112017126281248-pat00004
Figure 112017126281248-pat00005
그 결과, 하기 표 8 및 도 1 내지 4에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 혼합물을 투여한 비세척군 및 세척군 모두에서 각막혼탁, 홍채이상, 결막발적, 결막부종 및 결막배출물 등의 안점막자극이 관찰되지 않음을 확인하였다.
Figure 112017126281248-pat00006
<4-2> 피부자극 시험을 통한 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 을 포함하는 혼합물의 안전성 확인
본 발명의 혼합물의 안전성을 확인하기 위하여, 하기의 방법으로 피부자극 시험을 수행하였다.
구체적으로, 3개월령 수컷 Yac:NZW 토끼 7마리를 천안연암대학에서 제공받아, 온도 21.8±0.5℃, 상대습도 62±1.5%, 12시간 명/암 주기 조건으로 (재)한국화학융합시험연구원에서 음수 및 사료를 자유 섭취시켜 사육하였다.
그 다음, 시험물질 투여 24시간 전에 상기 토끼의 등 부위를 제모[약 (15 × 15) cm2]한 후, 투여 직전에 각각 (2.5 × 2.5) cm2 넓이의 투여구획 2 개소와 대조구획 2 개소로 구분 및 표시하였다. 시험동물 당 투여구획과 대조구획을 각각 찰과부위와 비찰과부위로 구분하였으며, 찰과부위는 표피만 손상되고 진피는 손상되지 않으며 피가 나지 않는 정도의 찰과상을 입혔다. 24시간 후 시험물질로 상기 실시예 <1-6>에서 제조한 혼합물 0.5 ㎖를 거즈(gauze)[(2.5 × 2.5) cm2]에 균일하게 도포하였다. 시험물질을 처리한 거즈를 상부 투여구획의 찰과부위 1 개소와 비찰과부위 1 개소에 부착하였다. 투여부위를 비자극성 테이프(Tegarderm, 3M )와 탄력붕대(Coban, 3M)를 이용하여 잘 고정시켰다. 첩포는 24 시간 후 제거하고 피부에 남아있는 시험물질은 세척물질을 이용해 부드럽게 세정해주었다. 투여 후 1일 1회씩 시험물질 투여 후 7일까지 하기 [표 9]에 따라 피부반응을 관찰하였고, 피부자극 지수(P.I.I)를 산출하였다. 피부자극성은 하기 [표 10]에 따라 판정하였다.
Figure 112017126281248-pat00007
Figure 112017126281248-pat00008
그 결과, 하기 표 11, 및 도 5 및 도 6에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 혼합물을 첩보한 투여구획 및 대조구획(혼합물을 처리하지 않는 구획) 모두에서 피부자극이 관찰되지 않음을 확인하였다.
Figure 112017126281248-pat00009
따라서, 상기 <실험예 1> 내지 <실험예 4>의 결과를 통해 본 발명의 혼합물의 항균, 항진균, 항산화 및 살균 효과가 현저히 우수하고, 피부에 도포 시 안전함을 확인하였으므로, 본 발명의 혼합물을 항균, 살균 또는 항진균용 조성물의 유효성분으로 이용할 수 있고, 상기 항균, 살균 또는 항진균용 조성물을 화장수, 화장품 보존제 등 화장료 조성물을 포함한 다목적 용도로 이용할 수 있다.
하기에 본 발명의 조성물을 위한 제조예를 예시한다.
< 제조예 1> 3종의 한방 추출물 및 2종의 미생물 발효추출물 을 포함하는 혼합물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물의 제조
<1-1> 유연화장수(skin)
본 발명의 혼합물을 함유한 유연화장수(skin)을 하기 [표 12]의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.
성분 함량(중량%)
본 발명의 혼합물 2.0
글리세린 5.0
1,3-부틸렌글리콜 3.0
REG 1500 1.0
알란토인 0.1
DL-판테놀 0.3
EDTA-2Na 0.02
벤조페논-9 0.04
소듐 히아루로네이트 5.0
에탄올 10.0
옥틸도데세스-16 0.2
폴리솔베이트 20 0.2
유니사이드-유 13 0.01
향 미량
증류수 잔량
합계 100
<1-2> 영양화장수(lotion)
본 발명의 혼합물을 함유한 영양화장수(lotion)을 하기 [표 13]의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.
성분 함량(중량%)
본 발명의 혼합물 2.0
글리세릴 스테아레이트 SE 1.5
세테아릴알콜 1.5
라놀린 1.5
폴리솔베이트 60 1.3
솔비타스테아레이트 0.5
경화식물유 4.0
광물유 5.0
트리옥타노인 2.0
디메치콘 0.8
초산 토코페롤 0.5
카르복시비닐 폴리머 0.12
글리세린 5.0
1,3-부틸렌글리콜 3.0
소듐히아루로네이트 5.0
트리에탄올아민 0.12
유니사이드-유 13 0.02
향 미량
증류수 잔량
합계 100
<1-3> 영양크림
본 발명의 혼합물을 함유한 영양크림을 하기 [표 14]의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.
성분 함량(중량%)
본 발명의 혼합물 2.0
친유형 모노스테아린산 글리세린 1.5
세테아릴알콜 1.5
스테아린산 1.0
폴리솔베이트 60 1.5
솔비타스테아레이트 0.6
이소스테아릴 이소스테레이트 5.0
스쿠알란 5.0
광물유 35.0
디메치콘 0.5
히드록시에틸셀룰로오스 0.12
글리세린 6.0
트리에탄올아민 0.7
유니사이드-유 13 0.02
향 미량
증류수 잔량
합계 100

Claims (15)

  1. 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 배양액 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 배양액을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 조성물로서, 상기 조성물은 대장균(Escherichia coli), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 페렴간균(Klebsiella pneumoniae), MRSA균(methicillin-resistant Staphylococcus aureus), 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus), 쥐티투스균(Salmonella typhimurium) 및 시겔라 플렉스네리(Shigella flexneri)에 대해 항균 활성 또는 살균 활성을 갖고, 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대해 항진균 활성을 갖는, 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출되는 것을 특징으로 하는, 항균, 살균 또는 항진균용 조성물.
  3. 제 2항에 있어서, 상기 추출물은 물, 메탄올, 에탄올 및 이들의 혼합 용매로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 용매로 추출되는 것을 특징으로 하는, 항균, 살균 또는 항진균용 조성물.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 락토바실러스 플란타룸 배양액은 락토바실러스 플란타룸을 액체배지로 25 내지 35℃에서 24 내지 72시간 동안 배양하여 획득한 배양액을 여과하는 단계를 거쳐 제조되는 것을 특징으로 하는, 항균, 살균 또는 항진균용 조성물.
  5. 제 1항에 있어서, 상기 바실러스 서브틸리스 배양액은 바실러스 서브틸리스을 액체배지로 30 내지 40℃에서 24 내지 72시간 동안 배양하여 획득한 배양액을 여과하는 단계를 거쳐 제조되는 것을 특징으로 하는, 항균, 살균 또는 항진균용 조성물.
  6. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 단삼 추출물 : 고추냉이 추출물 : 황금 추출물 : 락토바실러스 플란타룸 배양액 : 바실러스 서브틸리스 배양액을 1 : 0.5 내지 2.0 : 0.5 내지 2.0 : 0.5 내지 2.0 : 0.5 내지 2.0의 중량비로 함유하는 것을 특징으로 하는, 항균, 살균 또는 항진균용 조성물.
  7. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 단삼 추출물을 0.5 내지 3.5 중량부, 고추냉이 추출물을 0.5 내지 3.5 중량부, 황금 추출물을 0.5 내지 3.5 중량부, 락토바실러스 플란타룸 배양액을 0.5 내지 3.5 중량부, 바실러스 서브틸리스 배양액을 0.5 내지 3.5 중량부로 함유하는 것을 특징으로 하는, 항균, 살균 또는 항진균용 조성물.
  8. 삭제
  9. 삭제
  10. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 항산화 활성을 갖는 것을 특징으로 하는, 항균, 살균 또는 항진균용 조성물.
  11. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 화장품, 피부 세정제, 모발 세정제, 질 세정제, 욕실용 세정제, 구강 세정제, 주방용 세정제, 화장품 보존제, 식품 보존제, 의약품 보존제, 식품첨가제 및 사료첨가제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상에 사용되는 것을 특징으로 하는, 항균, 살균 또는 항진균용 조성물.
  12. 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 배양액 및 바실러스 서브틸리스 배양액을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 약학 조성물로서, 상기 조성물은 대장균(Escherichia coli), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 페렴간균(Klebsiella pneumoniae), MRSA균(methicillin-resistant Staphylococcus aureus), 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus), 쥐티투스균(Salmonella typhimurium) 및 시겔라 플렉스네리(Shigella flexneri)에 대해 항균 활성 또는 살균 활성을 갖고, 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대해 항진균 활성을 갖는, 조성물.
  13. 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 배양액 및 바실러스 서브틸리스 배양액을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 의약외품 조성물로서, 상기 조성물은 대장균(Escherichia coli), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 페렴간균(Klebsiella pneumoniae), MRSA균(methicillin-resistant Staphylococcus aureus), 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus), 쥐티투스균(Salmonella typhimurium) 및 시겔라 플렉스네리(Shigella flexneri)에 대해 항균 활성 또는 살균 활성을 갖고, 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대해 항진균 활성을 갖는, 조성물.
  14. 단삼 추출물, 고추냉이 추출물, 황금 추출물, 락토바실러스 플란타룸 배양액 및 바실러스 서브틸리스 배양액을 유효성분으로 함유하는, 항균, 살균 또는 항진균용 화장료 조성물로서, 상기 조성물은 대장균(Escherichia coli), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 페렴간균(Klebsiella pneumoniae), MRSA균(methicillin-resistant Staphylococcus aureus), 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus), 쥐티투스균(Salmonella typhimurium) 및 시겔라 플렉스네리(Shigella flexneri)에 대해 항균 활성 또는 살균 활성을 갖고, 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대해 항진균 활성을 갖는, 조성물.
  15. 제 14항에 있어서, 상기 항균, 살균 또는 항진균용 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 에센스, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤, 피부 점착타입의 화장료, 립스틱, 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 샴푸, 린스, 바디클렌저, 비누 및 연고로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 제형인 것을 특징으로 하는, 항균, 살균 또는 항진균용 화장료 조성물.



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