KR101411758B1 - 프로스태글란딘 지방 에멀젼, 이의 제조 방법, 그 에멀젼의안정화 방법 및 에멀젼화제 - Google Patents

프로스태글란딘 지방 에멀젼, 이의 제조 방법, 그 에멀젼의안정화 방법 및 에멀젼화제 Download PDF

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Abstract

프로스태글란딘을 유효 성분으로 하는 지방 에멀젼은 포스파티딜콜린(PC) 및 포스파티딜글리세롤(PG)를 포함하는 인지질을 함유하고, 상기 인지질 중의 PC와 PG의 비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 이다.
프로스태글란딘, 에멀젼, 포스파티딜콜린, 포스파티딜글리세롤

Description

프로스태글란딘 지방 에멀젼, 이의 제조 방법, 그 에멀젼의 안정화 방법 및 에멀젼화제 {Prostaglandin fat emulsion, method for producing the same, method for stabilizing the same, and emulsifying agent}
본 발명은 유효 성분의 안정성 및 에멀젼화 안정성이 뛰어난 프로스태글란딘(prostaglandin) 지방 에멀젼, 이의 제조 방법, 그 에멀젼의 안정화 방법, 및 상기 안정화 방법에 사용되는 에멀젼화제에 관한 것이다.
프로스태글란딘은 이중 결합을 3-5개 가지는 필수 지방산으로부터 합성되는 생리 활성 물질이며, 염증·통증·붓기의 조정, 혈압 기능·심(心)기능·위장 기능의 조정, 소화 효소의 분비 조정, 신장 기능 조절, 혈액 응고, 혈소판 응집, 알레르기 반응, 신경 전달, 각종 호르몬의 생산 등에 관여하고 있다.
프로스태글란딘 E1(PGE1) 제제(製劑)의 한 형태로서, 정맥주사용의 지방 에멀젼이 개발되고(예를 들면, 특공평 1-57094호 공보, 특공평 1-57096호 공보, 특개 2001-10958호 공보 참조), 시판되고 있는 것도 있다.
그렇지만, 현재 시판되고 있는 PGE1 지방 에멀젼은 저온(예를 들면, 5℃ 이하)에서 차광하여 보존하지 않으면 안 되고, 또, 저온에서 보존했다고 해도 품질 보증 기간이 짧다(예를 들면, 5℃×1년간). 그 이유로서는, 유효 성분인 PGE1가 화학적으로 불안정하다는 것을 들 수 있다. 예를 들면, PGE1 지방 에멀젼은, 보존시에 동결하지 않도록 유의할 필요가 있기 때문에, 5℃로 보존하는 경우, 엄밀한 온도 관리가 필요하다. 이와 같이, 현재 시판되고 있는 PGE1 지방 에멀젼은, 엄밀한 온도 관리하에서 보존할 필요가 있어서, 보존 중의 품질관리가 어렵다. 거기서, PGE1의 안정성을 높이는 검토가 다양하게 되어 왔지만(예를 들면, 특공평 8-18989호 공보, 특개평 4-338333호 공보 참조), 그 효과는 충분한 것이라고는 말하기 어려웠다. 또, 지방 에멀젼의 안정성을 높이기 위한 검토에 대해서도 행해지고 있지만(예를 들면, 특표 2005-500366호 공보, WO2004/52354호 공보 참조), 프로스태글란딘 지방 에멀젼에 대한 기재는 전혀 없었다.
이러한 상황 하에서, 유효 성분(프로스태글란딘)의 안정성 및 에멀젼화 안정성이 뛰어난 프로스태글란딘 지방 에멀젼의 개발이 요구되고 있다.
본 발명은 유효 성분의 안정성 및 에멀젼화 안정성이 뛰어난, 프로스태글란딘을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼, 이의 제조 방법, 및 그 에멀젼의 안정화 방법 및 상기 안정화 방법에 사용되는 에멀젼화제를 제공한다.
본 발명의 하나의 태양에 관련되는 프로스태글란딘을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼은, 포스파티딜콜린(PC) 및 포스파티딜글리세롤(PG)를 포함하는 인지질을 함유하고, 상기 인지질 중의 PC와 PG의 비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 이다.
상기 지방 에멀젼에 있어서, PC:PG가 95:5~99.7:0.3일 수 있다. 이 경우, PC:PG가 97:3~99.5:0.5일 수 있다.
상기 지방 에멀젼에 있어서, 포스파티딜에탄올아민(PE)을 실질적으로 함유하지 않을 수 있다.
상기 지방 에멀젼에 있어서, PG의 지방산 잔기 중에, 직쇄상의 탄소수 12-18개의 포화 또는 불포화 지방산 잔기가 포함될 수 있다.
상기 지방 에멀젼에 있어서, PG가 난황 유래일 수 있다.
상기 지방 에멀젼에 있어서, 유리(遊離) 고급 지방산 또는 그 염을 실질적으로 함유하지 않을 수 있다.
상기 지방 에멀젼에 있어서, 유리 올레인산을 실질적으로 함유하지 않을 수 있다.
상기 지방 에멀젼에 있어서, 상기 인지질 1 질량부에 대해서, 0.015 질량부 이하의 유리 고급 지방산 또는 그 염을 추가로 함유할 수 있다. 또, 상기 지방 에멀젼에 있어서, 상기 인지질 1 질량부에 대해서, 0.15 질량부 이하의 유리 고급 지방산 또는 그 염을 함유할 수 있다. 이 경우, 상기 유리 고급 지방산이 유리 올레인산일 수 있다.
상기 지방 에멀젼에 있어서, 상기 인지질 중의 PC의 함유량 및 PG의 함유량의 합계가 95% 이상일 수 있다.
상기 지방 에멀젼에 있어서, 정맥내 주사용일 수 있다.
상기 지방 에멀젼에 있어서, 프로스태글란딘이 프로스태글란딘 E1 또는 그 유도체일 수 있다.
상기 지방 에멀젼에 있어서, 프로스태글란딘이 프로스태글란딘 E1일 수 있다.
이 경우, 평균 입자경이 300 nm 이하이며, 또, 40℃에서 7일간 보존한 후의 프로스태글란딘 E1의 잔존율이 70% 이상일 수 있다.
또, 이 경우, 평균 입자경이 300 nm 이하이며, 또, 40℃에서 7일간 보존한 후의 프로스태글란딘 E1의 잔존율이 80% 이상일 수 있다.
또, 이 경우, 평균 입자경이 300 nm 이하이며, 또, 40℃에서 7일간 보존한 후의 프로스태글란딘 E1의 잔존율이 85% 이상일 수 있다.
또, 이 경우, 평균 입자경이 300 nm 이하이며, 또, 20℃에서 2개월 보존한 후의 프로스태글란딘 E1의 잔존율이 80% 이상일 수 있다.
또, 이 경우, 평균 입자경이 300 nm 이하이며, 또, 5℃에서 1년간 보존한 후의 프로스태글란딘 E1의 잔존율이 80% 이상일 수 있다.
본 발명의 하나의 태양에 관련되는 지방 에멀젼의 제조 방법은
포스파티딜콜린(PC) 및 포스파티딜글리세롤(PG)를 포함하는 인지질을 함유하고, 상기 인지질 중의 PC와 PG의 비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 인, 프로스태글란딘을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼을 조제하는 공정을 포함한다.
상기 지방 에멀젼의 제조 방법에서는, 상기 조정하는 공정에 있어서, 상기 지방 에멀젼의 pH를 4~7로 조정할 수 있다.
상기 지방 에멀젼의 제조 방법에서는, 상기 조정하는 공정에 있어서, 상기 지방 에멀젼의 pH를 4.5~6.5로 조정할 수 있다.
본 발명의 하나의 태양에 관련되는 프로스태글란딘의 안정화 방법은 프로스태글란딘을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼에 있어서, PC:PG가 85:15~99.7:0.3 이며, 또, PE를 실질적으로 함유하지 않는 에멀젼화제를 사용하는 것을 포함한다.
본 발명의 하나의 태양에 관련되는 지방 입자의 안정화 방법은 프로스태글란딘을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼에 있어서, PC:PG가 85:15~99.7:0.3 이며, 또, PE를 실질적으로 함유하지 않는 에멀젼화제를 사용하는 것을 포함한다.
본 발명의 하나의 태양에 관련되는 에멀젼화제는 PC:PG가 85:15~99.7:0.3 이며, 또, PE를 실질적으로 함유하지 않는 인지질로부터 이루어진, 프로스태글란딘을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼에 이용한다.
상기 지방 에멀젼에 의하면, 포스파티딜콜린(PC) 및 포스파티딜글리세롤(PG)를 포함하는 인지질을 함유하고, 상기 인지질 중의 PC와 PG의 비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 인 것에 따라, 유효 성분(프로스태글란딘)의 안정성 및 에멀젼화 안정성의 양쪽 모두가 뛰어나다. 이 때문에, 시판의 프로스태글란딘 지방 에멀젼과 비교하여, 보존 기간의 연장 및/또는 보존 온도 범위의 확대가 가능하다. 예를 들면, 후술하는 실시예의 결과로부터, PGE1 지방 에멀젼의 품질 보증 기간(5℃×1년)을 2년 정도로 연장하거나 보존 온도 범위를 10℃ 정도로 확대할 수 있을 가능성이 있다. 이것에 의해, 보존 중의 품질관리가 보다 용이하다. 또, 상기 지방 에멀젼에 의하면, 종래 기술과 동일하게, 지방 입자의 입자경이 작고, 균일하다 것에 따라, 병변 부위에 효율적으로 약제를 집적할 수 있기 때문에, 소량에서도 뛰어난 유효성을 발휘할 수 있다.
발명을 실시하기 위한 최선의 형태
이하, 본 발명의 일실시 형태와 관련되는 프로스태글란딘을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼(이하, 「프로스태글란딘 지방 에멀젼」또는 단지 「지방 에멀젼」라고도 말한다) 및 그 제조 방법, 및 그 에멀젼의 안정화 방법 및 상기 안정화 방법에 사용되는 에멀젼화제에 대해 설명한다. 또, 본 실시 형태에 대해, 「%」는 「질량%」를, 「부」는 「질량부」를 의미한다.
1. 지방 에멀젼
본 실시 형태와 관련되는 프로스태글란딘 지방 에멀젼은, 프로스태글란딘(유효 성분), 인지질(에멀젼화제), 유기재(油基材), 및 물을 포함한 에멀젼화물(수중유형 에멀젼)이다. 즉, 본 실시 형태와 관련되는 프로스태글란딘 지방 에멀젼은 지방 입자가 수중에 분산된 에멀젼화물이며, 상기 지방 입자에 있어서는, 인지질을 포함한 막의 내측에 프로스태글란딘 및 유기재가 주로 포함되어 있다.
본 실시 형태와 관련되는 프로스태글란딘 지방 에멀젼에 있어서의 각 성분의 함유량은, 프로스태글란딘이 0.2~100 μg/ mL, 유기재가 지방 에멀젼의 전량에 대해서 5~50% 이며, 또, 인지질이 유기재에 대해 1~50% 이다.
또, 본 실시 형태와 관련되는 프로스태글란딘 지방 에멀젼은, 필요에 따라서, 고급 지방산, 등장화제, 항산화제, pH 조정제를 추가로 함유할 수 있다.
게다가, 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼의 pH는 4~7인 것이 바람직하고, pH가 4.5~6.5인 것이 보다 바람직하다. 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 있어서, pH가 4 미만이면, 에멀젼화 안정성이 저하하는 일이 있고, 한편, pH가 7을 넘으면, 유효 성분의 안정성이 저하하는 일이 있다.
이하, 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼을 구성하는 각 성분에 대해 설명한다.
1.1. 프로스태글란딘
프로스태글란딘은, 프로스탄산(prostanoic acid)을 기본 골격으로서 가지는 화합물의 총칭이며, 그 환구조에 의해, A, B, C, D, E, F, G, H, I 등으로 분류되고 있다. 상술한 것처럼, 프로스태글란딘은 생리 활성 물질이며, 예를 들면, 평활근 자극, 염증, 알레르기, 세포의 분비·응집·유주(遊走), 세포 증식, 신경 전달 등에 있어서 세포 정보 전달 물질로서 기능한다. 보다 구체적으로는, 프로스태글란딘은 그 종류에 의해, 자궁관계 및 적출 소장 등의 평활근 수축 작용, 강압 작용, 승압 작용, 항지방분해작용, 위액 분비의 저지 작용, 중추 신경계에의 작용, 혈소판 점착성의 감소 작용, 혈소판 응집 억제 작용, 혈전 작성 저지 작용, 표피 증식 작용, 각질화 자극 작용 등의 생리학적 작용을 가진다.
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 포함되는 프로스태글란딘으로서는, PGA1, PGB1, PGD2, PGE1, PGE2, PGF1α, PGF2α, PGI2 및 이의 유도체를 들 수 있고, PGE1 및 그 유도체인 것이 바람직하다. 여기서, 유도체로서는 알킬 에스테르가 매우 적합하다(예를 들면, 특허 제 2602964호 참조).
그 중에서, PGE1는 예를 들면, 혈관 확장, 혈압 강하, 신혈유량 증대, 나트륨 이뇨, 레닌 분비 촉진, 에리트로포이에틴(erythropoietin) 분비 촉진, 혈소판 응집 저해, 기관지 확장, 자궁 수축, 장관 운동 항진, 위·장의 종주근 수축, 위·장의 윤상근 이완, 위산 분비 억제, 위점막 보호 작용, 면역 억제 작용, 말초 교감신경 종말로부터의 노르에피네프린(norepinephrine) 유리 억제 등의 작용을 가진다. 따라서, 본 실시 형태와 관련되는 PGE1를 함유하는 지방 에멀젼은 예를 들면, 만성 동맥 폐색증에 있어서의 사지 궤양 및 안정시 동통(疼痛)의 개선, 진행성 전신성 경화증 및 전신성 에리테마토서스(erythematosus)에 있어서의 피부 궤양의 개선, 당뇨병에 있어서의 피부 궤양의 개선, 진동병(振動病)에 있어서의 말초 혈행 장해에 수반하는 자각 증상의 개선 및 말초 순환·신경·운동 기능 장해의 회복, 동맥관 의존성 선천성 심질환에 있어서의 동맥관의 개존(開存) 및 경상(經上) 장간막 동맥성 문맥 조영(造影)에 있어서의 조영능의 개선에 이용할 수 있다.
1.2. 인지질
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에서 사용되는 인지질은 포스파티딜콜린(PC) 및 포스파티딜글리세롤(PG)를 포함한다. 또, 인지질은, 예를 들면, 나트륨염, 칼륨염, 암모늄염 등의 약학적으로 허용할 수 있는 염일 수 있다.
PC로서는, 난황 레시틴, 대두 레시틴, 또는 공지의 방법으로 합성, 반합성에 의해 수득한 레시틴 등을 들 수 있다. 그 중에서, 난황 레시틴이 바람직하고, 인지질 함량을 높일 수 있는 정제 난황 레시틴, 또, PE를 실질적으로 함유하지 않는 고도(高度) 정제 난황 레시틴이 바람직하다.
더욱이, 정제 난황 레시틴은 의약품 첨가물 규격에, 그리고 고도 정제 난황 레시틴은 의약품 첨가물 사전(일본 의약품 첨가제 협회편)에 준한다. 정제 난황 레시틴 중에는, 통상 12~18% 정도의 PE가 포함된다.
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼은 PE를 실질적으로 함유하지 않는 것이 바람직하다. PE를 실질적으로 함유하지 않는 지방 에멀젼은, 고도 정제 난황 레시틴, 또는 합성, 반합성에 의해 수득한 레시틴을 인지질로서 사용하는 것으로써 제조할 수 있다.
인지질이 PE를 실질적으로 함유하지 않는 것은, 예를 들면, 이하의 방법에 의해 확인할 수 있다. 즉, 인지질을 10%(w/v)가 되도록, 클로로포름·메탄올 혼합 용액에 용해시킨 용액을, 실리카겔 박층 판의 하단부에 10μL 충전한다. 이 박층판을 전개(展開) 용제(클로로포름:메탄올:물=65:25:4)를 이용해 전개하고, 건조시킨다. 그 후, 닌히드린(ninhydrin) 시약을 분무하고, 120℃으로 약 10분간 가열했을 때, 똑같이 충전한 PE 표준액으로 검출되는 스폿(spot)의 부위에 발색을 인정하지 않는 경우, 인지질이 PE를 실질적으로 함유하지 않는 것으로 판정한다.
PG는, 화학 합성에 의해 제조된 것이어도 괜찮고, 식물 또는 세균으로부터 추출된 것이어도 괜찮고, 또는, 공지의 방법(생화학 실험 강좌3 지질의 화학, 294-295페이지, 토쿄 화학 동인, 1974년)에 따라, 대두나 난황 유래의 레시틴을 원료로서 글리세롤의 존재하에서 포스포리파제(phospholipase) D를 작용시키는 것으로 조제된 것이어도 괜찮다.
PG의 지방산 잔기에는, 일반적으로, 직쇄상 또는 분기상의 탄소수 12-22개의 포화 또는 불포화 지방산 잔기가 존재하지만, 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 대해서는, PG의 지방산 잔기 중에, 직쇄상의 탄소수 12-18개의 포화 또는 불포화 지방산 잔기가 포함되는 것이 바람직하고, 직쇄상의 탄소수 16-18개의 포화 또는 불포화 지방산 잔기가 포함되는 것이 보다 바람직하다.
상기 범위의 탄소수를 가지는 지방산 잔기를 포함한 PG를 사용하는 것으로써, 특히, 난황 레시틴 유래의 PC를 사용하는 경우, PC의 지방산의 사슬 길이와 PG의 지방산의 사슬 길이가 동일한 정도가 되어, 보다 안정화된 지방 에멀젼을 얻을 수 있다고 추측된다.
화학 합성의 PG는 예를 들면, 디팔미틸포스파티딜글리세롤, 디올레오일포스파티딜글리세롤, 디라우로일포스파티딜글리세롤, 디미리스틸포스파티딜글리세롤, 디스테아로일포스파티디글리세롤, 및 팔미틸올레오일포스파티딜글리세롤 중 적어도 1종일 수 있다. 또, 천연 유래의 PG에 있어서는, 유래 물질 특유의 지방산 잔기를 가지는 PG를 이용할 수 있다. 그 중에서, 디팔미틸포스파티딜글리세롤, 대두 레시틴 유래의 PG 또는 난황 레시틴 유래의 PG가 바람직하고, 유효 성분의 안정성의 향상 및 생체 적합성의 면으로부터, 난황 레시틴 유래의 PG가 더욱 바람직하다.
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 있어서는, 인지질 중의 PC와 PG의 비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 이다. PC:PG가 상기 범위에 있는 것에 따라, 유효 성분의 안정성 및 에멀젼화 안정성의 양쪽 모두를 향상시킬 수 있다. PG가 상기 범위를 넘으면, 보존 중의 PGE1의 안정성에 악영향을 미치기 때문에, 바람직하지 않다. 또, PC:PG는 90:10~99.7:0.3인 것이 바람직하고, 95:5~99.7:0.3인 것이 보다 바람직하고, 97:3~99.5:0.5인 것이 더욱 더 바람직하다.
또, 유효 성분의 화학적 안정성을 향상시키는 점에 있어서, 인지질 중의 PC의 함유량 및 PG의 함유량의 합계는 95% 이상인 것이 바람직하고, 98% 이상인 것이 보다 바람직하다.
인지질로서는, 상술의 PC 및 PG 이외의 인지질(예를 들면, 스핀고마이에린(sphingomyelin), 포스파티딜이노시톨, 포스파티딜폴리글리세롤, 포스파티딜에틸렌글리콜, 및 포스파티딜폴리에틸렌글리콜 및 이러한 리조체, 리조 PC, 리조 PG 중의 적어도 1종)을 5% 미만 포함하고 있어도 괜찮다. 또, 천연 유래의 인지질에는, 인지질 이외에, 트리글리세롤, 콜레스테롤 등의 성분을 5% 미만 포함하고 있어도 괜찮다.
1.3. 유기재(油基材)
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 사용되는 유기재로서는, 예를 들면, 콩기름, 참기름, 유채씨유, 사플라워유(safflower oil), 올리브유, 피마자유, 옥수수 오일, 면실유, 미유(米油), 해바라기유, 그레이프 배정유, 밀배아유 등의 식물유나, 중쇄 지방산 트리글리세리드(MCT)를 들 수 있다. 식물유는 정제 식물유인 것이 바람직하다.
1.4. 고급 지방산
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 있어서, 유리 고급 지방산은 에멀젼화 보조제로서의 기능을 가진다. 즉, 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 있어서, 유리 고급 지방산을 함유하는 것으로써, 에멀젼화 안정성을 높일 수 있다. 본 발명에 있어서, 「유리 고급 지방산」이란, 카르본산을 말하고, 「유리 고급 지방산의 염」이란, 유리 고급 지방산의 약학적으로 허용할 수 있는 염(예를 들면, 나트륨염, 칼륨염 등의 알칼리 금속염, 칼슘염 등의 알칼리 토류 금속염)의 형태의 고급 지방산을 말한다. 「유리 고급 지방산 또는 그 염」에는, 유기재인 식물유나 인지질을 구성하는 지방산 에스테르의 형태의 것을 포함하지 않는다. 또, 여기서, 함유되는 유리 고급 지방산은 유기재인 식물유나 인지질에 포함되는 유리 고급 지방산을 포함하지 않는다.
고급 지방산은 직쇄상 또는 분기상의 탄소수 6-22개(바람직하게는 12-20개)의 포화 또는 불포화 지방산이다. 고급 지방산으로서는, 예를 들면, 올레인산, 스테아린산, 리놀산, 팔미틴산, 리놀렌산, 미리스틴산을 들 수 있고, 올레인산이 바람직하다.
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼은 유효 성분의 안정성 및 에멀젼화 안정성이 뛰어나기 때문에, 유리의 고급 지방산 또는 그 염(예를 들면, 유리 올레인산)이 실질적으로 함유되어 있지 않아도 좋다. 고급 지방산 또는 그 염을 함유하는 경우, 인지질 1부에 대해서 0.15부 이하인 것이 바람직하고, 0.015부 이하인 것이 보다 바람직하다. 고급 지방산의 함유량이 인지질 1부에 대해서 0.15부를 넘으면, 유효 성분의 안정성이 저하하는 경우가 있다. 고급 지방산의 함유량이 인지질 1부에 대해서 0.015부 이하인 경우, 유효 성분의 안정성을 유지하면서, 뛰어난 에멀젼화 안정성을 얻을 수 있다. 또, 「유리 고급 지방산을 실질적으로 함유하지 않는다」란, 어디까지나 배합 목적으로 첨가되는 것이 없는 것을 말하고, 예를 들면, 유기재인 식물유 또는 인지질의 분해에 의해 생긴 유리 고급 지방산이나, 의도하지 않는 혼입에 의해 함유되는 유리 고급 지방산을 제외한 것으로 한다.
지방 에멀젼이 유리 올레인산을 실질적으로 함유하지 않는 것은, 예를 들면, 이하의 방법에 의해 확인할 수 있다.
지방 에멀젼 1 mL에 대해, 에탄올 1 mL, 디에틸 에테르 0.5 mL, 및 석유 에테르 0.5 mL를 더해서 교반한다. 이것을 원심분리한 상층을 채취하고, 질소에 의해 용매를 유거(留去)한다. 수득한 유상 성분을 10%(w/)가 되도록 용해한 클로로포름·메탄올 혼합 용액 2μL를, 실리카겔 박층 판의 하단부에 충전한다. 이 박층판을 전개 용제(클로로포름:메탄올:물=65:25:4)를 이용해 전개하고, 건조시킨다. 그 후, 50%(w/w) 황산을 분무하고, 약 120℃으로 30분간 가열한 후, 똑같이 충전한 올레인산 표준액으로 검출되는 스폿의 부위에 발색을 인정하지 않는 경우, 지방 에멀젼이 유리 올레인산을 실질적으로 함유하지 않는 것으로 판정한다.
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼이, PE 및/또는 유리의 고급 지방산(예를 들면, 유리 올레인산)을 실질적으로 함유하지 않는 것에 의해, 상기 지방 에멀젼에 포함되는 성분의 수를 줄일 수가 있어서 유효 성분의 안정성을 보다 높일 수 있다.
1.5. 그 외의 성분
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에서는 필요에 따라서, 등장화제(예를 들면, 글리세린, 포도당, 염화나트륨), 항산화제(예를 들면, 아스코르빈산 및 그 염, 벤조산, 구연산 및 그 염, 디부틸 히드록시 아니솔, 디부틸 히드록시 톨루엔,α-토코페롤, D-소르비톨), pH 조정제(수산화나트륨, 염산, 각종 인산염)를 함유하고 있어도 괜찮다.
1.6. 제조 방법
본 발명의 일실시 형태와 관련되는 프로스태글란딘 지방 에멀젼의 제조 방법은 포스파티딜콜린(PC) 및 포스파티딜글리세롤(PG)를 포함하는 인지질을 함유 해, PC:PG가 85:15~99.7:0.3, 바람직하게는 90:10~99.7:0.3, 보다 바람직하게는 95:5~99.7:0.3, 더욱 바람직하게는 97:3~99.5:0.5인 인지질을 배합하여 지방 에멀젼을 조제하는 공정을 포함한다. 상기 지방 에멀젼을 조제하는 공정은, 보다 구체적으로는, 프로스태글란딘(유효 성분), 상기 인지질(에멀젼화제), 유기재, 및 물을 에멀젼화시키는 공정을 포함한다.
PC와 PG의 배합 방법으로서는, PC와 PG를 유기재 또는 물에 혼합 및 균질화해 두고, 거기에 물 또는 유기재를 더하여 에멀젼을 조제하면 좋고, 유기재 중에서 균질화하는 것이 바람직하다.
예를 들면, 소정량의 유기재(예를 들면, 콩기름)에, 인지질(PC 및 PG), 프로스태글란딘(예를 들면, PGE1), 및 그 외의 첨가제(예를 들면, 글리세린) 등을 상용의 호모저나이저(homogenizer)에서 혼합 및 균질화해, 그 다음에, 이것에 필요량의 물을 더한 후, 상기 호모저나이저로 다시 균질화를 실시하여 수중유형 에멀젼로 변환하는 것으로, 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼을 제조할 수 있다.
PC와 PG는 별도로 배합해도, 동시에 배합해도 괜찮다. 또, PC의 일부를 효소 반응에 의해 PG 으로 하고, 이것을 사용해도 좋고, PC 또는 PG의 정제 공정 중에, PG 또는 PC를 함유하는 미정제 정제물이나 이러한 정제품 등을 첨가하고, PC:PG가 85:15~99.7:0.3의 비율이 되도록 혼합한 것으로부터 정제하여 수득한 인지질을 사용해도 괜찮다. 난황 유래의 PC와 PG를 사용하는 경우, 난황 중의 PC를 효소 반응에 의해 Pg 으로 하고, PC와 PG가 85:15~99.7:0.3의 비율이 되도록 난황액을 혼합한 후, 인지질의 정제를 실시하고, 이것을 사용해도 괜찮다.
제조상의 형편에 따라서는, 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 안정화제, 등장화제, pH 조정제 등의 첨가제를 더해도 괜찮다. 또, 수득한 지방 에멀젼에 여과 처리, 가열 처리(고온 가열 처리 등)를 추가 실시해도 괜찮다.
또, 본 실시 형태와 관련되는 프로스태글란딘 지방 에멀젼의 제조 방법에 있어서, pH를 바람직하게는 4~7(보다 바람직하게는 4.5~6.5)로 조정하는 공정을 포함할 수 있다. 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 있어서, pH가 4 미만이면, 에멀젼화 안정성이 저하하는 일이 있고, 한편, pH가 7을 넘으면, 유효 성분의 안정성이 저하하는 일이 있다.
게다가, 본 발명의 일실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼의 제조 방법은 상기 지방 에멀젼의 pH를 4~7로 조정한 후, 상기 지방 에멀젼을 기밀(氣密) 또는 밀봉 용기에 넣고, 소정 온도에서 고온 가열 처리를 소정 시간 실시하는 공정을 추가로더 포함할 수 있다. 상기 고온 가열 처리에 의해, 유효 성분(프로스태글란딘)의 분해를 억제하면서, 상기 지방 에멀젼의 멸균을 실시할 수 있다. 여기서, 상기 고온 가열 처리는 고압 증기 가열 멸균 처리 또는 스프레이식 가열 멸균 처리인 것이 바람직하다.
상기 고압 증기 가열 멸균 처리 또는 스프레이식 가열 멸균 처리의 온도 및 시간은 각각, 110~140℃ 및 0.5~30분간인 것이 바람직하다. 예를 들면, 상기 고압 증기 가열 처리를 127℃에서 1분간 상당 실시할 수 있다. 127℃, 1분간 상당이라고 하는 것은, F0 치로 환산하면, 약 9~10이 되고, 미생물의 사멸을 목적으로 한 가열 조건의 일례이다.
상기 제조 방법으로 수득한 지방 에멀젼은 에멀젼화 안정성 뿐만 아니라, 유효 성분(프로스태글란딘)의 안정성이 뛰어나다. 예를 들면, 상기 고온 가열 처리 후의 지방 에멀젼은, 상기 고온 가열 처리전의 지방 에멀젼과 비교하여 프로스태글란딘의 잔존율이 70% 이상이며, 바람직하게는 80% 이상이며, 보다 바람직하게는 85% 이상이다.
1.7. 안정화 방법 및 에멀젼화제
본 발명의 일실시 형태와 관련되는 프로스태글란딘 지방 에멀젼의 안정화 방법은 프로스태글란딘을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼에 있어서, PC:PG가 85:15~99.7:0.3 이며, 또, PE를 실질적으로 함유하지 않는 인지질을 사용하는 것을 포함한다. 게다가, 본 발명의 일실시 형태와 관련되는 에멀젼화제는 프로스태글란딘 지방 에멀젼에 사용되고 PC:PG가 85:15~99.7:0.3 이며, 한편 PE를 실질적으로 함유하지 않는 인지질로부터 이루어진다. 이러한 에멀젼화제로서는, 예를 들면, 상기 PC:PG의 비율로 PG를 함유시킨, 상술한 고도 정제 난황 레시틴을 들 수 있다.
1.8. 용도 및 특성
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 의하면, 포스파티딜콜린(PC) 및 포스파티딜글리세롤(PG)를 포함하는 인지질을 함유하고, 상기 인지질 중의 PC와 PG의 비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 인 것에 따라, 예를 들면, 올레인산 등의 유리 지방산이 실질적으로 함유되어 있지 않아도, 에멀젼화 안정성을 유지하면서, 유효 성분(프로스태글란딘)의 안정성을 높일 수 있다. 게다가, 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 의하면, PE를 실질적으로 함유하지 않는 것에 의해, 유효 성분(프로스태글란딘)의 안정성을 더욱 높일 수 있다.
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼은, 정맥내 주사용으로서 사용할 수 있다. 이 경우, 본 실시 형태에 의해 수득한 지방 에멀젼의 pH를 조정한 후, 앰플이나 바이알, 프레 필드(pre-filled) 주사기 용기 등의 기밀 또는 밀봉 용기에 충전하고, 고온 가열 처리 등을 실시할 수 있다.
또, 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼의 평균 입자경은 300 nm 이하인 것이 바람직하고, 150~250 nm의 범위내인 것이 보다 바람직하다. 평균 입자경이 이것보다 큰 경우, 지방 에멀젼의 에멀젼화계가 불안정이 되는 일이 있다. 또, 특히 정맥내에 투여했을 경우에는, 150 nm보다 작은 경우는, 염증 부위(특히 말초 혈관 내벽)나 매크로 살균 바이러스에 집적하는 속도가 지연되어, 투여 후의 생리 활성의 발휘가 불충분하게 될 가능성이 있다.
또, 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼은, 평균 입자경은 300 nm 이하이며, 프로스태글란딘이 PGE1이며, 한편, 40℃에서 7일간 보존한 후의 PGE1의 잔존율이 70% 이상인 것이 바람직하고, 80% 이상인 것이 보다 바람직하고, 85% 이상인 것이 더욱 더 바람직하다. 게다가, 20℃에서 2개월간 보존한 후의 프로스태글란딘 E1의 잔존율이 70% 이상인 것이 바람직하고, 80% 이상인 것이 보다 바람직하고, 85% 이상인 것이 더욱 더 바람직하다. 게다가, 5℃에서 1년간 보존한 후의 프로스태글란딘 E1의 잔존율이 80% 이상인 것이 바람직하고, 85% 이상인 것이 보다 바람직하고, 90% 이상인 것이 더욱 더 바람직하다. 본 발명에 있어서, 지방 에멀젼의 40℃×7일간의 보존은, 지방 에멀젼의 장기 보존 안정성을 평가하기 위한 시험이다(예를 들면, 특개평 4-338333호 공보 참조). 또, 20℃×2개월간의 보존도 마찬가지로, 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼의 장기 보존 안정성을 평가하기 위한 시험이다(예를 들면, ICH 가이드 라인 Q1A 참조).
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 의하면, PC 및 PG를 포함하는 인지질을 함유하고, 상기 인지질 중의 PC와 PG의 비(PC:PG)를 85:15~99.7:0.3인 것에 따라, 유효 성분인 PGE1의 보존 안정성이 뛰어나고, 한편, 배합되는 다른 첨가제를 제한하거나 지방 에멀젼 중의 지방 입자의 평균 입자경을 증대시키거나 지방 에멀젼 중의 지방 입자의 입도 분포의 격차를 일으키게 하는 것이 없다. 또, 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼에 의하면, 종래 기술과 마찬가지로, 지방 입자의 입자경이 작고, 한편 균일한 것에 따라, 병변 부위에 효율적으로 약제가 집적하여, 소량에서도 뛰어난 유효성을 발휘한다.
여기서, 보존 후의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 잔존율(%)은, HPLC(고속 액체 크로마토 그래프) 법에서, 고온 가열 처리 직후의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량과 보존 후의 상기 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량을 측정하고, 수득한 고온 가열 처리 직후의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량과 보존한 후의 상기 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량에 근거하여, 이하의 식(1)에 의해 산출된다. 또, HPLC법에 따르는 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량의 자세한 측정 방법은 후술하는 실시예에 기재되어 있다.
[수학식 1]
PGE1의 잔존율(%) = (보존후의 비장 에멀젼 중의 PGE1의 함유량(g)÷고온 가열 처리 직후의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량(g))×100
1.9. 투여 형태
본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼은, 비경구의 투여 경로에서 사람 또는 사람 이외의 포유류에 투여되는 것이 바람직하고, 정맥내 주사(링겔 정맥내 주사를 포함한다)에 의해 투여되는 것이 보다 바람직하다. 예를 들면, 0.2~100 μg/ mL의 프로스태글란딘을 포함한 본 실시 형태와 관련되는 지방 에멀젼을 그대로, 또는 수액에 혼화하여, 정맥내 주사에 의해 투여할 수 있다.
2. 실시예
이하, 실시예에 의해 본 발명을 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명은 실시예로 한정되지 않는다.
2.1. 평가 방법
본 실시예에 있어서, 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량 및 지방 에멀젼 중의 지방 입자의 평균 입자경은 이하의 방법에 따라 측정되었다.
2.1.1. PGE1의 함유량
지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량은, 지방 에멀젼을 SEP-PAKC18 카트리지(워타즈 사 제조)로 전처리하여, 포스트컬럼법에 따르는 HPLC법에 의해 측정되었다. 조작 조건은 이하로 했다.
검출기:보라색 외부 흡광 광도계(측정 파장:278 nm)
컬럼:옥타데실 실릴화 실리카겔(내경 4 mm, 길이 15 cm)
컬럼 온도:약 60℃
이동상:pH 6.3의 1/150 mol/L 인산염 완충액·아세트니트릴 혼액(3:1)
이동상의 유량:1 mL/min
(포스트컬럼 반응 조건)
반응액:1 mol/L 수산화 칼륨 용액
유량:0.5 mL/min
반응 코일:내경 약 0.5 mm, 길이 약 10 m의 Teflon(상표명) 튜브
반응 온도:약 60℃
2.1.2. 지방 입자의 평균 입자경
지방 에멀젼 중의 지방 입자의 평균 입자경은, N4PLUS 서브 미크론 입도 분포 측정 장치(베크 맨·코르타(주) 제조)에서 측정되었다.
2.1.3. 지방 에멀젼 중의 PE의 검출
지방 에멀젼 1 mL에 대해, 에탄올 1 mL, 디에틸 에테르 0.5 mL, 석유 에테르 0.5 mL를 더하여 교반한다. 이것을 원심분리한 상층을 채취하여, 질소에 의해 용매를 유거(留去)한다. 수득한 유상 성분을 20%(w/)가 되도록 용해한 클로로포름·메탄올 혼합 용액 20μL를, 실리카겔 박층 판의 하단부에 충전한다. 이 박층판을 전개 용제(클로로포름:메탄올:물=65:25:4)를 이용해 전개하고, 건조시킨다. 그 후, 닌히드린 시약을 분무하고, 약 120℃으로 10분간 가열했을 때, 똑같이 충전한 PE 표준액으로 검출되는 스폿의 부위에, 발색을 인정하지 않는 경우, 지방 에멀젼이 PE를 실질적으로 함유하지 않는 것으로 판정한다.
2.2. 실시예 1
유기재로서 콩기름 50 g, 인지질로서 난황 레시틴 PC-98 N(Q P(주) 제조, 포스파티딜콜린의 순도 98.8%, 상기의 인지질 중의 PE검출 방법에서 PE가 검출되지 않았던 것) 8.82 g 및 디팔미틸포스파티딜글리세롤(일본 유지(주) 제조) 0.18 g를 호모 믹서에서 분산하여 균질화했다. 이것에 프로스태글란딘 E1 3.5 mg를 첨가한 후, 일본약방농글리세린 11.05 g를 용해시킨 주사 용수를 첨가하여 혼합하고, 전량을 500 g 으로서 미정제 에멀젼화액을 얻었다. 다음에, 상기 미정제 에멀젼화액을 만톤가우린형 호모저나이저(APV 사 제조)에서 600 kgf/cm2의 가압하에서 15회 통액(通液)하고, 실시예 1의 지방 에멀젼(평균 입자경 193 nm, 213 nm)를 얻었다. 이 지방 에멀젼 중의 지방 입자의 평균 입자경을 측정하고, 한편, 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량을 산출했다.
수득한 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량(조제 직후의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량)을 표 1 및 표 2에, 지방 에멀젼의 지방 입자의 평균 입자경(조제 직후의 지방 에멀젼 중의 지방 입자의 평균 입자경)을 표 3 및 표 4에 각각 나타낸다.
다음에, 수득한 지방 에멀젼을 구멍 지름 0.45μm의 멤브레인 필터(membrane filter)에서 여과하고, 수산화나트륨 수용액에서 pH 5.0, 5.5(2 샘플), 6.0로 조정하고, 2 mL 앰플에 분주(分注)를 한 후, 고온 가열 처리로서 110℃으로 5분간 스프레이식 가열 멸균 처리를 실시했다. 그 다음에, 상기 앰플을 개봉하여, 이 지방 에멀젼 중의 PGE1의 잔존율(가열 직후의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 잔존율)을 산출하고, 한편, 지방 에멀젼 중의 지방 입자의 평균 입자경(가열 직후의 지방 에멀젼 중의 지방 입자의 평균 입자경)을 측정했다. 그 결과를 표1 내지 표4에 각각 나타낸다.
또, 고온 가열 처리 직후의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 잔존율은, 상술한 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량의 측정 방법에 따라, 고온 가열 처리 직후의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량을 측정하고, 조제 직후의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량에 대한 고온 가열 처리 직후의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량의 비(%)로서 산출했다.
게다가, 고온 가열 처리 후의 앰플을 40℃에서 7일간 보존한 후, 상기 앰플 을 개봉하고, 40℃×7일간 보존 후의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 함유량을 측정하고, 식(1)에 근거하여, 40℃×7일간 보존 후의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 잔존율을 산출했다. 또, 40℃×7일간 보존 후의 지방 에멀젼 중의 지방 입자의 평균 입자경을 측정했다. 그 결과를 표 1 내지 표 4에 각각 나타낸다. 또, 실시예 1의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
또, 실시예 1, 2, 4-6 및 비교예 2, 3, 6에 있어서는, pH를 5.0로 조정했을 경우, 실시예 1, 2, 4, 7, 9, 10, 12 및 비교예 1-4, 6, 7에 있어서는, pH를 5.5로 조정했을 경우, 및, 실시예 1, 3, 7, 8, 11 및 비교예 3, 5에 있어서는, pH를 6.0로 조정했을 경우의 결과를 나타내고 있다(표 1 내지 표 4 참조).
또, 실시예 1-12 및 비교예 1-7에 있어서, PC의 사용량은 인지질(난황 레시틴)의 사용량에 PC의 순도(0.988=98.8%)를 곱해 산출한 것이다.
게다가, 표 1 및 표 2에 있어서, 「올레인산(질량부)」는 인지질 1 질량부에 대한 올레인산의 함유량(질량부)을 나타내고 있다.
2.3. 실시예 2
실시예 1의 지방 에멀젼에 있어서, 난황 레시틴 PC-98 N의 배합량을 8.55 g 으로 하고, 디팔미틸포스파티딜글리세롤의 배합량을 0.45 g 으로 한 것 이외는, 실 시예 1 과 동일한 방법에 의해, 실시예 2의 지방 에멀젼(평균 입자경 222 nm)를 얻었다. pH는 희염산에서 5.0 및 5.5로 조정했다.
실시예 2 및 후술하는 실시예 3-12 및 비교예 1-7의 지방 에멀젼에 있어서, 실시예 1의 지방 에멀젼과 동이한 방법으로, 고온 가열 처리 및 40℃×7일간의 보존을 실시하고, 각각의 경우에 있어서의 지방 에멀젼 중의 PGE1의 잔존율 및 지방 입자의 평균 입자경을 각각 측정했다. 그 결과를 표 1 내지 표 4에 나타낸다. 실시예 2의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.4. 실시예 3
실시예 1의 지방 에멀젼에 있어서, 난황 레시틴 PC-98 N의 배합량을 7.65 g 으로 하고, 디팔미틸포스파티딜글리세롤 대신에, 난황 인지질을 정제하여 수득한 PC를 글리세롤의 존재하에서 포스포리파제(phospholipase) D 처리하여 조제된 PG(이하, 난황 유래 PG)를 1.35 g 이용하고, 한층 더 앰플 분주 후의 고온 가열 처리 조건을 127℃, 1분간으로 한 것 이외는, 실시예 1 과 동일한 방법에 의해, 실시예 3의 지방 에멀젼(평균 입자경 229 nm)를 얻었다. 이 난황 유래 PG의 지방산 잔기의 조성중, 탄소수 16이 35%, 탄소수 18이 57%였다. pH는 수산화나트륨 수용액에서 6.0로 조정했다. 실시예 3의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다. 또, 실시예 3으로 수득한 지방 에멀젼은, 예를 들면, 후술하는 실시예 8, 11 에서 수득한 지방 에멀젼과 비교하여, 가열 직후의 유효 성분(PGE1)의 잔존율이 낮 은 것으로부터, PG의 첨가량이 증가하면, 가열 후의 유효 성분의 안정성에 악영향을 미치는 경향이 있다고 생각된다.
2.5. 실시예 4
실시예 1의 지방 에멀젼에 있어서, 콩기름에 올레인산 0.6 g를 더하는 것 이외는, 실시예 1 과 동일한 방법에 의해, 실시예 4의 지방 에멀젼(평균 입자경 226 nm)를 얻었다. pH는 희염산에서 5.0로, 수산화나트륨 수용액에서 5.5로 조정했다. 실시예 4의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.6. 실시예 5
실시예 1의 지방 에멀젼에 있어서, 콩기름에 올레인산 1.2 g를 더하는 것 이외는, 실시예 1 과 동일한 방법에 의해, 실시예 5의 지방 에멀젼(평균 입자경 210 nm)를 얻었다. 수득한 지방 에멀젼의 pH는 5.0이었다. 실시예 5의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.7. 실시예 6
실시예 2의 지방 에멀젼에 있어서, 콩기름에 올레인산 1.2 g를 더하는 것 이외는, 실시예 2로 같은 방법에 의해, 실시예 6의 지방 에멀젼(평균 입자경 230 nm)를 얻었다. pH는 희염산에서 5.0로 조정했다. 실시예 6의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.8. 실시예 7
실시예 3의 지방 에멀젼에 있어서, 난황 레시틴 PC-98 N의 배합량을 8.82 g 으로 하고, 난황 유래 PG의 배합량을 0.18 g 으로 하고, 한층 더 앰플 분주 후의 고온 가열 처리 조건을 110℃, 5분간으로 한 것 이외는, 실시예 3과 동일한 방법에 의해, 실시예 7의 지방 에멀젼(평균 입자경 218 nm)를 얻었다. pH는 희염산에서 5.5로, 수산화나트륨 수용액에서 6.0로 조정했다. 실시예 7의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.9. 실시예 8
실시예 3의 지방 에멀젼에 있어서, 난황 레시틴 PC-98 N의 배합량을 8.91 g 으로 하고, 난황 유래 PG의 배합량을 0.09 g 으로 한 것 이외는, 실시예 3과 동일한 방법에 의해, 실시예 8의 지방 에멀젼(평균 입자경 197 nm)를 얻었다. pH는 수산화나트륨 수용액에서 6.0로 조정했다. 실시예 8의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.10. 실시예 9
실시예 8의 지방 에멀젼에 있어서, 콩기름에 올레인산 0.12 g를 더하는 것 이외는, 실시예 8과 동일한 방법에 의해, 실시예 9의 지방 에멀젼(평균 입자경 217 nm)를 얻었다. pH는 수산화나트륨 수용액에서 5.5로 조정했다. 실시예 9의 지 방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.11. 실시예 10
실시예 8의 지방 에멀젼에 있어서, 난황 레시틴 PC-98 N의 배합량을 8.955 g 으로 하고, 난황 유래 PG의 배합량을 0.045 g 으로 한 것 이외는, 실시예 8과 동일한 방법에 의해, 실시예 10의 지방 에멀젼(평균 입자경 198 nm)를 얻었다. pH는 희염산에서 5.5로 조정했다. 실시예 10의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.12. 실시예 11
실시예 8의 지방 에멀젼에 있어서, 난황 레시틴 PC-98 N의 배합량을 8.973 g 으로 하고, 난황 유래 PG의 배합량을 0.027 g 으로 한 것 이외는, 실시예 8과 동일한 방법에 의해, 실시예 11의 지방 에멀젼(평균 입자경 195 nm)를 얻었다. pH는 수산화나트륨 수용액에서 6.0로 조정했다. 실시예 11의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다. 실시예 11 로 수득한 지방 에멀젼은, 가열 후의 평균 입자경이 약 50 nm 정도 증대하고 있는 것으로부터, 가열 안정성에 약간 뒤떨어진다고 생각되지만, 유상의 분리는 확인되지 않고, 유효 성분(PGE1)의 안정성에도 우수했다.
2.13. 실시예 12
실시예 2의 지방 에멀젼에 있어서, 디팔미틸포스파티딜글리세롤 대신에, 대두 인지질을 글리세롤의 존재하에서 포스포리파제 D 처리하여 조제된 PG(이하, 대두 유래 PG)를 이용하고, 한층 더 앰플 분주 후의 고온 가열 처리 조건을 127℃, 1분간으로 한 것 이외는, 실시예 2로 같은 방법에 의해, 실시예 12의 지방 에멀젼(평균 입자경 227 nm)를 얻었다. 이 대두 유래 PG의 지방산 잔기의 조성중, 탄소수 16이 14%, 탄소수 18이 78%였다. pH는 희염산에서 5.5로 조정했다. 실시예 12의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.14. 비교예 1
실시예 5의 지방 에멀젼에 있어서, 난황 레시틴 PC-98 N의 배합량을 9.0 g 으로 하고, 디팔미틸포스파티딜글리세롤의 배합량을 0 g 으로 한 것 이외는, 실시예 5와 동일한 방법에 의해, 비교예 1의 지방 에멀젼(평균 입자경 214 nm)를 얻었다. pH는 수산화나트륨 수용액에서 5.5로 조정했다. 비교예 1의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.15. 비교예 2
실시예 1의 지방 에멀젼에 있어서, 난황 레시틴 PC-98 N의 배합량을 9.0 g 으로 하고, 디팔미틸포스파티딜글리세롤의 배합량을 0 g 으로 한 것 이외는, 실시예 1 과 동일한 방법에 의해, 비교예 2의 지방 에멀젼(평균 입자경 189 nm)를 얻었다. pH는 희염산으로 5.0로, 수산화나트륨 수용액으로 5.5로 조정했다. 비교예 2의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.16. 비교예 3
비교예 1의 지방 에멀젼에 있어서, 앰플 분주 후의 고온 가열 처리 조건을 127℃, 1분간으로 한 것 이외는, 비교예 1과 동일한 방법에 의해, 비교예 3의 지방 에멀젼(평균 입자경 216 nm)를 얻었다. pH는 희염산에서 5.0로, 수산화나트륨 수용액에서 5.5 및 6.0로 조정했다. 비교예 3의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.17. 비교예 4
실시예 12의 지방 에멀젼에 있어서, 대두 유래 PG 대신에, 난황 인지질을 정제하여 수득한 PC를 L-세린의 존재하에서 포스포리파제 D 처리하여 조제된 난황 포스파티딜세린(이하, 난황 유래 PS)을 이용하는 것 이외는, 실시예 12 와 동일한 방법에 의해, 비교예 4의 지방 에멀젼(평균 입자경 221 nm)를 얻었다. pH는 수산화나트륨 수용액에서 5.5로 조정했다. 비교예 4의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
2.18. 비교예 5
실시예 8의 지방 에멀젼에 있어서, 난황 레시틴 PC-98 N의 배합량을 8.991 g 으로 하고, 난황 PG의 배합량을 0.009 g 으로 한 것 이외는, 실시예 8과 동일한 방 법에 의해, 비교예 5의 지방 에멀젼(평균 입자경 192 nm)를 얻었다. pH는 수산화나트륨 수용액으로 6.0로 조정했다. 비교예 5의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다. 또, 비교예 5의 지방 에멀젼은, 가열 후에 분리가 확인되었기 때문에, PGE1의 정량 및 보존 시험을 실시하지 않았다.
2.19. 비교예 6
비교예 1의 지방 에멀젼에 있어서, 난황 레시틴 PC-98 N의 배합량을 7 g 으로 하고, 난황 레시틴 PL-100 M(Q P(주) 제조, PE함량:15.8%) 2 g를 더하는 것 이외는, 비교예 1과 동일한 방법에 의해, 비교예 6의 지방 에멀젼(평균 입자경 195 nm)를 얻었다. pH는 희염산에서 5.0로, 수산화나트륨 수용액에서 5.5에 조제했다. 인지질 중의 PE함량은 3.5% 이며, 비교예 6의 지방 에멀젼중으로부터 PE가 검출되었다.
2.20. 비교예 7
실시예 12의 지방 에멀젼에 있어서, 대두 유래 PG 대신에, 디팔미틸포스파티진산을 이용하는 것 이외는, 실시예 12 와 동일한 방법에 의해, 비교예 7의 지방 에멀젼(평균 입자경 238 nm)를 얻었다. pH는 수산화나트륨 수용액에서 5.5로 조정했다. 비교예 7의 지방 에멀젼중으로부터 PE는 검출되지 않았다.
올레인산
(질량부)		 PC:PG pH 조제 직후 가열 직후 40℃×7일간 보존 후
PGE1
(㎍/mL)
(a)		 PGE1
(㎍/mL)
(b)		 PGE1
잔존율
(%)
(b/a)		 PGE1
(㎍/mL)
(c)		 PGE1
잔존율
(%)
(c/b)
실시예1 0 98:2 5.0 7.29 6.78 92.9 5.69 83.9
5.5 6.71 92.0 5.76 85.9
5.5 5.69 5.37 94.3 4.68 87.2
6.0 5.31 93.2 4.68 88.3
실시예2 0
0		 95:5 5.0 6.12 5.88 96.1 4.77 81.2
5.5 5.88 96.1 4.99 85.1
실시예3 0.067 85:15 6.0 6.60 4.08 61.9 2.91 71.3
실시예4 0.133 98:2 5.0 6.35 5.75 90.6 4.76 82.7
5.5 5.75 90.6 4.72 82.0
실시예5 0.133 98:2 5.0 7.57 6.76 89.3 5.09 75.3
실시예6 0 95:5 5.0 6.94 6.30 90.8 4.47 71.0
실시예7 0 98:2 5.5 6.64 6.13 92.3 5.55 90.5
6.0 6.02 90.6 5.58 92.7
실시예8 0 99:1 6.0 7.02 5.90 84.0 5.32 90.2
실시예9 0.0133 99:1 5.5 6.97 6.01 86.2 5.23 87.0
실시예10 0 99.5:0.5 5.5 7.20 6.28 87.2 5.67 90.3
실시예11 0 99.7:0.3 6.0 7.66 6.52 85.1 5.86 89.9
실시예12 0 95:5 5.5 7.18 5.69 79.2 4.60 80.9
올레인산
(질량부)		 PC:PG pH 조제 직후 가열 직후 40℃×7일간 보존 후
PGE1
(㎍/mL)
(a)		 PGE1
(㎍/mL)
(b)		 PGE1
잔존율
(%)
(b/a)		 PGE1
(㎍/mL)
(c)		 PGE1
잔존율
(%)
(c/b)
비교예1 0.133 100:0 5.5 7.20 6.32 87.8 4.21 66.7
비교예2 0 100:0 5.0 6.34 5.98 92.9 5.58 94.8
5.5 5.84 92.1 5.59 95.8
비교예3 0.133 100:0 5.0 7.12 5.95 83.5 4.36 73.4
5.5 5.76 80.9 4.07 70.6
6.0 5.52 77.5 3.63 65.9
비교예4 0 (PC:PS=
95:5)		 5.5 6.11 4.74 77.6 2.56 54.0
비교예5 0 99.9:0.1 6.0 - - - - -
비교예6 0.133 (PC:PE=
96.5:3.5)		 5.0 7.10 5.66 79.7 2.52 44.5
5.5 5.61 79.0 2.44 43.5
비교예7 0 (PC:PA=
95:5)		 5.5 6.93 4.93 71.3 3.00 60.7
pH 조제 직후 가열 직후 40℃×7일간 보존 후
평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)		 평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)		 평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)
실시예1 5.0 193 86 211 82 200 66
5.5 214 88 213 88
5.5 213 32 211 63 212 72
6.0 212 78 213 82
실시예2 5.0 222 68 218 80 225 78
5.5 219 55 220 85
실시예3 6.0 229 56 226 70 230 74
실시예4 5.0 226 86 225 88 229 50
5.5 227 74 225 80
실시예5 5.0 210 85 211 71 217 66
실시예6 5.0 230 74 223 60 232 68
실시예7 5.5 218 86 219 68 215 80
6.0 221 73 213 78
실시예8 6.0 197 81 198 60 196 82
실시예9 5.5 217 77 221 71 211 74
실시예10 5.5 198 58 191 56 181 64
실시예11 6.0 195 67 239 53 234 72
실시예12 5.5 227 93 233 85 226 74
pH 조제 직후 가열 직후 40℃×7일간 보존 후
평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)		 평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)		 평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)
비교예1 5.5 214 33 219 47 219 63
비교예2 5.0 189 69 731
(가열후 분해)		 315 423 195
5.5 (가열후 분해, 측정 불능) 413 185
비교예3 5.0 216 78 419 189 427 179
5.5 311 76 340 99
6.0 227 75 226 67
비교예4 5.5 221 29 225 77 219 80
비교예5 6.0 192 78 753
(가열후 분해)		 354 - -
비교예6
 5.0 195 70 191 76 197 72
5.5 187 68 186 71
비교예7 5.5 238 53 239 65 238 66
또, 표 1, 2에 있어서, 「PC:PG」는 각 지방 에멀젼에 배합되는 인지질 중의 PC와 PG와의 비를 나타낸다.
표 1 내지 표 4에 나타나는 결과로부터, 실시예 1-12로 수득한 지방 에멀젼에 의하면, PC 및 PG를 포함하는 인지질을 함유하고, 상기 인지질 중의 PC와 PG의 비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 인 것으로, 40℃×7일간 보존 후의 PGE1의 잔존율이 70% 이상이며, 또 80% 이상, 양호한 조건하에서는 85% 이상으로 할 수가 있고, 지방 입자의 평균 입자경이 300 nm 이하이며, 또, 조제 직후, 가열 직후, 및 40℃×7일간의 보존 후의 어느 경우에 대해서도 지방 입자의 평균 입자경의 격차가 작았다. 따라서, 실시예 1-12로 수득한 지방 에멀젼에 의하면, 유효 성분(PGE1)의 안정성 및 에멀젼화 안정성이 뛰어나다.
이것에 대해서, 비교예 1 로 수득한 지방 에멀젼에서는, 조제 직후의 지방 에멀젼과 비교하여, 40℃×7일간 보존 후의 지방 에멀젼의 PGE1의 잔존율이 크게 저하했다. 또, 비교예 2로 수득한 지방 에멀젼에서는, 조제 직후의 지방 입자와 비교하여, 가열 직후 및 40℃×7일간 보존 후의 지방 입자의 평균 입자경의 불규칙해졌다. 게다가, 비교예 2로 수득한 지방 에멀젼에서는, 조제 직후의 지방 입자의 평균 입자경과 비교해, 가열 직후 및 40℃×7일간 보존 후의 지방 입자의 평균 입자경이 현저하게 커지고, 제제의 분리도 확인되었다. 또, 비교예 3으로 수득한 지방 에멀젼에서는, pH 5.0 및 5.5에서는 가열 직후에 지방 입자가 커지고, pH6.0에서는 40℃×7일간 보존 후의 PGE1의 잔존율이 저하하고 있었다. 이러한 이유로서는, 비교예 1-3, 5로 수득한 지방 에멀젼에서는, 인지질 중의 PC와 PG의 비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3의 범위에 없기 때문에, 유효 성분(PGE1)의 안정성 및/또는 에멀젼화 안정성이 낮기 때문이라고 이해할 수 있다.
또, PG 대신에 PS를 사용한 비교예 4에 대해서는, 가열 직후 및 40℃×7일간 보존 후의 에멀젼화 안정성은 유지되고 있었지만, 40℃×7일간 보존 후의 PGE1의 잔존율이 현저하게 저하하고 있었다. 마찬가지로, PG 대신에 PA를 이용한 비교예 7에 있어서도, 가열 직후 및 40℃×7일간 보존 후의 에멀젼화 안정성은 유지되고 있었지만, 40℃×7일간 보존 후의 PGE1의 잔존율이 현저하게 저하하고 있었다. 이것으로부터, PG 대신에, PS 또는 PA를 이용했을 경우, 에멀젼화 안정성은 높지만, PGE1의 소장(消長)이 커지는 것이 이해된다.
비교예 6에 대해서도, 인지질 중에 PE를 함유하는 것으로써 에멀젼화 안정성은 높아지지만, 비교예 1, 3에 대해서, PGE1의 소장(消長)이 커지고 있는 것이 확인되었다.
2.21. 20℃에서 2개월간 보존 후의 결과
실시예 1, 실시예 7 및 비교예 1 에서 수득한 지방 에멀젼(pH 5.5)를 20℃의 조건하에서 2개월간 보존했다. 보존 후의 PGE1의 잔존율 및 평균 입자경을 표 5 및 표 6에 나타낸다. 또, 20℃에서 2개월간 보존한 후의 PGE1의 잔존율에 대해서는, 상기의 식(1)에 의해 산출했다.
표 5 및 표 6의 결과로부터, 20℃에서 2개월 보존한 후에 있어서도, 비교예 1으로 수득한 지방 에멀젼에 대해서 실시예 1 로 수득한 지방 에멀젼 쪽이, 유효 성분(PGE1)의 안정성이 높은 것이 이해된다.
올레인산
(%)		 PC:PG pH
 조제 직후 가열 직후 20℃×2개월간 보존 후
PGE1
(㎍/mL)
(a)		 PGE1
(㎍/mL)
(b)		 PGE1
잔존율
(%)
(b/a)		 PGE1
(㎍/mL)
(c)		 PGE1
잔존율
(%)
(c/b)
실시예1 0 98:2 5.5 5.69 5.37 94.3 4.97 92.5
실시예7 0 98:2 5.5 6.64 6.13 92.3 5.59 91.1
비교예1 0.133 100:0 5.5 7.20 6.32 87.8 4.36 69.1
pH
 조제 직후 가열 직후 20℃×2개월간 보존 후
평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)		 평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)		 평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)
실시예1 5.5 213 32 211 63 211 79
실시예7 5.5 218 86 219 68 224 36
비교예1 5.5 214 33 219 47 228 67
2.22. 5℃에서 6개월간 보존 후의 결과
실시예 1, 실시예 7 및 비교예 1 로 수득한 지방 에멀젼(pH 5.5)를 5℃의 조건하에서 6개월간 보존했다. 보존 후의 PGE1의 잔존율 및 평균 입자경을 표 7 및 표 8에 나타낸다. 또, 5℃에서 6개월간 보존한 후의 PGE1의 잔존율에 대해서는, 상기의 식(1)에 의해 산출했다.
표 7 및 표 8의 결과로부터, 5℃에서 6개월간 보존한 후에 있어서도, 비교예 1 로 수득한 지방 에멀젼에 대해서 실시예 1 및 7 로 수득한 지방 에멀젼 쪽이, 유효 성분(PGE1)의 안정성이 높은 것이 이해된다.
올레인산
(%)		 PC:PG pH
 조제 직후 가열 직후 5℃×6개월간 보존 후
PGE1
(㎍/mL)
(a)		 PGE1
(㎍/mL)
(b)		 PGE1
잔존율
(%)
(b/a)		 PGE1
(㎍/mL)
(c)		 PGE1
잔존율
(%)
(c/b)
실시예1 0 98:2 5.5 5.69 5.37 94.3 5.36 99.8
실시예7 0 98:2 5.5 6.64 6.13 92.3 5.99 97.6
비교예1 0.133 100:0 5.5 7.20 6.32 87.8 5.32 84.2
pH
 조제 직후 가열 직후 5℃×6개월간 보존 후
평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)		 평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)		 평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)
실시예1 5.5 213 32 211 63 227 87
실시예7 5.5 218 86 219 68 236 64
비교예1 5.5 214 33 219 47 231 52
2.23. 5℃에서 1년간 보존 후의 결과
실시예 1, 실시예 7 및 비교예 1 로 수득한 지방 에멀젼(pH 5.5)를 5℃의 조건하에서 1년간 보존했다. 보존 후의 PGE1의 잔존율 및 평균 입자경을 표 9 및 표 10에 나타낸다. 또, 5℃에서 1년간 보존한 후의 PGE1의 잔존율에 대해서는, 상기의 식(1)에 의해 산출했다.
표 9 및 표 10의 결과로부터, 5℃에서 1년간 보존한 후에 있어서도, 비교예 1 로 수득한 지방 에멀젼에 대해서 실시예 1 및 7 로 수득한 지방 에멀젼 쪽이, 유효 성분(PGE1)의 안정성이 높은 것이 이해된다.
올레인산
(%)		 PC:PG pH
 조제 직후 가열 직후 5℃×1년간 보존 후
PGE1
(㎍/mL)
(a)		 PGE1
(㎍/mL)
(b)		 PGE1
잔존율
(%)
(b/a)		 PGE1
(㎍/mL)
(c)		 PGE1
잔존율
(%)
(c/b)
실시예1 0 98:2 5.5 5.69 5.37 94.3 5.13 95.6
실시예7 0 98:2 5.5 6.64 6.13 92.3 5.60 91.4
비교예1 0.133 100:0 5.5 7.20 6.32 87.8 4.71 74.5
pH
 조제 직후 가열 직후 5℃×1년간간 보존 후
평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)		 평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)		 평균 입자경
(nm)		 표준편차
(nm)
실시예1 5.5 213 32 211 63 205 78
실시예7 5.5 218 86 219 68 218 74
비교예1 5.5 214 33 219 47 211 65

Claims (29)

  1. 포스파티딜콜린(PC) 및 포스파티딜글리세롤(PG)를 포함하는 인지질을 함유하고, 상기 인지질 중의 PC와 PG의 질량비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 인, 프로스태글란딘 E1 을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼.
  2. 청구항 1 에 있어서, PC:PG가 95:5~99.7:0.3 인 지방 에멀젼.
  3. 청구항 2 에 있어서, PC:PG가 97:3~99.5:0.5 인 지방 에멀젼.
  4. 청구항 1 에 있어서, 인지질을 10 %(w/v)가 되도록, 클로로포름ㆍ메탄올 혼합 용액에 용해시킨 용액을 실리카겔 박층 판의 하단부에 10 ㎕ 충전하고, 이 박층 판을 전개 용제(클로로포름:메탄올:물=65:25:4)를 사용하여 전개하고, 건조시킨 후, 닌히드린 시약을 분무하고, 120 ℃에서 10분간 가열했을 때, 동일하게 충전한 포스파티딜에탄올아민(PE) 표준액으로 검출되는 스폿의 부위에 발색을 인정하지 않는 지방 에멀젼.
  5. 청구항 1 에 있어서, PG의 지방산 잔기 중에, 직쇄상의 탄소수 12-18개의 포화 또는 불포화 지방산 잔기가 포함되는 지방 에멀젼.
  6. 청구항 1 에 있어서, PG가 난황 유래인 지방 에멀젼.
  7. 청구항 1 에 있어서, 직쇄상 또는 분기상의 탄소수 6-22개의 포화 또는 불포화 유리 지방산 또는 그 염이 배합 목적으로 첨가되어 있지 않은 지방 에멀젼.
  8. 청구항 1 에 있어서, 유리 올레인산이 배합 목적으로 첨가되어 있지 않은 지방 에멀젼.
  9. 청구항 1 에 있어서, 상기 인지질 1 질량부에 대해서, 0.015 질량부 이하의 직쇄상 또는 분기상의 탄소수 6-22개의 포화 또는 불포화 유리 지방산 또는 그 염을 함유하는 지방 에멀젼.
  10. 청구항 1 에 있어서, 상기 인지질 1 질량부에 대해서, 0.15 질량부 이하의 직쇄상 또는 분기상의 탄소수 6-22개의 포화 또는 불포화 유리 지방산 또는 그 염을 함유하는 지방 에멀젼.
  11. 청구항 10 에 있어서, 상기 직쇄상 또는 분기상의 탄소수 6-22개의 포화 또는 불포화 유리 지방산이 유리 올레인산인 지방 에멀젼.
  12. 청구항 1 에 있어서, 상기 인지질 중의 PC의 함유량 및 PG의 함유량의 합계가 95 질량% 이상인 지방 에멀젼.
  13. 청구항 1 에 있어서, 정맥내 주사용인 지방 에멀젼.
  14. 청구항 13 에 있어서, 평균 입자경이 300 nm 이하이며, 40℃에서 7일간 보존한 후의 프로스태글란딘 E1의 잔존율이 70 (w)/(w)% 이상인 지방 에멀젼.
  15. 청구항 13 에 있어서, 평균 입자경이 300 nm 이하이며, 40℃에서 7일간 보존한 후의 프로스태글란딘 E1의 잔존율이 80 (w)/(w)% 이상인 지방 에멀젼.
  16. 청구항 13 에 있어서, 평균 입자경이 300 nm 이하이며, 40℃에서 7일간 보존한 후의 프로스태글란딘 E1의 잔존율이 85 (w)/(w)% 이상인 지방 에멀젼.
  17. 청구항 13 에 있어서, 평균 입자경이 300 nm 이하이며, 20℃에서 2개월 보존한 후의 프로스태글란딘 E1의 잔존율이 80 (w)/(w)% 이상인 지방 에멀젼.
  18. 청구항 13 에 있어서, 평균 입자경이 300 nm 이하이며, 5℃에서 1년간 보존한 후의 프로스태글란딘 E1의 잔존율이 80 (w)/(w)% 이상인 지방 에멀젼.
  19. 포스파티딜콜린(PC) 및 포스파티딜글리세롤(PG)를 포함하는 인지질을 함유하고, 상기 인지질 중의 PC와 PG의 질량비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 이고,
    인지질을 10 %(w/v)가 되도록, 클로로포름ㆍ메탄올 혼합 용액에 용해시킨 용액을 실리카겔 박층 판의 하단부에 10 ㎕ 충전하고, 이 박층 판을 전개 용제(클로로포름:메탄올:물=65:25:4)를 사용하여 전개하고, 건조시킨 후, 닌히드린 시약을 분무하고, 120 ℃에서 10분간 가열했을 때, 동일하게 충전한 포스파티딜에탄올아민(PE) 표준액으로 검출되는 스폿의 부위에 발색을 인정하지 않고, 유리 올레인산이 배합 목적으로 첨가되어 있지 않으며, 프로스태글란딘 E1을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼.
  20. 포스파티딜콜린(PC) 및 포스파티딜글리세롤(PG)를 포함하는 인지질을 함유하고, 상기 인지질 중의 PC와 PG의 질량비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 이고,
    인지질을 10 %(w/v)가 되도록, 클로로포름ㆍ메탄올 혼합 용액에 용해시킨 용액을 실리카겔 박층 판의 하단부에 10 ㎕ 충전하고, 이 박층 판을 전개 용제(클로로포름:메탄올:물=65:25:4)를 사용하여 전개하고, 건조시킨 후, 닌히드린 시약을 분무하고, 120 ℃에서 10분간 가열했을 때, 동일하게 충전한 포스파티딜에탄올아민(PE) 표준액으로 검출되는 스폿의 부위에 발색을 인정하지 않고,
    상기 인지질 1 질량부에 대해서 0.015 질량부 이하의 직쇄상 또는 분기상의 탄소수 6-22개의 포화 또는 불포화 유리 지방산 또는 이의 염을 함유하는, 프로스태글란딘 E1을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼.
  21. 포스파티딜콜린(PC) 및 포스파티딜글리세롤(PG)를 포함하는 인지질을 함유하고, 상기 인지질 중의 PC와 PG의 질량비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 이고,
    인지질을 10 %(w/v)가 되도록, 클로로포름ㆍ메탄올 혼합 용액에 용해시킨 용액을 실리카겔 박층 판의 하단부에 10 ㎕ 충전하고, 이 박층 판을 전개 용제(클로로포름:메탄올:물=65:25:4)를 사용하여 전개하고, 건조시킨 후, 닌히드린 시약을 분무하고, 120 ℃에서 10분간 가열했을 때, 동일하게 충전한 포스파티딜에탄올아민(PE) 표준액으로 검출되는 스폿의 부위에 발색을 인정하지 않고,
    상기 인지질 1 질량부에 대해서 0.15 질량부 이하의 직쇄상 또는 분기상의 탄소수 6-22개의 포화 또는 불포화 유리 지방산 또는 이의 염을 함유하는, 프로스태글란딘 E1을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼.
  22. 포스파티딜콜린(PC) 및 포스파티딜글리세롤(PG)를 포함하는 인지질을 함유하고, 상기 인지질 중의 PC와 PG의 질량비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 이고, 프로스태글란딘 E1을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼을 제조하는 공정을 포함하는, 청구항 1 내지 21 중 어느 한 항에 기재된 지방 에멀젼의 제조 방법.
  23. 청구항 22 에 있어서, 지방 에멀젼의 pH 를 4~7로 조정하는 지방 에멀젼의 제조 방법.
  24. 청구항 22 에 있어서, 지방 에멀젼의 pH 를 4.5~6.5로 조정하는 지방 에멀젼의 제조 방법.
  25. 프로스태글란딘 E1을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼에 있어서, 포스파티딜콜린(PC)와 포스파티딜글리세롤(PG)의 질량비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 이며, 인지질을 10 %(w/v)가 되도록, 클로로포름ㆍ메탄올 혼합 용액에 용해시킨 용액을 실리카겔 박층 판의 하단부에 10 ㎕ 충전하고, 이 박층 판을 전개 용제(클로로포름:메탄올:물=65:25:4)를 사용하여 전개하고, 건조시킨 후, 닌히드린 시약을 분무하고, 120 ℃에서 10분간 가열했을 때, 동일하게 충전한 포스파티딜에탄올아민(PE) 표준액으로 검출되는 스폿의 부위에 발색을 인정하지 않는 인지질을 사용하는 것을 포함하는 프로스태글란딘 E1의 안정화 방법.
  26. 프로스태글란딘 E1을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼에 있어서, 포스파티딜콜린(PC)와 포스파티딜글리세롤(PG)의 질량비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 이며, 인지질을 10 %(w/v)가 되도록, 클로로포름ㆍ메탄올 혼합 용액에 용해시킨 용액을 실리카겔 박층 판의 하단부에 10 ㎕ 충전하고, 이 박층 판을 전개 용제(클로로포름:메탄올:물=65:25:4)를 사용하여 전개하고, 건조시킨 후, 닌히드린 시약을 분무하고, 120 ℃에서 10분간 가열했을 때, 동일하게 충전한 포스파티딜에탄올아민(PE) 표준액으로 검출되는 스폿의 부위에 발색을 인정하지 않는 인지질을 사용하는 것을 포함하는 지방 입자의 안정화 방법.
  27. 포스파티딜콜린(PC)와 포스파티딜글리세롤(PG)의 질량비(PC:PG)가 85:15~99.7:0.3 이며, 인지질을 10 %(w/v)가 되도록, 클로로포름ㆍ메탄올 혼합 용액에 용해시킨 용액을 실리카겔 박층 판의 하단부에 10 ㎕ 충전하고, 이 박층 판을 전개 용제(클로로포름:메탄올:물=65:25:4)를 사용하여 전개하고, 건조시킨 후, 닌히드린 시약을 분무하고, 120 ℃에서 10분간 가열했을 때, 동일하게 충전한 포스파티딜에탄올아민(PE) 표준액으로 검출되는 스폿의 부위에 발색을 인정하지 않는 인지질로부터 이루어진, 프로스태글란딘 E1을 유효 성분으로서 함유하는 지방 에멀젼에 사용되는 에멀젼화제.
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