CN105250494A - 一种改善糖代谢中药配方及制备工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种改善糖代谢中药配方及制备工艺,属于中药改善Ⅱ型糖尿病糖代谢技术领域。技术方案是:各组分的重量百分比:红景天15-30%、莱菔子15-30%、桑螵蛸2-10%;葛根5-10%;丹参10-20%;菟丝子10-30%;枸杞子5-10%;五味子5-10%;女贞子5-10%;苏子5-10%;车前子5-20%;茺蔚子5-20%;栀子5-10%;决明子5-10%。本发明针对Ⅱ型糖尿病的病理机制,以补肾、泄浊、化瘀清热为主,通过补肾以增气化,通过理气泄浊以去脂浊壅积,通过化瘀清热以消瘀泻热;促进胰岛细胞保护、改善胰岛素抵抗、抑制糖吸收、促进胰岛素分泌、预防血管并发症等作用;利用优化提取工艺将配方制成保存、携带、服用方便的现代中药制剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种改善糖代谢中药配方及制备工艺,属于中药改善Ⅱ型糖尿病糖代谢技术领域。
背景技术
糖尿病是一组由于胰岛素分泌和(或)作用缺陷所引起的以慢性高血糖为特征的代谢性疾病。国际糖尿病联盟(IDF)于2013年11月14日——联合国糖尿病日公布第六版《国际糖尿病联盟糖尿病地图》显示,2013年全球约有3.82亿成年人患有糖尿病,约510万人死亡,平均每6秒钟就有1人死于糖尿病,并预计到2035年,该病患者人数会上升至5.92亿。中国的糖尿病患者人数居各国之首,宁光教授等完成的中国成人糖尿病流行与控制现状研究表明,2010年中国18岁及以上成人糖尿病患病率达11.6%(约1.139亿糖尿病患者),糖尿病前期率为50.1%(约4.934亿糖尿病前期人群)。其中,Ⅱ型糖尿病(T2DM)占糖尿病总人数的90%~95%,是一种受遗传和环境影响的多因素内分泌疾病,可引起眼、肾、神经、心脏、血管等组织器官慢性进行性病变、功能减退及衰竭,已经成为危害人类健康的主要疾病。迫于严峻的流行形势,世界各国及国际组织对T2DM的研究均给予高度关注。
T2DM发病机制非常复杂,针对Ⅱ型糖尿病发病机制,西药主要治疗靶向有以下几个方面:胰岛素分泌缺陷、胰岛素抵抗、肝糖输出过高及抑制糖的吸收、增加糖的排泄。常用药如:磺脲类药物;噻唑烷二酮类;双胍类药物;α-葡萄糖苷酶抑制剂;各种类型的胰岛素;氯回苯酸类药物。最近,新问世的西药有:二肽基肽酶-Ⅳ(DPP-Ⅳ)抑制剂、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物和肾钠-葡萄糖共转运蛋白-2(SGLT-2)抑制剂等。尽管西药针对不同的患病机制,其作用靶点比较清楚,效应较强。但是,Ⅱ型糖尿病患者是一个有机联系的整体,糖尿病患者机体的许多代谢环节同时存在失调,单纯作用于某一靶点药物难以发挥最佳治疗效果,带来副作用也相对明显,原发性失效、继发性失效问题也较严重。如果我们在Ⅱ型糖尿病早期就应用具有整体调节及多靶点治疗药物,势必提高治疗效果、控制病情发展及减少并发症的发生。因此,研究整体调节、多靶点治疗及副作用低的中药药物已成为Ⅱ型糖尿病药物研究的一个方向。
糖尿病属于中医的消渴、消瘅病证范畴。近年来,改善糖尿病的中药研究受到广泛的关注,已有越来越多的关于中药复方、单味中药及中药活性成分防治Ⅱ型糖尿病的报道:
目前市场上治疗糖尿病的药物繁多,经检索,中国专利和中国期刊公开了以下治疗糖尿病有关的中药制剂的报道,现摘录如下:
l、中国专利<申请号>00108421<发明名称>一种治疗糖尿病的药物及其制备方法<申请人>韩万明刘萍,山西省阳泉市李家庄第一人民医院分院<文摘>本发明公开了一种新的治疗糖尿病的药物,它是以生黄芪、生地、丹参、生山药、荔枝核、元参、苍术、枸杞子、乌梅、玉米须、五味子、天花粉、瓜蒂、肉桂、蚕蛹、鬼箭羽,海蛤壳、鸡内金、葛根、桑叶、黄精为原料,根据每味中药的不同特性分别经过冻干、晒干、煅烧、除尘、粉碎,按比例配制,再经熟化,灭菌后制成散剂。本发明是在搜集了上百个民间治疗糖尿病的秘方上,再根据几代人潜心钻研,临床治疗经验所得,配方独特,治疗效果显著。
2、中国专利<申请号>99120424<发明名称>一种治疗糖尿病的药物及其制备方法<申请人>邵玉君<文摘>本发明公开了一种治疗糖尿病的中成药及其制备方法,这种中成药将松花粉、鸡内金、黄芪、太子参、黄柏、玉米须、知母、地黄、黄精、桑白皮、山药、荔枝核、丹参、山茱萸、大黄和五味子16味中药料,根据其有效成分和理化性质分为四组,分别采用水煎、水煎醇沉、乙醇提取和粉碎后直接入药的工艺,制备成胶囊,治疗糖尿病,疗效既显著,又无任何毒副作用。
3、决明子提取物减轻Ⅱ型糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤,作者刘利兵,张海锋,西京学院医学护理教研室,刊名:基础医学与临床,2015,35(1):1~6,目的:研究决明子提取物(SCE)对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注(MI/R)损伤的影响。结果:HFD-STZ大鼠MI/R损伤加重,虽SCE处理1周对正常动物MI/R损伤无影响,但降低HFD-STZ大鼠TC、TG水平,可将其心肌梗死面积减小至38.4%±2.7%,显著低于糖尿病组的46.1%±3.2%(P<0.05),且血清CK、LDH活性及细胞凋亡减少;还可增加HFD-STZ大鼠心肌Akt及ERK1/2磷酸化。用Akt或ERK1/2抑制剂可阻断SCE的心肌保护作用。结论:SCE可有效减轻糖尿病大鼠MI/R损伤,可能与其降脂并激活Akt及ERK1/2信号有关。
4、决明子醇提物对糖尿病小鼠氧化应激的影响,作者晋亚楠、李盼盼、李学刚、黄静、陈新;西南大学药学院;刊名:中国当代医药;2012,19(9)目的:研究决明子醇提物对糖尿病小鼠氧化应激的影响。结果:决明子醇提物各组分对糖尿病小鼠体重、血糖及抗氧化水平有不同程度的改善,与高糖组比,乙酸乙酯组分使血糖值和MDA含量明显降低、SOD活力极显著提高(P<0.01)。结论:决明子醇提物可改善糖尿病小鼠氧化应激状态,其中乙酸乙酯组为最佳活性组分。
5、五子降糖方对T2DM大鼠血糖及SOD、MDA、hsCRP、C-肽影响的实验研究,作者王亚、高秀娟、宝玲、喇孝瑾、王会敏、田振亚、李继安,华北理工大学中医学院,刊名:中华中医药杂志,2014,19(9),目的:观察五子降糖方对Ⅱ型糖尿病(T2DM)模型大鼠空腹血糖和餐后2h血糖、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、超敏C反应蛋白(hsCRP)和C-肽(C-P)的影响,初步探讨其作用机制。结果:较正常组,模型组大鼠空腹血糖及餐后2h血糖、MDA、hsCRP水平升高,血清SOD、C-P水平降低,差异均具有统计学意义(p<0.05);五子降糖方能够降低T2DM大鼠空腹血糖及餐后2h血糖、MDA水平,提高血清SOD、C-P水平,其中该方中剂量能够明显降低血清hsCRP水平,差异均具有统计学意义(p<0.05)。结论:五子降糖方可降低T2DM模型大鼠空腹及餐后2h血糖,其作用机制可能与抗氧化、降低炎症反应及改善胰岛β细胞功能有关。
6、葛根素注射液治疗糖尿病周围神经病变的Meta分析,作者赵勇、徐文华,湖北中医药大学湖北省中医院,刊名:中成药.2014,36(12):2657~2661,目的:运用Meta分析评价葛根素注射液治疗糖尿病周围神经病变的疗效及安全性。结果:纳入本研究共14篇文献,Meta分析结果表明葛根素注射液治疗糖尿病周围神经病变的总有效率、腓总及正中神经传导速度改善均优于对照组,7例出现不良反应。结论:葛根素注射液治疗糖尿病周围神经病变有效,尚需高质量、大样本、多中心的随机对照双盲研究进一步证实。
7.葛根总黄酮纳米混悬液的制备及其降血糖作用研究,作者傅前霞、周群、王治平、樊化,湖北省荆州市公安卫校。刊名:时珍国医国药.2014,25(11):2664~2666.目的:制备葛根总黄酮(PF)纳米混悬液(NS-PF),并考察其降血糖作用。结果:制备的NS-PF的粒径、多分散指数及Zeta电位分别为(158.18±3.16)nm、(0.383±0.013)、-(29.76±3.81)mV。PF、NS-PF及二甲双胍给药组对正常小鼠无明显急性降糖作用,对糖尿病小鼠体重也无影响,NS-PF组对糖尿病小鼠的随机血糖和空腹血糖均具有明显降低效果,并对其糖耐量有一定改善作用,整体降糖效果显著优于PF(P<0.01)。结论:葛根总黄酮纳米混悬液能显著提高葛根总黄酮降低血糖作用。
8.丹参多酚酸盐对Ⅱ型糖尿病患者胰岛β细胞功能和血清抗氧化酶活性水平的影响,作者姚慧娟、姚慧敏、李莉霞、李方、卜书红,上海交通大学医学院附属新华医院药学部、吉林省长白山药用植物研究重点实验室,刊名:中国医药导报2015,12(10):135~138.目的:探讨丹参多酚酸盐对Ⅱ型糖尿病患者胰岛β细胞功能和血清抗氧化酶活性水平的影响。结果:组间结果比较显示,两组患者治疗前后的胰岛β细胞功能改善不明显,差异无统计学意义(P>0.05),但治疗后给药组的抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性水平较常规治疗组有显著升高,差异有高度统计学意义(P<0.01),脂质代谢产物MDA的含量较常规治疗组低,但差异无统计学意义(P>0.05)。组内结果比较显示,两组患者给药后的胰岛β细胞功能较给药前均有所改善,其中空腹血糖、餐后2h血糖和糖化血红蛋白等指标水平改善明显,差异有高度统计学意义(P<0.01),同时两组治疗前后的抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性水平和脂质代谢产物MDA的含量差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论:丹参多酚酸盐对Ⅱ型糖尿病患者胰岛β细胞功能的改善作用不明显,但可增加患者体内血清中的抗氧化酶SOD、GSH-Px活性水平,并降低脂质代谢产物MDA的含量,从而发挥一定的抗氧化作用机制。
9.通平养心方对高糖诱导H9c2心肌细胞损伤的保护作用机制研究,作者尹敬、田炜、魏建强、喇孝瑾、杨雨旸、李继安,河北联合大学国家老年医学国际合作基地、唐山工人医院;刊名:天然产物研究与开发2014,26:2066~2070目的:观察以红景天为主药的通平养心方对高糖诱导的H9c2细胞损伤的保护作用机制。结果:通平养心方和JNK抑制剂均能阻断高糖造成的H9c2心肌细胞损伤;0.1μg/mL通平养心方预处理10min,细胞存活率升高、TMRE荧光减弱程度降低,p-JNK表达下降,p-GSK-3β表达升高。表明通平养心方能够通过线粒体保护途径对抗高糖诱导的H9c2细胞损伤,机制可能是通过JNK通路促进其下游因子GSK-3β磷酸化,从而抑制mPTP的开放实现的。
10.7种酸味中药对STZ致小鼠糖尿病的作用,作者齐海艳、董瑗瑗、邓翀陕西中医学院,刊名:陕西中医学院学报.2014,37(2):60~62.目的:评价7种酸味中药对以链尿佐菌素(STZ)致小鼠糖尿病降血糖作用的活性。结果:与模型组比较药物组能降低STZ糖尿病小鼠空腹血糖量、口服糖耐量升高血清胰岛素含量并能改善动物“三多一少”的症状,其中盐酸二甲双胍组、五味子、金樱子、山茱萸组效果较好。结论:酸性药物五味子、金樱子、山茱萸能明显改善STZ小鼠糖尿病症状。
11.五味子油对Ⅱ型糖尿病大鼠胰岛B细胞凋亡的影响,作者安丽萍、王英平、王春梅。吉林大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,中国农业科学院特产研究所,吉林大学学报(医学版).2012,38(1):84~88.目的:研究五味子油对Ⅱ型糖尿病大鼠胰岛B细胞的保护作用,探讨其降血糖作用及机制。结果:与模型组比较,五味子油治疗组大鼠FBG水平明显下降(P<0.05),FINS水平明显升高(P<0.05);五味子油治疗组大鼠血清MDA含量下降(P<0.05),SOD及CAT活性升高(P<0.05);五味子油治疗组大鼠胰腺组织Bcl-2mRNA表达水平升高,Caspase3mRNA表达水平下降(P<0.05),Bax表达无明显变化,但Bax/Bcl-2比值降低。与正常对照组比较,正常五味子油组大鼠上述指标未出现明显改变。结论:五味子油可通过降低脂质过氧化反应副产物,增强抗氧化物酶活力,调节凋亡相关基因,促进血清胰岛素分泌,从而降低血糖。
12.车前子多糖对糖尿病小鼠氧化应激的影响,张然,袁从英,冯娜,王素敏,河北医科大学基础医学院药理教研室,天津医药.2011,39(3):253~255,目的:研究车前子多糖(PSP)对实验性四氧嘧啶糖尿病小鼠氧化应激的影响。结果:与模型组比较,除了P1组血清、心脏SOD,血液CAT,心脏GSH-PX、肾脏NO和血清的NOS差异无统计学意义,小鼠血清和心脏的MDA水平均显著降低外,其他指标活性均显著升高。结论:PSP具有抗氧化效应及清除氧自由基的作用。
13.栀子苷降糖作用及相关机制研究,姚冬冬,舒娈,杨蕾,贾晓斌,孙敏,徽大学生命科学学院,江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药释药系统重点研究室,中草药.2014,45(8):1121~1125.,目的:探讨栀子苷对糖尿病小鼠的降糖作用及机制。结果:与模型组相比,栀子苷治疗组小鼠血糖水平降低,体质量下降,而血浆胰岛素水平升高,OGTT有所改善;胰腺组织切片免疫荧光染色结果表明,模型组小鼠胰岛结构被破坏,而栀子苷治疗组有明显改善,并且观察到Ki67表达,表明栀子苷能够促进胰岛β细胞增殖;栀子苷治疗组小鼠肝脏中Akt、GSK-3β蛋白磷酸化水平较模型组均有显著上调。结论:栀子苷能够有效改善糖尿病模型小鼠的高血糖症状,并增加血浆胰岛素水平,其作用可能与促进胰岛β细胞增殖,激活胰岛素受体下游Akt通路有关。
14.栀子水提取物对实验性Ⅱ型糖尿病大鼠血糖及同型半胱氨酸水平的影响,周瑞华,王虹玉,喇万英,唐咏梅,宁鸿珍,康瑞雪,夏青,河北联合大学,天然产物研究与开发.2013,25:1281~1283.,目的:观察栀子提取物对实验性Ⅱ型糖尿病大鼠血糖、血脂及同型半胱氨酸水平的影响。结论:栀子提取物ig能降低糖尿病大鼠的血糖、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDLC),同时能升高高密度脂蛋白(HDLC),降低同型半胱氨酸水平。
15.栀子对STZ诱导的Ⅱ型糖尿病大鼠血糖及血脂的影响,费曜,朱丹平,刘凡,重庆医科大学中医药学院中药综合教研室,重庆市第一人民医院,北京中医药大学,中药药理与临床2011,27(6):49~52.,目的:研究栀子水提取物、环烯醚萜总苷、京尼平苷、西红花总苷对链脲佐菌素致2型糖尿病大鼠血糖、血脂的影响。结果:与模型组比较,栀子各给药组大鼠体重有所增加,大便成形,小便较多。其中西红花苷组大鼠体重增加明显,24h尿量明显减少(P<0.05)。各给药组血糖均有所下降,但差异不明显。栀子水提物组(P<0.05)和京尼平苷组(P<0.05)大鼠的空腹血清胰岛素相较于模型对照组大鼠有所下降,而栀子水提物组(P<0.05)、环烯醚萜苷组(P<0.05)和京尼平苷组(P<0.05)大鼠的胰岛素敏感指数明显高于糖尿病模型组大鼠。栀子水提物、西红花苷((P<0.05)和京尼平苷(P<0.05)能明显降低高糖高脂大鼠的胆固醇水平,栀子水提物(P<0.05)、京尼平苷(P<0.05)和西红花苷(P<0.05)能明显降低高糖高脂大鼠的甘油三酯,栀子水提物和西红花苷能升高高密度脂蛋白胆固醇(P<0.05),西红花苷能降低低密度脂蛋白胆固醇(P<0.05)。结论:栀子各提取物能在一定程度上降低Ⅱ型糖尿病大鼠的高血糖和高血脂,其中栀子水提物为其降糖降脂的有效部位,京尼平苷对降低血清胰岛素,提高胰岛素敏感指数和降低血脂都有明显疗效,而西红花苷降低血脂的效果较为突出。
16.五子衍宗丸对糖尿病性白内障小鼠晶状体氧化损伤和多元醇通路的影响,朱向东,王燕,甘肃中医学院中医基础理论教研室,甘肃中医学院方剂学教研室,中医研究.2013,26(2):66~69.,目的:探讨五子衍宗丸对糖尿病性白内障小鼠晶状体氧化损伤和多元醇通路的影响。结果:与空白对照组对比,模型对照组小鼠晶状体混浊度增加,血糖、糖化血清蛋白指数升高,血清胰岛素降低(P<0.01),SOD和GSH-Px活性降低、MDA含量增多(P<0.01或P<0.05),葡萄糖、果糖、山梨醇含量增多(P<0.01)。运用受试药物治疗后,小鼠混浊度明显改善,血糖、糖化血清蛋白指数显著降低(P<0.01),晶状体组织SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.01)、MDA含量增多,以治疗组系为显著(P<0.01),葡萄糖、果糖、山梨醇含量显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论:五子衍宗丸能减轻D-半乳糖所致的氧化损伤,抑制DC小鼠晶状体组织多元醇通路的异常活跃,从而改善DC小鼠晶状体的混浊程度。
背景技术存在的问题是:Ⅱ型糖尿病多中年后发病,且肥胖者居多,具有肾气亏虚、气化不足的基础体质,并且也有肥甘太过、久坐少动、气机不畅等诱因,上述背景技术针对性差,改善糖代谢效果不理想,药物保存、携带、服用不方便。
发明内容
本发明目的是提供一种改善糖代谢中药配方及制备工艺,针对Ⅱ型糖尿病的病理机制,以补肾、泄浊、化瘀清热为主,通过补肾以增气化,通过理气泄浊以去脂浊壅积,通过化瘀清热以消瘀泻热,改善Ⅱ型糖尿病患者糖代谢和延缓糖尿病并发症,药物保存、携带、服用方便,解决背景技术中存在的上述问题。
本发明的技术方案是:
一种改善糖代谢中药配方,各组分的重量百分比:红景天15-30%、莱菔子15-30%、桑螵蛸2-10%;葛根5-10%;丹参10-20%;菟丝子10-30%;枸杞子5-10%;五味子5-10%;女贞子5-10%;苏子5-10%;车前子5-20%;茺蔚子5-20%;栀子5-10%;决明子5-10%。
功效:益肾泄浊、化瘀清热。
应用:主要用于Ⅱ型糖尿病高血糖和糖尿病大便秘结。
用法:每天3次,每次3-6g。于每餐前10-15分钟温开水送服。
一种改善糖代谢中药的制备工艺,包含如下工艺步骤:
①分别将红景天15-30%;莱菔子15-30%;葛根5-10%;丹参10-20%;菟丝子10-30%;枸杞子5-10%;五味子5-10%;女贞子5-30%;苏子5-30%;车前子5-20%;茺蔚子5-20%;栀子5-30%;决明子5-10%;粉碎过60目筛,取筛下粉料备用,上述百分比为重量百分比;
②将红景天、莱菔子、葛根、丹参、菟丝子、枸杞子、五味子、女贞子、苏子、车前子、茺蔚子、栀子、决明子粉料混合,加料液体积比1:20的65%乙醇浸泡0.5小时,加热温度60度,超声振荡提取1次,提取时间90分钟,滤过,滤液回收乙醇,干燥浸膏,得醇提取物;过滤后药渣进入下一步提取;
③将上述过滤后药渣混合,加重量比8倍量水,提取1次,提取时间3小时,过滤取水提液并浓缩干燥,得水提取物;过滤后药渣弃去;
④将桑螵蛸超微粉碎;
⑤将水提取物、醇提取物和桑螵蛸超微粉碎物混合,干燥、粉碎后得粉状物料为提取的有效成分。
本发明提取的是改善糖代谢的中药配方有效成分,最后得到有效成分的粉状物料,出粉率为25—30%,也就是说,最终提取的有效成分粉状物料的重量,是红景天、莱菔子、葛根、丹参、菟丝子、枸杞子、五味子、女贞子、苏子、车前子、茺蔚子、栀子、决明子、桑螵蛸原料粉料重量的25—30%。
本发明提取的有效成分粉状物料,与药用辅料配伍,可制成丸剂、胶囊剂、片剂、冲剂及颗粒剂,包装为每袋3g。
Ⅱ型糖尿病多中年后发病,且肥胖者居多,具有肾气亏虚、气化不足的基础体质,并且也有肥甘太过、久坐少动、气机不畅等诱因,针对Ⅱ型糖尿病的病理机制,以补肾、泄浊、化瘀清热为主,通过补肾以增气化,通过理气泄浊以去脂浊壅积,通过化瘀清热以消瘀泻热,实验研究获得了较好的改善糖代谢效果,改善Ⅱ型糖尿病患者糖代谢和延缓糖尿病并发症。
本发明所用中药材的功效及其在处方中的作用阐述如下:
红景天:主要功效补肾,理气养血,有活血止血、清肺止咳、解热润肺。用于气虚血瘀,胸痹心痛,中风偏瘫,倦怠气喘。
菟丝子:滋补肝肾,固精缩尿,安胎,明目,止泻。用于阳痿遗精,尿有余沥,遗尿尿频,腰膝酸软,目昏耳鸣,肾虚胎漏,胎动不安,脾肾虚泻;外治白癜风。
莱菔子:消食除胀,降气化痰。用于饮食停滞,脘腹胀痛,大便秘结,积滞泻痢,痰壅喘咳。
决明子:清热明目,润肠通便。用于目赤涩痛,羞明多泪,头痛眩晕,目暗不明,大便秘结。
葛根:解肌退热,生津,透疹,升阳止泻。用于外感发热头痛、项背强痛,口渴,消渴,麻疹不透,热痢,泄泻;高血压颈项强痛。
丹参:祛瘀止痛,活血通经,清心除烦。用于月经不调,经闭痛经,症瘕积聚,胸腹刺痛,热痹疼痛,疮疡肿痛,心烦不眠;肝脾肿大,心绞痛。
枸杞子:滋补肝肾,益精明目。用于虚劳精亏,腰膝酸痛,眩晕耳鸣,内热消渴,血虚萎黄,目昏不明。
五味子:收敛固涩,益气生津,补肾宁心。用于久嗽虚喘,梦遗滑精,遗尿尿频,久泻不止,自汗,盗汗,津伤口渴,短气脉虚,内热消渴,心悸失眠。
女贞子:滋补肝肾,明目乌发。用于眩晕耳鸣,腰膝酸软,须发早白,目暗不明。
苏子:清热利尿,渗湿通淋,明目,祛痰。用于水肿胀满,热淋涩痛,暑湿泄泻,目赤肿痛,痰热咳嗽。
茺蔚子:活血调经,清肝明目。用于月经不调,经闭,痛经,目赤翳障,头晕胀痛。
栀子:果实,泻火除烦,清热利尿,凉血解毒。用于热病心烦,黄疸尿赤,血淋涩痛,血热吐衄,目赤肿痛,火毒疮疡;外治扭挫伤痛。
桑螵蛸:益肾固精,缩尿,止浊。用于遗精滑精,遗尿尿频,小便白浊。
根据中医组方原则及中药现代药理作用机制组成配方:配方中红景天、菟丝子滋补肝肾二药合用为补益肾气,以增气化为该方主药,现代研究两味主药具有抗氧化、抗炎、胰岛细胞保护作用;女贞子、枸杞子益精补血,五味子敛肺补肾,与菟丝子共同补益肺肾之阴。莱菔子下气除痰,车前子泻而通之,泻有形之浊,苏子降气化痰,与莱菔子合用,增加其行气化痰之力,三药具有糖苷酶及二肽基肽酶抑制作用。方中葛根、丹参、决明子、栀子、茺蔚子兼顾清热消瘀,可改善血液循环、脂肪代谢及胰岛素抵抗。全方合用具有多靶点整体调节,促进胰岛细胞保护、改善胰岛素抵抗、抑制糖吸收、促进胰岛素分泌、预防血管并发症等作用。
本发明优点和有益效果:针对Ⅱ型糖尿病的病理机制,以补肾、泄浊、化瘀清热为主,通过补肾以增气化,通过理气泄浊以去脂浊壅积,通过化瘀清热以消瘀泻热,实验研究获得了较好的改善糖代谢效果;本发明全方合用具有多靶点整体调节,促进胰岛细胞保护、改善胰岛素抵抗、抑制糖吸收、促进胰岛素分泌、预防血管并发症等作用;利用优化提取工艺将配方制成保存、携带、服用方便的现代中药制剂。
附图说明
图1是本发明中药配方对GK大鼠GSP影响;
注:与正常组比较★P<0.05,★★P<0.01;与模型组比较▲P<0.05,▲▲P<0.01;
图2是本发明中药配方对GK大鼠HbAlc影响;
注:与正常组比较★P<0.05,★★P<0.01;与模型组比较▲P<0.05,▲▲P<0.01。
具体实施方式
以下结合附图,通过实例对本发明作进一步说明。
一种改善糖代谢中药配方,各组分的重量百分比:红景天15-30%、莱菔子15-30%、桑螵蛸2-10%;葛根5-10%;丹参10-20%;菟丝子10-30%;枸杞子5-10%;五味子5-10%;女贞子5-10%;苏子5-10%;车前子5-20%;茺蔚子5-20%;栀子5-10%;决明子5-10%。
功效:益肾泄浊、化瘀清热。
应用:主要用于Ⅱ型糖尿病高血糖和糖尿病大便秘结。
用法:每天3次,每次3-6g。于每餐前10-15分钟温开水送服。
一种改善糖代谢中药的制备工艺,包含如下工艺步骤:
①分别将红景天15-30%;莱菔子15-30%;葛根5-10%;丹参10-20%;菟丝子10-30%;枸杞子5-10%;五味子5-10%;女贞子5-30%;苏子5-30%;车前子5-20%;茺蔚子5-20%;栀子5-30%;决明子5-10%;粉碎过60目筛,取筛下粉料备用,上述百分比为重量百分比;
②将红景天、莱菔子、葛根、丹参、菟丝子、枸杞子、五味子、女贞子、苏子、车前子、茺蔚子、栀子、决明子粉料混合,加料液体积比1:20的65%乙醇浸泡0.5小时,加热温度60度,超声振荡提取1次,提取时间90分钟,滤过,滤液回收乙醇,干燥浸膏,得醇提取物;过滤后药渣进入下一步提取;
③将上述过滤后药渣混合,加重量比8倍量水,提取1次,提取时间3小时,过滤取水提液并浓缩干燥,得水提取物;过滤后药渣弃去;
④将桑螵蛸超微粉碎;
⑤将水提取物、醇提取物和桑螵蛸超微粉碎物混合,干燥、粉碎后得粉状物料为提取的有效成分。
本发明提取的是改善糖代谢的中药配方有效成分,最后得到有效成分的粉状物料,出粉率为25—30%,也就是说,最终提取的有效成分粉状物料的重量,是红景天、莱菔子、葛根、丹参、菟丝子、枸杞子、五味子、女贞子、苏子、车前子、茺蔚子、栀子、决明子、桑螵蛸原料粉料重量的25—30%。
本发明提取的有效成分粉状物料,与药用辅料配伍,可制成丸剂、胶囊剂、片剂、冲剂及颗粒剂,包装为每袋3g。
本发明实验报告
Ⅱ型糖尿病在中医属消渴、消瘅范畴,中医学认为该病是一种虚实夹杂的复杂证候,《灵枢五变》云:“五脏皆柔弱者,善病消瘅”。《灵枢五脏》云:“肾脆则善病消瘅,易伤”。王焘在《外台秘要·消渴消中门》中也做了卓有见地的阐述:“消渴者,原其发动,此则肾虚所致,每发即小便至甜”。说明五脏虚弱、特别是肾虚是易患消渴、消瘅的内在动因。《素问奇病论篇》云:“此人必数食甘美而多肥也,肥者,令人内热,甘者令人中满,故其气上溢,转为消渴。”强调了过食肥甘厚味是导致消瘅、消渴的主要诱发因素,中满、内热是主要病理转归,由此可见脏腑之气不足、肾气虚弱与饮食肥甘太过,气化不利,痰浊郁热内生是消渴病发病的主要病机。针对该病机拟定的“中药配方”,既能补肾益气以增气化,又能祛痰化湿,清热消瘀,本发明开展了治疗T2DMGK大鼠动物实验以观察疗效,并通过DPP-4体外抑制实验初步探讨其作用机制,现报道如下。
1材料
1.1实验动物
SPF级13周龄GK雄性大鼠54只,体重(300±20)g,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,许可证号SCXK(沪)2012-0002,动物合格证编号2007000577867。SPF级Wistar雄性大鼠10只,购自北京华阜康生物科技股份有限公司,许可证号SCXK(京)2014-0004。大鼠饲养于华北理工大学10000级屏障环境动物实验室(SYXK(冀)2015-0038),室温20℃,相对湿度45%,光暗周期(12h/12h)。
1.2药物与试剂
中药配方由红景天、菟丝子、丹参、葛根、女贞子、莱菔子、苏子、车前子、茺蔚子、枸杞子、决明子、栀子、五味子、桑螵蛸等组成,购于北京同仁堂唐山连锁药店有限公司,由田春雨副教授鉴定;二甲双胍片(中美上海施贵宝制药有限公司,批号:1405081);磷酸西格列汀片(杭州默沙东制药有限公司,产品批号:k005113);二肽基肽酶IV(sigma公司,批号:SLBK3698V);甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺(sigma公司,批号:SLBJ8491V);GLP-1试剂盒,(南京建成生物工程研究所,批号:Lot#20150304)。GSP试剂盒,(南京建成生物工程研究所,批号:Lot#20150119)
1.3主要仪器
BS224S十万分之一精密电子天平(德国SARTORIUS);GZX-9240数显鼓风干燥箱(上海博讯实业有限公司医疗设备厂);M200PRO酶标仪(瑞士TECAN);YZB/湘0043-2012安稳血糖仪(三诺生物传感股份有限公司);NycoCardReaderⅡ特种蛋白金标检测仪(挪威AXIS-SHIELDPoc公司生产);
2方法
1药物提取方法
体内实验:中药配方按照红景天20%;菟丝子10%;莱菔子15%;葛根5%;丹参10%;枸杞子5%;五味子5%;女贞子5%;苏子5%;车前子5%;茺蔚子5%;栀子5%;决明子3%;桑螵蛸2%比例配方,上述药物粉碎混合,加料液比1:20的65%乙醇浸泡0.5小时,加热温度60度,超声振荡提取1次,提取时间90分钟,滤过,滤液回收乙醇,干燥浸膏,得醇提取物;过滤后药渣加重量比8倍量水,煎煮提取1次,提取时间3小时,过滤取水提液并浓缩干燥,得水提取物;过滤后药渣弃去,所有药液混合浓缩,收膏率为24%。
体外实验:按照上述中药配方比例取配方药30g混合并粉碎成粗末,另将各单味中药5g粉碎成粗末,取中药配方及各单味药物粗末,分别加8倍量水,80℃水浴5小时,静置12小时后离心,12000转20min,取上清液;
2.2GK大鼠造模、分组、给药与指标检测
选取54只13周龄雄性GK大鼠,适应性喂养1周,给予高脂饲料(脂肪41%,蛋白17%,碳水化合物42%)喂养,连续4周,测定空腹血糖,空腹血糖>7.1mmol/L纳入实验,共纳入实验50只,将其随机分为模型组、二甲双胍组、中药配方高、中、低剂量组,每组10只。选取10只Wistar大鼠作为正常组,给予普通饲料喂养。各组灌胃相应药物,模型组与正常组灌胃等体积纯净水,给药量按照大鼠与人换算公式计算(每天7.5mg/kg),二甲双胍组灌胃盐酸二甲双胍混悬液0.1g/kg,中药配方组分别灌胃提取液4,8,16g/kg(折合生药量),共给药8周,给药期间模型组死亡1只,原因尚不明确。采用葡萄糖氧化酶法测定给药前、给药第4周、第8周GK大鼠空腹血糖(FBG),每次测定前禁食不禁水8h,取大鼠尾中下部血测定血糖。给药第8周测定糖化血红蛋白(HbAlc),8周后腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠,取大鼠腹主动脉血清离心,采用ELISA方法检测血清糖化血清蛋白(GSP)及GLP-1含量,按照已建立的体外筛选体系检测DPP-4酶活性。
2.3中药配方及其各单味中药对DPP-4抑制作用实验
实验分4组[3-6],每组设3个复孔,分别为空白组、阴性对照组、阳性对照组、阳性空白组,具体如表2。按照药物、酶、缓冲液、底物顺序加入96孔板,并对酶浓度、底物浓度、反应缓冲液pH值、反时间、反应温度进行优化,通过已建立体外筛选体系对中药配方及其组成的单味药物进行筛选。
2.4统计学处理
实验数据应用SPSS20.0软件及excel2007进行分析,实验结果均以均值±标准差表示。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较方差齐采用LSD法,方差不齐采用Dunnett’sT3法,P<0.05为差异有统计学意义。
抑制率计算公式:
3结果
3.1GK大鼠生理状态变化
正常组大鼠毛色较白且有光泽,精神状态活跃,粪便及尿量正常,模型组毛色明显发黄无光泽,精神状态萎靡,尿量增多且部分大鼠出现便溏,二甲双胍组及中药配方高、中、低剂量组状况较模型组均有所改善。
3.2中药配方对GK大鼠FBG水平,血清GLP-1含量,DPP-4活性的影响
给药前各药物组及模型组与正常组FBG比较均有显著性差异P<0.01,各给药组及模型组之间没有显著性差异P>0.05;给药4周后,各组FBG水平均高于正常组,有显著性差异(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组和中药配方高、中剂量组FBG水平低于模型组(P<0.05,P<0.01)存在差异性;给药8周后,二甲双胍组、中药配方高剂量组与正常组比较没有差异性P>0.05,中药配方中剂量组与正常组比较P<0.05,存在差异性。中药配方高、中剂量组与二甲双胍组FBG均低于模型组(P<0.01,P<0.05),存在差异性,中药配方低剂量组与模型组比较差异不显著。实验第8周结束测定血清GLP-1含量,结果与正常组比较,各组均低于正常组,存在显著性差异(P<0.01),与模型组比较各组均高于模型组,存在显著性差异,中药配方中剂量组、中药配方低剂量组与二甲双胍组比较没有显著性差异;DPP-4活性测定结果,与正常组比较模型组DPP-4活性明显偏高P<0.01,其余各组不存在差异性(见表1)。
注:同期比较,与正常组比较★★P<0.01,★P<0.05;与模型组比较▲▲P<0.01,▲P<0.05;与二甲双胍组比较■P<0.05,■■P<0.01。
3.3中药配方对GK大鼠GSP、HbAlc影响
GK大鼠GSP水平与正常组比较,模型组与中药配方低剂量组明显偏高P<0.01。与模型组比较,二甲双胍组与中药配方高、中剂量组均低于模型组P<0.01,与二甲双胍组比较中药配方高、中剂量组P>0.05(如图1)。GK大鼠HbAlc水平与正常组比较各组均高于正常组(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,二甲双胍组与中药配方各组均低于模型组P<0.01,与二甲双胍组比较中药配方各组无差异P>0.05(如图2)。
图1中药配方对GK大鼠GSP影响;注:与正常组比较★P<0.05,★★P<0.01;与模型组比较▲P<0.05,▲▲P<0.01;
图2中药配方对GK大鼠HbAlc影响;注:与正常组比较★P<0.05,★★P<0.01;与模型组比较▲P<0.05,▲▲P<0.01。
3.4DPP-4抑制剂体外筛选模型的优化结果
经反复摸索确定酶浓度为4U/L,底物浓度0.05mmol/L,缓冲液pH8.2,温度37℃,时间30min。按照上述反应体系对不同浓度磷酸西格列汀片抑制率进行测定,抑制率与药物浓度呈剂量依赖性,证明反应体系稳定。
3.5中药配方及其组成药物对DPP-4的抑制作用
中药配方、莱菔子、栀子、菟丝子对DPP-4抑制率>10%,对其进行复筛,女贞子、车前子、决明子、紫苏子、枸杞子、五味子、茺蔚子的DPP-4抑制作用不明显,剔除实验;复筛结果如表3。
4讨论
Ⅱ型糖尿病是多层次、多环节代谢紊乱性疾病,其治疗也应从机体的整体功能调节出发,开展多靶点、多环节的调控。本研究以肾气虚弱、气化不及,痰浊郁热内生而立论,实验研究表明中药配方可以改善GK模型大鼠一般状态,降低FBG、HbAlc、GSP水平,说明该方切合其发病机制,但从现代医学角度分析,其改善糖代谢的机制包括多种,如胰岛素促泌、改善胰岛素抵抗、促进肝糖原的合成、抑制糖苷酶等,近年来,抑制DPP-4,提高GLP-1已经成为治疗Ⅱ型糖尿病的新靶向。但本方是通过什么作用机制发挥作用的尚不清楚。为了阐释本方的多靶点作用机制,我们分别从胰岛素促泌、改善胰岛素抵抗、促进肝糖原的合成、抑制糖苷酶等方面开展相关研究。而本研究主要探讨该方对DPP-4抑制作用。DPP-4抑制主要通过延长体内GLP-1降解时间发挥降糖作用。GLP-1是一种肠促胰岛素,体内外研究显示GLP-1具有较好的抗糖尿病效应,它具有血糖依赖性的肠促胰岛素作用,可以避免餐后高血糖的风险,同时又阻止胰腺β细胞凋亡,促进β细胞的增殖[7-8],可改善糖尿患者的血糖代谢。但是由于GLP-1在体内很快被以DPP-4为主的酶降解,因而抑制DPP-4能一定程度延长GLP-1在体内的半衰期,从而有效地发挥GLP-1降血糖效应。
本实验选用的自发性非肥胖型GK大鼠Ⅱ型糖尿病模型以胰岛β细胞胰岛素释放受损、脂肪和肌肉组织中度胰岛素抵抗为特征。β细胞渐进性消失和胰岛纤维化并具有中等程度的胰岛素抵抗是该模型的特点,糖尿病发作后,很快出现高血糖、胰岛素分泌减弱等症状,其发病机理与Ⅱ型糖尿病机理及其类似[9]。实验结果表明,中药配方可以降低GK大鼠FBG、HbAlc及GSP水平,在改善糖代谢方面存在剂量依赖性。该方还能增加血清GLP-1含量,抑制血清DPP-4活性。体外实验通过对中药配方及其组成的单味药物进行筛选,发现该方具有DPP-4抑制作用,但较西格列汀片及其组成药物莱菔子、菟丝子、栀子作用弱,莱菔子、菟丝子、栀子可能是该方发挥DPP-4抑制作用的主要药物,由此推断DPP-4抑制作用是该方发挥降糖作用的有效途径之一。
中药配方中红景天、菟丝子滋补肝肾二药合用为补益肾气,以增气化为该方主药,女贞子、枸杞子益精补血,五味子敛肺补肾,与菟丝子共同补益肺肾之阴。莱菔子下气除痰,车前子泻而通之,泻有形之浊。苏子降气化痰,与莱菔子合用,增加其行气化痰之力攻补兼施。方中葛根、丹参、决明子、栀子、茺蔚子兼顾清热消瘀。现代药理也表明该方中多味中药可以通过不同途径发挥降糖作用,如红景天苷对H2O2及高糖诱导的H9c2细胞氧化应激损伤有保护作用,并且这种作用可能是通过PI3K/Akt通路促进其下游因子GSK-3β的磷酸化并失活,从而抑制mPTP的开放而实现的。菟丝子及其单体成分可能通过抑制α-淀粉酶的活性、抗氧化应激、增强免疫功能等发挥降糖作用[13-14]。五味子通过减轻和修复β细胞损伤、增加胰岛素含量降低血糖,还能调节嘌呤代谢与肠内菌代谢治疗糖尿病肾病[15-16]。决明子可以改善氧化应激状态改善糖代谢[10]。女贞子提取物及其单体成分降糖作用可能与抑制α-葡萄糖苷酶、改善胰岛素抵抗相关[11]。栀子提取物能降低血糖,降低同型半胱氨酸水平[12]。枸杞子有效成分可以降糖、降脂、改善肾功能、延缓或抑制糖尿病肾病微血管炎症过程[17]。莱菔子降糖方面的作用尚未见报道。该方以中医传统理论及现代药理研究成果为依据配伍而成,既能补肾益气以增气化,又能祛痰化湿,清热消瘀,从现代医学角度分析,该方通过作用于不同靶向进而发挥改善糖代谢作用。
本实验结果表明该中药配方能改善T2DM大鼠糖代谢,具有一定提高GLP-1作用,抑制DPP-4可能是该方作用机制之一,初步判断莱菔子、菟丝子、栀子是该方发挥DPP-4抑制作用的主要药物。体外筛选实验仅进行了中药配方及其单味中药水提物抑制DPP-4研究,其结论尚不能全面反应各单味中药抑制DPP-4作用,今后还需进行不同浓度其他溶剂提取物抑制DPP-4筛选实验,以为该方提取工艺进一步优化提供实验依据。
此外,我们还通过实验发现本配方具有一定的抑制α-葡萄糖苷酶活性、改善胰岛素抵抗作用。
Claims (4)
1.一种改善糖代谢中药配方,其特征在于各组分的重量百分比:红景天15-30%、莱菔子15-30%、桑螵蛸2-10%;葛根5-10%;丹参10-20%;菟丝子10-30%;枸杞子5-10%;五味子5-10%;女贞子5-10%;苏子5-10%;车前子5-20%;茺蔚子5-20%;栀子5-10%;决明子5-10%。
2.一种改善糖代谢中药的制备工艺,其特征在于包含如下工艺步骤:
①分别将红景天15-30%;莱菔子15-30%;葛根5-10%;丹参10-20%;菟丝子10-30%;枸杞子5-10%;五味子5-10%;女贞子5-30%;苏子5-30%;车前子5-20%;茺蔚子5-20%;栀子5-30%;决明子5-10%;粉碎过60目筛,取筛下粉料备用,上述百分比为重量百分比;
②将红景天、莱菔子、葛根、丹参、菟丝子、枸杞子、五味子、女贞子、苏子、车前子、茺蔚子、栀子、决明子粉料混合,加料液体积比1:20的65%乙醇浸泡0.5小时,加热温度60度,超声振荡提取1次,提取时间90分钟,滤过,滤液回收乙醇,干燥浸膏,得醇提取物;过滤后药渣进入下一步提取;
③将上述过滤后药渣混合,加重量比8倍量水,提取1次,提取时间3小时,过滤取水提液并浓缩干燥,得水提取物;过滤后药渣弃去;
④将桑螵蛸超微粉碎;
⑤将水提取物、醇提取物和桑螵蛸超微粉碎物混合,干燥、粉碎后得粉状物料为提取的有效成分。
3.根据权利要求2所述的一种改善糖代谢中药的制备工艺,其特征在于提取的有效成分,最后得到有效成分的粉状物料,出粉率为25—30%,也就是说,最终提取的有效成分粉状物料的重量,是红景天、莱菔子、葛根、丹参、菟丝子、枸杞子、五味子、女贞子、苏子、车前子、茺蔚子、栀子、决明子、桑螵蛸原料粉料重量的25—30%。
4.根据权利要求2所述的一种改善糖代谢中药的制备工艺,其特征在于提取的有效成分粉状物料,与药用辅料配伍,可制成丸剂、胶囊剂、片剂、冲剂及颗粒剂,包装为每袋3g。
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