KR100337978B1 - 황산콜리스틴을함유하는안정화된조성물 - Google Patents

Abstract

α-전분의 연속상에 분산된 황산콜리스틴 미세-입자와 β-전분의 미세-입자 와/또는 대두분말의 혼합물로 이루어지고 특별한 입자크기 범위를 갖는 상기 혼합물의 복합입자형태인 황산콜리스틴을 유효성분으로 함유하는 새로운 안정화된 조성물을 제공한다. 이 조성물의 황산콜리스틴 성분은 이 조성물을 혼합사료와 혼합한 다음 온수증기의 존재하에 120℃의 고온에서 펠릿형태로 압착성형했을때도 허용할수 없는 낮은 수준으로 비활성화되고 붕괴되는 것으로 부터 안정화된다.

Description

황산콜리스틴을 함유하는 안정화된 조성물{STABILIZED COMPOSITION COMPRISING COLISTIN SULFATE}

콜리스틴은 통상적으로 콜리스틴 A, B와 C로 이루어진 시클로펩티드 항생물질로 알려져 있다("머크 인덱스", 11판 페이지 2476(1989 참조)). 현재 판매되고 있는 황산콜리스틴은 통상 황산콜리스틴 A와 황산콜리스틴 B의 혼합물이다.

"황산콜리스틴"이란 용어는 이후 황산콜리스틴 A 그 자체 또는 시판하고 있는 황산콜리스틴 A와 소량의 황산콜리스틴 B의 혼합물을 의미하는 것으로 한다.

황산콜리스턴은 사육되는 유용한 동물의 성장을 촉진하기 위해서와 유용한 동물에 공급되는 사료의 소화효능을 강화하기 위하여, 유용한 동물, 예를들어, 돼지, 소와 닭을 사육하는 사료의 첨가제로 사용하는 것을 허용한 항생물질로서 공식으로 발표되었다. 더우기, 황산콜리스틴을 세균감염으로 인하여 발생되는 설사 또는 탈수증의 침해로부터 동물을 보호하기 위하여 유용한 동물에 투여하는 항생 의약으로 널리 사용되어 왔다.

그러나, 펠릿형태로 성형되고 상술한 목적으로 사료 첨가제로서 혼합된 황산 콜리스틴을 함유하고 있는 일반적인 혼합사료를 40℃의 상승된 온도에서 일개월 또는 그 이상의 기간동안 저장했을 때, 저장된 혼합사료에서 나타나는 항균 활성 또는 효능은 시간이 경과하면 바람직하지 못한 낮은 수준으로 감소될 수 있고, 상술한 펠릿형의 혼합사료에서 항균적 유효성분으로 존재하는 황산콜리스틴은 혼합사료내에서 안정성을 갖지 못한다. 또한 황산콜리스틴을 공기하에 장시간동안 상온에서 저장하면 황산콜리스틴은 실제적 범위까지 비활성화되지 않고 시간이 경과하여도 이의 항균 효능이 감소하지 않음을 알았다. 이러한 상황에서, 종래에는 한달 또는 그 이상동안 40℃에서 유지되는 펠릿형태의 혼합사료에 황산콜리스틴을 첨가제로서 혼합할 때 황산콜리스틴이 안정하지 못하는 정확한 이유를 알지 못했다.

따라서, 황산콜리스틴은 유효성분으로 함유하는 새로운 안정화된 항균성 조성물을 얻는 것이 많이 요구되었으며, 여기서 황산콜리스틴 성분은 이의 항균 활성 또는 효능이 불리한 저수준으로 감소하는 것을 안정화시킬 수 있고, 이는 상기 사료에 혼합되는 새로운 안정화된 항균성 조성물을 함유하는 펠릿형태의 혼합사료를한달 또는 그 이상의 기간동안 40℃에서 저장하더라도, 저장된 혼합사료는 저장하는 동안 또는 그후 실제적으로 감소된 항균 활성 또는 효능을 나타내지 않음을 확신할 수 있다.

본 발명의 목적은 현재 요망되고 있는 성질을 갖고 유효성분으로 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 항균성 조성물을 공급하는데 있다. 본 발명의 다른 목적은 쉽고 효과적인 방법으로 통상작업할 수 있는 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 항균성 조성물의 제조방법을 제공하는데 있다. 본 발명의 다른 목적은 다음 설명에서 분명해 질 것이다.

본 발명은 필히 복합입자형태이고 유용한 동물을 사육하는 사료의 첨가제로서 사용하는데와 세균감염으로부터 유용한 동물을 보호하는 의약으로 사용하는 유용한, 유효성분으로 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 조성물에 관한 것이며, 여기서 이 조성물을 사료와 혼합한 다음 생성된 혼합물을 온수 증기의 존재하에 고온으로 가열하여 펠릿형태로 압착성형할때나 이 조성물을 공기하에 40℃의 상승된 온도에서 장시간동안 단독으로 저장할때 황산콜리스틴을 이의 항균활성 또는 효능의 부분적 봉괴와 부분적 감소를 예방할 수 있도록 유효성분으로서 존재하는 황산콜리스틴을 상기 조성물에 혼합한다. 또한 본 발명은 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 조성물의 제조방법에 관한 것이다.

본 발명의 상술한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명자들은 많은 연구를 했다. 그 결과 본 발명에서는 펠릿형태의 혼합사료에 존재하는 황산콜리스틴은 40℃에서 저장하는 동안 시간이 경과하면 이의 항균 효능이 감소할 수 있고 이러한 점에서 안정하지 못하는 예상할 수 있는 정확한 이유가 존재하는 황산콜리스틴 성분이 점진적으로 붕괴되거나 구조적으로 변화되므로서, 콜리스틴 시클로펩티드의 분자구조의 변화를 포함하여, 제조된 펠릿형테의 혼합사료를 저장하는 동안 부분적으로 또는 완전하게 비활성화될 수 있고, 황산콜리스틴 성분의 붕괴와 비활성화는 다음의 원인때문에 일어나는 것을 알았다.

따라서, 이러한 원인은 첫째는 혼합사료와 황산콜리스틴의 혼합물을 온수 증기의 존재하게 120℃ 또는 그 이상 또는 그 이하의 상승된 온도에서 압력에서 가열하여 펠릿형태로 압착성형할 때 사용되는 혼합사료에 불순물로서 또는 통상의 무기첨가물로서 부수적으로 존재하고 있는 이가 금속이온, 예를들어, 철이온, 마그네슘이온, 칼슘이온 등이 존재하는 황산콜리스틴의 입자로 이동하여 확산하는 것이고; 둘째는 황산콜리스틴 성분의 입자에 확산된 이가 금속이온이 사용된 수증기에서 공급된 함수량의 존재하에 열과 압력의 작용으로 황산콜리스틴 성분과 상호작용하여 직접접촉하는 것이고; 셋째는 이가 금속이온과 황산콜리스틴 성분의 상호작용이 물 또는 몇몇 유기 용매에 유해하지 않는 알려지지 않은 킬레이트 화합물을 생성하는 것이고; 넷째는 상술한 이가 금속이온과 황산콜리스틴 성분의 상호작용이 40℃ 또는 그 이상 또는 그 이하의 상승된 온도에서 펠릿의 사료조성물을 저장하는 동안 더 진행하는데 있다.

또한 본 발명자의 경험을 통하여 황산콜리스틴 그 자체가 25℃ 이하의 상온에서와 대기압하에서 철이온, 마그네슘이온 등과 같은 이가 금속이온과 접촉할 때, 황산콜리스틴은 시간이 경과하여도 실제범위까지 이의 항균 효능이 감소하지 않음을 알았다.

본 발명자의 다른 연구를 통하여, 펠릿형태의 혼합사료에서 우연하게 일어나는 황산콜리스틴 성분의 상술한 붕괴와 비활성화는 펠릿형태의 혼합사료를 제조하는 공정과정에서와 제조된 펠릿형태의 사료를 저장하는 기간동안, 사료에 부수적으로 존재하는 이가 금속이온을 성분과 직접접촉으로 이동하는 것을 방지할 수 있음을 알았다. 상술한 방법으로 이가 금속이온이 황산콜리스틴 성분과의 직접접촉으로 이동하므로서 황산콜리스틴 성분과 상호작용하여 상술한 상황하에 황산콜리스틴을 붕괴시키고 비활성화하는 것을 방지하기 위하여, 본 발명에서는 12중량%의 낮은 함수량을 갖고, 입자크기가 250-750㎛의 범위에 있고, 각각 황산콜리스틴과 β -전분과/또는 대두분말의 미세-입자를 젤라틴화 상태의 α -전분으로 형성된 연속상 또는 매트릭스내에 균일하게 분산되므로서, 거의 모든 황산콜리스틴 미세-입자가 α -전분으로 만든 연속상 또는 매트릭스에 포함되고 개개의 복합입자가 고체 분산물의 구조를 갖는 내부구조를 함유하는 복합입자 형태로 황산콜리스틴 성분을 공급하는 것이 필요함을 알았다.

더우기, 본 발명자는 상기한 바와 같이 제조되고 분산된 황산콜리스틴 미세-입자를 함유하는 복합입자를 이의 부수적 성분으로 β -전분과/또는 대두분말의 이세-입자를 생략하여 간단하게 혼합하거나 또는 복합입자에 존재하는 황산콜리스틴미세-입자, 연속상-형성 α -전분물질과 β -전분과/또는 대두분말의 미세-입자 사이의 중량비가 1:0.1∼3.0-0.5∼5.0의 예정된 범위를 넘으면, 황산콜리스틴 성분의 붕괴와 비활성화는 여기서 혼합되는 황산콜리스틴의 복합입자를 함유하는 펠릿형태의 사료를 제조하는 과정에서와, 제조된 펠릿형 사료를 저장하는 시간동안 현저하게 일어날 수 있음을 알았다.

더우기, 본 발명자는 황산콜리스틴의 미세입자를 물에 용해한 α -전분의 페이스트-상 수용액과 혼합하고, 생성된 혼합물을 교반하여 α -전분의 페이스트-상수용액에 잘 분산시켜서 균일한 페이스트를 형성시키고, 이 균일한 페이스트를 β -전분과/또는 대두분말과 혼합한 다음, 황산콜리스틴 미세-분말, α -전분, 물과 β -전분과/또는 대두분말의 생성혼합물을 반죽하여 황산콜리스틴 미세-분말과 β -전분과/또는 대두분말의 미세-분말이 α -전분으로 만든 함수, 연속상 또는 매트릭스내에서 균일하게 분산되는, 반죽되고, 균일한 반죽-상 물질을 얻고, 적당한 기계수단으로 이 반죽물을 더 작은 조각으로 분할하고, 이들 더 작은 조각을 적당히 감소된 함수량으로 건조하고, 건조된 조각을 분쇄하여 다른 크기의 분리된 복합입자를 함유하는 분쇄된 물질을 얻고, 분쇄물질을 체질하여 원하는 입자크기 범위를 갖는 분리된 복합입자를 회수하여서 하는 새로이 고안된 방법을 사용할 때 황산콜리스틴의 미세-입자를 함유하는 상술한 바와 같은 요구되는 특수한 조성과 내부구조를 갖는 복합입자를 쉽고 효과적인 방법으로 제조할 수 있음을 알았다.

그러므로, 분 발명의 제일 특징에 따라서, 분말 형태의 조성물이 중량부의 황산콜리스틴, 0.1~3중량부의 α -전분과 0.5~5.0중량부의 β -전분이나 대두분말 또는 3-전분과 대두분말의 혼합물로 구성되고 이 혼합물을 기준으로 하여 12중량% 이하의 함수량을 갖는 혼합물로 만든 분리된 복합입자로 이루어지고, 이 혼합물로 만든 분리된 복합입자가 250∼750㎛ 범위의 입자크기를 갖고, 황산콜리스틴과 β -전분과/또는 대두분말이 상기 혼합물 중 개별복합입자에 존재하는 α -전분으로 된 연속상 또는 매트릭스 내에 균일하게 분산되어 있는 이들의 분리된 미세-입자로서 존재하므로서, 거의 모든 황산콜리스틴 미세-입자와 3-전분과/또는 대두분말이 α -전분으로 된 연속상 또는 매트릭스에 포함되는 내부구조를 상기 혼합물로 된 각 분리된 복합입자가 갖고, 필요에 따라 안정화된 조성물을 과립형태로 상기 혼합물의 분리된 복합입자를 압착성형하여서 된 과립형태로 함을 특징으로 하는, 유효성분으로 황산콜리스틴을 함유하고, 분말 또는 과립형태인 안정화된 조성물을 제공한다.

본 발명의 제일 특징에 따른 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 조성물은 본 발명의 새로운 조성물을 혼합사료와 혼합한 다음 이 혼합물을 120℃나 그이상 또는 그 이하의 상승된 온도에서 온수 증기의 존재하에 압력아래 상기 혼합물을 가열하여 펠릿형태로 성형한 후와, 상기와 같이 제조하고 혼합된 본 발명의 새로운 조성물을 함유하는 펠릿-성형 사료를 밀봉된 용기로 포장하고 75%의 높은 상대습도에서 공기하에 한달 또는 약간 더 긴 시간동안 40℃에서 저장할 때 본 발명의 새로운 조성물에 의하여 나타나는 항균 효능이 안정되므로서 현저하게 감소하지 않는 의미로 안정화된다.

물론 본 발명이 새로운 안정화된 조성물은 이 조성물을 어떠한 사료와 혼합하지 않고 사용되는 저장조건하에 밀봉용기에 단독으로 저장할 때 한달 이상의 장시간 동안 40℃에서 초기 항균 효능을 유지할 수 있다. 따라서 본 발명의 새로운 조성물은 그 자체 세균감염의 공격으로부터 동물을 보호하기 위하여 동물에 직접투여되는 황산콜리스턴의 안정화된 항균성 제제로서 유용하다.

발명을 실시하는 최선의 방법

본 발명의 새로운 안정화된 조성물에 혼합되어 사용할 수 있는 황산콜리스틴은 3% 또는 그 이상의 순도를 갖는 초기 황산콜리스틴 생성물에서 50% 또는 그 이상의 순도를 갖는 정제된 생성물로 변할 수 있다. 본 발명의 새로운 안정화된 조성물에 사용할 수 있는 알파-전분을 여러가지가 있고 밀, 쌀, 옥수수 등과 같은 여러가지 곡물로부터와 감자, 고구마, 탈로-포테이토 등과 같은 여러가지 포테이토에서 나올 수 있다. 이것은 본 발명의 새로운 안정화된 조성물에 사용할 수 있는 β -전분에 사용한다.

본 발명의 새로운 안정화된 조성물에 필수성분으로 혼합되는 알파-형 또는 베타-형의 전분은 낮은 함량의 회를 갖는 것이 바람직하다. 그러나, 사용되는 전분의 성질에 엄밀한 제한은 없다. 본 발명의 새로운 조성물에 사용할 수 있는 α -전분과 β -전분의 바람직한 예를들면 옥수수-전분이 있다. 본 발명의 새로운 조성물에 이용할 수 있는 대두분말은 각종 대두에서 나올 수 있다.

본 발명의 새로운 조성물에 혼합되는 α -전분은 미리 원료전분, 즉, β -전분의 미세입자를 물과 혼합하고 이 수성 혼합물을 95℃ 또는 그 부근의 온도에서 가열한 다음, 생성된 젤라틴화 전분페이스트를 탈수하여 사용하기에 편리한 적당한 함수량으로 하고 필요하면, 건조된 페이스트를 분쇄하여서 제조한다. 여기서 얻은 α -전분의 건조 분말체를 물과 혼합하여 α -전분의 페이스트-상 수용액을 형성시키고, 이를 본 발명의 새로운 조성물을 형성하는 다른 성분의 미세-입자와 더 혼합할수 있다.

본 발명의 새로운 안정화된 조성물에 있어, 조성물에 함유되어 있는 분리된 복합 입자는 1중량부의 황산콜리스틴, 0.2∼2중량부의 α -전분과 1∼2중량부의 β -전분 또는 대두분말 또는 β -전분과 대두분말의 혼합물로 구성되고 이 혼합물의 중량을 기준으로 하여 12중량% 이하의 함수량을 갖는 혼합물로 만들어지는 것이 바람직하다.

따라서, 본 발명에 따른 복합입자에서, 황산콜리스틴 α -전분과 β -전분 사이의 중량비는 1.0:0.2-2.0:1.0-2.0의 범위가 바람직하고 1.0:0.2-1.0:1.0-2.0의범위가 더 바람직하다.

본 발명의 조성물에 함유되는 복합입자는 10∼50중량%의 황산콜리스틴을 함유하는 것이 바람직하고 이 복합입자를 구성하는 혼합물의 중량을 기준하여 3-10중량%의 함수량을 갖는 것이 바람직하다.

본 발명의 조성물에 함유되는 복합입자는 250~750㎛ 범위의 하나의 특수한 입자크기를 필수적으로 갖는 것은 아니지만 250∼500㎛ 범위의 입자크기 범위를 가질 수 있다.

복합입자는 350~500㎛ 범위의 입자크기를 갖는 것이 바람직하다.

필요하면, 본 발명의 새로운 안정화된 조성물은 부가적 성분이 이가 금속 이온을 유지시키지도 않고, 황산콜리스틴 성분에 대하여 어떠한 불리한 작용을 나타내지 않는 한, 황산콜리스틴과 전분들과 더불어, 카르복시메틸셀루로오스와 같은 부가적인 성분을 더 함유할 수 있다.

본 발명의 제이 특징에 따라서, 유효성분으로 황산콜리스턴을 함유하는 안정화된 조성물의 제조방법을 제공하며 이 조성물은 유효성분인 황산콜리스틴, α -전분과, β -전분과/또는 대두분말 혼합물의 분리된 복합입자로 이루어지는 분말형태이고, 여기서 황산콜리스틴과 β -전분과/또는 대두분말의 미세-입자는 상기 혼합물의 개별 복합입자에 존재하는 α -전분으로 만든 연속상 또는 매트릭스내에 균일하게 분산되며, 상기 제조방법은 다음 단계로 이루어짐을 특징으로 한다:

(a) 1중량부의 황산콜리스턴의 미세 입자를 물에 용해한 0.1∼3중량부의 페이스트-상 수용액과 혼합하고 황산콜리스틴 입자가 α -전분의 페이스트-상 수용액에 잘 분산되고 부분적으로 용해될 때까지 이 혼합물을 교반하고, 이 혼합물을 균일한 페이스트로 형성시키는 단계,

(b) 황산콜리스틴, α -전분과 물의 혼합물로 만든 반응생성의 균일한 페이스트를 0.5-5중량%의 β -전분 미세-입자와/또는 대두분말의 미세-입자와 혼합하는 단계,

(c) 황산콜리스틴 미세-입자와 3-전분 미세-입자와/또는 대두분말 미세-입자가 물질에 존재하는 α -전분으로 만든 함수, 연속상 또는 매트릭스내에 균일하게 분산되는 균일한 반죽-상 물질로 반죽된 혼합물이 될 때까지, 첨가된 황산콜리스틴, α -전분, 물과 β -전분과/또는 대두분말의 혼합물을 반죽하는 단계,

(d) 생성된 균일한 반죽-상 물질을 더 작은 조각으로 분할하는 단계,

(e) 반응생성된 작은 조각을 이 작은 조각의 중량을 기준하여 10중량% 이하의 함수량으로 건조하는 단계,

(f) 상기 건조된 작은 조각을 분쇄하여 분리된 복합입자로 이루어지는 분쇄된 물질을 얻고, 여기서 각 복합입자는 황산콜리스틴, α -전분과 β -전분과/또는 대두분말로 만들어지고 황산콜리스틴의 미세-입자와 β -전분과/또는 대두분말의 미세-입자가 이 복합입자에 존재하는 α -전분으로 된 연속상 또는 매트릭스내에 균일하게 분산되는 내부구조를 가지므로서, 거의 모든 황산콜리스틴과 β -전분과/또는 대두분말의 미세-입자가 다른 입자크기의 상기 각 복합입자에 존재하는 α -전분의 연속상 또는 매트릭스에 포함되게 하는 단계,

(g) 250-750㎛ 범위의 입자크기를 갖는 복합입자로 이루어지는 분말을 회수하기 위하여 상술한 분쇄된 물질을 채질하는 단계,

(h) 단계(g)에서 얻은 이 분말은 과립을 형성시키기 위하여 압축성형하는 단계.

본 발명의 제이 특징에 따른 방법에서, 본 방법의 단계 (c),(d),(f),(g)와 (h)는 물론 단계 (a)와 (b)는 각 단계에서 의도되는 각 목적에 적합한 일반적인 장치를 사용하여 그 자체 공자되어 있는 방법으로 각각 행한다. 방법의 건조단계 (e)는 적당한 100℃ 이하 또는 그 이상의 상승된 온도에서 감압하의 일반적인 건조장치에서 행한다.

본 발명에 따른 황산콜리스틴의 안정화된 조성물은 사료의 첨가제로서 사용될 수 있다.

본 발명의 제일 특징에 따른 유효성분으로 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 조성물은 돼지, 소와 닭과 같은 가축을 사육하는 일반적 사료에 적당한 비율로 혼합할 수 있다. 이와 같은 일반사료는 옥수수, 밀, 보리, 콩, 쌀 또는 기타 곡물의 분말, 쌀기울과 같은 사료재료가 알려져 있고 또는 옥수수분말, 밀분말탈지 대두분말, 어분, 탈지유, 비타민, 무기질, 예를 들어 황산철, 탄산마그네슘, 아미노산과 향미료로 이루어지는 건조분말형태 즉, 건조매쉬형의 일반혼합사료가 있다.

본 발명에 따른 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 조성물은 생성 혼합물에서 10~100ppm의 황산콜리스틴 함량을 나타내는데 적합한 비율로 일반혼합사료와 혼합한 다음, 이 혼합물을 통상의 펠릿제조기로 온수 수증기의 존재하에 120℃ 또는 그 이상 또는 그 이하의 상승된 온도에서 펠릿형태로 압착성형한다.

상기 혼합물을 펠릿형으로 성형하는 방법과정애서, 사료 재료에 혼합되는 본 발명의 새로운 안정화된 조성물은 안정화를 유지시킬 수 있고, 즉 불리한 높은 범위까지 비활성화를 방지할 수 있다. 그 외, 본 발명에 따른 황산콜리스틴의 새로운 안정화된 조성물과 결합하여 펠릿으로 성형된 혼합사료에 존재하는 황산콜리스틴 성분은 펠릿화된 상기 혼합사료를 습기-불투수성 용기에 넣어서 밀봉한 다음 한달이나 그 이상 또는 그 이하의 장시간 동안 40℃ 또는 그 이상의 상승된 온도에서 저장하여도 안정화를 유지할 수 있으며, 즉 불리한 범위까지 비활성화를 방지할 수 있다.

본 발명의 실시예를 들어 예시하면 다음과 같다.

실시예 1

(1) 본 발명에 따른 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 조성물의 제조.

본 발명에 따른 황산콜리스틴의 새로운 안정화된 조성물의 대표적인 예를 들어 다음단계(i) 내지 (viii)의 공정에 의하여 제조하는 것이다:

단계(i)에서, 분쇄된 원료옥수수전분(20g)을 물(100g)과 혼합하고 얻을 혼합물을 원료전분이 α -전분의 상태로 젤라틴화 할 때까지 잘 교반하면서 95℃로 가열하여 물에 용해한 α -전분의 페이스트-상 수용액을 형성시킨다.

단계(ii)에서, 상기단계(i)에서 얻은 물(전체적으로 120g)에 용해한 α -전분의 페이스트-상 수용액을 100g의 시판되고 있는 황산콜리스틴(황산콜리스틴 A와 황산콜리스틴 B의 혼합물로 이루어지고 50중량%의 황산콜리스틴 함량을 갖는다)의 미세분말과 혼합하고, 생성한 혼합물을 황산콜리스틴이 α -전분의 페이스트-상 수용액에 분산되고 부분적으로 용해될 때까지 실온에서 잘 교반하여 전 혼합물을 균일한 페이스트로 형성시킨다.

단계(iii)에서는, 상기 단계(ii)에서 얻은 균일한 페이스트(전체 220g)를 200g의 원료옥수수전분(상기에서 β -전분이라 하였다)의 미세분말과 혼합한다.

단계(iv)에서는, 상기 단계(iii)에서 얻은 혼합물(전체 420g)을 황산콜리스틴의 미세-입자와 원료옥수수전분(β -전분)의 미세-입자가 하기 물질에 존재하는 α -전분으로 된 페이스트-상, 함수의 연속상내에서 균일하게 또는 균등하게 분산된 균일한 반죽-상 물질로, 반죽된 혼합물이 될 때까지 실온에서 잘 반죽한다.

단계(v)에서는, 상기 반죽단계(iv)에서 얻은 반죽-상 물질을 압출기와 절단기로 약 5mm× 5mm× 10mm의 적당한 크기의 더 작은 조각으로 분할한다.

단계(vi)에서는, 상기 단계(v)에서 얻은 작은 조각을 감안하에 건조장치에서 5∼9%의 함수랑으로 80℃에서 건조하여 건조된 조각을 얻는다.

단계(vii)에서는, 단계(vi)에서 얻은 건조된 조각을 분쇄장치에서 실온에서 건조하여 형성된 분리 복합입자를 함유하고 다른 입자크기를 갖는 분쇄된 물질을 얻는다.

이들 복합입자를 황산콜리스틴의 미세-입자, 원료옥수수전분(β -전분)과 α -전분의 연속상의 혼합물 또는 조합물로 만들고 황산콜리스틴과 원료옥수수전분(β-전분)의 미세-입자가 각 복합입자에 존재하는 α -전분으로 된 연속상내에 균일하게 분산된 내부구조 또는 배열을 갖도록 한다.

단계(viii)에서는, 단계(vii)에서 얻은 복합입자를 함유하는 분쇄된 물질을 적당한 메쉬크기를 갖는 몇가지 채로 채질한 다음, 약 250∼300㎛ 범위의 입자크기를 갖는 복합입자를 분말형태의 원하는 조성물로서 회수한다.

250~300㎛ 범위의 입자크기를 갖는 복합입자를 함유하는 원하는 이 조성물이 본 발명의 제일 특징에 따른 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 조성물의 예시된 제제이며, 이는 이후 시험제제번호 1이라 한다.

(2) 시험되는 제제의 제조.

상기 시험제제번호 1에서 황산콜리스틴의 농도를 측정하여 약20중량%로 평가하고, 시험제제번호 1을 약 1:1의 중량비로 적당한 양의 탈지된 쌀기울과 혼합하여 이 혼합물에서 황산콜리스틴의 농도가 10중량%가 되도록 회석한다. 쌀기울을 갖는 시험제제번호 1의 이 혼합물을 이후 시험제제번호 2로 할 것이다.

상기와 같은 시험제제번호 2의 40g-부분을 통상 "실험용 표준돼지 배합사료(건조매쉬형)"라 불리우고 주성분으로 옥수수분말, 밀분말, 밀기울, 탈지대두분말, 어분과 탈지유를 함유하고 또한 첨가제로서 보충되는 비타민, 철 화합물, 마그네슘 화합물과 기타 무기질, 아미노산과 향미료를 함유하는 시판되고 있는 혼합사료 10 kg-부분과 더 혼합한다. 이렇게 간단하게 함께 혼합된 상기 혼합사료와 시험제제번호 2의 생성혼합물은 40ppm의 황산콜리스틴 농도를 갖고 분말형 매쉬의 형태를 나타내며 이를 이후 시험제제번호 3이라 한다.

매쉬형태의 이 시험제제번호 3을 시판되고 있는 펠릿제조기로 압력하에 증기로 120℃에서 펠럿으로 압착성형하여, 펠릿-형상을 갖는 혼합사료를 직경 3mm와 길이 2-4mm의 원통형 펠릿으로 얻는다.

이와 결합된 시험제제번호 1을 함유하는 펠릿-형상사료는 이후 시험제제번호 4라고 한다.

비교하기 위하여, 유효성분으로 황산콜리스틴을 함유하는 과립형태의 통상적으로 시판되고 있는 조성물은, 판매되고 있는 황산콜리스틴과 탈지 쌀기울기를 혼합하고 유동충에서 혼합물을 분쇄하여 40중량%의 황산콜리스틴을 함유하는 과립을 얻어서 제조한다. 이러한 황산콜리스틴의 일반적 과립상 조성물을 적당한 양의 쌀기울기 간단하게 혼합하여 생성된 혼합물이 10중량%의 황산콜리스틴을 함유하도록 한다. 이 생성된 혼합물을 이후 시험제제번호 5(비교물)로 한다.

40g-부분의 시험제제번호 5(비교물)를 "실험용 표준돼지 배합사료(건조매쉬형)"로 불리우는 동일한 10kg-부분의 시판 혼합사료와 더 혼합한다.

이렇게 얻은 생성혼합물 매쉬형태와 40ppm의 황산콜리스틴을 가지며 이후 시험제제번호 6(비교물)이라 한다. 매쉬형태의 이 시험제제번호 6(비교물)을 상술한 바와 동일한 펠릿제조방법에 의하여 펠릿으로 성형하고, 직경 3mm와 길이 2-4mm의 원통형 펠릿형태의 사료를 제조하고 이후 시험제제번호 7(비교물)이라 한다.

(3) 시험제제들에서 황산콜리스틴 성분의 안정성을 평가하기 위한 시험공정 매쉬형의 시험제제번호 3과 펠릿형태의 시험제제번호 4는 물론 매쉬형태의 시험제제번호 6(비교물)과 펠릿형태의 시험제제번호 7(비교물)을 각각 100g-부분을 폴리에틸린 시이트로 만든 습기-불투수성백에 넣은 다음 백의 개구를 열-밀봉한다.

시험제제를 함유하는 밀봉된 백을 크래프트지 시이트이 세중첩층으로 된 각 백에 각각 분리하여 넣은 다음, 크래프트지 백의 개구를 밀봉한다.

폴리에틸렌 시이트의 백으로 포장된 시험제제를 함유하는 이들 크래프트지백을 75%의 상대습도에서 공기하에 40℃에서 4주 동안 저장한다. 4주 이하의 기간동의 저장에서, 폴리에틴렌 백에 함유된 시험제제의 몸체에 습기가 투과되지 않았음을 관찰했다. 저장시작시와 저장시작후 일주일, 이주일, 삼주일과 사주일말에 각 폴리에틸렌 백에 함유되어 있는 각 시험제제에서 20g-부분으로 두 시료를 채취한다.

피리딘과 n-헥산의 혼합용매로 시료를 추출하고 시료에서 나온 전체양의 활성 황산콜리스틴을 유기추출물로 이동시키고 유기추출물에 존재하는 활성 황산콜리스틴의 양을 고성능 액체 크로마토그라피(HPLC)에 의하여 정량적으로 측정하여서 채취한 각 시료에 남아 있는 황산콜리스틴의 잔유농도를 측정한다.

시료에서 황산콜리스틴을 측정한 잔유농도의 퍼센트는 시험제제번호 3과 번호 6에서 황산콜리스틴의 최초농도(40ppm)를 기준하여 계산한다. 이렇게 계산된 퍼센트를 황산콜리스틴의 "잔유퍼센트"라 하고 저장시간의 경과에 따라 시험된 제제를 기록한다.

상기 시험은 각 시험제제에 대하여 중복하여 행한다. 각 시험된 제제에서 얻은 네가지 수치데이타를 평균한다. 황산콜리스틴의 잔유퍼센트의 평균치를 사용하여 시정된 제제에 존재하는 황산콜리스틴 성분의 안정성을 평가한다.

(4) 시험결과.

저장된 시험제제에 남아 있는 활성 황산콜리스틴의 잔유퍼센트를 상기와 같이 평가하고, 이들을 하기 표 1a에 요약했다.

상기 표 1a에 있어서, 시험제제번호 4는 본 발명의 제일 특징에 의하여 안정화된 황산콜리스틴 성분을 함유하는 복합입자로 이루어지는 상기 시험제제번호 2와 혼합사료의 혼합물을 펠릿으로 성형하여 제조한 제품임을 알 수 있다.

4주 저장하는 동안 시험제제번호 4는 저장 첫째주에 83.8%에서 넷째주에 78.2%까지 변하는 황산콜리스틴의 잔유%값의 작고 허용할 수 있는 감소를 나타냈고, 시험제제번호 4에 혼합된 본 발명의 시험제제번호 1의 복합입자에 존재하는 황산콜리스틴 성분이 시험제제번호 3을 120℃에서 시험제제번호 4의 펠릿형태로 압착성형하는 과정에서 일어나는 여러가지 붕괴조건을 받음에 불구하고, 어느 정도 안정화됨을 관찰했다.

대조적으로 시험제제번호 7(비교물)은 종래기술에 따른 황산콜리스틴 과립을 함유하는 시험제제번호 6(비교물)을 펠릿으로 성형하여 만든 제품이다. 시험제제번호 7은 4주저장하는 동아 첫째주는 68.9%에서 넷째주에 50.2%로 변하는 황산콜리스틴의 크고 허용할 수 없는 잔유%값을 나타냈으며, 펠릿형태의 시험제제번호 7(비교물)에 존재하는 황산콜리스틴이 매쉬형태의 시험제제번호 6(비교물)을 120℃에서 시험제제 7(비교물)의 펠릿형태로 압착성형하는 동안과 저장하는 동안에 너무 많이 불리하게 붕괴되고 비활성화됨을 관찰했다.

두 매쉬형태인 시험제제번호 3과 시험제제번호 6(비교물)에 있어서, 황산콜리스틴의 잔유%값이 100%의 최초값에서 넷째주에 약 97%로 약간만 감소함을 알았다. 이것은 이들 시험제제번호 3과 번호 6에 존재하는 황산콜리스틴 성분이 매쉬형태의 시험제제를 제조하는 과정에서와 상기 저장조건하에 매쉬형태의 이들 시험제제를 저장하는 기간동안 실제적으로 감소되지 않기 때문이다.

더우기, 참고적으로 본 발명에 따른 황산콜리스틴의 새로운 안정화된 조성물의 대표적인 예시된 제제인 상기 시험제제번호 1을 전술한 바와 동일한 시험공정과 동일한 조장조건항에 시험하여, 상기 시험제제번호 1의 황산콜리스틴 성분의 안정성을 평가한다.

저장하는 동안 시험번호 1의 황산콜리스틴 성분의 잔유퍼센트를 시험제제번호 1의 황산콜리스틴의 최초농도(약 20중량%)를 기준하여 유사하게 계산한다.

여기에서 얻은 시험결과를 하기 표 1b에 요약했다.

상기 표 1b에서 시험제제번호 1에 존재하는 황산콜러스틴 성분이 전체적으로안정하고 저장 4주동안 40℃에서 실제적으로 붕괴되지 않음을 볼 수 있다.

실시예 2

시험제제의 생성과 시험제제의 안정성 평가의 제이 시리즈로서 실시예 1의 공정을 반복한다. 얻은 시험결과는 하기 표 2에 요약했다.

상기 표 2에 있어서, 실시에 1의 표 1a에서 얻은 것과 유사한 관찰을 달성할수 있음을 알 수 있다.

실시예 3

(1) 본 발명에 따른 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 조성물의 제조.

본 발명에 따른 황산콜리스틴의 새로운 안정화된 조성물의 다른 실시예로서 실시예 1과 유사하게 제조하나 다음단계(i)내지(viii)의 약간 수정된 공정으로 행한다:

단계(i)에서, α -전분분말을 물에 용해시켜서 물에 용해한 α -전분의 폐이스트-상 수용액을 얻을때까지 α -전분의 시판하는 건조분말(20g)과 혼합물을 교반한다.

단계(ii)에서 상기 단계(i)에서 얻은 물에 용해한 α -전분의 페이스트-상 수용액(총120g)을 100g의 시판하는 황산콜리스틴 미세분말(황산콜리스틴 A와 황산콜리스틴 B로 이루어지고 50중량%의 황산콜리스틴 함량을 갖는다)과 혼합하고, 생생된 혼합물을 황산콜리스틴이 α -전분의 페이스트-상 수용액에 분산되고 부분적으로 용해되어 전체혼합물이 균일한 페이스트로 형성될 때까지 실온에서 잘 교반한다.

단계(iii)에서, 상기 단계(ii)에서 얻은 균일한 페이스트(총 220g)을 원료옥수수전분(상기의 β -전분)의 미세분말, 200g과 혼합한다.

단계(iv)에서, 상기 단계(iii)에서 얻은 혼합물(총420g)을 실온에서 잘 반죽하여 반죽된 혼합물이 균일하고 반죽-상 물질이 되도록 황산콜리스틴의 미세-입자와 원료옥수수전분(β -전분)의 미세분자를 상기 물질에 존재하는 α -전분으로 만든 페이스트-상, 함수 연속내에 균일하게 또는 균등하게 분산시킨다.

단계(v)에서, 상기 반죽단계(iv)에서 얻은 반죽-상 물질을 압출기와 절단기에 의하여 약 5mm× 5mm× 10mm의 적당한 크기의 더 작은 조각으로 분할한다.

단계(vi)에서, 상기 단계(v)에서 얻은 작은 조각을 감압하에, 건조장치에서 5~9%의 함수량으로 80℃에서 건조하여 건조된 조각을 얻는다.

단계(vii)에서, 단계(vi)에서 얻은 건조된 조각을 실온에서 분쇄장치로 분쇄하여 형성된 분리복합입자로 이루어지고 다른 입자크기를 갖는 분쇄된 물질을 얻는다.

이들 복합입자를 황산콜리스틴 미세-입자 원료옥수수전분(β -전분) 미세-입자와 α -전분의 연속상의 혼합물 또는 조합물을 각각 만들고 황산콜리스틴과 원료 옥수수전분의 미세-입자가 각 복합입자에 존재하는 α -전분으로 된 연속상내에 균일하게 분산되어 있는 내부구조 또는 배열을 갖게 한다.

단계(viii)에서, 단계(vii)에서 얻은 복합입자를 함유하는 분쇄된 물질을 적당한 매쉬크기를 갖는 몇가지 체로 체질한 다음 약 250~300㎛ 범위의 입자크기를 갖는 복합입자를 분말형테의 원하는 조성물로 회수한다.

250~300㎛ 범위의 입자크기를 갖는 복합입자를 함유하는 원하는 조성물은 본 발명의 제일 특징에 따른 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 조성물의 다른예시된 제제이고, 이는 이후 시험제제번호 8이라 할 것이다.

이 실시예 3의 상기 단계(i)내지(viii)는 시판하는 α -전분의 건조분말을 먼저 이 실시예 3의 단계(i)에서 출발물질로서 사용하고, 분쇄된 원료전분, 즉 β -전분을 출발물질로 사용하고 실시예 1의 단계(i)에서 95℃항에 물로 수화하여 α -전분으로 젤라틴화하는 것을 제외하고 전술한 실시예 1의 단계(i)내지(viii)와 각각동일하다.

(2) 시험되는 제제의 제조.

이 실시예 3의 단계(viii)에서 얻은 시험번호 8을 사용하여 시험할 다른 제제를 제조한다. 시험될 이들 다른 제제의 제조는 전술한 실시예 1,(2)와 동일한 방법으로 행한다.

따라서, 시험제제신호 8에서 황산콜리스틴의 농도를 측정하면 약 20중량%로 평가되었고, 시험제제번호 8을 약 1:1의 중량비로 적당량의 탈지 쌀기울기와 혼합하여 생성된 혼합물에서 황산콜리스틴의 농도가 10중량%가 되도록 회석한다. 시험제제 8과 쌀기울의 혼합물을 이후 시험제제번호 9라고 한다.

상기 40g-부분의 시험제제번호 9를 통상 "실험용 표준돼지 배합사료(건조매쉬형)"라 불리우고 실시예1,(2)에서 사용한 것과 동일한 10kg-부분의 시판하는 혼합사료와 더 혼합한다.

시험제제번호 9와 상기 혼합사료와 간단하게 혼합하여 얻은 혼합물은 40ppm의 황산콜리스틴 농도를 갖고 분말형 매쉬형태를 나타내고, 이것을 이후 시험제제번호 10이라고 한다.

매쉬형태의 이 시험제제번호 10을 시판하는 펠릿제조기에 의하여 압력하에 증기로 120℃에서 펠릿으로 압착성형하여, 펠릿형상을 갖는 혼합사료를 직경 3mm와 길이 2~4mm의 원통형 펠릿형태로 얻는다. 이와 결합된 시험제제번호 8을 함유하는 이 펠릿형 사료를 이후 시험제제번호 11이라 한다.

비교하기 위하여, 매쉬형태의 시험제제번호 6(비교물)과, 펠릿형태의 시험제제번호 7(비교물)을 제조하고, 이를 실시예 1,(2)에서와 동일한 방법으로 제조된 시험제제번호 6(비교물)과 시험제제번호 7(비교물)과 동일하게 각각 공급한다.

(3) 시험제제에서 황산콜리스틴 성분의 안정성을 평가하기 위한 시험공정.

상기 제조된 시험제제에 존재하는 황산콜리스틴 성분의 안정성을 실시예 1,(3)에 서술된 시험공정과 동일하게 평가한다.

따라서, 매쉬형태의 시험제제번호 10 및 펠릿형태의 시험제제번호 10과, 매쉬형태의 시험제제번호 6(비교물) 및 펠릿형태의 시험제제번호 7(비교물)을 폴리에틸렌 시이트로 만든 습기-불투수성백에 100g-부분으로 각각 넣은 다음, 폴리에틸렌백의 개구를 열-밀봉한다. 이를 밀봉된 백을 실시예 1,(3)에 사용된 것과 동일한 크래프트지 시이트로 만든 백으로 분리하여 포장한다.

다음 이렇게 포장된 시험제제를 실시예 1,(3)에 서술된 것과 동일한 저장조건하에서 4주동안 40℃에서 저장한다.

저장된 각 시험제제로부터 일주일의 시간간격으로 20g-부분식 두 시료를 채취한다. 채취한 각 시료에 남아 있는 황산콜리스틴의 잔유농도를 실시예 1,(3)에서와 동일한 방법으로 측정한다.

저장하는 동안 시험제제에서 황산콜리스틴의 "잔유퍼센터"를 실시예 1,(3)에서와 동일한 방법으로 평가하여 기록한다.

이렇게 얻은 시험결과를 하기 표 3에 요약했다.

상기 표 3의 시험결과로부터, 황산콜리스틴 미세-입자를 함유하는 시험제제번호 8의 복합입자가 결합되어 있는 펠릿형태의 시험제제번호 11에 있어서, 황산콜리스틴의 잔유퍼센트가 저장 첫째주에 94.4%에서 넷째주에 76.9%로 감소함을 관찰한다. 4주동안 40℃에서 시험제제번호 11을 저장하는 동안 황산콜리스틴의 잔유퍼센트가 약 14%까지 감소하는 것을 허용할 수 있으며, 시험제제번호 11에 존재하는 황산콜리스틴이 상당한 정도로 안정화되는 것을 나타낸다.

대조적으로, 종래기술에 따른 펠릿형태의 시험제제번호 7(비교물)에 있어서, 황산클리스틴의 잔유퍼센트는 저장시 첫째주에 73.7%에서 넷째주에 48.5%로 감소했다. 저장시 4주동안 48.5%의 값으로 황산콜리스틴의 잔유퍼센트의 이와 같은 감소는 황산콜리스틴 성분이 황산콜리스틴의 최초함량으로부터 약 반까지 허용할 수 없는 범위로 붕괴되고 비활성화됨을 나타낸다.

실시예 4

이 실시예 4는 본 발명에 따른 황산콜리스틴은 함유하는 새로운 안정화된 조성물에서 황산콜리스틴 성분의 안정성이 본 발명의 새로운 안정화된 조성물에 함유된 복합입자에 혼합되어 있는 황산콜리스틴, α -전분과 β -전분 사이의 상대비율을 변경시켜서 어떻게 영향을 미치는가를 예시한 것이다.

(1) 본 발명에 따른 황산콜리스틴을 함유하는 안정화된 조성물의 제조.

본 발명에 따른 황산콜리스틴의 새로운 안정화된 조성물의 다른 몇몇 실시예는 실시예 3,(1)과 유사한 실시예 3,(1)의 단계(i)내지(viii)을 행하여 제조하는 것이다.

그러나 이 실시예 4에서는 단계(i),(iii)과 (viii)를 수정하여 여러가지 양(20g, 50g, 100g 또는 200g)의 시판하는 α -전분의 건조분말을 단계(i)에서 100g의 물에 용해시키고, 여러가지 양(200g, 150g, 100g 또는 영g)의 분쇄된 원료옥수수전분(β -전분)을 α -전분의 페이스트-상 수용액과 100g의 시판하는 황산콜리스틴(실시예 1에 사용된 것과 동일)의 혼합물과 단계(iii)에서 혼합하고, 300∼500㎛의 입자크기를 갖는 복합입자로 구성된 각 네가지 다른 분말을 단계(iii)에서 분쇄된 물질에서 회수한다.

따라서 채질단계(viii)로부터, 세가지 시험제제번호 12, 번호 13과 14인 본 발명의 새로운 안정화된 황산콜리스틴의 다른 세가지 예를 얻었다. 이 단계(viii)로부터 "비교"시험제제번호 15를 얻었다. 이들 네가지 시험제제번호 12 내지 번호 15는 하기 표4에 표시전 비율로 이들의 성분이 각각 함유되어 있는 생성물이다.

(2) 시험되는 제제의 제조.

상기 단계(viii)에서 얻은 시험제제번호 12 내지 번호 15를 각각 약 1:1의 중량비로 적당량의 쌀기울과 혼합하여, 생성된 네가지 혼합물이 10중량%의 황산콜리스틴을 함유하도록 한다.

상기에서 얻은 이들 네가지 혼합물을 이후 각각 시험제제번호 16, 시험제제번호 17, 시청제제번호 18과 "비교"시험제제번호 19라 한다.

이들 시험제제번호 16 내지 번호 19; 각각 40g-부분을 10kg-부분의 시판하는 혼합사료, 즉 실시예 1,(2)에 서술되어 있는 상술한 실험용 표준돼지 배합사료와더 혼합한 다음 실시예 1,(2)에서와 동일한 방법으로 매쉬형태의 생성된 네가지 혼합물을 성형한다.

따라서, 제조된 시험제제번호 20, 번호 21과 번호 22는 각각 표 4의 시험제제번호 12, 번호 13과 번호 14에서 나온 복합입자가 각각 함유되어 있는 생성물들이다. 이렇게 제조 "비교"시험제제번호 23은 표 4의 시험제제번호 15에서 나온 입자가 함유되어 있는 생성물이다.

(3) 시험제제에서 황산콜리스틴 성분의 안정성을 평가하기 위한 시험공정.

상기에서 제조된 시험제제번호 20 내지 번호 23에 존재하는 황산콜리스틴 성분의 안정성을 실시예 1,(3)에 서술되어 있는 것과 동일한 시험공정으로 평가한다.

모두 펠릿형태인 시험제제번호 20, 시험제제번호 21, 시험제제번호 22와 시험제제번호 23(비교물)을 폴리에틸렌 시이트로 만든 습기-불투수성 백에 각각 100g-부분씩 넣은 다음, 폴리에틸렌 백의 개구를 열-밀봉한다. 이들 밀봉된 백을 실시예 1,(3)에서 사용한 것과 동일한 크래프트지 시이트로 만든 백으로 분리하여 포장한다.

다음 포장된 시험제제를 실시예 1,(3)에 기술된 것과 동일한 것과 조건하에서 2주동안 40℃에서 저장한다.

2주동안 저장된 각 시험제제에서 한주의 시간간격으로 20g-부분씩 두 시료를 취한다. 취한 각 시료에 남아 있는 황산콜리스틴의 잔유농도를 실시예 1,(3)과 동일한 방법으로 측정한다.

비교하기 위하여, 실시예 1,(2)에 언급되어 있는 펠릿형태의 시험제제번호 7을 동일한 방법으로 시험한다.

저장하는 동안 시험제제에서 황산콜리스틴의 "잔유퍼센트"를 실시예 1,(3)에서와 동일한 방법으로 평가하여 기록한다.

여기서 얻은 시험결과를 하기 표 5에서 요약했다.

상기 표 5의 시험결과로부터, 표 4의 시험제제번호 15(비교물)를 사용하여 제조하고 β -전분 미세-입자를 사용된 황산콜리스틴의 제제에 혼합하는 것에서 생략한 시험제제번호 23(비교물)으로 40℃에서 저장 2주후에 황산콜리스틴의 잔유퍼센트가 이미 65.4%의 허용할 수 없는 수준으로 감소되었음을 관찰하게 된다.

시험제제번호 20, 번호 21과 번호 22에 있어서, 여기서 혼합되어 있는 황산콜리스틴 성분을 실제적으로 유용한 범위까지 성공적으로 안정화됨을 관찰했다. 이것은 본 발명에 따른 황산콜리스틴의 안정화된 조성물이 상기 표 4의 시험제제번호 12, 번호 13과 번호 14에 의하여 입증되는 바와 같이 황산콜리스틴, α -전분과 β -전분 사이의 중량비가 1.0:0.2-1.0:1.0-2.0의 범위에 있는 것이 바람직함을 나타낸다.

실시예 5

이 실시예는 본 발명에 따른 황산콜리스틴의 새로운 안정화된 조성물에 존재하는 황산콜리스틴의 안정성이 황산콜리스틴의 상기 안정화된 조성물에 함유되어 있는 입자크기분포의 차이에 의하여 영향을 받는 것을 예시한 것이다.

(1) 본 발명에 따른 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 조성물의 제조.

본 발명에 따른 다른 몇가지 예의 황산콜리스틴의 안정화된 조성물은 체질단계(viii)를 효과적으로 실시하여 하기 표 6a에 표시된 바와 같이 입자크기의 다른 분포를 갖는 복합입자로 각각 구성된 분말형태의 일곱가지 다른 조성물을 회수하는 것을 제외하고는, 상기 실시예 1,(1)의 단계(i)내지(viii)를 반복하여 제조한다.

회수된 이들 일곱가지 조성물을 이후 각각 시험제제번호 24, 번호 25, 번호 26, 번호 27, 번호 28과 번호 29라 한다.

비교하기 위하여, 실시예 1,(2)에서 얻고 황산콜리스틴 분말과 쌀기울(40% 황산콜리스틴 함량)의 유동층-과립화 혼합물을 다른 양의 쌀기울로 희석하여 황산콜리스틴의 농도가 10중량%로 되도록 제조한 시험제제번호 5(비교물)를 취한다.

이 시험제제번호 5(비교물)를 분쇄하고 체질하여 150~500㎛의 입자크기를 갖는 분말분획과 250~710㎛의 입자크기를 갖는 분말분획이 되게 한다. 이들 두 분말분획은 시험제제번호 31(비교물)과 시험제제번호 32(비교물)이라 각각 행한다. 이들 시험제제번호 31과 번호 32는 하기 표 6b에 표시된 입자크기의 다른 분포를 갖는다.

(2) 시험되는 제제의 제조.

상기에서 제조한 시험제제번호 24 내지 번호 32를 각각 사용하여 이들에 존재하는 황산콜리스틴의 안정성에 대하여 시험할 다른 제제를 제조한다. 시험할 다른 제조는 실시예 1,(2)와 동일한 방법으로 행한다.

따라서, 각 시험제제번호 24 내지 번호 32를 약 1:1 또는 그 이상의 중량비로 적당한 양의 쌀기울과 혼합하여 각 생성된 9가지 혼합물에서 황산콜리스틴의 농도가 10중량%가 되도록 희석한다. 여기서 얻은 9가지 다른 혼합물의 40g-부분을 실시예 1,(2)에 사용된 실험용 표준돼지 배합사료(매쉬형)와 동일한 10kg-부분의 혼합사료와 더 혼합한다.

이 방법으로 40ppm의 황산콜리스틴을 함유하는 매쉬형의 9가지 다른 사료조성물을 제조한다. 매쉬형태의 생성된 9가지 조성물을 각각 실시예 1,(2)와 동일한 방법으로 펠릿으로 성형하면 펠릿형태의 성형된 9가지 다른 사료조성물을 얻는다.

(3) 황산콜리스틴 성분의 안정성을 평가하기 위한 시험공정.

상기에서 제조한 펠릿형태의 9가지 다른 사료조성물에 존재하는 황산콜리스틴 성분의 안정성은 실시예 1,(3)에서 설명된 것과 동일한 방법으로 2주동안 40℃에서 저장하고 포장된 펠릿-성형 사료조성물에서 황산콜리스틴의 잔유퍼센트를 측정하여 실시예 1,(3)에서와 동일한 방법으로 평가한다.

얻은 시험결과는 하기 표 7에서 표시했다.

상기 표 7의 시험결과로부터, 본 발명에 따르지 않는 150 내지 250㎛ 범위 이하의 입자크기를 갖는 복합입자를 차례로 함유하는 시험제제번호 25(비교물)을 갖는 펠릿-형상 사료조성물에 있어서, 황산콜리스틴의 잔유퍼센트는 저장 첫째주에 이미 79.9%의 허용할 수 없는 낮은 수준으로 감소한 다음 둘째주에 59.5%로 감소함을 관찰했다.

실시예 6

이 실시예는 β -전분성분 미세-입자를 본 발명에 따른 복합입자의 필요한 성분으로서 대두분말의 미세-입자로 전체적으로 또는 부분적으로 대치할 수 있고, 일정량의 카르복시메틸셀루로오스(CMC)를 본 발명에 따른 복합입자에 부가적으로 혼합할 수 있는 것을 예시한 것이다.

본 발며에 따른 황산콜리스틴의 새로운 안정화된 조성물의 다른 몇가지 예를 실시예 3에서와 동일한 방법으로 실시예 3의 단계(i)내지(viii)을 행하여 실시예 3과 유사하게 제조하며, 그러나 단계(ii)에서 얻은 황산콜리스틴(100g), α -전분(20g)과 물(100g)의 혼합물로 이루어진 균일한 페이스트를 하기 표 8에 표시된 일정량의 카르복시메틸셀루로우스(CMC)와 함께 또는 없이, 표 8에 표시된 다른 양의 원료옥수수전분(β -전분)의 미세분말과/또는 대두분말의 미세분말과 혼합하는 것은 제외한다.

단계(iii)에서 얻은 6가지 다른 혼합물을 각각 연속단계(iv)에서 잘 반죽하면 하기 표 8에 표시된 6가지 다른 균일한 반죽-상 물질을 얻는다.

표 8에 표시되고 단계(iv)에서 얻은 6가지 다른 반죽-상 물질 A,B,C,D,E와 F를 각각 단계(v),(vi),(vii)와 (viii)로 제조한다. 6가지 다른 분말형태의 조성물은 약 250∼300㎛의 입자크기를 갖고 표 8에 표시된 5~9중량%의 함수량을 갖는 성분을 함유하는 복합입자로 이루어지는 것을 얻는다.

복합입자로 이루어지는 이들 6가지 다른 조성물은 각각 시험제제번호 33, 번호 34, 번호 35, 번호 36, 번호 37과 번호 38이라 한다.

(2) 시험되는 제제의 제조.

상기에서 제조된 시험제제번호 33 내지 번호 38을 각각 사용하여 이들에 존재하는 황산콜리스틴의 안정성에 대하여 시험할 다른 제제를 제조한다. 시험된 이들 제제의 제조는 실시예 1,(2)와 동일한 방법으로 행한다.

따라서, 시험제제번호 33내지 번호 38을 각각 약 1:1 또는 그 이상 또는 그이하의 중량비로 적당한 양의 쌀기울과 혼합하여 각 생성된 6가지 다른 혼합물에서 황산콜리스틴의 농도를 10중량%가 되도록 희석한다. 여기서 얻은 40g-부분의 6가지 다른 혼합물을 실시예 1,(2)에 사용된 실험용 표준돼지 배합사료(건조매쉬형)과 동일한 10kg-부분의 혼합사료와 더 혼합한다.

이 방법에서는 40ppm의 황산콜리스틴을 함유하는 매쉬형태의 6가지 다른 사료 조성물을 제조한다. 매쉬형태의 생성된 6가지 조성물을 실시예 1,(2)와 동일한 방법으로 각각 펠릿으로 성형하면, 펠릿형태로 성형된 6가지 다른 사료조성물을 얻는다.

(3) 황산콜리스틴 성분의 안정성을 평가하기 위한 시험공정.

상기에서 제조한 펠릿형태의 6가지 다른 사료 조성물에 존재하는 황산콜리스틴 성분의 안정성은 실시예 1,(3)에 서술된 것과 동일한 방법으로 2주동안 40℃에서 저장되고 포장된 펠릿화 사료조성물에서 황산콜리스틴의 잔유퍼센트를 측정하여 실시예 1,(3)과 동일한 방법으로 평가한다.

여기서 얻은 시험결과는 하기 표 9에 표시했다.

상기 표 9의 시험결과에서, 황산콜리스틴의 복합입자가 β -전분 미세-입자없이 대두분말의 미세-입자를 갖는 시험제제번호 36일 함유하는 펠릿형상사료조성물(표 8의 반죽 D를 사용하여 제조)에 있어서 황산콜리스틴의 잔유퍼센트가 저장 2주에서 79.5% 즉 약 80%의 허용할 수 있는 수준으로 유지됨을 관찰했다.

이것은 β -전분 미세-입자를 본 발명에 따른 황산콜리스틴의 복합입자의 성분으로서 대두분말의 미세-입자로 전체적으로 대치하는 것을 나타낸다.

그외, 대두분말을 함유하고 실시예 6,(1)의 상기 단계(iv)에서 얻은 표 8의 반죽 B, C와 D가 대두분말 대신에 β -전분을 함유하는 반죽 A, E와 F 보다 더 높은 점성도 또는 밀도를 갖는 것을 관찰했다.

본 발명에 따른 활성성분으로 황산콜리스틴을 함유하는 새로운 안정화된 조성물에 있어서, 이 새로운 안정화된 조성물의 황산콜리스틴 성분은 허용할 수 없는 낮은 수준으로 비활성화되고 붕괴되는 것으로부터 안정화된다.

본 발명에 따른 황산콜리스틴의 안정화된 조성물은 가열하에 펠릿형태로 압축성형한 매쉬형테의 혼합사료와 혼합하는데 유용하다. 얻은 펠릿-형상 사료조성물을 장기간 저장후에도 허용할 수 있는 수준으로 항균황성을 유지할 수 있다.

Claims (8)

1. 분말형태의 조성물이 1중량부의 황산콜리스틴, 0.1~3중량부의 α -전분과 0.5~5.0중량부의 β -전분 또는 대두분말이나 β -전분과 대두분말의 혼합물로 이루어지고 이 혼합물의 중량을 기준하여 12중량% 이하의 함수량을 갖는 혼합물로 만든 분리한 복합입자가 250~750㎛ 범위의 입자크기를 갖고, 상기 혼합물로 만든 각 분리한 복합입자가 상기 혼합물의 개별 복합입자에 존재하는 α -전분으로 만든 연속상 또는 매트릭스내에 균등하게 분산되어 있는 분리한 미세-입자로서 황산콜리스틴과 β -전분과/또는 대두분말이 존재하는 내부구조를 가지므로서, 거의 모든 황산콜리스틴과 β -전분과/또는 대두분말의 미세-입자가 α -전분으로 된 연속상 또는 매트릭스에 함유되고, 필요하면, 안정화된 조성물이 상기 혼합물의 분리한 조성물입자를 과립형태로 압착성형한 과립형태임을 특징으로 하는, 활성성분으로 황산콜리스틴을 함유하고 과립분말형태인 안정화된 조성물.
2. 제1항에 있어서, 조성물 함유되어 있는 분리복합입자를 1중량부의 황산콜리스틴 0.2∼2의 중량부의 α -전분과 1∼2중량부의 β -전분이나 대두분말 또는 β -전분과 대두분말의 혼합물로서 이루어지고 이 혼합물의 중량을 기준하여 12중량% 이하의 함수량을 갖는 혼합물로 존재하는, 안정화된 조성물.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 황산콜리스틴:α -전분:β -전분 사이의 중량비가 1.0:0.2~2.0:1.0~2.0의 범위에 있는 황산콜리스틴, α -전분과 β -전분의 혼합물로 조성물에 함유되어 있는 복합입자를 제조하는, 안정화된 조성물.
4. 제1항에 있어서, 황산콜리스틴이 황산콜리스틴 A이거나 또는 황산콜리스틴 A와 황산콜리스틴 B의 혼합물로 이루어지는 안정화된 조성물.
5. 제1항에 있어서, 조성물에 함유되어 있는 각 복합입자가 10∼50중량%의 황산콜리스틴을 함유하는 안정화된 조성물.
6. 제1항에 있어서, 조성물 함유되어 있는 복합입자가 이 복합입자를 구성하는 혼합물의 중량을 기준하여 3∼10중량%의 함수량을 갖는 안정화된 조성물.
7. 제1항에 있어서, 조성물에 함유되어 있는 복합입자가 350∼500㎛ 범위의 입자크기를 갖는 안정화된 조성물.
8. (a) 0.1∼3중량부의 α -전분을 물에 용해시킨 페이스트-상 수용액을 갖는 1중량부의 황산콜리스틴 미세분말을 혼합하고 이 혼합물을 황산콜리스틴 입자가 α -전분의 페이스트-상 수용액에 잘 분산되고 부분적으로 용해될때까지 교반하고 생성된 혼합물을 균일한 페이스트로 형성시키는 단계.

   (b) 황산콜리스틴, α -전분과 물의 혼합물로 만든 생성된 균일한 페이스트를 0.5~5중량부의 β -전분 미세-입자와/또는 대두분말 미세-입자와 혼합하는 단계.

   (c) 첨가된 황산콜리스틴, α -전분, 물과 β -전분과/또는 대두분말의 혼합물을 반죽하고, 반죽된 혼합물을, 황산콜리스틴 미세-입자와 β -전분 미세-입자와/또는 대두분말 미세-입자가 물질에 존재하는 α -전분으로 만든, 함수, 연속상 또는 매트릭스내에 균일하게 분산되는 균일한 반죽-상 물질로 되게 하는 단계.

   (d) 상기 균일한 반죽-상 물질을 더 작은 조각으로 분할하는 단계.

   (e) 생성된 작은 조각을 이 작은 조각의 중량을 기준하여 10중량% 이하의 함수량으로 건조하는 단계.

   (f) 상기 건조된 작은 조각을 분쇄하여 분리된 복합입자로 이루어지는 분쇄된 물질을 얻고, 여기서 각 복합입자는 황산콜리스틴, α -전분과 β -전분과/또는 대두분말로 만들어지고, 황산콜리스틴의 미세-입자와 β -전분과/또는 대두분말의 미세-입자가 이 복합입자에 존재하는 α -전분으로 된 연속상 또는 매트릭스내에 균일하게 분산되는 내부구조를 가지므로서, 거의 모든 황산콜리스틴과 β -전분과/또는 대두분말의 미세-입자가 다른 입자크기를 갖는 상기 각 복합입자에 존재하는 α -전분의 연속상 또는 매트릭스에 포함되게 하는 단계.

   (g) 상술한 분쇄된 물질을 체질하여 250∼750㎛ 범위의 입자크기를 갖는 복합입자를 함유하는 분말을 회수하는 단계.

   (h) 필요에 따라, 상기 단계(g)에서 얻은 분말을 압착성형하여 과립을 형성시키는 단계로 이루어짐을 특징으로 하는, 황산콜리스틴과 β -전분과/또는 대두분말의 미세-입자가 혼합물의 개별복합입자에 존재하는 α -전분으로 만든 연속상 또는 매트릭스내에 균일하게 분산된, 유효성분으로 황산콜리스틴, α -전분과 β -전분과/또는 대두분말의 혼합물의 분리복합입자를 함유하는 분말의 형태인 조성물인, 유효성분으로 황산콜리스턴을 함유하는 안정화된 조성물의 제조방법.