KR20050001730A - 암예방 및 치료용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 암예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 항암활성 및 면역증강활성을 기초로 암의 예방 및 치료제로 사용될 수 있는 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 (a) 상황버섯, 운지버섯, 표고버섯 및 영지버섯의 혼합물의 추출물; 및, (b) 당귀, 구기자, 황정, 상백피, 오갈피, 삼백초, 복령, 금은화, 포공영, 하수오, 인진 및 산약의 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 추출물; 을 포함하는 암예방 및 치료용 조성물과 이러한 조성물을 포함하는 건강보조식품을 제공한다. 본 발명의 조성물은 항암면역증강활성을 나타내어 암의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 암예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 항암활성 및 면역증강활성을 기초로 암의 예방 및 치료제로 사용될 수 있는 조성물에 관한 것이다.
인류 건강을 위협하는 최악의 질병이 악성종양, 즉 암은 심혈관 질환 다음으로 서구사회에서 가장 일반적인 사망원인이다. 현대사회에서 인구의 노령화, 흡연인구의 증가 및 대기오염으로 인한 폐암이 증가하고 있으며 식생활의 서구화에 따른 고지방식의 섭취, 환경오염물질의 증가, 음주량의 증가 등으로 대장암, 유방암, 전립선암 등이 지속적으로 증가 추세에 있다. 따라서 암의 조기예방 및 치료를 가능하게 하여 인간건강의 증진, 건강한 삶의 질 향상 및 인류보건 증진에 기여할 수 있는 항암 물질의 창출이 절실히 요구되고 있다.
현재까지 암치료를 위해 개발된 약제들은 전신치료용 주사나 경구투여에 따른 혈류를 따라 전신에 작용하는 비특이성으로 암세포에 대한 특이성이 낮다. 따라서 약제투여에 따른 전신적인 부작용이 많으며 수술이나 방사선 치료에 비해 부작용이 많이 나타나는 단점이 있다. 기존의 항암 약물들을 이용하는 암치료 기간은 1주일에 3~5일씩 3~4주 간격으로 6개월 내지 1년 정도 투여함에 따라 다양한 항암제 부작용을 야기해 치료를 중단하는 사례가 많이 발생한다. 암세포를 직접 공격하여 약효를 발휘하는 기존의 화학적 치료법은 부작용이 매우 강할 뿐만 아니라 비특이성의 단점에도 불구하고 최근 수년간 획기적인 신약이 나오지 않고 있는 실정이다.
상기 문제점을 해결하기 위하여, 본 발명의 목적은 항암활성 및 면역증강활성을 갖는 암예방 및 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 조성물을 유효성분으로 포함하는 건강보조식품을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 (a) 상황버섯, 운지버섯, 표고버섯 및 영지버섯의 혼합물의 추출물; 및, (b) 당귀, 구기자, 황정, 상백피, 오갈피, 삼백초, 복령, 금은화, 포공영, 하수오, 인진 및 산약의 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 추출물; 을 포함하는 암예방 및 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한 상기 조성물을 포함하는 암예방 및 치료용 건강식품을 제공한다.
이하 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 발명자들은 항암면역증강활성을 지닌 암예방 및 암치료 조성물에 대하여 연구하던 중, 천연생약을 수집하여 열수 추출하고 실험실적 조건에서 항암면역증강활성을 시험해본 결과, 효과적으로 배합한 천연생약 추출물의 조성물이 항암면역증강활성을 지니고 있음을 확인하고, 이를 토대로 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 따른 조성물의 각 구성 천연식물은 하기와 같다.
상황버섯(Phellinus linteus)은 소나무비늘버섯과(Hymenochaetaceae), 진흙버섯속(Phellinus)에 속하는 백색부후균이다. 영지버섯(Ganoderma lucidium)은 gyrophoric acid, lecarnoic acid 등을 함유하고 있으며 한방에서 건위, 건뇌, 강장, 강심, 이뇨, 해독, 항균, 면역, 진해, 진통, 신경쇠약, 불면증, 급만성간염, 위궤양, 혈압강하 등에 효과가 있다. 표고버섯(Lentinus edodes)은 일본 및 중국을 대표하는 식용버섯으로 죽은 참나무, 밤나무, 떡갈나무, 오리나무, 박달나무 등에 많이 돋은 버섯이다. 표고버섯에는 비타민, 미네랄, 식물섬유 등이 다량 함유되어 있어 고혈압 등 성인병 예방에 효과가 있다. 운지버섯(Coriolus versicolor)은 민주름버섯목 구멍장이 버섯과에 속하는 버섯으로서 이 버섯의 기능성 성분은 이 버섯의 세포벽을 이루는 물질인 Glucan인데 흔히 Polysaccharide-K 또는 PSK라고 부른다.
당귀(Angelica gigas)는 빈혈, 활혈효과가 있어 혈행장애에 의한 부인과제 질환에 쓰인다. 구기자(Lycium chinense)는 가을에 열매와 뿌리를 채취하여 햇볕에 말려 쓰는데, 열매를 말린 것을 구기자라 하고 뿌리껍질을 말린 것을 지골피(地骨皮)라 한다. 황정(Polygonatum sibiricum)은 한방에서는 뿌리줄기를 번갈·당뇨병·심장쇠약 등의 치료에 사용하며 한국·일본·중국에 분포한다. 오갈피(Acanthopanax sessiliflorum)는 한방에서는 뿌리 껍질과 나무 껍질을 오가피(五加皮)라는 약재로 쓰는데, 근육과 골격을 튼튼하게 해주고, 골절상·타박상·부종·사지마비에 효과가 있다. 삼백초(Saururus chinesis)는 한방에서는 식물체 전체를 말려 몸이 붓고 소변이 잘 안 나올 때 쓰고, 각기·황달·간염 등에도 사용한다. 복령(Poria cocos)은 땅속에서 소나무 등의 나무뿌리에 기생하는 균핵으로 균핵(菌核) 크기는 10∼30cm이며 둥근 모양 또는 길쭉하거나 덩어리 모양이다. 백색인 것을 백복령(白茯笭), 적색인 것을 적복령(赤茯笭)이라 한다. 강장 ·이뇨 ·진정 등에 효능이 있어 신장병 ·방광염 ·요도염에 이용한다. 금은화(Lonicera japonica)는 겨울에도 곳에 따라 잎이 떨어지지 않기 때문에 인동이라고 하며 종기·매독·임질·치질 등에 사용한다. 하수오(Polygonum multiflorum)는 붉은빛을 띤 갈색 덩이뿌리를 한방에서 하수오라고 하며 강장제·강정제·완하제로 사용한다. 잎은 나물로 하며 생잎을 곪은 데 붙여서 고름을 흡수시킨다. 산약(Dioscorea japonica)은 전분(澱粉) ·점액질(粘液質) ·단백질 ·지방 ·아르기닌콜린 등과 디아스타제를 함유하고 있으며, 지라[脾臟] ·폐 ·콩팥[腎臟] ·위 ·간의 경락(經絡)에도 작용한다.
본 발명의 암예방 및 치료용 조성물은 바람직하게는 상황버섯 추출물 40 내지 50중량%, 운지버섯 추출물 4 내지 8 중량%, 표고버섯 추출물 4 내지 8 중량%, 영지버섯 추출물 4 내지 8 중량%, 당귀 추출물 3 내지 6 중량%, 구기자 추출물 6 내지 12 중량%, 상백피 추출물 3 내지 6 중량%, 오갈피 추출물 3 내지 5 중량%, 삼백초 추출물 3 내지 6 중량%, 복령 추출물 3 내지 6 중량%, 금은화 추출물 3 내지 6 중량%, 포공영 추출물 3 내지 6 중량%, 하수오 추출물 3 내지 6 중량%, 인진 추출물 3 내지 6 중량% 및 산약 추출물 3 내지 6 중량%를 포함한다.
또한 본 발명의 조성물은 바람직하게는 상황버섯 추출물 49 중량%, 운지버섯 추출물 7 중량%, 표고버섯 추출물 7 중량%, 영지버섯 추출물 6 중량%, 황정 추출물 10 중량%, 당귀 추출물 6 중량%, 상백피 추출물 5 중량%, 오갈피 추출물 5 중량%, 삼백초 추출물 5 중량%를 포함한다.
위와 같은 생약 조성물의 조성비율은 많은 동물심험 및 임상실험 결과를 토대로 얻어진 것이며, 그 하한치 비율보다 낮은 경우에는 그 성분의 생리활성이 급속히 감소하였으며 그 상한치보다 높은 경우에는 다른 성분의 약효가 감소되는 이유로 상승효과 및 생약 조성물의 협동작용이 현저하게 떨어지는 문제점을 야기했다.
본 발명에 따른 조성물은 T 임파구세포, B 임파구세포, macrophages, 보체, 자연살해(natural killer)세포 등 면역세포에 작용하여 숙주의 저하된 면역기능을 회복·증강시킴으로써 인터루킨이나 인터페론 등 사이토카인의 생성을 촉진케 하여 항암면역효과(Biological Response Modifiers, BRM)를 발휘하는 특성이 있기 때문에 숙주에 특별한 부작용이 거의 없고 또한 화학요법제의 부작용을 완화시키거나 개선시키므로 항암보조치료제로서 장점이 있다.
본 발명의 조성물을 사용하여 통상적인 방법에 따라 약학 제형을 제조할 수 있다. 제형의 제조에 있어, 활성 성분을 담체와 함께 혼합 또는 희석하거나 용기형태의 담체내에 봉입시키는 것이 바람직하다. 담체가 희석제로 사용되는 경우에는 활성 성분에 대한 비히클(Vehicle), 부형제 또는 메디움(Medium)으로 작용하는 고형, 반고형 또는 액상의 물질일 수 있다. 따라서 제형은 정제, 환제, 분제, 엘릭시르, 현탁제, 유제, 용액제, 시럽제, 에어로졸, 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀제, 멸균주사제, 멸균 분제 등의 형태일 수 있다. 제형은 충진제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 당업계에 잘 알려진 방법을 사용하여 제형화 될 수도 있다.
이하 본 발명의 바람직한 실시예 및 비교예를 기재한다.
그러나 하기한 실시예는 본 발명의 바람직한 일 실시예일 뿐 본 발명이 하기한 실시예에 한정되는 것은 아니다.
(실시예 1)
1.열수 추출물의 제조
상황버섯, 운지버섯, 표고버섯, 영지버섯, 둥글레, 당귀, 상백피, 오갈피, 삼백초, 구기자, 복령, 금은화, 포공영, 구기자, 하수오, 인진쑥, 산약를 환류 냉각하에서 90 내지 100℃에서 4 내지 8 시간 동안 2회 연속 추출하여 열수 추출물을 얻은 후 농축하여 농도를 20 brix로 조정하였다.
2. 본 발명에 따른 조성물 제조
상기에서 얻은 추출물을 상황버섯 추출물 49g, 운지버섯 추출물 7g, 표고버섯 추출물 7g, 영지버섯 추출물 6g, 황정 추출물 10g, 당귀 추출물 6g, 상백피 추출물 5g, 오갈피 추출물 5g, 삼백초 추출물 5g을 혼합하여 본 발명에 따른 조성물을 제조하였다.
(실시예 2)
상기 실시예 1에서 얻은 생약의 열수 추출물을 상황버섯 추출물 40g, 운지버섯 추출물 5g, 표고버섯 추출물 5g, 영지버섯 추출물 5g, 당귀 추출물 3g, 구기자 추출물 6g, 상백피 추출물 4g, 오갈피 추출물 4g, 삼백초 추출물 4g, 복령 추출물 4g, 금은화 추출물 4g, 포공영 추출물 4g, 하수오 추출물 4g, 인진 추출물 4g 및산약 추출물 4g을 혼합하여 본 발명에 따른 조성물을 제조하였다.
실시예 조성물의 함량을 변화시킬 수 있으므로, 상기 실시예 1,실시예 2의 조성외에도 매우 다양한 조합의 조성물을 제조할 수 있다.
이하 본 발명에 따른 조성물의 항암면역증강 작용을 알아 보기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다.
(실험예 1)
(대식세포의 활성 시험)
1.임파구 세포증식 반응시험
살아있는 세포에서만 tetrazolium salt MTT 시약이 오렌지색의 formazan을 형성할 수 있는 원리를 이용하여 방사선 동위원소를 사용하지 않고 450nm에서 흡광도를 측정함으로써 세포 증식능을 조사하였다.
무처치한 mouse에서 무균적으로 채취한 비장에서부터 10% fetal calf serum, 2nM L-glutamine, 15mM HEPES 및 5㎍/㎖ gentamycine이 함유된 RPMI1640용액을 사용하여 단일세포 배양액을 조제한 다음, 비장세포 배양액을 2X105cells/㎖ 농도로 조절하여 96-well micrptiter plate에 100㎕씩 첨가하고 여기에 실시예 1, 실시예2를 농도별로 처리한 후 72 시간 배양하여 각 well에 첨가한 다음 세포를 전처리 하여 흡광도를 측정하였다. 그 결과는 다음 표 1에 나타내었다.
2. 대식세포의 위족형성능
복강 대식세포를 1 X 105cell로 조절하여 96-well micrptiter plate에서 37℃에서 48시간 동안 배양하여 위족형성능을 관찰하고, 위족형성 활성은 300마리의 대식세포를 기준으로 백분율로 표시하였다. 그 결과는 다음 표 1에 나타내었다.
[표 1. 대식세포 활성 시험 결과]
처리(㎍/㎖) | 세포증식능 | 위족생성능 |
lipopolysaccharide(0.5㎍/㎖) | 3.75±0.35 | 5.01±0.52 |
실시예 1(50㎍/㎖) | 2.42±0.14 | 3.04±0.19 |
실시예 1(100㎍/㎖) | 3.45±0.31 | 4.05±0.13 |
실시예 2(50㎍/㎖) | 2.31±0.35 | 2.98±0.39 |
실시예 2(100㎍/㎖) | 3.34±0.55 | 4.01±0.16 |
상기 표 1에서 볼 수 있는 바와 같이, 대식세포 활성에 있어 실시예 1, 실시예 2는 대식세포의 세포증식능과 위족형성능이 농도의존적으로 증가하였다.
(실험예 2)
(대식세포의 식작용 활성시험)
대식세포는 외부 항원물질에 대한 1차 방어를 담당하는 면역세포로서 반응중간대사 물질, cytokine 및 식작용을 통해 숙주내 항원물질을 제거한다. 복강 대식세포를 46-well micrptiter plate에서 48시간 배양한 다음 전처리하여 37℃에서 90분간 배양하여 배양된 세포를 FBS가 함유된 phosphate-PBS용액으로 세척한 다음 대식세포의 식작용에 어떤 영향을 미치는가를 형광분광광도계를 사용하여 FITC-altex microbead의 internalization으로 측정하였다. 그 결과는 다음 표 2에 나타내었다.
[표 2. 대식세포의 식작용에 미치는 영향]
처리(0.5㎍/㎖) | 식작용 활성 |
lipopolysaccharide(0.5㎍/㎖) | 638.4±62.5 |
실시예 1(50㎍/㎖) | 485.2±42.5 |
실시예 1(100㎍/㎖) | 651.5±34.8 |
실시예 2(50㎍/㎖) | 473.1±23.6 |
실시예 2(100㎍/㎖) | 659.5±32.8 |
상기 표 2에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 1과 실시예 2는 농도의존적으로 유의성 있는 식작용 효과를 나타내어 항암면역활성을 확인할 수 있었다.
(실험예 3)
(대식세포의 Nitric oxide 생성능 시험)
NO가 암세포와 미생물에 세포능력을 가지는 생화학적 기작은 미토콘드리아의 호흡계에 중심적인 역할을 하는 효소와 DNA합성에 관여하는 주요 효소들에 존재하는 Fe를 포함하는 잔기들과 NO가 결합하여 효소적 반응을 저해시킨다.
세포를 5% CO2배양기에서 24시간 배양한 후 배양액내의 NO를 측정하기 위하여 배양액상층을 Greiss시약과 혼합한 후 상온에서 10분간 방치 후 550nm에서 흡광도를 측정하며 NO의 농도는 NaNO3를 이용하여 표준곡선을 그리고 이와 비교하여 NO의 생성량을 정하여 나타난 결과는 다음 표 3과 같다.
[표 3. NO 생성에 미치는 영향]
처리(㎍/㎖) | Nitrite |
Lipopolysaccharide ㎍/㎖) | 64.25±4.56 |
실시예 1(50㎍/㎖) | 8.72±0.91 |
실시예 1(100㎍/㎖) | 16.75±4.23 |
실시예 2(50㎍/㎖) | 8.25±2.95 |
실시예 2(100㎍/㎖) | 15.52±3.72 |
상기 표 3에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 1과 실시예 2는 농도의존적으로 NO 생성이 증가하였다.
(실험예 4)
(대식세포의 암세포 증식억제)
본 발명에 따른 실시예 1, 실시예 2로 활성화된 대식세포의 암세포 증식억제 활성은 Sarcoma180 암세포를 18시간 동안 공동배양한 다음 MTT용액 50㎍을 각 well에 첨가하여 농도별로 세포활성을 조사하였다.
[표 4. 대식세포의 암세포 증식억제에 미치는 영향]
처리(㎍/㎖) | 증식억제능(%) |
Lipopolysaccharide(0.5㎍/㎖) | 58.4 |
실시예 1(50㎍/㎖) | 38.5 |
실시예 1(100㎍/㎖) | 52.4 |
실시예 2(50㎍/㎖) | 36.7 |
실시예 2(100㎍/㎖) | 50.4 |
상기 표 4에서 볼 수 있는 바와 같이, 실시예 1과 실시예 2를 각각 50, 100㎍/㎖의 농도로 처리한 결과 대식세포는 Sarcoma180 암세포를 강하게 억제하였고, 또한 100㎍/㎖ 농도에서는 암세포를 사멸시키는 것이 아니고 cytostatic 활성 향상에 의한 암세포 증식을 억제하는 것으로 나타나 면역증강 소재로서 활용가치가 있음이 확인되었다.
(실험예 5)
(Cytokine 생성능)
실시예 1과 실시예 2에 의한 대식세포의 cytokine 생성능, 즉 TNF-α, IL-1β 및 IL-6의 분비에 대한 영향을 조사하기 위하여 복강 대식세포에 각 추출물을 농도별로 처리한 다음 배양 상등액에 분비되는 각종 cytokine 양을 ELISA로 분석하였다.
[표 5. cytokine 생성에 미치는 영향]
처리(㎍/㎖) | TNF-α(ng/㎖) | IL-1β(ng/㎖) | IL-6 (ng/㎖) |
Lipopolysaccharide(0.5㎍/㎖) | 7.78±0.85 | 3.25±0.25 | 3.42±0.45 |
실시예 1(50㎍/㎖) | 4.17±0.25 | 2.12±0.15 | 1.14±0.18 |
실시예 1(100㎍/㎖) | 8.15±0.62 | 3.75±0.25 | 2.14±0.17 |
실시예 2(50㎍/㎖) | 4.05 ±0.41 | 2.08±0.34 | 1.12 ±0.18 |
실시예 2(100㎍/㎖) | 8.13±0.56 | 3.67±0.24 | 2.12±0.42 |
상기 표 5에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 1과 실시예 2는 농도의존적으로 배양 상등액에서 TNF-α, IL-1β 및 IL-6의 분비량이 증가되었는데, 특히 100㎍/㎖ 처리시에는 뚜렷이 증가하는 특징이 나타났다. 이런 결과는 NO 생산량이 증가한 것과 유사한 결과를 보였다. 이러한 cytokine의 분비량 증가는 T 세포가 활성화 되었음을 간접적으로 보여주고 있다.
즉, 이상의 시험예에서 살펴본 바와 같이 본 발명에 따른 조성물은 T임파구세포, B임파구세포, macrophages, 보체, 자연살해(natural killer)세포 등 면역세포에 작용하여 숙주의 저하된 면역기능을 회복·증강시킴으로써 인터루킨이나 인터페론 등 사이토카인의 생성을 촉진케 하여 항암면역효과(Biological Response Modifiers, BRM)를 나타낸다.
상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 조성물은 대식세포 등의 면역활성을 증가시킴으로써 대식세포는 암세포 증식을 억제하여 항암효과를 나타내는 것으로 밝혀졌다. 본 발명의 조성물은 부작용이 없는 천연소재로 암환자에 대해 단독으로또는 타약제와 병용하여 암의 치료 또는 예방 목적으로 널기 활용될 수 있을 것이다.
Claims (4)
- (a) 상황버섯, 운지버섯, 표고버섯 및 영지버섯의 혼합물의 추출물; 및,(b) 당귀, 구기자, 황정, 상백피, 오갈피, 삼백초, 복령, 금은화, 포공영, 하수오, 인진 및 산약의 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 추출물; 을 포함하는 암예방 및 치료용 조성물.
- 제1항에서, 상황버섯 추출물 40 내지 50중량%, 운지버섯 추출물 4 내지 8 중량%, 표고버섯 추출물 4 내지 8 중량%, 영지버섯 추출물 4 내지 8 중량%, 당귀 추출물 3 내지 6 중량%, 구기자 추출물 6 내지 12 중량%, 상백피 추출물 3 내지 6 중량%, 오갈피 추출물 3 내지 5 중량%, 삼백초 추출물 3 내지 6 중량%, 복령 추출물 3 내지 6 중량%, 금은화 추출물 3 내지 6 중량%, 포공영 추출물 3 내지 6 중량%, 하수오 추출물 3 내지 6 중량%, 인진 추출물 3 내지 6 중량% 및 산약 추출물 3 내지 6 중량%를 포함하는 암예방 및 치료용 조성물.
- 제1항에서, 상황버섯 추출물 49 중량%, 운지버섯 추출물 7 중량%, 표고버섯 추출물 7 중량%, 영지버섯 추출물 6 중량%, 황정 추출물 10 중량%, 당귀 추출물 6 중량%, 상백피 추출물 5 중량%, 오갈피 추출물 5 중량%, 삼백초 추출물 5 중량%를 포함하는 암예방 및 치료용 조성물.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항 기재의 조성물을 함유하는 건강보조식품.
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