CN104474135B - 一种对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种疗效好、见效快且无毒副作用的对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物，发明人在中医临床和药物研究几十年，治疗患者高达30余万人次基础上，发明了的口服药物组合物。本发明所述药物组合物包括以下重量百分比的组分：枳椇子提取物10‑50%、丹参提取物10‑50%、葛根提取物10‑40%、茶多酚10‑30%。本发明与现有的其他制剂相比，具有以下的优点，本发明的药物组合物为不含毒性药材的纯中药制剂，具有疗效明显、造价低、疗效高、见效快、无毒副作用、可长期服用的特点。

Description

一种对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物

技术领域

本发明涉及中药领域，特别是一种对化学性肝损伤具有辅助保护功能的中药制剂。

背景技术

肝病时肝功能有不同程度的损害，其解毒、排泄功能及贮备和再生能力降低，肝血流量减少，各种进入肝脏的药物使代谢负荷加重，从而发生内环境紊乱，进而造成肝损伤。肝损伤是各种肝脏疾病的病变结果，近年来国内不少学者在现代医学对肝损伤的发生因素及病理机制，做了大量研究，在抗药物所致肝损伤的治疗方面认为并无特异性药物，多采用休息、加强营养、补充维生素和对症治疗等，严重者甚至被迫终止用药。

肝损伤是临床常见的危害人类健康的疾病，肝损伤涉及的病理因素比较广泛，涉及许多因素，如病毒、生物、药物、理化、酒精等，都可以导致肝损伤。化学性肝损伤，主要是指来自工作生活环境、食物、药物及大量饮酒等有害化学物质所致的肝损伤。作为人体的重要解毒器官的肝脏，具有肝动脉和肝静脉双重血液供应。化学物质可通过胃肠道门静脉或体循环进入肝脏进行转化，因此肝脏容易受到化学物中的毒性物质损害。大自然和人类工业生产过程中均存在一些对肝脏有毒性的物质，称为″亲肝毒物″，这些毒物在人群中普遍易感，潜伏期短，病变的过程与感染的剂量直接相关，可引起肝脏不同程度的肝细胞坏死、脂肪变形、肝硬化和肝癌。

随着社会的发展，肝损伤的人越来越多，对肝损伤辅助保护的保健食品有着很大的适应人群。历代医书《黄帝内经》、《神农本草经》、《千金方》、《本草纲目》、《名医别录》等均记载了护肝的中草药。近代更出现了各种护肝方剂。目前，市场上常用的保健药物，大多数吸收率不高，辅助效果极微，且副作用较多，缺乏营养。中国专利（申请号90105366，公开号1058907A）报道了一种解酒保肝的中药口服液，制作方法采用传统中药煎煮法，有效成分不清，作用机理不明，未提供足够的药理学及病理学解释。同时未进行相关的动物或人体实验，毒理危害性不明确。中国专利（申请号96103872，公开号1164397），中国专利（申请号995100420，公开号1189368）所提供的保肝解酒制剂也存在类似的问题。目前肝保健品在产品功效上很少将“化学性肝损伤”作为唯一以及第一功效作为诉求；而是大都伴以1-2个其他大类别的功能诉求，如提高免疫力、抗疲劳等。如“昂立多邦”，主打功能是抗疲劳，其次才是保肝脏。另一个影响较大的“海王经尊”，其产品功效申请虽然为“针对化学性肝损伤”，但是其产品沟通很多消费者心目中认为它是属于“解酒”的产品。本药物组合物（陆圣康源牌今舒胶囊）健脾利湿、上下分消、活血通经、化瘀通络、发表解肌、升阳五种成分各具有不同的辅助保护化学性肝损伤功能，可协同发挥增强保护化学性肝损伤作用。本品无毒副作用，为化学性肝损伤者提供了一个安全、有效、可靠、价廉的保健食品，和其他同类保健品相比，具有一定的综合优势。

发明内容

为了克服现有技术的不足, 本发明提供了一种疗效好、见效快且无毒副作用的对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物。发明人在中医临床和药物研究几十年，治疗患者高达30 余万人次基础上，发明的口服药物组合物，主要针对化学性肝损伤人群，以现代医学理论为基础，精选5味对化学性肝损伤具有辅助保护功能的原料组方，经现代工艺制成对化学性肝损伤具有辅助保护功能的保健品,对肝病进行基本保健和修复，促进细胞再生，阻滞肝纤维化。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物，其特征在于包括以下重量百分比的组分：枳椇子提取物10-50%、丹参提取物10-50%、葛根提取物10-40%、绿茶提取物10-30%。

作为一种优选的技术方案，所述一种对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物，还包括重量百分比为5-20%的五味子提取物。

所述枳椇子提取物制备方法：将枳椇子淘洗、烘干，粉碎制成小块，粉碎后的枳椇子称重，放入提取罐内，回流状态下提取；第一次回流提取时，在提取罐内加入水，加水量是枳椇子重量的8—10倍（W/W），加热至沸后开始计时，回流提取2小时；待第一次回流提取完成后，第二次回流提取操作同第一次；待第二次回流提取完成后，第三次加水量与前两次操作相同（W/W），从加热至沸后开始计时，回流提取1.5小时；合并三次回流提取所得滤液，将滤液在70—80℃的温度值范围内减压浓缩，得到比重为1.0-1.1浓缩液；喷雾干燥，粉碎,过80目筛，筛分后得所述枳椇子提取物。

所述枳椇子提取物制备工艺关键技术要点：枳椇子提取物是由药材枳椇子提取所得。根据枳椇子药材特性，制备采用 “回流式水提工艺”。溶媒介质水，可在回流状态下进行提取，防止枳椇子所含有效成分高温氧化失活，保证提取内容物的稳定性，得到较高提取率。为防止所得提取物皂苷、糖苷、黄酮类等有效物质潮解，采用“喷雾干燥”工艺。

所述丹参提取物的制备方法：将药材丹参洗净、烘干，粉碎制成小块，粉碎后的丹参称重后放入提取罐内，加入含量85%的乙醇，在回流状态下乙醇提取三次；第一次回流提取时，乙醇加入量是丹参重量的8-10倍（W/W），从加热至沸后开始计时，回流提取2小时；待第一次回流提取完成后，第二次操作同上；待第二次回流提取完成后，第三次加入同含量规格、相同重量的乙醇，回流提取1.5小时，合并三次回流提取所得滤液并过滤，在70—80℃温度值范围内减压浓缩，得到比重为1.0-1.1浓缩液，喷雾干燥，粉碎，过80目筛，筛分后得所述丹参提取物。

所述丹参提取物制备工艺关键技术要点：丹参提取物是由药材丹参提取所得。根据丹参药材特性，丹参酮ⅡA (TanShinone IIA，TSh II A)是本药物提取所得的一种活性物质。制备时采用“回流式醇提工艺”，可有效地保证丹参有效成分在溶媒介质乙醇中充分溶出后提取，可保证药物有效成分稳定性，得到较高提取率。采用喷雾干燥工艺，除乙醇残留。

所述葛根提取物的制备方法：将药材葛根淘洗、烘干，粉碎制成小块，粉碎后的葛根称重放入提取罐内，回流状态下水提取三次；第一次回流提取时，在提取罐内加入水，加水量是葛根重量的10倍（W/W），加热至沸后开始计时，回流提取2小时；待第一次回流提取完成后，第二次回流提取操作同第一次；待第二次回流提取完成后，第三次加水量是葛根重量的8倍（W/W），从加热至沸后开始计时，回流提取1.5小时；合并三次回流提取所得滤液，将滤液在70℃下减压浓缩，得到比重为1.0-1.1浓缩液；喷雾干燥，粉碎,过80目筛，筛分后得所述葛根提取物。

所述葛根提取物制备工艺关键技术要点：葛根提取物是由药材葛根提取所得。根据葛根药材特性，制备采用 “回流式水提工艺”。溶媒介质水，可在回流状态下进行提取，防止葛根所含有效成分高温氧化失活，保证提取内容物的稳定性，得到较高提取率。为防止所得提取物葛根素等有效物质吸潮潮解，采用“喷雾干燥”工艺。

所述绿茶提取物制备方法：绿茶净选后，粉碎，放入提取罐内，加水量是粉碎绿茶重量的10倍量（W/W），微沸状态下2次水提取，每次提取1.5小时，得到绿茶粗滤液；将提取液超滤，经聚酰胺柱层析，用含量75%乙醇溶液洗脱，将乙醇洗脱液在50~70℃温度值范围内，真空度0.04~0.08MPa条件下浓缩，再将浓缩液过滤，在进口温度150~165℃，出风70-80℃的条件下进行喷雾干燥除溶剂残留，粉碎，过80目筛，筛分后得所述绿茶提取物（茶多酚）。

所述五味子提取物的制备方法：将药材五味子淘洗、烘干，粉碎制成小块，将粉碎的五味子称重后放入提取罐内，乙醇提取三次；第一次醇提时加入含量65%乙醇，加入量是五味子重量的8倍，提取2小时；第二次醇提时加入含量65%乙醇，加入量是五味子初始重量的7倍，提取2小时；第三次醇提时加入含量65%乙醇，加入量是五味子初始重量的6倍，提取1.5小时；回收乙醇，合并三次提取所得滤液，将滤液在75—80℃温度值范围内减压浓缩，得到比重为1.0-1.1浓缩液，喷雾干燥，过80目筛，筛分后得所述五味子提取物。

所述五味子提取物制备工艺关键技术要点：五味子提取物是由药材五味子提取所得。根据五味子药材特性，五味子提取物制备采用“醇提工艺”，可有效地保证五味子天然药物活性成分在溶媒介质乙醇中充分溶出后，进行醇提取。“醇提工艺”可保证药物提取有效成分的稳定性，得到较高提取率。为防止所得提取物含多糖、木脂素类（五味子甲素、乙素、丙素、醇甲、醇乙、酯甲和酯乙等）有效物质吸潮潮解，采用“喷雾干燥”工艺。

作为一种优选的技术方案，一种对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物，包括以下重量百分比的组分：枳椇子提取物20-30%、丹参提取物20-30%、葛根提取物15-25%、绿茶提取物10-20%、五味子提取物5-10%。

作为一种优选的技术方案，本发明所述一种对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物为口服制剂，所述口服制剂为医学上可接受的各种剂型包括胶囊剂、片剂、颗粒剂或口服液。

本发明所述的药物组合物可应用在制备对化学性肝损伤有辅助保护功能的保健品中。

本发明制剂标志性成份含量标准葛根素按照《GB-T 22251-2008 保健食品中葛根素的测定》要求，葛根素≥1.6g/100g ; 茶多酚按照《GB/T8313-2008茶叶中提取茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》茶多酚≥8.2g/100g。

本发明对化学性肝损伤有辅助保护功能纯中药制剂的口服剂量为：2-3g，30 天一个疗程。

本发明处方中以有止渴除烦，消湿热，解酒毒功能的枳椇子提取物；活血调经，祛瘀止痛，凉血消痈，清心除烦，养血安神丹参提取物为君药；辅以解表退热，生津，透疹，升阳止泻葛根提取物；有极强的清除有害自由基，阻止脂质过氧化的作用茶多酚；调肝固肾、收

敛固涩，益气生津，补肾宁心的五味子提取物；诸味配伍，协同发挥保肝护肝之功效，对化学性肝损伤有辅助保护作用。本处方的枳椇子提取物、丹参提取物、葛根提取物、五味子提取物分别由枳椇子、丹参、葛根、五味子提取所得，此四种药材已被列入《卫生部关于进一步规范保健食品原料管理通知》卫法监发[2002]51号文件中“既是食品又是药品的物品名单”及“可用于保健食品的物品名单”，配伍和用量都兼顾了产品的功能性和安全性，配方科学合理，无毒副作用，可长期服用。

肝为将军之官，主谋虑。中医认为：肝与胆相为表里，开窍于目，肝主藏血，肝主疏泄，有贮藏和调节血液的功能。《素问·五脏生成》：“肝之合筋也，其荣爪也”。本方中，枳椇子性平，味甘，入心经、脾经，止渴除烦，消湿热，解酒毒，现代研究具有抗脂质过氧化和保护肝损伤作用。能减轻纤维化和肝细胞的变性坏死及炎性细胞浸润，使线粒体膜及时恢复，减少内质网扩张，促进细胞再生，阻滞肝纤维化的发生发展。

丹参味苦，性微寒。归心、肝经 具活血行气，通经止痛之功。现代医学认为，丹参具有扩张冠状动脉，增加冠状动脉血流量，防止心缺血和心肌梗死，加快微循环血流，促进毛细血管网开放，抑制心肌收缩，减少能量消耗，扩张血管，降低胆固醇、血脂，抑血，激活纤溶，稳定红细胞膜，提高缺氧耐受力，增加肝脏血量，保护肝损伤细胞，抗肝纤维化，抑制中枢神经系统以及消抗菌等作用。

葛根性凉、气平、味甘，主入脾、胃经，具清热、降火、排毒诸功效，主消食，解诸毒，治天行上。现代研究发现葛根对慢性肝损伤动物模型具有明显的保护作用，其机制与保护肝细胞膜、清除自由基、抗脂质过氧化和抗纤维化等作用有关。

茶多酚（Tea Polyphenols，缩写TP）是从绿茶中提取的全天然抗氧化食品，具有抗氧化能力强，无毒副作用，无异味等特点。茶多酚具有很强的抗氧化作用，其抗氧化能力是VC 的5-10 倍，且用量少：0.01-0.03％即可起作用，而无合成物的潜在毒副作用。早期研究茶多酚可应用在乙醇性肝损伤中，降低内毒素血症发生，对乙醇性肝损伤可能起到一定的保护作用。2009年-2012年本人做为此国家科技部国际合作专项项目负责人，承担了遵义陆圣康源科技开发有限责任公司公司与悉尼科技大学医学分子生物学系糖尿病研究室项目研究，使用贵州湄潭产大叶种属绿茶提取物茶多酚，采用国际先进技术进行了《茶多酚对Ⅱ型糖尿病胰岛功能及并发症作用机理研究》（国家科技部国际科技合作项目编号：2011DFA31160），系统完整建立了茶多酚与降血糖、降血脂、减肥、抗氧化、抗肿瘤的研究体系和完全不同的降糖作用及机理的体内实验、体外实验，选用了特殊遗传基因糖尿病肥胖大鼠(ZUCKER)模型，此种动物模型的实验研究尚属先例。通过对具有糖尿病遗传基因大鼠动物试验，明确了茶多酚在不同年龄段情况下对特殊基因肥胖型、遗传型糖尿病脂肪(Zucker)大鼠的胰脏、肝脏、心肌以及肾组织有保护作用；明确了茶多酚对糖尿病遗传基因大鼠（Zucker）的胰岛刺激葡萄糖胰岛素分泌物作用和对胰岛β细胞的保护作用；明确了茶多酚对肥胖相关的非酒精脂肪肝(NAFLD)有保护细胞功能和预防作用。结论：茶多酚（200mg/Kg）可削弱高血脂，减少胰岛、肝脏、心脏以及肾脏中脂肪沉积，明显改善肥胖高血脂引起的肝功能异常及脂肪肝，预防肥胖相关的非酒精脂肪肝(NAFLD)。经高效液相-质谱层析联项（LC-MS）对此茶多酚有效成分分析鉴定：贵州湄潭大叶种属绿茶提取的天然茶多酚含量高达到99%以上，其中体现主要活性指标成分的表没食子儿茶素没食子酸酯-Epigallocatechin gallate（EGCG）含量高达70%，居国内外茶叶提取茶多酚、EGCG含量之首。不同于国内外很多文献报道所言天然茶多酚中的EGCG 含量低，高纯度的只能靠化学合 成（由美国Sigma 公司合成）。其茶多酚、EGCG天然有效成分含量高，抗氧化能力强，在本发明的药物组合物配方中作为主要有效成分之一，显示出明显的对化学性肝损伤具有辅助保护功能作用。

五味子性温，味酸、甘；归肺、心、肾经，收敛固涩，益气生津，补肾宁心。现代研究已发现五味子对肝脏的作用具有明显的保护作用。包天桐，刘耕陶等用四氯化碳、硫代乙酸胺和乙炔雌二醇环戊醚引起小鼠肝损伤为模型，发现五味子的醇提物和从五味子中分离出

的上述五味子甲素、乙素、丙素、醇甲、醇乙、酯甲和酯乙均有不同程度的降低因化学物质引起的血清转氨酶升高作用，能明显减轻肝小叶的坏死，作者推测，五味子对四氯化碳损伤大鼠肝脏的保护作用可能是通过肝细胞内蛋白质合成代谢实现的。用五味子醇提物，预先24h

给药能显著降低大剂量扑热息痛肝中毒所致的小鼠死亡率，并防止肝内谷眈甘肽的耗竭，增强肝微粒体代谢扑热息痛的速度，血中扑热息痛含量下降。北五味子多糖可显著减低四氯化碳中毒小鼠肝中丙二醛的含量，抑制小鼠肝脏脂质过氧化反应，促进正常小鼠的胆汁分泌和部分肝切除后肝的再生。五味子单味或与其他中药配伍用于急、慢性肝损伤的治疗，可以促进损伤肝细胞的修复、降低血清谷丙转氨酶(ALT) 活性。五味子醇提取液对大白鼠慢性肝损伤有一定的保护作用，对心血管系统五味子有扩血管作用，并促进脾免疫功能，而五味子醇提取液能增强肾上腺皮质激素的免疫抑制作用，能对抗同种异体组织移植排斥反应，延缓衰老作用。

纵观本发明诸药配伍（陆圣康源牌今舒胶囊）由枳椇子提取物、丹参提取物、葛根提取物、茶多酚（绿茶提取物）、五味子提取物组成。枳椇子止渴除烦，处膈上热，润五脏，利小便，加快有害物质代谢。丹参祛瘀止痛、活血通经、清心除烦，化瘀通络是治疗肝硬化的主要方法之一；“饮食所伤”是中医学重要的病因学说，调理脾胃运化功能的方法是酒精性肝病长期临床治疗实践中常用的基本治则。枳椇子止渴除烦，消湿热，解酒毒。葛根发表解肌、升阳透疹、解热生津，鼓舞脾胃阳气，使得脾升胃降，各司其职，解酒止泻。五味子是保肝降酶的常用药材之一。茶多酚具有清除自由基和抗氧化作用等重要的生物活性，对肝酒精性肝损伤早期应用可能会减慢或阻断酒精性肝损伤的发生发展，对非酒精性脂肪肝(NAFLD)有保护细胞功能和预防作用。五药相配健脾利湿，上下分消共奏健脾保肝护肝之功效。

安全性评价证明：

结论：

（1）本发明制剂（陆圣康源牌今舒胶囊）对两种性别的大、小鼠经口急性毒性LD₅₀均大于15.0g/kg·BW,根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）急性毒性分级标准，陆圣康源牌今舒胶囊属无毒级。

（2）三项遗传毒性试验（Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠睾丸染色体畸变试验）结果均为阴性。

急性毒性试验：

由表1、2可见，分别以15.0g/kg·BW的剂量灌胃两种性别的大、小鼠，观察14天，实验期间未见明显的中毒表现，动物无死亡，尸检中各主要脏器亦未见异常。受试物对两种性别的大、小鼠的经口急性毒性LD₅₀均大于15.0g/kg·BW。

表1陆圣康源牌今舒胶囊对小鼠的急性毒性()

表2陆圣康源牌今舒胶囊对大鼠的急性毒性()

遗传毒性试验：

Ames试验：由表3、4可见，样品各剂量组回变菌落数均未超过空白对照菌落数2倍，亦无剂量-反应关系。对鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四株试验菌株，各剂量组在加与不加S9时，回变菌落数均未超过空白对照菌落数的2倍，亦无剂量-反应关系，试验结果为阴性。

表3陆圣康源牌今舒胶囊Ames试验结果(第一次实验)()

注：以上结果为三个平皿回变菌落数的均数±标准差。

表4陆圣康源牌今舒胶囊Ames试验结果(重复实验)()

注：以上结果为三个平皿回变菌落数的均数±标准差。

小鼠骨髓细胞微核试验：

由表5可见，样品各剂量组微核率与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),而环磷酰胺组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。陆圣康源牌今舒胶囊小鼠骨髓细胞微核试验结果为阴性。

表5陆圣康源牌今舒胶囊对小鼠骨髓微核发生率的影响()

*与阴性对照组比较，P<0.05

小鼠睾丸染色体畸变试验：

由表6可见，样品各剂量组小鼠睾丸染色体畸变发生率与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)，而丝裂霉素阳性对照组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。因此，未见陆圣康源牌今舒胶囊对小鼠睾丸染色体畸变产生影响。

表6陆圣康源牌今舒胶囊对小鼠睾丸染色体畸变发生率的影响()

注：与阴性对照组比较，P<0.05

30天喂养试验证明：

结论：

(1)以1.00、2.00、4.00g/kg·BW(分别相当于人拟用剂量的25倍、50倍、100倍)的陆圣康源牌今舒胶囊内容物掺入饲料中喂饲大鼠30天，在试验期间，各组动物体重、增重、食物利用率及脏体比值与对照组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)；

(2)血液学指标、生化指标在本检测单位正常值范围内；大体解剖未见异常，未发现与受试样品相关的病理组织学改变。

(3)本品经大鼠30天喂养试验未见明显的毒性作用。

由表7可见，以1.00、2.00、4.00g/kg·BW的受试物掺入饲料中喂饲30天，动物未出现拒食现象。各组动物总食物利用率、体重和增重与对照组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。

表7陆圣康源牌今舒胶囊受试物对大鼠总食物利用率的影响(均值±标准差)

由表8和表9可见，实验末期血液学的各项指标均在本检测单位正常值范围内，各剂量组的各项指标与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。

表8陆圣康源牌今舒胶囊受试物对大鼠血液学指标的影响(均值±标准差)

表9陆圣康源牌今舒胶囊受试物对大鼠白细胞分类的影响(％，均值±标准差)

由表10及续表10可见，实验末期试验动物各项生化指标均在本检测单位正常值范围内，仅雄性动物中，中剂量组天门冬氨酸基转移 酶(AST)低于对照组，且差异有统计学意义(P<0.05)；雌性动物中，低剂量组天门冬氨酸氨基转移酶(AST)高于对照组，且差异有统计学意义(P<0.05),但无生物学意义；其余各项指标与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。

表10陆圣康源牌今舒胶囊受试物对大鼠生化指标的影响(均值±标准差)

*与对照组比较，P<0.05

续表10陆圣康源牌今舒胶囊受试物对大鼠生化指标的影响(均值±标准差)

由表11和12大体解剖观察未发现异常。各组动物脏器重量及脏体比值与对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

表11陆圣康源牌今舒胶囊受试物对大鼠脏器重量的影响(g，均值±标准差)

表12陆圣康源牌今舒胶囊受试物对大鼠脏体比的影响(％，均值±标准差)

病理组织学检查：

各主要脏器取高剂量组20只，对照组20只，均为雌雄各半。

肝脏：被膜完整，无明显纤维组织增生。肝小叶存在，间质未见结缔组织增生。肝中央静脉、肝小动、静脉未见异常。部分动物汇管区可见少量小圆形炎细胞浸润对照组3/20（雄2只，雌1只），高剂量组2/20（雄1只，雌1只）。两组比较无明显差别。

脾脏：两组动物脾脏包膜完整，红、白髓结构清晰，红髓脾窦红细胞充盈，白髓生发中心活跃及脾小结中央动脉管壁未见增厚或变性。两组比较无明显差别。

肾脏：两组动物肾脏包膜完整，皮髓质结构清楚，肾小球体积未见缩小或扩大，数目未见减少。肾小管上皮细胞未见变性、坏死或脱落，官腔中未见管型及结石，肾见质未见纤维组织增生。个别动物肾间质可见少量小圆形炎细胞浸润，对照组2/20（雄1只，雌1只），高剂量组2/20（雄1只，雌1只）。两组比较无明显差别。

胃：前胃角化良好，胃粘膜完整，未见出血、糜烂、溃疡及脱落，腺体未见增生、化生或萎缩，固有层、肌层及浆膜层未见异常。前后胃交界处无明显异常。

十二指肠：黏膜完整，未见出血、糜烂、溃疡及脱落，固有膜肠腺丰富，未见增生、化生或萎缩，固有层、肌层及浆膜未见异常。两组比较无明显差别。

睾丸：睾丸被膜完整，曲精细管可见各级生精细胞存在且分布正常，腔中可见发育良好的精子细胞及精子，间质未见显著改变。两组比较无明显差别。

卵巢：卵巢可见不同生长发育阶段的卵泡细胞及黄体、白体，均未见异常。两组比较无明显差别。

通过镜下观察高剂量组与对照组比较，未发现与样品相关的病理组织学改变（表13）看，故未对中、低剂量组进行组织病理学检查。

表13 陆圣康源牌今舒胶囊受试物对大鼠主要脏器病理组织的影响

对化学性肝损伤有辅助保护作用动物试验证明：

结论：

(1)以200mg/kgBW、400 mg/kgBW、800 mg/kgBW剂量的陆圣康源牌今舒胶囊灌胃小鼠30天，各组动物生长活动良好，各组动物增重与模型对照组相比，差异无统计学意义（P>0.05）;

(2)高剂量组肝匀浆中MDA浓度及TG浓度均低于模型对照组，高剂量组肝匀浆中GSH浓度高于模型对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；高剂量组的脂肪变性评分低于模型对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。

(3)根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）辅助保护化学性肝损伤功能结果判定标准，提示陆圣康源牌今舒胶囊具有对动物酒精性肝损伤辅助性保护作用功能。

由表14可见，以不同剂量的陆圣康源牌今舒胶囊内容物灌胃小鼠30天，各组动物生长、活动正常。各组动物增重与模型对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。

表14 陆圣康源牌今舒胶囊对小鼠体重的影响（g，均值±标准差）

由表15可见，MDA、GSH、TG含量空白对照组与模型对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）,表明模型建立成功。以不同剂量的陆圣康源牌今舒胶囊内容物灌胃小鼠30天，高剂量组肝匀浆中MDA浓度及TG浓度均低于模型对照组，高剂量组肝匀浆中GSH浓度高于模型对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。

表15陆圣康源牌今舒胶囊对MDA、GSH、TG含量的影响（均值±标准差）

由表16可见，观察脂滴在肝脏的分布、范围和面积。模型对照组脂肪变性评分高于空白对照组，且差异有统计学意义（P<0.05），表明模型建立成功。以不同剂量的陆圣康源牌今舒胶囊内容物灌胃小鼠30天，高剂量组的脂肪变性评分低于模型对照组，且差异有统计学意义（P<0.05）。

表16 陆圣康源牌今舒胶囊对小鼠肝脏的影响（均值±标准差）

剂量组(mg/kg.Bw)	动物数(只)	脂肪变性评分	P值
				空白对照组	10	0.24±0.06	0.000
模型对照组	10	2.83±0.18	---
				200	10	2.74±0.11	0.079
400	10	2.80±0.08	0.517
				800	10	2.66±0.08	0.001

本发明的药物组合物对动物的急性肝损伤、慢性肝损伤、酒精性肝损伤具有一定的治疗作用，通过陆圣康源牌今舒胶囊的安全性评价证明属无毒级，说明本发明的药物组合物是安全有效的。

本发明与现有的其它口服制剂相比，具有疗效明显、造价低、疗效高、见效快、无毒副作用，可长期服用的特点，是不含毒性药材的纯中药制剂。

附图说明

图1是本发明所述枳椇子提取物的制备流程图；

图2是本发明所述丹参提取物的制备流程图；

图3是本发明所述葛根提取物的制备流程图；

图4是本发明所述绿茶提取物的制备流程图；

图5是本发明所述五味子提取物的制备流程图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明的优选实施例进行详细说明。

实施例1

参照图1-5，本发明优选实施例1提供一种对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物，其特征在于包括以下重量百分比的组分：枳椇子提取物10-50%、丹参提取物10-50%、葛根提取物10-40%、茶多酚10-30%，还包括重量百分比为5-20%的五味子提取物。

所述枳椇子提取物的制备方法：将药材枳椇子淘洗、烘干，粉碎制成小块，粉碎后的枳椇子称重，放入提取罐内，回流状态下提取。第一次回流提取时，在提取罐内加入水，加水量是枳椇子重量的8—10倍（W/W），加热至沸后开始计时，回流提取2小时；待第一次回流提取完成后，第二次回流提取操作同第一次；待第二次回流提取完成后，第三次加水量与前两次操作相同（W/W），从加热至沸后开始计时，回流提取1.5小时。合并三次回流提取所得滤液，将滤液在70—80℃的温度值范围内减压浓缩，得到比重为1.0-1.1浓缩液。喷雾干燥，粉碎,过80目筛，筛分后得枳椇子提取物。

所述丹参提取物的制备方法：将药材丹参洗净、烘干，粉碎制成小块。粉碎后的丹参称重后放入提取罐内，加入含量85%的乙醇，在回流状态下乙醇提取三次。第一次回流提取时，乙醇加入量是丹参重量的8-10倍（W/W），从加热至沸后开始计时，回流提取2小时；待第一次回流提取完成后，第二次操作同上；待第二次回流提取完成后，第三次加入同含量规格、相同重量的乙醇，回流提取1.5小时，合并三次回流提取所得滤液过滤，在70—80℃温度值范围内减压浓缩，得到比重为1.0-1.1浓缩液，喷雾干燥，粉碎，过80目筛，筛分后得丹参提取物。

所述葛根提取物的制备方法：将药材葛根淘洗、烘干，粉碎制成小块，粉碎后的葛根称重放入提取罐内，回流状态下提取三次。第一次回流提取时，在提取罐内加入水，加水量是葛根重量的10倍（W/W），加热至沸后开始计时，回流提取2小时；待第一次回流提取完成后，第二次回流提取操作同第一次；待第二次回流提取完成后，第三次加水量是葛根重量的8倍（W/W），从加热至沸后开始计时，回流提取1.5小时。合并三次回流提取所得滤液，将滤液在70℃的温度值范围内减压浓缩，得到比重为1.0-1.1浓缩液。喷雾干燥，粉碎,过80目筛，筛分后得葛根提取物。

所述绿茶提取物（茶多酚）优选制备方法：本药物组合物茶多酚由贵州湄潭大叶种属绿茶提取制备所得。

绿茶净选后，粉碎，放入提取罐内，加水量是粉碎绿茶重量的10倍量（W/W），微沸状态下2次水提取，每次提取1.5小时，得到绿茶粗滤液。将提取液超滤，经聚酰胺柱层析，用含量75%乙醇溶液洗脱，将乙醇洗脱液在50~70℃温度值范围内，真空度0.04~0.08MPa条件下浓缩，再将浓缩液过滤，在进口温度150~165℃，出风70-80℃的条件下进行喷雾干燥除溶剂残留，粉碎，过80目筛，筛分后得绿茶提取物（茶多酚）。

所述五味子提取物的制备方法：将药材五味子淘洗、烘干，粉碎制成小块，将粉碎的五味子称重后放入提取罐内，乙醇提取三次。第一次醇提时加入含量65%乙醇，加入量是五味子重量的8倍，提取2小时；第二次醇提时加入含量65%乙醇，加入量是五味子初始重量的7倍，提取2小时；第三次醇提时加入含量65%乙醇，加入量是五味子初始重量的6倍，提取1.5小时。回收乙醇，合并三次提取所得滤液，将滤液在75—80℃温度值范围内减压浓缩，得到比重为1.0-1.1浓缩液，喷雾干燥，过80目筛，筛分后得五味子提取物。

实施例2

配方（按每1000粒计）： 枳椇子提取物120g、丹参提取物105g、葛根提取物80g、茶多酚40g、五味子提取物35g、糊精18g、硬脂酸镁2g。原料过筛，混合均匀，加入辅料糊精、硬脂酸镁，混合至均匀，灌入胶囊，制得胶囊剂。

实施例3

配方（按每1000粒计）：枳椇子提取物110g、丹参提取物115g、葛根提取物80g、茶多酚45g、五味子提取物30g、糊精18g、硬脂酸镁2g。原料过筛，混合均匀，加入辅料糊精、硬脂酸镁，混合至均匀，灌入胶囊，制得胶囊剂。

实施例4

配方（按每1000片计）：枳椇子提取物105g、丹参提取物110g、葛根提取物83g、茶多酚50g、五味子提取物32g、糊精5g、淀粉15 g。原料过筛，混合均匀，加入辅料糊精、淀粉，混合至均匀，压片，制

得片剂。

实施例5

配方（按每1000袋计）：枳椇子提取物115g、丹参提取物95g、葛根提取物80g、茶多酚45g、五味子提取物35g、糊精30g。原料过筛，混合均匀，加入辅料糊精，混合至均匀，制粒，制得颗粒剂。

实施例6

配方（按每1000瓶/10ml计）：枳椇子提取物130g、丹参提取物90g、葛根提取物80g、茶多酚50g、五味子35g。原料过筛，混合均匀，适量加水，溶解，混合均匀，再次补加水稀释至规定量，液体循环均匀后灌装，制得口服液。

以上所述的仅为本发明的优选实施例，所应理解的是，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想，并不用于限定本发明的保护范围，凡在本发明的思想和原则之内所做的任何修改、等同替换等等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物，其特征在于：由以下重量百分比的组分组成：枳椇子提取物10-50%、丹参提取物10-50%、葛根提取物10-40%、茶多酚10-30%、五味子提取物5-20%；

其中所述枳椇子提取物制备方法：将枳椇子淘洗、烘干，粉碎制成小块，粉碎后的枳椇子称重，放入提取罐内，回流状态下提取；第一次回流提取时，在提取罐内加入水，加水量是枳椇子重量的8—10倍，加热至沸后开始计时，回流提取2小时；待第一次回流提取完成后，第二次回流提取操作同第一次；待第二次回流提取完成后，第三次加水量与前两次操作相同，从加热至沸后开始计时，回流提取1.5小时；合并三次回流提取所得滤液，将滤液在70—80℃的温度值范围内减压浓缩，得到比重为1.0-1.1浓缩液；喷雾干燥，粉碎,过80目筛，筛分后得所述枳椇子提取物；

所述丹参提取物的制备方法：将药材丹参洗净、烘干，粉碎制成小块，粉碎后的丹参称重后放入提取罐内，加入含量85%的乙醇，在回流状态下乙醇提取三次；第一次回流提取时，乙醇加入量是丹参重量的8-10倍，从加热至沸后开始计时，回流提取2小时；待第一次回流提取完成后，第二次操作同上；待第二次回流提取完成后，第三次加入同含量规格、相同重量的乙醇，回流提取1.5小时，合并三次回流提取所得滤液并过滤，在70—80℃温度范围内减压浓缩，得到比重为1.0-1.1浓缩液，喷雾干燥，粉碎，过80目筛，筛分后得所述丹参提取物；

所述葛根提取物的制备方法：将药材葛根淘洗、烘干，粉碎制成小块，粉碎后的葛根称重放入提取罐内，回流状态下水提取三次；第一次回流提取时，在提取罐内加入水，加水量是葛根重量的10倍，加热至沸后开始计时，回流提取2小时；待第一次回流提取完成后，第二次回流提取操作同第一次；待第二次回流提取完成后，第三次加水量是葛根重量的8倍，从加热至沸后开始计时，回流提取1.5小时；合并三次回流提取所得滤液，将滤液在70℃的温度值范围内减压浓缩，得到比重为1.0-1.1浓缩液；喷雾干燥，粉碎,过80目筛，筛分后得所述葛根提取物；

所述茶多酚制备方法：绿茶净选后，粉碎，放入提取罐内，加水量是粉碎绿茶重量的10倍量，微沸状态下2次水提取，每次提取1.5小时，得到绿茶粗滤液；将提取液超滤，经聚酰胺柱层析，用含量75%乙醇溶液洗脱，将乙醇洗脱液在50~70℃温度值范围内，真空度0.04~0.08MPa条件下浓缩，再将浓缩液过滤，在进口温度150~165℃，出风70-80℃的条件下进行喷雾干燥除溶剂残留，粉碎，过80目筛，筛分后得所述茶多酚；

所述五味子提取物的制备方法：将药材五味子淘洗、烘干，粉碎制成小块，将粉碎的五味子称重后放入提取罐内，乙醇提取三次；第一次醇提时加入含量65%乙醇，加入量是五味子重量的8倍，提取2小时；第二次醇提时加入含量65%乙醇，加入量是五味子初始重量的7倍，提取2小时；第三次醇提时加入含量65%乙醇，加入量是五味子初始重量的6倍，提取1.5小时；回收乙醇，合并三次提取所得滤液，将滤液在75—80℃温度值范围内减压浓缩，得到比重为1.0-1.1浓缩液，喷雾干燥，过80目筛，筛分后得所述五味子提取物。

2.根据权利要求1所述的一种对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物，其特征在于：由以下重量百分比的组分组成：枳椇子提取物20-30%、丹参提取物20-30%、葛根提取物15-25%、茶多酚10-20%、五味子提取物5-10%。

3.根据权利要求1或2所述的一种对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物，其特征在于：所述一种对化学性肝损伤具有辅助保护功能的药物组合物为口服制剂，所述口服制剂为医学上可接受的剂型为胶囊剂、片剂、颗粒剂或口服液。