KR101249824B1 - 대사증후군 예방에 효과가 있는 식물성유산균 락토바실러스 플란타륨 ｄｓｒ ｊ1―8 및 이의 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은 김치에서 분리한 대사증후군 예방 및 치료 효과를 갖는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) DSR J1-8[기탁번호: KCCM11141P], 상기 유산균 및 그 배양물을 포함하는 대사증후군 예방 및 치료용 약학 조성물, 생균제 조성물, 사료용 조성물, 식품첨가용 조성물 또는 발효식품에 관한 것이다.

Description

대사증후군 예방에 효과가 있는 식물성유산균 락토바실러스 플란타륨 ＤＳＲ Ｊ1―8 및 이의 용도 {Plant origin lactic acid bacteria Lactobacillus plantarum DSR J1-8 having preventing effect of metabolic syndrome and its use}

본 발명은 대사증후군 예방 및 치료에 효과가 있는 유산균 및 이의 용도에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 내산성, 내염성, 내답즙성, 항생제내성, 열안전성, α-글루코시다아제 억제 활성이 우수하고 α-아밀라아제 활성 저해능이 있는 균주인 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8 및 이의 용도에 관한 것이다.

최근 보고된 대한당뇨병학회 역학소위원회와 건강보험심사평가원의 공동조사 결과에 따르면 2003년 현재 우리나라 당뇨병 환자 수는 전인구의 8.29％인 401만 여명이며, 현재의 발생률을 감안하면 2010년에는 490만 명, 2020년 620만 명, 2030년 720만 명으로 추산하고 있어 그때는 우리나라 전체 인구 7명당 1명이 당뇨병 환자가 되는 심각한 현상이 초래될 것으로 우려된다.

당뇨병은 우리나라에서도 급격히 증가하고 있는 중요한 사망 원인 중 하나인 만성 질환이며 당뇨병에 의한 사망률도 1983년 인구 10만명당 4.3명에서 1995년 13.1명으로 빠른 속도로 증가하고 있으며, 2005년에는 15.9명으로 추정되고 있어 당뇨병의 예방과 관리 및 합병증 예방이 매우 중요한 실정이다.

당뇨병은 그 자체로서의 병뿐만 아니라 다른 병을 야기시키는 합병증을 유발하기 때문에 더욱 두려우며, 일단 발병이 되면 그 완치가 어려워 예방이 최선이며, 일단 당뇨병으로 확인이 되면, 발병이 된 이후에는 지속적으로 치료를 받아야하는 어려움이 있다.

이에 당뇨병의 예방 및/또는 치료를 위한 부작용이 전혀 없는 약(drug) 또는 식품(Food)의 개발이 절실히 요구되고 있다. 지금까지는 혈당의 상승을 억제시키는 천연소재부터 항당뇨 효능이 있는 단일물질의 개발을 위해 많은 연구들이 집중되어 오고 있다. 하지만 아직도 많은 연구 및 시판식품에서 당뇨억제 효능에 대한 만족할 만한 성과를 가져오지는 못하고 있는 실정이다.

일반적으로 섭취한 음식물의 생체 내 소화는 구강 내에서 탄수화물의 초기 분해를 비롯하여 위장에서 일부 단백질의 분해가 일어난다. 그러나 본격적인 탄수화물 및 지방의 소화, 흡수는 십이지장에서부터 회장부에 이르는 부위에서 주로 일어나며 일반적으로 대장에서는 주로 수분과 염류 등의 재흡수와 유리지방산의 흡수가 일어나는 것으로 알려져 있다. 따라서 소화 흡수의 가장 중요한 부분이 바로 소장에서 일어나는데 췌장에서 분비되는 트립시노겐, 키모트립시노겐, 카르복시 펩티다아제 등의 단백질 분해 효소, 췌장 리파아제, 스팁신 등의 지질 분해 효소, 췌장아밀라아제, 아밀롭신, 말타아제 등의 탄수화물 분해 효소 및 소장액에 존재하는 다양한 펩티다아제, 핵산 분해효소, 알기나아제, 포스파타제, 각종 당질 분해효소인 유당 분해 효소 등 여러 가지 소화 효소에 의해서 식괴가 분해되고 소장 표면에 있는 융모세포에서 흡수되어 암죽관과 혈관을 통해서 흡수된 영양분이 체내로 이동하게 된다. 그러므로 장내 소화에 중요한 역할을 하는 아밀라아제의 활성을 억제하면 탄수화물이 체내로 흡수되는 저당류 물질로 분해 되는 것을 막아주어 과도한 탄수화물의 흡수를 억제 할 수 있다.

음식물 중에 포함된 탄수화물은 알파-아밀라아제, 이소말타아제(isomaltase), 글루코아밀라아제(glucoamylase), 슈크라제(sucrase)와 같은 여러 가지 알파-글루코시다아제들의 작용에 의하여 포도당과 같은 단당류로 분해되어 혈액내로 흡수된다. 따라서 이러한 알파-글루코시다아제의 작용을 저해하면 탄수화물이 단당류로 분해되지 못하므로 혈액내로 흡수되지 못한다. 따라서 탄수화물 섭취시에 야기되는 혈액내 포도당 농도의 급격한 상승이 억제된다.

따라서 혈당 강하 조절에 이용할 목적으로, 탄수화물 대사에 필수적인 알파-글루코시다아제 효소의 작용 저해제에 대한 많은 연구가 이루어져 왔다. 그 결과, 토양 방선균의 배양액에서 얻은 올리고스타틴(oligostatin, Itoh, J. 등 J.Antibiotics, 1981, 34. 1424), 트레스타틴(trestatin, Yokose, K. 등 J. Antibiotics, 1983, 36. 1157)등이 보고되었고, 1977년에는 독일 바이엘(Bayer)사에서 아카보스(acarbose, Schmidt, D.D. 등, Naturwis senschaften, 1977, 64. 535))를 발견하여 이를 당뇨병 및 비만증 치료제로 개발하였다. 이밖에도 현재 일본 다께다 제약에서는 발리오라민(baliolamine)을, 독일 바이엘사에서는 데옥시노리지마이신(deoxynojirimycin) 유도체인 미그리톨(miglitol)에 대한 임상 시험을 실시하고있다 (Foelsch, U. R. 등, Structrue and Function of the small intestine; Caspyry, W. F. ed. p310-318. Excerptamedica, Amsterdam, 1987).

현재까지 많은 종류의 당뇨병 치료제가 개발되어 있고 개발이 진행 중이나 만족할 만한 치료방법이나 약물은 개발되지 못하였다. 종래의 치료방법으로 인슐린 의존성 환자에게 인슐린을 직접 투여하거나 인슐린 비의존성 환자에게는 설포닐우레아계 유도체를 투여하여 혈액내 포도당의 농도를 조절하는 방법이 있다. 그러나 인슐린은 알레르기 반응 등의 부작용을 일으킬 수 있으며, 혈류에 도달하기 전 소화관내에서 파괴되므로 경구로 투여할 수 없어 주사제로만 사용되기 때문에 장시간동안 정기적인 주사를 필요로 하는 환자에 있어 반복되는 주사로 인한 피부의 부종 등을 일으키는 문제점을 가지고 있다. 그리고 톨부타미드(tolbutamide), 글리퀴돈(gliquidone)등의 설포닐우레아(sulfonyl urea)계 약물은 클로람페니콜, β차단제, 설파제 등과 병용시 저혈당을 야기할 수 있으며, 메트포르민(metformin) 등의 비구아니이드(biguanide)계 약물은 알콜과 병용시 젖산 과다증 등을 야기하는 문제점을 가지고 있다.

최근 당뇨는 급증하는 추세에 있어 정부에서는 특별 관리질환으로 당뇨병을 정하고 국가적 차원에서 당뇨병 관리를 추진해 나가고 있으나 당뇨 환자를 위한 기능성 식품은 저 칼로리 식품이 대부분이며 직접 혈당 조절을 도와주는 기능성 원료는 국내에 부재하다.

따라서 혈당관리가 필요한 당뇨환자를 위해 영양소의 섭취에 제한 없이 기존의 당뇨에 사용되는 식이요법이 아닌 다른 필수적인 무기이온 및 단백질 등의 흡수저해 없이 탄수화물의 흡수만을 저해할 수 있는 당뇨환자에게 적합한 차별화된 방법의 개발이 요구되고 있다. 종래의 혈액내 포도당 농도를 조절하는 방법의 문제점을 극복하고자, 최근 포도당의 혈액내 흡수 자체를 막는 새로운 방법이 시도되고 있다. 상기 새로운 방법 중 하나로 알파-글루코시다아제 억제제들을 당뇨병 치료제로서 개발하는 것이 시도되고 있다.

한편, 당뇨병은 소변으로 많은 포도당이 배설되는 증세로서, 백내장, 피부소양, 다발경향이 있는 화농소, 신경통 및 신부전증과 같은 많은 합병증을 일으키고, 지방대사에 영향을 미치거나 장애를 일으켜 애시도시스(acidosis)로부터 다시 당뇨병혼수에 빠지게 하는 등 인체에 심각한 문제를 일으킬 수 있다. 당뇨병은 크게 두 가지 형태, 즉 제1형 당뇨병(Insulin Dependent Diabetes Mellitus, IDDM)과 제2형 당뇨병(Non-Insulin Dependent Diabetes Mellitus, NIDDM)으로 분류되며, 그 중 제2형 당뇨병은 당뇨 환자의 95% 이상을 차지한다고 알려져 있다(박경수. J. Ginseng Res., 2003, 56~61). 이러한 제2형 당뇨병의 예방 및 치료방법으로는 1) 식이조절, 2) 운동요법, 3) 경구용 혈당강하제, 4) 인슐린 제제가 사용되는데, 그 중 경구용 혈당강하제의 대표적인 약물로서 인슐린 분비를 촉진시키는 설포닌요소제, 인슐린저항성을 개선시키는 메트포르민, 글리타존 계열 및 포도당 흡수를 저해하는 알파-글리코시다제 저해제 등이 있다. 그러나, 이런 경구용 혈당 강하제들은 간 독성, 체중 증가, 저혈당 등의 부작용을 초래하여 사용에 제한을 받고 있다.

현대인은 운동량은 감소하고 식생활 형태는 채식위주에서 필요이상의 지방과 열량을 섭취하는 형태로 변화하면서 비만증이 국민건강을 위협하는 요인이 되고 있다. 비만인은 정상인에 비하여 당뇨병, 동맥경화, 고혈압, 심장병, 간장병, 담석증, 통풍, 신장병등의 발생률과 수술시 위험성이 높아 대체로 단명한다고 보고되고 있다. 이와 같은 비만 치료를 위해 체지방 감소를 목적으로 한 조성물로 공역 리놀렌산(conjugated linoleic acid)(특허공보10-2007-0096995) 및 락토바실루스 류테리(Lactobacillus reuteri)를 함께 함유한 공역 리놀렌산 조성물(공개특허공보 10-2001-0047292), 홍삼 사포닌과 의이인을 함유한 조성물(특허공보 10-2006-0002087) 및 콩에 버섯균사체를 배양하여 만든 청국장(공개특허공보 10-2006-0021011) 등이 개시되어 있다.

초기 비만 치료방법으로는 칼로리의 이용량을 증가시키는 칼로리 요법, 칼로리 흡수량을 감소시키는 식이요법 및 행동조절요법 등이 이용되었으나 최근에는 일반적으로 소화효소 억제제, 식욕 억제제, 지방 분해제와 같은 약물요법을 이용하는 경우가 많다. 장기간 사용이 허가된 약물로는 시부트라민(sibutramine)과 오르리스타트(orlistat) 두 가지가 있다. 시부트라민은 식욕 억제제의 일종으로 1년 동안 복용할 경우 평균적으로 약 5~9%의 체중을 줄여준다. 그러나 두통, 구갈(심한 갈증), 불면증 및 변비 등의 부작용이 발생할 수 있고, 혈압과 맥박수가 다소 증가할 수 있기 때문에 주기적으로 혈압과 맥박수를 체크해야 한다. 오르리스타트는 지방분해효소의 억제제로 체내에서 지방이 소화되지 못하도록 하는 약이다. 섭취한 지방의 약 30% 를 소화 및 흡수되지 않고 그대로 몸 밖으로 배출시켜주나 부작용으로 대변이 자주 마렵거나 지방변 등이 나타날 수 있고, 지방 흡수율의 감소로 인해 장에서의 지용성 비타민의 흡수율도 떨어지는 문제점이 있다.

최근에는 비만증과 같은 성인병의 예방 및 치료법으로서 적절한 운동과 더불어 오랜 세월동안 안정성과 효능이 검증된 여러 식품소재의 이용에 대한 관심이 높아지고 있다. 현재 비만인을 위한 건강식품으로 식이섬유, 생약제 및 여러 식품소재를 함유하는 제품들이 개발되어 있으나, 그 효능이 미미하고 식사량을 줄이고 이 제품들을 섭취할 경우 여러 영양소의 부족으로 인한 부작용으로 정상적인 생활이 어렵고, 복용을 중단하면 빠르게 다시 비만해지는 문제점이 있다.

따라서 탄수화물의 섭취량이 가장 많은 한국인의 식생활 패턴을 고려한다면, 전체 영양소의 섭취를 제한하는 기존에 사용되는 식이요법이나 식이섬유를 이용한장 청소효과 및 지방의 소화 흡수 억제를 주된 기작으로 하는 다이어트 제품은 적합하지 못하므로, 다른 필수적인 무기이온 및 단백질 등의 흡수저해 없이 탄수화물의 흡수만을 저해할 수 있는 한국인에게 적합한 차별화된 방법의 개발이 필요하다.

인간의 건강에 매우 유익한 영향을 미치는 미생물로써 그 유용성이 날로 증가하고 있다. 최근에는 유산균에 대한 연구가 활발히 진행되어 일반 식품뿐만 아니라 건강식품 및 약품으로도 개발되는 등 그 응용범위가 점점 넓어지고 있다. 유산균에 속하는 미생물로는 스트렙토코커스(Streptococcus) 속, 페디오코커스(Pediococcus) 속, 류코노스톡(Leuconostoc) 속, 락토바실러스(Lactobacillus) 속, 스포로락토바실러스(Sporolactobacillus) 속 및 비피도박테리움(Bifidobacterium) 속의 미생물 등이 있다.

이러한 유산균들은 동물의 장내에 서식하면서 동물이 섭취한 영양분 및 섬유소 등을 분해하여 에너지원으로 사용하고, 젖산 및 항생물질 등을 생산하여 장내 유해균의 발육을 억제함으로써 장내 건강유지에 중요한 역할을 한다. 또한, 유산균은 동물의 성장촉진 및 사료 이용률 개선, 병에 대한 저항력 증가, 유해세균의 증식억제, 폐사율 감소, 부패 독성물질의 생성 억제 및 각종 비타민 생성에도 이용되고 있다. 그러나, 유산균이 상기와 같은 효능을 발휘하려면 장내에 안전하게 도달하여 장의 점막에 부착된 후 그 기능을 나타내어야 한다. 그러기 위해서는 직접 장에 부착될 수 있는 균주여야 하고, 경구 투여시 위산에 의한 파괴가 적어야 하며, 담즙산에 대한 내성이 강해야 하는 등의 조건을 기본적으로 충족시킬 수 있어야 한다.

한편, 당뇨에 미치는 유산균의 영향에 대해 보고된 바로는, Matsuzaki 등이 알록산(alloxan)으로 마우스에 제1형 당뇨를 유발시킬 경우 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei)를 경구 투여시키면 당뇨 발병율이 낮아질 뿐 아니라, 혈당도 감소하는 현상을 보고하였다(Matsuzaki T et al., 1997. APMIS. 637-642). 또한 제2형 당뇨병 형질전환 동물인 KK-Ay 마우스에 락토바실러스 카세이를 투여할 경우 혈당 강하 및 체중 증가 억제 현상이 나타났으며, IFN-γ와 IL-2 등 사이토카인의 변화 및 혈장 인슐린 수치의 감소를 확인할 수 있었다(Matsuzaki T et al., Endocrine J., 1997, 44, 357-365). 또한 Yadav 등은 고열량 식이를 섭취시킨 랫트에 락토바실러스 애시도필러스(Lb. acidophilus)와 락토바실러스 카세이가 함유되어 있는 dahi를 섭취시킬 경우 혈중 글루코스, 혈장 인슐린, 글루코스 내성, 트리글리세라이드, LDL, 혈중 자유 지방산등의 수치가 크게 감소하여 당뇨 발병율을 낮출 수 있다고 보고한 바 있다(Yadav H et al., Nutrition, 2007, 23, 62-68).

본 발명은 α-글루코시다아제 억제 활성이 우수하고 α-아밀라아제 활성 저해능이 있는 유산균을 이용한 비만 및 혈당 조절용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 알파아밀라아제 및 알파글루코시다아제에 대한 저해활성이 있는 유산균을 개발하고, 이를 이용하여 장내 탄수화물 분해효소인 아밀라아제 및 글루코시다아제 활성을 저해함으로써 비만인의 체중 조절용 조성물과 당뇨환자의 혈당증가를 억제하는 혈당조절용 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 혈당상승 억제효과와 비만 기능 개선 효과를 갖는 미생물, 상기 미생물을 포함하는 미생물 제제, 상기 미생물을 포함하는 미생물 제제의 제조방법, 상기 미생물을 포함하는 식품, 상기 미생물을 포함하는 식품의 제조방법을 제공하고자 한다.

본 발명은 탄수화물의 최종 체내 흡수를 억제함으로써 혈당의 조절과 비만의 예방 및 치료에 이용할 수 있는 기능성 원료로서 비만 및 당뇨인의 삶의 질을 크게 향상시킬 수 있다.

따라서 본 발명의 목적은 대사증후군 예방 및 치료 효과를 갖는 신규한 유산균으로 내산성, 내염성, 내답즙성, 항생제 내성, 열안전성, α-글루코시다아제 억제 활성이 우수하고 α-아밀라아제 활성 저해능이 있는 유산균인 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8과, 이의 대사증후군 예방용 조성물, 생균제 조성물, 사료용 조성물, 식품첨가용 조성물, 발효식품으로의 용도를 제공하는 것이다

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 α-글루코시다아제 억제 활성이 우수하고 α-아밀라아제 활성 저해능이 있으며, 항생제 내성이 있으며 pH 2.5 및 3에서 내산성, NaCl 10 % 및 15 %에서 내염성, 옥스갈(oxgall) 0.3 % 및0.5 %에서 내담즙성을 갖고 내열성이 우수한 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8을 제공한다.

본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 상기 락토바실러스 플란타륨 또는 이의 배양물을 함유하는 대사증후군 예방 및 치료용 약학 조성물, 생균제 조성물, 사료용 조성물 또는 식품첨가용 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 상기 락토바실러스 플란타륨 또는 이의 배양물을 함유하는 발효식품을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 락토바실러스 플란타륨 또는 이의 배양물을 스타터로 이용하여 발효식품을 제조하는 방법을 제공한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명의 락토바실러스 플란타륨은 α-글루코시다아제 억제 활성이 우수하고 α-아밀라아제 활성 저해능이 있으며, 내산성, 내열성, 내염성, 내담즙성 및 항생제 내성을 가지는 특징이 있다. 특히, 김치에서 분리한 본 발명의 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8은 α-글루코시다아제 저해 활성이 81.83%로 우수하고, α-아밀라아제 저해 활성이 10.2%이며, pH 2.5 및 3에서 내산성, 65℃에서 내열성, NaCl 10% 및 15 %에서 내염성 및 옥스갈(oxgall) 0.3% 및 0.5 % 내담즙성을 가지는 특징이 있다(실시예 1-2 내지 1-8 참조).

본 발명의 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8은 α-글루코시다아제 저해 활성이 α-아밀라아제 저해 활성에 비해 8배 이상인 균주로서, 탄수화물의 소당화를 억제하여 혈당 상승을 억제하고 식욕을 억제하여 비만을 억제하면서도, α-아밀라아제의 지나친 저해에 의해 분해되지 못한 전분의 대장 유입과 이로 인해 발생하는 대장 내 전분분해 세균류의 비정상적인발효로 인한 복부팽만, 설사 등의 부작용이 감소될 수 있다.

또한 본 발명의 락토바실러스 플란타륨은 pH 2.5에서 53.93 %이상 생존하여 강한 내산성을 가지고 NaCl 15 %에서 90 % 이상 생존하여 강한 내염성을 가지며 옥스갈(oxgall) 0.5 %에서 100 % 이상의 생존율을 보여 강한 내담즙성을 가진다.

본 발명의 락토바실러스 플란타륨은 내산성, 내염성 및 내담즙성이 우수하기 때문에, 상기 균주를 경구 섭취하면 생체 내의 가혹한 환경, 즉 pH가 3 이하로 내려가는 산성 환경과 위장 및 소장에서 분비되는 소화효소 및 담즙산에 의해서도 생육이 우수해 장으로 도달할 수 있는 확률이 증가 될 수 있다.

또한 본 발명의 락토바실러스 플란타륨은 항생제 내성이 우수하기 때문에 항생제의 존재하에서도 생육이 가능해 생체 내에서 유익한 기능을 할 수 있다(실시예 1-7 참조).

상기와 같은 α-글루코시다아제 억제 활성이 우수하고 α-아밀라아제 활성 저해능이 있으며, 내산성 및 내염성, 내열성, 항생제내성, 내담즙성이 우수한 특징을 모두 가지고 있는 락토바실러스 플란타륨 균주는 본 발명에서 처음으로 제공되는 것이다.

따라서 본 발명의 유산균은 인간 및 동물의 건강증진을 위한 용도, 즉 대사증후군 예방 및 치료용 약학 조성물, 생균제 조성물, 사료용 조성물 또는 식품 첨가용 조성물로 사용될 수 있다. 상기 조성물은 본 발명의 락토바실러스 플란타륨의 생균, 건조균 또는 배양물을 유효성분으로 포함할 수 있으며, 부형제 또는 담체를 추가로 포함할 수 있다. 상기 배양물은 액체배지에서 배양한 배양액 자체, 상기 배양액을 여과 또는 원심분리하여 균주를 제거한 여액(원심분리한 상등액)등을 포함한다. 조성물 내 락토바실러스 플란타륨의 함량은 조성물의 용도 및 제형에 따라 달라질 수 있다.

상기 조성물은 다양한 제형과 방법으로 제조 및 투여될 수 있다. 예를 들어, 락토바실러스 플란타륨 또는 이의 배양물을 약제학적 분야에서 통상적으로 사용하는 담체 및 향료와 혼합하여 정제(tablet), 트로키(troche), 캡슐(caps㎕e), 엘릭실(elixir), 시럽(syrup), 산제(powder), 현탁제(suspension) 또는 과립제(gran㎕e) 등의 형태로 제조 및 투여될 수 있다. 상기 담체로는 결합제, 활탁제, 붕해제, 부형제, 가용화제, 분산제, 안정화제, 현탁화제 등을 사용할 수 있다. 투여방식은 경구, 비경구 또는 도포법을 사용할 수 있으나, 바람직하게는 경구 투여하는 것이 바람직하다. 또한, 투여용량은 체내에서 활성성분의 흡수도, 불활성율 및 배설속도, 피투여자의 연령, 성별, 상태 등에 따라 적절히 선택할 수 있다.

본 발명에 따른 락토바실러스 플란타륨 또는 이의 배양물은 김치, 음료, 이유식, 유제품 등의 식품에 대한 식품첨가제로 사용될 수 있다. 아울러, 본 발명의 락토바실러스 플란타륨은 발효식품의 제조를 위한 스타터(starter)로 사용될 수 있다. 상기 발효식품은 치즈, 김치, 발효생식제품 등을 포함한다. 본 발명의 락토바실러스 플란타륨을 이용한 발효식품은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라 제조될 수 있다.

본 발명에 따른 락토바실러스 플란타륨은 김치를 제조하는데 사용할 수 있다. 바람직하게는 소금으로 절인 배추에 고춧가루, 마늘, 생강, 대파, 무채, 설탕과 같은 일반적인 김치 양념들을 혼합한 후, 본 발명의 락토바실러스 플란타륨의 배양물을 첨가하여 김치를 제조할 수 있다. 상기 본 발명의 락토바실러스 플란타륨의 배양물은 김치 전체 중량에 대하여 0.1 ~ 5 중량% 로 첨가하는 것이 바람직하며, 1 중량% 로 첨가하는 것이 가장 바람직하다.

본 발명에 따른 락토바실러스 플란타륨은 통상적인 락토바실러스 속 미생물의 배양방법에 의해 대량으로 배양할 수 있다. 배양배지로는 탄소원, 질소원, 비타민 및 미네랄로 구성된 배지를 사용할 수 있으며, 예컨대, MRS(Man-Rogosa-Sharp)배지 또는 배추즙 배지를 사용할 수 있다. 상기 배추즙 배지는 절임배추를 분쇄하고 착즙한 후, 멸균하여 사용할 수 있다. 미생물의 배양은 통상의 락토바실러스 미생물의 배양 조건상에서 가능하며, 예컨대 25 ℃ 내지 37 ℃에서 18 시간 내지 48 시간 정도 배양할 수 있으며, 보다 바람직하게는 37 ℃에서 20시간 정도 배양할 수 있다. 배양액 중의 배양 배지를 제거하고 농축된 균체만을 회수하기 위해 원심분리 또는 여과 과정을 거칠 수 있으며, 이러한 단계는 당업자가 필요에 따라 수행할 수 있다. 농축된 균체는 통상적인 방법에 따라 냉동(frozen)하거나 또는 냉동건조(lyophilized)하여 그 활성을 잃지 않도록 보존할 수 있다.

이상 살펴본 바와 같이, 본 발명의 신규한 김치 유산균인 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8은 α-글루코시다아제 억제 활성이 우수하고 α-아밀라아제 활성 저해능이 있으며, 내산성 및 내열성, 내염성, 항생제 내성, 내담즙성이 우수한 특징이 있다. 따라서 본 발명의 유산균은 대사증후군 예방용 약학 조성물, 생균제 조성물, 사료용 조성물, 식품첨가용 조성물 및 발효식품의 제조에 다양하게 이용될 수 있다. 특히, 본 발명에 따른 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8을 대사증후군 예방에 효과적이다.

본 발명의 유산균은 탄수화물 소화 효소인 α-글루코시다아제 및 α-아밀라아제의 활성을 억제함으로써 저당류의 체내 흡수를 억제하여 혈당의 상승을 막고, 영양분의 과다 섭취를 줄임으로써 당뇨병 또는 비만증을 포함하는 대사증후군의 예방 및 치료에 효과를 나타내며, 소화되지 않는 탄수화물로 인하여 포만감을 유도할 수 있어 다이어트 효과를 나타낼 수 있다.

따라서, 이러한 본 발명의 유산균은 당뇨병 또는 비만증을 포함하는 대사증후군의 예방 및 치료를 위해 사용 될 수 있으며, 또한 식품 또는 음식에 첨가하여 탄수화물의 소화를 억제함으로써 섭취자의 혈당을 조절하고, 포만감을 유도할 수 있는 다이어트 보조효과가 있는 건강식품의 용도로 사용될 수 있다

도 1은 실시예 1의 실험에 사용한 600개의 유산균 중에서 α-글루코시다아제의 활성 저해율이 높았던 상위 20개 균주의 활성 저해율을 나타낸 그래프이다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1>

<1-1> 김치로부터 유산균의 분리

통상적인 김치 제조방법으로 제조된 김치 30 종을 선택하고, 상기 김치를 유산균 분리 김치시료로 사용하였다. 상기 김치시료를 0.85 % 식염수로 10 배 희석하였고, 0.1 ㎖씩 MRS 아가 배지(MRS 아가, 디프코(Difco.); 박토 펩톤 10 g, 소고기추출물 10 g, 효모추출물 5 g, 글루코스 20 g, 트윈 801 g, 구연산 2 g, 제2 인산칼륨 2 g, 초산나트륨 5 g, 황산망간 0.1 g, 황산마그네슘 0.05 g, 아가 15 g/증류수 1 ℓ)플레이트에 접종한 후, 유리막대로 도말하였다. 이후, 플레이트를 25 ℃의 항온 배양기에서 2일 동안 배양하였다. 생성된 각각의 콜로니를 MRS 아가 플레이트에 획선 접종하였고, 25 ℃에서 2일 동안 배양하여 총 600 개의 유산균 콜로니를 분리하였다.

<1-2> α-glucosidase 저해 활성이 우수한 유산균의 분리

상기 실시예 <1-1>에서 분리된 600개의 유산균들 중에서α-glucosidase 저해 활성이 우수한 유산균을 선발하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.

본 실험예에서는 알파글루코시다아제는 탄수화물 소화과정의 첫단계 효소로서 탄수화물 분해속도의 조절효소이다. 유산균배양액의 알파글루코시다아제의 활성저해 효과를 관찰하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.

유산균은 MRS 배지에서 37℃, 24시간 배양후 12,000rpm의 원심분리를 통해 배양상등액을 이용하여 α-글루코시다아제 저해활성 측정을 하였다.

α-글루코시다아제 저해활성 측정은 Dahlqvist 방법 (Assay of intestinal disaccharide. Enzymol. Biol. Clin.(1970)을 변형하여 수행하였다. 구체적으로, 0.1M phosphate buffer(pH7.2) 0.05ml와 α-글루코시다아제 용액 (2unit/ml) 0.05 ml, 후보균주 배양액 200 ㎕를 혼합한 후, 37℃에서 5분간 전반응하였다. 기질물질인 2mM PNPG 용액 100 ㎕를 가하여 37℃에서 30분간 반응시킨 후, 1M Na2CO3 용액 100㎕를 가하여 반응을 중지시킨 후, 생성된 α-니트로페놀의 양을 405nm에서 흡광도로 측정하였다. 대조구는 후보균주 배양액 또는 상등액을 첨가하지 않고 포스페이트 버퍼를 사용하여 α-글루코시다아제의 활성을 측정하여 이를 대조구로 하여 그의 상대적인 저해율을 계산하였다. 흡광도 측정하여 저해율 측정하여 상위 20개 균주를 표시하였다(도 1). α-글루코시다아제 억제 활성이 가장 높게 나타난 유산균은 DSR J1-8균주로 나타났다.

<1-3> α-amylaes 저해 활성이 유산균의 분리

상기 실시예 <1-1>에서 분리된 600개의 유산균들 중에서α-amylase 저해 활성이 낮은 유산균을 선발하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.

유산균은 MRS 배지에서 37℃, 24시간 배양후 12,000rpm의 원심분리를 통해 배양상등액을 이용하여 α-아밀라아제 저해활성 측정을 하였다.

유산균 배양상등액100 ㎕와 800 ㎕의 potassium phosphate buffer(pH6.8)를 첨가하고 여기에 100㎕ potato starch(difco)1ml을 첨가한후 37℃ 워터배스에서 15분간 반응시켰다. 2ml의 DNS 시약 (3,5-dinitro-salicylic acid 10mg/ml, sodium potassium tartarate.4 H20 3g/ml)를 첨가하여 반응을 종결시킨후 DNS 발색을 위해 끓는물에서 5분간 가열하였다(miller, 1959). 상온으로 식힌후 10ml의 증류수를 첨가하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 37℃에서 효소반응을 시키지 않고 DNS시약을 넣어 블랭크로 사용하였고, 배양상등액 대신 100㎕의 증류수를 첨가하여 대조구로 사용하였다.

알파 아밀라아제 저해율 측정하여 상위 20개 균주를 표시하였다(표1).

Isolate	Inhibitory activity(%)	Isolate	Inhibitory activity(%)
DSR J1-1	38.11	DSR J1-11	15.03
DSR J1-2	26.25	DSR J1-12	31.23
DSR J1-3	31.12	DSR J1-13	31.98
DSR J1-4	16.33	DSR J1-14	32.12
DSR J1-5	11.21	DSR J1-15	12.76
DSR J1-6	28.92	DSR J1-16	30.25
DSR J1-7	14.75	DSR J1-17	9.88
DSR J1-8	10.2	DSR J1-18	33.18
DSR J1-9	17.39	DSR J1-19	20.65
DSR J1-10	24.85	DSR J1-20	19.37

기존의 혈당조절을 위해 알파-글루코시다아제 저해제를 사용하는 경우 α-아밀라아제(α-amylase)의 지나친 저해에 의해 분해되지 못한 전분의 대장 유입과 이로 인해 발생하는 대장 내 전분분해 세균류의 비정상적인발효로 인한 복부팽만, 설사 등의 부작용이 보고되고 있다.

따라서, 본 발명에서는 α-아밀라아제 억제 활성이 가장 낮게 나타난 유산균주 4종중에서 α-글리코시다아제 억제 활성이 높은 DSR J1-8균주를 최종 선발하였다.

<1-4> 선별된 유산균의 동정

a. 버지스의 분류 세균학 매뉴얼에 따른 분석

상기 실시예 <1-1,2>에서 선발된 유산균을 단일 콜로니로 분리한 후, 버지스의 분류 세균학 매뉴얼(Bergy's manual of systematic bacteriology)에 준하여 형태학적 및 생화학적 특성을 조사하였고, 그람 염색을 수행하였다. 그 결과, 상기 분리된 균주는 그람 양성 균주이며 간균의 형태를 갖고 있음을 확인할 수 있었다(표 2).

특성	Lactobacillus plantarum DSR J1-8
그람(Gram)	+
콜로니 형태(Colony form)	막대형(rod)
콜로니 색깔(Colony color)	노란색(yellow)
운동성(Motility)	-
카탈라제(Catalase)	-
발효형태	호모(Homo)
포자(Spore)	-
15 ℃에서 생육	+
NaCl 4 %에서 생육	+

b. API 시스템을 이용한 분석

이후, 상기 균주는 API 시스템(API system; La Balme-les-Grottes, France)으로 동정하였다. 우선, 멸균 백금이로 균 콜로니를 각각 취한 후 멸균 증류수 2 ㎖에 부유시켰다. 다시 상기 균액을 멸균 증류수 5 ㎖에 API 50CH 키트(BioMerieux, France)에서 제공되는 맥팔란드 표준 용액 No.2(MccFaland Standard Solution No.2)의 농도로 균액을 부유시켰다. 상기 부유액을 API 50CH 키트의 액체배지에 첨가하여 균질화시킨 후, API 50CH 키트의 50개 각 튜브에 200 ㎕씩 접종하였다. 미네랄 오일로 튜브 위를 엎어준 후, 30 ℃에서 48 시간 동안 배양시켰다. 상기 배양액을 API 시스템으로 분석하여 49종의 탄수화물 발효패턴을 확인한 후, 이 결과를 ATB 동정 컴퓨터 시스템에 입력하여 동정하였다.

그 결과, 상기 실시예 <1-2>에서 선발된 DSR J1-8 유산균은 하기 표 3의 탄수화물 발효패턴을 갖고 있는 락토바실러스 속에 속하는 균주인 것으로 판명되었다.

대조군	-	D-만노즈	+	살리신	+	겐티오비오즈	+
글리세롤	-	L-솔보즈	-	셀로비즈	+	D-튜라노즈	_
에리쓰리톨	-	람노즈	+	말토즈	+	D-리조즈	-
D-아라비노즈	-	둘시톨	-	락토즈	+	D-타가토즈	-
L-아라비노즈	+	이노시톨	-	멜리비오즈	+	D-퓨코즈	-
리보오즈	+	만니톨	+	사카로즈	+	L-퓨코즈	-
D-자일로즈	-	솔비톨	+	트레할로즈	+	D-아라비톨	-
L-자일로즈	-	D-만노시드	-	이눌린	+	L-아라비톨	-
아도니톨	-	D-글루코시드	-	멜레지토즈	+	글루코네이트	+
자일로시드	-	글루코사민	+	D-라피노즈	+	2-세토-글루코네이트	-
갈락토즈	+	아미그달린	+	아미돈	-	5-세토-글루코네이트	-
D-글루코즈	+	알부틴	+	글리코겐	-
D-프록토즈	+	에스큘린	+	자일리톨	+

c. 16S rDNA 염기서열 분석

당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 상기 선별된 유산균들의 16S rDNA의 염기서열을 분석하였다. 그 결과, 상기 DSR J1-8 유산균의 16S rDNA 염기서열(서열번호 1)은 락토바실러스 플란타륨의 16S rDNA 염기서열과 99 % 동일함을 알 수 있었다.

따라서, 본 발명자들은 DSR J1-8 유산균을 "락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8로 명명하고 이를 한국미생물보존센터(Korean Culture Center of Microorganisms)에 2010년 12월 10일자로 기탁하였다[기탁번호: KCCM11141P].

<1-4> 내산성 테스트

상기 실시예 <1-2,3>에서 선발된 알파아밀라아제 및 알파글로시다제를 가장 우수하게 억제하는 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8균주를 염산을 이용하여 pH 2.5, 3.0으로 조정한 MRS 브로스(MRS 브로스, Difco.; 박토 펩톤 10 g, 소고기추출물 10 g, 효모추출물 5 g, 글루코스 20 g, 트윈 801 g, 구연산 2 g, 제2인산칼륨 2 g, 초산나트륨 5 g, 황산망간 0.1 g, 황산마그네슘 0.05 g/증류수 1ℓ) 10 ㎖에 각각 접종하였다. 이후, 37 ℃에서 2 시간 동안 배양하면서 생균수를 조사하였다.

생존율(%)/pH	pH 2.5	pH 3.0
Lactobacillus plantarum DSR J1-8	53.93	65.27
Lactobacillus plantarum KCTC3108	31.71	42.05

그 결과, 상기 표4에 나타낸 봐와 같이, 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8 은 pH 2.5 및 3.0에서 생육이 활발하고, 특히 pH 2.5에서도 53.93 % 이상 생존하며, pH 3에서 약 65.27 % 이상의 생존율을 나타내어 내산성이 강한 것으로 나타났다.

<1-5> 내염성 테스트

상기 실시예 <1-2>에서 선발된 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8균주를 염화나트륨(NaCl)로 10 및 15 %로 조정한 MRS 브로스 10 ㎖에 각각 접종하였다. 이후, 37 ℃에서 2시간 배양하면서 상기 염농도에서 균주의 생육을 관찰하였다.

생존율 (%)/NaCl (%)	10%	15%
Lactobacillus plantarum DSR J1-8	100	90
Lactobacillus plantarum KCTC3108	85	68

그 결과, 상기 표5에 나타낸 봐와 같이, 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8 유산균은 염화나트륨 10 및 15 %에서 생육이 활발하며, 특히 염화나트륨 15 %에서도 90 % 이상의 생존율을 나타내었다.

<1-6> 내담즙성 테스트

상기 실시예 <1-2>에서 선발된 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8 을 옥스갈(oxgall)로 0.3 및 0.5% 로 조정한 MRS 브로스 10㎖에 각각 접종하였다. 이후, 37 ℃에서 2 시간 배양하면서 상기 인공 담즙 농도에서의 균주의 생육을 관찰하였다.

생존율 (%)/Oxgall (%)	0.3%	0.5%
Lactobacillus plantarum DSR J1-8	118.14	100
Lactobacillus plantarum KCTC3108	51.43	32.45

그 결과, 상기 표6에 나타낸 봐와 같이, 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8은 옥스갈(oxgall) 0.3 및 0.5 %에서 생육이 활발하며, 특히 옥스갈(oxgall) 0.5 %에서도 100% 생존율을 나타내었다.

<1-7> 항생제 내성 테스트

상기 실시예 <1-2>에서 선발된 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8균주를 MRS 고체배지에 접종하고, 항생제가 포함된 필터(직경 6 mm)를 올려놓고 24시간 배양하여 항생제에 의한 형성된 억제 환의 크기를 측정하였다. 억제 환의 크기가 작을수록 항생제에 대한 내성이 크다는 것을 의미한다. 하기 표 6는 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8에 대한 항생제 내성정도를 나타낸 것이다.

항생제	락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8(mm)
테트라사이클린(30㎕)	20
에리트로마이신(15㎕)	12
앰피실린(10㎕)	18
페니실린(10IU/IE/UI)	22
세파로신(30㎕)	15

상기 표 7에 기재된 것과 같이 본 발명의 DSR3-CK10 유산균은 항생제 내성이 우수하여 항생제와 함께 정장용, 생균제, 사료용, 식품첨가용, 항균용, 약학적 조성물 및 발효식품에 사용하더라도 그 활성이 유지되어 유용하게 이용될 수 있음을 알 수 있었다.

<1-8> 내열성 테스트

상기 실시예 <1-2>에서 선발된 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8 균주를 MRS 브로스 10 ㎖에 각각 1%씩 접종한후, 65 ℃에서 5분, 15분 정치한 후 균주의 생육을 관찰하였다.

생존율 (%)/65℃	5분	15분
Lactobacillus plantarum DSR J1-8	68.14	42.01
Lactobacillus plantarum KCTC3108	38.65	25.23

그 결과, 상기 표8 에 나타낸 봐와 같이 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8 은 65℃에서 5분에서 68.14%　생존율을 나타내었다.

<제조예 1: 생균제 조성물의 제조>

본 발명의 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8 유산균을 2.0 % 글루코스, 1.0 % 펩톤, 1.0 % 효모추출물, 0.2 % 제이인산, 0.05 % 황산마그네슘 및 0.05 % 시스테인이 함유된 배지에 접종하여 37 ℃에서 2 일 동안 호기적으로 배양하였다. 탈지강, 대두박, 옥분 및 당밀이 각각 3:1:1:1의 중량비로 혼합되어 들어 있는 고체 배양기에 상기 각 균주의 배양액을 10 중량%로 접종한 후, 여기에 물을 45 내지 60 중량%로 첨가하였다. 이를 40 ℃에서 3 일 동안 교반시키면서 혐기적으로 고체발효를 수행하여 생균제 조성물을 제조하였으며, 이때 제조된 생균제 조성물은 본 발명의 유산균이 1×10⁸ cfu/g 이상으로 포함되도록 하였다.

<제조예 2: 식품첨가용 조성물의 제조>

본 발명의 락토바실러스 플란타륨 DSR J1-8 유산균을 각각 2.0 % 글루코스, 1.0 % 펩톤, 1.0 % 효모추출물, 0.2 % 제이인산 및 0.05 % 황산마그네슘, 0.05 % 시스테인 등이 함유된 배지에 접종하여 37 ℃에서 2 일간 호기적으로 배양하였다. 분유 또는 탈지유(skim milk) 및 전분 또는 유당을 1:1 중량비로 혼합한 혼합물에 상기 배양액을 60 중량%로 첨가한 후, 이를 -70℃ 이하에서 급속 냉동시킨 후, -60 ℃에서 36 시간 동안 동결 건조시켜 식품첨가용 조성물을 제조하였다. 이때, 동결건조시 수분 증발 효율을 높이기 위한 열판의 온도는 30 ℃로 하였으며, 이때 제조된 식품첨가용 조성물은 본 발명의 유산균이 1×10⁸ cfu/g 이상으로 포함되도록 하였다.

<제조예 3: 약학 조성물의 제조>

상기 제조예 1 및 2 에서 얻어진 생균 조성물 분말을 각각 통상적인 방법에 따라 정제, 환제 및 캡슐제로 성형하여 약학조성물로 제조하였으며, 이때 제조된 조성물은 본 발명의 유산균이 1×10⁸ cfu/g 이상으로 포함되도록 하였다.

<제조예 4: 사료용 조성물의 제조>

본 발명의 락토바실러스 플란타륨 DSR3-M2 유산균을 2.0 % 글루코스, 1.0 % 펩톤, 1.0 % 효모추출물, 0.2 % 제이인산, 0.05 % 황산마그네슘 및 0.05 % 시스테인이 함유된 배지에 접종하여 37 ℃에서 2일 동안 호기적으로 배양하였다. 각 균주의 배양액과 부형제 탈지강을 1:1의 중량비로 단순 혼합한 후 40 ℃ 이하에서 건조시켰으며, 건조된 혼합물을 분쇄하여 사료용 조성물을 제조하였다. 이때 제조된 사료용 조성물은 본 발명의 유산균이 1×10⁸ cfu/g 이상으로 포함되도록 하였다.

한국미생물보존센터(국외) KCCM11141P 20101210

<110> DAESANG FNF CORPORATION <120> Plant origin lactic acid bacteria Lactobacillus plantarum DSR J1-8 having preventing effect of metabolic syndrome and its use <130> s-101214 <160> 1 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1477 <212> DNA <213> Lactobacillus plantarum <400> 1 aagtcgacga actctggtat tgattggtgc ttgcatcatg atttacattt gagtgagtgg 60 cgaactggtg agtaacacgt gggaaacctg cccagaagcg ggggataaca cctggaaaca 120 gatgctaata ccgcataaca acttggaccg catggtccga gtttgaaaga tggcttcggc 180 tatcactttt ggatggtccc gcggcgtatt agctagatgg tggggtaacg gctcaccatg 240 gcaatgatac gtagccgacc tgagagggta atcggccaca ttgggactga gacacggccc 300 aaactcctac gggaggcagc agtagggaat cttccacaat ggacgaaagt ctgatggagc 360 aacgccgcgt gagtgaagaa gggtttcggc tcgtaaaact ctgttgttaa agaagaacat 420 atctgagagt aactgttcag gtattgacgg tatttaacca gaaagccacg gctaactacg 480 tgccagcagc cgcggtaata cgtaggtggc aagcgttgtc cggatttatt gggcgtaaag 540 cgagcgcagg cggtttttta agtctgatgt gaaagccttc ggctcaaccg aagaagtgca 600 tcggaaactg ggaaacttga gtgcagaaga ggacagtgga actccatgtg tagcggtgaa 660 atgcgtagat atatggaaga acaccagtgg cgaaggcggc tgtctggtct gtaactgacg 720 ctgaggctcg aaagtatggg tagcaaacag gattagatac cctggtagtc cataccgtaa 780 acgatgaatg ctaagtgttg gagggtttcc gcccttcagt gctgcagcta acgcattaag 840 cattccgcct ggggagtacg gccgcaaggc tgaaactcaa aggaattgac gggggcccgc 900 acaagcggtg gagcatgtgg tttaattcga agctacgcga agaaccttac caggtcttga 960 catactatgc aaatctaaga gattagacgt tcccttcggg gacatggata caggtggtgc 1020 atggttgtcg tcagctcgtg tcgtgagatg ttgggttaag tcccgcaacg agcgcaaccc 1080 ttattatcag ttgccagcat taagttgggc actctggtga gactgccggt gacaaaccgg 1140 aggaaggtgg ggatgacgtc aaatcatcat gccccttatg acctgggcta cacacgtgct 1200 acaatggatg gtacaacgag ttgcgaactc gcgagagtaa gctaatctct taaagccatt 1260 ctcagttcgg attgtaggct gcaactcgcc tacatgaagt cggaatcgct agtaatcgcg 1320 gatcagcatg ccgcggtgaa tacgttcccg ggccttgtac acaccgcccg tcacaccatg 1380 agagtttgta acacccaaag tcggtggggt aaccttttag gaaccagccg cctaaggtgg 1440 gacagatgat tagggtgaag tcgtnacaag gcagatg 1477

Claims (7)

1. α-글루코시다아제 및 α-아밀라아제의 억제 활성이 우수한 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum) DSR J1-8[기탁번호: KCCM11141P].
   
2. 제1항의 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum) DSR J1-8[기탁번호: KCCM11141P] 또는 이의 배양물을 함유하는 혈당 강하용 조성물.
   
3. 제1항의 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum) DSR J1-8[기탁번호: KCCM11141P] 또는 이의 배양물을 함유하는 생균제 조성물.
   
4. 제1항의 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum) DSR J1-8[기탁번호: KCCM11141P] 또는 이의 배양물을 함유하는 사료용 조성물.
   
5. 제1항의 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum) DSR J1-8[기탁번호: KCCM11141P] 또는 이의 배양물을 함유하는 식품첨가용 조성물.
   
6. 제1항의 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum) DSR J1-8[기탁번호: KCCM11141P] 또는 이의 배양물을 함유하는 발효식품.
   
7. 제1항의 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum) DSR J1-8[기탁번호: KCCM11141P] 또는 이의 배양물을 스타터(starter)로 이용하여 발효식품을 제조하는 방법.

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