KR20030030636A - 버섯 자실체의 발효를 이용하여 고활성 항암 단백다당체를제조하는 방법 - Google Patents
버섯 자실체의 발효를 이용하여 고활성 항암 단백다당체를제조하는 방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 버섯 자실체의 발효를 이용하여 고활성 항암 단백다당체를 제조하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 담자균 균사체를 이용하여 버섯 자실체를 발효시켜 추출하는 것을 특징으로 하는 고활성 항암성 단백다당체의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 단백다당체에 관한 것이다. 본 발명의 제조방법은 버섯으로부터 항암효과를 나타내는 단백다당체를 높은 수율로 수득할 수 있는 장점이 있다. 또한, 본 발명의 제조방법에 따라 수득된 단백다당체는 종래의 제조방법으로 제조된 단백다당체보다 우수한 항암활성을 갖기 때문에 항암치료제로 유용하게 사용될 수 있을 뿐 아니라, 암을 예방하기 위한 기능성 식품으로도 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 버섯 자실체의 발효를 이용하여 고활성 항암 단백다당체를 제조하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 담자균 균사체를 이용하여 버섯 자실체를 발효시켜 추출하는 것을 특징으로 하는 고활성 항암성 단백다당체의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 단백다당체에 관한 것이다.
일반적으로 버섯은 90% 이상의 수분과 2~3%의 단백질, 지방질, 당질, 미네랄, 비타민 B2, 나이아신(niacin), 프로비타민 D 등을 함유하고 있다. 또한, 버섯은 칼로리가 낮고, 고단백이어서 다이어트와 성인병 예방에 효과가 있는 식품으로 평가되고 있으며, 요통치료, 손발마비, 항종양 및 적혈구 용혈 작용, 항바이러스 작용, 저혈압 및 알레르기 반응 억제 효과가 있고, 특히 항암효과가 있는 것으로 알려져 있다. 이러한 버섯으로부터 추출된 렌티난(lentinan),시조필란(schizophyllan), 피에스케이(PSK) 등의 다당체 또는 단백다당체는 면역기능을 활성화시켜 항암효과를 발휘하기 때문에 암의 치료에 보조적으로 사용되고 있다(Chihara, G.,et al.,Nature222: 687, 1969; Tsugagoshi, S.et al.,Cancer Treat. Rev.11:131, 1984). 구체적으로, 잎새버섯(Grifola frondosa)을 위시하여 운지 버섯(Coriolus versicolor), 표고버섯(Lentinus edodes), 상황버섯(Phelinus linteus) 등의 일부 버섯류에 함유되어 있는 다당체 또는 단백다당체는 우수한 항종양 효과를 나타내기 때문에 많은 관심과 연구의 대상이 되고 있으며, 의약품으로 개발된 것도 있다.
특히, 상기 잎새버섯은 담자균류에 속하는 향기가 좋은 식용버섯으로, 그 열수 추출물은 예로부터 일본 및 중국 등지에서 암 치료용 민간약제로 사용되어 왔다. 또한, 잎새버섯은 항 당뇨효과, 혈압 강하효과, 구리 흡착효과 및 항암 활성이 있는 것으로 보고된 바 있다(Rapior S.et al.,J. Essent. Oil. Res.8:63-66, 1996; Adachi K.et al.,Chem. Pharm. Bull.36:1000-1006, 1998). 예컨대, 잎새버섯에서 추출된 단백다당체는 대식세포를 활성화시켜 인터루킨-1의 생산을 증가시키며, 자연살상세포(natural killer cell)를 활성화시킬 뿐만 아니라, 보체 경로(alternative complement pathway)를 활성화시키는 등 면역활성화를 통해서 항암효과를 나타내는 것으로 보고되어 왔다(Hishida I.et al.,Chem. Pharm. Bull. 36: 1819-1827, 1988; Suzuki I.et al.,Chem. Pharm. Bull. 37: 410-413, 1989).
그러나, 잎새버섯의 항암면역활성 유효성분인 단백다당체 분획의 추출 및 제조법은 재래의 방법에서 크게 벗어나지 못하고 있었다. 실제로, 미국특허제2,859,843호에는 잎새버섯 균사체나 자실체에 물을 가해 열수추출하고, 그 추출액에 에탄올을 20-70%가 되도록 가하여 1차적으로 단백다당체를 침전시킨 후, 그 남은 상등액에 다시 에탄올을 최종 용적의 80-99%가 되도록 첨가하여 단백다당체를 분리하는 방법이 개시되어 있으나, 이는 재래의 방법을 약간 변조시킨 것에 불과하다. 이에 본 발명자들은 상기 미국특허 제 2,859,843호와는 다르게 잎새버섯의 열수추출액에 동량의 95% 알코올을 첨가하여 얻어지는 단백다당체 KGF1이 우수한 항암효과를 발휘함을 발견하고 그 제조방법을 특허출원한 바 있다(출원번호: 제10-2001-21226호). 그러나 기존의 일반적인 방법은 물론 상기 두 가지 방법 모두에 있어서, 잎새버섯 단백다당체 수율은 1% 전후로 매우 저조한 수치이다. 따라서 항암효과를 나타내는 단백다당체 수율을 향상시키기 위한 획기적인 방법의 개발이 요구되어 왔다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의하여 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 버섯으로부터 유래한 단백다당체의 수율을 증대시킬 수 있는 방법을 제공하는 것이다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 버섯 자실체를 열수추출 또는 열수추출 및 에탄올 처리하여 항암성 단백다당체를 제조하는 방법에 있어서,
a) 버섯 자실체에 무기질과 유기영양소를 첨가하여 발효 혼합물을 제조하는 단계;
b) 상기 발효 혼합물에 담자균 균사체 또는 효모를 접종한 후 배양하여 발효시키는 단계; 및
c) 상기 배양이 완료된 버섯 발효물로부터 단백다당체를 추출하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고활성 항암성 단백다당체의 제조방법을 제공한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
버섯은 기본적으로 곰팡이의 일종으로서, 분류학적으로는 대부분 담자균류(basidiomycetes)에 속한다. 따라서 버섯들은 다른 곰팡이류와 마찬가지로 일생의 대부분을 눈에 쉽게 띄지 않는 균사체로서 살아간다. 버섯의 일생은 버섯에서 떨어져 나온 미세한 포자가 발아되어 균사체로 자라면서 시작되는데, 이들 버섯 균사체는 죽은 나무 등걸이나 낙엽 등 주로 식물체로부터 양분을 섭취하여 증식을 거듭하며 영양을 축적한 후, 온도, 습도, 이산화탄소 농도 등의 모든 조건이 구비되면 단시간 내에 사람의 눈에 보이는 거대한 자실체를 만들어 비로소 “버섯”으로 인식된다.
한편, 버섯의 세포벽은 β-글루칸(β-glucan) 등의 고분자 다당체 또는 단백다당체로 매우 치밀하게 짜여져 있어서 상온에서는 물론 어느 정도의 가열에 의해서도 추출이 잘 되지 않는다. 따라서, 단백다당체 등의 유효성분을 추출을 위해서는 수 차례의 열탕추출을 반복해야 하며, 그렇다 하더라도 그 수율이 1% 정도로 매우 저조하였다. 특히, 잎새버섯을 비롯하여 운지버섯(Coriolus versicolor), 상황버섯(Phelinus linteus), 차가버섯(Innonotus obliquos), 영지버섯(Ganoderma lucidum) 등 자실체가 가죽처럼 질기거나 목질처럼 단단한 버섯들의 경우 유효 단백다당체 성분의 수율이 더욱 저조하였다. 이에, 본 발명자들은 담자균 균사체나 효모로 하여금 상기 죽은 나무 등걸이나 낙엽 등의 식물체 대신 버섯을 영양원으로 이용하여 증식하게 한다면 버섯의 세포벽이 연화되어 단백다당체의 추출이 용이해지고, 이에 따라 수율이 증대될 것이라고 예측하였다. 따라서, 본 발명은 상기와 같은 점에 착안하여 고안된 것으로서, 버섯을 열을 가하는 등의 물리적인 수단이 아닌 생물학적 수단, 즉, 발효과정을 통해 단백다당체를 추출한다는 점에 특징이 있다.
이하, 본 발명에 따른 단백다당체의 제조방법에 대해 상세히 설명한다.
먼저 버섯 자실체에 무기질과 유기영양소를 첨가하여 발효 혼합물을 제조한다. 이 때 본 발명에 이용될 수 있는 상기 버섯으로는 항암효과를 나타내는 버섯, 즉, 운지버섯(Coriolus versicolor), 상황버섯(Phelinus linteus), 차가버섯(Innonotus obliquos), 영지버섯(Ganoderma lucidum), 잎새버섯(Grifola frondosa), 참버섯(Panus rudis) 또는 표고버섯(Lentinus edodes) 등을 사용할 수 있으나, 보다 바람직하게는 잎새버섯을 이용하는 것이 바람직하다. 또한, 상기 버섯 자실체는 분말화하여 사용하는 것이 바람직하다. 상기 발효혼합물에 첨가되는 상기 무기질로는 칼슘(Ca), 칼륨(K), 염소(Cl), 황(S) 등의 무기염류 및구리(Cu), 철(Fe), 망간(Mn), 아연(Zn) 등의 미량원소를 사용할 수 있으며, 상기 유기영양소로는 효모추출물, 펩톤, 포도당, 미강(rice bran) 등을 사용할 수 있다.
이후, 상기 발효 혼합물에 담자균 균사체 또는 효모를 접종한 후 배양하여 발효시킨다. 본 발명에 따라 상기 버섯 자실체의 발효에 사용되는 미생물(이하 '접종균'이라 한다)로는 항암효과가 잘 알려진 식용버섯이나 약용버섯의 균사체, 특히 잎새버섯 균사체(Grifola frondosa) 균사체, 표고버섯(Lentinus edodes) 균사체, 팽이버섯(Flammulina velutipes) 균사체 및 참버섯(Panus rudis) 균사체로 이루어지는 담자균 균사체 군으로부터 선택되는 1종 이상을 사용하는 것이 바람직하고, 필요에 따라서는 발효시킬 버섯과 같은 종류의 균사체를 사용할 수도 있다. 또한, 본 발명에서는 효모를 이용하여 상기 버섯 자실체를 발효시킬 수도 있다. 상기 효모로는 사카로마이시스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 또는 사카로마이시스 칼스버겐시스(Saccharomyces calsbergensis)를 사용하는 것이 바람직하다. 상기 버섯의 발효는 액상으로 배양하여 발효시킬 수도 있고, 고형으로 배양하여 발효시킬 수도 있다. 상기 액상으로 발효시킬 때는 버섯 자실체 분말에 1 내지 5 중량%의 효모추출물, 펩톤 및 포도당을 첨가하여 제조된 발효 혼합물(액상 발효용 혼합물)을 이용하는 것이 바람직하고, 고형으로 발효시킬 때는 버섯 자실체 분말에 3 내지 30 중량%의 톱밥, 미강 및 포도당을 첨가하여 제조된 발효 혼합물(고형 발효용 조성물)을 이용하는 것이 바람직하다. 나아가, 상기 발효 혼합물에 황산마그네슘(magnesium sulfate), 인산 제 1 칼륨(potassium phosphate,monobasic; KH2PO4), 염화칼슘(calcium chloride), 황산아연(zinc sulfate), 황산구리(cupric sulfate), 염화망간(manganese chloride), 황산철(ferrous sulfate and ferric sulfate) 등의 무기질이 첨가될 수도 있다. 또한, 상기 발효혼합물의 배양은 정치배양, 진탕배양 또는 발효조내 배양 방법을 사용할 수 있다. 이 때 배양온도는 20 내지 37℃가 바람직하나, 보다 바람직하게는 25℃가 바람직하며, 배양기간은 1 내지 15일이 바람직하나, 보다 바람직하게는 5일이 바람직하다.
그리고 나서, 상기 배양이 완료된 버섯 발효물로부터 단백다당체를 추출한다. 상기 배양이 완료된 버섯 발효물로부터 단백다당체를 추출하는 방법으로는 공지의 단백다당체의 추출방법(열수추출 또는 열수추출 및 에탄올 처리)이 사용될 수 있으나, 보다 바람직하게는 상기 배양이 완료된 버섯 발효물을 90 내지 130℃로 20분 내지 2시간동안 1 내지 7회 열수추출하여 추출액을 얻은 후, 1 내지 3배량의 에탄올을 처리하여 단백다당체를 제조하는 것이 바람직하다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1>
접종균으로 잎새버섯을 이용한 단백다당체의 제조
건조된 잎새버섯 자실체 1,200g을 입도 100mesh이하의 크기로 분쇄하였다.이후, 상기 잎새버섯 자실체 분말 5g에 포도당 10g, 효모추출물 10g, 펩톤 10g, 황산마그네슘 0.5g, 인산 제 1 칼륨(KH2PO4) 0.87g, 염화칼슘 0.3g, ZnSO4·7H2O 4mg, CuSO4·5H2O 1mg, MnCl2·4H2O 7mg, FeSO4·7H2O 10mg 및 증류수 1ℓ를 가한 후, pH를 5.0으로 조정한 다음 이를 121℃에서 30분 동안 고압멸균하여 발효 혼합물을 제조하였다. 잎새버섯으로부터 공지의 방법에 따라 균사체를 분리한 후, 이를 상기 발효 혼합물에서 25℃, 5일간 배양하였다. 그리고 나서, 상기 잎새버섯 균사체의 배양물을 상기 발효 혼합물에 5 %(v/v)가 되도록 접종하였다. 이후, 이를 25℃에서 180rpm으로 진탕하며 5일간 배양하였다. 그리고 나서, 위상차 현미경(올림프스사, 일본)을 이용하여 상기 배양한 발효물을 관찰한 결과, 상기 접종된 잎새버섯 균사체 자체가 성장한 균사덩어리 및 상기 잎새버섯 균사체들이 잎새버섯 자실체 조각에 활착하여 성장한 혼합 균사덩어리가 관찰되었다.
이후, 상기 배양된 발효물을 전기 믹서기(Osterizer 16 speed blender, USA)로 30초 정도 파쇄한 후, 고압멸균기(Full Automatic Autoclave 9041, 한신메디칼사)를 이용하여 110℃에서 60분간 추출하였다. 이후, 감압여과하여 열수 추출액을 분리한 후, 동량의 95% 에탄올을 가하여 4℃에서 하룻밤 보관하여 침전을 생성시켰다. 그리고 나서, 원심분리기(Union 32R, 한일싸이언스사)를 이용하여 4℃에서 2,800rpm으로 20분간 원심분리하여 상등액을 제거하고, 남은 침전물을 30℃의 증류수 100㎖에 용해시킨 후, 다시 원심분리하여 불용성분을 제거하였다. 이후, 상등액을 투석막(D-9597 Dialysis Tubing, Molecular cut off: 12,000, Sigma)을 이용하여 4℃에서 증류수에 대해 24시간 투석하였다. 그리고 나서, 투석된 내용물을 다시 고속원심분리기(Mega 17R, 한일싸이언스사)를 이용하여 4℃에서 16,000rpm으로 원심분리하여 투석 중에 생성된 불용성 침전물을 제거한 후, 딥 프리저(deep freezer)(Model 917, Forma사)를 이용하여 -80℃로 동결시키고 동결건조기(FDU-540, EYELA사)로 동결건조하여 담갈색의 수용성 분말의 단백다당체를 수득하였으며, 이를 GFG라 명명하였다.
이후, 상기 수득된 분말의 총당함량과 총단백함량을 측정하여 그 결과를 하기 표 1에 기재하였다. 이 때 상기 총당함량은 노리스 등의 방법(Norris J. R.et al.,Methods in Microbiology. 5B: Academic Press. New York.209-339. 1971)에 따라 측정하였고, 상기 총단백함량은 세드막크 등의 방법(Sedmark J. J.et. al.,Anal. Biochem. 79:455-553, 1977)에 따라 측정하였다. 또한, 본 발명의 제조방법에 따라 수득된 단백다당체의 수율을 조사하여 하기 표 2에 기재하였다.
<실시예 2 >
접종균으로 표고버섯을 이용한 단백다당체의 제조
잎새버섯 자실체 분말 14g을 사용하여 상기 실시예 1과 동일한 방법에 따라 발효 혼합물을 제조한 후, 잎새버섯의 발효를 위한 접종균으로 표고버섯을 사용하여 상기 실시예 1과 동일한 방법에 따라 단백다당체를 제조하였으며, 이를 LEG라 명명하였다. 이후, 총당함량과 총단백함량을 상기 실시예 1과 동일한 방법에 따라 측정하여 하기 표 1에 기재하였다. 또한, 수득된 단백다당체의 수율을 각각 조사하여 하기 표 2에 나타내었다.
<실시예 3>
접종균으로 팽이버섯을 이용한 단백다당체의 제조
잎새버섯 자실체 분말 10g을 사용하고, 접종균으로 팽이버섯을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법에 따라 단백다당체를 제조하였으며, 이를 FVG라 명명하였다. 이후, 총당함량과 총단백함량을 상기 실시예 1과 동일한 방법에 따라 측정하여 하기 표 1에 기재하였다. 또한, 수득된 단백다당체의 수율을 각각 조사하여 하기 표 2에 나타내었다.
<실시예 4>
접종균으로 참버섯을 이용한 단백다당체의 제조
잎새버섯 자실체 분말 12.5g을 사용하고, 접종균으로 참버섯을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법에 따라 단백다당체를 제조하였으며, 이를 PRG라 명명하였다. 이후, 총당함량과 총단백함량을 상기 실시예 1과 동일한 방법에 따라 측정하여 하기 표 1에 기재하였다. 또한, 수득된 단백다당체의 수율을 각각 조사하여 하기 표 2에 나타내었다.
<비교예 1>
발효시키지 않은 잎새버섯 자실체로부터 열수추출 및 에탄올 처리하여 단백다당체를 제조하였다. 먼저, 건조된 잎새버섯 자실체 50g에 1,000 ㎖의 증류수를 가하여 전기 믹서기(Osterizer 16 speed blender, USA)로 약 2분 동안 파쇄한 후, 발효과정 없이 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 열수추출 및 에탄올 처리하여 단백다당체를 제조하였다. 이후, 총당함량과 총단백함량을 상기 실시예 1과 동일한 방법에 따라 측정하여 하기 표 1에 기재하였다. 또한, 수득된 단백다당체의 수율을 각각 조사하여 하기 표 2에 나타내었다.
| 총당함량(%)(w/w) | 총단백함량(%)(w/w) | |
| 실시예 1 | 72.44 | 12.51 |
| 실시예 2 | 69.32 | 7.95 |
| 실시예 3 | 75.10 | 6.87 |
| 실시예 4 | 74.59 | 4.94 |
| 비교예 1 | 72.34 | 9.87 |
상기 표 1에 기재된 바와 같이, 본 발명의 제조방법에 따라 잎새버섯으로부터 수득된 물질들이 단백다당체임을 확인할 수 있었다.
| 발효혼합물에 첨가된잎새버섯 자실체 분말량(g) | 수득량(㎎) | 수율(%) | |
| 실시예 1 | 5 | 57.1 | 1.14 |
| 실시예 2 | 14 | 405.7 | 2.90 |
| 실시예 3 | 10 | 197.1 | 1.97 |
| 실시예 4 | 12.5 | 346.6 | 2.77 |
| 비교예 1 | 50 | 469.7 | 0.94 |
상기 표 2에 기재된 바와 같이, 본 발명의 제조방법에 따라 제조된 단백다당체의 수율이 종래의 방법 즉, 발효과정 없이 열수추출 및 에탄올 처리하여 얻는 경우(비교예 1)에 비해 높음을 확인할 수 있었다. 이는 발효과정을 통하여 잎새버섯 자실체의 조직이 연화되어 단백다당체의 추출이 용이해짐으로써 수율이 증가되었다는 것을 보여주는 결과이다.
<실시예 5 내지 8>
항암효과 확인
상기 실시예 1 내지 4에서 제조된 각 단백다당체 시료들을 생쥐의 복강에 전처리한 후, 육종암세포(sarcoma 180)를 상기 생쥐의 복강에 이식하여 본 발명에 따른 단백다당체의 항암 효과를 조사하였다. 먼저, 본 발명의 제조방법에 따라 상기 실시예 1 내지 4에서 제조된 각 단백다당체 시료를 10㎎/㎖의 농도로 생리식염수에 용해시켰다. 상기 단백다당체가 용해된 생리식염수 0.1㎖씩을 상기 ICR계 생쥐(대한바이오링크사)에 1일 1회씩 3일간 복강주사하고, 제 3일에는 상기 시료주사와 2시간의 간격을 두고 생쥐의 육종암 세포를 복강 내에 4×105cell/mouse의 농도로 이식하였다. 이 때, 생쥐의 육종암 세포(sarcoma 180)로는 ICR계 생쥐의 복막에서 일주일 간격으로 계대 배양한 것을 사용하였다. 이후, 제 7일째 상기 생쥐를 희생시켜 오정연 등의 방법(오정연 외, 약학회지 42: 487-493, 1998)에 따라 복강 중에 증식되고 있는 암세포를 계수하여 종양저지율을 계산하였으며, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다. 대조구로는 단백다당체가 용해되지 않은 순수 생리식염수를 사용하였다.
<비교예 2>
상기 비교예 1에서 제조한 단백다당체를 이용하여 상기 실시예 5 내지 8과 동일한 방법에 따라 실시하여 종양저지율을 계산하였으며, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
| 육종암 세포수 | 종양 저지율(%) | |
| 대조구 | 1571 ±342 | 0 |
| 실시예 5 | 577 ±236 | 63.6 |
| 실시예 6 | 582 ±187 | 62.9 |
| 실시예 7 | 369 ±157 | 76.5 |
| 실시예 8 | 893 ±271 | 43.2 |
| 비교예 2 | 1113 ±366 | 29.1 |
상기 표 3에 기재된 바와 같이, 본 발명의 제조방법에 따라 제조된 단백다당체의 경우 종래의 열수추출 및 에탄올처리방법에 따라 제조된 단백다당체보다 육종암 세포의 수가 현저하게 적었으며, 또한 종양 저지율이 1.5배 내지 2.6배 이상 높음을 확인할 수 있었다. 이는 발효에 이용된 담자균 균사체의 항암효과를 나타내는 성분이 상기 단백다당체에 가미되어 항암효과의 상승작용을 일으켰고, 나아가 발효과정을 통해 상기 단백다당체의 생리활성이 증대된 것을 나타낸다.
상기 살펴본 바와 같이, 본 발명의 제조방법은 버섯으로부터 항암효과를 나타내는 단백다당체를 높은 수율로 수득할 수 있는 장점이 있다. 또한, 본 발명의 제조방법에 따라 수득된 단백다당체는 종래의 제조방법으로 제조된 단백다당체보다 우수한 항암활성을 갖기 때문에 항암치료제로 유용하게 사용될 수 있을 뿐 아니라, 암을 예방하기 위한 기능성 식품으로도 유용하게 사용될 수 있다.
Claims (12)
- 버섯 자실체를 열수추출 또는 열수추출 및 에탄올 처리하여 항암성 단백다당체를 제조하는 방법에 있어서,a) 버섯 자실체에 무기질과 유기영양소를 첨가하여 발효 혼합물을 제조하는 단계;b) 상기 발효 혼합물에 담자균 균사체 또는 효모를 접종한 후 배양하여 발효시키는 단계; 및c) 상기 배양이 완료된 버섯 발효물로부터 단백다당체를 추출하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고활성 항암성 단백다당체의 제조방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 버섯은 운지버섯(Coriolus versicolor), 상황버섯(Phelinus linteus), 차가버섯(Innonotus obliquos), 영지버섯(Ganoderma lucidum), 잎새버섯(Grifola frondosa), 참버섯(Panus rudis) 및 표고버섯(Lentinus edodes)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 버섯 자실체는 분말형태인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 발효 혼합물은 버섯 자실체 분말에 1 내지 5 중량%의 효모추출물, 펩톤 및 포도당을 첨가하여 제조된 액상 발효용 조성물인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 발효 혼합물은 버섯 자실체 분말에 3 내지 30 중량%의 톱밥, 미강(rice bran) 및 포도당을 첨가하여 제조된 고형 발효용 조성물인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 담자균 균사체는 잎새버섯(Grifola frondosa) 균사체, 표고버섯(Lentinus edodes) 균사체, 팽이버섯(Flammulina velutipes) 균사체 및 참버섯(Panus rudis) 균사체로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 효모는 사카로마이시스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 또는 사카로마이시스 칼스버겐시스(Saccharomyces calsbergensis)인것을 특징으로 하는 고활성 항암성 단백다당체의 제조방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 배양은 정치배양, 진탕배양 또는 발효조내 배양인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 배양은 20 내지 37℃에서 1 내지 15일간 행해지는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항의 방법에 의해 제조된 고활성 항암성 단백다당체.
- 제 10항의 고활성 항암성 단백다당체를 함유하는 항암용 약제 조성물.
- 제 10항의 고활성 항암성 단백다당체를 함유하는 기능성 식품.
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