KR102536447B1 - 사이클릭 디뉴클레오티드 화합물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 화학식 I의 화합물에 관한 것이며, 상기 화합물은 특히 STING의 조절제인 중요한 약리학적 특성을 갖고 있다.
[화학식 I]

상기 화학식 I에서,
R¹, R² 및 R³은 제1항에서 정의된 바와 같다.

Description

사이클릭 디뉴클레오티드 화합물

본 발명은, 비-퓨린 핵염기 이미다조피리다지논, 하나의 퓨린 핵염기 및 하나의 비-정규(non-canonical) 2',5'-포스포로티오에이트 모이어티(moiety)를 특징으로 하고 사이토카인 생산을 유도하는, 화학식 I의 신규한 사이클릭 디뉴클레오티드 화합물(CDN) 및 이의 약제학적으로 허용되는 염에 관한 것이다. 또한 본 발명은, 본 발명의 화합물을 함유하는 약제학적 조성물 및 병용물, 및 STING(인터페론 유전자의 자극제)과 관련되거나 이에 의해 조절되는 질환을 치료하기 위한 상기 조성물 및 병용물의 의학적 용도에 관한 것이다. 특히, 본 발명의 약제학적 조성물은 염증, 알레르기성 및 자가면역성 질환들, 감염성 질환, 암의 치료에 대해 그리고 백신 애주번트(adjuvant)로서 적합하다.

면역계의 역할은 병원체 및 악성 세포로부터 신체를 보호하는 것이다. 그러나, 바이러스 및 암 세포는 면역계를 피할 수 있는 방법을 찾아낸다. 따라서, 면역 요법의 목적은, 항원 특이적 면역 반응을 개시하거나, 병원성 침입자 또는 암 세포에 대한 면역계의 특정 세포 유형에서 기존의 반응을 재활성화하는 것이다.

면역계는, 선천 면역계 및 적응 면역계의 두 가지 부문(arm)으로 대략적으로 그룹화될 수 있는, 여러 가지 특수한 계통(lineage)으로 구성된다. 성공적인 면역 반응을 위해서는 양 부문의 계통이 협력하여 작용해야 한다. 선천 면역계의 주요 역할은, 적응계와는 달리 항원 특이성이 없고 오래 지속되는 병원체 또는 악성 세포에 대한 빠른 면역 반응에 시작하는(mount) 것이다. 선천 면역계는, 병원체 또는 형질전환 세포의 직접적인 사멸 이외에도, 적응 면역계를 활성화시키고 후속적으로 이를 지시한다. 항원 제시 세포, 예를 들어 수지상 세포는 림프구 조직에서 T 세포에 대한 펩타이드-주요 조직적합성 복합체(MHC) 복합체의 형태로 항원을 포획하고 제시한다. 이러한 항원 제시는 특정 사이토카인의 분비와 함께, 항원 특이적 이펙터(effector) CD4 및 CD8 T 세포의 활성화 및 분화를 유발한다. 항원 제시 세포 및 다른 세포 유형에 의한 I형 인터페론(IFN) 생산은, I형 IFN의 부재가 바이러스 감염 또는 종양 세포에 대한 감소된 T 세포 의존성 면역 반응을 초래하기 때문에, T 세포의 활성화에서 중요한 이벤트(event)로 간주된다(Zitvogel 등, Nature Reviews Immunology 15, 405 - 414, 2015). 반면에, 암 치료 동안 I형 IFN 시그니처(signature)의 존재는, T 세포에 침윤하는 증가된 수의 종양 및 잠재적으로 유리한 임상 결과와 관련된다(Sistigu 등, Nature Medicine 20, 1301 - 1309, 2014).

마우스에서의 최근 연구는, 종양 미세 환경에서 I형 IFN의 효율적인 분비 및 암세포에 대한 T 세포 의존 면역 반응의 유도가 인터페론 유전자의 어댑터(adaptor) 단백질 자극제(STING(stimulator of interferon genes), Tmem173, MPYS, MITA, ERIS로도 알려져 있음)의 존재에 따른다는 것을 보였다(Woo 등, Immunity 41, 5, 830 - 842, 2014; Corrales 등, Cell Reports 11, 1018 - 1030, 2015; Deng 등, Immunity 41, 5, 843 - 852, 2014). I형 IFN의 존재의 중요성은, STING의 결손이, 종양 미세 환경에서의 감소된 I형 IFN 수준 및 몇몇 종양 마우스 모델에서의 감소된 항종양 효과를 초래한다는 사실에 의해 강조되었다. 반면, STING의 특이적인 활성화는 암 세포에 대한 향상된 항원 특이적 T 세포 면역 반응을 초래했다.

STING은 핵산 센서군에 속하며 세포질 DNA 신호전달을 위한 어댑터이다. STING의 기초 상태에서. STING은 ER에 고정된(anchored) N 말단 도메인 및 세포질에 상주하는(residing) C 말단 도메인을 갖는 이량체로서 존재한다. 단백질 사이 클릭 GMP-AMP 신타아제(cGAS)에 의해 생성된 사이클릭 디뉴클레오티드(CDN)는, STING의 천연 리간드이다(Ablasser 등, Nature 498, 380 - 384, 2013). STING에 대한 CDN의 결합은, TANK 결합 키나아제(TBK1) 및 인터페론 조절 인자 3(IRF3)의 결합 및 활성화, 및 ER로부터 핵 주위 엔도솜으로의 위치 재선정(relocalisation)을 가능하게 하는 입체형태 변화를 유도한다(Liu 등, Science 347, Issue 6227, 2630-1-2630-14, 2015). TBK1에 의한 전사 인자 IRF3 및 NF-κB의 인산화는 I형 IFN을 포함하는 다중 사이토카인의 발현을 초래한다.

바이러스 감염 및 암 치료요법을 포함하는 몇 가지 악성에서의 I형 IFN의 중요성을 고려할 때, STING의 특이적 활성화를 허용하는 전략이 치료상의 관심사이다.

WO 2014/189805는, 2개의 퓨린 핵염기 및 1개 이상의 비-정규 2',5' 포스포디에스테르 또는 포스포로티오에이트 모이어티를 특징으로 하고, STING-의존성 사이토카인 생성을 유도하는 사이클릭 디뉴클레오티드 화합물을 개시한다.

WO 2015/185565는, 2개의 퓨린 핵염기, 리보오스 테트라하이드로푸란 환 대신 1개 또는 2개의 사이클로펜탄 및 1개의 비-정규 2',5' 포스포디에스테르 모이어티를 특징으로 하고, STING을 조절하는 사이클릭 디뉴클레오티드 화합물을 개시한다.

WO 2016/120305는, 2개의 퓨린 핵염기, 2'-OH가 2'-F로 대체된 1개의 리보오스 모이어티 및 1개의 비-정규 2',5' 포스포디에스테르 모이어티를 특징으로 하고, STING을 조절하는 사이클릭 디뉴클레오티드 화합물을 개시한다.

US 2014/0329889, WO 2014/099824, WO 2015/017652 및 문헌[Cell 154, 748-762 (2013), and Molecular Cell 51, 226-235 (2013)]은, 2개의 퓨린 핵염기, 1개의 정규 3',5' 및 1개의 비-정규 2',5' 포스포디에스테르 모이어티를 특징으로 하는 사이클릭 디뉴클레오티드 2'3'-cGAMP(사이클릭 [G(2',5')pA(3',5')p])를 개시한다. 비-정규 연결된 2'3'-cGAMP는 정규 연결된 3'3'-cGAMP 또는 대칭성 세균 c-디-GMP보다 높은 친화도로 인간 STING과 결합되고, I형 인터페론 생성을 유도한다.

WO 2014/093936은, 2개의 퓨린 핵염기 및 2개의 정규 3',5' 포스포디에스테르 또는 포스포로티오에이트 모이어티를 특징으로 하고, STING-의존성 사이토카인 생성을 유도하는 사이클릭 디뉴클레오티드 화합물을 개시한다.

US 7,709,458은, 2개의 퓨린 핵염기 및 2개의 정규 3',5' 포스포디에스테르 모이어티를 특징으로 하고, 암 세포 증식을 억제하기 위해 또는 암 세포 세포자멸사를 증가시키기 위해 사용될 수 있는, 사이클릭 디뉴클레오티드 화합물, 특히 대칭성 세균 CDN c-di-GMP를 개시한다.

US 7,592,326은, 2개의 퓨린 핵염기 및 2개의 정규 3',5' 포스포디에스테르 모이어티를 특징으로 하는 면역 자극성 사이클릭 디뉴클레오티드 화합물, 특히 대칭성 세균 CDN c-디-GMP를 개시한다.

WO 2016/096174 및 WO 2016/145102는, 2개의 퓨린 핵염기 및 2개의 정규 3',5' 포스포디에스테르 또는 포스포로티오에이트 모이어티를 특징으로 하고, STING-의존성 사이토카인 생성을 유도하는 사이클릭 디뉴클레오티드 화합물을 개시한다.

문헌[Bioorg. Med. Chem. Lett. 18 (2008) 5631-5634]은, 대칭성 세균 CDN c-디-GMP의 면역 자극성 모노포스포로티오에이트 및 비스포스포로티오에이트 유사체를 개시한다.

제1 양태에서, 본 발명은 화학식 I의 사이클릭 디뉴클레오티드 화합물 및 이의 이소형, 토토머, 입체 이성질체, 대사물, 전구 약물, 용매화물, 수화물 및 염, 특히 무기 또는 유기 염기를 포함하는 이의 생리학적으로 허용되는 염, 또는 이들의 조합을 제공한다.

[화학식 I]

상기 화학식 I에서,

R¹은, H, F, -O-C_{1 -3}-알킬 및 OH로 이루어지는 그룹으로부터 선택되고,

R²는 H이거나,

R²는 -CH₂-이고 R¹은 -O-이고, 이들은 함께 -CH₂-O- 브릿지(bridge)("Locked Nucleic Acid", "LNA")를 형성하고,

R³은, 퓨린, 아데닌, 구아닌, 크산틴, 하이포크산틴으로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 퓨린 핵염기이고, 이의 N⁹ 질소를 통해 연결된다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 시험관내 및/또는 생체내 STING-의존성 방식으로 사이토카인 생산을 유도하고 치료법에서 사용하기에 적합한, 즉, 의약으로서 사용하기에 적합한 약리학적 및 약동학적 특성을 갖는 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 신규한 화학식 I의 화합물을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은 STING에 관련되거나 이에 의해 조절되는 질환 또는 병태의 치료에 사용하기 위한 신규한 화학식 I의 화합물을 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하여 제공한다.

추가적인 양태에서, 본 발명은 염증, 알레르기성 또는 자가면역성 질환들, 예를 들어 알러지성 비염 또는 천식을 치료하기 위한, 감염성 질환 또는 암을 치료하기 위한, 또는 백신 애주번트로 사용하기 위한 신규한 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 대상체에서 STING에 관련되거나 이로 조절되는 질환 또는 병태의 치료 방법으로서, 치료학적 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 대상체에게 투여함을 포함하는 치료 방법을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 염증, 알레르기성 또는 자가면역성 질환들, 예를 들어 알레르기성 비염 또는 천식의 치료를 필요로 하거나, 감염성 질환 또는 암의 치료를 필요로 하는 환자에서, 염증, 알레르기성 또는 자가면역성 질환들, 예를 들어 알레르기성 비염 또는 천식 또는 감염성 질환 또는 암을 치료하기 위한 방법으로서, 치료학적 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 상기 환자에게 투여함을 포함하는 치료 방법을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, STING의 조절이 유익한 질환 또는 병태의 치료에 사용하기 위한 또는 STING과 관련되거나 이에 의해 조절되는 질환 또는 병태를 치료하기 위한 의약의 제조에서, 화학식 I의 화합물의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 염증, 알레르기성 또는 자가면역성 질환들, 예를 들어 알레르기성 비염 또는 천식의 치료에 사용하기 위한, 또는 감염성 질환 또는 암을 치료하기 위한 의약의 제조에서의, 또는 백신 애주번트로서 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 추가의 치료제를 포함하는 병용물을 제공한다.

본 발명의 추가의 목적은, 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 적어도 하나의 추가의 치료제 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 치료에 사용하기 위한 하나 이상의 추가의 치료제를 포함하는 병용물을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, STING의 조절이 유익한 질환 또는 병태의 치료에 사용하기 위한 또는 STING과 관련되거나 이에 의해 조절되는 질환 또는 병태의 치료에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 하나 이상의 추가의 치료제를 포함하는 병용물을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 염증, 알레르기성 및 자가면역성 질환, 감염성 질환 및 암의 치료에 사용하기 위한, 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 추가의 치료제를 포함하는 병용물을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 환자의, STING의 조절이 유익하거나 또는 STING에 관련되거나 이에 의해 조절되는 질환 또는 병태의 치료 방법으로서, 상기 환자에 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 추가의 치료제를 포함하는 병용물을 치료학적 유효량으로 투여함을 포함하는, 치료 방법을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 환자의, 염증, 알레르기성 또는 자가면역성 질환들, 감염성 질환 또는 암의 치료 방법으로서, 상기 환자에 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 추가의 치료제를 포함하는 병용물을 치료학적 유효량으로 투여함을 포함하는, 치료 방법을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 백신 애주번트를 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은 항원 또는 항원 조성물 및 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 면역원성 조성물을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 질환의 치료 또는 방지에서 사용하기 위한, 항원 또는 항원 조성물 및 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 면역원성 조성물을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 질환을 치료 또는 방지하기 위한 항원 또는 항원 조성물을 포함하는 면역원성 조성물을 제조하기 위한, 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 질환을 앓고 있거나 질환에 걸리기 쉬운 인간 대상체에게, 항원 또는 항원 조성물 및 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 면역원성 조성물을 투여함을 포함하는, 질환의 치료 또는 방지 방법을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 질환의 치료 또는 방지에 사용하기 위한, 항원 또는 항원 조성물 및 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 백신 조성물을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 질환을 치료 또는 방지하기 위한 항원 또는 항원 조성물을 포함하는 백신 조성물을 제조하기 위한, 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은, 질환을 앓고 있거나 질환에 걸리기 쉬운 인간 대상체에 대한, 항원 또는 항원 조성물 및 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 백신 조성물의 투여를 포함하는, 질환의 치료 또는 방지 방법을 제공한다.

본 발명의 추가의 목적은 상기 및 하기 설명에 의해 그리고 실시예들에 의해 당업자에게 명백해질 것이다.

본 발명의 화합물은 몇 가지 이점, 예를 들어 인간 STING에 대한 유리한 결합 친화력, 유리한 세포 활성, 즉, 상이한 인간 STING 대립 유전자를 포함하는 세포에서의 활성, 세포 검정에서의 유리한 안정성 및 유리한 약동학적(PK) 특성을 나타낸다.

달리 언급하지 않는 한, R¹ 및 R² 및 R³은 상기 및 하기에서 정의된 바와 같다. 본 발명에 따른 화합물의 개별 치환체의 일부 바람직한 의미가 이하에 제공될 것이다. 이들 정의 중 임의 것 및 각각은 서로 조합될 수 있다.

R ¹ 및 R ² :

제1 양태에서, R¹ 및 R²는 상기 언급된 바와 같이 정의된다.

또 다른 양태에서, R¹ 및 R²는 둘 다 H이다.

또 다른 양태에서, R¹은 F이고 R²는 H이다.

또 다른 양태에서, R¹은 -OH이고 R²는 H이다.

또 다른 양태에서, R¹은 -OCH₃이고 R²는 H이다.

또 다른 양태에서, R¹은 -O- 및 R²는 -CH₂-이며, 이들은 함께 -O-CH₂- 브릿지를 형성한다.

R ³ :

제1 양태에서, R³은 상기 언급된 바와 같이 정의된다.

또 다른 양태에서, R³은 퓨린이며, 이의 N⁹ 질소를 통해 연결된다.

또 다른 양태에서, R³은 아데닌이며, 이의 N⁹ 질소를 통해 연결된다.

또 다른 양태에서, R³은 구아닌이며, 이의 N⁹ 질소를 통해 연결된다.

또 다른 양태에서, R³은 크산틴이며, 이의 N⁹ 질소를 통해 연결된다.

또 다른 양태에서, R³은 하이포크산틴이며, 이의 N⁹ 질소를 통해 연결된다.

하기 표는 화학식 I의 화합물의 추가의 구체적인 양태 I-1 내지 I-16을 나타낸다:

본 발명에 따른 화합물의 바람직한 하부구조를 화학식 Ia로 나타낸다.

[화학식 Ia]

상기 화학식 Ia에서,

R¹ 및 R² 및 이의 양태들은 상기 설명된 바와 같이 정의된다.

본 발명에 따른 화합물의 바람직한 하부구조를 화학식 Ib로 나타낸다.

[화학식 Ib]

상기 화학식 Ib에서,

R¹ 및 R² 및 이의 양태들은 상기 설명된 바와 같이 정의된다.

이하의 본 발명에 따른 화합물, 이들의 토토머 및 입체 이성질체, 이들의 염, 특히 무기 또는 유기 염기를 갖는 이들의 생리학적으로 허용되는 염, 이들의 용매화물 또는 수화물이 특히 바람직하다.

[화학식 Ia.1]

[화학식 Ia.2]

[화학식 Ia.3]

및

[화학식 Ib.1]

본 발명의 화합물은 Rp 또는 Sp 위치배열(configuration)을 갖는 키랄 인광체 원자를 갖는다. 실질적으로 순수한 형태의 화학식 I, Ia, Ib, Ia.1, Ia.2, Ia.3 및 Ib.1의 화합물의 모든 입체 이성질체 또는 이들의 혼합물이 본 발명에 포함된다. 실질적으로 순수한 (Rp,Rp), (Rp,Sp), (Sp,Rp) 또는 (Sp,Sp) 입체 이성질체로서의 화학식 I, Ia, Ib, Ia.1, Ia.2, Ia.3 및 Ib.1의 화합물, 특히 실질적으로 순수한 (Rp,Rp) 입체 이성질체, 즉, 인광체 원자 둘 다가 Rp 위치배열을 갖는 입체 이성질체가 바람직하다.

본 발명에 따른 화합물 및 이의 중간체는, 당업자에게 공지되어 있고 유기 합성의 문헌에 기재된 합성 방법을 사용하여 수득될 수 있다. 바람직하게는, 상기 화합물은 특히 하기 실험 섹션에 기재된 바와 같이, 하기에서 보다 충분히 설명되는 제조 방법과 유사하게 수득된다. 일부 경우, 반응 도식을 실시하는데 채택되는 순서가 다양할 수 있다. 당업자에게 공지되어 있지만 본원에 상세하게 개시되지 않은 이들 반응의 변형도 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 화합물을 제조하기 위한 일반적인 방법은, 이하의 도식을 연구하는 당업자에게 명백해질 것이다. 출발 화합물은 상업적으로 입수가능하거나, 문헌 또는 본원에 개시된 방법에 의해 제조될 수 있거나, 유사하거나 근사한 방식으로 제조될 수 있다. 반응이 실시되기 전에, 화합물 내의 임의 상응하는 관능 그룹이 통상적인 보호 그룹을 사용하여 보호될 수 있다. 이들 보호 그룹은 당업자에게 친숙한 방법을 사용하여 반응 순서 내의 적합한 스테이지에서 다시 개열(cleaved)될 수 있다.

본원에 개시된 사이클릭 디뉴클레오티드는, 하기에 상세히 개시되는 바와 같이 또는 당업자에게 공지된 다른 방법에 의해 제조될 수 있다. 이러한 도식이 결코 제한적이지 않으며, 본 발명의 사상을 벗어나지 않고 세부 사항의 변형이 이루어질 수 있는 것이 당업자에 의해 이해될 것이다.

사이클릭 디뉴클레오티드 화합물은 문헌[Chem. Rev. 113, 7354-7401 (2013), Org. Lett., 12, 3269-3271 (2010), Tetrahedron 49, 1115-1132 (1993)], WO 2014/189805, WO 2016/096174, WO 2015/185565, WO 2016/145102 또는 WO 2016/120305 및 본원에 나타낸 참조문헌들에 개시된 방법에 의해 수득될 수 있다.

본원에서 사용되는 용어 "보호 그룹"은, 달리 정의되지 않는 한, 산소, 질소 또는 인 원자에 부착되어 그 원자의 추가 반응을 방지하거나, 다른 목적으로 사용되는 화학적 관능 그룹을 나타낸다. 폭넓게 다양한 보호 그룹이 유기 합성 분야의 당업자에게 공지되어 있으며, 예를 들어 문헌["Protective Groups in Organic Synthesis" by T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Third Edition, 1999]에 개시되어 있다.

화학식 I의 화합물 및 이의 염은 본 발명의 추가 양태를 구성하는 하기 개시된 방법에 의해 제조될 수 있다.

당업자는, 화학식 I의 포스포로티오에이트 모이어티가 각각, R 위치배열(R_P) 또는 S 위치배열(S_P)로 존재할 수 있음을 인식할 것이다. 하기 개시되는 방법은, 합성의 상이한 스테이지에서 당업자에게 공지된 크로마토그래피 방법, 예를 들어 적합한 용매 시스템 및 컬럼을 갖는 고압 액체 크로마토그래피에 의해 분리될 수 있는 형광체 원자에 대하여 최대 4개의 부분 입체 이성질체를 수득할 수 있다. 일부 경우, 예를 들어 하나의 황화(sulfurization) 단계가 부분 입체 선택성 방식으로 진행될 때, 하기 개시되는 방법은 합성의 상이한 스테이지에서, 당업자에게 공지된 크로마토그래피 방법에 의해 분리될 수 있는 2개의 부분 입체 이성질체만을 우선적으로 수득할 수 있다.

하기 제조 방법 내에서 명시적으로 특정되지 않은 치환체는 발명의 내용에서 상기 언급된 정의를 포함하는 것으로 이해된다.

화학식 I'의 화합물은 화학식 II의 화합물의 탈보호에 의해 제조될 수 있다.

[화학식 I']

상기 화학식 I'에서,

R⁴ 및 임의로 R¹은 OH이다.

[화학식 II]

상기 화학식 II에서,

R^{4 .1} 및 임의로 R^{1 .1}은 적합한 보호 그룹, 예를 들어 tert-부틸디메틸실릴(TBS)을 포함하는 산소이다.

예를 들어, R^{1 .1}은 H, F, O-알킬 또는 OTBS이거나, R²와 함께 -CH₂-O- 브릿지를 형성하며, R^{4 .1}은 OTBS이다. 예를 들어, 화학식 II의 화합물은 적합한 용매, 예를 들어 피리딘에 용해되고, 트리에틸아민 트리하이드로플루오라이드와 트리에틸아민의 혼합물로 처리되고, 적합한 온도, 예를 들어 20 내지 60℃에서 적합한 시간 기간, 예를 들어 1 내지 6시간 동안 교반된다.

화학식 II의 화합물은 화학식 III의 화합물의 탈보호에 의해 제조될 수 있다.

[화학식 III]

상기 화학식 III에서,

R^{3 .1}은, 적합한 보호 그룹, 예를 들어 벤조일을 포함하는 NH를 나타내고,

R^{3 .2}는 H를 나타내거나("보호된 아데닌");

R^{3 .1}은 OH를 나타내고, R^{3 .2}는 적합한 보호 그룹, 예를 들어 이소-부티릴을 포함하는 NH를 나타내거나("보호된 구아닌");

R^{3 .1}은 OH를 나타내고, R^{3 .2}는 H를 나타내거나("하이포크산틴");

R^{3 .1} 및 R^{3 .2}는 둘 다 H를 나타낸다("퓨린").

예를 들어, 화학식 III의 화합물은, 적합한 혼합물, 예를 들어 메탄올 또는 에탄올 중의 메틸아민 또는 수성 암모니아에 용해되고, 적합한 온도, 예를 들어 20 내지 60℃에서 적합한 시간 기간, 예를 들어 1 내지 24시간 동안 교반된다.

화학식 III의 화합물은 화학식 IV의 화합물의 환화 및 후속적인 황화에 의해 제조될 수 있다.

[화학식 IV]

상기 화학식 IV에서,

R², R^{3 .1} ,R^{3 .2.}, R^{1 .1} 및 R^{4 .1}은 상기 언급된 바와 같이 정의된다.

예를 들어, 화학식 IV의 화합물은, 적합한 용매, 예를 들어 피리딘에 용해되고, 적합한 커플링제, 예를 들어 2-클로로-5, 5-디메틸-1,3,2-디옥사포스포리난 2-옥사이드(DMOCP) 또는 피발로일 클로라이드 또는 아다만토일 클로라이드로 처리되고, 적합한 온도, 예를 들어 20℃에서 적합한 시간 기간, 예를 들어 0.1 내지 2시간 동안 교반된다. 환화 반응은 적합한 황화 시약, 예를 들어, 3H-1,2-벤조디티올-3-온 또는 원자 황으로 처리되고, 적합한 온도, 예를 들어 20℃에서 적합한 시간 기간, 예를 들어 0.1 내지 2시간 동안 교반되어 켄칭된다.

화학식 IV의 화합물은, 화학식 V의 화합물과 화학식 VI의 화합물의 커플링에 의해 제조될 수 있다.

[화학식 V]

[화학식 VI]

상기 화학식 V 및 화학식 VI에서,

R², R^{3 .1} ,R^{3 .2.}, R^{1 .1} 및 R^{4 .1}은 상기 언급된 바와 같이 정의된다.

예를 들어, 화학식 VI의 화합물은, 적합한 용매, 예를 들어 아세토니트릴에 용해되고, 임의로 적합한 커플링제, 예를 들어 테트라졸, Activator 42^®(아세토니트릴 중 5-(3,5-비스(트리플루오로메틸)페닐)-1H-테트라졸을 함유하는 활성화제 용액), 피리디늄 디클로로아세테이트 또는 피리디늄 트리플루오로아세테이트(또는 커플링제들의 혼합물)의 존재하에 적합한 용매, 예를 들어 아세토니트릴에 용해된 화학식 V의 화합물 용액으로 처리되고, 적합한 온도, 예를 들어 20℃에서 적합한 시간 기간, 예를 들어 0.1 내지 2시간 동안 교반된다. 커플링 반응은, 적합한 황화 시약, 예를 들어, 3-((N,N-디메틸아미노메틸리덴)아미노)-3H-1,2,4-디티아졸-3-티온(DDTT) 또는 페닐아세틸 디설파이드(PADS) 또는 3H-1,2-벤조디티올-3-온 1,1-디옥사이드(부카쥬(Beaucage) 시약)로의 처리에 의해 켄칭되고, 적합한 온도, 예를 들어 20℃에서 적합한 시간 기간, 예를 들어 0.1 내지 2시간 동안 교반된다. 용매의 증발 후, 잔류물이 적합한 용매, 예를 들어 디클로로메탄과 물의 혼합물에 용해되고, 적합한 시약, 예를 들어 디클로로아세트산으로 처리되고, 적합한 온도, 예를 들어 20℃에서, 적합한 시간 기간, 예를 들어 0.1 내지 2시간 동안 교반된다. 생성물 IV을 함유하는 용액은 적합한 용매, 예를 들어 피리딘의 첨가, 및 증발에 의한 농도에 의해 수득된다.

화학식 V의 화합물은 화학식 VII의 화합물의 반응에 의해 제조될 수 있다.

[화학식 VII]

상기 화학식 VII에서,

R², R^{3 .1} ,R^{3 .2.}, R^{1 .1} 및 R^{4 .1}은 상기 언급된 바와 같이 정의된다.

예를 들어, 화학식 VII의 화합물은, 적합한 혼합물, 예를 들어 물을 함유하는 아세토니트릴에 용해되고, 피리디늄 트리플루오로아세테이트로 처리되고, 적합한 온도, 예를 들어 20℃에서, 적합한 시간 기간, 예를 들어 1 내지 30분 동안 교반된다. 이후, tert-부틸아민이 첨가되고, 상기 혼합물이 적합한 온도, 예를 들어 20℃에서, 적합한 시간 기간, 예를 들어 0.1 내지 1시간 동안 교반된다. 생성물이, 용매의 증발에 의해 단리된 뒤, 적합한 용매, 예를 들어 물을 함유하는 디클로로메탄에 용해되고, 디클로로아세트산으로 처리되고, 적합한 온도, 예를 들어 20℃에서, 적합한 시간 기간, 예를 들어 0.1 내지 1시간 동아 교반된다. 아세토니트릴 중 화학식 V의 농축된 용액이, 예를 들어, 피리딘의 첨가에 이어 아세토니트릴을 포함하는 혼합물을 공비함으로써 수득된다.

화학식 VI의 화합물이 화학식 VIII의 화합물의 반응에 의해 제조될 수 있다.

[화학식 VIII]

상기 화학식 VIII에서,

R^{4 .1}은 상기 언급된 바와 같이 정의된다.

예를 들어, 적합한 용매, 예를 들어 아세토니트릴로의 공비 후, 화학식 VIII의 화합물은, 적합한 용매, 예를 들어 디클로로메탄에 용해되고, 활성화제, 예를 들어 1H-테트라졸의 존재하에 포스피틸화제, 예를 들어 2-시아노에틸 N,N,N',N'-테트라이소프로필포스포로디아미다이트와 반응되고, 적합한 온도, 예를 들어 20℃에서, 적합한 시간 기간, 예를 들어 1 내지 48시간 동안 교반된다.

화학식 VIII의 화합물은 화학식 IX의 화합물의 반응에 의해 제조될 수 있다.

[화학식 IX]

예를 들어, 화학식 IX의 화합물은, 적합한 용매, 예를 들어, 피리딘에 용해되고, 적합한 염기, 예를 들어 이미다졸의 존재하에 적합한 실릴화제, 예를 들어 tert-부틸디메틸실릴 클로라이드와 반응되고, 적합한 온도, 예를 들어 20℃에서, 적합한 시간 기간, 예를 들어 1 내지 48시간 동안 교반된다. 위치 이성질(regioisomeric) 2'-실릴화 및 3'-실릴화 생성물이, 수성 후처리 후 단리되고, 예를 들어 적합한 용매 시스템을 갖는 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 분리될 수 있다.

화학식 IX의 화합물은 화학식 X의 화합물의 반응에 의해 제조될 수 있다.

[화학식 X]

예를 들어, 화학식 X는, 적합한 용매, 예를 들어 피리딘에 용해되고, 4,4'-디메톡시트리틸 클로라이드와 반응되고, 적합한 온도, 예를 들어 20℃에서, 적합한 시간 기간, 예를 들어 1 내지 48시간 동안 교반된다.

화학식 I의 화합물 또는 이의 합성 중간체는, 하기 언급되는 바와 같이 이들의 부분 입체 이성질체로 분리될 수 있다. 화학식 I의 화합물의 부분 입체 이성질체 혼합물은, 그 자체로 공지된 방법, 예를 들어 크로마토그래피 및/또는 분별 결정화를 사용하여 이들의 상이한 물리-화학적 특성들의 이점을 사용하여 이들의 부분 입체 이성질체들로 분리될 수 있다.

상기 언급한 바와 같이, 화학식 I의 화합물은 염으로, 특히 약제학적 용도를 위해 약제학적으로 허용되는 염으로 전환될 수 있다.

본 발명에 따른 화합물은 유리하게는, 이러한 목적을 위해 문헌으로부터 당업자에게 공지된 방법과 조합될 수도 있는 하기 실시예에 기재된 방법을 사용하여 수득가능할 수도 있다.

용어 및 정의

본 명세서에서 특별히 정의되지 않은 용어는 설명 및 문맥에 비추어 당업자에 의해 부여될 의미를 부여받는다. 그러나, 명세서에서 사용되는 바와 같이, 달리 구체화되지 않는 한, 다음 용어들은 표시된 의미를 가지며 이하의 관습이 준수된다.

용어 "본 발명에 따른 화합물(들)", "화학식 I의 화합물(들)", "본 발명의 화합물(들)" 등은, 본 발명에 따른 화학식 I의 화합물을, 이의 토토머, 입체 이성질체 및 이들의 혼합물 및 이의 염, 특히 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 상기 토토머, 입체 이성질체 및 이의 염의 용매화물 및 수화물을 포함하는 상기 화합물의 용매화물 및 수화물을 포함하여 나타낸다.

용어 "치료" 및 "치료하는"은 둘 다, 방지적, 즉, 예방적 또는 치료적, 즉, 치유적 및/또는 완화적 치료를 포함한다. 따라서, 용어 "치료" 및 "치료하는"은, 특히 명시적인 형태의 상기 병태가 이미 발현된 환자의 치료학적 치료를 포함한다. 치료학적 치료는, 특정 적응증의 증상을 완화시키기 위한 증상 치료, 또는 적응증의 병태를 역전시키거나 부분적으로 역전시키기 위한 또는 질환의 진행을 멈추거나 늦추기 위한 원인 치료일 수 있다. 따라서, 본 발명의 조성물 및 방법은 예를 들어, 일정 기간에 걸친 치료학적 치료로서 그리고 만성 치료법 용으로서 사용될 수 있다. 또한, 용어 "치료" 및 "치료하는"은, 예방적 치료, 즉, 상기 언급된 병태를 발현할 위험이 있는 환자의 치료, 따라서 상기 위험을 감소시키는 치료를 포함한다.

본 발명이 치료를 필요로 하는 환자를 나타낼 때, 이는 주로 포유 동물, 특히 인간에 관한 것이다.

용어 "치료학적 유효량"은, (i) 특정 질환 또는 병태를 치료 또는 방지하고, (ii) 특정 질환 또는 병태의 하나 이상의 증상을 약화시키거나, 개선시키거나, 또는 제거하거나, 또는 (iii) 본원에 기재된 특정 질환 또는 병태의 하나 이상의 증상의 개시를 방지 또는 지연시키는 본 발명의 화합물의 양을 의미한다.

달리 나타내지 않는 한, 본원에서 사용되는 용어 "조절된" 또는 "조절되는" 또는 "조절제(들)"은 본 발명의 하나 이상의 화합물을 사용하는 STING 경로의 활성화를 나타내며, 이 경우에는 STING 작용제를 나타낸다.

달리 명시되어 있지 않는 한, 본원에서 사용되는 용어 "매개된" 또는 "매개되는" 또는 "매개하다"는, (i) 특정 질환 또는 병태의 방지를 포함하는 치료, (ii) 특정 질환 또는 병태의 하나 이상의 증상의 약화, 개선, 또는 제거, 또는 (iii) 본원에 기재된 특정 질환 또는 병태의 하나 이상의 증상의 개시의 방지 또는 지연을 나타낸다.

본 발명의 화합물이 화학명 형태로 표현되고 임의 불일치가 있는 경우의 화합물로 표현되는 경우, 상기 화합명 형태가 우선한다.

별표는 하위 화학식에서 정의된 바와 같이 핵심 분자에 연결된 결합을 나타 내기 위해 사용될 수 있다.

구체적으로 나타내지 않는 한, 명세서 및 첨부된 청구범위 전체에 걸쳐 주어진 화학식 또는 화학명은, 토토머 및 모든 입체 이성질체, 광학 이성질체 및 기하 이성질체(예를 들어, 거울상 이성질체, 부분 입체 이성질체, E/Z 이성질체 등) 및 이의 라세미, 및 개별 거울상 이성질체들의 상이한 분율의 혼합물, 부분 입체 이성질체들의 혼합물, 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 염 및 이들의 용매화물, 예를 들어 유리 화합물의 용매화물 또는 상기 화합물의 염의 용매화물을 포함하는 수화물을 포함한다.

화학식 I의 화합물과 관련하여 본원에서 사용되는 용어 "실질적으로 순수한"은, 하나의 (Rp, Rp), (Rp, Sp), (Sp, Rp) 또는 (Sp, Sp) 부분 입체 이성질체를 나타내며, 이는 인광 원자에 대해 다른 가능한 부분 입체 이성질체에 비해 75% 이상 순수하다. 바람직한 양태에서, 화학식 I의 실질적으로 순수한 화합물은 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 97% 이상, 및 99% 이상 순수하다.

본원에서 사용되는 어구 "약제학적으로 허용되는"은, 확실한 의학적 판단의 범위 내에서, 과도한 독성, 자극, 알레르기성 반응 또는 기타 문제 또는 합병증없이 그리고 합리적인 이익/위험 비에 적합한, 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투여 형태를 나타내기 위해 본원에서 사용된다.

본원에서 사용되는 "약제학적으로 허용되는 염"은, 모 화합물(parent compound)이 염기를 갖는 이의 염을 생성함으로써 개질된, 개시된 화합물의 유도체를 나타낸다. 본 발명의 약제학적으로 허용되는 염은, 통상적인 화학적 방법에 의해 산성 모이어티를 함유하는 모 화합물로부터 합성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 유리 산 형태의 이들 화합물을, 충분한 양의 물, 또는 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세토니트릴과 같은 유기 희석제 또는 이들의 혼합물 중의 적절한 염기와 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 다르게는, 염은 이온 교환에 의해, 예를 들면 본 발명의 화합물의 수용액(유리 산 또는 염 형태)을 양이온 교환제로 처리함으로써 제조될 수 있다.

약리학적 활성

본 발명에 따른 화합물은 인간 STING에 대한 바람직한 결합 친화도를 나타낸다. 예를 들어, 결합 친화도는 문헌[Nat. Chem. Biol. 10, 1043-1048 (2014)]에 개시된 바와 같은 섬광 근접 검정(SPA: scintillation proximity assay)-기반 경쟁적 결합 분석에 의해 측정될 수 있다. 다르게는, 결합 친화도는 예를 들어, 문헌[Molecular Cell 51, 226-235 (2013)]에 기재된 등온 적정 열량계(ITC: isothermal titration calorimetry)에 의해 측정될 수 있다. 다르게는, 결합 친화도는, WO 2016/145102에 기재된 바와 같은 표면 플라즈몬 공명(SPR: surface plasmon resonance)에 의해 측정될 수 있다. 다르게는, 결합 친화도는 예를 들어 WO 2016/145102에 기재된 바와 같은 시차 주사 형광 측정(DSF: differential scanning fluorimetry)에 의해 측정될 수 있다.

본 발명에 따른 화합물은 유리한 세포 활성을 나타낸다. 시험관내 사이토카인 유도는 WO 2016/096174에 개시된 것과 유사한 방식으로 리포터 세포주, 예를 들어 THP1 세포에서 측정될 수 있다. 본 발명에 따른 화합물은 상이한 인간 STING 대립유전자를 갖는 세포에서 유리한 세포 활성을 나타낸다. 인간 STING은 적어도 5개의 공지된 변종(WT, HAQ, REF/232H, AQ, Q/293 Q)에 존재한다. 인간 STING 변이체에서 상이한 CDN들의 활성을 시험하기 위해, THP1-STING KO 세포는 상이한 STING 변이체를 암호화하는 벡터로 안정적으로 형질도입될 수 있다. 또한, 시험관내 사이토카인 유도는 인간 1차 PBMC 또는 인간 수지상 세포에서 측정될 수 있다.

본 발명에 따른 화합물은, 예를 들어 THP1 세포, Calu-3 세포 또는 인간 간세포와 같은 시험관내 세포 검정에서 유리한 안정성을 나타낸다. 또한, 본 발명에 따른 화합물은 용액 및 고체 상태에서 유리한 화학적 안정성을 나타낸다.

또한, 본 발명에 따른 화합물은 유리한 약동학적(PK) 특성을 나타낸다. PK 특성은 전임상 동물 종, 예를 들어 마우스, 래트, 햄스터, 개, 기니피그, 미니 돼지, 사이노몰구스 원숭이, 레서스 원숭이에서 결정될 수 있다. 화합물의 PK 특성은 예를 들어, 문헌[E. Kerns & L. Di (Drug-like properties: concepts, structure design and methods: from ADME to toxicity optimization, Elsevier, 1^st ed, 2008)]에 개시된 바와 같이, 다음의 파라미터들에 의해 설명될 수 있다: 평균 체류 시간(MRT), 제거 반감기(t_{1 /2}, 즉, 약물의 농도가 이의 원래 값의 절반에 도달하기 위해 필요한 시간), 분포 용적(V_D, 즉, 약물이 분포되어 있는 겉보기 용적), 곡선 아래 면적(AUC, 즉, 단일 투여 후 농도-시간 곡선의 적분), 청소율(CL, 즉, 단위 시간당 약물이 제거된 혈장의 용적).

본 발명에 따른 특정 화합물은 종양내 또는 정맥내 적용 후, 예를 들어 마우스 MC38, 4T1, 결장26, EMT6 종양 모델에서 유리한 생체내 약리학적 활성을 나타낸다.

유리한 세포 활성 및/또는 유리한 세포 안정성 및/또는 개선된 PK 특성과 결합된 유리한 결합 친화도는, 약리학적 효능을 위한 보다 더 낮은 투여량을 가능하게 할 수 있다. 보다 더 낮은 투여량은, 환자에게 더 낮은 "약물 부하" 또는 "약물 부담(burden)"(모 약물 및 이의 대사물)의 이점을 가져, 잠재적으로 부작용을 줄이고 약물 제작의 생산 비용을 낮춘다.

본 발명의 화합물의 인간 STING에 대한 결합은 하기 검정을 사용하여 입증될 수 있다:

시차 주사 형광 측정(DSF)

기판:

Hard-Shell^®PCR 플레이트 384-웰(well) 얇은 벽(카탈로그# HSP3805R, BIO-RAD)

PCR 플레이트용 Microseal^®'B' 접착 씰(카탈로그# MSB-1001, BIO-RAD)

DMSO 중 SYPRO 오렌지 용액(시그마 카탈로그 번호 S.5692-500UL), 농도 "5,000x"

장비: 판독기: CFX384 실시간 시스템(Bio-Rad)

피펫팅 로봇: HamiltonStarlet

검정 완충액: 20mM Tris, 150mM NaCl pH 7.5

표적 단백질: 인간 STING(hSTING, 잔기 155-341, N- 말단 His8-태그 및 TEV-개열 자리를 갖는 야생형 서열, MW: 23601,5Da)

단백질 원액(stock solution): 검정 완충액 중 c = 309㎛ 원액

시험 화합물의 최종 검정 농도: 100㎛, 3㎛ 표적 단백질, "5x" SYPR Orange

검정 절차:

1) 화합물 원액 및 이의 희석액을 분석 완충액으로 제조했다.

2) 5ul 형광 염료 원액(5,000x SYPRO Orange)을 50ul의 표적 단백질(309uM) 및 945ul의 완충액과 혼합했다.

3) 상기 단백질-염료-혼합물(25x SYPRO Orange 및 15uM 단백질) 2ul을 8ul의 화합물 용액에 첨가했다. 최종 용적은 10uL였다.

4) 특정 웰 위치를 음성 대조군으로 사용했다.

5) 플레이트를 이중 측정을 위해 준비하고, 1,000g에서 2분간 원심분리했다.

6) 측정에서, 0.5℃의 160 사이클을 사용했다(온도 램프 15s/사이클, 15℃로부터 95℃까지).

데이터 분석: 해리 곡선을 Bio-Rad CFX Manager에서 처리했다. 피크 유형을 "음수"로 설정했다. 실시예 1.1, 실시예 2.1 및 실시예 4.1의 경우, 적어도 2회의 Tm 측정을 평균하였다.

측정된 Tm의 변화를 표 1에 나타낸다.

[표 1]

본 발명의 화합물의 세포 활성은 하기 시험관내 THP1 검정을 사용하여 입증될 수 있다:

시험관내 사이토카인 유도

본 발명에 따른 화합물의 사이토카인 유도 활성을 THP1 리포터 세포주를 사용하여 입증했다.

세포주에서 발현되는 STING 단백질의 활성화는 인터페론 생성을 증가시킨다. 인터페론 조절 인자(IRF)-유도성 SEAP(분비된 배아 알칼리성 포스파타제) 리포터 구조의 안정한 통합에 의해, 기능성 인터페론 신호 전달 경로가 모니터링될 수 있다. Invivogen의 QUANTI-Blue™ 비색 효소 검정 및 적절한 광학 밀도(OD) 판독기를 사용하여, SEAP의 활성을 탐지하고 정량화할 수 있다. 이러한 기술은 STING 단백질의 약리학적 변형을 특성화하는데 사용될 수 있다.

SEAP 활성의 측정을, 인간 STING 단백질 및 IRF-유도성 SEAP 리포터 구조를 안정하게 발현하는 THP1-Blue ISG 세포에서 실시했다. 세포를, 10% 소 태아 혈청, 50㎍/ml 페니실린-스트렙토마이신, 100㎍/ml Zeocin 및 100㎍/ml Normocin을 갖는 RPMI1640 배지에서 37°, 95% 습도 및 5% CO₂ 항온배양기에서 배양했다. 즉석 검정(assay-ready) 세포를 냉동 보존물(stock)로 저장했다.

검정을 위한 준비에서, 세포를 Zeocin/Normocin 불포함 배지에서 해동시키고, 50% 수성 DMSO 중 15,000cell/ 15μ 또는 16점 연속 희석의 밀도 및 배지로의 최종 희석 단계로 분석 플레이트에 분배시켜, 검정에서 0.5%의 최종 DMSO 농도를 보장했다. 플레이트에 5㎕의 희석된 화합물과 5㎕의 배지를 첨가한 후, 37℃에서 24시간 항온배양했다.

검정 당일, 웰당 75㎕의 Quanti-Blue를 플레이트의 모든 웰에 첨가하고, 상기 플레이트를 37℃에서 또 다른 30분간 항온배양했다. 620nm에서의 OD를 EnVision 판독기(PerkinElmer)상에서 측정했다.

EC₅₀ 값 및 Hill 경사를, 620nM에서의 OD를 사용하는 Megalab 소프트웨어(Boehringer Ingelheim)로 8-포인트 또는 16-포인트 4개 파라미터 비선형 곡선 피팅으로부터 유도했다. 실시예 1.1, 실시예 2.1, 실시예 3.1 및 실시예 4.1에 대한 EC₅₀ 값은 적어도 2회 측정의 평균이다. 표 2 참조.

[표 2]

상기 THP1 검정에서, 실시예 1.1은 각각의 부분 입체 이성질체인 실시예 1.2보다 더 강력하다. 인간 STING과 복합체를 이루는 실시예 1.1의 X선은 형광체 원자 둘 다가 Rp 위치배열을 갖는 것을 나타낸다. 따라서 유사한 방식으로, 보다 강력한 각각의 부분 입체 이성질체인 실시예 2.1, 실시예 3.1, 실시예 4.1도 형광체 원자 둘 다에서의 Rp 위치배열을 특징으로 하는 것으로 가정된다.

사이클릭 디뉴클레오티드에 대한 반응에 영향을 미칠 수 있는 인간의 STING 유전자에서, 몇 가지 단일 뉴클레오티드 다형성이 확인되었다. 본 발명의 화합물의 활성을 측정하기 위해, 상이한 인간 STING 변이체를 발현하는 THP1-BLUE ISG 리포터 세포주를 생성했다. 이를 위해, CRISPR/CAS9 시스템을 사용하여 내인성 인간 STING을 우선 삭제했다: THP1-Blue ISG 세포를, STING 유전자를 표적화하는 ALL-IN-온 CRISPR 플라스미드로 전기천공했다(Sigma로부터 구입, 성공적인 형질 도입을 위해, gRNA 및 GFP를 리포터 유전자로서 암호화함). 이후, GFP 양성 세포를 형질감염 24시간 후 분류하고 팽창시켰다. 이어서, 세포를 반고형 메토켈 매질에 분산시켜 단일 세포 클론 단리를 허용했다. 이후, 클론을 Qu항-blue 리포터 검정을 사용하여 cGAMP 반응성에 대해 스크리닝했다. 비반응성 클론을 후속적으로, 웨스턴 블롯팅(western blotting) 및 STING 유전자좌의 시퀀싱에 의해 STING 손실을 분석했다.

인간 STING 변이체의 과발현을 위해, 확인된 THP1-Blue ISG hSTING KO 클론을 hSTING의 대립 변이체(WT, HAQ, R232H, AQ 및 R293Q)를 암호화하는 개별 레트로바이러스 플라스미드(MSCV-ires-GFP-Blasti)로 형질도입했다. 형질도입된 세포를 상이한 수준 GFP 형광에 대해 분류하고, STING 대립 유전자 발현을 웨스턴 블롯으로 분석했다. 부모인 변형되지 않은 THP1-Blue ISG 세포주를 형성하는 내인성 STING 수준에 필적하는 수준의 전위 STING 단백질(WT, HAQ, R232H, AQ 및 R293Q)을 발현하는 모집단을 선택하고, CDN 특성화에 사용했다. 본 발명의 실시예는 상기 변이체 5개 모두에서 세포 활성을 나타낸다.

본 발명의 화합물의 세포 안정성을 하기와 같이 측정했다: 화합물을, 세포 배양 배지(10% FCS, 1% 비-필수 아미노산 및 1% 피루베이트가 보충된 MEM)에 10㎛ 세포주 Calu-3(24-웰 플레이트에서 60,000 cell/웰)의 최종 농도로 최대 24시간 동안 용해했다. 세포 배양 상청액의 샘플을 1, 6, 24시간에 채취하고, LC-MS/MS로 정량했다.

본 발명의 화합물의 마우스 PK를 하기 방법을 사용하여 측정했다:

마우스 PK

동물 실험

상기 화합물을 NaCl 생리용액에 용해하고, 수컷 C57BL/6NRj 마우스에 10 ㎛ol/Kg의 투여량으로 정맥내 투여했다. ETDA를 항응고제로 취하여, 0.25, 0.5, 0.75, 1 및 2시간에 20㎕의 샘플을 수집했다. 혈장을 원심분리에 의해 생성하여 -20℃에서 보관했다. 화합물 농도를 LC-MS/MS에 의해 측정했다. 측정된 농도-시간 관계(중복 실험의 평균)를 표 3에 나타낸다.

[표 3]

따라서, 본 발명은 의약으로서의 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.

또한, 본 발명은, 환자의 STING의 조절에 의해 영향받을 수 있는 질환 또는 병태, 또는 환자의 STING과 관련되거나 이에 의해 조절되는 질환 또는 병태의 치료 및/또는 방지를 위한 본 발명에 따른 화학식 I의 화합물 또는 약제학적 조성물의 용도에 관한 것이다. 환자는 인간인 것이 바람직하다.

또 다른 양태에서, 본 발명은, STING과 관련되거나 이에 의해 조절되는 질환 또는 병태의 치료를 필요로 하는 포유 동물에서 상기 질환 또는 병태를 치료하는 방법으로서, 포유 동물, 바람직하게는 인간에게 치료적 유효량의 본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다.

STING과 관련되거나 이에 의해 조절되거나, 또는 STING의 조절에 영향을 받을 수 있는 질환 및 병태는, 염증, 알레르기성 또는 자가면역성 질환들, 예를 들어 알레르기성 비염 또는 천식, 전염성 질환 또는 암을 포함한다. 또한, 이들의 활성으로 인해, 본 발명의 화합물은 백신 애주번트로서 적합하다.

자가면역성 질환은, 전신 홍반성 루푸스, 건선, 인슐린 의존성 당뇨병(IDDM), 피부 근염 및 쇼그렌 증후군(SS)을 포함하지만, 이들로 한정되지는 않는다.

염증은 외상에 대한 혈관, 세포 및 신경학적 반응의 그룹을 나타낸다. 염증은 염증 세포, 예를 들어 단핵 세포, 호중구 및 과립구의 조직 내로의 이동으로 특징지어질 수 있다. 이는 일반적으로 감소된 내피 장벽 기능 및 조직 내로의 부종과 관련된다. 염증은 급성 또는 만성으로 분류될 수 있다. 급성 염증은 유해한 자극에 대한 신체의 초기 반응이며, 혈장 및 백혈구의, 혈액으로부터 손상된 조직으로의 증가된 이동에 의해 달성된다. 생화학적 이벤트의 케스케이드(cascade)가, 국소 혈관계, 면역계 및 손상된 조직 내의 다양한 세포를 포함하는 염증 반응을 증식시키고 성숙시킨다. 만성 염증으로 알려진 지속적인 염증은, 염증 자리에 존재하는 세포 유형의 점진적인 이동을 가져오고, 염증 과정에서 조직의 동시 파괴 및 치유를 특징으로 한다.

감염에 대한 면역 반응의 일부로서 또는 외상에 대한 급성 반응으로서 발생하는 경우 염증은 유익할 수 있으며, 일반적으로 자체 제한적이다. 그러나, 염증은 다양한 조건하에서 해로울 수 있다. 이는 감염 인자에 대한 반응에서 심각한 장기 손상 및 사망을 초래할 수 있는(예를 들어, 패혈증의 개시) 과도한 염증의 생성을 포함한다. 또한, 만성 염증은, 일반적으로 해롭고, 많은 만성 질환의 근원이며, 조직에 심각하고 돌이킬 수 없는 손상을 유발한다. 이런 상황에서, 면역 반응은 종종 자가 조직에 대한 것(자가 면역)이지만, 외부 개체에 대한 만성 반응은 자가 조직에 대한 방관자(bystander) 손상을 초래할 수도 있다. 따라서, 항염증성 치료법의 목적은 이러한 염증을 감소시키고, 존재시 자가 면역을 억제하고, 생리학적 과정 또는 치유 및 조직 수리가 진행되도록 허용하는 것이다.

본 발명의 화합물은, 하기 예시되는 바와 같이, 근골격계 염증, 혈관 염증, 신경 염증, 소화계 염증, 안구 염증, 생식계 염증 및 기타 염증을 포함하는 신체의 모든 조직 및 기관의 염증을 치료하는데 사용될 수 있다.

근골격계 염증은, 근골격계의 모든 염증성 질환, 특히, 손, 손목, 팔꿈치, 어깨, 턱, 척추, 목, 엉덩이, 무릎, 발목 및 발의 관절을 포함하는 골격 관절에 영향을 미치는 병태, 및 근육을 뼈, 예를 들어 힘줄에 연결하는 조직에 영향을 미치는 병태를 나타낸다. 본 발명의 화합물로 치료될 수 있는 근골격계 염증의 예는, 관절염(예를 들어, 골관절염, 류마티스 관절염, 건선성 관절염, 강직성 척추염, 급성 및 만성 감염성 관절염, 통풍 및 가성 통풍과 관련된 관절염, 및 청소년 특발성 관절염을 포함함), 건염, 윤활막염, 윤활낭염, 섬유증(섬유근통), 상과염, 근염 및 골염(예를 들어, 파젯트병, 치골염, 및 낭성 섬유 골염을 포함함)을 포함한다. 안구 염증은 눈꺼풀을 포함하는 눈의 모든 구조의 염증을 나타낸다. 본 발명의 화합물로 치료될 수 있는 안구 염증의 예는, 안검염, 안검 이완증, 결막염, 눈물샘염, 각막염, 건성 각결막염(건성안), 공막염, 속눈썹증 및 포도막염을 포함한다. 본 발명의 화합물로 치료될 수 있는 신경계의 염증의 예는, 뇌염, 길랑-바레 증후군, 수막염, 신경근긴장증, 기면증, 다발 경화증, 척수염 및 정신분열증을 포함한다.

본 발명의 화합물로 치료될 수 있는 혈관계 또는 림프계의 염증의 예는, 관절 경화증, 관절염, 정맥염, 혈관염 및 림프관염을 포함한다.

본 발명의 화합물로 치료될 수 있는 소화계의 염증성 병태의 예는, 담관염, 담낭염, 장염, 소장결장염, 위염, 위창자염, 염증성 창자 질환(예를 들어, 크론병 및 궤양성 대장염), 회장염 및 직장염을 포함한다.

본 발명의 화합물로 치료될 수 있는 생식계의 염증성 질환의 예는, 자궁 경부염, 융모양막염, 자궁 내막염, 부고환염, 배꼽염, 난소염, 고환 염, 난관염, 자궁관 난소 농양, 요도염, 질염, 외음염 및 외음부통을 포함한다.

상기 제제는 염증 성분을 갖는 자가 면역 병태를 치료하는데 사용될 수 있다. 이러한 병태는, 급성 파종 전신 탈모, 베체트병, 샤가스병, 만성 피로 증후군, 자율 신경 기능 이상, 뇌척수염, 강직성 척추염, 재생 불량성 빈혈, 화농 땀샘염, 자가 면역성 간염, 자가 면역성 난소염, 복강 질환, 크론병, 제1형 당뇨병, 거세포 동맥염, 굿파스처 증후군. 그레이브스병, 길랭-바레 증후군, 하시모토병, 헤 노흐-쇤라인 자색반, 가와사키병, 홍반성 루푸스, 현미경 대장염, 현미경 다발동맥염, 혼합 결합 조직 질환, 다발 경화증, 중증 근무력증, 안구간대경련 근간대경련 증후군, 시신경염, 오드 갑상샘염, 천포창, 결절 다발 동맥염, 다발 근육통, 류마티스 관절염, 라이저 증후군, 쇼그렌 증후군, 일시적인 동맥염, 베게너 육아종증, 온난 자가 면역성 용혈성 빈혈, 간질성 방광염, 라임병, 국소 피부 경화증, 건선, 사코이드증, 경피증, 궤양성 대장염 및 백반증을 포함한다.

상기 제제는, 염증 성분을 갖는 T 세포 매개 과민성 질환을 치료하는데 사용될 수 있다. 이러한 조건은, 접촉 과민증, 접촉 피부염(포이즌 아이비로 인한 피부염을 포함함), 두드러기, 피부 알레르기, 호흡기 알레르기(건초열, 알레르기성 비염) 및 글루텐 민감성 창자병(셀씨병)을 포함한다.

상기 제제로 치료될 수 있는 다른 염증성 질환은, 예를 들어, 충수염, 피부염, 피부근염, 심내막염, 섬유조직염, 잇몸염, 설염, 간염, 화농땀샘염, 홍채염, 후두염, 유방염, 심근염, 신장염, 이염, 췌장염, 이하선염, 심장막염, 복막염, 인두염, 흉막염, 폐렴, 전립샘염, 신우방광염, 및 구내염, 이식 거부(기관 예를 들어 신장, 간, 심장, 폐, 췌장(예를 들어, 섬 세포), 골수, 각막, 소장, 피부 동종이식편, 피부 동종이식편, 및 심장 판막 이종이식편, 혈청병, 및 이식편대숙주병을 포함함), 급성 췌장염, 만성 췌장염, 급성 호흡 곤란 증후군을 포함한다. 세자리 증후군, 선천성 부신 과다형성, 비화농성 갑상샘염, 암과 관련된 고칼슘혈증, 천포창, 수포 피부염 포진피부염, 중증 다형 홍반, 박탈성 피부염, 지루성 피부염, 계절성 또는 다년성 알레르기성 비염, 기관지 천식, 접촉 피부염, 아토피성 피부염, 약물 과민성 반응, 알레르기성 결막염, 각막염, 눈 대상포진, 홍채염 및 홍체성모체염, 맥락망막염, 시신경염, 대증 사르코이드증, 전격 또는 파종 폐결핵 화학요법, 성인 특발 저혈소판 자색반증, 성인 이차 혈소판감소증, 성인 후천성 (자가 면역) 용혈 빈혈, 백혈병 및 림프종, 아동 급성 백혈병, 국소 소장염, 자가 면역 혈관염, 다발 경화증, 만성 폐쇄성 폐 질환, 고형 기관 이식 거부, 패혈증. 바람직한 치료는, 이식 거부, 류마티스 관절염, 건선성 관절염, 다발 경화증. 1형 당뇨, 천식, 염증성 장 질환, 전신 홍반 루푸스, 건선, 만성 폐 질환, 및 감염성 병태(예를 들어, 패혈증)를 수반하는 염증의 치료를 포함한다.

일 양태에서, 본 발명의 화합물을 사용하여 치료되는 질환 또는 병태는 암이다. 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 잠재적으로 유익한 항종양 효과를 가질 수 있는 암 질환 및 병태의 예는, 폐암, 골암, 췌장암, 피부암, 두부암, 경부암, 자궁암, 난소암, 위암, 결장암, 유방암, 식도암, 소장암, 창자암, 내분비계암, 갑상샘암, 부갑상샘암, 부신암, 요도암, 전립샘암, 음경암, 고환암, 요관암, 방광암, 신장 또는 간암; 직장암; 항문부암; 난관, 자궁내막, 자궁경부, 질, 음문, 신장깔때기, 신장 세포의 암종; 연조직의 육종; 점액종; 횡문근종; 섬유종; 지방종; 기형종; 담관암종; 간모세포종; 혈관육종; 혈관종; 간암; 섬유육종; 연골육종; 골수종; 만성 또는 급성 백혈병; 림프구 림프종; 일차 CNS 림프종; CNS의 신생물; 척수축 종양; 편평 세포 암종; 윤활막 육종; 악성 흉막 중피종(inesothelioma); 뇌간교종; 뇌하수체 샘종; 기관지 샘종; 연종골성 과오종; 중피종; 호지킨병 또는 상기 암들 중 하나 이상의 조합을 포함하지만, 이들로 제한되지는 않는다.

본 발명에 따른 화합물로 치료될 수 있는 바람직한 암은, 피부암, 폐암, 간암, 결장암, 뇌암, 유방암, 난소암, 전립선암, 췌장암, 신장암, 위암, 두경부암 및 요로암, 및 림프종 및 백혈병이다.

신규한 화합물은, 상기 언급한 질환의 방지, 단기간 또는 장기간 치료를 위해, 임의로 수술, 방사선 요법 또는 다른 "최첨단" 화합물, 예를 들어 세포 증식 억제제, 항-혈관형성 물질, 스테로이드 또는 항체와 병용하여 사용될 수도 있다.

특정 양태에서, 애주번트로서의 역할에서, 본 발명의 화합물 및 조성물은, 백신(들)을 사용하는 치료적 또는 예방적 전략에서 애주번트로서 사용될 수 있다. 따라서, 본 발명의 실질적으로 순수한 CDN 또는 이의 전구 약물 또는 약제학적으로 허용되는 염은, 하나 이상의 미리 결정된 항원에 대한 면역 반응을 자극하도록 선택된 하나 이상의 백신과 함께 사용될 수 있다. 본 발명의 실질적으로 순수한 CDN 또는 이의 전구 약물 또는 약제학적으로 허용되는 염은 이러한 백신과 함께 또는 이에 추가로 제공될 수 있다.

이러한 백신(들)은, 관심있는 항원, 정제된 항원, 상기 항원을 발현하고/발현하거나 분비하도록 재조합 조작된(recombinantly engineered) 생 바이러스 또는 박테리아 전달 벡터; 항원이 로딩되었거나 항원을 암호화하는 핵산을 포함하는 조성물로 형질감염된 세포를 포함하는 항원 제시 세포(APC) 벡터, 리포좀 항원 전달 비히클, 또는 항원을 암호화하는 노출된 핵산 벡터를 포함하는, 불활성화되거나 약화된 박테리아 또는 바이러스를 포함할 수 있다. 상기 목록은 제한적일 것을 의도하지 않는다. 예로서, 이러한 백신(들)은 GM-CSF, CCL20, CCL3, IL-12p70, FLT-3 리간드, 사이토카인 중 하나 이상을 발현 및 분비하는 불활성화된 종양 세포도 포함할 수 있다.

관련된 양태에서, 본 발명은 개체에서 면역 반응을 유도, 자극 또는 보조하는 방법에 관한 것이다. 이들 방법은, 본 발명의 실질적으로 순수한 CDN 또는 이의 전구 약물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 개인에게 투여함을 포함한다.

1일당 적용가능한 화학식 I의 화합물의 투여량 범위는 일반적으로, 0.0001 내지 10mg, 예를 들어 0.001 내지 1mg이다. 각 투여 단위는 편의상 0.0001 내지 10mg, 예를 들어 0.001 내지 1mg을 함유할 수 있다.

실제 치료학적 유효량 또는 치료적 투여량은 당연히, 당업자에게 공지된 인자들, 예를 들어 환자의 연령 및 체중, 투여 경로 및 질환의 중증도에 따를 것이다. 임의 경우에, 화합물 또는 조성물은 환자의 독특한 병태에 기초하여 치료학적 유효량이 전달되게 하는 투여량 및 방식으로 투여될 것이다.

하나 이상의 추가의 치료학적 제제와의 모든 병용을 포함하는 본 발명에 따른 화합물, 조성물은, 점막(예를 들어, 경구, 설하, 질, 비강, 자궁경부 등), 종양 내, 종양 주위, 경피, 흡입 또는 비경구(예를 들어, 피하, 정맥 내, 근육 내, 동맥 내, 피내, 경막 내 및 경막 외 투여) 경로로 투여될 수 있다. 대부분의 경우, 정맥 내, 종양 내, 종양 주위 또는 피하 투여 경로가 적합하다.

약제학적 조성물

본원 명세서의 목적을 위해, 약제학적 조성물은, 약제학적으로 허용되는 담체, 애주번트 및 비히클을 함유하는 제형으로, 비경구, 비경구를 포함하는 다양한 수단에 의해, 흡입 분무, 국소 또는 직장 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물의 종양 내(직접 종양 덩어리(mass) 내로) 또는 종양 주변(종양 덩어리 주위로) 투여는, 국소적으로 침윤하는 DC를 직접 활성화시킬 수 있거나, 종양 세포 세포자멸을 직접 증진 시킬 수 있거나, 종양 세포를 세포 독성 제제에 감작시킬 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은, 멸균 주사가능한 제제, 예를 들어 멸균 주사가능한 수성 또는 유성(oleaginous) 현탁액 형태일 수 있다. 상기 현탁액은, 상기 언급된 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제를 사용하여 공지된 기술에 따라 제형화될 수 있다. 멸균 주사가능한 제제는, 비독성 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매 중의 멸균 주사가능한 용액 또는 현탁액, 예를 들어 1,3-부탄-디올 중의 용액일 수도 있거나, 동결건조 분말로서 제조될 수도 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중, 물, 링거 용액 및 등장성 염화나트륨 용액이 사용될 수 있다. 또한, 멸균 고정 오일은 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로서 사용될 수 있다. 이러한 목적을 위해, 합성 모노글리세라이드 또는 디글리세라이드를 포함하는 임의 무자극성(bland) 오일을 사용할 수 있다. 또한, 지방산, 예를 들어 올레산이 마찬가지로 주사가능제(injectables)의 제조에 사용될 수 있다.

구강 내 국소 투여에 적합한 제형은, 향미료 기제, 일반적으로 수크로스 및 아카시아 또는 트래거캔스 중에 활성 성분을 포함하는 로젠지; 불활성 기제, 예를 들어 젤라틴 및 글리세린, 또는 수크로스 및 아카시아 중에 활성 성분을 포함하는 파스틸(pastille); 및 적합한 액체 담체 중에 활성 성분을 포함하는 마우스워시를 포함한다.

질내 투여에 적합한 제형은, 활성 성분 이외에 당업계에 적절한 것으로 알려진 담체를 함유하는 페서리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 발포체 또는 스프레이 제형으로 제공될 수 있다.

비경구 투여에 적합한 제형은, 항산화제, 완충액, 정균제, 및 제형을 의도된 수용자의 혈액과 등장성으로 만드는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비수성 등장성 멸균 주사 용액; 및 현탁제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다. 제형은 단위 용량 또는 다중 용량 씰링 용기, 예를 들어 앰플 및 바이알로 제공될 수 있으며, 사용 직전에 무균 액체 담체, 예를 들어 주사용 물만을 필요로 하는 동결 건조(냉동 건조(lyophilized)) 조건으로 저장할 수 있다. 주사 용액 및 현탁액은 상기 개시한 종류의 무균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다.

병용 치료법

본 발명의 화합물은 그 자체로 사용될 수 있거나, 적절한 면역 반응을 유도, 변형 또는 자극시키기에 충분한 양으로 약제학적으로 허용되는 부형제와 병용될 수 있다. 면역 반응은, 특이적 면역 반응, 비특이적 면역 반응, 특이적 및 비특이적 반응 둘 다, 선천적 반응, 1차 면역 반응, 적응 면역, 2차 면역 반응, 기억 면역 반응, 면역 세포 활성화, 면역 세포 증식, 면역 세포 분화 및 사이토카인 발현을 비제한적으로 포함할 수 있다. 특정 양태에서, 본원에 기재된 화합물 및 이의 조성물은, 하나 이상의 미리 결정된 항원에 대한 면역 반응을 자극할 것이 의도된 백신; 애주번트; CTLA-4 및 PD-1 경로 길항제, 지질, 리포좀, 화학 요법제, 면역 조절 세포주 등을 포함하는 하나 이상의 추가 조성물과 함께 투여된다.

본원에 기재된 화합물 및 이의 조성물은, 추가의 치료학적 또는 예방적 조성물 또는 양식에 앞서, 상기 조성물 또는 양식 이후에, 그리고/또는 상기 조성물 또는 양식과 동시에 투여될 수 있다. 이들은, B7 동시 자극 분자, 인터루킨-2, 인터페론-G, GM-CSF, CTLA-4 길항제, OX-40/OX-40 리간드, CD40/CD40 리간드, 사르그라모스팀, 레바미졸, 백시니아 바이러스, 칼메트-게랑 간균(BCG), 리포좀, 백반, 프로인드의 완전 또는 불완전 애주번트, 해독된 내독소, 광유, 표면 활성 물질, 예를 들어 지질레시틴(lipolecithin), 플루로닉(pluronic) 폴리올, 폴리음이온(polyanion), 펩타이드 및 오일 또는 탄화수소 유액을 비제한적으로 포함한다. 반응 유형 둘 다를 자극하는 것도 사용될 수 있지만, 항체 반응에 비해 세포 용해성 T세포 반응을 우선적으로 자극하는 T세포 면역 반응을 유도하는 담체가 바람직하다. 제제가 폴리펩타이드인 경우, 폴리펩타이드 그 자체 또는 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 투여될 수 있다. 담체는 세포, 예를 들어 항원 제시 세포(APC) 또는 수지상 세포일 수 있다. 항원 제시 세포는, 대식 세포, 수지상 세포 및 B 세포와 같은 세포 유형을 포함한다. 다른 전문 항원 제시 세포는, 단핵구, 변연부 쿠퍼 세포, 미세아교세포, 랑게르한스 세포, 손가락 돌기 수지상 세포, 소포 수지상 세포 및 T 세포를 포함한다. 조건 항원 제시 세포가 사용될 수도 있다. 조건 항원 제시 세포의 예는, 성상 세포, 소포 세포, 내피 및 섬유모세포를 포함한다. 담체는 폴리펩타이드를 발현하도록, 또는 백신접종된 개인의 세포에서 후속적으로 발현되는 폴리뉴클레오티드를 전달하도록 형질 전환된 박테리아 세포일 수 있다. 애주번트, 예를 들어 수산화알루미늄 또는 인산알루미늄을 첨가하여 면역 반응을 유발, 향상 또는 연장시키기 위한 백신의 능력을 증가시킬 수 있다. 추가의 물질, 예를 들어 개별적으로 사용되거나 상기 개시된 조성물과 병용하여 사용되는, 사이토카인, 케모카인, 및 CpG, 톨 유사 수용체(TLR) 9 작용제와 박테리아 핵산 서열 시퀀스, 및 지질단백질, LPS, 모노포스포릴 지질 A, 리포테이코산, 이미키모드, 레시퀴모드를 포함하는 TLR 2, TLR 4, TLR 5, TLR 7, TLR 8, TLR 9에 대한 추가의 작용제, 및 또한 레티노산-유도성 유전자 I(RIG-I) 작용제, 예를 들어 폴리 I:C도, 잠재적인 애주번트이다. 애주번트의 다른 대표적인 예는, 키라야 사포닌(Quillaja saponaria) 및 코리네박테리움 파리움(Corynebacterium parvum)의 껍질로부터 정제된 균질한 사포닌(McCune 등., Cancer, 1979; 43:1619)을 포함하는 합성 애주번트 QS-21을 포함한다.

추가적인 치료제와 함께 공동 투여하기 위한 방법이 당 업계에 공지되어 있다(Hardman, et al. (eds.) (2001) Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th ed., McGraw-Hill, New York, NY; Poole and Peterson (eds.) (2001) Pharmacotherapeutics for Advanced Practice:A Practical Approach, Lippincott, Williams & Wilkins, Phila., PA; Chabner and Longo (eds.) (2001) Cancer Chemotherapy and Biotherapy, Lippincott, Williams & Wilkins, Phila., PA). 일반적으로, 공동 투여 또는 함께 투여는, 동시에 또는 상이한 시간에 투여될 수 있는 둘 이상의 제제들로 대상체를 치료함을 나타낸다. 예를 들어, 이러한 제제는, 필수적으로 동일한 시간 또는 상이한 시간일 수 있고 동일한 투여 경로 또는 상이한 투여 경로에 의할 수 있는 별도의 투여로서 단일 대상체에 전달될 수 있다. 이러한 제제는 동일한 투여 경로에 의해 동시에 투여되도록 동일한 투여(예를 들어, 동일한 제형)로 단일 대상체에게 전달될 수 있다.

본 발명의 화합물의 애주번트 특성으로 인해, 이들의 용도는, 다른 백신, 애주번트, 항원, 항체 및 면역 조절제를 포함하는 다른 치료 양식과 조합될 수도 있다. 예가 이하에 제공된다.

애주번트

본 발명의 조성물 또는 방법은, 본원에 개시된 본 발명의 화합물 및 이의 조성물 이외에, 이들의 성질로 인해, 표적화된 종양 세포(들)에 존재하는 암 항원에 대해 반응하는 면역계를 자극하거나 다르게는 사용하는 역할을 할 수 있는 하나 이상의 추가 물질을 추가로 포함할 수 있다. 이러한 애주번트는, 지질, 리포좀, 선천 면역을 유도하는 비활성화된 박테리아(예를 들어, 비활성화되거나 약화된 Listeria monocytogene), 톨 유사 수용체(TLR), (NOD) 유사 수용체(NLR), 레티노산 유도성 유전자 기반(RIG)-I 유사 수용체(RLR), C형 렉틴 수용체(CLR) 및/또는 병원체 관련 분자 패턴("PAMPS")를 포함하지만, 이들로 제한되지는 않는다. PAMP의 예는, 지질단백질, 지질폴리펩티드, 펩티도글리칸, 지모산, 지질다당류, 나이세리아 포린, 플라젤린, 프로필린, 갈락토세라마이드, 무라밀 디펩타이드를 포함한다. 펩티도글리칸, 지질단백질 및 리포테이코산은 일례인 MPL을 포함하여 대부분의 세균에 의해 발현된다. 플라젤린은, 병원성 및 공생 세균에 의해 분비되는 박테리아 편모의 구조적 요소를 나타낸다. 갈락토실세라마이드는 자연 킬러 T(NKT) 세포의 활성제이다. 무라밀 디펩타이드는 모든 세균에 대해 공통적인 생체활성 펩티도글리칸 모티프이다.

면역 체크포인트 억제제

본 발명의 화합물은, 면역 체크포인트 억제제, 예를 들어 CTLA-4 경로 길항제, PD-1 경로 길항제, Tim-3 경로 길항제, Vista 경로 길항제, BTLA 경로 길항제, LAG-3 경로 길항제 또는 TIGIT 경로 길항제로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 면역 체크 포인트 억제제와 조합되어 사용된다. 일부 양태에서, 면역 체크포인트 억제제는, 항-CTLA-4 항체, 항-PD-1 항체, 항-Tim-3 항체, 항-Vista 항체, 항-BTLA 항체, 항-LAG-3 항체 또는 항-TIGIT 항체로 이루어지는 그룹으로부터 선택된다.

본 발명의 화합물은 CTLA-4 경로 길항제와 조합되러 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 상기 조합은 고형 종양 또는 혈액암을 치료하는데 사용된다. CTLA-4는 적응 면역 반응의 중요한 음성 조절제로 생각된다. 활성화된 T 세포는, 항원 제시 세포에서 CD28보다 높은 친화성으로 CD80 및 CD86과 결합하여, T 세포 자극, IL-2 유전자 발현 및 T 세포 증식을 억제하는 CTLA-4를 상향조절한다. 결장암, 전이성 전립선 암 및 전이성 흑색종의 마우스 모델에서 CTLA4 차단의 항 종양 효과가 관찰되었다. 일부 양태에서, CTLA-4 경로 길항제는 트레멜리무맙 및 이필리무맙으로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 항-CTLA-4 항체 분자이다.

이필리무맙(CTLA-4 항체, MDX-010로도 알려져 있음, CAS 번호 477202-00-9) 및 트레멜리무맙(이전에 티실리무맙으로 공지된 IgG2 단일클론 항체, CP-675,206)은, 인간 CTLA4에 결합하는 인간화 단일클론 항체이고, 이의 CD80 및 CD86과의 상호 작용을 방지한다. 유사한 전략에 의해 표적화될 수 있는 다른 음성 면역 조절제는, 프로그램된 세포사 1(PD-1), B 및 T 림프구 약화제, 형질 전환 성장 인자 베타, 인터루킨-10 및 혈관 내피 성장 인자를 포함한다.

일부 양태에서, 본 발명의 화합물은 항-CTLA-4 항체 및 항-PD-1 항체와 조합되어 사용될 수 있다. 일 양태에서, 상기 조합물은, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 항-PD-1 항체 분자 및 항-CTLA-4 항체, 예를 들어 이필리무맙을 포함한다. 사용될 수 있는 예시적인 용량은, 약 1 내지 10mg/kg, 예를 들어 3mg/kg의 항-PD-1 항체 분자의 용량 및 약 3mg/kg의 항-CTLA-4 항체, 예를 들어 이필리무맙의 용량을 포함한다.

본 발명의 화합물은 PD-1 경로 길항제와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 상기 조합은 고형 종양 또는 혈액암을 치료하는데 사용된다. PD-1은 활성화된 T 세포에서 발현되는 적응 면역 반응의 또 다른 음성 조절제이다. PD-1은 B7-H1 및 B7-DC에 결합하고, PD-1의 진입은 T-세포 활성화를 억제한다. 항종양 효과는 PD-1 경로 차단으로 입증되었다. 항-PDV-1 항체 분자(예를 들어, 니볼루맙(Opdivo^®), 펨브롤리주맙(Keytruda^®) 및 피딜리주맙 및 AMP-224는, 본 발명에서 용도를 확인할 수 있는 PD-1 경로 차단제의 예가 될 수 있는 것으로 문헌에 보고되어 있다. 일부 양태에서, PD-1 경로 길항제는, 니볼루맙, 펨브롤리주맙 또는 피딜리주맙으로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 항-PD-1 항체 분자이다.

일부 양태에서, PD-1 경로 길항제는, 불변 영역(예를 들어, 면역 글로불린 서열의 Fc 영역)에 융합된 PD-L1 또는 PD-L2의 면역 부착소(immunoadhesin)(예를 들어 세포외 또는 PD-1 결합 부분을 포함하는 면역 부착소)이다. 일부 양태에서, PD-1 억제제는 AMP-224(B7-DCIg; Amplimmune; 예를 들어, WO2010/027827 및 WO2011/066342에 개시됨)가 PD-1과 B7-H1의 상호 작용을 차단하는 PD-L2 Fc 융합 가용성 수용체이다.

일부 양태에서, PD-1 경로 길항제는 PD-L1 또는 PD-L2 억제제이다. 일부 양태에서, PD-L1 또는 PD-L2 억제제는 항-PD-L1 항체 또는 항-PD-L2 항체이다. 일부 양태에서, 항-PD-L1 억제제는 YW243.55.S70, MPDL3280A, MEDI-4736, MSB-0010718C 또는 MDX-1105로부터 선택된다. 일부 양태에서, PD-L1 억제제는 항-PD-L1 항체 MSB0010718C이다. MSB0010718C(A09-246-2로도 나타냄; Merck Serono)는 PD-L1에 결합하는 단일클론 항체이다.

본 발명의 화합물은 TIM-3 경로 길항제와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 상기 조합은 고형 종양 또는 혈액암을 치료하는데 사용된다. 일부 양태에서, TIM-3 경로 길항제는 항-TIM-3 항체이다. 일부 양태에서, 항-TIM-3 항체 분자는 2015년 8월 6일자로 공개된, 발명의 명칭이 "TIM-3에 대한 항체 분자 및 이 용도"인, US 2015/0218274에 개시되어 있다.

본 발명의 화합물은 LAG-3 경로 길항제와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 상기 조합은 고형 종양 또는 혈액암을 치료하는데 사용된다. 일부 양태에서, LAG-3 경로 길항제는 항-LAG-3 항체이다. 일부 양태에서, 항-LAG-3 항체 분자는 2015년 3월 13일자로 출원된, 발명의 명칭이 "LAG-3에 대한 항체 분자 및 이 용도"인, US 2015/0259420에 개시되어 있다.

아미노산 분해 대사

본 발명의 화합물은 아미노산 대사 억제제, 예를 들어 IDO 또는 아르기나제 1 또는 아르기나제 2 억제제와 조합되어, 면역 억제 면역 세포, 예를 들어 골수 유도된 억제 세포의 면역 억제 효과를 길항시킬 수 있다.

퓨린성 신호 경로

본 발명의 화합물은, 퓨린성 신호 전달 경로의 억제제, 예를 들어 CD39 및 CD73 경로 길항제 또는 A2A/A2B 수용체 억제제와 조합되어 사용될 수 있다.

케모카인 및 케모카인 수용체

본 발명의 화합물은, 억제 면역 세포의 종양 미세환경으로의 동원(recruitment)을 억제하기 위해 케모카인 또는 케모카인 수용체 길항제와 조합되어 사용될 수 있다. 예를 들어, 그러나 비배타적으로, 본 발명의 화합물은 골수 억제 세포 및 조절 T 세포의 침윤을 감소시키는 CCR2 또는 CCR5 길항제의 조합으로 사용될 수 있다.

T 세포 수용체 작용제

본 발명의 화합물은 T-세포 수용체 작용제, 예를 들어 CD28 작용제, OX40 작용제, GITR 작용제, CD137 작용제, CD27 작용제 또는 HVEM 작용제와 조합되어 사용될 수 있다.

본 발명의 화합물은 CD27 작용제와 조합되어 사용될 수 있다. 예시적인 CD27 작용제는 예를 들어 PCT 공개 공보 제WO 2002/004367호에 기재된 항-CD27 작용성 항체를 포함한다.

본 발명의 화합물은 GITR 작용제와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 상기 조합은 고형 종양 또는 혈액암을 치료하는데 사용된다. 예시적인 GITR 작용제는 예를 들어, GITR 융합 단백질 및 항-GITR 항체(예를 들어, 2가 항-GITR 항체)를 포함한다.

TLR 작용제

본 발명의 화합물은, 톨 유사 수용체 작용제와 조합되어 사용될 수 있다. 본원에서 사용되는 용어 "톨 유사 수용체"(또는 "TLR")는, 미생물 생성물을 감지하고/감지하거나 적응 면역 반응을 개시하는 단백질의 톨 유사 수용체군 또는 이의 단편을 나타낸다. 일 양태에서, TLR은 수지상 세포(DC)를 활성화시킨다. 톨 유사 수용체(TLR)는, 먼저 미생물 병원체를 인식하는 선천성 면역 계통의 센서로 확인된 패턴 인식 수용체군이다. TLR은, 류신-풍부 반복물(repeats)의 외도메인, 막횡단 도메인 및 세포내 TIR(Toll/IL-1R) 도메인을 함유하는 보존된 막 스패닝(spanning) 분자군을 포함한다. TLR은 미생물의 뚜렷한 구조를 인식하며, 종종 "AMP"(병원체 관련 분자 패턴)로 나타낸다. TLR에 결합하는 리간드는 염증 및 면역에 관련된 인자의 생산을 유도하는 세포내 신호 전달 경로의 케스케이드를 유발한다.

당해 기술 분야에 공지되어 있고 본 발명에서의 용도를 발견하는 TLR 작용제는 다음을 포함하지만, 이들로 한정되지는 않는다:

Pam3Cys, TLR-1/2 작용제;

CFA, TLR-2 작용제;

MALP2, TLR-2 작용제;

Pam2Cys, TLR-2 작용제;

FSL-1, TLR-2 작용제;

Hib-OMPC, TLR-2 작용제;

폴리리보신산:폴리리보사이티드산(폴리 I:C), TLR-3 작용제;

폴리아데노신-폴리우리딜산(폴리 AU), TLR-3 작용제;

폴리-L-리신과 카복시메틸셀룰로오스로 안정화된 폴리이노신산-폴리사이티딜산(Hiltonol^®), TLR-3 작용제;

모노포스포릴 지질 A(MPL), TLR-4 작용제;

LPS, TLR-4 작용제;

세균성 플라겔린, TLR-5 작용제;

시알릴-Tn(STn), 다수의 인간의 MUC1 점액과 관련된 탄수화물;

암 세포 및 TLR-4 작용제;

이미퀴모드, TLR-7 작용제;

레지퀴모드, TLR-7/8 작용제;

록소리빈, TLR-7/8 작용제; 및

비메틸화된 CpG 디뉴클레오티드(CpG-ODN), TLR-9 작용제.

이들의 애주번트 특성으로 인해, TLR 작용제는 바람직하게는 다른 백신, 애주번트 및/또는 면역 조절제와 조합하여 사용되며, 다양한 조합으로 조합될 수 있다. 따라서, 특정 양태에서, STING에 결합하고 STING-의존성 TBK1 활성화를 유도하는 모노-FCDN 또는 디-FCDN 화합물, 및 수지상 세포 유도, 동원 및/또는 성숙을 자극하는 하나 이상의 사이토카인을 발현 및 분비하는 불활성화된 종양 세포가, 치료적 목적을 위해 하나 이상의 TLR 작용제와 함께 본원에 개시된 바와 같이 투여될 수 있다.

항체 치료법

본 발명의 화합물은 치료용 항체와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 치료용 항체의 작용 메카니즘은, 항체-의존성 세포-매개된 세포 독성(ADCC)이다. ADCC는 세포 매개 면역 방어 메커니즘으로서, 이에 의해 면역계의 작동 세포가, 막 표면 항원은 특정 항체에 결합된 표적 세포를 능동적으로 용해시킨다. 이는 체액 면역 반응의 일부로서 항체가 감염을 제한하고 억제하는 작용을 할 수 있는 메커니즘 중 하나이다. 고전적 ADCC는 자연 살해(NK) 세포에 의해 매개되며; 대식세포, 호중구 및 호산구도 ADCC를 매개할 수 있다. ADCC는 종양에 대한 트라스트주맙 및 리툭시맙을 포함하는 치료용 단일 클론 항체의 중요한 메카니즘이다. 본 발명의 화합물은 ADCC를 강화시키는 작용을 할 수 있다.

다음은 본 발명의 화합물과 함께 사용될 수 있는 예시적인 항체 목록이다:

무로모납-CD3, 인플릭시맙, 아달리무맙, 오말리주맙, 다클리주맙, 리툭시맙, 이브리투모맙, 토시투모맙, 세툭시맙, 트라스투주맙, 알렘투주맙, Lym-1 이필리무맙, 비탁신, 베바시주맙 및 압식시맙.

본 발명의 화합물과 조합되어 사용될 수 있는 추가의 치료용 항체는, 프로락틴 수용체(PRLR) 억제제, HER3 억제제, EGFR2 및/또는 EGFR4 억제제, M-CSF 억제제, 항-APRIL 항체, 또는 항-SIRPα 또는 항-CD47 항체를 포함한다.

화학요법제

본원에 기재된 방법의 추가의 양태에서, 본 발명의 화합물은 화학요법제(예를 들어, 소형 분자 약제학적 화합물)와 조합되어 사용된다. 따라서, 상기 방법은, 추가의 치료 또는 병용 치료로서 유효량의 하나 이상의 화학요법제를 대상체에게 투여함을 추가로 포함한다. 특정 양태에서, 하나 이상의 화학요법제는, 아비라테론 아세테이트, 알트레타민, 언하이드로빈블라스틴, 오리스타틴, 벡사로텐, 비칼루타미드, BMS 184476, 2,3,4,5,6-펜타플루오로-N-(3-플루오로-4-메톡시페닐)벤젠 설폰아미드, 플레오마이신, N,N-디메틸-L-발릴-L-발릴-N-메틸-L-발릴-L-프롤리-1-L프롤린-t부틸아미드, 카섹틴, 세마도틴, 클로람부실, 사이클로포스파미드, 3',4'-디데하이드로-4'-데옥시-8'-노르빈-칼류코블라스틴, 도세탁솔, 독세탁셀, 사이클로포스파미드, 카보플라틴, 카르무스틴, 시스플라틴, 크립토피신, 사이클로포스파미드, 사이타라빈, 다카르바진(DTIC), 닥티노마이신, 다우노루비신, 데시타빈 돌라스타틴, 독소루비신(아드리아마이신), 에토포사이드, 5-플루오로우라실, 피나스테라이드, 플루타미드, 하이드록시우레아 및 하이드록시우레아탁산, 이포스파미드, 리아로졸, 로니다민, 로무스틴(CCNU), 엔잘루타미드, 메클로레타민(질소 머스타드), 멜팔란, 미보불린 이세티오네이트, 리족신, 세르테네프, 스트렙토조신, 미토마이신, 메토트렉세이트, 탁산, 닐루타미드, 오나프리스톤, 파클리탁셀, 프레드니무스틴, 프로카바진, RPR109881, 스트라무스틴 포스페이트, 타목시펜, 타소네르민, 탁솔, 트레티노인, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신 설페이트, 및 빈플루닌으로 이루어지는 그룹으로부터 선택된다.

본원에 개시된 방법의 추가의 양태에서, 본 발명의 화합물은, 본원의 방법에 개시된 적응증을 치료하기 위한 화학요법제 및/또는 추가의 제제와 조합하여 사용된다. 일부 양태에서, 본 발명의 화합물은, 소트라스타우린, 닐로티닙, 5-(2,4-디하이드록시-5-이소프로필페닐)-N-에틸-4-(4-(모르폴리노메틸)페닐)이속사졸-3-카복사미드, 닥톨리십, 8-(6-메톡시-피리딘-3-일)-3-메틸-1-(4-피페라진-1-일-3-트리플루오로메틸-페닐)-1,3-디하이드로-이미다조[4,5-c]퀴놀린-2-온, 3-(2,6-디클로로-3,5-디메톡시페닐)-1-(6-((4-(4-에틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)-1-메틸우레아, 부파를리십, 8-(2,6-디플루오로-3,5-디메톡시페닐)-N-(4-((디메틸아미노)메틸)-1H-이미다졸-2-일)퀴녹살린-5-카복사미드, (S)-N1-(4-메틸-5-(2-(1,1,1-트리플루오로-2-메틸프로판-2-일)피리딘-4-일)티아졸-2-일)피롤리딘-1,2-디카복사미드, (S)-1-(4-클로로페닐)-7-이소프로폭시-6-메톡시-2-(4-(메틸-(((1r,4S)-4-(4-메틸-3-옥소피페라진-1-일)사이클로헥실)메틸)아미노)페닐)-1,2-디하이드로이소퀴놀린-3(4H)-온, 데페라시록스, 레트로졸, (4S,5R)-3-(2'-아미노-2-모르폴리노-4'-(트리플루오로메틸)-[4,5'-비피리미딘]-6-일)-4-(하이드록시메틸)-5-메틸옥사졸리딘-2-온, (S)-5-(5-클로로-1-메틸-2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-3-일)-6-(4-클로로페닐)-2-(2,4-디메톡시피리미딘-5-일)-1-이소프로필-5,6-디하이드로피롤로[3,4-d]이미다졸-4(1H)-온, 4-((2-(((1R,2R)-2-하이드록시사이클로헥실)아미노)벤조[d]티아졸-6-일)옥시)-N-메틸피콜린-아미드, 이마티닙 메실레이트, 2-플루오로-N-메틸-4-(7-(퀴놀린-6-일메틸)이미다조[1,2-b][1,2,4]트리아진-2-일)벤즈아미드, 룩솔리티닙, 파노비노스타트, 오실로드로스타트, (S)-N-((S)-1-사이클로헥실-2-((S)-2-(4-(4-플루오로벤조일)티아졸-2-일)피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-(메틸아미노)프로판아미드, (S)-N-((S)-1-사이클로헥실-2-((S)-2-(4-(4-플루오로벤조일)티아졸-2-일)피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-(메틸아미노)프로판아미드, 소니데집 포스페이트, 세리티닙, 7-사이클로펜틸-N,N-디메틸-2-((5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카복사미드, N-(4-((1R,3S,5S)-3-아미노-5-메틸사이클로헥실)피리딘-3-일)-6-(2,6-디플루오로페닐)-5-플루오로피콜린아미드, 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세타미드, 엔코라페닙, 7-사이클로펜틸-N,N-디메틸-2-((5-((1R,6S)-9-메틸-4-옥소-3,9-디아자바이사이클로[4.2.1]-노난-3-일)피리딘-2-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카복사미드, 비니메티닙, 미도스타우린, 에베롤리무스, 1-메틸-5-((2-(5-(트리플루오로메틸)-1H-이미다졸-2-일)피리딘-4-일)옥시)-N-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1H-벤조[d]이미다졸 2-아민, 파시레오티드 디아스파르테이트, 도비티닙, (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드, N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필설포닐)-페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민, 3-(4-(4-((5-클로로-4-((5-메틸-1H-피라졸-3-일)아미노)피리미딘-2-일)아미노)-5-플루오로-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)티에탄 1,1-디옥사이드, 5-클로로-N2-(2-플루오로-5-메틸-4-(1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)피페리딘-4-일)페닐)-N4-(5-메틸-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2,4-디아민, 5-클로로-N2-(4-(1-에틸피페리딘-4-일)-2-플루오로-5-메틸페닐)-N4-(5-메틸-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2,4-디아민, 발스포다르, 및 바탈라닙 석시네이트로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 제제와 조합되어 사용된다.

다른 양태에서, 본 발명의 화합물은, PKC 억제제, BCR-ABL 억제제, HSP90 억제제, PI3K 및/또는 mTOR의 억제제, FGFR 억제제, PI3K 억제제, FGFR 억제제, PI3K 억제제, 시토크롬 P450의 억제제(예를 들어, CYP17 억제제), HDM2 억제제, 아로마타제 억제제, p53 및/또는 p53/Mdm2 상호 작용의 억제제, 또는 CSF-1R 티로신 키나제 억제제와 조합되어 사용될 수 있다.

적합한 제제는 예를 들어 정제, 캡슐제, 좌약, 용액 - 특히 주사 및 주입용 용액(s.c., i.v., i.m) - 엘릭서, 유액 또는 분산성 분말을 포함한다. 약제학적 활성 화합물(들)의 함량은 전체 조성물의 0.1 내지 90wt%, 바람직하게는 0.5 내지 50wt%의 범위 내, 즉, 하기 명시되는 투여량 범위를 달성하기에 충분한 양이어야 한다. 명시되는 용량은 필요에 따라 1일 수 회 제공될 수 있다.

상기 언급된 조합 파트너의 투여량은, 일반적으로 권장되는 가장 낮은 용량의 1/5 내지 일반적으로 권장되는 용량의 1/1 이하이다.

또 다른 양태에서, 본 발명은, 환자에서의 STING과 관련되거나 이에 의해 조절되거나 또는 STING의 조절에 의해 영향을 받을 수 있는 질환 또는 병태의 치료 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은, 이러한 치료를 필요로 하는 환자, 바람직하게는 인간에게 치료학적 유효량의 본 발명의 화합물을 치료학적 유효량의 상기 개시된 하나 이상의 추가 치료제와 병용하여 투여하는 단계를 포함한다.

추가의 치료제와 병용되는 본 발명에 따른 화합물의 사용은 동시에 또는 시차를 두고(at staggered time) 실시될 수 있다.

본 발명에 따른 화합물 및 하나 이상의 추가의 치료제는 둘 다, 하나의 제형에 함께 또는 2개의 동일하거나 상이한 제형으로, 예를 들어 일명 부품 키트(kit-of-part)로 존재할 수 있다.

결과적으로, 또 다른 양태에서, 본 발명은, 본 발명에 따른 화합물 및 상기 및 이하에 개시되는 하나 이상의 추가의 치료제, 임의로 하나 이상의 불활성 담체 및/또는 희석제를 함께 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 다른 특징들 및 이점들은, 예시의 방식으로 본 발명의 원리를 설명하는 이하의 보다 상세한 실시예로부터 명백해질 것이다.

본 발명에 따른 화합물의 합성

일반 기술 고지

용어 "주변 온도"및 "실온"은 상호 교환가능하게 사용되며, 약 20℃, 예를 들어 15 내지 25℃의 온도를 지정한다.

일반적으로, 제조된 화합물의 ¹H NMR 스펙트럼 및/또는 질량 스펙트럼이 얻어졌다. 달리 명시하지 않는 한, 모든 크로마토그래피 작업은 실온에서 실시했다. 주기적인 디뉴클레오티드 합성 동안, 용매의 증발을 수욕 온도가 35℃를 초과하지 않는 감압 하에서 회전 증발에 의해 일반적으로 실시했다. 또한, 사이클릭 디뉴클레오티드의 합성 동안, 반응을 질소 또는 아르곤 하에서 실시했다.

핵 자기 공명(NMR) 스펙트럼: ¹H 스펙트럼의 경우, DMSO 용매 신호(2.50ppm)에 대한 화학적 이동을 나타냈거나, D₂O에서의 측정의 경우, DSS(4,4-디메틸-4-실라펜탄-1-설폰산)에 대한 화학적 이동을 나타냈다. ³¹P NMR 스펙트럼은 ¹H/³¹P(Bruker BioSpin GmbH, 소프트웨어: TopSpin, au 프로그램: xsi)의 절대 빈도들의 비교에 의해 간접적으로 참조했다. 모든 ³¹P NMR 스펙트럼을 양성자 탈커플링으로 기록했다.

약어 목록

ACN 아세토니트릴

aq. 수성

℃ 섭씨

DA 다이오드 어레이

DBU 디아자바이사이클로[5.4.0]운덱-7-엔

CEP (2-시아노에틸)-(N,N-디이소프로필)]-포스포라미다이트

DCM 디클로로메탄

DDTT 3-((N,N-디메틸-아미노메틸리덴)아미노)-3H-1,2,4-디티아졸-3-티온

DIPEA 디이소프로필에틸아민

DMAP 4-디메틸아미노피리딘

DMF N,N-디메틸포름아미드

DMOCP 2-클로로-5,5-디메틸-2-옥소-1,3,2-디옥사포스포리난

DMT 4,4'-디메톡시트리틸

ESI-MS 전자분무 이온화 질량 분광분석법

EtOAc 에틸 아세테이트

eq 당량

FC 플래시 크로마토그래피, 추가의 상세 내용이 제공되지 않는 경우 SiO₂가 사용된다

h 시간

HCl 염산

HATU [디메틸아미노-(1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리딘-3-일옥시)-메틸렌]-디메틸-암모늄 헥사플루오로포스페이트

HPLC 고성능 액체 크로마토그래피

L 리터

LiHMDS 리튬 헥사메틸디실라지드

m/z 전하-대-질량비

MeOH 메탄올

min 분

mL 밀리리터

MS 질량 스펙트럼

n.d. 측정되지 않음

NH₄OH 물 중 NH₃ 용액

Pd-PEPPSI-IPent™ 디클로로[1,3-비스(2,6-디-3-펜틸페닐)이미다졸-2-일리덴](3-클로로피리딜)팔라듐(II)

psi 제곱인치당 파운드

RT 실온(약 20℃)

SEM 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸

Sol 용매

TBS tert-부틸-디메틸실릴

TEA 트리에틸 아민

TEAF 트리에틸암모늄 포르메이트

TF/TFA 트리플루오로아세트산

TFAA 트리플루오로아세트산 무수물

THF 테트라하이드로푸란

t_R 분으로 나타낸 체류 시간

분석 HPLC -구성:

구성 A(농도 구배 HPLC ):

VWR/Hitachi: L-2130 펌프; VWR/Hitachi: L-2200 자동 샘플러; VWR/Hitachi: L-2350 칼럼 오븐(30℃로 세트); VWR/Hitachi: L-2400 가변 파장 UV/Vis 검출기; EZChrom 소프트웨어 버전 3.3.1 SP1.

YMC*GEL ODS-A 12nm(10㎛; 250 x 0.4mm) 채널 = 물 중 20mM TEAF(pH 6.8); 채널 B = 100% 아세토니트릴, 20mM TEAF(pH 6.8). 농도 구배: 0분 100% A; 30분 100% B; 40분 100% B, 30℃; 유속: 1.0mL/in; UV 261nm;

구성 B( 등용매성 HPLC ):

VWR/Hitachi: L-7100 펌프; VWR/Hitachi: L-7400 가변 파장 UV/Vis 검출기; VWR/Hitachi: D-7500 적산기(Integrator).

분석 HPLC(구성 C; YMC*GEL ODS-A 12nm(10㎛; 250 x 0.4mm) 11% 아세토니트릴, 물 중 20mM TEAF(pH 6.8); 유속: 1.0mL/in; UV 264nm;

LC-MS-분석:

HPLC-시스템: VWR/Hitachi: L-2130 펌프; VWR/Hitachi: L-2200 자동 샘플러; VWR/Hitachi: L-2300 컬럼 오븐; VWR/Hitachi: L-2450 다이오드 어레이 검출기; Agilent: OpenLab

MS-시스템: Bruker Esquire LC 6000 분광분석기

시스템 A

컬럼: Kromasil 100-5 C₈, 5㎛, 50mm x 3mm.

유속: 0.4mL/in, 35℃, UV-검출 범위: 220 내지 300nm

질량 스펙트럼: 음극 및 양극 전자 스프레이 이온화를 사용하여 질량 분석기에 기록됨

샘플 제조: 샘플(2 내지 10㎕)을 175㎕의 아세토니트릴과 175㎕의 물에 용해시켰으며, 주입 용적 2 내지 10㎕.

시스템 B

컬럼: ACE 3 AQ 110-3 C₁₈, 5㎛, 50mm x 3mm.

유속: 0.4mL/in, 35℃, UV-검출 범위: 220 내지 300nm

질량 스펙트럼: 음극 및 양극 전자 스프레이 이온화를 사용하여 질량 분석기에 기록됨

중간체의 합성

중간체 1.1

이미다조피리다지논 -β-D-리보푸라노사이드(1-(β-D- 리보푸라노실 ) 이미다조 [4,5-d]피리다진-4(5H)-온)

표제 화합물을 문헌[J. Chem . Soc . Perkin Trans. 1 1989, 1769-1774]에 기재된 바와 같이 제조했다.

중간체 1.2

5'- DMT - 이미다조피리다지논 -β-D- 리보푸라노사이드

이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드(중간체 1.1, 4.00g, 14.9mmol)를, 무수 피리딘(3 x 20mL)으로 공비시키고, 진공에서 건조시키고, 무수 피리딘(25㎖)에 용해시켰다. 상기 용액에, 무수 피리딘(15㎖) 중 4,4'-디메톡시트리틸 클로라이드(5.05g, 14.9mmol) 용액을 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반시켰다. 상기 반응 혼합물을 감압하에 증발시켜, 생성되는 잔류물을 예비 역상 HPLC(X-Bridge C18, 아세토니트릴/물/NH₃)에 의해 정제했다.

LC-MS(시스템 D):

t_Ret = 0.82분; ESI-MS: 571 [M+H]⁺

중간체 1.3-a 및 중간체 1.3-b

5'- DMT -2'-TBS- 이미다조피리다지논 -β-D- 리보푸라노사이드 (중간체 1.3-a) 및 5'-DMT-3'-TBS-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드(중간체 1.3-b)

5'-DMT-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드(중간체 1.2, 5.30g, 9.29mmol)를 무수 피리딘(3 x 30㎖)으로 공비시키고, 진공에서 건조시키고, 무수 피리딘(20㎖)에 용해시켰다. 상기 용액에, 이미다졸(1.90g, 27.9mmol) 및 tert-부틸클로로디메틸실란(1.54g, 10.2mmol)을 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 6시간 동안 실온에서 교반시켰다. 상기 반응 혼합물을 디클로로메탄 및 물에 나눴다(partitioned). 유기 층을 분리하고, 수성층을 디클로로메탄으로 추출했다. 합쳐진 유기 추출물을 염수로 세척하고, 소수성 프릿을 사용하여 건조시키고, 감압하에 증발시켰다. 생성되는 잔류물을 중간압 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, 디클로로메탄 중 5 내지 20% 아세톤의 농도 구배)로 정제했다.

LC-MS (시스템 F):

중간체 1.3-a: t_Ret = 1.57분; ESI-MS: 685 [M+H]⁺

중간체 1.3-b: t_Ret = 1.67분; ESI-MS: 685 [M+H]⁺

중간체 1.4

5'- DMT -3'-TBS-2'- CEP - 이미다조피리다지논 -β-D- 리보푸라노사이드

5'-DMT-3'-TBS-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드(중간체 1.2, 5.30g, 9.29mmol)를 무수 피리딘(3 x 30㎖)으로 공비시키고, 진공에서 건조시키고, 무수 클로로메탄(45㎖)에 용해시켰다. 상기 용액에, 2-시아노에틸 N,N,N',N'-테트라이소프로필포스포로디아미다이트(1.62㎖, 5.12mmol) 및 테트라졸(5.69㎖의 아세토니트릴 중 0.5M 용액, 2.85mmol)을 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 4시간 동안 실온에서 교반시켰다. 상기 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 탄산수소나트륨 수용액으로 세척했다. 유기 층을 분리하고, 수성층을 디클로로메탄으로 추출했다. 합쳐진 유기 추출물을 소수성 프릿을 사용하여 건조시키고, 감압하에 증발시켰다. 생성되는 잔류물을 중간압 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔(디클로로메탄 중 트리에틸아민으로 불활성화됨)), 사이클로헥산 중 20 내지 100%의 에틸 아세테이트(3% 트리에틸아민)의 농도 구배)로 정제했다. 생성물을 부분 입체 이성질체들의 혼합물 형태로 수득했다.

LC-MS(시스템 D):

t_Ret = 1.33분; ESI-MS: 885 [M+H]⁺

중간체 1.5

5'-OH-2'-TBS-3'-H-포스포네이트-N ⁶ -Bz-아데노신

N⁶-Bz-5'-DMT-2'-TBS-3'-CEP-아데노신(ChemGenes으로부터 입수함, 0.890g, 0.90mmol)을 실온에서 아세토니트릴(15㎖) 및 물(0.033㎖, 1.83mmol, 2eq.)에 용해시켰다. 피리디늄 트리플루오로아세테이트(0.210g, 1.09mmol, 1.2eq.)를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 10분 동안 실온에서 교반시켰다. tert-부틸아민(10㎖, 95.7mmol)을 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반시켰다. 상기 반응 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 무수 아세토니트릴(25㎖)에 재용해시키고, 감압하에 증발하여, 백색 내지 무색의 폼(foam)을 수득했다. 잔류물을 디클로로메탄(25㎖) 및 물(0.162㎖, 9mmol, 10eq.)에 용해시켰다. 디클로로메탄(25㎖) 중 디클로로아세트산 (0.670㎖, 8.12mmol, 9eq.)을 첨가하고, 생성되는 오렌지 용액을 10분간 실온에서 교반시켰다. 피리딘 (1.31㎖, 16.23mmol, 18eq.)을 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 5분간 실온에서 교반시켰다.

원물질의 LC-MS 분석이 중간체 1.5의 존재를 확인했다.

LC-MS (시스템 A):

t_Ret = 3.10분; ESI-MS: 550 [M+H]⁺

플라스크에 스토퍼를 장착하고(stoppered), 조심스럽게 씰링하고, +2℃에서 16시간 동안 저장했다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 무수 아세토니트릴(4 x 15㎖)로 공비시켰다. 마지막 증발 절차 동안 상기 용액을 약 5㎖의 최종 공비물로 농축시켰다. 생성되는 중간체 1.5의 무수 용액을 다음 반응 순서에서 즉시 사용했다.

중간체 1.6

선형 이량체 5'-OH-3'-TBS- 이미다조피리다지논 -β-D- 리보푸라노사이드 -(2'→5')-시아노에틸-포스포로티오에이트-2'-TBS-3'-H-포스포네이트-N ⁶ -Bz-아데노신

5'-DMT-3'-TBS-2'-CEP-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드(중간체 1.4, 1.340g, 1.51mmol, 1.7eq.)를 무수 아세토니트릴(4x10㎖)로 공비시켰다. 마지막 증발 절차 동안, 상기 용액을 약 3㎖의 최종 공비 혼합물로 농축시켰다. 생성되는 용액을, 약 5㎖의 무수 아세토니트릴(원하는 물질의 이론적인 양: 0.495g, 0.90mmol)에 용해된 5'-OH-2'-TBS-3'-H-포스포네이트-N⁶-Bz-아데노신(중간체 1.5)에 실온에서 첨가했다. 상기 반응 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반시켰다. ((N,N-디메틸아미노-메틸리덴)아미노)-3H-1,2,4-디티아졸린-3-티온(DDTT)(0.203g, 0.99mmol, 1.1eq.)을 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반시켰다. 휘발물을 감압 하에 증발시키고, 잔류물을 디클로로메탄(25㎖) 및 물(0.162㎖, 9mmol, 10eq.)에 용해시켰다. 디클로로메탄(25㎖) 중 디클로로아세트산(1.340㎖, 16.24mmol, 18eq.)을 첨가하고, 오렌지 용액을 20분간 실온에서 교반시켰다. 피리딘 (10㎖)을 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 5분간 실온에서 교반시켰다.

원물질의 LC-MS 분석으로, 부분 입체 이성질체들의 혼합물로서 중간체 1.6의 존재를 확인했다.

LC-MS(시스템 A):

중간체 1.6-a: t_Ret = 7.36분; 중간체 1.6-b: t_Ret = 7.57분;

ESI-MS: 각각의 부분 입체 이성질체에 대해 1063 [M+H]⁺.

플라스크에 스토퍼를 장착하고, 조심스럽게 씰링하고, +2℃에서 16시간 동안 저장했다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 무수 아세토니트릴(2 x 20㎖)로 공비시켰다. 추가 분획의 40㎖의 무수 피리딘을 첨가하고, 잔류물을 약 20mL의 최종 용적으로 감압하에 농축시켰다. 생성되는 중간체 1.6의 무수 용액을 다음 반응 순서에서 즉시 사용했다.

중간체 1.7

사이클릭 이량체 3'-TBS-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드-(2'→5')-시아노에틸-포스포로티오에이트-2'-TBS-N ⁶ -Bz-아데노신-(3'→5')-포스포로티오에이트

2-클로로-5,5-디메틸-1,3,2-디옥사포스포리난 2-옥사이드(DMOCP)(0.581g, 3.15mmol, 3.5eq.)를, 약 20㎖의 최종 용적의 무수 피리딘 중 조악한 5'-OH-3'-TBS-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드-(2'→5')-CE-PS-2'-TBS-3'-H-포스포네이트-N⁶-Bz-아데노신(중간체 1.6)(조악한 제제 중 원하는 물질의 이론적인 양: 0.957g, 0.90mmol)에 첨가했다. 생성되는 혼합물을 20분간 실온에서 교반시켰다. 물(0.570㎖, 31.6mmol, 35.1eq.) 및 3H-1,2-벤조디티올-3-온(0.230g, 1.37mmol, 1.5eq.)을 첨가하고, 실온에서 계속 교반시켰다. 20분 후, 반응 혼합물을 150㎖ 물 중 탄산수소나트륨(4.500g, 53.6mmol) 용액에 붓고, 실온에서 5분간 진탕시킨 뒤, 에틸 아세테이트/메틸-tert-부틸에테르(150㎖, 1:1) 혼합물을 첨가했다. 유기상을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트/메틸-tert-부틸에테르(2 x 75㎖, 1:1)로 2회 추가로 추출했다. 합쳐진 유기상을 무수 황산마그네슘으로 건조시킨 뒤, 감압 하에 용매를 증발시키고, 100㎖의 무수 톨루엔으로 최종 공동-증발시켰다. 예비 플래시 크로마토그래피(160g의 실리카 겔, 디클로로메탄 중 0 내지 12.5% MeOH의 농도 구배)에 의해 원물질을 정제하여, 0.78g의 순도 풍부(purity enriched) 중간체 1.7(부분 입체 이성질체들의 혼합물)을 수득했다.

LC-MS (시스템 A):

중간체 1.7-a: t_Ret = 7.56분; 중간체 1.7-b: t_Ret = 8.18분;

중간체 1.7-c: t_Ret = 9.02분; 중간체 1.7-d: t_Ret = 10.17분;

ESI-MS: 각각의 부분 입체 이성질체에 대해 1077 [M+H]⁺.

중간체 1.8

사이클릭 이량체 3'-TBS- 이미다조피리다지논 -β-D- 리보푸라노사이드 -(2'→5')-포스포로티오에이트-2'-TBS-아데노신-(3'→5')-포스포로티오에이트

125㎖의 무수(absolute) 에탄올 중 33% 메틸아민을, 순도 풍부 3'-TBS-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드-(2'→5')-시아노에틸-포스포로티오에이트-2'-TBS-N⁶-Bz-아데노신-(3'→5')-포스포로티오에이트 (중간체 1.7; 0.780g)에 첨가하고, 생성되는 용액을 실온에서 4시간 동안 교반시켰다. 모든 휘발물을 감압 하에 증발시키고, 진공에서 추가로 건조시켜, 0.758g의 조악한 중간체 1.8(부분 입체 이성질체들의 혼합물)을 수득하여, 다음 반응에서 바로 사용했다.

LC-MS (시스템 A):

중간체 1.8-a: t_Ret = 1.47분; 중간체 1.8-b: t_Ret = 3.60분;

중간체 1.8-c: t_Ret = 3.90분; 중간체 1.8-d: t_Ret = 5.53분;

ESI-MS: 각각의 부분 입체 이성질체에 대해 920 [M+H]⁺.

중간체 2.1

5'-OH-2'-F-3'-H-포스포네이트-N ⁶ -Bz-2'-데옥시아데노신

N⁶-벤조일-5'-DMT-2'-F-2'-데옥시아데노신-3'-CEP(Alfa Aesar로부터 입수함)(1.05g, 1.20mmol)을, 아세토니트릴(6㎖) 및 물(0.043㎖, 2.40mmol, 2eq.)에 실온에서 용해시켰다. 피리디늄 트리플루오로아세테이트(278mg, 1.44mmol, 1.2eq.)를 첨가하고, 반응 혼합물을 5분간 실온에서 교반시켰다. 이후, tert-부틸아민(6.0㎖, 57.1mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 15분간 실온에서 교반시켰다. 반응 혼합물을 진공에서 증발시키고, 무수 아세토니트릴(12㎖)에 재용해시키고(2x), 진공에서 다시 증발시켜, 백색 내지 무색의 폼을 수득했다. 잔류물을 디클로로메탄(14.4㎖) 및 물(0.22㎖, 12.0mmol, 10eq.)에 용해시켰다. 디클로로메탄 중 디클로로아세트산(6%, 14.4㎖)을 첨가하고, 생성되는 오렌지 용액을 10분간 실온에서 교반시켰다. 피리딘(1.64㎖, 20.3mmol, 17eq.)을 첨가하고, 반응 혼합물을 진공에서 증발시키고, 무수 아세토니트릴(3 x 11㎖)로 공비시켰다. 마지막으로, 남아있는 조악한 생성물을 고진공에서 추가로 30분간 건조시켜, 추가의 정제 없이 사용했다.

원물질의 LC-MS 분석으로 중간체 2.1의 존재를 확인했다.

LC-MS (시스템 E):

t_Ret = 0.64분; ESI-MS: 438 [M+H]⁺ .

중간체 2.2

선형 이량체 5'-OH-3'-TBS-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드-(2'→5')-시아노에틸-포스포로티오에이트-2'-F-3'-H-포스포네이트-N ⁶ -Bz-2'-데옥시아데노신

5'-DMT-3'-TBS-2'-CEP-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드(중간체 1.4, 1.38g, 1.56mmol, 1.0eq.)를 무수 아세토니트릴(10㎖)에 용해시키고, 진공에서 공비 증발시켰다. 이러한 작업을 또 다른 3회 반복하여, 마지막 증발에서 플라스크에 약 5㎖의 공비 혼합물를 남겼다. 10조각의 분자체(3Å)를 첨가하고, 생성되는 혼합물을, 약 3㎖의 무수 아세토니트릴 (원하는 물질의 이론적인 양: 523mg, 1.20mmol)에 용해된 5'-OH-2'-F-3'-H-포스포네이트-N⁶-Bz-2'-데옥시아데노신(중간체 2.1)에 실온에서 첨가했다. 반응 혼합물을 5분간 실온에서 교반시켰다. ((N,N-디메틸아미노-메틸리덴)아미노)-3H-1,2,4-디티아졸린-3-티온(DDTT)(275mg, 1.34mmol, 0.9eq.)을 첨가하고, 반응 혼합물을 30분간 실온에서 교반시켰다. 휘발물를 진공에서 증발시키고, 잔류물을 디클로로메탄(20㎖) 및 물(0.216㎖, 12mmol, 7.7eq.)에 용해시켰다. 디클로로메탄(6%, 19.2㎖) 중 디클로로아세트산을 첨가하여, 생성되는 오렌지 용액을 10분간 실온에서 교반시켰다. 이러한 기간 후, 피리딘(12㎖)을 첨가하고, 반응 혼합물을 진공에서 증발시켰다. 마지막으로, 남아있는 조악한 생성물을 고진공에서 추가로 30분간 건조시키고, 추가의 정제 및 특성확인 없이 사용했다.

중간체 2.3

사이클릭 이량체 3'-TBS-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드-(2'→5')-시아노에틸-포스포로티오에이트-2'-F-N ⁶ -Bz-2'-데옥시아데노신-(3'→5')-포스포로티오에이트

조악한 중간체 2.2(원하는 물질의 최대 이론적 양: 1.48g, 1.56mmol)를 36㎖의 무수 피리딘에 용해시키고, 진공에서 약 20㎖로 감소시켰다. 2-클로로-5,5-디메틸-1,3,2-디옥사포스포리난 2-옥사이드(DMOCP)(775mg, 4.20mmol, 2.7eq.)를 첨가하고, 생성되는 혼합물을 5분간 실온에서 교반시켰다. 물(0.75㎖, 41.3mmol, 26.5eq.) 및 3H-1,2-벤조디티올-3-온(0.302g, 1.80mmol, 1.15eq.)을 첨가하고, 실온에서 계속 교반했다. 5분 후, 반응 혼합물을 140㎖ 물 중 탄산수소나트륨(4.00g, 47.6mmol) 용액에 붓고, 5분간 실온에서 교반시킨 뒤, 에틸 아세테이트/메틸-tert-부틸에테르(140㎖, 1:1) 혼합물을 첨가했다. 유기상을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트/메틸-tert-부틸에테르(1:1)로 추가로 추출했다. 유기상을 합치고, 용매를 진공에서 제거했다.

남아있는 잔류물을 최소 용적의 디클로로메탄에 용해시키고, 예비 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, DCM/MeOH: 100/0 → 80/20)에 의해 정제했다. 분획들을 HPLC-MS로 분석했다. 생성물 함유 분획들을 합치고, 용매를 진공에서 제거하여, 900 mg의 부분 입체 이성질체들의 혼합물을 수득했다.

원 물질의 LC-MS 분석으로 중간체 2.3-a/b/c/d의 존재를 확인했다.

LC-MS (시스템 E):

중간체 2.3-a: t_Ret = 0.95분; 중간체 2.3-b: t_Ret = 0.98분;

중간체 2.3-c: t_Ret = 1.00분; 중간체 2.3-d: t_Ret = 1.03분;

ESI-MS: 각각의 부분 입체 이성질체에 대해 965 [M+H]⁺.

중간체 2.4

사이클릭 이량체 3'-TBS- 이미다조피리다지논 -β-D- 리보푸라노사이드 -(2'→5')-포스포로티오에이트-2'-F-2'-데옥시아데노신-(3'→5')-포스포로티오에이트

10㎖의 메탄올 및 10㎖의 수성 암모니아(30 내지 33%)에 300mg(원하는 물질의 최대 이론적인 양: 0.31mmol)의 중간체 2.3을 첨가했다. 생성되는 혼합물을 15시간 동안 50℃에서 교반시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 질소를 30분 동안 상기 혼합물을 통해 버블링했다(bubbled). 용매를 진공에서 제거하고, 혼합물을 무수 아세토니트릴(30㎖)에 재용해시키고, 진공에서 다시 증발시켰다. 잔류물을 무수 아세토니트릴로 연마하고(triturated), 여과하고, 5ml의 ACN으로 세척하고, 밤해 실온에서 건조시켰다. 조악한 생성물을 DMF에 용해시키고, 예비 HPLC(X-Bridge C-18; 아세토니트릴/H₂O/NH₃)에 의해 정제했다. 생성물 함유 분획들을 수집하고, 동결 건조에 의해 용매를 제거했다. 이 방법에 의해, 모든 4개의 부분 입체 이성질체를 분리할 수 있었다.

상기 물질의 LC-MS 분석으로 중간체 2.4-a/b/c/d의 존재를 확인했다.

LC-MS(시스템 C):

중간체 2.4-a: t_Ret = 1.04분; 중간체 2.4-b: t_Ret = 1.10분;

중간체 2.4-c: t_Ret = 1.13분; 중간체 2.4-d: t_Ret = 1.15분;

ESI-MS: 각각의 부분 입체 이성질체에 대해 808 [M+H]⁺.

중간체 3.1

5'-OH-3'-H-포스포네이트-N ⁶ -Bz-LNA-아데닌

출발 물질로서 "LNA-A 아미다이트"(EQ-0063-1000, Exiqon으로부터 입수함)을 사용하여, 중간체 3.1을 중간체 2.1과 유사하게 제조했다.

원물질의 LC-MS 분석으로 중간체 3.1의 존재를 확인했다.

LC-MS (시스템 E):

t_Ret = 0.63분; ESI-MS: 448 [M+H]⁺

중간체 3.2

선형 이량체 5'-OH-3'-TBS- 이미다조피리다지논 -β-D- 리보푸라노사이드 -(2'→5')-시아노에틸-포스포로티오에이트-3'-H-포스포네이트-N ⁶ -Bz-LNA-아데닌

출발 물질로서 중간체 3.1 및 중간체 1.4를 사용하여, 중간체 3.2를 중간체 2.2와 유사하게 제조했다.

중간체 3.3

사이클릭 이량체 3'-TBS-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드-(2'→5')-시아노에틸-포스포로-티오에이트-N ⁶ -Bz-LNA-아데닌-(3'→5')-포스포로티오에이트

출발 물질로서 중간체 3.2를 사용하여, 중간체 3.3을 중간체 2.3과 유사하게 제조했다.

상기 물질의 LC-MS 분석으로 중간체 3.3-a/b/c/d의 존재를 확인했다.

LC-MS(시스템 E):

중간체 3.3-a: t_Ret = 0.94분; 중간체 3.3-b: t_Ret = 0.98분;

중간체 3.3-c: t_Ret = 0.99분; 중간체 3.3-d: t_Ret = 1.03분;

ESI-MS: 각각의 부분 입체 이성질체에 대해 975 [M+H]⁺.

중간체 3.4

사이클릭 이량체 3'-TBS- 이미다조피리다지논 -β-D- 리보푸라노사이드 -(2'→5')-포스포로티오에이트-LNA-아데닌-(3'→5')-포스포로티오에이트

출발 물질로서 중간체 3.3을 사용하여, 중간체 3.4를 중간체 2.4와 유사하게 제조했다.

상기 물질에 대한 LC-MS 분석으로 중간체 3.4-a/b/c/d의 존재를 확인했다.

LC-MS(시스템 C):

중간체 3.4-a: t_Ret = 0.81분; 중간체 3.4-b: t_Ret = 0.89분;

중간체 3.4-c: t_Ret = 0.91분; 중간체 3.4-d: t_Ret = 0.99분;

ESI-MS: 각각의 부분 입체 이성질체에 대해 818 [M+H]⁺.

중간체 4.1

5'-OH-2'-TBS-3'-H-포스포네이트-퓨린-β-D- 리보푸라노사이드

출발 물질로서, 문헌[Fu et al. Biochemistry 1993, 32, 10629 - 10637]에 기재된 바와 같이 제조될 수 있는 5'-DMT-2'-TBS-3'-CEP-퓨린-β-D-리보푸라노사이드를 사용하여, 중간체 4.1을 중간체 1.5와 유사하게 제조했다. 중간체 1.5와는 달리, 본 중간체는 밤새 저장하지 않고 반응의 다음 순서에서 바로 사용했다.

원물질의 LC-MS 분석으로 중간체 4.1의 존재를 확인했다.

LC-MS(시스템 B):

t_Ret = 8.56분; ESI-MS: 431 [M+H]⁺

중간체 4.2

선형 이량체 5'-OH-3'-TBS-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드-(2'→5')-시아노에틸-포스포로티오에이트-2'-TBS-3'-H-포스포네이트-퓨린-β-D-리보푸라노사이드

출발 물질로서, 중간체 1.4 및 상기 개시된 중간체 4.1을 사용하여, 중간체 4.2를 중간체 1.6과 유사하게 제조했다.

원물질의 LC-MS 분석으로, 부분 입체 이성질체들의 혼합물로서 중간체 4.2의 존재를 확인했다.

LC-MS(시스템 B):

중간체 4.2-a: t_Ret = 14.86분; 중간체 4.2-b: t_Ret = 15.01분;

ESI-MS: 각각의 부분 입체 이성질체에 대해 944 [M+H]⁺.

중간체 4.3

사이클릭 이량체 3'-TBS-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드-(2'→5')-시아노에틸-포스포로-티오에이트-2'-TBS-퓨린-β-D-리보푸라노사이드-(3'→5')-포스포로티오에이트

출발 물질로서 중간체 4.2를 사용하여, (부분 입체 이성질체들의 혼합물로서) 중간체 4.3을 중간체 1.7과 유사하게 제조했다.

LC-MS(시스템 B):

중간체 4.3-a: t_Ret = 15.76분; 중간체 4.3-b: t_Ret = 16.61분;

중간체 4.3-c: t_Ret = 17.68분; 중간체 4.3-d: t_Ret = 19.26분;

ESI-MS: 각각의 부분 입체 이성질체에 대해 958 [M+H]⁺.

중간체 4.4

사이클릭 이량체 3'-TBS-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드-(2'→5')-포스포로티오에이트-2'-TBS-퓨린-β-D-리보푸라노사이드-(3'→5')-포스포로티오에이트

출발 물질로서 중간체 4.3을 사용하여, (부분 입체 이성질체들의 혼합물로서) 중간체 4.4를 중간체 1.8과 유사하게 제조했다.

LC-MS(시스템 B):

중간체 4.4-a: t_Ret = 10.31분; 중간체 4.4-b: t_Ret = 11.82분;

중간체 4.4-c: t_Ret = 12.26분; 중간체 4.4-d: t_Ret = 14.47분;

ESI-MS: 각각의 부분 입체 이성질체에 대해 905 [M+H]⁺.

본 발명에 따른 화합물의 합성

일반 고지: 다음 화합물 쌍은 부분 입체 이성질체이고, 적어도 하나의 인광체 원자의 위치배열에 대해 각각 상이하다:

실시예 1.1 및 실시예 1.2;

실시예 2.1 및 실시예 2.2;

실시예 3.1 및 실시예 3.2;

실시예 4.1 및 실시예 4.2.

실시예 1.1 및 실시예 1.2

사이클릭( 이미다조피리다지논 -β-D- 리보푸라노사이드 -(2'→5')- 포스포로티오에이트 -아데노신-(3'→5')-포스포로티오에이트)

30㎖의 무수 피리딘 및 15㎖의 무수 트리에틸아민을, 조악한 3'-TBS-이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드-(2'→5')-포스포로티오에이트-2'-TBS-아데노신-(3'→5')-포스포로티오에이트(중간체 1.8; 0.76 g)에 첨가했다. 생성되는 용액을 약 5㎖의 최종 용적으로 감압하에 농축한 뒤, 트리에틸아민 트리하이드로플루오라이드(3.590㎖, 21.7mmol)와 11㎖의 무수 트리에틸아민을 동시 첨가했다. 상기 용액을 3.5시간 동안 50℃에서 교반시켰다. 실온으로의 냉각 후, 반응을 메톡시트리메틸실란(10㎖, 72.4mmol)으로 켄칭하고, 실온에서 추가로 교반하여, 모든 과량의 HF를 소비했다. 30분 후, 모든 휘발물 성분들을 감압하에 증발시킨 후, 50㎖의 무수 톨루엔으로 감압하에 최종 공동-증발시켰다. 잔류물을 진공에서 추가로 건조시켜, 실시예 1.1과 실시예 1.2를 함유하는 원 혼합물(raw mixture)을 수득했다.

65㎖의 물을 첨가하여, 생성되는 현탁액을 실온에서 초음파욕에 배치했다. 15분 후, 상기 현탁액을 60㎖의 클로로포름에 붓고, 유기상을 분리했다. 이러한 추출을 클로로포름으로 또 다른 2회 반복했다. 합쳐진 유기상을 50㎖의 물로 추출하고, 합쳐진 생성물 함유 수성상을 0.45㎛ Rotilabo®-CME-syringe 필터(외부 직경: 33mm)로 여과하여 미립자 성분을 제거했다. 생성물 용액을 물로 500㎖로 희석하여, 2M 염화나트륨으로 미리 재생되고 물로 세척된 Q Sepharose™ Fast Flow 음이온 교환 컬럼(40 내지 165㎛; 125 x 35mm; ~120㎖) Cl^--형태에 가했다. 컬럼을 물로 세척한 뒤(2 컬럼 용적), 25 컬럼 용적에 걸쳐 물 중 0 내지 1M의 중탄산트리에틸암모늄 완충액(TEAB, pH 7)의 농도 구배가 따랐다(검출 파장 254nm). 실시예 1.1 및 실시예 1.2를 ~0.6M TEAB로 이성질체들의 혼합물로서 용리했다. 생성물 함유 분획들을 약 10㎖의 최종 용적으로 감압하에 조십스럽게 농축했다.

반복된 반-예비 역상 HPLC 정제에 의해, 실시예 1.1(네 번째 용리됨)과 실시예 1.2(세 번째 용리됨)의 분리를 완수했다. 생성물 용액을, 4% 아세토니트릴, 물 중 20 mM 트리에틸암모늄 포르메이트(TEAF, pH 6.8)로 미리 평형화된 YMC*GEL ODS-A 12nm 컬럼(10㎛; 250 x 16mm; ~50㎖)에 가했다. 4%, 6% 및 20% 아세토니트릴, 물 중 20 mM TEAF(pH 6.8)의 단계-용매 구배로 용리를 실시했다.

나트륨 염인 실시예 1.1("네 번째로 용리되는 부분 입체 이성질체")의 제조

TEA-salt인 실시예 1.1의 탈염을, 예비 역상 중간압 액체 크로마토그래피(MPLC)로 실시했다. 생성물 용액(~40㎖)을, 물로 미리 평형화된 Merck LiChroprep®RP-18 컬럼(15 내지 25㎛; 450 x 25mm; ~220㎖)에 다했다. 상기 컬럼을 물로 세척하여, 과량의 TEAF 완충액을 제거했다. 이후, 물 중 2% 2-프로판올을 사용하여 탈염된 실시예 1.1을 용리했다. 생성물 함유 분획들을 감압하에 부분 농축시키고, 2M 염화나트륨으로 미리 재생되로 물로 세척된 SP Sepharose™ Fast Flow 양이온 교환 컬럼(45 내지 165㎛; 125 x 35mm; ~120mL) Na⁺-형태에 후속적으로 가했다. 상기 컬럼을, UV-흡광이 더 이상 검출되지 않을 때까지 물로 세척했다(검출 파장 254nm). 생성물 함유 분획들을 감압하에 조심스럽게 증발시키고, 추가로 진공에서 건조시켜, 실시예 1.1을 이나트륨 염으로서 수득했다.

HPLC(위치배열 A): t_Ret = 8.56분;

ESI-MS: 692 [M+H]⁺

나트륨 염인 실시예 1.2("세 번째로 용리되는 부분 입체 이성질체")의 제조

TEA로부터 TEA 염인 실시예 1.2로의 탈염 및 염 변경을, TEA 염인 실시예 1.1에 대해 개시된 것과 유사한 방식으로 실시했다.

HPLC(위치배열 A): t_Ret = 7.75분;

ESI-MS: 692 [M+H]⁺

(NMR)

실시예 2.1 및 실시예 2.2

사이클릭 ( 이미다조피리다지논 -β-D- 리보푸라노사이드 -(2'→5')- 포스포로티오에이트 -2'-F-2'-데옥시아데노신-(3'→5')-포스포로티오에이트

16mg(19㎛ol)의 중간체 2.4-d를 1㎖의 무수 피리딘 및 4㎖의 무수 아세토니트릴에 첨가하고, 용매를 진공에서 공비 증발시켰다. 잔류물을 10mL의 무수 아세토니트릴에 2회 재현탁시키고, 진공에서 다시 공비 증발시켰다. 80.7㎕(1.0mmol)의 무수 피리딘 및 168㎕(1.2㎛ol)의 TEA를 상기 잔류물에 첨가한 뒤, 103㎕(0.63mmol)의 TEA*3HF를 시린지를 통해 연속 첨가했다. 생성되는 혼합물을 90분간 50℃에서 교반시켰다. 실온으로 냉각 후, 반응을, 20㎖의 탄산트리에틸암모늄 수용액(농도 = 1mol/L)을 첨가하여 켄칭시켰다. 생성되는 혼합물을 추가로 15분간 실온에서 교반시켰다. 상기 혼합물을 Water Sep Pak C18 ⓒ 카트리지(5g의 C18-물질, 먼저 25㎖의 아세토니트릴로 그리고 이후에 25㎖ 물로 예비컨디셔닝됨)에 조심스럽게 로드하고, 60㎖의 물로 세척했다. 이후, 생성물을, 100mL의 아세토니트릴/트리에틸암모늄 아세테이트/물 혼합물(1mL의 트리에틸암모늄 아세테이트 수용액(농도 = 1 mol/L)을 100㎖의 물 및 25㎖의 아세토니트릴에 첨가하여 제조됨)을 사용하여 상기 카트리지로부터 용리했다. 생성물을 함유하는 분획들을 합치고, 용매를 동결 건조에 의해 제거했다. 생성되는 생성물을 예비 HPLC(Atlantis C18; 20mM aq. NH4OAc/아세토니트릴 = 98/2 → 80/20)에 의해 추가로 정제했다. 동결 건조에 의해 용매를 제거한 뒤, 생성물을 2㎖의 물에 용해시키고, Bio-Rad Spin 컬럼(250mg의 BT AG 50W-2 수지 100 내지 200Mesh 수소 형태로 충전되고, 3mL의 1m 수성 NaOH로 컨디셔닝된 후, 6㎖의 물로 세척하여, pH ~7로 한다)에 붓고, 12mL의 물로 용리시켰다. 최종 생성물을 함유하는 분획들을 합치고, 용매를 동결 건조에 의해 제거했다.

실시예 2.1:

LC-MS(시스템 C):

t_Ret = 0.61분; ESI-MS: 694 [M+H]+

실시예 2.2

출발 물질로서 중간체 2.4-c를 사용하여, 실시예 2.2를 실시예 2.1과 유사하게 제조했다.

LC-MS(시스템 C):

t_Ret = 0.30분; ESI-MS: 694 [M+H]⁺

실시예 3.1 및 실시예 3.2

사이클릭 (이미다조피리다지논-β-D-리보푸라노사이드-(2'→5')-포스포로티오에이트-LNA-아데닌-(3'→5')-포스포로티오에이트), 나트륨 염

출발 물질로서 각각 중간체 3.4-d(실시예 3-1의 경우) 및 3.4-c(실시예 3-2의 경우)를 사용하여, 실시예 3.1 및 3.2를 실시예 2.1 및 2.2과 유사하게 제조했다.

실시예 3.1:

LC-MS(시스템 E):

t_Ret = 0.37분; ESI-MS: 704 [M+H]+

실시예 3.2:

LC-MS(시스템 E):

t_Ret = 0.29분; ESI-MS: 704 [M+H]⁺

실시예 4.1 및 실시예 4.2

사이클릭 (이미다조피리다지논- -D-리보푸라노사이드-(2'→5')-포스포로티오에이트-퓨린-β-D 리보푸라노사이드-(3'→5')-포스포로티오에이트), 나트륨 염

출발 물질로서 중간체 4.4-d 및 중간체 4.4-c를 사용하여, 실시예 4.1 및 4.2를 실시예 1.1 및 1.2와 유사하게 제조했다. 실시예 1.1 및 1.2에 대해 개시된 절차 이외에, 반응의 출발 전에, 상기 출발 물질을 무수 피리딘과 무수 트리에틸아민의 2:1 혼합물을 사용하여 1회 공비시켰다.

실시예 4.1:

HPLC(위치배열 B): t_Ret = 10.22분;

ESI-MS: 677 [M+H]+

실시예 4.2:

HPLC(위치배열 B): t_Ret = 5.50분;

ESI-MS: 677 [M+H]⁺

Claims (18)

1. 화학식 I의 화합물, 이의 용매화물, 이의 수화물, 이의 입체이성질체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
   [화학식 I]
   

   

   
   상기 화학식 I에서,
   R¹은, H, F, 및 OH로 이루어지는 그룹으로부터 선택되고,
   R²는 H이거나;
   R²는 -CH₂-이고 R¹은 -O-이며, 이들은 함께 -CH₂-O- 브릿지(bridge)를 형성하고,
   R³은, 퓨린 및 아데닌으로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 퓨린 핵염기이고, 이의 N⁹ 질소를 통해 연결된다.
2. 제1항에 있어서, 화학식 Ia의 화합물인, 화합물, 이의 용매화물, 이의 수화물, 이의 입체이성질체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
   [화학식 Ia]
   

   

   
   상기 화학식 Ia에서,
   R¹ 및 R²는 제1항에서 정의된 바와 같다.
3. 제1항에 있어서, 화학식 Ib의 화합물인, 화합물, 이의 용매화물, 이의 수화물, 이의 입체이성질체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
   [화학식 Ib]
   

   

   
   상기 화학식 Ib에서,
   R¹ 및 R²는 제1항에서 정의된 바와 같다.
4. 제2항에 있어서, 화학식 Ia.1의 화합물인, 화합물, 이의 용매화물, 이의 수화물, 또는 이의 입체이성질체.
   [화학식 Ia.1]
   

   
5. 제2항에 있어서, 화학식 Ia.2의 화합물인, 화합물, 이의 용매화물, 이의 수화물, 또는 이의 입체이성질체.
   [화학식 Ia.2]
   

   
6. 제2항에 있어서, 화학식 Ia.3의 화합물인, 화합물, 이의 용매화물, 이의 수화물, 또는 이의 입체이성질체.
   [화학식 Ia.3]
   

   
7. 제3항에 있어서, 화학식 Ib.1의 화합물인, 화합물, 이의 용매화물, 이의 수화물, 또는 이의 입체이성질체.
   [화학식 Ib.1]
   

   
8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 기재된 화합물의 (Sp,Sp), (Rp,Rp), (Sp,Rp), 또는 (Rp,Sp) 입체이성질체.
9. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 기재된 화합물의 (Rp,Rp) 입체이성질체.
10. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 기재된 화합물의 약제학적으로 허용되는 염.
11. 제4항 내지 제7항 중 어느 한 항에 기재된 화합물의 나트륨 염.
12. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 기재된 하나 이상의 화합물 또는 이의 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 염을, 임의로 하나 이상의 불활성 담체, 희석제또는 이들의 조합과 함께 포함하는, 염증, 알레르기성 질환, 자가면역성 질환, 감염성 질환 및 암으로부터 선택되는 질환 또는 병태의 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물.
13. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는, 염증, 알레르기성 질환, 자가면역성 질환, 감염성 질환 및 암으로부터 선택되는 질환 또는 병태의 치료에 사용하기 위한 백신.
14. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 백신 애주번트(adjuvant)로서 사용되는 화합물.
15. 의약으로서 사용하기 위한, 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
16. 염증, 알레르기성 질환, 자가면역성 질환, 감염성 질환 및 암으로부터 선택되는 질환 또는 병태의 치료에 사용하기 위한, 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
17. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 기재된 하나 이상의 화합물 또는 이의 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 추가의 치료학적 제제를, 임의로 하나 이상의 불활성 담체, 희석제 또는 이들의 조합과 함께 포함하는, 염증, 알레르기성 질환, 자가면역성 질환, 감염성 질환 및 암으로부터 선택되는 질환 또는 병태의 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물.
18. 제17항에 있어서, 상기 화합물 중의 하나 및 하나 이상의 추가의 치료학적 제제를 포함하는, 약제학적 조성물.