JPH01228480A

JPH01228480A - 食用担子菌菌糸体培養抽出物の製造方法

Info

Publication number: JPH01228480A
Application number: JP63055292A
Authority: JP
Inventors: Toshio Sato; 利夫佐藤; Yasunori Niino; 新納　靖規; Toshio Kakegawa; 寿夫掛川; Hiroshi Ishii; 博石井
Original assignee: NIPPON HAI POTSUKUSU KK; Nippon Hypox Laboratories Inc
Current assignee: NIPPON HAI POTSUKUSU KK; Nippon Hypox Laboratories Inc
Priority date: 1988-03-09
Filing date: 1988-03-09
Publication date: 1989-09-12
Also published as: EP0413053A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［技術分野］本発明は食用担子菌菌糸体培養抽出物の製造方法に関す
る。本発明の方法により得られた食用担子菌菌糸体培養
抽出物は抗アレルギー作用を有し、医薬品、医薬部外品
、化粧品、食品等に配合して用いられ、その作用を発揮
する。

［従来技術］近年、食品を栄養面、囁好面からとらえるのみならず、
その生理活性機能を唄視した機能性食品に関する研究が
多方面で行なわれている。

今日、我々が日々口にしている食品の中から優れた生！
！ｌ！活性物質が見い出された場合、安全性が保証され
ているだけに医薬品になり得る確率はきわめて高いと考
えられる。シイタケをはじめとする担子菌類の多くは抗
腫瘍性多糖を含むことが報告されている［チハラ、蛋白
核酸酵素、２１　（６）４２５（１９７６’）　］。

一方、担子菌はその生活史において、菌糸体として生存
する時代と、これが生長又は増殖し子実体又は子大層を
形成して生存する時代とに大別されるが、カワラタケ菌
、スエヒロタケ菌等の菌糸体培養から抗腫瘍性多糖が得
られ、シイタケの子実体からは抗腫瘍付多糖レンチナン
が見いだされ、各々医薬として提供されている。またシ
イタケ菌に関してはその菌糸体１８養物が、免疫調節作
用を介して抗肝炎作用を示すことが報告されている［ミ
ゾグチ、肝胆膵１５．１２７（１９８７）］。

しかし、食用担子菌菌糸体培養物が、抗アレルギー作用
を示すことを科学的に証明した例は無い。

し発明の課題］従って本発明の目的は、食用きのこから薬用資源又は機
能性食品として利用可能な物質を得ることにある。

［課題解決のための手段］本発明者は、古来から食用に供され゛ていた、マイタケ
、コツブタケ、ムキタケ、ヒメマツタケ、アラゲキクラ
ゲ及びシロキクラゲから選択される担子菌の菌糸体を、
グルコースを構成糖に含む糖質を含有する培地を用いて
培養して得られた培養液を遠心分離又は濾別することに
より培養固形物を得、次いで該培養固形物を水及び／又
は親水性溶媒で抽出することにより得られた抽出物を、
濃縮、乾燥することにより、抗アレルギー作用を有する
食用担子菌菌糸体培養抽出物が得られることを見い出し
た。

従って本発明は、上記の培養、抽出操作を含むことを特
徴とする食用担子菌菌糸体培養抽出物の製造方法にある
。

以下、本発明の詳細な説明する。

本発明の培養抽出物の製造方法において用いられる食用
担子菌としては、マイタケ（サルノコシカケ科、マイタ
ケ属〉、コツブタケ（コツブタケ利、コツブタケ属）ム
キタケ（キシメジ科、ヒラタケ属）、ヒメマツタケ（ハ
ラタケ科、ハラタケ属）、アラゲキクラゲ（キクラゲ科
、キクラゲ属）及びシロキクラゲ（シロキクラゲ科、シ
ロキクラゲ属）が挙げられる。これら食用担子菌の各菌
糸体は、以下のように培養される。すなわち、マイタケ
、コツブタケ、ムキタケ、ヒメマツタケ、アラゲキクラ
ゲ及びシロキクラゲから選択される食用担子菌の菌糸体
を分離し、これを合成又は半合成培地を用いて培養する
。

上記の培地において、炭素源としては、グルコースを構
成糖とした糖類例えばグルコース、マルトース、トレハ
ロース、ショ糖、デンプンを用いる。又窒素源としては
、有機性窒素源例えばアミノ酸混合物であるカザミノ酸
、天然物であるトマト、タケノコ又はじゃがいも等を用
いるのが好ましい。最小基本培地例えばグルタミン酸培
地、又は窒素源としてアンモニウム塩（例えば塩化アン
モニウム等）や硝酸塩（例えば硝酸アンモニウム、硝酸
ナトリウム、硝酸カリウム等）のみを用いた場合、増殖
は極めて遅い。

更にグルコースを構成糖に含まない培地、例えばキシロ
ース、フルクトース等のみを炭素源として用いた場合、
増殖はしても抗アレルギー活性を有する培養物は得られ
ない。又、培養に関する物理的環境は一般の培養条件の
範囲であって特に制限されないが、温度は１５〜４０℃
、好ましくは２０〜ｂしいが、照光は１日１１〜１４時間程度は可能である。

さらにＩ）＋１は３．０〜８．０好ましくは３．５〜７
．０の範囲が良好である。

培養中の撹拌は、２４時間毎に数分間、往復振とう又は
回転振とうすることで十分であるが、連続振とうしても
良い。

培養期間は、物理的環境及び培地組成により一定ではな
いが、好ましくは３〜１２０日特に好ましく５〜９０日
にするのが良い。

培養後、培養液を遠心分離又は濾別処理して培養固形物
を得る。遠心分離は１００〜５．０００９、好ましくは
８００〜３，０００ｇの重力加速度を与える遠心操作に
よって行なわれる。また濾別は３．５〜２００メツシユ
、特に好ましくは４〜１６メツシユのふるい又は濾紙や
カーゼ等を用いて行なわれる。

このようにして得られた固形物を、溶媒として水及び／
又は親水性有機溶媒（メタノール、エタノール、アセト
ン、テトラヒドロフラン等）を用いて抽出処理する。こ
の抽出時の温度は、４〜１２０℃好ましくは４０〜９０
℃であり、粉砕又は切断により細分化した固形物を抽出
処理するのが好ましい。又、固形物１１吊部に対し抽出
溶媒は１〜１００重量部、好ましくは３〜２０重皐部用
いられる。抽出ｎ間は１〜４８ｖ１間好ましくは６〜２
４時間である。

このようにして得られた抽出物を、場合により先の遠心
分離又は濾別時に得られた遠心上澄液又は濾液と合体さ
せた後、濃縮する。濃縮のための手段は特に限定されな
いが、目的物の変性等を防止するために、減圧濃縮や凍
結乾燥が有利である。

上記濃縮後に得られる本発明の食用担子菌菌糸体培養抽
出物は、黄白色乃至褐色の吸湿性固形物であり、フェノ
ール硫酸法又はアントロン法により糖類を含むことが１
　Ｈされた。また脂肪酸、ステロール類を含むことも確
認された。

本発明の培養抽出物は、後掲の実施例からも明らかなよ
うに、生体内のアレルギー反応の原因の１つである、肥
満細胞からのヒスタミン遊頗反応を抑制する作用を有し
ており、かつ安全性も高いので、種々のアレルギー性疾
患例えばアトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、気管支
喘息等を予防又は治療する医薬として有用である。また
化粗品、医薬部外品、食品等に添加されて、その作用を
発揮づる。

［実施例Ｊ以下、実施例により本発明を更に説明する。

（１）食用担子菌菌糸体培養抽出物の製造例（２）　培
地の作製培養に用いられる各培地は以下のようにして作製した。

（トマト培地）トマト果肉細切片２００９を蒸留水１０゜Ｏｍｅに加え
、沸とう水浴上で１時間加熱した。

温時、固形物を濾去し、濾液にＤ−グルコース２０ｇを
加え溶解し必要に応じ１）Ｈ６，Ｏに調整した。その後
高圧蒸気殺菌（１２０”０２０分）シトマド培地とした
。

（じゃがいも培地）じゃがいもの塊茎部の皮を剥ぎ、細切りとしたもの２０
０ｇを蒸留水１０００ｄに加え、沸とう水浴上で１時間
加熱した。

以下、トマト培地の場合と同様に操作し、じゃがいも培
地とした。

（たＩＪのこ培地）たけのこの可食部を細切りとしたもの２００ｇを蒸留水
１０００ａｄ！に加え沸とう水浴上で１簡間加熱した。

以下トマト培地の場合と同様に操作し、たけのこ培地と
した。

（カザミノ酸含有合成培地）培地組成糖質”　　　　　　　　　　２０．Ｏｒ；ｉカザミノＦ
２　　　　　　　　　４．０４ｇアデニン塩酸塩　　　
　　　５．０重ｇグアニン　！　　　　　　　５．０η シトシン　〃　　　　　　　２．Ｏη チミン　　　　　　　　　　２．０ＩＲｙウラシル　　
　　　　　　　２．０■ イノシトール　　　　　　　２゜５Ｉｒｇニコチン酸ア
ミド　　　　　０．２＋１１９リボフラビン　　　　　
　　０．２〜塩酸ピリドキシン　　　　　０．１重葉酸　　　　　　　　　　　　０．　１Ｒ９ビオチン　
　　　　　　　　０．１重ｇジアノコバラミン　　　　
　０．１η Ａロチン酸　　　　　　　　０．２重ｇ塩酸チアミン　
　　　　　　０．２η リン酸２水素カリウム　　　１．０ｇ硫酸マグネシウム　　　　　０．３ｇ塩化カルシウム　　　　　　０．１ｇ塩化ナトリウム　　　　　　０．０５９＠酸亜鉛　　　
　　　　　　０．２１ＰＩ硫酸第１鉄　　　　　　　　
０．２■ ＴｉＡ酸銅　　　　　　　　　　０．１■硫酸マンガン
　　　　　　　Ｏ，ｌｑ（注＞−ｔＳ質として、グルコース、マルトース、トレ
ハロース、デンプン、キシロース及びフルクトースのうちの１種をそれぞれ用いた。

上述の組成を蒸溜水に溶＠後、ｐＨ６，０に調整し蒸留
水で１０００ａｊ！とし、高圧蒸気殺菌（１２０℃２０
分）し、カザミノ酸含有合成培地を得た。

υ　担子菌類の培養マイタケ、コツブタケ、ムキタケ、ヒメマツタケ、アラ
ゲキクラゲ及びシロキクラゲ並びにカンタケ、ツク０タ
ケ、エノキタケ、シイタケ及びヒラタケの栄養菌糸の菌
叢から菌糸体片を切り出し、上で得られた各種培地を無
菌的に分注した培養びんに接種し、暗所に２５℃で１〜
１２週間培養した。

表−１及び表−２に各担子菌の菌糸体培養に用いた培地
の種類を示す。

培養後、培養固形物をガーゼ上で濾取し、細かく切断し
、該固形物湿潤型１１ｉｕ１９に対し１０倍かの蒸留水
を加え沸とう水浴上で１１ｔＩ間加熱した。上澄液を分
取し、更に同様に抽出を繰り返し、抽出液と先のｍ液を
併わせ減圧下に全容を１７２０以下に濃縮した後、凍結
乾燥し本発明の目的物である培養抽出物を得た。

冑られた培養抽出物は黄白色乃至褐色の固体であり、粘
質、脂肪酸、ステロール類等を含有することがＴｉｖ認
された。

また各菌糸体より得た抽出物のメタノール混和上澄液に
ついて薄層クロマトグラフィーを行へった。プレートは
シリカゲル６０くメＪレク社製）、展開溶媒としてクロ
ロホルム：メタノール（９：　１　）を用いた。尚検出
にはヨード発色を用いた。　　　　−゛、゛以下にそれぞれの培養抽出物の薄層クロマトグラフィー
結果を示す。

（２）　シロキクラゲＲｆｏ、４４にスポットＲｆｏ、０６を中心にした原点からのテーリング（ハ）　アラゲキクラゲＲｆｏ、２５．０．３６．０．４２、ｏ、４６．０．５１．０．５９及び０．８４にスポットｌＨｏ、１５を中心にした原点からのテーリング（φ　ヒメマツタケＲｆｏ、５１及び０ｏ８４にスポットＲｆ０．０５を中心にした原点からのテーリング（へ）　コツブタケＲｆｏ、５１及び０．８４にスポットＲｆ０．０５を中心にした原点からのテーリング（ｅ）　　ムキタケＲｆｏ、４９及び０．８４にスポットＲｆ０．０６を中心にした原点からのテーリング〈０　マイタケＲｆｏ、５３及び０．８４にスポットＲｆ０．０６を中心にした原点からのテーリング（２）　　本発明により得られた食用担子菌菌糸体培養
抽出物の薬理試験例を用いて得られた食用担子菌菌糸体培養抽出物について
、生体内アレルギー反応のモデル実験法として抗アレル
ギー剤の検索に汎用されているラット腹腔肥満細胞から
のヒスタミン遊離反応に及ぼす作用を検討した。

即ちラット腹腔肥満細胞をロック（Ｌｏｃｋｅ　）液に
１×１０６個／ｄ程度浮遊させ、検体を最終２９／ｄｉ
になる様に混合溶解し３７℃で５分間加温した。その後
化合物４８／　８０を加え３７℃で１０分間加温した。

水冷後２５００回転／分、４℃で遠心分前し、上澄部及
び沈査部のそれぞれのヒスタミン量をＰ、Ａ、ショアー
（Ｓｈａｒｅ　）の方法［Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｔｈｅｒ、
　　１２７．１８２　（１９５９）］に従い測定しヒス
タミン＠離に対する作用を篩用した。結果は表−１に示
す。表−１より、マイタケ、コツブタケ、ムキタケ、ヒ
メマツタケ、アラゲキクラゲ及びシロキクラゲ由来のも
のは強力なヒスタミン遊離抑制作用を示した。

尚、比較のために提示したカンタケ、フクロタケ、エノ
キタケ等の菌糸体培養抽出物は全く活性を示さなかった
。

（ハ）　培地として、前記（１）食用担子菌菌糸体培養
抽出物の製造例の（功で調製したカザミノ酸含有合成培
地（糖質として、グルコース、マルトース、トレハロー
ス、デンプン、キシロース及びフルクトースから選択さ
れる１種をそれぞれ使用した）を用いて得られたシロキ
クラゲ菌糸体培養抽出物について、その１１Ｉｇ／ｄの
用早における増殖性及びヒスタミン遊離抑制作用を調べ
た。結果は表−２に示す。

表−２より、培地における糖質がいずれの場合も、ヒス
タミン遊離抑制作用は認められるが、その活性は、グル
コース、マルトース、トレハロース、デンプンにおいて
強く、キシロース、フルクトースにおいては低いことが
明らかとなった。また窒素源としてカザミノ酸の代りに
硝酸アンモニウム、硝酸カリウム、塩化アンモニウム、
ペプトンのうちの１Ｆｊを用い、グルコース、核酸、チ
アミンを所定聞合む培地で上述と同様に培養したが、６
１１１酸アンモニウム、硝酸カリウム、塩化アンモニウ
ム又はペプトンでは増殖が遅くカザミノ酸が有利である
ことが判明した。

表−１表−２（３）　　食用担子菌菌糸体培養抽出物のあ性試験本発
明の方法により得られた食用担子菌菌糸体培養抽出物に
ついてｄｄｙ系マウスへの軽口投与による急性毒性試験
を行なったところ、いずれも１ｏｇ、”＊ｙにおいても
死亡例は認められなかった。

［発明の効果］以上詳述した通り、本発明によれば、抗アレルギー作用
を有し、かつ高い安全性を有することから、アレルギー
竹疾患の治療又は予防に有効であり、かつ化粧品や食品
等に配合されてその作用を発揮する食用担子菌菌糸体培
養抽出物が提供された。

出願人　株式会社　日本ハイボックス代理人　弁理ｔ　　中　村　静　男

Claims

【特許請求の範囲】

（１）マイタケ、コツブタケ、ムキタケ、ヒメマツタケ
、アラゲキクラゲ及びシロキクラゲから選択される食用
担子菌の菌糸体を、グルコースを構成糖に含む糖質を含
有する培地を用いて培養して得られた培養液を遠心分離
又は濾別することにより培養固形物を得、次いで該培養
固形物を水及び／又は親水性溶媒溶媒で抽出することに
より得られた抽出物を、濃縮、乾燥して食用担子菌菌糸
体培養抽出物を得ることを特徴とする抗アレルギー作用
を有する食用担子菌菌糸体培養抽出物の製造方法。
（２）請求項（１）の方法により得られた、抗アレルギ
ー作用を有する食用担子菌菌糸体培養抽出物を有効成分
として含むことを特徴とする医薬、医薬部外品、化粧品
又は食品組成物。