KR102166279B1 - 식물 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항균, 및 항염증용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항균, 및 항염증용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 조성물은 여드름 원인균들에 대하여 매우 강력한 시너지 효과를 나타내어 세균 감염에 의해 발생하는 여드름 증상의 치료 및 예방에 효과적으로 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 세포 독성이 없고, 강력한 항산화 활성을 갖는 동시에 산화질소(NO) 매개 염증 반응을 효과적으로 억제하여 염증성 질환의 치료 및 예방에도 효과적으로 사용될 수 있다.
따라서, 본 발명의 조성물은 화장품, 의약, 건강기능식품 등의 다양한 분야에서 항산화, 항균 및 항염증 목적으로 유용하게 이용가능하다.
본 발명의 조성물은 여드름 원인균들에 대하여 매우 강력한 시너지 효과를 나타내어 세균 감염에 의해 발생하는 여드름 증상의 치료 및 예방에 효과적으로 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 세포 독성이 없고, 강력한 항산화 활성을 갖는 동시에 산화질소(NO) 매개 염증 반응을 효과적으로 억제하여 염증성 질환의 치료 및 예방에도 효과적으로 사용될 수 있다.
따라서, 본 발명의 조성물은 화장품, 의약, 건강기능식품 등의 다양한 분야에서 항산화, 항균 및 항염증 목적으로 유용하게 이용가능하다.
Description
본 발명은 식물 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항균, 및 항염증용 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항균, 및 항염증용 조성물에 관한 것이다.
생물체의 항상성(homeostasis)을 유지하는 과정에서 중요한 역할을 담당하고 있는 물질들 중 일부가 각종 생물체 유래의 생리 활성 물질이다. 지금까지 수많은 생리 활성 물질에 관해 많은 연구가 진행되고 있으며, 그 중, 미생물, 식물, 또는 동물체 등에서 분리된 항균물질에 관한 연구는 생명과학 및 의학 분야에서 매우 중요한 영역이다.
모든 생명체는 생존을 위하여 항균 및 항진균 물질을 생산하는 것으로 알려져 있는데, 항균 및 항진균 물질을 생산하는 미생물에 많은 연구가 이루어지고 있으며, 항균 및 항진균 물질을 생산하는 미생물 또는 이들에게서 분리된 물질을 이용해 항균제 또는 항진균제를 개발하려는 연구들이 오래전부터 시도되고 있다.
현재까지 개발된 주된 항균물질들은 미생물, 식물 등 천연에서 유래한 것과 화학적으로 합성된 것으로 나뉠 수 있는데, 천연에서 분리된 최초의 항균물질은 1928년 알렉산더 플레밍에 의해 발견된 페니실린이며, 이후 천연 유래 또는 화학적으로 합성된 많은 항균물질이 유해균에 의해 유발된 질병의 치료에 사용되고 있으나, 최근에는 화학적으로 합성된 항균물질에 대한 내성 증가로 인해 천연에서 유래한 항균물질을 이용한 항균제 개발에 관심이 증가하는 추세이다.
천연 유래 항균 또는 항진균제와 관련된 기술로, 고삼 추출물(특허출원 제10-1993-0006319호), 자몽 추출물(특허출원 제10-1993-0006320호), 회향, 대회향, 세신, 녹나무속 식물 및 정향의 혼합 추출물(특허출원 제10-2002-0054685호), 녹차 폴리페놀 및 티트리 오일(특허출원 제10-2002-0028517호), 세스바니아 그랜디프로라 추출물(특허출원 제10-2011-0015252호) 등 다양한 식물체의 추출물 또는 그 분획물이 항균 활성을 갖는 것으로 지금까지 보고되어 있다.
또한, 대표적인 피부 염증 질환의 하나인 여드름은 호르몬의 작용, 과도한 피지 분비, 세균의 감염 등에 의한 모피지선, 모낭 및 주변 조직의 염증성 질환을 말한다. 여드름의 원인은 여러 가지가 있으나, 피지 분비의 증가, 피지선을 자극하는 호르몬(예를 들어, 안드로젠)과 모피지선에서 번식하면서 피지를 분해하여 유리 지방산을 형성하는 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 의한 염증 진전, 모낭 내 이상 각화, 유전적 소질 등의 주요 인자가 복합적으로 작용하여 발생하는 것으로 알려져 있다. 또한, 호기성 피부 상재균은 염증의 일차적 원인은 아니지만, 염증 발생 부위를 더욱 확장시켜 여드름이 악화되는데 영향을 주는 것으로 밝혀져 있다.
여드름의 치료는 국소제제 도포 요법 및 경구 약물 복용 요법과 최근 시행되고 있는 레이저 시술, 박피술 등 수술 요법이 있다. 국소 도포 요법은 여드름의 원인균으로 알려진 프로피오니박테리움 아크네스에 대한 항균 작용 목적으로 아젤라익산(azelaic acid), 살리실산 등의 항균제를 사용하거나 면포 용해 작용을 위해 벤조일퍼옥사이드(benzoyl peroxide) 등을 외용 연고 타입으로 사용하는 방법이나, 이는 제형화에 어려움이 있고, 관련 법규제 등으로 제품화에 어려운 점이 있었다. 또한, 경구약물 복용요법은 피지선의 기능 억제와 모낭벽 파괴의 억제 목적으로 레티노이드, 부신피질 호르몬 등을 이용하는 방법인데, 이들 경구제제의 과량 복용시 피부 발적, 피부 과민반응, 피부 건조증 등의 부작용이 발생하는 문제점이 있었다.
지금까지 단일 식물추출물 또는 복합 식물추출물을 여드름 원인균의 치료 용도로 사용하고자 하는 시도가 있었으나, 아직 산업 현장에서 활용되기에 충분할 만큼의 항균 효과를 나타내는 식물추출물은 거의 없었으며, 여드름 원인균에 대하여 강력한 항균 효과를 나타내는 식물 복합 추출물의 조합에 연구 성과는 미미한 상태이다. 또한, 항균제로서의 고유 기능 이외에 항산화 또는 항염증 활성 등의 다양한 부가 효능에 관한 연구는 미진한 상태이다.
이러한 배경 아래에서, 본 발명자들은 여드름 원인균에 대한 우수한 항균 활성을 갖는 동시에 자체적으로 항산화 및 항염 활성 등의 다양한 기능성을 보유한 식물추출물들의 조합을 찾기 위해 예의 노력한 결과, 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물이 여드름의 원인이 되는 유해 미생물들을 매우 효과적으로 억제하여 여드름 치료에 효과적으로 사용할 수 있는 동시에 항균 및 항산화 목적으로도 유용하게 활용될 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 주된 목적은 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항균, 및 항염증용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항균, 및 항염증용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명자들은 여드름의 원인균을 효과적으로 억제할 수 있는 물질을 찾고자 여러 가지 천연물질들을 대상으로 그 효과를 탐색하였고, 식물체들의 조합에 따른 시너지 효과에 주목하여 항균 효능을 더욱 개선하고자 연구노력한 결과, 장미허브, 님, 황금, 및 청호 추출물을 조합하는 경우에 항산화, 항균 및 항염증 활성에 대한 시너지 효과가 획기적으로 증가함을 발견하였고, 또한 피부에 적용시에도 안전성에 문제가 없음을 확인하였다.
본 발명의 "장미허브(Plectranthus tomentosa)"는 쌍떡잎식물 꿀풀과의 다육식물을 의미하고, "님(Azadirachta indica)"은 멀구슬나무과의 상록교목을 의미하며, "황금(Scutellaria baicalensis Georgi)"은 꿀풀과의 여러해살이풀인 속썩은풀의 뿌리를 의미하고, 청호(Artemisiae Annuae Herba)는 쌍떡잎식물 초롱꽃목 국화과의 개똥쑥(Artemisia annua Linne) 또는 개사철쑥(Artemisia apiacea Hance)의 지상부를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "추출물"은 식물의 추출 처리에 따라 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 본 발명의 상기 추출물은 바람직하게 추출 후 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있다.
본 발명의 상기 장미허브, 님, 황금, 및 청호 추출물은, 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 추출될 수 있고, 식물 조직 배양물에서도 추출할 수 있으며, 잎, 줄기, 뿌리, 꽃, 열매 등의 부위에서 추출한 추출물을 포함한다.
본 발명의 항산화, 항균, 및 항염증용 화장료 조성물에서, 상기 장미허브, 님, 황금, 및 청호는 10:3:3:1의 중량비로 조합되는 것이 가장 바람직하다. 본 발명의 실시예에서 상기 장미허브, 님, 황금, 및 청호를 다양한 비율로 혼합하여 항산화 및 항균용 조성물을 제조하였으며, 상기 비율로 혼합된 복합 추출물의 항산화 효과가 가장 우수한 것을 확인할 수 있었다(도 2 참조). 또한, 제조된 조성물의 항균력을 확인하기 위해 한천확산법(disc diffusion test) 및 미생물 생장 최소억제 농도 평가를 수행하였다. 그 결과, 장미허브, 님, 황금, 및 청호로 구성된 복합 추출물의 조합이 단일 추출물에 비해 전반적으로 우수한 항균 활성을 나타내는 것을 확인하였다.
특히, 장미허브, 님, 황금, 및 청호 추출물이 10:3:3:1의 비율로 혼합된 식물 복합 추출물의 항균 효과가 가장 우수한 것으로 측정되었으며, 테트라사이클린 또는 암피실린과 대비하여도 동등 이상의 효과가 관찰되었다.
본 발명의 항산화, 항균, 및 항염증용 화장료 조성물은 여드름 원인균에 대하여 매우 강력한 항균 활성을 나타내는데, 구체적으로 여드름 유발에 가장 큰 원인으로 지목되고 있는 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis) 균주, 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주에 대하여 매우 강력한 항균 활성이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 항산화, 항균, 및 항염증용 화장료 조성물에서, 상기 항염증 활성은 일산화질소(NO) 생성 억제를 통해 수행되는데, 본 발명자들은 장미허브, 님, 황금, 및 청호로 구성된 복합 추출물이 염증 유발물질인 LPS에 의해 매개되는 신호전달체계에서 일산화질소(Nitric Oxide; NO)의 생성 억제를 통해 염증 관련 세포 내 신호전달체계를 효과적으로 차단함으로써 염증성 질환의 예방 또는 치료에 사용될 수 있음을 확인한 바 있다(도 3 및 4 참조).
본 발명의 항산화, 항균, 및 항염증용 화장료 조성물에서, 상기 조성물은 마스크팩, 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 유연수, 유액, 메이크업 베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선스크린 크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패치 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 항산화, 항균, 및 항염증용 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 항산화, 항균, 및 항염증용 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 항산화, 항균, 및 항염증용 화장료 조성물에서, 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물은 구체적으로는 건조 중량으로, 화장료 조성물 총 중량의 0.0001 내지 50 중량%로 포함될 수 있으며, 보다 구체적으로는 0.0005 내지 10 중량%로 포함될 수 있다. 상기 범위 내에서 항산화, 항균 및 항염증에 대한 우수한 효능을 나타내는 이점이 있으며, 조성물의 제형이 안정화되는 이점이 있다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 및 항염증용 약학적 조성물을 제공한다. 본 발명의 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물은 여드름 원인균에 대한 우수한 항균 활성을 갖는 동시에 염증 발생에 관여하는 일산화질소(Nitric Oxide; NO)의 생성을 효과적으로 억제하고, 우수한 항산화 및 세포 보호 효과를 나타내어 세균 감염성 여드름 및 염증성 질환의 치료 및 예방을 위한 약학적 조성물로 사용될 수 있다.
본 발명에서 "치료"는 상기 조성물의 투여로 세균 감염성 여드름 또는 염증성 질환의 증세가 호전되거나 이롭게 되는 모든 행위를 의미하며, "예방"은 상기 조성물의 투여로 세균 감염성 여드름 또는 염증성 질환의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
또한, 본 발명의 상기 "세균 감염성 여드름" 증상의 비제한적인 예로는 여드름 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis) 균주, 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주에 감염되어 발생하는 여드름 증상을 들 수 있다.
또한, 본 발명에서 "염증성 질환"은 염증을 주병변으로 하는 질병을 총칭하는 의미로서, 본 발명에서 상기 염증성 질환은 일산화질소(Nitric Oxide; NO) 매개 염증성 질환인 것을 특징으로 한다. 바람직하게는 상기 일산화질소(Nitric Oxide; NO) 매개 염증성 질환으로는 아토피 피부염, 건선, 부비동염, 비염, 결막염, 천식, 피부염, 염증성 콜라겐 혈관 질환, 사구체신염, 뇌염, 염증성 장염, 만성 폐쇄성 폐질환, 패혈증, 패혈성 쇼크증, 폐섬유증, 미분화 척추관절증, 미분화 관절병증, 관절염, 염증성 골용해, 바이러스 또는 박테리아 감염에 의한 만성 염증질환, 대장염, 궤양성 대장염, 염증성 장질환, 타입 1 당뇨병, 타입 2 당뇨병, 관절염, 류마티스 관절염, 반응성 관절염, 골관절염, 공피증, 골다공증, 아테롬성 동맥경화증, 심근염, 심내막염, 심낭염, 낭성 섬유증, 하시모토 갑상선염, 그레이브스병, 나병, 매독, 라임병(Lyme disease), 보렐리아증(Borreliosis), 신경성-보렐리아증, 결핵, 사르코이드증(Sarcoidosis), 루프스, 동창성 루프스, 결핵성 루프스, 루프스 신염, 전신성 홍반성 루프스, 황반변성, 포도막염, 과민대장 증후군, 크론씨병, 쇼그랜 증후군, 섬유근통, 만성피로 증후군, 만성피로 면역부전 증후군, 근육통성 뇌척수염, 근위축성 측삭경화증, 파키슨병, 알츠하이머병, 다발성경화증, 자폐스펙트럼 장애, 주의력결핍 장애, 주의력 결핍 과잉행동장애 등을 들 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본 발명의 약학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여인 경우에는 정맥 내 주입, 피하주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물의 1일 투여량은 예컨대 0.001-100㎎/㎏이다.
본 발명의 약학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 쉽게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질 중의 용액, 현탁액, 시럽제 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 산제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가로 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균, 및 항염증용 식품 조성물을 제공한다. 본 발명의 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물은 여드름 원인균에 대한 우수한 항균 활성을 갖는 동시에 염증 발생에 관여하는 일산화질소(Nitric Oxide; NO)의 생성을 효과적으로 억제하고, 우수한 항산화 및 세포 보호 활성이 있으므로 세균 감염성 여드름 및 염증성 질환의 예방을 위한 식품 조성물로 사용될 수 있다. 본 발명의 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물과, 세균 감염성 여드름 증상 및 염증성 질환의 예방은 상기에서 설명한 바와 같다. 상기 식품 조성물은 건강기능식품의 형태로 사용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물은 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물의 분획물 또는 이의 가공물의 형태로 포함될 수 있다. 또한, 상기 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물에는 건강기능식품이 포함될 수 있다. 본 발명에 있어서, "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 “기능성”이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법으로 제조 가능하며, 상기 제조시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다.
또한, 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 세균 감염성 여드름 증상 및 염증성 질환을 개선하는 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취할 수 있다.
본 발명의 건강기능식품이 취할 수 있는 형태에는 제한이 없으며, 통상적인 의미의 식품을 모두 포함할 수 있고, 기능성 식품 등 당업계에 알려진 용어와 혼용하여 사용할 수 있다. 아울러 본 발명의 건강기능식품은 당업자의 선택에 따라 식품에 포함될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품도 포함된다.
본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:
(a) 본 발명의 조성물은 여드름 원인균들에 대하여 매우 강력한 시너지 효과를 나타내어 세균 감염으로 발생하는 여드름 증상의 치료 및 예방에 효과적으로 사용될 수 있다.
(b) 또한, 본 발명의 조성물은 세포 독성이 없고, 강력한 항산화 활성을 갖는 동시에 산화질소(NO) 매개 염증 반응을 효과적으로 억제하여 염증성 질환의 치료 및 예방에도 효과적으로 사용될 수 있다.
(c) 따라서, 본 발명의 조성물은 화장품, 의약, 건강기능식품 등의 다양한 분야에서 항산화, 항균 및 항염증 목적으로 유용하게 이용가능하다.
도 1은 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 인간각질형성세포에 처리한 후 세포 생존율의 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 인간각질형성세포에 처리한 후 ROS 생성량의 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 RAW 264.7 세포에 처리한 후 MTT assay를 통해 세포 보호 효과를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 RAW 264.7 세포에 처리한 후 NO 생성량의 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 인간각질형성세포에 처리한 후 ROS 생성량의 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 RAW 264.7 세포에 처리한 후 MTT assay를 통해 세포 보호 효과를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 RAW 264.7 세포에 처리한 후 NO 생성량의 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예 1. 식물 추출물의 제조
1-1. 식물 단일 추출물의 제조
건조된 장미허브 100g을 분쇄한 후 3L의 70% 에탄올을 용매로 사용하여 12시간 가온 환류추출한 후, 냉침 시키고, 1.2㎛ 투과 사이즈를 갖는 여과지로 여과하여 여과액을 수득하였다. 수득된 여과액을 감압농축 및 감압 건조로 농축하여 장미허브의 건조 분말을 제조하였다(제조예 1).
상기와 동일한 방법으로 각각 님, 황금, 및 청호의 건조 분말을 제조하였다(제조예 2 내지 4).
1-2. 식물 복합 추출물의 제조
상기 실시예 1-1에서 제조된 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 건조 분말을 하기 [표 1]의 중량비로 혼합하여 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 제조하였다.
[표 1]
실시예
2. 여드름 원인균에 대한 항균 활성
실시예 1에서 제조한 4종 식물체의 단일 추출물(제조예 1 내지 4)과 이들의 복합 추출물(제조예 5 내지 14)이 여드름 원인균에 대한 직접적인 항균 활성이 있는지를 확인하기 위하여 여드름 원인균으로 알려진 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis) 균주, 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주를 대상으로 여드름 유발 원인균의 생장 억제 효능을 검증하였다.
[표 2]
검증을 위해 액체배지 희석법에 따라 프로피오니박테리움 아크네스 균주, 스타필로코커스 에피더미디스 균주, 및 스타필로코커스 아우레우스 균주에 대한 최소 성장억제농도(Minimun Inhibitory Concentration, MIC)를 구하여 검증하였다.
먼저, 프로피오니박테리움 아크네스 균주는 RCM 배지, 스타필로코커스 에피더미디스 균주는 NB 배지, 스타필로코커스 아우레우스 균주는 NA 배지를 이용하여 배양하였고, 상기 [표 2]의 배양 조건으로 배양한 후 시험에 사용하였다.
각 균주별 액체 배지와 실시예 1에서 제조한 4종 식물체의 단일 추출물(제조예 1 내지 4) 및 이들의 복합 추출물(제조예 5 내지 14)을 각각 혼합하여 3종의 균주를 1×106 CFU/ml의 초기 균수로 준비하여 미생물 저감 효능 시험을 실시하였다. 준비된 3종 균주를 대조군, 비교군을 포함하여 각각 접종하여 균주별 최적 조건에서 배양하였으며, 0, 1, 24시간마다 시료를 채취하여 멸균된 식염수를 이용하여 10배수로 희석하여 한천배지에 도말하였다.
도말한 플레이트들은 최적조건에서 배양한 후, 전형적인 집락을 확인 및 계수하여 감소율을 확인하였고, 이를 통해 3종 미생물에 대한 저감 효능을 확인할 수 있었다. 비교 검증을 위해 종래 여드름 원인균에 대해 항균 효과가 잘 알려진 항균물질인 테트라사이클린(tetracycline)(비교예 1)과 암피실린(ampiciline)(비교예 2)을 사용하였다.
[표 3]
실험 결과, 상기 [표 3]에 나타난 바와 같이, 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 단일 추출물을 처리한 제조예 1 내지 4의 실험군에 비해 이들의 복합 추출물을 처리한 실험군에서 여드름 원인균에 대한 항균 활성이 더 높은 것으로 관찰되어 이들의 시너지 효과를 확인할 수 있었다.
특히, 장미허브, 님, 황금, 및 청호 추출물이 10:3:3:1의 비율로 혼합된 제조예 12의 4종 식물 복합 추출물의 항균 효과가 가장 우수한 것으로 측정되었으며, [비교예 1]의 테트라사이클린 또는 [비교예 2]의 암피실린과 대비하여도 동등 이상의 효과가 관찰되었다. 상기 결과를 통해 본 발명의 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물이 여드름 원인균들을 효과적으로 사멸시켜 여드름 피부의 개선에 매우 유용하게 사용할 수 있음을 확인할 수 있었다.
실시예 3. 세포 독성
실시예 1에서 제조한 4종 식물체의 복합 추출물(제조예 5 내지 14)이 인간각질형성세포(HaCaT, Human immortalized keratinocyte)의 생장에 미치는 효과를 아래와 같은 방법으로 확인하였다.
우선, 10% FBS(fetal bovine serum, Cambrex)가 포함된 전용 배지인 DMEM(Dulbeccos modified Eagles medium) 배지에 인간각질형성세포를 24 well 세포 배양 접시에 1×105 농도로 접종한 후 24시간 동안, 37℃, 5% CO2 습윤 조건에서 배양하였다. 배양된 인간각질형성세포들을 40㎜ 조직 배양 플레이트(1.0×105 세포들)에 시딩하였다. 세포들이 80% 융합에 도달할 때, 세포를 인산 완충 식염수(PBS)로 두 차례 씻어내었고, UVB(UVB Peak range: 312nm, UV dose: 144mJ/cm2)를 조사하였다.
이후, 제조예 5 내지 제조예 14의 샘플이 100㎍/㎖의 농도로 첨가된 신선한 세럼-프리 배지 2mL를 각 웰에 첨가한 후, 72시간 동안 배양하였다. 72시간 후, 1 mg/mL의 MTT를 처리하고 2시간 후, 세포에 MTT 처리로 생성된 포마잔(formazan)을 DMSO로 녹여 570nm에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 인간각질형성세포에 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 단일 추출물과 이들의 복합 추출물을 처리한 경우, 이들 식물체의 복합 추출물이 인간 피부 표피 각질 세포주의 세포 생존율을 증가시키는 것으로 나타났고, UVB 조사로 감소된 인간각질형성세포의 증식을 회복시켜주는 것으로 확인되었다. 특히, 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 추출물이 10:3:3:1의 비율로 혼합된 제조예 12의 4종 식물 복합 추출물의 효과가 가장 우수한 것을 확인할 수 있었다(도 1 참조).
실시예 3. 항산화 활성
인간각질형성세포(HaCaT, Human immortalized keratinocyte)에서 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 단일 또는 복합 추출물이 갖는 활성산소종(ROS, Reactive Oxygen Species) 생성 억제 효과를 확인하는 실험을 수행하였다.
실험은 인간각질형성세포에 UVB(UVB Peak range: 312 nm, UV dose: 144 mJ/cm2)를 조사한 다음, 무혈청 DMEM 배지로 희석한 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물(제조예 5 내지 14)을 농도별(10, 100㎍/㎕)로 처리하여 30분 동안 배양하고, 여기(excitation) 480nm, 방출(emission) 530nm 조건에서 형광도를 측정하여 DCF 형광 강도(DCF fluorescence intensity)를 비교하여 수행하였다. 통계처리는 GraphPad Prism 프로그램을 사용하여 실시하였으며, ANOVA(one-way analysis of variance)를 이용하여 평균값의 유의성을 5% 미만의 한계로 조사하였다.
실험 결과, 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 단일 추출물의 단독 처리에 비해 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물이 갖는 항산화 효과가 더욱 우수한 것으로 나타났으며, 이러한 현상은 UV 처리된 인간각질형성세포 실험에서 더욱 뚜렷하게 관찰되었다.
특히, 장미허브, 님, 황금, 및 청호 추출물이 10:3:3:1의 비율로 혼합된 제조예 12의 4종 식물 복합 추출물이 ROS 생성을 유의하게 억제하고 항산화에 대한 시너지 효과가 가장 우수함을 확인할 수 있었다(도 2 참조).
실시예 4. 항염증 활성
4-1. 세포 보호 효과
장미허브, 님, 황금, 및 청호의 단일 또는 복합 추출물이 LPS 처리된 대식세포주인 RAW 264.7 세포의 생장에 미치는 영향을 통해 세포 보호 효과를 아래와 같은 방법으로 확인하였다.
대식세포주인 RAW 264.7 세포를 한국세포주은행(KTCC, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였고, 10% FBS(Fetal bovine serum)를 함유한 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)에 10% FBS, 100㎍/㎖ 페니실린 및 100㎍/㎖ 스트렙토마이신을 첨가한 배지에 상기 세포를 접종하여 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다.
상기 RAW 264.7 세포를 1×106 cells/mL의 농도(in DMEM)로 96웰 플레이트에 접종하고 24시간 배양 후, 실시예 1에서 제조된 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물(제조예 5 내지 14)을 100㎍/㎖ 농도로 희석한 시료와 내독소로 알려진 LPS(1μg/ml)를 함유한 새로운 배지를 동시에 처리하여 24시간 배양하였다. 이후, 1mg/mL의 MTT 시약을 처리하고 2시간 후, 세포에 MTT 처리로 인해 생성된 포마잔(formazan)을 DMSO로 녹여 570nm에서 흡광도를 측정하였다.
실험 결과, 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 단일 추출물에 비해 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 처리한 실험군에서 RAW 264.7 세포의 세포 보호 효과가 더욱 우수한 것으로 나타났다.
특히, 장미허브, 님, 황금, 및 청호 추출물이 10:3:3:1의 비율로 혼합된 제조예 12의 4종 식물 복합 추출물을 처리한 군에서 세포 보호 효과가 가장 우수한 것으로 나타났는데, LPS처리 대조군에 비해 152%(100㎍/㎖) 수준으로 세포 생존율이 증가하여 가장 우수한 세포 보효 효과를 확인할 수 있었다(도 3 참조).
4-2. 산화질소 생성 억제능
장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물의 항염증 효과를 확인하기 위해, 염증 유발에 관여하는 대표적인 세포 독성물질인 일산화질소(nitric oxide, NO)의 생성 억제율을 측정하였다.
먼저, 대식세포주인 RAW 264.7 세포를 한국세포주은행(KTCC, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였고, 10% FBS(Fetal bovine serum)를 함유한 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)에 10% FBS, 100㎍/㎖ 페니실린 및 100㎍/㎖ 스트렙토마이신을 첨가한 배지에 상기 세포를 접종하여 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다.
구체적으로, 상기 RAW 264.7 세포를 1×106 cells/mL의 농도(in DMEM)로 96 웰 플레이트에 접종하고 24시간 배양 후, 실시예 1에서 제조된 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물(제조예 5 내지 14)을 100㎍/㎖ 농도로 희석한 시료와 내독소로 알려진 LPS(1μg/ml)를 함유한 새로운 배지를 동시에 처리하여 24시간 배양하였다. 그 후, 세포 배양 상등액 100㎕와 Griess reagent[1%(w/v) sulfanilamide, 0.1%(w/v) naphtylethylenediamine in 2.5%(v/v) phosphoric acid] 100㎕를 혼합하여 96 웰 플레이트에서 10분 동안 반응시키고, ELISA 리더를 사용하여 540nm에서 흡광도를 측정하여 생성된 산화질소의 양을 측정하였다. 생성된 아질산염(nitrite)의 농도는 아질산나트륨(sodium nitrite)을 DMEM 배지에 용해한 표준 곡선을 이용하여 계산하였다. LPS를 처리한 대조군과 LPS를 처리하지 않은 대조군에서 생성된 아질산염의 생성량 차이를 기준으로 각 시료의 일산화질소 생성 저해 활성을 확인하였다.
실험 결과, 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 단일 추출물의 단독 처리보다 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물의 산화질소 생성 억제 효과가 더 우수한 것을 확인할 수 있었다.
특히, 장미허브, 님, 황금, 및 청호 추출물이 10:3:3:1의 비율로 혼합된 제조예 12의 4종 식물 복합 추출물은 LPS처리 대조군에 비해 각각 42%(10㎍/㎖) 및 55%(100㎍/㎖) 수준으로 산화질소 생성을 억제하여 산화질소 생성 억제에 가장 우수한 효과를 보이는 것으로 관찰되었다(도 4 참조).
상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물은 염증반응에 중요한 역할을 하는 산화질소의 생성을 직접적으로 저해하여 염증관련 질환의 치료 및 예방에 효과적으로 작용할 수 있음을 확인할 수 있었다.
상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 포함하는 조성물은 세포 독성이 없고, 여드름 원인균의 생장을 효과적으로 억제하고, 우수한 항산화 활성이 있으며, NO 생성을 직접적으로 억제하여 염증성 질환의 치료 및 예방에도 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (6)
- 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 유효성분으로 포함하되,
상기 장미허브, 님, 황금, 및 청호는 10:3:3:1의 중량비를 갖는 것을 특징으로 하고,
상기 조성물은 여드름 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis) 균주, 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주에 대한 항균 활성을 갖는 것을 특징으로 하는,
항산화, 항균, 및 항염증용 화장료 조성물. - 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 항염증 활성은 일산화질소(NO) 생성 억제를 통해 수행되는 것을 특징으로 하는,
항산화, 항균, 및 항염증용 화장료 조성물. - 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 유효성분으로 포함하되,
상기 장미허브, 님, 황금, 및 청호는 10:3:3:1의 중량비를 갖는 것을 특징으로 하고,
상기 조성물은 여드름 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis) 균주, 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주에 대한 항균 활성을 갖는 것을 특징으로 하며,
항염증 활성은 일산화질소(NO) 생성 억제를 통해 수행되는 것을 특징으로 하는,
항균, 및 항염증용 약학적 조성물. - 장미허브, 님, 황금, 및 청호의 복합 추출물을 유효성분으로 포함하되,
상기 장미허브, 님, 황금, 및 청호는 10:3:3:1의 중량비를 갖는 것을 특징으로 하고,
상기 조성물은 여드름 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis) 균주, 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주에 대한 항균 활성을 갖는 것을 특징으로 하며,
항염증 활성은 일산화질소(NO) 생성 억제를 통해 수행되는 것을 특징으로 하는,
항균, 및 항염증용 식품 조성물.
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