KR100676124B1

KR100676124B1 - 엔-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)프로폭시]피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드 및 인슐린 내성 치료에 있어서의 이의 용도

Info

Publication number: KR100676124B1
Application number: KR1020017010932A
Authority: KR
Inventors: 마리아 퀴르디; 카탈린 비로; 카롤리 나기; 라스즐로 위뢰그디; 지타 사카이; 예노 스질베레키; 타마스 모교로시; 마그돌나 퇴뢰크; 안드라스 코마로미; 에데 마르반요스; 미할리 바라바스; 미할리네 카르도스; 졸탄 나기; 라스즐로 코라니; 멜린다 나기
Original assignee: 비오렉스 쿠타토 에쉬 훼레스테 에르테
Priority date: 1999-02-26
Filing date: 2000-02-24
Publication date: 2007-01-31
Also published as: IL144866A; CZ297386B6; BG65178B1; PL350915A1; UA72495C2; ZA200106488B; PT1163224E; RU2250901C2; EE04961B1; SI1163224T1; RS50083B; SK11582001A3; AU779096B2; IL144866A0; HUP9900475D0; HRP20010584B1; DK1163224T3; WO2000050403A1; EP1163224B1; KR20010102410A

Abstract

본 발명은 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드, 이의 입체 이성질체 및 이의 산부가염, 이들을 함유하는 약제 조성물, 병리적 인슐린 내성의 치료, 이와 관련된 병리적 상태의 치료, 및 당뇨병으로 유도된 만성 합병증, 특히 망막증, 신경병 및 신증의 동시 치료 및 예방 및/또는 당뇨병으로 인한 병리적으로 감소된 말초 신경 재생의 동시 증가에 의한 병리적 인슐린 내성의 치료 및 이와 관련된 병리적 상태의 치료용으로서의 이들 화합물의 용도, 및 치료방법에 관한 것이다.

Description

엔-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)프로폭시]피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드 및 인슐린 내성 치료에 있어서의 이의 용도{N-[2-hydroxy-3-(1-piperidinyl)propoxy]pyridine-1-oxide-3-carboximidoyl chloride and its use in the treatment of insulin resistance}

본 발명은 O-(3-피페리디노-2-히드록시-1-프로필)히드록심산할라이드 유도체, 이의 약제학적 용도 및 유효성분으로서 이 유도체를 함유하는 약제에 관한 것으로, 즉 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드, 이의 입체 이성질체 및 이들의 산부가염에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 인슐린 내성 치료에 있어서의 이들 화합물의 용도 및 유효성분으로서 이들 유도체를 함유하는 약제에 관한 것이다.

O-(3-피페리디노-2-히드록시-1-프로필)히드록심산할라이드 유도체는 유럽특허 명세서 제0 417 210 B1호의 공보에 이미 공지되어 있다. 이 특허 명세서에 따르면, 이들 화합물은 선택적 베타 블로킹 효과를 나타내므로, 당뇨병성 혈관증, 특히 당뇨병성 망막증 및 당뇨병성 신증의 치료에 적합하다.

PCT 공개 제WO 98/06400호의 공보에 의하면, O-(3-피페리디노-2-히드록시-1-프로필)히드록심산할라이드 유도체 및 유사한 구조를 지닌 다른 화합물은 혈관 내 피세포를 보호하고 재생하는데 유효하므로, 내피의 기능부전으로 인한 질병의 치료를 위한 적절한 활성제이다.

여러가지 히드록실아민 유도체, 그 중에서도 특히 O-(3-피페리디노-2-히드록시-1-프로필)히드록심산할라이드 유도체의 샤프롱 발현(chaperon-expression) 증가 효과 및 샤프롱계의 기능과 관련된 질병의 치료에 있어서의 이들 화합물의 용도가 WO 97/16439에 공지되어 있다. 이 특허 출원서에 있어서, O-(3-피페리디노-2-히드록시-1-프로필)-3-피리딜히드록심산클로라이드 N-옥사이드 유도체(그 중에서도 특히)가 신규 화합물로서 정의되어 청구되어 있다. 그러나, 이 제조방법은 피페리딘-N-옥사이드와, 피페리딘 및 피리딘 환에 N-옥사이드 그룹을 함유하는 화합물에 대해서만 기재되어 있다. 본 발명의 화합물은 상기 출원서에 언급되어 있지 않다.

인슐린 내성은 인슐린의 효과를 차단하는 병리적 상태이다. 이의 형성이 독립적으로 가능하지만, 일반적으로 당뇨병과 관련되어 있다. 인슐린 내성으로 인해, 신체는 탄수화물, 지질 및 단백질 대사를 위해 더 높은 그리고 더 높은 농도의 인슐린을 필요로 한다. 이는 극도로 높은 인슐린 농도를 초래한다. 장기간 지속되는 높은 인슐린 농도는 독립적 심장-뇌-혈관 위험 인자임이 입증되었다.

인슐린 내성의 감소는 두 타입의 당뇨병에 있어서 필수적이다. 당뇨병 타입 2의 경우에는 주요한 병인 인자로서 존재하는 반면에, 당뇨병 타입 1의 경우에는 인슐린 내성은 치료 목적으로 외인적으로 가해진 과잉량의 인슐린 및 글루코스 독성으로 인한 것이다.

인슐린 내성 감소를 위해 여러가지 활성제가 제공되어 왔다. 이들 중, 가장 중요한 것은 인슐린 증감제 제품으로, 이들 중 가장 알려진 제제는 티아졸리딘-디온 그룹의 멤버인 트로글리타존이다(참조문헌: A.R.Saltiel et al., Diabetes 45/12/1996 pp. 1661-1669, and S. Kumar et al., Diabetologia 1996/39/6 pp. 701-709). 이 화합물의 주요 효과는 기저 상태 및 글루코스 자극 후에 말초적인 인슐린 수요를 저하시킴으로써 인슐린 내성을 감소시키는 것이다. 그 결과, 탄수화물 대사를 향상시킬 뿐 아니라, 과지질혈증 및 병리적 지혈과 같은 고 인슐린 농도의 2차 효과로서 발생하는 다수의 병리적 일탈(deviation)을 보정한다. 이의 궁극적인 포지티브 효과는 심장 혈관 위험의 감소이다. 그러나, 단점으로는 심각한 주로 간독성 부작용을 일으킬 수 있으므로, 이의 사용을 제한하고 충분한 주의를 요한다.

O-(3-피페리디노-2-히드록시-1-프로필)히드록심산할라이드 분야의 연구중에, 비모클로몰(bimoclomol)로서 공지된 O-(3-피페리디노-2-히드록시-1-프로필)-3-피리딘히드록심산클로라이드말레이트를 상세히 연구조사하여, 이의 가장 중요한 효과가 만성 신경병의 병리적 결과에 대한 것으로 밝혀졌다. 당뇨병에 있어서, 운동 및 지각 신경 전도 속도 결손을 상당히 향상시키고, 또한 자율 신경병으로 인한 병리적 일탈에 유리한 효과를 나타낸다. 또한, 동물 실험 및 사람에 대한 페이스(phase) Ⅱ 테스트에 있어서는 병리적 당뇨병성 요 알부민 배출을 감소시키고, 동물 실험에 있어서는 당뇨병성 망막증으로 인한 병리적 조직 및 전기생리변경을 감소시킨다. 그러나, 인슐린 내성의 감소에 있어서는 비모클로몰이 효과적이지 않다.

현재, 인슐린 내성을 감소시킬 수 있고, 동시에 세가지의 만성 당뇨병 합병증 모두로 인한 일탈을 효과적으로 치료할 수 있는 약제는 구할 수 없다.

적절한 활성물질의 연구조사에 있어서, 비모클로몰의 N-옥사이드 유도체에 대해 생물학적 활성을 테스트하였다. 예비 테스트에 있어서, STZ 당뇨병에 걸린 위스타 래트(Wistar rat)의 운동 및 지각 신경병에 대한 비모클로몰의 세가지의 N-옥사이드 유도체의 효율에 대하여 연구하였다. 스트렙토조토신으로 유발된 당뇨병으로 인한 말초 운동 및 지각 신경 전도 속도 결손을 개선하는데 있어서의 3개의 비모클로몰 N-옥사이드 유도체의 효율은 실험 2에 상세히 기재된 방법을 이용하여 측정되었다. 결과는 하기 표에 요약되어 있다.

상기 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 비모클로몰의 피리딘 N-옥사이드 유도체는 비모클로몰과 동등하지만, 2개의 다른 N-옥사이드 유도체는 운동 및 지각 신경병에 대한 상당히 약한 효과를 갖는다. 이 경험을 기초로 하여, 비모클로몰의 피리딘 N-옥사이드 유도체, 즉 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-1-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드에 대하여 연속적으로 연구조사를 행하였다.

이러한 연구조사결과, N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드가 상술한 세가지의 주요 당뇨병 합병증의 치료에 있어서 비모클로몰과 동일하거나 몇몇 경우에는 비모클로몰보다 큰 효과를 나타내는 것 이외에도 말초적인 인슐린 내성을 감소시키는 예기치 않은 결과를 얻었다. 이러한 특성으로 인해, 화합물은 만성 당뇨병 합병증, 특히 망막증, 신경병 및 신증의 치료 및 말초적인 인슐린 내성의 동시 감소에 적합하나, 또한 비당뇨병성 병리적 인슐린 내성 및 이와 관련된 모든 병리적 상태의 치료에도 적합하다.

N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드의 유리한 생물학적 특성은 하기 실험에 의해 입증되었다. 이들 테스트에 있어서, N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드말레이트 또는 적절한 광학활성 화합물의 말레이트가 테스트 화합물로서 사용되었다. 실험의 설명에 있어서, 라세미 화합물의 말레이트는 화합물 A로서 명명되고, 광학활성 입체 이성질체의 말레이트는 항상 구체적으로 지적된다.

실험 1:

당 내성이 결손된 인슐린 내성을 갖는 살찐 인슐린과잉혈증 주커(Zucker) fa/fa 래트의 탄수화물 대사에 대한 화합물 A 및 비모클로몰에 의한 치료 효과, 2개월간 치료

물질 및 방법:

실험에 있어서, 소위 주커 fa/fa 래트(Charles River Laboratories Inc.)를 사용한다. 일란성 동물에 있어서, 비만증, 인슐린 내성, 고 혈액 인슐린 레벨, 결손된 당 내성 및 과트리글리세리드혈증은 시상하부의 렙틴 수용체 변이에 기인한다. 상기 특성으로 인해, 이는 초기의 타입 2 당뇨병의 수용된 모델이다.

동물을 연구조사개시시에 24시간 동안 각각의 대사 상자에 놓고, 치료 1개월 또는 2개월 후에 24시간 동안 요를 수집한다.

동물에게 14∼22주간에 1일에 1회 섭식을 조절하여 테스트 물질 또는 생리 식염수를 제공한다.

혈액 및 요의 생화학적 파라미터를 코닥 엑타켐(Kodak Ectachem) 700 자동 분석기로 측정한다. 요의 전체 단백질 레벨을 595㎚에서 브래드포드 스테이닝(Bradford staining(Hitachi U-3200))을 사용하여 분광 광도계로 측정한다. 혈청의 인슐린 농도를 래트 항인슐린 항체를 사용하여 RIA방법으로 측정한다.

수축기 혈압, 확장기 혈압 및 심장 속도를 레티카(Letica) 200 자동분석기로 래트 테일(소위 테일 커프(tail cuff) 방법)에 대하여 주 1회 측정한다. 치료 2개월 후에, 당 내성 레벨을 복강내 당 내성 테스트로 측정한다(2g/㎏ ip.)

결과:

경구적으로 20㎎/㎏의 1일 투여량으로 비모클로몰을 투여한 결과, 공복시 혈당 레벨을 상당히 감소시키나, 공복시 인슐린 농도에는 효과를 나타내지 않는다.

이전 데이터와 비교하여, 화합물 A를 경구적으로 20㎎/㎏의 1일 투여량으로 투여한 결과, 공복시 혈당 및 인슐린 농도를 상당히 감소시키고, 인슐린 농도는 약 50%로 감소시킨다. 결과를 표 1 및 도 1에 나타낸다.

표 1:

공복시 혈당 및 인슐린 농도에 대한 화합물 A 및 비모클로몰의 효과

공복시 혈당(mmol/l) 공복시 인슐린(ng/ml)

(평균 ±SE) (평균 ±SE)

야윈 대조군 7.197 ±0.315*** 3.727 ±0.302***

살찐 대조군 9.774 ±0.342 22.882 ±3.790

화합물 A 8.267 ±0.436** 11.176 ±1.955**

비모클로몰 8.179 ±0.316*** 29.362 ±9.211

** p < 0.001, *** p < 0.0001, 살찐 대조군과 비교

복강내 당 내성 테스트 과정 중에, 비모클로몰이나 화합물 A는 혈당 곡선(AUC)하의 영역에 효과를 나타나지 않았다. 그러나, 인슐린의 AUC의 경우에는, 2개의 화합물간에 차이가 있다. 즉, 비모클로몰은 아무런 효과를 나타내지 않고, 화합물 A는 야윈 대조군과 동일한 레벨로 상당히 감소시켰다. 결과를 표 2 및 도 2에 나타낸다.

표는 0∼60분 사이의 곡선 하의 영역(AUC)의 값을 포함한다.

표 2:

당 내성이 결손된 인슐린 내성을 갖는 살찐 인슐린과잉혈증 주커 fa/fa 래트의 당 내성에 대한 비모클로몰 및 화합물 A에 의한 치료 효과, 2개월간 치료

혈당(AUC) 인슐린(AUC)

(평균 ±SE) (평균 ±SE)

야윈 대조군 823.69 ±60.66*** 599.49 ±86.76***

살찐 대조군 1417.00 ±159.88 1986.34 ±213.84

화합물 A 1418.40 ±194.57 790.35 ±166.08**

비모클로몰 1286.86 ±131.59 2337.71 ±590.49

*** p < 0.0001, 살찐 대조군과 비교

요약:

화합물 A는 말초적인 인슐린 내성을 상당히 감소시키고, 비모클로몰은 그렇지 않다.

실험 2:

STZ 당뇨병에 걸린 위스타 래트의 말초 신경병으로 인한 병리적 일탈에 대한 화합물 A 및 비모클로몰에 의한 치료 효과, 1개월간 치료

물질 및 방법:

실험에 있어서, 메일(male) 위스타 래트(Charles River Laboratories Inc.)를 사용한다. 실험 개시시에 이들의 체중이 340∼370g이었다. 생리 식염수에 용해된 스트렙토조토신(STZ, Sigma, St. Louis, MO) 1회분 45㎎/㎏ 투여량을 정맥내 투여하여 당뇨병을 유발시킨다. 15mmol/l 이상의 값을 허용하는 혈당 테스트로 1일후에 당뇨병 발전과정을 체크한다.

테스트 및 기준 물질을 하루에 1회 동물에게 경구투여한다.

신경 전도 속도(NCV)를 측정하기 위해, 드 코니그 및 기스펜(De Konig and Gispen)에 의해 변형된 스텐리(Stanley) 방법을 사용한다. 히포노름(1㎎/㎏ ip., Janssen, Tilburg, Denmark), 플루아니손(10㎎/㎖), 및 펜타닐시트레이트(0.2㎎/㎖)를 동시에 투여하여 동물을 마취시킨다. 나중에, 표준점에서 좌측 좌골 신경 및 경골 신경을 자극한다. 니혼-고덴(Nihon-Kohden; model SEN-1104, Japan) 스티뮬레이터를 통해, 백금 침 전극으로 초최대 자극(스퀘어 임펄스, 0.03ms)을 이용한다. 발바닥 근에서 옮겨와서 미오그라프(Elema-

, Stockholm, Sweden)로 증배한 근전도(EMG)를 매트랩 포 윈도즈(Matlab for Windows; Mathwork, Inc, UK) 프로그램에 의해 분석한다. 당뇨병으로 인한 NCV 손상도를 m/s로 나타낸다. 치료 효율을 백분율(%)로 이것과 비교한다. 통계적 계산은 짝을 이루지 않은 t-테스트 및 단일 판정기준 ANOVA 테스트(Newman-Keuls post hoc test와 함께)(Graphpad Instat, San Diego, CA)에 의해 이루어졌다.

결과:

1일 1회 20㎎/㎏의 투여량으로 비모클로몰을 투여하고, 1일 1회 5㎎/㎏의 투여량으로 화합물 A를 투여한 결과, 당뇨병 동물에서 동일한 정도로 운동(MNCV) 및 지각(SNCV) 신경 전도 속도를 상당히 향상시켰다. 화합물 A의 투여량을 10㎎/㎏를 초과하게 증가시킨 결과, 효과는 증가하지 않았다. 결과를 표 3에 나타낸다.

표 3:

STZ 당뇨병(STZ-DB) 위스타 래트의 신경 전도 속도(NCV) 결손에 대한 화합물 A 및 비모클로몰에 의한 치료 효과

신경 전도 속도(NCV)

그룹 MNCV SNCV

m/s 향상율% m/s 향상율%

대조군 60.9 ±0.2 62.3 ±0.3

STZ-DB 대조군 43.7 ±0.2 44.7 ±0.2

STZ-DB+비모클로몰

20㎎/㎏ 57.4 ±0.2*** 79.7 58.5 ±0.6*** 77.9

STZ-DB+화합물 A

5㎎/㎏ 57.4 ±0.3*** 79.5 58.4 ±0.3*** 77.6

10㎎/㎏ 59.2 ±0.3*** 90.4 60.4 ±0.4*** 89.0

20㎎/㎏ 59.1 ±0.3*** 89.8 60.1 ±0.3*** 87.4

*** p < 0.001

실험 3:

STZ 당뇨병에 걸린 위스타 래트의 당뇨병성 자율 신경병으로 인한 병리적 일탈에 대한 화합물 A 및 비모클로몰에 의한 치료 효과, 1개월간 치료후

물질 및 방법:

실험에 있어서, 실험 개시시에 이들의 체중이 340∼370g인 메일 위스타 래트(Charles River Laboratories Inc.)를 사용한다. 생리 식염수에 용해된 스트렙토조토신(STZ, Sigma, St. Louis, MO) 1회분 45㎎/㎏ 투여량을 정맥내 투여하여 당뇨병을 유발시킨다. 15mmol/l 이상의 값을 허용하는 혈당 테스트로 1일후에 당뇨병 발전과정을 체크한다.

테스트 및 기준 물질을 하루에 1회 동물에게 경구투여한다.

60㎎/㎏ 펜토바르비탈소듐(Nembutal, Sanofi, Phylaxia)의 복강내 투여에 의해 이루어진 마취하에 실험을 행한다. 이후에, 기관내 튜브 또는 폴리에틸렌 캐뉼러를 대퇴동맥 및 정맥으로 삽입한다. 동맥 카테터를 수축기 혈압 및 확장기 혈압의 동시 측정을 위해 압력변환기에 연결한다(해모시스(Haemosys) 컴퓨터 프로그램을 갖춘 온라인 자동 측정 및 전송(forwarding) 시스템). 20분간의 평형 기간후에, 하기의 물질을 정맥내 투여한다: 노르아드레날린 5㎍/㎏ iv. - 이소프로테레놀 0.4㎍/㎏ iv. - 미주신경 자극(2V, 기간: 500㎲ec, 지연: 1㎳ec). 물질의 효과를 10분간 모니터한다.

결과:
자율 신경병은 당뇨병 및 다른 질병(예: 간질환)의 경우에 있어서의 심장병 돌연사의 주요 원인 중의 하나이다. 따라서, 자율 신경병으로 인한 병리적 일탈을 효과적으로 감소시킬 수 있는 모든 제품은 매우 중요하다.

실험에서, 비모클로몰 또는 화합물 A의 20㎎/㎏ 1회분 투여량을 매일 투여한 결과, 자율 신경병으로 인한 여러가지 병리적 일탈을 상당히 감소시켰다.

본 발명자들의 결과 요약 및 비교는 표 4에 나타낸다.

표의 이중 화살표는 테스트 물질이 다른 물질보다 통계상 훨씬 더 효과적이다는 것을 나타낸다.

표 4:

실험 4:

STZ 당뇨병에 걸린 위스타 래트의 초기 당뇨병성 망막증으로 인한 병리적 조직 변경에 대한 화합물 A 및 비모클로몰에 의한 치료 효과, 1개월간 치료

물질 및 방법:

테스트 및 기준 물질을 하루에 1회 동물에게 경구투여한다.

마취(Calypsovet, 125㎎/㎏ ip., Richter Rt., Hungary)후에, 안구 적출하여 인산염 완충액에 용해된 4% 포름알데히드에 고정시킨다.

그 후에, 이들을 파라핀(배지 DDM P800, 봉매(embedding) 센터: Lignifer L-120-92-014, 착색제: Shandon Eliott, 미크로톰: Leica SM 2000 R, 현미경: Jenaval Karl Zeiss Jena)에 매몰시킨다. 여러가지 안구의 6 미크론 단편을 준비하여, 헤마톡실린/에오신(Fluka) 및 PAS( 페리오드산-시프(Schiff), Fluka) 염색법을 이용한다. 40×및 100×의 배율로 광학현미경 평가를 행한다. 표준 샘플의 사진 및 슬라이드 포지티브를 준비한다.

지정된 샘플에 대하여 조직 평가를 행하고, 그룹 분할은 시험관이 알지 못한다. 망막의 병리적 일탈을 0-20의 스케일로 등급을 매기고, 렌즈의 병리적 일탈을 0-3의 스케일로 등급을 매긴다.

스태티스티카(Statistica) 4.5(SatSoft, USA) 프로그램으로 통계 계산을 행한다. 네가티브 경우에 대한 주어진 값은 0.1이고, 박스 앤 위스커 플롯 그래프(Box and Whisker plot graph)를 또한 준비한다.

실험에서 각 그룹에 대하여, 평균 ±SE(표준오차)값을 계산하여, 비(非)모수 만-위트니 U-테스트(non-parametric Mann-Whitney U-test; Graphpad Instat, San Diego, CA)의 수단으로 비교를 행한다.

결과:

실험에서, 화합물 A의 5㎎/㎏ 또는 비모클로몰의 20㎎/㎏ 1회분 투여량을 매일 투여한 결과, 치료 1개월후에 당뇨병성 망막증으로 유도된 병리적 조직 변경을 상당히 향상시켰다. 이들 2개의 화합물 중, 화합물 A는 치료하지 않은 당뇨병 동물과 비교하여 통계상 훨씬 더 효과적이다. 결과를 표 5에 나타낸다.

표 5:
초기 STZ-당뇨병성 막망증으로 유도된 병리적 조직 변경에 대한 화합물 A 및 비모클로몰에 의한 치료 효과

스코어 값

그룹 평균 ± SE 향상율%

삭제

대조군 1.785 ±0.342 100

STZ 당뇨병 10.571 ±1.962

STZ 당뇨병 +

20㎎/㎏ 비모클로몰 5.185 ±1.019* 61.3

STZ 당뇨병 +

5㎎/㎏ 화합물 A 4.028 ±0.961** 74.5

* p < 0.05, ** p < 0.01, 치료하지 않은 당뇨병 동물과 비교

실험 5:

STZ 당뇨병 위스타 래트의 당뇨병성 신증으로 인한 병리적 요 단백질 손실에 대한 화합물 A 및 비모클로몰에 의한 치료 효과, 1개월간 치료후

물질 및 방법:

테스트 및 기준 물질을 하루에 1회 동물에게 경구투여한다.

24시간의 요(urine) 수집시에, 동물을 각각의 대사 상자(metabolic cage) 에 놓는다. 이 기간 동안에, 물은 무제한으로 공급하나, 음식은 주지 않는다. 음식의 단백질 함량에 의한 가능한 오염을 방지하도록 후자의 수단이 필요하다. 박테리아 오염을 방지하도록 티몰(Thymol) 결정(Reanal 3135-1-08-38)이 놓인 보정된 유리 용기에 요를 수집한다.

측정하기 전에, 요 샘플을 원심분리(2500rpm)하여, 페이퍼 필터(Whatmann 1)를 통해 여과한다. 필요에 따라, 이들을 측정할 때까지 -20℃에서 보관한다.

브래드포드 염색법(Sigma B-6916, St. Louis, MO)으로 요의 전체 단백질 함량을 측정하고, 분광 광도계(Hitachi-U-3200)로 색 강도를 검출한다.

결과:

비모클로몰 20㎎/㎏의 1회분 투여량을 매일 투여한 결과, STZ 당뇨병으로 유도된 높은 요 단백질 손실을 상당히 감소시켰다. 화합물 A 10㎎/㎏의 1회분 투여량을 매일 투여한 결과, 요 단백질 손실을 그다지 감소시키지 않았다. 그러나, 화합물 A의 (+) 거울상 이성질체 5㎎/㎏의 1회분 투여량을 매일 투여한 결과, 당뇨병성 요 단백질 손실을 상당히 감소시켰다. 결과를 표 6에 나타낸다.

표 6:

STZ 당뇨병 위스타 래트의 당뇨병성 신증으로 인한 요 단백질 손실에 대한 화합물 A의 (+) 거울상 이성질체 및 비모클로몰에 의한 치료 효과

24시간의 요 단백질 손실(㎎/24h)

(평균 ±SE)

그룹

1.

STZ 당뇨병 8.302 ±2.40

STZ 당뇨병 +

비모클로몰, 20㎎/㎏ 3.66 ±1.39*

* p < 0.05

2.

STZ 당뇨병 13.03 ±2.63

STZ 당뇨병 +

화합물 A, 10㎎/㎏ 12.06 ±1.70

STZ 당뇨병 +

화합물 A의 (+) 거울상

이성질체, 5㎎/㎏ 5.61 ±1.08*

* p < 0.02

실험 6:

STZ 당뇨병에 걸린 위스타 래트의 말초 신경병의 병리적 변경에 대한 화합물 A, 및 이의 (+) 및 (-) 거울상 이성질체에 의한 1개월 치료후의 효과

물질 및 방법:

사용한 실험 동물 및 모든 방법은 실험 2에 기재된 바와 동일하다.

결과:

1일 1회 10㎎/㎏의 투여량으로 화합물 A 및 1일 1회 5㎎/㎏의 투여량으로 화합물 A(+)를 투여한 결과, 당뇨병 동물에서 동일한 활성을 나타내고 운동(MNCV) 및 지각(SNCV) 신경 전도 속도 결손을 상당히 향상시켰다. 이와 반대로, 화합물 A(-)는 각 파라미터에 대하여 그다지 향상 효과를 나타내지 않았다. 결과를 표 7에 나타낸다.

표 7:

STZ 당뇨병 위스타 래트의 신경 전도 속도(NCV) 결손에 대한 화합물 A, 및 이의 A(+) 및 A(-) 거울상 이성질체의 효과

신경 전도 속도(NCV)

그룹 MNCV SNCV

m/s 향상율% m/s 향상율%
----------------------------------------------------------------------

대조군 62.7 ±0.4 64.9 ±0.7

STZ-DB 대조군 46.9 ±0.9 48.4 ±1.0

STZ-DB+화합물 A 59.3 ±0.3*** 78.9 61.4 ±0.7*** 79.2

10㎎/㎏

STZ-DB+A(+) 58.1 ±0.5*** 71.3 59.7 ±0.5*** 68.5

5㎎/㎏

STZ-DB+A(-) 53.1 ±0.7*** 39.4 54.1 ±0.9*** 34.9
5㎎/㎏

*** p < 0.001, 치료하지 않은 STZ 당뇨병 동물과 비교

실험 7:

STZ 당뇨병에 걸린 래트의 초기 당뇨병성 망막증의 병리적 조직 변경에 대한 화합물 A, 및 이의 A(+) 및 A(-) 거울상 이성질체에 의한 2개월간 치료후의 효과

물질 및 방법:

사용한 실험 동물 및 모든 방법은 실험 4에 기재된 바와 동일하다.

결과:

1일 1회 5㎎/㎏의 투여량으로 A(+) 거울상 이성질체를 투여한 결과, 2개월 치료후에 당뇨병성 망막증으로 인한 렌즈형 및 망상 병리적 조직 변경을 상당히 향상시켰지만, 1일 1회 10㎎/㎏의 투여량의 화합물 A의 효과는 그다지 크지 않고, 1일 1회 5㎎/㎏의 투여량의 A(-) 거울상 이성질체는 효과적이지 않았다. 다만 망상 조직 변경에 관해서는, 회합물 A 및 이의 A(+) 거울상 이성질체는 효과적인 반면에, A(-) 거울상 이성질체의 효과는 그다지 크지 않았다. 결과를 표 8에 나타낸다.

표 8:

STZ 당뇨병에 걸린 래트의 초기 당뇨병성 망막증의 조직 변경에 대한 화합물 A, 및 이의 A(+) 및 A(-) 거울상 이성질체의 효과

실험 8:

식이 요법으로 유도된 인슐린 내성 동물 모델의 생체 내에서의 인슐린 의존성 글루코스 흡수에 대한 A(+) 및 A(-) 거울상 이성질체의 효과

물질 및 방법:

초기 체중이 300∼350g인 메일 위스타 래트(Charles River Laboratories Inc.)를 실험에 사용한다. 식이 요법 처리에 의해 인슐린 내성을 유도한다: 3주간 고지방(HF) 식품을 동물에게 준다. HF 식품에서 포화 지방 비율이 우세하고 전체 1일 칼로리 섭취량의 70%를 준다. A(+) 및 A(-) 거울상 이성질체를 20㎎/㎏/day의 투여량으로 예방용으로 1일 1회 공급한다.

3주간의 치료 종료시에 하기 파라미터를 조사한다: 1. 혈청의 탄수화물 및 지질 파라미터 및 2. 글루코스 흡수(uptake)의 정량 측정에 대한 현재 가장 정확한 방법인 정상 혈중 글루코스 농도의(euglycaemic) 글램프 방법에 의해 생체 내의 인슐린 조절된 당 흡수(DeFronzo et al., American Journal of Physiology, 1979/237/E214-223 pages). 간략히, 상이한 동물 그룹의 공복시 혈당 농도는 동일해야 한다. 지각있는, 자유로이 움직이는, 만성적으로 삽입관(cannula)를 삽입한 래트에 대하여 실험을 행한다: 처음에 인슐린 주입(6.4 mU/㎏/min)을 개시하고, 이어서 정상 혈중 글루코스 농도 범위의 혈중 글루코스 농도를 유지하도록 평행-런(parallel-run) 연속적인 글루코스 주입을 행한다. 안정화후에, 주입된 글루코스의 양을 인슐린 감도의 정량 파라미터인 90분간(글루코스 주입률=GIR, ㎎/㎏/min) 측정한다.

결과:

1일 1회 20㎎/㎏의 투여량의 A(+) 및 A(-) 거울상 이성질체는 래트의 체중 및 식품 소비 및 공복시 혈중 글루코스 농도에 영향을 미치지 않았다. 이와는 반대로, 2개의 화합물은 HF 식품으로 유도된 높은 공복시 인슐린 및 트리글리세리드 농도를 표준화하고 또한 높은 근육 트리글리세리드 함량을 상당히 감소시켰다. 정상 혈중 글루코스 농도의 클램프 테스트는 HF 식품이 생체 내에서의 인슐린으로 조절된 글루코스 흡수를 상당히 억제시키는 것을 나타낸다: 대조군: 26.7+0.68㎎/㎏/min, HF 다이어트: 15.0+0.39㎎/㎏/min.

삭제

이러한 억제된 인슐린으로 조절된 글루코스 흡수는 2개의 거울상 이성질체에 의해 증가된다: HF+A(+): 20.5+0.89㎎/㎏/min 및 HF+A(-): 19.7+1.38㎎/㎏/min(두 경우에 있어서 p<0.01의 레벨로 상당히 증가). 이러한 결과에 따르면, 2개의 거울상 이성질체는 새로운 견지에서 본 발명의 화합물의 인슐린 내성 감소 작용을 입증하는 인슐린으로 조절된 글루코스 흡수를 증가시킨다.

실험 9:

상습 투여후의 주커 당뇨병성 지방 과다 래트에 있어서의 A(+) 거울상 이성 질체의 항당뇨병 활성

물질 및 방법:

일반적으로 당뇨병에 걸린 동물 모델을 선택하여, 주커 당뇨병 지방 과다(ZDF) 래트를 실험에 사용한다. 이 모델은 인슐린 내성을 지니고 살찌나, 당뇨병에 걸리지 않은 주커 fa/fa 동물 모델(실험 1 참조)의 당뇨병 변형체이다. ZDF 래트에서, 인슐린 내성 페이스에 앞서서 생후 7주에서 당뇨병이 나타난다.

생후 7주에서 당뇨병에 걸리지 않은 페이스에서 개시되어 6주간 연속된 2 ×20㎎/㎏/day의 투여량으로 처리하여 A(+) 거울상 이성질체의 효과를 조사한다.

임상 화학 파라미터를 표준방법으로 측정한다.

혈청 인슐린 농도를 최근에 개발된 방법(ELISA method, DRG International, Inc., U.S.A.)으로 측정한다.

결과:

A(+) 거울상 이상질체가 당뇨병 동물에서 강한 항당뇨병 활성을 갖는 새로운 결과로서 이 실험에서 알아냈다.

3주 및 5주 치료후에 얻어진 결과를 표 9에 나타낸다.

표 9:

공급된 혈청 글루코스 농도(mmol/l)

그룹 3주 5주

대조군 6.23 ±0.08 5.87 ±0.08

ZDF 18.56 ±1.94 21.28 ±1.65

ZDF+A(+)

2 ×20㎎/㎏ 10.82 ±1.36* 13.25 ±0.76**

* p < 0.02, ** p < 0.005, 치료하지 않은 ZDF와 비교

A(+) 거울상 이성질체에 의한 처리가 혈당 농도를 표준화할 수 없지만, 강한 항당뇨병 활성과 만성 당뇨병 합병증에 대한 이미 확인된 상당한 치유 효율의 조합 효과는 이 화합물에게 유일한 특성을 부여한다. A(+) 거울상 이성질체의 치료 적용 영역은 이러한 새로운 조합 효율에 기초하여 상당히 확장될 수 있다.

추가의 실험으로, 당뇨병의 병리적 합병증에 대한 이의 효능 이외에도, 본 발명의 화합물이 당뇨병으로 인한 말초 신경의 다른 손상의 치료에 유용하다는 결론을 얻었다. 이 결론은 하기의 신경 재생 실험의 결과에 의해 지지된다.

실험 10:

STZ 당뇨병 위스타 래트의 신경 재생에 대한 화합물 A 및 A(+) 거울상 이성질체의 치료 효과

물질 및 방법:

체중이 320∼350g인 위스타 래트에 대하여 실험을 행한다. 당뇨병은 실험 2에 기재된 바와 같이 유도되어 체크되었다. 3주간 당뇨병에 걸린 테스트 동물에 있어서, 냉동에 의해 좌측 좌골 신경에 상처를 입히고, 우측 좌골 신경을 상처입지 않은 대조군으로서 사용한다. 전위 경골근에서 옮겨온 근전도의 곡선 하의 영역(AUC)인 발바닥 자극에 의해 유발된 굴근 반사의 신호를 모니터함으로써 재생을 관찰한다. 자극 및 검출을 위해, 실험 2에 기재된 시스템을 사용한다. 10㎎/㎏ 의 1일 1회분 투여량의 화합물 A 및 5㎎/㎏의 1일 1회분 투여량의 A(+) 거울상 이성질체를 냉동에 의한 상처를 입힌 후에 5주간 투여한다.

결과:

당뇨병에 걸린지 3주 종말시에, 냉동으로 상처를 입히기 전에, 지각 신경병이 나타나서 양다리에 대한 AUC가 23-25% 감소되었다. 냉동에 의한 상처를 입힌 후 2주 동안에는 아무런 응답이 관찰되지 않았다. 신경 재생도는 5주간에 63%이었다. 화합물 A에 의해서는 재생이 73% 증진되었고, A(+) 거울상 이성질체는 93% 정도로 효과적이었다. 각각 A(+) 거울상 이성질체 및 화합물 A로 처리한 결과로서, 냉동하지 않은 신경에 있어서는 재생이 83% 및 다만 44% 관찰되었다. 따라서, A(+) 거울상 이성질체는 강한 신경 재생 효과를 갖는다.

N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드는 종래에는 공지되어 있지 않은 하기 절차에 의해 제조될 수 있다.

WO 97/16349에 기재된 산화방법에 따르면, 양쪽 환의 질소 원자에서 산화된 유도체, 또는 보다 소량의 시약으로 지방족환에서 산화된 유도체가 O-(3-피페리디노-2-히드록시-1-프로필)-3-피리딘히드록심산클로라이드로부터 제조될 수 있다. 왜냐하면 지방족환 질소 원자가 산화반응에서 우선적으로 반응하기 때문이다. 산화반응의 부위 선택성은 본 발명의 화합물의 제조를 위해 피린딘환을 향해야 하므로, 절차가 변경된다. 변경의 주요점은 피린딘환의 선택적 산화반응을 촉진시키기 위해, 과산화반응이 강산, 바람직하게는 메탄술폰산의 존재하에 수행되는데, 이는 지방족환 질소에 양성자를 가해 이의 산화를 방지하므로, 피리딘의 산화는 1차가 된 다는 점이다. 산화제로서, 모든 타입의 과산, 바람직하게는 과아세트산이 사용될 수 있다.

본 발명의 화합물의 광학활성 거울상 이성질체는 출발물질로서 적절한 광학활성 O-(3-피페리디노-2-히드록시-1-프로필)-3-피리딘히드록심산클로라이드 거울상 이성질체를 사용함으로써 제조되는데, 라세미 화합물을 분할함으로써, 예를 들면 EP 0 417 210 B1에 의해 제조될 수 있다. 반응 과정 중에, 분자의 키랄성은 손상되지 않고, 얻어진 생성물은 출발물질과 동일한 광학적 순도를 갖는다.

경우에 따라, 얻어지거나 이의 광학활성 거울상 이성질체 중의 하나인 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드는 공지 방법에 의해 무기산 또는 유기산을 사용하여 산부가염으로 변형될 수 있다.

N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드, 이의 광학활성 (+) 또는 (-) 거울상 이성질체, 모든 비율의 거울상 이성질체의 혼합물, 및 라세미 화합물, 또한 무기산 또는 유기산에 의한 상기 화합물로부터 생성된 산부가염은 본 발명의 대상을 구성한다. N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드의 모든 가능한 기하 이성질체 형태는 본 발명의 범위에 속한다. 용어 "N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드의 입체 이성질체"는 화합물의 모든 가능한 광학적 및 기하 이성질체를 명명한다.

본 발명에 따르면, 이들 화합물은 병리적 인슐린 내성의 치료 및 이와 관련 된 병리적 상태의 치료 및 예방에 사용된다.

본 발명의 특정 실시형태는 만성 당뇨병으로 유도된 합병증, 특히 망막증, 신경병 및 신증의 동시 치료 또는 예방, 및 병리적 인슐린 내성 및 이와 관련된 병리적 상태의 동시 치료 또는 예방에 사용된다.

본 발명의 다른 특정 실시형태에 다르면, N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드 또는 이의 입체 이성질체 또는 이의 산부가염은 병리적 인슐린 내성 및 이와 관련된 병리적 상태의 치료 및 당뇨병으로 유도된 병리적으로 감소된 말초 신경 재생의 동시 증가에 사용된다.

본 발명의 화합물은 사람 및 가축 치료에 사용될 수 있다.

따라서, 본 발명의 목적은 또한 환자에게 염기 또는 산부가염의 형태로 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드 또는 이의 입체 이성질체 중 하나를 투여하는 동안에, 병리적 인슐린 내성의 치료법 및 이와 관련된 병리적 상태의 치료 및 예방법을 포함한다. 본 발명의 절차 중 양호한 실시형태는 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드 또는 이의 입체 이성질체 중 하나, 또는 이의 산부가염이 당뇨병성 망막증, 신경병 또는 신증에 걸린 환자에 투여하는 경우이다.

또 하나의 특정 실시형태에 따르면, 본 발명의 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드 또는 이의 입체 이성질체 중 하나 또는 이의 산부가염이, 당뇨병으로 인한 신경 재생의 병리적 감소인 경우에 환자에게 투여하는 것이다.

화합물의 투여량은 환자의 상태 및 질환에 따르고, 1일 투여량은 0.1∼400㎎/㎏, 바람직하게는 0.1∼100㎎/㎏이다. 사람 치료에 있어서, 성인 환자에 대해서는 경구 투여량은 바람직하게는 10∼300㎎이고, 직장 투여의 경우에는 1∼15㎎ 이지만, 비경구적 투여의 경우에는 1∼15㎎이다. 이들 투여량은 특정 경우, 특히 경구적 치료에 있어서는 1일간 2∼3 더 작은 투여량으로 분할될 수 있는 투여량 단위 형태로 투여되는 것이 바람직하다.

바람직하게는, 라세미 화합물의 입체 이성질체, 가장 바람직하게는 (+) 거울상 이성질체가 사용된다. 이 경우에는, 상기 제한범위내의 소량의 유효성분이 치료에 충분하다.

치료에 적합한 약제도 또한 본 발명의 대상이다. 이들 약제 조성물은 통상적인 보조물질 및 담체 이외에도, 유효성분으로서 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드 또는 이의 입체 이성질체 중 하나, 또는 상기 화합물 중 하나의 산부가염을 함유한다.

본 발명의 약제 조성물은 사람 또는 가축 치료에 일반적으로 사용되는 고체 또는 유체 제제 형태로 제조될 수 있다. 단순 정제 또는 코팅 정제, 당제, 과립, 캡슐, 용액 또는 시럽은 경구 투여용으로, 직장 투여용으로는 좌약, 비경구적 투여용으로는 동결건조된(lyophilised) 또는 동결건조되지 않은(not lyophilized) 주사액 또는 주입액으로 제조될 수 있다. 이들은 통상적인 방법으로 제조될 수 있다. 경구용 제품은 미소 결정성 셀룰로스, 전분 또는 락토스 등의 충전제, 스테아르산 또는 스테아르산마그네슘 등의 윤활제, 당 등의 코팅재, 히드록시메틸셀룰로스 등의 피막형성재, 메틸파라벤 또는 사카린 등의 아로마 또는 감미제, 또는 착색제를 함유할 수 있다. 좌약은 보조제로서 코코넛 버터 또는 폴리에틸렌글리콜을 함유할 수 있다. 비경구용 제품은 유효물질 이외에도, 생리식염수를 함유할 수 있고, 특정 경우에는 프로필렌글리콜 등의 분산제 및 습윤제를 함유할 수 있다.

본 발명은 하기 실시예에 의해 예시된다.

실시예 1:

N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드(Z)-2-부텐디오에이트(1:1) 의 제조

N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-3-피리딘-카르복시미도일 클로라이드 40.4g(0.136mol)을 빙초산 238㎖와 메탄술폰산 13.0g(0.136mol)의 혼합물에 용해시킨다. 30% 과산화수소 용액 61.5㎖(0.591mol)를 60℃에서 가한다. 반응 혼합물을 60℃에서 3.5∼4시간 교반한다. 용액을 10℃로 냉각시킨 다음, 0.5M Na₂S₂O₅ 용액 91㎖를 가한다. 물-아세트산 혼합물 315㎖를 용액으로부터 증류하여 제거하고, 4N NaOH 용액 250㎖를 잔류물(pH=10.55)에 가하고 클로로포름으로 진탕시킨다. 클로로포름 상을 수세하고, 건조하여 목탄으로 처리한 다음에, 증발시킨다. 물을 잔류물에 가하여, 이소프로필에테르로 추출한 다음에 클로로포름으로 추출한다. 클로로포름 상을 건조시키고, 목탄으로 처리하여, 여과한 후에 증발하여 제거시킨다. 잔류물을 아세톤에 용해시키고, 말레인산을 사용하여 염으로 변환시킨다. 침전물을 여과하고, 아세톤으로 세정한 다음에 건조시킨다. 얻어진 생성물을 비등 에탄올로 결정화한다.

수율: 20g(35%)

Mp.: 150.5∼154.5℃

¹H-NMR(용매: DMSO; 기준: DMSO; ν= 300㎒)[ppm]: 8.55(s, 1H, 2-피리딘); 8.35(d, 1H, 6-피리딘); 7.68(d, 1H, 4-피리딘); 7.55(m, 1H, 5-피리딘); 6.00(s, 2H, CH=CH); 4.23-4.48(m, 3H, CH-OH 및 NOCH₂); 2.95-3.50(m, 6H, 3 ×NCH₂); 1.20-1.90(m, 6H, 피페리딘: 3 ×CH₂)

¹³C-NMR(용매: DMSO; 기준: DMSO; ν= 300㎒)[ppm]: 167.6(2C, 2COOH); 141.0(2-피리딘); 136.8(6-피리딘); 136.4(2C, CH=CH); 133.4(CCl); 131.9(3-피리딘); 127.2(4-피리딘); 123.6(5-피리딘); 77.9(NOCH₂); 63.6(CH₂N); 58.3(CHOH); 52.0-55.0(2C, 피페리딘: 2 ×NCH₂); 22.6 및 21.7(3C, 피페리딘: 3 ×CH₂).

실시예 2:

(+)-/R/-N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드(Z)-2-부텐디오에이트(1:1) 의 제조

라세미 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-3-피리딘-카르복시미도일 클로라이드 대신에, 이의 R 거울상 이성질체를 사용한 것을 제외하고는 실시예 1에 기재된 절차를 반복실시한다. 화합물의 순수 형태를 헥산으로 결정화하여 조질 염기와 분리한다.

수율: 31%

Mp.: 91∼93℃

IR(KBr, ㎝^-1): 3167(br); 2840; 2710; 1575; 1560; 1480; 1443(br); 1293(s); 1279(s); 1093; 1053; 1043; 1023(s); 834(s); 810; 688

경우에 따라, 또한 실시예 1에 기재된 바와 같이 아세톤 용액 중의 조질 염기로부터 말레인산염을 제조할 수 있다.

수율: 33%

Mp.: 132.0∼133.0℃

거울상 이성질체 비율: 98/2(키랄 AGP 100 ×4㎜ 컬럼에 대한 HPLC 측정)

¹H-NMR 및 ¹³C-NMR: 라세미 화합물의 스펙트럼과 동일.

실시예 3:

(-)-/S/-N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드(Z)-2-부텐디오에이트(1:1) 의 제조

라세미 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-3-피리딘-카르복시미도일 클로라이드 대신에, S 거울상 이성질체를 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 절차를 반복실시한다.

수율: 34%

Mp.: 132.0∼133.0℃

¹H-NMR 및 ¹³C-NMR: 라세미 화합물의 스펙트럼과 동일.

실시예 4:

정제

(+)-N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-

피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드 20.0㎎

옥수수 녹말 100.0㎎

락토스 95.0㎎

탤크 4.5㎎

스테아르산마그네슘 0.5㎎

미세하게 분쇄된 유효성분을 보조물질과 혼합하고, 이 혼합물을 균질화하여 과립화한다. 그 다음에 과립을 정제로 압착한다.

실시예 5:

캡슐

(+)-N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-

옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드말레이트 20.0㎎

미세결정 셀룰로스 99.0㎎

비정형 이산화규소 1.0㎎

유효성분을 보조물질과 혼합하고, 이 혼합물을 균질화하여 젤라틴 캡슐에 충 전한다.

실시예 6:

당제

N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-

1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드말레이트 25.0㎎

락토스 82.5㎎

감자 녹말 33.0㎎

폴리비닐피롤리돈 4.0㎎

스테아르산마그네슘 0.5㎎

유효성분 및 폴리비닐피롤리돈을 에탄올에 용해시킨다. 락토스와 감자 녹말의 혼합믈을 유효성분의 과립 용액으로 균일하게 습윤시킨다. 여과후에, 과립을 50℃에서 건조시켜 스크린한다. 스테아르산마그네슘을 가하여, 정제 형태로 프레스한 다음에, 당 코팅으로 피복하여 밀납으로연마한다.

실시예 7:

좌약

(+)-N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-

옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드 4.0㎎

코코넛 버터 3.5g

고체 지방 50 좌약 물질 15.0g

코코넛 버터 및 좌약 물질을 40℃로 가열하고, 유효성분을 용융 혼합물에 분 산시킨 다음, 물질을 좌약 몰드에 충전한다.

실시예 8:

용액

(+)-N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-

옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드히드로클로라이드 500㎎

소르비톨 10g

사카린소듐 0.05g

이중 증류수(bidistilled water) 충분량 첨가 100㎖

실시예 9:

주사액

(+)-N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-

옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드말레이트 2㎎

생리식염수, 피로겐 비함유, 무균 충분량 첨가 2.0㎖

용액을 2㎖ 유리병에 주입하여 밀봉한다.

실시예 10:

주입액

주입액 500㎖를 하기 조성으로 제조한다:

N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-

옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드말레이트 20.0㎎

생리식염수, 피로겐 비함유, 무균 충분량 첨가 500㎖

Claims

N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드, 이의 입체 이성질체, 및 이의 산부가염.
당뇨병과 관련된 인슐린 내성의 치료용, 및 망막증(retinopathy), 신경병 및 신증(nephropathy)으로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 당뇨병과 관련된 병리적 상태의 치료용으로서의 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드, 이의 입체 이성질체, 또는 이의 산부가염을 포함하는 조성물.
당뇨병과 관련된 인슐린 내성의 치료용, 및 망막증(retinopathy), 신경병, 신증(nephropathy) 및 당뇨병으로 인한 말초신경재생의 병리적 감소로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 당뇨병과 관련된 하나 이상의 병리적 상태의 치료 및 예방용으로서의 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드, 이의 입체 이성질체, 또는 이의 산부가염을 포함하는 조성물.
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일반적으로 사용되는 약제학적으로 허용가능한 하나 이상의 보조제 및 담체와 혼합된 N-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)-프로폭시]-피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드 또는 이의 입체 이성질체 중 하나 또는 이의 산부가염을 활성성분으로서 함유하는, 당뇨병과 관련된 인슐린 내성의 치료용, 및 망막증, 신경병 및 신증으로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 당뇨병과 관련된 병리적 상태의 치료 및 예방용 약제 조성물.