KR100256036B1

KR100256036B1 - 사이클릭 펩타이드 항진균제 및 그의 제조방법

Info

Publication number: KR100256036B1
Application number: KR1019930004076A
Authority: KR
Inventors: 조셉 부르크하르트 프레드릭; 데보노 매뉴엘; 스코트 닛센 제프리; 윌슨 터너 쥬니어 윌리암
Original assignee: 피터 지. 스트링거; 일라이 릴리 앤드 컴퍼니
Priority date: 1992-03-19
Filing date: 1993-03-17
Publication date: 2000-05-01
Also published as: CA2091663A1; HU9300785D0; CA2091663C; IL122315A; DK0561639T3; EP0561639B1; NO930948D0; ES2174843T3; HU225783B1; IL122315A0; KR930019694A; DE122008000006I1; FI931202A0; YU18593A; AU3534193A; LU91406I2; DE69331922D1; IL105048A; CZ41693A3; NO930948L

Abstract

본 발명에서는 하기 식(1)의 화합물이 제공된다:

상기식에서,

R′는 수소, 메틸 또는 NH₂C(O)CH₂- 이고;

R″ 및 R′′′는 독립적으로 메틸 또는 수소이며;

R 및 R^y는 독립적으로 하이드록시 또는 수소이고;

R₁은 하이드록시, 수소 또는 하이드록시설포닐옥시이며;

R₇은 하이드록시, 수소, 하이드록시설포닐옥시 또는 포스포노옥시이고;

R₂는 신규한 아실 측쇄이다.

신규한 제제, 진균 및 기생균 활성의 억제 방법 및 화합물의 디데옥시(R=H) 형태의 제조방법도 역시 제공된다.

Description

사이클릭 펩타이드 항진균제 및 그의 제조방법

본 발명은 사이클릭 펩타이드 항진균제에 관한 것이다. 상세하게는, 본 발명은 사이클릭 펩타이드 항진균제의 에키노칸딘(echinocandin) 부류의 아실 유도체; 진균 및 기생균 감염의 치료 방법 및 그 방법에 유용한 제제에 관한 것이다.

본 발명에 의해 제공된 화합물은 그들이 다양한 미생물을 배양함으로써 생산된 사이클릭 펩타이드 항진균제들로부터 유도되었다는 점에서 반-합성항진균제이다. 다수의 사이클릭 펩타이드 항진균제들이 공지되어 있다. 이들 중에는 에키노칸딘 B(A30912A), 아큘레아신(aculeacin), 멀런도칸딘(mulundocandin), 스포리오펀진(sporiofungin), L-671,329, FR901379 및 S31794/F1이 있다. 그러한항진균제들은 모두 구조적으로 사이클릭 헥사펩타이드 코어, 또는 핵, 상기 코어 또는 핵으로부터 뻗은 측쇄를 형성하는 지방산 아실 그룹을 가진 사이클릭 아미노산 중의 하나인 아미노 그룹을 특징으로 한다. 예를들어, 에키노칸딘 B 는 리놀레일 측쇄를 가진 반면 아큘레아신은 팔미토일 측쇄를 가진다. 사이클릭 헥사 펩타이드의 상기 지방산 측쇄들은 효소적 탈아실화 반응에 의해 제거되어 유리 핵(하기의 R₂가 수소인 식(1))을 제공할 수 있다. 핵의 아미노 그룹의 재아실화 반응에 의해 반합성항진균 화합물이 제공된다. 예를들어, 에키노칸딘 B 핵은 특정한 인위적 측쇄 부분으로 재아실화될때 다수의 항진균제를 제공한다(Debono, 미합중국 특허 제4,293,489 호 참조). 그러한항진균 화합물중 하나로 R 이 메틸이고, R₁이 수소이며, R₂가 p-(n-옥틸옥시) 벤조일인 일반식(1)에 의해 표시되는 실로펀진(cilofungin)이 있다.

사이클릭 헥사펩타이드의 효소적 탈아실화 반응은 아보트등(Abbott et al.)에 의해 미합중국 특허 제4,293,482 호에 기술된 바와같이 유기체 악티오플라네스 우타헨시스(Actinoplanes utahensis) 및 관련된 미생물에 의해 생산된 탈아실화 효소(deacylase)를 사용하여 수행된다.

본 발명은 예를들어 칸디다 알비칸스(Candida albicans)의 병원성 균주에 대한 향상된 항진균 및 항기생균 효능을 특히 부여하는 독특한 측쇄 아실 그룹을 갖는 아실화된 사이클릭 헥사펩타이드를 제공한다. 또한, 아민계 및 벤질계 하이드록시 그룹을 제거하여 일반식(1)(R=H)의 디데옥시 화합물을 얻는 방법도 제공된다.

본 발명에 의해 제공된 화합물은 하기 식(1)로 표시되는 화합물 및 약제학적으로 허용되는 그의 무독성 염이다:

상기식에서,

R′는 수소, 메틸 또는 NH₂C(O)CH₂- 이고;

R″ 및 R′′′는 독립적으로 메틸 또는 수소이며;

R 및 R^y는 독립적으로 하이드록시 또는 수소이고;

R₁은 하이드록시, 수소 또는 하이드록시설포닐옥시이며;

Ⅰ) R₂는 하기식으로 표시되는 치환된 벤조일 그룹이거나

[상기식에서,

A) R₃은 식 -O-(CH₂)m-[O-(CH₂)n]p-O-(C₁-C_{1 2}알킬)(식에서, m 및 n 은 2 내지 4의 정수이고 p 는 0 또는 1 임)로 표시되는 폴리옥사-알킬 그룹이거나;

B) R₃은 식 -Y-(C₁-C_{1 2}알킬)(식에서, Y 는 -C≡C- 또는 -CH=CH-임)로 표시되는 불포화 탄화수소 그룹이거나;

C) R₃은 식 -O-(CH₂)m-G(식에서, m 은 상기에 정의된 바와 같고 G는 C₇-C₁₀비사이클로알킬 또는 C₇-C₁₄트리사이클로알킬임)의 그룹이거나;

D) R₃는 퀴놀릴임];

Ⅱ) R₂는 하기 식으로 표시되는 아실 그룹이거나

[상기 식에서,

Z는 -O-, -CH≡C-, -CH=CH-, -CH₂-CH₂-, -CH₂- 또는 탄소-탄소 결합이고;

A) R₄는 수소, C₂-C₁₂알키닐, 치환된 C₂-C₁₂알키닐, C₃-C₁₂사이클로알킬, C₇-C₁₀비사이클로알킬, C₇-C₁₄트리사이클로알킬, C₁-C₁₂알콕시, C₃-C₁₂사이클로알콕시, 나프틸, 피리딜, 티에닐, 벤조티에닐, 퀴놀릴 또는 페닐이거나;

B) R₄는 아미노, C₁-C₁₂알킬티오, 할로겐, C₁-C₁₂알킬, C₂-C₁₂알케닐, C₂-C₁₂알키닐, 치환된 C₁-C₁₂알킬, 치환된 C₂-C₁₂알케닐, 치환된 C₂-C₁₂알키닐, C₁-C₁₂알콕시, 트리플로오로메틸, 페닐, 치환된 페닐 또는 식 -O-(CH₂)m-[O-(CH₂)n]p-0-(C₁-C_{1 2}알킬)(식에서, m, n 및 p 는 상기에 정의된 바와같음)로 표시되는 폴리옥사-알킬 그룹으로 치환된 페닐로 치환된 페닐이거나;

C) R₄는 플루오로, 브로모, 클로로 또는 요오도로 치환된 C₁-C₆알콕시로 치환된 페닐이거나;

D) R₄는 C₃-C₁₂사이클로알킬, C₇-C₁₀비사이클로알킬, C₇-C₁₄트리사이클로알킬, C₂-C₁₂알키닐, 아미노, C₁-C₄알킬아미노, 디-(C₁-C₄알킬)아미노, C₁-C₁₂알카노일아미노 또는 식 -O-(CH₂)m-[O-(CH₂)n]p-O-(C₁-C₁₂알킬)(식에서, m, n 및 p 는 상기에 정의된 바와같음)로 표시되는 폴리옥사-알킬 그룹으로 치환된 페닐로 치환된 C₁-C₁₂알콕시이거나;

E) R₄는 식(식에서, R₈은 페닐로 임의 치환된 C₁-C₆알콕시임)의 그룹으로 치환된 C₁-C₁₂알콕시이거나;

F) R₄는 식 -O-(CH₂)p′ -W-R₅(식에서, p′는 2 내지 4의 정수이고; W 는 피롤리디노, 피페리디노 또는 피페라지노이고, R₅는 수소, C₁-C₁₂알킬, C₃-C₁₂사이클로알킬, 벤질 또는 C₃-C₁₂사이클로알킬메틸임)로 표시되는 그룹이거나;

G) R₄는 식 -Y-R₆(식에서, Y는 상기에 정의된 것과 동일한 의미를 가지며, R₆는 C₁-C₁₂알킬, 치환된 C₁-C₁₂알킬, C₃-C₁₂사이클로알킬, C₇-C₁₀비사이클로알킬, C₇-C₁₄트리사이클로알킬, 페닐, C₃-C₁₂사이클로알케닐, 나프틸, 벤조티아졸릴, 티에닐, 인다닐, 플루오레닐; 아미노, C₁-C₁₂알킬티오, 할로겐, C₁-C₁₂알킬, C₂-C₁₂알케닐, C₂-C₁₂알키닐, C₁-C₁₂알콕시, 트리플루오로메틸, -O-(CH₂)p′-W-R₅, 또는 플루오로, 브로모, 요오드 또는 클로로로 치환된 C₁-C₆알콕시로 치환된 페닐이거나, R₆는 식 -O-(CH₂)m-[O-(CH₂)n]p-O-(C₁-C₁₂알킬)(식에서, m, n 및 p 는 상기에 정의된 바와같음)로 표시되는 폴리옥사-알킬 그룹으로 치환된 페닐임)으로 표시되는 그룹임];

Ⅲ) R₂는 하기 식을 갖는 그룹이거나

[상기 식에서,

R^x는 C₁-C₁₂알콕시 또는 식 -O-(CH₂)m-[O-(CH₂)n]p-O-(C₁-C₁₂알킬)(식에서, m, n 및 p 는 상기에 정의된 바와같음)로 표시되는 폴리옥사-알킬 그룹임];

Ⅳ) R₂는 하기 식을 갖는 그룹이거나

[상기 식에서,

R₉은 페닐, C₁-C₁₂알킬, 또는 C₁-C₁₂알콕시이고 R₆은 상기 정의한 바와 같음];

Ⅴ) R₂는 R₄로 치환된 나프토일이고;

단, R′ 가 메틸 또는 NH₂C(O)CH₂-이고;

R″가 메틸이며;

R′′′가 메틸이고;

R^y가 하이드록시이며;

R 이 하이드록시이고;

a) R₁이 하이드록시설포닐옥시이고, R₇이 하이드록시, 하이드록시설포닐옥시 또는 포스포노옥시이거나;

b) R₁이 수소 또는 하이드록시설포닐옥시이고, R₇이 하이드록시설포닐옥시 또는 포스포노옥시인 경우,

R₂는

[상기 식에서,

R₃은 -O-(CH₂)m-[O-(CH₂)n]p-O-(C₁-C₁₂알킬)(식에서, P=0 임)이다.

[상기 식에서,

Z는 탄소-탄소 결합 또는 -O-이고, R₄는 C₁-C₁₂알콕시이다] 또는

ⅲ) R₄(여기에서, R₄는 수소 페닐, 또는 C₁-C₁₂알콕시임)로 치환된 나프토일이 아니다.

본 발명의 화합물을 사용하여 기생충성 및 진균성 활성을 억제하기 위한 제제 및 방법, 및 화합물의 디데옥시 형태의 제조방법도 역시 제공된다.

“C₁-C₁₂알킬”이란 용어는 예를들어, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 2급-부틸, t-부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 데실, 운데실 및 도데실 그룹 등과 같은 직쇄 또는 분지쇄 알킬 탄화수소 그룹을 말한다.

“C₁-C₁₂알케닐”이란 용어는 비닐, 1-프로펜-2-일, 1-부텐-4-일, 1-펜텐-5-일, 1-부텐-1-일 등과 같은 그룹을 말한다.

“C₁-C₁₂알키닐”이란 용어는 에티닐, 프로피닐, 펜티닐, 부티닐 등과 같은 그룹을 말한다.

“C₁-C₁₂알킬티오”란 용어는 메틸티오, 에틸티오, t-부틸티오 등과 같은 그룹을 말한다.

“C₁-C₁₂알콕시”란 용어는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시, 헵톡시, 옥틸옥시, 도데실옥시 등과 같은 직쇄 또는 분지쇄 옥시알킬 그룹을 말한다.

“C₃-C₁₂사이클로알콕시”이란 용어는 사이클로프로폭시, 사이클로부톡시 등과 같은 그룹을 말한다.

“C₃-C₁₂사이클로알케닐”이란 용어는 사이클로프로페닐, 사이클로부테닐, 사이클로펜테닐 등과 같은 그룹을 말한다.

“치환된 C₁-C₁₂알킬”, “치환된 C₂-C₁₂알케닐”, 및 “치환된 C₂-C₁₂알키닐”은 할로겐, 하이드록시, 보호된 하이드록시, 아미노, 보호된 아미노, C₁-C₇아실옥시, 니트로, 카복시, 보호된 카복시, 카바모일, 카바모일옥시, 시아노, 메틸설포닐아미노, 페닐, 치환된 페닐, 또는 C₁-C₁₂알콕시로 1 또는 2 회 치환된 상기 그룹들을 나타낸다.

“치환된 페닐”이란 용어는 할로겐, 하이드록시, 보호된 하이드록시, 시아노, 니트로, C₁-C₁₂알킬, C₁-C₁₂알콕시, 카복시, 보호된 카복시, 카복시메틸, 하이드록시메토일, 아미노, 아미노메틸, 트리플루오로메틸 또는 N-(메틸설포닐아미노)로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개의 부분으로 치환된 페닐 그룹으로 표시된다.

“C₃-C₁₂사이클로알킬”이란 용어는 사이플로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸과 같은 그룹을 말한다.

“C₁-C₄알킬아미노”란 용어는 메틸아미노, 에틸아미노, n-부틸아미노등과 같은 그룹을 말한다.

“디-(C₁-C₄알킬)아미노”란 용어는 디메틸아미노, 디에틸아미노, 디-n-프로필아미노, 디-n-부틸아미노, 메틸에틸아미노, 메틸-n-부틸아미노등과 같은 3급 아미노 그룹을 말한다.

“C₁-C₁₂알카노일아미노”란 용어는 C₁-C₁₂카복실산으로부터 유도된 아실아미노 그룹과 같은 그룹을 말하며, 포름아미노, 아세틸아미노, 프로피오닐아미노, 부티릴아미노등으로 예시된다.

“C₃-C₁₂사이클로알킬메틸”이란 용어는 메틸에 의해 더 치환된 상술한 C₃-C₇사이클로알킬들을 말한다.

“C₇-C₁₀비사이클로알킬” 및 “C₇-C₁₄트리사이클로알킬”이란 용어는 비사이클로[2.2.1.]헵트-2-일, 비사이클로[2.2.1.]헵-4-엔-2-일, 비사이클로[3.3.1.]노나-3-일, 비사이클로[3.3.1.]노나-2-일, 비사이클로[3.2.1.]옥트-2-일, 비사이클로[2.2.2.]옥트-2-일, 비사이클로[2.2.2.]옥트-5-엔-2-일, 아다만틸등과 같은 그룹을 말한다.

“디데옥시”란 용어는 R=H 인 일반식(1)의 화합물을 말한다.

기생균 및 진균 활성의 억제방법과 관련하여 사용된 것과 같은 “억제”란 용어는 그의 보통의 정의, 즉 정지, 지연 또는 예방적으로 방해하거나 방지하는 것을 의미하도록 정의된다.

기생균 및 진균 활성과 관련하여 사용된 것과 같은 “활성”이라는 용어는 그의 성장 및 수반하는 특징을 포함하며 기생균 또는 진균의 존재로 인해 야기된다.

본 발명의 화합물을 기생균 또는 진균과 접촉시킴으로써 기생균 및 진균 활성을 억제하는 방법과 관련하여 사용된 것과 같은 “접촉”이라는 용어는 그의 보통의 정의를 의미하도록 정의된다. 그렇지만, 상기 용어는 억제의 기작으로서와 같이, 공정에 대한 어떠한 더 이상의 한정을 의미하지는 않고, 방법은 화합물의 작용 및 그들 고유의 항-진균 특성에 의해 기생균 및 진균 활성을 억제하기 위한 본 발명의 진의를 포함하는 것으로 정의된 것이며, 바꾸어 말하면, 방법에 사용된 화합물이 그러한 억제의 원인 물질이다.

식(1)의 R₂에 의해 표시되는 아실 그룹의 예는, 예를 들어 2-메톡시에톡시(p=0, m=1), 2-에톡시에톡시, 2-(2-에톡시에톡시)에톡시(m=2, p=1, n=2), 3-(2-에톡시에톡시)-프로폭시, 3-(20메톡시에톡시)부톡시등과 같은 폴리옥사-알킬 그룹으로 치환된 벤조일이다.

R₂가 불포화 탄화수소 그룹 -Y-(C₁-C₁₂알킬)로 치환된 벤조일인 R₃그룹의 예로는 아세틸렌성 그룹 -C≡C-(C₁-C₁₂알킬) 및 시스- 또는 트랜스- 예를들어, 프로페닐, 부테닐, 헥세닐, 데세닐등 일 수 있는 -CH₂=CH₂-(C₁-C₁₂알킬); 프로피닐, 부티닐, 헥시닐, 운데시닐등의 알킨이 포함된다.

R₂가 하기식으로 표시되는 그룹인 아실 그룹의 예로는 디페닐 에테르(Z=-O-), 디페닐 아세틸렌(Z=-C≡C-), 스틸벤(Z=-CH=CH-) 및 비페닐(Z=탄소-탄소결합)이 있다.

Z가 탄소-탄소 결합, 즉 페닐-페닐 결합인 그러한 비페닐 그룹의 예중에는 4-[4-(부틸옥시)페닐)벤조일, 4-[4-(사이클로부틸메톡시)-페닐]벤조일, 4-[4-(사이클로펜틸메톡시)페닐]벤조일, 4-[4-(사이클로헥실에톡시)-페닐]벤조일, 4-[4-(n-헥실옥시)-페닐]벤조일, 4-페닐벤조일, 4-[4-(11-아미노-운데실옥시)-페닐]벤조일, 4-[4-(11-포름아미도운데실옥시)페닐]벤조일, 4-[4-(이소펜틸옥시)페닐]벤조일 등이 있다. Z가 산소 원자인 상기 식의 그러한 디페닐 에테르 아실 그룹 R₂의 예로는 4-(4-부틸옥시페녹시)벤조일, 4-(4-헥실옥시페녹시)벤조일, 4-(4-에톡시페녹시)벤조일, 4-(4-벤질옥시페녹시)벤조일, 4-[4-(3-사이클로부틸옥시)페녹시]벤조일, 4-(4-도데실옥시페녹시)벤조일, 4-[4-(3-디메틸아미노프로폭시)페녹시]벤조일 등이 있다. Z가 아세틸렌성 결합 또는 에틸렌 결합인 디페닐아세틸렌 및 스틸벤 아실 그룹 R₂의 예로는 4-스티릴벤조일, 4-(4-메톡시스티릴)벤조일, 4-(4-부틸옥시스티릴)벤조일, 4-(4-페닐에티닐)벤조일, 4-(4-에톡시페닐에티닐)벤조일, 4-(4-사이클로헥실옥시페닐에티닐)벤조일 등이 있다. Z가 탄소-탄소 결합이고 R₄가 식 -O-(CH₂)p′-W-R₅로 표시되는 상술한 식으로 표시되는 R₂아실 그룹의 예로는 4-[4-[2-(N-사이클로헥실피페리딘-4-일)에톡시]페닐]벤조일, 4-[4-[2-(N-헥실피페리딘-4-일)에톡시]페닐]벤조일, 4-[4-[2-(4-벤질피페리디노)에톡시]페닐]벤조일, 4-[4-[2-(4-사이클로헥실피페리디노)에톡시]페닐]벤조일 등의 디페닐 아실 그룹이 있다. R₄가 식 -Y-R₆로 표시되는 그러한 아실 그룹의 예로는 4-[4-(페닐에티닐)페닐]벤조일, 4-[4-(페닐에티닐)페녹시]벤조일, 4-[4-(헥시닐)페닐]벤조일, 4-[4-(스티릴)페녹시]벤조일, 4-[4-(4-벤질페닐에티닐)페닐]벤조일, 4-[4-[4-4-메틸피페리디노)에톡시]페닐에티닐]페닐]벤조일 등의 아실 그룹이 포함된다. R₄가 식 -O-(CH₂)p′-W-R₅로 표시되는 그러한 아실 그룹은 염산, 브롬산, 황산 및 인산등과 같은 유기 및 무기산 및 설폰산, 벤젠설폰산, 톨루엔설폰산, 메탄설폰산, 아세트산, 클로로아세트산, 트리플루오로아세트산, 벤조산, 이소프탈산, 살리실산, 시트르산, 말산, 석신산, 말론산등의 산과 같은 유기산과 함께 피페리딘 및 피페라진 헤테로사이클릭 그룹의 염기성 아미노 그룹의 염을 형성한다.

하기 표는 식(1)로 표시되는 사이클릭 펩타이드의 또다른 예들을 포함한다. 표 1은 아실 그룹 R₂가 하기 식의 것인 사이클릭 펩타이드의 예들을 포함한다.

[표 1]

하기 표 2 는 R₂가 하기 식으로 표시되는 식(1)의 화합물을 예시한다.

[표 2]

하기 표 3 은 R₂가 표 2 에 지시된 바와같은 식을 갖고, R₄가 식 -O-(CH₂)p-W-R₅로 표시되는 식 1 의 화합물들을 예시한다.

[표 3]

식(1)로 표시되는 아실 사이클로헥사펩타이드는 항기생균성 활성을 나타내며, 예를들어, 그들은 감염성 진균 칸디다 알비칸스(Candida albicans) 및 칸디다 파라사일로시스(Candida parapsilosis)에 대해 특히 활성적이다. 그들은 또한 아스페르 질러스 푸미가터스(Aspergillus fumigatus)에 대해 현저한 활성을 나타낸다. 그들은 생체내 및 생체외에서 모두 활성적이며, 따라서 전신적 진균 감염을 퇴치하는데 유용하다.

본 발명의 화합물은 면역억제된 개체에서 기회 감염증을 주로 담당하는 특정 유기체의 성장을 억제한다. 예를들어 본 발명의 화합물은 AIDS 환자에서 뉴모시스티스 폐렴의 원인 유기체인 뉴모시스티스 카리니(Pneumocystis carinii)의 성장을 억제한다.

본 발명의 화합물의항진균 활성은 표준 아가 희석 시험 및 원반-확산 시험으로 생체외에서 결정되며 여기에서 시험 화합물의 최소 억제 농도가 얻어진다. 마우스내의 표준 생체내 시험이 전신적 진균 감염을 구제하는데 있어서 시험 화합물의 유효량을 결정하기 위해 사용된다.

하기 표 4A-E 는 밀리리터당 마이크로그램(mcg/ml)으로 표시된 칸디다 알비칸스 및 칸디다 파라사일로시스에 대한 본 발명 화합물의 최소 억제 농도(MIC) 및 특정 화합물의 마우스 내에서의 유효량 ED_{5 0}을 포함한다.

표 4A-E 에서 R′=CH₃, R″=CH₃, R′′′=CH₃, R^y=OH, R₇=OH 및 R₁=H 이고, 표 4A-D 에서 R=OH 인 반면, 표 E 에서는 R=H 이다.

표 4A 에서, R₂는 R₃가 표 4 에 지시된 바와같은 하기 식의 것이다.

표 4B 에서, R₂는 Z가 -O- 이고 R₄가 지시된 바와같은 하기 식의 것이다.

표 4C 는 Z 가 탄소-탄소 결합인 것을 제외하고는 표 4B 와 같다.

표 4D 는 R₂가 정의된 바와 같을때 화합물 활성을 나타낸다.

표 4E 에서, R₂가 지시된 바와 같은 디데옥시(여기에서 R=H)화합물이 예시된다.

[표 4a]

[표 4b]

* c.alb는 칸디다 알비칸스이고, C.parap.는 칸디다 파라사일로시스이다.

[표 4c]

[표 4da]

[표 4db]

[표 4dc]

[표 4dd]

[표 4ea]

[표 4eb]

[표 4ec]

본 발명의 비-디데옥시 화합물(식(1))은 R₂가 수소일때 식으로 표시되는 사이클릭 헥사펩타이드의 아미노 핵을 사용하여 제조된다. 상기 아미노 핵은 천연 화합물의 지방산 측쇄가 제거되는 공지된 탈아실화 효소 반응에 의해 공지된 천연 산물로부터 수득된다. 예를들어, R′=R″=R′′′=메틸, R 이 OH, R^y가 하이드록시, R₁이 H, R₇이 OH 이고, R₂가 리놀레오일인 식(1)로 표시될 수 있는 에키노칸딘 B 는 미합중국 특허 제4,293,482 호 및 제4,304,716 호에 기술된 바와같이 유기체 악티노플란스 우타헨시스(Actinoplanes utahensis)에 의해 생산된 탈아실화 효소로 탈아실화되어 에키노칸딘 B 핵(R₂=H)을 제공한다.

N-탈아실화되어 아미노 핵 출발물질을 제공하는 공지된 천연 사이클릭 헥사펩타이드로는 에키노칸딘 B(A-30912A 로서도 역시 공지됨), 아큘레아신(팔미토일 측쇄), 테트라하이도에키노칸딘 B(스테아로일 측쇄), 멀런도칸딘(분지된 C₁₅측쇄), L-671,329(C₁₆분지된 측쇄), S 31794/FI(테트라데카노일 측쇄), 스포리오펀진(C₁₅분지된 측쇄) 및 FR901379(팔미토일 측쇄)가 포함된다. N-탈아실화 반응에 의해 수득된 아미노 핵은 다음으로 공지된 아미노 아실화 과정을 이용함으로써 아실화되어 R₂가 상기에 정의된 아실 그룹을 나타내는 식(1)로 표시되는 N-아실 사이클릭 헥사펩타이드를 제공한다. 아실화 부분은 바람직하게는 2,4,5-트리클로로페닐 에스테르와 같은 카복실산 RCOOH 의 활성 에스테르이다. R₂COOH 전구체 산은 니트릴 R₂CN 또는 에스테르 R₂COOC₁-C₄alk 의 가수분해에 의해 제조된다. 상기 니트릴 및 에스테르 중간체들은 공지 방법에 의해 제조된다.

표 5-10 의 알콕시 방향족(즉, 페닐 및 비페닐)화합물은 하기 두가지 방법 중 하나에 의해 제조되었다.

A. 하이드록시방향족 화합물(1 당량)을 아세토니트릴(200-300㎖)에 용해시키고 칼륨 t-부톡사이드 또는 칼륨 카보네이트(1 당량)와 같은 염기를 가한다. 다음으로 알킬 브로마이드, 요오다이드 또는 p-톨루엔설포네이트(1 당량)를 가하고 용액을 6 시간동안 환류시킨다. 용매를 진공하에 증발시키고 잔류물을 에테르 및 2N 수산화 나트륨에 용해시킨다. 에테르 층을 황산 마그네슘으로 건조시키고 증발시켜 알콕시방향족 생성물을 얻는다.

B. 하이드록시방향족 화합물(1 당량), 알킬 알콜(1 당량), 및 트리페닐포스핀(1 당량)을 테트라하이드로푸란(200-300㎖)에 용해시키고 디에틸아조디카복실레이트(1 당량)을 상온에서 10 분 동안에 적가한다. 17 시간후 용제를 증발하에 제거하고 잔류물을 에테르에 용해시킨다. 유기층을 2N 수산화 나트륨 용액으로 추출하고, 황산 마그네슘으로 건조시키고, 증발시켜 에테르/펜탄으로부터 결정화된 생성물을 얻거나, 생성물이 3 급 아민을 포함한다면, 하이드로클로라이드 염이 형성되고 메탄올/에틸 아세테이트로부터 결정화된다.

[표 5]

[표 6]

[표 7]

[표 8]

[표 9]

[표 10]

표 11-14에 포함된 알키닐 및 알케닐 방향족 화합물은 하기 방법에 의해 제조되었다:

방향족 브로마이드, 요오다이드 또는 트리플루오로메탄-설포네이트(1 당량)를 질소 대기하에 아세토니트릴(600 ㎖/0.1 몰의 방향족 반응물)에 용해시킨다. 알킨 또는 알켄(1 당량), 트리에틸아민(2 당량), 팔라듐 디클로라이드(0.05 당량), 트리페닐포스핀(0.1 당량) 및 요오드화 제1구리(0.025 당량)을 가하고 용액을 17 시간 동안 환류시켰다. 용매를 진공하에 제거하고 잔류물을 에테르(300 ㎖)에 슬러리화시킨다. 여과에 의해 고체를 제거하고 여액을 1N 염산 용액으로 세척한다. 유기층을 황산 마그네슘으로 건조시키고 증발시켜 생성물을 수득한다.

[표 11]

[표 12]

[표 13]

[표 14]

표 15 에 열거된 방향족 붕산들은 하기 방법에 의해 제조되었다:

방향족 할라이드(1 당량)를 테트라하이드로푸란 용제내에서 -78℃ 로 냉각시킨다. 부틸 리튬(1.2 당량)을 가한다. 15 분후 트리이소프로필 보레이트(2 당량)를 가하고 10 분동안 교반 후 냉각 바스를 제거한다. 반응물이 상온으로까지 따뜻해졌을때 반응을 중지시키기 위해 물을 가한후 1N HC1 을 가한다. 유기층을 감압하에 제거하여 남은 고체 침전물을 여과에 의해 수거한다. 상기 고체를 헥산으로 세척하여 순수한 붕산을 얻는다.

표 16 에 열거된 테르페닐 에스테르는 하기 방식으로 만들어졌다:

방향족 붕산(1 당량), 메틸 4-요오도벤조에이트(1 당량), 및 탄산 칼륨(1.5 당량)을 질소-퍼지된 톨루엔 용액내에서 혼합한다. 다른 한편으로는, 요오도벤조에이트의 트리클로로 페닐 에스테르가 사용될 수도 있다. 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0.03 당량)을 가하고 7 시간동안 환류한다. 탄산 칼륨을 제거하기 위해 용액을 가만히 따르고 진공하에 환원시킨다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 분쇄하고 고체 생성물을 여과에 의해 수거한다.

[표 15]

[표 16]

표 5-16 에 기술된 방향족 니트릴 또는 카복실레이트 에스테르는 하기의 두가지 가수분해 방법 중 어느하나에 의해 카복실산으로 전환될 수 있다:

A. 방향족 니트릴을 에탄올 및 과량의 50% 수산화 나트륨 용액에 용해시키고 2 시간동안 환류시킨다. 고체가 침전될때까지 물을 가한다. 침전물을 여과에 의해 수거하여 디옥산 및 6N 염산 용액에 가하고 17 시간동안 환류시킨다. 물을 가하고 카복실산 생성물을 결정화하여 여과에 의해 수거하고 진공하에 건조시킨다.

B. 카복실레이트 메틸 에스테르를 메탄올에 용해시키고 과량의 2N 수산화 나트륨 용액을 가하고 용액을 5 시간동안 환류시킨다. 과량의 염산으로 용액을 산성화하고 침전물이 형성될 때까지 물을 가한다. 카복실산을 여과에 의해 수거하고 진공하에 건조시킨다.

카복실산은 하기의 일반적인 방법에 따라 표 17-25 에 나타낸 2,4,5-트리클로로페닐 에스테르로 전환된다:

방향족산(1 당량), 2,4,5-트리클로로페놀(1 당량) 및 N,N′-디사이클로헥실-카보디이미드(1 당량)를 메틸렌 클로라이드에 용해시킨다. 혼합물을 17 시간동안 교반한 후 여과한다. 여액을 증발 건조시키고, 잔류물을 에테르에 용해시킨 후 여과하고, 결정화가 시작될 때까지 펜탄을 가한다. 결정성 생성물을 여과에 의해 수거하고 진공하에 건조시킨다.

[표 17]

[표 18]

[표 19]

[표 20]

[표 21]

[표 22]

[표 23]

[표 24]

[표 25]

식(1)의 디데옥시 화합물은 벤질계 및 아민계 하이드록시 그룹을 제거함으로써 제조된다. 방법은 식(1)의 비-디데옥시 화합물(식에서 R₂는 수소 또는 아실일 수 있다)을 트리클로로아세트산, 트리플루오로아세트산, 또는 보론트리플루오라이드 에테레이트와 같은 강산(그중 트리플루오로아세트산이 바람직함) 및 나트륨시아노보로하이드라이드 또는 트리에틸실란과 같은 환원제(그중 트리에틸실란이 바람직함)로 처리함을 포함한다. 반응은 -5 내지 70℃ 의 온도에서 메틸렌 클로라이드, 클로로포름 또는 아세트산과 같은 적당한 용제(그중, 디클로로메탄이 바람직함)내에서 일어난다. 산은 기질 1 몰당 2 내지 60 몰의 양으로 존재해야 하고 환원제는 기질 1 몰당 2 내지 60 몰의 양으로 존재해야 한다. 상기 방법은 아민계 및 벤질계 하이드록시 그룹의 선택적 제거를 제공한다.

식(1)로 표시되는 화합물은 이전에 공지된 N-아실헥사펩타이드 항진균제보다 개선된 특성을 갖는다. 예를들어, 일반적으로 화합물은 어떠한 전신성 항진균제에 대해서도 중요한 특성인 경구적 생체내 이용 효율을 나타낸다. 또한, 식(1)의 다수의 N-아실 화합물은 증가된 항진균활성 및 증가된 수용성을 가진다.

식(1)로 표시되는 N-아실 헥사펩타이드 중 어떤 것들은 본 발명의 바람직한 태양이다. R₂가 하기의 디페닐 아실 그룹인 화합물은 바람직한 항진균제이다.

[상기식에서, Z 는 탄소-탄소 결합이고, R₄는 알콕시, 사이클로알콕시 또는 사이클로알킬알콕시 그룹이다]. 또한 바람직한 화합물은 Z 가 탄소-탄소 결합이고 R₄가 -Y-R₆이며 R₆가 C₁-C₁₂알킬 페닐 또는 치환된 페닐이고 Y 가 아세틸렌형 결합인 경우로 표시된다.

N-아실 헥사펩타이드의 더욱 바람직한 그룹은 Z 가 탄소-탄소 결합이고 R₄가 -O-(CH₂)p-W-R₅(식중 W 는 피페리딘 그룹임)로 표시될때로 표시된다.

상술한 첫번째 그룹의 바람직한 화합물의 예로는 4-(4-알콕시페닐)벤조일이 있고, 여기에서 알콕시 그룹은 바람직하게는 C₅-C_{1 0}알콕시 그룹 또는 C₃-C₇알킬로 치환된 C₁-C₄알콕시이다. 그러한 바람직한 화합물의 예들은 R₂가 4-(4-n-헥실옥시페닐)벤조일, 4-(4-n-헵틸옥시페닐)벤조일, 4-(4-n-옥틸옥시페닐)벤조일, 4-[4-(3,3-디메틸부톡시)페닐]벤조일, 4-[4-(2-사이클로펜틸에톡시)페닐]벤조일 및 4-[4-(2-사이클로헥실옥시에톡시)-페닐]벤조일인 식(1)로 표시된다:

R₄가 -Y-R₆인 상술한 두번째 바람직한 화합물의 예로는 4-[4-(페닐에티닐)-페닐]벤조일 및 4-[4-(n-부틸에티닐)페닐]벤조일이 포함된다.

R₄가 -O-(CH₂)p-W-R₅를 나타내는 본 발명의 바람직한 화합물의 예는 R₂가 하기식을 가질때로 표시된다.

[상기식에서, W-R₅는 피페리디노, 4-n-프로필피페리디노, 4-벤질피페리디노, 4-사이클로헥실피페리디노, 4-사이클로헥실메틸피페리디노 및 하이드로클로라이드염, 황산 염 또는 인산 염과 같은 약제학적으로 허용되는 산 부가염이다.]

바람직한 사이클로헥실펩타이드 화합물은 R′=R″=메틸, R₁이 수소, R₂가 상기에 정의된 바와같은 바람직한 아실 그룹인 식(1)로 표시된다. 표 26 은 R=R₇=R^y=OH; R′=R″=R′′′=CH₃; 및 R₁=H 인 가장 바람직한 R₂치환체의 목록이다.

[표 26]

본 발명에 의해 제공된 N-아실헥사펩타이드는 전신성 감염 및 피부 감염 양쪽의 진균성 감영의 치료에 유용하다. 따라서, 본 발명은 항진균적으로 유효한 비독성량의 식(1)로 표시되는 N-아실-사이클로헥사펩타이드를 숙주에 투여함을 포함하는, 인간 또는 동물에서의 진균성 감염의 치료 방법을 역시 제공한다. 바람직한 항진균 방법은 식 1에서 R′=R″=메틸이고, R₁이 수소이고, R₂가 상기에 정의된 바와 같은 바람직한 아실 그룹인 N-아실헥사펩타이드 화합물을 투여함을 포함한다.

항진균 화합물은 비경구적으로, 예를들어 근육내로, 복강내로 또는 피하로, 경비적으로 또는 경구적으로 투여될 수 있거나 피부 감염에 대해서는 외용으로 적용될 수 있다. 투여량은 물론 감염의 성질 및 중한 정도, 숙주의 연령 및 전반적인 건강 및 특정 항진균제에 대한 특정 숙주의 내성 등에 따라 달라질 것이다. 특정한 투여량 섭생법도 그러한 요소들에 따라 유사하게 달라질 수 있고 1회의 1일 투여량으로 또는 1일 동안 다수의 투여량으로 주어질 수 있다. 섭생은 약 2-3 일로부터 약 2-3 주 또는 그 이상까지 지속될 수 있다.

본 발명은 또한 본 발명의 항진균 화합물을 투여하기 위해 유용한 약제학적 제제를 제공한다. 상기 제제들은 식(1)로 표시되는 N-아실헥사펩타이드 또는 약제학적으로 허용되는 그의 무독성 염 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다.

비경구적 투여를 위해서 제제는 식(1)의 화합물, 및 탈이온수, 생리적 식염수, 5% 덱스트로즈 및 다른 통상적으로 사용된 희석제와 같은 생리학적으로 허용되는 희석제를 포함한다. 제제는 폴리에틸렌 글리콜 또는 폴리프로필렌 글리콜 또는 다른 공지된 가용화제와 같은 가용화제를 포함할 수도 있다. 그러한 제제는 항진균제 및 부형제를 건조 분말 또는 동결건조된 분말 형태로 포함하는 무균 병(vial)으로 만들어질 수도 있다. 사용전에, 생리학적으로 허용되는 희석제를 가하고 환자에게 투여하기 위해 주사기를 통해 용액을 뽑아낸다. 경구 투여를 위해서는, 항 진균 화합물을 젤라틴 캅셀내에 채우거나 정제로 형성한다. 그러한 정제는 또한 투여량 및 식(1)의 특정 항진균 화합물에 대하여 알맞는 크기의 정제를 제조하기 위해 적당한 결합제, 분산제 또는 다른 적당한 부형제를 역시 포함한다. 소아과 또는 노인과 용도를 위해 항진균 화합물은 가미된 액체 현탁액, 용액 또는 유화액으로 조제될 수 있다. 바람직한 경구용 담체 시스템은 리네올산, 크레모포어 RH-60 및 물이며 바람직하게는 80% 리네올산, 5% 크레모포어 RH-60 및 87% 멸균수의 양(부피로)으로 사용된다. 화합물은 2.5 내지 40 mg/㎖의 양으로 시스템에 가한다.

외용적 사용을 위해서 항진균 화합물은 피부 표면에 대한 도포를 위해 건조 분말을 사용하여 조제될 수 있거나 가용화 수성액 또는 비-수성액, 예를들어, 알콜 또는 글리콜을 함유하는 액체 제제로 조제될 수 있다. 그러한 제제는 본 명세서에 제공된 항진균 방법에 사용하기에 유용한 형태이다.

본 명세서에 제공된 N-아실사이클로헥사펩타이드는 주사용으로 병당 약 50 mg 내지 약 500 mg을 함유하는 단위 투여량 제제로 상술한 바와 같이 조제될 수 있다. 경구용으로는 캅셀 또는 정제당 약 100 mg 내지 약 500 mg을 함유하는 젤라틴 캅셀 또는 정제가 제공될 수 있다.

본 발명의 바람직한 제제는 R′=R″=메틸, R₁이 수소, R₂가 4-[4-(페닐에티닐)-페닐]벤조일인 식(1)로 표시되는 활성 성분을 젤라틴 캅셀에 포함하거나 활성 성분으로서 R′=R″=메틸, R₁이 수소, R₂가 4-[4-[2-(4-사이클로헥실-피페리디노)에톡시]페닐]벤조일인 식(1)로 표시되는 항진균제 또는 그의 하이드로클로라이드염 형태를 정제 또는 젤라틴 캅셀에 포함한다. 더 바람직한 제제는 상술한 바와같은 바라직한 화합물이 사용된 것들이다.

본 발명의 또다른 한 태양으로 뉴모시스티스 폐렴 환자의 치료방법이 제공된다. 상기 방법은 유기체 뉴모시스티스 카리니(Pneumocystis carinii)에 의해 야기된 감염의 개시를 방지하기 위해 예방적으로 사용될 수 있다. N-아실사이클릭펩타이드는 비경구적으로, 예를들어, 근육내(i. m.), 정맥내(i. v.) 또는 복강내(i. p.) 주사로 또는 경구적으로 또는 흡입에 의해 직접 폐의 기도내로 투여될 수 있다. 바람직하게는 사이클릭펩타이드는 화합물의 에어로졸 스프레이 제제의 흡입을 통해 투여된다.

사이클릭 펩타이드의 유효량은 환자의 체중 1kg 당 약 3mg 내지 약 100mg 일 것이다. 투여량은 1 회의 1 일 투여량 이거나 치료 섭생을 통해 매일 다수의 투여량, 예를들어, 2,3 또는 4회일 수 있다. 각각의 투여량, 전달 경로, 투여 빈도 및 치료 기간은 감염의 강도 및 범위, 환자의 연령 및 전반적인 건강, 치료법에 대한 환자의 반응 및 환자가 약물에 얼마나 잘 견디는지에 따라 달라질 수 있다. AIDS 환자에게 PCP 감염은 감염의 성질 때문에 고도의 치료저항성을 가진다는 것이 알려져 있다. 예를들어, 심한, 진전된 감염에서 기도의 내강 표면은 감염성물질로 막히게 되고 광범위한 기생충 성장이 폐 조직에서 일어난다. 따라서 진전된 감염을 가진 환자는 더 긴 기간동안 더 높은 투여량을 필요로 한다. 반대로, 심하게 감염되지 않고 PCP 에 감염되기 쉬운 면역 결핍 환자는 더 낮고 덜 빈번한 예방적 투여량으로 치료될 수 있다.

식(1)로 표시되는 사이클릭펩타이드의 활성은 면역 억제된 래트에서 증명된다. 시험은 일반적으로 하기와 같이 수행된다. 면역억제의 개시 1 주일후에 래트에 기생균을 기관내 접종하고 나머지 연구기간동안 면역억제상태로 유지시킨다. 기생균 접종 1 일후에 예방적 처리를 시작하고 온건한 PCP 가 발병한지 3 또는 4 주후에 치료적 처리를 시작한다. 8 또는 10 마리의 동물들을 하기 그룹으로 나눈다: 시험 화합물을 투여한 동물; 비-처리된 뉴모시스티스 감염된 대조 동물; 트리메토프림-설파메톡사졸(TMP-SMX)로 처리된 동물; 또는 비-처리된, 감염되지 않은 대조 동물. 상이한 처리들의 효능을 연구기간중 동물의 체중 및 생존을 검사함으로써 및 부검시에 PCP 의 심한 정도를 조사함으로써 평가한다. 폐의 염색된 인상 표본(impression smear) 및 염색된 폐 균등액을 평가하여 피.카리니(P. carinii) 감염의 강도를 결정한다.

시험에 사용된 면역 결핍된 래트는 하기와 같이 제조된다. 체중 120-140g 의 암컷 루이스(Lewis)래트를 메틸 프레드니솔론 아세테이트를 사용하여 제1주에는 4mg/100g, 제2주에는 3mg/100g 및 그후 계속하여 주마다 2mg/100g 의 투여량으로 각각 면역 억제한다. 감염되지 않은 대조 래트를 제외하고 모든 래트를, 심하게 감염된 공여 동물(감염 점수 6)의 폐로부터 채취되고 냉동보존(액체질소)된 접종물로서 유지된 >10⁵내지 10⁶의 피.카리니(영양형, 전포낭 및 포낭)를 포함하는 0.1㎖ 내지 0.2㎖ 의 둘베코 변형 이글 배지(DulBecco′s Modified Eagle Media)로 기관내 접종한다. 래트를 면역 억제 상태로 유지하고 시험 화합물을 이용한 치료의 개시전에 PCP 가 3 또는 4 주동안 발병하도록 한다. 체중을 주마다 기록하고 각 그룹이 동물들간에 유사한 분포의 체중 감소 퍼센트를 갖도록 래트를 처리그룹으로 나눈다. 래트를 시험 화합물로 2 또는 3 주동안 처리한 다음 부검한다. 예방법 연구를 위해, 기생균의 기관내 접종 1 일 후에 시험 화합물의 투여를 개시하고 래트가 부검될 때까지 계속한다.

시험 화합물의 평가 기간 후에, 래트를 부검하고 시험 화합물을 김사(Giemsa)-염색된, 은-메텐아민 염색된 인상표본에 의해서 및/또는 은-메텐아민 염색된 폐 균등액(하기 참조)에 의해서 평가한다. 부검은 다음과 같이 수행한다. 시험용 래트를 케타민 하이드로클로라이드 및 자이라진의 혼합물로 마취시킨 후 우심방을 통하여 방혈한다. 복강 및 흉강내의 내부 기간을 육안적 병변에 대하여 조사한다.

각 래트의 좌엽으로 부터 얻은 폐 조직의 소부분을 후술하는 인상 표본을 제조하기 위해 사용한다. 기생균(영양형 전포낭 및 포낭)의 총수를 결정하기 위해 김사-염색된 인상 표본을 평가한다. 처리로 인해 약간의 항-뉴모시스티스 활성(김사-염색된 슬라이드로부터 감염 점수에 의해 판단됨)을 나타내는 그룹중의 래트로부터 얻은 인상 표본 및 대조 그룹중의 래트로 부터 얻은 인상 표본을 유기체의 포낭벽에 특이적인 메타민은으로 역시 염색한다. 인상 표본을 무작위화하고, 번호를 매긴 후 평가한다. 사용된 감염 점수는 다음과 같다:

점수 기준

0 기생균이 발견되지 않음

1 1 내지 5 기생균/10 오일 영역

2 약 1 기생균/영역

3 2-10 기생균/영역

4 >10 그러나 <100 기생균/영역

5 >100 그러나 <1,000 기생균/영역

점수 6 은 >1,000 유기체/영역(세기엔 너무 많음)을 포함하는 인상 표본을 가진 감염을 위해 남겨 두었다. 김사-염색된 슬라이드를 1008 배의 최종 배율을 사용하여 현미경으로 검사한다. 메텐아민 은-염색된 슬라이드는 400 배의 최종 배율로 검사한다.

래트 폐 조직에 있는 포낭은 다음과 같이 정량한다. 각 래트의 좌엽으로부터 얻은 폐 조직의 소부분을 상술한 바와 같이 인산 표본을 제조하기 위해 사용한다. 각 폐의 나머지 부분은 중량을 측정하고 행크스 평형된 염 용액(HBSS)(폐중량의 40 배)을 포함하는 튜브내에 넣고 브링크만(Brinkman) 모델 조직 균질화기를 사용하여 균질화한다. 균질화된 폐 시료(HBSS 중의 1:4 희석액)의 2 ㎕ 시료를 테플론-피복된 12-웰 슬라이드의 웰에 넣고 메텐아민 은으로 염색하고 인상 표본에 대하여 상술한 바와 같이 포낭의 수로 점수를 매긴다.

시험 동물내에서 두가지 바람직한 N-아실사이클로헥사펩타이드의 활성 및 효능이 하기에 나타나 있다. R′=R″=메틸, R₁이 수소, R₂가 4-[(4-페닐에티닐)페닐]벤조일인 식(1)의 화합물을 에어로졸 용액으로서 5 mg/㎖의 농도로 5 주 동안에 매일 2 회씩 한시간동안 투여하면 폐에서 피. 카리니 포낭이 90 % 감소된다. 10 mg/kg으로, 3 주동안 매일 2 회씩 경구 투여하면, 폐에 있는 포낭의 수가 감염된 비히클 대조군에 비해 99 %가 넘게 감소된다.

바람직한 N-아실사이클릭펩타이드가 경구적으로 및 복강내 주사에 의해 투여될 때 화합물은 심하게 감염된 래트의 폐로부터 피. 카리니 포낭을 제거하는데 효과적이다. 예를들어, 화합물을 10 또는 40 mg/kg으로, 4,8 또는 12 일 동안 매일 2 회씩 투여할 때, 심하게 감염된 래트의 폐에 있는 동정가능한 포낭의 수는 99%가 넘게 감소한다. 화합물을 1 mg/kg으로 복강내로 투여할 때도 유사한 효능이 관찰된다.

예방적 활성에 대해 경구적으로 시험할 때, 감염된 동물에 1 mg/kg으로 투여할 때와 5 또는 4 mg/kg의 더 높은 투여량이 주어질 때의 두가지 연구 중의 어느 하나에서 바람직한 화합물은 99%가 넘는 포낭 감소를 나타낸다.

하이드로클로라이드 염으로서 R′=R″=메틸이고, R₁이 수소이고, R₂가 4-[4-[2-(4-사이클로헥실피레리디노)에톡시]페닐]벤조일인 식(1)로 표시되는 본 발명의 또 다른 바람직한 화합물도 PCP의 치료에 역시 효과적이다. 감염된 면역 억제된 래트에서 PCP를 방지하는데 있어서는 에어로졸 예방법(5 주 동안 매주 2 회씩 두번의 60 분 치료)이 매우 효과적이다. 5, 10, 25 또는 50 mg/㎖의 에어로졸화된 용액을 사용한 에어로졸 치료법은 폐에 있는 포낭의 수를 대조군에 비해 99%가 넘게 감소시킨다. 복강내 투여량에 의해서도 유사한 결과가 얻어진다.

하기의 본 발명의 화합물의 예 및 그들의 제조 방법은 본 발명을 더 상세히 기술한다.

[사이클로헥사펩타이드 핵의 N-아실화]

A30912A 핵의 유도체의 제조는 하기의 일반적인 방법에 의해 수행되었으며 표 27에 상기 유도체들이 열거되어 있다.

A30912A 핵 및 2,4,5-트리클로로페놀 에스테르를 디메틸 포름아미드(25-50 ㎖)에 용해시키고 상온에서 17-65시간 동안 교반한다. 용매를 진공하에 제거하고 잔류물을 에테르에 슬러리화 시키고 여과에 의해 수거한다. 고체 생성물을 메틸렌클로라이드로 세척한 후 메탄올 또는 아세토니트릴/물(1:1 V/V) 중의 어느 하나에 용해시킨다. 상기 용액을 라이닌 다이나맥스-60A C₁₈역상 컬럼(Rainin Dynamax-60A C₁₈reverse-phase column)을 사용하는 워터스사(Waters)의 600E 반-예비적(semi- preparative) 크로마토그래피 시스템에 주입한다. 20-40% 수성 아세토니트릴 및 0.5% 단염기성 암모늄 포스페이트(w/v)로 시작하여 반응하지 않는 A30912A 핵이 용출될 때까지 컬럼을 용출시키고(230nm 에서 UV 로 검출하고 유출 속도는 20㎖/분임) 다음으로 완충액을 제거하고 생성물 피크는 수성 아세토니트릴 중에서 용출시킨다. 생성물을 포함하는 분획을 진공하에 증발시키거나 동결건조시켜 순수한 화합물을 얻는다. 생성물은 워터스사의 C₁₈마이크로 본다팩(Micro Bondapak)컬럼을 사용하고 0.5% 단염기성 암모늄 포스페이트(w/v)를 함유한 40% 수성 아세토니트릴로 2㎖/분의 유출속도로 용출시키고 230nm 에서 UV 로 검출하는 동일한 HPLC 기기에 의해 분석될 수 있다. 생성물은 또한 고속원자 충격 질량 분석기(FABMS)에 의해 분석될 수도 있다(사용된 화합물에서, R′=R″=R′′′=CH₃, R=OH, R^y=OH, R₁=H, R₇=OH 이고 R₂는 정의된 바와같다).

[표 27a]

[표 27b]

[표 27c]

표 27 에서 열겨된 것들과 같은 화합물은 페놀성 하이드록시에서 더 변형되어 표 28 에 나타낸 것과 같은 R₇=-OPO₃HNa 를 제공할 수 있다. 방법은 하기와 같다:

리포펩타이드(1 당량) 및 테트라벤질피로포스페이트(2 당량)를 13×분자체(molecular sieve)로 건조된 디메틸포름아미드에 용해시킨다. 수산화리튬 1 수화물(5 당량)을 가하고 교반된 용액을 HPLC 로 조사한다. 0.5 시간 및 1 시간후에 수산화 리튬(5 당량)을 가한다. 1 내지 2 시간 사이에 빙초산으로 반응을 중지시키고, 용제를 진공하에 제거하고, 잔류물을 수성아세토니트릴 용출제를 사용하는 반-예비적 C₁₈역상 컬럼으로 정제한다. 정제된 생성물을 아세트산 나트륨(1 당량) 및 10% Pd/C 촉매와 함께 (1/1) 아세트산/물에 용해시킨다. 용액을 수소 기체 대기하에 두고 1 시간동안 교반한다. 여과에 의해 촉매를 제거한 수 용액을 동결건조시켜 순수한 최종 생성물을 얻는다. 순도를 분석적 HPLC 에 의해 평가하고 생성물을 고속 원자 충격 질량 분석기(FABMS)에 의해 분석한다.

[표 28]

[디데옥시 사이클로헥사펩타이드의 제조]

디데옥시 화합물의 제조는 하기 방법에 의해 수행될 수 있으며 표 29에 유도체가 열거되어 있다. 디클로로메탄중의 비-디데옥시 사이클로헥사펩타이드(R=OH이고 R₂가 수소 또는 아실인 식(1))의 현탁액에 디클로로메탄중의 환원제 트리에틸실란을 가한다. 용액을 교반하고, 휘발성 성분을 감압하에 제거한 후 잔류물을 디에틸 에테르와 함께 분쇄한다. 화합물을 HPLC를 사용하여 정제하고 생성물을 동결건조시킨다.

[실시예]

[디데옥시실로펀진]

디클로로메탄(100 ㎖) 중의 실로펀진(10.00 g, 9.71 mmol)의 현탁액에 디클로로메탄(50 ㎖) 중의 트리에틸실란(96 ㎖, 602 mmol)의 용액을 가한다. 트리플루오로아세트산(46.4 ㎖, 602 mmol)을 디클로로메탄(50 ㎖) 중의 용액으로서 15분에 걸쳐서 가한다. 용액을 상온에서 2 시간 동안 교반한다. 휘발성 반응 성분을 감압하에 제거하고 잔류물을 디에틸 에테르와 함께 분쇄한다. 고정상으로서 프렙 팩(prep pak) 500/C₁₈컬럼(Waters Associates, Inc.)을 사용하는 “프렙 LC/시스템 500” 장치(Waters Associates, Inc.)를 통한 역상 HPLC에 의해 화합물을 정제한다. 컬럼은 500 psi에서 CH₃CN/H₂O(10:90 내지 20:80 V/V)을 사용하는 이동상 구배로 용출시킨다. 생성물을 포함하는 분획을 모으고, 감압하에 증발시키고 p-디옥산으로부터 동결건조시켜 디데옥시실로펀진(6.66 g, 68.7 %)을 수득한다(6.66 g, 68.7 %), FAB-MS: C₄₉H₇₂N₇O₁₅에 대한 m/z 계산치, 998.5086; 실측치, 998.512; UV λ(EtOH)nm(ε) 202.60(61012), 256.20(18569).

표 29는 R₂, 사이클릭헥사펩타이드 및 반응물의 양, 및 상술한 바와 같이 제조된 디데옥시 화합물의 수율을 나타낸다. ( R′=R″=R″′=CH₃, R₁=H 및 R=R^y=R₇=OH); T.E.S.=트리에틸실란; TFA=트리플루오로아세트산; 숫자는 g으로 나타낸 중량이다).

[표 29]

Claims

하기 식(1)의 화합물 및 약제학적으로 허용되는 그의 무독성 염.

상기 식에서, R′는 수소, 메틸 또는 NH₂C(O)CH₂- 이고; R″ 및 R″′는 독립적으로 메틸 또는 수소이며; R 및 R^y는 독립적으로 하이드록시 또는 수소이고; R₁은 하이드록시, 수소 또는 하이드록시설포닐옥시이며; R₂은 하이드록시, 수소, 하이드록시설포닐옥시 또는 포스포노옥시이고; Ⅰ) R₂는 하기식에서 표시되는 치환된 벤조일 그룹이거나

[상기식에서, A) R₃은 식 -O-(CH₂)m-[O-(CH₂)n]p-O-(C₁-C_{1 2}알킬)(식에서, m 및 n 은 2 내지 4의 정수이고, p 는 0 또는 1임)로 표시되는 폴리옥사-알킬 그룹이거나; B) R₃은 식 -Y-(C₁-C₁₂알킬)(식에서, Y 는 -C≡C- 또는 -CH=CH-임)로 표시되는 불포화 탄화수소 그룹이거나; C) R₃은 식 -O-(CH₂)m-G(식에서, m은 상기에 정의된 바와 같고, G는 C₇-C₁₀비사이클로알킬 또는 C₇-C₁₄트리사이클로알킬임)의 그룹이거나; D) R₃는 퀴놀릴임]; Ⅱ) R₂는 하기 식으로 표시되는 아실 그룹이거나

[상기 식에서,Z는 -O-, -C≡C-, -CH=CH-, -CH₂-CH₂-, -CH₂- 또는 탄소-탄소 결합이고; A) R₄는 수소, C₂-C₁₂알키닐, 치환된 C₂-C₁₂알키닐, C₃-C₁₂사이클로알킬, C₇-C₁₀비사이클로알킬, C₇-C₁₄트리사이클로알킬, C₁-C₁₂알콕시, C₃-C₁₂사이클로알콕시, 나프틸, 피리딜, 티에닐, 벤조티에닐, 퀴놀릴 또는 페닐이거나; B) R₄는 아미노, C₁-C₁₂알킬티오, 할로겐, C₁-C₁₂알킬, C₂-C₁₂알케닐, C₂-C₁₂알키닐, 치환된 C₁-C₁₂알킬, 치환된 C₂-C₁₂알케닐, 치환된 C₂-C₁₂알키닐, C₁-C₁₂알콕시, 트리플루오로메틸, 페닐, 치환된 페닐, 또는 식 -O-(CH₂)m-[O-(CH₂)n]p-0-(C₁-C_{1 2}알킬)(식에서, m, n 및 p 는 상기 정의된 바와 같음)로 표시되는 폴리옥사-알킬 그룹으로 치환된 페닐로 치환된 페닐이거나; C) R₄는 플루오로, 브로모, 클로로 또는 요오도에 의해 치환된 C₁-C₆알콕시로 치환된 페닐이거나; D) R₄는 C₃-C₁₂사이클로알킬, C₇-C₁₀비사이클로알킬, C₇-C₁₄트리사이클로알킬, C₂-C₁₂알키닐, 아미노, C₁-C₄알킬아미노, 디-(C₁-C₄알킬)아미노, C₁-C₁₂알카노일아미노, 또는 식 -O-(CH₂)m-[O-(CH₂)n]p-O-(C₁-C₁₂알킬)(식에서, m, n 및 p 는 상기에 정의된 바와 같음)로 표시되는 폴리옥사-알킬 그룹으로 치환된 페닐에 의해 치환된 C₁-C₁₂알콕시이거나; E) R₄는 식(식에서, R₈은 페닐로 임의 치환된 C₁-C₆알콕시임)의 그룹으로 치환된 C₁-C₁₂알콕시이거나; F) R₄는 식 -O-(CH₂)p′-W-R₅(식에서, p′는 2 내지 4의 정수이고; W 는 피롤리디노, 피페리디노 또는 피페라지노이고, R₅는 수소, C₁-C₁₂알킬, C₃-C₁₂사이클로알킬, 벤질 또는 C₃-C₁₂사이클로알킬메틸임)로 표시되는 그룹이거나; G) R₄는 식 -Y-R₆(식에서, Y는 상기에 정의된 것과 동일한 의미를 가지며, R₆는 C₁-C₁₂알킬, 치환된 C₁-C₁₂알킬, C₃-C₁₂사이클로알킬, C₇-C₁₀비사이클로알킬, C₇-C₁₄트리사이클로알킬, 페닐, C₃-C₁₂사이클로알케닐, 나프틸, 벤조티아졸릴, 티에닐, 또는 아미노, C₁-C₁₂알킬티오, 할로겐, C₁-C₁₂알킬, C₂-C₁₂알케닐, C₂-C₁₂알키닐, C₁-C₁₂알콕시, 트리플루오로메틸, -O-(CH₂)p′-W-R₅, 또는 플루오로, 브로모, 요오도 또는 클로로로 치환된 C₁-C₆알콕시로 치환된 페닐이거나, R₆는 식 -O-(CH₂)m-[O-(CH₂)n]p-O-(C₁-C₁₂알킬)(식에서, m, n 및 p 는 상기에 정의된 바와 같음)로 표시되는 폴리옥사-알킬 그룹으로 치환된 페닐임)으로 표시되는 그룹임]; Ⅲ) R₂는 하기 식을 갖는 그룹이거나

[상기 식에서, R¹는 C₁-C₁₂알콕시 또는 식 -O-(CH₂)m-[O-(CH₂)n]p-O-(C₁-C₁₂알킬)(식에서, m, n 및 p는 상기에 정의된 바와 같음)로 표시되는 폴리옥사-알킬 그룹임]; Ⅳ) R₂는 하기 식을 갖는 그룹이거나

[상기 식에서, R₉은 페닐, C₁-C₁₂알킬, 또는 C₁-C₁₂알콕시이고, R₆은 상기 정의한 바와 같음]; Ⅴ) R₂는 R₄로 치환된 나프토일이고; 단, R′ 가 메틸 또는 NH₂C(O)CH₂-이고; R″가 메틸이며; R″′가 메틸이고; R^y가 하이드록시이며; R 이 하이드록시이고; a) R₁이 하이드록시설포닐옥시이고, R₇이 하이드록시, 하이드록시설포닐옥시 또는 포스포노옥시이거나; b) R₁이 수소 또는 하이드록시설포닐옥시이고, R₇이 하이드록시설포닐옥시 또는 포스포노옥시인 경우, R₂는

[상기 식에서, R₃은 -O-(CH₂)m-[O-(CH₂)n]p-O-(C₁-C₁₂알킬)(식에서, P=0 임)이다.

[상기 식에서, Z는 탄소-탄소 결합 또는 -O-이고, R₄는 C₁-C₁₂알콕시이다] 또는 ⅲ) R₄(여기에서, R₄는 수소 페닐, 또는 C₁-C₁₂알콕시임)로 치환된 나프토일이 아니다.
제1항에 있어서, 하기식(1)의 화합물 및 약제학적으로 허용되는 그의 염.

상기 식에서, R′는 수소, 메틸 또는 NH₂C(O)CH₂- 이고; R″ 및 R″′는 독립적으로 메틸 또는 수소이며; R 및 R^y는 독립적으로 하이드록시 또는 수소이고; R₁은 하이드록시, 수소 또는 하이드록시설포닐옥시이며; R₇은 하이드록시, 수소, 하이드록시설포닐옥시 또는 포스포노옥시이고; R₂는 하기 식의 그룹이다.
하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제와 함께 제1항 또는 제2항 중 어느 한 항의 화합물을 활성 성분으로 함유하는, 뉴모시스티스 폐렴 및 진균 감염을 치료하기 위한 약학 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, R이 하이드록시이고; R′,R″ 및 R″′가 메틸이며; R₁이 수소이고; R₇및 R_y가 하이드록시인 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 그의 염.
제1항 또는 제2항에 있어서, R₂가인 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 그의 염.
제4항 있어서, R₂가인 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 그의 염.