CN101590092A - 一种用于治疗白血病的中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗白血病的中药组合物及其制备方法。该中药组合物是由雄黄、青黛、当归、冰片按一定重量配比制备而成。它可以被制备成任何一种常用药物剂型。本发明中药组合物具有清热、解毒、活血之功效，用于治疗各种急慢性白血病。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于治疗白血病的中药组合物及其制备方法，属于中药领域。
背景技术
白血病是造血组织的恶性疾病。其特点是骨髓及其他造血组织中有大量白血病细胞无限制地增生，并进入外周血液，而正常血细胞的制造被明显抑制，该病居年轻人恶性疾病中的首位，病因至今仍不完全清楚，病毒可能是主要的致病因子，但还有许多因素如放射、化学毒物(苯等)或药物、遗传素质等可能是致病的辅因子。根据白血病细胞不成熟的程度和白血病的自然病程，分为急性和慢性两大类。根据增生细胞类型，可分为粒细胞性、淋巴细胞性和单核细胞性三类。主要表现为感染、发热、贫血和出血。
主要治疗有下列几类化学治疗、放射治疗、标靶治疗。部分高危险性病人，需要进行骨髓移植。近10年来，随着分子生物学、生物遗传学的进展，对白血病的病因病理认识更加深入，同时新疗法、新药物的发现以及中药的使用，使白血病预后得到极大的改观。
中医学无“白血病”这一病名，根据其临床表现如发热、贫血、出血、肝脾及淋巴结肿大等，可归于中医“虚劳″、“急劳”、“热劳″、“血证″、“痰核”等范畴。虽然无统一辨证依据，但中医白血病辨证分型的总趋势还是以气阴两虚型、气血两虚型、热毒蕴结型和血瘀阻滞型为主。
本发明人认为白血病的病因主要是由“毒邪入血”所引起，这种邪毒进入机体后多能化热伤阴，因而又将这种毒邪称为火热之邪，也称之为火毒、热毒。除此之外，邪毒还应包括内伤所致的内毒。邪毒在一定内因条件下入侵人体的脏腑经络，由表及里，或毒自内而生，内外合毒。邪毒蕴积于内，日久化热。所以治则当以清热解毒为主。
发明内容
本发明提供一种新的中药组合物，该组合物具有清热、解毒、活血的作用，用于治疗各种急慢性白血病。
本发明的另一个目的是提供上述中药组合物的制备方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
本发明是由下述重量配比的原料制成的：雄黄0.05-0.1份、青黛1.5-3份、当归6-12份、冰片0.15-0.3份。
优选的重量份配比为：雄黄0.08份、青黛2份、当归9份、冰片0.2份。
本发明中药组合物的制备方法如下：
将当归水提取或不同浓度乙醇提取或水提醇沉，或水蒸汽蒸馏提取挥发油药渣水提取或不同浓度乙醇提取或水提醇沉，还可进一步用大孔树脂柱纯化，得到当归提取物；将当归提取物、雄黄、青黛、冰片混合，加入适量辅料，制备成药学上可接受的固体口服制剂，例如胶囊剂、片剂、丸剂、滴丸剂等。
其中，当归提取物的优选制备方法为：
当归加5倍量水，煎煮2小时，滤过，滤渣加入4倍量水，煎1小时，滤过，滤渣弃去，合并2次滤液，滤液减压浓缩至药液体积(L)与药材重量(Kg)比为1∶0.9-1.1，加入乙醇使药液含醇浓度在70％，静置，滤过，浓缩至相对密度为1.30-1.35(50℃)的稠膏，减压干燥(60℃，-0.08Mpa)，即得当归提取物。
当归提取物的另一优选制备方法为：
当归加水浸泡4小时，用挥发油提取器以石油醚(30，-60℃)为溶剂，水蒸馏6小时后，收集挥发油，60℃挥干石油醚，得淡黄色当归挥发油，用beta环糊精包合，制成beta环糊精包合物；将蒸馏后残液滤过，得滤液1，药渣再加70％乙醇，回流提取1.5小时后滤过，得滤液2，合并2次滤液，浓缩至相对密度为1.30-1.35(50℃)的稠膏，减压干燥(60℃，-0.08Mpa)，粉碎，加入beta环糊精包合物，即得当归提取物。
本发明中药组合物优选的滴丸剂的制备方法如下：
将聚乙二醇4000∶聚乙二醇6000按3∶1的比例加热熔融，加入当归提取物、雄黄、青黛、冰片的细粉，混匀，60-80℃保温，滴入冷却的二甲硅油中，待滴丸冷却后取出，沥净并擦除二甲硅油，即得滴丸。
本发明中药组合物优选的丸剂的制备方法如下：
将当归提取物、雄黄、青黛、冰片粉碎成细粉，加入适量蜂蜜，混和均匀，制丸剂。
本发明中药组合物优选的胶囊剂的制备方法如下：
将当归提取物、雄黄、青黛、冰片粉碎成细粉，加入乳糖，混匀，用95％乙醇制粒，干燥，装入胶囊，即得胶囊剂。
本发明中药组合物另一优选的胶囊剂的制备方法如下：
将当归提取物、雄黄、青黛、冰片粉碎成细粉，干燥，装入胶囊，即得胶囊剂。
本发明中药组合物优选的片剂的制备方法如下：
将当归提取物、雄黄、青黛、冰片粉碎成细粉，加入乳糖，混匀，制粒，干燥，加入硬脂酸镁适量，混匀，压片，包衣，即得片剂。
本发明药物组合物的配伍机理如下：
本发明人认为白血病的病因主要是由“毒邪入血”所引起，这种邪毒进入机体后多能化热伤阴，因而又将这种毒邪称为火热之邪，也称之为火毒、热毒。邪毒在一定内因条件下入侵人体的脏腑经络，由表及里，或毒自内而生，内外合毒。如果邪毒量少力弱则起病缓，即有一个潜伏期，或病程较长。邪毒蕴积于内，日久化热，耗气伤阴，因而患者早期常表现为气阴耗伤的证候，临床表现为气阴两虚型，为早期或轻型患者；邪毒入里，伤及气血，出现气血双亏证候，属气血两虚型；毒邪进一步深入，侵入营血，攻注骨髓、肝脾及三焦，使阴阳失调，致造血器官功能障碍，引起白血病细胞显著增生的现象，出现壮热、烦渴、衄血、发斑等热毒炽盛表现。若邪毒内陷心包则出现神昏谵语等证候，如不及时救治，出现气阴衰竭，病入膏肓，难以救治。此多在前两型基础上病情恶化而形成，也可因邪毒力很强，或者正气极虚，邪毒直接侵入营血，攻注骨髓，一发病即见热毒炽盛现象。邪毒内蕴，加之内伤七情，造成热灼浸液，血液黏稠，气机郁滞，终致气血瘀滞，热灼痰凝，气滞痰气凝结，则渐成癥积、瘰疬、恶核而见肝脾淋巴结肿大。
依据以上白血病的病因病程的分析，治疗白血病当以清热解毒为主，活血化瘀为辅。在本发明中药组合物中，各药物的作用机理如下：
雄黄：硫化物类矿物雄黄族雄黄，主含二硫化二砷(As2S2)。辛，温；有毒。归肝、大肠经。解毒杀虫，燥湿祛痰，截疟。用于痈肿疔疮，蛇虫咬伤，虫积腹痛，惊痫，疟疾。
青黛：爵床科植物马蓝Baphicacanthus cusia(Nees)Bremek.、蓼科植物蓼蓝Polygonum tinctorium Ait.或十字花科植物菘蓝Isatis indigoticaFort.的叶或茎叶经加工制得的干燥粉末或团块。咸，寒。归肝经。清热解毒，凉血，定惊。用于温毒发斑，血热吐衄，胸痛咳血，口疮，痄腮，喉痹，小儿惊痫。
当归：甘、辛，温。归肝、心、脾经。补血活血，调经止痛，润肠通便。用于血虚萎黄，眩晕心悸，月经不调，经闭痛经，虚寒腹痛，肠燥便秘，风湿痹痛，跌扑损伤，痈疽疮疡。
冰片：辛、苦，微寒。归心、脾、肺经。开窍醒神，清热止痛。用于热病神昏、痉厥，中风痰厥，气郁暴厥，中恶昏迷，目赤，口疮，咽喉肿痛，耳道流脓。
砷作为抗肿瘤药物在我国已有百年历史，如过去应用牛黄解毒片(含雄黄)及雄黄治疗慢性粒细胞白血病(CML)。70年代初期，我国率先用砷剂治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)，获得较高的临床缓解率。
雄黄的主要成分为硫化砷，研究发现其中治疗白血病的主要化合物为二硫化二砷(As2S2)。北京医科大学血液病研究所报告单用雄黄治疗急性早幼粒细胞白血病38例，其中6例为对多种药物耐药的复发病人，2例为ATRA及化疗药物部分耐药的复发病人，另30例为经ATRA治疗后达完全缓解病例，治疗方案为1000～1500mg·d-1，2～3周为一疗程，疗程间隔2～3周，总疗程2年半。结果经1～3疗程雄黄治疗后，8例部分或完全耐药的病人完全缓解，30例于完全缓解期接受雄黄治疗的病例，除3例因其它严重合并症或雄黄的副作用退出治疗外，其余27例均持续完全缓解，所有35例病人至1997年一直存活，3年实际生存率为100％。早在1981年周蔼祥等人已证明雄黄治疗白血病有效，完全缓解率72％，部分缓解28％，总有效率100％。1998年唐由君应用含雄黄的中成药六神丸、西黄丸、紫金锭治疗急慢性白血病获得一定疗效。1999年杨新中报告运用由雄黄等中药组方的纯中药制剂治疗急慢性白血病，疗效较好。此结果证实了雄黄对APL治疗的高效性及特异清除APL克隆至基因水平的作用。(雄黄等砷剂治疗白血病的机理及临床应用，解放军药学学报第19卷第2期)
目前研究证明诱导肿瘤细胞凋亡是雄黄抗肿瘤作用的一种比较明确而重要的机制，不同学者采用不同的恶性血液病细胞对其诱导肿瘤细胞凋亡的机制进行了深入研究。在细胞凋亡的分子生物学研究过程中，人们发现多种基因参与细胞凋亡的调控，其中bcl-2基因的作用备受关注。bcl-2的过度表达不仅可有效阻止包括代谢产物积累、自由基等诱发的细胞凋亡，而且能够抑制许多因素(如射线和癌基因)介导的细胞凋亡。一些研究发现：bcl-2基因家族蛋白表达水平的变化能显著改变肿瘤细胞株对化疗药物诱导凋亡的阻抗。(雄黄诱导白血病细胞凋亡的研究，现代肿瘤医学2006年1月第14卷第1期)
在本发明中药组合物中以雄黄作为君药，利用其“以毒攻毒”的特性，作为产生治疗效果的主要药物，青黛作为臣药取其清热、解毒、凉血的功效以配合和贯彻清热解毒的中医治疗原则，另外，当归活血，冰片开窍醒神共为佐使，四药合用共奏清热解毒、活血化瘀、止痛、凉血之功效。
本发明中药组合物具有清热、解毒、活血的作用，用于治疗各种急慢性白血病，如急性白血病、慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症、急性早幼粒细胞白血病等。
以下通过具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明：
具体的实施方式
实施例1：
雄黄0.08kg、青黛2kg、当归9kg、冰片0.2kg
当归加5倍量水，煎煮2小时，滤过，滤渣加入4倍量水，煎1小时，滤过，滤渣弃去，合并2次滤液，滤液减压浓缩至9L，加入乙醇使药液含醇浓度在70％，静置，滤过，浓缩至相对密度为1.30-1.35(50℃)的稠膏，减压干燥(60℃，-0.08Mpa)，即得当归提取物；
将18kg聚乙二醇4000和6kg聚乙二醇6000加热熔融，加入当归提取物、雄黄、青黛、冰片的细粉，混匀，60-80℃保温，滴入冷却的二甲硅油中，待滴丸冷却后取出，沥净并擦除二甲硅油，即得滴丸。
实施例2：
雄黄0.05kg、青黛2kg、当归12kg、冰片0.2kg
当归加5倍量水，煎煮2小时，滤过，滤渣加入4倍量水，煎1小时，滤过，滤渣弃去，合并2次滤液，滤液减压浓缩至12L，加入乙醇使药液含醇浓度在70％，静置，滤过，浓缩至相对密度为1.30-1.35(50℃)的稠膏，减压干燥(60℃，-0.08Mpa)，即得当归提取物；
将当归提取物、雄黄、青黛、冰片粉碎成细粉，加入适量蜂蜜，混和均匀，制丸剂。
实施例3：
雄黄0.1kg、青黛2kg、当归9kg、冰片0.2kg
当归加水浸泡4小时，用挥发油提取器以石油醚(30，-60℃)为溶剂，水蒸馏6小时后，收集挥发油，60℃挥干石油醚，得淡黄色当归挥发油，beta-环糊精包合，制备成beta-环糊精包合物；将蒸馏后残液滤过，得滤液1，药渣再加70％乙醇，回流提取1.5小时后滤过，得滤液2，合并2次滤液，浓缩至相对密度为1.30-1.35(50℃)的稠膏，减压干燥(60℃，-0.08Mpa)，粉碎，加入beta-环糊精包合物，即得当归提取物；
将当归提取物、雄黄、青黛、冰片粉碎成细粉，加入10kg乳糖，混匀，用95％乙醇制粒，干燥，装入胶囊，即得胶囊剂。
实施例4：
雄黄0.08kg、青黛3kg、当归9kg、冰片0.3kg
当归加5倍量水，煎煮2小时，滤过，滤渣加入4倍量水，煎1小时，滤过，滤渣弃去，合并2次滤液，滤液减压浓缩至9L，加入乙醇使药液含醇浓度在70％，静置，滤过，浓缩至相对密度为1.30-1.35(50℃)的稠膏，减压干燥(60℃，-0.08Mpa)，即得当归提取物；
将当归提取物、雄黄、青黛、冰片粉碎成细粉，干燥，装入胶囊，即得胶囊剂。
实施例5：
雄黄0.08kg、青黛1.5kg、当归6kg、冰片0.15kg
当归加水浸泡4小时，用挥发油提取器以石油醚(30，-60℃)为溶剂，水蒸馏6小时后，收集挥发油，60℃挥干石油醚，得淡黄色当归挥发油，用beta-环糊精包合，制备成beta-环糊精包合物；将蒸馏后残液滤过，得滤液1，药渣再加70％乙醇，回流提取1.5小时后滤过，得滤液2，合并2次滤液，浓缩至相对密度为1.30-1.35(50℃)的稠膏，减压干燥(60℃，-0.08Mpa)，粉碎，加入beta-环糊精包合物，即得当归提取物；
将当归提取物、雄黄、青黛、冰片粉碎成细粉，加入6kg乳糖，混匀，制粒，干燥，加入硬脂酸镁适量，混匀，压片，包衣，即得片剂。
通过以下实验来进一步阐述本发明所述药物组合物的有益效果：
本发明药物组合物对可移植性小鼠淋巴细胞白血病(L7212)治疗作用的实验研究
1材料与方法
1.1实验材料本发明药液、碘化丙啶、大鼠抗小鼠单克隆抗体(anti-CD3-PE、anti-CD4-FITC、anti-CD8-FITC)。615近交系小鼠，鼠龄5-8周，体重18-24g，雌雄各半。流式细胞仪。L7212白血病细胞株。
1.2实验方法按文献(褚建新，齐淑玲，雷健玲，等.可移植性小鼠白血病模型(L7212)的建立及其生物学特性[J].中华肿瘤杂志，1981，3(4)：287)方法复制L7212白血病模型。将小鼠随机分为正常对照组、正常给药组(中药高剂量)、L7212模型组、L7212中药1组(中药高剂量)和L7212中药2组(中药中剂量)。正常给药组、L7212中药1组和L7212中药2组予本发明药液(高剂量中药为含生药8g/ml的药液，中剂量中药为含生药4g/ml的药液)0.3ml/只灌胃，正常对照组和L7212模型组予等体积生理盐水。各组均于接种次日灌胃给药，每日1次，共给药7d。
1.3观测指标(1)生存时间用公式(T-C)/C×100％计算，生命延长率T为治疗组平均生存天数，C为对照组平均生存天数。(2)外周血白细胞总数及分类计数，骨髓有核细胞涂片分类计数，肝、脾、胸腺指数。(3)残留白血病细胞的测定按文献(郑德先，吴克复，褚建新.现代实验血液学研究方法与技术[M].北京：北京医科大学·中国协和医科大学联合出版社，1999，510)方法，采用生物移植试验检测。(4)细胞增殖周期按文献(姜泊，张亚历，周殿元.分子生物学常用实验方法[M].北京：人民军医出版社1996，118)方法，以流式细胞仪检测。T淋巴细胞亚群以流式细胞仪检测。
1.4统计学处理计量资料以(x±S)表示，采用t检验。
2结果
2.1各组生存时间比较见表1。结果示第1、2批实验中，L7212中药组较L7212模型组生存时间均有所延长(p＜0.05或0.01)，L7212中药1、2组组间生存时间差异无显著性(p＞0.05)。
表1 各组生存时间比较(d，x±S)
与L7212模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01。下同。
2.2各组外周血白细胞计数及分类比较见表2。结果示L7212模型组和L7212中药1组小鼠外周血白细胞计数在接种后第5日已明显升高，但差异无显著性(p＞0.05)。接种后第8日，两组小鼠外周血涂片中已可见大量白血病细胞，而L7212中药1组白血病细胞百分比低于L7212模型组(p＜0.01)。
表2 各组外周血白细胞计数及白血病细胞百分比比较(x±S)
2.3各组骨髓白血病细胞百分比比较见表3。接种后第5日，小鼠骨髓中已出现少量白血病细胞，但两组结果相近(p＞0.05)。接种后第8日，L7212中药1组小鼠骨髓中白血病细胞百分比明显低于L7212模型组，但由于观察例数少，未作统计。
表3 各组骨髓白血病细胞百分比比较(％，x±S)
2.4各组肝脏、脾脏、胸腺指数比较L7212模型组和L7212中药1组接种后第5日，活杀的小鼠(6只)及白血病死亡小鼠(4批，共44只)的肝脏、脾脏指数相近(p＞0.05)。正常给药组小鼠的脾脏、胸腺指数相近(p＞0.05)。
2.5各组残留白血病细胞测定结果比较L7212模型组与L7212中药1、2组小鼠生存时间比较无统计学意义。
2.6各组骨髓细胞增殖周期分布比较见表4。结果显示L7212中药1组小鼠骨髓细胞G2/G1比值较正常对照组和L7212模型组降低。
表4 各组骨髓细胞增殖周期分布比较(x±S)
与正常对照组比较，△P＜0.05。下同
2.7各组脾脏、T淋巴细胞亚群比较见表5。L7212组小鼠脾脏T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+百分比多低于正常组，而CD4+/CD8+比值多低于未给药组(正常对照组、L7212模型组)。
表5 各组脾脏、T淋巴细胞亚群比较(x±S)
3结论
本实验表明，本发明药物组合物对白血病有很好的疗效，因其可延长L7212白血病小鼠的生存时间，降低其外周血中白血病细胞的比例，故该方对治疗白血病是客观有效的。
Claims (10)
1、一种用于治疗白血病的中药组合物，其特征在于，它是由下列重量份的原料药制成：雄黄0.05-0.1份、青黛1.5-3份、当归6-12份、冰片0.15-0.3份。
2、根据权利要求1的中药组合物，其特征在于，它是由下列重量份的原料药制成：雄黄0.08份、青黛2份、当归9份、冰片0.2份。
3、权利要求1或2所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，该方法为：将当归水提取或不同浓度乙醇提取或水提醇沉，或水蒸汽蒸馏提取挥发油药渣水提取或不同浓度乙醇提取或水提醇沉，还可进一步用大孔树脂柱纯化，得到当归提取物；将当归提取物、雄黄、青黛、冰片混合，加入适量辅料，制备成胶囊剂、片剂、丸剂、滴丸剂。
4、根据权利要求3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，当归提取物的制备方法为：当归加5倍量水，煎煮2小时，滤过，滤渣加入4倍量水，煎1小时，滤过，滤渣弃去，合并2次滤液，滤液减压浓缩至药液体积(L)与药材重量(Kg)比为1∶0.9-1.1，加入乙醇使药液含醇浓度在70％，静置，滤过，浓缩至相对密度为1.30-1.35(50℃)的稠膏，减压干燥(60℃，-0.08Mpa)，即得当归提取物。
5、根据权利要求3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，当归提取物的制备方法为：当归加水浸泡4小时，用挥发油提取器以石油醚(30，-60℃)为溶剂，水蒸馏6小时后，收集挥发油，60℃挥干石油醚，得淡黄色当归挥发油，用beta-环糊精包合，制备成beta-环糊精包合物；将蒸馏后残液滤过，得滤液1，药渣再加70％乙醇，回流提取1.5小时后滤过，得滤液2，合并2次滤液，浓缩至相对密度为1.30-1.35(50℃)的稠膏，减压干燥(60℃，-0.08Mpa)，粉碎，加入beta-环糊精包合物，即得当归提取物。
6、根据权利要求3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，滴丸剂的制备方法为：将聚乙二醇4000∶聚乙二醇6000按3∶1的比例加热熔融，加入当归提取物、雄黄、青黛、冰片的细粉，混匀，60-80℃保温，滴入冷却的二甲硅油中，待滴丸冷却后取出，沥净并擦除二甲硅油，即得滴丸。
7、根据权利要求3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，丸剂的制备方法为：将当归提取物、雄黄、青黛、冰片粉碎成细粉，加入适量蜂蜜，混和均匀，制丸剂。
8、根据权利要求3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，胶囊剂的制备方法为：将当归提取物、雄黄、青黛、冰片粉碎成细粉，加入乳糖，混匀，用95％乙醇制粒，干燥，装入胶囊，即得胶囊剂。
9、根据权利要求3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，胶囊剂的制备方法为：将当归提取物、雄黄、青黛、冰片粉碎成细粉，干燥，装入胶囊，即得胶囊剂。
10、根据权利要求3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，片剂的制备方法为：将当归提取物、雄黄、青黛、冰片粉碎成细粉，加入乳糖，混匀，制粒，干燥，加入硬脂酸镁适量，混匀，压片，包衣，即得片剂。
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