KR20060116463A - 인삼박을 배지로 한 버섯 균사체 및 그 생산방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 인삼으로부터 엑기스를 추출한 후 폐기되는 재료인 인삼박을 배지로 한 버섯 균사체 및 그 생산방법에 관한 것이다.
상기와 같은 본 발명에 따른 버섯 균사체는, 인삼박을 배지로 하여 제조되는 것을 특징으로 한다.
이때 버섯 균사체는, 표고버섯(lentinus edodes (BERK.) Sing.)균사체, 상황버섯(Phellinus igniarius)균사체, 동충하초(Cordyceps poludosa)균사체 및 영지(Ganoderma lucidum)균사체 중의 어느 하나인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 버섯 균사체의 생산방법은, 인삼박을 pH5.0~pH6.0 범위의 물에 침지시켜 수분이 50~55%가 되도록 한 후 멸균하는 단계; 멸균된 상기 인삼박배지에 균사체 원균을 준비하는 단계; 상기 인삼박배지에 원균을 접종하여 균사체를 제조하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 한다.
이때 버섯 균사체는, 표고버섯(lentinus edodes (BERK.) Sing.)균사체, 상황버섯(Phellinus igniarius)균사체, 동충하초(Cordyceps poludosa)균사체 및 영지(Ganoderma lucidum)균사체 중의 어느 하나이며, pH는 5.0~6.0으로 하여, 표고버섯(lentinus edodes (BERK.) Sing.)균사체, 상황버섯(Phellinus igniarius)균사체, 영지버섯(Ganoderma lucidum)균사체 균종은 25~27℃에서, 그리고 동충하초(Cordyceps poludosa)균사체는 35~38℃에서, 각각 배양하는 것을 특징으로 한다.
mycelia extracts, ginseng residue, Hep3B cell(간암세포주), HeLa cell(자궁경부암세포주), sarcoma-180(고형암세포주)
Description
본 발명은 인삼으로부터 엑기스를 추출한 후 폐기되는 재료인 인삼박을 배지로 한 버섯 균사체 및 그 생산방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 인삼박에 상황버섯(Phellinus linteus), 영지버섯(Ganoderma lucidum), 운지버섯(Coriolus versicolor), 표고버섯(Lentinus edodes)의 균사체 종균을 접종하여 인삼박을 균사체의 배지로 사용함으로써 획득되는, 항산화·항암효과를 가지는 한방 균사체 및 그 생산방법에 관한 것이다.
인삼(Panax ginseng C.A. Meyer)은 우리나라의 대표적인 생약재로서, 예로부터 약용 및 건강음료로 널리 이용되어 왔으며, 최근에는 인삼의 다양한 효능과 천연물을 선호하는 추세에 따라 그 수요가 더욱 증가하고 있다. 인삼은 탄수화물, 아미노산, 지방산, 무기질 등의 영양소와, 인삼의 주된 약리 작용 성분인 인삼사포닌을 비롯하여 항암성분으로 주목되고 있는 폴리아세틸렌 성분, 노화억제 및 항피로 효과가 보고된 페놀계 성분 등을 함유하고 있다. 인삼의 주요 효능은 간 보호와 해독, 항피로, 면역증진, 항암 및 항산화작용 등이 있으며, 인삼의 이용 형태도 다양하여 홍삼과 백삼으로 1차 가공·제조되고 이를 원료로 드링크, 캡슐, 분말, 차, 넥타 등의 2차 가공식품이 만들어진다.
이러한 인삼으로부터 인삼추출물을 제조하고 부산물로 생성된 인삼잔사를 인삼박이라 하는데, 이는 산업적으로 대부분 폐기하고 있는 실정이다.
한편 기능성 식품 및 의약품 소재로 크게 주목받고 있는 버섯은 기호성이 높을 뿐 아니라 심장병, 고지혈증, 뇌졸중 등의 성인병에 대한 예방과 항암효과 및 면역증강에 효과가 있는 것으로 보고되고 있다. 또한 버섯 균사체도 항암작용, 면역증강효과, 항산화효과, 혈중 콜레스테롤 저하작용 등이 있는 것으로 알려져 있다. 균사체의 polysaccharide - peptide 성분은 면역세포 중 암세포와 최전선에서 싸우는 NK 세포를 활성화시켜 암세포를 파괴하는 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 담자균에서 추출한 다당류의 항암효과에 관한 연구로는 Tsukagoshi 등이 C. versicolor의 자실체로부터 추출한 단백다당류(PS-K)가 S-180에 대한 항암효과가 있음을 밝혔으며, Chihara 등이 Lentinus edoses의 자실체로부터 항암성 다당류를 추출하여 heteropolysaccharide라는 것을 밝히고, 항암능이 매우 뛰어난 중성다당류인 β-(1→3)-D-glucan을 분리하여 구조를 밝혔다. 또한 Lentinus edoses의 자실체로부터 분리된 단백다당류가 sarcoma-180에 대해서 억제효과가 뛰어났다고 보고하였다. 이상과 같이 고등균류의 자실체나 균사배양물에서 수종의 다당류 또는 단백다당류가 우수한 항암효과를 나타내는 것으로 확인되었다. 따라서 다양한 소재로 부터 회수한 polysacharideprotein을 면역증강제 혹은 항암보조제로 실용화할 필요성이 있으며, 그럴 경우 건강식품, 의약품, 의약품보조제로써의 이용성이 높을 것으로 기대된다. 그러나 버섯 균사체가 우리 식생활에 응용되는 정도는 매우 미흡한 편이다.
본 발명은 위와 같은 상황에서 인삼박을 이용한, 기능성이 강화된 균사체 및 그 제조방법을 제공하고자 한다. 종래에는 밀기울, 톱밥, 등의 일반배지를 이용하여 균사체를 생산해 왔는바, 본 발명에서는 균사체 본래의 기능성에 충분한 섬유소와 사포닌잔사를 함유한 인삼박을 응용함으로써 자원의 재활용도를 높이고 균사체의 효능 극대화 및 적용 다양화를 꾀하고자 한다.
위에서 기술한 내용에 의해 나타나듯이, 본 발명의 목적은 인삼박을 이용한, 기능성이 강화된 균사체 및 그 생산방법을 제공함으로써, 인삼엑기스를 짜고 남은 부산물인 인삼박의 활용도를 높이고 다양한 분야에 응용 가능한 고기능성 식품 소재를 제공하는 것이다.
이를 위해 본 발명에서는 인삼으로부터 인삼추출물을 제조하고 부산물로 생성되는 인삼박에 조건을 달리하며 상황버섯(Phellinus linteus), 영지버섯(Ganoderma lucidum), 운지버섯(Coriolus versicolor), 표고버섯(Lentinus edodes)의 균사체를 접종·배양하여 인삼박 균사체 배양의 최적 조건을 확립하였고, 인삼 박 균사체의 기능성 평가를 위해 전자공여능을 측정하였으며, 인삼박 균사체의 항암작용을 관찰하기 위해 Hep3B cell(간암세포주)과 HeLa cell(자궁경부암 세포주) 및 S-180(고형암 세포주)고형암에 대한 억제 효과를 측정하였다. 그 결과 본 발명자들은 인삼박을 배지로 이용해서 생산한 균사체가 항산화효과, Hep3B cell(간암세포주)항암효과, HeLa cell(자궁경부암 세포주)항암효과 및S-180 고형암세포에 대한 항암효과가 있음을 밝힘으로써, 자원의 재활용성을 제고하고 그 산물을 고기능성 식품소재 생산자원으로 이용할 수 있도록 하는 본 발명을 완성하였다.
상기한 목적을 달성하기 위한 본 발명에 따른 버섯 균사체는, 인삼박을 배지로 하여 제조되는 것을 특징으로 한다.
이때 버섯 균사체는, 표고버섯(lentinus edodes (BERK.) Sing.)균사체, 상황버섯(Phellinus igniarius)균사체, 동충하초(Cordyceps poludosa)균사체 및 영지(Ganoderma lucidum)균사체 중의 어느 하나인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 버섯 균사체의 생산방법은, 인삼박을 pH5.0~pH6.0 범위의 물에 침지시켜 수분이 50~55%가 되도록 한 후 멸균하는 단계; 멸균된 상기 인삼박배지에 균사체 원균을 준비하는 단계; 상기 인삼박배지에 원균을 접종하여 균사체를 제조하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 한다.
이때 버섯 균사체는, 표고버섯(lentinus edodes (BERK.) Sing.)균사체, 상황버섯(Phellinus igniarius)균사체, 동충하초(Cordyceps poludosa)균사체 및 영지 (Ganoderma lucidum)균사체 중의 어느 하나이며, pH는 5.0~6.0으로 하여, 표고버섯(lentinus edodes (BERK.) Sing.)균사체, 상황버섯(Phellinus igniarius)균사체, 영지버섯(Ganoderma lucidum)균사체 균종은 25~27℃에서, 그리고 동충하초(Cordyceps poludosa)균사체는 35~38℃에서, 각각 배양하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따라 균사체를 생산할 때 인삼엑기스를 짜고 남은 부산물인 인삼박을 균사체 생산배지로 사용하여 균사체를 제조할 수 있다.
구체적으로 본 발명에 따른 인삼박소재를 이용한 균사체의 제조방법은, 1) 인삼박 배지를 준비하는 단계; 2) 원균을 준비하는 단계; 3) 원균을 접종하여 인삼균사체를 제조하는 단계로 이루어진다.
먼저 인삼박 배지를 준비하는 단계(단계 1)를 보면, 통상적으로 사용되는 배지는 밀기울, 톱밥 등이나, 본 발명에서는 인삼박 속에 잔존하는 사포닌과 섬유소를 활용하기 위해 인삼박을 사용하는바, 인삼박을 pH5.0~pH6.0 범위의 물에 2시간 동안 침지 수분이 50~55%가 되도록 한 후 용기에 입병해서 121℃ 1.2기압, 15분 동안 쪄서 잡균을 멸균한다. 그 후 30℃ 이하로 식힌 다음 종균을 접종한다.
다음으로 멸균된 한방소재에 균사체 원균을 준비하는 단계(단계 2)가 이어진다. 본 발명에 사용한 원균은 표고버섯(lentinus edodes (BERK.) Sing.)균사체, 상황버섯(Phellinus igniarius)균사체, 동충하초(Cordyceps poludosa)균사체, 영지(Ganoderma lucidum)균사체이다. 실험시에는 이를 종균소에서 분양받아 사용했다. 다만 분양종균은 균력이 약하기 때문에 YM배지 혹은 MS배지에 계대배양하여 균력을 키운 다음 고체배지 혹은 액체배지에 이식하여 배양했다.
마지막으로 상기 인삼박배지에 원균을 접종하여 균사체를 제조하는 단계(단계 3)인데, 인삼박을 이용한 균사체 생산을 위한 배양은 균주의 생장온도, 즉 표고버섯(lentinus edodes (BERK.) Sing.)균사체, 상황버섯(Phellinus igniarius)균사체, 영지버섯(Ganoderma lucidum)균사체 균종은 25~27℃에서, 그리고 동충하초(Cordyceps poludosa)균사체는 35~38℃에서, pH는 5.0~6.0으로 조절해서 배양했다. 배양시 인삼박의 전체 함량도 필요에 따라 인삼박배지를 중량비1~100%함량의 혼합물을 배지로 하고 배양병에 입병 후 멸균한 다음 균사체 균주접종 후 배양온도, pH는 액체배양 조건과 동일하다. 배양기간은 2주의 기간이 소요된다.
이하, 본 발명을 실시예를 통해 상세히 설명한다.
Ⅰ. 실험재료
본 실험에 사용된 인삼박은 풍기우경인삼이 제공한 말린 인삼박을 사용하였으며 상황버섯(Phellinus linteus), 영지버섯(Ganoderma lucidum), 운지버섯(Coriolus versicolor), 표고버섯(Lentinus edodes)의 균사체는 한국농용미생물 보존센터(KACC)에서 분양받아 사용했다.
Ⅱ. 실험방법
1. 인삼박 균사체 배양 생산
인삼박은 10분 침지한 후 10분 단위로 60분까지 자동수분측정기로 수분을 측정하여 침수시간에 따른 수분함량 최적화 조건을 확립하였다. 이것을 멸균기에 121℃에서 20분간 멸균한 후 상황, 영지, 운지, 표고 균사체를 clean bench 안에서 접종하여 22~24℃에서 25~30일간 배양하여 생육상태를 관찰하였다. 최적상태의 균사체를 60℃에서 건조 후 분말화하여 물과 60% 에탄올로 추출한 후 동결 건조하여 전자공여능 측정과 간암세포주(Hep3B cell), 자궁경부암 세포주(HeLa cell)에 대한 증식 억제 실험에 사용하였고, S-180 고형암 실험에는 건조된 각 인삼박 균사체에 10배 수를 가하여 80℃에서 2시간 추출한 후 이를 2배 희석하여 마우스에 공급하였다.
2. 전자공여능 측정
인삼박 균사체의 전자공여능은 Blois의 방법에 따라 각 시료의 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl(DPPH)에 대한 전자공여 효과로서 시료의 환원력을 측정하였다. 즉 소정 농도의 시료에 0.4mM DPPH 용액 1.6mL를 가하고, 10초간 vortex mixing 후 37℃에서 30분간 반응시킨 다음 이 반응액을 분광광도계를 사용하여 517nm에서 흡광도를 측정하였다.
3. 암세포 증식 억제능 실험
(1) 세포주
본 실험에서 사용한 세포주는 간암 세포주인 Hep3B(KCLB 58064) cell과 자궁경부암 세포주인 HeLa(KCLB 10002) cell로서, 한국세포주은행에서 분양받아 사용하였다.
(2) 세포배지
Hep3B cell 배양에 사용한 DMEM(high glucose)배지는 1L당 DEME 1pack, sodium bicarbonate(sigma, U.S.A) 3.7g을 첨가하여 pH 7.2~7.4로 맞춘 후 pore size가 0.2㎛인 filter를 이용하여 제균 시킨 후 10X antibicotic-antimycotic(Gibco)을 1%, FBS(fetal bovine serum, promega, USA) 10%를 첨가하여 사용하였다. HeLa cell 배양에는 RPMI 1640 배지가 사용되었다.
(3) 암세포 증식 억제능 실험
Hep3B cell과 HeLa cell은 5×105cells를 cell culture plate (NUNC, 60φ)에 항온기(37℃, 5% CO2)에서 24시간 배양한 후 각 시료 추출물을 최종 농도가 1000, 2500, 5000ppm이 되도록 첨가하여 24시간 동안 다시 배양시켰다. 배양된 세 포는 광학현미경(NICON TMS, Japan) 100X로 관찰하고, 0.4% trypan blue assay로 세포 증식 억제율을 계산하였다.
4. S-180 고형암 실험
(1) 실험동물
본 실험에 사용한 동물은 4주령의 ICR 마우스를 국립보건원 안전 연구원으로부터 분양 받아 항온항습 및 공기청정시스템(HC-ES-02, 효창사이언스)에서 일정한 조건(온도: 22±2℃, 습도: 55±5%, 명암: 12시간 light/dark cycle)으로 사육하였다. 일반사료로 2주 이상 적응시킨 후 고형암을 유발하기 위한 숙주로 사용하였다.
(2) 암세포
세포주는 S-180(KCLB 10008)을 한국세포주은행으로부터 분양 받아 8~12주령된 ICR 마우스의 복강에서 계대 배양하였다. 복수암에 걸린 마우스의 복강 속으로 일회용 1mL 주사기로 찔러 노란색의 복수액 1mL를 채취한 후, 그 원액을 0.1mL씩 ICR 마우스의 복강 속에 접종하고 배양하면서 13일마다 계대배양 하였다.
(3) S-180 고형암 성장저지 실험
조의 방법(21)을 변형하여 ICR 마우스의 복강에 in vivo 계대 중인 S-180 세포를 멸균된 주사기로 채취하고 MEME 배지로 희석하여 S-180 세포의 농도가 4× 107cells/mL가 되게 하였다. 이와 같이 희석한 S-180 세포액을 50㎕(2×106cells)씩 ICR 마우스(♂, 6주령, 28±2 g)의 우측 서혜부에 피하 이식한 후 4종류의 실험시료 즉 인삼박에서 배양된 상황, 영지, 운지, 표고 균사체 추출액을 자유로이 섭취시켰다. 종양세포 이식 29일째 되는 날 치사시켜 생성된 고형암을 적출하고 그 무게를 측정한 후 종양성장저지 백분율(tumor growth inhibition ratio, I.R. : %)을 계산하였다.
5. 통계학적 분석
모든 실험결과는 mean±S.E.로 나타내었고, 각 그룹간의 측정치에 대한 자료분석은 SPSS 통계 프로그램(22)을 이용하여 p<0.05 수준에서 유의성을 판정하였다.
Ⅲ. 실험결과 및 고찰
1. 인삼박을 이용한 균사체 배양 최적 조건
본 실험에 사용한 균사체[상황버섯(Phellinus linteus), 영지버섯(Ganoderma lucidum), 운지버섯(Coriolus versicolor), 표고버섯(Lentinus edodes)]는 YMA(1 L 당 yeast extract 3 g, malt extract 3 g, pepton 10 g, agar 20 g)배지에 계대배 양하여 균력을 키운 다음 인삼박에 접종하였다.
인삼박을 이용한 균사체의 배양은 균사체의 pH, 수분량 등의 다양한 요인으로 최적조건을 조사하였다. 풍기우경인삼에서 공급받은 인삼박을 10분 동안 침지한 후 시간별로 탈수하여 멸균기(120℃, 20분, 15 Lbs)에서 멸균하였다.
인삼박을 이용한 균사체 생산을 위한 인삼박의 수분함량 실험에서는 각각 40%, 50%, 55%, 60%로 수분함량을 달리하여 실험한 결과, 40%의 수분함량에서는 약 4주 정도의 생육기간 중에 정상적인 생육을 못하고 말라서 생육이 중지되었다. 50%와 55%의 수분함량에서는 비교적 양호한 생육상태를 나타내었으며, 60%에서는 다소 높은 수분함량으로 3주 이후부터 배양병의 끝부분이 물러져서 생육이 중지되었다. 인삼박을 이용한 균사체 접종에서 생육조건에 적합한 50%~55% 사이의 수분함량을 유지하기 위한 적합한 침지시간은 10분, 탈수 시간은 대략 1시간 정도인 것으로 나타났다. 또한 실험 결과 pH는 5.0~6.0이 생육에 적합한 것으로 나타났다.
2. 전자공여능 측정
Fig. 1은 인삼박 균사체의 전자공여능을 나타낸 것이다.
전자공여능은 산화성 활성 radical에 전자를 공여하여 산화를 억제키는 것으로서 항산화 효과의 척도로 이용된다. 500~10000 ppm 까지 농도가 진할수록 전자공여능이 높게 나타났고, 10000 ppm에서 상황은 92.25%, 영지는 85.08%, 운지는 96.89%, 표고는 74.53% 로 나타났다.
정 등은 느타리버섯 균사체 추출물의 에탄올 분획이 항산화성이 높았다고 보고하였으나 균사체의 항산화성에 관한 연구 보고는 많지 않은 실정이다. 이들 버섯 균사체의 DPPH에 대한 free radical 소거작용은 free radical에 전자를 공여하여 free radical 봉쇄에 의하여 항산화작용을 나타낸 것으로 사료된다.
Fig. 1. Electron donating activity of extract from mushroom mycelia - cultured ginseng by-product
A:Phellinus linteus, B:Ganoderma lucidum, C:Coriolus versicolor, D:Lentinus edodes.
3. 인삼박 균사체가 간암 세포(Hep3B cell)에 미치는 영향
(1) Hep3B cell의 형태변화
Fig. 2 ~ Fig. 5(각 그림에 실린 다섯 개의 사진은 왼쪽부터 시계방향으로 A, B, C, D, E로 지칭됨)는 인삼박 균사체를 물과 60% 에탄올로 추출한 후 Hep3B cell에 처리했을 때 세포 모양의 변화를 관찰한 것이다.
상황(Fig. 2)의 경우 에탄올 추출물에서 Hep3B cell 모양이 심하게 변화된 것이 관찰되었다. 영지(Fig. 3)는 물과 에탄올 추출물 각각 2500 ppm에서 미미한 형태변화를 관찰 할 수 있었고, 5000 ppm에서는 심한 형태변화를 볼 수 있었다. 운지(Fig. 4)는 에탄올 추출물 2500 ppm과 5000 ppm에서 Hep3B cell의 형태 변화가 뚜렷하게 나타났는데 특히 5000 ppm에서는 형태 변형이 심한 것을 볼 수 있었다. 그에 비해 물 추출물에서는 대조군과 비교했을 때 2500 ppm에서는 형태의 확연한 차이는 관찰되지 않았고 5000 ppm에서 약간의 형태변화를 관찰할 수 있었다. 표고(Fig. 5)는 물 추출물 2500 ppm, 5000 ppm에서 모두 특이한 세포형태 변화는 관찰되지 않았으나 에탄올 추출물에서는 두 농도 모두 심한 형태 변화가 있었다.
대체적으로 4종류의 버섯 균사체 모두 에탄올 추출물이 물 추출물보다 Hep3B 세포의 형태변화에 더 많은 영향을 준 것으로 보인다.
Fig. 2. A photograph of the Hep3B cells with extract from
Phellinus linteus
mycelia-cultured ginseng By-product.
A : Control
B : 60% ethanol extract 2500ppm
C : 60% ethanol extract 5000ppm
D : Water extract 2500ppm
E : Water extract 5000ppm
Fig. 3. A photograph of the Hep3B cells with extract from
Ganoderma lucidum
mycelia-cultured ginseng By-product
.
A : Control
B : 60% ethanol extract 2500ppm
C : 60% ethanol extract 5000ppm
D : Water extract 2500ppm
E : Water extract 5000ppm
Fig. 4. A photograph of the Hep3B cells with extract from
Coriolus versicolor
mycelia-cultured ginseng By-product
.
A : Control
B : 60% ethanol extract 2500ppm
C : 60% ethanol extract 5000ppm
D : Water extract 2500ppm
E : Water extract 5000ppm
Fig. 5. A photograph of the Hep3B cells with extract from
Lentinus edodes
mycelia-cultured ginseng By-product
A : Control
B : 60% ethanol extract 2500ppm
C : 60% ethanol extract 5000ppm
D : Water extract 2500ppm
E : Water extract 5000ppm
(2) 인삼박 균사체가 Hep3B cell 증식에 미치는 영향
Fig. 6~Fig. 9는 Hep3B cell에 각 인삼박 균사체의 물과 60% 에탄올 추출물을 처리하여 24시간 배양한 후 암세포 증식 억제율을 나타낸 것이다.
상황의 경우(Fig. 6) 물 추출물 2500 ppm에서는 13.61%, 5000 ppm에서 16.09%의 매우 낮은 억제율을 나타냈으며 60% 에탄올 추출물 2500 ppm에서는 10.78%, 5000 ppm에서 14.72%로서 Hep3B cell 증식 억제능이 미미하였으며 농도에 따른 차이도 거의 나타나지 않았다. 영지의 경우(Fig. 7) 물 추출물에서는 2500 ppm에서 50%, 5000 ppm에서 72.82%로 상황, 운지, 표고 물 추출물에 비해 Hep3B cell 증식 억제율이 가장 높게 나타났으며 농도가 높을수록 그 억제효과가 컸다. 60% 에탄올 추출물 2500 ppm에서는 21.9%, 5000 ppm에서는 82.77%로서 상황과 운지에 비해 높은 세포증식 억제 효과를 나타내었다. 운지(Fig. 8)는 물 추출물 2500 ppm에서 9.91%, 5000 ppm에서 8.39%, 60% 에탄올 추출물 2500 ppm에서는 22.53%, 5000 ppm에서는 41.73%로서 낮은 암세포 억제율을 보였다. 표고(Fig. 9)는 물 추출물 2500 ppm에서 19.43%, 5000 ppm에서 18.3%로 낮은 암세포 억제율이 나타났으나 60% 에탄올 추출물 2500 ppm은 31.79%, 5000 ppm은 99.09%로 강한 세포증식 억제 효과를 확인할 수 있었으며 5000 ppm으로 처리하였을 때 에탄올 추출물이 물 추출물에 비하여 세포증식 억제 효과가 80.79% 더 높았다.
Fig. 6. Growth inhibition ratio of
Phellinus linteus
mycelium ethanol and water extracts from processed ginseng by-product on Hep3B cell.
A: Control, B: 60% ethanol extract 2500ppm, C: 60% ethanol extract 5000ppm,
D: Water extract 2500ppm, E: Water extract 5000ppm.
Fig. 7. Growth inhibition ratio of
Ganoderma lucidum
mycelium ethanol and water extracts from processed ginseng by-product on Hep3B cell.
A: Control, B: 60% ethanol extract 2500ppm, C: 60% ethanol extract 5000ppm,
D: Water extract 2500ppm, E: Water extract 5000ppm.
Fig. 8. Growth inhibition ratio of
Coriolus versicolor
mycelium ethanol and water extracts from processed ginseng by-product on Hep3B cell.
A: Control, B: 60% ethanol extract 2500ppm, C: 60% ethanol extract 5000ppm,
D: Water extract 2500ppm, E: Water extract 5000ppm.
Fig. 9. Growth inhibition ratio of
Lentinus edodes
mycelium ethanol and water extracts from processed ginseng by-product on Hep3B cell.
A: Control, B: 60% ethanol extract 2500ppm, C: 60% ethanol extract 5000ppm,
D: Water extract 2500ppm, E: Water extract 5000ppm.
이상의 결과는 영지버섯이 암세포 억제효과가 있다는 김 등의 보고와 유사하나 운지버섯이 항암작용이 있다는 이 등의 보고와는 상이하게 운지는 낮은 암세포 억제율을 나타내었다. 또한 표고의 암세포 증식 억제 효과는 표고버섯의 열수가용성 다당류가 암세포 증식 억제 효과가 있었다는 최 등의 보고가 있으나 본 실험에서는 물 추출물보다 에탄올 추출물에서 암세포 증식 억제 효과가 더 컸다. 균사체 추출물의 농도에 따른 간암세포의 증식 억제 효과는 표고버섯이 간암세포인 H22에 대해 항암효능이 있으며 버섯첨가량이 증가할수록 암세포 억제율이 증가하였다는 박 등의 보고에서와 같이 균사체 추출물의 농도가 증가할수록 Hep3B cell의 증식 억제 효과가 컸다.
4. 인삼박 균사체가 자궁경부암 세포(HeLa cell)에 미치는 영향
(1) HeLa cell의 형태변화
Fig. 10 ~ Fig. 13(각 그림에 실린 다섯 개의 사진은 왼쪽부터 시계방향으로 A, B, C, D, E로 지칭됨)은 인삼박 균사체를 물과 60% 에탄올로 추출한 후 HeLa cell에 처리했을 때 세포 모양을 관찰한 것이다.
상황(Fig.10)은 물 추출물보다 에탄올 추출물에서 농도 의존적으로 모양이 심하게 변형된 것이 관찰되었다. 영지(Fig. 11)는 물과 에탄올 추출물 모두 농도가 증가할수록 형태 변화가 심하였고 에탄올 추출물 처리 시 형태 변화가 더욱 뚜렷함이 관찰되었다. 운지(Fig. 12)는 에탄올 추출물에서 농도가 높을수록 형태변화가 심했으나 물 추출물에서는 미미한 세포수 감소와 세포 형태변화를 볼 수 있었다. 표고(Fig. 13)는 모든 처리군에서 특이한 세포형태 변화를 볼 수 있었으며 세포가 파괴되어 배양액 상층부로 떠오르는 것을 볼 수 있었고, 특히 에탄올 처리군에서 농도 의존적으로 뚜렷한 변화를 나타내었다.
대체적으로 4종류의 버섯 균사체 모두 에탄올 추출물이 물 추출물보다 자궁경부암세포인 HeLa cell의 형태변화에 더 많은 영향을 준 것으로 보이며 특히 영 지, 표고의 에탄올 처리군에서 확연한 형태변화를 볼 수 있었다.
Fig. 10. A photograph of the HeLa cells with extract from
Phellinus linteus
mycelia-cultured ginseng by-product.
A : Control
B : 60% ethanol extract 2500ppm
C : 60% ethanol extract 5000ppm
D : Water extract 2500ppm
E : Water extract 5000ppm
Fig. 11. A photograph of the HeLa cells with extract from
Ganoderma lucidum
mycelia-cultured ginseng by-product
.
A : Control
B : 60% ethanol extract 2500ppm
C : 60% ethanol extract 5000ppm
D : Water extract 2500ppm
E : Water extract 5000ppm
Fig. 12. A photograph of the HeLa cells with extract from
Ganoderma lucidum
mycelia-cultured ginseng by-product
.
A : Control
B : 60% ethanol extract 2500ppm
C : 60% ethanol extract 5000ppm
D : Water extract 2500ppm
E : Water extract 5000ppm
Fig. 13. A photograph of the HeLa cells with extract from
Coriolus versicolor
mycelia-cultured ginseng by-product
.
A : Control
B : 60% ethanol extract 2500ppm
C : 60% ethanol extract 5000ppm
D : Water extract 2500ppm
E : Water extract 5000ppm
(2) 인삼박 균사체가 HeLa cell 증식에 미치는 영향
Fig. 14 ~ Fig. 17는 HeLa cell에 각 인삼박 균사체의 물과 60% 에탄올 추출물을 처리하여 24시간 배양한 후 암세포 증식 억제율을 나타낸 것이다.
상황의 경우(Fig. 14) 물 추출물 2500 ppm, 5000 ppm에서 각각 5.93%, 5.25%로 증식 억제효과가 거의 나타나지 않았고 에탄올 추출물 2500 ppm에서 5.9%, 5000 ppm에서는 38.84%로 나타났다. 영지의 경우(Fig. 15) 물 추출물 2500 ppm에서 6.78%, 5000 ppm에서 9.55%로 HeLa cell 억제 효과가 거의 나타나지 않았으며 에탄올 추출물 2500 ppm에서는 14.56%, 5000 ppm에서는 41.56%로 물 추출물 군에서 보다 증식 억제율이 높게 나타났다. 운지(Fig. 16)는 물 추출물 2500 ppm에서 5.35%, 5000 ppm에서 7.29%, 60% 에탄올 추출물 2500 ppm에서는 5.08%, 5000 ppm에서는 10.75%로서 모든 군에서 미미한 암세포 억제율을 보였다. 표고(Fig. 17)는 물 추출물 2500 ppm에서 7.39%, 5000 ppm에서 5.51%, 60% 에탄올 추출물 2500 ppm은 6.91%로 낮은 암세포 억제율이 나타났으나 에탄올 추출물 5000 ppm에서는 86.7%의 강한 세포증식 억제 효과를 확인할 수 있었다.
양 등(30)은 띠미로 버섯의 열수 추출물을 HeLa cell에 투여한 결과 70%의 항암효과를 볼 수 있었으며 Hep G2에 대해서는 40% 정도의 항암효과를 관찰하였고, methanol 추출물의 경우 HeLa cell에 대해 60%의 성장억제 효과가 있다고 보고하였다. 또한 황과 손(31)은 인삼 및 다른 생약재들의 항암효과를 보고한 바 있는데 이들의 수용성 추출물보다 석유에테르 추출물이 더 효과적이라고 하였다. 본 실험에서 4종류의 균사체 중 표고버섯이 암세포 억제율이 가장 컸으며 물 추출물에 비해 에탄올 추출물에서 강한 HeLa cell 억제능을 관찰할 수 있었다.
Fig. 14. Growth inhibition ratio of
Phellinus linteus
mycelium ethanol and water extracts from processed ginseng by-product on HeLa cell.
A: Control, B: 60% ethanol extract 2500ppm, C: 60% ethanol extract 5000ppm,
D: Water extract 2500ppm, E: Water extract 5000ppm.
Fig. 15. Growth inhibition ratio of
Ganoderma lucidum
mycelium ethanol and water extracts from processed ginseng by-product on HeLa cell.
A: Control, B: 60% ethanol extract 2500ppm, C: 60% ethanol extract 5000ppm,
D: Water extract 2500ppm, E: Water extract 5000ppm.
Fig. 16. Growth inhibition ratio of
Coriolus versicolor
mycelium ethanol and water extracts from processed ginseng by-product on HeLa cell.
A: Control, B: 60% ethanol extract 2500ppm, C: 60% ethanol extract 5000ppm,
D: Water extract 2500ppm, E: Water extract 5000ppm.
Fig. 17. Growth inhibition ratio of
Lentinus edodes
mycelium ethanol and water extracts from processed ginseng by-product on HeLa cell.
A: Control, B: 60% ethanol extract 2500ppm, C: 60% ethanol extract 5000ppm,
D: Water extract 2500ppm, E: Water extract 5000ppm.
5. S-180 고형암 억제효과
S-180 세포를 ICR 마우스의 우측 서혜부 피하에 접종한 후 29일째에 마우스로부터 적출한 고형암괴의 무게는 Table 1과 같다.
대조군에 비해 인삼박 균사체의 고형암 억제효과는 운지가 64.83%로 가장 컸으며 상황 59.32%, 영지 61.44%, 표고 56.35%의 고형암 억제효과를 나타내었다.
S-180 세포에 대한 표고버섯의 종양억제 효과는 표고버섯의 자실체내 lentinan에 의한다는 보고가 있으나 본 실험에서는 표고가 나머지 버섯 균사체에 비해 가장 낮은 고형암 억제효과를 나타내었다. 또한 S-180 세포에 대한 상황, 영지 및 운지의 항종양 효과가 보고된 바 있으며 많은 담자균류의 균사체는 항암효과 및 면역활성 증강 효과가 있는 것으로 보고되고 있다.
Ⅳ. 결론
인삼박을 이용한 균사체의 기능성 평가 및 항암효과 실험에서 다음과 같은 결과를 얻었다.
1. 인삼박 균사체의 전자공여능은 500~10000ppm까지 농도가 높을수록 전자공여능이 높게 나타났으며 10000ppm에서는 운지 96.89%, 상황 92.25%, 영지 85.08%, 표고 74.53%로 높은 값을 나타내었다.
2. 간암세포의 형태변화는 대체적으로 물 추출물보다 에탄올 추출물에서 심하게 나타난 것을 확인할 수 있었다. 특히 표고는 물 추출물에서는 특이한 세포형태 변화가 관찰되지 않았으나 에탄올 추출물에서는 2500ppm과 5000ppm 모두 심한 형태 변화가 있었다.
3. 간암세포에 대한 억제율은 상황의 경우 물 추출물과 60% 에탄올 추출물 모두에서 세포증식 억제능이 미미하였으며 운지, 영지, 표고는 물 추출물에 비해 60% 에탄올 추출물에서 세포증식 억제능이 더욱 강한 것으로 나타났다. 또한 60% 에탄올 추출물을 처리한 결과는 표고의 경우 5000ppm에서 99.09%로 강한 세포증식 억제 효과를 확인할 수 있었으며 농도가 높을수록 그 억제 효과가 컸다.
4. 자궁경부암 세포의 형태변화는 4종류의 버섯 균사체 모두 에탄올 추출물이 물 추출물보다 자궁경부암 세포의 형태변화에 더 많은 영향을 주었으며, 특히 영지, 표고 균사체 처리시 확연한 형태변화를 볼 수 있었다.
5. 자궁경부암 세포에 대한 증식 억제율은 상황, 영지, 운지 모두 미미하였으며 표고는 60% 에탄올 추출물을 처리한 결과 5000ppm에서 86.7%의 높은 억제율을 나타내었다.
6. S-180 고형암 억제효과는 대조군에 비해 운지가 64.83%로 가장 컸으며 영 지 61.44%, 표고 56.35%, 상황 59.32%의 고형암 억제효과를 나타내었다.
상기한 구성의 본 발명에 따르면, 이러한 인삼으로부터 인삼추출물을 제조하고 부산물로 생성되어 대부분 폐기되고 있는 인삼박을 유용하게 활용하여 재활용도를 높일 수 있다.
또한 그와 같이 함으로써 버섯 균사체의 기능을 더욱 강화하여 응용함으로써 균사체의 효능 극대화 및 적용 다양화를 꾀하고자 한다. 특히 본 발명에 따른 버섯 균사체는 다양한 분야에 응용 가능한 고기능성 식품 소재를 제공로 활용될 수 있을 것이다.
Claims (4)
- 인삼박을 배지로 하여 제조되는 것을 특징으로 하는,인삼박을 배지로 한 버섯 균사체.
- 제1항에 있어서,버섯 균사체는, 표고버섯(lentinus edodes (BERK.) Sing.)균사체, 상황버섯(Phellinus igniarius)균사체, 동충하초(Cordyceps poludosa)균사체 및 영지(Ganoderma lucidum)균사체 중의 어느 하나인 것을 특징으로 하는,인삼박을 배지로 한 버섯 균사체.
- 인삼박을 pH5.0~pH6.0 범위의 물에 침지시켜 수분이 50~55%가 되도록 한 후 멸균하는 단계;멸균된 상기 인삼박배지에 균사체 원균을 준비하는 단계;상기 인삼박배지에 원균을 접종하여 균사체를 제조하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는,인삼박을 배지로 한 버섯 균사체의 생산방법.
- 제3항에 있어서,버섯 균사체는, 표고버섯(lentinus edodes (BERK.) Sing.)균사체, 상황버섯(Phellinus igniarius)균사체, 동충하초(Cordyceps poludosa)균사체 및 영지(Ganoderma lucidum)균사체 중의 어느 하나이며,pH는 5.0~6.0으로 하여, 표고버섯(lentinus edodes (BERK.) Sing.)균사체, 상황버섯(Phellinus igniarius)균사체, 영지버섯(Ganoderma lucidum)균사체 균종은 25~27℃에서, 그리고 동충하초(Cordyceps poludosa)균사체는 35~38℃에서, 각각 배양하는 것을 특징으로 하는,인삼박을 배지로 한 버섯 균사체의 생산방법.
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Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102771854A (zh) * | 2012-07-20 | 2012-11-14 | 黄晓青 | 通过液体深层发酵制备的火木层孔菌保健饮料及其制备方法 |
CN104285669A (zh) * | 2014-09-18 | 2015-01-21 | 淳安千岛湖桑都食用菌专业合作社 | 一株桑黄菌株及其应用 |
CN104322273A (zh) * | 2014-09-18 | 2015-02-04 | 杭州千岛湖桑之宝农业开发有限公司 | 桑黄人工袋栽工艺 |
CN105594453A (zh) * | 2015-12-17 | 2016-05-25 | 大连爱地诺生物科技有限公司 | 一种灵芝培育方法 |
CN105900696A (zh) * | 2016-06-28 | 2016-08-31 | 黄秀英 | 以铁皮石斛为培养基制备桑黄菌丝体 |
CN105993593A (zh) * | 2016-05-23 | 2016-10-12 | 浙江省农业科学院 | 一种具有抗肿瘤活性的桑黄高效工厂化袋料栽培工艺 |
CN110982868A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-04-10 | 贵州中医药大学 | 一种提高灵芝三萜含量的共培养方法及应用 |
KR20220009321A (ko) * | 2020-07-15 | 2022-01-24 | 채희원 | 콩 발효 복합 균사체의 제조방법 |
-
2005
- 2005-05-10 KR KR1020050038871A patent/KR20060116463A/ko not_active Application Discontinuation
Cited By (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102771854A (zh) * | 2012-07-20 | 2012-11-14 | 黄晓青 | 通过液体深层发酵制备的火木层孔菌保健饮料及其制备方法 |
CN104285669A (zh) * | 2014-09-18 | 2015-01-21 | 淳安千岛湖桑都食用菌专业合作社 | 一株桑黄菌株及其应用 |
CN104322273A (zh) * | 2014-09-18 | 2015-02-04 | 杭州千岛湖桑之宝农业开发有限公司 | 桑黄人工袋栽工艺 |
CN105594453A (zh) * | 2015-12-17 | 2016-05-25 | 大连爱地诺生物科技有限公司 | 一种灵芝培育方法 |
CN105993593A (zh) * | 2016-05-23 | 2016-10-12 | 浙江省农业科学院 | 一种具有抗肿瘤活性的桑黄高效工厂化袋料栽培工艺 |
CN105900696A (zh) * | 2016-06-28 | 2016-08-31 | 黄秀英 | 以铁皮石斛为培养基制备桑黄菌丝体 |
CN105900696B (zh) * | 2016-06-28 | 2019-03-01 | 广西壮仁堂生物科技有限公司 | 以铁皮石斛为培养基制备桑黄菌丝体 |
CN110982868A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-04-10 | 贵州中医药大学 | 一种提高灵芝三萜含量的共培养方法及应用 |
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