KR102270290B1 - 진주 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 조성물 - Google Patents
진주 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 추출물을 유효성분으로 포함하는 항여드름, 항염증, 및 피부 보습용 조성물에 관한 것이다.
여드름 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주의 생장을 효과적으로 저해시켜 우수한 항여드름 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 염증매개 물질인 산화질소의 생성을 효과적으로 억제하며, 필라그린(Filaggrin) 및 히알루론산(Hyaluronic acid) 관련 유전자의 발현을 촉진하고, 우수한 보습 효과가 있으므로, 화장품, 식품, 및 의약외품 분야에서 피부 보습 목적으로 유용하게 이용 가능하다.
여드름 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주의 생장을 효과적으로 저해시켜 우수한 항여드름 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 염증매개 물질인 산화질소의 생성을 효과적으로 억제하며, 필라그린(Filaggrin) 및 히알루론산(Hyaluronic acid) 관련 유전자의 발현을 촉진하고, 우수한 보습 효과가 있으므로, 화장품, 식품, 및 의약외품 분야에서 피부 보습 목적으로 유용하게 이용 가능하다.
Description
본 발명은 진주 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 조성물에 관한 것으로 더욱 구체적으로 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 추출물을 유효성분으로 포함하는 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 조성물에 관한 것이다.
대표적인 피부 염증 질환의 하나인 여드름은 호르몬의 작용, 과도한 피지 분비, 세균의 감염 등에 의한 모피지선, 모낭 및 주변 조직의 염증성 질환을 말한다.
여드름의 원인은 여러 가지가 있으나, 피지 분비의 증가, 피지선을 자극하는 호르몬(예를 들어, 안드로젠)과 모피지선에서 번식하면서 피지를 분해하여 유리 지방산을 형성하는 프로피오니박테리움 아크네스 (Propionibacterium acnes)에 의한 염증 진전, 모낭 내 이상 각화, 유전적 소질 등의 주요 인자가 복합적으로 작용하여 발생하는 것으로 알려져 있다. 또한, 호기성 피부 상재균은 염증의 일차적 원인은 아니지만, 염증 발생 부위를 더욱 확장시켜 여드름이 악화되는데 영향을 주는 것으로 밝혀져 있다.
여드름의 치료는 국소 제제 도포 요법 및 경구 약물 복용 요법과 최근 시행되고 있는 레이저 시술, 박피술 등 수술 요법이 있다. 국소 도포 요법은 여드름의 원인균으로 알려진 프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)에 대한 항균 작용 목적으로 아젤라익산(azelaic acid), 살리실산 등의 항균제를 사용하거나 면포 용해 작용을 위해 벤조일퍼옥사이드(benzoyl peroxide) 등을 외용 연고 타입으로 사용하는 방법이나, 이는 제형화에 어려움이 있고, 관련법규제 등으로 제품화에 어려운 점이 있었다. 또한, 경구약물 복용요법은 피지선의 기능 억제와 모낭벽 파괴의 억제 목적으로 레티노이드, 부신피질 호르몬 등을 이용하는 방법인데, 이들 경구제제의 과량 복용시 피부 발적, 피부 과민반응, 피부 건조증 등의 부작용이 발생하는 문제점이 있었다.
또한, 염증 반응은 세포 또는 조직의 손상이나 박테리아, 곰팡이, 바이러스, 다양한 종류의 알레르기 유발물질 등의 외부감염원에 감염되었을 때 국소 혈관과 체액 중 각종 염증매개인자 및 면역세포가 관련되어, 효소 활성화, 염증 매개물질 분비, 체액 침윤, 세포 이동, 조직 파괴 등 일련의 복합적인 생리적 반응과 홍반, 부종, 발열, 통증 등 외적 증상을 나타낸다. 평상시의 염증 반응은 외부감염원을 제거하고 손상된 조직을 재생하여 생명체 기능회복작용을 하지만, 항원이 제거되지 않거나 내부물질이 원인이 되어 염증 반응이 과도하거나 지속해서 일어나면 오히려 점막 손상을 촉진하고, 그 결과 일부에서는 암 발생 등의 질환을 이끈다.
염증의 발생 원인으로서는 다양한 생화학적인 현상이 관여하고 있는 것으로 알려져 있는데, 특히 일산화질소(Nitric Oxide; NO)를 발생시키는 효소인 산화질소 합성 효소(Nitric Oxide Synthase; NOS)와 프로스타글란딘의 생합성과 관련된 효소들이 염증 반응을 매개하는 데 있어서 가장 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 따라서 L-아르기닌으로부터 일산화질소를 생성시키는 효소인 산화질소 합성효소(NOS)나, 아라키돈산으로부터 프로스타글란딘 등을 합성하는데 관련된 효소인 사이클로옥시게나아제(COX)의 활성 저해를 통해 염증을 차단하는 것이 염증 치료제 개발에 목표가 되고 있다.
또한, 일반적으로 피부에 사용되는 보습용 조성물은 사람의 모발이나 피부 등에 수분을 일정량 유지함으로써 부드럽고 생기있게 하며, 갈라짐, 건조함 등의 손상을 방지해주는 역할을 한다. 즉, 피부 보습용 조성물은 피부나 모발에 일정량 이상의 수분을 공급하거나 수분이 유지함으로써 피부나 모발을 미화하고, 건강하게 유지하기 위한 목적으로 사용된다. 피부는 수분 유지에 필수적인 기능을 하는 기관으로, 수분 조절에 대략 2/3 정도의 비중을 담당하는 것으로 알려져 있다. 따라서, 수분의 공급, 유지, 즉 보습과 관련된 기능성 연구가 활발하게 진행되고 있다. 또한, 최근에는 천연물 등으로부터 얻은 생리 활성 물질을 도입하여 피부 자체의 고유 방어 기능을 더욱 강화함으로써 피부의 보습력을 증가시키는 제품의 개발이 활발하게 진행되는 추세이다.
그러나, 아직까지 천연 성분들의 추출물에서 분리된 단일성분들의 조합에 대한 항여드름, 항염증 및 피부 보습의 시너지 활성 연구는 충분히 이루어지지 않고 있으며, 이로 인해 단일성분들의 조합을 활용한 항여드름 및 항염제와 관련된 연구 성과는 미미한 상태이다.
이러한 배경 아래에서, 본 발명자들은 우수한 항여드름, 항염증 및 피부 보습 활성을 갖는 천연 추출물들의 조합을 찾기 위해 예의 노력한 결과, 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 복합추출물 조합이 다양한 여드름 원인균들을 효과적으로 억제하고, 우수한 항염증 및 피부 보습 활성을 나타내어 항여드름제, 항염제, 및 피부 보습제로 유용하게 활용될 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 주된 목적은 여드름 원인균의 생장을 효과적으로 저해하고, 우수한 항염증 및 피부 보습 효과를 나타내는 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 천연 복합추출물을 유효성분으로 하는 항여드름, 항염증, 및 피부 보습용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 진주(pearl) 추출물, 벚꽃(Cherry Blossoms) 추출물, 연꽃(Lotus Blossom) 추출물, 동백꽃(Camellia Flower) 추출물, 및 다마스크장미(Damask Rose) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 조성물을 제공한다.
본 발명자들은 여드름 피부의 피부상태 개선에 효능이 있는 물질을 찾고자 항균활성을 갖는 여러 천연물질들 중에서 여드름 원인균에 대한 우수한 항균 활성을 나타내는 동시에, 여드름 증상을 확대하는 염증반응을 억제하며, 피부 보습에 효과가 우수한 천연 추출물의 조합을 찾아내기 위해 예의 연구노력한 결과, 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물을 조합하는 경우, 여드름 원인균에 대한 항균 효과와 항염증 및 피부 보습 효과가 획기적으로 증가함을 발견하였고, 또한 피부에 적용시에도 안전성에 문제가 없음을 확인하였다.
본 발명의 용어 “진주”는 조개류의 체내에서 형성되는 구슬 모양의 분비물 덩어리를 의미하고, “벚꽃(Cherry Blossoms)”은 벚나무(Prunus serrulata var. spontanea)의 꽃을 의미하며, 용어 “연꽃(Lotus Blossom)”은 쌍떡잎식물 프로테아목 연꽃과의 여러해살이 수초인 연꽃(Nelumbo nucifera)의 꽃을 의미하고, 용어 “동백꽃(Camellia Flower)”은 쌍떡잎식물 물레나무목 차나무과의 상록교목인 동백나무(Camellia japonica)의 꽃을 의미하며, 용어 “다마스크장미(Rose damascena)”는 쌍떡잎식물 장미목 장미과의 소관목을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "여드름"은 피부의 모피지선, 모낭 및 주변 조직에서 발생하는 여드름 원인균 또는 피부상재균 등에 의해 감염되는 염증성 질환을 의미하며, 용어 "여드름 피부" 여드름 원인균 또는 피부상재균 등에 의해 여드름이 발생한 피부 또는 여드름 발생의 우려가 있는 피부를 의미한다. 또한, 용어 “항여드름”은 여드름 원인균 또는 피부상재균 등에 의해 감염되는 질환에서 여드름 원인균 또는 피부상재균을 사멸시키고, 감염에 의해 발생하는 염증 반응을 완화시는 것을 의미한다. 또한, 용어 "피부 보습" 이란 피부에 수분감을 증가시켜주고, 촉촉한 상태를 유지시키는 것을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "추출물"은 진주 또는 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 등 식물들의 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 본 발명의 상기 추출물은 바람직하게 추출 후 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있다.
본 발명의 상기 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 식물추출물은, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 추출될 수 있고, 식물 조직 배양물에서도 추출이 가능하다.
본 발명의 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 조성물에서, 상기 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물은 10:10-5:4-2:0.5-2:0.5-2의 중량비를 갖는 것이 바람직하며, 10:5:3:1:1의 중량비를 갖는 것이 가장 바람직하다.
본 발명의 실시예에서 상기 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 추출물을 다양한 비율로 혼합하여 여드름 원인균에 대한 항균 조성물을 제조하였으며, 제조된 조성물의 항균력을 확인하기 위해 한천확산법(disc diffusion test) 및 미생물 생장 최소억제 농도 평가를 수행하였다. 그 결과, 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 추출물의 조합이 전반적으로 여드름 원인균에 대한 우수한 항균 활성을 나타내는 것을 확인하였으며, 특히 대조군으로 사용한 메틸파라벤이나 시판되는 항균제와 비교하였을 때, 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 추출물이 10:10-5:4-2:0.5-2:0.5-2의 중량비로 혼합되었을 때 우수한 시너지 효과가 있음을 확인하였고, 10:5:3:1:1의 중량비로 혼합되었을 때 가장 우수한 시너지 효과가 있는 것을 확인할 수 있었다.
본 발명의 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 조성물은 여드름 원인균에 대한 우수한 항균 활성을 나타내는데, 구체적으로 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주에 대한 항균 활성을 나타낸다.
또한, 본 발명의 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 조성물은 산화질소(nitric oxide)의 생성을 억제하여 항염증 활성을 나타내는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명의 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 조성물은 히알루론산의 합성을 증가시켜 피부 보습 활성을 나타내는 것을 특징으로 한다.
구체적으로 본 발명의 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 조성물은 필라그린(Filaggrin) 및 히알루론산 합성효소(hyaluronan synthase-3) 유전자의 발현을 촉진시킴으로써 히알루론산의 합성을 증가시키고, 이를 통해 피부 보습 활성을 나타내는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물은 여드름 원인균에 대한 강력한 생장 억제 활성을 나타내고, 염증 반응을 저해하며, 히알루론산의 합성을 증가시키는 우수한 효과가 있으므로 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 화장료 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 유효성분으로 상기 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들이 포함되며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수(스킨), 영양 화장수(밀크로션), 영양 크림, 맛사지 크림, 에센셜 오일, 아이크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸타, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라가칸타 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장품의 구체예로서는 여성청결제, 손세정제, 세안크림, 세안폼, 클렌징크림, 클렌징밀크, 클렌징로션, 마사지크림, 콜드크림, 모이스처크림, 유액, 화장수, 팩, 에프터세이빙크림, 썬텐방지크림, 썬텐용 오일, 비누, 보디샴푸, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 양모료, 육모료, 헤어크림, 헤어리퀴드, 세트로션, 헤어스프레이, 헤어브리지, 컬러린스, 컬러스프레이, 퍼머넌트웨이브액, 프레스파우더, 루스파우더, 아이섀도, 핸드크림, 및 립스틱 등을 들 수 있다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물은 여드름 원인균에 대한 강력한 생장 억제 활성을 나타내고, 염증 반응을 저해하며, 히알루론산의 합성을 증가시키는 우수한 효과가 있으므로 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
한편, 본 발명의 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 조성물은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 제조될 수 있다.
구체적으로 산을 첨가함으로써 염을 형성할 수 있고, 예를 들어 무기산(예: 염산, 히드로브롬산, 인산, 질산, 황산 등), 유기 카르복실산(예: 아세트산, 트리플루오로아세트산과 같은 할로 아세트산, 프로피온산, 말레산, 숙신산, 말산, 시트르산, 타르타르산, 살리실산), 및 산성 당(글루쿠론산, 갈락투론산, 글루콘산, 아스코르브산), 산성 폴리사카리드(예: 히알우론산, 콘드로이틴 술페이트, 아르기닌산), 콘드로이틴 술페이트와 같은 술폰산 당 에스테르를 포함하는 유기 술폰산(예: 메탄, 술폰산, p-톨루엔 술폰산) 등을 첨가하여 염을 형성할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 세포 독성이 없는 천연 추출물에서 분리되는 물질로 임상투여시 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다.
즉, 본 발명의 약학적 조성물은 실제로 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 리우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 생리식염수 또는 유기용매와 같이 약제로 허용된 여러 전달체(carrier)와 혼합하여 사용될 수 있고, 안정성이나 흡수성을 증가시키기 위하여 글루코스, 수크로스 또는 덱스트란과 같은 카보하이드레이트, 아스코르브 산(ascorbic acid) 또는 글루타치온과 같은 항산화제(antioxidants), 킬레이트화제(chelating agents), 저분자 단백질 또는 다른 안정화제(stabilizers)들이 약제로 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 유효용량은 0.01 내지 10㎎/㎏이고, 바람직하게는 0.1 내지 1㎎/㎏ 이며, 하루 1회 내지 3회 투여될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 총 유효량은 볼루스(bolus) 형태 혹은 상대적으로 짧은 기간 동안 주입(infusion) 등에 의해 단일 투여량(single does)으로 환자에게 투여될 수 있으며, 다중 투여량(multiple does)이 장기간 투여되는 분할 치료 방법(fractionated treatment protocol)에 의해 투여될 수 있다. 상기 농도는 약의 투여 경로 및 치료 횟수뿐만 아니라 환자의 나이 및 건강상태 등 다양한 요인들을 고려하여 환자의 유효 투여량이 결정되는 것이므로 이러한 점을 고려할 때, 이 분야의 통상적인 지식을 가진 자라면 본 발명의 약학적 조성물로서의 특정한 용도에 따른 적절한 유효 투여량을 결정할 수 있을 것이다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항여드름, 항염증, 및 피부 보습용 식품 조성물을 제공한다. 본 발명의 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물과, 항여드름, 항염증, 및 피부 보습은 상기에서 설명한 바와 같다. 상기 식품 조성물은 건강기능식품의 형태로 사용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물은 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물을 포함하는 복합추출물, 이의 분획물 또는 이의 가공물의 형태로 포함될 수 있다. 또한, 상기 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물에는 건강기능식품이 포함될 수 있다. 본 발명에 있어서, "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 “기능성”이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법으로 제조 가능하며, 상기 제조시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다.
또한, 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 건강기능식품은 피부 보습 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
본 발명의 건강기능식품이 취할 수 있는 형태에는 제한이 없으며, 통상적인 의미의 식품을 모두 포함할 수 있고, 기능성 식품 등 당업계에 알려진 용어와 혼용이 가능하다. 아울러 본 발명의 건강기능식품은 당업자의 선택에 따라 식품에 포함될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품도 포함된다.
본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:
(a) 본 발명은 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 5종 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 조성물을 제공한다.
(b) 본 발명의 항여드름, 항염증 및 피부 보습용 조성물은 여드름 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주의 생장을 효과적으로 저해시켜 우수한 항여드름 효과를 나타낸다.
(c) 또한, 본 발명의 조성물은 염증매개 물질인 산화질소의 생성을 효과적으로 억제하여 우수한 항염증 활성을 나타내며, 필라그린(Filaggrin) 및 히알루론산(Hyaluronic acid) 합성과 관련된 유전자의 발현을 촉진하여 우수한 보습 효과가 있으므로, 화장품, 식품, 및 의약외품 분야에서 항여드름, 항염증, 및 피부 보습 목적으로 유용하게 이용 가능하다.
도 1은 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 추출물의 처리 후 세포 생존율의 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 단일 또는 복합 추출물의 처리 후 산화질소의 생성 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 추출물의 처리 후 히알루론산 합성량의 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 추출물의 처리 후 필라그린 및 히알루론산 합성 효소의 발현 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 단일 또는 복합 추출물의 처리 후 산화질소의 생성 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 추출물의 처리 후 히알루론산 합성량의 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 추출물의 처리 후 필라그린 및 히알루론산 합성 효소의 발현 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예 1. 천연 추출물의 제조
진주 100g을 분쇄한 후 3L의 70% 에탄올을 용매로 사용하여 12시간 가온 환류추출한 후, 냉침 시키고, 1.2㎛ 투과 사이즈를 갖는 여과지로 여과하여 여과액을 수득하였다. 수득된 여과액을 감압농축 및 감압 건조로 농축하여 진주 건조 분말을 제조하였다.
건조된 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미 각 100g을 원료로 하여 상기와 동일한 방법으로 추출하여 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 건조 분말을 제조하였다.
실시예 2. 천연 추출물 첨가에 따른 세포 생존 시험
실시예 1에서 제조한 5종 천연 추출물이 인간 피부섬유아세포(NHDF, normal human dermal fibroblasts)의 생장에 미치는 효과를 아래와 같은 방법으로 확인하였다.
먼저, 대식세포주인 RAW 264.7 세포를 한국세포주은행(KTCC, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. 구체적으로, 10% FBS(Fetal bovine serum)를 함유한 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)에 10% FBS, 100㎍/㎖ 페니실린 및 100㎍/㎖ 스트렙토마이신을 첨가한 배지에 상기 세포를 접종하여 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다.
구체적으로, 상기 RAW 264.7 세포를 1×106 cells/mL의 농도(in DMEM)로 96 웰 플레이트에 접종하고 24시간 배양 후, 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 천연 추출물을 농도별(10, 50 및 100㎍/㎕)로 처리하여 희석한 시료와 내독소로 알려진 LPS(1μg/ml)를 함유한 새로운 배지를 동시에 처리하여 24시간 배양하였다.
그 결과, 대식세포주인 RAW 264.7 세포에 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 복합추출물을 처리한 경우, 이들 천연 추출물이 대식세포주인 RAW 264.7 세포의 세포 생존율에 크게 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었으며, 이를 통해 본 발명의 5종 성분들의 추출물이 인체에 독성을 나타내지 않음을 확인할 수 있었다.
실시예 3. 단일 및 복합 추출물의 여드름 원인균에 대한 항균 테스트
본 발명의 천연 추출물이 여드름 원인균에 대한 직접적인 항균 활성이 있는지를 확인하기 위하여 여드름 원인균으로 알려진 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주를 대상으로 여드름 유발 원인균에 대한 생장 억제 효능을 검증하였다.
[표 1]
검증을 위해 액체배지 희석법에 따라 상기 5종 균주에 대한 최소 성장억제농도(Minimun Inhibitory Concentration, MIC)를 구하여 검증하였다.
먼저, 프로피오니박테리움 아크네스 균주는 RCM 배지에, 스타필로코커스 에피더미디스 균주와 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주는 NB 배지를 이용하여 배양하였고, 상기 [표 1]의 배양 조건으로 배양한 후 시험에 사용하였다.
각각의 접종 균은 2×106 CFU/well 농도로 5종 천연 성부의 단일 추출물의 시료와 함께 18시간 동안 배양하였다. 배양 후, 육안 및 현미경으로 균의 성장을 관찰하였고, 흡수파장 600nm에서 흡광도를 측정하여 순수 배양액의 흡광도 값과 같은 결과를 얻은 것을 최소억제농도로 결정하였다. 비교 검증을 위해 종래 여드름 원인균에 대해 항균효과가 알려진 메틸파라벤(비교예 1)을 사용하였다.
[표 2]
그 결과, 상기 [표 2]에 나타난 바와 같이, 본 발명의 5종 천연 추출물은 단일 추출물인 경우, [비교예 1]의 메틸파라벤을 처리한 대조군과 비교하여 여드름 원인균들에 대한 항균효과가 유사한 수준인 것으로 나타났다.
이에 따라, 상기 5종 천연 추출물의 조합에 따른 항균효과를 최적화하기 위하여 체커보드 어세이 실험을 수행하였다.
실시예 4. 5종 복합 천연 추출물의 최적 배합 비율 선정을 위한 항균 테스트
4-1. 진주 및 벚꽃 추출물의 시너지 효과 검증
진주 추출물과 벚꽃 추출물 사이의 상호 영향을 확인하기 위하여 2종 복합추출물의 P. acnes KACC 11946 균주에 대한 미생물 생장 최소억제농도(MIC)를 평가하였다.
항균 시너지를 확인하기 위한 실험 방법은 표준화되어 있지 않아, 항균물질을 조합하여 항균 시너지를 확인하는 방법인 체커보드 어세이(checkerboard assay)를 응용하여 사용하였다. 항균력 측정실험은 6행×6열로 설정하였고, 96웰-플레이트에 혼합효과를 측정할 진주 추출물과 벚꽃 추출물을 각각 MIC 농도에서 연속 2배 희석하여 진주 추출물은 수평축으로 벚꽃 추출물은 수직축으로 각 웰에 연속적으로 희석하였다. 이후 37℃에서 16~24시간 동안 배양한 후, 진주 추출물과 벚꽃 추출물의 상호 억제한 가장 낮은 농도로서 정의하였으며, 두 화합물 사이의 상호작용은 하기 FIC(fractional inhibitory concentration) 지수로 나타내었다.
FIC index(FICI)는 하기 [수학식 1] 및 [수학식 2]에 따라 계산되었다.
[수학식 1]
[수학식 2]
이때, FICI 지수가 0.5보다 작거나 같으면 상승효과(synergistic effect), 0.5와 1 사이이면 부가 효과(additive effect), 1과 4 사이이면 무관함(indifferent), 4 이상이면 상쇄 효과(antagonistic effect)가 있는 것으로 판단하였고, 측정 결과를 하기 [표 3]에 나타내었다.
[표 3] P. acnes KACC 11946
그 결과, 진주 추출물과 벚꽃 추출물은 이들이 1 내지 2:1의 비율로 혼합된 추출물이 여드름 원인균에 대한 상승된 억제 효과가 있는 것을 확인할 수 있었고, 진주 추출물과 벚꽃 추출물이 2:1의 비율로 혼합된 복합추출물이 가장 우수한 시너지 효과가 있는 것을 확인할 수 있었다.
4-2. 진주, 벚꽃, 및 연꽃 추출물의 시너지 효과 검증
실시예 4-1의 진주와 벚꽃 추출물에 대한 항균활성 검정 결과를 반영하여, 진주 및 벚꽃의 10:5 혼합 추출물과, 연꽃 추출물의 혼합 비율에 따른 미생물 생장 최소억제농도(MIC)를 평가하고, 측정 결과를 하기 [표 4]에 나타내었다.
[표 4] P. acnes KACC 11946
그 결과, 진주 및 벚꽃 추출물과 연꽃 추출물의 복합추출물은 이들이 2 내지 8 : 1의 비율로 혼합된 추출물이 여드름 원인균에 대한 상승된 억제 효과가 있는 것을 확인할 수 있었고, 진주, 벚꽃, 및 연꽃 추출물이 10:5:3의 비율로 혼합된 복합추출물이 가장 우수한 시너지 효과가 있는 것을 확인할 수 있었다.
4-3. 동백꽃 및 다마스크장미 추출물의 시너지 효과 검증
동백꽃 추출물과 다마스크장미 추출물 사이의 상호 영향을 확인하기 위하여 2종 복합 추출물의 미생물 생장 최소억제농도(MIC)를 평가하고, 측정 결과를 하기 [표 5]에 나타내었다.
[표 5] P. acnes KACC 11946
그 결과, 동백꽃 추출물과 다마스크장미 추출물은 이들이 1:1의 비율로 혼합된 추출물이 여드름 원인균에 대한 상승된 억제 효과가 있는 것을 확인할 수 있었다.
4-4. 최종 5종 복합 추출물의 항균 활성 검정
상기 실시예 4-1 및 4-2의 실험을 통해 진주, 벚꽃, 및 연꽃 추출물은 10:10-5:4-2의 비율로 혼합되는 경우 여드름 원인균에 대한 상승된 억제 효과가 있고, 상기 실시예 4-3의 실험을 통해 동백꽃과 다마스크장미의 복합추출물은 이들이 1:1의 비율로 혼합된 경우 여드름 원인균에 대한 상승된 억제 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
상기 결과를 바탕으로 진주, 벚꽃, 및 연꽃의 3종 추출물과 동백꽃과 다마스크장미의 2종 추출물을 배합한 결과, 이들이 10:0.5-2의 비율로 혼합되는 경우 상승효과가 있음을 확인하였고, 이를 통해 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 5종 복합추출물은 10:10-5:4-2:0.5-2:0.5-2의 비율로 혼합되는 경우 상승효과가 있고, 10:5:3:1:1로 혼합되는 경우 여드름 원인균 억제에 최적의 효과가 있는 것으로 나타났다.
진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 5종 복합추출물의 시너지 효과를 검증하기 위해 10:5:3:1:1로 혼합된 5종 복합추출물의 항균 활성을 검증하였다.
실험은 5종의 천연 추출물과 캐리어 오일(포도씨 오일)에 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주를 1×106 CFU/ml의 초기 균수로 준비하여 미생물 저감 효능 시험을 실시하였다. 준비된 5종의 균주를 5종 복합 추출물에 접종하여 균주별 최적 조건에서 배양하였으며, 0, 1, 24시간마다 시료를 채취하여 멸균된 saline을 이용해 10배수로 희석하여 한천배지에 도말하였다. 도말한 플레이트들은 최적 조건에서 배양한 후, 전형적인 집락을 확인 및 계수하여 감소율을 확인하였다. 비교실험을 위해 음성대조군과 [비교예 2][0.1%(w/v) Salicylic acid] 및 [비교예 3][1%(v/v) Tea Tree oil]을 대조군으로 사용하였다.
상기 실험을 최적 비율로 혼합된 5종 복합추출물의 여드름 원인균에 대한 생장 저해 효능을 확인할 수 있었고, 그 결과를 [표 6]에 나타내었다.
[표 6]
[표 6]을 참조하면, 무처리 음성대조군에 비해 본 발명의 5종 복합추출물을 처리한 시험군에서는 여드름 원인균 모두에 대해 99.9% 이상의 높은 억제율을 보여 단일 추출물에 비해 현저하게 상승된 여드름 원인균 억제 효과가 있는 것을 확인할 수 있었다.
또한, 복합추출물 간에 객관적인 비교 검증을 위해 액체배지 희석법에 따라 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주에 대한 최소 성장억제농도(Minimun Inhibitory Concentration, MIC)를 구하여 하기 [표 7]에 나타내었다.
그 결과, 각각의 단일 추출물이나, 이들의 2종 또는 3종 추출물에 비해, 5종 추출물의 항균효과가 가장 우수한 것을 확인할 수 있었다.
[표 7]
상기와 같은 실험을 통해, 본 발명의 5종 성분 복합추출물은 여드름 원인균의 생장을 억제하는 우수한 시너지 효과가 있음을 확인할 수 있었고, 이러한 여드름 원인균에 대한 억제 효과는 시중에서 사용되는 화합물질인 메틸파라벤(비교예 1)과 비교하여도 매우 우수한 억제 효과임을 확인할 수 있었다.
실시예 5. 5종 복합추출물의 항염증 효과 테스트
본 발명의 5종 복합추출물의 항염증 효과를 확인하기 위해, 염증 유발에 관여하는 대표적인 세포 독성물질인 일산화질소(nitric oxide, NO)의 생성 억제율을 측정하였다.
먼저, 대식세포주인 RAW 264.7 세포를 한국세포주은행(KTCC, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. 구체적으로, 10% FBS(Fetal bovine serum)를 함유한 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)에 10% FBS, 100㎍/㎖ 페니실린 및 100㎍/㎖ 스트렙토마이신을 첨가한 배지에 상기 세포를 접종하여 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다.
구체적으로, 상기 RAW 264.7 세포를 1×106 cells/mL의 농도(in DMEM)로 96 웰 플레이트에 접종하고 24시간 배양 후, 비율을 달리하여 혼합한 본 발명의 5종 복합추출물을 10, 50, 및 100㎍/㎖ 농도로 희석한 시료와 내독소로 알려진 LPS(1μg/ml)를 함유한 새로운 배지를 동시에 처리하여 24시간 배양하였다. 그 후, 세포 배양 상등액 100㎕와 Griess reagent[1%(w/v) sulfanilamide, 0.1%(w/v) naphtylethylenediamine in 2.5%(v/v) phosphoric acid] 100㎕를 혼합하여 96 웰 플레이트에서 10분 동안 반응시키고, ELISA 리더를 사용하여 540nm에서 흡광도를 측정하여 생성된 산화질소의 양을 측정하였다. 생성된 아질산염(nitrite)의 농도는 아질산나트륨(sodium nitrite)을 DMEM 배지에 용해한 표준 곡선을 이용하여 계산하였다. LPS를 처리한 대조군과 LPS를 처리하지 않은 대조군에서 생성된 아질산염의 생성량 차이를 기준으로 각 시료의 일산화질소 생성 저해 활성을 확인하였다(표 8, 도 2 참조).
[표 8]
그 결과, 본 발명의 5종 성분의 복합추출물은 LPS처리 대조군에 비해 모든 조합 비율에서 산화질소 생성을 억제하여 항염증에 우수한 시너지 효과를 보이는 것으로 관찰되었다. 특히, 여드름 원인균에 억제 효과가 좋았던 10:10-5:4-2:0.5-2:0.5-2의 비율의 혼합비에서도 전반적인 항염증의 시너지 효과가 인정되었으며, 10:5:3:1:1로 혼합되는 경우에 가장 항염증 효과가 우수한 것으로 나타났다.
실시예 6. 5종 복합추출물의 피부 보습 효과 검증
본 발명의 5종 복합 추출물(10:5:3:1:1 중량비)의 피부 보습 효과를 검증하기 위해 히알루론산(Hyaluronan) 합성 촉진에 미치는 영향을 실험하였다.
인간각질형성세포를 24 well 세포배양 접시에 1㎖의 배양액을 넣고 약 1×105의 농도로 세포를 접종한 후, 37℃, 5% CO2 환경에서 24시간 동안 배양하였다. 그 후, 5종 복합 추출물(50, 및 100㎍/㎖)을 포함한 배지로 교체하여 24시간 배양하였다. 이후 배양액을 회수(harvest)하여 4℃, 7,500rpm 환경에서 5분간 원심분리(centrifuge)한 뒤, ELISA 방법을 이용하여 Hyaluronan(Hyaluronan kit, R&D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA)의 발현량을 확인하였다.
히알루론산(HA, Hyaluronan, Hyaluronic acid)은 주로 표피 각질형성세포와 진피 섬유아세포에 의해 합성되며, 수분과 결합하여 세포가 정상적으로 활동할 수 있는 환경을 조성하는 중요한 역할을 하는 물질이다. 피부에서 히알루론산의 감소는 피부 탄력 저하 및 수분 함유량 감소의 직접적인 원인 중 하나이다. 따라서 본 실험예에서는 인간각질형성세포 내에서 히알루론산의 생성량을 확인하였다. 그 결과, 본 발명의 5종 복합추출물은 50㎍/㎖ 용량에서 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크 장미의 단일추출물에 비해 각각 151%, 181%, 174%, 160%, 및 125% 증가된 히알루론산 합성량이 측정되었고, 100㎍/㎖ 용량에서 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크 장미의 단일추출물에 비해 각각 175%, 145%, 205%, 160%, 및 119% 증가된 히알루론산 합성량이 관찰되었다(도 3 참조). 상기 결과를 통해 본 발명의 5종 복합추출물은 5종 성분의 시너지 효과로 인해 피부 세포에서 히알루론산 생성을 효과적으로 증가시키고, 피부 보습과 관련된 용도로 매우 효과적으로 사용될 수 있음을 확인할 수 있었다.
실시예 7. Filaggrin 및 Hyaluronan synthase-3 유전자 발현 분석
본 발명의 5종 복합 추출물(10:5:3:1:1 중량비)이 필라그린(Filaggrin, FLG, 각질층 형성 인자) 및 히알루론산 합성효소(HAS-3, Hyaluronan synthase-3, 피부보습 인자) 유전자 발현에 미치는 영향을 실험하였다.
먼저, 100mm 세포 배양 접시에 인간각질형성세포를 10% FBS를 첨가한 DMEM 배지에 1×106 세포 농도로 접종하여 37℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 배양하여 본 발명의 5종 복합 추출물(10:5:3:1:1 중량비)을 각각 50μg/mL 및 100μg/mL 농도가 되도록 DMEM 배지에 희석하여 제조한 희석용액을 첨가하여 24시간 동안 동일 조건에서 배양하였다. 이후 Trizol reagent(invitrogen, USA)를 이용하여 세포를 회수하여 RNA를 분리하였다. RT-PCR 방법을 이용하여 필라그린 및 히알루론산 합성효소의 mRNA 발현량을 확인하였다. 사용한 프라이머는 다음과 같다:
- Filaggrin : 정방향 5′-AAG CTT CAT GGT GAT GCG AC-3′, 역방향 5′-TCA AGC AGA AGA GGA AGG CA-3′
- Hyaluronan synthase-3: 정방향 5′-CCC AGC CAG ATT TGT TGA TG-3′, 역방향 5′-AGT GGT CAC GGG TTT CTT CC-3′
- GAPDH: 정방향 5'-ACC ACA GTC CAT GCC ATC AC-3', 역방향 5'-CCA CCA CCC TGT TGC TGT AG-3'.
상기와 같은 프라이머를 이용하여 RT-PCR 수행하고, 그 결과를 도 4에 정리하여 나타내었다.
필라그린은 표피 과립층에서 케라토히알린과립(keratohyalin granule)을 형성하는 단백질인 프로필라그린(profilaggrin)의 형태로 존재하다가, 각질형성세포의 최종분화과정에서 필라그린으로 분해된 후에 각질세포막을 형성할 때 케라틴 필라멘트를 응집하여 각질세포의 단단하고 편평한 구조를 만듦으로써 피부장벽에서 벽돌(brick)의 역할을 수행한다.
또한, 진피층 및 표피에 존재하는 생리활성 물질의 하나인 히알루론산은 섬유아세포에서 합성되는 물질로 히알루론산 합성효소(Hyaluronan synthase)에 의해 생산된다.
따라서, 본 실시예에서는 피부 보습과 직접적으로 관련된 인간각질형성세포 내에서 필라그린과 히알루론산 합성효소의 mRNA 발현을 확인하였다. 그 결과, 시료 무처리군에 비해, 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물이 10:5:3:1:1의 비율로 혼합된 본 발명의 복합추출물 처리군에서는 필라그린(filaggrin)의 mRNA 발현량이 무처리군에 비해 각각 189%(50μg/mL) 및 236%(100μg/mL) 증가하였고, 히알루론산 합성효소(hyaluronan synthase-3)의 mRNA 발현량이 각각 176%(50μg/mL) 및 322%(100μg/mL) 증가한 것으로 관찰되었다.
상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미의 복합추출물은 세포 독성이 없고, 여드름 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주의 생장을 효과적으로 저해시켜 우수한 항여드름 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다. 또한, 본 발명의 5종 복합추출물이 염증매개 물질인 산화질소의 생성을 효과적으로 억제하며, 필라그린(Filaggrin) 및 히알루론산(Hyaluronic acid) 유전자의 발현을 촉진하고, 우수한 보습 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 특히, 진주, 벚꽃, 연꽃, 동백꽃, 및 다마스크장미가 10:5:3:1:1의 비율로 혼합된 복합추출물에서 여드름 원인균에 대한 억제 효과와 마찬가지로 염증 억제 및 피부 보습에도 가장 높은 시너지 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (10)
- 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물을 유효성분으로 함유하되,
상기 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물은 10:10-5:4-2:0.5-2:0.5-2의 중량비를 갖는 것을 특징으로 하고,
프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주에 대한 항균 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는,
항여드름, 항염증, 및 피부 보습용 화장료 조성물. - 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물은 10:5:3:1:1의 중량비를 갖는 것을 특징으로 하는 항여드름, 항염증, 및 피부 보습용 화장료 조성물. - 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 조성물은 산화질소(nitric oxide)의 생성을 억제하여 항염증 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 항여드름, 항염증, 및 피부 보습용 화장료 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 히알루론산의 합성을 증가시키는 것을 특징으로 하는 항여드름, 항염증, 및 피부 보습용 화장료 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 필라그린(Filaggrin) 및 히알루론산 합성효소(hyaluronan synthase-3) 유전자의 발현을 촉진하는 것을 특징으로 하는 항여드름, 항염증, 및 피부 보습용 화장료 조성물. - 삭제
- 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물을 유효성분으로 함유하되,
상기 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물은 10:10-5:4-2:0.5-2:0.5-2의 중량비를 갖는 것을 특징으로 하고,
프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주에 대한 항균 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는,
항여드름 및 항염증용 약학적 조성물. - 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물을 유효성분으로 함유하되,
상기 진주 추출물, 벚꽃 추출물, 연꽃 추출물, 동백꽃 추출물, 및 다마스크장미 추출물은 10:10-5:4-2:0.5-2:0.5-2의 중량비를 갖는 것을 특징으로 하고,
프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주, 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 균주에 대한 항균 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는,
항여드름, 항염증, 및 피부 보습용 식품 조성물.
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KR1020190123823A KR102270290B1 (ko) | 2019-10-07 | 2019-10-07 | 진주 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 조성물 |
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JP2016210706A (ja) * | 2015-05-01 | 2016-12-15 | Shiodaライフサイエンス株式会社 | 抗酸化・抗炎症剤、及び該抗酸化・抗炎症剤を含有するコルチゾール分泌抑制剤 |
KR101854446B1 (ko) * | 2017-01-10 | 2018-06-14 | 주식회사 아미코스메틱 | 상동나무 추출물과 미세침을 함유하는 화장료 조성물 |
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JPH0782161A (ja) * | 1993-09-10 | 1995-03-28 | Hiromaru Ogata | 活性酸素抑制剤 |
KR101499442B1 (ko) * | 2008-09-16 | 2015-03-09 | (주)아모레퍼시픽 | 석류꽃 및 관동화 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물 |
-
2019
- 2019-10-07 KR KR1020190123823A patent/KR102270290B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (2)
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JP2016210706A (ja) * | 2015-05-01 | 2016-12-15 | Shiodaライフサイエンス株式会社 | 抗酸化・抗炎症剤、及び該抗酸化・抗炎症剤を含有するコルチゾール分泌抑制剤 |
KR101854446B1 (ko) * | 2017-01-10 | 2018-06-14 | 주식회사 아미코스메틱 | 상동나무 추출물과 미세침을 함유하는 화장료 조성물 |
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