CN104161909A - 一种祛黄褐斑的药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明的目的是提供一种具有祛黄褐斑功能的药物组合物。为了实现上述目的,本发明所采用的技术方案是一种具有祛黄褐斑功能的药物组合物,其含有如下重量百分比的原料成分:丹参提取物20-60%、当归提取物20-40%、绿茶提取物茶多酚10-30%、玫瑰花提取物10-35%、葡萄籽提取物5-30%。本发明与现有的其它制剂相比,具有如下的优点,本发明的药物组合物为不含毒性药材的纯中药制剂,根据药材特性采用不同的提取制备生产工艺和关键技术,保证提取有效成分含量和稳定性,具有疗效明显、成本低、疗效高、见效快、无毒副作用等特点。

Description

一种祛黄褐斑的药物组合物
技术领域
本发明涉及中药领域,特别是一种对黄褐斑具有祛斑保健功能的药物组合物。 
背景技术
黄褐斑,中医称“肝斑”“黧黑斑”,表现为颜面部出现局限性淡褐色皮肤色素改变,其病损为黄褐色或咖啡色斑片,形状不同,大小不等,可波及整个面部,有时可互相融合,状如蝴蝶,日晒后可加重。多见于中年以上女性,患者一般伴有相应内分泌失调表现,如失眠、急躁等。黄褐斑形现于外,而其因在于内,是体内气血阴阳失调的信号,并可以反映脏腑功能的盛衰。黄褐斑形成的原因主要是因女性内分泌失调,精神压力大,各种疾病(肝肾功能不全、妇科病、糖尿病)等以及体内缺少维生素及外用化学药物刺激引起。所以,要治其本,应以内治法为主,以内养外。 
黄褐斑是世界疑难杂症,直接影响容貌和美观,成为当前很多女性面临的难题。许多有过祛斑经历的女性往往花了很多冤枉钱,结果越治越严重,于是渐渐失去信心,认为黄褐斑无法治愈。经研究证明,黄褐斑完全可以根治,关键要选对药就可达到一个比较好的效果。目前,我国国家食品药品监督管理总局已经批准具有祛黄褐斑功能的品种有246个,配方简单,原料重复,难于对症,很难满足我国庞大的需求人群。为解决广大女性的困扰,主要针对面部有黄褐斑人群,我们依据传统医学理论及现代药理学研究,进行了安全性评价、祛黄褐斑功能的人体试食实验,对中药材功效成分进行了严格筛选,科学组方开发了此产品。本药物组合物(陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊)活血散 瘀,凉血消痈,养血安神,润肠通便,理气解郁五种功效明确成分,各具有不同的辅助祛黄褐斑功能,可联合发挥活血化瘀,疏通经络,祛黄褐斑的作用。本品无毒副作用,产品原料天然,生产工艺科学合理,质量稳定可控,为消费者提供了一个安全、有效、可靠、廉价的保健食品。产品特点是内治法为主,以内养外,活血散瘀、调节内腑,达到对黄褐斑标本兼治。与其他同类保健食品相比具有一定的特色优势。 
发明内容
为实现上述目的和克服目前市场产品的技术不足,发明人根据自己从事中医临床和药物研究几十年的实际经验,在总结前人处方的基础上,主要针对面部有黄褐斑的人群,近年来做了大量的药理研究,对此进行了安全性评价、祛黄褐斑功能试验、祛黄褐斑人体试食实验,对中药材功效成分进行了严格筛选,研发出了一种能够有效去除黄褐斑的药物组合物。。 
本发明实现其目的所采用的技术方案是:一种祛黄褐斑的药物组合物,包含如下重量百分比的原料成分:丹参提取物20-60%、当归提取物20-40%、绿茶提取物茶多酚10-30%、玫瑰花提取物10-35%、葡萄籽提取物5-30%。 
所述丹参提取物的制备方法:将药材丹参洗净、烘干,粉碎制成小块,粉碎后的丹参称重后放入提取罐内,加入含量85%的乙醇,乙醇加入量是丹参重量的8-10倍(W/W),在回流状态下乙醇提取三次;第一次回流提取时,从加热至沸96℃后开始计时,回流提取2小时;待第一次回流提取完成后,第二次操作同上;待第二次回流提取完成后,第三次加入同含量规格、相同重量的乙醇,加热至沸96℃后开始计时回流提取1.5小时,合并三次回流提取所得醇提滤液,在70—80℃温度值范围内减压浓缩,得到比重为1.0-1.1浓缩液;在喷雾干燥塔内喷口温度≤100℃,塔内温度≤80℃的条件下,喷雾干燥; 粉碎,过80目筛,筛分后得所述丹参提取物。 
所述丹参提取物制备工艺关键技术要点:丹参提取物是由药材丹参提取所得。根据药材丹参特性,丹参酮Ⅱ A(TanShinone IIA,TSh II A)是本药物提取所得的一种活性物质。制备时采用“回流式醇提工艺”,经定量体积乙醇溶剂三次充分提取后,可有效地保证丹参酮ⅡA有效成分在溶媒介质乙醇中充分溶出,保证提取时的有效成分含量。浓缩采用“减压浓缩工艺”。减压浓缩后,沸点低,可充分保证药物有效成分稳定性使其得到较高提取率。干燥采用“喷雾干燥工艺”。使浓缩物在干燥塔内处在80℃温度状态,喷口局部高温100℃在极短瞬间进行干燥,保留丹参提取物的活性成分,去除了残留乙醇。 
所述当归提取物的制备方法:将药材当归洗净、烘干,粉碎制成小块,粉碎后的当归称重后放入提取罐内,回流状态下水提取三次;第一次回流提取时,在提取罐内加入水,加水量是当归重量的8-10倍(W/W),加热至沸后开始计时,在恒温状态下回流提取2小时;待第一次回流提取完成后,第二次回流提取操作同第一次;待第二次回流提取完成后,第三次加水量是当归重量的8-10倍(W/W),加热至沸后开始计时,在恒温状态下回流提取1.5小时;合并三次回流提取所得水提滤液,将水提滤液在70℃-80℃的温度范围内减压浓缩,得到比重为1.0-1.1浓缩液;在喷雾干燥塔内喷口温度≤100℃,塔内温度≤80℃的条件下,喷雾干燥;粉碎,过80目筛,筛分后得所述当归提取物。 
所述当归提取物制备工艺关键技术要点:当归提取物是由药材当归提取所得。根据药材当归特性,当归中含有挥发油成分阿魏酸、正丁烯基苯酚、藁本内酯等化学有效成分。阿魏酸是本药物提取所得的活性物质(具有很强的抗氧化活性,对过氧化氢、超氧自由基、羟自由基、过氧化亚硝基有强烈的清除作用),制备采用“回流式水提工艺”。为保证有效成分能够充分溶出:(1)严格规定溶媒介质水的加 水量是所提取药材当归重量比(W/W)上限;(2)在到达规定的提取温度值后,保持在这个恒温状态下回流提取阿魏酸等活性成分,防止温度过高所含阿魏酸等有效成分氧化失活。浓缩采用“减压浓缩工艺”。减压浓缩后,沸点低,可充分保证药物有效成分稳定性使其得到较高提取率。干燥采用“喷雾干燥工艺”。可使浓缩物在干燥塔内80℃状态下,喷口局部高温100℃在极短瞬间进行干燥,保留当归提取物的活性成分,防止所得提取物吸潮潮解。 
所述绿茶提取物茶多酚制备方法:绿茶净选后,粉碎,放入提取罐内,加水量是粉碎绿茶重量的10倍量(W/W),微沸状态下2次水提取,每次提取1.5小时,得到绿茶粗滤液;将提取液超滤,经聚酰胺柱层析,用含量75%乙醇溶液洗脱,将乙醇洗脱液在50-70℃温度值范围内,真空度0.04-0.08MPa条件下浓缩,再将浓缩液过滤,在进口温度150-165℃,出风70-80℃的条件下进行喷雾干燥除溶剂残留,粉碎,过80目筛,筛分后得到绿茶提取物茶多酚。 
所述玫瑰花提取物的制备方法:将药材玫瑰花净选、淘洗、烘干,粉碎后过8目筛得到粗粉;将制得的玫瑰花粗粉称重后放入提取罐内,回流状态下水提取两次;第一次回流提取时,加水量是玫瑰花粗粉重量5倍(W/W),回流提取2小时;第二次回流提取加水量是玫瑰花粗粉重量6倍(W/W),回流提取3小时;合并二次回流提取所得水提滤液,在75—80℃温度值范围内减压浓缩,得到相对密度为1.41-1.50稠浸膏;在温度值80℃,进行真空干燥,粉碎,过80目筛,筛分后得所述玫瑰花提取物。 
所述玫瑰花提取物制备工艺关键技术要点:玫瑰花提取物是由药材玫瑰花提取所得。根据药材玫瑰花特性,主要化学成分有挥发油、鞣质、黄酮、脂肪油、氨基酸等,总黄酮是本药物提取所得的一种活性物质。为此,对玫瑰花提取有严格的技术要求:玫瑰花粉碎度须达到8目筛,再进行水提保证提取有效成分完全。提取采用“回流式水 提工艺”,有效地控制溶媒介质水的加入量,待充分溶出后进行提取。浓缩采用“减压浓缩工艺”。减压浓缩后,沸点低,可充分保证玫瑰花总黄酮有效成分稳定性,在浓缩物达到相对密度要求后,得到较高提取率。干燥采用“喷雾干燥工艺”。使浓缩物在干燥塔内80℃温度状态进行干燥,保留玫瑰花提取物的活性成分,防止所得提取物吸潮潮解。 
所述葡萄籽提取物的制备方法:葡萄籽净选,淘洗,烘干后,粉碎、过20目筛得到葡萄籽粗粉;将制得的葡萄籽粗粉称重后放入提取罐内,分别用含量80%的乙醇,乙醇是葡萄籽8倍重量(W/W)、7倍重量(W/W)、6倍重量(W/W),在温度85℃时,依次2小时、2小时、1.5小时醇回流提取三次;合并醇提滤液,将醇提滤液中的乙醇进行回收后,在75-80℃温度值范围内减压浓缩,得到相对密度1.15-1.18的浓缩液;在喷雾干燥塔温度≤80℃的条件下,喷雾干燥;粉碎,过80目筛,筛分后得所述葡萄籽提取物。 
所述葡萄籽提取物制备工艺关键技术要点:葡萄籽提取物所用原料葡萄籽系制造葡萄酒后的副产物,测定低聚原花色素含量须达到80%再进行提取。根据葡萄籽特性,原花青素是本药物组合物提取所得的一种活性物质。为此,对葡萄籽提取有严格的技术要求:葡萄籽粉碎度须达到20目筛粗粉,以保证提取时有效成分被充分提出。再通过“醇回流提取工艺”,采用大量溶媒介质乙醇回流提取制备所得,可有效地降低对原花青素的破坏,防止药效成分失活。浓缩采用“减压浓缩工艺”。减压浓缩后,沸点低,可充分保证有效成分稳定性,在浓缩物达到相对密度要求后,可得较高提取率。干燥采用“喷雾干燥工艺”。可使浓缩物在干燥塔内80℃状态进行干燥,保留提取物的活性成分,去除残留乙醇。 
本发明优选的技术方案是一种祛黄褐斑的药物组合物,按重量百分比计其主要原料组成:丹参提取物25%、当归提取物22%、绿茶提 取物18%、玫瑰花提取物20%、葡萄籽提取物提取物15%。 
本发明所述一种对祛黄褐斑具有辅助功能的药物组合物为口服制剂,为医学上可接受的各种剂型包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液、丸剂或滴丸。中药活性成份提取物混合,按常规操作方法与药用辅料制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂或口服液等剂型。 
本发明所述的药物组合物,可在制备祛黄褐斑功能的保健品中应用。 
本发明的积极效果:本发明提供了多种天然药物有效成分联合协同配方,不是成分的简单叠加,对黄褐斑具有很好的协同消除效果和抑制作用,是一种无任何毒副作用,安全、效果明显的药物组合物。 
本发明中以活血祛瘀,通经止痛的丹参,补血活血、调经止痛、润肠通便的当归为君药,辅以清除自由基极强的茶多酚,行气解郁、和血止痛的玫瑰花,富含原花青素的葡萄籽为臣药。纵观全方,既有调肝补脾,益气养血,活血行气,除湿化痰之功的中草药,又有具有良好的抗氧化作用的茶多酚、葡萄籽。本配方联合作用,可有效清除自由基,抑制酪氨酸酶活性,从而抑制黑色素的生成,起到改善面部微循环、增强面部营养、消退色斑的作用,从而达到祛除黄褐斑的目的。 
黄褐斑,正常人的面部经络(血管、神经等)极为丰富,充沛的气血供应脸部经络所需,致使肤色健康并有光泽,反之则面部晦暗缺乏红润。中医认为其病因主要为肝失条达,气机郁结,郁久化火,灼伤阴血,血行不畅,可导致颜面气血失和;脾气虚弱,运化失健,不能化生精微,则气血不能润泽于颜面;肾阳不足、肾精亏虚等病理变化均可导致颜面发生黄褐斑。 
本方中丹参味苦,性微寒。归心、肝经。主治活血祛瘀,通经止痛,清心除烦,凉血消痈。用于胸痹心痛,脘腹胁痛,热痹疼痛,心烦不眠,月经不调,痛经经闭,疮疡肿痛。对黄褐斑患者,丹参在本 方中具有活血养血、被动瘀生新,改善面部微循环,血行通畅,上荣于面部,使面部毛细血管得以充养,黄褐斑渐消。丹参中的丹参酮ⅡA可不同程度抑制内毒素炎症过程中的炎症因子变化以及巨噬细胞的过度活化增殖,在治疗时注重考虑疏肝理气,活血调经祛斑。方中丹参祛瘀消斑,除烦安神。 
当归味甘、性温、辛。归肝、心、脾经。具有补血活血,调经止痛,润肠通便之效。用于血虚萎黄、眩晕心悸、月经不调、经闭痛经、虚寒腹痛、肠燥便秘、风湿痹痛、跌扑损伤、痈疽疮疡。本方中当归可养血活血,促进细胞蛋白质合成,对DNA、RNA的合成有促进作用,抑制血小板聚集,调节物质代谢,促进肝脏水解过程,加强免疫功能,利于毒物排泻。使体内过氧化程度降低,抗氧化能力及清除自由基能力增强,减少黑色素细胞的生成及皮肤色素沉着。现代研究表明,当归中的阿魏酸具有很强的抗氧化活性,对过氧化氢、超氧自由基、羟自由基、过氧化亚硝基都有强烈的清除作用。不仅能清除自由基,而且能调节人体生理机能,抑制产生自由基的酶,促进清除自由基的酶的产生,能大大增加谷胱甘肽转硫酶和醌还原酶的活性,抑制酪氨酸酶活性。 
本方中的茶多酚(Tea Polyphenols,缩写TP)是从贵州湄潭县特产大叶种属绿茶中提取所得,具有抗氧化能力强,无毒副作用,无异味等特点。茶多酚是茶叶中最主要活性物质,具有很强的抗氧化作用,其抗氧化能力是VC的5-10倍,且用量少:0.01-0.03%即可起作用,而无合成物的潜在毒副作用。据以往国内外大量研究表明茶多酚具有抗氧化、防止肿瘤,预防心血管疾病等生物学活性。2009年-2012年本人做为此国家科技部国际合作专项项目负责人,承担了遵义陆圣康源科技开发有限责任公司公司与悉尼科技大学医学分子生物学系糖尿病研究室项目研究,使用贵州湄潭产大叶种属绿茶提取物茶多酚,采用国际先进技术进行了《茶多酚对Ⅱ型糖尿病胰岛功能及并发症作 用机理研究》(国家科技部国际科技合作项目编号:2011DFA31160),系统完整建立了茶多酚与降血糖、降血脂、减肥、抗氧化、抗肿瘤的理论研究体系,选用特殊遗传基因肥胖大鼠(ZΜCKER)模型,进行了体内实验、体外实验,此种动物模型的实验研究尚属先例。通过对ZΜCKER模型特殊遗传基因肥胖大鼠动物试验,证明了高纯度的茶多酚除具有降血糖、降血脂、减肥、对非酒精脂肪肝(NAFLD)有保护细胞功能和预防作用外,还有极强的清除自由基、阻止脂质过氧化的作用。按自由基学说的理论,衰老的原因是组织中自由基含量发生了改变,这种改变使细胞功能遭到破坏,从而加速肌体的衰老进程。而面部黄褐斑也正是人体皮肤衰老的一方面表现。茶多酚对自由基的清除作用,使之能向构成肌体防御脂质过氧化系统的内源成分那样阻止体内脂质过氧化进行,从而起抗衰老、延缓色素沉积的作用。此外,茶多酚还具有优异的抗辐射功能,从而保护黑色素细胞的正常功能,抑制黑色素的形成,减轻色素沉着。结论:茶多酚(200mg/Kg)具有极强的抗氧化功能,可明显减少抑制黄褐斑、黑色素的形成。 
经高效液相-质谱层析联项(LC-MS)对此茶多酚有效成分分析鉴定:贵州湄潭大叶种属绿茶提取的天然茶多酚含量高达到99%以上,其中体现主要活性指标成分的表没食子儿茶素没食子酸酯-Epigallocatechin gallate(EGCG)含量高达70%,居国内外茶叶提取茶多酚、EGCG含量之首。不同于国内外很多文献报道所言天然茶多酚中的EGCG含量低,高纯度的只能靠化学合成(由美国Sigma公司合成)。其茶多酚、EGCG天然有效成分含量高,抗氧化能力强,在本发明的药物组合物配方中作为主要有效成分之一,显示出明显的祛黄褐斑的功能作用。 
玫瑰花,甘,味苦,温。归肝、脾经。主治行气解郁,和血止痛。用于肝胃气痛,食少呕恶,月经不调,跌扑伤痛。现代药理研究表明,玫瑰花的药理作用广泛,在心血管疾病、免疫炎症的治疗与抗肿瘤、 抗氧化以及利胆、解毒等方面都有显著的治疗作用。从玫瑰花中分离得到黄酮类、鞣质、多酚类化合物为玫瑰花有效成分,具有抗氧化、清除自由基等多种生理和药理活性。本方中用玫瑰花清热解毒、舒肝理气同时活血敛肤。 
葡萄籽提取物含丰富的原花青素。原花青素(proanthocyanidin)是植物王国中广泛存在的一大类多酚物质的总称,由不同数量儿茶素或表儿茶素缩合而成。研究发现,原花青素具有强大的抗氧化、清除自由基能力和对人体微循环具有特殊改善的双重功效,以高效、低毒、高生物利用而著称。在本方中葡萄籽提取物中含低聚原花色素含量高达到95%以上,可有效抑制50%以上黄褐斑黑色素形成,使黄褐斑褪色,抑制脂褐素和老年斑的形成。 
纵观本发明诸药配伍(陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊胶囊)由丹参提取物、当归提取物、茶多酚、玫瑰花提取物、葡萄籽提取物组成。丹参味苦,微寒。归心、肝经。活血调经,祛瘀止痛,凉血消痈,清心除烦,养血安神。当归味甘、辛,温,归肝、心、脾经。补血活血,调经止痛,润肠通便。玫瑰花性温味甘微苦,入肝、脾二经,理气解郁、活血散瘀。辅以清除自由基极强的茶多酚,高含量原花青素,共奏祛黄褐斑之功效,具有祛黄褐斑的功能。 
安全性评价证明 
对陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊毒理学实验结果结论: 
1、急性经口毒性试验:对昆明种雌、雄小鼠的最大耐受剂量(MTD)大于20.00g/kg·bw,属无毒级。 
2、三项遗传毒性试验:Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验结果均为阴性。 
3、30天喂养试验:以0.83g/kg·bw、1.67g/kg·bw、3.33g/kg·bw剂量的样品给大鼠灌胃30天,实验期间,动物生长发育良好,各剂量组体重、增重、食物利用率、血常规指标、血生化指标、 脏器重量及脏器/体重比值与对照组比较,无显著性差异(P﹥0.05)。大体解剖和组织病理检查未见明显与样品有关的异常改变。提示陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊30天喂养对大鼠未见明显毒副作用。 
急性经口毒性试验: 
表1 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊急性经口毒性试验小鼠体重结果(±s,g) 
性别 动物数(只) 初始体重 一周末体重 二周末体重
10 19.69±1.31 27.71±2.92 31.83±3.53
10 20.29±1.50 26.20±2.37 29.27±2.70
表2 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊小鼠急性毒性试验结果 
性别 动物数(只) 途径 剂量(g/kg·bw) 死亡数(只) MTD(g/kg·bw)
10 经口 20.00 0 ﹥20.00
10 经口 20.00 0 ﹥20.00
由表1、2可见,以20.00g/kg·bw剂量的陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊给两种性别的昆明种小鼠灌胃后未见明显中毒症状,观察14天无死亡。观察期末将受试动物处死进行解剖检查,肝、脾、肾、胃、肠、心、肺等主要脏器,未见明显异常改变。陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊对昆明种雌、雄小鼠的最大耐受剂量(MTD)大于20.00g/kg·bw。根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的急性毒性分级标准,属无毒级。 
三项遗传毒性试验 
Ames试验: 
表3 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊Ames试验结果(第一次) 
注:以上结果为3个平皿的均值±标准差。 
阳性对照:TA97+S9、TA98+S9、TA100+S9采用2-AF(剂量:10.0μg/皿);TA97-S9、TA98-S9、TA100-S9采用9-芴酮(剂量:0.2μg/皿);TA100-S9采用NaN3(剂量:1.5μg/皿);TA102+S9采用1,8-二羟蒽醌(剂量:50.0μg/皿);TA102-S9采用MMC(剂量:0.5μg/皿)。表4同。 
表4 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊Ames试验结果(第二次) 
由表3、4可见,对TA97、TA98、TA100、TA102四株试验菌株,加与不加S-9,样品各剂量组回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍,亦无剂量—反应关系。 
小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验: 
表5 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊对小鼠骨髓微核发生率的影响 
*与阴性对照组比较,P﹤0.01 
由表5可见,样品各剂量组微核率与阴性对照组比较差异无显著性(P﹥0.05),而环磷酰胺组与阴性对照组比较差异有显著性(P﹤0.01)。 
小鼠精子畸形试验: 
表6 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊对小鼠精子畸形发生率的影响 
*与阴性对照组比较,P﹤0.01 
由表6可见,样品各剂量组小鼠精子畸形发生率与阴性对照组比较差异无显著性(P﹥0.05),而环磷酰胺阳性对照组与阴性对照组比较差异有显著性(P﹤0.01)。 
30天喂养试验: 
30天喂养期间,各组动物生长发育良好,无异常行为和中毒症状,无死亡。对大鼠体重及食物利用率的影响见表7。 
表7 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊对大鼠总食物利用率的影响(±s) 
喂养期间,各剂量组雌雄鼠各时点体重、末重和增重、每周及总进食量、每周及总食物利用率与对照组比较差异无显著性(P﹥0.05)。 
样品对大鼠血常规指标的影响: 
各剂量组雌雄大鼠的血红蛋白、红细胞总数、红细胞压积、血小 板数、白细胞总数及分类与对照组比较,差异无显著性(P﹥0.05)。 
见表8-9和续表9。 
表8 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊30天喂养试验血液学检查结果(±s) 
表9 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊对大鼠WBC计数及其分类的影响(±s) 
续表9 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊对大鼠WBC计数及其分类的影响(±s) 
样品对大鼠生化指标的影响: 
各剂量组雌雄大鼠的总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、胆固醇、甘油三酯、尿素氮、肌酐、血糖与对照组比较均无显著性差异(P﹥0.05)。见表10-11。 
表10 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊30天喂养试验末期生化检验结果(±s) 
表11 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊30天喂养试验末期生化检验结果(±s) 
样品对大鼠实验未禁食后体重、脏器重量和脏器/体重比值的影响: 
各剂量组大鼠的实验未禁食后体重及肝脏、肾脏、脾脏、睾丸的绝对重量和肝/体、脾/体、肾/体、雄鼠睾/体比值与对照组比较,差异无显著性(P﹥0.05)。见表12-13。 
表12 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊对大鼠实验未禁食后体重及脏器重量的影响(±s) 
表13 陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊对大鼠脏体比的影响(±s) 
大体解剖及组学检查结果: 
共检查对照组和各剂量组共80只大鼠,雄、雌各半。剖检后肉眼观察,心、肺、肝、脾、肾、胃、肠、睾丸(卵巢)等主要脏器的色泽、大小、形态结构等均未见明显异常。 
镜下检查: 
检查高剂量组和各剂量组各20只,雌、雄各半。 
肝脏:被膜完整,肝小叶结构清楚,其中高剂量组雄鼠1只肝细胞见点状坏死,对照组雄鼠1只肝细胞见轻度脂肪变性。 
肾脏:被膜完整,肾小球、肾小管结构正常。其中对照组雌鼠1只、高剂量组雄鼠1只肾间质见少量炎性细胞浸润。 
胃肠:各层结构清楚,粘膜上层完整,粘膜下层未见异常。 
脾脏:被膜完整,脾小梁结构正常,红、白髓比例正常,未见异常。 
卵巢:上皮与白膜正常,各级卵泡发育良好,未见异常。 
睾丸:曲精管各级生精细胞发育良好,间质未见异常。 
上述检查结果表明,高剂量组雄、雌大鼠的肝、肾、胃、肠、睾 丸(卵巢)均未见明显与试验因素有关的病理组织学变化。 
祛黄褐斑功能人体试食试验证明: 
结论: 
本发明的制剂(陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊)将受试者按黄褐斑颜色、面积情况随机分为试食组和对照组,分别食用陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊和安慰剂,45天后结果表明:试食组黄褐斑颜色积分与自身试食前及对照组比较差异均有显著性(P<0.05);黄褐斑面积与自身试食前及对照组比较差异均有显著性(P<0.05),试食组黄褐斑面积平均减少10.29%;试食组祛黄褐斑总有效率为67.27%,与对照组(9.09%)比较,差异有显著性(P<0.05),且无新的黄褐斑产生。提示陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊具有祛黄褐斑作用。试食陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊前后,血常规、血生化等各项检测指标均未见明显异常改变,试食期间未观察到明显不良反应。 
安全性观察 
体重、血压、心率、血常规、尿常规、大便常规及血生化指标: 
见表14、15。食用本发明产品(陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊)45天后,试食组和对照组体重、血压、心率未见明显异常改变,血常规、尿常规、大便常规及生化指标均在正常范围内,提示陆圣康源牌祛黄褐斑胶囊对机体健康无明显损害。 
表14 试食前后体重、血压、心率、血常规、尿常规、大便常规指标变化情况(±s) 
表15 试食前后生化指标变化情况(±s) 
心电图、腹部B超、胸透检查:均在正常范围内。 
结论:试食期间未见明显不良反应。 
功效观察: 
两组黄褐斑颜色变化情况: 
见表16。试食后试食组黄褐斑颜色积分平均下降0.41分,与试食前比较差异有显著性(P<0.05),与对照组比较差异也有显著性(P<0.05)。 
表16 黄褐斑颜色变化比较(积分,±s) 
分组 试验前 试验后 差值
对照组 2.66±0.32 2.58±0.39 0.08±0.19
试食组 2.68±0.29 2.27±0.36*# 0.41±0.19
注:自身对照*P<0.05  组间对照#P<0.05 
两组黄褐斑面积变化情况: 
见表17。试食后试食组黄褐斑面积平均减少575.3mm2,与试食前比较差异有显著性(P<0.05),与对照组比较差异也有显著性(P<0.05)。 
表17 黄褐斑面积变化比较(mm2,±s) 
分组 试验前 试验后 差值 减少百分率(%)
对照组 5594.7±960.7 5569.8±976.5 24.9±201.4 0.45
试食组 5590.7±873.7 5015.5±838.8*# 575.3±187.9# 10.29
[0118] 注:自身对照*P<0.05  组间对照#P<0.05 
功效评定: 
见表18。试食后试食组临床观察总有效率为67.27%,与对照组(9.09%)比较差异有显著性(P<0.05)。 
表18 祛黄褐斑功效比较 
分组 例数 有效 无效 总有效率%
对照组 55 5 50 9.09
试食组 55 37 18 67.27#
注:组间对照#P<0.05 
脱失率: 
经过45天试验后,对照组有0例受试者因间断服用受试品或无法判断效果被筛除;试食组有0例受试者因间断服用受试品或无法判断效果被筛除。最后有效试验人群对照组55例,试食组55例。见表19。 
表19 试验脱失率 
组别 对照组(例) 试食组(例)
试食前 55 55
脱失数 0 0
脱失率 0.00% 0.00%
本发明的药物组合物通过安全性评价、祛黄褐斑功能人体试食试验,经对祛黄褐斑颜色变化、祛黄褐斑面积功能性比对和其祛黄褐斑功效评定验证证明:本发明药物组合物具有祛黄褐斑的作用,对黄褐斑主要临床症状有改善作用,总有效率为为67.27%%。急性毒性试验结果属无毒级,三项遗传毒性试验结果均为阴性,说明本发明的药物组合物是安全有效的。 
本发明与现有其它制剂剂型相比,具有如下的优点,本发明的药物组合物为不含毒性药材的复方纯中药制剂,药材提取物有效成分含量高,具有疗效明显、成本低、疗效高、见效快、无毒副作用等特点,祛黄褐斑功能的有效率居同类产品之首。 
附图说明
图1是本发明所述丹参提取物的制备流程图; 
图2是本发明所述当归提取物的制备流程图; 
图3是本发明所述绿茶提取物茶多酚的制备流程图; 
图4是本发明所述玫瑰花提取物的制备流程图; 
图5是本发明所述葡萄籽提取物的制备流程图。 
具体实施方式
下面结合附图对本发明的优选实施例进行详细说明。 
实施例1 
参照图1至图5,本发明优选实施例1提供一种祛黄褐斑的药物组合物,其含有如下重量百分比的原料成分:丹参提取物20-60%、当归提取物20-40%、绿茶提取物茶多酚10-30%、玫瑰花提取物10-35%、葡萄籽提取物5-30%。 
所述丹参提取物的制备方法:将药材丹参洗净、烘干,粉碎制成小块,粉碎后的丹参称重后放入提取罐内,加入含量85%的乙醇,乙醇加入量是丹参重量的8-10倍(W/W),在回流状态下乙醇提取三次。第一次回流提取时,从加热至沸96℃后开始计时,回流提取2小时;待第一次回流提取完成后,第二次操作同上;待第二次回流提取完成后,第三次加入同含量规格、相同重量的乙醇,加热至沸96℃后开始计时回流提取1.5小时,合并三次回流提取所得醇提滤液,在70—80℃温度值范围内减压浓缩,得到比重为1.0-1.1浓缩液。在喷雾干燥塔内喷口温度≤100℃,塔内温度≤80℃的条件下,喷雾干燥。粉碎,过80目筛,筛分后得所述丹参提取物。 
所述当归提取物的制备方法:将药材当归洗净、烘干,粉碎制成小块,粉碎后的当归称重后放入提取罐内,回流状态下水提取三次。第一次回流提取时,在提取罐内加入水,加水量是当归重量的8-10倍(W/W),加热至沸后开始计时,在恒温状态下回流提取2小时;待第一次回流提取完成后,第二次回流提取操作同第一次;待第二次回 流提取完成后,第三次加水量是当归重量的8-10倍(W/W),加热至沸后开始计时,在恒温状态下回流提取1.5小时。合并三次回流提取所得水提滤液,将水提滤液在70℃-80℃的温度范围内减压浓缩,得到比重为1.0-1.1浓缩液。在喷雾干燥塔内喷口温度≤100℃,塔内温度≤80℃的条件下,喷雾干燥。粉碎,过80目筛,筛分后得所述当归提取物。 
所述绿茶提取物制备方法:绿茶净选后,粉碎,放入提取罐内,加水量是粉碎绿茶重量的10倍量(W/W),微沸状态下2次水提取,每次提取1.5小时,得到绿茶粗滤液;将提取液超滤,经聚酰胺柱层析,用含量75%乙醇溶液洗脱,将乙醇洗脱液在50-70℃温度值范围内,真空度0.04-0.08MPa条件下浓缩,再将浓缩液过滤,在进口温度150-165℃,出风70-80℃的条件下进行喷雾干燥除溶剂残留,粉碎,过80目筛,筛分后得到绿茶提取物茶多酚。 
所述玫瑰花提取物的制备方法:将药材玫瑰花净选、淘洗、烘干,粉碎后过8目筛得到粗粉。将制得的玫瑰花粗粉称重后放入提取罐内,回流状态下水提取两次。第一次回流提取时,加水量是玫瑰花粗粉重量5倍(W/W),回流提取2小时;第二次回流提取加水量是玫瑰花粗粉重量6倍(W/W),回流提取3小时。合并二次回流提取所得水提滤液,在75—80℃温度值范围内减压浓缩,得到相对密度为1.41-1.50稠浸膏。在温度值80℃,进行真空干燥,粉碎,过80目筛,筛分后得所述玫瑰花提取物。 
所述葡萄籽提取物的制备方法:葡萄籽净选,淘洗,烘干后,粉碎、过20目筛得到葡萄籽粗粉。将制得的葡萄籽粗粉称重后放入提取罐内,分别用含量80%的乙醇,乙醇是葡萄籽8倍重量(W/W)、7倍重量(W/W)、6倍重量(W/W),在温度85℃时,依次2小时、2小时、1.5小时醇回流提取三次。合并醇提滤液。将醇提滤液中的乙醇进行回收后,在75-80℃温度值范围内减压浓缩,得到相对密度 1.15-1.18,的浓缩液。在喷雾干燥塔温度≤80℃的条件下,喷雾干燥。粉碎,过80目筛,筛分后得所述葡萄籽提取物。 
实施例2 
配方(按每1000粒计):丹参提取物130g、当归提取物135g、茶多酚50g、玫瑰花提取物80g、葡萄籽提取物90g、糊精10g、硬脂酸镁5g。原料过筛,混合均匀,再适当加入辅料硬脂酸镁、糊精,混合均匀,灌入胶囊,制得胶囊剂。 
实施例3 
配方(按每1000片计):丹参提取物128g、当归提取物122g、茶多酚60g、玫瑰花提取物90g、葡萄籽提取物80g、糊精15g、硬脂酸镁5g。原料过筛,混合均匀,再加入辅料硬脂酸镁、糊精,混合均匀,压片,制得片剂。 
实施例4 
配方(按每1000袋计):丹参提取物125g、当归提取物130g、茶多酚50g、玫瑰花提取物85g、葡萄籽提取物95g、糊精15g。原料过筛,混合均匀,再加入辅料糊精,混合均匀,制粒,制得颗粒剂。 
实施例5 
配方(按每1000粒计):丹参提取物130g、当归提取物130g、茶多酚60g、玫瑰花提取物70g、葡萄籽提取物90g、糊精15g、硬脂酸镁5g。原料过筛,混合均匀,再加入糊精、硬脂酸镁,混合均匀,灌入胶囊,制得胶囊剂。 
实施例6 
配方(按每1000袋计):丹参提取物125g、当归提取物135g、茶多酚65g、玫瑰花提取物75g、葡萄籽提取物75g、过筛,原料混合均匀,再加入糊精25g,混合均匀,制粒,制得颗粒剂。 
实施例7 
配方(按每1000瓶/10ml计):丹参提取物132g、当归提取物 138g、茶多酚65g、玫瑰花提取物85g、葡萄籽提取物80g,过筛,原料混合均匀,适量加水,溶解,混合均匀,再次补加水稀释至规定量,液体循环均匀后灌装,制得口服液。 
以上所述的仅为本发明的优选实施例,所应理解的是,以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想,并不用于限定本发明的保护范围,凡在本发明的思想和原则之内所做的任何修改、等同替换等等,均应包含在本发明的保护范围。 

Claims (3)

1.一种祛黄褐斑的药物组合物,包含如下重量百分比的原料成分:丹参提取物20-60%、当归提取物20-40%、绿茶提取物茶多酚10-30%、玫瑰花提取物10-35%、葡萄籽提取物5-30%;
其中所述丹参提取物的制备方法:将药材丹参洗净、烘干,粉碎制成小块,粉碎后的丹参称重后放入提取罐内,加入含量85%的乙醇,乙醇加入量是丹参重量的8-10倍(W/W),在回流状态下乙醇提取三次;第一次回流提取时,从加热至沸96℃后开始计时,回流提取2小时;待第一次回流提取完成后,第二次操作同上;待第二次回流提取完成后,第三次加入同含量规格、相同重量的乙醇,加热至沸96℃后开始计时回流提取1.5小时,合并三次回流提取所得醇提滤液,在70—80℃温度值范围内减压浓缩,得到比重为1.0-1.1浓缩液;在喷雾干燥塔内喷口温度≤100℃,塔内温度≤80℃的条件下,喷雾干燥;粉碎,过80目筛,筛分后得所述丹参提取物;
所述当归提取物的制备方法:将药材当归洗净、烘干,粉碎制成小块,粉碎后的当归称重后放入提取罐内,回流状态下水提取三次;第一次回流提取时,在提取罐内加入水,加水量是当归重量的8-10倍(W/W),加热至沸后开始计时,在恒温状态下回流提取2小时;待第一次回流提取完成后,第二次回流提取操作同第一次;待第二次回流提取完成后,第三次加水量是当归重量的8-10倍(W/W),加热至沸后开始计时,在恒温状态下回流提取1.5小时;合并三次回流提取所得水提滤液,将水提滤液在70℃-80℃的温度范围内减压浓缩,得到比重为1.0-1.1浓缩液;在喷雾干燥塔内喷口温度≤100℃,塔内温度≤80℃的条件下,喷雾干燥;粉碎,过80目筛,筛分后得所述当归提取物;
所述绿茶提取物茶多酚制备方法:绿茶净选后,粉碎,放入提取罐内,加水量是粉碎绿茶重量的10倍量(W/W),微沸状态下2次水提取,每次提取1.5小时,得到绿茶粗滤液;将提取液超滤,经聚酰胺柱层析,用含量75%乙醇溶液洗脱,将乙醇洗脱液在50-70℃温度值范围内,真空度0.04-0.08MPa条件下浓缩,再将浓缩液过滤,在进口温度150-165℃,出风70-80℃的条件下进行喷雾干燥除溶剂残留,粉碎,过80目筛,筛分后得到绿茶提取物茶多酚;
所述玫瑰花提取物的制备方法:将药材玫瑰花净选、淘洗、烘干,粉碎后过8目筛得到粗粉;将制得的玫瑰花粗粉称重后放入提取罐内,回流状态下水提取两次;第一次回流提取时,加水量是玫瑰花粗粉重量5倍(W/W),回流提取2小时;第二次回流提取加水量是玫瑰花粗粉重量6倍(W/W),回流提取3小时;合并二次回流提取所得水提滤液,在75—80℃温度值范围内减压浓缩,得到相对密度为1.41-1.50稠浸膏;在温度值80℃,进行真空干燥,粉碎,过80目筛,筛分后得所述玫瑰花提取物;
所述葡萄籽提取物的制备方法:葡萄籽净选,淘洗,烘干后,粉碎、过20目筛得到葡萄籽粗粉;将制得的葡萄籽粗粉称重后放入提取罐内,分别用含量80%的乙醇,乙醇是葡萄籽8倍重量(W/W)、7倍重量(W/W)、6倍重量(W/W),在温度85℃时,依次2小时、2小时、1.5小时醇回流提取三次;合并醇提滤液,将醇提滤液中的乙醇进行回收后,在75-80℃温度值范围内减压浓缩,得到相对密度1.15-1.18的浓缩液;在喷雾干燥塔温度≤80℃的条件下,喷雾干燥;粉碎,过80目筛,筛分后得所述葡萄籽提取物。
2.根据权利要求1所述的一种祛黄褐斑的药物组合物,其特征在于:包含如下重量百分比的原料:丹参提取物25%、当归提取物22%、绿茶提取物18%、玫瑰花提取物20%、葡萄籽提取物提取物15%。
3.根据权利要求1所述的一种祛黄褐斑的药物组合物,其特征在于:所述祛黄褐斑的药物组合物为胶囊剂或片剂或颗粒剂或口服液。
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