KR100417703B1

KR100417703B1 - 항클라미디아제

Info

Publication number: KR100417703B1
Application number: KR10-1999-7012039A
Authority: KR
Inventors: 야마자키쯔토무; 하라유키히코
Original assignee: 미쓰이 노린 가부시키가이샤
Priority date: 1998-04-21
Filing date: 1999-04-19
Publication date: 2004-02-11
Also published as: EP1005862A4; DE69918781T2; CN1139382C; WO1999053916A1; JP3860612B2; CN1263463A; KR20010014010A; DE69918781D1; EP1005862A1; CA2294207C; CA2294207A1; EP1005862B1; AU741244B2; AU3171799A

Abstract

본 발명은 차 폴리페놀을 함유하는 것을 특징으로 하는 항클라미디아제 및 클라미디아 감염증의 치료에 유효량의 차 폴리페놀을 포함하는 조성물을 환자의 환부에 투여하는 것을 특징으로 하는 클라미디아 감염증의 예방 또는 치료방법에 관한 것이다.

본 발명에 사용하는 차 폴리페놀은 천연물인 차의 성분이다. 차는 예로부터 음료로서 널리 사용되어 왔고, 안전성에 관해서는 전혀 문제가 없다. 그 때문에, 차 폴리페놀도 인체에 대해 유해한 부작용이 없고, 또한 내성주가 출현할 걱정이 없는 것이다.

Description

항클라미디아제{Anti-Chlamydia agent}

클라미디아(Chlamydia)속 세균은 형상이 0.2∼1.5㎛의 구상 또는 타원상이며, 진핵생물의 세포 내에 편성 기생을 하는 특수한 세균이다.

숙주세포 밖에서의 존재형인 감염성 소체는 식작용에 의해 숙주세포의 액포 내로 들어가서 망상 구조체로 불리는 입자로 전환한다. 이 망상 구조체는 분열에 의해 수를 늘리고, 감염 후기에 감염성 소체로 성숙한다.

클라미디아는 트라코마(trachoma)나 봉입체 결막염(클라미디아·트라코마티스,Chlamydia trachomatis), 앵무새 열(클라미디아·시타시,C. psittaci)의 병원체로서, 또한 어린 아이에 있어서 폐렴, 인두염, 기관지염, 부비강염, 중이염(클라미디아·뉴모니아,C. pneumoniae) 등의 병원체로서 알려져 있다. 또한 클라미디아·트라코마티스는 세계적으로 유행하고 있는 성 감염증의 주된 병원 미생물이다.

클라미디아 감염증, 특히 클라미디아·트라코마티스(C. trachomatis) 감염증의 치료에는 통상 항생 물질의 경구투여가 행해지고 있다. 이 경우, 사용되는 항생 물질로서는 테트라사이클린(tetracycline)계의 독시사이클린(doxycycline), 마이노사이클린(mynocycline), 마크로라이드(macrolide)계의 클래리트로마이신 (clarithromycin), 뉴퀴놀론(neuquinolone)계의 오플록사신(ofloxacin), 토수플록사신(tosufloxacin), 스파르플록사신(sparfloxacin) 등이 있고, 치료를 위해서는 통상 2주간 정도의 경구투여가 행해진다. 그러나 항생 물질에 의한 치료의 경우, 부작용의 문제가 있기 때문에 테트라사이클린계나 뉴퀴놀론계의 약제는 임부에게 투여할 수 없다. 또한 항생 물질의 투여에는 약제 내성주의 출현이라는 위험이 항상 존재한다.

따라서 본 발명의 목적은 부작용이 없고, 또한 내성주가 출현할 걱정이 없는 항클라미디아제를 천연물 중에서 찾아내어 공급하는 것이다.

본 발명자 등은 상기 목적을 달성하기 위해 예의 연구를 한 결과, 차잎에 포함되어 있는 차 폴리페놀이 클라미디아속 세균에 대하여 현저한 증식저해활성을 갖고 있다는 것을 발견하였고, 이러한 발견을 토대로 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

본 발명에 사용하는 차는 예로부터 음료로서 널리 사용되어 왔고, 안전성에 관해서는 전혀 문제가 없는 것이다.

본 발명은 차 폴리페놀(tea polyphenol)을 함유하는 것을 특징으로 하는 항클라미디아(anti-Chlamydia)제에 관한 것이다.

본 발명은 차 폴리페놀을 함유하는 것을 특징으로 하는 항클라미디아제이다.

또한 본 발명은 클라미디아 감염증의 치료에 유효량의 차 폴리페놀을 포함하는 조성물을 환자의 환부에 투여하는 것을 특징으로 하는 클라미디아 감염증의 치료방법이다.

발명을 실시하기 위한 최선의 형태

본 발명에서, 차는 차나무(Camellia sinensis)로부터 얻어지는 잎, 줄기, 목부, 뿌리, 열매나 이들의 혼합물을 의미하지만, 통상은 음용 차잎을 원료로서 사용하는 것이 일반적이다.

음용 차잎에는 그 제법의 차이에 따라 여러 가지 종류가 있으며, 예컨대 홍차, 푸알차(pooar tea) 등의 발효차, 우롱차, 포종차(包種, paochong tea) 등의 반-발효차, 녹차 등의 비-발효차 및 이들의 혼합물이 있다. 본 발명에서는 이들 어느 것이나 사용할 수 있다.

본 발명에 사용하는 차 폴리페놀로서는, 상기 차 폴리페놀을 함유하는 차 자체나, 상기 차로부터 물, 열수, 유기용매, 함수 유기용매 등에 의해 추출하여 얻은 추출물, 또는 이들의 혼합물 등이 있다. 또한 차추출물을 유기용매 분획이나 흡착수지를 사용한 크로마토그래피에 의해 소망하는 정도로 정제하여 얻어지는 차 폴리페놀의 고함유물을 사용할 수도 있다. 이들의 방법에 관해서는 특공평 1-44234호 공보, 2-12474호 공보, 2-22755호 공보, 특개평 4-20589호 공보, 5-260907호, 8-109178호 공보 등에 기재되어 있다.

이렇게 하여 얻어진 차 추출물이나 차 폴리페놀의 고함유물에 포함되는 차 폴리페놀로서는, 구체적으로는 카테킨(catechin)류, 즉 (+)-카테킨, (-)-카테킨, (+)-갈로카테킨, (+)-에피갈로카테킨, (+)-갈로카테킨 갈레이트, (+)-에피갈로카테킨 갈레이트, (-)-에피카테킨, (-)-에피카테킨 갈레이트, (-)-카테킨 갈레이트, (-)-에피갈로카테킨, (-)-갈로카테킨, (-)-에피갈로카테킨 갈레이트, (-)-갈로카테킨갈레이트 등, 테아플라빈(teaflavin)류, 즉 테아플라빈 모노갈레이트 A, 테아플라빈 모노갈레이트 B, 테아플라빈 디갈레이트, 유리형 테아플라빈 등이 포함되고, 이들을 단독 또는 조합시켜 사용한다.

또한 상기 차 폴리페놀은 시판품을 입수할 수도 있으며, 예컨대 카테킨류를 주성분으로 하는 것으로서, 상품명: 폴리페논 60(미쯔이 노린사 제, 차 폴리페놀 함량 60% 이상), 상품명: 폴리페논 30(미쯔이 노린사 제, 차 폴리페놀 함량 30% 이상), 상품명: 폴리페논 70S(미쯔이 노린사 제, 차 폴리페놀 함량 70% 이상), 상품명: 폴리페논 E(미쯔이 노린사 제, 차 폴리페놀 함량 80% 이상) 등이 있다. 또한 테아플라빈류를 주성분으로 하는 것으로서, 상품명: 폴리페논 TF(미쯔이 노린사 제, 조성: 테아플라빈 16.8%, 테아플라빈 모노갈레이트 A 19.5%, 테아플라빈 모노갈레이트 B 16.1%, 테아플라빈 디갈레이트 31.4%) 등이 있다.

본 발명의 항클라미디아제는 클라미디아·트라코마티스 외에 클라미디아·뉴모니아, 클라미디아·시타시, 클라미디아·페코룸(C. pecorum) 등의 클라미디아속 세균에 적용된다.

본 발명에서, 상기 차 폴리페놀의 사용시에 적당한 용해화제, 현탁화제, 기제 등과 조합시켜 크림상, 페이스트상, 겔상, 유액상, 액상 등의 조성물로서 사용한다. 예컨대 차 폴리페놀 및/또는 차 폴리페놀 함유 소재를 정제수, 생리식염수, 함수 에탄올 등에 용해 및/또는 현탁하여 기도점막 등의 환부에 분무 및/또는 도포할 수 있다. 트라코마나 봉입체 결막염 등에는 차 폴리페놀을 정제수나 완충액 등에 용해하여 점안약(eyedropper)으로서 사용하거나, 연고(oinment) 기제에 혼화하여 안 연고(eyepaste)로서 사용할 수 있다. 또한 차 폴리페놀을 크림, 페이스트, 겔, 연고 등에 혼화하여 자궁경관 상피 등의 환부에 도포하는 것도 가능하다.

본 발명에서 크림, 페이스트, 겔, 연고의 기제로서는 예컨대 백색 바세린, 황색 바세린, 파라핀, 유동 파라핀, 스쿠알란, 세레신 등의 탄화수소; 라우린산, 스테아린산, 미리스틴산, 팔미틴산, 올레인산, 리놀산 등의 고급지방산; 스테아릴 알코올, 올레일 알코올, 라우릴 알코올, 세틸 알코올, 라놀린 알코올 등의 지방산 고급알코올; 세스퀴올레인산 소르비탄, 미리스틴산 이소프로필, 팔미틴산 이소프로필, 모노스테아린산 글리세린 등의 지방산 에스테르; 밀랍, 백색 밀랍, 라놀린 등의 왁스; 아보카도(avogado)유, 올리브유, 카카오유, 참기름, 콩기름, 피마자유, 마카다미아 너트(macadamia nut)유, 밍크(mink)유, 난황(yolk)유, 우지, 라아드(lard) 등의 유지; 아라비아검(gum arabi), 트라간트검(tragacanth gum), 구아검(guar gum), 카라야검(karaya gum), 덱스트린, 젤라틴, 카라기난, 셀락(shellac), 송진, 카세인, 카르복시메틸셀룰로오스나트륨, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 알긴산나트륨, 니트로셀룰로오스, 폴리비닐알코올, 폴리비닐피롤리돈, 폴리아크릴산 나트륨, 폴리비닐메틸 에테르, 라우로마크로골 (lauromacrogol), 폴리아미드 수지, 실리콘유 등의 고분자 화합물 중에서 1종류 또는 2종류 이상을 적절히 선택하여 사용할 수 있다.

또한 상기 제제에 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, dl-피롤리돈카르복실산 나트륨, 젖산나트륨, 소르비톨, 히알루론산나트륨 등의 보습제; 벤토나이트(bentonite), 카올린, 산화아연, 산화티탄 등의 무기물;파라옥시벤조산 메틸, 파라옥시벤조산 에틸, 파라옥시벤조산 프로필, 파라옥시벤조산 부틸 등의 안정화제; 염화 벤잘코늄, 염화 벤제토늄, 구연산, 구연산나트륨, 파라옥시벤조산, 붕산 등의 방부제; 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 등의 계면활성제 및 공지의 경피 흡수 촉진제 등을 필요에 따라 첨가할 수 있다.

이들의 경우, 약제 중의 차 폴리페놀의 농도는 환자의 증상, 연령, 사용부위, 사용방법 등에 따라 다르고, 특히 한정되지 않지만, 통상은 액상, 유액상 등의 형태로 사용하는 경우에는 0.2∼50mg/ml, 바람직하게는 1.6∼10mg/ml이다. 또한 크림, 페이스트, 겔, 연고 등의 형태로 사용하는 경우에는, 약제 중의 차 폴리페놀의 농도는 0.2∼200mg/g, 바람직하게는 10∼100mg/g이다.

본 발명의 항클라미디아제를 사용하는 경우, 클라미디아의 특수한 증식 사이클과 재발 예방을 고려하여, 치료를 어느 정도의 기간, 예컨대 2∼4주간 정도 계속하는 것이 바람직하다. 그 동안의 사용빈도는 환자의 증상, 사용부위, 사용방법, 사용하는 차 폴리페놀의 농도 등의 요인에 따라 다르지만, 하루에 1∼10회 정도의 사용을 매일 계속하는 것도 가능하다.

본 발명의 항클라미디아제의 유효성분인 차 폴리페놀은 안전성이 매우 높기 때문에, 예방적으로 사용할 수도 있다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 이들에 의해 제한되는 것은 아니다.

실시예 1

피검 클라미디아로서 클라미디아·트라코마티스주를 사용하고, 10⁴개의 봉입체를 형성하는 클라미디아를 각종 농도의 차 폴리페놀(상품명: 폴리페논 70S, 미쯔이 노린사 제, 카테킨 함량: (-)-에피갈로카테킨 18.3%, (-)-에피카테킨 8.6%, (-)-에피갈로카테킨 갈레이트 35.9%, (-)-에피카테킨 갈레이트 11.2%, (-)-갈로카테킨 갈레이트 3.5%)를 포함하는 SPG(수크로오스 포스페이트 글루타메이트)액 중, 37℃에서 30분, 60분 또는 90분 인큐베이트하였다. 또한 대조군으로서, 차 폴리페놀을 포함하지 않는 SPG액 중에서 동일하게 클라미디아를 인큐베이트하였다.

인큐베이트 종료 후, 각 용액을 단층배양한 HeLa229 세포에 접종하고, 1500rpm에서 60분간 원심흡착시켰다. 그 후, 접종액을 제거하고, 클라미디아 배양액(1μg/ml 시클로헥시미드 함유 이글(Eagle) 최소 필수배양액)을 가하여 37℃에서 72시간 배양하였다. 배양 종료 후, 배양액을 제거하고, 메탄올로써 고정한 후, 플루오레세인 이소티오시아네이트(FITC) 표지 항클라미디아·트라코마티스 단일클론 항체로써 염색하고, 클라미디아·트라코마티스의 봉입체 수를 계측하였다.

결과를 표 1에 나타내었다. 또한 표 중에는 각 처리에서의 봉입체 수를 대조군의 봉입체 수에 대한 상대값으로 나타내었다. 표로부터 알 수 있듯이, 차 폴리페놀을 0.2mg/ml 첨가하여 30분간 인큐베이트한 경우를 제외하면, 어느 쪽의 처리구에서도 클라미디아·트라코마티스 봉입체 수가 감소하였다. 특히 90분간 인큐베이트한 경우에는 차 폴리페놀을 1.6mg/ml 이상 첨가하면, 클라미디아·트라코마티스의 발육이 완전 저지되었다.

인큐베이션 차 폴리페놀 농도(mg/ml)시간(분) 0 0.2 0.4 0.8 1.6 3.2 6.4

30 1.00 1.00 0.58 0.34 0.18 0.10 0.0560 1.00 0.87 0.41 0.18 0.06 0.02 0.0290 1.00 0.55 0.07 0.03 0 0 0

실시예 2

피검 클라미디아로서 클라미디아·트라코마티스주를 사용하고, 10⁴개의 봉입체를 형성하는 클라미디아를 각종 농도의 (-)-에피카테킨 갈레이트 또는 (-)-에피갈로카테킨 갈레이트를 포함하는 SPG액 중, 37℃에서 90분간 인큐베이트하였다.

인큐베이트 종료 후, 각 용액을 단층배양한 Hela229 세포에 접종하고, 1500rpm에서 60분간 원심흡착시켰다. 그 후, 접종액을 제거하고, 클라미디아 배양액(1μg/ml 시클로헥시미드 함유 이글 최소 필수배양액)을 가하여 37℃에서 72시간 배양하였다. 배양 종료 후, 배양액을 제거하고, 메탄올로써 고정한 후, FITC 표지 항클라미디아·트라코마티스 단일클론 항체로써 염색하고, 클라미디아·트라코마티스의 봉입체 수를 계측하였다.

그 결과, (-)-에피카테킨 갈레이트 및 (-)-에피갈로카테킨 갈레이트는 각각 0.8mg/ml, 1.6mg/ml의 농도에서 클라미디아·트라코마티스의 발육을 완전 저지한다는 것을 알았다.

실시예 3

이하의 각 처방에 의해 항클라미디아제를 제조하였다. 또한 차 폴리페놀로서사용한 「폴리페논 E」의 조성 분석치는 다음과 같다.

「폴리페논 E」의 조성

(-)-에피갈로카테킨 12%

(-)-에피카테킨 9%

(-)-에피갈로카테킨 갈레이트 53%

(-)-갈로카테킨 갈레이트 6%

(-)-에피카테킨 갈레이트 4%

처방예 1

산화아연 200g

유동 파라핀 30g

백색 밀랍 32.5g

세스퀴올레인산 소르비탄 13g

백색 바세린 604.5g

「폴리페논 E」 120g

총량 1000g

처방예 2

백색 바세린 400g

세탄올 100g

백색 밀랍 50g

세스퀴올레인산 소르비탄 50g

라우로마크로골 5g

파라옥시벤조산 에틸 1g

(또는 파라옥시벤조산 메틸)

파라옥시벤조산 부틸 1g

(또는 파라옥시벤조산 프로필)

「폴리페논 E」 120g

정제수 273g

총량 1000g

처방예 3

백색 바세린 250g

스테아릴 알코올 200g

프로필렌글리콜 120g

폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 60 40g

모노스테아린산 글리세린 10g

파라옥시벤조산 메틸 1g

파라옥시벤조산 프로필 1g

「폴리페논 E」 120g

정제수 258g

총량 1000g

처방예 4

밀랍 330g

식물유 550g

「폴리페논 E」 120g

총량 1000g

처방예 5

백색 밀랍 50g

세스퀴올레인산 소르비탄 20g

백색 바세린 810g

「폴리페논 E」 120g

총량 1000g

처방예 6

마크로골(폴리에틸렌글리콜)40OO 440g

마크로골(폴리에틸렌글리콜)4OO 440g

「폴리페논 E」 120g

총량 100Og

처방예 7

스테아린산 200g

수산화칼륨 13g

글리세린 100g

파라옥시벤조산 메틸 1g

파라옥시벤조산 프로필 1g

「폴리페논 E」 120g

정제수 565g

총량 1000g

처방예 8

스테아린산 150g

팔미틴산 이소프로필 20g

라놀린 10g

소르비톨 56g

수산화칼륨 10g

파라옥시벤조산 메틸 1g

파라옥시벤조산 프로필 1g

「폴리페논 E」 120g

정제수 632g

총량 1000g

처방예 9

스테아린산 180g

유동 파라핀 20g

라놀린 5g

세스퀴올레인산 소르비탄 20g

수산화칼륨 8g

소르비톨 35g

파라옥시벤조산 메틸 1g

파라옥시벤조산 프로필 1g

「폴리페논 E」 120g

정제수 610g

총량 1000g

처방예 10

붕산 20mg

파라옥시벤조산 메틸 0.26mg

파라옥시벤조산 프로필 0.14mg

「폴리페논 E」 250mg

정제수 총량 1000mL

처방예 11

무수 인산 이수소나트륨 5.6mg

무수 인산 일수소나트륨 2.84mg

파라옥시벤조산 메틸 0.26mg

파라옥시벤조산 프로필 0.14mg

「폴리페논 E」 250mg

정제수 총량 1000mL

처방예 12

파라옥시벤조산 메틸 0.26mg

파라옥시벤조산 프로필 0.14mg

「폴리페논 E」 250mg

정제수 총량 1000mL

본 발명에 의해, 클라미디아 감염증에 대해 유효하고, 또한 안전성이 높은 예방, 치료약이 제공된다. 이 약제는 부작용이 없는데다, 항생 물질을 투여하는 경우와 달리 내성주가 출현할 걱정이 없다.

Claims

차 폴리페놀을 함유하는 것을 특징으로 하는 항클라미디아제.
제1항에 있어서, 차 폴리페놀이 (+)-카테킨, (-)-카테킨, (+)-갈로카테킨, (+)-에피갈로카테킨, (+)-갈로카테킨 갈레이트, (+)-에피갈로카테킨 갈레이트, (-)-에피카테킨, (-)-에피카테킨 갈레이트, (-)-카테킨 갈레이트, (-)-에피갈로카테킨, (-)-갈로카테킨, (-)-에피갈로카테킨 갈레이트, (-)-갈로카테킨 갈레이트, 테아플라빈 모노갈레이트 A, 테아플라빈 모노갈레이트 B, 테아플라빈 디갈레이트 및 유리형 테아플라빈으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 것인 항클라미디아제.
제1항에 있어서, 클라미디아가 클라미디아·트라코마티스인 항클라미디아제.
삭제
제1항에 있어서, 크림, 페이스트, 겔, 연고, 유액, 용액 또는 현탁액의 형태인 항클라미디아제.
제5항에 있어서, 차 폴리페놀 농도가 유액, 용액 또는 현탁액 등의 액상 형태로 사용하는 경우에는 0.2∼50mg/ml인 항클라미디아제.
제5항에 있어서, 차 폴리페놀 농도가 크림, 페이스트, 겔 또는 연고 등의 형태로 사용하는 경우에는 0.2~200㎎/g인 항클라미디아제.