KR20040025914A

KR20040025914A - 치료제

Info

Publication number: KR20040025914A
Application number: KR10-2003-7013308A
Authority: KR
Inventors: 오노기히로무; 시라가마사히로; 사가와히로아끼; 가또이꾸노신
Original assignee: 다카라 바이오 가부시키가이샤
Priority date: 2001-04-10
Filing date: 2002-03-28
Publication date: 2004-03-26
Also published as: EP1386919A1; JPWO2002083660A1; CN100516059C; WO2002083660A1; KR100715927B1; US20060199774A1; CN1501922A; US7078386B2; US20040122082A1; JP4358515B2; KR100768024B1; EP1386919A4; KR20060092291A

Abstract

본 발명은 NGF 생산증강을 필요로 하는 질환의 치료, 증상개선, 예방 등에 유효한 NGF 생산증강 작용을 갖는 쿠마린 및/또는 크로만 골격을 갖는 화합물을 유효성분으로 하는 의약, 음료 또는 사료에 관한 것이다. 본 발명의 유효성분에 특별히 독성은 관찰되지 않아 부작용이 발생할 우려도 없기 때문에, 안전하며 적절하게 상기 질환의 치료 등을 실시할 수 있다.

Description

치료제{REMEDIES}

인간의 지적 기능, 기억, 감정, 행동 등의 신경활동의 유지에는 신경세포가 주요한 역할을 담당하고 있다. 이들 신경활동의 기초가 되고 있는 신경세포의 분화, 생존, 기능발현에는 각각의 신경세포에 특이적인 신경성 영양인자가 필요하다. 신경성 영양인자 중 최초로 그 존재 및 기능이 밝혀진 것이 신경성장인자 (Nerve Growth Factor, 이하 NGF 로 약기함) 로 현재는 뇌 유래 신경영양인자 (Brain-derived-neurotrophic Factor), 뉴로 트로핀 (Neuro trophin)-3, 뉴로 트로핀-4/5 등이 발견되어 있다.

NGF 는 전뇌 기저부의 대세포성 콜린 작동성 신경세포의 신경성 영양인자인 점에서 알츠하이머형 치매증과의 관련이 주목되고 있다 [팔마시아, Vol. 22, No. 2, 147 ∼ 151 (1986), 노년 정신의약, Vol. 3, No. 6, 751 ∼ 758 (1986)].

알츠하이머형 치매증이란, 발육 장해, 소증상 (巢症狀), 하지의 강직 구련 (拘攣), 간질유형의 발작 등의 임상을 동반하고, 노인성 플라크, 알츠하이머 원선유 변화 등의 병리학적 소견을 나타내는 질환으로서 노인성 치매의 병형태 중 하나이다. 최근 고령화 사회에서 증가 경향이 나타나 중대한 사회적 관심이 집중되고 있지만, 증상에 대한 이렇다 할 개선법이나 치료법이 발견되고 있지 않다. 또, 약년성 (juvenile) 알츠하이머에 대해서도 증상의 개선법이나 치료법이 발견되고 있지 않다.

알츠하이머형 치매증 환자 뇌에는 마이넬트 기저핵을 중심으로 하는 전뇌 기저부에 현저한 변성, 콜린아세틸기 전위효소 (CAT) 활성의 현저한 저하가 관찰되고 있다 [Annu. Rev. Neurosci., Vol. 3, 77 (1980)]. 1985 년에 래트 뇌를 사용한 연구에서 NGF 가 뇌의 이 부위에서의 신경성 영양인자임이 밝혀져 [EMBO J., Vol. 4, 1389 (1985)], NGF 와 본 질환의 관련이 주목되었다. 또 헌팅턴 무도증 환자 뇌의 선조체에서는 GABA 작동성 신경세포의 탈락과 함께 콜린 작동성 신경세포의 탈락이 현저하고, NGF 가 선조체의 내재성 콜린 작동성 신경세포에도 작용함이 밝혀져 [Science, Vol. 234, 1341 (1986)], 본 질환이 NGF 와 관련이 있을 가능성이 지적되고 있다. 각종 신경 질환의 모델이 될 수 있는 래트 등의 동물에서 NGF 의 효과가 연구되고, 래트에서는 신경세포의 변성이 현저해지기 이전에 NGF 를 뇌내 투여하면, 변성을 저지할 수 있어 CAT 활성의 저하도 방지할 수 있음이 보고되어 있다 [J. Neurosci., Vol. 6, 2155 (1986), Brain Res., Vol. 293, 305 (1985), Science, Vol. 235, 214 (1986), Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 83, 9231 (1986)]. 말초교감신경 지배조직 및 뇌에서 NGF 가 생합성되고 있는 것, 이 NGF 의 생합성에 말초조직 또는 뇌조직의 간질세포인 선유아세포 또는 아스트로 글리어세포가 각각 중요한 역할을 담당하고 있는 것도 증명되고 있다 [J. Bol.Chem., Vol. 259, 1259 (1984), Biochem. Biophys. Res. Commun., Vol. 136, 57 (1986)]. 또, 이 선유아세포나 아스트로 글리어세포가 생산하는 NGF 의 항원성, 분자량, 등전점, 생물 활성은 종래에 자주 연구되던 악하선 NGF 와 동일함이 밝혀지는 동시에, 선유아세포 (L-M 세포) 및 아스트로 글리어세포의 배양액에 다양한 신경전달물질을 가하는 실험에 의해 캐티코올아민 (노르에피네푸린, 에피네푸린, 도파민) 이 NGF 합성 촉진효과를 나타냄이 발견되고 있다 [J. Biol. Chem., Vol. 201, 6039 (1986)].

이와 같이, NGF 가 신경성 영양인자로서 작용하는 부위가 변성되는 이들 신경 질환에서, NGF 는 변성을 저지하는 치료약으로서 사용할 수 있을 것으로 기대된다. 또 뇌혈관 장해, 뇌종양, 뇌첨 (惱尖), 두부외상 변성 질환, 마취약물중독 등 뇌신경세포가 일단 변성에 빠지면 평생 회복되지 않아 그 결과 지적기능 저하, 기억 장해뿐만 아니라 감정 장해, 행동이상 등 다양한 장해를 일으키는데, 신경선유에는 가소성이 있어 손상을 받으면 그 부근의 건강한 선유로부터 발아가 발생하여 장해입은 시냅스로 바뀌어 새로운 시냅스가 형성되므로, 이 때 NGF 가 신경기능의 수복재생을 촉진시키는 치료약으로서 사용할 수 있을 것으로 기대된다.

그러나, NGF 를 각각 신경 질환의 치료에 응용하고자 한 경우, NGF 는 NGF 를 필요로 하는 신경세포의 매우 가까운 곳에 도달해야 하고, 중추신경 질환의 경우도 뇌세포의 환부에 NGF 를 보내야 하는데, 혈관계를 통하여 NGF 를 뇌내에 보낼 수 없다. 왜냐하면, 뇌내의 혈관 내피세포는 서로 밀착결합으로 결합되고 있어 (뇌혈액 관문이라고 함), 물, 가스, 지용성 물질 이외의 물질의 혈액으로부터 뇌조직으로의 이동은 제한을 받고 있기 때문이며, 고분자 물질인 단백질 (NGF 도 포함) 은 완전히 뇌혈관 관문을 통과할 수 없기 때문이다. 이 NGF 를 직접 뇌내에 외과적 수법을 사용하여 투입하는 것은 현재 기술로서도 지나치게 위험이 크다.

한편, 직접 NGF 를 투여하는 것은 아니며 NGF 의 생산을 증강시키는 물질의 개발도 실시되고 있는데, 그 대부분은 강한 독성을 갖거나 독성이 나오는 농도와 유효한 농도가 매우 근접한 물질, 또는 신경흥분 작용 등 신경계에 대해 중대한 부작용을 초래하는 물질인 등 많은 문제를 안고 있어 아직 실용화에는 이르지 못하고 있다.

발명의 개시

본 발명의 목적은 NGF 생산증강을 필요로 하는 질환의 치료, 증상개선, 예방 등에 유효한 NGF 생산증강 작용을 갖는 화합물을 유효성분으로 하는 의약, 식품, 음료 또는 사료을 제공하는 것에 있다.

본 발명자들은 예의 검토한 결과, 쿠마린 및/또는 크로만 골격을 갖는 화합물이 NGF 생산증강 활성을 가짐을 발견하고 본 발명을 완성시켰다.

즉, 본 발명을 개략적으로 설명하면, 본 발명의 제 1 발명은 (A) 쿠마린 골격을 갖는 화합물, (B) 2-디메틸크로만 골격을 갖는 화합물, 및 약리학적으로 허용되는 그들의 염으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 1 종의 화합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 NGF 생산증강을 필요로 하는 질환의 치료제 또는 예방제 (본 명세서에서 의약이라고도 함) 에 관한 것이다.

본 발명의 제 1 발명에서 쿠마린 골격을 갖는 화합물로는 화학식 (Ⅰ):

(식 중, R₁, R₂, R₃은 수소원자, 수산기, 지방족기, 방향족기, 방향지방족기 또는 당잔기이며, 각각 동일하거나 상이해도 됨)

또는 화학식 (Ⅱ):

(식 중, R₄, R₅는 수소원자, 수산기, R_iO 기, R_iiCOO 기 또는 당잔기이며, 각각 동일하거나 상이해도 됨)

로 표시되는 화합물이 예시된다.

또, 화학식 (Ⅰ) 로 표시되는 화합물로는 특히 바람직하게는 7-O-β-D-글루코피라노실옥시-8-프레닐쿠마린(7-O-β-D-glucopyranosyloxy-8-prenyl coumarin), 또는 7-β-D-글루코피라노실옥시-6-프레닐쿠마린(7-β-D-glucopyranosyloxy-6-prenyl coumarin) 이 예시되고, 화학식 (Ⅱ) 로 표시되는 화합물로는 특히 바람직하게는 3’-O-β-D-글루코피라노일켈락톤(3’-O-β-D-glucopyranoyl khellactone), 또는 4’-O-안겔로일-3’-O-[6-O-(β-D-글루코피라노실)-β-D-글루코피라노실]-켈락톤(4’-O-angeloyl-3’-O-[6-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]-khellactone) 이 예시된다.

본 발명의 제 1 발명에서 2-디메틸크로만 골격을 갖는 화합물로는 화학식 (Ⅲ):

(식중, R₆은 수소원자, 수산기, 카르복실기, 지방족기, 방향족기, 방향지방족기 또는 당잔기임)

으로 표시되는 화합물이 예시된다.

또, 화학식 (Ⅲ) 으로 표시되는 화합물로는 특히 바람직하게는 8-카르복실-3-히드록시-5-메톡시-2-디메틸크로만(8-carboxyl-3-hydroxy-5-methoxy-2-dimethyl chroman), 또는 3-히드록시-8-[3-(4-히드록시페닐)-아크릴로일]-5-메톡시-2-디메틸크로만(3-hydroxy-8-[3-(4-hydroxyphenyl)-acryloyl]-5-methoxy-2-dimethyl chroman) 이 예시된다.

본 발명의 제 2, 제 3 발명은 본 발명의 제 1 발명과 동일한 유효성분을 함유하는 것을 특징으로 하는 NGF 생산증강제, NGF 생산증강용 식품, 음료 또는 사료에 관한 것이다.

본 발명은 쿠마린 또는 크로만 골격을 갖는 화합물의 신경성장인자 생산증강 작용을 이용한 의약, 식품, 음료 또는 사료에 관한 것이다.

도 1 은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 10 의 FAB-MS 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

도 2 는 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 10 의¹H-NMR 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

도 3 은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 13-2 의 FAB-MS 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

도 4 는 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 13-2 의¹H-NMR 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

도 5 는 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 13-2 의¹³C-NMR 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

도 6 은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 18-4 의 FAB-MS 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

도 7 은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 18-4 의¹H-NMR 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

도 8 은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 18-4 의¹³C-NMR 스펙트럼을 나타내는도면이다.

도 9 는 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-5 의 FAB-MS 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

도 10 은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-5 의¹H-NMR 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

도 11 은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-5 의¹³C-NMR 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

도 12 는 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-6 의 FAB-MS 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

도 13 은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-6 의¹H-NMR 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

도 14 는 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-6 의¹³C-NMR 스펙트럼을 나타내는 도면이다.

발명을 실시하기 위한 최선의 형태

본 명세서에서「NGF 생산증강 작용」및「NGF 생산증강 활성」은 각각 NGF 생산증강을 가져오는 것 및 NGF 생산을 증강시키는 기능을 말하는데, 그 의미에서 특별히 엄밀하게 구별하지는 않는다. 「증강」에는, 본 발명의 유효성분의 작용 전에 비해 작용 후에 목적물질의 양이 증가하는 양태와 함께, 본 발명의 유효성분을 작용시킴으로써 목적물질을 생기시키는 양태 (유도) 를 포함한다. 또, 본 명세서에서 유효성분으로 예시하는 물질 모두 단독으로 또는 2 종 이상 혼합하여 본 발명에서 사용할 수 있다.

본 발명에서 유효성분으로 사용되는 화합물은 (A) 쿠마린 골격을 갖는 화합물, (B) 2-디메틸크로만 골격을 갖는 화합물, 및 약리학적으로 허용되는 그들의 염으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 1 종의 화합물 (이하, 본 발명에서 사용되는 화합물이라고도 함) 로서 NGF 생산증강 활성을 갖고 있으면 특별히 한정되지 않는다. 또, 후술하는 바와 같이 프로드러그로서 기능할 수 있는 해당 화합물의 유도체여도 된다. 따라서, 본 발명의 유효성분으로는 상기 (A), (B) 의 화합물, 및 본 발명의 원하는 효과를 얻을 수 있는 한 상기 (A), (B) 의 화합물의 유도체, 그리고 약리학적으로 허용되는 그들의 염을 포함한다. 또한, 본 명세서에서「약리학적으로 허용되는」이란 생물에 대해 실질적으로 독이 없는 것을 의미한다. 또, 상기 (A), (B) 의 화합물의 광학 이성체, 케토-에놀 호변 이성체, 기하 이성체 등의 각종 이성체, 각 이성체의 혼합물 또는 단독이어도 NGF 생산증강 활성을 갖는 한 모두 본 발명에서 사용할 수 있다.

본 발명에서 쿠마린 골격을 갖는 화합물로는 특별히 한정되지 않지만, 예컨대 상기 화학식 (Ⅰ) 또는 (Ⅱ) 로 표시되는 화합물이 예시된다.

한편, 2-디메틸쿠마린 골격을 갖는 화합물로는 특별히 한정되지 않지만, 예컨대 상기 화학식 (Ⅲ) 으로 표시되는 화합물이 예시된다.

본 명세서에서 지방족기로는 예컨대 메틸기, 에틸기, n-프로필기 등의 탄소수 1∼30 의 직쇄상 알킬기, 이소프렌기, 이소부틸기, sec-부틸기, tert-부틸기, 이소펜틸기, 네오펜틸기, tert-펜틸기 등의 분지상 알킬기, 에테닐기, 알릴기, 트랜스-1-프로페닐기, 시스-1-프로페닐기, 시스-8-헵타데세닐기, 시스-8-시스-11-헵타데카디에닐기, 시스-8-시스-11-시스-14-헵타데카트리에닐기, 시스-5-시스-8-시스-11-헵타데카트리에닐기, 시스-4-시스-7-시스-10-노나데카트리에닐기, 시스-4-시스-7-시스-10-시스-13-노나데카테트라에닐기, 시스-4-시스-7-시스-10-시스-13-시스-16-노나데카헵타에닐기, 시스-12-헨에이코세닐기, 시스-3-시스-6-시스-9-시스-12-시스-15-시스-18-헨에이코헥사에닐기 등의 직쇄상 알케닐기, 프레닐기, 이소프로페닐기, 시스-1-메틸-1-프로페닐기, 트랜스-1-메틸-1-프로페닐기, 트랜스-1-메틸-1-프로페닐기, 트랜스-1-에틸-1-프로페닐기 등의 분지상 알케닐기를 들 수 있다. 본 발명의 원하는 효과 발현의 관점에서, 이러한 지방족기의 바람직한 예로는 프레닐기를 들 수 있다.

또, 방향족기로는 예컨대 페닐기, 나프틸기, 비페닐기 외에 피롤릴기, 피리딜기, 인돌릴기, 이미다졸릴기, 톨릴기, 자일릴기 등을 들 수 있다.

방향지방족기의 바람직한 예로는 탄소수가 1∼20 인 포화 또는 불포화의 방향지방족기가 예시되고, 특히 바람직하게는 3-(4-히드록시페닐)-아크릴로일기가 예시된다. 그 외, 예컨대 알킬기의 탄소수가 1∼20 인 페닐알킬기 (예, 벤질기, 페네틸기), 스티릴기, 신나밀기 등을 들 수 있다.

당잔기를 구성하는 당으로는 예컨대, 글루코오스, 트레오스, 리보오스, 아피오스, 알로오스, 람노오스, 아라비아피라노오스, 리브로스트, 크실로오스, 갈락토오스, 만노오스, 탈로오스, 푸코오스, 프룩토오스, 글루쿠론산, 갈락투론산 등의 단당, 겐티오비오스, 네오헤스페리도오스, 루티노오스, 아가로비오스, 이소말토오스, 수크로오스, 크실로비오스, 니게로오스, 말토오스, 락토오스 등의 2 당, 아가로오스, 푸코이단 등의 다당 유래의 올리고당, 및 아가로오스, 푸코이단 등의 다당 등을 들 수 있다. 본 발명의 원하는 효과 발현의 관점에서, 이러한 당의 바람직한 예로는 글루코오스, 겐티오비오스를 들 수 있다. 또, 당잔기로는 당이 O-, N-, S- 또는 C-글리코시드 결합된 화합물 외에 당의 환원 말단 이외의 탄소와 C-C 결합에 의해 결합된 화합물도 포함된다.

R_iO 기의 R_i로는 상기 예시한 지방족기, 방향족기가 예시된다.

또, R_iiCOO 기의 R_ii로는 상기 예시한 지방족기, 방향족기가 예시된다. 본 발명의 원하는 효과 발현의 관점에서 R_iiCOO 기의 바람직한 예로는 안겔로일기를 들 수 있다.

또한, 본 발명에서 사용되는 상기 화학식 (Ⅰ), (Ⅱ) 및 (Ⅲ) 으로 표시되는 화합물로부터, 예컨대 에스테르로 하는 등, 체내에서 용이하게 가수분해되어 원하는 효과를 발휘할 수 있는 유도체 (프로드러그) 를 각각 형성할 수 있다. 이러한 프로드러그의 조제는 공지된 방법 (예컨대, 의약품의 개발, 제 7 권, 분자설계, 163 ∼ 198 페이지, 히로카와 서점 (Pharmaceutical Research and Development, Vol. 7, Drug Design p163-198, HIROKAWA Publishing Co.) 참조) 에 따르면 된다. 또한, 이러한 유도체는 그들의 염이어도 된다.

상기 화학식 (Ⅰ) 로 표시되는 화합물의 특히 바람직한 예로는 예컨대 7-O-β-D-글루코피라노실옥시-8-프레닐쿠마린(7-O-β-D-glucopyranosyloxy-8-prenyl coumarin), 또는 7-β-D-글루코피라노실옥시-6-프레닐쿠마린(7-β-D-glucopyranosyloxy-6-prenyl coumarin) 을 들 수 있다. 또 상기 화학식 (Ⅱ) 로 표시되는 화합물의 바람직한 예로는 3’-O-β-D-글루코피라노일켈락톤(3’-O-β-D-glucopyranoyl khellactone), 또는 4’-O-안겔로일-3’-O-[6-O-(β-D-글루코피라노실)-β-D-글루코피라노실]-켈락톤(4’-O-angeloyl-3’-O-[6-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]-khellactone) 을 들 수 있다. 이들 구조식에 대해 각각 순서대로 하기 화학식 (Ⅳ) ∼ (Ⅶ) 에 나타낸다.

또, 상기 화학식 (Ⅲ) 으로 표시되는 화합물의 바람직한 예로는, 예컨대 8-카르복실-3-히드록시-5-메톡시-2-디메틸크로만(8-carboxyl-3-hydroxy-5-methoxy-2-dimethyl chroman), 또는 3-히드록시-8-[3-(4-히드록시페닐)-아크릴로일]-5-메톡시-2-디메틸크로만(3-hydroxy-8-[3-(4-hydroxyphenyl)-acryloyl]-5-methoxy-2-dimethyl chroman) 을 들 수 있다. 예컨대, 전자의 구조식을 하기 화학식 (Ⅷ) 에 나타낸다.

상기하는 바와 같은 본 발명의 유효성분은, 전술하는 바와 같이 어느 것이나 NGF 생산증강 작용을 갖는 것이다. 해당 작용의 발현은 예컨대 후술하는 실시예 1-(2) 에 나타내는 방법에 의해 평가할 수 있다.

본 발명에서 유효성분으로 사용되는 화합물은 천연물로서 존재하는 경우는, 예컨대 식물 (예컨대 아시타바 등의 미나리과 식물) 에서 상법에 따라 추출하여 정제함으로써 얻을 수 있다. 추출은 공지된 방법에 따라 예컨대 원료를 분쇄 또는 가늘게 자른 후, 용매를 사용하여 배치식 또는 연속식으로 실시할 수 있다. 추출 용매로는 예컨대 물, 클로로포름, 에탄올, 메탄올, 이소프로필알콜 등의 알콜류, 아세톤, 메틸에틸케톤 등의 케톤류, 아세트산메틸, 아세트산에틸 등의 친수성 또는 친유성의 용매를 각각 단독으로 또는 혼합액으로 사용할 수 있다. 추출온도는 필요에 따라 적절하게 설정하고, 추출조작은 필요에 따라 수회 반복해도 된다. 정제방법으로는 예컨대 각종 크로마토그래피 등에 의해 분획하여 정제할 수 있다.

즉, 예컨대 아시타바로부터 본 발명에 사용되는 화합물을 정제하는 경우는 아시타바 뿌리부를 물을 용매로 하는 추출조작에 투입하고, 이어서 얻어진 추출액을 역상 크로마토그래피에 의해 분획ㆍ정제하여 본 발명에 사용되는 화합물을 얻을 수 있다.

상기한 7-β-D-글루코피라노실옥시-6-프레닐쿠마린(7-β-D-glucopyranosyloxy-6-prenyl coumarin), 4’-O-안겔로일-3’-O-[6-O-(β-D-글루코피라노실)-β-D-글루코피라노실]-켈락톤(4’-O-angeloyl-3’-O-[6-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]-khellactone) 및 8-카르복실-3-히드록시-5-메톡시-2-디메틸크로만(8-carboxyl-3-hydroxy-5-methoxy-2-dimethyl chroman) 은 본 발명에서 처음 아시타바로부터 단리된 화합물로 그 NGF 생산증강 작용에 대해서도 처음 확인되었다. 본 발명은 이들 화합물도 포함하는 것이다.

또한, 본 발명에서 유효성분으로서 사용할 수 있는 화합물로는 NGF 생산증강 활성을 갖는 한, 예컨대 시판되고 있는 화합물도 이용할 수 있고, 그 외에 오르토쿠마르산을 출발원료로 하여 공지된 방법에 의해 적절하게 합성할 수도 있다 (Bull. Soc., p2929 (1971) 참조). 또, 디케텐과 페놀의 반응으로부터 적절하게 합성할 수도 있다 (J. Chem. Soc., p854 (1954) 참조).

본 발명에서 사용되는 다양한 상기 화합물의 염으로는 예컨대 알칼리금속염, 알칼리토류금속염, 유기염기와의 염 등이 예시된다. 해당 염으로는 예컨대 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 암모늄 또는 프로톤화된 벤자틴(N,N'-디-벤질에틸렌디아민), 콜린, 에탄올아민, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, 메글라민(N-메틸글루카민), 베네타민(N-벤질페네틸아민), 피페라진 또는 트로메타민(2-아미노-2-히드록시메틸-1,3-프로판디올) 과의 염을 들 수 있다.

NGF 는 신경세포의 생존이나 기능을 유지하거나, NGF 의 농도 구배에 따라 신경세포를 신장시키는 내인성 성장인자이기 때문에, NGF 의 생산을 증감시킴으로써 알츠하이머병 등의 노인성 치매증이나 말초신경 장해, 뇌혈관 장해, 뇌종양, 뇌첨, 두부외상 변성 질환, 마취약물중독 등의 신경기능의 수복ㆍ재생을 필요로 하는 질환의 치료 또는 예방을 할 수 있는 것으로 생각된다. 또, 근위축성 측삭경화증, 약제장해성 말초신경 장해, 당뇨병성 말초신경 장해, 파킨슨병, 감각신경 장해, 색소성 망막증, 황반 변성증 등의 치료 또는 예방에도 유용할 것으로 생각된다. 본 발명의 유효성분은 NGF 생산증강 작용을 갖기 때문에 해당 유효성분을 포함하여 이루어진, 본 발명의 의약, 식품, 음료 또는 사료는 NGF 의 생산증강을 실시함으로써, 치료 또는 예방이 가능한 질환이면 특별히 한정되지 않지만, 여기에 구체적으로 예시한 바와 같은 NGF 생산증강을 필요로 하는 질환의 치료, 증상개선, 예방 등에 특히 유효하다. 또, 본 발명의 유효성분에는 후술하는 바와 같이 특별히 독성은 관찰되지 않아 부작용이 발생할 우려도 없다. 따라서, 안전하며 적절하게 NGF 의 생산증강을 실시할 수 있다. 이것은 본 발명의 의약, 식품, 음료 또는 사료의 중요한 이점이다.

본 발명의 NGF 생산증강을 필요로 하는 질환의 치료제 또는 예방제로는 본발명의 상기 유효성분을 공지된 의약용 담체와 조합하여 제제화한 것을 들 수 있다. 본 발명의 양태에서는 유효성분으로서의 염은 약리학적으로 허용될 수 있는 염을 사용한다.

본 발명의 치료제 또는 예방제의 제조는 통상 상기 유효성분을 약리학적으로 허용할 수 있는 액상 또는 고체상의 담체와 배합함으로써 실시된다. 그 때, 필요에 따라 용제, 분산제, 유화제, 완충제, 안정제, 부형제, 결합제, 붕괴제, 활택제 등을 첨가하여, 정제, 과립제, 산제, 분말제, 캡슐제 등의 고형제, 통상 액제, 현탁제, 유제 등의 액제로 할 수 있다. 또, 사용하기 전에 적당한 액체 담체의 첨가에 의해 액상으로 할 수 있는 건조품이나, 그 외 외용제로 할 수도 있다.

의약용 담체는 치료제 또는 예방제의 투여형태 및 제형에 따라 선택할 수 있다. 고체 조성물로 이루어지는 경구제로 하는 경우는 정제, 환제, 캡슐제, 산제, 세립제, 과립제 등으로 할 수 있다. 예컨대, 전분, 젖당, 백당, 만니톨, 카르복시메틸셀룰로오스, 옥수수전분, 무기염 등이 이용된다. 또, 경구제의 제조에 있어서는 추가로 결합제, 붕괴제, 계면활성제, 윤택제, 유동성 촉진제, 교미제, 착색제, 향료 등을 배합할 수도 있다. 예컨대 정제 또는 환제로 하는 경우는 필요에 따라 자당, 젤라틴, 히드록시프로필셀룰로오스 등의 당의 또는 위용성 또는 장용성 물질의 필름으로 피복해도 된다. 액체 조성물로 이루어지는 경구제로 하는 경우는 약리학적으로 허용되는 유탁제, 용액제, 현탁제, 시럽제 등으로 할 수 있다. 예컨대, 정제수, 에탄올 등이 담체로서 이용된다. 또, 추가로 필요에 따라 습윤제, 현탁제와 같은 보조제, 감미제, 풍미제, 방부제 등을 첨가해도 된다.

한편, 비경구제로 하는 경우는, 상법에 따라 본 발명의 상기 유효성분을 희석제로서의 주사용 증류수, 생리식염수, 포도당 수용액, 주사용 식물유, 참기름, 땅콩유, 대두유, 옥수수유, 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜 등에 용해 내지 현탁시키고, 필요에 따라 살균제, 안정제, 등장화제, 무통화제 등을 첨가하여 제조할 수 있다. 또, 고체 조성물을 제조하여 사용하기 전에 무균수 또는 무균의 주사용 용매에 용해시켜 사용할 수도 있다.

외용제로는 경피투여용 또는 경점막 (구강내, 비강내) 투여용인 고체, 반고체상 또는 액상의 제제가 포함된다. 또 좌제 등도 포함된다. 예컨대, 유제, 로션제 등의 유탁제, 외용 팅크제, 경점막 투여용 액제 등의 액상 제제, 오일성 연고, 친수성 연고 등의 연고제, 필름제, 테이프제, 파프제 등의 경피투여용 또는 경점막 투여용 부착제 등으로 할 수 있다.

이상의 각종 제제는 각각 공지된 의약용 담체 등을 이용하여 적절하게 상법에 의해 제조할 수 있다. 또, 이러한 제제에서의 유효성분의 함유량은 그 투여형태, 투여방법 등을 고려하고, 바람직하게는 후술하는 투여량 범위에서 해당 유효성분을 투여할 수 있는 양이면 특별히 한정되지 않는다.

본 발명의 치료제 및 예방제는 제제형태에 따른 적당한 투여경로로 투여할 수 있다. 투여방법도 특별히 한정되지 않고, 내용, 외용 및 주사에 의한 것이 가능하다. 주사제는, 예컨대 정맥내, 근육내, 피하, 피내 등에 투여할 수 있고, 외용제에는 예컨대 좌제를 그 적합한 투여방법에 의해 투여하면 된다.

본 발명의 치료제 및 예방제로서의 투여량은 그 제형형태, 투여방법, 사용목적 및 해당 치료제 또는 예방제의 투여대상인 환자의 연령, 체중, 증상 등에 따라 적절히 설정되고 일정하지는 않다. 일반적으로는 제제 중에 함유되는 상기 유효성분의 투여량으로 바람직하게는 성인 1 일당 0.1㎍ ∼ 2000㎎/㎏ 체중이다. 물론, 투여량은 다양한 조건에 따라 변동되므로, 상기 투여량보다 적은 양으로 충분한 경우도 있고, 또는 범위를 초과하여 필요한 경우도 있다. 투여는 필요한 투여량 범위내에서 1 일내에 1 회 또는 수회로 나눠 실시해도 된다. 또, 본 발명의 치료제 또는 예방제는 그대로 경구투여하는 것 외에, 임의의 음식품에 첨가하여 일상적으로 섭취시킬 수도 있다. 투여기간도 원하는 효과 발현에 따라 적절하게 결정하면 된다.

또, 본 발명은 상기 유효성분을 함유하는 NGF 생산증강제를 제공할 수도 있다. 해당 증강제로는 상기 유효성분 그 자체여도 되고, 또 상기 유효성분을 함유하는 조성물이어도 된다. 본 발명의 양태에서는 유효성분으로서의 염은 약리학적으로 허용되는 염이 바람직하다. NGF 생산증강제는 예컨대 상기 유효성분을 해당 유효성분과 동일한 용도에 사용가능한 다른 성분 등과 배합하고, 상기 치료제 또는 예방제의 제조방법에 준하여 통상 사용되는 시약의 형태로 제조하면 된다. 이러한 증강제에서의 상기 유효성분의 함유량은 해당 증강제의 사용목적, 사용방법 등을 고려하고, 본 발명의 원하는 효과 발현을 얻을 수 있는 양이면 되며, 특별히 한정되지 않는다. 또, 이 증강제의 사용량도 본 발명의 원하는 효과 발현을 얻을 수 있으면 특별히 한정되지 않는다. 특히, 생체에 투여하여 사용하는 경우에는 임의의 투여방법에 따라 바람직하게는 상기 치료제 또는 예방제에서의 유효성분의 투여량 범위내에서 유효성분을 투여할 수 있는 양으로 사용하면 된다. NGF 생산증강제는 NGF 생산증강을 필요로 하는 질환에서의 해당 성장인자의 증강에 유용하다. 또, 해당 증강제는 NGF 와 관련되는 질환에 대한 약물의 스크리닝에도 유용하다. 또한 해당 증강제는 NGF 또는 신경세포의 물리적 변화에 관한 기능 연구에도 유용하다.

또한, 본 발명의 다른 양태로서 본 발명에 관련되는 상기 유효성분을 동물에 투여하는 NGF 생산의 증강방법을 제공할 수도 있다. 본 발명의 양태에서는 유효성분으로서의 염은 약리학적으로 허용되는 염이 바람직하다. 이러한 방법은 NGF 생산의 증강이 필요할 것으로 예상되거나 또는 그것이 필요한 동물에 대해, 상기 유효성분을 바람직하게는 상기 NGF 생산증강제로서 투여함으로써 실시할 수 있고, 이러한 투여에 의해 NGF 의 생산을 증강시킨다. 유효성분의 투여방법, 투여량 등은 상기 NGF 생산증강제의 경우와 동일하게 하면 된다. 또한, NGF 생산의 증강방법에서는 본 발명의 치료제 또는 예방제, 후술하는 식품, 음료 또는 사료를 사용할 수도 있다. 또한,「동물」로는 예컨대 포유동물인 인간, 개, 고양이, 소, 돼지, 말 등을 들 수 있고, 그 중에서도 인간에 대해 바람직하게 사용된다. 이러한 NGF 생산의 증강방법은 예컨대 NGF 생산증강을 필요로 하는 질환의 치료 또는 예방에서의 NGF 생산증강에 유용하다. 또, 이 증강방법은 NGF 와 관련되는 질환에 대한 약물의 스크리닝에 유용하다. 또, 이 증강방법은 NGF 또는 신경세포의 물리적 변화에 관한 기능 연구에도 유용하다.

또, 본 발명은 상기 유효성분을 함유, 첨가 및/또는 희석하여 이루어지는 NGF 생산증강용 식품, 음료 또는 사료를 제공한다. 본 발명의 양태에서는 유효성분의 염으로는 약리학적으로 허용되는 염, 또는 그것과 동등한 안전성을 갖는 염이 바람직하다. 본 발명의 식품, 음료 또는 사료는 그 NGF 생산증강 작용에 의해 NGF 생산증강을 필요로 하는 질환의 증상개선, 예방에 매우 유용하다.

또한, 본 명세서에서「함유」란 식품, 음료 또는 사료 중에 본 발명에서 사용되는 유효성분이 함유되는 양태를,「첨가」란 식품, 음료 또는 사료의 원료에 본 발명에서 사용되는 유효성분을 첨가하는 양태를,「희석」이란 본 발명에서 사용되는 유효성분에 식품, 음료 또는 사료의 원료를 첨가하는 양태를 말하는 것이다.

본 발명의 식품, 음료 또는 사료의 제조법에 특별히 한정은 없다. 예컨대, 배합, 조리, 가공 등은 일반적으로 사용되고 있는 식품, 음료 또는 사료에 따르면 되고, 그것들의 제조법에 의해 제조할 수 있고, 얻어진 식품, 음료 또는 사료에 NGF 생산증강 작용을 갖는 본 발명의 상기 유효성분이 함유되어 있으면 된다.

본 발명의 식품 또는 음료로는 특별히 한정되지 않지만, 예컨대 본 발명의 상기 유효성분이 함유되어 이루어진, 곡물 가공품 (소맥분 가공품, 전분류 가공품, 프리믹스 가공품, 면류, 마카로니류, 빵류, 팥소류, 메밀류, 밀기울, 쌀국수, 당면, 및 포장떡 등), 유지 가공품 (가소성 유지, 튀김기름, 샐러드유, 마요네즈류, 및 드레싱 등), 대두 가공품 (두부류, 된장, 및 대두발효품 등), 식육 가공품 (햄, 베이컨, 압축햄, 및 소시지 등), 수산제품 (냉동 다진 어육, 어묵, 관 모양의 어묵, 다진 어육, 기름에 튀긴 어육, 어육 볼, 시뉴 (sinew), 어육 햄, 소시지, 가다랭이포, 어란 가공품, 수산 통조림, 및 해산물을 간장으로 조린 반찬 (쯔꾸다니) 등), 유제품 (원료유, 크림, 요구르트, 버터, 치즈, 연유, 분유, 및 아이스크림 등), 야채ㆍ과일 가공품 (페이스트류, 잼류, 절임채소류, 과일음료, 야채음료, 및 믹스음료 등), 과자류 (쵸컬릿, 비스켓류, 과자빵류, 케이크, 떡과자, 및 쌀과자류 등), 알콜 음료 (정종, 중국술, 와인, 위스키, 일본 증류주 (소주), 보드카, 브랜디, 진, 럼주, 맥주, 청량 알콜 음료, 과일주, 및 리큐어 등), 기호 음료 (녹차, 홍차, 우롱차, 커피, 청량음료, 및 유산음료 등), 조미료 (간장, 소스, 식초, 및 미림 등), 통조림ㆍ병조림ㆍ포장 식품 (쇠고기 야채 덮밥, 쇠고기 야채 솥밥, 팥밥, 카레라이스, 및 기타 각종 조리식품 등), 반건조 또는 농축 식품 (리버 페이스트, 기타 스프레드, 메밀국수 또는 우동의 국물 및 농축 수프류), 건조 식품 (즉석 면류, 즉석 카레, 인스턴트 커피, 분말 쥬스, 분말 수프, 즉석 된장국 (미소), 조리식품, 조리음료, 및 조리수프 등), 냉동 식품 (스키야끼, 차완무시 (일식 계란찜), 장어구이, 햄버그 스테이크, 슈마이, 교자 (만두), 각종 스틱, 및 후루츠 칵테일 등), 고형 식품, 액체 식품 (수프 등), 향신료류 등을 함유하는 농산ㆍ임산 가공품, 축산 가공품, 수산 가공품 등을 들 수 있다.

본 발명의 식품 또는 음료에는 본 발명에서 유효성분으로 사용되는 상기 화합물이 단독으로 또는 복수 함유, 첨가 및/또는 희석되어 있고, 그 NGF 생산증강 작용을 발현시키기 위한 필요량이 함유되어 있으면 특별히 그 형상에 한정은 없다. 예컨대, 태블릿형상, 과립형상, 캡슐형상 등 경구적으로 섭취가 가능한 형상물도 포함된다.

본 발명의 식품 또는 음료 중의 상기 유효성분의 함유량은 특별히 한정되지 않고, 그 식감과 활성 발현의 관점에서 적절하게 선택할 수 있다. 예컨대 식품 중 바람직하게는 0.00001 중량% 이상, 보다 바람직하게는 0.0001 ∼ 10 중량% 이며, 더욱 바람직하게는 0.0006 ∼ 6 중량% 이다. 또, 예컨대 음료 중, 바람직하게는 0.00001 중량% 이상, 보다 바람직하게는 0.0001 ∼ 10 중량% 이며, 더욱 바람직하게는 0.0006 ∼ 6 중량% 이다. 본 발명의 식품 또는 음료는 그것들에 함유되는 유효성분의 섭취량이 예컨대 성인 1 일당 바람직하게는 0.001 ∼ 100㎎/㎏ 체중, 보다 바람직하게는 0.1 ∼ 10㎎/㎏ 이 되도록 섭취하는 것이 바람직하다.

또, 본 발명은 상기 유효성분을 함유, 첨가 및/또는 희석하여 이루어지는 NGF 생산증강 작용을 갖는 생물용 사료를 제공한다. 또한, 다른 일 양태로서 상기 유효성분을 생물에 투여하는 것을 특징으로 하는 생물의 사육방법도 제공한다. 또한, 본 발명의 다른 일 양태로서 상기 유효성분을 함유하는 것을 특징으로 하는 생물 사육용제가 제공된다.

이들 발명에서 생물이란 예컨대 양식동물, 페트동물 등이며, 양식동물로는 가축, 실험동물, 가금, 어류, 갑각류 또는 패류가 예시된다. 사료로는 컨디션의 유지 및/또는 개선용 사료가 예시된다. 생물 사육용제로는 침지용제, 사료첨가제, 음료용 첨가제가 예시된다.

이들 발명에 의하면, 이들을 적용하는 상기 예시한 바와 같은 생물에서, 본 발명에 사용되는 상기 유효성분의 NGF 생산증강 작용에 기초하여 본 발명의 상기 치료제 또는 예방제에 의한 것과 동일한 효과 발현을 기대할 수 있다. 즉, 해당 생물에서의 NGF 생산증강 작용을 필요로 하는 질환의 치료 또는 예방 효과를 갖는다.

본 발명에 사용되는 상기 유효성분은 통상, 대상생물의 체중 1㎏, 1 일당 바람직하게는 0.01 ∼ 2000㎎ 이 투여된다. 투여는 본 발명의 사료에 의해 실시하는 것이 바람직하다. 예컨대 해당 유효성분을 대상생물에 공급하는 인공배합 사료의 원료 중에 첨가 혼합해 두거나, 또는 인공배합 사료의 분말원료와 혼합한 후, 그 외의 원료에 추가로 첨가 혼합함으로써 실시할 수 있다. 상기 유효성분의 사료 중 함유량은 특별히 한정되지 않고 목적에 따라 설정하면 되는데, 바람직하게는 0.001 ∼ 15 중량% 의 비율이 바람직하다.

인공배합 사료로는 어분, 카세인, 오징어 분말 등의 동물성 원료, 대두박 (大豆粕), 소맥분, 전분 등의 식물성 원료, 사료용 효모 등의 미생물 원료, 대구 간유, 오징어 간유 등의 동물성 유지, 대두유, 채종유 등의 식물성 유지, 비타민류, 미네랄류, 아미노산, 항산화제 등을 원료로 하는 인공배합 사료를 들 수 있다. 또, 어육 민스 등의 어류용 사료를 들 수 있다.

본 발명의 사료의 제조법에 특별히 제한은 없고, 또 배합도 일반 사료에 준하는 것이면 되고, 제조된 사료 중에 NGF 생산증강 작용을 갖는 본 발명의 상기 유효성분이 함유되어 있으면 된다.

또, NGF 생산증강 작용을 갖는 본 발명의 상기 유효성분을 풀, 수조, 저장 탱크 또는 사육영역의 물, 해수 등에 직접 첨가하여 대상생물을 침지시킴으로써 투여할 수도 있다. 이 침지방법은 대상생물의 사료 섭취량이 저하되었을 때 특히유효하다. 물 또는 해수 중의 NGF 생산증강 작용을 갖는 본 발명의 유효성분의 농도는 특별히 한정되지 않고 목적에 따라 사용하면 되는데, 바람직하게는 0.00001 ∼ 1 중량% 의 비율이 적당하다.

또 NGF 생산증강 작용을 갖는 본 발명의 상기 유효성분을 함유하는 음료를 사육용 음료로 대상생물에 섭취시켜도 된다. 이 음료 중의 NGF 생산증강 작용을 갖는 본 발명의 유효성분의 농도는 특별히 한정되지 않고 목적에 따라 사용하면 되는데, 0.0001 ∼ 1 중량% 의 비율이 적당하다. NGF 생산증강 작용을 갖는 본 발명의 상기 유효성분을 함유하여 이루어지는 생물사육용제, 예컨대 침지용제, 사료첨가제, 음료용 첨가제는 그 자체 공지된 배합 및 제조법으로 제조하면 된다. 이 생물사육용제에서의 유효성분의 함유량은 본 발명의 원하는 효과를 얻을 수 있으면 특별히 한정되는 것은 아니다.

본 발명을 적용할 수 있는 생물은 한정되지 않지만, 양식동물로는, 말, 소, 돼지, 양, 염소, 낙타, 라마 등의 가축, 마우스, 래트, 몰모트, 토끼 등의 실험동물, 닭, 오리, 칠면조, 타조 등의 가금, 참돔, 돌돔, 광어, 가자미, 방어, 새끼방어, 부시리, 다랑어, 발구지, 은어, 연어ㆍ송어류, 자지복, 민물장어, 미꾸라지, 메기 등의 어류, 참새우, 블랙타이거, 장수새우, 꽃게 등의 갑각류 등, 전복, 소라, 가리비, 굴 등의 패류, 페트동물로는 개, 고양이 등을 들 수 있고, 육상ㆍ수중동물에 폭넓게 적용할 수 있다.

본 발명의 생물의 사육방법은, 본 발명의 상기 사료나 생물사육용제를 사용하고, 그것들의 사용방법으로서 구체적으로 예시한 방법에 의해 생물에 본 발명의유효성분을 섭취시킴으로써 실시할 수 있다.

예컨대, NGF 생산증강 작용을 갖는 본 발명에 사용되는 상기 유효성분을 함유하여 이루어지는 사료를 섭취시키거나, 또는 NGF 생산증강 작용을 갖는 본 발명에 사용되는 상기 유효성분의 함유액에 대상생물을 침지시킴으로써 가축, 실험동물, 가금, 어류, 갑각류, 패류, 페트동물 등의 컨디션을 양호하게 유지하거나 개선시킬 수 있다.

또한, 본 발명의 다른 양태로서 NGF 생산증강을 필요로 하는 질환의 치료제 또는 예방제, NGF 생산증강제, 또는 NGF 생산증강용 식품, 음료 또는 사료의 제조를 위한 본 발명의 상기 유효성분의 사용을 제공한다. 이러한 사용의 양태로는 본 발명의 상기 치료제 또는 예방제, NGF 생산증강제, 또는 NGF 생산증강용 식품, 음료 또는 사료의 제조에서의 상기 유효성분의 사용 양태를 들 수 있다. 예컨대, NGF 생산증강을 필요로 하는 질환의 치료제 또는 예방제, 또는 NGF 생산증강제의 제조에서의, 상기 유효성분의 사용으로는 상기와 같은 정제, 과립제, 산제, 분말제, 캡슐제 등의 고형제, 통상 액제, 현탁제, 유제 등의 액제, 또 사용하기 전에 적당한 담체의 첨가에 의해 액상으로 할 수 있는 건조품의 제조에서의 사용이 예시된다.

본 발명에서 사용되는 상기 유효성분은 그 작용 발현에 있어서의 유효량을 투여해도 독성은 관찰되지 않는다. 예컨대, 경구투여의 경우, 3’-O-β-D-글루코피라노일켈락톤, 7-O-β-D-글루코피라노실옥시-8-프레닐쿠마린, 7-β-D-글루코피라노실옥시-6-프레닐쿠마린,4’-O-안겔로일-3’-O-[6-O-(β-D-글루코피라노실)-β-D-글루코피라노실]-켈락톤, 8-카르복실-3-히드록시-5-메톡시-2-디메틸크로만, 3-히드록시-8-[3-(4-히드록시페닐)-아크릴로일]-5-메톡시-2-디메틸크로만 또는 이들의 광학 활성체 또는 그것들의 염 중 어느 하나를 1g/㎏ 으로 마우스에 단회 투여해도 사망예는 관찰되지 않는다. 또, 부작용의 발생도 관찰되지 않는다.

이하, 실시예를 들어 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 이들의 기재에 전혀 한정되는 것은 아니다. 또한, 특별한 사정이 없는 한 실시예에서의 % 는 중량% 를 의미한다.

조제예 1

아시타바 뿌리부 유래 프랙션의 분획

(1) 건조 아시타바 (학명: Angelica Keiskei) 뿌리부 분말 5.8㎏ 에 24ℓ의 아세트산에틸을 첨가하여 실온에서 3 시간 추출을 실시하였다. 흡인여과 후의 잔사에 18ℓ의 에탄올을 첨가하여 실온에서 하룻밤 추출을 실시하였다. 이어서, 흡인여과 후의 잔사에 52ℓ의 증류수를 첨가하여 60℃ 에서 3 시간 추출을 실시하였다. 고형 잔사를 제거한 액체 부분을 로터리 이배퍼레이터로 농축한 것에 2.5 배량의 에탄올을 첨가하여 4℃ 에서 하룻밤 정치하였다. 그 후, 흡인여과로 침전물과 액체 부분으로 분획하였다. 액체 부분을 로터리 이배퍼레이터로 농축 건고시켜 아시타바 뿌리부 수추출 저분자 획분을 얻었다. 이어서 아시타바 뿌리부 수추출 저분자 획분을 앰버라이트 XAD-2 (오르가노사 제조: 수지량 2ℓ)에 넣고 증류수 30ℓ로 비흡착물을 충분히 씻어내고, 이어서 16ℓ의 메탄올로 흡착물을 용출시켰다. 메탄올 용출액을 로터리 이배퍼레이터로 농축 건고시켜 아시타바 뿌리부 수추출 저분자 획분 XAD-2 처리물을 얻었다.

(2) 조제예 1-(1) 에 기재된 아시타바 뿌리부 수추출 저분자 획분 XAD-2 처리물을 역상 크로마토그래피를 사용하여 분획하였다. 이하에 그 조건에 대해 나타낸다. 수지는 코스모실 140 C18-OPN (나카라이테스크사 제조: 수지량 400㎖) 을 사용하였다. 아시타바 뿌리부 수출부 저분자 획분 XAD-2 처리물을 상기 수지를 충전한 칼럼에 공급하여 전개용매로서 각각 1ℓ의 증류수, 20% 아세토니트릴 수용액, 25% 아세토니트릴 수용액, 40% 아세토니트릴 수용액, 메탄올의 순서로 용출을 실시하고, 각 용출 획분을 감압 농축하여 각 코스모실 분획물을 조제하였다.

(3) 조제예 1-(2) 에서 얻은 코스모실 140 으로부터의 25% 아세토니트릴 수용액 용출 획분을 역상 크로마토그래피를 사용하여 분획하였다. 이하에 그 조건에 대해 나타낸다. 칼럼은 TSK gel ODS-80Ts (21.5㎜ X 30㎝: 도소사 제조) 를 사용하였다. 용매 A (증류수) 와 용매 B (증류수와 아세토니트릴을 용량비 1 대 1 로 혼합한 것) 의 용출비는 0 분 내지 120 분에 걸쳐 용매 B 비를 직선적으로 25% 내지 100% 로, 이어지는 20 분간은 용매 B 비를 100% 로 유지, 마지막에 용매 B 비를 25% 로 하여 20 분간 유지로 하였다. 용출속도는 5㎖/분, 검출은 235㎚ 로 실시하였다. 자외선 흡수를 지표로 프랙션 1 ∼ 30 을 채취하였다.

실시예 1

3’-O-β-D-글루코피라노일켈락톤(3’-O-β-D-glucopyranoyl khellactone) 의 NGF 생산증강 활성

(1) 조제예 1-(3) 에서 얻은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 10 (유지시간 62.2 분의 검출 피크를 포함하는 프랙션) 의 질량스펙트럼 (MS) 을 질량분석계 (DX302: 니혼덴시사 제조) 에 의해 FAB-MS 의 수법으로 측정하였다. 매트릭스에는 글리세롤을 사용하였다. 그 결과, m/z 245 (M-OGlc)⁺의 피크를 검출하였다. 도 1 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 10 의 FAB-MS 스펙트럼을 나타낸다. 도 1 에서 횡축은 m/z 값, 종축은 상대강도를 나타낸다.

아시타바 뿌리부 유래 프랙션 10 을 핵자기공명 (NMR) 스펙트럼장치 (JNM-A 500: 니혼덴시사 제조) 를 사용하여 각종 NMR 스펙트럼을 측정하여 구조 해석하였다. 이하에 NMR 의 귀속 신호를 나타낸다.

단,¹H-NMR 에서는 시료는 중디메틸술폭시드에 용해시켜 잔류 디메틸술폭시드의 화학 시프트값을 2.49ppm 으로 나타냈다. 도 2 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 10 의¹H-NMR 스펙트럼을 나타낸다. 도 2 에서 횡축은 화학 시프트값 (ppm), 종축은 시그널 강도를 나타낸다.

아시타바 뿌리부 유래 프랙션 10 에 대해 실시한 MS 스펙트럼, NMR 스펙트럼 해석 결과, 3’-O-β-D-글루코피라노일켈락톤 (분자량 424) 임을 확정하였다.

(2) 실시예 1-(1) 에서 구조가 확정된 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 10 의 NGF 생산증강 활성을 측정하였다. 마우스 선유아세포 L-M 세포 (ATCC CCL-1.2) 를 0.5% 의 박토펩톤 (기브코사 제조) 을 함유하는 M199 배지 (ICN 사 제조) 에 1.5 ×10⁵세포/㎖ 로 현탁하여 96 웰 플레이트에 0.1㎖ 씩 뿌려 무균적으로 배양하였다. 3 일간 배양한 후, 배지를 제거하고, 0.5% 의 소 혈청 알부민 (시그마사 제조) 을 함유하는 M199 배지로 전환하였다. 여기에 시료로서 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 10 을 첨가하여 20 시간 배양하였다. 배양 종료 후, 배양액 중의 NGF 농도를 엔자임 이뮤노 어세이법 (NGF Emax Immuno Assay System : 프로메가사 제조) 으로 측정하였다. 시료를 첨가하지 않은 세포배양액 중의 NGF 농도 (대조의 NGF 생산량) 를 100 % 로 하여 시료 첨가시의 NGF 농도 (시료 첨가시의 NGF 생산량) 를 나타내고, 시료의 NGF 생산증강 활성에 대해 평가하였다. 시료는 최종 농도가 표 1 에 나타내는 농도가 되도록 첨가하였다. 실험은 2 번 연속으로 실시하고 그 평균값을 채용하였다. 그 결과, 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 10, 즉 3’-O-β-D-글루코피라노일켈락톤에 NGF 생산증강 활성이 있음이 밝혀졌다. 표 1 에 그 결과를 나타낸다.

분획 프랙션 (검출 피크: 분)	농도 (㎎/㎖)	NGF 생산량 (%)
프랙션 10 (62.2)	2.00	565.5

단, 대조의 NGF 생산량은 0.382ng/㎖ 였다.

실시예 2

7-O-β-D-글루코피라노실옥시-8-프레닐쿠마린(7-O-β-D-glucopyranosyloxy-8-prenyl coumarin) 의 NGF 생산증강 활성

(1) 조제예 1-(3) 에서 얻은 프랙션 13 (유지시간 66.9 분의 검출 피크를 포함하는 프랙션) 의 역상 크로마토그래피를 사용하여 다시 분획하였다. 이하에 그 조건에 대해 나타낸다. 칼럼은 TSK gel ODS-80TsQA (4.6㎜ X 25㎝: 도소사 제조) 를 사용하였다. 용매 A (0.1% 트리플루오로아세트산을 함유하는 증류수) 와 용매 B (증류수와 아세토니트릴을 용량비 1 대 1 로 혼합한 것으로 0.1% 트리플루오로아세트산을 함유함) 의 용출비는 20 분간, 용매 B 비를 50% 유지로 하였다. 용출속도는 1㎖/분, 검출은 235㎚ 로 실시하고, 자외선 흡수를 지표로 프랙션 13-1 ∼ 13-8 을 채취하였다.

(2) 실시예 2-(1) 에서 얻은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 13-2 (유지시간 8.7 분의 피크를 포함하는 프랙션) 의 MS 스펙트럼, NMR 스펙트럼을 실시예 1-(1) 과 동일한 방법으로 측정하였다.

질량분석에 의해 m/z 393 (M+H)⁺의 피크를 검출하였다. 도 3 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 13-2 의 MS 스펙트럼을 나타낸다. 도 3 에서 횡축은 m/z 값, 종축은 상대강도를 나타낸다.

아시타바 뿌리부 유래 프랙션 13-2 의 NMR 의 귀속 신호를 나타낸다.

도 4 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 13-2 의¹H-NMR 스펙트럼을 나타낸다. 도 4 에서 횡축은 화학 시프트값 (ppm), 종축은 시그널 강도를 나타낸다.

단,¹³C-NMR 에서는 시료는 중디메틸술폭시드에 용해시켜 중디메틸술폭시드의 화학 시프트값을 39.5ppm 으로 나타냈다. 도 5 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 13-2 의¹³C-NMR 스펙트럼을 나타낸다. 도 5 에서 횡축은 화학 시프트값 (ppm), 종축은 시그널 강도를 나타낸다.

아시타바 뿌리부 유래 프랙션 13-2 에 대해 실시한 MS 스펙트럼, NMR 스펙트럼 해석 결과, 7-O-β-D-글루코피라노실옥시-8-프레닐쿠마린 (분자량 392) 임이 확정되었다.

(3) 실시예 2-(2) 에서 구조가 확정된 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 13-2 를시료로서 사용하고, 그 NGF 생산증강 활성을 실시예 1-(2) 와 동일한 방법으로 측정하였다. 시료는 최종농도가 표 2 에 나타내는 농도가 되도록 첨가하였다. 그 결과, 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 13-2, 즉 7-O-β-D-글루코피라노실옥시-8-프레닐쿠마린에 NGF 생산증강 활성이 있음이 밝혀졌다. 표 2 에 그 결과를 나타낸다.

분획 프랙션 (검출 피크: 분)	농도 (㎎/㎖)	NGF 생산량 (%)
프랙션 13-2 (8.7)	1.00	792.1

단, 대조의 NGF 생산량은 0.053ng/㎖ 였다.

실시예 3

8-카르복실-3-히드록시-5-메톡시-2-디메틸크로만(8-carboxyl-3-hydroxy-5-methoxy-2-dimethyl chroman) 의 NGF 생산증강 활성

(1) 조제예 1-(3) 에서 얻은 프랙션 18 (유지시간 73.0, 73.8, 74.97 분의 검출 피크를 포함하는 프랙션) 을 실시예 2-(1) 과 동일한 방법으로 역상 크로마토그래피를 사용하여 18-1 ∼ 18-12 로 다시 분획하였다.

(2) 실시예 3-(1) 에서 얻은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 18-4 (유지시간 10.9 분의 피크를 포함하는 프랙션) 의 MS 스펙트럼, NMR 스펙트럼을 실시예 2-(2) 와 동일한 방법으로 측정하였다.

질량분석에 의해 m/z 253 (M+H)⁺의 피크를 검출하였다. 도 6 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 18-4 의 MS 스펙트럼을 나타낸다. 도 6 에서 횡축은m/z 값, 종축은 상대강도를 나타낸다.

NMR 의 귀속 신호를 이하에 나타낸다.

도 7 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 18-4 의¹H-NMR 스펙트럼을 나타낸다. 도 7 에서 횡축은 화학 시프트값 (ppm), 종축은 시그널 강도를 나타낸다.

도 8 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 18-4 의¹³C-NMR 스펙트럼을 나타낸다. 도 8 에서 횡축은 화학 시프트값 (ppm), 종축은 시그널 강도를 나타낸다.

아시타바 뿌리부 유래 프랙션 18-4 의 MS 스펙트럼, NMR 스펙트럼 해석 결과, 8-카르복실-3-히드록시-5-메톡시-2-디메틸크로만 (분자량 252) 임이 확정되었다.

(3) 실시예 3-(2) 에서 구조가 확정된 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 18-4 를 시료로서 사용하고, 그 NGF 생산증강 활성을 실시예 1-(2) 와 동일한 방법으로 측정하였다. 시료는 최종농도가 표 3 에 나타내는 농도가 되도록 첨가하였다. 그 결과, 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 18-4, 즉 8-카르복실-3-히드록시-5-메톡시-2-디메틸크로만에 NGF 생산증강 활성이 있음이 밝혀졌다. 표 3 에 그 결과를나타낸다.

분획 프랙션 (검출 피크: 분)	농도 (㎎/㎖)	NGF 생산량 (%)
프랙션 18-4 (10.9)	0.0375	2510.4

단, 대조의 NGF 생산량은 0.027ng/㎖ 였다.

실시예 4

7-β-D-글루코피라노실옥시-6-프레닐쿠마린(7-β-D-glucopyranosyloxy-6-prenyl coumarin) 의 NGF 생산증강 활성

(1) 조제예 1-(3) 에서 얻은 프랙션 19 (유지시간 75.4 분의 검출 피크를 포함하는 프랙션), 프랙션 20 (76.5 분의 검출 피크를 포함하는 프랙션) 을 혼합하여 실시예 2-(1) 과 동일한 방법으로 역상 크로마토그래피를 사용하여 프랙션 19/20-1 ∼ 19/20-7 로 다시 분획하였다.

(2) 실시예 4-(1) 에서 얻은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-5 (유지시간 16.4 분의 피크를 포함하는 프랙션) 의 MS 스펙트럼, NMR 스펙트럼을 실시예 2-(2) 와 동일한 방법으로 측정하였다.

질량분석에 의해 m/z 393 (M+H)⁺의 피크를 검출하였다. 도 9 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-5 의 MS 스펙트럼을 나타낸다. 도 9 에서 횡축은 m/z 값, 종축은 상대강도를 나타낸다.

NMR 의 귀속 신호를 이하에 나타낸다.

도 10 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-5 의¹H-NMR 스펙트럼을 나타낸다. 도 10 에서 횡축은 화학 시프트값 (ppm), 종축은 시그널 강도를 나타낸다.

도 11 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-5 의¹³C-NMR 스펙트럼을 나타낸다. 도 11 에서 횡축은 화학 시프트값 (ppm), 종축은 시그널 강도를 나타낸다.

아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-5 에 대해 실시한 MS 스펙트럼, NMR 스펙트럼 해석 결과, 7-β-D-글루코피라노실옥시-6-프레닐쿠마린 (분자량 392) 임이 확정되었다.

(3) 실시예 4-(2) 에서 구조가 확정된 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-5 를 시료로서 사용하고, 그 NGF 생산증강 활성을 실시예 1-(2) 와 동일한 방법으로측정하였다. 시료는 최종농도가 표 4 에 나타내는 농도가 되도록 첨가하였다. 그 결과, 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-5, 즉 7-β-D-글루코피라노실옥시-6-프레닐쿠마린에 NGF 생산증강 활성이 있음이 밝혀졌다. 표 4 에 그 결과를 나타낸다.

분획 프랙션 (검출 피크: 분)	농도 (㎎/㎖)	NGF 생산량 (%)
프랙션 19, 20-5 (16.4)	1.00	487.9

단, 대조의 NGF 생산량은 0.063ng/㎖ 였다.

실시예 5

4’-O-안겔로일-3’-O-[6-O-(β-D-글루코피라노실)-β-D-글루코피라노실]-켈락톤(4’-O-angeloyl-3’-O-[6-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]-khellactone) 의 NGF 생산증강 활성

(1) 실시예 4-(1) 에서 얻은 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-6 (유지시간 18.8 분의 검출 피크를 포함하는 프랙션) 의 MS 스펙트럼, NMR 스펙트럼을 실시예 2-(2) 와 동일한 방법으로 측정하였다.

질량분석에 의해 m/z 245 (M-2Glc-Angel)⁺, 669 (M+H)⁺, 691 (M+Na)⁺, 707 (M+K)⁺의 피크를 검출하였다. 도 12 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-6 의 MS 스펙트럼을 나타낸다. 도 12 에서 횡축은 m/z 값, 종축은 상대강도를 나타낸다.

NMR 의 귀속 신호를 이하에 나타낸다.

도 13 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-6 의¹H-NMR 스펙트럼을 나타낸다. 도 13 에서 횡축은 화학 시프트값 (ppm), 종축은 시그널 강도를 나타낸다.

도 14 에 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-6 의¹³C-NMR 스펙트럼을 나타낸다. 도 14 에서 횡축은 화학 시프트값 (ppm), 종축은 시그널 강도를 나타낸다.

아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-6 에 대해 실시한 MS 스펙트럼, NMR 스펙트럼 해석 결과, 4’-O-안겔로일-3’-O-[6-O-(β-D-글루코피라노실)-β-D-글루코피라노실]-켈락톤 (분자량 668) 임이 확정되었다.

(2) 실시예 5-(1) 에서 구조가 확정된 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-6 을 시료로서 사용하고, 그 NGF 생산증강 활성을 실시예 1-(2) 와 동일한 방법으로 측정하였다. 시료는 최종농도가 표 5 에 나타내는 농도가 되도록 첨가하였다. 그 결과, 아시타바 뿌리부 유래 프랙션 19/20-6, 즉 4’-O-안겔로일-3’-O-[6-O-(β-D-글루코피라노실)-β-D-글루코피라노실]-켈락톤에 NGF 생산증강 활성이 있음이 밝혀졌다. 표 5 에 그 결과를 나타낸다.

분획 프랙션 (검출 피크: 분)	농도 (㎎/㎖)	NGF 생산량 (%)
프랙션 19/20-6 (18.8)	1.00	337.7

단, 대조의 NGF 생산량은 0.063ng/㎖ 였다.

실시예 6

3-히드록시-8-[3-(4-히드록시페닐)-아크릴로일]-5-메톡시-2-디메틸크로만(3-hydroxy-8-[3-(4-hydroxyphenyl)-acryloyl]-5-methoxy-2-dimethyl chroman) 의 NGF 생산증강 활성

(1) 조제예 1-(1) 에서 얻어진 아세트산에틸 추출액을 로터리 이배퍼레이터로 감압 농축 후, 클로로포름에 용해시켜 전량을 실리카겔 BW-300SP (후지실리시아 카가쿠사 제조: 750㎖) 에 흡착시켰다. 이어서, 헥산:클로로포름=2:5 (750㎖),클로로포름 (1000㎖), 클로로포름:메탄올=10:1 (1100㎖) 을 사용하여 흡착물을 단계적으로 용출시키고, 각 용출 획분을 감압 농축하여 각 실리카겔 분획물을 조제하였다.

(2) 실시예 6-(1) 에 기재된 클로로포름:메탄올=10:1 용출 획분을 클로로포름 30㎖ 에 용해시키고, 그 중 15㎖ 를 실리카 크로마토그래피를 사용하여 분획하였다. 이하에 그 조건에 대해 나타낸다. 실리카겔에는 BW-300SP (300㎖) 를 사용하였다. 전개용매로서 클로로포름 (1800㎖), 클로로포름:메탄올=500:7 (300㎖) 를 사용하고, 이 순서대로 용출을 실시하였다. 이어서 아세트산에틸 (300㎖) 로 용출 후, 각 용출액을 감압 농축하여 각 실리카 칼럼 분획물을 조제하였다.

(3) 실시예 6-(2) 에 기재된 아세트산에틸 용출 획분을 클로로포름:메탄올=50:1 (20㎖) 에 용해시키고, 실리카 크로마토그래피를 사용하여 분획하였다. 이하에 그 조건에 대해 나타낸다. 실리카겔에는 BW-300SP (300㎖) 를 사용하였다. 전개용매로서 클로로포름:메탄올=500:10 (1200㎖), 클로로포름:메탄올=500:13 (500㎖), 클로로포름:메탄올=500:19 (500㎖), 클로로포름:메탄올=500:22 (800㎖), 아세트산에틸 (500㎖) 을 사용하고, 이 순서대로 단계적으로 용출시켜 1 프랙션에 18㎖ 씩 분리채취하였다. 얻어진 프랙션의 프랙션번호 68 내지 83 을 모아 감압 농축하고, 10% 에탄올 수용액에 용해시켜 프랙션 68 ∼ 83 의 10% 에탄올 수용액을 얻었다.

(4) 실시예 6-(3) 에 기재된 10% 에탄올 수용액을 역상 크로마토그래피를 사용하여 분획하였다. 수지는 코스모실 140 C18-OPN (나카라이테스크사 제조: 수지량 50㎖) 을 사용하였다. 전개용매로서 각각 200㎖ 의 증류수, 10% 에탄올 수용액, 20% 에탄올 수용액, 30% 에탄올 수용액, 50% 에탄올 수용액, 에탄올을 사용하고, 이 순서대로 용출을 실시하고 각 용출 획분을 감압농축하여 각 코스모실 분획물을 조제하였다.

(5) 실시예 6-(4) 의 30% 에탄올 수용액 용출 획분으로부터 아세트산에틸과 헥산을 사용하고 재결정을 실시하여 화합물 A 36㎎ 을 얻었다.

(6) 실시예 6-(5) 에서 조제한 화합물 A 의 MS 스펙트럼, NMR 스펙트럼을 실시예 2-(2) 와 동일한 방법으로 측정하였다. 또한, 매트릭스에는 m-니트로벤질알콜을 사용하였다. 질량분석에 의해 m/z 355 (M+H)+ 의 피크를 검출하였다.

NMR 의 귀속 신호를 이하에 나타낸다.

단,¹³C-NMR 에서는 시료는 중디메틸술폭시드에 용해시켜 중디메틸술폭시드의 화학 시프트값을 2.50ppm 으로 나타냈다.

(7) 화합물 A 에 대해 실시한 MS 스펙트럼, NMR 스펙트럼 해석 결과, 3-히드록시-8-[3-(4-히드록시페닐)-아크릴로일]-5-메톡시-2-디메틸크로만(3-hydroxy-8-[3-(4-hydroxyphenyl)-acryloyl]-5-methoxy-2-dimethyl chroman) (분자량 354) 임이 확정되었다.

(8) 실시예 6-(7) 에서 구조가 확정된 3-히드록시-8-[3-(4-히드록시페닐)-아크릴로일]-5-메톡시-2-디메틸크로만(3-hydroxy-8-[3-(4-hydroxyphenyl)-acryloyl]-5-methoxy-2-dimethyl chroman) 을 시료로서 사용하고, 그 NGF 생산증강 활성을 실시예 1-(2) 와 동일한 방법으로 측정하였다. 시료는 최종농도가 표 6 에 나타내는 농도가 되도록 첨가하였다. 그 결과, 3-히드록시-8-[3-(4-히드록시페닐)-아크릴로일]-5-메톡시-2-디메틸크로만(3-hydroxy-8-[3-(4-hydroxyphenyl)-acryloyl]-5-methoxy-2-dimethyl chroman) 에 NGF 생산증강 활성이 있음이 밝혀졌다. 표 6 에 그 결과를 나타낸다.

농도 (μM)	NGF 생산량 (%)
200	457.7

단, 대조의 NGF 생산량은 0.668ng/㎖ 였다.

본 발명에 의해 쿠마린 및/또는 크로만 골격을 갖는 화합물을 함유하는 NGF생산증강을 필요로 하는 질환의 치료 등에 유효한 의약, 식품, 음료 또는 사료가 제공된다.

이 의약은 치매증 또는 신경 장해 등의 NGF 생산증강을 필요로 하는 질환의 치료제 또는 예방제로서 유용하다. 또, 본 발명에 의해 쿠마린 및/또는 크로만 골격을 갖는 화합물을 함유하는 NGF 생산증강제도 제공되고, 이 증강제는 NGF 의 기능 연구, NGF 와 관련되는 질환용 의약의 스크리닝에 유용하다.

또, 이 식품 또는 음료는 일상적인 음식품으로 섭취함으로써 NGF 생산증강을 필요로 하는 질환의 증상개선 등에 유효하게 작용한다. 따라서, 쿠마린 및/또는 크로만 골격을 갖는 화합물을 유효성분으로 하는 본 발명의 음식품은 생체의 항상성 유지에 유효한 기능성 음식품이다.

본 발명의 사료는 그 유효성분에 의한 NGF 생산증강 작용에 의해 동물 생체의 항상성 유지에 기여할 수 있다.

Claims

(A) 쿠마린 골격을 갖는 화합물, (B) 2-디메틸크로만 골격을 갖는 화합물, 및 약리학적으로 허용되는 그들의 염으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 1 종의 화합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 신경성장인자 생산증강을 필요로 하는 질환의 치료제 또는 예방제.
제 1 항에 있어서, 쿠마린 골격을 갖는 화합물이 화학식 (Ⅰ):

(식 중, R₁, R₂, R₃은 수소원자, 수산기, 지방족기, 방향족기, 방향지방족기 또는 당잔기이며, 각각 동일하거나 상이해도 됨)

또는 화학식 (Ⅱ):

[식 중, R₄, R₅는 수소원자, 수산기, R_iO 기, R_iiCOO 기 (단, R_i및 R_ii는 지방족기 또는 방향족기임) 또는 당잔기이며, 각각 동일하거나 상이해도 됨]

로 표시되는 화합물인 치료제 또는 예방제.
제 2 항에 있어서, 화학식 (Ⅰ) 로 표시되는 화합물이 7-O-β-D-글루코피라노실옥시-8-프레닐쿠마린(7-O-β-D-glucopyranosyloxy-8-prenyl coumarin), 또는 7-β-D-글루코피라노실옥시-6-프레닐쿠마린(7-β-D-glucopyranosyloxy-6-prenyl coumarin) 이며, 화학식 (Ⅱ) 로 표시되는 화합물이 3’-O-β-D-글루코피라노일켈락톤(3’-O-β-D-glucopyranoyl khellactone), 또는 4’-O-안겔로일-3’-O-[6-O-(β-D-글루코피라노실)-β-D-글루코피라노실]-켈락톤(4’-O-angeloyl-3’-O-[6-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]-khellactone) 인 치료제 또는 예방제.
제 1 항에 있어서, 2-디메틸크로만 골격을 갖는 화합물이 화학식 (Ⅲ):

(식중, R₆은 수소원자, 수산기, 카르복실기, 지방족기, 방향족기, 방향지방족기 또는 당잔기임)

으로 표시되는 화합물인 치료제 또는 예방제.
제 4 항에 있어서, 화학식 (Ⅲ) 으로 표시되는 화합물이 8-카르복실-3-히드록시-5-메톡시-2-디메틸크로만(8-carboxyl-3-hydroxy-5-methoxy-2-dimethyl chroman), 또는 3-히드록시-8-[3-(4-히드록시페닐)-아크릴로일]-5-메톡시-2-디메틸크로만(3-hydroxy-8-[3-(4-hydroxyphenyl)-acryloyl]-5-methoxy-2-dimethyl chroman) 인 치료제 또는 예방제.
(A) 쿠마린 골격을 갖는 화합물, (B) 2-디메틸크로만 골격을 갖는 화합물, 및 약리학적으로 허용되는 그들의 염으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 1 종의 화합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 신경성장인자 생산증강제.
제 6 항에 있어서, 쿠마린 골격을 갖는 화합물이 제 2 항에 기재된 화학식 (Ⅰ) 또는 화학식 (Ⅱ) 로 표시되는 화합물인 신경성장인자 생산증강제.
제 7 항에 있어서, 화학식 (Ⅰ) 로 표시되는 화합물이 7-O-β-D-글루코피라노실옥시-8-프레닐쿠마린(7-O-β-D-glucopyranosyloxy-8-prenyl coumarin), 또는 7-β-D-글루코피라노실옥시-6-프레닐쿠마린(7-β-D-glucopyranosyloxy-6-prenyl coumarin) 이며, 화학식 (Ⅱ) 로 표시되는 화합물이 3’-O-β-D-글루코피라노일켈락톤(3’-O-β-D-glucopyranoyl khellactone), 또는 4’-O-안겔로일-3’-O-[6-O-(β-D-글루코피라노실)-β-D-글루코피라노실]-켈락톤(4’-O-angeloyl-3’-O-[6-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]-khellactone) 인 신경성장인자 생산증강제.
제 6 항에 있어서, 2-디메틸크로만 골격을 갖는 화합물이 제 4 항에 기재된 화학식 (Ⅲ) 으로 표시되는 화합물인 신경성장인자 생산증강제.
제 9 항에 있어서, 화학식 (Ⅲ) 으로 표시되는 화합물이 8-카르복실-3-히드록시-5-메톡시-2-디메틸크로만(8-carboxyl-3-hydroxy-5-methoxy-2-dimethyl chroman), 또는 3-히드록시-8-[3-(4-히드록시페닐)-아크릴로일]-5-메톡시-2-디메틸크로만(3-hydroxy-8-[3-(4-hydroxyphenyl)-acryloyl]-5-methoxy-2-dimethyl chroman) 인 신경성장인자 생산증강제.
(A) 쿠마린 골격을 갖는 화합물, (B) 2-디메틸크로만 골격을 갖는 화합물, 및 그들의 염으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 1 종의 화합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 신경성장인자 생산증강용 식품, 음료 또는 사료.
제 11 항에 있어서, 쿠마린 골격을 갖는 화합물이 제 2 항에 기재된 화학식 (Ⅰ) 또는 화학식 (Ⅱ) 로 표시되는 화합물인 신경성장인자 생산증강용 식품, 음료 또는 사료.
제 12 항에 있어서, 화학식 (Ⅰ) 로 표시되는 화합물이 7-O-β-D-글루코피라노실옥시-8-프레닐쿠마린(7-O-β-D-glucopyranosyloxy-8-prenyl coumarin), 또는 7-β-D-글루코피라노실옥시-6-프레닐쿠마린(7-β-D-glucopyranosyloxy-6-prenyl coumarin) 이며, 화학식 (Ⅱ) 로 표시되는 화합물이 3’-O-β-D-글루코피라노일켈락톤(3’-O-β-D-glucopyranoyl khellactone), 또는 4’-O-안겔로일-3’-O-[6-O-(β-D-글루코피라노실)-β-D-글루코피라노실]-켈락톤(4’-O-angeloyl-3’-O-[6-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]-khellactone) 인 신경성장인자 생산증강용 식품, 음료 또는 사료.
제 11 항에 있어서, 2-디메틸크로만 골격을 갖는 화합물이 제 4 항에 기재된 화학식 (Ⅲ) 으로 표시되는 화합물인 신경성장인자 생산증강용 식품, 음료 또는 사료.
제 14 항에 있어서, 화학식 (Ⅲ) 으로 표시되는 화합물이 8-카르복실-3-히드록시-5-메톡시-2-디메틸크로만(8-carboxyl-3-hydroxy-5-methoxy-2-dimethyl chroman), 또는 3-히드록시-8-[3-(4-히드록시페닐)-아크릴로일]-5-메톡시-2-디메틸크로만(3-hydroxy-8-[3-(4-hydroxyphenyl)-acryloyl]-5-methoxy-2-dimethyl chroman) 인 신경성장인자 생산증강용 식품, 음료 또는 사료.
7-β-D-글루코피라노실옥시-6-프레닐쿠마린(7-β-D-glucopyranosyloxy-6-prenyl coumarin) 또는 그 염.
4’-O-안겔로일-3’-O-[6-O-(β-D-글루코피라노실)-β-D-글루코피라노실]-켈락톤(4’-O-angeloyl-3’-O-[6-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]-khellactone) 또는 그 염.
8-카르복실-3-히드록시-5-메톡시-2-디메틸크로만(8-carboxyl-3-hydroxy-5-methoxy-2-dimethyl chroman) 또는 그 염.