KR100294935B1

KR100294935B1 - 경구용 시클로스포린 제제

Info

Publication number: KR100294935B1
Application number: KR1019970702717A
Authority: KR
Inventors: 제이. 조 무; 이. 레비 랄프; 제이. 파울리티 필립; 플로 로베르; 메를르 크리스띠앙
Original assignee: 프란시스 제이 메이어; 더 유니버시티 오브 노쓰 캐롤라이나 엣 채플 힐; 데이비드 엘. 윈터; 상스타트 메디칼 코포레이션
Priority date: 1995-08-25
Filing date: 1996-07-31
Publication date: 2001-07-12
Also published as: IL120673A0; SK53697A3; NO971890L; BG62875B1; HUP9801052A3; CA2202887A1; PL319898A1; EP0789561A4; WO1997007787A1; DE69632125T2; NZ313899A; JPH10509462A; DE69632125D1; SI9620014A; HUP9801052A2; EP0789561A1; HK1001956A1; IS4460A; CN1164828A; AU6644196A

Abstract

본 발명은 높은 생체 이용성을 갖고 경질 캡슐 또는 나노 입자로 투여할 수 있는 개선된 경구용 시클로스포린 제형에 관한 것이다. 본 발명의 제형에서, 시클로스포린은 하나 이상의 비이온성 계면활성제와 조합하여 있는 탄소수 2 내지 34개의 하나 이상의 알칸올 용매를 포함하는 경구적으로 허용되는 부형제 중에 운반된다. 본 발명의 제형은 하나 이상의 보조 용매를 추가로 함유할 수 있으며, 관심있는 보조 용매는 지방산 및 디올을 포함한다. 본 발명의 제형은 면역 억제 치료에서의 사용이 발견되었다.

Description

경구용 시클로스포린 제제 {ORAL CYCLOSPORIN FORMULATIONS}

수용자-공여자 조직 타입의 매칭을 통해 이식편 거부를 피하기 위한 노력에도 불구하고, 공여자 기관을 수용자 내로 도입시키는 이식 수술의 대부분에서, 면역 억제 치료는 수용자 내의 공여자 기관의 생존성을 유지시키는데 중요하다. 아자티오프린, 메토트렉세이트, 시클로포스파미드, FK-506, 라파마이신 및 코르티코스테로이드를 포함하는 다양한 면역 억제제가 이식 수술에서 사용되어 왔다. T-세포 매개 반응에 대한 우선적 효과로 인해 면역 억제 치료에서 사용이 증가된 약제는 시클로스포린이다.

시클로스포린은 균종 톨리포클라듐 인플라툼 감즈 (Tolypocladium inflatum Gams)에 의해 대사산물로서 생성되는 11개의 아미노산으로 구성된 고리형 폴리펩티드의 한 부류이다. 시클로스포린은 세포 주기의 G₀또는 G₁단계에서, 면역적격 림프구, 특히 T-림프구를 가역적으로 억제하는 것으로 관찰되었다. 많은 시클로스포린이 공지되어 있지만, 시클로스포린 A가 가장 널리 사용된다.

시클로스포린 A의 사용은 피부, 심장, 신장, 췌장, 골수, 소장 및 폐를 포함하는 동종이인자형 이식조직편의 생존성을 연장시키는 것으로 보고되어 있다. 동종이인자형 이식에서, 시클로스포린 A는 체액 면역성 및, 더 큰 정도로, 세포 매개 면역 반응, 예를 들면 동종이식편 거부, 지연형 과민증, 경험적 알레르기성 뇌척수염, 프로인트의 애쥬번트 관절염 및 이식편-수용자 질환을 억제하는 것으로 입증되었다. 시클로스포린의 사용은 성공적이었지만, 이식 후에 약제의 투여는 시클로스포린 치료의 잇점이 가역적이고, 일단 시클로스포린 A의 투여가 중단되면 이식편 거부가 일어나기 때문에 연속적으로 수행되어야 한다.

경구 투여 및 정맥내 투여 둘 모두를 위한 시클로스포린 제제가 개발되었지만, 투여의 용이함 및 더 우수한 환자 수용성 때문에 시클로스포린의 경구 투여가 바람직하다. 또한, 시클로스포린의 정맥내 투여는 경구용 제제의 사용으로는 관찰되지 않는 부작용인 과민 반응을 유발시킬 수 있다. 개발되고 현재 시판 중인 경구용 시클로스포린 제제는 연질 젤라틴 캡슐 및 용액 제제를 모두 포함하며, 이들은 모두 상표명 SANDIMMUNE^TM및 NEORAL^TM로 시판되고 있다.

면역 억제 치료에 경구용 시클로스포린 제제를 사용하는 데에 있어서, 간병자 및 제조자는 많은 문제를 인식해야 한다. 경구용 시클로스포린 제제에 있어서, 시클로스포린 생체 이용성은 물중에서 시클로스포린의 비혼화성 및 수성 환경에서 침전하는 시클로스포린의 경향 때문에 제한될 수 있다. 그외에, 경구용 제제에 존재하는 시클로스포린의 농도는 시클로스포린의 소수성 성질로 인해 제한될 수 있다. 또한, 위장관에 의한 시클로스포린 흡수는 하나의 제제 배치로부터 다음 배치까지 불규칙적일 수 있으며, 이는 치료하는 동안 시클로스포린 혈중 농도의 계속된 모니터링을 필요로 한다. 최종적으로, 포장 및 저장 안정성이 경구용 제제에 있어서 하나의 문제다. 예를 들어, 시클로스포린의 연질 젤라틴 캡슐 제제의 경우에, 기밀한 포장이 사용되어야 하며, 이는 벌키성 및 고비용으로 인해 불리하다. 또한, 시클로스포린 제제는 시클로스포린 결정화가 일어날 수 있기 때문에, 저온에서 불안정할 수 있다.

따라서, 바람직한 경구용 시클로스포린 제제는 상기 문제의 최소한 일부를 해결한 제제일 것이다. 이상적으로, 경구용 제제는 높은 생체 이용성을 조장하고, 고농도의 시클로스포린을 포함하며, 경질 캡슐 형태로 제조될 수 있을 것이다.

관련 문헌

문헌 [Physician's Desk Reference (1994) pp 2071-2074]에는 상표명 SANDIMMUNE^TM으로 현재 시판되는 경구용 시클로스포린 제제가 기술되어 있다.

경구용 시클로스포린 제제는 또한, NEORAL^TM패키지 인서트, (1995) [Sandoz Pharmaceuticals Corporation, East Hanover, New Jersey, 07936]에도 기술되어 있다.

시클로스포린 및 이들의 유도체를 기술하고 있는 관심있는 미합중국 특허는 제 4,220,641호, 제 4,639,434호, 제 4,289,851호 및 제 4,384,996호를 포함한다. 미합중국 특허 제 5,047,396호에는 시클로스포린의 투여용 정맥내 제제가 기술되어 있다. 미합중국 특허 제 4,388,307호, 제 4,970,076호 및 제 4,990,337호에는 경구용 시클로스포린 제제의 제조 방법이 기술되어 있다.

약제학적 제제의 경구 전달용 경질 캡슐의 제조 방법은 미합중국 특허 제 4,882,618호, 제 4,576,284호, 제 5,120,710호 및 제 4,894,235호에 기술되어 있다.

발명의 요약

경구용 시클로스포린 제제, 및 면역억제 치료에서 이들의 사용방법이 제공된다. 본 발명의 제제에서, 시클로스포린은 적어도 하나의 비이온성 계면활성제와 배합하여 탄소수 2 내지 3개의 적어도 하나의 알칸올 용매를 포함하는 경구적으로 허용되는 부형제 중에 존재한다. 본 발명의 제제는 하나 이상의 보조용매를 추가로 포함할 수 있으며, 여기에서 관심있는 보조용매는 지방산 에스테르 및 디올이다. 시클로스포린 제제는 경질 캡슐로서 포장될 수 있다. 폴리옥시알킬렌 계면활성제를 포함시킴으로써, 안정한 분산액의 수성 매질로의 희석시에, 무정형의 생체 이용성 시클로스포린 나노 입자가 제공된다.

본 발명은 경구용 시클로스포린 제제 분야에 관한 것이다.

도 1은 본 발명에 따르는 수개의 경구용 제제에 대해 쥐를 대상으로 달성된 시클로스포린 최고 농도(C_max)를 도시한 도면이다. 여기에서, C_max는 SANDIMMUNE^TM경구용 제제(SO)에 의해 달성되는 C_max와 비교한 상대값으로서 나타내었다.

도 2는 도 1에 도시된 각각의 제제에 대해 C_max가 발생한 시간(T_max)를 도시한도면이다. 여기에서, T_max는 SANDIMMUNE^TM경구용 제제(SO)에 의해 달성되는 T_max와 비교한 상대값으로서 제공된다.

도 3은 도 1에 도시된 각각의 제제에 대해 혈중 농도-시간 곡선하의 상대 면적(AUC)를 도시한 도면이다. 여기에서, AUC는 SANDIMMUNE^TM경구용 제제(SO)에 대한 AUC 값과 비교한 상대값으로서 제공된다.

도 4는 SANDIMMUNE^TM경구용 용액 (도면에서는 "Sand)"뿐만 아니라, 본 발명에 따르는 수개의 경구용 제제에 대해 사람을 대상으로 달성된 시클로스포린 최고 농도(C_max)를 도시한 도면이다.

도 5는 도 4에 도시된 각각의 제제에 대해 혈중 농도-시간 곡선하의 면적(AUC)를 도시한 도면이다.

도 6은 도 4에 도시된 각각의 제제에 대해 C_max가 발생한 시간(T_max)을 도시한 도면이다.

생체 이용성을 조장하고 캡슐, 특히 경질 캡슐로서 제형화될 수 있는 경구용 시클로스포린 제제가 제공된다. 본 발명의 제제에서, 시클로스포린은 적어도 하나의 비이온성 계면활성제와 배합하여 탄소수 2 내지 3개의 적어도 하나의 알칸올 용매를 포함하는 경구적으로 허용되는 부형제 중에 존재한다. 본 발명의 제제는 적어도 하나의 보조용매를 추가로 포함할 수 있으며, 여기에서 관심있는 보조 용매는지방산 에스테르 및 디올을 포함한다. 본 발명의 제제의 성분들은 각각 약제학적으로 허용된다. 높은 생체 이용성을 제공하는 것 이외에, 본 발명의 제제는 특정 제제의 한 배치로부터 다음 배치까지 재현가능한 시클로스포린 흡수를 제공한다. 본 발명의 제제는 면역억제 치료에서 사용될 수 있다.

많은 시클로스포린이 당업계에서 면역억제 활성을 나타내는 것으로 공지되어 있으며, 본 발명의 경구용 제제로 전달될 수 있다. 본 발명의 제제로 투여될 수 있는 시클로스포린은 시클로스포린 A, 시클로스포린 B, 시클로스포린 C, 시클로스포린 D 및 시클로스포린 G, 및 이들의 합성 유사체를 포함한다 [참조 : Merck Index (1989) 2759]. 본 발명의 경구용 제제는 시클로스포린 A의 전달에 특히 적합하다. 본 발명의 제제로 전달되는 경우, 시클로스포린 A는 제제의 부형제 성분의 부피를 기준으로 하여, 50 내지 150㎎/㎖, 일반적으로 100 내지 150㎎/㎖의 농도로 존재할 것이다.

본 발명의 제제의 부형제 성분은 알칸올 용매 성분을 포함하며, 여기에서 알칸올 용매 성분은 적어도 하나의 알칸올, 일반적으로 3개 이하의 서로 다른 알칸올, 더욱 일반적으로 2개 이하의 서로 다른 알칸올을 포함할 것이고, 여기에서 알칸올은 일반적으로 탄소원자 1.5개 당 히드록실기가 1개 이하가 되도록, 2 내지 3개의 탄소원자 및 1 내지 2개의 히드록실기를 포함할 것이다. 적합한 알칸올은 에탄올 및 프로필렌 글리콜을 포함한다. 제제 중의 알칸올 용매의 총량은 제제의 적어도 약 1%(v/v), 일반적으로 적어도 약 3%(v/v)이고, 95%(v/v) 만큼 많을 수 있지만, 대개 약 5 내지 75%(v/v), 일반적으로 약 5 내지 60%(v/v), 더욱 일반적으로약 10 내지 60%(v/v)일 것이다. 에탄올이 제제 중에 알칸올 용매로서 존재하는 경우, 에탄올의 양은 제제의 5 내지 20%(v/v), 일반적으로 약 5 내지 15%(v/v)일 수 있는 반면, 프로필렌 글리콜이 알칸올 용매로서 존재하는 경우에, 본 발명의 제제 중의 프로필렌 글리콜의 양은 제제의 약 5 내지 90%(v/v), 일반적으로 약 5 내지 85%(v/v), 더욱 일반적으로는 약 10 내지 50%(v/v)일 수 있다.

또한, 경구적으로 허용되는 부형제 중에 적어도 하나의 비이온성 폴리옥시알킬렌 계면활성제, 일반적으로 2개 이하의 비이온성 폴리옥시알킬렌 계면활성제가 존재할 것이다. 폴리옥시알킬렌 계면활성제는 약 5 내지 20, 일반적으로 약 8 내지 16의 친수성-친유성-밸런스(HLB)를 가질 것이다. 바람직하게는, 본 발명의 제제에 사용되는 비이온성 폴리옥시알킬렌 계면활성제는 폴리옥시에틸렌 화합물일 것이다. 관심있는 폴리옥시에틸렌 화합물은 에톡실화된 알코올, 즉 폴리옥시에틸렌 알코올 또는 에톡실화된 지방 알코올 (여기에서, 알코올 부분은 10 내지 18개, 일반적으로는 10 내지 14개의 탄소원자를 갖는 것이 통상적임), 및 이들의 에테르 및 에스테르 치환체; 및 탄소수 4 내지 6개, 일반적으로는 탄소수 6개의 폴리올 (여기에서, 폴리올은 폴리올 무수물, 예를 들어 소르비탄일 수 있음)의 지방산 부분 에스테르, 일반적으로 모노에스테르의 폴리옥시에틸렌 유도체를 포함한다. 본 발명의 계면활성제의 지방산 부분은 전형적으로 10 내지 18개의 탄소원자를 가질 것이다. 에틸렌옥시드기의 수는 2 내지 30개, 일반적으로는 약 2 내지 25개인 것이 통상적일 것이다. 바람직한 계면활성제는 폴리옥시에틸렌(4) 라우릴 에테르(BRIJ30^TM) 및 폴리옥시에틸렌(20) 모노 소르비탄 모노-올레에이트 (TWEEN 80^TM)이다. 본 발명의 제제 중에 존재하는 비이온성 계면활성제의 총량은 제제의 5 내지 65%(v/v), 일반적으로는 약 5 내지 60%(v/v)일 것이다. TWEEN 80^TM이 제제 중에 존재하는 경우, 이것은 일반적으로 제제의 5 내지 60%(v/v), 더욱 일반적으로 약 10 내지 50%(v/v)의 양으로 존재할 것이다. BRIJ30^TM이 본 발명의 제제 중에 존재하는 경우, 이것은 일반적으로 제제의 10 내지 45%(v/v), 더욱 일반적으로 약 15 내지 40%(v/v)의 양으로 존재할 것이다.

본 발명의 제제는 하나 이상의 보조 용매, 일반적으로 3개 이하의 서로 다른 보조 용매, 더욱 일반적으로 2개 이하의 서로 다른 용매를 추가로 포함할 수 있으며, 여기에서 적합한 보조 용매는 지방산 에스테르 및 디올을 포함하는데, 보조 용매는 100% 지방산 에스테르, 100% 디올, 또는 이들의 배합물일 수 있다. 제제 중에 존재하는 보조 용매의 총량은 약 20 내지 80%(v/v)일 수 있고, 약 25 내지 75%(v/v)가 일반적일 것이다. 제제 중에 존재하는 경우, 본 발명의 제제에서 보조 용매 대 용매의 비는 약 1:1 내지 15:1일 수 있으며, 약 1:1 내지 13:1이 일반적일 것이다.

본 발명의 제제에서 보조 용매로서 사용될 수 있는 지방산 에스테르는 지방산의 탄화수소 사슬 길이가 12개 내지 18개의 탄소원자, 일반적으로 14개 내지 18개의 탄소원자인 지방산 에스테르인데, 지방산 에스테르는 저급 알칸올의 모노에스테르일 것이다. 적합한 지방산 에스테르는 짝수개의 지방산 사슬을 포함하며, 탄화수소 사슬은 포화되거나 불포화될 수 있고, 일반적으로 2개 이하의 불포화 자리를 가질 수 있다. 관심있는 지방산은 식물 또는 포유동물 유래의 지방산이며, 팔미트산, 스테아르산, 팔미트올레산, 리놀레산, 리놀렌산 등, 특히 미리스트산 및 올레산을 포함하는 것이 일반적일 것이다. 지방산 모노에스테르의 알코올은 분지를 갖거나 갖지 않은, 탄소원자 길이가 2 내지 4개, 일반적으로 2 내지 3개인 저급 알칸올일 것이다. 특히 관심있는 지방산 에스테르는 미리스트산 이소프로필 및 올레산 에틸이다. 존재하는 경우, 미리스트산 이소프필은 전체 제제의 약 55 내지 75%(v/v)이고, 존재하는 경우, 올레산 에틸은 전체 제제의 약 35 내지 75%(v/v)일 것이다. 일반적으로, 지방산 에스테르는 제제 중의 계면활성제의 양과 적어도 거의 동일(v/v)하거나 8배까지 많은 양, 일반적으로 제제 중의 계면활성제의 양의 5배 이하의 양(v/v)으로 존재할 것이다.

디올이 또한 본 발명의 제제 중에 존재할 수 있으며, 여기에서 디올은 지방산 에스테르 보조 용매에 부가하여, 또는 이것 대신에 존재할 수 있다. 보조 용매로서 관심있는 디올은 일반적으로 생리적 온도에서 액체이고, 탄소수 8 내지 28개, 일반적으로 탄소수 16 내지 20개의 디올을 포함하며, 여기에서 디올은 알킬렌이 2 내지 3개의 탄소원자를 갖는 폴리알킬렌 디올일 수 있다. 보조 용매로서 사용하기 위해 적합한 디올은 분자량이 약 200 내지 800 달톤, 일반적으로 약 200 내지 650 달톤일 수 있다. 특히 관심있는 디올은 폴리에틸렌 글리콜, 특히 폴리에틸렌 글리콜 200 (PEG₂₀₀), 폴리에틸렌 글리콜 400 (PEG₄₀₀), 폴리에틸렌 글리콜 600 (PEG₆₀₀)등을 포함하며, PEG₄₀₀이 바람직하다. 본 발명의 제제 중에 보조 용매로서 존재하는 경우에, 디올의 양은 제제의 약 5 내지 60%(v/v), 일반적으로 5 내지 55%(v/v)일 것이다.

바람직하게는 제제 중에 무정형 나노 입자를 형성시키기 위해, 저급 알칸올의 총량은 일반적으로 약 25 내지 60 중량%, 더욱 일반적으로 약 30 내지 50 중량%일 것이다. 알킬렌옥시 화합물(들)의 총량은 일반적으로 약 20 내지 50 중량%, 더욱 일반적으로 약 25 내지 40 중량%일 것이다. 폴리옥시알킬렌 화합물의 배합물이 사용되는 경우, 지방산 에스테르의 양은 일반적으로 폴리옥시알킬렌 화합물의 약 25 내지 100%일 것이다.

본 발명의 제제에서, 보조 용매는 그 자체로, 제제에 점도, 안정성 등과 같은 바람직한 물리적 성질을 제공할 수 있다. 필요한 경우, 제제는 제제에 목적하는 물리적 성질을 제공하는 부가적 물질, 예를 들어 농후제, 현탁제, 응고제 등을 추가로 함유할 수 있으며, 이러한 물질은 아라비아 고무, 카르복시메틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 레시틴, 메틸 셀룰로오스, 고분자량 폴리에틸렌 글리콜, 예를 들어 약 1000 내지 6000 달톤, 일반적으로 1000 내지 5000 달톤의 분자량을 갖는 폴리에틸렌 글리콜, 포비돈, 알긴산 나트륨, 트래거캔스 고무 등을 포함한다. 또한, 본 발명의 제제 중에는 다양한 기능을 제공하는 많은 부성분, 예를 들어 효소 억제제, 방부제, 산화방지제, 항균제, 안정화제 등이 존재할 수 있다. 제제 중에 존재하는 경우, 이들 농후제 및 기타 첨가제의 총량은 제제의 5 중량% 이하, 일반적으로 2 중량% 이하, 더욱 일반적으로 1 중량% 이하가 통상적일 것이다. 당업계에 공지되어 있는, 많은 부형제가 또한 본 발명의 제제 중에 존재할 수 있다.

본 발명의 제제는 광범위한 온도에서 안정하며, 여기에서 안정하다는 것은 제제의 물리적 보전이 이루어진다는 것, 예를 들어 시클로스포린 활성제의 결정화가 일어나지 않는다는 것을 의미한다. 본 발명의 제제가 안정한 온도 범위에는 냉장 저장에 사용되는 온도와 같은 저온이 포함되며, 여기에서 그러한 저온은 통상적으로 약 0 내지 15℃, 더욱 통상적으로 약 2 내지 8℃이다.

본 발명의 제제는 캡슐 형태로, 예를 들어 경질 및 연질 캡슐로 투여하는데 적합한다. 액체 제제를 포함하는 경질 캡슐의 제조 방법은 당업계에 공지되어 있으며, 본원에 참고로 편입되는 미합중국 특허 제 4,822,618호 및 제 4,576,284호에 기술되어 있다. 일반적으로, 본 발명의 제제에서 사용될 수 있는 경질 캡슐은 2개의 부분, 즉 쉘 부분 및 캡 부분을 포함할 것이다. 쉘 부분과 캡 부분은 서로 꽉 맞물려서 경질 캡슐 쉘 내에 밀봉된 일정 부피의 둘러싸인 공동을 생성시킨다. 쉘 및 캡 부분은 전분 또는 젤라틴과 같은 친수성 중합체로부터 제조될 수 있다. 경질 캡슐을 제조하는 데에 있어서는, 액체 제제가 쉘 부분에 주입된 후에, 캡슐은 쉘 부분 위에 캡 부분을 꽉 맞물리게 함으로써 밀봉될 것이다. 두 부분 사이의 밀봉은 본원에 참고로 편입되는 EP 제 116744호에 기술된 바와 같은 밀봉제를 사용함으로써 확실하게 되어서, 캡슐로부터 주입된 제제의 누출이 방지될 수 있다. 위에서의 분해를 방지하기 위해, 본 발명의 제제를 포함하는 캡슐은 위의 산성 환경에서 캡슐의 분해를 억제하는 장용성 피복제로 피복될 수 있다. 다양한 장용성 피복제가 당업계에 공지되어 있다 [참조 : 본원에 참고로 편입되는 미합중국 특허 제 5,206,219호].

조성물, 특히 나노 입자 생성 제제는 먼저 시클로스포린을, 일반적으로 시클로스포린을 용해시키기 위해 사용되는 조성물의 약 50 중량 미만의 저급 알칸올(소량의 폴리옥시알킬렌 화합물이 또한 포함될 수 있음) 중에 용해시킴으로써 제조될 수 있다. 상승된 온도, 일반적으로 약 60 내지 90℃가 사용될 수 있다. 시클로스포린을 용해시킨 후에, 다량의 폴리옥시알킬렌 화합물이 첨가될 수 있으며, 전체 제제는 적합한 성분의 첨가에 의해 목적하는 비가 될 수 있다. 일반적으로, 시클로스포린은 저급 알칸올 (임의적으로, 폴리옥시알킬렌 화합물의 일부를 포함함) 중에, 약 1:1.5 내지 5, 더욱 일반적으로 1:2 내지 4의 중량비로 용해될 수 있다.

본 발명의 제제는 면역 억제 치료에서 사용될 수 있다. 면역 억제 치료는 특발성 신증 증후군, 타입 I 인슐린-의존성 당뇨병, 베체트 증후군, 활동성 크로운병, 무형성 빈혈, 심한 코르티코스테로이드-의존성 천식, 건선, 류머티스성 관절염, 및 면역계가 병원성 역할을 할 수 있는 기타 질환을 포함하는 매우 다양한 질환에서 지적된다. 동종 및 이종 기관, 조직 또는 세포 이식을 포함하는 이식의 상황에서 본 발명의 제제의 사용이 특히 관심이 있으며, 여기에서 면역 억제는 이식 후에 이식된 기관, 조직 또는 세포의 생존성을 확실히 유지시키기 위해, 즉 예를 들어 골수 이식 후에 이식편 거부 또는 이식편 대 수용자 질환을 예방하기 위해 필요하다.

수용자에 면역억제 치료를 제공하기 위해 본 발명의 제제를 사용하는 데에 있어서는, 유효량의 시클로스포린이 경구적으로 투여되어, 치료하려는 특정 상태에 따라, 수용자에서 면역 억제의 목적하는 수준이 달성될 것이다. 이식의 경우에, 일반적으로 시클로스포린의 초기 투여량이 수술 전에 투여될 것이다. 공여자 기관을 수용자에게 이식한 후에, 시클로스포린은 반복적으로, 즉 장기적으로 수용자에게 투여되어 면역 억제를 유지시킬 것이다. 초기 투여량은 이식하기 4 내지 12시간 전에 투여될 것이고, 수용자 1㎏에 대해 10 내지 18㎎, 일반적으로 10 내지 15㎎일 수 있다. 수술 후에, 초기 투여량이 1 내지 3주, 일반적으로 1 내지 2주 동안 매일 계속되는 것이 통상적일 것이다. 그런 다음, 투여량은 매일 3 내지 10㎎/kg, 일반적으로 3 내지 6㎎/kg의 유지 투여량으로 점점 감소될 수 있다. 투여량이 유지 수준으로 감소되는 비율은 1주당 3 내지 8%일 수 있으며, 일반적으로 1주당 약 5%일 것이다. 투여량은 HPLC, RIA, ELISA 또는 TDx 검정법에 의해 측정하여, 통과 혈중 농도를 기준으로 150 내지 250 ng/㎖의 농도를 유지하도록 조절하는 것이 전형적일 것이다. 본 발명의 제제는 부가적 약제와 함께 투여될 수 있으며, 여기에서는 보조 치료가 추천되며 이는 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어, 본 발명의 제제는 부신 코르티코스테로이드, 아자티오프린 등과 함께 투여될 수 있다.

공여자 기관을 수용자에 이식하는 것과 함께 본 발명의 제제를 투여하는 것은 공여자 기관의 존재에 대한 수용자의 면역 반응의 억제의 결과로서 수용자 내에서 공여자 기관의 생존성을 연장시킬 것이다. 용어 "생존성의 연장"은 공여자 기관이 면역억제 치료가 이식과 함께 사용되지 않은 경우 보다 더 긴 기간동안 수용자 내에서 생존성을 유지함을 의미한다. 따라서, 생존성의 연장은 무한한 기간 동안 생존성의 유지를 포함한다. 공여자 기관은 그것이 수용자 환경에서 기능성을 유지하는 한 생존성인 것으로 여겨진다.

사용자의 편리함을 위해, 적합한 양의 시클로스포린, 하나 이상의 투여량 수준 및 보조 용매, 즉 저급 알칸올(들) 및 폴리옥시알킬렌 화합물(들), 예를 들어 에탄올 및 프로필렌 글리콜 중 하나 이상, 및 폴리소르베이트 80 및 PEG400 중 하나 이상을 갖는 킷이 제공될 수 있다.

하기의 실시예는 비제한적으로 예시를 위해 제공된다.

본 발명에 따르는 수개의 경구용 시클로스포린 제제를 제조하였다. 그런 다음, 제조한 제제 중의 시클로스포린의 생체 이용성을 쥐 및 사람을 대상으로 관찰하였다.

I. 경구용 시클로스포린 제제

하기의 경구용 시클로스포린 A 제제를 제조하였다. 각각의 경우에, 100㎎의 CsA, 제시된 양의 계면활성제 및 제시된 양의 에탄올 또는 프로필렌 글리콜을 1.0㎖의 용량 플라스크에 첨가하고, 적합한 부피의 지방산 에스테르 및/또는 디올을 첨가하여 1.0㎖의 최종 부피로 만들었다.

제 제	조 성
19	EtOH 0.1㎖ (10%)Tween 80 300㎎ (0.278㎖)IM 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.622㎖)(531㎎)
20	EtOH 0.05㎖ (5%)Brij 30 350㎎ (0.368㎖)IM 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.582㎖)(496㎎)
21	PG 0.05㎖ (5%)Brij 30 350㎎ (0.368㎖)IM 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.582㎖)(496㎎)
22	EtOH 0.1㎖ (10%)Tween 80 300㎎ (0.278㎖)EO 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.622㎖)(541㎎)
23	EtOH 0.05㎖ (5%)Brij 30 350㎎ (0.368㎖)EO 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.582㎖)(506㎎)
24	PG 0.05㎖ (5%)Brij 30 350㎎ (0.368㎖)EO 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.582㎖)(506㎎)
33	EtOH 0.1㎖ (10%)Brij 30 150㎎ (0.158㎖)IM 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.742㎖)(633㎎)
34	EtOH 0.1㎖ (10%)Brij 30 150㎎ (0.158㎖)EO 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.742㎖)(646㎎)
35	EtOH 0.1㎖ (10%)Tween 80 500㎎ (0.463㎖)PG 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.437㎖)(453㎎)
36	EtOH 0.1㎖ (10%)Tween 80 300㎎ (0.278㎖)PG 100㎎ (0.097㎖)EO 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.525㎖)(465㎎)
37	EtOH 0.1㎖ (10%)Tween 80 300㎎ (0.278㎖)PEG 400 100㎎ (0.088㎖)EO 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.534㎖)(464㎎)

제 형	조 성
38	EtOH 0.1㎖ (10%)Brij 30 300㎎ (0.316㎖)PG 100㎎ (0.097㎖)EO 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.487㎖)(424㎎)
39	EtOH 0.1㎖ (10%)Brij 30 300㎎ (0.316㎖)PG 200㎎ (0.193㎖)EO 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.391㎖)(340㎎)
40	PG 300㎎ (290㎖)Brij 30 300㎎ (0.316㎖)EO 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.394㎖)(343㎎)
41	EtOH 0.05㎖ (5%)Brij 30 150㎎ (0.158㎖)Tween 80 100㎎ (0.093㎖)EO 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.649㎖)(565㎎)
42	PG 0.05㎖ (5%)Brij 30 150㎎ (0.158㎖)Tween 80 100㎎ (0.093㎖)EO 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.649㎖)(565㎎)
43	EtOH 0.10㎖ (10%)Tween 80 400㎎ (0.371㎖)PG 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.529㎖)
44	EtOH 0.10㎖ (10%)Tween 80 400㎎ (0.371㎖)PEG₄₀₀100㎖가 되게 하는 양 (0.529㎖)(601㎎)
45	EtOH 0.10㎖Tween 80 300㎎ (0.278㎖)PG 약 250㎎ (0.243㎖)PEG₄₀₀약 250㎎ (0.220㎖)
46	EtOH 0.10㎖ (10%)Tween 80 100㎎ (0.093㎖)PG 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.807㎖)
48	EtOH 0.10㎖ (10%)Tween 80 200㎎ (0.186㎖)PG 약 250㎎ (0.243㎖)PEG₄₀₀약 250㎎ (0.220㎖)

제 형	조 성
49	EtOH 0.10㎖ (10%)Tween 80 600㎎ (0.558㎖)PG 1㎖가 되게 하는 양 (0.342㎖)
50	EtOH 0.10㎖ (10%)Tween 80 300㎎ (0.278㎖)PG 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.622㎖)
51	EtOH 0.10㎖ (10%)Tween 80 200㎎ (0.186㎖)PG 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.714㎖)
52	EtOH 0.05㎖ (5%)Tween 80 400㎎ (0.371㎖)PG 1.0㎖가 되게 하는 양 (0.579㎖)

PG = 폴리프로필렌 글리콜 ; EtOH = 에탄올 ;

Brij 30 = 폴리옥시에틸렌(4) 라우릴 에테르 ;

Tween 80 = 폴리옥시에틸렌(20) 모노 소르비탄 모노-올레에이트 ;

IO = 미리스트산 이소프로필 ;

EO = 올레산 에틸

II. 제제 19 - 24 및 33 - 42에 대한 생체내 생체 이용성 연구

제제 19 - 24 및 33 - 42 중의 시클로스포린의 생체 이용성을 하기와 같이 연구하였다. 생체 이용성의 측정으로서, 하기의 약동학 변수를 측정하였다 : (a) 시클로스포린의 최고 혈중 농도 (C_max) ; (b) C_max에 도달하기 위해 필요한 시간 (T_max) ; 및 혈중 농도 시간-곡선 시간 하의 면적 (AUC). 제제 19 - 24 및 33 - 42 이외에, SANDIMMUNE^TM경구용 용액 (SO) 중의 시클로스포린의 생체 이용성을 유사한 조건 하에서 비교를 위해 관찰하였다. 상기 제제 각각에 대해, 체중이 250 내지 350 g인 CsA-경험이 없는 스프라그 돌리(Sparague Dawley) 쥐에 펠릿화된 표준 먹이 (Agway^TM3000, Granville Mill, Greensboro, NC) 및 물을 임의로 공급하였다. 실험 하루 전에, 실리콘 고무 캐뉼라를 가벼운 에테르 마취하에 우측 경부 및 우측 대퇴부 정맥 내에 삽입하였다. 하룻밤 금식 후에, CsA를 위관 영양법에 의해 투여하였다.

투여 후에, 200㎕의 혈액 샘플을 경부 정맥으로부터 0.3㎎의 동결건조된 NaEDTA를 함유하는 0.5㎖의 폴리프로필렌 마이크로퓨즈관에 채취하였다. 경구용 제제가 투여된 동물에 대한 샘플 채취 시간은 투여 후 0, 0.5, 1, 2, 4, 8, 12, 24, 36, 48 및 72시간이었다.

몇가지 대사산물을 포함하여 CsA를 형광 분극 면역 검정법 (FPI) (TDx, Abbot Lab)에 의해 전혈 중에서 측정하였다. 신속하게, 150㎕의 전혈 샘플을 정량적으로 1.5㎖의 마이크로퓨즈관에 옮겼다. 세포를 50㎕의 계면활성제-함유 가용화제로 분해(lysis)하고 용해시켰다. 그런 다음, 단백질을 300㎕의 아세토니트릴로 침전시켰다. 원심분리 후에, 상등액을 Abbott Diagnostics에 의해 추천된 방법에 따라 TDx 자동 분석기에서 FPI 검정하였다. TDx 검정법은 원래 사람 혈액에 대해 개발되었기 때문에, 추천된 방법의 일부를 하기와 같이 변형시켰다. 공지된 CsA 농도의 일련의 표준 용액을, 공지된 양의 CsA를 EDTA로 처리된 쥐의 혈액에 첨가함으로써 제조하였다. 샘플 중의 CsA 농도가 1.0㎍/㎖ 초과인 것으로 예상될 때에, 혈액 샘플을 pH 7의 0.1M-인산염 완충액 중에서 10배 희석시켰다. 희석된 샘플에 대해, 부피적으로 10% 쥐의 혈액 및 90% 인산염 완충액인 공지된 양의 CsA를 함유하는 일련의 표준 용액을 사용하여 또 다른 보정 곡선을 만들었다.

기술적 약동학 변수를 비-구획 분석(non-compartmental analysis)으로부터 수득하였다. 최고 농도 (C_max) 및 최고 농도가 나타나는 시간 (T_max)을 각각의 쥐에 대한 미처리(raw) 농도-시간 프로필의 검사에 의해 측정하였다. 시간 0으로부터 최종 데이터 포인트 까지의 혈중 농도-시간 곡선하의 면적 (AUC_0-t)을 선형 사다리꼴방법에 의해 계산하였다. 혈중 농도-시간 곡선의 꼬리 부분하의 나머지 면적 (AUC_t-∞)을 최종 관찰 농도 (C^*) 대 농도-시간 프로필의 말단 제거 상과 관련된 1차 속도 상수 (λ_z)의 비로서 측정하였다. 속도 상수 λ_z를 농도-시간 프로필의 겉보기 말단 로그-선형 상(즉, 분석하의 프로필에 따라, 최종 3 내지 5개의 데이터 포인트)에서의 농도-시간 데이터의 로그-선형 회귀에 의해 측정하였다. 총 AUC (AUC_t-∞)를 AUC_0-t와 AUC_t-∞의 합으로서 얻었다.

각각의 제제에 대한 결과를 SO에 대해 얻어진 결과와 비교하였고, 도 1 내지 3에 제공한다. 결과는, 제제의 대부분에 대해, 본 발명의 제제의 더 큰 AUC 값에 의해 나타나는 바와 같이, SANDIMMUNE^TM경구용 용액 (SO)과 비교하여 본 발명의 제제에 의해 시클로스포린의 더 큰 생체 이용성이 달성됨을 입증한다.

III. 제제 35, 43 - 46 및 48 - 52의 생체내 사람 생체 이용성

이상적 체중으로부터 편차가 20% 이하인 19세 내지 55세의 건강한 남성 48명을 피험자로 이용하였다. 단일 투여량, 금식, 무작위, 이중 맹목, 3가지 방식의 크로스오버 연구를 수행하였다. 48명의 피험자를 무작위로 8명씩 6개의 그룹으로 나누었다. 각각의 그룹에 3가지 다른 경우 (각각의 경우는 7일간의 세척기간에 의해 분리됨)로, 상기 제제 또는 SANDIMMUNE^TM경구용 용액 (SO)로부터 300㎎의 단일 투여량의 시클로스포린을 투여하였다.

피험자는 투여 전 10시간 및 투여 후 4시간에 금식하도록 요구되었다. 투여전 1시간 내지 투여 후 2시간을 제외하고는, 연구하는 동안 물은 임의로 허락되었다. 투여 전에, 15㎖의 혈액 샘플을 채취하였다. 투여를 위해, 제제의 3㎖ 분취액 (300㎎)을 200㎖의 쵸컬릿 밀크와 배합시키고, 경구적으로 섭취시켰다. 10㎖의 혈액 샘플을 t = 0, 0.5, 1, 1.5, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 20 및 24시간에 채취하였다. 연구 후 15㎖의 혈액 샘플을 또한 채취하였다.

전혈 샘플 중의 시클로스포린 A의 농도를 제조자의 지시에 따라 TDx (Abbott Diagnostics, N. Chicago, IL)를 사용하여 검정하였다.

비-구획 약동학을 표준 방법을 사용하여 유도하였다. 최고 전혈 농도 (C_max) 및 이것의 발생 시간 (T_max)은 농도-시간 데이터로부터 수득하였다. 혈중 농도 시간 곡선 하의 면적(AUC)은 감도의 한계 초과의 최종 혈중 농도 (25 ng/㎖)까지 선형 사다리꼴 규칙에 의해 계산하고, 무한대로 외삽시켰다.

각각의 제제에 대해 관찰된 C_max, T_max및 AUC 값을 평균하였다. 각각의 제제에 대한 평균값을 도 4 내지 6에 나타내었다. 결과는, 시험된 각각의 제제에 대해, C_max가 동일한 조건하에서 SANDIMMUNE^TM경구용 용액 (SO)를 사용하는 경우 보다 최소한 2배 빠르게 발생함을 증명한다. 또한, 시험 제제에 대해 관찰된 AUC는 동일한 조건하에서 SANDIMMUNE^TM경구용 용액 (SO)에 대해 관찰된 것보다 최소한 2000 ng·hr/㎖ 더 컸다. 상기 결과에 근거하여, 제제 35, 43 - 46 및 48 - 52는 SANDIMMUNE^TM경구용 용액 (SO) 보다 더 큰 생체 이용성을 제공한다.

수성 매질 중에서의 희석에 의한 무정형 나노 입자의 형성을 위한 제제를 제조하였다.

IV. 나노 입자 제제

A. 5 g의 시클로스포린 A를 5㎖의 에탄올에 첨가하였다. 혼합물을 시클로스포린 A의 용해가 완결될 때까지 교반시켰다. 생성된 용액에 25 g의 폴리소르베이트 80을 첨가하고, 1,2-프로필렌 글리콜을 첨가하여 부피를 50㎖로 만들었다. 혼합물을 균질 용액이 생성될 때까지 실온에서 충분히 교반시켰다.

B. 5 g의 시클로스포린 A를 5㎖의 에탄올에 첨가하였다. 혼합물을 시클로스포린 A의 용해가 완결될 때까지 교반시켰다. 생성된 용액에 15 g의 폴리소르베이트 80을 첨가하고, 1,2-프로필렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜 400의 혼합물을 첨가하여 부피를 50㎖로 만들었다. 혼합물을 균질 용액이 생성될 때까지 실온에서 충분히 교반시켰다.

C. 1㎖의 실시예 1에서 수득한 용액을 사람에게 농축 에멀션 또는 마이크로에멀션을 경구 투여하기 위해 추천되는 유리 주사기를 사용하여 50㎖의 물 중에 첨가하였다. 용액을 첨가한 후, 빠르게 용해시키고, 콜로이드성 현탁액으로서 청색 반사되는 (틴달 효과) 미세 입자의 백색 현탁액을 수득하였다. 5시간 동안 26,000 g에서 원심분리시킨 후에, 침전물을 물로 세척하고, 24시간 동안 26,000 g에서 원심분리시켰다. 동일한 조건하에서 세척 및 원심분리 과정을 반복하였다. 건조 후에, x-선 분말 다이어그램을 수행하였다. 고체는 오로지 무정형이었다.

침전물을 주사 전자 현미경법에 의해 조사하였다. 침전물은 약간의 응집물의 존재와 함께 200 내지 400 nm의 직경을 갖는 무정형 구형 나노 입자로 구성되었다.

D. 2㎖의 실시예 1에서 수득한 용액을 100㎖의 물 중에 첨가하고, 콜로이드성 현탁액을 희석후 10분 및 1시간 후에 회절/확산 레이저 그래뉼로미터 (Malvern SB.OD)에 의해 조사하였다.

1시간 후에, 2개의 입자군을 관찰하였다 : 하나는 300 nm의 평균 직경을 갖는 70 중량%의 시클로스포린 A를 나타내고, 나머지 하나는 아마도 나노 입자의 응집물을 구성하는 20㎛의 평균 직경을 갖는 30 중량%의 시클로스포린 A를 나타낸다.

E. 1㎖의 실시예 1에서 얻은 용액을 50㎖의 물에 첨가하고, 콜로이드성 현탁액을 10분 동안 교반시켰다.

그런 다음, 현탁액을 200㎖의 인공 산성 위액에 첨가하고, 37℃에서 가온시켰다. 균질 콜로이드성 현탁액을 회절/확산 레이저 그래뉼로미터 (Malvern SB.OD)에 의해 조사하였다. 현탁액은 오로지 600 nm의 평균 직경을 갖는 나노 입자로 구성되었다.

F. 1㎖의 실시예 1에서 수득한 용액을 200㎖의 인공 산성 위액에 직접 첨가하였다.

균질 현탁액을 37℃에서 가온시키고, 회절/확산 레이저 그래뉼로미터 (Malvern SB.OD)에 의해 빠르게 조사하였다. 현탁액은 오로지 350 nm의 평균 직경을 갖는 나노 입자로 구성되었다.

상기 결과 및 논의로부터, 높은 생체 이용성을 갖는 신규한 시클로스포린 제제가 제공됨이 명백하다. 본 발명의 제제는 고농도의 시클로스포린을 포함할 수 있고, 냉장에 통상적으로 사용되는 저온을 포함하는 광범위한 온도에서 저장 안정성을 갖는다. 본 발명의 제제는 경질 캡슐 형태를 포함하는 캡슐 형태로 전달될 수 있어, 저장 및 취급의 용이함을 제공한다. 제제는 또한 무정형 나노 입자를 제공하며, 이에 의해 시클로스포린의 생체 이용성이 증가된다.

본 명세서에 인용된 모든 간행물 및 특허출원은 각각의 개별적 간행물 또는 특허출원이 참고로 편입되는 것으로 특히 그리고 개별적으로 지적된 것처럼 본원에 참고로 편입된다.

본 발명이 이해를 명확히 하도록 하기 위해 예시 및 실시예에 의해 어느정도 상세히 설명되었지만, 본 발명의 개시에 비추어 첨부한 특허청구의 범위의 사상 또는 범위로부터 벗어나지 않으면서 본 발명에 대한 소정의 변형 및 변화가 이루어질 수 있음은 당업자에게 쉽게 명백할 것이다.

Claims

시클로스포린;

하나 이상의 탄소수 2 내지 3개의 알칸올 용매; 및

에톡실화된 탄소수 4 내지 6개의 폴리올의 지방산 모노에스테르 및 폴리옥시에틸렌 알코올로 구성된 군으로부터 선택된, 하나 이상의 비이온성 폴리옥시알킬렌 계면활성제를 포함하는 경구용 시클로스포린 제제.
시클로스포린;

하나 이상의 탄소수 2 내지 3개의 알칸올 용매;

에톡실화된 탄소수 4 내지 6개의 폴리올의 지방산 모노에스테르 및 폴리옥시에틸렌 알코올로 구성된 군으로부터 선택된, 하나 이상의 비이온성 폴리옥시알킬렌 계면활성제; 및

탄소수 14 내지 18개의 지방산과 저급 알칸올의 모노에스테르 및 탄소수 8 내지 28개의 디올로 구성된 군으로부터 선택된, 하나 이상의 보조 용매를 포함하는 경구용 시클로스포린 제제.
제 2 항에 있어서, 알칸올 용매의 총량이 제제의 약 5 내지 75%(v/v)이고, 비이온성 폴리옥시알킬렌 계면활성제의 총량이 제제의 약 5 내지 65%(v/v)이며, 보조 용매의 총량이 제제의 약 20 내지 80%(v/v)임을 특징으로 하는 제제.
시클로스포린 A;

에탄올 및 프로필렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되고, 제제의 약 5 내지 75%(v/v)인 하나 이상의 알칸올 용매;

에톡실화된 소르비탄의 모노에스테르 및 폴리옥시에틸렌 알코올로 구성된 군으로부터 선택되고, 제제의 약 5 내지 65%(v/v)인 하나 이상의 비이온성 폴리옥시에틸렌 계면활성제; 및

탄소수 2 내지 4개의 저급 알칸올과 탄소수 14 내지 18개의 지방산의 모노에스테르를 하나 이상 포함하고, 제제의 약 20 내지 80%(v/v)인 하나 이상의 보조 용매를 포함하는 시클로스포린 제제.
제 4 항에 있어서, 비이온성 계면활성제가 폴리옥시에틸렌(4) 라우릴 에테르 및 폴리옥시에틸렌(20) 모노 소르비탄 모노-올레에이트로 구성된 군으로부터 선택되고, 지방산 에스테르는 미리스트산 이소프로필 및 올레산 에틸로 구성된 군으로부터 선택되며, 하나가 탄소수 8 내지 28개의 디올인 2개의 보조 용매를 포함함을 특징으로 하는 제제.
약 50 내지 150 ㎎/㎖의 농도의 시클로스포린 A;

에탄올 및 프로필렌 글리콜로 구성되고, 제제의 약 5 내지 75%(v/v)인 알칸올 용매 성분; 및

제제의 약 10 내지 50%(v/v)인 에톡실화된 소르비탄의 모노에스테르를 포함하는 경구용 시클로스포린 제제.
제 6 항에 있어서, 에탄올의 양이 제제의 약 5 내지 20%(v/v)임을 특징으로 하는 제제.
제 6 항에 있어서, 프로필렌 글리콜의 양이 제제의 약 10 내지 50%(v/v)임을 특징으로 하는 제제.
제 1 항에 따르는 경구용 제제를 함유하는 경질 캡슐로 구성된 경질 캡슐 시클로스포린 제제.
시클로스포린 나노 입자의 수성 분산액으로서, 분산액 중에 존재하는 시클로스포린의 50 중량% 이상이 약 1㎛ 미만의 무정형 입자이고, 상기 수성 분산액에 (1) 모노글리세리드, 디글리세리드 또는 트리글리세리드 중의 하나 이상 또는 (2) 에스테르 교환되고 폴리에톡실화된 식물성 오일이 실질적으로 존재하지 않는 분산액.
제 10 항에 있어서, 소량의 저급 알칸올 및 하나 이상의 폴리옥시에틸렌 계면활성제를 추가로 포함하는 분산액.
제 11 항에 있어서, 저급 알칸올이 에탄올 및 프로필렌 글리콜 중 하나 이상이고, 폴리옥시에틸렌 화합물이 폴리소르베이트 80임을 특징으로 하는 분산액.
시클로스포린, 에탄올 및 프로필렌 글리콜 중 하나 이상, 및 폴리소르베이트 80 및 PEG 400 중 하나 이상을 포함하는 시클로스포린 제제 킷.
에탄올 및 프로필렌 글리콜 중 하나 이상과 시클로스포린을 혼합하여 용액을 수득하는 단계; 및

상기 용액을 폴리옥시에틸렌 계면활성제와 혼합하여, 물로 희석시킬 때에 상기 시클로스포린의 무정형 나노 입자를 형성하는 제 2 용액을 수득하는 단계를 포함하는, 제 12 항에 따르는 시클로스포린 입자의 수성 분산액을 제조하는 방법.