CN102464704B

CN102464704B - 一种化合物及其制备方法和用途

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Publication number: CN102464704B
Application number: CN2010105339095A
Authority: CN
Inventors: 胡海峰; 闵涛玲; 朱宝泉
Original assignee: Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry
Current assignee: Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry
Priority date: 2010-11-05
Filing date: 2010-11-05
Publication date: 2013-12-11
Anticipated expiration: 2030-11-05
Also published as: CN102464704A

Abstract

本发明公开了一种新化合物及其制备方法和用途。所述的新化合物是结构如式Ⅰ所示的化合物，

Description

一种化合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及有机化合物，尤其涉及一种新化合物及其制备方法和用途。

背景技术

棘白菌素类是20世纪70年代发现的一类天然环状脂肽类化合物。棘白菌素类具有环状六肽核心和脂肪酸侧链结构。根据环六肽上不同的取代基和脂肪酸侧链分为不同的化合物，其中有棘白菌素B。棘白菌素类属于一类新型抗真菌化合物，作为葡聚糖合成酶抑制剂，非竞争性地抑制真菌细胞壁的β-(1，3)-D-葡聚糖的合成而发挥杀菌作用。棘白菌素类对白色假丝酵母等有较强的杀菌作用，但是对烟曲霉等丝状真菌的抑制作用较弱。因此需要寻找对烟曲霉等丝状真菌有较强抑制作用的化合物。

发明内容

本发明旨在提供一种对烟曲霉等丝状真菌有较强抑制作用的新化合物及其制备方法。

在本发明的第一方面，提供了一种结构如式I所示的化合物，

在本发明的第二方面，提供了一种本发明提供的如式I所示的化合物的制备方法，所述的方法包括步骤：

将结构如式II所示的化合物和甲醇混合，得到本发明提供的如式I所示的化合物，

在另一优选例中，所述的方法包括步骤：

(1)将结构如式II所示的化合物和甲醇混合，得到溶液1；

(2)将溶液1置于20-60℃反应，得到本发明提供的如式I所示的化合物。

在另一优选例中，溶液1中，如式II所示的化合物和甲醇的重量体积比为1-200∶1(mg/mL)。

在另一优选例中，步骤(2)中，溶液1的pH 3-4。

在另一优选例中，步骤(2)的反应时间为20-90小时。

在另一优选例中，所述的方法包括步骤：

(a)将结构如式II所示的化合物和甲醇混合，得到溶液1；

(b)使溶液1的pH 3-4，并置于20-60℃反应20-90小时；和

(c)经分离纯化，得到本发明提供的如式I所示的化合物。

在另一优选例中，步骤(c)中通过高效液相色谱分离纯化。

在本发明的第三方面，提供了一种本发明提供的如式I所示的化合物的用途，用于制备抗烟曲霉(Aspergillus funigatus)的药物。

据此，本发明提供了对烟曲霉等丝状真菌有较强抑制作用的化合物。

具体实施方式

发明人经过深入而广泛的研究，意外地发现以棘白菌素B(echinocandin B)为原料，在一定的条件下，可以使某些特定位置的羟基脱氢形成烷氧基，从而得到对烟曲霉等丝状真菌有较强抑制作用的如式I所示的化合物。在此基础上完成了本发明。

具体地，本发明获得如式I所示化合物的方法为：

第一步，将结构如式II所示的化合物和甲醇混合，得到溶液1；

第二步，将溶液1置于20-60℃反应20-90小时；和

第三步，经分离纯化，得到结构如式I所示化合物。

第一步中结构如式II所示的化合物可以是其纯净化合物，也可以是含有该化合物的混合物，例如但不限于，通过本领域熟知的发酵方法得到的含有该混合物的发酵液等，然而在上述含有式II化合物的混合物中，以混合物的总量计，其中的式II化合物的重量百分比为1-98w/w％，较佳地为60-98w/w％。

在第一步所得到的溶液1中，如式II所示的化合物和甲醇的重量体积比为1-200∶1(mg/mL)，较佳地为20-100∶1(mg/mL)。

第二步中，至于反应的溶液1的pH值为3-4，反应温度较佳地为40-50℃，反应时间较佳地为40-60小时。

第三步中分离纯化的方法可以是本领域熟知的，例如柱层析、结晶，较佳地可以采用半制备型高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)。

本发明得到的结构如式I所示的化合物可用于抗真菌，尤其对于烟曲霉等丝状真菌有较强抑制作用。

本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

本发明的主要优点在于：

1、本发明提供的结构如式I所示的化合物与棘白菌素B相比，其抗烟曲霉的活性显著高于棘白菌素B。

2、本发明提供的结构如式I所示的化合物可为开发新的抗烟曲霉药物提供先导化合物。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。

本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的，例如是指在100毫升的溶液中溶质的重量。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

本发明实施例中，棘白菌素B的制备方法为：

(1)通过菌株Aspergillus rugulosus NRRL 8113(美国专利4024245)的发酵提取方法获得。

(2)通过菌株Aspergillus nidulans NRRL 8112(美国专利4024246)的发酵提取方法获得。

(3)通过菌株Aspergillus nidulans var.echinulatus A-32204，NRRL3860(Swiss专利568386)发酵提取方法获得。

(4)通过Aspergillus rugulosus NRRL 8039(Belgian专利834289)的发酵提取方法获得。

本发明中，式I化合物的检测方法为高效液相色谱法，具体检测方法如下：

色谱柱：ODS-C18(250mm×4.6mm，i.d 5μm)。

流动相：甲醇∶乙腈∶水(7∶2∶1)。

进样量：20μL。

流速：1.0mL/min。

柱温：30℃。

紫外检测波长：221nm。

实施例1

制备结构如式I所示的化合物

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在60％)溶解于甲醇(10ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度40摄氏度的环境中，放置50小时。HPLC检测获得组分式I化合物(58％)，转化率96％。

使用半制备型HPLC分离纯化式I化合物，制备条件：

色谱柱：ODS-C18(250mm×7.8mm，i.d 5μm)。

流动相：甲醇∶乙腈∶水(7∶2∶3.5)。

进样量：50μL。

流速：2.0mL/min。

柱温：30℃。

紫外检测波长：221nm。

获得式I化合物，纯度95％以上。

式I化合物的结构鉴定：

式I化合物为白色无定形粉末，分子式：C54H85N7016；电喷雾离子质谱(ESI-MS)：1110[M+Na]⁺。¹H和¹³C核磁共振数据见表1。

表1式I化合物(ECN-I)的碳氢化学位移数据

a TMS，CD₃OD，30℃，¹H-NMR 400MHz，¹³C-NMR 100MHz。

实施例2

结构如式I所示的化合物抗烟曲霉活性

本发明对式I化合物和棘白菌素B的抗烟曲霉活性进行检测。使用纸片法进行检测。

精确称量本发明对式I化合物和棘白菌素B各10mg，配置成浓度为10mg/ml、20、40mg/ml样品甲醇溶液，分别添加10μL体积的不同浓度样品甲醇溶液于5mm滤纸片上，干燥后将含有不同样品的纸片放置于含有烟曲霉的生物活性检测培养基上，28℃培养过夜后检测抑菌圈直径大小，以未添加样品的甲醇溶液(10μL)为对照，分析生物活性。重复三次，抑菌圈直径取平均值。

检测结果见下表2。

表2式I化合物(ECN-I)与棘白菌素B对烟曲霉的抑制作用

结果表明，不同含量的式I化合物对烟曲霉的抑菌活性都显著高于棘白菌素B。

实施例2

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在98％)溶解于甲醇(10ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度40摄氏度的环境中，放置50小时。HPLC检测获得组分式I化合物(94％)，转化率96％。

实施例3

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在50％)溶解于甲醇(10ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度40摄氏度的环境中，放置50小时。HPLC检测获得组分式I化合物(40％)，转化率80％。

实施例4

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在1％)溶解于甲醇(10ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度40摄氏度的环境中，放置50小时。HPLC检测获得组分式I化合物(0.4％)，转化率40％。

实施例5

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在80％)溶解于甲醇(800ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度40摄氏度的环境中，放置50小时。HPLC检测获得组分式I化合物(20％)，转化率25％。

实施例6

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在80％)溶解于甲醇(4ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度40摄氏度的环境中，放置50小时。HPLC检测获得组分式I化合物(72％)，转化率90％。

实施例7

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在80％)溶解于甲醇(8ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度40摄氏度的环境中，放置50小时。HPLC检测获得组分式I化合物(77％)，转化率96％。

实施例8

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在80％)溶解于甲醇(40ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度40摄氏度的环境中，放置50小时。HPLC检测获得组分式I化合物(76％)，转化率95％。

实施例9

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在80％)溶解于甲醇(8ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度50摄氏度的环境中，放置50小时。HPLC检测获得组分式I化合物(75％)，转化率94％。

实施例10

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在80％)溶解于甲醇(8ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度60摄氏度的环境中，放置50小时。HPLC检测获得组分式I化合物(70％)，转化率88％。

实施例11

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在80％)溶解于甲醇(8ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度20摄氏度的环境中，放置50小时。HPLC检测获得组分式I化合物(60％)，转化率75％。

实施例12

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在80％)溶解于甲醇(8ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度40摄氏度的环境中，放置20小时。HPLC检测获得组分式I化合物(36％)，转化率45％。

实施例13

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在80％)溶解于甲醇(8ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度40摄氏度的环境中，放置90小时。HPLC检测获得组分式I化合物(70％)，转化率88％。

实施例14

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在80％)溶解于甲醇(8ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度40摄氏度的环境中，放置40小时。HPLC检测获得组分式I化合物(75％)，转化率94％。

实施例15

在室温下将棘白菌素B(1g，echinocandin B含量在80％)溶解于甲醇(8ml)，用盐酸(1mol/L)调节pH至3-4，放置于温度40摄氏度的环境中，放置60小时。HPLC检测获得组分式I化合物(76％)，转化率95％。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术内容范围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任何他人完成的技术实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同，也或是一种等效的变更，均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。

Claims

1.一种结构如式Ⅰ所示的化合物，

2.一种如权利要求1所述的化合物的制备方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：

（a）将结构如式Ⅱ所示的化合物和甲醇混合，得到溶液1；

（b）使溶液1的pH3－4，并置于20－60℃反应20－90小时；和

（c）经分离纯化，得到如权利要求1所述的化合物

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，溶液1中，如式Ⅱ所示的化合物和甲醇的重量体积比为1－200∶1，其中重量和体积的单位分别是毫克和毫升。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（c）中通过高效液相色谱分离纯化。

5.一种如权利要求1所述的化合物的用途，其特征在于，用于制备抗烟曲霉（Aspergillus funigatus）的药物。